FR2795959A1 - Compositions contain a fatty acid derived from plant or algal sources that inhibit lipogenesis and counteract fatty tissue formation - Google Patents

Compositions contain a fatty acid derived from plant or algal sources that inhibit lipogenesis and counteract fatty tissue formation Download PDF

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Abstract

Cosmetic and pharmaceutical compositions for counteracting fatty tissue containing a fatty acid derived from plant or algal lipids that inhibits lipogenesis of human adipocytes. The fatty acid preferably has 12-22 Carbon atoms with a degree of unsaturation between 0 and 5. It may be present as the free acid or as its mono- di- or tri-glycerides. Especially preferred acids are those derived from algae, especially the diatom Eurodiscaceaes bidulphiales bacilariophyces or the cyanobacterium Odontella aurita. The fatty acids derived from these contain around 22% of 5,8,11,14,17-eicosapentaenoic acid (EPA).

Description

<Desc/Clms Page number 1> <Desc / Clms Page number 1>

La présente invention concerne un produit cosmétique ou pharmaceutique qui contient un principe actif pour lutter contre l'adiposité et ainsi affiner la silhouette.  The present invention relates to a cosmetic or pharmaceutical product that contains an active ingredient to fight against adiposity and thus refine the silhouette.

On connaît déjà de tels produits et on sait que les principes actifs utilisés présentent une activité lipolytique par laquelle ils stimulent la dégradation (ou lyse) des graisses stockées dans les adipocytes humains, notamment sous forme de triglycérides, et favorisent l'élimination des produits de cette dégradation, notamment les acides gras et les glycérols.  Such products are already known and it is known that the active principles used exhibit lipolytic activity by which they stimulate the degradation (or lysis) of the fats stored in human adipocytes, especially in the form of triglycerides, and promote the elimination of this degradation, in particular fatty acids and glycerols.

Par exemple, dans le document du brevet français n 98 02152, on utilise en tant que principe actif un groupement pyrone qui a pour effet d'activer la phosphorylation d'une enzyme du type lipase pour la dégradation des triglycérides en acides gras. Par exemple, ce groupement pyrone est la mangostine extraite d'un arbre de l'espèce Garcinia Mangostana.  For example, in French Patent No. 98 02152, the active ingredient used is a pyrone group which has the effect of activating the phosphorylation of a lipase enzyme for the degradation of triglycerides to fatty acids. For example, this pyrone group is mangostine extracted from a tree of the species Garcinia Mangostana.

On sait également que, dans les adipocytes, la lipolyse est en compétition avec la lipogénèse qui consiste en la formation des graisses, notamment des triglycérides, et qui met en jeu toute une série de réactions biochimiques faisant intervenir des protéines à activité enzymatique telles l'Acyl-CoA synthétase et l'acide gras synthétase

Figure img00010001

connue également sous le nom FAS (fatty acicsynthase). It is also known that, in adipocytes, lipolysis is in competition with lipogenesis, which consists of the formation of fats, especially triglycerides, and which involves a series of biochemical reactions involving proteins with enzymatic activity such as Acyl-CoA synthetase and fatty acid synthetase
Figure img00010001

also known as FAS (fatty acicsynthase).

Le but de la présente invention est de proposer un produit cosmétique qui contient un principe actif pour lutter contre l'adiposité et qui soit nouveau, notamment par rapport aux produits dont le principe actif favorise la lipolyse.  The purpose of the present invention is to provide a cosmetic product that contains an active ingredient to fight against adiposity and is new, especially compared to products whose active ingredient promotes lipolysis.

A cet effet, un produit cosmétique selon la présente invention contient en tant que principe actif au moins un acide gras mis en #uvre pour présenter une activité inhibitrice sur la lipogénèse des adipocytes humains, ledit au moins acide gras étant issu d'un extrait lipidique de plantes ou d'algues.  For this purpose, a cosmetic product according to the present invention contains as active principle at least one fatty acid used to exhibit an inhibitory activity on the lipogenesis of human adipocytes, said at least one fatty acid being derived from a lipid extract of plants or algae.

Comme cela est montré ci-dessous, un tel produit cosmétique permet de limiter l'accumulation des acides gras dans les adipocytes humains. On pense que les acides gras contenus dans ledit extrait sont responsables d'un effet d'inhibition de l'action d'une enzyme qui intervient dans la lipogénèse, notamment la synthèse des acides gras par l'acide gras synthétase FAS. En utilisant un produit qui contient un tel principe actif, on inhibe ou limite pour le moins la lipogénèse des acides gras et on diminue ainsi leur concentration dans les adipocytes.  As shown below, such a cosmetic product can limit the accumulation of fatty acids in human adipocytes. It is believed that the fatty acids contained in said extract are responsible for an effect of inhibiting the action of an enzyme involved in lipogenesis, including the synthesis of fatty acids by fatty acid synthetase FAS. By using a product which contains such an active principle, at least the lipogenesis of the fatty acids is inhibited or at least limited and their concentration in the adipocytes is thus reduced.

On a pu montrer que les acides gras ayant un nombre de carbones compris entre 12 et 22 peuvent être utilisés. Il en est de même des acides gras présentant un degré  It has been shown that fatty acids having a carbon number between 12 and 22 can be used. It is the same with fatty acids having a degree

<Desc/Clms Page number 2><Desc / Clms Page number 2>

d'insaturation compris entre 0 et 5 Il en est encore de même des acides gras libres, ou monoglycériques, ou diglycériques ou triglycériques
Selon une autre caractéristique de l'invention, ledit extrait est un extrait lipidique d'une algue ou d'une microalgue
On a réalisé à titre d'exemple un produit cosmétique à base d'un extrait lipidique d'une microalgue qui est, en l'occurrence, une cyanobactérie nommée Odontella aurita. Elle fait partie des diatomés dont la classe est celle des Bacilariophycées, l'ordre celui des Bidulphiales, et la famille celle des Eurodiscaceaes.
of unsaturation between 0 and 5 It is still the same of free fatty acids, or monoglyceric, or diglyceric or triglycerical
According to another characteristic of the invention, said extract is a lipid extract of an alga or a microalga
An example of a cosmetic product based on a lipid extract of a microalgae which is, in this case, a cyanobacterium named Odontella aurita. It is one of the diatoms of which the class is that of the Bacilariophyceae, the order that of the Bidulphiales, and the family that of the Eurodiscaceae.

Cette microalgue particulière contient des acides gras polyinsaturés tels que

Figure img00020001

l'acide eicopentanoïque (5, 8, 11, 14, 17- eicosapentaenoïc acid) connu sous le nom EPA en une concentration de l'ordre de 22 % des acides gras totaux, soit approximativement 2 % du poids sec de la microalgue. Elle est donc riche en EPA. This particular microalgae contains polyunsaturated fatty acids such as
Figure img00020001

eicopentanoic acid (5, 8, 11, 14, 17-eicosapentaenoic acid) known as EPA in a concentration of about 22% of the total fatty acids, or approximately 2% of the dry weight of the microalgae. It is therefore rich in EPA.

Cette microalgue est obtenue par culture contrôlée en bassins de plein air (de type race way )
La présente invention concerne également un procédé de préparation d'un produit qui contient en tant que principe actif un extrait lipidique de plantes ou d'algues. Il est caractérisé en ce que ledit extrait est réalisé par extraction au gaz carbonique CO2 supercritique à partir de ladite plante préalablement séchée ou de ladite algue préalablement congelée qui est ensuite lyophilisée.
This microalga is obtained by controlled culture in outdoor pools (race way type)
The present invention also relates to a process for preparing a product which contains as an active ingredient a lipid extract of plants or algae. It is characterized in that said extract is produced by supercritical CO2 gas extraction from said previously dried plant or said previously frozen algae which is then lyophilized.

On va maintenant décrire le mode opératoire des expériences qui ont été menées pour prouver l'effet inhibiteur des acides gras sur la néosynthèse des lipides.  We will now describe the procedure of the experiments that were conducted to prove the inhibitory effect of fatty acids on the neosynthesis of lipids.

Dans toutes ces expériences, les adipocytes ont été isolés à partir de plasties abdominales prélevées chez des femmes de 34 à 52 ans. Les expériences ont eu lieu le jour du prélèvement ou dès le lendemain du prélèvement. Les fragments de tissus adipeux ont été incubés pendant 30 minutes à 37 C en présence de collagènase, puis les adipocytes isolés ont été lavés et repris dans un milieu MEM tamponné au bicarbonate, en présence d'antibiotiques (pénicilline/streptomycine), de glutamine (2 mM), et d'albumine bovine sérique délipidée (0,5%)
A 90 l d'une même suspension d'adipocytes de concentration prédéterminée, ont été ajoutés 100 l d'un milieu de culture, puis après une pré-incubation d'environ 1 heure, 10 l d'un marqueur de [2-14C]-acétate 50 uCi/ml. Les échantillons ainsi constitués subissent une incubation à 37 C, 5 % CO2, pendant 4 heures, après quoi, ils sont soumis à une congélation à - 80 C Les expériences sont toujours réalisées en double ou triple
In all these experiments, the adipocytes were isolated from abdominal plasties taken from women aged 34 to 52 years. The experiments took place on the day of collection or the day after sampling. The fragments of adipose tissue were incubated for 30 minutes at 37 ° C. in the presence of collagenase, then the isolated adipocytes were washed and taken up in a bicarbonate-buffered MEM medium, in the presence of antibiotics (penicillin / streptomycin), glutamine ( 2 mM), and serum bovine albumin delipidated (0.5%)
To 90 l of the same suspension of adipocytes of predetermined concentration, were added 100 l of a culture medium, then after a pre-incubation of about 1 hour, 10 l of a marker of [2-14C ] -acetate 50 μCi / ml. The samples thus formed undergo incubation at 37 ° C., 5% CO 2, for 4 hours, after which they are subjected to freezing at -80 ° C. The experiments are always carried out in double or triple

<Desc/Clms Page number 3> <Desc / Clms Page number 3>

Les lipides sont ensuite extraits conformément à la méthode de Bligh and Dyer (extraction méthanol/chloroforme/eau), séchés sous azote et la radioactivité incorporée (Radioactivité résultant de l'incorporation du carbone 14C dans les lipides néosynthétisés dans les adipocytes) est comptée en scintillation liquide. Les données brutes de comptage ont été transférées et traitées sous un logiciel approprié; les comparaisons intergroupes ont été réalisées par analyse de variance (ANOVA) à l'aide du test de comparaison multiple de la méthode de Dunnett. The lipids are then extracted according to the method of Bligh and Dyer (extraction methanol / chloroform / water), dried under nitrogen and the incorporated radioactivity (Radioactivity resulting from the incorporation of the carbon 14C in the neosynthesized lipids in the adipocytes) is counted in liquid scintillation. The raw count data was transferred and processed under appropriate software; intergroup comparisons were performed by ANOVA using Dunnett's multiple comparison test.

Il est tenu compte du bruit de fond (radioactivité mesurée au temps to).  The background noise (radioactivity measured at time to) is taken into account.

Ce mode opératoire a été validé en utilisant la cérulénine qui est connue pour inhiber l'expression de l'acide gras synthétase.  This procedure was validated using cerulenin which is known to inhibit the expression of fatty acid synthetase.

L'incorporation d'acétate après 4 heures d'incubation est forte (133000 cpm); le bruit de fond à to était négligeable (1 % du temps 4 heures).

Figure img00030001
The incorporation of acetate after 4 hours of incubation is strong (133,000 cpm); the background noise at to was negligible (1% of the time 4 hours).
Figure img00030001

On a ainsi pu constater qu'à des concentrations de 10 M (gmoles par litre) et 1 M, la cérulénine inhibe efficacement l'incorporation (respectivement 93 et 56 % d'inhibition). Par contre, elle est inactive à une concentration de 0,1 M. Ces résultats valident par conséquent le mode opératoire ci-dessus. It has thus been found that at concentrations of 10 M (gmoles per liter) and 1 M, cerulenin effectively inhibits the incorporation (respectively 93 and 56% inhibition). On the other hand, it is inactive at a concentration of 0.1 M. These results therefore validate the above procedure.

De plus, on a également pu constater que la présence d'huile minérale, telle que l'huile de vaseline, dans le milieu de culture n'a pas inhibé l'incorporation ni l'extraction des lipides adipocytaires. L'huile de vaseline est donc utilisée comme milieu tampon dans lequel notamment les acides gras testés seront préalablement dilués.  In addition, it has also been found that the presence of mineral oil, such as liquid petrolatum, in the culture medium has not inhibited the incorporation or extraction of adipocyte lipids. Vaseline oil is therefore used as a buffer medium in which in particular the fatty acids tested will be previously diluted.

On a cherché à mettre en évidence l'activité inhibitrice des acides gras sur la néosynthèse des lipides produits par les adipocytes humains et à déterminer les propriétés de ceux qui donnent une activité maximale.  It has been sought to demonstrate the inhibitory activity of fatty acids on the neosynthesis of lipids produced by human adipocytes and to determine the properties of those which give maximum activity.

On a donc, dans un premier temps, étudier l'effet de la longueur de la chaîne carbonée des acides gras testés.  We therefore, first, study the effect of the length of the carbon chain of the fatty acids tested.

Pour former le milieu d'incubation, des acides gras à 12,14, 16,18, 20 et 22 carbones ont été dilués dans de l'huile de vaseline dont on rappelle que la présence n'inhibe pas l'incorporation ni l'extraction des lipides adipocytaires. Ce milieu a donc été mélangé à une suspension de 90 l d'adipocytes et a été pré-incubé pendant 1

Figure img00030002

heure. Puis, mélangé à IOjj.1 d'un marqueur de [2-14C]-acétate 50 Ci/ml, il a été incubé pendant 4 heures To form the incubation medium, 12,14,16,18, 20 and 22 carbon fatty acids were diluted in petrolatum oil, which is recalled that the presence does not inhibit incorporation or extraction of adipocyte lipids. This medium was therefore mixed with a suspension of 90 l of adipocytes and was preincubated for 1 hour.
Figure img00030002

hour. Then, mixed with 10 μl of a [2-14 C] -acetate marker 50 Ci / ml, it was incubated for 4 hours.

<Desc/Clms Page number 4> <Desc / Clms Page number 4>

L'incorporation d'acétate après 4 heures de marquage est très forte (de l'ordre de 200 000 cpm); le bruit de fond à to est négligeable (1 % du temps 4 heures). Ce bruit de fond a été soustrait dans les résultats finaux. The incorporation of acetate after 4 hours of labeling is very strong (of the order of 200,000 cpm); the background noise at to is negligible (1% of the time 4 hours). This background noise has been subtracted from the final results.

Ces résultats sont donnés dans le tableau 1 ci-dessous.  These results are given in Table 1 below.

<Desc/Clms Page number 5> <Desc / Clms Page number 5>

Figure img00050001
Figure img00050001

<tb>
<tb> traitement <SEP> cpm <SEP> moyenne <SEP> cpm-contrôle <SEP> tO <SEP> % <SEP> témoin
<tb> contrôle <SEP> tO <SEP> 7976 <SEP> 6278 <SEP> 0 <SEP> 0
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<tb> témoin <SEP> (4h <SEP> incubation) <SEP> 189462 <SEP> 196424 <SEP> 190146 <SEP> 100
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<tb> C12:01 <SEP> mM <SEP> 40049 <SEP> 37894 <SEP> 31616 <SEP> 17
<tb> 35738
<tb>
<Tb>
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<tb> 4579
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<tb> 35738
<Tb>

Figure img00050002

C12:0 100 NM 144276 150019 143742 76
Figure img00050003
Figure img00050002

C12: 0 100 NM 144276 150019 143742 76
Figure img00050003

<tb>
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<tb>
<Tb>
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<tb> C22 <SEP>: 0 <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 115241 <SEQ> 119389 <SEQ> 113112 <SEP> 59
<tb> 123537
<tb> C22: 0100pM <SEP> 114841 <SEP> 122748 <SEP> 116471 <SEP> 61
<tb> 130655
<tb> C22 <SEP>: 0 <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 166548 <SEQ> 155722 <SEQ> 149444 <SEP> 79
<tb> 144895
<Tb>

Tableau 1 : effets de la longueur de la chaîne carbonée des acides gras sur l'incorporation de [14C]-acétate dans les lipides adipocytaires sd, écart-type. Table 1: Effects of the length of the carbon chain of fatty acids on the incorporation of [14C] acetate in adipocyte lipids sd, standard deviation.

<Desc/Clms Page number 6> <Desc / Clms Page number 6>

On notera que le taux d'inhibition est le complément du taux d'incorporation donné en % témoin dans le tableau 1 ci-dessus (Taux d'inhibition = 100 - % témoin).  Note that the inhibition rate is the complement of the rate of incorporation given in% control in Table 1 above (inhibition rate = 100 -% control).

On peut constater que tous les acides gras testés ont inhibé de façon dose- dépendante l'incorporation d'acétate par rapport au témoin huile de vaseline. A la plus faible concentration testée (10 M), l'inhibition était d'environ 10-20 % pour les acides gras saturés C12 0 à C16:0, et 30-40 % pour les acides gras saturés Cl 8:0 et C20:0. A la concentration moyenne de lOOuM, l'inhibition est de 25 % pour les acides gras C12.0 et C14:0, et 45-50 % pour les acides gras C16:0 et C18:0. Elle est supérieure à 60 % pour l'acide gras C20 :0 l'exception de l'acide gras C22 :0, tousles acides gras, à la plus forte concentration de 1 mM, ont inhibé l'incorporation avec une efficacité de l'ordre de 80-85 %.  It can be seen that all the fatty acids tested inhibited the incorporation of acetate in a dose-dependent manner compared with the control Vaseline oil. At the lowest concentration tested (10 M), the inhibition was about 10-20% for saturated C12 to C16: 0 saturated fatty acids, and 30-40% for Cl 8: 0 and C20 saturated fatty acids. : 0. At the average concentration of 100 μM, the inhibition is 25% for the C12.0 and C14: 0 fatty acids, and 45-50% for the C16: 0 and C18: 0 fatty acids. It is greater than 60% for the C20 fatty acid: with the exception of the C22: 0 fatty acid, all the fatty acids, at the highest concentration of 1 mM, inhibited the incorporation with an efficacy of order of 80-85%.

L'acide gras C22 0 à la concentration de 1 mM a inhibé l'incorporation de seulement 40 %.  C22 0 fatty acid at a concentration of 1 mM inhibited incorporation by only 40%.

On peut donc conclure que l'inhibition de la lipogénèse est optimale pour les acides gras à 18 et 20 carbones mais qu'elle diminue ensuite pour les acides gras à 22 carbones.  It can therefore be concluded that the inhibition of lipogenesis is optimal for the 18- and 20-carbon fatty acids, but then decreases for the 22-carbon fatty acids.

L'effet du degré d'insaturation a été évalué sur les acides gras comportant 20 carbones, à savoir les acides gras notés C20 0, C20 2, C20 :3, C20 :4 et C20 :5. rappelle que ces acides gras à 20 carbones sont parmi les plus efficaces, comme cela a été démontré dans l'expérience précédente Les résultats sont donnés dans le tableau II ci-dessous.  The effect of the degree of unsaturation was evaluated on the fatty acids containing 20 carbons, namely the fatty acids C20 0, C20 2, C20: 3, C20: 4 and C20: 5. recalls that these 20-carbon fatty acids are among the most efficient, as has been demonstrated in the previous experiment. The results are given in Table II below.

<Desc/Clms Page number 7> <Desc / Clms Page number 7>

Figure img00070001
Figure img00070001

<tb>
<tb> traitement <SEP> cpm <SEP> moyenne <SEP> cpm-contrôle <SEP> tO <SEP> % <SEP> témoin
<tb> contrôle <SEP> tO <SEP> 1564 <SEP> 1416 <SEP> 0 <SEP> 0
<tb> 1268
<tb> témoin <SEP> (4h <SEP> incubation) <SEP> 48905 <SEP> 49970 <SEP> 48554 <SEP> 100
<tb> 51035
<tb> C20 <SEP> :5 <SEP> (EPA) <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 5215 <SEP> 5314 <SEP> 3898 <SEP> 8
<tb> 5412
<tb> C20:5(EPA)100pM <SEP> 6169 <SEP> 6404 <SEP> 4988 <SEP> 10
<tb> 6638
<tb> C20:5 <SEP> (EPA) <SEP> 10 <SEP> pM <SEP> 6463 <SEP> 6272 <SEP> 4856 <SEP> 10
<tb> 6080
<tb> C20:0 <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 2402 <SEP> 2371 <SEP> 955 <SEP> 2
<tb> 2339
<tb> C20:0 <SEP> 100 <SEP> M <SEP> 2930 <SEP> 2977 <SEP> 1561 <SEP> 3
<tb> 3024
<tb> C20:010 <SEP> pM <SEP> 21989 <SEP> 21730 <SEP> 20314 <SEP> 42
<tb> 21471
<tb> C20:21 <SEP> mM <SEP> 2776 <SEP> 2843 <SEP> 1427 <SEP> 3
<tb> 2910
<tb> C20:2 <SEP> 100 <SEP> pM <SEP> 6373 <SEP> 6771 <SEP> 5355 <SEP> 11
<tb> 7168
<tb> C20:2 <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 11946 <SEP> 13220 <SEP> 11804 <SEP> 24
<tb> 14494
<tb> C20:3 <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 5386 <SEP> 5063 <SEP> 3647 <SEP> 8
<tb> 4739
<tb> C20:3 <SEP> 100 <SEP> M <SEP> 4990 <SEP> 4434 <SEP> 3018 <SEP> 6
<tb> 3877
<tb> C20 <SEP> :3 <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 12854 <SEP> 15938 <SEP> 14522 <SEP> 30
<tb> 19021
<tb> C20:41 <SEP> mM <SEP> 6179 <SEP> 6373 <SEP> 4957 <SEP> 10
<tb> 6567
<tb> C20:4100 <SEP> M <SEP> 8777 <SEP> 7840 <SEP> 6424 <SEP> 13
<tb> 6902
<tb> C20:4 <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 10315 <SEP> 9460 <SEP> 8044 <SEP> 17
<tb> 8604
<tb>
Tableau II : effets du nombre d'insaturation des acides gras sur l'incorporation de [14C]-acétate dans les lipides adipocytaires. sd, écart-type
<Tb>
<tb> treatment <SEP> cpm <SEP> average <SEP> cpm-control <SEP> tO <SEP>% <SEP> control
<tb> control <SEP> tO <SEP> 1564 <SEQ> 1416 <SEP> 0 <SEP> 0
<tb> 1268
<tb> control <SEP> (4h <SEP> incubation) <SEP> 48905 <SEQ> 49970 <SEQ> 48554 <SEP> 100
<tb> 51035
<tb> C20 <SEP>: 5 <SEP> (EPA) <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 5215 <SEQ> 5314 <SEQ> 3898 <SEP> 8
<tb> 5412
<tb> C20: 5 (EPA) 100pM <SEP> 6169 <SEQ> 6404 <SEQ> 4988 <SEP> 10
<tb> 6638
<tb> C20: 5 <SEP> (EPA) <SEP> 10 <SEP> pM <SEP> 6463 <SEQ> 6272 <SEQ> 4856 <SEP> 10
<tb> 6080
<tb> C20: 0 <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 2402 <SEP> 2371 <SEP> 955 <SEP> 2
<tb> 2339
<tb> C20: 0 <SEP> 100 <SEP> M <SEP> 2930 <SE> 2977 <SE> 1561 <SEP> 3
<tb> 3024
<tb> C20: 010 <SEP> pM <SEP> 21989 <SEP> 21730 <SEP> 20314 <SEP> 42
<tb> 21471
<tb> C20: 21 <SEP> mM <SEP> 2776 <SEQ> 2843 <SEQ> 1427 <SEP> 3
<tb> 2910
<tb> C20: 2 <SEP> 100 <SEP> pM <SEP> 6373 <SE> 6771 <SE> 5355 <SEP> 11
<tb> 7168
<tb> C20: 2 <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 11946 <SE> 13220 <SE> 11804 <SEP> 24
<tb> 14494
<tb> C20: 3 <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 5386 <SEP> 5063 <SEP> 3647 <SEP> 8
<tb> 4739
<tb> C20: 3 <SEP> 100 <SEP> M <SEP> 4990 <SEQ> 4434 <SEQ> 3018 <SEP> 6
<tb> 3877
<tb> C20 <SEP>: 3 <SEP> 10 <SEP> M <SE> 12854 <SE> 15938 <SE> 14522 <SEP> 30
<tb> 19021
<tb> C20: 41 <SEP> mM <SEP> 6179 <SE> 6373 <SE> 4957 <SEP> 10
<tb> 6567
<tb> C20: 4100 <SE> M <SEP> 8777 <SE> 7840 <SE> 6424 <SEP> 13
<tb> 6902
<tb> C20: 4 <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 10315 <SEQ> 9460 <SEP> 8044 <SEP> 17
<tb> 8604
<Tb>
Table II: Effects of the number of fatty acid unsaturation on the incorporation of [14 C] -acetate into adipocyte lipids. sd, standard deviation

<Desc/Clms Page number 8> <Desc / Clms Page number 8>

Comme on peut le constater, l'incorporation d'acétate après 4 heures de marquage est forte (de l'ordre de 50 000 cpm), le bruit de fond à to est faible (2-3 % du temps 4 heures). Ce bruit de fond a été soustrait dans les résultats finaux. As can be seen, the incorporation of acetate after 4 hours of marking is high (of the order of 50 000 cpm), the background noise at to is low (2-3% of the time 4 hours). This background noise has been subtracted from the final results.

Tous les acides gras C20:0, C20 :2, C20:3 et C20:4 ont inhibé de façon dosedépendante l'incorporation d'acétate par rapport au témoin huile de vaseline. Quant à l'acide gras C20 :5, appelé EPA (Acide eicopentanoïque), il a, en solution huileuse aux 3 concentrations testées (0.01 mM; 0. 1 mM et 1 mM, en huile de vaseline), fortement inhibé l'incorporation (90 % d'inhibition).  All C20: 0, C20: 2, C20: 3 and C20: 4 fatty acids inhibited the incorporation of acetate in a dose-dependent manner with respect to the petrolatum oil control. As for the fatty acid C20: 5, called EPA (eicopentanoic acid), it has, in oily solution at the 3 concentrations tested (0.01 mM, 0. 1 mM and 1 mM, in petrolatum oil), strongly inhibited the incorporation (90% inhibition).

On peut donc constater que l'inhibition de la lipogénèse croît avec le degré d'insaturation.  It can thus be seen that the inhibition of lipogenesis increases with the degree of unsaturation.

L'effet du type de liaison des acides gras concernés a également été évalué, notamment sur les acides gras à 18 carbones et à 3 insaturations, à savoir l'acide gras libre C18:3L, l'acide gras monoglycérique C18:3MG, l'acide gras diglycérique C 18: 3DG et l'acide gras triglycérique C18:3TG. Les résultats sont donnés dans le tableau III ci-dessous.  The effect of the type of binding of the fatty acids concerned was also evaluated, in particular on the 18-carbon and 3-unsaturated fatty acids, namely the C18: 3L free fatty acid, the C18: 3MG monoglycerol fatty acid, diglyceric fatty acid C 18: 3DG and triglyceric fatty acid C18: 3TG. The results are given in Table III below.

<Desc/Clms Page number 9> <Desc / Clms Page number 9>

Figure img00090001
Figure img00090001

<tb>
<tb> traitement <SEP> cpm <SEP> moyenne <SEP> cpm-contrôle <SEP> tO <SEP> % <SEP> témoin
<tb> contrôle <SEP> tO <SEP> 5277 <SEP> 5241 <SEP> 0 <SEP> 0
<tb> 5205
<tb> témoin <SEP> 230031 <SEP> 235043 <SEP> 229802 <SEP> 100
<tb> 240055
<tb> C20:5(EPA) <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 9362 <SEP> 9400 <SEP> 4159 <SEP> 2
<tb> 9437
<tb> C20:5 <SEP> (EPA) <SEP> 100 <SEP> pM <SEP> 88429 <SEP> 87278 <SEP> 82037 <SEP> 36
<tb> 86126
<tb> C20 <SEP> :5 <SEP> (EPA) <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 160638 <SEP> 184267 <SEP> 179026 <SEP> 78
<tb> 207895
<tb> C18 <SEP> :3TG <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 225489 <SEP> 232519 <SEP> 227278 <SEP> 99
<tb> 239549
<tb> C18:3TG <SEP> 100 <SEP> pM <SEP> 222495 <SEP> 224591 <SEP> 219350 <SEP> 95
<tb> 226687
<tb> C18:3TG <SEP> 10 <SEP> pM <SEP> 222768 <SEP> 220470 <SEP> 215229 <SEP> 94
<tb> 218171
<tb> C18:3DG <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 108249 <SEP> 110324 <SEP> 105083 <SEP> 46
<tb> 112398
<tb> C18:3DG <SEP> 100 <SEP> M <SEP> 189825 <SEP> 174688 <SEP> 169447 <SEP> 74
<tb> 159550
<tb> C18:3DG <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 221555 <SEP> 226390 <SEP> 221149 <SEP> 96
<tb> 231225
<tb> C18:3MG <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 16297 <SEP> 15884 <SEP> 10643 <SEP> 5
<tb> 15471
<tb> C18:3MG <SEP> 100 <SEP> pM <SEP> 46557 <SEP> 46228 <SEP> 40987 <SEP> 18
<tb> 45898
<tb> C18:3MG <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 208257 <SEP> 211398 <SEP> 206157 <SEP> 90
<tb> 214539
<tb> C18:3 <SEP> L <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 18893 <SEP> 19384 <SEP> 14143 <SEP> 6
<tb> 19874
<tb> C18:3 <SEP> L <SEP> 100 <SEP> pM <SEP> 151243 <SEP> 160452 <SEP> 155211 <SEP> 68
<tb> 169661
<tb> C18:3 <SEP> L <SEP> 10 <SEP> pM <SEP> 215874 <SEP> 217389 <SEP> 212148 <SEP> 92
<tb> 218904
<tb>
<Tb>
<tb> treatment <SEP> cpm <SEP> average <SEP> cpm-control <SEP> tO <SEP>% <SEP> control
<tb> control <SEP> tO <SEP> 5277 <SEP> 5241 <SEP> 0 <SEP> 0
<tb> 5205
<tb> control <SEP> 230031 <SEP> 235043 <SEQ> 229802 <SEP> 100
<tb> 240055
<tb> C20: 5 (EPA) <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 9362 <SEQ> 9400 <SEQ> 4159 <SEP> 2
<tb> 9437
<tb> C20: 5 <SEP> (EPA) <SEP> 100 <SEP> pM <SEP> 88429 <SEQ> 87278 <SEP> 82037 <SEP> 36
<tb> 86126
<tb> C20 <SEP>: 5 <SEP> (EPA) <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 160638 <SEQ> 184267 <SEQ> 179026 <SEP> 78
<tb> 207895
<tb> C18 <SEP>: 3TG <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 225489 <SEP> 232519 <SEQ> 227278 <SEP> 99
<tb> 239549
<tb> C18: 3TG <SEP> 100 <SEP> pM <SEP> 222495 <SEP> 224591 <SEP> 219350 <SEP> 95
<tb> 226687
<tb> C18: 3TG <SEP> 10 <SEP> pM <SEP> 222768 <SEP> 220470 <SEP> 215229 <SEP> 94
<tb> 218171
<tb> C18: 3DG <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 108249 <SEQ> 110324 <SEQ> 105083 <SEP> 46
<tb> 112398
<tb> C18: 3DG <SEP> 100 <SEP> M <SEP> 189825 <SEQ> 174688 <SEQ> 169447 <SEP> 74
<tb> 159550
<tb> C18: 3DG <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 221555 <SEP> 226390 <SEP> 221149 <SEP> 96
<tb> 231225
<tb> C18: 3MG <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 16297 <SEQ> 15884 <SEQ> 10643 <SEP> 5
<tb> 15471
<tb> C18: 3MG <SEP> 100 <SEP> pM <SEP> 46557 <SEQ> 46228 <SEQ> 40987 <SEP> 18
<tb> 45898
<tb> C18: 3MG <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 208257 <SEP> 211398 <SEP> 206157 <SEP> 90
<tb> 214539
<tb> C18: 3 <SEP> L <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 18893 <SE> 19384 <SE> 14143 <SEP> 6
<tb> 19874
<tb> C18: 3 <SEP> L <SEP> 100 <SEP> pM <SEP> 151243 <SEP> 160452 <SEP> 155211 <SEP> 68
<tb> 169661
<tb> C18: 3 <SEP> L <SEP> 10 <SEP> pM <SEP> 215874 <SEQ> 217389 <SEP> 212148 <SEP> 92
<tb> 218904
<Tb>

Tableau III: effets du type de liaison des acides gras sur l'incorporation de [14C]-acétate dans les lipides adipocytaires. sd, écart-type. Table III: Effects of the type of fatty acid binding on the incorporation of [14 C] -acetate in adipocyte lipids. sd, standard deviation.

L'incorporation d'acétate après 4 heures de marquage est très forte (de l'ordre de 230 000 cpm); le bruit de fond à to est faible (< 1 % du temps 4 heures). Ce bruit de fond a été soustrait dans les résultats finaux  The incorporation of acetate after 4 hours of marking is very strong (of the order of 230 000 cpm); the background noise at to is low (<1% of the time 4 hours). This background noise has been subtracted from the final results

<Desc/Clms Page number 10> <Desc / Clms Page number 10>

Comme on peut le constater, à la plus faible concentration testée (10 M), les acides gras testés n'ont pas d'effet inhibiteur significatif (> 10 %) contrairement à l'EPA (22 % d'inhibition) A 100 M, les acides gras C18:3DG, C18:3MG et C18:3L ont inhibé l'incorporation de respectivement 25 %, 82 % et 32 %. L'acide gras C 18:3MG était donc le plus efficace à cette concentration. As can be seen, at the lowest concentration tested (10 M), the tested fatty acids have no significant inhibitory effect (> 10%) unlike EPA (22% inhibition) A 100 M C18: 3DG, C18: 3MG and C18: 3L fatty acids inhibited incorporation by 25%, 82% and 32%, respectively. The fatty acid C 18: 3MG was therefore the most effective at this concentration.

A la plus forte concentration testée (1 mM), l'acide gras C18:3DG a inhibé l'incorporation de 54 %, alors que les acides gras C18:3MG et C18:3L l'ont inhibé d'une quantité supérieure à 95 %, à l'instar de l'EPA (98 %).  At the highest concentration tested (1mM), the C18: 3DG fatty acid inhibited the incorporation by 54%, whereas the C18: 3MG and C18: 3L fatty acids inhibited the incorporation by an amount greater than 95%. %, like the EPA (98%).

On peut également constater qu'aux 3 concentrations testées, l'acide gras triglycérique C18:3TG n'a pas montré d'effet sur l'incorporation d'acétate dans ces conditions expérimentales.  It can also be noted that at the 3 concentrations tested, the triglyceric fatty acid C18: 3TG did not show any effect on the incorporation of acetate under these experimental conditions.

Les acides gras sous forme libre et monoglycérique sont donc plus efficaces que sous forme diglycérique Les acides gras sous forme triglycérique n'ont pas d'effet.  Fatty acids in free and monoglyceric form are therefore more effective than in the diglyceric form Fatty acids in triglycerol form have no effect.

On a également testé un extrait huileux provenant d'une micro-algue contenant des acides gras polyinsaturés, notamment de l'EPA libre (C20:05L) en concentration d'environ 10 %. Cet extrait a été préalablement dilué à 10% dans une huile végétale (HV) ne contenant pas d'EPA. L'extrait testé (ODON) contenait donc environ 1% d'EPA. Plus particulièrement, ont été testés un tel extrait préservé de l'oxydation par la présence d'un anti-oxydant (ODON 0. 5) et un autre extrait sans anti-oxydant (ODON 0). Les extraits huileux ont été dilués dans l'huile de vaseline.  An oily extract derived from a micro-alga containing polyunsaturated fatty acids, in particular free EPA (C20: 05L) in a concentration of approximately 10%, was also tested. This extract was previously diluted to 10% in a vegetable oil (HV) containing no EPA. The tested extract (ODON) therefore contained about 1% EPA. More particularly, were tested such an extract preserved oxidation by the presence of an antioxidant (ODON 0.5) and another extract without antioxidant (ODON 0). The oily extracts were diluted in petrolatum oil.

Les résultats sont répertoriés dans le tableau IV ci-dessous.  The results are listed in Table IV below.

<Desc/Clms Page number 11><Desc / Clms Page number 11>

produits en solutions huileuses

Figure img00110001
products in oily solutions
Figure img00110001

<tb>
<tb> traitement <SEP> cpm <SEP> sd <SEP> n <SEP> % <SEP> témoin <SEP> p
<tb> témoin <SEP> (4h <SEP> incubation) <SEP> 153449 <SEP> 10449 <SEP> 3 <SEP> 100
<tb> contrôle <SEP> tO <SEP> 1329 <SEP> 282 <SEP> 3 <SEP> 1 <SEP> < <SEP> 0.01 <SEP>
<tb> EPA <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 109708 <SEP> 9435 <SEP> 3 <SEP> 71 <SEP> < <SEP> 0.01 <SEP>
<tb> EPA <SEP> 100 <SEP> M <SEP> 116948 <SEP> 11909 <SEP> 3 <SEP> 76 <SEP> < <SEP> 0.01 <SEP>
<tb> EPA <SEP> 10 <SEP> pM <SEP> 120202 <SEP> 4487 <SEP> 3 <SEP> 78 <SEP> < <SEP> 0.01
<tb> ODON-010 <SEP> % <SEP> 2501 <SEP> 318 <SEP> 3 <SEP> 2 <SEP> < <SEP> 0.01 <SEP>
<tb> ODON-0 <SEP> 1 <SEP> % <SEP> 40092 <SEP> 5846 <SEP> 3 <SEP> 26 <SEP> < <SEP> 0.01
<tb> ODON-0 <SEP> 0.1 <SEP> % <SEP> 33081 <SEP> 6708 <SEP> 3 <SEP> 22 <SEP> < <SEP> 0.01 <SEP>
<tb> ODON-0.510 <SEP> % <SEP> 2855 <SEP> 632 <SEP> 3 <SEP> 2 <SEP> < <SEP> 0.01 <SEP>
<tb> ODON-0.51 <SEP> % <SEP> 44901 <SEP> 1082 <SEP> 3 <SEP> 29 <SEP> < <SEP> 0.01 <SEP>
<tb> ODON-0.5 <SEP> 0.1 <SEP> % <SEP> 36960 <SEP> 4792 <SEP> 3 <SEP> 24 <SEP> < <SEP> 0.01 <SEP>
<tb>
<Tb>
<tb> treatment <SEP> cpm <SEP> sd <SEP> n <SEP>% <SEP> control <SEP> p
<tb> control <SEP> (4h <SE> incubation) <SEP> 153449 <SEQ> 10449 <SEP> 3 <SEP> 100
<tb> control <SEP> tO <SEP> 1329 <SEQ> 282 <SEP> 3 <SEP> 1 <SEP><SEP> 0.01 <SEP>
<tb> EPA <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 109708 <SEQ> 9435 <SEP> 3 <SEP> 71 <SEP><SEP> 0.01 <SEP>
<tb> EPA <SEP> 100 <SEP> M <SEP> 116948 <SEQ> 11909 <SEP> 3 <SEP> 76 <SEP><<SEP> 0.01 <SEP>
<tb> EPA <SEP> 10 <SEP> pM <SEP> 120202 <SEQ> 4487 <SEP> 3 <SEP> 78 <SEP><SEP> 0.01
<tb> ODON-010 <SEP>% <SEQ> 2501 <SEQ> 318 <SEP> 3 <SEP> 2 <SEP><SEP> 0.01 <SEP>
<tb> ODON-0 <SEP> 1 <SEP>% <SEQ> 40092 <SEQ> 5846 <SEP> 3 <SEP> 26 <SEP><SEP> 0.01
<tb> ODON-0 <SEP> 0.1 <SEP>% <SEP> 33081 <SEP> 6708 <SEP> 3 <SEP> 22 <SEP><SEP> 0.01 <SEP>
<tb> ODON-0.510 <SEP>% <SEP> 2855 <SEP> 632 <SEP> 3 <SEP> 2 <SEP><SEP> 0.01 <SEP>
<tb> ODON-0.51 <SEP>% <SEQ> 44901 <SEQ> 1082 <SEP> 3 <SEP> 29 <SEP><SEP> 0.01 <SEP>
ODON-0.5 <SEP> 0.1 <SEP>% <SEP> 36960 <SEQ> 4792 <SEP> 3 <SEP> 24 <SEP><SEP> 0.01 <SEP>
<Tb>

Tableau IV : effets d'une huile de micro-algue riche en AG libres, sans antioxydant (ODON-0) et avec anti-oxydant (ODON-0 5) sur l'incorporation de [14C]- acétate dans les lipides adipocytaires Comparaison avec l'EPA sd, écart-type. Table IV: Effects of Free Anti-oxidant (ODON-0) and Anti-Oxidant (ODON-O 5) Rich Microalgal Oil on [14C] Acetate Incorporation in Adipocyte Lipids Comparison with EPA nd, standard deviation.

<Desc/Clms Page number 12> <Desc / Clms Page number 12>

Comme on peut le constater sur le tableau V ci-dessus, ces extraits huileux ont fortement inhibé l'incorporation d'acétate : % d'inhibition à la concentration 10 %; 70-80 % d'inhibition aux concentrations 1 % et 0.1%.  As can be seen from Table V above, these oily extracts strongly inhibited acetate incorporation:% inhibition at 10% concentration; 70-80% inhibition at 1% and 0.1% concentrations.

Ces résultats ont été confirmés par des mesures en chromatographie en couche mince (CCM) qui ont, de plus, prouvé que ces effets ne proviennent pas d'un quenching (ce contrôle était nécessaire dans la mesure où les produits sont colorés et sont extraits par les solvants utilisés).  These results were confirmed by thin layer chromatography (TLC) measurements which furthermore proved that these effects do not come from quenching (this control was necessary since the products are colored and are extracted by the solvents used).

Enfin, on a testé seule l'huile végétale HV qui contient des acides gras polyinsaturés, notamment de l'acide linoléique (> 50 %) sous forme triglycéride (C18:2TG). Ce test a été mené conjointement à l'EPA (C20:5), à l'acide sialique (C18:0) et à l'acide linoléique (C 18:2) sous leur forme libre. Ces acides gras ont été dilués dans l'huile de vaseline. Les résultats sont montrés dans le tableau V cidessous.  Finally, the vegetable oil HV which contains polyunsaturated fatty acids, in particular linoleic acid (> 50%) in triglyceride (C18: 2TG) form, has been tested alone. This test was conducted in conjunction with EPA (C20: 5), sialic acid (C18: 0) and linoleic acid (C18: 2) in their free form. These fatty acids were diluted in petrolatum oil. The results are shown in Table V below.

<Desc/Clms Page number 13><Desc / Clms Page number 13>

solutions aqueuses

Figure img00130001
aqueous solutions
Figure img00130001

<tb>
<tb> traitement <SEP> cpm <SEP> sd <SEP> n <SEP> % <SEP> témoin <SEP> p
<tb> contrôle <SEP> tO <SEP> 1125 <SEP> 564 <SEP> 3 <SEP> 2 <SEP> < <SEP> 0.001
<tb> témoin <SEP> (4h <SEP> incubation) <SEP> 53901 <SEP> 4009 <SEP> 3 <SEP> 100 <SEP> -
<tb>
<Tb>
<tb> treatment <SEP> cpm <SEP> sd <SEP> n <SEP>% <SEP> control <SEP> p
<tb> control <SEP> tO <SEP> 1125 <SEP> 564 <SEP> 3 <SEP> 2 <SEP><SEP> 0.001
<tb> control <SEP> (4h <SE> incubation) <SEP> 53901 <SEP> 4009 <SEP> 3 <SEP> 100 <SEP> -
<Tb>

Figure img00130002

cerulenine 10 NM 18720 1275 3 35 < 0.001
Figure img00130003
Figure img00130002

Cerulenine 10 NM 18720 1275 3 35 <0.001
Figure img00130003

<tb>
<tb> produits <SEP> en <SEP> solutions <SEP> huileuses
<tb> traitement <SEP> cpm <SEP> sd <SEP> n <SEP> % <SEP> témoin <SEP> p
<tb> contrôle <SEP> tO <SEP> 1171 <SEP> 246 <SEP> 3 <SEP> 2 <SEP> < <SEP> 0.001
<tb> témoin <SEP> (4h <SEP> incubation) <SEP> 52584 <SEP> 6038 <SEP> 3 <SEP> 100C20 <SEP> :5 <SEP> (EPA) <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 10500 <SEP> 934 <SEP> 3 <SEP> 20 <SEP> < <SEP> 0.001
<tb> HV <SEP> 9 <SEP> % <SEP> 27660 <SEP> 5044 <SEP> 3 <SEP> 53 <SEP> < <SEP> 0.001
<tb> HV <SEP> 0.9 <SEP> % <SEP> 39960 <SEP> 3882 <SEP> 3 <SEP> 76 <SEP> < <SEP> 0.01 <SEP>
<tb> HV <SEP> 0. <SEP> 09 <SEP> % <SEP> 46438 <SEP> 1149 <SEP> 3 <SEP> 88 <SEP> > <SEP> 0.05
<tb> C18:0 <SEP> (AS) <SEP> 1000 <SEP> M <SEP> 6483 <SEP> 562 <SEP> 3 <SEP> 12 <SEP> < <SEP> 0.001
<tb>
<Tb>
<tb> products <SEP> in <SEP> solutions <SEP> oily
<tb> treatment <SEP> cpm <SEP> sd <SEP> n <SEP>% <SEP> control <SEP> p
<tb> control <SEP> tO <SEP> 1171 <SEP> 246 <SEP> 3 <SEP> 2 <SEP><SEP> 0.001
<tb> control <SEP> (4h <SEP> incubation) <SEP> 52584 <SEP> 6038 <SEP> 3 <SEP> 100C20 <SEP>: 5 <SEP> (EPA) <SEP> 1 <SEP> mM <SEP> 10500 <SEP> 934 <SEP> 3 <SEP> 20 <SEP><SEP> 0.001
<tb> HV <SEP> 9 <SEP>% <SEP> 27660 <SEP> 5044 <SEP> 3 <SEP> 53 <SEP><SEP> 0.001
<tb> HV <SEP> 0.9 <SEP>% <SEP> 39960 <SEP> 3882 <SEP> 3 <SEP> 76 <SEP><SEP> 0.01 <SEP>
<tb> HV <SEP> 0. <SEP> 09 <SEP>% <SEP> 46438 <SEP> 1149 <SEP> 3 <SEP> 88 <SEP>><SEP> 0.05
<tb> C18: 0 <SEP> (AS) <SEP> 1000 <SEP> M <SEP> 6483 <SEP> 562 <SEP> 3 <SEP> 12 <SEP><SEP> 0.001
<Tb>

Figure img00130004

C18:0 (AS) 100 NM 19301 1055 3 37 < 0.001 C18:0 (AS) 90 NM 44284 3456 3 84 > 0.05 C18:2 (AL) 1000 NM 13567 1389 3 26 < 0.001 C18:2 (AL) 100 NM 16391 3462 3 31 < 0.001 IC18:2 (AL) 10 NM 50854 4772 3 97 > 0.05
Tableau V : effets d'une huile végétale (HV) riche en acide linoléique (AL) sous forme triglycéride (TG) sur l'incorporation de [14C]-acétate dans les lipides adipocytaires. Comparaison avec la cérulénine, l'EPA, l'acide sialique (AS) et l'acide linoléique (AL) sous forme libre sd, écart-type
L'incorporation d'acétate après 4 heures de marquage était forte (54 000 cpm); le bruit de fond à to était négligeable (2 % du temps 4 heures)
Figure img00130004

C18: 0 (AS) 100 NM 19301 1055 3 37 <0.001 C18: 0 (AS) 90 NM 44284 3456 3 84> 0.05 C18: 2 (AL) 1000 NM 13567 1389 3 26 <0.001 C18: 2 (AL) 100 NM 16391 3462 3 31 <0.001 IC18: 2 (AL) 10 NM 50854 4772 3 97> 0.05
Table V: Effects of a vegetable oil (HV) rich in linoleic acid (LA) in triglyceride (TG) form on the incorporation of [14C] -acetate in adipocyte lipids. Comparison with cerulenin, EPA, sialic acid (AS) and linoleic acid (LA) in free form sd, standard deviation
Acetate incorporation after 4 hours of labeling was strong (54,000 cpm); the background noise at to was negligible (2% of the time 4 hours)

<Desc/Clms Page number 14> <Desc / Clms Page number 14>

Comme cela est visible sur le tableau ci-dessus, l'Huile Végétale (HV) à 9 % et
0,9 % a inhibé de façon significative l'incorporation d'acétate dans les lipides, respectivement 53 % et 76 % du témoin contre seulement 2%n et 26% du témoin avec l'extrait ODON aux mêmes concentrations d'huile HV. Par contre, l'inhibition de HV n'est plus significative à la concentration 0,09 % correspondant à environ 500jjM de C18:2TG (88 % du témoin) alors que l'extrait ODON à 0,1% inhibait fortement et de façon statistique l'incorporation d'acétate (seulement 22% du témoin).
As can be seen in the table above, Vegetable Oil (HV) at 9% and
0.9% significantly inhibited the incorporation of acetate in lipids, respectively 53% and 76% of the control against only 2% n and 26% of the control with the ODON extract at the same concentrations of HV oil. On the other hand, the inhibition of HV is no longer significant at the 0.09% concentration corresponding to approximately 500 μM of C18: 2TG (88% of the control) whereas the 0.1% ODON extract inhibited strongly and significantly statistic incorporation of acetate (only 22% of the control).

Des mesures en chromatographie en couche mince ont confirmé ces effets.  Thin layer chromatography measurements confirmed these effects.

On notera donc que les effets obtenus avec l'huile végétale HV sont très nettement inférieurs à ceux obtenus avec les extraits huileux contenant les acides gras poly-insaturés libres de la micro-algue ODON.  It will therefore be noted that the effects obtained with the vegetable oil HV are very much lower than those obtained with the oily extracts containing the free polyunsaturated fatty acids of the ODON microalgae.

L'EPA en solution huileuse à 1 mM (huile de vaseline) a fortement inhibé l'incorporation (80 % d'inhibition).  EPA in oily solution at 1 mM (petrolatum oil) strongly inhibited the incorporation (80% inhibition).

L'acide sialique (AS ou C18:0) à 1000 M et 100 M a fortement inhibé l'incorporation d'acétate (respectivement 74 % et 69 % d'inhibition). L'inhibition n'était plus significative à la concentration 10 M (84 % du témoin).  Sialic acid (AS or C18: 0) at 1000 M and 100 M strongly inhibited acetate incorporation (respectively 74% and 69% inhibition). The inhibition was no longer significant at the 10M concentration (84% of the control).

Quant à l'acide linoléique sous forme libre (AL ou C18:2) à 1000 M et à 100 M, il a fortement inhibé l'incorporation d'acétate (respectivement 88 % et 63 % d'inhibition). L'inhibition n'était plus significative à la concentration 10 M (97 % du témoin).  As for linoleic acid in free form (LA or C18: 2) at 1000 M and 100 M, it strongly inhibited the incorporation of acetate (respectively 88% and 63% inhibition). The inhibition was no longer significant at the 10M concentration (97% of the control).

Cette expérience confirme l'inhibition de la néosynthèse des lipides dans les adipocytes humains par des acides gras à 18 ou 20 carbones, notamment, saturés ou insaturés, de préférence se présentant sous forme libre ou monoglycérides. This experiment confirms the inhibition of lipid neosynthesis in human adipocytes by fatty acids with 18 or 20 carbons, in particular, saturated or unsaturated, preferably in free form or monoglycerides.

Claims (10)

REVENDICATIONS 1) Produit cosmétique ou pharmaceutique du type qui contient un principe actif pour lutter contre l'adiposité, caractérisé en ce que ledit principe actif est constitué d'au moins un acide gras mis en #uvre pour présenter une activité inhibitrice sur la lipogénèse des adipocytes humains, ledit au moins acide gras étant issu d'un extrait lipidique de plantes ou d'algues. 1) Cosmetic or pharmaceutical product of the type which contains an active ingredient for controlling adiposity, characterized in that said active ingredient consists of at least one fatty acid used to exhibit an inhibitory activity on the lipogenesis of adipocytes humans, said at least one fatty acid being derived from a lipid extract of plants or algae. 2) Produit cosmétique ou pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'au moins dit acide gras a un nombre de carbones compris entre 12 et 22.  2) cosmetic or pharmaceutical product according to claim 1, characterized in that the at least said fatty acid has a carbon number of between 12 and 22. 3) Produit cosmétique selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que l'au moins dit acide gras a un degré d'insaturation compris entre 0 et 5.  3) cosmetic product according to claim 1 or 2, characterized in that the at least said fatty acid has a degree of unsaturation of between 0 and 5. 4) Produit cosmétique ou pharmaceutique selon la revendication 1,2 ou 3, caractérisé en ce que l'au moins dit acide gras est un acide gras libre, un acide gras monoglycérique, un acide gras diglycérique ou un acide gras triglycérique.  4) Cosmetic or pharmaceutical product according to claim 1, 2 or 3, characterized in that the at least one fatty acid is a free fatty acid, a monoglyceric fatty acid, a diglyceric fatty acid or a triglyceride fatty acid. 5) Produit cosmétique ou pharmaceutique selon une des revendications précédentes, caractérisé en ce que ledit extrait est un extrait lipidique d'une algue ou d'une microalgue.  5) Cosmetic or pharmaceutical product according to one of the preceding claims, characterized in that said extract is a lipid extract of an algae or microalgae. 6) Produit cosmétique ou pharmaceutique selon la revendication 5, caractérisé en ce que ladite microalgue appartient à la famille des Eurodiscaceaes.  6) Cosmetic or pharmaceutical product according to claim 5, characterized in that said microalgae belongs to the family of Eurodiscaceae. 7) Produit cosmétique ou pharmaceutique selon la revendication 6, caractérisé en ce que ladite microalgue appartient à la famille des Eurodiscaceaes et à l'ordre des Bidulphiales.  7) Cosmetic or pharmaceutical product according to claim 6, characterized in that said microalgae belongs to the family of Eurodiscaceae and order Bidulphiales. 8) Produit cosmétique ou pharmaceutique selon la revendication 7, caractérisé en ce que ladite microalgue appartient à la famille des Eurodiscaceaes, à l'ordre des Bidulphiales et la classe des Bacilariophycées.  8) Cosmetic or pharmaceutical product according to claim 7, characterized in that said microalgae belongs to the family of Eurodiscaceae, order Bidulphiales and class Bacilariophyceae. 9) Produit cosmétique ou pharmaceutique selon la revendication 5, caractérisé en ce que ladite microalgue fait partie des diatomées.  9) Cosmetic or pharmaceutical product according to claim 5, characterized in that said microalgae is part of the diatoms. 10) Produit cosmétique ou pharmaceutique selon la revendication 5, caractérisé en ce que ladite microalgue est une cyanobactérie, par exemple une cyanobactérie nommée Odontella aurita 10) Cosmetic or pharmaceutical product according to claim 5, characterized in that said microalgae is a cyanobacterium, for example a cyanobacterium named Odontella aurita.
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