FR2617830A1 - PROCESS FOR THE BIOLOGICAL PURIFICATION OF METHANOL IN WASTEWATER - Google Patents
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Abstract
Selon l'invention, on soumet les eaux résiduaires contenant le méthanol à une neutralisation par l'acide orthophosphorique, on les enrichit avec des sources d'azote, après quoi on introduit la souche Methylomonas metanica B-2576, déposée au Musée Central des micro-organismes industriels Vsesojuznogo nauchno-issledovatelskogo instituta genetiki i selektsii promyshlennykh mikroorganizmov. On cultive la souche citée sur le milieu indiqué jusqu'à l'épuration des eaux résiduaires à partir du méthanol. Le procédé d'épuration biologique du méthanol dans des eaux résiduaires trouvera une application dans les entreprises d'extraction et de traitement du gaz naturel contenant du sulfure d'hydrogène.According to the invention, the waste water containing methanol is subjected to neutralization with orthophosphoric acid, they are enriched with nitrogen sources, after which the strain Methylomonas metanica B-2576, deposited at the Central Museum of Micro -industrial organizations Vsesojuznogo nauchno-issledovatelskogo instituta genetiki i selektsii promyshlennykh mikroorganizmov. The strain cited is cultivated on the medium indicated until the purification of the waste water from methanol. The process for the biological purification of methanol from waste water will find application in companies extracting and processing natural gas containing hydrogen sulphide.
Description
L'invention revendiquée concerne l'épuration biolo-The claimed invention concerns the biological purification of
gique des eaux résiduaires, et plus précisément un procédé d'épuration biologique visant à débarrasser les eaux wastewater treatment, and more specifically a biological purification process aimed at ridding
résiduaires du méthanol.residuals of methanol.
L'invention trouvera une application dans les entre- The invention will find application in the
prises d'extraction et de traitement du gaz naturel con- extraction and treatment of natural gas
tenant du sulfure d'hydrogène.holding hydrogen sulfide.
A l'heure actuelle, on connaît la culture de micro- At present, we know the culture of micro-
organismes appartenant aux divers groupes physiologiques, 0 réalisable sur des milieux nutritifs contenant du méthanol organisms belonging to the various physiological groups, 0 obtainable on nutrient media containing methanol
en qualité de source de carbone.as a source of carbon.
Ainsi, par exemple, on connait un procédé de culture de levures d'espèces différentes sur un milieu contenant du méthanol (V.S. Podgorsky "Fiziologia i metabolizm metanolusvaivajuschikh drozhzhei". Eds. "Naukova dumka", Kiev, 1982). On connaît également la culture des levures, assimilant le méthanol, sur des milieux nutritifs dans la Thus, for example, a method of culturing yeasts of different species on a medium containing methanol (V. S. Podgorsky "Fiziologia i metabolizm metanolusvaivajuschikh drozhzhei", Eds. "Naukova dumka", Kyiv, 1982) is known. Yeast culture, assimilating methanol, is also known on nutrient media in the
composition desquels entre le liquide résiduaire de cul- composition of which between the residual liquid of
ture ("braga") résultant de la production d'hydrolyse des ture ("braga") resulting from the hydrolysis production of
0 levures ("Acta microbiol. bulg.", 1970, v. 7, pages 49-54). Yeasts ("Acta microbiol., Bulg.", 1970, v. 7, pages 49-54).
Les procédés nommés de culture des micro-organismes Named processes for culturing microorganisms
assimilant le méthanol peuvent être utilisés pour l'épura- assimilating methanol can be used for the purification of
tion des eaux industrielles résiduaires contenant du méthanol. Ainsi, par exemple, la culture de levure de l'espèce Hansenula polymorpha est réalisée sur des eaux résiduaires contenant du méthanol, résultant de l'extraction industrial waste water containing methanol. Thus, for example, the yeast culture of the species Hansenula polymorpha is carried out on waste water containing methanol, resulting from the extraction
et du traitement du gaz naturel contenant du sulfure d'hy- and the treatment of natural gas containing hydrogen sulphide
drogène, ce qui donne la possibilité d'épurer le méthanol des which gives the possibility of purifying methanol from
eaux résiduaires citées (SU, A, 963960). waste water cited (SU, A, 963960).
0 Conformément à ce procédé, l'épuration des eaux rési- 0 In accordance with this process, the purification of waste water
duaires contenant du méthanol est réalisée à l'aide de duanes containing methanol is carried out using
levures à une température de 36-38 C dans un milieu neutra- yeasts at a temperature of 36-38 C in a neutral medium
lisé par l'acide orthophosphorique jusqu'à un niveau de pH égal à 3,9-4,0 et enrichi en micro-éléments, en sources :5 d'azote et en vitamines. L'épuration des eaux résiduaires par ce procédé connu permet d'obtenir de l'eau ne contenant which is available from orthophosphoric acid up to pH 3.9-4.0 and enriched with microelements, nitrogen sources and vitamins. The purification of waste water by this known method makes it possible to obtain water containing no
que des traces de méthanol.only traces of methanol.
Un inconvénient du procédé nommé tient à une consom- A disadvantage of the named process is a consumer
mation considérable de l'acide orthophosphorique, des micro éléments et des vitamines, nécessaires pour l'obtention considerable amount of orthophosphoric acid, micro-elements and vitamins necessary to obtain
d'un milieu nutritif favorable au développement de la cul- nutritious environment conducive to the development of cul-
ture d'espèce Hansenula polymorpha.utilisant le méthanol. species Hansenula polymorpha.using methanol.
Ainsi, un volume des eaux résiduaires de 2000 m exige, pou la neutralisation, 3 m3 d'acide orthophosphorique concentré plus de 250 kg de micro-éléments, 3,6 kg de thiamine et g de destibiotine. L'inconvénient du procédé connu tient également à une lente vitesse de dilution de 0,5 1/h: 5 1 0,1 h-2, ce qui exige des volumes considérables des ouvrages d'épuration, vu que le temps de séjour des eaux à Thus, a volume of 2000 m of wastewater requires, for neutralization, 3 m3 of concentrated orthophosphoric acid more than 250 kg of micronutrients, 3.6 kg of thiamine and g of destibiotin. The disadvantage of the known process is also due to a slow dilution rate of 0.5 l / h: 0.1 hh-2, which requires considerable volumes of the purification plants, since the residence time of waters to
épurer dans l'ouvrage d'épuration est de 10 heures. to purify in the purification works is 10 hours.
On s'est donc proposé de mettre un procédé d'épuration biologique des eaux résiduaires au point, visant à les It has therefore been proposed to put a biological purification process for wastewater at the point, aimed at
libérer du méthanol, dans lequel on utiliserait un micro- to release methanol, in which a micro-
organisme grâce auquel le processus d'épuration serait réalisé dans des conditions avantageuses du point de vue organism through which the purification process would be carried out under advantageous conditions from the point of view
économique grâce à l'intensification du processus. through the intensification of the process.
La solution consiste en ce que dans le procédé d'épu- The solution is that in the process of
ration biologique du méthanol des eaux résiduaires par biological supply of methanol from wastewater by
culture d'un micro-organisme sur des eaux résiduaires préa- culture of a micro-organism on pre-treated wastewater
lablement neutralisées par l'acide orthophosphorique et latency neutralized by orthophosphoric acid and
enrichies en sources d'azote, jusqu'à l'épuration du métha- enriched sources of nitrogen, until the purification of metha-
nol des eaux résiduaires, conformément à l'invention, en in accordance with the invention, in
qualité de micro-organisme, on utilise la souche Methylomo- quality of the micro-organism, the strain Methylomo-
nas metanica B2576, déposée au Musée Central des micro- nas metanica B2576, deposited at the Central Museum of Micro-
organismes industriels Vsesojuznogo nauchno-issledovatel- industrial organizations Vsesojuznogo nauchno-issledovatel-
skogo instituta genetiki i selektsii promyshlennykh mikrooi skogo instituta genetiki i selektsii promyshlennykh mikrooi
ganizmov (04.07.1982).Ganizmov (04.07.1982).
Grâce à la présente invention, la consommation des Thanks to the present invention, the consumption of
réactifs nécessaires pour l'épuration de 1 m3 d'eaux rési- reagents necessary for the purification of 1 m3 of
duaires se voit réduite de 12 fois en comparaison avec le duaires is reduced by 12 times in comparison with the
procédé d'épuration des eaux connu, à une double intensifi- water purification process known, with a double intensification
cation du processus.cation of the process.
Il est rationnel, conformément à l'invention, de neutraliser préalablement les eaux résiduaires par l'acide orthophosphorique jusqu'à un pH de 5,5-7,0, et de réaliser la culture du micro-organisme cité à une température de It is rational, in accordance with the invention, to previously neutralize the residual waters with orthophosphoric acid to a pH of 5.5-7.0, and to carry out the cultivation of the microorganism cited at a temperature of
-37 C.-37 C.
D'autre caractéristiques et avantages de l'invention Other features and advantages of the invention
seront mieux compris à la lecture de la description du will be better understood by reading the description of the
procédé d'épuration des eaux résiduaires qui va suivre et wastewater treatment process that will follow and
de plusieurs exemples de la réalisation. several examples of the realization.
Pour réaliser le procédé revendiqué, on effectue l'isolement de la culture assimilant le méthanol. Pour cela, on place le sol pollué par le méthanol dans une colonne en verre vorticale et on fait passer, à traver le sol, l'eau résiduaire contenant le méthanol résultant des champs d'exploitation de gaz, diluée préalablement avec un milieu nutritif jusqu'à une concentration en méthanol de 1 g/l. On utilise un milieu nutritif minéral contenant, en g/dm3: K2HPO4 1,0; MgSO4.7H20: 0,5; NaCl:0, 02 To carry out the claimed process, the culture assimilating methanol is isolated. For this, the soil polluted with methanol is placed in a vortical glass column and the wastewater containing methanol resulting from the gas exploitation fields, previously diluted with a nutrient medium, is passed through the soil. at a methanol concentration of 1 g / l. A mineral nutrient medium containing, in g / dm3: K2HPO4 1.0 is used; MgSO4.7H2O: 0.5; NaCl: 0.02
FeSO4.7H20:O,03 NH4N03:0,5; pH=7,0. On augmente graduel- FeSO4.7H2O: 0.03 NH4NO3: 0.5; pH = 7.0. We gradually increase
lement la concentration en méthanol du milieu jusqu'à 10,0 g/dm3, en diminuant la dilution de l'eau résiduaire réelle avec le milieu nutritif. On augmente la teneur en méthanol de l'eau résiduaire jusqu'à l'obtention de son utilisation complète de l'eau résiduaire de la dilution précédente. Au stade d'amenée de l'eau résiduaire contenant 10,0 g/dm de the methanol concentration of the medium to 10.0 g / dm3, decreasing the dilution of the actual waste water with the nutrient medium. The methanol content of the waste water is increased until its complete use of the residual water of the preceding dilution is obtained. At the feed stage of the waste water containing 10.0 g / dm
méthanol, et en l'absence de ce dernier dans l'eau rési- methanol, and in the absence of the latter in residential water
duaire sortant de la colonne, on effectue l'isolement de la o culture pure de la bactérie par ensemencement du contenu de la colonne sur un milieu nutritif minéral agarisé de la dune out of the column, is carried out the isolation o the pure culture of the bacterium by seeding the contents of the column on a mineral nutrient medium agarized the
composition susmentionnée contenant 2,0 g/dm3 de méthanol. above-mentioned composition containing 2.0 g / dm3 of methanol.
Dans des conditions stationnaires, la culture consomme le méthanol en plus faibles concentrations que lors de sa Under stationary conditions, the crop consumes methanol in lower concentrations than during its
:5 culture en écoulement continu. La croissance du micro- Continuous flow culture. The growth of the micro-
organisme sur le milieu contenant 2,0 g/dm3 de méthanol témoigne de son utilisation par la culture, vu que le organism on medium containing 2.0 g / dm3 of methanol testifies to its use by culture, as the
méthanol est une source de carbone unique. Methanol is a unique carbon source.
La souche Methylomonas metanica B-2576 se caractérise The strain Methylomonas metanica B-2576 is characterized
par les particularités morphologiques et physiolo-biochimi- morphological and physiological-biochemical characteristics
ques suivantes: les cellules sont droites sous forme de bâtonnet, mobiles, ont un flagelle polaire, gram-négatives, aérobies, se multiplient par division, les dimensions de la cellule sont de 0,6xl mm; les collonnies de couleur following: the cells are straight rod-shaped, mobile, have a polar flagellum, gram-negative, aerobic, multiply by division, the dimensions of the cell are 0.6xl mm; colored collonnies
rosâtre ou crème sont muqueuses, les dimensions des colo- pink or cream are mucous, the dimensions of the colo-
nies étant de 3-4 mm.nies being 3-4 mm.
La souche indiquée ne se développe pas sur des milieux nutritifs ordinaires du type de l'agar de viande-peptone, The indicated strain does not develop on ordinary nutrient media of the meat-peptone agar type,
elle ne croît que sur des milieux contenant du méthanol. it only grows on media containing methanol.
La culture technique isolée Methylomonas metanica B-2576 est déposée au Musée Central promyshlennykh mikroorganizmov Vsesojuznogo nauchnoissledovatelskogo The isolated technical culture Methylomonas metanica B-2576 is deposited in the Central Museum promyshlennykh mikroorganizmov Vsesojuznogo nauchnoissledovatelskogo
instituta genetiki i selektsii promyshlennykh microorganiz- institute genetiki i selektsii promyshlennykh microorganiz-
mov (04.07.1982).mov (04.07.1982).
Le procédé revendiqué d'épuration biologique du méthanol des eaux résiduaires consiste à neutraliser les eaux résiduaires contenant du méthanol par de l'acide The claimed method for the biological purification of methanol from waste water is to neutralize methanol-containing wastewater with acid
orthophosphorique jusqu'à un pH de 5,5-7,0 et à les enri- orthophosphoric acid to a pH of 5.5-7.0 and to
chir avec des sources d'azote, en introduisant, par exemple chir with nitrogen sources, introducing, for example
du nitrate d'ammonium.ammonium nitrate.
On introduit ensuite, dans les eaux résiduaires, la souche Methylomonas metanica B-2576 et on réalise la The wastewater Methylomonas metanica B-2576 is then introduced into the waste water and the
culture du micro-organisme cité en maintenant la tempéra- culture of the microorganism cited while maintaining the temperature
ture au niveau de 20-37 C. Comme il suit des études, la culture du microorganisme indiqué à une température de 20-37 C assure l'utilisation du méthanol par les bactéries jusqu'aux quantités-traces ou l'absence complète du méthano: dans les eaux résiduaires. A une température inférieure à at 20-37 ° C. As studies show, the culture of the microorganism indicated at a temperature of 20-37 ° C ensures the use of methanol by the bacteria up to the trace quantities or the complete absence of the methanol. : in waste water. At a temperature below
C, le processus d'utilisation du méthanol par le micro- C, the process of using methanol by the micro-
organisme se voit sensiblement ralenti, et pendant 48 body is significantly slowed down, and for 48
heures de culture seulement 450 mg de méthanol sont consom- hours of culture only 450 mg of methanol are consumed
més par les bactéries dans 1 1 d'eau résiduaire. Aux tempé- caused by bacteria in 1 1 of wastewater. At temperatures
raturesau-delà de 37 C, la souche Methylomonas metanica below 37 C, the strain Methylomonas metanica
B-2576 ne croît pas et n'utilise pas de méthénol. B-2576 does not grow and does not use methenol.
On neutralise préalablement les eaux résiduaires par l'acide orthophosphorique jusqu'à un pH non inférieur à 5,5, étant donné qu'à un pH plus bas, la croissance et l'utilisation du méthanol par la souche Methylomonas metanica B-2576 sont ralenties. Une faible teneur en alcali des eaux résiduaires (pH supérieur à 7,0) est également défavorable à une consommation complète du The residual waters are pre-neutralized with orthophosphoric acid to a pH of not less than 5.5, since at a lower pH the growth and use of methanol by Methylomonas metanica strain B-2576 is slowed. A low alkali content of waste water (pH above 7.0) is also unfavorable to a complete consumption of
méthanol par le micro-organisme cité. methanol by the cited microorganism.
Le procédé revendiqué d'épuration biologique des eaux résiduaires permet d'épurer des eaux résiduaires d'une haute concentration en méthanol (5% en poids). Le The claimed process for the biological purification of waste water makes it possible to purify waste water with a high concentration of methanol (5% by weight). The
méthanol est alors entièrement utilisé par les microorga- methanol is then fully used by microorganisms.
nismes et on ne le trouve pas dans l'eau épurée ou seule- and it is not found in purified water or
ment des quantités - traces.trace quantities.
Grâce à l'utilisation de la souche Methylomonas metanica B-2576 à la place de la culture de levure du Through the use of the strain Methylomonas metanica B-2576 in place of the yeast culture of
type Hansenula polymorpha utilisée auparavant pour l'épu- type Hansenula polymorpha previously used for
ration des eaux résiduaires, le processus d'épuration devient économiquement plus avantageux vu que, premièrement, wastewater treatment, the purification process becomes economically more advantageous since, firstly,
la consommation de l'acide orthophosphorique pour la neu- the consumption of orthophosphoric acid for
tralisation des eaux résiduaires diminue considérablement, non pas jusqu'à une valeur du pH de 3,9-4,0, mais jusqu'à un pH de 5,5-7,0, deuxièmement, la souche Methylomonas metanica B-2576 n'exige absolument pas de vitamines telles que la thiamine et la destiobiotine pour son développement waste water decreases considerably, not up to a pH value of 3.9-4.0, but up to pH 5.5-7.0, secondly, strain Methylomonas metanica B-2576 n absolutely does not require vitamins such as thiamine and destiobiotin for its development
et l'utilisation du méthanol.and the use of methanol.
La réduction du temps de séjour des eaux résiduaires dans l'appareil de purification, en comparaison avec celui utilisé auparavant, permet d'intensifier de deux fois le The reduction of the residence time of the wastewater in the purification apparatus, in comparison with that used previously, makes it possible to intensify twice the
processus d'épuration.purification process.
Pendant l'épuration des eaux résiduaires par le procédé revendiqué s'accumule une biomasse bactérienne, contenant plus de 70% de protéine crue, qu'on utilise ensuite pour During the purification of the waste water by the claimed process a bacterial biomass, containing more than 70% of raw protein, is accumulated, which is then used to
préparer divers produits protéiques. prepare various protein products.
Exemple IExample I
Dans un fermenteur pour une culture continue de micro- In a fermenter for a continuous culture of micro-
organismes, d'une capacité de 5 1, on introduit des eaux résiduaires contenant 50,0 g/dm3 de méthanol,résultant de l'extraction et du traitement de gaz naturel contenant du organisms with a capacity of 5 1, waste water containing 50.0 g / dm3 of methanol, resulting from the extraction and treatment of natural gas containing
sulfure d'hydrogène. On introduit ensuite, dans le fermen- Hydrogen sulfide. Then, in the fermen-
teur, de l'acide orthophosphorique à raison de 0,4 ml/dm3 et du nitrate d'ammonium à raison de 150 mg/dm3 On dilue au préalable les eaux résiduaires avec un milieu nutritif synthétique jusqu'à une concentration en méthanol de 10 g/dm3, et on ensemence le fGrmenteur avec la souche Methylomonas metanica B-2576, cultivée dans des fioles d'Erlenmeyer sous secouage sur un milieu 0.4 ml / dm 3 orthophosphoric acid and 150 mg / dm 3 ammonium nitrate. The waste water is pre-diluted with a synthetic nutrient medium to a methanol concentration of 10 ml. g / dm3, and seeded with strain Methylomonas metanica B-2576, cultured in Erlenmeyer flasks under shaking on medium.
nutritif synthétique contenant du méthanol à une centra- synthetic nutrient containing methanol at one
tion de 5,0 g/dm On augmente graduellement la concentration en méthanol des eaux résiduaires jusqu'à 50,0 g/dm3, en diminuant sa 5.0 g / dm The methanol concentration of the wastewater is gradually increased to 50.0 g / dm3, decreasing
dilution avec le milieu synthétique. On maintient la con- dilution with the synthetic medium. We keep the con-
centration en acide orthophosphorique dans les eaux rési- concentration in orthophosphoric acid in residential waters
duaires au niveau de 0,4 ml/dm3 (pH = 6,5). La température duaries at the level of 0.4 ml / dm3 (pH = 6.5). Temperature
des eaux résiduaires est de 30 C. Après obtention de Ia con- wastewater is 30 ° C. After obtaining the
centration en souche Methylomonas metanica B-2576 de + g/dm3, on effectue la mise an culture des bactéries dans un écoulement des eaux résiduaires à un coefficient de dilution de 0,2h, ce qui correspond à un temps de séjour des eaux résiduaires à purifier dans le fermenteur concentration in the strain Methylomonas metanica B-2576 of + g / dm3, the culture of the bacteria is carried out in a flow of the wastewater at a dilution coefficient of 0.2h, which corresponds to a residence time of the wastewater at purify in the fermenter
égal à 5 heures.equal to 5 hours.
Pendant 10 jours de culture continue de la souche Methylomonas metanica B2576 sur les eaux résiduaires conenant le méthanol, la biomasse de microorganismes est maintenue d'une façon stable au niveau de 37+2 g/dm3, ce qui témoigne d'un haut degré d'utilisation du méthanol par les microorganismes. L'eau résiduaire purifiée ne contiel During 10 days of continuous cultivation of Methylomonas metanica strain B2576 on waste water containing methanol, the biomass of microorganisms is stably maintained at the level of 37 + 2 g / dm3, which indicates a high degree of use of methanol by microorganisms. Purified wastewater does not contiel
alors le méthanol qu'en concentrations- traces. then methanol only in trace concentrations.
Exemple 2Example 2
On effectue le processus d'épuration des eaux rési- The water purification process is carried out
duaires contenant du méthanol d'une façon tout à fait analogue à celle decrite à l'exemple 1. Cependant, on réalise une neutralisation préalable des eaux résiduaires par l'acide orthophosphorique jusqu'au pH de '5,5. On maintient Methanes containing methanol in a manner quite similar to that described in Example 1. However, the residual water is first neutralized with orthophosphoric acid to a pH of 5.5. We keep
la température des eaux résiduaires au niveau de 20 C. the temperature of the waste water at the level of 20 C.
On entreprend la mise en culture de la souche Methy- The cultivation of the strain Methy-
lomonas metanica B-2576 en régime periodique à une con- lomonas metanica B-2576 in a periodic diet at a
O centration de départ optimale du méthanol de 1 g/dm3. O optimal starting concentration of methanol of 1 g / dm3.
On entreprend le processus d'épuration pendant 48 The purification process is undertaken during 48
heures sous agitation vigoureuse.hours with vigorous agitation.
L'eau résiduaire purifiée, 48 heures après la culture, Purified wastewater, 48 hours after cultivation,
contient 0,002 g/dm3 de méthanol.contains 0.002 g / dm3 of methanol.
Exemple 3Example 3
On réalise le processus d'épuration des eaux résiduai- The process of purification of residual water is carried out
res comme à l'exemple 1. Cependant, on effectue une neutra- as in Example 1. However, a neutralization is carried out
lisation préalable des eaux résiduaires par l'acide ortho- pre-treatment of wastewater with orthoacidic acid
phosphorique jusqu'au pH = 7,0. On maintient la température phosphoric up to pH = 7.0. We keep the temperature
O des eaux résiduaires au niveau de 370C. O wastewater at the level of 370C.
On entreprend la culture de la souche Methylomonas metanica B-2576 en régime periodique à une concentration The cultivation of the strain Methylomonas metanica B-2576 is initiated periodically at a concentration
de départ en méthanol de I g/dm3.starting point in methanol of I g / dm3.
On entreprend le processus d'épuration pendant 48 heures sous agitation vigoureuse. L'eau résiduaire purifiée, après 48 heures de culture des micro-organismes cités, ne The purification process is started for 48 hours with vigorous stirring. The purified waste water, after 48 hours of culture of the microorganisms mentioned, does not
renferme pas de méthanol.does not contain methanol.
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