FI80072C - Askorbatresistant, pao brett omraode verkande glukostestkomposition, testapparat och -metod. - Google Patents
Askorbatresistant, pao brett omraode verkande glukostestkomposition, testapparat och -metod. Download PDFInfo
- Publication number
- FI80072C FI80072C FI832756A FI832756A FI80072C FI 80072 C FI80072 C FI 80072C FI 832756 A FI832756 A FI 832756A FI 832756 A FI832756 A FI 832756A FI 80072 C FI80072 C FI 80072C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- glucose
- composition
- ascorbate
- peroxidase
- color
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2326/00—Chromogens for determinations of oxidoreductase enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2326/00—Chromogens for determinations of oxidoreductase enzymes
- C12Q2326/50—Phenols; Naphthols; Catechols
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2326/00—Chromogens for determinations of oxidoreductase enzymes
- C12Q2326/90—Developer
- C12Q2326/96—4-Amino-antipyrine
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/805—Test papers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/904—Oxidation - reduction indicators
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
- Polyurethanes Or Polyureas (AREA)
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
Description
1 80072
Askorbaatinkestävä, laajalla alueella toimiva glukoosikoe-koostumus, koelaite ja -menetelmä Tämä keksintö liittyy pelkistävän sokerin, kuten glu-5 koosin kvalitatiiviseen ja kvantitatiiviseen analyysiin. Tarkemmin sanottuna se koskee koostumusta, joka pystyy havaittavasti reagoimaan sokerin läsnäollessa. Pelkistävien sokereiden lisäksi koostumusta voidaan käyttää vetyperoksidin, peroksidaasin, peroksidatiivisesti aktiivisten ainei-10 den, hypokloriitin ja muiden analyyttien toteamiseen.
Koenäytteiden analysointi sokerien läsnäolon toteamiseksi on käyttökelpoinen monilla eri aloilla. Niinpä tämä keksintö liittyy sellaisiin erilaisiin toiminta-aloihin kuin panimoteollisuuteen, biokemialliseen tutkimukseen ja 15 lääketiteelliseen diagnostiikkaan. Panimoteollisuduessa esimerkiksi tärkkelys muutetaan sokeriksi, kuten maltoosiksi, ennen varsinaista fermentaatiota. Maltoosin läsnäoloa seurataan sen vuoksi tarkasti, jotta varmistetaan korkeat saannot lähtöaineena käytetystä viljasta. Monet biokemialliset 20 systeemit vaativat glukoosia tarkasti säädetyissä konsent-raatioissa soluenergiansa lähteenä, ja sellaisten systeemien tutkiminen vaatii sen, että näitä konsentraatioita seurataan huolellisesti. Lääkärit käyttävät sokerianalyysia suuressa määrin hyväkseen esim. diabetes mellituksen (ilme-25 nee epänormaalin korkeina glukoosin konsentraatioina veressä ja virtsassa) diagnostisoinnissa ja seuraamisessa.
Sen lisäksi on nykyään käytettävissä monia analyyttisiä menetelmiä peroksidatiivisesti aktiivisten aineiden havaitsemiseksi sellaisista näytteistä kuin virtsasta ulos-30 tesuspensioista, ja maha-suolialueen näytteistä. Hemoglobiini ja sen johdannaiset ovat tyypillisiä tällaisia "peroksidatiivisesti aktiivisia" aineita, koska ne käyttäytyvät samalla tavalla kuin peroksidaasientsyymi. Sellaiset aineet luetaan myös tässä kuuluvaksi pseudoperoksidaaseihin. Per-35 oksidatiivisesti aktiiviset aineet ovat entsyymin kaltaisia siinä mielessä, että ne katalysoivat redox-reaktiota 2 80072 peroksidien ja bentsidiinin, o-tolidonin, 3,3',5,5'-tetra-metyylibentsidiinin; 2,7-diaminofluoreenin tai samanlaisten bentsidiinin tyyppisten indikaattoriaineiden kanssa, joilla tapahtuu havaittava reaktio, kuten värinmuutos. Useimmat 5 menetelmät piilevän veren määrittämiseksi koenäytteistä perustuvat tähän pseudoperoksidaasi-aktiivisuuteen.
Niinpä esillä oleva keksintö on käyttökelpoinen hyvin erilaisilla toiminta-aloilla. Se on käyttökelpoinen aina kun sokerianalyysillä on merkitystä, olkoonpa se panimo-10 teollisuudessa, ruokateollisuudessa, tieteellisessä tutkimuksessa tai lääketieteessä. Sen lisäksi sitä voidaan käyttää erilaisissa menetelmissä peroksidaasin tai pseudoperok-sidaasin toteamiseksi. Mikä tahansa systeemi, jossa muodostuu IVOlta reaktiotuotteena tai joka sisältää peroksidaasia 15 tai pseudoperoksidaasia, on sopiva tämän keksinnön soveltamiseen, kuten ovat myös muut systeemit, kuten uima-altaan vesi, joka sisältää hypokloriittia, ja muut voimakkaasti hapettavat systeemit.
Sokerianalyysin historia on ehkä merkittävin, koska 20 se on läpikäynyt näyttäviä muutoksia vuosien kuluessa, sekä perusreaktioiltaan että formaatissaan. Näitä analyysejä voidaan suurimmaksi osaksi kuvata hapettavina systeemeinä, jotka pelkistetyssä muodossa saavat aikaan reaktio-olosuhteet, jotka johtavat havaittavaan reaktioon, kuten värin-25 muutokseen tai muutokseen systeemin absorboiman tai heijastaman ultraviolettivalon aallonpituudessa. Niinpä pelkistävät sokerit muuttavat hopeaoksidin metalliseksi hopeaksi ja levitettäessä sokeriliuosta hopeaoksidilla kyllästetylle suodatinpaperipalaselle kehittyy musta täplä. F. Feigl, 30 Chem. Ind., Voi. 57, s. 1161, Lontoo (1938). Samoin o-di-nitrobentseeni ja dinitroftaalihapon 3,4- ja 3,5-isomeerit antavat herkän värireaktion (muodostaen violetteja värisävyjä) kuumennettaessa pelkistävien sokereiden kanssa Na2S03:ssa. T. Momose, et ai., Chem. Pharma. Bull. Tokyo, 35 Voi. 12, s. 14 (1964); F. Feigl, Spot Tests in Organic Analysis, 7th Edition, ss. 338-339, Elsevier Pubi. Co.,
New York (1966).
Il 3 80072
Mutta niinkin aikaisin kuin 1849 tiedettiin, että pelkistävät sokerit aiheuttaisivat CuSO^rn alkalisen liuoksen saostumisen keltaisenpunaiseksi kupari(I)oksidiksi (ok-sihydraatiksi). H. Fehling, Ann., Voi. 72 (1849). Katso 5 myös B. Herstein, J. Am. Chem. Soc., Voi. 32, s. 779 (1910). Tämä varhainen virstanpylväs, tunnettu Fehlingin kokeena, antoi sysäyksen paljon herkemmän kokeen kehittämiselle, jossa käytetään hyväksi hopeaoksidia ammoniakissa, niin sanottua Tollensin reagenssia, joka reagoi helposti pelkis-10 tävien aineiden kanssa tuottaen mustan saostuman metallista hopeaa, muodostaen usein peilin lasisten reaktioastioiden sisäseinille. B. Tollens, Ber., Voi. 14, s. 1950 (1881);
Voi. 15, s. 1635, 1828 (1882).
Diabetes mellituksen suhteellisen korkean esiintymis-15 tiheyden sekä siitä johtuvien vakavien kliinisten seurauksien vuoksi biologisessa ja lääketieteellisessä ammattikunnassa syntyi suurta kiinnostusta uutta menetelmää kohtaan, jolla analysoidaan glukoositasoa virtsassa ja seerumissa. Tämä voimakas kiinnostus johti useiden menetelmien kehit-20 tämiseen, jotka poikkeavat näyttävästi liuoskemiallisista edeltäjistään. Näissä käytetään hyväksi monimutkaisia biokemiallisia systeemejä, jotka voivat olla liitettynä kuiviin "kasta-ja-lue"laitteisiin, joita käytetään liuos- ja suspensiomenetelmissä, tai yhdessä spektrofotometrien tai 25 muiden laitteistojen kanssa.
Yksi näistä uusista menetelmistä, jota erityisen hyvin voidaan käyttää sokerianalyysissä, on entsymaattinen systeemi, jossa analyytti, esimekriksi glukoosi, toimii tietyn entsyymin substraattina, ja jossa reaktiotuotteet 30 pystyvät saamaan aikaan havaittavan reaktion niiden indikaattoreiden kanssa, jotka tunnetaan alalla "bentsidiini-tyyppisinä indikaattoreina". Näille yhdisteille voi tapahtua värinmuutoksia vetyperoksidin ja entsyymiperoksidaasin läsnäollessa. Glukoosi/glukoosioksidaasisysteemi on esi-35 merkkinä aikaisemmin tunnetusta systeemistä, jossa glukoosi hapettuu glukonihapoksi ja samanaikaisesti muodostuu ve- 4 80072 typeroksidia (H202) seuraavasti:
CHo0H
.2 ch2oh ch2oh
H/ °\OH tt \—O I OH
Y glukoosioksidaasi y \ H2° ^ y* r_n 5 HK-f /---\ HÖSQH H/ H/
H / \ " °H H OH
FAD* FADH2** V^°2 h2®2 &-glukonilaktoni D-glukonihappo 10 P-D-glukoosi *Koentsyymi-flaviiniadeniinidinukleotidi **Sama, pelkistetty muoto
Juuri vetyperoksidin samanaikainen muodostuminen on perustana seuraavalle indikaattoriin liittyville vaiheille 15 ja havaittavalle värin muodostumiselle tai muille havaittaville reaktioille. Niinpä bentsidiinityyppinen indikaattori reagoi vetyperoksidin ja peroksidaasin läsnäollessa muuttamalla valon absorboimiskykyään.
Käytännössä tätä menetelmää käytetään nykyisin hyväk-20 si glukoosianalyyseissä "kasta-ja-lue"-reagenssiliuskojen muodossa, esim. niissä, joita Ames Division of Miles Laboratories, Inc. markkinoi tavaramerkillä CLINISTIX® ja muut. Yleisesti ottaen nämä käsittävät muoviliuskan, jonka toiseen päähän on kiinnitetty imevä paperiosa, joka on kyl-25 lästetty sopivilla entsyymeillä, indikaattoriyhdisteillä ja puskuroivilla aineilla tärkeimpinä vaikuttavina aineosina. Niitä käytetään kastamalla reagenssia sisältävä pää koenäytteeseen, poistamalla se ja vertaamalla paperissa muodostunutta väriä standardivärikartan kanssa, joka on 30 kalibroitu erilaisilla glukoosikonsentraatioilla.
On julkaistu useita patentteja, jotka koskevat samantyyppisiä glukoosianalyysisovellutuksia kuin esillä oleva keksintö. US-patentissa 2 848 308, Alfred H. Free on kuvattu perusentsyymikemia, jossa glukoosioksidaasia, peroksi-35 daasia ja bentsidiinityyppistä indikaattoria käytetään reagenssiliuskassa glukoosin määrittämiseksi virtsasta tai
H
5 80072 muista kehon nesteistä. US-patentissa 3 753 863, Speck, kuvataan, alempien alkaanipolyolien käyttöä "stabiloimaan" bentsidiinityyppisiä indikaattoriliuoksia. US-patentti 4 071 317, Lam, koskee piilevälle verelle herkän koostu-5 muksen stabilointia käyttäen tiettyjä sulfoni-, sulfoksidi-ja amidiyhdisteitä laimennusaineina koostumuksen valmistuksessa. Tämä jälkimmäinen koostumus käsittää orgaanisen hyd-roperoksidiyhdisteen, ja indikaattoriyhdisteen, kuten bentsidiinityyppisen indikaattorin.
10 US-patentit 4 336 330 ja 4 318 985 käsittelevät glu- koosikonsentraatioiden määritystä laajalla alueella. Tämä laaja toiminta-alue perustuu tiettyjen polymeerien käyttöön reagenssia sisältävässä kantajamatriisissa. Jälkimmäisessä patentissa on kuvattu spesifisesti silloitetun ureaformal-15 dehydihartsin käyttö, kun taas edellisessä käytetään hyväkseen polystyreeniä. Kummassakin näistä patenteista, kuten myöskään muissa yllämainituissa patenteissa ei ole mitään mainintaa keksinnön mukaisen seoksen käytöstä indikaattorina glukoosimääritykseen. Mainituissa patenteissa ei ole 20 myöskään mitään mainintaa askorbaatin kestävyydestä.
Kuten sokerianalyysin tapauksessa, peroksidaasi- tai pseudoperoksidaasianalyysejä varten on kehitelty vuosien aikana useita menetelmiä, jotka perustuvat väriä muodostavien indikaattoreiden hapetuksen entsyyminkaltaiseen kata-25 lyysiin vetyperoksidin läsnäollessa. Etupäässä nämä käsittävät liuoskemiallisia menetelmiä ja "kasta-ja-lue"-tyyppisiä reagenssia sisältäviä liuskoja. Tyypillinen esimerkki edellisestä on kuvattu julkaisussa Richard M. Henry, et ai. Clincal Chemistry Principles and Techniques, Hagertown, 30 Maryland: Harper and Row (1974), ss. 1124-1125. Tämä menetelmä käsittää jääetikan (puskuri), difenyyliamiinin (indikaattori) , ja vetyperoksidin käytön. Vaikka tällaiset . . liuosmenetelmät ovat osoittuneet analyysikelpoisiksi, niis sä on kuitenkin runsaasti ilmeisiä puutteita, joista ei 35 vähäisimpänä heikko reagenssipysyvyys ja riittämätön herkkyys. Sellaisille reagenssiliuoksille on tyypillistä sta- 6 80072 biilisuuden väheneminen (ergo-herkkyys) niin nopeasti, että tuoreita reagenssiliuoksia täytyy valmistaa muutaman päivän varastoinnin jälkeen, mikä vaatii ylimääräistä työtä ja on taloudellisesti epäedullista, koska kalliita reagensseja 5 tuhlataan.
Toisessa menetelmässä peroksidatiivisesti aktiivisten aineiden määrittämiseksi, jota useimmat kliiniset analyytikot nykyisin pitävät edullisena, käytetään hyväksi "kasta-ja-lue"-reagenssiliuskoja. Tyypillisiä tällaisia laitteita 10 ovat reagenssiliuskat, joita valmistaa Ames Division of
Miles Laboratories, Inc. ja myydään nimellä HEMASTIX®. Nämä käsittävät pääosaltaan huokoisen paperimatriisin, joka on kiinnitetty muoviselle liuskalle tai kantajalle. Matriisi on kyllästetty puskuroidulla seoksella, jossa on orgaa-15 nista hydroperoksidia ja o-tolidiinia. Upotettaessa liuska nesteeseen, joka käsittää hemoglobiinia, myoglobiinia, punasoluja tai muita pseudoperoksidaaseja, matriisissa kehittyy sininen väri, jonka intensiteetti on suoraan verrannollinen peroksidatiivisesti aktiivisen aineen konsent-20 raatioon näytteessä. Niinpä vertaamalla matriisissa kehittynyttä väriä standardivärikarttaan analyysin tekijä voi määrittää puolikvantitatiivisesti näytteessä olevan tuntemattoman aineen määrän.
Reagenssiliuskoilla on pääasiassa kaksi etua verrat-25 tuna liuoskemiallisiin menetelmiin: liuskat ovat helpompia käyttää, koska ei vaadita reagenssien valmistusta eikä tarvita analyysilaitteistoja; ja saavutetaan parempi reagenssien stabiilisuus, mistä on seurauksena suurempi tarkkuus, herkkyys ja taloudellisuus.
30 Kuten edellä olevasta voidaan nähdä, kirjallisuusta löytyy hyvin runsaasti menetelmiä glukoosin toteamiseksi ja/tai sen konsentraatioiden määrittämiseksi vesisystee-meistä. On kuitenkin eräs vakava ongelma, joka on tyypillinen monille näistä systeemeistä ja joka tekee ne ainakin 35 epämukaviksi ja pahimmassa tapauksessa epäluotettavan epätarkoiksi. Tämä ongelma johtuu askorbaatti-ionin läsnä-
II
7 80072 olosta koenäytteessä. Analysoitaessa esimerkiksi, virtsan glukoosia, kun potilaan ruokavaliossa on runsaasti C-vita-miinia (askorbiinihappoa), tulokset monista aikaisemmin tunnetuista glukoosikokeista ovat virheellisesti negatii-5 visia, tai antavat lukeman, joka on alempi kuin todellinen glukoosikonsentraatio. Tämä ongelma aiheutuu askorbiiniha-pon taipumuksesta pelkistää indikaattori välittömästi sen hapetuksen aikana, aiheuttaen siten viivästymävaiheen, jonka aikana värinmuutos myöhästyy. Niinpä jos glukoosikoe 10 perustuu värinmuodostukseen tietyllä nopeudella, askorbii-nihapon läsnäolo pienentää tätä nopeutta antaen siten vääriä todellista pienempiä tuloksia. Tämä keksintö puolestaan tarjoaa kaksinkertaisen edun verrattuna aikaisemmin käytettyihin systeemeihin. Tämä keksintö mahdollistaa glukoosi-15 analyysit epätavallisen laajalla konsentraatioalueella, so. alueella 0 - noin 5000 mg/dl. Samalla systeemin on yllättäen havaittu olevan resistentti askorbiinihapon haitallisille vaikutuksille.
On olemassa toinenkin aikaisemmin tunnettu kirjalli-20 suuden alue, joka liittyy esillä olevaan keksintöön - nimittäin kirjallisuus, joka käsittelee reaktiota 4-aminoan-tipyriinin (tässä myöhemmin 4-AAP) ja fenoliyhdisteiden välillä. Tiedetään, että sininen kromofori kehittyy 4-AAP:n ja kromatrooppisen hapon hapettavasta kytkennästä, Wong et 25 ai., Inter J. of Biochem., 13, 159-163 (1981). Niinpä 4-AAP kykenee kytkeytymään kromotrooppisen hapon kanssa peroksidin läsnäollessa muodostaen sinisen värin. Tunnettua on myös katekolien toteaminen käyttäen 4-AAP:tä antamaan purppuraväri, LaRue et ai., Anal. Chim. Acta., 31, 400-403 30 (1964). Äskettäin esitetty kirjallisuusviite, joka käsit telee fenolin määritystä käyttäen 4-APP:tä, viittaa häiriöön, joka johtuu tiettyjen hapettimien läsnäolosta systeemissä. Monien hapettavien ionien joukossa I^C^n on mainittu johtavan virheellisiin negatiivisiin tuloksiin.
35 Norwitz et ai., Analytical Chemistry, 51, 1632-1637 (1979). On myös kuvattu systeemi, jossa käytetään hyväksi 4-AAP:tä 8 80072 ja 3,5-dikloori-2-hydroksibentseenisulfonihappoa virtsa-hapon suorassa entsymaattisessa analyysissä, Fossati et ai. Clinical Chemistry, 26, 227-231 (1980).
Neljässä edellä mainitussa kirjallisuusviitteessä, 5 jotka käsittelevät 4-AAP:tä ja fenolisia kytkentäaineita, ei ole mainintaa sellaisesta glukoosianalyysistä, jossa glukoosi konsentraatiot voitaisiin todeta laajalta alueelta. Lisäksi askorbaattihäiriöön liittyvää ongelmaa ei mitenkään ole mainittu. Tämä keksintö käsittelee suoraan 10 molempia näitä näkökohtia, ja lopputuloksena on laaja-aluei-nen glukoosikoe, jolla on minimaalinen askorbaattiherkkyys. Edelleen Norwitzin kirjallisuusviite, johon edellä viitattiin, osoittaa, että 4-AAP-analyysimenetelmä on altis virheille läsnäolevien hapettavien aineiden takia. Artikkelis-15 sa arvellaan tämän aiheutuvan fenolin hapetettavasta hajoamisesta.
Yhteenvetona tunnetusta tekniikan tasosta sokeria koskeva kemia alkoi ilmestyä analyyttiselle näyttämölle niinkin aikaisin kuin 19. vuosisadan puolivälissä (Fehlingin 20 liuos ja Tollensin reagenssi). Useimmat "puhtaasti kemiallisista" systeemeistä, joita on sen jälkeen ilmestynyt on suureksi osaksi korvattu biokemiallisilla systeemeillä, erityisesti niillä, jotka käsittävät sokerioksidaasin, peroksidaasin ja bentsidiinityyppisen peroksidiherkän indi-25 kaattorin. Nyt pyritään mittaamaan glukoosia tai muuta analyyttiä laajalla konsentraatioalueella, ja lisäksi on yhtä välttämätöntä, että mitatut tulokset eivät sisällä askorbiinihaposta (C-vitamiinista) johtuvia virheitä. Tämä keksintö mahdollistaa nämä molemmat halutut parannukset.
30 Esillä oleva keksintö koskee koostumusta, koelait teistoa ja -menetelmää glukoosin toteamiseksi ja/tai sen konsentraation määrittämiseksi nestemäisestä koenäytteestä. Koostumuksella pystytään määrittämään glukoosikonsentraatio laajalla alueella, so. alueella 0 - 5000 mg glukoosia 100 35 mlrssa koenäytettä. Koostumus kestää lisäksi näytteessä läsnäolevan askorbaatin aiheuttaman häiriön. Koostumus sill 9 80072 sältää glukoosioksidaasia, peroksidaasia ja indikaattorina, joka pystyy tuottamaan havaittavan reaktion peroksidaasin ja H202:n läsnäollessa, kahden yhdisteen seosta. Toisella on rakenne 5 R' r2n r 10 ja toisella on rakenne
OH
Jsr jossa R-ryhmät ovat samanlaisia tai erilaisia ja merkitsevät vetyä tai alempaa alkyyliä, R' on fenyyli ja RM on 20 alempi alkyyli.
Kuviot 1-3 on annettu tämän keksinnön lisävalaisemi-·. : seksi. Ne ovat graafisia esityksiä esimerkeistä I-III saa duista tuloksista. Kuviot 1 ja 2 kuvaavat askorbaatin pel-I kistysvaikutuksista aiheutuvan indikaattorin värin häviämi- 25 sen voimakasta vähenemistä, joka tässä keksinnössä on oivallettu, sekä merkittävästi kohonnutta värinmuodostumis-nopeutta. Kuvio 3 kuvaa tässä kuvattujen indikaattoreiden tarkkuutta glukoosin määrityksessä.
Kuviossa 1 värinkehittymisen nopeus (valkoiset pyl--: 30 väät) ja häipymisnopeus (viivoitetut pylväät) esitetään graafisesti (/umooleina sekunnissa) 4-amino-antipyreeni/4-metyylikatekolille (vasen puoli), aniliinille (keskellä) ja m-anisidiinille (oikea puoli), tässä järjestyksessä.
Kuviossa 2 värinkehittymisnopeus (valkoiset pylväät) 35 ja häipymisnopeus (viivoitetut pylväät), ilmaistuna muutoksena absorbanssiyksiköissä sekunnissa, esitetään graa- 10 80072 fisesti seuraaville indikaattoreille (vasemmalta): kateko-li/4-aminoantipyreeni; 4-aminoantipyreeni; 3,5-dikloori-2-hydroksibentseenisulfonihappo; fenoli; kromotrooppinen happo.
5 Kuviossa 3 näkyvä glukoosikonsentraatio (mg/dl) esi tetään graafisesti todellista glukoosikonsentraatiota (mg/dl) vastaan. Ylempi käyrä esittää standardia, keskimmäinen käyrä systeemiä 4-aminoantipyreeni/4-metyylikateko-li, jossa on mukana 50 mg/dl askorbaattia ja alempi käyrä 10 systeemiä 2-amino-8-naftoli-3,6-disulfonaatti, jossa on mukana 50 mg/dl askorbaattia.
Seuraavassa esityksessä termejä R, R' ja R" käytetään kuvattaessa yhdisteitä, jotka muodostavat keksinnön mukaisen indikaattorin. R käsittää vedyn ja alemman alkyylin.
15 "Alemmalla alkyylillä" tarkoitetaan alkyyliryhmää, jossa on 1 - noin 6 hiiliatomia. Mukana ovat sellaiet alkyyli-ryhmät kuin metyyli, etyyli, n-propyyli, isopropyyli, n-bu-tyyli, isobutyyli, tert-butyyli ja pentyylin ja heksyylin eri isomeerit.
20 Koostumus sisältää indikaattorin lisäksi glukoosi- oksidaasi- ja peroksidaasientsyymit. Edullinen peroksidaa-sientsyymi on piparjuuriperoksidaasi, vaikka muutkin ovat yhtä tehokkaita keksinnössä. Glukoosioksidaasia voidaan saada sienten, esim. Aspergilluksen ja Penicilliumin mysee-25 leistä, kuten myös erilaisilta kaupallisilta toimittajilta.
Indikaattori on olennainen komponentti keksinnön mukaisessa koostumuksessa, koska sen ansiosta saavutetaan laaja konsentraatioalue ja samanaikaissti resistenssi niitä haittavaikutuksia vastaan, joita askorbaatilla on 30 koetuloksiin. Se käsittää seoksen yhdisteistä, joista toinen on 4-AAP tai sen johdannainen, toisen ollessa 4-alkyy-likatekoli.
Il n 80072
Keksinnön mukainen laite käsittää kantajamatriisin, johon on liitetty keksinnön mukaista koostumusta nopeiden, luotettavien tulosten saamiseksi glukoosianalyysissä. Kanta jamatriisi on tavallisesti huokoinen aine, kuten suoda-5 tinpaperi. Muita kantajamatriisina käyttökelpoisia aineita ovat huopa, huokoiset keramiikkaliuskat, kudotut tai matto-lasikuidut, puu, kangassienimateriaali ja savipitoiset aineet. Toinen vaihtoehto on muovipinta, kuten polystyreeni-kalvo, joka voidaan päällystää keksinnön mukaisella koos-10 tumuksella käyttäen sopivia sideaineita. Kaikki tällaiset kantajamatriisimateriaalit ovat sopivia käytettäväksi tässä keksinnössä muiden lisäksi. Suodatinpaperin on havaittu olevan erityisen edullinen.
Laitteen valmistuksessa koostumus valmistetaan kuten 15 osoitetaan esimerkeissä jäljempänä ja liitetään sitten sopivaan kantajamatriisiin. Esimerkiksi, kun käytetään edullista matriisimateriaalia, suodatinpaperia, paperi upotetaan koostumuksen liuokseen, poistetaan ja kuivataan. Toisessa edullisessa suoritusmuodossa koostumusta sisältävä 20 paperi kiinnitetään polystyreeniliuskan toiseen päähän, toisen pään toimiessa kahvana.
Laitetta käytetään sovellettaessa keksinnön mukaista menetelmää käytännössä saattamalla se kosketukseen koenäyt-teen kanssa, jonka epäillään sisältävän glukoosia. Sen 25 liuskaan kiinnitetyssä versiossa, suodatinpaperin sisältävä pää upotetaan koenäytteeseen (esimerkiksi virtsaan), poistetaan, ja todetaan reaktio, kuten muutos värissä tai prosentuaalisessa valon absorbanssissa (tai heijastumissuh-teessa) tietyllä aallonpituudella. Siinä tapauksessa, että 30 värin ilmaantuminen tai muutos on kyseinen havaittava reaktio voidaan käyttää vertailuvärikarttaa, jolloin saadaan aikaan glukoosikonsentraation puolikvantitatiivinen määritys vertaamalla laitteen värinkehitystä värikartan laattojen kanssa, joista jokainen edustaa laitteen kehittämää vä-35 riä standardiglukoosiliuoksilla, joilla on erilaiset tunnetut konsentraatiot.
12 80072
Useimmissa aikaisemmin tunnetuissa "kasta-ja-lue"-glukoosikoelaitteissa käytetään reagensseja, jotka pystyvät määrittämään glukoosia konsentraatioalueella 0 - 500 mg/dl. Tämä keksintö mahdollistaa analyysit yhtä suuruusluokkaa 5 korkeammalle alueelle, so. 0 - 5000 mg/dl. Edelleen, kun aikaisemmat laitteet ovat herkkiä askorbaatille antaen usein virheellisiä, negatiivisia tuloksia, keksinnön mukainen koostumus ja laite osoittavat odottamatonta kestävyyttä askorbaattia kohtaan. Nämä edut mahdollistavat laajalla 10 alueella puolikvantitatiiviset tulokset, jotka ovat luotettavia huolimatta askorbaatin läsnäolosta koenäytteessä.
Edullinen tapa kiinnittää kyllästetty suodatinpaperi alustalle, kuten polystyreeniliuskalle, on käyttää kaksipuolista teippiä. Erityisen sopivaa on tuote nimeltä Double 15 Stick, jota markkinoi 3M-yhtiö. Suodatinpaperi voidaan kiinnittää toiselle puolelle teippiä, liuska muotoiltuna sopivankokoiseksi, ja liimata muoviliuskan toiseen päähän teipin toisen liimapuolen avulla.
Esimerkkejä 20 Seuraavat esimerkit annetaan kuvaamaan keksintöä edel leen. Edulliset suoritusmuodot kuvataan, ja asiaankuuluvat suoritustiedot esitetään ja analysoidaan. Kuitenkin esimerkkien on tarkoitus vain valaista keksintöä, eivätkä ne ole millään tavoin tarkoitettu rajoittamaan keksinnön suoja-25 piiriä.
Esimerkki I - Erilaiset indikaattorit
Koe suoritettiin erilaisten indikattorien tutkimiseksi, mukaanluettuna tämän keksinnön mukainen indikaattori, tarkoituksena määrittää (a) askorbaatin vaikutukset niiden 30 peroksidilla katalysoituun hapetukseen, ja (b) värinkehi-tyksen suhteelliset nopeudet. Kokeesta saadut tiedot osoittavat, että tämän keksinnön mukainen indikaattori (4-amino-antipyriini ja 4-metyylikatekoli) on moninkerroin parempi kuin aniliini ja m-anisidiini molemmissa suhteissa. Nämä 35 tulokset ilmenevät selvästi kuvasta 1.
Il 13 80072
Ekvimolaariset määrät indikaattoreita käytettiin erilisissä reagenssiliuoksissa, keksinnön mukaisen indikaattorin sisältäessä 4-AAP:tä ja 4-metyylikatekolia (4-MC) ekvimolaariset määrät, summan ollessa sama kuin kaikkien mui-5 den indikaattorien moolimäärät. Niinpä kaikki valmistetut koostumukset sisälsivät indikaattoria lukuunottamatta samoja reagensseja, ja kaikki koostumukset sisälsivät ekvimolaariset määrät niitä vastaavaa indikaattoria. Käytetyt indikaattorit olivat 4-AAP/4-MC, aniliini ja m-anisidiini.
10 Kolme 1,0 ml:n kyvettiä täytettiin seuraavilla ai neilla annetuissa konsentraatioissa tislatussa vedessä, lopputilavuus 1,25 ml liuosta.
Aine Konsentraatio
Peroksidaasi (puskuroitu 15 pH 5,5:een) 30 yug/ml
Indikaattori 2,0 mM
Valmistettiin kolme liuosta, jotka sisälsivät ylläolevat aineet; ensimmäinen sisälsi 4-AAP:tä ja 4-MC:tä indikaattorina, kumpaakin yhdistettä oli läsnä 1,0 mM:n kon-20 sentraatiossa; toinen liuos sisälsi 2,0 mM aniliinia; ja kolmas sisälsi 2,0 mM m-anisidiinia.
Jokainen liuos tutkittiin spektrofotometrisesti lisäämällä H2C>2:ta pitoisuuteen 2,0 mM ja vastaavat värin-kehityksen nopeudet havainnoitiin aikayksikköä kohden yli 25 2 minuutin jaksoina.
Kun värinkehtiyksen havainnointia oli jatkettu 2 minuuttia peroksidin lisäyksen jälkeen, lisättiin askorbaat-tia pitoisuuteen 0,5 mM. Saatu seos havainnoitiin sitten fotometrisesti askorbaatin aiheuttamasta indikaattorin pel-30 kistymisestä johtuvan värin häviämisen nopeuden mittaamiseksi. Nopeustiedot, ilmaistuna yksikköinä yumoolia/s, ovat seuraavat:
Indikaattori Värinkehityksen Värin häviämisnopeus nopeus_ 35 4-AAP/4-MC 28 5
Aniliini 14 20 m-Anisidiini 5 50 14 80072
Tiedot on kuvattu graafisesti kuvassa 1. Kuten voidaan nähdä, 4-AAP/4-MC-indikaattori-systeemillä värinkehi-tysnopeus oli suurempi ja askorbaatin aiheuttama värinhä-vimäisnopeus oli pienempi kuin aniliinilla tai m-anisidii-5 nilla. Väistämätön johtopäätös on, että 4-AAP/4-MC on huomattavasti kestävämpi askorbaatin aiheuttamaa häiriötä vastaan, ja mahdollistaa luotettavan, laaja-alueisen kokeen glukoosille.
Esimerkki II - Erilaiset fenolikompleksit 10 Suoritettiin koe, jossa verrattiin erilaisten feno- liyhdisteiden vaikutusta 4-AAP:hen f^C^n ja peroksidaasin läsnäollessa. Saadut tulokset on esitetty graafisesti kuvassa 2 ja ne osoittavat, että 4-MC, keksinnön mukainen yhdiste, on huomattavasti parempi kuin muut fenolijohdan-15 naiset yhdessä 4-APP:n kanssa tuottamaan nopeampi värinke-hitys ja hitaampi värin häviäminen, joka johtuu askorbaatin vastavaikutuksesta.
Niinpä 4-AAP hapetettiin i^C^lla ja peroksidaasilla, joko yksin tai eri fenoliyhdisteiden kanssa, erityisesti 20 fenolin, kromotrooppisen hapon (CTA), 4-metyylikatekolin (keksinnön mukainen) ja 3,5-dikloori-2-hydroksibentseeni-sulfonihapon (DHSA) kanssa. Värinkehityksen nopeutta tutkittiin fotometrisesti aallonpituudella, jossa käytetty hapetettu indikaattori osoitti voimakkainta valon absor-25 banssia. Värin muodostumisnopeus mitattiin ja sitä verrattiin värin muodostumisnopeuteen fenoliyhdisteen puuttuessa. Havaitut tiedot vakioitiin olettamalla värinmuodostumisno-peuden 4-AAP:lie yksin olevan yhtä kuin 1,00.
Jokaiseen viidestä kyvetistä lisättiin vesiliuos, 30 joka sisälsi 10 mM 4-aminoantipyriiniä. Neljään kyvettiin lisättiin fenoliyhdistettä konsentraatioon 10 mM. Jokainen liuos oli 0,311 M sitraatin suhteen ja niiden pH oli 5,0. Piparjuuriperoksidaasia lisättiin konsentraatioon 50 mg/^ug/ml, riippuen entsyymin aktiivisuudesta. Sitten lisät-35 tiin H-2°2 lopullisen konsentraatioon 10 mM. Värinkehityksen suhteelliset nopeudet mitattiin ja saadut tulokset vakioitiin samaan entsyymikonsentraatioon.
Il 15 80072
Jokaisessa analyysissä, kun optinen tiheys oli saavuttanut arvon 0,6, lisättiin nopeasti askorbiinihappoa antamaan konsentraatioon 200 /uM, ja muutos valon absor-banssissa mitattiin. Tiedot kokeesta annetaan seuraavassa taulukossa, ja esitetään graafisesti kuvassa 2.
5 Värin muodos- (Δ & A/min) Pel- tumisen suht. kistymisnopeus
Aallonpituus Kytkijä nopeus_ askorbaatin kanssa 530 ei mikään 1,00 0,281 500 4-MC 18,5 0,0599 10 520 DHSA 2,08 0,455 510 fenoli 1,34 0,500 590 CTA 1,98 0,148
Yllä olevasta selviää, että 4-metyylikatekoli muo-15 dostaa värin aminoantipyriinin kanssa monta kertaa nopeammin kuin mikään muu tutkittu kytkijä ja että hapetetun indikaattorin väi on kestävämpi askorbiinihapon aiheuttamaa vaalenemista vastaan.
Esimerkki III - Koelaitteiden valmistus 4-AAP/4-MC:n 20 ja 2-amino-8-naftoli-3,6-disulfoni- hapon kanssa__
Suoritettiin koe, jossa koelaitteet glukoosin mittausta varten valmistettiin. Toinen laitesarja sisälsi indikaattorina 4-AAP:tä ja 4-MC:tä; toinen 2-amino-8-25 naftoli-3,6-disulfonihappoa. Molemmilla indikaattorisys-teemeillä oli suunnilleen sama ekstinktiokerroin.
Valmistettiin kastoliuos, joka sisälsi seuraavia aineita 16 80072
Polyvinyylipyrrolidoni (15 g/ml H20;ssa) 2,0 ml
Polyoksietyloitu oleyylialkoholi (GAF Co. ON 870,5 g/ml H20:ssa) 1,0 ml 5 Glukoosioksidaasi (5000 U/ml) 1,6 ml
Peroksidaasi (3 mg/ml 1,0 M sit-raattipuskurissa pH = 5,5) 2,0 ml 4-metyylikatekoli (1,0 M etanolissa) 1,0 ml 4-aminoantipyr iini (1,0 M etanono-10 lissa) 1,0 ml
Deionisoitua vettä 1,4 ml
Kokonaistilavuus 10,0 ml
Palanen Whatman 31ET-suodatinpaperia kastettiin tähän liuokseen ja kuivattiin 60°C:ssa 15 minuuttia.
15 Samoin valmistettiin koepaperi (laite) muuten identtisestä liuoksesta, paitsi että 2,0 ml IM 2-ami-no-8-naftoli-3,6-disulfonihappoa etanolissa käytettiin 4-AAP:n ja 4-MC:n sijasta.
Molemmat laitteet upotettiin lyhyeksi aikaa glu-20 koosiliuoksiin, joilla oli tunnetut konsentraatiot, ja pidettiin lämpökaapissa 60 sekunnin ajan. Toista glukoosiliuossarjaa, joka sisälsi 50 mg/dl askorbiini-happoa, käytettiin mittaamaan askorbaatin vaikutuksia. Molempien sarjojen laitteet kalibroitiin kastamal-25 la glukoosiliuokseen, jossa ei ollut askorbaattia, pitämällä lämpökaapissa 60 sekuntia ja havainnoimalla värinmuodostus. Seuraavaksi laitteet tutkittiin yhdessä askorbaattia sisältävien glukoosiliuoksien kanssa käyttäen samaa menetelmää. Tulokset on lueteltu alla ja 30 esitetty graafisesti kuvassa 3.
Il 17 80 072
Todellinen Näkyvä glukoosi, mg/dl glukoosikonsen- aminonaftoiidi- traatio mg/dl 4-AAP/4-MC sulfonaatti_ 0 0 0 c 50 20 0
D
100 70 jälkiä 250 150 50 500 300 80 1000 800 200 1Q 2000 1500 500 5000 5000 1300
Tulokset osoittavat selvästi aminoantipyriini/me-tyylikatekolia sisältävien reagenssiliuskojen paremman askorbaattikestävyyden.
15
Claims (5)
1. Koostumus glukoosin toteamiseksi ja/tai sen pitoisuuden määrittämiseksi koenäytteestä, joka koostumus sisäl- 5 tää glukoosioksidaasia, peroksidaasia ja indikaattorin, joka pystyy tuottamaan havaittavan reaktion peroksidaasin ja Η202:η läsnäollessa, tunnettu siitä, että indikaattori käsittää kahden yhdisteen seoksen, joista toisella on rakenne 10 yr R2ir 15 ja toisella on rakenne OH joissa R-ryhmät ovat samanlaisia tai erilaisia ja merkitsevät vetyä tai alempaa alkyyliä, R1 on fenyyli ja R" on 25 alempi alkyyli.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen koostumus, tunnettu siitä, että yhdisteet ovat 4-aminoantipyriini ja 4-metyylikatekoli.
3. Koelaite glukoosin toteamiseksi ja/tai sen pitoi-30 suuden määrittämiseksi koenäytteestä, tunnettu siitä, että se käsittää kantajamatriisin, johon on liitetty patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukaista koostumusta.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen laite, tunnet-t u siitä, että kantajamatriisi on paperia.
5. Menetelmä glukoosin toteamiseksi ja/tai sen pitoi suuden määrittämiseksi koenäytteestä, tunnettu sii- li 19 80072 tä, että näyte saatetaan kosketukseen patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukaisen koostumuksen tai patenttivaatimuksen 3 tai 4 mukaisen koelaitteen kanssa ja havaittava reaktio todetaan . 20 8 0 0 7 2
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/404,445 US4460684A (en) | 1982-08-02 | 1982-08-02 | Ascorbate-resistant broad range glucose test composition, test device and method |
| US40444582 | 1982-08-02 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI832756A0 FI832756A0 (fi) | 1983-07-29 |
| FI832756A FI832756A (fi) | 1984-02-03 |
| FI80072B FI80072B (fi) | 1989-12-29 |
| FI80072C true FI80072C (fi) | 1990-04-10 |
Family
ID=23599633
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI832756A FI80072C (fi) | 1982-08-02 | 1983-07-29 | Askorbatresistant, pao brett omraode verkande glukostestkomposition, testapparat och -metod. |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4460684A (fi) |
| EP (1) | EP0102504B1 (fi) |
| JP (1) | JPS5948099A (fi) |
| AT (1) | ATE15695T1 (fi) |
| AU (1) | AU540076B2 (fi) |
| CA (1) | CA1185154A (fi) |
| DE (1) | DE3360843D1 (fi) |
| DK (1) | DK155052C (fi) |
| ES (1) | ES524637A0 (fi) |
| FI (1) | FI80072C (fi) |
| IE (1) | IE55408B1 (fi) |
| NO (1) | NO165202C (fi) |
| ZA (1) | ZA832892B (fi) |
Families Citing this family (38)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4621049A (en) * | 1984-11-19 | 1986-11-04 | Miles Laboratories, Inc. | Enzymatic high range glucose test |
| US4898813A (en) * | 1986-04-04 | 1990-02-06 | Albarella James P | Catalytic test composition intended to produce a range of colors |
| US5001054A (en) * | 1986-06-26 | 1991-03-19 | Becton, Dickinson And Company | Method for monitoring glucose |
| US4981779A (en) * | 1986-06-26 | 1991-01-01 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus for monitoring glucose |
| DE3625852A1 (de) * | 1986-07-31 | 1988-02-04 | Miles Lab | Verbesserte testmittel und verfahren zu deren herstellung |
| US4935346A (en) | 1986-08-13 | 1990-06-19 | Lifescan, Inc. | Minimum procedure system for the determination of analytes |
| JPH0619346B2 (ja) * | 1986-11-17 | 1994-03-16 | コニカ株式会社 | 過酸化水素定量用分析素子 |
| GB2204951B (en) * | 1987-04-04 | 1991-04-24 | Tokuyama Soda Kk | Method for quantitative determination of polyamines |
| DE3743405A1 (de) * | 1987-05-14 | 1988-11-24 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur bestimmung von fructosamin |
| US4883764A (en) * | 1987-07-20 | 1989-11-28 | Kloepfer Mary A | Blood test strip |
| US5310680A (en) * | 1987-09-16 | 1994-05-10 | Smithkline Diagnostics, Inc. | Test for fecal occult blood |
| CA1322326C (en) * | 1987-09-16 | 1993-09-21 | Josefina Tecson Baker | Test for fecal occult blood |
| DE3732688A1 (de) * | 1987-09-29 | 1989-04-13 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur spezifischen bestimmung des serumfructosamingehalts sowie hierfuer geeignetes reagenzgemisch |
| US4965094A (en) * | 1988-12-27 | 1990-10-23 | At&T Bell Laboratories | Electroless silver coating for dielectric filter |
| GB9308411D0 (en) * | 1993-04-23 | 1993-06-09 | Celsis Ltd | Detection of biological material |
| US5447868A (en) | 1993-09-14 | 1995-09-05 | Propper Manufacturing Co. Inc. | Method, reagent and kit for the detection of fecal occult blood |
| US6270974B1 (en) | 1998-03-13 | 2001-08-07 | Promega Corporation | Exogenous nucleic acid detection |
| US6391551B1 (en) | 1998-03-13 | 2002-05-21 | Promega Corporation | Detection of nucleic acid hybrids |
| US7090975B2 (en) * | 1998-03-13 | 2006-08-15 | Promega Corporation | Pyrophosphorolysis and incorporation of nucleotide method for nucleic acid detection |
| US6312902B1 (en) | 1998-03-13 | 2001-11-06 | Promega Corporation | Nucleic acid detection |
| US6268146B1 (en) | 1998-03-13 | 2001-07-31 | Promega Corporation | Analytical methods and materials for nucleic acid detection |
| US6277578B1 (en) | 1998-03-13 | 2001-08-21 | Promega Corporation | Deploymerization method for nucleic acid detection of an amplified nucleic acid target |
| US6335162B1 (en) | 1998-03-13 | 2002-01-01 | Promega Corporation | Nucleic acid detection |
| US6159693A (en) * | 1998-03-13 | 2000-12-12 | Promega Corporation | Nucleic acid detection |
| US6235480B1 (en) | 1998-03-13 | 2001-05-22 | Promega Corporation | Detection of nucleic acid hybrids |
| US6270973B1 (en) | 1998-03-13 | 2001-08-07 | Promega Corporation | Multiplex method for nucleic acid detection |
| US6703211B1 (en) | 1998-03-13 | 2004-03-09 | Promega Corporation | Cellular detection by providing high energy phosphate donor other than ADP to produce ATP |
| US6535753B1 (en) * | 1998-08-20 | 2003-03-18 | Microsense International, Llc | Micro-invasive method for painless detection of analytes in extra-cellular space |
| US6458326B1 (en) | 1999-11-24 | 2002-10-01 | Home Diagnostics, Inc. | Protective test strip platform |
| US6541266B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-04-01 | Home Diagnostics, Inc. | Method for determining concentration of an analyte in a test strip |
| US6525330B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-02-25 | Home Diagnostics, Inc. | Method of strip insertion detection |
| US6562625B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-05-13 | Home Diagnostics, Inc. | Distinguishing test types through spectral analysis |
| US9547000B2 (en) * | 2012-08-29 | 2017-01-17 | 7905122 Canada Inc. | Chromogenic absorbent material for animal litter and related chromogenic solution |
| CA3174465A1 (en) | 2014-02-27 | 2015-09-03 | 7905122 Canada Inc. | Chromogenic absorbent material for animal litter |
| CA2962672C (en) | 2014-10-01 | 2023-03-21 | 7905122 Canada Inc. | Process and apparatus for manufacturing water-absorbing material and use in cat litter |
| AU2016401104B2 (en) | 2016-04-01 | 2022-04-07 | 7905122 Canada Inc. | Water-absorbing material and uses thereof |
| MX2019004971A (es) * | 2016-10-28 | 2019-10-30 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc | Deteccion de acido ascorbico en una muestra de orina. |
| CN110082347B (zh) * | 2019-05-30 | 2021-12-24 | 中国科学院成都生物研究所 | 一种简易的尿糖定量检测方法以及尿糖定量检测试剂盒 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT986838B (it) * | 1972-05-12 | 1975-01-30 | Sclavo Inst Sieroterapeut | Complesso di reagenti per la deter minazione enzimatica del glucosio sistema glucosio ossidasi perossi dasi con metodo manuale e automati co con lettura a termine o in cinetica |
| IT1123670B (it) * | 1976-11-08 | 1986-04-30 | Sclavo Inst Sieroterapeut | Composizione adatta alla determinazione enzimatica del glugosio |
| NL7801413A (nl) * | 1977-03-09 | 1978-09-12 | Hoffmann La Roche | Peroxydasebepaling. |
| US4098574A (en) * | 1977-08-01 | 1978-07-04 | Eastman Kodak Company | Glucose detection system free from fluoride-ion interference |
| DE2856487A1 (de) * | 1977-12-29 | 1979-07-12 | Wako Pure Chem Ind Ltd | Verfahren zur bestimmung von peroxidischen substanzen und hierfuer brauchbare verbindungen |
| US4119405A (en) * | 1978-02-13 | 1978-10-10 | Miles Laboratories, Inc. | Test means and method for interference resistant determination of oxidizing substances |
| US4427770A (en) * | 1982-06-14 | 1984-01-24 | Miles Laboratories, Inc. | High glucose-determining analytical element |
-
1982
- 1982-08-02 US US06/404,445 patent/US4460684A/en not_active Expired - Lifetime
-
1983
- 1983-04-21 CA CA000426399A patent/CA1185154A/en not_active Expired
- 1983-04-25 ZA ZA832892A patent/ZA832892B/xx unknown
- 1983-04-28 AU AU14038/83A patent/AU540076B2/en not_active Ceased
- 1983-07-26 AT AT83107309T patent/ATE15695T1/de not_active IP Right Cessation
- 1983-07-26 DE DE8383107309T patent/DE3360843D1/de not_active Expired
- 1983-07-26 EP EP83107309A patent/EP0102504B1/en not_active Expired
- 1983-07-29 NO NO832762A patent/NO165202C/no unknown
- 1983-07-29 FI FI832756A patent/FI80072C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-07-29 IE IE1808/83A patent/IE55408B1/en not_active IP Right Cessation
- 1983-08-01 ES ES524637A patent/ES524637A0/es active Granted
- 1983-08-01 JP JP58139513A patent/JPS5948099A/ja active Granted
- 1983-08-01 DK DK351983A patent/DK155052C/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES8501532A1 (es) | 1984-11-16 |
| AU540076B2 (en) | 1984-11-01 |
| NO832762L (no) | 1984-02-03 |
| DK351983A (da) | 1984-02-03 |
| IE831808L (en) | 1984-02-02 |
| DE3360843D1 (en) | 1985-10-24 |
| FI832756A0 (fi) | 1983-07-29 |
| NO165202B (no) | 1990-10-01 |
| DK155052B (da) | 1989-01-30 |
| CA1185154A (en) | 1985-04-09 |
| EP0102504A1 (en) | 1984-03-14 |
| ES524637A0 (es) | 1984-11-16 |
| US4460684A (en) | 1984-07-17 |
| EP0102504B1 (en) | 1985-09-18 |
| JPS5948099A (ja) | 1984-03-19 |
| NO165202C (no) | 1991-01-16 |
| AU1403883A (en) | 1984-02-09 |
| FI832756A (fi) | 1984-02-03 |
| ATE15695T1 (de) | 1985-10-15 |
| DK155052C (da) | 1989-06-26 |
| IE55408B1 (en) | 1990-09-12 |
| ZA832892B (en) | 1984-01-25 |
| FI80072B (fi) | 1989-12-29 |
| JPH047198B2 (fi) | 1992-02-10 |
| DK351983D0 (da) | 1983-08-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI80072C (fi) | Askorbatresistant, pao brett omraode verkande glukostestkomposition, testapparat och -metod. | |
| US4279993A (en) | Indicator composition and test device containing amine oxide, and method of use | |
| US4310626A (en) | Interference-resistant composition, device and method for determining a peroxidatively active substance in a test sample | |
| EP0123115B1 (en) | Ascorbate interference-resistant composition, device and method for the determination of peroxidatively active substances | |
| US4361648A (en) | Color fixed chromogenic analytical element | |
| US4071317A (en) | Test composition and device for determining peroxidatively active substances and process for preparing same | |
| JP3118029B2 (ja) | ケトン体の検定のための組成物及び方法 | |
| EP0029155B1 (en) | Stabilized composition and test device for detecting the presence of a sugar in a test sample | |
| IE60127B1 (en) | Stable composition for the determination of peroxidatively active substances | |
| US4340395A (en) | Stabilization of benzidine-type indicators with various enhancers | |
| US4290773A (en) | Stabilization of benzidine-type indicators with various enhancers | |
| US5510245A (en) | Composition and method of assaying for ketone bodies | |
| FI77896B (fi) | Komposition foer bestaemning av urinsyra eller kolesterol i ett vaetskeprov. | |
| US4340394A (en) | Stabilization of benzidine-type indicators with various enhancers | |
| EP0043469B1 (en) | Interference-resistant test device for determining a peroxidatively active substance in a test sample and method for preparing it | |
| US4380585A (en) | Stabilization of benzidine-type indicators with various enhancers | |
| US4339242A (en) | Stabilization of benzidine-type indicators with various enhancers | |
| US4339243A (en) | Stabilization of benzidine-type indicators with various enhancers | |
| US4340392A (en) | Stabilization of benzidine-type indicators with various enhancers | |
| JPS6259782B2 (fi) | ||
| US4340393A (en) | Stabilization of benzidine-type indicators with various enhancers |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: MILES INC |