FR2997761A1 - Dispositif de verification de la temperature des thermoblocs pcr 96 puits multimarque en mode echantillon - Google Patents

Dispositif de verification de la temperature des thermoblocs pcr 96 puits multimarque en mode echantillon Download PDF

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David Gaertner
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Abstract

Dispositif pour la vérification de la température des thermoblocs PCR 96 puits. L'invention concerne un dispositif de vérification de la température des thermoblocs PCR sur n'importe quel appareil PCR 96 puits afin de mesurer des températures et d'en contrôler les performances dans les conditions de l'échantillon lors d'un essai PCR. Il est constitué d'une plaque PCR 96 puits demi-jupée au format SBS (FIG.1) compatible avec tous les modèles de thermoblocs PCR existants, contenant 16 thermistances CTN en version boîtier CMS (FIG.2, 1) à 16 emplacements particuliers pour prendre en compte tous les éléments peltier quel que soit l'appareil PCR. Les capteurs sont immergés dans un milieu aqueux ou autre substance ayant des caractéristiques thermiques équivalentes à l'eau afin de recréer les conditions de l'échantillon PCR. Le dispositif selon l'invention est particulièrement destiné à la vérification multimarque de la température des thermoblocs PCR 96 puits en mode échantillon.

Description

La présente invention concerne un dispositif de vérification de la température des thermoblocs PCR multimarque afin de mesurer des températures et d'en contrôler les performances (justesse, stabilité, homogénéité, vitesse de chauffe/refroidissement) dans les conditions de l'échantillon lors d'un essai PCR.
La plupart de ces dispositifs ne proposent traditionnellement qu'une mesure des températures du thermobloc par contact au moyen de capteurs adaptés à la forme des puits PCR. Les points sensibles résident dans le choix du capteur de température (résistance de type thermistance, résistance de platine ou couples thermoélectriques), le nombre de capteurs de température et l'adaptabilité sur tous les types de thermoblocs PCR. Enfin, le point critique de ces dispositifs est de mesurer les températures du thermobloc PCR par effet de contact sans tenir compte de ce qu'il se passe dans l'échantillon en condition d'utilisation lors d'un essai PCR. Le dispositif selon l'invention permet de remédier à ces inconvénients. Il comporte comme première caractéristique 16 capteurs de température étanches de type thermistance CTN 10 kOhms en version boîtier CMS (Composant Monté en Surface). Le choix de ces thermistances permet d'améliorer la qualité de mesure (incertitude, dérive dans le temps, sensibilité aux contraintes mécaniques et thermiques rencontrées dans le cadre de la PCR) par rapport aux thermocouples et aux résistances de platine. Les 16 capteurs de mesures ont été introduits dans un consommable plastique plaque PCR 96 puits demi-jupée au standard SBS de marque et modèle les plus utilisés en PCR et qui s'adapte sur tous les thernnocycleurs du marché et à 16 emplacements particuliers de manière à garantir la prise en compte de tous les éléments peltier quel que soit l'appareil PCR. Les capteurs sont immergés dans un milieu aqueux ou tout autre substance présentant les mêmes caractéristiques thermiques que l'eau afin de recréer les conditions de l'échantillon PCR (et non par contact). Les dessins annexés illustrent l'invention : La figure 1 représente en perpective, la plaque PCR 96 puits demi-jupée. La figure 2 représente en coupe, un puits PCR avec une sonde de température. La figure 3 représente en vue du-dessus, les emplacements des capteurs de mesure dans la plaque PCR demi-jupée. En référence à ces dessins, et selon la figure 1 (FIG. 1), le dispositif est composé d'une plaque PCR 96 puits (1) demi-jupée (2) au format SBS (plaque 0.2 nnL, demi-jupée, 96 puits) qui dispose d'un marquage alpha-numérique. Les 12 colonnes de la plaque PCR 96 puits demi-jupée sont numérotées de la gauche vers la droite de 1 à 12 (3) et les 8 lignes vont de haut en bas de la lettre A jusqu'à H (4). La plaque PCR 96 puits demi-jupée est fabriquée en polypropylène. Selon la figure 2 (FIG.2), chaque sonde de température est constituée d'une thermistance CTN 10 kOhms (1) soudée aux extrémités de 2 fils de longueur constante afin [2] d'annuler les erreurs systématiques liées à la résistance du câblage. La thermistance de taille 0,5 x 0,5 x 1 mm, conçue pour être exclusivement utilisée en soudage sur carte électronique, permet ainsi la réalisation d'une sonde finale de très petite dimension (2). La sonde ainsi constituée est insérée par la paroi du puits PCR (3). Chaque puits est rempli avec une solution aqueuse ou autre substance présentant les mêmes caractéristiques thermiques que l'eau (4) avec le volume employé par l'utilisateur en essai PCR afin d'être en mode échantillon et d'imposer au thermobloc la même charge thermique qu'en routine. La plaque est alors déposée sur le thermobloc PCR 96 puits (5). Selon la figure 3 (FIG.3), les sondes de mesures ont été positionnées à 16 emplacements du thermobloc PCR (couleur grise sur la figure correspondant aux puits Al, A4, A8, Al2, C3, C9, D6, D12, El, E4, E7, F10, H1, H5, H9 et H12). Les 16 chaînes de mesure sont étalonnables à tout moment auprès d'un laboratoire accrédité COFRAC. Les 16 sondes de mesures sont reliées en nappe puis connectées à une centrale d'acquisition avec un convertisseur A/N de 18 bits minimum afin d'avoir une résolution de 0.01°C sur la plage de températures et un scan des 16 sondes de mesures en 1 seconde maximum. Les résultats bruts issus d'un essai PCR sont enregistrés sur l'ordinateur relié à la centrale d'acquisition. Le dispositif selon l'invention est particulièrement destiné à la vérification de la température des thermoblocs PCR multimarques en mode échantillon.

Claims (5)

  1. REVENDICATIONS1. Dispositif de vérification de la température des thermoblocs PCR 96 puits caractérisé en ce qu'il comporte 16 sondes de température (FIG.2, 1) dans un consommable plastique plaque PCR 96 puits demi-jupée (FIG.1) selon des emplacements définis (FIG.3) pour une caractérisation des températures sur un thermobloc PCR 96 puits et en méthode échantillon lors d'un essai PCR
  2. 2. Dispositif selon la revendication 1 caractérisé en ce que les 16 capteurs de température (FIG.2, 1) sont des thermistances CTN de 10 kOhms en version boîtier CMS (taille 0,5 x 0,5 x 1 mm)
  3. 3. Dispositif selon la revendication 1 caractérisé en ce que les 16 capteurs de température (FIG.2, 1) sont introduits dans 16 puits de la plaque PCR 96 puits demi-jupée au standard SBS (FIG.1) pour garantir une caractérisation des températures sur un thermobloc PCR 96 puits
  4. 4) Dispositif selon la revendication 1 caractérisé en ce que les 16 capteurs de température (FIG.2, 1) sont positionnés à 16 emplacements spécifiques dans la plaque PCR 96 puits demi-jupée (FIG.3)
  5. 5) Dispositif selon la revendication 1 caractérisé en ce que les 16 capteurs de température (FIG.2, 1) sont immergés dans une solution aqueuse ou dans une pâte thermique (FIG.2, 4) avec le volume employé par l'utilisateur en essai PCR pour prendre en compte les mesures au niveau de l'échantillon (mode échantillon)
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5224778A (en) * 1991-11-12 1993-07-06 The Perkin Elmer Corporation Temperature verification for polymerase chain reaction systems

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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US5224778A (en) * 1991-11-12 1993-07-06 The Perkin Elmer Corporation Temperature verification for polymerase chain reaction systems

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