FR2647668A1

FR2647668A1 - Transfer pipette for embryos

Info

Publication number: FR2647668A1
Application number: FR9006920A
Authority: FR
Inventors: Peter Rommel; Manfred Faust; Hartmut Beyer
Original assignee: Medizin und Labortechnik Leipzig VEB
Current assignee: Medizin und Labortechnik Leipzig VEB
Priority date: 1989-06-06
Filing date: 1990-06-05
Publication date: 1990-12-07

Abstract

The transfer pipette for embryos is characterised in that an inner tube 2 is placed between the outer tube 1 and the mandrel 3 of the transfer pipette, the inner tube 2 serving as a support for a straw 4, in that, in order to close the transfer pipette at the front and in order to close the straw 4 at the front, a pipette head 5 is provided with a straw shaft and an outer tube shaft, as well as a central sampling hole and an outlet opening 9 which is situated in the region of the shaft of the outer tube, and in that a moulding 11 is situated against the inner wall in the front part of the outer tube 1.

Description

La présente invention concerne une pipette de transfert pour le transfert d'embryons d'animaux domestiques d'élevage, en particulier de bovins. The present invention relates to a transfer pipette for the transfer of embryos of domesticated farm animals, in particular cattle.

L'introduction d'un embryon de 6 ou 7 jours dans l'utérus d'un animal récepteur, ne s'effectue, dans la pratique, en principe que par la voie naturelle, c'est- & -dire trans-cervicale, à travers le vagin et le canal du col de l'utérus, à l'aide de canules de transfert ou d'implantation. The introduction of a 6 or 7 day embryo into the uterus of a recipient animal, is carried out, in practice, in principle only by the natural way, that is to say trans-cervical, through the vagina and the cervical canal, using transfer or implantation cannulas.

Les appareils connus reposent sur ce principe de base que l'embryon avec son bouillon de culture, est introduit dans une paillette ou un cathéter en matière plastique, qui sont placés dans un tube métallique et qui, après introduction dans l'utérus, peuvent être vidés, au moyen d'un mandrin ou d'une seringue, par une ouverture centrale ou latérale, à l'extrémité avant des appareils. Known devices are based on this basic principle that the embryo with its culture broth, is introduced into a straw or a plastic catheter, which are placed in a metal tube and which, after introduction into the uterus, can be emptied, by means of a mandrel or syringe, through a central or lateral opening at the front end of the devices.

Pour le transfert d'embryons, on trouve sur le marché la canule d'implantation selon le DE-PS 3007539 (A 61 D 7/00) qui est constituée de deux parties pouvant être vissées entre elles, sans joint. La paillette avec l'embryon est placée, avant le transfert, dans la partie avant dont le perçage est conique en direction de la pointe de la canule, de sorte que le bord avant de la paillette garantit toujours une fermeture étanche contre la paroi intérieure de la canule. Directement devant cette fermeture, se trouve une ouverture latérale en forme d'oeillet, pratiquée dans la paroi de la canule, par laquelle on peut vider le contenu de la paillette, dans l'utérus, au moyen d'un bouchon et d'un mandrin. For the embryo transfer, there is on the market the implantation cannula according to DE-PS 3007539 (A 61 D 7/00) which consists of two parts which can be screwed together, without seal. Before the transfer, the straw with the embryo is placed in the front part, the bore of which is conical in the direction of the tip of the cannula, so that the front edge of the straw always guarantees a tight seal against the inner wall of the cannula. Directly in front of this closure is a side opening in the shape of an eyelet, made in the wall of the cannula, through which the contents of the straw can be emptied into the uterus by means of a stopper and a mandrel.

Pour empêcher des contaminations de l'ouverture latérale de la canule, lors de l'introduction trans-cervicale, il a été proposé aussi de n'ouvrir celle-ci qu'à l'intérieur de l'utérus, en faisant tourner la paillette de 1800 (DD-PS 235182, A 61 D 7/00). To prevent contamination of the lateral opening of the cannula, during trans-cervical introduction, it has also been proposed to open it only inside the uterus, by turning the straw from 1800 (DD-PS 235182, A 61 D 7/00).

Mais compte tenu de leur construction relativement rigide et rectiligne, ces deux canules de transfert ne permettent pas de déposer l'embryon suffisamment profondément a l'intérieur de l'utérus, de sorte que le succès de la gestation est soumis à certaines limites. On court en outre le risque d'une perforation de l'utérus. But given their relatively rigid and rectilinear construction, these two transfer cannulas do not allow the embryo to be deposited deep enough inside the uterus, so that the success of gestation is subject to certain limits. There is also a risk of perforation of the uterus.

Afin que l'embryon puisse être déposé aussi profondément que possible et sans risque dans le corps de l'utérus, on a mis au point un appareil de transfert d'embryon" spécial qui se caractérise par une spirale métallique flexible qui entoure un tuyau en Téflon contenant l'embryon et qui peut être réalisé A partir d'un tube extérieur métallique (Rasbech, Dtsch. tierärztl. In order that the embryo can be deposited as deep as possible and without risk in the body of the uterus, we have developed an embryo transfer device "special which is characterized by a flexible metallic spiral which surrounds a pipe in Teflon containing the embryo and which can be produced from an external metal tube (Rasbech, Dtsch. Tierärztl.

Wochenschrift 83 (1976) 524-526).Wochenschrift 83 (1976) 524-526).

Cet appareil est trop compliqué pour une méthode de routine et exige un travail de nettoyage et de stérilisation relativement important. Un appareil de transfert pour embryons et sperme avec ouverture centrale d l'extrémité avant de la canule est décrit dans le GB-UK 2070437 (A 61 D 7/02). This device is too complicated for a routine method and requires relatively significant cleaning and sterilization work. A transfer device for embryos and sperm with central opening at the front end of the cannula is described in GB-UK 2070437 (A 61 D 7/02).

Aux inconvénients d'une forme de réalisation rigide et rectiligne vient s'ajouter dans cette construction, le risque de contamination. In addition to the disadvantages of a rigid and rectilinear embodiment, there is the risk of contamination.

La combinaison d'un tube métallique de transfert avec un tuyau de transfert mince, introduire profondément dans la trompe de l'utérus, est décrit dans un Instrumentarium zur Gewinnung und Ubertragung boviner
Embryonen" (Lampeter, W. W. et al. : Zuchthygiene 15 (1980) 173-176). Le risque que le tuyau de transfert ne se plie est très grand, car la possibilité de contrôle est réduite. Il s'agit en partie d'un système ouvert avec un risque de contamination accru.The combination of a metal transfer tube with a thin transfer tube, inserted deep into the fallopian tube, is described in an Instrumentarium zur Gewinnung und Ubertragung boviner
Embryonen "(Lampeter, WW et al.: Zuchthygiene 15 (1980) 173-176). The risk of the transfer hose bending is very great, since the possibility of control is reduced. This is partly due to an open system with an increased risk of contamination.

Une variante similaire, mais dans une autre combinaison avec des canules de ponction pour la transplantation chirurgicale d'embryons de bovins est décrite dans le DD-PS 160 680 (A 61 B 10/00). L'ouverture de sortie latérale pour le petit tube intérieur élastique présente un angle de sortie de 105 à 1300. Mais ce dispositif suppose la ponction préalable de l'utérus et n'est donc pas utilisé. A similar variant, but in another combination with puncture cannulas for the surgical transplantation of bovine embryos is described in DD-PS 160 680 (A 61 B 10/00). The lateral outlet opening for the small elastic inner tube has an outlet angle of 105 to 1300. But this device presupposes the prior puncture of the uterus and is therefore not used.

L'invention a pour but d'améliorer la - abilité du transfert trans-cervical d'embryons et d'accrottre les taux de gestation des animaux récepteurs. The object of the invention is to improve the - ability of trans-cervical transfer of embryos and to increase the gestation rates of recipient animals.

L'invention se propose, pour le transfert trans-cervical d'embryons, de déposer l'embryon, profondément à l'intérieur de l'utérus (pointe de la trompe), car le lieu du dépôt, dans la trompe de l'utérus ipsilatérale détermine de manière significative (cC= 0,05) l'issue de la gestation. En outre, la pipette de transfert doit pouvoir être facilement manipulée et avec fiabilité, afin de permettre un passage 1 travers les voies génitales sans blessure. The invention proposes, for the trans-cervical transfer of embryos, to deposit the embryo, deep inside the uterus (tip of the tube), because the place of the deposit, in the tube of the ipsilateral uterus significantly determines (cC = 0.05) the outcome of gestation. In addition, the transfer pipette must be able to be easily and reliably manipulated to allow passage through the genital tract without injury.

Ce but est atteint suivant l'invention en ce qu'on place, entre le tube extérieur et le mandrin de la pipette de transfert, un tube intérieur servant de support à la paillette, en ce que pour fermer A l'avant la pipette de transfert et pour fermer à l'avant la paillette, on prévoit une tête de pipette avec une tige de paillette et une tige de tube extérieur, ainsi qu'un trou de prélèvement central et une ouverture de sortie qui se trouve dans la région de la tige du tube extérieur et en ce qu'une moulure se trouve contre la paroi intérieure, dans la partie avant du tube extérieur. Le tiers avant environ du mandrin en deux parties est réalisé dans une matière plastique élastique. A l'extrémité avant de la pipette de transfert, on prévoit une tête de pipette semi-arrondie qui ferme la paillette et le tube extérieur. A cet effet, la tête de pipette présente deux tiges de diamètres différents, une tige correspondant au diamètre intérieur de la paillette et l'autre au diamètre intérieur du tube extérieur. This object is achieved according to the invention in that, between the outer tube and the mandrel of the transfer pipette, an inner tube serving as a support for the straw is placed, in that to close the pipette at the front. transfer and to close the straw at the front, a pipette head with a straw rod and an external tube rod is provided, as well as a central sampling hole and an outlet opening which is located in the region of the rod of the outer tube and in that a molding is located against the inner wall, in the front part of the outer tube. The front third approximately of the two-part mandrel is made of an elastic plastic material. At the front end of the transfer pipette, a semi-rounded pipette head is provided which closes the straw and the outer tube. For this purpose, the pipette head has two rods of different diameters, one rod corresponding to the internal diameter of the straw and the other to the internal diameter of the external tube.

Le diamètre extérieur maximal de la tête de pipette correspond à celui du tube extérieur qui n'est que de 3 mm. The maximum outside diameter of the pipette head corresponds to that of the outside tube which is only 3 mm.

Dans la région de la tige qui est introduite dans le tube extérieur, on prévoit une ouverture de sortie latérale qui communique avec un trou de prélèvement, jusqu'à l'extrémité de la tige de paillette. L'ouverture de sortie est ainsi protégée pendant l'introduction de la pipette de transfert, jusque dans la trompe de l'utérus, contre toute contamination et obstruction. In the region of the rod which is introduced into the outer tube, a lateral outlet opening is provided which communicates with a sampling hole, up to the end of the glitter rod. The outlet opening is thus protected during the introduction of the transfer pipette, as far as the fallopian tube, against any contamination and obstruction.

Selon une autre caractéristique de l'invention, A la sortie arrière de l'arc du tube extérieur, se trouve une moulure qui exerce uné légère pression sur la paillette et empêche ainsi qu'elle ne glisse à l'extérieur. According to another characteristic of the invention, at the rear outlet of the arc of the outer tube, there is a molding which exerts a slight pressure on the straw and thus prevents it from slipping outside.

En position de fin de course de la paillette extraite, sa paroi est coincée entre la moulure et le tube intérieur, ce qui assure une bonne étanchéité et empêche que la paillette ne glisse à l'extérieur du tube extérieur, pendant le transfert. In the end of travel position of the extracted straw, its wall is wedged between the molding and the inner tube, which ensures a good seal and prevents the straw from sliding outside the outer tube during transfer.

Pour préparer un transfert d'embryon, on place la paillette avec l'embryon et le bouchon de fermeture arrière, sur le tube intérieur et on l'introduit dans le tube extérieur, jusqu'S son extrémité avant, de manière A pouvoir introduire la tête de pipette dans la paillette. To prepare an embryo transfer, place the straw with the embryo and the rear closure cap on the inner tube and introduce it into the outer tube, up to its front end, so that the head can be inserted. pipette in the glitter.

On introduit ensuite la tige avec l'ouverture de sortie, dans le tube extérieur. Après mise en place du mandrin, la pipette de transfert est prête à être utilisée et peut être introduite, dans cet état, jusque dans la partie initiale de la trompe ipsilatérale de l'utérus. The rod is then introduced with the outlet opening into the outer tube. After placement of the mandrel, the transfer pipette is ready to use and can be introduced, in this state, to the initial part of the ipsilateral tube of the uterus.

Ensuite, en poussant vers l'avant le tube inté- rieur, on fait ressortir la paillette avec la tête de pipette, en direction de la pointe de la trompe. Lorsque la position de fin de course est atteinte dans laquelle la paillette est coincée contre la moulure, on peut actionner le mandrin et vider la paillette, l'embryon étant ainsi déposé profondément dans l'utérus. Then, pushing the inner tube forward, the flake is brought out with the pipette head, towards the tip of the tube. When the end position is reached in which the straw is stuck against the molding, you can activate the mandrel and empty the straw, the embryo thus being deposited deep in the uterus.

Diverses autres caractéristiques de l'invention ressortent d'ailleurs de la description qui suit. Various other characteristics of the invention will also emerge from the description which follows.

Une forme de réalisation de l'objet de l'invention est réprésenté, à titre d'exemples non limitatifs, aux dessins annexés. An embodiment of the object of the invention is shown, by way of nonlimiting examples, in the accompanying drawings.

La figure 1 est une vue d'ensemble en coupe de la pipette de transfert,
La figure 2 représente la pipette de transfert avec paillette sortie dans l'utérus,
La figure 3 est une vue en coupe de la tête de transfert avec paillette.FIG. 1 is an overall view in section of the transfer pipette,
FIG. 2 represents the transfer pipette with a straw that has left the uterus,
Figure 3 is a sectional view of the transfer head with straw.

La pipette de transfert mesure au total 550 mm de longueur et, contrairement aux appareils connus, elle est repliée dans sa partie avant et présente un diamètre extérieur de 3 mm seulement. The transfer pipette measures a total of 550 mm in length and, unlike known devices, it is folded back in its front part and has an outside diameter of only 3 mm.

Elle est constituée du tube extérieur 1 avec l'arc avant de tube extérieur la, du tube intérieur 2, du mandrin 3 en deux parties avec la partie avant en matière plastique 3a, d'une paillette 4 généralement connue et de la tête de pipette 5. It consists of the outer tube 1 with the front arc of the outer tube 1a, the inner tube 2, the mandrel 3 in two parts with the plastic front part 3a, a generally known straw 4 and the pipette head. 5.

Celle-ci assure la fermeture avant du tube extérieur 1 ainsi que la fermeture avant de la paillette 4 dont la fermeture arrière est assurée, de manière connue, par un bouchon 6. Pour la double fonction de fermeture, la tête de pipette 5 dont l'extrémité avant est semi-arrondie, possède deux tiges de diamètres différents, à savoir une tige de paillette 7 et une tige de tube extérieur 8 qui sont adaptées aux diamètres intérieurs respectifs de ces éléments. Dans la région de la tige de tube extérieur 8 se trouve l'ouverture de sortie 9 latérale qui communique avec le trou de pré lève- ment 10 central de la tête de pipette. Pour bloquer la paillette 4 dans la pipette de transfert pendant l'utilisation, en particulier dans la position ressortie, on prévoit sur la paroi intérieure, par exemple sur l'extrémité arrière de l'arc de tube extérieur la, une moulure 11. Elle exerce une légère pression sur la paillette et assure ainsi sa fixation dans l'appareil. Lorsque le tube intérieur 2 avec la paillette 4 placée dessus, atteint la moulure 11, lorsque la paillette est extraite, la paroi de celle-ci est coincée entre la moulure-et le tube intérieur et on obtient une fixation fiable de la paillette dans sa position de fin de course et on empêche qu'elle ne glisse involontairement à l'extérieur de la pipette. Pour manipuler plus facilement la pipette de transfert, le tube extérieur et le tube intérieur ont une forme conique, de manière connue, sur leurs extrémités arrière. This ensures the front closure of the outer tube 1 as well as the front closure of the straw 4, the rear closure is ensured, in known manner, by a stopper 6. For the double closing function, the pipette head 5 of which l 'front end is semi-rounded, has two rods of different diameters, namely a glitter rod 7 and an outer tube rod 8 which are adapted to the respective internal diameters of these elements. In the region of the outer tube rod 8 is the lateral outlet opening 9 which communicates with the central withdrawal hole 10 of the pipette head. To block the straw 4 in the transfer pipette during use, in particular in the extended position, there is provided on the inner wall, for example on the rear end of the arc of the outer tube la, a molding 11. It exerts a slight pressure on the glitter and thus ensures its fixation in the device. When the inner tube 2 with the straw 4 placed above, reaches the molding 11, when the straw is extracted, the wall of the latter is wedged between the molding and the inner tube and a reliable fixing of the straw is obtained in its end position and it is prevented from sliding unintentionally outside the pipette. To more easily handle the transfer pipette, the outer tube and the inner tube have a conical shape, in known manner, on their rear ends.

Au laboratoire, dans des conditions stériles, la paillette 4 contenant l'embryon est placée, avec son extrémité contenant le bouchon 6, sur le tube intérieur 2. Le tube intérieur et la paillette sont ensuite introduits dans le tube extérieur 1 jusqu'à ce que la paillette ressorte d'environ 3 mm de l'arc de tube extérieur la. Lorsqu'on commence à passer la moulure 11, on sent une légère résistance. On introduit ensuite la tête de pipette 5 avec sa tige de paillette 7, dans la paillette 4. On extrait ensuite le tube intérieur jusqu'à ce que la tige de tube extérieur 8 soit totalement logée dans le tube extérieur 1. In the laboratory, under sterile conditions, the straw 4 containing the embryo is placed, with its end containing the plug 6, on the inner tube 2. The inner tube and the straw are then introduced into the outer tube 1 until that the glitter comes out of about 3 mm from the arc of the outer tube la. When we begin to pass the molding 11, we feel a slight resistance. The pipette head 5 with its glitter rod 7 is then introduced into the glitter 4. The internal tube is then extracted until the external tube rod 8 is completely housed in the external tube 1.

On assure ainsi en même temps une fermeture totale de l'ouverture de sortie 9. Après introduction du mandrin 3 en deux parties avec la partie avant 3a flexible dans le tube intérieur 2, la pipette de transfert est prête à être utilisée. La pipette de transfert peut être transportée et stockée dans cet état, dans un conteneur spécial la protégeant de la chaleur. This ensures at the same time a total closure of the outlet opening 9. After introduction of the mandrel 3 in two parts with the flexible front part 3a in the inner tube 2, the transfer pipette is ready to be used. The transfer pipette can be transported and stored in this state, in a special container protecting it from heat.

Pour transférer l'embryon, on introduit la pipette de transfert lege artis dans l'animal récepteur, par contrôle rectal, jusque dans la partie initiale de la trompe de l'utérus ipsilatérale. On pousse ensuite le tube intérieur dans le tube extérieur et la paillette 4 ressort d'environ 80 mm, en direction de la pointe de la trompe. To transfer the embryo, the lege artis transfer pipette is introduced into the recipient animal, by rectal control, as far as the initial part of the ipsilateral uterus tube. Then push the inner tube into the outer tube and the straw 4 comes out about 80 mm, towards the tip of the tube.

Lorsque le bord avant du tube intérieur atteint la moulure 11, la paillette 4 est fixée. On peut maintenant actionner le mandrin 3 et vider rapidement la paillette. L'embryon est ainsi déposé profondément à l'intérieur de l'utérus, ce qui crée des conditions préalables optimales au développement futur de l'embryon. When the front edge of the inner tube reaches the molding 11, the straw 4 is fixed. We can now operate the mandrel 3 and quickly empty the straw. The embryo is thus deposited deep inside the uterus, which creates optimal preconditions for the future development of the embryo.

Sur les dessins, 12 désigne un embryon dans le fluide de culture 13 et 14 le milieu de culture 15, 16, 17 des espaces d'air, 18 le vagin, 19 le col et 20 une trompe de l'utérus. In the drawings, 12 denotes an embryo in the culture fluid 13 and 14 the culture medium 15, 16, 17 air spaces, 18 the vagina, 19 the cervix and 20 a fallopian tube.

Claims

1. Transfer pipette for transferring embryos cross-cervically, comprising a mandrel intended for emptying a straw in which the embryo is located, floating in the culture fluid and the rear end of which is closed by a plug sliding, characterized in that between the outer tube (1) and the mandrel (3) of the transfer pipette, an inner tube (2) serving as a straw holder (4) is placed, in that to close at before the transfer pipette and to close the straw (4) at the front, a pipette head (5) with a straw rod (7) and an external tube rod (8) is provided, as well as a central sampling hole (10) and an outlet opening (9) which is located in the region of the stem of the outer tube and that a molding (11) is located against the inner wall, in the front part of the outer tube (1).

2. Transfer pipette according to claim 1, characterized in that the front part of the pipette head (5) preferably has a semi-rounded shape.

3. Transfer pipette according to one of claims 1 and 2, characterized in that the front part of the outer tube (1) has an arc shape.

4. Transfer pipette according to one of claims 1 to 3, characterized in that the mandrel (3) is in two parts, in the inner tube (2).

5. Transfer pipette according to one of claims 1 and 4, characterized in that the front part (3a) of the mandrel is made of an elastic plastic material.

6. Transfer pipette according to claims 1 to 6, characterized in that the molding (11) is placed at the rear end of the arc (la) of the outer tube.