FI72606B

FI72606B - Tunnsnittfaergningsapparat foer elektronmikroskopgitter.

Info

Publication number: FI72606B
Application number: FI850960A
Authority: FI
Inventors: Riitta Marja Annikki Harjula; Matti Veikko Anter Jaervilehto
Original assignee: Riitta Marja Annikki Harjula; Matti Veikko Anter Jaervilehto
Priority date: 1985-03-12
Filing date: 1985-03-12
Publication date: 1987-02-27
Also published as: FI72606C; FI850960A0; FI850960L

Description

72606

Ohutleikevärjäyslaite elektronimikroskooppi-hiloille

Elektronimikroskooppisessa (EM) tutkimusrutiinissa ns. ohutleikkeet kiinnitetään erityisille pyöreille metalliverkoille tai reikäle-vyille (halkaisija n. 3 mm). Jotta näytteisiin saataisiin tarpeellinen kontrasti, nämä ns. EM-hilat näytteineen käsitellään eli vär-5 jätään sopivilla kemiallisilla liuoksilla joko koneellisesti tai käsin. Koneellistetussa menetelmässä kone huolehtii automaattisesti nesteiden vaihdosta ennalta määrätyn ohjelman mukaisesti. Käsin suoritetussa värjäyksessä hilat siirretään joko yksitellen nestepi-sarasta toiseen tai ryhmänä jonkinlaisessa pidikkeessä värjäysal-10 taasta toiseen.

Koneellisesti suoritetun värjäyksen haittapuolina voidaan pitää mm. laitteen toiminnan epävarmuutta satunnaisesti käytettynä, suurehkoja käytettyjä nestetilavuuksia, näytehilojen pidikkeen epäkäytännölli-syyttä, väriaineen mahdollista sakkautumista, korkeaa hankintahin-15 taa.

Käsin suoritetun värjäyksen haittapuolia ovat yksittäisten hilojen jatkuvaan käsittelyyn liittyvä vaurioitumisvaara, menetelmän hitaus ja työläys, pieni kapasiteetti, avointen nestetilojen aiheuttama työterveysriski.

20 Hilojen värjäykseen nykyisin käytettyjen pidikkeiden haittapuolia ovat mm. hilat pidikettä liikuteltaessa suojaamattomia ja alttiina vahingoittumiselle, pidikkeen vaatima suuri tilavuus, mahdollisten liima-aineiden aiheuttama kontaminaatio.

Keksinnön tuntomerkit selviävät patenttivaatimuksista.

25 Käytännön työskentelyosuhteissa on todettu, että keksinnön mukainen laite tarjoaa mm. seuraavat edut: leikkeet ovat suojassa; pieni : tarvittava nestemäärä (1 - 5 ml, putken koosta riippuen); helppo : käsiteltävyys; suuri kapasiteetti; yksinkertainen nesteiden suoda- tusmahdollisuus; leikehilat käsittelyjen ja kuljetusten aikana suo-30 jattuina; terveydelliset riskit vähäisemmät kuin avoimia käsittely-altaita käytettäessä; toimintavarma; pienet hankintakustannukset erityisesti pieniä laboratorioita ja satunnaisia käyttäjiä silmällä ·2' 72606 pitäen; voidaan liittää vaivattomasti konevärjäyspakkauksiin. Luettelo piirrustuksista: 35 A. Näytehilojen pidike (no:t 1-4) B. Hilapidikkeen avausteline (no:t 5-8) C. Männällinen sylinteri liitäntöineen (no:t 9-13)

Laitteen rakenne

Laite koostuu kolmesta osasta: näytehilojen pidikkeestä (A); pidik-40 keen avaustelineestä (B); sylinterimäisestä, männällisestä putkesta (C).

Näytehilojen pidike (A) valmistetaan elastisesta, putken muotoisesta materiaalista (esim. PVCrstä) siten, että sen paksuus vastaa männäl-lisen putken sisämittaa ja sallii sen vaivattoman sijoittamisen 45 putken sisään. Näytehilojen pidikkeen (1) korkeus on korkeintaan noin 1/3 männällisen putken sisäpituudesta ja korkeintaan puolet männän piston pituudesta. Näytehilojen pidikkeen (1) sisäpintaan tehdään joukko 1-2 mm pituisia ja n. 0.5 mm syvyisiä viiltoja (6) säännöllisiin riveihin n. 2-3 mm päähän toisistaan. Viillot (6) 50 koodataan riveittäin ja sarakkeittain käyttämällä aakkosia ja nume- : roita tai muita merkintöjä. Lisäksi merkitsemistarkoituksessa mate- : riaalin reunaan voidaan tehdä koloja (2) pidikkeen asennon yksise- : litteiseksi tunnistamiseksi. Elastisen putken yksi seinämä on lei kattu pitkittäin halki siten, että putki voidaan avata, jolloin . 55 avattaessa hiloille tarkoitetut viillot (6) aukeavat. Avatun putken ] pitkittäin leikattujen sivujen reunaosassa on reiät (3), kumpikin n. 2 mm halkaisijaltaan.

Pidikkeen avaustelineessä on kaksi em. reikiin (3) sopivaa nuppia, joista toinen on koukkumainen (8) ja toinen pallomainen (7). Kuokku-60 mainen nuppi (8) on kooltaan sellainen, että se menee väljästi : hilapidikkeen (5) toiseen reikään (3). Pallomaisen nupin (7) hal- : kaisija on hieman suurempi kuin hilapidikkeen toisen reiän (3) : halkaisija. Kuitenkin niin, että nuppi menee reikään vaivattomasti | elastisen materiaalin antaessa periksi. Nuppien etäisyyden määrää 65 avatussa hilapidikkeessä olevien reikien etäisyys. Avaustelineen : alustan (5) materiaali voi olla esim. puuta tms.

Sylinterimäisenä, männällisenä (11) putkena (C) tässä käytetään esimerkiksi injektioruiskua (9), jonka tilavuus on 5, 10 tai 15 ml.

-3- 72 60 6

Koko riippuu hilapidikkeputken läpimitasta. Nesteiden suodatusta 70 varten injektioruiskuun voidaan liittää normaali kertakäyttösuodatin (10) (esim. Millipore). Edelleen ruiskuun liitetyn suodattimen kautta ruisku voidaan kytkeä esim. kolmitiehanan (12) kautta konevär-jäyspakkauksiin (13).

Laitteen toiminta 75 Hilapidike (A) avataan kiinnittämällä se avaustelineeseen (B). Ava-ustelineen toinen nuppi on koukkumainen (8). Ensin asetetaan hilapi-dikkeen toinen reikä koukkumaiseen nuppiin ja sitten hilapidike rullataan auki. Pyöreäpäinen nuppi (7) painetaan lopuksi hilapidik-keen toiseen reikään. Tällöin viillot (6) aukeavat ja näytehilat 80 voidaan riittävää varovaisuutta noudattaen asetella avautuneisiin rakoihin. Hilapidikkeen irroittaminen tapahtuu päinvastaisessa järjestyksessä. Näytehilat tarttuvat viiltoihin hilapidikkeen saadessa alkuperäisen muotonsa. Hilat kiinnittyvät viiltoihin erittäin luotettavasti. Tämän jälkeen asetetaan putkimaisessa muodossa oleva 85 hilapidike injektioruiskuun männän varren puoleisesta päästä poistamalla ensin mäntä (11). Sen jälkeen asetetaan mäntä paikoilleen ja männän avulla imetään rauhallisesti käsittelyneste ruiskuun. Käsittely tapahtuu halutun ohjelman mukaisesti. Ilma poistetaan ruiskusta imuaukon kautta ruiskun ollessa pystyasennossa. Jos näytteitä on 90 välillä kuivattava tai muuten tarkasteltava, hilat voidaan vaivattomasti ja turvallisesti poistaa ruiskusta pidikkeessään poistamalla ensin neste ja sitten mäntä.

Sylinterin rakenne voi myös olla sellainen, että se voidaan liittää esim. värjäyskoneeseen. Tällöin männän korvaisi koneessa oleva pump-95 pu ja nesteen vaihto tapahtuisi läpivirtausperiaatteella. Etuna nykyisin käytössä olevien automaattikoneiden rakenteeseen olisi se, että esitetty hilapidike voitaisiin liittää suoraan värjäysputkis-toon ja tällä tavoin näytteiden käsittely saataisiin haluttaessa automatisoitua.

Claims

100 Patenttivaatimukset

1. Elektronimikroskooppisessa tutkimuksessa käytettyjen näytehilojen käsittely- ja värjäyslaite, johon kuuluu näytehilojen pidike (A), avausteline (B) ja männällinen sylinteri (C), tunnettu siitä, että näytehilat on kiinnitetty elastisesta materiaalista valmistetun 105 näytehilapidikkeen viiltoihin (6), jotka sijaitsevat yhden seinän osalta pitkittäin halkaistun putken sisäpuolella, ja jotka viillot aukeavat, kun putki avattaessa levitetään levyksi ja sulkeutuvat, kun putki asettuu normaalimuotoonsa.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukaiseen laitteeseen kuuluva avausteline 110 (B), tunnettu siitä, että telineessä oleva koukkumainen nuppi (8) sopii väljästi näytehilojen pidikkeessä olevaan toiseen reikään ja pidikettä rullattaessa pidike avautuu siten, että sen toinen reikä sattuu telineessä olevan pallomaisen nupin (7) kohdalle, joka elastisen reiän läpi painettuna pitää hilapidikkeen avatussa asennossa. 115

3. Patenttivaatimuksen 1 mukaiseen laitteeseen asetettujen näytehilojen värjäyskäsittely, tunnettu siitä, että se suoritetaan sylinterissä (C), johon värjäys- yms. käsittelyä varten neste imetään sylinterin männän (11) avulla.