FR2714183A1 - Device for raising the level of a liquid in a cell, well or the like, multiwell plate equipped with this device, and use of this device or this plate for measuring the optical density. - Google Patents
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Abstract
La présente invention concerne un dispositif d'élévation du niveau d'un liquide contenant une substance dissoute, dans un alvéole, puits ou analogue ainsi qu'une plaque à puits multiples équipée de ce dispositif. Ce dispositif est caractérisé par une pluralité de manchons (1) à paroi (4) d'épaisseur variable et ouverts à leurs deux extrémités, ces manchons appartenant à un support (7) et pouvant être insérés dans les puits ou alvéoles (2) d'une plaque (P). Ce dispositif permet une élévation du niveau d'un liquide dans un puits pour permettre par exemple une mesure de densité optique, et peut notamment être utilisé pour la mesure de la densité optique d'une substance dissoute dans un milieu de culture cellulaire.The present invention relates to a device for raising the level of a liquid containing a dissolved substance, in a cell, well or the like, as well as to a multi-well plate equipped with this device. This device is characterized by a plurality of sleeves (1) with a wall (4) of variable thickness and open at their two ends, these sleeves belonging to a support (7) and being able to be inserted into the wells or cells (2) d 'a plate (P). This device makes it possible to raise the level of a liquid in a well to allow for example a measurement of optical density, and can in particular be used for the measurement of the optical density of a substance dissolved in a cell culture medium.
Description
La présente invention a essentiellement pour objet un dispositif d'élévation du niveau d'un liquide, dans un alvéole, puits ou analogue. The subject of the present invention is essentially a device for raising the level of a liquid, in a cell, well or the like.
Elle vise également une plaque à puits multiples pour la culture de cellules, la microtitration ou autre usage, équipée de ce dispositif. It also relates to a multi-well plate for cell culture, microtiter or other use, equipped with this device.
On utilise fréquemment en biologie, en particulier en biologie cellulaire, des plaques à alvéoles ou puits multiples destinés à contenir une ou des substances à analyser. Frequently used in biology, particularly in cell biology, cell plates or multiple wells for containing one or more substances to be analyzed.
Mais lorsqu'on veut mesurer la densité optique d'une substance en solution dans un liquide et contenue dans un puits, par exemple selon la méthode décrite par F. BURMEISTER et al., dans "Preprints of the XIVth IFSCC Congress,
Barcelone, 1986, vol. I, il faut que la hauteur du liquide soit assez grande pour permettre une mesure de densité optique qui soit suffisamment précise, et donc fiable.But when one wants to measure the optical density of a substance in solution in a liquid and contained in a well, for example according to the method described by F. BURMEISTER et al., In "Preprints of the XIVth IFSCC Congress,
Barcelona, 1986, vol. I, it is necessary that the height of the liquid is large enough to allow an optical density measurement that is sufficiently accurate, and therefore reliable.
En effet, la densité optique qui se mesure en éclairant un échantillon transparent ou translucide par un faisceau lumineux généralement monochromatique, est fonction de la longueur du trajet optique du faisceau lumineux, de la concentration de la substance dans la solution à mesurer et du coefficient d'absorption de la lumière propre à la substance, comme établi par la formule suivante Do = s C lo
dans laquelle
- Do est la densité optique.In fact, the optical density, which is measured by illuminating a transparent or translucent sample with a generally monochromatic light beam, is a function of the length of the optical path of the light beam, the concentration of the substance in the solution to be measured and the optical coefficient. absorption of the light proper to the substance, as established by the following formula Do = s C lo
in which
- Do is the optical density.
- E est le coefficient d'extinction molaire, dont la valeur dépend de la longueur d'onde de la lumière utilisée et de la nature de la substance dissoute. - E is the molar extinction coefficient, the value of which depends on the wavelength of the light used and the nature of the dissolved substance.
- C est la concentration de la substance dans la solution, et
- 1, est la longueur du trajet optique dans l'échantillon de solution.- C is the concentration of the substance in the solution, and
- 1, is the length of the optical path in the solution sample.
Or, bien souvent, on se trouve en face d'échantillons de très faible volume et dont la hauteur dans le puits et par conséquent le trajet optique, est très petite, ce qui constribue à une imprécision notable de la mesure de densité optique. Cette imprécision devient encore beaucoup plus importante, donc beaucoup plus gênante dans le cas où la valeur du coéfficient d'extinction molaire de l'échantillon analysé est faible. Par ailleurs, l'augmentation de la hauteur de l'échantillon dans le puits par apport de liquide supplémentaire, ne constitue pas une solution au problème de l'amélioration de la précision des mesures, car cet apport a pour effet de diminuer la concentration de la substance du fait de la dilution réalisée. However, very often, one is faced with samples of very small volume and whose height in the well and therefore the optical path, is very small, which contributes to a significant inaccuracy of the optical density measurement. This inaccuracy becomes even more important, therefore much more troublesome in the case where the value of the molar extinction coefficient of the sample analyzed is low. Moreover, the increase in the height of the sample in the well by adding additional liquid does not constitute a solution to the problem of improving the accuracy of the measurements, because this contribution has the effect of reducing the concentration of the sample. the substance due to the dilution carried out.
La présente invention a pour objet de résoudre les problèmes ci-dessus. The present invention aims to solve the above problems.
A cet effet, elle a pour objet un dispositif d'élévation du niveau d'un liquide contenant une substance dissoute, dans un alvéole, puits ou analogue, caractérisé par un manchon à paroi d'épaisseur variable et ouvert à ses deux extrémités, qui est insérable dans ledit alvéole ou puits. For this purpose, it relates to a device for raising the level of a liquid containing a dissolved substance, in a cell, well or the like, characterized by a sleeve with a wall of variable thickness and open at both ends, which is insertable into said cell or well.
Suivant une autre caractéristique de ce dispositif, le manchon est solidaire d'un élément comportant une pluralité de tels manchons. According to another feature of this device, the sleeve is secured to an element comprising a plurality of such sleeves.
Cet élément peut être une barrette ou une platine. This element can be a bar or a plate.
Il peut comporter des lignes d'entaillage entre les manchons pour permettre leur séparation de façon à n'utiliser qu'une partie de l'ensemble des manchons. It may comprise lines of notching between the sleeves to allow their separation so as to use only part of the set of sleeves.
L'invention vise encore une plaque à alvéoles ou puits multiples permettant par exemple la culture de cellules ou la microtitration d'échantillons, caractérisée en ce qu'elle est munie d'un dispositif répondant aux caractéristiques précédentes. The invention also relates to a multi-well plate or multiple wells allowing, for example, cell culture or microtiteration of samples, characterized in that it is provided with a device meeting the above characteristics.
Cette plaque peut être recouverte par une platine comportant sur une face autant de manchons que de puits dans la plaque. This plate can be covered by a plate having on one side as many sleeves as wells in the plate.
L'invention vise également l'utilisation du dispositif ou de la plaque ci-dessus pour la mesure de la densité optique d'une substance dissoute dans ce liquide. The invention also relates to the use of the above device or plate for measuring the optical density of a substance dissolved in this liquid.
Elle vise plus particulièrement l'utilisation de ce dispositif pour le dosage de substances contenues dans un milieu de culture cellulaire, ces substances ayant été par exemple produites par des cellules en culture, ou bien ayant été libérées dans le milieu après solubilisation de cellules, celles-ci ayant éventuellement reçu un marquage immunologique. It relates more particularly to the use of this device for the determination of substances contained in a cell culture medium, these substances having for example been produced by cells in culture, or having been released into the medium after solubilization of cells, those if it has been immunologically labeled.
Mais d'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront mieux dans la description détaillée qui suit et se réfère aux dessins annexés, donnés uniquement à titre d'exemple, et dans lesquels
- la figure 1 est une vue en perspective d'un manchon inséré dans un puits
- la figure 2 est une vue en perspective d'une barrette munie de tels manchons
- la figure 3 est une vue en perspective similaire à la figure 2 mais montrant des manchons individuellement séparables de la barrette
- la figure 4 est une vue en coupe de la barrette de la figure 2, passant par l'axe des manchons, et illustrée en position montée sur une rangée de puits ; et
- la figure 5 est une vue en perspective partielle d'une plaque à puits multiples prête à recevoir une platine comportant sur une face des manchons suivant l'invention.But other features and advantages of the invention will appear better in the detailed description which follows and refers to the accompanying drawings, given solely by way of example, and in which
FIG. 1 is a perspective view of a sleeve inserted in a well
FIG. 2 is a perspective view of a bar provided with such sleeves
FIG. 3 is a perspective view similar to FIG. 2 but showing individually separable sleeves of the bar.
- Figure 4 is a sectional view of the bar of Figure 2, passing through the axis of the sleeves, and illustrated in mounted position on a row of wells; and
- Figure 5 is a partial perspective view of a multiwell plate ready to receive a plate having on one side sleeves according to the invention.
En se reportant tout particulièrement à la figure 1, on voit qu'un dispositif selon l'invention est, d'une manière générale, constitué par un manchon 1 insérable dans un alvéole ou puits 2 ménagé dans un élément 3 et pouvant contenir un liquide dans lequel est dissoute une substance quelconque. With particular reference to FIG. 1, it can be seen that a device according to the invention is, in general, constituted by a sleeve 1 that can be inserted in a cell or well 2 formed in an element 3 and that can contain a liquid in which any substance is dissolved.
Le manchon 1 est ouvert à ses deux extrémités pour permettre le passage du faisceau lumineux, et sa paroi 4 peut avoir une épaisseur variable, ce qui caractérise le calibre du manchon 1. The sleeve 1 is open at both ends to allow the passage of the light beam, and its wall 4 may have a variable thickness, which characterizes the caliber of the sleeve 1.
Ainsi, comme on le comprend aisément, le manchon 1, une fois introduit dans le puits 2, réduira le volume de ce puits en fonction de l'épaisseur de la paroi 4 et permettra par conséquent la remontée du liquide dans le puits 2 de la hauteur désirée en fonction du calibre utilise. Thus, as is easily understood, the sleeve 1, once introduced into the well 2, will reduce the volume of this well as a function of the thickness of the wall 4 and therefore allow the rise of the liquid in the well 2 of the desired height according to the caliber used.
Le manchon 1, de même que l'élément 3 peuvent être en une matière quelconque telle que par exemple une matière plastique transparente à usage unique ou réutilisable d'une mesure à une autre après nettoyage. The sleeve 1, as well as the element 3 may be of any material such as for example a transparent plastic disposable or reusable from one measurement to another after cleaning.
Ainsi, un faisceau lumineux traversant le puits et le liquide qu'il contient, de préférence selon une direction sensiblement parallèle à l'axe du puits qui est généralement sensiblement cylindrique, permettra une mesure de la densité optique de la substance dissoute dans le liquide dont la hauteur dans le puits sera suffisamment importante pour procurer la sensibilité, la précision et l'efficacité voulues de la mesure. Thus, a light beam passing through the well and the liquid that it contains, preferably in a direction substantially parallel to the well axis, which is generally substantially cylindrical, will make it possible to measure the optical density of the substance dissolved in the liquid of which the height in the well will be large enough to provide the desired sensitivity, accuracy and efficiency of the measurement.
Comme on le voit sur les figures 2 et 3, le manchon 1 peut être solidaire d'un support 5 comportant une pluralité de tels manchons faisant saillie d'un côté dudit support. As seen in Figures 2 and 3, the sleeve 1 may be secured to a support 5 having a plurality of such sleeves projecting from one side of said support.
Comme on le voit sur la figure 2, le support 5 peut être constitué par une barrette portant une pluralité de manchons 1 dont l'espacement correspondra à l'espacement entre les puits 2 d'une ligne de puits ménagée dans l'élément 3. As can be seen in FIG. 2, the support 5 may consist of a bar carrying a plurality of sleeves 1 whose spacing will correspond to the spacing between the wells 2 of a well line formed in the element 3.
Le support en forme de barrette 5 peut comporter des lignes d'entaillage 6 entre les manchons 1, ce qui permet aisément de les séparer les uns des autres pour les insérer dans tel ou tel puits ménagé dans l'élément 3. The bar-shaped support 5 may comprise score lines 6 between the sleeves 1, which makes it easy to separate them from each other for insertion into a particular well formed in the element 3.
On a montré sur la figure 4, un ensemble linéaire de manchons 1 appartenant à une barrette 5, comme montré sur la figure 2, laquelle ligne de manchons est insérée dans les puits 2 d'espacement correspondant, ménagés dans l'élément 3. FIG. 4 shows a linear assembly of sleeves 1 belonging to a bar 5, as shown in FIG. 2, which line of sleeves is inserted into the corresponding spacing wells 2 formed in the element 3.
Les manchons 1 peuvent aussi être solidaires d'un support en forme de plaque ou de platine 7, comme on le voit bien sur la figure 5 où lesdits manchons 1 font saillie d'une même face de la platine 7. The sleeves 1 may also be integral with a support in the form of a plate or plate 7, as can be seen in FIG. 5, where said sleeves 1 project from the same face of the plate 7.
Cette platine 7 avec manchons associés pourra comporter autant de manchons 1 que d'alvéoles ou puits 2, prévus dans une plaque P à puits multiples permettant par exemple la culture de cellules, la microtitration d'échantillons, des opérations de dosage ou encore d'autres utilisations. This plate 7 with associated sleeves may include as many sleeves 1 as cells or well 2, provided in a multi-well plate P for example cell culture, microtitre samples, dosing operations or even other uses.
Il va de soi que l'on peut utiliser des manchons 1 dans seulement certains puits 2 de la plaque P, par exemple à l'aide d'une barrette 5 avec manchons sécables ou insécables, comme on le voit sur les figures 2 et 3. It goes without saying that sleeves 1 can be used in only certain wells 2 of the plate P, for example by means of a bar 5 with breakable or non-breakable sleeves, as can be seen in FIGS. .
Bien entendu, l'invention n'est nullement limitée au mode de réalisation décrit et illustré qui n'a été donné qu'à titre d'exemple. Of course, the invention is not limited to the embodiment described and illustrated which has been given by way of example.
C'est ainsi que la matière et l'épaisseur de paroi des manchons 1 peuvent être quelconques, de même que la position géométrique des manchons sur une platine, une barrette ou autre support quelconque. Thus, the material and the wall thickness of the sleeves 1 may be any, as well as the geometric position of the sleeves on a plate, a bar or any other support.
C'est dire que l'invention comprend tous les équivalents techniques des moyens décrits ainsi que leurs combinaisons si celles-ci sont effectuées suivant son esprit. This means that the invention includes all the technical equivalents of the means described and their combinations if they are carried out according to its spirit.
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