FR2873293A1 - Utilisation d'un acide gras pour la preparation d'une composition topique destinee a l'apaisement des reactions inflammatoires dues aux piqures d'hymenopteres a venin - Google Patents

Utilisation d'un acide gras pour la preparation d'une composition topique destinee a l'apaisement des reactions inflammatoires dues aux piqures d'hymenopteres a venin Download PDF

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Abstract

La présente invention a pour objet l'utilisation d'un acide gras pour la préparation d'une composition destinée à l'apaisement des réactions inflammatoires dues aux piqûres d'hyménoptères.

Description

UTILISATION D'UN ACIDE GRAS POUR LA PRÉPARATION D'UNE COMPOSITION TOPIQUE
DESTINÉE A L'APAISEMENT DES REACTIONS INFLAMMATOIRES DUES AUX PIQURES D'HYMENOPTERES A VENIN
La présente invention a pour objet l'utilisation d'un acide gras pour la préparation d'une composition topique destinée à l'apaisement des réactions inflammatoires dues aux piqûres d'hyménoptères Les insectes secrétant des substances nocives pour les êtres humains sont assez nombreux dans nos régions. Entre les guêpes, les frelons, les 14 bourdons, les fourmis et les abeilles les risques de piqûre ne sont pas négligeables. Ces insectes sont appelés hyménoptères. Leur piqûre peut provoquer des réactions locales ou générales non allergiques ou encore des réaction allergiques locales ou généralisées.
Les réactions locales non allergiques sont dues à une réaction inflammatoire non spécifique. Une réaction habituelle après une piqûre d'hyménoptère est constituée d'une douleur immédiate associée à une rougeur, une démangeaison et un oedème sur plusieurs centimètres. L'évolution de la réaction est variable. Cette dernière peut durer quelques heures (trois en moyenne) et ne dure en général pas plus d'un jour. Il existe dans ce type de réactions des cas particuliers. Des piqûres entraînant des réactions non allergiques sur des sites précis peuvent avoir des conséquences dramatiques. Des piqûres dans la cavité buccale et en particulier au fond de la gorge peuvent entraîner des troubles respiratoires par l'intermédiaire d'un oedème local. Enfin des piqûres au niveau de l'oeil, sur la cornée, peuvent engendrer des 25. complications immédiates comme des abcès oculaires ou des perforations du globe. Certaines complications peuvent apparaître plus tard: des cataractes ou des glaucomes.
Les réactions générales non allerqiques se rencontrent lors d'envenimation massive en cas de piqûres multiples. Ces réactions se présentent sous forme de troubles digestifs avec diarrhées et vomissements, chute de tension parfois associée à des palpitations, des convulsions non constantes et une atteinte des muscles pouvant entraîner une insuffisance rénale (dans le cadre d'une rabdomyolyse). Ces réactions apparaissent généralement après plus d'une trentaine de piqûres.
Les réactions allergiques concernent approximativement 1% de la population. Elles peuvent être locales, régionales, généralisées ou retardées. Elles sont généralement classées en plusieurs stades en fonction du degré de gravité : réaction locale (réaction élargie par rapport à la réaction normale mais limitée à un membre) réaction régionale (réaction atteignant les articulations du membre piqué), réaction générale (cutanées à distance, manifestations respiratoires, oedème de Quincke, asthme, manifestations digestives, palpitations), choc anaphylactique (chute de tension s'ajoutant aux signes décrits spontanément mortels).
Les hyménoptères regroupent de nombreuses espèces dont les abeilles, les guêpes, les frelons, les fourmis. Bien que la majorité des piqûres de ces hyménoptères ne provoquent qu'une douleur modérée et une réaction limitée et temporaire, elles peuvent se révéler dangereuses voire mortelles si elles sont multiples, si elles se produisent dans la bouche, dans la gorge, ou au niveau des yeux, ou encore si le sujet piqué déclenche une réaction de type allergique. Le sujet piqué ressent tout d'abord une douleur plus ou moins vive en fonction du type d'insecte et de la quantité de venin injectée. La peau autour de la piqûre devient rouge et enflée. Le sujet ressent des démangeaisons plus ou moins intenses.
Des travaux récents ont montré que le venin d'insecte et notamment le venin d'abeille est une substance complexe comprenant un grand nombre de composés actifs parmi lesquels l'histamine, la melittine, l'hyaluronidase et la phospholipidase A. La sensibilité à ces protéines du venin pourrait expliquer certaines des réactions exposées ci-dessus.
La demanderesse a ainsi trouvé de façon surprenante que ces acides gras en particulier en C12-C24 diminuent considérablement la réaction inflammatoire qui fait suite à une piqûre d'hyménoptère.
C'est pourquoi la présente invention concerne l'utilisation d'un acide gras pour la préparation d'une composition topique ou injectable destinée à l'apaisement des réactions inflammatoires dues aux piqûres d'hyménoptères.
Les acides gras utilisés dans la présente invention sont de préférence les acides gras naturels, c'est-à-dire pouvant être obtenus à partir de produit naturels tels que les huiles, mais également des acides gras de synthèse identiques ou non aux acides gras naturels.
En outre, les acides gras utilisables peuvent être des acides gras saturés ou insaturés. On peut également envisager d'utiliser les sels ou dérivés pharmaceutiquement acceptables de ces acides gras qui sont compris dans la dénomination acide gras.
Parmi les acides gras utilisés dans le cadre de la présente invention on peut notamment citer les acides en C12 à C24, l'acide Laurique (nDodecanoïque), Myristique (n-Tetradecanoïque), Palmitique (n-Hexadecano que), Stearique (n-Octadecanoïque), Arachidique (n-Eicosanoïque), Behenique (n-Docosanoïque), Lignocerique (n-Tetracosanoïque), Palmitoleique (cis-A9-Hexadecenoïque), Oleique (cis- O9-Octadecenoïque), Linoleique (cis, cis- A9-, Al2-Octadecadienoque), Linolenique (all-cisA9- Al2-, A15-Octadecatrienoïque), Arachidonique (all-cis- A5-, A$-, A"A14-Eicosatetraenoïque) On préfère les acides gras polyinsaturés et l'acide linoléique et oléique 15 sont particulièrement actifs dans l'utilisation objet de l'invention.
Les acides gras ont été testés in vitro pour leur capacité à inhiber l'activité de certains des composants pro-inflammatoires du venin d'abeille, et in vivo chez le rat dans des modèles d'oedèmes induits par du venin d'abeille.
Les résultats de ces essais montrent que les acides gras peuvent être utilisés pour la fabrication de compositions destinées au traitement local des inflammations faisant suite aux piqûres d'hyménoptères à venin.
Dans le cas présent, la composition dont l'utilisation est l'objet de l'invention peut en outre comprendre d'autres principes actifs notamment un anesthésiant et/ou un antibiotique et/ou une substance anti-allergique ou anti-inflammatoire.
Les acides gras peuvent être formulés sous toutes les formes adaptées à l'administration topique, en association avec des excipients appropriés pour permettre une administration d'une dose de 0,0là 50 mg par piqûre d'hyménoptère à venin. La dose pourra bien entendu varier en fonction de la quantité de venin absorbée, du nombre de piqûres ou encore du type d'insecte.
Parmi les formulations galéniques qui peuvent être adaptées pour la mise en oeuvre de l'invention on peut citer les pommades, les crèmes, les gels, les patchs, les poudres, les sprays ou encore les lotions. Une application grâce à un stick peut s'avérer particulièrement avantageuse pour les piqûres uniques sur un membre par exemple. Si les muqueuses ou encore les yeux sont atteints on préfère respectivement une formulation sous forme d'un spray ou d'un collyre.
Dans certains cas on préférera administrer la composition faisant l'objet de la présente invention par voie d'injection locale. Les substances actives des compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent être dissoutes ou mises en suspension dans un liquide injectable stérile pharmaceutiquement acceptable, tel que l'eau stérile, un solvant organique stérile ou un mélange de ces deux liquides pour une administration par voie locale, pour permettre une administration d'une dose de 0,001 à 1 mg par piqûre d'hyménoptère à venin.
L'invention sera mieux comprise à la lecture des exemples qui suivent et qui se réfèrent aux figures ci-après: Fig. 1: illustre le pourcentage d'inhibition de l'activité PLA 2 du venin d'abeille en fonction de la concentration en acide qui est utilisé pour: 1.A L'acide linoléique (exemple 1) 1.B L'acide oléique (exemple 1) Fig. 2: illustre l'effet de l'acide oléique et linoléique sur l'augmentation du volume de la patte de rat dans un modèle d'inflammation, en fonction du temps après injection du venin d'abeille (exemple 2 expérience 1).
Fig. 3: illustre l'effet de l'acide oléique et linoléique l'augmentation du 30 volume de la patte de rat dans un modèle d'inflammation, en fonction du temps après injection du venin d'abeille (exemple 2 expérience 2) Fig. 4: illustre l'effet de l'acide oléique et linoléique l'augmentation du volume de la patte de rat dans un modèle d'inflammation, en fonction du temps après injection du venin d'abeille (exemple 2 expérience 3) Exemple I: Effets inhibiteurs in vitro de l'acide linoléique et de l'acide oléique sur l'activité phospholipase A2 de venin d'abeille (PLA2), composante inflammatoire majeure de ce venin: L'effet de l'acide linoléique et oléique sur l'activité PLA2 est mesuré selon la 10 méthode d'extraction à l'hexane décrite par Katsumata, M. Gupta, G. and Goldman AS., (1986), Anal. Biochem. 154 (2), 676-681. L'activité PLA2 est déterminée en utilisant un substrat radioactif, le L-a-dipalmitoyl-[2, 9,10 (N)-3H-palmitoyl]-phosphatidylcholine. La réaction est réalisée dans 1 ml de tampon glycine/NaOH, pH 9, contenant 2.2 mM de désoxycholate, 0. 11 pCi de dipalmitoyl-PC et 32 mU/ml de PLA2 de venin d'abeille. Après 20 minutes d'incubation, la réaction est arrêtée en ajoutant 0.2 ml d'une solution Triton X-100/EDTA, puis le produit de la réaction, l'acide palmityque radiomarqué, est extrait par une solution d'hexane contenant 0. 1% d'acide acétique et 0.7g/ml de Na2SO4. La radioactivité des extraits est déterminée à l'aide d'un compteur à scintillation liquide. Les résultats représentent la moyenne SEM des valeurs en CPM obtenues dans deux expériences indépendantes.
Les figures 1A et 1B illustrent le pourcentage d'inhibition de l'activité PLA2 (axe vertical) en fonction de la concentration d'acide gras utilisé (axe horizontal).
Ces résultats démontrent que l'acide linoléique et oléique inhibent de manière dose dépendante l'activité enzymatique de la PLA2 de venin d'abeille.
Exemple II:
Activité de l'acide oléique et linoléique dans un modèle d'oedème inflammatoire provoqué par le venin d'abeille chez le rat (Rabinovich, GA. Sotomayor CE., Riera, CM., Bianco I. and Correa SG. (2000), Eur. J. Immunol. 30, 1331-1339; Chen, J., Luo C., Li, HL. And Chen HS, (1999), Pain, 83, 67-76) Expérience 1: Le venin d'abeille (20pg/ml dans NaCl 0.9%) est incubé, à température ambiante, en présence ou non d'acide linoléique (32 M). 30 minutes après le début de l'incubation, les solutions (25p1) sont injectées par voie sous cutanée à des rats Sprague Dawley (110-140g), au niveau de la face supérieure du pied. L'oedème est mesuré à l'aide d'un pléthysmomètre 5 10 15 20 30 60 et 90 minutes après l'injection. Les résultats représentent la moyenne SEM de 5 animaux. Les comparaisons statistiques sont réalisées par un test de t, dont le groupe témoin est constitué par les animaux ayant reçut le venin seul. * P< 0.05, *** P< 0.005. Les résultats sont représentés en figure 2.
Expérience 2: 120 et 30 minutes avant l'injection du venin d'abeille (20pg/mI dans NaCl 0.9%) des rats Sprague Dawley (110-140g) sont traités ou non, sur le dessus du pied, par application topique d'acide linoléique. L'oedème est mesuré à l'aide d'un pléthysmomètre 5 - 10 15 - 20 et 30 minutes après l'injection sous cutané du venin d'abeille au niveau de la face supérieure du pied de l'animal. Les résultats (figure 3) représentent la moyenne SEM de 20 animaux. Les comparaisons statistiques sont réalisées par un test de t, dont le groupe témoin est constitué par les animaux traités par le véhicule (acétone).
* P< 0.05, ** P< 0.01, *** P< 0.005 Expérience 3: et 30 minutes avant l'injection du venin d'abeille (20pg/ml dans NaCl 0.9%) des rats Sprague Dawley (110-140g) sont traités ou non, sur le dessus du pied, par application topique d'acide oléique. L'oedème est mesuré à l'aide d'un pléthysmomètre 5 - 10 - 15 et 20 minutes après l'injection sous cutané du venin d'abeille au niveau de la face supérieure du pied de l'animal. Les résultats (figure 4) représentent la moyenne SEM de 5 animaux. Les comparaisons statistiques sont réalisées par un test de t, dont le groupe témoin est constitué par les animaux traités par le véhicule (acétone). * P< 0.05.

Claims (1)

  1. 8 Revendications
    1. Utilisation d'un acide gras pour la préparation d'une composition topique ou injectable destinée à l'apaisement des réactions inflammatoires dues aux piqûres d'hyménoptères.
    2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'acide gras est un acide en C12 à C24.
    3. Utilisation selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisée en ce que l'acide gras est choisi parmi: l'acide Laurique (n-Dodecano que), Myristique (n-Tetradecanoïque), Palmitique (n-Hexadecanoïque), Stearique (n-Octadecanoïque), Arachidique (n-Eicosanoïque), Behenique (nDocosanoïque), Lignocerique (n-Tetracosanoïque), Palmitoleique (cis-A9Hexadecenoïque), Oleique (cis- L!,9- Octadecenoïque), Linoleique (cis, cis- A9-, Al2-Octadecadienoïque), Linolenique (ailcis- 2-, Al2_ A15_Octadecatrienoïque), Arachidonique (all- cis- Q5- A8- A11-, A1a-Eicosatetraenoïque) 4. Utilisation selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisée en ce que l'acide gras est choisi parmi l'acide linoléique et l'acide oléique.
    5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que l'acide gras peut être appliqué sous différentes formes galéniques choisie parmi les pommades, les crèmes, les gels, les patchs, les poudres, les sprays, les lotions ou les sticks.
    6. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que la composition est sous forme injectable.
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