FI63778B - Foerfarande foer isolering av klamydia - Google Patents
Foerfarande foer isolering av klamydia Download PDFInfo
- Publication number
- FI63778B FI63778B FI814023A FI814023A FI63778B FI 63778 B FI63778 B FI 63778B FI 814023 A FI814023 A FI 814023A FI 814023 A FI814023 A FI 814023A FI 63778 B FI63778 B FI 63778B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- cells
- cell
- mmc
- mccoy
- chlamydia
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/24—Methods of sampling, or inoculating or spreading a sample; Methods of physically isolating an intact microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/195—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria
- G01N2333/295—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria from Chlamydiales (o)
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
63778
Menetelmä klamydian eristämiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää klamydian eristämiseksi klamydiatartunnan diagnoosia varten, jossa menetelmässä kliininen näyte ympätään viljellyn solulinjan solui-5 hin, inkuboidaan ja muodostuneet inkluusiot detektoidaan sopivimmin valomikroskooppisesti värjäyksen jälkeen.
Chlamydia trachomatis on prokaryootti organismi, joka tartuttaa eukaryoottisoluja ehdottomana solunsisäisenä loisena. Chlamydia trachomatis aiheuttaa ihmisessä useita sai-10 rauksia , ja tietoisuus sen merkityksestä kansanterveydelle on nopeasti kasvamassa (Paavonen, J. 1979. Chlamydial infections. Microbiological, diagnostic, and clinical aspects. Med.Biol. 54:135-151; Paavonen, J.,P.Saikku, E.Vesterinen, B.Meyer, E.Vartiainen, and E.Saksela. 1978.
15 Genital chlamydial infections in patients attending a gynaecological outpatient clinic. Br. J.Vener. Dis. 54:257-261; Schachter, J. 1978. Chlamydial infections.
N. Engl.Med. 298:428-435, 490-495, 540-549; Taylor-Robinson, ' D., and B.J. Thomas. 1980. The role of Chlamydia trachomatis 20 in genital-tract and associated diseases.J. Clin. Pathol.
33:205-235.) Klamydiatartuntojen laboratoriodiagnoosien varsinaisen läpimurron aiheutti kudosviljelymenetelmän kehittäminen organismin eristämistä varten säteilytetyissä McCoy soluissa (Gordon,F.B., H.R. Dressier, A.L. Quan, W.T.
25 McQuilkin, and J.I. Thomas. 1972. Effect of ionizing radiation on susceptibility of McCoy cell cultures to Chlamydia trachomatis.Appi.Microbiol. 23:123-129; Gordon, F.B. and A.L.Quan. 1965. Isolation of the trachoma agent in cell culture.Proc. Soc. Biol.Med. 118: 354-359.) Alunperin käytet-30 ty McCoy solulinja on läheistä sukua hiiren fibroblastiselle syöpäsolulinjalle L929 (Blyth, W.A., and J. Taverene. 1972. Cultivation of TRIC agents: a comparison between the use of BHK-21 and irradiated McCoy cells. J.Hyg. 72:121-128).
Paitsi McCoy solulinjan, myös monien muiden solulinjojen on 35 osoitettu olevan herkkiä klamydialle (Croy, T.R., C.C. Kuo, and S.P. Wang. 1975- Comparative suspectibility of eleven mammalian cell lines to infection with trachoma organisms.
2 63778 J.Clin. Microbiol. 1:434-439; Rota, T.R. 1977. Chlamydia trachomatis in cell culture. Susceptibility of seven established mammalian cell types in vitro. Adaption of ; trachoma organisms to McCoy and BHK-21 cells. In vitro ; 5 13:280-292.), mutta vain harvat ovat riittävän herkkiä ' käytettäviksi organismin eristämiseen kliinisistä näytteistä.
Sen lisäksi että kliininen näyte sentrifugoidaan solu-kerroksen päälle, solut tavallisesti esi- tai jälkikäsitel-10 lään niiden jakautumisen estämiseksi ja klamydian solunsisäi-sen jakautumisen lisäämiseksi. Säteilyyn liittyvät käytännön ongelmat ovat johtaneet vaihtoehtoisten menetelmien käyttöön solujen käsittelyssä.
Säteilytyksen tai käsittelyn IUdR:llä, sytokalasiini , ! 15 B:llä tai sykloheksimidillä on ilmoitettu kasvattavan I |
McCoy solujen herkkyyttä klamydialle. Jotkut tutkijat ovat j ! v väittäneet, että käsittelemättömät McCoy solut ovat yhtä j , herkkiä kuin säteilytetyt solut klamydian eristämiseen j ; (Hobson, D., F.W.A. Johnson, E. Rees, and I.A. Taita.1974. 1 ; 20 Simplified method for diagnosis of genital and occular infections with chlamydia. Lancet ii:555), mutta jotkut puolestaan ovat osoittaneet, että ne ovat vähemmän herkkiä ja inkluusioiden pienen koon vuoksi on vaikea todeta inkluusiot ja laskea ne (Evans, R.T. and D. Taylor-Robinson. 1979. ; ! 25 Comparison of various McCoy cell treatment procedures used ( : for detection of Chlamydia trachomatis. J. Clin. Microbiol. ! j
* I
10; 198-201). Monet laboratoriot ovat havainneet säteilytyk- f 3en vaikeaksi toimenpiteeksi ja yrittävät välttyä hankkimas- ( ta kobolttilähdettä säteilytystarkoitukseen. Samoin kaikilla j 30 solujen aineenvaihdunnan estävillä ja sytotoksisilla yhdisteillä voi olla joitakin terveydellisiä riskivaikutuksia j laboratoriohenkilökuntaan.Erilaisten solulinjojen ja käsittelyjen käyttö osoittanee, että parasta tekniikkaa klamydian eristämiseksi ei ole vielä löydetty.
55 Vaikka solujen sykloheksimidi-käsittelyä pidetäänkin laajalti herkimpänä menetelmänä, säteilytystä käytetään i •'delleen monissa laboratorioissa kasvattamaan solujen tar- , 3 63778 tuntaherkkyyttä.
Tämän keksinnön mukaiselle menetelmälle on pääasiallisesti tunnusomaista se, että näyte ympätään Mus musculus castaneous hiirilajin sikiön epiteelisoluista viljellyn 5 solulinjan soluihin.
Epiteelisolu on ihmisen klamydiatartunnan ensisijainen kohde. Koska ei-transformoituneita, puhtaita epiteeli-soluviljelmiä on vaikea saada aikaan, epiteelisolujen kokeellista tartuntaa on ollut vaikea suorittaa.Mus musculus 10 castaneous hiirilajien sikiöstä eristetyn pysyvän epiteeli-solulinjan, MMC-E:n viljelemisen onnistuminen (Rapp, U.R., J. Keski-Oja, and U.I. Heine. 1979- Establishment and characterization of the epithelial mouse embryo cell line MMC-E. Cancer Res. 39:^111-^113) ja solulinjan karakteri-15 sointi on tehnyt mahdolliseksi tutkia in vitro sellaisten tautien eri aspekteja, jotka yleensä saavat aikaan muutoksia epiteeliin.
MMC-E solulinja eristettiin alunperin Mus musculus castaneouksen sikiöstä ja luokiteltiin epiteliaaliseksi 20 morfologiansa perusteella. MMC-E viljelmässä nähdään tiiviitä liitoksia ja desmosomimaisia rakenteita tarkasteltaessa suurella suurennoksella. Immunofluoresenssissa nähdään pieniä määriä solupinnan fibronektiiniä ja lisäksi viljelmistä saadaan virustransformaatiolla huonosti differentoi-25 tuneita karsinoomia "nude-hiirissä”. Solut sisältävät myös keratiinirihmoja, jotka ovat epiteelisolujen erikoisominaisuus (Keski-Oja, J., Lehto, V.-P. and Virtanen I. 1981. Keratin filaments of cultured mouse epithelial cells are rapidly affected by epidermal qrowth factor. J.Cell Biol.
30 90:531-5^1). MMC-E solut eivät ole tuumorigeenisiä "nude- hiirissä" ja niissä ilmentyy "epidermal growth factorin'1 (EGP) reseptoreita suuria määriä. EGF voi stimuloida soluja jakautumaan sekä saa aikaan differentaatioita muistuttavia morfologisia muutoksia (Keski-Oja, J., I.U. Heine, U.R.
35 Rapp, and B. Wetzel. 19Ö0. Epidermal growth factor-induced alterations in proliferating mouse epithelial cells.Exp.
Cell Res. 128:279-290). "Murine sarcoma" kasvutekijät saa- 4 63778 vat aikaan viljelytilanteessa näissä soluissa transformoidun fenotyypin (Keski-Oja, J., J.E. DeLarco, U.R. Rapp, and G.J. Todaro. 1980. Murine sarcoma growth factors affect the growth and morphology of cultured mouse epithelial cells. ' 5 J.Cell Physiol. 104:41-46).
Tässä yhteydessä tutkittiin näiden hiiren sikiön epiteelisolujen herkkyyttä Chlamydia trachomatikselle. Saatiin selville, että MMC-E soluviljelmät olivat herkkiä Chlamydia trachomatis tartunnalle ilman mitään käsittelyä, jos käy-10 tetään tiheitä, vanhoja viljelmiä, jolloin estetään solujen, mutta ei klamydian kasvua.
Käsittelemätön Mus musculus castaneouksen sikiön epi-teelisolulinja MMC-E on yhtä herkkä Chlamydia trachomatis tartunnalle kuin standardi McCoy menetelmä, jossa käytetään 15 säteilytettyjä soluja, ja sillä on merkittäviä etuja sekä kliinisessä rutiinidiagnoosissa että in vitro epitee- ;; lisolujen kokeellista klamydiatartuntaa tutkittaessa.
MMC-E solut ovat herkkiä Chlamydia trachomatis tartunnalle ilman mitään esi- tai jälkikäsittelyä ja ovat verrat- ' 20 tavissa tavallisesti eristyksessä käytettyihin, säteilytet- i tyihin McCoy soluihin. Sykloheksimidillä käsitellyt MMC-E solut mahdollistavat yhä useammissa laboratorioissa klamy- » diatartuntojen rutiinidiagnoosit ja ovat hyödyllisiä in .
vitro epiteelisolujen klamydiatartuntoihin liittyvien me-25 kanismien tutkimuksissa. i Käsittelemättömien MMC-E solujen käyttö klamydian .
eristämiseen on hyödyllistä klamydiatartuntojen rutiini- 1 ί diagnooseissa, ainakin sellaisissa laboratorioissa, joissa McCoy solujen esikäsittelyt ovat liian vaikeita suorittaa.
30 MMC-E solujen käyttö mahdollistaa täten klamydian eristä- mistestien suorittamisen yhä useammissa laboratorioissa.
Ceuraavassa selostetaan lähemmin erästä keksinnön sovellutusesimerkkiä. f
Colujen viljely 35 MMC-E solut kasvatettiin soluviljelyä varten käsitel- i lyissä muoviDulloissa (Tissue culture plastic petri dish) 5 63778 BHK-nesteessä, johon oli lisätty 10 % vasikan sikiön seerumia ja 50 pg/mg gentamysiiniä. Kantasolut irrotettiin tryosiini-EDTA:11a oasasointia varten viikoittain suhteessa 1:5- Noin 3 x 10 kpl soluja viljeltiin 1,0 ml:ssa 5 ravintonestettä tasapohjaisessa muoviputkessa, joka sisälsi pyöreän, halkaisijaltaan 13 mm:n, steriloidun peitinlasin, johon viljellyt solut tarttuivat. Putkia inkuboitiin 35°C:een lämmössä, 5 %:n hiilidioksidi-ilmastuksessa ja ne olivat valmiita näytteen ymppäykseen, pohjan täyttyessä soluista 10 1-2 päivää myöhemmin.
Säteilytetyt McCoy soluviljelmät valmistettiin samanlaisiin putkiin (ks. edellä) tavanomaisesti (Terho, P. 1978. Isolation techniques of Chlamydia trachomatis from patients with nonspecific urethritis. Dermatol. Monatsschr.
15 164:515-520).
C. trachomatis -kontrollikanta Käytetty kanta oli C.trachomatis serotyyppi L2 (434Bu), joka alkuaan on hankittu eräältä lontoolaiselta silmätauti-klinikalta. Se pasasoitiin laboratoriossa säteilytetyissä 20 McCoy soluissa kuten on kuvattu (Saikku, P., and J. Paavo-nen. 1978. Single-antigen immunofluorescence test for chlamydial antibodies. J. Clin. Microbiol. 8:119-121). Tämän kontrollikannan infektiviteetti oli 5 x 10^ inkluusiota muodostavaa yksikköä/ml määriteltynä säteilytetyissä McCoy 25 soluputkissa. 10-kertaiset kontrollikannan sarjalaimennok-set 0,2 M sakkaroosi - 0,02 M fosfaattiliuoksessa (2SP) (Gordon, P.B., and A.L. Quan. 1965· Isolation of the trachoma agent in cell culture. Proc.Soc.Biol.Med. 118:354-359),johon on lisätty 3 % vasikan sikiön seerumia, 50 /ag/ml gentamy-30 siiniä ja 25 U/ml nystatiinia, olivat juuri ennen käyttöä valmistettuj a.
Kliiniset näytteet
Tutkimusmateriaalina käytettiin Helsingin yliopiston iho- ja sukupuolitautien poliklinikalla toukokuussa 1980 otet-35 tuja 110 virtsaputken ja kohdunsuunkaulan näytettä potilaista, joilla oli ei-gonokokkaalinen uretriitti tai kervisiitti.
63778 6
Ympin ja infektiivisyyden titraaminen
Kaikki ympit tehtiin kahtena rinnakkaisena sekä MMC-E että McCoy solulinjasta. 0,1 ml molempien solulinjojen kont-rollikantoja aplisoitiin putkiin, jotka sisälsivät konfluent-5 teja eli viljelyastian pohjan täyttäviä viljelmiä käsittelemättömiä MMC-E soluja tai säteilytettyjä McCoy soluja. 0,2 M sakkaroosi-0,02 M fosfaattipuskurilla inokuloituja soluja käytettiin negatiivisina kontrolleina.
Kliiniset näytteet sulatettiin, jos ne olivat jäädytet-10 tyjä, ja homogenisoitiin sekoittamalla 20 sekunnin ajan.
Näyte jaettiin kahteen samankokoiseen osaan (0,5 ml kumpikin) ja ympättiin soluviljelmiin.
Näyte aplisoitiin sentrifugoimalla 3000 xg 1 tunnin ajan 35°C:eessa.Soluja inkuboitiin kaksi päivää 37°C:eessa.Jodi-15 värjäystä vartenravintoneste poistettiin putkesta ja lisättiin 1 ml metanolia ja annettiin seistä 10 minuuttia huoneen lämmössä. Metanoli poistettiin ja lisättiin 1 ml tavaramerkillä Lugol myytävää värjäysnestettä (valmistaja:Merck, Darmstadt) ja annettiin seistä 20 minuuttia huoneen lämmössä. 20 Värjäysneste poistettiin ja peitinlasi otettiin putkesta. Jodilla värjättyjen inkluusioiden laskeminen suoritettiin standarditekniikan mukaisesti mikroskoopissa (Paavonen, J.,M. Kousa, P. Saikku, E. Vesterinen, E. Jansson,and A. Lassus.1978. Examination of men with nongonococcal 25 urethritis and their sexual partners for Chlamydia trachomatis and Ureaplasma Urealyticum.Sex. Transm.Dis. 5:93-96).
Inkluusiot käsittelemättömissä MMC-E soluissa olivat kooltaan vastaavia kuin McCoy soluissa ja helppoja detektoida. Tällaisia käsittelemättömiä MMC-E soluja si-30 sältäviä eristysputkia voidaan valmistaa päivittäin.
Täten vältytään ongelmalta laskea milloin säteilyttää solut ja viljellä niitä peitinlasilla monta päivää ennen näyt-, teen saamista. Esitelty menetelmä on heti käyttövalmis klamydian rutiiniviljelyyn. Jodivärjäys osoittautui sopivak-35 31 suurien näytemäärien seulontaan.
Käsittelemättömien MMC-E solujen asemasta on mahdollista käyttää myös esim. sykloheksimidillä käsiteltyjä MMC-E
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI814023A FI63778C (fi) | 1981-12-15 | 1981-12-15 | Foerfarande foer isolering av klamydia |
| PCT/FI1982/000063 WO1983002122A1 (en) | 1981-12-15 | 1982-12-15 | Method for the isolation of chlamydia |
| EP19830900038 EP0097196A1 (en) | 1981-12-15 | 1982-12-15 | Method for the isolation of chlamydia |
| JP83500105A JPS58502083A (ja) | 1981-12-15 | 1982-12-15 | クラミジアの分離方法 |
| SU833637905A SU1296011A3 (ru) | 1981-12-15 | 1983-08-12 | Способ выделени @ @ |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI814023 | 1981-12-15 | ||
| FI814023A FI63778C (fi) | 1981-12-15 | 1981-12-15 | Foerfarande foer isolering av klamydia |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI63778B true FI63778B (fi) | 1983-04-29 |
| FI63778C FI63778C (fi) | 1983-08-10 |
Family
ID=8514957
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI814023A FI63778C (fi) | 1981-12-15 | 1981-12-15 | Foerfarande foer isolering av klamydia |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0097196A1 (fi) |
| JP (1) | JPS58502083A (fi) |
| FI (1) | FI63778C (fi) |
| SU (1) | SU1296011A3 (fi) |
| WO (1) | WO1983002122A1 (fi) |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4118469A (en) * | 1976-04-27 | 1978-10-03 | Research Corporation | Antigen for trachoma lymphogranuloma venereum (LGV) and non-gonococcal urethritis (NGU) |
| DK138080A (da) * | 1979-04-02 | 1980-10-03 | Research Corp | Fremgangsmaade til serologisk undersoegelse af kilder som mistaenkes for at indeholde antistoffer mod chlamydia trachomatis |
| US4427782A (en) * | 1981-03-03 | 1984-01-24 | Caldwell Harlan D | Isolation of principal outer membrane protein and antigen of Chlamydia trachomatis |
-
1981
- 1981-12-15 FI FI814023A patent/FI63778C/fi not_active IP Right Cessation
-
1982
- 1982-12-15 JP JP83500105A patent/JPS58502083A/ja active Pending
- 1982-12-15 WO PCT/FI1982/000063 patent/WO1983002122A1/en not_active Application Discontinuation
- 1982-12-15 EP EP19830900038 patent/EP0097196A1/en not_active Withdrawn
-
1983
- 1983-08-12 SU SU833637905A patent/SU1296011A3/ru active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI63778C (fi) | 1983-08-10 |
| EP0097196A1 (en) | 1984-01-04 |
| JPS58502083A (ja) | 1983-12-08 |
| WO1983002122A1 (en) | 1983-06-23 |
| SU1296011A3 (ru) | 1987-03-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Coleman et al. | A prospective study of human polyomavirus infection in pregnancy | |
| Yoder et al. | Microtest procedure for isolation of Chlamydia trachomatis | |
| Borchardt et al. | A comparison of the sensitivity of the InPouch TV, Diamond's and Trichosel media for detection of Trichomonas vaginalis. | |
| Ridgway et al. | Current problems in microbiology: 1. Chlamydial infections: which laboratory test? | |
| Grossmann et al. | Progress on isolation and short-term ex-vivo culture of highly purified non-apoptotic human intestinal epithelial cells (IEC) | |
| US5137030A (en) | Diagnostic methods | |
| Evans et al. | Detection of chlamydiae by isolation and direct examination | |
| FI63778C (fi) | Foerfarande foer isolering av klamydia | |
| Harrison et al. | Infection of untreated primary human amnion monolayers with Chlamydia trachomatis | |
| Ripa | Microbiological diagnosis of Chlamydia trachomatis infection | |
| US6472206B1 (en) | In situ growth, freezing and testing of cultured cells | |
| Hide et al. | A microculture technique for isolating live Leishmania parasites from peripheral blood of visceral leishmaniasis patients | |
| Cavaliere et al. | Cervico-vaginal Chlamydia trachomatis infection in pregnant adolescent and adult women: A morphologic and immunofluorescent study | |
| Cantero et al. | Maximizing the immunological output of the cervicovaginal explant model | |
| WO2016079733A1 (en) | Method for early diagnosis of cancer | |
| Rota | Techniques for culturing and determining antimicrobial susceptibility of Chlamydia trachomatis | |
| Meštrović et al. | Technical aspects of Chlamydia trachomatis antimicrobial susceptibility testing in cell culture system | |
| Swenson et al. | Examination of human semen infected with Ureaplasma urealyticum by fluorescence microscopy | |
| RU2449277C2 (ru) | Способ прогнозирования инфицирования новорожденных и родильниц | |
| Joseph et al. | In vitro culture of various species of microsporidia causing keratitis: evaluation of three immortalized cell lines | |
| Keski-Oja et al. | Isolation of Chlamydia trachomatis in Untreated MMC-E mouse epithelial cells | |
| RU2401862C2 (ru) | Способ выделения энтерококков из свежевзятого патологического материала | |
| CN219652972U (zh) | 一种用于无抗精子抗体的精子筛选的芯片和装置 | |
| Bahrami et al. | Prevalence of Ureaplasma urealyticum in endocervical specimens of female patients in Qazvin, Iran | |
| Takeda et al. | A new human spermatozoon selection method based on penetration of cervical mucus for intracytoplasmic sperm injection |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: LABSYSTEMS OY |