FR2954321A1 - Derives de platine (iv) - couples a un agent de ciblage antitumoral - Google Patents

Abstract

L'invention est relative à un complexe de platine de formule (I) : dans laquelle : ▪ X représente un atome d'halogène ; ▪ R1 représente un groupe R'1NH2 ou bien une 2-picoline directement liée au platine par son atome d'azote et R2 représente un groupe R'2NH2, R1 et R2 étant en configuration cis par rapport au platine ; ▪ R'1 et R'2 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe (C1-C6)alkyle, (C1-C6)alkényle, (C3-C8)cycloalkyle ; ou bien R1 et R2 forment ensemble avec l'atome de platine un cycle de 5 à 7 chaînons de formule (A) : ▪ L1 et L2 positionnés en configuration cis par rapport au platine, représentent chacun un atome d'halogène ; ou bien L1 et L2 forment ensemble avec l'atome de platine un cycle de 5 à 7 chaînons, de formule (B) : ▪ W représente une liaison simple ou un groupe -C(O)-(CH2)m-NH-C(O)- ou -C(O)- (CH2)m-C(O)-NH- rattaché au groupe (CH2)n par le groupe C(O) ; ▪ n et m valent 2, 3 ou 4 ; ▪ Z représente un fragment d'un agent de vectorisation attaché à W susceptible d'être reconnu par une cellule tumorale.

Description

DÉRIVÉS DE PLATINE (IV) û COUPLÉS A UN AGENT DE CIBLAGE ANTITUMORAL

La présente invention se rapporte à des complexes de platine (IV) portant un ligand axial halogène et un second ligand axial de type oxy couplé, via un linker, à un acide gras polyinsaturé, à leur 5 préparation et à leur application thérapeutique.

[Domaine technique] Certains dérivés du platine sont bien connus comme agent anticancéreux. Les propriétés anticancéreuses du premier d'entre eux, le cisplatine, ont été découvertes en 1965. Le cisplatine a 10 été approuvé par la FDA en 1978, puis ont suivi les accords donnés, toujours par la FDA, au carboplatine en 1989 et à l'oxaliplatine en 2002 et enfin le satraplatine et le picoplatine font actuellement l'objet de demandes de mise sur le marché auprès de la FDA. Le platine se trouve, dans la majorité de ces dérivés, à son degré d'oxydation II, il est toujours coordonné à deux ligands amine et, selon le cas, à des ligands chlorure pour le cisplatine ou à un dérivé d'acide 15 organique dicarboxylique tel que l'acide 1,1-cyclobutanedicarboxylique pour le carboplatine, ou l'acide oxalique pour l'oxaliplatine. Le picoplatine est également un complexe de platine (II) portant deux ligands azotés, dont l'un est l'a-picoline. Le satraplatine est constitué d'un platine (IV) lié toujours à deux ligands azotés, à deux chlorures et à deux groupes acétate. O O H2N• .,"Cl Pt H2N ICI O\ satraplatine picoplatine O L'activité antitumorale des complexes de platine (II) ci-dessus est liée à leur réaction avec des bases de l'ADN û principalement deux guanines adjacentes d'un même brin û avec des formes « aqua » générées par hydrolyse d'un au moins de leur ligands labiles û eg chloro, oxalato ou 1-1- 25 cyclobutanedicarboxylato. Cependant, ces formes « aqua » peuvent également réagir avec d'autres nucléophiles que l'ADN, notamment avec des cystéines, des méthionines ou des histidines de biomolécules présentes dans le plasma (Reedijk, J, Chem. Rev. 1999, 99, 2499- 2510 ; Gabano et al, Curr. Chem. Biol. 2007, 1, 278-289), ce qui d'une part accroit leur toxicité 20 Ces composés peuvent être représentés par les formules suivantes : O ~~NH2e Pt NH2 oxaliplatine NH Cl 3\ I Pt NH' CI cisplatine NH3\ / O Pt NH3 O carboplatine ,CI P\ H2N Cl chez les patients et d'autre part limite grandement leur accès à l'ADN des cellules tumorales ciblées.

La préparation de complexes analogues de platine (IV) octa-coordinés plus inertes, tel que le Satraplatine, permet de limiter ces réactivités indésirables et d'augmenter la quantité de platine capable d'atteindre l'ADN. Ces complexes de platine (IV), qui agissent comme pro-drogues, sont réduits en analogue platine (II), par perte de deux ligands axiaux, dans les conditions hypoxiques caractéristiques (Hall et al, Metal Ions in Biological Systems, M. Dekker Ed. 2004, 42, 209-250). [Problème technique] Afin de mieux diriger les complexes de platine (II) vers leur cible tumorale, de nouveaux complexes ont spécifiquement été mis au point en couplant à l'un des ligands, fixe ou labile, un agent de vectorisation susceptible d'être reconnu par une cellule tumorale. Des ligands du récepteur à l'estrogène, des acides biliaires, des ligands du récepteur folique, des antimétabolites, des sucres, des peptides, des phosphonates ou des polymères ont ainsi été couplés soit via le(s) ligand(s) fixe(s) aminé(s) soit via un ligand labile généralement de type dicarboxylate (voir la revue de Gabano et al, Curr. Med. Chem. 2009, 16, 4544-4580). Cependant, ces composés sont toujours susceptibles d'aquation suivie de réaction avec des biomolécules nucléophiles avant de pénétrer dans des cellules tumorales. Les avantages du ciblage sont rappelés dans la revue de Gabano : doses d'administration plus faibles entraînant moins d'effets secondaires et meilleur index thérapeutique.

Des complexes de platine (IV), potentiellement stables vis à vis de nucléophiles présents dans le plasma, et dans lesquels des ligands du récepteur à l'estrogène sont couplés au platine via leurs ligands diaxiaux ont été récemment développés par l'équipe de S.Lippard au Massachusetts Intitute of Technology (Chem. & Biol. 2004, 11, 567-574). Plus récemment encore, la même équipe a développé une nouvelle série de complexe de platine (IV) dans lesquels l'un des ligands diaxiaux est couplé via un linker à un ligand du récepteur folique, tandis que le second ligand diaxial est couplé, via un autre linker contenant une chaîne solubilisante de type PEG, à un « nanotube de carbone à paroi simple » (Single-Wall Carbon Nanotube technology ou SWNT technology) dont l'intérêt essentiel est d'accroître la durée de demi-vie plasmatique des composés auxquels ils sont fixés (J. Amer. Chem. Soc. 2008, 130, 11467-11476).

Des anticorps monoclonaux, spécifiques de divers types tumoraux sont actuellement utilisés comme vecteurs de ciblage de composés cytotoxiques agissant soit au niveau du fuseau mitotique - tels que la maytansine, les taxanes ou l'auristatine û ou directement au niveau de l'ADN û tels que la calicheamicine ou le CC-1065 - sous la forme de conjugués « Antibody-Drug Conjugates » (Acc. Chem. Res. 2008, 41, 98-107 pour revue). L'une des problématiques principales de ces conjugués, constitués d'un agent cytotoxique d'un anticorps comme agent de vectorisation et d'un élément de liaison (« linker ») entre l'anticorps et l'agent cytotoxique, est la libération spécifique de l'agent cytotoxique dans la cellule tumorale, ce qui nécessite le développement d'un « linker » adapté, stable lors du stockage et dans la circulation sanguine et rapidement clivable à l'intérieur de la cellule tumorale. [Art antérieur] Nanoletters 2006, 6(11), 2544-2548 décrit des composés squalénisés utilisables en tant qu'anticancéreux. Current Medicinal Chemistry 2009, 16, 4544-4580 décrit des complexes de platine mais sans l'enchaînement ùO-(CH2)n-O-W-Z. Chem. & Biol. 2004, 11, 567-574 décrit des complexes de platine tels que le suivant : comprenant deux ligands oxygénés. J.Am.Chem.Soc. 2008, 130, 11467 décrit un complexe de cisplatine (IV) couplé d'une part à un ligand du récepteur folate et d'autre part à un nanotube de carbone. Le complexe de platine ne comprend pas le même type de ligand. P.N.A.S. 2008, 105, 17356 décrit la nanoencapsulation du cisplatine dans un copolymère PLGA/PEG couplé à un aptamère spécifique du PSMA pour les cancers de la prostate. WO 2007/006019 décrit des complexes du platine de formule : R1 R1 R3 ( X R3 I X R/I Y Y I R 3 R2 R2 dans lesquels X et Y représentent un atome d'halogène, -NO2, -ONO ou le Il IH3 -O-C-C / CH2CH(CH3)2 groupe H mais sans l'enchaînement ùO-(CH2)n O-W-Z. [Description de l'invention] définitions • groupe alkyle : un groupe hydrocarboné aliphatique de formule brute CnH2n+1, n étant un entier, obtenu en enlevant un atome d'hydrogène d'un alcane. Le groupe alkyle peut être linéaire ou ramifié. II peut s'agir par exemple du groupe méthyle (CH3-), éthyle (CH3CH2-), n-propyle (CH3CH2CH2-), iso-propyle (-CH(CH3)2), n-butyle (CH3CH2CH2CH2-), iso-butyle (-C(CH3)3) ;

• groupe cycloalkyle :

• groupe alkényle :

• groupe hétérocycloalkyle : • agent de vectorisation : une molécule susceptible d'être reconnu par une cellule tumorale : il peut s'agir par exemple d'un ligand, d'une protéine, d'un anticorps, plus particulièrement monoclonal, d'un fragment de protéine ou d'anticorps, d'un peptide, d'un sucre, d'un oligonucléotide, d'un oligosaccharide, d'une hormone, d'une vitamine, par exemple la vitamine B12, de l'acide folique ou de la biotine, un ligand endogène ou synthétique d'un récepteur surexprimé à la surface d'une cellule tumorale - tel que le récepteur à l'estrogène ou le récepteur à l'acide folique. L'agent de vectorisation a pour fonction de diriger le complexe de platine à proximité ou dans la cellule tumorale. abréviations CCM : chromatographie sur couche mince ; HPLC: chromatographie liquide haute pression ; TA : température ambiante ; PR : pression réduite ; Rf : coefficient de rétention ; Tr : temps de rétention. [Brève description de l'invention] L'invention est relative à un complexe de platine de formule (I) :

X R.1\ Pt R2 IO L2 (CH2)n ù OùWùZ (I) dans laquelle :

^ X représente un atome d'halogène ;

^ RI représente un groupe R'1NH2 ou bien une 2-picoline directement liée au platine par son atome d'azote et R2 représente un groupe R'2NH2, RI et R2 étant en configuration cis par rapport au platine ;

^ R'1 et R'2 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe (C1-C6)alkyle, (C1-C6)alkényle, (C3-C8)cycloalkyle ;

ou bien RI et R2 forment ensemble avec l'atome de platine un cycle de 5 à 7 chaînons de formule (A) : H2N Pt 7 H2N (A) ^ Lt et L2 positionnés en configuration cis par rapport au platine, représentent chacun un

atome d'halogène ;

ou bien Lt et L2 forment ensemble avec l'atome de platine un cycle de 5 à 7 chaînons, de

formule (B) : oùv Pt\ Y O o (B) dans lequel :

^ V représente CH2, C(0) ou P(0)OH

^ Y représente représente une liaison ou le groupe (CR1R2)1_2, R1 et R2 représentant H ou (C1-C4) alkyle ;

10 les cycle (A) et/ou (B) pouvant être :

o soit substitués par au moins un groupe (C1-C4)alkyle ;

osoit accolés par deux atomes de carbone en commun à un groupe (C4-C3)cycloalkyle ou un groupe (C4-C3)hétérocycloalkyle mono ou bicyclique saturé ;

15 o soit spiro-substitués par un groupe (C4-C3)cycloalkyle ou un groupe (C4-C3)hétérocycloalkyle mono ou bicyclique saturé ;

^ W représente une liaison simple ou un groupe -C(0)-(CH2)m-NH-C(0)- ou -C(0)-(CH2)m C(0)-NH- rattaché au groupe (CH2)n par le groupe C(0) ;

^ n vaut 2, 3 ou 4 ;

20 ^ m vaut 2, 3 ou 4 ;

^ Z représente un fragment d'un agent de vectorisation attaché à w susceptible d'être reconnu par une cellule tumorale et tel que :

^ ZH représente un acide biliaire ou un acide gras polyinsaturé lorsque W représente une liaison simple ;

25 ^ Z-000H ou Z-NH2 représente un anticorps, un peptide, un sucre, une hormone, une vitamine, l'acide folique, la biotine, un ligand endogène ou synthétique d'un récepteur surexprimé à la surface d'une cellule tumorale. R1 peut représenter NH3 ou la cyclohexylamine. R2 peut représenter l'ammoniac. Plus 30 particulièrement,

^ R1 et R2 représentent l'ammoniac ;

^ ou bien R1 représente une 2-picoline liée au platine par son atome d'azote et R2 représente l'ammoniac ;

^ ou bien R1 représente la cyclohexylamine et R2 représente l'ammoniac.

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R1 et R2 peuvent former ensemble avec l'atome de platine l'un des deux cycles (A) suivants :5 NH NH , / Pt / Pt NHZ NHZ Le groupe (C4-C3)cycloalkyle qui peut être accolé au cycle (A) est le groupe cyclohexyle ou bien le groupe (C4-C3)cycloalkyle qui est spiro-accolé au cycle (A) est ou bien le groupe (C4-o

C3)hétérocycloalkyle qui est spiro-accolé au cycle (A) est Le cycle (A) peut être l'un des suivants : 6 (A2) (A3) Le groupe (C4-C3)cycloalkyle qui est accolé au cycle (B) est le groupe cyclohexyle. Le cycle (B) peut être l'un des suivants : CO2H v v , 2 ZH représente un acide biliaire de formule x1s° x o X1=X2=X3=OH (acide cholique) ; o X1=X2=OH et X3=H (acide chénodésoxycholique) ; o X1=X3=OH et X2=H (acide désoxycholique) ; o X1=OH et X2=X3=H (acide lithocholique) ou un acide gras polyinsaturé. avec : L'acide gras polyinsaturé comprend de 12 à 24 atomes de carbone (incluant l'atome de carbone du groupe COOH ) et des doubles liaisons de géométrie Z ou E qui sont conjuguées ou non entre elles. L'acide gras polyinsaturé peut être l'acide cis-4,7,10,16,16,19-docosahexaènoïque (DHA) ou l'acide (4E,8E,12E,16E,20E)-4,8,13,17,21-pentaméthyl-docosa-4,8,12,16, 20-pentaènoique. Plus particulièrement, le complexe peut être tel que

^ X représente un atome de chlore ;

^ RI et R2 représentent l'ammoniac

ou bien RI représente une 2-picoline liée au platine par son atome d'azote et R2 représente l'ammoniac ;

ou bien RI représente la cyclohexylamine et R2 représente l'ammoniac ; ou bien RI et R2 forment ensemble l'un des cycles (AI), (A2) ou (A3) ;

^ LI et L2 représentent un atome de chlore

ou bien LI et L2 forment ensemble avec l'atome de platine l'un des cycles (BI) ou (B2). Plus particulièrement,

^ n vaut 2 ;

20 ^ W représente une simple liaison

^ ZH représente l'acide (4Z,7Z,10Z,I3Z,I6Z,I9Z)-docohexaènoïque ou l'acide (4 E,8E,12E,16E,20E)-4,8,13,17,21-pentaméthyl-docosa-4,8,12,16, 20-pentaènoique. 25 n et m peuvent valoir 2. Le complexe de platine peut être choisi parmi l'un des suivants : H CI NH2 I OC) NH2 1 t\OO H O 15 w 1 CI H3N'^, I Cl ,Pt N H3 1 CI w 1 8 Br ~~NH2 1 '0 - Pt /H N1-12 I 0ç 0 1O O ti Le complexe est destiné à libérer une fois injecté à un patient le complexe de formule (Il) X 1 /Pt/L

RZ 0 L2 R1\ Lj

1 Pt correspondant (CH2)ù OH ou le complexe de formule (III) correspondant R2 L2 L'invention est aussi relative à l'utilisation d'un complexe en tant que précurseur du composé de X R1\ I ~La Pt R2 I 0 LZ formule (II) correspondant Pt L 7 correspondant R2 L2. Enfin, l'invention est relative à une composition pharmaceutique comprenant un complexe selon l'invention. L'invention concerne aussi l'utilisation dudit complexe en tant qu'anticancéreux ainsi que l'utilisation dudit complexe dans la préparation d'un médicament anticancéreux. [Description détaillée] La présente invention a pour objet des complexes de platine (IV) de formule (I) : (CH2),-OH ou du complexe de formule (III) (CH2)nù OùWùZ (I) dans laquelle • X représente un atome d'halogène ; • RI représente un groupe R'1NH2 ou bien une 2-picoline et R2 représente un groupe R'2NH2, R1 et R2 étant en configuration cis par rapport au platine ; • R't et R'2 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe (CIC6)alkyle, (C1-C6)alkényle, (C3-C8)cycloalkyle ; ou bien RI et R2 forment ensemble avec l'atome de platine un cycle de 5 à 7 chaînons de formule (A) H2N

/ Pt H2N (A) • Lt et L2 positionnés en configuration cis par rapport au platine, représentent chacun un atome d'halogène ; ou bien Lt et L2 forment ensemble avec l'atome de platine un cycle de 5 à 7 chaînons, de formule (B) oùv Pt\ Y O \\ o (B)

dans lequel ^ V représente CH2, C(0) ou P(0)OH ; ^ Y représente une liaison ou le groupe (CR1R2)1_2, RI et R2 représentant H ou un groupe (C1-C4) alkyle ; 20 les cycles (A) et/ou (B) pouvant être éventuellement : o soit substitués par au moins un groupe (C1-C4)alkyle ; o soit accolés par deux atomes de carbone en commun à un groupe (C4-C8)cycloalkyle ou un groupe (C4-C8)hétérocycloalkyle mono ou bicyclique saturé ; o soit spiro-substitués par un groupe (C4-C8)cycloalkyle ou un groupe (C4- 25 C8)hétérocycloalkyle mono ou bicyclique saturé ; • W représente une liaison simple ou un groupe -C(0)-(CH2)m-NH-C(0)- ou -C(0)-(CH2)m C(0)-NH- rattaché au groupe (CH2)n par le groupe C(0) ; • nvaut 2,3ou4; • mvaut 2,3ou4; 9 15 • Z représente un fragment d'un agent de vectorisation susceptible d'être reconnu par une cellule tumorale attaché à w et tel que : ^ ZH représente un acide un acide biliaire ou un acide gras polyinsaturé lorsque W représente une liaison simple ; ^ Z-COOH ou Z-NH2 représente un anticorps, un peptide, un sucre, une hormone, une vitamine, l'acide folique, la biotine, un ligand endogène ou synthétique d'un récepteur surexprimé à la surface d'une cellule tumorale.

X représente un atome d'halogène qui peut être F, Cl, Brou I.

RI peut être R'1NH2dans laquelle R'1 représente un atome d'hydrogène, un groupe (C1-C6)alkyle, (C1-C6)alkényle, (C3-C3)cycloalkyle. RI peut être aussi la 2-picoline directement liée au platine par

son atome d'azote ( ). R1 peut être par exemple l'ammoniac (NH3) ou la cyclohexylamine.

R2 peut être R'2NH2 dans laquelle R'2 représente un atome d'hydrogène, un groupe (C1-C6)alkyle ou (C1-C6)alkényle. R2 peut être par exemple l'ammoniac.

Plus particulièrement, 20 ^ RI et R2 représentent l'ammoniac ; ^ ou bien RI représente une 2-picoline liée au platine par son atome d'azote et R2 représente l'ammoniac ; ^ ou bien RI représente la cyclohexylamine et R2 représente l'ammoniac.

25 Plus particulièrement, n et m valent 2, de sorte que l'enchaînement ûO-(CH2)n O-W- représente û O(CH2)2-O-C(0)-(CH2)2-NH-C(0)- ou bien -O(CH2)2-O-C(0)-(CH2)2-C(0)-NH-.

RI et R2 peuvent aussi former ensemble avec l'atome de platine un cycle de 5 à 7 chaînons de formule (A) : 15 H2N N Pt 30 7 H2N (A) II peut s'agir par exemple d'un des deux cycles à 5 chaînons suivants : Pt / / NH2 Pt NH2 Le cycle (A) peut être substitué par au moins un groupe (C1-C4)alkyle. Le cycle (A) peut être aussi accolé à un groupe (C4-C8)cycloalkyle, par exemple le groupe cyclohexyle, ou à un groupe (C4-C8)hétérocycloalkyle mono ou bicyclique saturé. On entend par « accolé » le fait que le cycle (A) et le groupe (C4-C8)cycloalkyle ou (C4-C8)hétérocycloalkyle sont liés par deux atomes de carbone communs : C H2N cycle (A) 7 Pt ~C H2N (Cq C8)cycloalkyle ou hétérocycloalkyle Le cycle (A) peut être aussi spiro-substitué par un groupe (C4-C8)cycloalkyle ou un groupe (C4-C8)hétérocycloalkyle mono ou bicyclique saturé. On entend par « spiro-substitué » le fait que le cycle (A) et le groupe (C4-C8)cycloalkyle ou (C4-C8)hétérocycloalkyle sont liés par un seul atome de carbone commun : (Cq C8)cycloalkyle ou hétérocycloalkyle C H2N cycle (A) / Pt C H2N Le groupe (C4-C8)cycloalkyle spiro-accolé peut être par exemple le suivant : Le groupe (C4-C8)hétérocycloalkyle spiro-accolé peut être par exemple le suivant : Le cycle (A) peut être plus particulièrement l'un des suivants : 0 Pt \ / v v NHZ NH2 NH\ Pt (A2) (A3) LI et L2 positionnés en configuration cis par rapport au platine, représentent chacun un atome d'halogène, par exemple chacun un atome de chlore. Lt et L2 peuvent aussi former ensemble

avec l'atome de platine un cycle de 5 à 7 chaînons, de formule (B) : oùv Pt\ Y o O (B) V représente CH2, C(0) ou P(0)OH. Y représente une liaison ou un ou deux chaînons carbonés. 5

Le cycle (B) peut être substitué par au moins un groupe (C1-C4)alkyle. Le cycle (B) peut être aussi accolé (cf.définition précédente) à un groupe (C4-C8)cycloalkyle, par exemple le groupe cyclohexyle, ou à un groupe (C4-C8)hétérocycloalkyle mono ou bicyclique saturé. Le cycle (B) peut être aussi spiro-substitué (cf.définition précédente) par un groupe (C4-C8)cycloalkyle ou un groupe

10 (C4-C8)hétérocycloalkyle mono ou bicyclique saturé. Le cycle (B) peut être plus particulièrement l'un des suivants : O o O /o / Pt/ N

O O (B1) (B2) 15 Z représente un fragment d'un agent de vectorisation susceptible d'être reconnu par une cellule tumorale. De préférence, l'agent de vectorisation est reconnu de façon spécifique par la cellule tumorale. L'agent de vectorisation comprend au moins une fonction acide ûCOOH ou amine primaire ûNH2 permettant son rattachement au complexe de platine (IV). 20 L'agent de vectorisation peut être un anticorps, un peptide, un sucre, une hormone, une vitamine, par exemple la vitamine B12, de l'acide folique ou de la biotine, un ligand endogène ou synthétique d'un récepteur surexprimé à la surface d'une cellule tumorale - tel que le récepteur à l'estrogène ou le récepteur à l'acide folique. L'anticorps peut être plus particulièrement un anticorps monoclonal. Dans ce cas, l'attachement à w se fait par l'intermédiaire d'un de ses

25 résidus soit de type acide carboxylique soit de type amine primaire. Par exemple, dans le cas d'un anticorps, l'attachement peut se réaliser par l'intermédiaire d'un fragment lysine. D'autres approches récentes permettant d'introduire au moins une fonction acide ûCOOH ou amine primaire ûNH2 sur un anticorps consistent à introduire des acides aminés non-naturels permettant l'accès à d'autres types de chimie (de Graaf A.J., et al., Bioconjugate Chem. 2009, Publication

30 Date (Web): February 3, 2009 (Review); DOI: 10.1021/bc800294a ; WO 2006/069246 et selon Chin J.W., et al., JACS 2002, 124, 9026-9027 (technologie ReCode®)).

Lorsque ZH représente un acide biliaire, celui-ci a pour formule : CO2H avec : ^ X1=X2=X3=OH (acide cholique) ; ^ X1=X2=OH et X3=H (acide chénodésoxycholique) ; ^ X1=X3=OH et X2=H (acide désoxycholique) ; ^ X1=OH et X2=X3=H (acide lithocholique)

Lorsque ZH représente un acide gras polyinsaturé, celui-ci est représenté par la formule : chaîne grasse polyinsaturée-COOH. L'acide gras polyinsaturé comprend de 12 à 24 atomes de carbone (incluant l'atome de carbone du groupe COOH ) et des doubles liaisons de géométrie Z ou E qui sont conjuguées ou non entre elles. L'acide gras polyinsaturé peut être linéaire, ramifié ou partiellement cyclique. L'acide gras polyinsaturé peut être plus particulièrement l'acide cis-4,7,10,16,16,19-docosahexaènoïque (DHA) ou l'acide (4E,8E,12E,16E,20E)-4,8,13,17,21- pentaméthyl-docosa-4,8,12,16,20-pentaènoique (également nommé acide norsqualènique). L'acide gras peut être de formule : o HO v w HO On peut distinguer les complexes de formule (I) pour lesquels : • X représente un atome de chlore ; • RI et R2 représentent l'ammoniac ou bien RI représente une 2-picoline liée au platine par son atome d'azote et R2 représente l'ammoniac ; ou bien RI représente la cyclohexylamine et R2 représente l'ammoniac ; ou bien RI et R2 forment ensemble l'un des cycles (Al), (A2) ou (A3) ; • LI et L2 représentent un atome de chlore ou bien LI et L2 forment ensemble avec l'atome de platine l'un des cycles (B1) ou (B2).

On peut également distinguer les complexes de formule (I) pour lesquels : • n vaut 2; • W représente une simple liaison • ZH représente l'acide (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-docohexaènoïque ou l'acide (4 E,8E,12E,16E,20E)-4,8,13,17,21-pentaméthyl-docosa-4,8,12,16, 20-pentaènoique. 5 La structure spécifique des complexes de formule (I) leur confère des propriétés particulièrement intéressantes comme agent de ciblage antitumoral. En effet, selon la Demanderesse, • la structure de type platine (IV) est chimiquement inerte et permet ainsi la conservation du complexe ; 10 • la structure de type platine (IV) est biologiquement très peu réactive, notamment vis-à-vis des biomolécules nucléophiles présentes dans la circulation sanguine ; • la nature de type ester de la connexion entre le complexe de platine (IV) et l'agent de vectorisation, soit au travers de W soit directement dans les cas des acides biliaires ou des acides gras polyinsaturés, permet la libération rapide et efficace par une estérase quelconque, 15 présente dans le cytoplasme de la cellule tumorale, d'un complexe de formule générale (II) ci-dessous : (CH2)äùOH (II)

• le ligand X de type halogène permet de moduler la bioréduction ultérieure dans la cellule du composé de formule (II) en un composé de formule (III) :

1 Pt

20 R2 L2 (III) Préparation des complexes de formule (I) cas des com • lexes de formule I • our les • uels W re résente un rou e -C O - CH -NH- C(0)- ou -C(0)-(CH2)m-C(0)-NH- 25 Ces composés sont obtenus selon le Schéma 1 par couplage d'un composé P1 ou P'1 et d'un agent de vectorisation porteur respectivement d'au moins une fonction acide ou amine : C(=O)-(CH2)m-NH2 P, o Schéma 1 Le couplage peut s'effectuer en présence d'un agent de couplage, tel que par exemple le tétrafluoroborate de O-[(éthoxycarbonyl)cyanométhylèneamino]-N,N,N'N'-tétraméthyluronium (TOTU), et d'une base organique, tel qu'une amine, telle que par exemple l'éthyldiisopropylamine, en opérant dans un solvant tel que le DMF. La température de la réaction peut être comprise entre la TA et 40°C ; la durée de la réaction peut varier entre 2 à 48 h.

PI et P'1 sont obtenus à partir du composé de formule (II) selon le Schéma 2 : X R~Iti • z z (II) X

Rz ~ I tai\ L~ z O ()n

O( )\/OH o Pi P'i O Om 'NH2 o o o Schéma 2 Dans le cas de PI, on peut effectuer l'estérification par action d'un excès (de 2 à 3 équivalents-molaires) d'anhydride de diiacide par chauffage, à l'abri de la lumière, pendant 2 à 24 h dans un solvant tel que la pyridine à une température comprise entre 40°C et le reflux.

Dans le cas de P'1, on peut effectuer l'estérification par action d'un aminoacide (1 équivalent- molaire) dont la fonction amine est protégée par un groupe protecteur GP qui peut être par exemple le Boc, Fmoc ou Cbz, en présence d'un agent de couplage tel que par exemple le tétrafluoroborate de O-[(éthoxycarbonyl)cyanométhylèneamino]-N,N,N'N'-tétraméthyluronium (TOTU) et d'une base organique tel qu'une amine, telle que par exemple l'éthyldiisopropylamine. On peut opérer dans un solvant tel que le DMF à une température comprise entre l'ambiante et 40°C pendant 2 à 48 h. Le groupement protecteur de la fonction amine utilisé, tel que Boc, Fmoc ou Cbz est ensuite clivé selon l'une quelconque des méthodes connues de l'homme de l'art.

Le composé de formule (II) est obtenu selon le Schéma 3 à partir du composé de formule (III) par action d'un agent d'halogénation électrophile (noté X+) en opérant dans un a,c -alcanediol X R~Pt~~9.Lt äX+ä »- R1 Lt Ptpvj RZ \L2 HO R2 L2 (III) )n O (II) OH )n Schéma 3 X+ peut être par exemple l'un des suivants :

O N O O N O O N O BF - 4 N Lorsque X représente un atome de chlore, de brome ou d'iode, il est particulièrement intéressant d'opérer par action d'un léger excès du N-halosuccinimide correspondant (de 1,05 à 1,2 équivalent-molaire). Lorsque X représente un atome de fluor, il est particulièrement intéressant d'opérer par action d'un léger excès de tétrafluoroborate de 1-fluoro-pyridinium ou de bis(tétrafluoroborate de 1-chlorométhyl-4-fluoro-1,4-diazoniobicyclo[2.2.2.]octane (de 1,05 à 1,2 équivalent-molaire). On opère généralement en solution dans un large excès de a,c -alcanediol (de 20 à 200 équivalents-molaire) utilisé comme solvant, à l'abri de la lumière et à température voisine de l'ambiante. La durée de la réaction peut varier de 1 à 24 h. cas des composés de formule (1) pour lesquels W représente une liaison simple Ces composés sont obtenus selon le Schéma 4 par couplage (estérification) d'un composé de formule (II) et d'un acide biliaire ou d'un acide gras polyinsaturé : OH X couplage avec R'\ I pv,L' un acide biliaire ou un ~/ Î t acide gras polyinsaturé L2 O )n Schéma 4o, w ùz On utilise un agent de couplage, tel que par exemple le tétrafluoroborate de O-[(éthoxycarbonyl)cyanométhylèneamino]-N,N,N'N'-tétraméthyluronium (TOTU), et d'une base organique, tel qu'une amine, telle que par exemple l'éthyldiisopropylamine, en opérant dans un solvant tel que le DMF. La température de la réaction peut être comprise entre la TA et 40°C ; la durée de la réaction peut varier entre 2 à 48 h.

[Exemples] techniques analytiques méthode LC/MS (conditions A) : Colonne : ACQUITY BEH C18 1,7 pm 2,1x50 mm ; solvant : A : H2O+0,1% acide formique - B : CH3CN+0,1 % acide formique ; Tcolonne : 50°C ; débit : 1 ml/min ; gradient (2 min) :5à50%Ben 0,8 min ; 1,2 min : 100% de B ; 1,85 min 100% de B ; 1,95 min 5% de B. composés intermédiaires Composé intermédiaire (11.1) : trans-(chloro)(2-hydroxy-éthyloxy)-(1 R,2R-cyclohexanediamine)(éthanedioato)platine (IV) H Cl O Pt(1v) 0 - NHO'O H 2 O \OH 10 5 g (12,65 mmoles) de (1 R,2R-cyclohexanediamine)(éthanedioato)platine (EloxatinTM) et 1,74 g (13,03 mmoles) de N-chlorosuccinimide sont dissous dans 50 mL d'éthylèneglycol puis agités pendant 3 h à l'abri de la lumière. On ajoute alors 50 mL d'acétone et 100 mL d'oxyde de diéthyle et on agite pendant 10 min. Le surnageant est alors éliminé, puis on ajoute de nouveau et 50 mL d'acétone et 100 mL d'oxyde de diéthyle et on agite 10 min. Le surnageant est de nouveau éliminé 15 et le résidu épais ainsi obtenu est empâté 3 fois successivement dans 150 mL d'acétone plusieurs fois, le dernier empâtage étant effectué dans une cuve à ultrasons. Le solide formé est alors essoré, puis de nouveau agité dans 150 mL d'acétone pendant une nuit. Après essorage sur verre fritté, lavage à l'oxyde de diéthyle et séchage sous PR à TA, on obtient 4,69 g de trans-(chloro)(2-hydroxyéthyloxy)-(1 R,2R-cyclohexanediamine)(ethanedioato)platine (IV), sous forme d'un solide 20 jaune très pâle, contenant 1 mole par mole d'éthylène glycol. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) : 0,97 à 1,20 (m, 2 H) ; 1,38 à 1,60 (m, 4 H) ; 1,95 à 2,10 (m, 2 H) ; 2,57 (m, 2 H) ; 2,81 à 3,08 (m, 2 H) ; 3,28 à 3,53 (m partiellement masqué, 2 H) ; 4,93 (m, 1 H) ; 6,80 à 8,15 (m, 4 H). IR : le spectre a été enregistré entre 4000 et 400 cm-' avec une résolution de 2 cm-' sur un spectromètre Nicolet Nexus, le produit étant en pastille de KBr. Les principales bandes sont centrées à : 3453 ; 25 3223 ; 3167 ; 2939 ; 2876 ; 1717 ; 1690 ; 1662 ; 1354 ; 1072 ; 1032 ; 803 & 568 cm-1 . Composé intermédiaire (11.2) : trans-(bromo)(2-hydroxy-éthyloxy)-(1 R,2R-cyclohexanediamine)(éthanedioato)platine (IV) H Br j(iv) Pt O-H O \OH 0,25 g (0,63 mmole) de (1R,2R-cyclohexanediamine)(éthanedioato)platine et 0,112 g (0,63 mmole) de N-bromosuccinimide sont dissous dans 2,5 mL d'éthylèneglycol puis agités pendant une nuit à l'abri de la lumière. Le solide jaune formé est mis en suspension dans un mélange de 3 mL de tétrahydrofurane et 10 mL d'oxyde de diéthyle, essoré puis agité sous ultrasons dans 2 mL d'acétone. Après essorage et séchage sous PR à TA, on obtient 0,168 g de trans-(bromo)(2-hydroxy-éthyloxy)-(1 R,2R-cyclohexanediamine)(éthanedioato)platine (IV), sous forme d'un solide jaune contenant 1 mole par mole d'éthylène glycol. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) : 0,99 à 1,17 (m, 2 H) ; 1,36 à 1,58 (m, 4 H) ; 1,95 à 2,08 (m, 2 H) ; 2,63 (m, 2 H) ; 2,78 à 3,02 (m, 2 H) ; 3,28 à 3,53 (m partiellement masqué, 2 H) ; 4,98 (m, 1 H) ; 6,92 à 8,10 (m, 4 H). LC/MS (A) : Ionisation : électrospray en mode positif et/ou négatif (ES+/-) : (effet isotopique complexe, c'est l'isotope 195Pt qui est considéré) : Tr= 0,21 min ; [M+H]+ : m/z 539 ; pic de base : m/z 477.

Composé intermédiaire (11.1) : trans-(fluoro)(2-hydroxy-éthyloxy)-(1 R,2R-cyclohexanediamine)(éthanedioato)platine (IV) H F 1 jPt(ivj0 /1----NH2 O'O H O \OH 5 g (12,65 mmoles) de (1 R,2R-cyclohexanediamine)(ethanedioato)platine, et 2,41 g (13,03 mmoles) de tétrafluoroborate de 1-fluoropyridinium sont dissous dans 50 mL d'éthylèneglycol puis agités pendant 4 h à l'abri de la lumière. On ajoute alors 50 mL d'acétone et 100 mL d'oxyde de diéthyle et on agite pendant 10 min. Le surnageant est alors éliminé, puis on ajoute de nouveau et 50 mL d'acétone et 100 mL d'oxyde de diéthyle et on agite 10 min. Le surnageant est de nouveau éliminé et le résidu épais ainsi obtenu est empâté 3 fois successivement dans 150 mL d'acétone plusieurs fois, le dernier empâtage étant effectué pendant 45 min dans une cuve à ultrasons. Le solide formé est alors essoré sur verre fritté, lavé à l'oxyde de diéthyle et séché sous PR à TA. On obtient ainsi 5,10 g de trans-(fluoro)(2-hydroxyéthyloxy)-(1R,2R- cyclohexanediamine)(ethanedioato)platine (IV), sous forme d'un solide jaune. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) : 1,01 à 1,19 (m, 2 H) ; 1,40 à 1,63 (m, 4 H) ; 1,96 à 2,13 (m, 2 H) ; 2,45 à 2,53 (m partiellement masqué, 2 H) ; 2,72 à 2,94 (m, 2 H) ; 3,25 à 3,48 (m partiellement masqué, 2 H) ; 4,81 (m, 1 H) ; 7,02 à 8,39 (m, 4 H). LC/MS (A) : Ionisation : électrospray en mode positif et/ou négatif (ES+/-) : (effet isotopique complexe, c'est l'isotope 195 Pt qui est considéré) : Tr= 0,14 min ; [M+H]+ : m/z 478 ; [M+Na]+ : m/z 500.

Composé intermédiaire (11.4) : Composé intermédiaire (11.5) : CI NH CI Pt(1v)

NH2 CI O racémate exo Composé intermédiaire (I1'.1) : H Cl /\,....ûNH jPt(1v) ~~NH OO

O O o H O 0,5 g (1,013 mmole) de trans-(chloro)(2-hydroxyéthyloxy)-(1R,2R-cyclohexanediamine)(éthanedioato) platine (IV), composé intermédiaire (11.1), et 0,24 g (2,5 mmoles) d'anhydride succinique sont mis en suspension dans 5 mL de pyridine, puis on chauffe 3 h à 50°C à l'abri de la lumière. Après refroidissement, le mélange est dilué avec 50 mL d'acétone et un insoluble gris est filtré sur clarcel. Le filtrat est concentré à sec sous PR, puis après dilution avec 20 mL d'oxyde de diéthyle, un solide jaune est essoré. Cette produit brut est purifié par HPLC préparative sur une colonne contenant 11 g de silice SVF D26 RP18, en éluant avec un gradient d'un mélange de d'eau contenant 9 mM d'acide trifluoroacétique (A) et d'acétonitrile contenant également 9 mM d'acide trifluoroacétique (B) selon le programme suivant : de 0 à 2 min 100% de A, puis de 100 à 90% de A en 60 min. Les fractions contenant plus de 80% d'attendu, par analyse LC/MS, sont successivement regroupées, concentrées, redissoutes dans le minimum d'acétonitrile et cristallisées par addition d'oxyde de diéthyle. On obtient ainsi 0,119 g de trans-(chloro)[2-(2-carboxy- éthylcarbonyl)oxy-éthyloxy)-(1 R,2R-cyclohexanediamine)(éthanedioato)platine (IV), sous forme d'une poudre jaune. RMN 1H : (400 MHz, DMSO-d6) : 1,00 à 1,19 (m, 2 H) ; 1,41 à 1,58 (m, 4 H) ; 1,97 à 2,09 (m, 2 H) ; 2,38 à 2,55 (m partiellement masqué, 6 H) ; 3,04 (t large, 19 H J=5,4 Hz, 2 H) ; 4,01 (t, J=5,4 Hz, 2 H) ; 6,82 à 8,26 (m, 4 H) ; 12,17 (m étalé, 1 H). LC/MS (A) : tr= 2,28 min ; m/z= 592 (M-H-) ; 592 (M+H+). Composé intermédiaire (II'.2) : trans-(fluoro)[2-(2-carboxy-éthylcarbonyl)oxy-éthyloxy)-(1 R,2R-5 cyclohexanediamine)(éthanedioato)platine (IV) H F NH Pt(iv) 0 O /1---NH2 \O~O H O O O 1,517 g (3,18 mmoles) de trans-(fluoro)(2-hydroxyéthyloxy)-(1R,2R-cyclohexanediamine)(ethanedioato) platine (IV), composé intermédiaire (11.3), et 1,457 g (14,56 mmoles) d'anhydride succinique sont mis en suspension dans 15 mL de pyridine, puis 10 on chauffe à 70°C pendant 3 h à l'abri de la lumière. Après refroidissement, le milieu réactionnel est dilué avec 100 mL d'acétone et un insoluble beige est filtré sur clarcel. Le filtrat est concentré à sec sous PR, puis après dilution avec 20 mL d'oxyde de diéthyle, 1,5 g de poudre jaune est essoré. Ce produit brut est purifié par HPLC préparative sur une colonne contenant 31 g de silice SVF D26 RP18, en éluant avec un gradient d'un mélange de d'eau 15 contenant 9 mM d'acide trifluoroacétique (A) et d'acétonitrile contenant également 9 mM d'acide trifluoroacétique (B) selon le programme suivant : de 0 à 2 min 100% de A, puis de 100 à 90% de A en 60 min. Les fractions contenant plus de 90% d'attendu, par analyse LC/MS, sont successivement regroupées, concentrées, redissoutes dans le minimum d'acétonitrile et cristallisées par addition d'oxyde de diéthyle. On obtient ainsi 0,477 g de 20 trans-(fluoro)[2-(2-carboxy-éthylcarbonyl)oxy-éthyloxy)-(1 R,2R-cyclohexanediamine)(éthanedioato)platine (IV). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) : 1,00 à 1,18 (m, 2 H) ; 1,43 à 1,60 (m, 4 H) ; 1,97 à 2,08 (m, 2 H) ; 2,38 à 2,53 (m partiellement masqué, 6 H) ; 3,04 (t large, J=5,4 Hz, 2 H) ; 4,00 (t, J=5,4 Hz, 2 H) ; 6,78 à 8,29 (m, 4 H) ; 12,17 (m étalé, 1 H). LC/MS (A) :(effet isotopique complexe, c'est l'isotope 195 Pt qui est considéré) :Tr 25 (min) = 0,25 min ; [M+H]+ : m/z 578 ; [M-H]- : m/z 576

Les numéros des composés exemplifiés renvoient à ceux donnés dans le tableau ci-après, qui illustre les structures chimiques et les propriétés physiques de quelques composés selon l'invention. Exemple 1 : 30 Dans un tricol de 25 mL, à l'abri de la lumière, on dissout 140 mg (0,427 mmole) de tétrafluoroborate de O-[(éthoxycarbonyl)cyanométhylèneamino]-N,N,N'N'-tétraméthyluronium (TOTU) et 134 mg (0,408 mmole) d'acide cis-4,7,10,16,16,19-docosahexaènoïque (DHA) dans 1 mL de DMF anhydre, puis on ajoute 74 pL (0,425 mmole) de diisopropyléthylamine en solution dans 1 mL de DMF et on agite pendant 15 min. On ajoute ensuite successivement 22 mg (0,18 mmole) de 4-diméthylaminopyridine et 200 mg de trans-(chloro)(2-hydroxyéthyloxy)-(1 R,2R-cyclohexanediamine)(ethanedioato)platine (IV), composé intermédiaire (11.1). Le mélange est agité 72 h, à TA et à l'abri de la lumière, puis concentré à sec sous PR (2 mbar) à 40°C. Le produit brut est alors purifié par HPLC préparative sur une colonne de 10 g de silice 60 SVF D22, en éluant avec un gradient de n-heptane (solvent A) et d'acétate d'éthyle (solvant B) à un débit de 15 mL/mn selon le programme suivant : 0 à 5 min : « 50% A et 50% B » ; 5 à 20 mn : de « 50% A et 50% B » à «20%Aet80% B»; de 20 à 40 mn: de «20%Aet80% B» à «10%Aet90% B». En concentrant les fractions éluées entre 15 et 30 min, on isole 130 mg de trans-(chloro)[2-(cis- 4,7,10,16,16,19-docosahexaènoato)-éthyloxy]-(1 R,2R-cyclohexanediamine)(éthanedioato)platine (IV), sous forme d'un solide jaune très-pâle. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) : 0,92 (t, J=7,6 Hz, 3 H) ; 0,99 à 1,16 (m, 2 H) ; 1,42 à 1,61 (m,4H);1,97à2,07(m,4H);2,22à2,35(m,4H);2,38à 2,52 (m partiellement masqué, 2 H) ; 2,72 à 2,87 (m, 10 H) ; 3,04 (t large, J=5,4 Hz, 2 H) ; 4,00 (t, J=5,4 Hz, 2 H) ; 5,21 à 5,41 (m, 12 H) ; 6,77 à 8,33 (m, 4 H). LC/MS (A) : Ionisation : électrospray en mode positif et/ou négatif (ES+/-) : (effet isotopique complexe, c'est l'isotope 195 Pt qui est considéré) :Tr= 1,22 min ; [M+H]+ : m/z 804 ; [M+Na]+ : m/z 826. CCM sur plaque silice 60F254 : Rf = 0,11 (éluant : acétate d'éthyle / n-heptane 4:1).

Exemple 2 : H Cl NH2 1 0,0 t NH2 1 00 H O 21 Exemple 4 : H Cl NH2 I O~O ,Pt NH2 1 O~O H O Les composés selon l'invention ont fait l'objet d'essais pharmacologiques permettant de déterminer leur effet inhibiteur de cellules sensibles aux dérivés du platine. Des essais ont consisté à mesurer l'activité in vitro des composés de l'invention sur les souches A549, H460 LoVo, KB et SKBr3 en comparaison avec le complexe de platine (II) dont auquel il est apparenté ; notamement le produit de l'exemple 1 en comparaison avec l'oxaliplatine.

15 La prolifération cellulaire est évaluée par incorporation de 14C-thymidine dans l'ADN des cellules. A549, H460 LoVo, KB et SKBr3 sont cultivées en milieu Dulbecco's modified Eagle's medium w Exemple 3 : H Br NH2 1 t NH2 I \O~O H O T 22 10 (DMEM). Tous les milieux contiennent 10% de sérum de veau foetal, 2 mM de L-glutamine, 100 unités/ml de pénicilline et 100 mg/ml de streptomycine. L'incubation est réalisée à 37°C dans une atmosphère de 95% air/5% CO2.

Les cellules, en croissance exponentielles, sont introduites dans les puits d'une plaque 96 puits Cytostar, contenant un liquide scintillant (Cytostar-T scintillating microplate, GE Healthcare Bio-Sciences AB, Uppsala, Sweden), à la densité de 5.103 à 104 cellules par puits, à raison de 180 pl par puits. Après 4 h d'incubation, les composés à tester sont ajoutés. Les composés sont préalablement préparés en solution stock à la concentration de 10 mM dans le DMSO. Une série de dilutions est réalisée, avant que les composés soient mis au contact des cellules sous un volume de 10 pl. Après 72 h d'incubation à 37°C dans une atmosphère de 95% air/5% CO2, 0,1pCi/puits de 14C-thymidine sont ajoutés. 24 h après (total 96 h de traitement), l'incorporation de 14C-thymidine est enregistrée dans un compteur à scintillation adaptée, (MicroBeta radioactivity counting, Perkin-Elmer Life Sciences, Boston, MA, USA). Les valeurs moyennes obtenues dans les groupes expérimentaux sont divisées par les valeurs moyennes obtenues dans les groupes contrôles pour obtenir des pourcentages par rapports aux contrôles.

Les valeurs d'IC50 sont évaluées à partir de courbes présentant le pourcentage de viabilité vs la concentration du composé testé, en utilisant le logiciel Biostat speed. L'IC50 est définie comme la concentration du compose qui inhibe 50% de la prolifération cellulaire ou 50% de la viabilité cellulaire.

La viabilité cellulaire peut aussi être évaluée par le kit « Titer 96 assay » (Promega, Madison, Wisconsin, USA), qui utilise le 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4- sulfophenyl)-2H-tetrazolium] (MTS) (Cancer Commun. 1991, 3, 207-212) et ceci quelque soit le type cellulaire. Ce test est un des plus communément utilisé dans la littérature. II utilise une méthode d'absorption colorimétrique basé sur la capacité des enzymes déshydrogénases des cellules vivantes de produire le formazan, un composé brunâtre détectable à 490 nm. Pour cela, en fin d'incubation, 20 pI de réactif MTS est ajouté aux puits de culture et la plaque incubée 1-3 h supplémentaires. Une mesure du signal bruit de fond est évalué à partir de puits contenant les cellules auxquelles on a ajouté 20 pI de Triton X100 en fin d'incubation. La survie cellulaire est évaluée par la mesure de l'absorbance à 490 nm en utilisant un compteur adapté (Victor2 Wallac plate reader, Perkin Elmer, Boston, Massachusetts, USA). L'activité inhibitrice vis à vis de ces souches est donnée par la concentration qui inhibe 50% de l'activité de chacune d'entre elles.

Le Tableau II montre la moyenne des IC50 (pM) obtenues avec le produit de l'exemple 1 en comparaison avec l'Eloxatine dans les mêmes expériences.

Tableau II cellules A549 H460 LoVo KB SKBr3 Eloxatine 1,31 1,26 0,60 0,97 4,41 Exemple 1 0,24 0,12 0,19 0,61 0,55

Claims (4)

1. Revendications1. Complexe de platine de formule (I) : X Rt\ L1 Pt R2 Ô L2 (CH2)n ù OùWùZ (I) dans laquelle : ^ X représente un atome d'halogène ; ^ RI représente un groupe R'1NH2 ou bien une
2. 2-picoline directement liée au platine par son atome d'azote et R2 représente un groupe R'2NH2, RI et R2 étant en configuration cis par rapport au platine ; ^ R'1 et R'2 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupe (C1-C6)alkyle, (C1-C6)alkényle, (C3-C8)cycloalkyle ; ou bien RI et R2 forment ensemble avec l'atome de platine un cycle de 5 à 7 chaînons de formule (A) : 7 H2N (A) ^ Lt et L2 positionnés en configuration cis par rapport au platine, représentent chacun un atome d'halogène ; ou bien Lt et L2 forment ensemble avec l'atome de platine un cycle de 5 à 7 chaînons, de formule (B) oùv Pt\ Y O \\ o (B) dans lequel : ^ V représente CH2, C(0) ou P(0)OH ^ Y représente représente une liaison ou le groupe (CR1R2)1_2, R1 et R2 représentant H ou (C1-C4) alkyle ; les cycle (A) et/ou (B) pouvant être : o soit substitués par au moins un groupe (C1-C4)alkyle ; osoit accolés par deux atomes de carbone en commun à un groupe (C4-C8)cycloalkyle ou un groupe (C4-C8)hétérocycloalkyle mono ou bicyclique H2N Ptsaturé ; o soit spiro-substitués par un groupe (C4-C3)cycloalkyle ou un groupe (C4-C3)hétérocycloalkyle mono ou bicyclique saturé ; ^ W représente une liaison simple ou un groupe -C(0)-(CH2)m-NH-C(0)- ou -C(0)-(CH2)m C(0)-NH- rattaché au groupe (CH2)n par le groupe C(0) ; ^ n vaut 2, 3 ou 4 ; ^ mvaut2,3ou4; ^ Z représente un fragment d'un agent de vectorisation attaché à w susceptible d'être reconnu par une cellule tumorale et tel que : ^ ZH représente un acide biliaire ou un acide gras polyinsaturé lorsque W représente une liaison simple ; ^ Z-0O0H ou Z-NH2 représente un anticorps, un peptide, un sucre, une hormone, une vitamine, l'acide folique, la biotine, un ligand endogène ou synthétique d'un récepteur surexprimé à la surface d'une cellule tumorale. 2. Complexe selon la revendication 1 dans lequel R, représente NH3 ou la cyclohexylamine.
3. 3. Complexe selon la revendication 1 ou 2 dans lequel R2 représente l'ammoniac.
4. 4. Complexe selon la revendication 1 dans lequel : ^ RI et R2 représentent l'ammoniac ; ^ ou bien RI représente une 2-picoline liée au platine par son atome d'azote et R2 représente l'ammoniac ; ^ ou bien RI représente la cyclohexylamine et R2 représente l'ammoniac. 8. Complexe selon la revendication 1 dans lequel RI et R2 forment ensemble avec l'atome de platine l'un des deux cycles (A) suivants : /Pt \ /Pt NH2 NH2 9. Complexe selon l'une des revendications précédentes dans lequel le groupe (C4-C3)cycloalkyle qui est accolé au cycle (A) est le groupe cyclohexyle ou bien le groupe(C4-C8)cycloalkyle qui est spiro-accolé au cycle (A) est (C4-C8)hétérocycloalkyle qui est spiro-accolé au cycle (A) est ou bien le groupe o 7. Complexe selon la revendication 1 dans lequel le cycle (A) est l'un des suivants : O (A2) (A3) 8. Complexe selon l'une des revendications précédentes dans lequel le groupe (C4-C8)cycloalkyle qui est accolé au cycle (B) est le groupe cyclohexyle. 9. Complexe selon l'une des revendications précédentes dans lequel le cycle (B) est l'un des suivants : (B1) (B2) 10. Complexe selon l'une des revendications précédentes dans lequel ZH représente : un acide biliaire de formule avec : o X1=X2=X3=OH (acide cholique) ; CO2Ho X1=X2=OH et X3=H (acide chénodésoxycholique) ; o X1=X3=OH et X2=H (acide désoxycholique) ; o X1=OH et X2=X3=H (acide lithocholique) ou un acide gras polyinsaturé. 11. Complexe selon la revendication 10 dans lequel l'acide gras polyinsaturé comprend de 12 à 24 atomes de carbone (incluant l'atome de carbone du groupe COOH) et des doubles liaisons de géométrie Z ou E qui sont conjuguées ou non entre elles. 12. Complexe selon la revendication 10 dans lequel l'acide gras polyinsaturé est l'acide cis-4,7,10,16,16,19-docosahexaènoïque (DHA) ou l'acide (4E,8E,12E,16E,20E)-4,8,13,17,21-pentaméthyl-docosa-4,8,12,16, 20-pentaènoiq ue. 13. Complexe selon la revendication 1 dans lequel : ^ X représente un atome de chlore ; ^ RI et R2 représentent l'ammoniac ou bien RI représente une 2-picoline liée au platine par son atome d'azote et R2 représente l'ammoniac ; ou bien RI représente la cyclohexylamine et R2 représente l'ammoniac ; ou bien RI et R2 forment ensemble l'un des cycles (Al), (A2) ou (A3) définis à la revendication 7 ; ^ LI et L2 représentent un atome de chlore ou bien LI et L2 forment ensemble avec l'atome de platine l'un des cycles (B1) ou (B2) définis à la revendication 9. 14. Complexe selon la revendication 1 ou 13 dans lequel : ^ n vaut 2 ; ^ W représente une simple liaison ^ ZH représente l'acide (4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-docohexaènoïque ou l'acide (4 E,8E,12E,16E,20E)-4,8,13,17,21-pentaméthyl-docosa-4,8,12,16, 20-pentaènoique. 15. Complexe selon l'une des revendications précédentes dans lequel n et m valent 2. 16. Complexes de platine choisis parmi l'un des suivants :H Cl • NH2 I O,O t NH2 OO H O\ 0 O T T w w H Br • NH2 I O,O t NH2 OO H O 0 L0 r H Cl • NH2\ O~O Pt NH2 I \O-"".O H O 17. Composition pharmaceutique comprenant un complexe selon l'une des revendications 1 à 16. 18. Complexe selon la revendication 1 à 16 pour utilisation en tant qu'anticancéreux. 19. Utilisation d'un complexe selon la revendication 1 à 16 dans la préparation d'un médicament anticancéreux. w ti 20. Complexe selon la revendication 1 à 16 destiné à libérer une fois injecté à un patientle complexe de formule (II) correspondant (CH2)äùOH L / Pt 1 Rz \ Lz ou le complexe de formule (III) correspondant 21. Utilisation d'un composé selon la revendication 1 à 16 en tant que précurseur du composé de formule (II) correspondant (CH2)äùOH L / Pt 1 Rz \ L2 ou du complexe de formule (III) correspondant