FI75804B - FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV TERAPEUTISKT AKTIVT PROLINDERIVAT. - Google Patents
FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV TERAPEUTISKT AKTIVT PROLINDERIVAT. Download PDFInfo
- Publication number
- FI75804B FI75804B FI822171A FI822171A FI75804B FI 75804 B FI75804 B FI 75804B FI 822171 A FI822171 A FI 822171A FI 822171 A FI822171 A FI 822171A FI 75804 B FI75804 B FI 75804B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- group
- compound
- formula
- mixture
- cyclohexylcarbonyl
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, attached to ring carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
- C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
- C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
- C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
- C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
- C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
- C07D209/20—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals substituted additionally by nitrogen atoms, e.g. tryptophane
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pyrrole Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
1 758041 75804
Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten proliinijohdannaisten valmistamiseksiA process for the preparation of therapeutically active proline derivatives
Esillä oleva keksintö koskee menetelmää proliinijoh-5 dannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava (I)The present invention relates to a process for the preparation of proline derivatives of formula (I)
f»3 /—If »3 / —I
R-A-S-CH,CHCO-N (I) 10 \-R-A-S-CH, CHCO-N (I) 10 \ -
dooHDooh
(jossa R on aminohapon Ä-aminoryhmään liittynyt syklohek-syylikarbonyyliryhmä; A on glysiini-, sarkosiini-, D-alanii-ni-, D-leusiini-, D-metioniini-, D-glutamiini-, D-fenyyli-15 alaniini-, D-tryptofaani- tai D-fenyyliglysiinitähde ja siinä on Λ-karbonyyliryhmä, joka muodostaa rikkiatomin kanssa tioliesterisidoksen) ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi.(where R is a cyclohexylcarbonyl group attached to the Δ-amino group of the amino acid; A is glycine, sarcosine, D-alanine, D-leucine, D-methionine, D-glutamine, D-phenyl-alanine , A D-tryptophan or D-phenylglycine residue and has a Λ-carbonyl group which forms a thiol ester bond with a sulfur atom) and pharmaceutically acceptable salts thereof.
Yhdisteitä, jotka ovat samankaltaisia kuin nämä kaa-20 van (I) esittämät yhdisteet, esimerkiksi yhdisteitä, joissa R on bentsoyyli-, asetyyli- tai t-butyylioksikarbonyyliryh-mä ja A on L-Λ"amino happo, on kuvattu GB-patenttihakemukses-sa nro 2 050 359A. Eurooppa-patenttihakemuksessa (EP) 9 898A1 kuvataan yhdisteitä, joissa R on bentsoyyli-, ase-25 tyyli-, t-butyylioksikarbonyyli-, syklopentyylikarbonyyli-ryhmä tai niiden kaltainen ja A on L-Λ-aminohappo. EP 35 383A1 kuvaa yhdisteitä, joissa R on bentsoyyliryhmä ja A on D-fenyylialanyyliryhmä. Ei kuitenkaan ole ennestään tunnettua kirjallisuusviitettä, joka erityisesti kuvaisi 30 kaavan (I) esittämiä yhdisteitä. Näin ollen ne ovat uusia yhdisteitä, joita ei ole kuvattu kirjallisuudessa, ja ne ovat käyttökelpoisia farmaseuttisina aineina kuten jäljempänä esitetään.Compounds similar to these compounds of formula (I), for example compounds in which R is a benzoyl, acetyl or t-butyloxycarbonyl group and A is an L-Λ "amino acid, are described in GB patent application. No. 2,050,359 A. European Patent Application (EP) 9,898A1 describes compounds in which R is a benzoyl, acetyl, t-butyloxycarbonyl, cyclopentylcarbonyl or the like group and A is an L-Λ amino acid. 35383A1 describes compounds in which R is a benzoyl group and A is a D-phenylalanyl group, however, there is no prior art reference which specifically describes the compounds represented by formula (I) .Therefore, they are novel compounds not described in the literature and are useful as pharmaceuticals as described below.
Rakennekaavan (I) ryhmässä : 35 fH3 : -CHjCHCO- 2 75804 on asymmetrinen hiiliatomi, joten tämä ryhmä voi olla D-muotona, L-muotona tai DL-muotona, so. D- ja L-muotojen seoksena. Jokainen muoto kuuluu esillä olevan keksinnön piiriin, ja D- ja DL-muodot ovat ensisijaisia biologisen aktii-5 visuutensa vuoksi.The group of structural formula (I): 35 fH 3: -CH 2 CHCO- 2 75804 has an asymmetric carbon atom, so this group may be in the D-form, the L-form or the DL-form, i. As a mixture of D and L forms. Each form is within the scope of the present invention, and the D and DL forms are preferred due to their biological activity.
Kaavassa (I) oleva proliiniryhmä 10Proline group in formula (I) 10
COOHCOOH
voi olla D-muotona, L-muotona tai DL-muotona ja jokainen muoto kuuluu esillä olevan keksinnön piiriin, jolloin L-ja DL-muodot ovat ensisijaisia biologisen aktiivisuutensa 15 vuoksi.may be in the D-form, the L-form, or the DL-form, and each form is within the scope of the present invention, with the L- and DL-forms being preferred for their biological activity.
Valaisevia esimerkkejä kaavan (I) mukaisten proliini-johdannaisten farmaseuttisesti hyväksyttävistä suoloista ovat alkalimetallien kuten natriumin ja kaliumin kanssa muodostuneet suolat, maa-alkalimetallien kuten kalsiumin ja 20 magnesiumin kanssa muodostuneet suolat sekä emäksisten aminohappojen kuten argiinin ja lysiinin kanssa muodostuneet suolat. Kalsiumsuolat ja lysiinisuolat ovat edullisia.Illustrative examples of pharmaceutically acceptable salts of proline derivatives of formula (I) include salts formed with alkali metals such as sodium and potassium, salts formed with alkaline earth metals such as calcium and magnesium, and salts formed with basic amino acids such as arginine and lysine. Calcium salts and lysine salts are preferred.
Edellä määriteltyjä kaavan (I) mukaisia proliinijoh-dannaisia tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja 25 valmistetaan keksinnön mukaisesti siten, että a) saatetaan yhdiste, jolla on kaava (II) ΪΗ3 R-A'-S-CH2CHCOOH (II) 30 (jossa A' on edellä määritelty ryhmä A tai sen suojattu johdannainen; ja R tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty), karbodi-imidin läsnäollessa tai sen reaktiivinen amidi, hap-pohalogenidi, aktivoitu esteri tai seka-anhydridi reagoimaan 35 yhdisteen kanssa, jolla on kaava (III) 3 75804 HN (III) COOR' 5 (jossa R' on vetyatomi tai karboksyylin suojaryhmä) tai sen silyyliryhmän sisältävän johdannaisen kanssa inertissä orgaanisessa liuottimessa lämpötilavälillä -20°C:sta 10°C:seen ja poistetaan reaktiotuotteessa mahdollisesti olevat suoja- 10 ryhmät, tai b) saatetaan yhdiste, jolla on kaava (IV) R-A’-OH (IV) 15 (jossa A1 ja R tarkoittavat samaa kuin edellä on määritelty), karbodi-imidin läsnäollessa tai sen reaktiivinen amidi, hap-pohalogenidi, aktivoitu esteri tai seka-anhydridi reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava (V) 20 CHo j- I 3 / HS-CHoCHCO-N (V) v-i COOR' 25 (jossa R' on edellä määritelty) mukaisen yhdisteen kanssa intertissä orgaanisessa liuottimessa lämpötilavälillä -20°C:sta 10°C:seen, ja poistetaan reaktiotuotteessa mahdollisesti olevat suojaryhmät ja menetelmällä a) tai menetelmällä b) saatu tuote mahdollisesti muutetaan farmaseut- 30 tisesti hyväksyttäväksi suolaksi.Proline derivatives of formula (I) as defined above, or pharmaceutically acceptable salts thereof, are prepared according to the invention by a) providing a compound of formula (II) ΪΗ3 R-A'-S-CH2CHCOOH (II) 30 (wherein A ' is a group A or a protected derivative thereof as defined above, and R is as defined above), in the presence of a carbodiimide or a reactive amide, acid halide, activated ester or mixed anhydride thereof to react with a compound of formula (III) 3 75804 HN (III) COOR '5 (where R' is a hydrogen atom or a carboxyl protecting group) or a derivative containing a silyl group thereof in an inert organic solvent at a temperature between -20 ° C and 10 ° C and any protecting groups in the reaction product are removed, or b) reacting a compound of formula (IV) R-A'-OH (IV) 15 (wherein A1 and R are as defined above) in the presence of a carbodiimide or a reactive amide thereof, an acid halide, an activated ester reacting a different or mixed anhydride with a compound of formula (V) 20 CHo j- I 3 / HS-CHoCHCO-N (V) vi COOR '25 (where R' is as defined above) in an organic solvent at a temperature between - From 20 ° C to 10 ° C, and any protecting groups present in the reaction product are removed and the product obtained by method a) or method b) is optionally converted into a pharmaceutically acceptable salt.
Jos kaavan (I) ryhmässä A on funktionaalinen ryhmä, joka ei saisi reagoida, kuten amino- tai karboksyyliryhmä, tarkoittaa kaavan (II) mukainen yhdiste johdannaista, jossa tällainen ryhmä voi olla suojattu.If the group A of the formula (I) has a functional group which should not react, such as an amino or carboxyl group, the compound of the formula (II) denotes a derivative in which such a group may be protected.
4 758044 75804
Mikä tahansa A':ssa oleva funktionaalinen ryhmä, joka ei saisi osallistua reaktioon, voidaan suojata ryhmillä, joita tavallisesti käytetään peptidisynteeseissä ja jotka voidaan poistaa suhteellisen lievissä olosuhteissa. Esimer-5 kiksi aminoryhmä voi olla suojattu t-butyylioksikarbonyyli-ryhmällä; karboksyyliryhmä voi olla suojattu t-butyyliryh-mällä. Nämä suojaryhmät voidaan poistaa käsittelemällä fluo-rivedyllä, trifluorietikkahapolla tai kloorivedyllä. Vaihtoehtoisesti karboksyyliryhmä on suojattu alemmalla alkyy-10 Iillä substituoidulla silyyliryhmällä kuten trimetyylisilyy-liryhmällä, joka poistetaan sitten käsittelemällä vedellä.Any functional group in A 'that should not participate in the reaction can be protected with groups commonly used in peptide syntheses that can be removed under relatively mild conditions. The amino group of Example 5 may be protected with a t-butyloxycarbonyl group; the carboxyl group may be protected with a t-butyl group. These protecting groups can be removed by treatment with hydrogen fluoride, trifluoroacetic acid or hydrogen chloride. Alternatively, the carboxyl group is protected with a lower alkyl-substituted silyl group such as trimethylsilyl, which is then removed by treatment with water.
Kun R' kaavassa (III) on karboksyylin suojaryhmä, se voi olla t-butyyliryhmä tai alemmalla alkyylillä substituoitu silyyliryhmä ja se voidaan poistaa käsittelemällä fluorive-15 dyllä, trifluorietikkahapolla, kloorivedyllä tai vedellä.When R 'in the formula (III) is a carboxyl protecting group, it may be a t-butyl group or a lower alkyl-substituted silyl group, and may be removed by treatment with hydrofluoric acid, trifluoroacetic acid, hydrogen chloride or water.
Kaavan (II) mukaisen yhdisteen reaktiivinen johdannai-ne on sellainen, että reaktioon osallistuva karboksyyliryhmä on aktivoitunut. Karboksyyliryhmä voidaan aktivoida muuttamalla se miksi tahansa peptidisynteesien alalla tavalli-20 sesti käytetyksi muodoksi joita ovat esimerkiksi aktivoidut amidit, happohalogenidit, aktivoidut esterit ja happojen seka-anhydridit. Näistä muodoista ovat edullisia N-hydroksi-sukkinimidin kanssa muodostetut aktivoidut esterit, hapon seka-anhydridit hiilihapon monoesterien kanssa ja aktivoidut 25 amidit karbonyyli-di-imidatsolin kanssa. Karbo-di-imidejä kuten disykloheksyylikarbo-di-imidiä voidaan käyttää konden-sointiaineina muodostettaessa amidisidos karboksyyliryhmän ja iminoryhmän välille.The reactive derivative of the compound of formula (II) is such that the carboxyl group involved in the reaction is activated. The carboxyl group can be activated by converting it to any of the forms commonly used in peptide synthesis, such as activated amides, acid halides, activated esters, and mixed anhydrides of acids. Of these forms, activated esters formed with N-hydroxysuccinimide, mixed acid anhydrides with carbonic acid monoesters and activated amides with carbonyldiimidazole are preferred. Carbodiimides such as dicyclohexylcarbodiimide can be used as condensing agents to form an amide bond between the carboxyl group and the imino group.
Kaavan (III) mukaisen yhdisteen reaktiivinen johdan-30 nainen on sellainen, että mainitun yhdisteen iminoryhmä on aktivoitunut. Iminoryhmä voidaan aktivoida millä tahansa menetelmällä, jota tavallisesti käytetään peptidisynteesien alalla, esimerkiksi menetelmällä, jossa liitetään silyyliryhmä kuten trimetyylisilyyliryhmä, "fosfatsomenetelmällä", 35 jossa käytetään fosforiyhdistettä kuten fosfotrikloridia /Ann. Chem. 572 96 (1951)71 menetelmällä, jossa käytetään 5 75804 fosforin happoesteriä kuten pyrofosforihapon tetraetyylies-teriä tai "N-karboksianhydridimenetelmällä" (NCA-menetelmä).The reactive derivative of the compound of formula (III) is such that the imino group of said compound is activated. The imino group can be activated by any method commonly used in the field of peptide syntheses, for example, a method of attaching a silyl group such as a trimethylsilyl group, a "phosphato method" using a phosphorus compound such as phosphotrichloride / Ann. Chem. 572 96 (1951) 71 by a method using 5,758,804 phosphoric acid esters such as tetraethyl ester of pyrophosphoric acid or by the "N-carboxyanhydride method" (NCA method).
Reaktio voidaan saattaa tapahtumaan inertissä orgaanisessa liuottimessa kuten tetrahydrofuraanissa, dioksaanis-5 sa, dimetyyliformamidissa, heksametyylifosforiamidissa, kloroformissa, dikloorimetaanissa tai asetonitriilissä. Reaktio toteutetaan lämpötilavälillä -20°C:sta 10°C:seen. Reaktioaika vaihtelee riippuen lämpötilasta, reagoivista yhdisteistä ja liuottimesta ja on yleensä 0,5 tunnin ja 48 tunnin 10 välillä, edullisesti 1 tunnista 6 tuntiin.The reaction may be carried out in an inert organic solvent such as tetrahydrofuran, dioxane, dimethylformamide, hexamethylphosphoramide, chloroform, dichloromethane or acetonitrile. The reaction is carried out at a temperature of -20 ° C to 10 ° C. The reaction time varies depending on the temperature, the reactants and the solvent, and is generally between 0.5 hours and 48 hours, preferably from 1 hour to 6 hours.
Amidinmuodostusreaktion jälkeen reaktiotuotteessa mahdollisesti olevat suojaryhmät poistetaan millä tahansa, kulloinkin kyseessä olevalle suojaryhmälle spesifisellä menetelmällä, jotka on mainittu edellä.After the amide formation reaction, any protecting groups present in the reaction product are removed by any of the methods specific to the particular protecting group mentioned above.
15 Lopputuote voidaan eristää reaktioseoksesta ja puhdis taa millä tahansa tavanomaisella menetelmällä, esimerkiksi erilaisilla kromatografisilla menetelmillä käyttäen silika-geeliä, dekstraanin verkkopolymeeriä tai huokoisia polymeerejä kuten styreenidivinyylibentseeniä tai akryylihappo-20 estereitä. Sopiva eluointiliuotin voidaan valita seuraavis-ta: kloroformi, etyyliasetaatti, metanoli, etanoli, tetrahydrof uraani , bentseeni, vesi ja asetonitriili. Vaihtoehtoisesti voidaan lopputuote saada eristämällä reaktiotuote ensin orgaanisena suolana kuten disykloheksyyliamiinisuolana, 25 jota käsitellään sitten hapolla kuten esimerkiksi suolahapolla tai kaliumbisulfaatilla.The final product can be isolated from the reaction mixture and purified by any conventional method, for example, various chromatographic methods using silica gel, dextran network polymer, or porous polymers such as styrene-divinylbenzene or acrylic acid esters. A suitable elution solvent can be selected from chloroform, ethyl acetate, methanol, ethanol, tetrahydrofuran, benzene, water and acetonitrile. Alternatively, the final product can be obtained by first isolating the reaction product as an organic salt such as a dicyclohexylamine salt, which is then treated with an acid such as hydrochloric acid or potassium bisulfate.
Menetelmävaihtoehdossa a) lähtöaineena käytettävä kaavan (II) mukainen yhdiste voidaan valmistaa helposti seuraa-valla menetelmällä: 30 Yhdiste, jonka kaava on (VI): R-OH (VI) (jossa R on sama kuin edellä on määritelty) tai sen karbok-syyliryhmän osalta reaktiivinen johdannainen saatetaan rea-35 goimaan aminohapon kanssa, jonka kaava on (VII): 6 75804 H2N-A"-COOR" (VII) (jossa A" on aminohappotähde, joka on sama kuin A' lukuun-5 ottamatta ryhmää NH tai C=0; R" on vetyatomi tai karboksyy-lin suojaryhmä) tai sen reaktiivisen johdannaisen kanssa, minkä jälkeen poistetaan R", mikäli se on suojaryhmä, jolloin saadaan yhdiste, jonka kaava on (VIII): 1Q R-NH-A”-COOH (VIII) (jossa R ja A” ovat samat kuin edellä on määritelty), tämän jälkeen kaavan (VIII) mukainen yhdiste tai sen reaktiivinen johdannainen saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on (IX): 15 CHo I 3 HS-CHjCHCOOR'" (IX) (jossa R'" on vetyatomi tai karboksyylin suojaryhmä) , minkä 20 jälkeen poistetaan R*1, jos se on suojaryhmä.The compound of formula (II) used as a starting material in process variant a) can be easily prepared by the following method: A compound of formula (VI): R-OH (VI) (where R is as defined above) or a carboxyl group thereof for which the reactive derivative is reacted with an amino acid of formula (VII): 6 75804 H2N-A "-COOR" (VII) (where A "is an amino acid residue which is the same as A 'except for the group NH or C = O; R "is a hydrogen atom or a carboxyl protecting group) or a reactive derivative thereof, followed by removal of R" if it is a protecting group to give a compound of formula (VIII): 1Q R-NH-A "- COOH (VIII) (wherein R and A 'are as defined above), then reacting a compound of formula (VIII) or a reactive derivative thereof with a compound of formula (IX): CHO I 3 HS-CH 2 CHCOOR' "(IX) (where R '" is a hydrogen atom or a carboxyl protecting group), followed by the removal of R * 1 if it is protecting group.
Esimerkkeihin kaavan (VI) mukaisen yhdisteen karbok-•j syyliryhmän osalta reaktiivisista johdannaisista kuuluvat peptidisynteesin alalla yleisesti käytetyt johdannaiset kuten aktivoidut amidit, happohalogenidit, aktivoidut esterit 25 ja happojen seka-anhydridit.Examples of the reactive derivatives for the carboxyl group of the compound of formula (VI) include those commonly used in the field of peptide synthesis, such as activated amides, acid halides, activated esters and mixed anhydrides of acids.
Jos R" kaavan (VII) mukaisessa aminohapossa on suoja-ryhmä, ovat tästä edullisia esimerkkejä t-butyyliryhmä (joka voidaan poistaa fluorivedyllä, trifluorietikkahapolla tai kloorivedyllä), bentsyyliryhmä (joka voidaan poistaa 30 pelkistämällä katalyyttisesti palladiumin tai sen kaltaisten avulla) ja alemmat alkyyliryhmät kuten metyyli ja etyyli (jotka voidaan poistaa hydrolysoimalla aikalisissä olosuhteissa) .When R "in an amino acid of formula (VII) has a protecting group, preferred examples thereof include a t-butyl group (which can be removed with hydrogen fluoride, trifluoroacetic acid or hydrogen chloride), a benzyl group (which can be removed by catalytic reduction with palladium or the like) and lower alkyl groups such as methyl and ethyl (which can be removed by hydrolysis under time conditions).
Kaavan (VII) mukaisen aminohapon reaktiivinen johdan-35 nainen on sellainen, että sen aminoryhmä on aktivoitu ja tällainen johdannainen valmistetaan millä tahansa aktivointi- 7 75804 menetelmällä, jota tavallisesti käytetään peptidisynteesien alalla, kuten liittämällä silyyliryhmä (esim. trimetyyli-silyyliryhmä), "fosfatsomenetelmällä", fosforihappoesteri-menetelmällä ja N-karboksianhydridimenetelmällä.The reactive derivative of the amino acid of formula (VII) is such that its amino group is activated and such derivative is prepared by any activation method commonly used in the field of peptide syntheses, such as by attaching a silyl group (e.g. a trimethylsilyl group). ", by the phosphoric acid ester method and the N-carboxyanhydride method.
5 Karbodi-imidiä kuten esimerkiksi disykloheksyylikar- bo—di-imidiä voidaan käyttää kondensointiaineena muodostettaessa amidisidos kaavan (VI) mukaisen yhdisteen ja kaavan (VII) mukaisen aminohapon välille.A carbodiimide such as dicyclohexylcarbodiimide can be used as a condensing agent to form an amide bond between a compound of formula (VI) and an amino acid of formula (VII).
Reaktio voidaan saattaa tapahtumaan inertissä orgaa-10 nisessa liuottimessa kuten tetrahydrofuraanissa, dioksaanis-sa, dimetyyliformamidissa, heksametyylifosfotriamidissa, kloroformissa, dikloorimetaanissa tai asetonitriilissä. Reaktio toteutetaan yleensä jäähdyttäen tai huoneen lämpötilassa (-50°C:sta 20°C:een), edullisesti -30°C:sta 15 10°C:seen. Reaktioaika vaihtelee riippuen reaktiolämpöti-lasta, reagoivista yhdisteistä ja liuottimesta ja se on yleensä 0,5 tunnista 48 tuntiin, edullisesti välillä 1-6 tuntia.The reaction may be carried out in an inert organic solvent such as tetrahydrofuran, dioxane, dimethylformamide, hexamethylphosphotriazide, chloroform, dichloromethane or acetonitrile. The reaction is generally carried out under cooling or at room temperature (-50 ° C to 20 ° C), preferably -30 ° C to 15 ° C. The reaction time varies depending on the reaction temperature, the reactants and the solvent, and is generally from 0.5 hour to 48 hours, preferably from 1 to 6 hours.
Jos R" kaavassa (VII) on suojaryhmä, se voidaan pois-20 taa reaktiotuotteesta millä tahansa tavanomaisella, edellä kuvatulla menetelmällä.If R "in formula (VII) is a protecting group, it may be removed from the reaction product by any of the conventional methods described above.
Kaavan (VIII) mukainen yhdiste voidaan eristää reak-tioseoksesta ja puhdistaa millä tahansa tavanomaisella menetelmällä, esimerkiksi uudelleenkiteyttämällä etyyliasetaa-25 tista, n-heksaanista, asetonista tai vedestä tai eri tyyppisillä kromatografisilla menetelmillä kuten on kuvattu kaavan (I) mukaisen yhdisteen eristämisen ja puhdistamisen yhteydessä tai hajottamalla reaktiotuotteen orgaaninen suola hapon avulla.The compound of formula (VIII) may be isolated from the reaction mixture and purified by any conventional method, for example by recrystallization from ethyl acetate, n-hexane, acetone or water or by various types of chromatographic methods as described for the isolation and purification of the compound of formula (I). or by decomposing the organic salt of the reaction product with an acid.
30 Kaavan (VIII) mukainen yhdiste voidaan saattaa rea goimaan kaavan (IX) mukaisen yhdisteen kanssa reagoittamal-la ensin mainitun yhdisteen karboksyyliryhmä jälkimmäisen yhdisteen merkaptoryhmän kanssa kondensointiaineen (so. karbo-di--imidien kuten esimerkiksi disykloheksyylikarbo-di-35 imidin) läsnäollessa. Kaavan (VIII) mukaisen yhdisteen reaktiivinen johdannainen voidaan saattaa reagoimaan kaavan (IX) 8 75804 mukaisen yhdisteen kanssa. Esimerkkejä kaavan (VIII) mukaisen yhdisteen reaktiivisista johdannaisista ovat aktivoidut amidit, happohalogenidit, aktivoidut esterit ja happojen seka-anhydridit. Karbonyyli-di-imidatsolin kanssa muodos-5 tetut aktivoidut amidit ovat edullisia.A compound of formula (VIII) may be reacted with a compound of formula (IX) by reacting the carboxyl group of the former compound with the mercapto group of the latter compound in the presence of a condensing agent (i.e. carbodiimides such as dicyclohexylcarbodiimide). A reactive derivative of a compound of formula (VIII) may be reacted with a compound of formula (IX) 8 75804. Examples of reactive derivatives of a compound of formula (VIII) are activated amides, acid halides, activated esters and mixed anhydrides of acids. Activated amides formed with carbonyl diimidazole are preferred.
Kaavan (IX) mukaisen yhdisteen karboksyyliryhmä voi olla suojattu tai suojaamaton. Edullisia suojaryhmiä ovat t-butyyliryhmä ja muut ryhmät, jotka voidaan poistaa happa-missa olosuhteissa.The carboxyl group of the compound of formula (IX) may be protected or unprotected. Preferred protecting groups are the t-butyl group and other groups that can be removed under acidic conditions.
10 Reaktio, jossa muodostetaan tioliesteri, suoritetaan inertissä orgaanisessa liuottimessa kuten tetrahydrofuraa-nissa, dioksaanissa, dimetyyliformamidissa, heksametyyli-fosfotriamidissa, kloroformissa, dikloorimetaanissa tai asetonitriilissä. Reaktio toteutetaan yleensä jäähdyttäen 15 tai huoneen lämpötilassa (-50°C:sta 20°C:seen), edullisesti -30°C:n ja 10°C:n välillä silloin kun kaavan (VIII) mukaista yhdistettä käytetään sen aktivoituna amidina tai happo-halogenidina, ja -10°C:n ja 10°C:n välillä kun mainittua yhdistettä käytetään happoanhydridimuodossa. Reaktioaika 20 vaihtelee riippuen reaktiolämpötilasta, reagoivista yhdisteistä ja liuottimesta ja se on yleensä välillä 0,5-48 tuntia, edullisesti välillä 1-6 tuntia. Tioliesterin muodosta-misreaktion jälkeen poistetaan reaktiotuotteesta R"', jos se on suojaryhmä. Jos suojaryhmä on t-butyyliryhmä, se voi-25 daan poistaa tavanomaisella menetelmällä, so. reaktiolla fluorivedyn, trifluorietikkahapon tai kloorivedyn kanssa.The reaction to form a thiol ester is performed in an inert organic solvent such as tetrahydrofuran, dioxane, dimethylformamide, hexamethylphosotriamide, chloroform, dichloromethane or acetonitrile. The reaction is generally carried out under cooling at 15 or room temperature (-50 ° C to 20 ° C), preferably between -30 ° C and 10 ° C when the compound of formula (VIII) is used as its activated amide or acid. as a halide, and between -10 ° C and 10 ° C when said compound is used in the acid anhydride form. The reaction time 20 varies depending on the reaction temperature, the reactants and the solvent, and is generally from 0.5 to 48 hours, preferably from 1 to 6 hours. After the thiol ester formation reaction, R "'is removed from the reaction product if it is a protecting group. If the protecting group is a t-butyl group, it can be removed by a conventional method, i.e., by reaction with hydrogen fluoride, trifluoroacetic acid or hydrogen chloride.
Lopputuote voidaan eristää reaktioseoksesta ja puhdistaa millä tahansa tavanomaisella menetelmällä kuten esimerkiksi uudelleenkiteyttämällä orgaanisesta liuottimesta 30 kuten etyyliasetaatista tai n-heksaanista, eri tyyppisillä kormatografisillä menetelmillä kuten on kuvattu kaavan (I) mukaisen yhdisteen eristämisen ja puhdistamisen yhteydessä tai hajottamalla reaktiotuotteen orgaaninen suola hapon avulla.The final product can be isolated from the reaction mixture and purified by any conventional method such as recrystallization from an organic solvent such as ethyl acetate or n-hexane, various types of chromatographic methods as described for isolating and purifying a compound of formula (I) or decomposing the organic salt of the reaction product.
35 Keksinnön mukaisessa menetelmävaihtoehdossa b) saate taan kaavan (IV) mukainen yhdiste tai sen reaktiivinen joh- 9 75804 dannainen reagoimaan kaavan (V) mukaisen yhdisteen kanssa kuten edellä on esitetty.In process variant b) of the invention, a compound of formula (IV) or a reactive derivative thereof is reacted with a compound of formula (V) as described above.
Jos kaavan (I) ryhmässä A on vapaa funktionaalinen ryhmä, jonka ei tulisi osallistua reaktioon, kuten amino-5 tai karboksyyliryhmä, tarkoittaa kaavan (IV) mukainen yhdiste johdannaista, jossa tällainen ryhmä voi olla suojattu.If the group A of the formula (I) has a free functional group which should not participate in the reaction, such as an amino-5 or a carboxyl group, the compound of the formula (IV) denotes a derivative in which such a group may be protected.
A':ssa mahdollisesti oleva funktionaalinen ryhmä, jonka ei tulisi osallistua reaktioon, suojataan ryhmillä, joita tavallisesti käytetään peptidisynteesien alalla ja 10 jotka voidaan poistaa suhteellisen lievissä olosuhteissa. Esimerkiksi aminoryhmä voidaan suojata t-butyylioksikarbo-nyyliryhmällä ja karboksyyliryhmä voidaan suojata t-butyyli-ryhmällä. Nämä ryhmät voidaan poistaa käsittelemällä fluori-vedyllä tai kloorivedyllä.Any functional group in A 'that should not participate in the reaction is protected with groups commonly used in peptide synthesis that can be removed under relatively mild conditions. For example, an amino group may be protected with a t-butyloxycarbonyl group and a carboxyl group may be protected with a t-butyl group. These groups can be removed by treatment with hydrogen fluoride or hydrogen chloride.
15 Vaihtoehtoisesti voidaan karboksyyliryhmä suojata alemmalla alkyylillä substituoidulla silyyliryhmällä kuten esimerkiksi trimetyylisilyyliryhmällä, joka poistetaan sitten käsittelemällä vedellä. Kun R' kaavassa (V) on karbok-syylin suojaryhmä, se voi olla t-butyyliryhmä tai alempi-20 alkyylisubstituoitu silyyliryhmä ja se voidaan poistaa käsittelemällä fluorivedyllä, trifluorietikkahapolla, kloori-vedyllä tai vedellä.Alternatively, the carboxyl group may be protected with a lower alkyl substituted silyl group such as a trimethylsilyl group which is then removed by treatment with water. When R 'in formula (V) is a carboxyl protecting group, it may be a t-butyl group or a lower alkyl-substituted silyl group and may be removed by treatment with hydrogen fluoride, trifluoroacetic acid, hydrogen chloride or water.
Kaavan (IV) mukaisen yhdisteen reaktiivinen johdannainen on sellainen, että reaktioon osallistuva karboksyy-25 liryhmä on aktivoitunut. Karboksyyliryhmä voidaan aktivoida sopivaksi muodoksi kuten aktivoiduiksi amideiksi, happohalo-genideiksi, aktivoiduiksi estereiksi tai happojen seka-an-hydrideiksi. Karbonyyli-di-imidatsolin kanssa muodostetut aktivoidut amidit ovat suositeltavia. Karbo-di-imidejä kuten 30 disykloheksyylikarbo-di-imidiä voidaan käyttää kondensointi-aineina muodostettaessa amidisidos karboksyyliryhmästä ja merkaptoryhmästä.The reactive derivative of the compound of formula (IV) is such that the carboxyl group involved in the reaction is activated. The carboxyl group can be activated to a suitable form such as activated amides, acid halides, activated esters or mixed anhydrides of acids. Activated amides formed with carbonyl-diimidazole are preferred. Carbodiimides such as dicyclohexylcarbodiimide can be used as condensing agents to form an amide bond from a carboxyl group and a mercapto group.
Kaavan (IV) mukaisen yhdisteen tai sen reaktiivisen johdannaisen ja kaavan (V) mukaisen yhdisteen välinen reak-35 tio saatetaan tapahtumaan inertissä orgaanisessa liuottimes-sa kuten tetrahydrofuraanissa, dioksaanissa, dimetyyliform- 10 75804 amidissa, heksametyylifosfotriamidissa, kloroformissa, di-kloorimetaanissa tai asetonitriilissä. Reaktio toteutetaan lämpötila-alueella -20°C:sta 10°C:seen, kun kaavan (IV) mukaista yhdistettä käytetään aktivoituna amidina tai happo-5 halogenidina, ja alueella -10°C:sta 10°C:seen kun mainittua yhdistettä käytetään happoanhydridinä. Reaktioaika vaih-telee riippuen reaktiolämpötilasta, reagoivista yhdisteistä ja liuottimesta ja se on yleensä 0,5 tunnista 48 tuntiin, edullisesti 1-6 tuntia.The reaction between a compound of formula (IV) or a reactive derivative thereof and a compound of formula (V) is carried out in an inert organic solvent such as tetrahydrofuran, dioxane, dimethylformamide, hexamethylphosphoric triamide, chloroform or dichloroethane. The reaction is carried out at a temperature in the range of -20 ° C to 10 ° C when the compound of formula (IV) is used as an activated amide or acid-halide, and in the range of -10 ° C to 10 ° C when said compound is used acid anhydride. The reaction time varies depending on the reaction temperature, the reactants and the solvent, and is generally 0.5 to 48 hours, preferably 1 to 6 hours.
10 Tioliesterin muodostumisreaktion jälkeen reaktiotuot teessa mahdollisesti olevat suojaryhmät poistetaan millä tahansa, vastaaville suojaryhmille spesifisellä menetelmällä.After the thiol ester formation reaction, any protecting groups in the reaction product are removed by any method specific for the corresponding protecting groups.
Lopputuote voidaan eristää reaktioseoksesta ja puhdis-15 taa millä tahansa tavanomaisella menetelmällä, joita edellä on kuvattu, kuten esimerkiksi eri tyyppisillä kromatografisilla menetelmillä käyttäen silikageeliä, verkkoutunutta dekstraanipolyraeeriä ja huokoisia polymeerejä kuten styree-ni/divinyylibentseeniä tai akryylihappoestereitä. Sopiva 20 eluointiliuotin voidaan valita seuraavista: kloroformi, etyyliasetaatti, metanoli, etanoli, tetrahydrofuraani, bent-*: seeni, vesi ja asetonitriili. Vaihtoehtoisesti voidaan lop putuote saada eristämällä reaktiotuote ensin orgaanisena suolana kuten esimerkiksi disykloheksyyliamiinisuolana, jota : 25 sitten käsitellään hapolla kuten esimerkiksi suolahapolla ! tai kaliumbisulfaatilla.The final product can be isolated from the reaction mixture and purified by any of the conventional methods described above, such as various types of chromatographic methods using silica gel, crosslinked dextran polyol, and porous polymers such as styrene / divinylbenzene or acrylic acid. A suitable elution solvent can be selected from chloroform, ethyl acetate, methanol, ethanol, tetrahydrofuran, benzene, water and acetonitrile. Alternatively, the final product can be obtained by first isolating the reaction product as an organic salt such as a dicyclohexylamine salt, which is then treated with an acid such as hydrochloric acid! or potassium bisulfate.
Kaavan (I) mukaisessa yhdisteessä on karboksyyliryhmä liittyneenä pro1iiniryhmään, joten se voi muodostaa suoloja erilaisten emäksisten aineiden kanssa, mikäli näin halutaan. 30 Farmaseuttisesti hyväksyttävien emäksisten aineiden kanssa muodostetut suolat ovat erityisen tärkeitä. Tällaisia suoloja voidaan valmistaa tavanomaisella menetelmällä, so. kä-sittelemällä mainittua karboksyyliryhmää ekvimolaarisella määrällä jotakin yllä mainittua emästä (esim. alkalimetal-35 lit, maa-alkalimetallit ja emäksiset aminohapot).The compound of formula (I) has a carboxyl group attached to the proline group, so that it can form salts with various basic substances, if desired. Salts formed with pharmaceutically acceptable basic substances are of particular importance. Such salts can be prepared by a conventional method, i. by treating said carboxyl group with an equimolar amount of one of the above bases (e.g., alkali metals, alkaline earth metals and basic amino acids).
11 7580411 75804
Esillä olevan keksinnön mukaisesti valmistetut kaavan (I) mukaiset proliinijohdannaiset ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat estävät angiotensiini II:n muodostumisen angiotensiini (I):sta inhiboimalla angiotensiiniä 5 muuttavan entsyymin vaikutuksen. Tämän vuoksi ne ovat käyttökelpoisia angiotensiini II:n vaikutuksesta kohonneen verenpaineen hoidossa ja sydämen vajaatoiminnan hoidossa.The proline derivatives of formula (I) and their pharmaceutically acceptable salts prepared according to the present invention inhibit the formation of angiotensin II from angiotensin (I) by inhibiting the action of an angiotensin 5 converting enzyme. Therefore, they are useful in the treatment of hypertension due to the action of angiotensin II and in the treatment of heart failure.
Muutamien esillä olevan keksinön mukaisten lopputuotteiden aktiivisuus angiotensiiniä muuttavan entsyymin inhi-10 biittoreina mitattiin.The activity of a few final products of the present invention as inhibitors of the angiotensin converting enzyme was measured.
1) Menetelmä1) Method
Angiotensiiniä muuttava entsyymi uutettiin kaniinin keuhkosta. Koeputkiin pantiin 0,111-molaarista boorihappo-Na2C03-puskuriliuosta (pH 8,3, 0,6 ml), 0,2 ml 0,111-molaa-15 rista boorihappo-Na2C03-puskuriliuosta (pH 8,3), joka sisälsi 25 mmol bentsoyyliglysyylihistidyylileusiinia (substraatti) , ja 0,1 ml 0,111-molaarista boorihappo-Na2CC>3-puskuri-liuosta (pH 8,3), joka sisälsi 10 °-10 moolia tutkittavia yhdisteitä (13 esillä olevan keksinnön mukaista lopputuo-20 tetta, jotka on esitetty taulukossa jäljempänä), ja esi- inkuboitiin 37°C:ssa 5-10 minuuttia. Sitten lisättiin kuhunkin koeputkeen 0,1 ml entsyymiliuosta (asetonijauho) ja kutakin seosta inkuboitiin 37°C:ssa 30 minuuttia. Entsyymin vaikutuksesta muodostunut bentsoyyliglysiini uutettiin etyy-25 liasetaattiin suolahapon läsnä ollessa ja sen määrä mitattiin UV-absorptiolla 228 nm:ssä. Määritettiin koeyhdistei-den läsnä ollessa esiintyvän entsyymiaktiivsuuden suhde entsyymiaktiivisuuteen ilman koeyhdisteitä (100). Kunkin koeyhdisteen pitoisuus, jolla entsyymin suhteellisen aktii-30 visuus oli 50 %, esitettiin kysymyksessä olevan koeyhdisteen aktiivisuutena inhiboida entsyymin toiminta ja ilmoitettiin 150-arvona.The angiotensin converting enzyme was extracted from the rabbit lung. The test tubes were charged with 0.111 molar boric acid-Na 2 CO 3 buffer solution (pH 8.3, 0.6 mL), 0.2 mL of 0.111 molar boric acid Na 2 CO 3 buffer solution (pH 8.3) containing 25 mmol benzoylglycylhistidyl leucine ( substrate), and 0.1 ml of a 0.111 molar boric acid-Na 2 CO 3 buffer solution (pH 8.3) containing 10 ° -10 moles of test compounds (13 of the final products of the present invention shown in in the table below), and preincubated at 37 ° C for 5-10 minutes. 0.1 ml of enzyme solution (acetone powder) was then added to each test tube and each mixture was incubated at 37 ° C for 30 minutes. The benzoylglycine formed by the enzyme was extracted into ethyl acetate in the presence of hydrochloric acid and measured by UV absorption at 228 nm. The ratio of enzyme activity in the presence of test compounds to enzyme activity without test compounds was determined (100). The concentration of each test compound at which the relative activity of the enzyme was 50% was expressed as the activity of the test compound in question to inhibit the activity of the enzyme and was reported as a value of 150.
12 75804 2) Tulokset --12 75804 2) Results -
Koeyhdiste I50Test compound I50
Yhdiste n:o 1 1,6 x 10”^ ^ Yhdiste n:o 2 1,3 x 10“^Compound No. 1 1.6 x 10 "^ ^ Compound No. 2 1.3 x 10" ^
Yhdiste n:o 3 4,0 x 10“^Compound No. 3 4.0 x 10 "
Yhdiste n:o 4 1,0 x 10”^Compound No. 4 1.0 x 10 ”^
Yhdiste n:o 5 1,5 x 10"?Compound No. 5 1.5 x 10 "?
Yhdiste n:o 6 1,7 x 10""7 10 Yhdiste n:o 7 4,8 x 10"8Compound No. 6 1.7 x 10 "" 7 10 Compound No. 7 4.8 x 10 "8
Yhdiste n:o 8 1,7 x 10-*7Compound No. 8 1.7 x 10- * 7
Yhdiste n:o 9 5,4 x 10”^ ^ Yhdiste n:o: 1. N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alanyylitio)-2-D-metyylipropanoyyli7-L-proliini 2. N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyliglysyylitio)-2-D-metyylipropanoyyli7-L-proliini 2Q 3. N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-N-metyyliglysyyli- tio)-2-D-metyylipropanoyyl\7-L-proliini 4. N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-fenyylialanyyli-tio)-2-D-metyylipropanoyyli7-L-proliini 5. N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-leusyylitio)-2- 25 D-metyylipropanoyyli7-L-proliini 6. N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-tryptofyylitio)- 2-D-metyylipropanoyyli7-L-proliini 7. N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-fenyyliglysyyli- tio) -2-D-metyylipropanoyyli7’*L”proliini 2q 8. N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-metionyylitio)- 2-D-metyylipropanoyyli7-L-proliini 9. N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-glutaminyylitio)-2-D-metyylipropanoyyli7-L-proliini Esillä olevan keksinnön mukaisten lopputuotteiden 25 vaikutus kestää pitempään kuin samankaltaisen tehon omaa- vien tunnettujen yhdisteiden vaikutus, esimerkiksi 3-merkap- 13 75804 to-2-D-metyylipropanoyyli-L-proliinin (tavallisesti kutsuttu nimellä Captopril) vaikutus, niin että haluttu vaikutus verenpaineeseen voidaan saavuttaa harvemmin vuorokausiannoksin. Captopril ja muut tunnetut yhdisteet aiheuttavat veren-5 paineeseen äkillisen putoamisen antojakson alussa ja tämä voi kehittyä ortostaattiseksi hypotensiiviksi asteniaksi ^Lancet, voi. 1, nro 8, 115, p. 557 (10. maaliskuuta 1979).7, mutta esillä olevan keksinnön mukaisilla lopputuotteilla on vain lievä hypotensiivinen vaikutus antojakson alussa ja 10 ortostaattisen hypotensiivin astenian kehittyminen on hyvin vähän mahdollista. Captoprilin kaltaiset lääkeaineet, joissa on vapaa merkaptoryhmä, saavat aikaan erilaisia sivuvaikutuksia, joiden voidaan katsoa johtuvan merkaptoryhmästä. Muutamia mainitaksemme: häiriöitä makuaistissa, albumiinin 15 erittyminen virtsaan, agranulocytosis ja ihosairauksia, joihin liittyy kuume, on raportoitu julkaisuissa Lancet, voi.Compound No. 9 5.4 x 10 "Compound No.: 1. N- [3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-alanylthio) -2-D-methylpropanoyl] -L-proline 2. N- [3 - (N-cyclohexylcarbonylglycylthio) -2-D-methylpropanoyl-7-L-proline 2Q 3. N- [3- (N-cyclohexylcarbonyl-N-methylglycylthio) -2-D-methylpropanoyl] -L-proline 4. N - E 3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-phenylalanylthio) -2-D-methylpropanoyl-7-L-proline 5. N- E 3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-leucylthio) -2-D-methylpropanoyl-7-L -proline 6. N- E 3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-tryptophylthio) -2-D-methylpropanoyl-7-L-proline 7. N-3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-phenylglycylthio) -2-D -methylpropanoyl7' * L ”proline 2q 8. N- [3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-methionylthio) -2-D-methylpropanoyl] -L-proline 9. N- [3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-glutaminylthio) -2-D-methylpropanoyl-7-L-proline The effect of the final products of the present invention lasts longer than that of known compounds having similar potency, for example, the effect of 3-mercap- 13 75804 to-2-D-methylpropanoyl-L-proline (commonly referred to as Captopril) so that the desired effect on blood pressure can be achieved less frequently at daily doses. Captopril and other known compounds cause a sudden drop in blood-5 pressure at the beginning of the administration period and this may develop into orthostatic hypotensive asthenia. 1, No. 8, 115, p. 557 (March 10, 1979) .7, but the final products of the present invention have only a mild hypotensive effect at the beginning of the administration period and the development of orthostatic hypotensive asthenia is very unlikely. Drugs such as captopril with a free mercapto group produce a variety of side effects that can be attributed to the mercapto group. A few to mention: taste disturbances, urinary albumin 15 excretion, agranulocytosis, and skin diseases associated with fever, have been reported in the Lancet, Vol.
1, nro 8160, p. 150 (19. tammikuuta 1980), Lancet, voi. 2, nro 8186, p. 129 (19. heinäkuuta 1980) ja South African Medical Journal, voi. 58, 172 (1980). Sitä vastoin esillä 20 olevan keksinnön mukaisten lopputuotteiden tioliesterisidos ei hydrolysoidu in vivo ja siten on epätodennäköistä, että muodostuisi merkaptoryhmä. Sen vuoksi on hyvin vähän mahdollista, että esillä olevan keksinnön mukaiset lopputuotteet aiheuttaisivat yllä mainittuja, merkaptoryhmästä johtuvik-25 si katsottavia sivuvaikutuksia.1, No. 8160, p. 150 (19 January 1980), Lancet, vol. 2, No. 8186, pp. 129 (July 19, 1980) and South African Medical Journal, vol. 58, 172 (1980). In contrast, the thiol ester bond of the final products of the present invention is not hydrolyzed in vivo and thus it is unlikely that a mercapto group would form. Therefore, it is very unlikely that the final products of the present invention would cause the above-mentioned side effects due to the mercapto group.
Keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden aktiivisuuden vertailemiseksi rakenteeltaan läheisiin tunnettuihin yhdisteisiin suoritettiin vertailukokeet, joissa tunnettuina yhdisteinä käytettiin FI-patenttijulkaisusta 71749, 30 FI-patenttihakemuksista 810683, 810725 ja 810663 ja GB-ha-kemusjulkaisusta 2050359 tunnettuja yhdisteitä. Kokeissa määritettiin yhdisteiden angiotensiiniä muuttavaa entsyymiä inhiboiva aktiivisuus, hydrolyysi in vitro ja angiotensiini-I:n aiheuttamaa verenpainetta alentava vaikutus in vivo sekä 35 tämän kesto. Tulokset on esitetty seuraavassa taulukossa I. Koetuloksista ilmenee, että keksinnön mukaisesti valmistettu 14 75804 yhdiste ei angiotensiiniä muuttavan entsyymin inhiboinnin osalta eroa oleellisesti ennestään tunnetuista. Muissa kahdessa kokeessa (hydrolyvsi, verenpainetta alentava aktiivisuus) keksinnön mukainen yhdiste sen sijaan on tunnettuihin 5 yhdisteisiin verrattuna ylivoimainen; sillä on merkittävästi vähemmän sivuvaikutuksia ja vaikutuksten kesto on paljon pitempi kuin tunnetuilla yhdisteillä.In order to compare the activity of the compounds according to the invention with known compounds of similar structure, comparative experiments were carried out using compounds known from FI patent applications 71749, FI patent applications 810683, 810725 and 810663 and GB application publication 2050359 as known compounds. The experiments determined the angiotensin-converting enzyme inhibitory activity, the in vitro hydrolysis and the antihypertensive effect of angiotensin-I in vivo, as well as the duration thereof. The results are shown in the following Table I. The experimental results show that the compound 14 75804 prepared according to the invention does not differ substantially from the previously known angiotensin-modifying enzyme inhibition. In the other two experiments (hydrolysis, antihypertensive activity) the compound of the invention, on the other hand, is superior to the known compounds; it has significantly fewer side effects and the duration of effects is much longer than with known compounds.
is 75804 <0 — > c *h +j o eis 75804 <0 -> c * h + j o e
c > rHc> rH
<U -H<U -H
rH > O <N (Τι VOrH> O <N (Vι VO
fQ 00 VO Γ0 fir-4 ^ (0 -H -fQ 00 VO Γ0 fir-4 ^ (0 -H -
in (Nin (N
+J to o oo eg+ J to o oo eg
<D rj tN in rH<D rj tN in rH
C 3HC 3 H
H (0 TJ- Γ~H (0 TJ- Γ ~
<0 -Η ιΗ «H<0 -Η ιΗ «H
Λ > O VOΛ> O VO
C -H <Tv m 'TC -H <Tv m 'T
d) -H (N ^ - 'Td) -H (N 2 - - T
U -P ιΗ II rn II O'U -P ιΗ II rn II O '
Jl O II <f C rH CHJl O II <f C rH CH
> (0 VO C -vr *<#> κβ 0 u ~> (0 VO C -vr * <#> κβ 0 u ~
UM CUM C
+J :nJ -H+ J: nJ -H
•H e & > m (0 * C > o i— ro ro (n ον o :(0 •H (U VO (Tv in <Tv Sh »H :(0 HO I *|0 « - c >,:(0 o oo vo Γ' m ·** σι fi• H e &> m (0 * C> oi— ro ro (n ον o: (0 • H (U VO (Tv in <Tv Sh »H: (0 HO I * | 0« - c>, :( 0 o oo vo Γ 'm · ** σι fi
>,f-H co σ\ m in σι .X>, f-H co σ \ m in σι .X
H H fi 0 0) ^ Η -ι-ι .H H fi 0 0) ^ Η -ι-ι.
Oho o r-ι oo m oo COho o r-ι oo m oo C
>i :n3 (—I o t— v—i >-h vo I (1) ffi -m iH 4-> ________ fi> i: n3 (—I o t— v — i> -h vo I (1) ffi -m iH 4-> ________ fi
•H•B
:(0(0
r-· i'- γ·- γ-- θ' I—Ir- · i'- γ · - γ-- θ 'I — I
o I I I I I (1)o I I I I I (1)
m o o o o o Im o o o o o I
H rH rH rH rH iH a) Θχ x x x x oH rH rH rH rH iH a) Θχ x x x x o
vo cn cn m ,Xvo cn cn m, X
%. ·* ·** 3 cn cm m co co 11 rH —....... ............ 1 ....... " " 1 1 ...... . . — 1 •H fi%. · * · ** 3 cn cm m co co 11 rH —....... ............ 1 ....... "" 1 1 ..... . . - 1 • H fi
-·(« X X X X X X- · («X X X X X X
+J I I I I I I+ J I I I I I I
- ^ (ö o a) a) <β o- ^ (ö o a) a) <β o
0} I—I iH pfi pfi rH H0} I — I iH pfi pfi rH H
> C P4 Λ ·< Λ> C P4 Λ · <Λ
I I I I I II I I I I I
fi-P Q Q tfi fil P)fi-P Q Q tfi fil P)
a) to I I I I I Ia) to I I I I I I
T3-H OOOO O O I-1 fi -o oouu u u rn ! 6 έώ ό ό * *T3-H OOOO O O I-1 fi -o oouu u u rn! 6 έώ ό ό * *
•H _ __. . _ ___ O• H _ __. . _ ___ O
-P-- O-P-- O
,X ^ I, X ^ I
(0 fi Ä K(0 fi Ä K
(0 (Ö O— CJ(0 (Ö O— CJ
fi ·Η > Ifi · Η> I
HOJiddl σι σι σι cnHOJiddl σι σι σι cn
•O ^ rH n in ro roinin ro m m ro m m K• O ^ rH n in ro roinin ro m m ro m m K
0-H rH 0 (Tv 00 (N VO (TiOOfMrO (TlOOCNirO (TiOOCNrO CJ0-H rH 0 (Tv 00 (N VO (TiOOfMrO (TlOOCNirO (TiOOCNrO CJ
,¾¾ 3 in gnu r> vo vo ο ημο γό » id γό i X 4j .f-, :t0 3 o o o hoom r~ o o m r-oom to ^ tfl d) rHf: rH rH v—I rH rHrHiHO rH rH i—I O I—I rH v—I O |, ¾¾ 3 in gnu r> vo vo ο ημο γό »id γό i X 4j .f-,: t0 3 ooo Hoom r ~ oom r-oom to ^ tfl d) rHf: rH rH v — I rH rHrHiHO rH rH i —IOI — I rH v — IO |
r_| .,Η 4J rHd) Γ- 00 00 00 t^ 00 00 (N I— 00 OO (N Γ" 00 00 (NR_ | ., Η 4J rHd) Γ- 00 00 00 t ^ 00 00 (N I— 00 OO (N Γ "00 00 (N
fi Ό ·Η ·Η ,Χfi Ό · Η · Η, Χ
(13 x: -H to (0 HHH H HHHCQ HHHffl HHMCQ(13 x: -H to (0 HHH H HHHCQ HHHffl HHMCQ
fn >· > W ,C &η&ηΡη h , b h h U h Em En O Cm Eh Eh U Xfn> ·> W, C & η & ηΡη h, b h h U h Em En O Cm Eh Eh U X
16 7580416 75804
Kaavan (I) mukainen proliinijohdannainen ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat voidaan formuloida koostumuksiksi, jotka on tarkoitettu annettaviksi suun kautta, kuten tableteiksi, kapseleiksi, rakeiksi, jauheiksi, siira-5 peiksi ja eliksiireiksi, tai steriileiksi liuoksiksi tai suspensioiksi annettavaksi parenteraalisesti. Tätä tarkoitusta varten voidaan valmistaa farmaseuttisia koostumuksia yhdestä tai useammasta esillä olevan keksinnön mukaisesta lopputuotteesta (aktiiviaineosana) ja farmaseuttisesti hy-10 väksyttävistä apuaineista kuten täyteaineista, kantajista, sideaineista, stabilointiaineista ja makuaineista. Esillä olevan keksinnön mukaisten yhdisteiden vuorokausiannos aikuisille on 0,5 mg - 2 g, edullisesti noin 1-500 mg annettuna oraalisti ja 0,1-600 mg, edullisesti noin 0,3-300 mg 15 annettuna parenteraalisti.The proline derivative of formula (I) and its pharmaceutically acceptable salts may be formulated into compositions for oral administration, such as tablets, capsules, granules, powders, Siira-5 pellets and elixirs, or as sterile solutions or suspensions for parenteral administration. For this purpose, pharmaceutical compositions can be prepared from one or more of the final products of the present invention (as active ingredient) and pharmaceutically acceptable excipients such as excipients, carriers, binders, stabilizers and flavors. The daily dose of the compounds of the present invention for adults is 0.5 mg to 2 g, preferably about 1 to 500 mg administered orally and 0.1 to 600 mg, preferably about 0.3 to 300 mg administered parenterally.
Esillä olevan keksinnön mukaisten yhdisteiden valmistusmenetelmää kuvataan nyt seuraavien esimerkkien avulla, joihin keksintö ei suinkaan rajoitu.The process for preparing the compounds of the present invention will now be described by way of the following examples, to which the invention is by no means limited.
Esimerkki 1 20 N-bustituoitujen aminohappojen valmistus a) D-alaniini (4,5 g) liuotettiin 230 ml:aan Na2C03:n 1-normaalista vesiliuosta sekoittaen. Liuokseen lisättiin tipoittain 100 ml tetrahydrofuraania, joka sisälsi 9,0 g sykloheksyylikarbonyylikloridia, 5-10°C:ssa, jossa lämpöti-25 lassa seosta sekoitettiin 30 minuuttia, sen jälkeen sekoi- : tettiin huoneen lämpötilassa 1,5 tunnin ajan. Tämän jälkeen reaktioseokseen lisättiin 2N HC1 niin, että sen pH saatiin välille 1-2. Reaktioseosta uutettiin etyyliasetaatilla ja orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä NaCl-liuoksella ja 30 kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Suodos haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin raakatuote. Uudelleenkiteytys etyyli-asetaatti/n-heksaanista antoi 4,65 g N-sykloheksyylikarbonyy-li-D-alaniinia. ~ +26,6°.Example 1 Preparation of 20 N-busted amino acids a) D-Alanine (4.5 g) was dissolved in 230 ml of 1N aqueous Na 2 CO 3 with stirring. To the solution was added dropwise 100 ml of tetrahydrofuran containing 9.0 g of cyclohexylcarbonyl chloride at 5-10 ° C, at which temperature the mixture was stirred for 30 minutes, then stirred at room temperature for 1.5 hours. 2N HCl was then added to the reaction mixture to bring the pH to between 1-2. The reaction mixture was extracted with ethyl acetate, and the organic layer was washed with saturated NaCl solution and dried over magnesium sulfate. The filtrate was evaporated in vacuo to give the crude product. Recrystallization from ethyl acetate / n-hexane gave 4.65 g of N-cyclohexylcarbonyl-1-D-alanine. ~ + 26.6 °.
.* Seuraavassa luetellut yhdisteet valmistettiin edellä 35 kuvatulla menetelmällä.* The compounds listed below were prepared by the method described above.
17 75804 h.17 75804 h.
en enen en
H -HH -H
I 3 3 •H Λ! Λί 3 πϊ ro e * M λ; 6 Λ E ^ E - -I 3 3 • H Λ! 3ί 3 πϊ ro e * M λ; 6 Λ E ^ E - -
O O ^0 ^ EKO O ^ 0 ^ EK
o— O -— o ·—. LO .—. .—. -—. ·.·. · *· ΓΟ (No— O -— o · -. LO .—. .-. -. ·. ·. · * · ΓΟ (N
+J ook cr se LO K » ® OK OK QK Q 5C —·—·+ J ook cr se LO K »® OK OK QK Q 5C - · - ·
(D ^ O ^ O ^ O ro O rH O H O O H -—- O t—I(D ^ O ^ O ^ O ro O rH O H O O H -—- O t — I
m oo qj eri qj o<i) ro φ * φ -O γο-η en rorH o lom oo qj eri qj o <i) ro φ * φ -O γο-η en rorH o lo
•H Hg Hg rH g Hg LO S3 D — - Q — OJ (N• H Hg Hg rH g Hg LO S3 D - - Q - OJ (N
rH I + | I I + U K U ' - 3 * V k v V —' LO CNI —' iJl O rf m 4J II O II O II O H O II O II O K--' K - ^ ]| «. - «. - *. - g (N g (N «. * •H Ό OH OH OH OH OH OH Z I LO Z | o rorH I + | I I + U K U '- 3 * V k v V -' LO CNI - 'iJl O rf m 4J II O II O II O H O II O II O K--' K - ^] | «. - «. - *. - g (N g (N «. * • H Ό OH OH OH OH OH OH Z I LO Z | o ro
to β Γ", II r-. Il Il 4—, Il 1^ Il Il I CN σι | rH o rHto β Γ ", II r-. Il Il 4—, Il 1 ^ Il Il I CN σι | rH o rH
>1 3 U .¾ U Λ5 O «U U .¾1 U K * - K * * *> 1 3 U .¾ U Λ5 O «U U .¾1 U K * - K * * *
Puin "vJ —' '-ij'-r VJ — Vj — *<| — H HÖH HroifPuin "vJ - '' -ij'-r VJ - Vj - * <| - H HÖH Hroif
I I I I I I I II I I I I I I I
3 33333333 3333333
H-) 4H m <4-1 4-1 m MH 4H UHH-) 4H m <4-1 4-1 m MH 4H UH
0)0 0 000000 ε u u u u u u u u •μ Ό Ό Ό Ό Ό Ό Ό Ό 4-* >1 ^4 >1 >1 ^4 ^4 ^4 4-» ,β Λ Λ Λ Λ A Λ Λ 03 3 333333 β Μ Ρ-ι Μ Μ Μ )Η >Η >Η •μ 4-» 4J 4-) 4-) 4-» 4J 4-> 4-> rH 0) φ φ φ φ φ φ φ 0-Ρ 4-> 4J 4-» 4-» 4-> 4-> 4-> rl 4-) — -Η -· -Η — ·Η — -Η — -Η — ·Η — -Η -- -Η X -μ β ·Η e -Η β -Η β -Η β -rl β -Η β -rl β 3 33 33 33 33 33 33 33 33 φ φ 3 φ 3 0)3 0)3 (1)3 (1)3 0)3 (1)3 Κ > μ > μ > >Η > μ > )Η >)η >Μ > μ0) 0 0 000000 ε uuuuuuuu • μ Ό Ό Ό Ό Ό Ό Ό Ό 4- *> 1 ^ 4> 1> 1 ^ 4 ^ 4 ^ 4 4- »,, β Λ Λ Λ Λ A Λ Λ 03 3 333333 β Μ Ρ-ι Μ Μ Μ) Η> Η> Η • μ 4- »4J 4-) 4-) 4-» 4J 4-> 4-> rH 0) φ φ φ φ φ φ φ 0-Ρ 4- > 4J 4- »4-» 4-> 4-> 4-> rl 4-) - -Η - · -Η - · Η - -Η - -Η - · Η - -Η - -Η X -μ β · Η e -Η β -Η β -Η β -rl β -Η β -rl β 3 33 33 33 33 33 33 33 33 φ φ 3 φ 3 0) 3 0) 3 (1) 3 (1) 3 0) 3 (1) 3 Κ> μ> μ>> Η> μ>) Η>) η> Μ> μ
I I I I I II I I I I I
I I -rl I I ·Η I -rl I ·Η I -rl I ·ΗI I -rl I I · Η I -rl I · Η I -rl I · Η
>1 I >1 rH >1 I >1 rH >1 rH >1Η >1 rH >1 rH> 1 I> 1 rH> 1 I> 1 rH> 1 rH> 1Η> 1 rH> 1 rH
>1 >1 >4 >1 >4 >1 >4 >4 >1 >1 >1 >1 >4 >4 >1 >1 4.) 3 >1-H 3 >1 3 >1-<H 3>i 3 >4 3 >i 3>-i 3>i 3 Λί β Ό X C Λί fi Ό Λί β X β X C Λ( β Λί β > φ Ο -Η φ Ο -Η φ Ο -Η φ Ο -Η φ 0 Ή φ Ο Ή φ Ο -Η φ Ο -Η -Η -μ .C Λ μ .β Λ Ό Λ Λ μ ΚΙΛΌ ΛΛΌ ΛΛΌ ΛΛΌΛΛΌ 0 <d ojho ο)η·η oho ο μ -η ο μ -η ομ·η ο>η·ηο)η·η tr 0) '—13'—I ι—I 3 μ ι—I 3 ι—I <—I 3 Μ ι—13)-1 <—I 3 )Η I—I 3 μ '—13)-1 3 β Λί Λί Λί Λί Λ! 0 XXX XX 0 Λ! Λί 0 Λ! Λί 0 Λί Λί 0 Λί Λί Ο> 1> 1> 4> 1> 4> 1> 4> 4> 1> 1> 1> 1> 4> 4> 1> 1 4.) 3> 1-H 3> 1 3> 1- <H 3 > i 3> 4 3> i 3> -i 3> i 3 ί β Ό XC Λί fi Ό Λί β X β XC Λ (β Λί β> φ Ο -Η φ Ο -Η φ Ο -Η φ Ο -Η φ 0 Ή φ Ο Ή φ Ο -Η φ Ο -Η -Η -μ .C Λ μ .β Λ Ό Λ Λ μ ΚΙΛΌ ΛΛΌ ΛΛΌ ΛΛΌΛΛΌ 0 <d ojho ο) η · η oho ο μ -η ο μ - η ομ · η ο> η · ηο) η · η tr 0) '—13' — I ι — I 3 μ ι — I 3 ι — I <—I 3 Μ ι — 13) -1 <—I 3) Η I — I 3 μ '—13) -1 3 β Λί Λί Λί Λί Λ! 0 XXX XX 0 Λ! 0ί 0 Λ! 0ί 0 Λί Λί 0 Λί Λί Ο
φ -rl ^l-rl -rl >4 -rl rH >1-rl -r| >4-rl rH >4 -rl r-H >4-rl rH >4-rl rH >4-H rHφ -rl ^ 1-rl -rl> 4 -rl rH> 1-rl -r | > 4-rl rH> 4-rl r-H> 4-rl rH> 4-rl rH> 4-H rH
K 3 en ri rH en rH Λί w ri h 3 h en rH x en ri x μηλ: wha; i) & β r-H 3 3 3 3 3 3 33K 3 en ri rH en rH Λί w ri h 3 h en rH x en ri x μηλ: wha; i) & β r-H 3 3 3 3 3 3 33
S +* Il IS + * Il I
I >1 O -rl -rl I I ft >1 -rl I β -rl I I I -rl I I β I I >4 I I β I I -μ Ι Ι β Ι Ι -Η Ι Ι 3 +> Λί ο ο -η Λίθο Λί ο μ Λίοω-ΗΛίοα) ,ν ο >-η χο·η )(οο 1 Ο Ο) Λ UH β (1) Λ rH φΛ-μ ΦΛΉ β φ Λ S φ Λ tr Ο) Λ 3 ΦΛϋ -μ & Λ μ I 3 Λμΐ Λ μ I Λ M I -Η Λ M I A M I .β μ >4 ,β μ μ 4J -μ 3 Ο 3 Ο Η Ο 3 Q 03Q-rl 03Q-H 0 3 Ο 03Q-H O 3Η 033 3 β Λ rH ,lfi I 3 rH χ ι H K I fi H M I η H )( I HXI fi Λ Ό 0 Λί -H -H -H X -H -H -H Λί -H -H 3 Λί -H -H >4 Λί -H -r| -H X -H -μ -μ Λί -H -μ Λ! -μ -μI> 1 O -rl -rl II ft> 1 -rl I β -rl III -rl II β II> 4 II β II -μ Ι Ι β Ι Ι -Η Ι Ι 3 +> Λί ο ο -η Λίθο Λί ο μ Λίοω-ΗΛίοα), ν ο> -η χο · η) (οο 1 Ο Ο) Λ UH β (1) Λ rH φΛ-μ ΦΛΉ β φ Λ S φ Λ tr Ο) Λ 3 ΦΛϋ -μ & Λ μ I 3 Λμΐ Λ μ I Λ MI -Η Λ MIAMI .β μ> 4, β μ μ 4J -μ 3 Ο 3 Ο Η Ο 3 Q 03Q-rl 03Q-H 0 3 Ο 03Q-HO 3Η 033 3 β Λ rH, lfi I 3 rH χ ι HKI fi HMI η H) (I HXI fi Λ Ό 0 Λί -H -H -HX -H -H -H Λί -H -H 3 Λί -H -H> 4 Λί -H -r | -HX -H -μ -μ Λί -H -μ Λ! -μ -μ
β -μ β >4 rH ι—I rH >1 rl rl fi >4 rH rH 3 >4 rH rH rH >4 rH rH β >4 rH rH -μ >4 rH rH >4d Hβ -μ β> 4 rH ι — I rH> 1 rl rl fi> 4 rH rH 3> 4 rH rH rH> 4 rH rH β> 4 rH rH -μ> 4 rH rH> 4d H
30 -H 3 >4 >4 >4 3>4 >4-μ 3 >1 >(MH 3 >4 >4 tT 3 >4 >4-rt 0) >4 >1 g 3>i>i 3 >4 >4 I β ε I >1 >4 >4·μ I >4 >4·μ I >4 >1 O I >4 >4·Η I >4 >4-μ I >4 >4 3 I >1 >4 I >1 >4 μ Z -μ 3 Ζ 3 β β β Ζ 3 β 3 Ζ 3 β -μ Ζ 3 β Η ζ 3 β β Ζ 3 β -μ Ζ 3 β Ζ 3 β β is 7580430 -H 3> 4> 4> 4 3> 4> 4-μ 3> 1> (MH 3> 4> 4 tT 3> 4> 4-rt 0)> 4> 1 g 3> i> i 3> 4> 4 I β ε I> 1> 4> 4 · μ I> 4> 4 · μ I> 4> 1 OI> 4> 4 · Η I> 4> 4-μ I> 4> 4 3 I> 1 > 4 I> 1> 4 μ Z -μ 3 Ζ 3 β β β Ζ 3 β 3 Ζ 3 β -μ Ζ 3 β Η ζ 3 β β Ζ 3 β -μ Ζ 3 β Ζ 3 β β is 75804
Esimerkki 2 a) 3- (N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alanyylitio)- 2-D-metyylipropaanihappo N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alaniini (5,97 g) liuo-5 tettiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (100 ml). Liuokseen lisättiin karbonyyli-di-imidatsolia (5,84.g) -20°C:n ja -15°C:n välillä ja seosta sekoitettiin siinä lämpötilassa tunnin ajan. Sen jälkeen lisättiin 3-merkapto-2-D-metyyli-propaanihappoa (3,60 g) ja seosta sekoitettiin lämpötilassa 10 -15... -10°C tunnin ajan, sitten vielä huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Seos haihdutettiin tyhjössä liuottimen poistamiseksi. Jäännökseen lisättiin vettä (40 ml) ja 2N-HC1 lisättiin seokseen sen pH:n säätämiseksi välille 1-2. Seosta uutettiin etyyliasetaatilla ja orgaaninen kerros pestiin 15 kyllästetyllä NaCl-liuoksella kahdesti ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Suodos haihdutettiin tyhjössä raaka-tuotteen saamiseksi. Uudelleenkiteytys etyyliasetaatti/n-heksaanista antoi otsikkoyhdisteen värittöminä prisma-maisina kiteinä (7,50 g, 83 %). Sp. 149-152°C.Example 2 a) 3- (N-Cyclohexylcarbonyl-D-alanylthio) -2-D-methylpropanoic acid N-cyclohexylcarbonyl-D-alanine (5.97 g) was dissolved in dry tetrahydrofuran (100 ml). To the solution was added carbonyl diimidazole (5.84 g) between -20 ° C and -15 ° C, and the mixture was stirred at that temperature for 1 hour. 3-Mercapto-2-D-methylpropanoic acid (3.60 g) was then added and the mixture was stirred at 10-15 ° C for 10 hours, then at room temperature for 1 hour. The mixture was evaporated in vacuo to remove the solvent. Water (40 mL) was added to the residue, and 2N-HCl was added to the mixture to adjust its pH to 1-2. The mixture was extracted with ethyl acetate and the organic layer was washed twice with saturated NaCl solution and dried over magnesium sulfate. The filtrate was evaporated in vacuo to give the crude product. Recrystallization from ethyl acetate / n-hexane gave the title compound as colorless prismatic crystals (7.50 g, 83%). Sp. 149-152 ° C.
20 ÄZD - +46,4° (C=l, 07, MeOH) NMR (CD3OD, 6 ): 1,20 (3H, d), 1,35 (3H, d), 1,20-2,0 (UH, m), 2,40-2,80 (1H, m), 3,05 (2H, m), 4,50 (1H, m) b) 3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-fenyyliglysyyli-tio)-2-D-metyylipropaanihappo 25 Yllä kohdassa (a) esitetty menettely toistettiin käyttäen N-sykloheksyylikarbonyyli-D-fenyyliglysiiniä (2,61 g), karbonyyli-di-imidatsolia (1,95 g) ja 3-merkapto-2-D-metyylipropaanihappoa (1,20 g). Saatiin otsikkoyhdiste keltaisena öljynä (2,07 g, 57 %).Δ δ - + 46.4 ° (C = 1.07, MeOH) NMR (CD 3 OD, δ): 1.20 (3H, d), 1.35 (3H, d), 1.20-2.0 ( UH, m), 2.40-2.80 (1H, m), 3.05 (2H, m), 4.50 (1H, m) b) 3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-phenylglycylthio) -2-D-methylpropanoic acid The procedure of (a) above was repeated using N-cyclohexylcarbonyl-D-phenylglycine (2.61 g), carbonyldiimidazole (1.95 g) and 3-mercapto-2-D- methylpropanoic acid (1.20 g). Obtained the title compound as a yellow oil (2.07 g, 57%).
30 Ä7d = -48,7° (C = 1,19, MeOH) NMR (CDC13, S ): 1,24 (3H, d) , 1,20-2,10 (UH, m), 2,40- 2,80 (1H, m), 3,Ιο (2H, m), 5,75 (1H, d), 6,40-6,80 (lH,m), 7,30 (5H, S) , 8,90 (1H, S) .Δ D = -48.7 ° (C = 1.19, MeOH) NMR (CDCl 3, δ): 1.24 (3H, d), 1.20-2.10 (UH, m), 2.40- 2.80 (1H, m), 3.3, (2H, m), 5.75 (1H, d), 6.40-6.80 (1H, m), 7.30 (5H, S), .90 (1H, S).
c) 3- (N-sykloheksyylikarbonyyli-D-leusyylltio) -2-D- 35 metyylipropaanihappoc) 3- (N-Cyclohexylcarbonyl-D-leucylthio) -2-D-methylpropanoic acid
Kohdan (a) menettely toistettiin käyttäen N-sykloheks- 19 75804 yylikarbonyyli-D-leusiinia (2,41 g), karbonyyli-di-imidatso-lia (1,95 g) ja 3-merkapto-2-D-metyylipropaanihappoa (1,20 g). Saatiin otsikkoyhdiste öljynä (2,40 g, 70 %) .The procedure of (a) was repeated using N-cyclohexyl-19-carbonyl-D-leucine (2.41 g), carbonyl-diimidazole (1.95 g) and 3-mercapto-2-D-methylpropanoic acid (1 , 20 g). Obtained the title compound as an oil (2.40 g, 70%).
Z&7d = +12,2° (C = 1,03, MeOH) 5 NMR (CDCI3, & ) : 0,95 (6H, d) , 1,28 (3H, d) , 1,20-2,10 (UH, m), 2,40-2,80 (1H, m), 3,10 (2H, m), 4,70 (1H, m), 6,00- 6,30 (1H, m), 9,20 (1H, S).Z + 7d = + 12.2 ° (C = 1.03, MeOH) δ NMR (CDCl 3, δ): 0.95 (6H, d), 1.28 (3H, d), 1.20-2.10 ( UH, m), 2.40-2.80 (1H, m), 3.10 (2H, m), 4.70 (1H, m), 6.00-6.30 (1H, m), 9 , 20 (1 H, S).
d) 3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-glutaminyylitio)-2-D-metyylipropaanihappo 10 Yllä kohdassa (a) esitetty menettely toistettiin käyt täen N-sykloheksyylikarbonyyli-D-glutamiinia (2,56 g), kar-bonyyli-di-imidatsolia (1,95 g) ja 3-merkapto-2-D-metyyli-propaanihappoa (1,20 g). Saatiin 0,70 g otsikkoyhdistettä (20 %). Sp. 146-149°C.d) 3- (N-Cyclohexylcarbonyl-D-glutaminylthio) -2-D-methylpropanoic acid The procedure of (a) above was repeated using N-cyclohexylcarbonyl-D-glutamine (2.56 g), carbonyl-di- imidazole (1.95 g) and 3-mercapto-2-D-methylpropanoic acid (1.20 g). 0.70 g of the title compound was obtained (20%). Sp. 146-149 ° C.
I5 £>7d = +10,8° (C = 1,05, MeOH) NMR (CD3OD, S ) i 1,20 (3H, d) , 1,20-2,10 (UH, m), 2,30 (4H, m), 2,40-2,80 (1H, m), 3,05 (2H, m), 4,50 (1H, m).15 D = + 10.8 ° (C = 1.05, MeOH) NMR (CD 3 OD, δ) δ 1.20 (3H, d), 1.20-2.10 (UH, m), 2, Δ (4H, m), 2.40-2.80 (1H, m), 3.05 (2H, m), 4.50 (1H, m).
e) 3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-fenyylialanyyli-tio)-2-D-metyylipropaanihappo 20 Yllä kohdassa (a) esitetty menettely toistettiin käyt täen N-sykloheksyylikarbonyyli-D-fenyylialaniinia (1,37 g), karbonyyli-di-imidatsolia (1,0 g) ja 3-merkapto--2-D-metyyli-propaanihappoa (0,60 g). Saatiin otsikkoyhdiste öljynä (1,5 g, 79 %).e) 3- (N-Cyclohexylcarbonyl-D-phenylalanylthio) -2-D-methylpropanoic acid The procedure of (a) above was repeated using N-cyclohexylcarbonyl-D-phenylalanine (1.37 g), carbonyldi- imidazole (1.0 g) and 3-mercapto-2-D-methylpropanoic acid (0.60 g). The title compound was obtained as an oil (1.5 g, 79%).
25 Zä7d = +13,9° (C = 1,02, MeOH) NMR (CDCI3, £): 1,25 (3H, d), 1,20-2,0 (10H, m), 2,1-3,0 (2H, m), 3,0-3,4 (4H, m), 4,95 (1H, t), 6,19 (1H, d), 7,24 (5H, S), 10,12 (1H, S).Δ Zd = + 13.9 ° (C = 1.02, MeOH) NMR (CDCl 3, δ): 1.25 (3H, d), 1.20-2.0 (10H, m), 2.1- 3.0 (2H, m), 3.0-3.4 (4H, m), 4.95 (1H, t), 6.19 (1H, d), 7.24 (5H, S), 10 .12 (1H, S).
f) 3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-metionyylitio)- 20 2-D-metyylipropaanihappof) 3- (N-Cyclohexylcarbonyl-D-methionylthio) -20-D-methylpropanoic acid
Kohdan (a) menettely toistettiin käyttäen N-syklohek-syylikarbonyyli-D-metioniinia (0,325 g), karbonyyli-di-imidatsolia (0,25 g) ja 3-merkapto-2-D-metyylipropaanihap-poa (0,15 g). Saatiin otsikkoyhdiste öljynä (0,29 g, 64 %).The procedure of (a) was repeated using N-cyclohexylcarbonyl-D-methionine (0.325 g), carbonyldiimidazole (0.25 g) and 3-mercapto-2-D-methylpropanoic acid (0.15 g). . Obtained the title compound as an oil (0.29 g, 64%).
35 &7d = -7,9° (C = 1,0, MeOH) 20 75804 NMR (CDC13,S): 1,26 (3H, d), 1,2-2,0 (10H, m), 2,09 (3H, S), 2,0-3,2 (8H, m), 4,5-5,0 (1H, m), 6,62 (1H, d), 10,07 (1H, S).35 D = -7.9 ° (C = 1.0, MeOH) δ 75804 NMR (CDCl 3, δ): 1.26 (3H, d), 1.2-2.0 (10H, m), 2, 09 (3H, S), 2.0-3.2 (8H, m), 4.5-5.0 (1H, m), 6.62 (1H, d), 10.07 (1H, S) .
g) 3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D—tryptofyylitio)-5 2-D-metyylipropaanihappog) 3- (N-Cyclohexylcarbonyl-D-tryptophylthio) -5 2-D-methylpropanoic acid
Yllä kohdassa (a) esitetty menettely toistettiin käyttäen N-sykloheksyylikarbonyyli-D-tryptofaania (0,157 g), karbonyyli-di-imidatsolia (0,1 g) ja 3-merkapto-2-D-metyyli-propaanihappoa (0,06 g). Saatiin kumimainen erä otsikkoyh-10 distettä (0,17 g, 82 %).The procedure of (a) above was repeated using N-cyclohexylcarbonyl-D-tryptophan (0.157 g), carbonyldiimidazole (0.1 g) and 3-mercapto-2-D-methylpropanoic acid (0.06 g). . A gummy portion of the title compound (0.17 g, 82%) was obtained.
Z£7d = -7,1° (C = 1,0, MeOH) NMR (CDC13, £): 1,26 (3H, d), 1,2-2,4 (11H, m), 2,5-2,9 (1H, m), 3,03-3,3 (2H, m), 3,35 (2H, d), 4,87 (1H, t), 6,4-6,9 (2H, broad S), 6,9-7,8 (5H, m), 10,5 (1H, S).Δ 7d = -7.1 ° (C = 1.0, MeOH) NMR (CDCl 3, δ): 1.26 (3H, d), 1.2-2.4 (11H, m), 2.5 -2.9 (1H, m), 3.03-3.3 (2H, m), 3.35 (2H, d), 4.87 (1H, t), 6.4-6.9 (2H , broad S), 6.9-7.8 (5H, m), 10.5 (1H, S).
15 Esimerkki 3 a) Ν-/Γ3- (N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alanyylitio) -2-P-metyylipropanoyyli7-L-proliini 3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alanyylitio)-2-D-metyylipropaanihappo (1,51 g) liuotettiin kuivaan tetrahydrofu-20 raaniin (40 ml). Liuokseen lisättiin trietyyliamiinia (0,61 g) ja etyyliklooriformaattia (0,65 g) -5°C:ssa sekoittaen. Viiden minuutin kuluttua lisättiin liuos, jossa oli L-proliinia (0,58 g) ja trietyyliamiinia (0,61 g) liuotettuna veteen (5 ml), ja seosta sekoitettiin 0°C:ssa tunnin ajan, 25 sen jälkeen huoneen lämpötilassa 30 minuuttia. Seos haihdutettiin tyhjössä liuottimen poistamiseksi. Kun jäännökseen oli lisätty vettä, lisättiin seokseen 2N-HC1 sen pH:n säätä-I miseksi arvoon 1-2. Reaktioseosta uutettiin etyyliasetaa- : tiliä ja orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä NaCl-liuok- 30 sella kahdesti ja kuivattiin mangesiumsulfaatilla. Suodos väkevöitiin tyhjössä etyyliasetaatin poistamiseksi ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluenttina kloroformin ja metanolin seosta (100:1-100:2)., Lopputuotet-ta sisältävät fraktiot otettiin talteen ja haihdutettiin tyh-35 jössä, jolloin saatiin kumimainen erä otsikkoyhdistettä (0,3 g).Example 3 a) β- [β- (N-Cyclohexylcarbonyl-D-alanylthio) -2-β-methylpropanoyl] -L-proline 3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-alanylthio) -2-D-methylpropanoic acid (1.51 g) was dissolved in dry tetrahydrofuran (40 ml). To the solution were added triethylamine (0.61 g) and ethyl chloroformate (0.65 g) at -5 ° C with stirring. After 5 minutes, a solution of L-proline (0.58 g) and triethylamine (0.61 g) dissolved in water (5 ml) was added, and the mixture was stirred at 0 ° C for 1 hour, then at room temperature for 30 minutes. . The mixture was evaporated in vacuo to remove the solvent. After water was added to the residue, 2N-HCl was added to the mixture to adjust its pH to 1-2. The reaction mixture was extracted with ethyl acetate, and the organic layer was washed twice with saturated NaCl solution and dried over mangesium sulfate. The filtrate was concentrated in vacuo to remove ethyl acetate and the residue was chromatographed on silica gel using a mixture of chloroform and methanol (100: 1-100: 2) as eluent. The fractions containing the final product were collected and evaporated in vacuo to give a gummy batch of the title compound (0.3 g). ).
2i 75804 b) Sama yhdiste voitiin valmistaa seuraavalla menetelmällä : 3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alanyylitio)-2-D-metyy-lipropaanihappoa (6,3 g) ja N-hydroksisukkinimidiä (2,3 g) 5 liuotettiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (50 ml). Liuokseen lisättiin disykloheksyylikarbo-di-imidiä (4,3 g) lämpötila-välillä 0-5°C ja seosta sekoitettiin tässä lämpötilassa yli yön. Reaktion jälkeen sakka suodatettiin pois ja liukenematon aines pestiin pienellä määrällä tetrahydrofuraania. Suo-10 dos ja pesunesteet yhdistettiin ja väkevöitiin tyhjössä.2i 75804 b) The same compound could be prepared by the following method: 3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-alanylthio) -2-D-methylpropanoic acid (6.3 g) and N-hydroxysuccinimide (2.3 g) were dissolved in dry tetrahydrofuran. (50 ml). Dicyclohexylcarbodiimide (4.3 g) was added to the solution at 0-5 ° C, and the mixture was stirred at this temperature overnight. After the reaction, the precipitate was filtered off, and the insoluble matter was washed with a small amount of tetrahydrofuran. The Suo-10 dosage and washings were combined and concentrated in vacuo.
Jäännökseen lisättiin etyyliasetaattia ja seos suodatettiin. Etyyliasetaattiliuos pestiin 0,5-normaalise11a HClrlla, vedellä, Na2C03:n vesiliuoksella ja kyllästetyllä NaCl-liuok-sella esitetyssä järjestyksessä. Liuos kuivattiin magnesium-15 sulfaatilla, haihdutettiin tyhjössä ja jäännös kiinteytettiin lisäämällä etyyliasetaatin ja heksaanin seosta (1:10). Kiinteän tuotteen saanto oli 6,90 g (87 %). Sp. 113-116°C. D*Jo = +14,2° (C=l, 05, Me OH) NMR (CDC13,&): 1,38 (6H, d) , 1,20-2,20 (UH, m), 2,82 (4H, 20 S), 2,8-3,30 (3H, m), 4,75 (1H, m), 6,30 (1H, broad d).Ethyl acetate was added to the residue, and the mixture was filtered. The ethyl acetate solution was washed with 0.5 N HCl, water, aqueous Na 2 CO 3 and saturated NaCl in the order shown. The solution was dried over magnesium sulfate, evaporated in vacuo and the residue solidified by the addition of a mixture of ethyl acetate and hexane (1:10). The yield of solid product was 6.90 g (87%). Sp. 113-116 ° C. D * Jo = + 14.2 ° (C = 1.05, Me OH) NMR (CDCl 3, δ): 1.38 (6H, d), 1.20-2.20 (UH, m), 2, 82 (4H, 20S), 2.8-3.30 (3H, m), 4.75 (1H, m), 6.30 (1H, broad d).
Aktivoitu esteri (3,98 g) liuotettiin tetrahydrofuraaniin (40 ml). Liuokseen lisättiin vettä (5 ml), johon oli liuotettu L-proliinia (1,15 g), ja N-etyylimorfoliinia (1,26 ml) ja seosta sekoitettiin yli yön. Seos haihdutettiin 25 tyhjössä liuotinten poistamiseksi ja jäännökseen lisättiin vettä. Seokseen lisättiin 2-normaalista HC1 sen pH:n säätämiseksi välille 1-2. Reaktioseosta uutettiin etyyliasetaatilla ja orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä NaCl-liuok-sella ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Suodos haihdutet-30 tiin tyhjössä. Jäännös pylväskromatografoitiin silikageelil-lä käyttäen kloroformin ja metanolin seosta (100:1-100:2) eluenttina. Tuote (1,45 g), joka saatiin haihdutettaessa eluaatti tyhjössä, todettiin identtiseksi otsikkoyhdisteen - kanssa NMR-analyysillä.The activated ester (3.98 g) was dissolved in tetrahydrofuran (40 ml). To the solution were added water (5 ml) dissolved in L-proline (1.15 g) and N-ethylmorpholine (1.26 ml), and the mixture was stirred overnight. The mixture was evaporated in vacuo to remove solvents and water was added to the residue. 2N HCl was added to the mixture to adjust its pH to 1-2. The reaction mixture was extracted with ethyl acetate, and the organic layer was washed with saturated NaCl solution and dried over magnesium sulfate. The filtrate was evaporated in vacuo. The residue was subjected to silica gel column chromatography using a mixture of chloroform and methanol (100: 1 to 100: 2) as an eluent. The product (1.45 g) obtained by evaporating the eluate in vacuo was found to be identical to the title compound by NMR analysis.
35 c) Otsikkoyhdiste voitiin valmistaa myös seuraavalla menetelmällä: 22 7 5 80 4 3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alanyylitio)-2-D-metyy-lipropaanihappoa (4,52 g) liuotettiin tionyylikloridiin (5 ml). Liuokseen lisättiin tippa dimetyyliformamidia ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yli yön. Seos haih-5 dutettiin tyhjössä liuotinten poistamiseksi ja jäännökseen lisättiin kuivaa tolueenia (2 ml), ja seos haihdutettiin uudelleen tyhjössä liuottimen poistamiseksi. Jäännökseen lisättiin kuivaa tetrahydrofuraania (10 ml) sekoittaen. Tet-rahydrofuraaniliuos, joka sisälsi happokloridin, lisättiin 10 tipoittain lämpötilassa 5-10°C samalla sekoittaen veteen (25 ml), johon oli liuotettu L-proliini (2,3 g) ja Na2C03 (2,5 g). Seosta sekoitettiin tässä lämpötilassa tunnin ajan ja huoneen lämpötilassa vielä kaksi tuntia. Reaktioseosta uutettiin kloroformilla. Vesipitoiseen kerrokseen lisättiin 15 2-normaalista HCl sen pH:n säätämiseksi välille 1-2. Kun liuos oli uutettu kloroformilla, pestiin kloroformikerros kyllästetyllä NaCl-liuoksella kahdesti ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Kun kloroformi oli poistettu, kromatogra-foitiin jäännös silikageelipylväässä käyttäen kloroformin ja 20 metanolin seosta (100:1-100:2) eluenttina. Kun seos haihdutettiin tyhjössä, saatiin kumimainen aine (1,6 g). Tämä aine todettiin identtiseksi otsikkoyhdisteen kanssa NMR-analyy-sillä.C) The title compound could also be prepared by the following method: 3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-alanylthio) -2-D-methylpropanoic acid (4.52 g) was dissolved in thionyl chloride (5 ml). A drop of dimethylformamide was added to the solution, and the mixture was stirred at room temperature overnight. The mixture was evaporated in vacuo to remove solvents and dry toluene (2 ml) was added to the residue, and the mixture was re-evaporated in vacuo to remove the solvent. Dry tetrahydrofuran (10 ml) was added to the residue with stirring. A solution of tetrahydrofuran containing the acid chloride was added dropwise at 5-10 ° C with stirring in water (25 ml) dissolved in L-proline (2.3 g) and Na 2 CO 3 (2.5 g). The mixture was stirred at this temperature for one hour and at room temperature for another two hours. The reaction mixture was extracted with chloroform. To the aqueous layer was added 2N normal HCl to adjust its pH to 1-2. After the solution was extracted with chloroform, the chloroform layer was washed twice with saturated NaCl solution and dried over magnesium sulfate. After removal of chloroform, the residue was chromatographed on a silica gel column using a mixture of chloroform and methanol (100: 1-100: 2) as eluent. Evaporation of the mixture in vacuo gave a gummy substance (1.6 g). This material was found to be identical to the title compound by NMR analysis.
: d) Otsikkoyhdiste voitiin valmistaa vielä menetelmäl- 25 lä, joka on kuvattu seuraavassa.: d) The title compound could be further prepared by the method described below.
3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alanyylitio)-2-D-metyy-lipropaanihappoa (3,01 g) ja L-proliinin t-butyyliesteriä (1,71 g) liuotettiin kuivaan dikloorimetaaniin (50 ml) ja liuokseen lisättiin disykloheksyylikarbc-di-imidiä (2,15 g) 30 sekoittaen ja jäillä jäähdyttäen. Seosta sekoitettiin samassa lämpötilassa puolen tunnin ajan ja pidettiin 5°C:ssa yli yön. Reaktioseos suodatettiin ja liukenematon aines pestiin dikloorimetaanilla. Suodos ja pesunesteet yhdistettiin ja pestiin 1-normaalisella HCl:11a, vedellä, 1-normaalisella 35 NaHCC^lla ja kyllästetyllä NaCl-liuoksella mainitussa järjestyksessä, kuivattiin MgS04:lla ja haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin kumimainen erä N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyy- 23 75804 li-D-alanyylitio)-2-D-metyylipropyyli7-L-proliinin t-butyy-liesteriä (4,3 g). 4,0 g tätä esteriä liuotettiin anisoliin (30 g) ja liuokseen lisättiin trifluorietikkahappoa (10 ml). Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan ja 5 haihdutettiin tyhjössä trifluorietikkahappoylimäärän poistamiseksi. Jäännös kromatografoitiin silikageelipylväässä (kolonni: 2 x 35 cm) käyttäen eluenttina metanolin ja kloroformin seosta (1:100-3:100). Lopputuotetta sisältävät fraktiot otettiin talteen ja haihdutettiin tyhjössä, jolloin 10 saatiin kumimainen aine (3,4 g). Tämän aineen todettiin olevan identtinen otsikkoyhdisteen kanssa NMRilla ja ohutker-roskromatografiällä.3- (N-Cyclohexylcarbonyl-D-alanylthio) -2-D-methylpropanoic acid (3.01 g) and L-proline t-butyl ester (1.71 g) were dissolved in dry dichloromethane (50 ml) and dicyclohexylcarboxylate was added to the solution. diimide (2.15 g) with stirring and ice-cooling. The mixture was stirred at the same temperature for half an hour and kept at 5 ° C overnight. The reaction mixture was filtered and the insoluble material was washed with dichloromethane. The filtrate and washings were combined and washed with 1N HCl, water, 1N NaHCO 3 and saturated NaCl solution in that order, dried over MgSO 4 and evaporated in vacuo to give a gummy batch of N- [3- (N- cyclohexylcarbonyl-23-80804 (1-D-alanylthio) -2-D-methylpropyl-7-L-proline t-butyl ester (4.3 g). 4.0 g of this ester was dissolved in anisole (30 g) and trifluoroacetic acid (10 ml) was added to the solution. The mixture was stirred at room temperature for 1 hour and evaporated in vacuo to remove excess trifluoroacetic acid. The residue was chromatographed on a silica gel column (column: 2 x 35 cm) using a mixture of methanol and chloroform (1: 100-3: 100) as eluent. The fractions containing the final product were collected and evaporated in vacuo to give a gum (3.4 g). This material was found to be identical to the title compound by NMR and thin layer chromatography.
Reagoivat aineet, reaktioliuottimet ja menetelmät, joita käytettiin valmistettaessa esimerkin 3 otsikkoyhdis-15 tettä on lueteltu seuraavassa taulukossa yhdessä sen fysikaalisten ominaisuuksien kanssa. Muut yhdisteet valmistettiin käyttäen jotakin esimerkissä 3 kuvatuista menetelmistä (a)-(d), ja kulloinkin käytetyn menetelmän erityispiirteet on lueteltu seuraavassa taulukossa yhdessä lopputuotteiden 20 fysikaalisten ominaisuuksien kanssa. Taulukossa numerot, jotka seuraavat numeroja (1) ja (2) sarakkeessa "Rf-arvo", ilmoittavat Rf-arvot, jotka on saatu ohutkerroskromatogra-fialla käyttäen eluentteina vastaavasti CHC^/MeOH/AcOH (2:1:0,003) ja n-BuOH/AcOH/H20 (4:1:1).The reactants, reaction solvents, and methods used to prepare the title compound of Example 3 are listed in the following table along with its physical properties. The other compounds were prepared using one of the methods (a) to (d) described in Example 3, and the specific features of each method used are listed in the following table, along with the physical properties of the final products. In the table, the numbers following (1) and (2) in the column "Rf value" indicate the Rf values obtained by thin layer chromatography using CHCl 3 / MeOH / AcOH (2: 1: 0.003) and n- BuOH / AcOH / H 2 O (4: 1: 1).
2i 75804 L £ o oo ^ cn g *o vo to to <x> vL o o o o o o2i 75804 L £ o oo ^ cn g * o vo to to <x> vL o o o o o o
* €D <3> <£$> <3> O CSD* € D <3> <£ $> <3> O CSD
^ - ' aa^ - 'aa
*“ tN ' CM fN - Ίν Q* “TN 'CM fN - Ίν Q
« ~ S -^B δ ""^-δ δ - - θρΓ*--r«_ δ~™»_' ΰ« π βθδδδϊ ·υ - S S δ ® τ> ° S δΊδ § 1 :jj«~ S - ^ B δ" "^ -δ δ - - θρΓ * - r« _ δ ~ ™ »_ 'ΰ« π βθδδδϊ · υ - S S δ ® τ> ° S δΊδ § 1: jj
£ |δΒ.έΒΒέΕ8 3 -f? Ε ε®8":$ e'e Β Β s'S I£ | δΒ.έΒΒέΕ8 3 -f? Ε ε®8 ": $ e'e Β Β s'S I
> ^*-88889" ·ι~885~“ .5888§“8 o SS -m m (Τι ο in 3 ίο ^ m σν '"Ί 5 i^Lnrnoocn^rScjv H cn »«*.»..«— —— ·*>,**«,«. —· „ Η Λ^«.ΛΓϊ4,Τ><Τ>ιΓ,νΡ, i flri'f i (n π μ ι/no rs n> o oo tn i i I I i t—i i—itniiiLn>—ioiiiiictii s Nnmoin^oon oi na n o mnimmoi— nim Ö ^ ' * " * * S»* *>'****» S***»,»*» z H h hoi oi n ^ io r r-i r-ι <n m -a* vo σν HHoin^inrr _ O vo Sd s o Q vo ος s o ~ ^ o ~> ^ * - 88889 "· ι ~ 885 ~“ .5888§ “8 o SS -mm (Τι ο in 3 ίο ^ m σν '" Ί 5 i ^ Lnrnoocn ^ rScjv H cn »« *. »..« - —— · *>, ** «,«. - · „Η Λ ^«. ΛΓϊ4, Τ> <Τ> ιΓ, νΡ, i flri'f i (n π μ ι / no rs n> o oo tn ii II it — ii — itniiiLn> —ioiiiiictii s Nnmoin ^ oon oi na no mnimmoi— nim Ö ^ '* "* * S» * *>' **** »S ***», »*» z H h Hoi oi n ^ io r ri r-ι <nm -a * vo σν HHoin ^ inrr _ O vo Sd so Q vo ος so ~ ^ o ~
& rj" r? ^ o h 3 oo hS& rj "r? ^ o h 3 oo hS
*5 ΐ JS t &| ‘f ai* 5 ΐ JS t & | ‘F ai
+» fe S , λ S+ »Fe S, λ S
2* «1 |g *g Il 11 l"s p il il is af i§ ύ2 * «1 | g * g Il 11 l" s p il il is af i§ ύ
Ä^tE-tmOOQ) 03Φ QE QÄ ^ tE-tmOOQ) 03Φ QE Q
•h lii -htI .’ 1 ägi t &$ h lv 5 +3 1 jj2• h lii -htI. ’1 ägi t & $ h lv 5 +3 1 jj2
Il lii tilli t^ ^1¾ ti iUiiä ! Il II Iillä hl 311 II Iin : ^ »s ö 3s s 2 2 lii, ||λ|| |S|!i *i i!sliii tlisi, Ifist s llifil Alia* Aiaf* :-: i *s? s iffiAäi ±£&ss 75804 25 co en o r- oo (N m co 0 VO r» LD 00 » - > - - o o 1_| o o o o _ (¾ _ O <0 1 Ö O <0 Θ MH - - Q5 - . Ti — r» _ ro » cn (0 ro » cm ·—Il lii tilli t ^ ^ 1¾ ti iUiiä! Il II Iillä hl 311 II Iin: ^ »s ö 3s s 2 2 lii, || λ || | S |! I * i i! Sliii tlisi, Ifist s llifil Alia * Aiaf *: -: i * s? s iffiAäi ± £ & ss 75804 25 co en o r- oo (N m co 0 VO r »LD 00» -> - - oo 1_ | oooo _ (¾ _ O <0 1 Ö O <0 Θ MH - - Q5 - . Ti - r »_ ro» cn (0 ro »cm · -
ΓΜ » »-» X X 10 S3 — XΓΜ »» - »X X 10 S3 - X
- X i« E EX CJ tNU » * * o P CJ cnU - -P- X i «E EX CJ tNU» * * o P CJ cnU - -P
g CJ 2 χ t* Λ Λ Λ m X X ^ Ό » » » »X » » -» - O X X X X td - CJ X X <d eg CJ 2 χ t * Λ Λ Λ m X X ^ Ό »» »» X »» - »- O X X X X td - CJ X X <d e
T>XCO-PCJXX»XTJ CJ CJ CJ 2 - Ό CJ CJ 'EKT> XCO-PCJXX »XTJ CJ CJ CJ 2 - Ό CJ CJ 'EK
VO CN CN T} O - » X ' —''ONVO CN CN T} O - »X '-' 'ON
tj h < ^ ' --- O Tl £ *· s ^ β H O£ n)-xx g »CJ td E E E E -- <o e G o 2 <d u — O ro in en h x o * - P.!·tj h <^ '--- O Tl £ * · s ^ β H O £ n) -xx g »CJ td E E E E - <o e G o 2 <d u - O ro in en h x o * - P.! ·
t^rx » * »rt * P X » » » » X O PKt ^ rx »*» rt * P X »» »» X O PK
X » χ ro uo ^ en X^XXXXliooo i'fXX'OlJWMX »χ ro uo ^ en X ^ XXXXliooo i'fXX'OlJWM
«. MOOl^1 2 3 4 5 I I I—I 00 1—I I—I (N ·—· - H Φ H«. MOOl ^ 1 2 3 4 5 I I I — I 00 1 — I I — I (N · - · - H Φ H
ro » i Hinwnooi * » ^ —co »'—''—"'—' - - - ~ »h x m - v » » x x oi x x x x xro »i Hinwnooi *» ^ —co »'—''—"' - '- - - ~ »h x m - v» »x x oi x x x x x
CJ ro » cn <N ro ro rr » rH oo en r~ cn Ί* » - X roincot-HHinHCJ ro »cn <N ro ro rr» rH oo en r ~ cn Ί * »- X roincot-HHinH
Q »~rH - VO ^ »r--^» cn—1 » » ^ — m ....ro·»» n ro in « i · O <N ro ^r w ____ __ |__loi l i l |tT»4->0 ΟΟΙΙΙΓΜΓΟΓ'-Ο X cm ro (n ror» (n (m—, oo HromHi»o<j\ id Hninnioinrooi a »xxx »xxx » »»»»»»»id» »»»»»»»» 2 i-hcJCJCJcncJCJCJI" ηηιν^^όό g te HHN'tiniohooQ »~ rH - VO ^» r - ^ »cn — 1» »^ - m .... ro ·» »n ro in« i · O <N ro ^ rw ____ __ | __loi lil | tT »4 -> 0 ΟΟΙΙΙΓΜΓΟΓ'-Ο X cm ro (n ror »(n (m—, oo HromHi» o <j \ id Hninnioinrooi a »xxx» xxx »» »» »» »» id »» »» »» » »» 2 i-hcJCJCJcncJCJCJI "ηηιν ^^ όό g te HHN'tiniohoo
OO
Q » ». ΙΠ » » ro o 0 o -—. » o —»Q »». ΙΠ »» ro o 0 o -—. »O -»
q .. »X oo »X o »Xq .. »X oo» X o »X
r-^ i—I H O » H o LiOi—lOr- ^ i — I H O »H o LiOi — 10
.¾ oo il φ r» il ω i il ®.¾ oo il φ r »il ω i il ®
^ i CJ 2 ^ CJ 2 OS^ i CJ 2 ^ CJ 2 OS
•H ^ W• H ^ W
02 I <U C I02 I <U C I
JJ | Q) Il O > -H OJJ | Q) Il O> -H O
Qj -p 5> ·Η *H P 3 PQj -p 5> · Η * H P 3 P
I g -h ΗΌ Ό » ^ O -H C » >1·|Η >ι·Η >i-p h-Po-h >i e -cc eI g -h ΗΌ Ό »^ O -H C»> 1 · | Η> ι · Η> i-p h-Po-h> i e -cc e
Jj jj 4J rH -Pfl3 föfö ·Η rl (o (öJj jj 4J rH -Pfl3 föfö · Η rl (o (ö
O <D ·Η <Ι)β·Η PtÖ O H M fOO <D · Η <Ι) β · Η PtÖ O H M fO
id § « -h e"» -pp ε ,¾ x p Q) -H < P -Η0Φ 0)3 (ÖT)(U3 PJH Q Ή > En MH 01 OJ E-· Ή-Ιid § «-h e" »-pp ε, ¾ x p Q) -H <P -Η0Φ 0) 3 (ÖT) (U3 PJH Q Ή> En MH 01 OJ E- · Ή-Ι
>i-h i -h LL> i-h i -h LL
>iEJil E -r· $ M -rH O -H I p γ , m L p i -p · O ^ , -L -p J o P fl -P H P O-H I rH Ή lö X ( >i C Sh O H J ·Η>ιΟ > o O X-H £mh ·* -P rH -H >1 m H +j ΗΛΙΛ 4J-H-H "P J|J £ £ 0 0) Λί P 2 Λ5 3P-P <P3 >cH O cd t7> Φ Sh <d 3 X O -P >i E C In X Ό> iEJil E -r · $ M -rH O -HI p γ, m L pi -p · O ^, -L -p J o P fl -PHP OH I rH Ή lö X (> i C Sh OHJ · Η> ιΟ> o O XH £ mh · * -P rH -H> 1 m H + j ΗΛΙΛ 4J-HH "PJ | J £ £ 0 0) Λί P 2 Λ5 3P-P <P3> cH O cd t7> Φ Sh <d 3 XO -P> i EC In X Ό
me in X » m O O <d >iP O Ome in X »m O O <d> iP O O
O) -H -H -H -H -H -H OT rH (0 -P O -H H « gO) -H -H -H -H -H -H OT rH (0 -P O -H H «g
(>; Id QHT) KO ΗΛ E w p gn 5*5 -H(>; Id QHT) KO ΗΛ E w p gn 5 * 5 -H
1 :id o) ε — C r-H _Q ^ a ^ rs a) o» —· id (d u Ό S -P w - — — i i 21: id o) ε - C r-H _Q ^ a ^ rs a) o »- · id (d u Ό S -P w - - - i i 2
I I I I I 1101 III —» OI I I I I 1101 III - »O
3 OOOOIO OO-PQII 0 S ° £3 OOOOIO OO-PQII 0 S ° £
rH X -rl I id P H Λ Λ I Id O H Λ >rH ft IrH X -rl I id P H Λ Λ I Id O H Λ> rH ft I
,¾ m X CN CU Λ P >ι(Ί ft ii ΛίΡΐΚ-Ρ-HJ, X m X CN CU Λ P> ι (Ί ft ii ΛίΡΐΚ-Ρ-HJ
4 >. id α> I o I >1 Id p I o a >i id m -h h i +j ny g» μ j tn4i+i/» μ I >,rv.4>. id α> I o I> 1 Id p I o a> i id m -h h i + j ny g »μ j tn4i + i /» μ I>, rv.
0) I H I O ft I I Ή I O (i j * ·Ρ JL ^ ^’'P0) I H I O ft I I Ή I O (i j * · Ρ JL ^ ^ '' P
a) 2 (JQ-HHN 2CQ-H-HI 2 C Q >1-P rH ca) 2 (JQ-HHN 2CQ-H-HI 2 C Q> 1-P rH c
-P -id I 4J H J - Id I 4JHN — Id I W φ >i-H-P -id I 4J H J - Id I 4JHN - Id I W φ> i-H
0) I Id ·Η ·Η >1 rH ·Η I Id ·Η -r| ^i-rH-rl I Ifl Ή C ΐ^ιΉ •H /n tn rH rH >, >1 C fi) UIHH >iH e “ί ^ il Λ 2 Tl T3 >t>i-P >ι·Ρ '-P-* >ι>ι·Ρ >i-P >iÖ*Q C p0) I Id · Η · Η> 1 rH · Η I Id · Η -r | ^ i-rH-rl I Ifl Ή C ΐ ^ ιΉ • H / n tn rH rH>,> 1 C fi) UIHH> iH e “ί ^ il Λ 2 Tl T3> t> iP> ι · Ρ '-P - *> ι> ι · Ρ> iP> iÖ * QC p
X I I) >1 >1 dl O H I fl) >i >i <D >i-rl I Φ >ι·Ρ I g PX I I)> 1> 1 dl O H I fl)> i> i <D> i-rl I Φ> ι · Ρ I g P
5 2 X C C ε C rH 2 X C MH g e rH 2 X C rH CM a a 758045 2 X C C ε C rH 2 X C MH g e rH 2 X C rH CM a a 75804
P ι-H ΓΟ VO CS <N COP ι-H ΓΟ VO CS <N CO
p VO Γ*- VO VO ^3* ^3* H · * · · · · <U o o o o o o ^ Θ Θ Θ Θ Θ Θ % <n| * *. k *» ^p VO Γ * - VO VO ^ 3 * ^ 3 * H · * · · · · <U o o o o o o ^ Θ Θ Θ Θ Θ Θ% <n | * *. k * »^
Sl_^ a-61. . a-e1 .s1 suo'. 8 - |*ί8ΐΒ-«§ I ® e s e e rr\ ** M P"* ·**··» SÖ ** U S ^ Vj £C ** * *“ *·Sl_ ^ a-61. . a-e1 .s1 suo '. 8 - | * ί8ΐΒ- «§ I ® e s e e rr \ ** M P" * · ** ·· »SÖ ** U S ^ Vj £ C ** * *“ * ·
,Η ΌΛΗΚΚ5ΒΗ10 Λ'ίίωκχω Λ 5 S S S K, Η ΌΛΗΚΚ5ΒΗ10 Λ'ίίωκχω Λ 5 S S S K
Π ^'ttcncn^ iH^r 04 m »dSCLilSΠ ^ 'ttcncn ^ iH ^ r 04 m »dSCLilS
R s k m m k a tn tn κ H von ·ηο\ο ·Η nvnnooH π in oi <n ouo ςγ> *>—’ ^-' (\| · · · VO * · · w · · w w>.....R s k m m k a tn tn κ H von · ηο \ ο · Η nvnnooH π in oi <n ouo ςγ> *> - '^ -' (\ | · · · VO * · · w · · w w> .....
g immini (Nm m ^ ^ ^ T ^ g n h o i i i in o h ι i m t i in g*,M i 1 Ä Nm^ismoh <n n tn m «h vo ··«····· ·«···«· ······ οΗΗίΝΠΝΜΠ^ h h oj m m n* HHfNmNMn O o o —* o o ^ ° ° ci O o~ · S Ί1 »a ^ · 5g immini (Nm m ^ ^ ^ T ^ gnhoiii in oh ι imti in g *, M i 1 Ä Nm ^ ismoh <nn tn m «h vo ··« ····· · «···« · ·· ···· οΗΗίΝΠΝΜΠ ^ hh oj mmn * HHfNmNMn O oo - * oo ^ ° ° ci O o ~ · S Ί1 »a ^ · 5
x a öl s äI r öIx a öl s äI r öI
H ..j Ή in h] in a u r- t:* liila fi§ ι ii as m 1 g 3 I I eaH ..j Ή in h] in a u r- t: * lilac fi§ ι ii as m 1 g 3 I I ea
I I '4 , S-J d ^ II I '4, S-J d ^ I
u , ^ , t '0 M I t o ί i Id ii ib I: il s S* tl ι tipi ! tili I li «3 H*M H«s SiSiS ö Wlwu, ^, t '0 M I t o ί i Id ii ib I: il s S * tl ι Tipi! account I li «3 H * M H« s SiSiS ö Wlw
·’: |j $ .5. tS S· ': | J $ .5. tS S
lii! il, f|$ssi ;: ι ilfäi alli him 27 7 5 8 0 4lii! il, f | $ ssi;: ι ilfäi alli him 27 7 5 8 0 4
Esimerkki 4Example 4
Esimerkeissä 3 ja 5 valmistetuista näytteistä N-/3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alanyylitio)-2-D-metyylipro-panoyyli7-L-proliinia muodostettiin erilaisia suoloja.From the samples prepared in Examples 3 and 5, various salts were formed from N- [3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-alanylthio) -2-D-methylpropanoyl] -L-proline.
5 a) Ca-suola 3,98 g:n erä esimerkissä 3 tai 5 valmistettua yhdistettä liuotettiin metanoliin (40 ml). Liuokseen lisättiin kalsiumasetaattihydraattia (0,84 g) ja seosta kuumennettiin refluksoiden tunnin ajan. Liukenematon aines suo-10 datettiin pois ja suodos haihdutettiin tyhjössä. Jäännökseen lisättiin kloroformia ja seos suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä. Jäännökseen lisättiin dietyylieetteriä ja seos suodatettiin ja kuivattiin ilmassa, jolloin saatiin esimerkin 3 tai 5 yhdisteen kalsiumsuola (3,40 g). 7D= 15 -47° (C=1,0, MeOH).5 a) Ca salt A 3.98 g portion of the compound prepared in Example 3 or 5 was dissolved in methanol (40 ml). Calcium acetate hydrate (0.84 g) was added to the solution, and the mixture was heated under reflux for 1 hour. The insoluble material was filtered off and the filtrate was evaporated in vacuo. Chloroform was added to the residue, and the mixture was filtered and evaporated in vacuo. Diethyl ether was added to the residue, and the mixture was filtered and air-dried to give the calcium salt of Example 3 or 5 (3.40 g). 7D = 15 -47 ° (C = 1.0, MeOH).
b) Mg-suolab) Mg salt
Kohdan (a) menettely toistettiin käyttäen 3,09 g esimerkissä 3 tai 5 valmistettua yhdistettä ja 0,772 g mag-nesiumasetaatin tetrahydraattia. Saatiin esimerkin 3 tai 5 20 yhdisteen magnesiumsuola (2,42 g). ^o£7D= -46,6° (C = 1,0,The procedure of (a) was repeated using 3.09 g of the compound prepared in Example 3 or 5 and 0.772 g of magnesium acetate tetrahydrate. The magnesium salt of Example 3 or 5 (2.42 g) was obtained. δ 7D = -46.6 ° (C = 1.0,
MeOH).MeOH).
c) Lysiinisuola 1,19 g esimerkissä 3 tai 5 valmistettua yhdistettä liuotettiin metanoliin (22 ml). Liuokseen lisättiin lysii-25 niä (0,416 g) ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan ja haihdutettiin tyhjössä. Jäännökseen lisättiin kloroformia ja seos suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä. Jäännökseen lisättiin dimetyylieetteriä ja tuote imu-suodatettiin, jolloin saatiin esimerkin 3 tai 5 yhdisteen 30 lysiinisuola (1,54 g). /D = -23,1° (C = 1,0, MeOH) .c) Lysine salt 1.19 g of the compound prepared in Example 3 or 5 were dissolved in methanol (22 ml). Lysine (0.416 g) was added to the solution and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour and evaporated in vacuo. Chloroform was added to the residue, and the mixture was filtered and evaporated in vacuo. Dimethyl ether was added to the residue, and the product was suction filtered to give the lysine salt of Example 3 or 5 (1.54 g). / D = -23.1 ° (C = 1.0, MeOH).
(d) Na-suola 2,27 g:n erä esimerkissä 3 tai 5 valmistettua yhdistettä liuotettiin metanoliin (25 ml). Liuokseen lisättiin 0,514 g natriumasetaattia ja seosta sekoitettiin huo-35 neen lämpötilassa 30 minuuttia ja haihdutettiin tyhjössä.(d) Na salt A 2.27 g portion of the compound prepared in Example 3 or 5 was dissolved in methanol (25 ml). To the solution was added 0.514 g of sodium acetate and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes and evaporated in vacuo.
28 7 5 8 0 4 Jäännökseen lisättiin 200 ml metanolin ja kloroformin seosta (3:100 tilavuussuhde) ja muodostunut seos suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä. Jäännös liuotettiin metanoliin ja liuos suodatettiin ja haihdutettiin tyh-5 jössä. Jäännökseen lisättiin etyyliasetaattia ja tuote suodatettiin imulla, jolloin saatiin esimerkin 3 tai 5 yhdisteen Na-suola (1,85 g). = -26,7° (C = 1,0, MeOH) .28 7 5 8 0 4 To the residue was added 200 ml of a mixture of methanol and chloroform (3: 100 by volume) and the resulting mixture was filtered and evaporated in vacuo. The residue was dissolved in methanol and the solution was filtered and evaporated in vacuo. Ethyl acetate was added to the residue, and the product was filtered off with suction to give the Na salt of Example 3 or 5 (1.85 g). = -26.7 ° (C = 1.0, MeOH).
e) Disykloheksyyliamiinisuola 13,1 g:n erä esimerkin 3 tai 5 yhdistettä liuo-10 tettiin 120 ml .-aan asetonitriiliä. Liuokseen lisättiin di-sykloheksyyliamiinia (6 ml) sekoittaen. Seosta sekoitettiin edelleen 30 minuuttia ja annettiin sitten seistä yli yön. Sakka suodatettiin imulla ja kuivattiin ilmassa. Saadut raakakiteet suspendoitiin 300 ml:aan asetonitriiliä ja 15 suspensiota kuumennettiin refluksoiden 30 minuutin ajan. Suspensio jäähdytettiin ja kiteet suodatettiin imulla ja kuivattiin ilmassa, jolloin saatiin esimerkin 3 tai 5 yhdisteen disykloheksyyliamiinisuola (12,2 g). /o(7D = -24,5° (C = 1,0, MeOH).e) Dicyclohexylamine salt A 13.1 g portion of the compound of Example 3 or 5 was dissolved in 120 ml of acetonitrile. Dicyclohexylamine (6 ml) was added to the solution with stirring. The mixture was further stirred for 30 minutes and then allowed to stand overnight. The precipitate was filtered off with suction and air dried. The obtained crude crystals were suspended in 300 ml of acetonitrile, and the suspension was heated under reflux for 30 minutes. The suspension was cooled and the crystals were filtered off with suction and dried in air to give the dicyclohexylamine salt of Example 3 or 5 (12.2 g). (oD = -24.5 ° (C = 1.0, MeOH)).
20 Esimerkki 5 N-/3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alanyylitio) -2-D-metyylipropanoyyli7-L-proliini N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alaniini (5,98 g) liuotettiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (80 ml). Liuokseen lisättiin kar-25 bonyyli-di-imidatsolia (5,84 g) -18°C:ssa sekoittaen samalla kun seosta jäähdytettiin jäillä. Seosta sekoitettiin tässä lämpötilassa tunnin ajan ja sen jälkeen seokseen lisättiin N-(3-merkapto-2-D-metyylipropanoyyli)-L-proliinia (6,29 g), minkä jälkeen sekoitettiin -18°C:ssa 30 minuuttia, sitten 30 huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Kun reaktio oli mennyt loppuun, se haihdutettiin tyhjössä liuottimen poistamiseksi. Jäännökseen lisättiin vettä (50 ml) ja seokseen lisättiin 2-normaalista HC1 sen pH:n säätämiseksi välille 1-2. Seosta uutettiin etyyliasetaatilla ja etyyliasetaattikerros pes~ 35 tiin kyllästetyllä NaCl-liuoksella, kuivattiin MgSO^:lla ja 29 75804 haihdutettiin tyhjössä. Jäännökseen lisättiin asetonit-riiliä (120 ml), sen jälkeen lisättiin 6 ml disyklohek-syyliamiinia (DCHA). Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Kun seos oli seissyt yli yön, suo-5 datettiin sakka ja kuivattiin ilmassa, jolloin saatiin raaka DCHA-suola 14,35 g. Raakasuola suspendoitiin ase-tonitriiliin (300 ml) ja suspensiota kuumennettiin refluk-soiden 30 minuutin ajan. Jäähdyttämisen jälkeen sakka otettiin talteen imusuodatuksellaja kuivattiin ilmassa, 10 jolloin saatiin valkea DCHA-suola (12,20 g). DCHA-suola (12,20 g) suspendoitiin etyyliasetaattiin (90 ml) ja suspensioon lisättiin 0,5N KHS04:n vesiliuosta (60 ml) ja seosta ravisteltiin. Orgaaninen kerros pestiin tislatulla vedellä, kuivattiin MgS04:lla ja haihdutettiin tyh-15 jössä, jolloin saatiin kumimainen aine (8,64 g). Tämän aineen todettiin olevan identtinen otsikkoyhdisteen kanssa NMR-analyysillä ja ohutkerroskromatografiällä. NMR (CDC13,6): 1,20 (3H, leveä, d, CH3), 1,38 (3H, d, CH3), l, 55-2,0 (10H, m, CH2) , 2,0-2,5 (4H, m, CH2) , 2,5-3,3~" 20 (4H, m, CH & CH2), 3,4-3,9 (2H, m, CH2), 4,0-5,0 (2H, m, CH), 6,0-6,5”(1Η, m, NH), 7,31 (1H, s, C02H). Rf: (1) 0,66; (2) 0,71.Example 5 N- [3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-alanylthio) -2-D-methylpropanoyl] -L-proline N-cyclohexylcarbonyl-D-alanine (5.98 g) was dissolved in dry tetrahydrofuran (80 ml). To the solution was added carbonyl diimidazole (5.84 g) at -18 ° C with stirring while cooling the mixture on ice. The mixture was stirred at this temperature for 1 hour, and then N- (3-mercapto-2-D-methylpropanoyl) -L-proline (6.29 g) was added to the mixture, followed by stirring at -18 ° C for 30 minutes, then at room temperature for 30 minutes. temperature for one hour. When the reaction was complete, it was evaporated in vacuo to remove the solvent. Water (50 mL) was added to the residue, and 2N HCl was added to the mixture to adjust its pH to 1-2. The mixture was extracted with ethyl acetate and the ethyl acetate layer was washed with saturated NaCl solution, dried over MgSO 4 and evaporated in vacuo. Acetonitrile (120 mL) was added to the residue, followed by 6 mL of dicyclohexylamine (DCHA). The mixture was stirred at room temperature for one hour. After standing overnight, the precipitate was filtered off and dried in air to give 14.35 g of crude DCHA salt. The crude salt was suspended in acetonitrile (300 ml) and the suspension was heated at reflux for 30 minutes. After cooling, the precipitate was collected by suction filtration and air dried to give a white DCHA salt (12.20 g). The DCHA salt (12.20 g) was suspended in ethyl acetate (90 ml), and 0.5N aqueous KHSO 4 solution (60 ml) was added to the suspension, and the mixture was shaken. The organic layer was washed with distilled water, dried over MgSO 4 and evaporated in vacuo to give a gum (8.64 g). This material was found to be identical to the title compound by NMR analysis and thin layer chromatography. NMR (CDCl 3, 6): 1.20 (3H, broad, d, CH 3), 1.38 (3H, d, CH 3), 1.55-2.0 (10H, m, CH 2), 2.0- 2.5 (4H, m, CH 2), 2.5-3.3 ~ 20 (4H, m, CH & CH 2), 3.4-3.9 (2H, m, CH 2), 4.0- 5.0 (2H, m, CH), 6.0-6.5 "(1Η, m, NH), 7.31 (1H, s, CO 2 H). Rf: (1) 0.66; (2) 0.71.
Esimerkki 6 N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyliqlysyylitio)-2-D-25 metyy1ipropanoyy147-L-pro1i in i N-sykloheksyylikarbonyyliglysiini (1,02 g) liuotettiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (10 ml). Liuokseen lisättiin 20 ml kuivaa tetrahydrofuraania, joka sisälsi 1,07 g karbonyyli-di-imidatsolia, -20°C:ssa sekoittaen samalla kun 30 seosta jäähdytettiin jäillä. Seosta sekoitettiin tässä lämpötilassa tunnin ajan ja sen jälkeen lisättiin 6 ml kuivaa tetrahydrofuraania, joka sisälsi 1,09 g N-(3-mer-kapto-2-D-metyylipropanoyyli)-L-proliinia, minkä jälkeen sekoitettiin -20°C:ssa 30 minuuttia ja sitten huoneen 35 lämpötilassa tunnin ajan. Kun reaktio oli mennyt loppuun, seos haihdutettiin tyhjössä liuottimen poistamiseksi. Jään- 30 7 5 8 0 4 nös kromatografoitiin silikageelipylväässä (kolonni: 2 x 35 cm) käyttäen eluenttina metanolin ja kloroformin seosta (1:100-3:100). Lopputuotetta sisältävät fraktiot yhdistettiin ja haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin kumi-5 mainen aine (1,16 g). Aine todettiin identtiseksi otsikko-yhdisteen kanssa NMR-analyysillä ja ohutkerroskromatogra-fiällä. NMR (CDC13,£): 1,21 (3H, leveä, d, CH3), 1,35-2,5 (14H; m, CH2), 2,6-3,3 (4H, m, CH & CH2), 3,4-1,9 (2H, m, CH2), 4,0-477 (3H, m, CH & CH2), 6,35-7,1 (1H, m, NH), 9,01 10 (1H, s, C02H). Rf: (1) 0,60; 72) 0,68.Example 6 N-3- (N-Cyclohexylcarbonylglycylthio) -2-D-25-methylpropanoyl147-L-proline N-Cyclohexylcarbonylglycine (1.02 g) was dissolved in dry tetrahydrofuran (10 ml). To the solution was added 20 ml of dry tetrahydrofuran containing 1.07 g of carbonyldiimidazole at -20 ° C with stirring while cooling the mixture with ice. The mixture was stirred at this temperature for 1 hour, then 6 ml of dry tetrahydrofuran containing 1.09 g of N- (3-mercapto-2-D-methylpropanoyl) -L-proline was added, followed by stirring at -20 ° C. 30 minutes and then at room temperature for 35 hours. When the reaction was complete, the mixture was evaporated in vacuo to remove the solvent. The residue was chromatographed on a silica gel column (column: 2 x 35 cm) using a mixture of methanol and chloroform (1: 100-3: 100) as eluent. The fractions containing the final product were combined and evaporated in vacuo to give a gum (1.16 g). The substance was found to be identical to the title compound by NMR analysis and thin layer chromatography. NMR (CDCl 3, δ): 1.21 (3H, broad, d, CH 3), 1.35-2.5 (14H; m, CH 2), 2.6-3.3 (4H, m, CH & CH 2) ), 3.4-1.9 (2H, m, CH 2), 4.0-477 (3H, m, CH & CH 2), 6.35-7.1 (1H, m, NH), 9.01 10 (1H, s, CO 2 H). Rf: (1) 0.60; 72) 0.68.
Esimerkki 7 N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-N-metyyliglysyyli-tio)-2-D-metyylipropanoyyll7-L-proliini Esimerkin 6 menettely toistettiin paitsi että N-syklo-15 heksyylikarbonyyliglysiini korvattiin N-sykloheksyylikarbo-nyyli-N-metyyliglysiinillä (1,09 g), karbonyyli-di-imidatso-lilla (1,09 g) ja N-(3-merkapto-2-D-metyylipropanoyyli)-L-proliinilla (1,09 g). Muodostui kumimainen aine (0,76 g) ja se todettiin identtiseksi otsikkoyhdisteen kanssa NMR-ana-20 lyysillä ja ohutkerroskromatografilla.Example 7 N- [3- (N-Cyclohexylcarbonyl-N-methylglycylthio) -2-D-methylpropanoyl] -L-proline The procedure of Example 6 was repeated except that N-cyclo-15-hexylcarbonylglycine was replaced by N-cyclohexylcarbonyl-N-methylglycine. (1.09 g), carbonyldiimidazole (1.09 g) and N- (3-mercapto-2-D-methylpropanoyl) -L-proline (1.09 g). A gummy substance formed (0.76 g) and was identified with the title compound by NMR analysis and thin layer chromatography.
NMR (CDC13,£): 1,21 (3H, leveä d, CH3), 1,3-2,4 (14H, m, CH2), 2,4-3,3 (4H, m, CH & CH2), 3,22~(3H, s, CH3), 3,3-3,8 (2H, m, CH2), 4,0-4,7 (3H, m,~CH & CH2), 9,75 (1H, s, C02H). Rf: (1) 0,?6; (2) 0,62.NMR (CDCl 3, δ): 1.21 (3H, broad d, CH 3), 1.3-2.4 (14H, m, CH 2), 2.4-3.3 (4H, m, CH & CH 2) , 3.22 ~ (3H, s, CH3), 3.3-3.8 (2H, m, CH2), 4.0-4.7 (3H, m, ~ CH & CH2), 9.75 ( 1H, s, CO 2 H). Rf: (1) 0,? 6; (2) 0.62.
25 Esimerkki 8 N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-fenyylialanyylitio)- 2-D-metyylipropanoyylj7-L-proliiniExample 8 N- [3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-phenylalanylthio) -2-D-methylpropanoyl] -L-proline
Esimerkin 6 menettely toistettiin paitsi että N-syklo-heksyylikarbonyyliglysiinin sijasta käytettiin N-syklohek-30 syylikarbonyyli-D-fenyylialaniinia (1,54 g), karbonyyli-di-imidatsolia (1,09 g) ja N-(3-merkapto-2-D-metyylipropanoyy- li)-L-proliinia (1,09 g). Muodostui kumimainen aine (0,97 g) ja sen todettiin olevan identtinen otsikkoyhdisteen kanssa NMR-analyysillä ja ohutkerroskromatografisesti. NMR (CDCI3, 35 S): 1,20 (3H, leveä, d, CH3), 1,2-2,5 (14H, m, CH2, 2,5-3,3 (6H, m, CH & CH2), 3,3-3,8~(2H, m, OH2), 4,0-5,3 T2H, m, CH), 3i 75804 5,7-6,4 (1H, m, NH) , 7,29 (5H, s, aromaattinen) , 7,5-7,9 (1H, leveä s, C02H). Rf: (1) 0,64; (2) 0,82.The procedure of Example 6 was repeated except that N-cyclohexylcarbonyl-D-phenylalanine (1.54 g), carbonyldiimidazole (1.09 g) and N- (3-mercapto-2-ol) were used instead of N-cyclohexylcarbonylglycine. -D-methylpropanoyl) -L-proline (1.09 g). A gummy substance formed (0.97 g) and was found to be identical to the title compound by NMR analysis and thin layer chromatography. NMR (CDCl 3, 35 S): 1.20 (3H, broad, d, CH 3), 1.2-2.5 (14H, m, CH 2, 2.5-3.3 (6H, m, CH & CH 2) ), 3.3-3.8 ~ (2H, m, OH2), 4.0-5.3 T2H, m, CH), 3i 75804 5.7-6.4 (1H, m, NH), 7 .29 (5H, s, aromatic), 7.5-7.9 (1H, broad s, CO 2 H). Rf: (1) 0.64; (2) 0.82.
Esimerkki 9 Ν-ΖΓ3- (N-sykloheksyylikarbonyyli-D-leusyylitio) -2-D-5 metyylitiopropanoyyljJ-L-proliiniExample 9 Ν-ΖΓ3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-leucylthio) -2-D-5-methylthiopropanoyl] -L-proline
Esimerkin 6 menettely toistettiin paitsi että N-syklo-heksyylikarbonyyliglysiinin sijasta käytettiin N-syklohek-syylikarbonyyli-D-leusiinia (1,20 g), karbonyyli-di-imidat-solia (0,97 g) ja N-(3-merkapto-2-D-metyylipropanoyyli)-L-10 proliinia (0,98 g). Muodostui kumimainen aine (1,17 g) ja se todettiin identtiseksi otsikkoyhdisteen kanssa NMR-ana-lyysillä ja ohutkerroskromatografisesti.The procedure of Example 6 was repeated except that N-cyclohexylcarbonyl-D-leucine (1.20 g), carbonyldiimidazole (0.97 g) and N- (3-mercapto- 2-D-methylpropanoyl) -L-10 proline (0.98 g). A gummy substance formed (1.17 g) and was identified as the title compound by NMR analysis and thin layer chromatography.
NMR (CDÖI3,£ ) : 0,93 (6H, d, CH^) , 1,21 (3H, leveä d, CH3), 1,30-2,5 (17H, m, CH & CH2) , 2,5-3,3 (4H, m, CH & CH2) , 15 3,3-3,9 (2H, m, CH2), 4,0-5,0 (2H, m, CH), 5,95-6,5 (1H, m, NH), 7,30 (1H, s, C02H). Rf: (1) 0,61; (2) 0,73.NMR (CDCl 3, δ): 0.93 (6H, d, CH 3), 1.21 (3H, broad d, CH 3), 1.30-2.5 (17H, m, CH & CH 2), 2, 5-3.3 (4H, m, CH & CH 2), 3.3-3.9 (2H, m, CH 2), 4.0-5.0 (2H, m, CH), 5.95- 6.5 (1H, m, NH), 7.30 (1H, s, CO 2 H). Rf: (1) 0.61; (2) 0.73.
Esimerkki 10 N-Z3~(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-tryptofvylitio)-2-D- metyylipropanoyyli7-L-proliini 20 Esimerkin 6 menettely toistettiin paitsi että N-syklo- heksyylikarbonyyliglysiinin sijasta käytettiin N-syklohek-syylikarbonyyli-D-tryptofaania (1,75 g), karbonyyli-di-imidat-solia (1,09 g) ja N-(3-merkapto-2-D-metyylipropanoyyli)-L-proliinia (1,09 g). Muodostui kumimainen aine (0,8 g) ja se 25 todettiin identtiseksi otsikkoyhdisteen kanssa NMR-analyy-sillä ja ohutkerroskromatografisesti. NMR (CDCI3,& ): 1,15 (3H, leveää, CH3) , 1,3-2,4 (14H, m, CH2),2,5-3,9 (8H, m, CH & CH2), 4,1-477 (1H, m, CH), 4,7-5,2_(1H, M, CH), 6,0- 6,4 (2H, m, NH), 6,95-7,9 (5H, m, aromaattinen), 8,80 (1H, 30 leveä s, C02H). Rf: (1) 0,58; (2) 0,82.Example 10 N-Z3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-tryptophylthio) -2-D-methylpropanoyl-7-L-proline The procedure of Example 6 was repeated except that N-cyclohexylcarbonyl-D-tryptophan was used instead of N-cyclohexylcarbonylglycine. , 75 g), carbonyl diimidazole (1.09 g) and N- (3-mercapto-2-D-methylpropanoyl) -L-proline (1.09 g). A gummy substance formed (0.8 g) and was identified with the title compound by NMR analysis and thin layer chromatography. NMR (CDCl 3, δ): 1.15 (3H, broad, CH 3), 1.3-2.4 (14H, m, CH 2), 2.5-3.9 (8H, m, CH & CH 2), 4.1-477 (1H, m, CH), 4.7-5.2_ (1H, M, CH), 6.0-6.4 (2H, m, NH), 6.95-7.9 (5H, m, aromatic), 8.80 (1H, 30 broad s, CO 2 H). Rf: (1) 0.58; (2) 0.82.
Esimerkki 11 N-Z3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-fenyyliqlysyylitio)- 2-D-metyylipropanoyyli7~L-proliiniExample 11 N-Z3- (N-Cyclohexylcarbonyl-D-phenylglycylthio) -2-D-methylpropanoyl-7-L-proline
Esimerkin 6 menettely toistettiin paitsi että N-syklo-35 heksyylikarbonyyliglysiinin sijasta käytettiin N-syklohek-syylikarbonyyli-D-fenyyliglysiiniä (1,30 g), karbonyyli-di- 32 75804 imidatsolia (0,97 g) ja N-(3-merkapto-2-D-metyylipropanoyy-li)-L-proliinia (0,98 g). Muodostui kumimainen aine (0,35 g) ja se todettiin identtiseksi otsikkoyhdisteen kanssa NMR-analyysillä ja ohutkerroskromatografisesti. NMR (CDCl3,£): 5 1,18 (3H, leveä d, CH3), 1,3-2,5 (14H, m, CH2), 2,5-3,8 (6H, m, CH & CH2), 4,2-4,7 (1H, m, CH), 5,62~(1H, d, CH), 6,53 (1H, d, NH), 7,37 5H, s, aromaattinen), 8,90 (1H), s, C02H). Rf: (1) 0,58, (2) 0,83.The procedure of Example 6 was repeated except that N-cyclohexylcarbonyl-D-phenylglycine (1.30 g), carbonyldi-imidazole (0.97 g) and N- (3-mercapto) were used instead of N-cyclo-35-hexylcarbonylglycine. -2-D-methylpropanoyl-1-L-proline (0.98 g). A gummy substance formed (0.35 g) which was found to be identical to the title compound by NMR analysis and thin layer chromatography. NMR (CDCl 3, δ): δ 1.18 (3H, broad d, CH 3), 1.3-2.5 (14H, m, CH 2), 2.5-3.8 (6H, m, CH & CH 2) ), 4.2-4.7 (1H, m, CH), 5.62- (1H, d, CH), 6.53 (1H, d, NH), 7.37 5H, s, aromatic), 8.90 (1H), s, CO 2 H). Rf: (1) 0.58, (2) 0.83.
Esimerkki 12 10 N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-metionyylitio)-2-D- metyylipropanoyyli7-L-proliiniExample 12 N- [3- (N-Cyclohexylcarbonyl-D-methionylthio) -2-D-methylpropanoyl] -L-proline
Esimerkin 6 menettely toistettiin paitsi että N-syklo-heksyylikarbonyyliglysiinin sijasta käytettiin N-syklohek-syylikarbonyyli-D-metioniinia (1,30 g), karbonyyli-di-imidat-15 solia (1,09 g) ja N-(merkapto-2-D-metyylipropanoyyli)-L-proliinia (1,09 g). Muodostui kumimainen aine (0,59 g) ja se todettiin identtiseksi otsikkoyhdisteen kanssa NMR-ana-lyysilla ja ohutkerroskromatografiseti. NMR (CDC13, &): 1,23 (3H, leveä d, CH3), 1,5-2,4 (16H, m, CH2), 2,10 (3H, s, 20 CH3), 2,59 (2H, t, CH2), 2,7-3,3 (4H, m, CH I CH2), 3,3-3,9 (2H, m, CH2), 4,0-5,1_(2H, m, CH), 6,49 (1H, d, NH), 7,81 (1H, s, C02H). Rf: (1) 0,60; (2) 0,77.The procedure of Example 6 was repeated except that N-cyclohexylcarbonyl-D-methionine (1.30 g), carbonyldiimidazole-15 (1.09 g) and N- (mercapto-2) were used instead of N-cyclohexylcarbonylglycine. -D-methylpropanoyl) -L-proline (1.09 g). A gummy substance formed (0.59 g) and was found to be identical to the title compound by NMR analysis and thin layer chromatography. NMR (CDCl 3, δ): 1.23 (3H, broad d, CH 3), 1.5-2.4 (16H, m, CH 2), 2.10 (3H, s, CH 3), 2.59 ( 2H, t, CH 2), 2.7-3.3 (4H, m, CH 1 CH 2), 3.3-3.9 (2H, m, CH 2), 4.0-5.1_ (2H, m , CH), 6.49 (1H, d, NH), 7.81 (1H, s, CO 2 H). Rf: (1) 0.60; (2) 0.77.
Esimerkki 13 N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-glutaminyylitio)-2-25 D-metyylipropanoyyljJ-L-proliiniExample 13 N- [3- (N-Cyclohexylcarbonyl-D-glutaminylthio) -2-25-D-methylpropanoyl] -L-proline
Esimerkin 6 menettely toistettiin paitsi että N-syklo-heksyylikarbonyyliglysiinin sijasta käytettiin N-sykloheksyy-likarbonyyli-D-glutamiinia (0,5 g), karbonyyli-di-imidatso-lia (0,41 g) ja N-(3-merkapto-2-D-metyylipropanoyyli)-L-pro-30 liinia (0,41 g). Muodostui kumimainen aine (0,3 g) ja se todettiin identtiseksi otsikkoyhdisteen kanssa NMR-analyysil-lä ja ohutkerroskromatografisesti. NMR (CDC13, S): 1#20 (3H, leveä d, CH3), 1,3-2,5 (16H, m, CH2), 2,5-3,2 (6H, m, CH & CH2), 3,3-379 (2H, m, CH2), 4,1-4,9 (2H, m, CH); 5,6-35 7,6 (4h7 m, NH & C02H) . Rf: (I) 0,42; (2) 0,48.The procedure of Example 6 was repeated except that N-cyclohexylcarbonyl-D-glutamine (0.5 g), carbonyldiimidazole (0.41 g) and N- (3-mercapto-glycol) were used instead of N-cyclohexylcarbonylglycine. 2-D-methylpropanoyl) -L-pro-30 (0.41 g). A gummy substance formed (0.3 g) and was identified with the title compound by NMR analysis and thin layer chromatography. NMR (CDCl 3, δ): 1 # 20 (3H, broad d, CH 3), 1.3-2.5 (16H, m, CH 2), 2.5-3.2 (6H, m, CH & CH 2) , 3.3-379 (2H, m, CH 2), 4.1-4.9 (2H, m, CH); 5.6-35 7.6 (4h7 m, NH & CO 2 H). Rf: (I) 0.42; (2) 0.48.
33 7580433 75804
Esimerkki 14 N-£3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alanyylitio)-2-D-metyylipropanoyyli7-L-proliinin disykloheksyyliamiini-suola 5 1) 3-(N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alanyylitio)-2-D- metyylipropaanihappo (241 g) suspendoitiin kuivaan dikloori-metaaniin (1,3 litraa). Suspensioon lisättiin tipoittain trietyyliamiinia (117 ml) -15°C:ssa sekoittaen, sitten lisättiin tipoittain pivaloyylikloridia (104 ml) alle -5°C:n 10 lämpötilassa sekoittaen ja seosta sekoitettiin edelleen 30 minuuttia.Example 14 N- [3- (N-Cyclohexylcarbonyl-D-alanylthio) -2-D-methylpropanoyl] -L-proline dicyclohexylamine salt 5 1) 3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-alanylthio) -2-D-methylpropanoic acid ( 241 g) was suspended in dry dichloromethane (1.3 liters). Triethylamine (117 ml) was added dropwise to the suspension at -15 ° C with stirring, then pivaloyl chloride (104 ml) was added dropwise at below -5 ° C with stirring, and the mixture was further stirred for 30 minutes.
2) L-proliini (101 g) suspendoitiin kuivaan dikloori-metaaniin (1,2 litraa). Suspensioon lisättiin tipoittain trimetyylisilyylikloridia (112 ml) -15°C:ssa sekoittaen, 15 sen jälkeen lisättiin tipoittain trietyyliamiinia (122 ml) alle -5°C:n lämpötilassa sekoittaen ja seosta sekoitettiin vielä -15°C:ssa 30 minuuttia. Muodostuneeseen seokseen lisättiin kohdassa (1) valmistettu liuos ja seosta sekoitettiin jäähdyttäen 15 minuuttia, sitten huoneen lämpötilassa 20 tunnin ajan. Kun reaktio oli mennyt loppuun, lisättiin reak-tioseokseen kylmää tislattua vettä (1 litra) samalla jäähdyttäen ja sen jälkeen lisättiin väkevää suolahappoa (90 ml) tipoittain. Seosta sekoitettiin 10 minuuttia ja orgaaninen kerros erotettiin, pestiin kyllästetyllä NaCl-liuoksella kah-25 desti ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Suodokseen lisättiin disykloheksyyliamiinia (326 ml) ja asetonitriiliä (800 ml) ja seosta sekoitettiin 30 minuuttia. Sen jälkeen lisättiin neljä 800 ml:n asetonitriilierää 10 minuutin välein ja saatu seos jätettiin yöksi 5°C:een. Sakka suodatettiin imul-30 la ja kuivattiin ilmassa, jolloin saatiin otsikkoyhdiste raa-katuotteena. Raakatuote liuotettiin kuumaan dikloorimetaaniin (3 litraa) ja suodatettiin. Suodosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia ja lisättiin vielä neljä 750 ml:n asetonitriilierää 10 minuutin välein ja muodostunut seos 35 jätettiin seisomaan yöksi 5°C:een. Sakka suodatettiin ja kuivattiin ilmassa, jolloin saatiin väritön erä otsikkoyhdistet-tä (404 g). Sp. 190-191°C, [cQD = -24,5° (C=1,0, MeOH) .2) L-proline (101 g) was suspended in dry dichloromethane (1.2 liters). Trimethylsilyl chloride (112 ml) was added dropwise to the suspension at -15 ° C with stirring, then triethylamine (122 ml) was added dropwise at below -5 ° C with stirring, and the mixture was further stirred at -15 ° C for 30 minutes. To the resulting mixture was added the solution prepared in (1), and the mixture was stirred under cooling for 15 minutes, then at room temperature for 20 hours. When the reaction was completed, cold distilled water (1 liter) was added to the reaction mixture under cooling, and then concentrated hydrochloric acid (90 ml) was added dropwise. The mixture was stirred for 10 minutes and the organic layer was separated, washed twice with saturated NaCl solution and dried over magnesium sulfate. Dicyclohexylamine (326 ml) and acetonitrile (800 ml) were added to the filtrate, and the mixture was stirred for 30 minutes. Four 800 ml portions of acetonitrile were then added every 10 minutes and the resulting mixture was left overnight at 5 ° C. The precipitate was filtered off with suction and dried in air to give the title compound as a crude product. The crude product was dissolved in hot dichloromethane (3 liters) and filtered. The filtrate was stirred at room temperature for 30 minutes and four more 750 ml portions of acetonitrile were added every 10 minutes and the resulting mixture was allowed to stand overnight at 5 ° C. The precipitate was filtered and air dried to give a colorless portion of the title compound (404 g). Sp. 190-191 ° C, [α] D = -24.5 ° (C = 1.0, MeOH).
34 7580434 75804
Esimerkki 15 N~Z~3- (N-sykloheksyylikarbonyyli-D-alanyylitio) -2-D-metyylipropanoyyliJ-L-proliinin kalsiumsuola 404 g esimerkissä 14 valmistettua disykloheksyyliamii-5 nisuolaa suspendoitiin etyyliasetaattiin (2 litraa) ja suspensioon lisättiin 0,5N KHS04 (2,5 litraa) ja seosta sekoitettiin 10 minuuttia. Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin tislatulla vedellä ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Suo-dos haihdutettiin tyhjössä ja jäännös liuotettiin asetoniin 10 (1,2 litraa). Asetoniliuokseen lisättiin tislattua vettä (1,2 litraa) ja kalsiumkarbonaattia (36,6 g) ja seosta sekoitettiin kiivaasti 40°C:ssa tunnin ajan. Jäähdyttämisen jälkeen seos suodatettiin ja suodos haihdutettiin tyhjössä. Saatu siirappi suspendoitiin asetoniin (1 litra) ja liuosta 15 sekoitettiin 5 tuntia. Sakka suodatttiin imulla, kuivattiin ilmassa, sen jälkeen tyhjökuivattiin, jolloin saatiin otsik-koyhdiste valkoisena jauheena (212 g). Z^7D = -47,2° (C=1,0, MeOH).Example 15 Calcium salt of N-Z-3- (N-cyclohexylcarbonyl-D-alanylthio) -2-D-methylpropanoyl-L-proline 404 g of the dicyclohexylamine-5 salt prepared in Example 14 were suspended in ethyl acetate (2 liters) and 0.5N KHSO 4 was added to the suspension. (2.5 liters) and the mixture was stirred for 10 minutes. The organic layer was separated, washed with distilled water and dried over magnesium sulfate. The filtrate was evaporated in vacuo and the residue was dissolved in acetone (1.2 liters). To the acetone solution were added distilled water (1.2 liters) and calcium carbonate (36.6 g), and the mixture was stirred vigorously at 40 ° C for 1 hour. After cooling, the mixture was filtered and the filtrate was evaporated in vacuo. The resulting syrup was suspended in acetone (1 liter) and the solution was stirred for 5 hours. The precipitate was filtered off with suction, air dried, then vacuum dried to give the title compound as a white powder (212 g). Δ D = -47.2 ° (C = 1.0, MeOH).
Claims (3)
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP9400281 | 1981-06-19 | ||
JP56094002A JPS57209270A (en) | 1981-06-19 | 1981-06-19 | Proline derivative |
JP56137823A JPS5839661A (en) | 1981-09-03 | 1981-09-03 | Preparation of proline derivative |
JP13782381 | 1981-09-03 |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI822171A0 FI822171A0 (en) | 1982-06-16 |
FI822171L FI822171L (en) | 1982-12-20 |
FI75804B true FI75804B (en) | 1988-04-29 |
FI75804C FI75804C (en) | 1988-08-08 |
Family
ID=26435270
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI822171A FI75804C (en) | 1981-06-19 | 1982-06-16 | Process for the preparation of therapeutically active proline derivative |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR890000769B1 (en) |
AT (1) | AT377496B (en) |
CA (1) | CA1235120A (en) |
CH (1) | CH651825A5 (en) |
DE (1) | DE3222779A1 (en) |
DK (1) | DK156054C (en) |
ES (2) | ES8307216A1 (en) |
FI (1) | FI75804C (en) |
FR (1) | FR2508040B1 (en) |
GB (1) | GB2102412B (en) |
HU (1) | HU188177B (en) |
IL (1) | IL65954A (en) |
IT (1) | IT1157053B (en) |
MX (2) | MX171888B (en) |
NL (1) | NL193282C (en) |
NO (1) | NO156408C (en) |
PT (1) | PT75076B (en) |
SE (1) | SE453595B (en) |
SU (1) | SU1316556A3 (en) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6354321A (en) * | 1985-03-27 | 1988-03-08 | Ajinomoto Co Inc | Blood sugar lowering agent |
KR870007114A (en) * | 1986-01-21 | 1987-08-14 | 우에노 기미오 | Stable Solid Agents of Thiol Ester Derivatives |
ZA896851B (en) | 1988-09-14 | 1990-06-27 | Hoffmann La Roche | Use of ace-inhibitors |
ES2154277T3 (en) * | 1993-07-15 | 2001-04-01 | Hoffmann La Roche | PHARMACEUTICAL COMBINATION CONTAINING AN INHIBITOR OF THE RENINE-ANGIOTENSIN SYSTEM AND AN ENDOTHELINE ANTAGONIST. |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ZA802420B (en) * | 1979-05-18 | 1981-04-29 | Squibb & Sons Inc | Aminoacyl derivatives of mercaptoacyl amino acids |
-
1981
- 1981-12-29 AT AT0558581A patent/AT377496B/en not_active IP Right Cessation
-
1982
- 1982-05-26 GB GB08215345A patent/GB2102412B/en not_active Expired
- 1982-05-28 CA CA000404054A patent/CA1235120A/en not_active Expired
- 1982-06-02 IL IL65954A patent/IL65954A/en not_active IP Right Cessation
- 1982-06-16 NO NO821997A patent/NO156408C/en not_active IP Right Cessation
- 1982-06-16 MX MX010799A patent/MX171888B/en unknown
- 1982-06-16 SU SU823450352A patent/SU1316556A3/en active
- 1982-06-16 MX MX193189A patent/MX155724A/en unknown
- 1982-06-16 IT IT67772/82A patent/IT1157053B/en active
- 1982-06-16 FI FI822171A patent/FI75804C/en not_active IP Right Cessation
- 1982-06-17 CH CH3751/82A patent/CH651825A5/en not_active IP Right Cessation
- 1982-06-17 DK DK273082A patent/DK156054C/en not_active IP Right Cessation
- 1982-06-17 HU HU821976A patent/HU188177B/en not_active IP Right Cessation
- 1982-06-18 SE SE8203814A patent/SE453595B/en not_active IP Right Cessation
- 1982-06-18 NL NL8202472A patent/NL193282C/en not_active IP Right Cessation
- 1982-06-18 ES ES513277A patent/ES8307216A1/en not_active Expired
- 1982-06-18 DE DE19823222779 patent/DE3222779A1/en active Granted
- 1982-06-18 PT PT75076A patent/PT75076B/en not_active IP Right Cessation
- 1982-06-19 KR KR8202740A patent/KR890000769B1/en active
- 1982-06-21 FR FR8210796A patent/FR2508040B1/en not_active Expired
-
1983
- 1983-03-14 ES ES520582A patent/ES520582A0/en active Granted
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FI66596B (en) | PROCEDURE FOR THE FRAMEWORK OF THERAPEUTIC ANALYSIS | |
CA2124375C (en) | Compounds containing a fused bicyclic ring and processes therefor | |
AU661616B2 (en) | Benzo-fused lactams | |
US4303583A (en) | 1H,5H-[1,4]Thiazepino[4,3-a]indole-1,5-diones | |
CA1246056A (en) | Anti-hypertensive agents | |
FI87211B (en) | A FRUIT PROCESSING OF THE PHARMACEUTICALS OF THE PRODUCT DERIVATIVES AV PERHYDRO-1,4-THIAZEPINE. | |
JPS6059226B2 (en) | Proline derivatives and related compounds | |
CA2178352A1 (en) | Thiazolo benzazepine containing dual action inhibitors | |
HU181087B (en) | Process for producing mercapto-acyl-dipeptides | |
ES2304639T3 (en) | NEW DERIVATIVES OF 2-HYDROXYTHETRAHYDROFURAN AND ITS APPLICATION AS MEDICINES. | |
JPH0422907B2 (en) | ||
FI75804B (en) | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV TERAPEUTISKT AKTIVT PROLINDERIVAT. | |
GB2159160A (en) | Mercaptocycloalkylcarbonyl and mercaptoarylcarbonyl dipeptides | |
ES2287114T3 (en) | ESTERES SYNTHESIS PROCEDURE OF N - ((S) -1-CARBOXIBUTE) - (S) -ALANINE AND ITS APPLICATION IN PERINDOPRILE SYNTHESIS. | |
ES2198389T3 (en) | PROCEDURE FOR THE SYNTHESIS OF DERIVATIVES N- (MERCAPTOACIL) -AMINOACIDOS FROM ALFA-SUBSTITUTED ACIDS. | |
HUT62313A (en) | Process for producing n-(alpha-substituted pyridinyl)-carbonyldipeptide derivatives | |
EP0159396B1 (en) | Carboxyalkyl peptide derivatives | |
ES2249691T3 (en) | PROCEDURE OF SYNTHESIS OF ACID DERIVATIVES (2S, 3AS, 7AS) -1- (S) -ALANIL) -OCTAHIDRO-1H-INDOL-2-CARBOXILICO AND ITS USE IN THE SYNTHESIS OF PERINDOPRIL. | |
CA1332943C (en) | Process for preparing perhydrothiazepine derivatives | |
KR890000770B1 (en) | Process for preparing of proline derivatives | |
HU225916B1 (en) | Thiazolo[3,2-a]azepine derivatives, process for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them | |
JPH0667902B2 (en) | Process for producing 3-thiopropionic acid derivative | |
JPS6345252A (en) | Proline derivative | |
CZ292229B6 (en) | Process for preparing amides of alpha-(N,N-dialkyl)-aminocarboxylic acids | |
NL8104047A (en) | METHOD FOR PREPARING A THERAPEUTIC PREPARATION, AND METHOD FOR PREPARING SUITABLE COMPOUNDS. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM | Patent lapsed |
Owner name: CHUGAI SEIYAKU KABUSHIKI KAISHA |