FI63595C - Foerfarande foer stabilisering av bakteriologiska prover i synnerhet urinprover - Google Patents
Foerfarande foer stabilisering av bakteriologiska prover i synnerhet urinprover Download PDFInfo
- Publication number
- FI63595C FI63595C FI790541A FI790541A FI63595C FI 63595 C FI63595 C FI 63595C FI 790541 A FI790541 A FI 790541A FI 790541 A FI790541 A FI 790541A FI 63595 C FI63595 C FI 63595C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- boric acid
- samples
- urine
- bacteriological
- added
- Prior art date
Links
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 title claims description 13
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 54
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 claims description 53
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 47
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 10
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 3
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 3
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 3
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- -1 polyoxy Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical class C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- MCPLVIGCWWTHFH-UHFFFAOYSA-L methyl blue Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC(S(=O)(=O)[O-])=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[NH+]C=2C=CC(=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(NC=3C=CC(=CC=3)S([O-])(=O)=O)=CC=2)C=C1 MCPLVIGCWWTHFH-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 25
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 18
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 18
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 16
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 3,7-bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 11
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 7
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 7
- PEEKVIHQOHJITP-UHFFFAOYSA-N boric acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OB(O)O.OCC(O)CO PEEKVIHQOHJITP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 5
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 5
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 4
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 3
- 241000588770 Proteus mirabilis Species 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 3
- 241000219470 Mirabilis Species 0.000 description 2
- OVRWHQHOBRAOMZ-UHFFFAOYSA-N OCC(O)CO.B(O)O Chemical compound OCC(O)CO.B(O)O OVRWHQHOBRAOMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- ZADPBFCGQRWHPN-UHFFFAOYSA-N boronic acid Chemical compound OBO ZADPBFCGQRWHPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- MTJGVAJYTOXFJH-UHFFFAOYSA-N 3-aminonaphthalene-1,5-disulfonic acid Chemical compound C1=CC=C(S(O)(=O)=O)C2=CC(N)=CC(S(O)(=O)=O)=C21 MTJGVAJYTOXFJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000589567 Brucella abortus Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 1
- 241000588767 Proteus vulgaris Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 description 1
- 241001147691 Staphylococcus saprophyticus Species 0.000 description 1
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010046543 Urinary incontinence Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000006161 blood agar Substances 0.000 description 1
- RERVRRLGFUNERS-UHFFFAOYSA-N boron;propane-1,2,3-triol Chemical compound [B].OCC(O)CO RERVRRLGFUNERS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940056450 brucella abortus Drugs 0.000 description 1
- 230000001010 compromised effect Effects 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000020200 pasteurised milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 229940007042 proteus vulgaris Drugs 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F5/00—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic Table
- C07F5/02—Boron compounds
- C07F5/04—Esters of boric acids
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Chemical And Physical Treatments For Wood And The Like (AREA)
- Ceramic Products (AREA)
- Amplifiers (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
ΓβΙ ««KUULUTUSjULKAISU ,7rnr «TL LBJ (11) utlAggninosskiiift 0 C .. Patentti oySnnetty 11 07 1983 ” Patent neddelat (51) Kv.ik.Va.3 C 12 N 1/04, C 12 (¾ 1/04 SUOMI—FINLAND (21) Nt^ttih.k*niu.-p»t«n«i»eki*iol 7905^1 (22) HtkemltpUvl — AiwBknlnpdi( 19.02.79 ' ' (23) AlkupUvi—GIWgh«t*dif 19.02.79 (41) Tullut Julktaukil — Mlvlt affwitHg 25. 08. 79 ' . /44) NlhtivUulpunon Ja kuuLfulkmtoun pvm. — ηο Αο nrtent- och registarstyreieen ' ΑμΜμ utitfd och utUkriftwi puMmnd (32)(33)(31) PrrOatty «tuolkuu»—Butin* prtorttvt 2U. 02.78
Ruotsi-Sverige(SE) 78021^7-^ (71) Opus Chemical, Stora Mygatan 15, S-Ull 08 Göteborg, Ruotsi-Sverige(SE) (72) Gerhard Oskar Hentschel, Askim, Thore Carolusson, Göteborg, Ruotsi-Sverige(SE) (7*0 Leitzinger Oy (5*0 Menetelmä bakteriologisten näytteiden, erityisesti virtsanäytteiden stabiloimiseksi - Förfarande för stabilisering av bakteriologiska prover, i synnerhet urinprover
Oheisen keksinnön kohteena on menetelmä bakteriologisten näytteiden, erityisesti virtsanäytteiden stabiloimiseksi, näytteiden säilyttämiseksi kuljetuksen aikana,
Boorihapon käyttö bakteriologisten näytteiden säilytyksessä on ollut tunnettua jo tämän vuosisadan alusta, mm. eläinlääketieteellisistä töistä, jotka ovat koskeneet pastöroidun maidon bakteriologista ja tuotantohygieenistä testiä. Näissä töissä on osoitettu mahdollisuus käyttää 1 %:sta boorihappoliuosta apuaineena kuljetuksen aikana bakteriologisiin laboratorioihin sekä näin saavutetut edut. Kokeissa käytettiin B. tuberculosis-bakteeria ja osoittautui, että tuberkeli-bakteerit eivät tuhoutuneet maitonäytteissä, jotka oli säilytetty 1 %:lla boorihapolla. Samalla tämä säilytystapa mahdollisti kauan kestävän näytteiden kuljetuksen ilman, että näytteissä tapahtui mitään ei-suotavia muutoksia, jotka olisivat vaikuttaneet laboratoriotutkimuksiin.
2 63595 1920-luvun lopussa ei vielä oltu hyväksytty mahdollisuutta helpottaa bakteriologista laboratoriotyötä boorihapposäilytyksen avulla virtsanäytteiden bakteerianalyyseissä. Erittäin voimakkaasti on painotettu sitä, että epäillyissä virtsatieinfektioissa on välittömästi tutkittava virtsanäytteet bakteriologisesti, jotta vältyttäisiin bakteerikantojen liikakasvulta, huolimatta siitä, että boorihappoa voidaan käyttää esianalyyttiseti häiritsemättä muiden, parametrien mittauksia. Brucella abortus-tutkimuksissa on osoitettu, että liikakasvun välttämiseksi on mahdollista käyttää boorihappoa 1 %:na kuljetusaineena.
Monissa eri tutkimuksissa, sekä ihmisillä että eläimillä, jotka ovat koskeneet bakteereiden kasvua ja sen estämistä eri väliteaineissa on käytetty boorihappoa. Monissa tieteellisissä töissä huomautetaan tästä huolimatta, että virtsan bakteriologiset tutkimukset on suoritettava välittömästi, jos säilyttäminen kylmässä (+4°C) ei ole mahdollista, ja mikäli kylmäsäilytys on mahdollista tällöinkin ainoastaan 48 tunnin aikana. Virtsanäytteiden hitaassa kuljetuksessa bakteriologisiin laboratorioihin esiintyvä liikakasvu on siis yhä ongelma. Eräässä 1960-luvun lopun työssä huomautetaan hieman yllättäen, että tutkimuksia, jotka koskevat boorihappoa säilytysaineena virtsanäytteiden kuljetuksessa, ei ole otettu huomioon ja vielä vähemmän tutkittu.
Tässä työssä ilmoitetaan, että boorihapon konsentraatio on optimaati-sesti valmiissa kuljetettavaksi tarkoitetussa virtsanäytteessä 1,8 %, ja että esianalyyttinen aika ei saa ylittää 4 päivää.
Huolimatta näistä lääketieteellisistä töistä ja huolimatta siitä, että boorihappo oli aikaisemmin tunnettu bakteereiden kasvun suhteen funktionaalisena säilytysaineena, tämä menetelmä on levinnyt vain vähän kansallisesti tai kansainvälisesti bakteriologisessa laboratoriotyössä.
Tähän vähäiseen kiinnostukseen hyväksyä näennäisesti varma ja suhteellisen selvästi taloudellisempi kuljetusmenetelmä kuin kylmäkuljetus voidaan osoittaa kuitenkin monia syitä. Menetelmään liittyy suuria käytännön vaikeuksia, koska on mitattava hyvin pieniä määriä jauhetta, sillä tämä on kuljetettava hyvin pienissä kuljetusputkissa, ja koska boorihapolla on suhteellisen alhainen liukoisuus virtsaan. Jos jauhe il 3 63595 sitä paitsi liuotetaan veteen, jotta helpommin voitaisiin mitata täsmälliset tilavuudet, saadaan niin suuri tilavuus boorihappoliuosta ja virtsaa, että tämä on käytännössä kuljetuksissa mahdotonta. Jotta laboratoriossa voitaisiin ottaa virtsanäytteet, joissa on boorihappoa, ja boorihappoa sisältämättömät virtsanäytteet, tarvitaan ylimääräinen työvaihe, joka on käytännössä häiritsevä, koska keskitetyssä labora-toriodiagnostiikkassa työvaiheita on oltava niin vähän kuin mahdollista päivittäin tulevan suuren virtsanäytemäärän vuoksi (noin 500 per päivä suurehkossa laboratoriossa).
Boorihapon liukoisuus veteen on: 0°C:ssa 2,66 g/100 g vettä 20°C:ssa 4,9 g/100 g vettä mikä tarkoittaa, että käytännössä ei voida toimia suuremmilla konsentraatioilla kuin 3-prosenttisilla liuoksilla, jotta vältettäisiin kiteytyminen lämpötilojen vaihdellessa. Mm. kustannussyistä on käytettävä mahdollisimman pieniä kuljetusyksiköltä, joiden tilavuus on 10 ml.
Kun käytetään 3-prosenttista boorihappoliuosta 9 ml:aan virtsaa on lisättävä 13 ml liuosta, jotta boorihapon konsentraatioksi saadaan 1,8 %, mikä tarvitaan säilytyksen aikaansaamiseksi. Tämä tarkoittaa, että näytteisiin lisätään paljon vettä ja että tilavuus tulee yli kaksinkertaiseksi.
On osoittautunut, että säilyminen saadaan tehokkaammaksi lisäämällä boorihappoa, jos tämä on orgaanisena kompleksina.
Koska boorihapon konsentraatio tässä kompleksissa on korkea, on täysin riittävää, että 9 ml:aan virtsaa lisätään 0,4 - 1,4 ml tai g. Tällä tavoin tilavuutta lisätään niin vähän, että voidaan käyttää standardisoituja kuljetusputkia.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista se, että näytteeseen lisätään boorihappokompleksia, jonka kaava on 4 63595 o o" o
R ^ B ^ H tai R B RH
[Χ0^ XoJ
jossa R tarkoittaa: etyleeniglykolia, propaanidiolia-1,2, glyserolia, fruktoosia, mannitolia, sorbitolia tai muita veteen liukenevia dioksi- tai polyoksiyhdisteitä ja että kompleksia lisätään sellainen määrä, että boorihapon pitoisuus näytteessä on 0,2 - 1,4 paino-%, edullisesti 0,4 - 0,8 paino-%.
Jotta voitaisiin helpommin todeta, onko säilytysainetta lisätty, kompleksit voidaan värjätä metyleenisinisellä tai muulla sopivalla väriaineella, joka ei häiritse bakteriologista tutkimusta.
Seuraavissa esimerkeissä on kuvattu keksinnön mukaisesti käytettyjen boorihappokompleksien valmistus.
Esimerkki 1
100 paino-osaa etyleeniglykolia 17 paino-osaa boorihappoa BP
kuumennettiin 98°C:een, jolloin vettä lohkesi pois. Tämän jälkeen lämpötila nostettiin 112°C:een 4 minuutin aikana. Tällöin poistui 2 moolia vettä.
Boorihappopitoisuus = 17,7 % pH väkevässä reaktiotuotteessa =2,5 pH 10-prosenttisessa vesiliuoksessa = 4,4
Esimerkki 2
124 paino-osaa glyserolia DAB 6 d = 1,23 17 paino-osaa boorihappoa BP
kuumennettiin 110°C:een, jolloin reaktio alkoi ja 2 moolia vettä lohkesi pois. Reaktioseoksen vesipitoisuus nousi 11,3 %:sta 22,3 %:iin.
i- 5 63595 Lämpötilaa nostettiin 3 minuutissa 129°C:een, minkä jälkeen lämmitys lopetettiin ja reaktiotuote sai jäähtyä.
Vesipitoisuus = 15,5 %
Boorihappopitoisuus = 12,4 % pH väkevässä reaktiotuotteessa = 1,3 pH 10-prosenttisessa vesiliuoksessa = 3,9
Metyleenisinistä lisättiin niin, että sen konsentraatioksi tuli 5-50 ppm.
Esimerkki 3 100 paino-osaa d-mannitolia 70 paino-osaa vettä 32 paino-osaa boorihappoa kuumennettiin 80°C:een, jolloin reaktio alkoi. Lämpötila nostettiin 7 minuutissa 112°C:een, jolloin poistui 2 moolia vettä. Boorihappopitoisuus = 10,8 % pH väkevässä reaktiotuotteessa = 0,85 pH 10-prosenttisessa vesiliuoksessa = 3,5
Tuote sai jäähtyä ja puristettiin sen jälkeen tableteiksi.
Esimerkki 4 100 paino-osaa fruktoosia 50 paino-osaa vettä 36 paino-osaa boorihappoa kuumennettiin 80°C:een, minkä jälkeen lämpötila nostettiin 6 minuutissa 109°C:een, jolloin poistui 2 moolia vettä.
Boorihappopitoisuus = 12,1 % pH väkevässä reaktiotuotteessa = 1,1 pH 10-prosenttisessa vesiliuoksessa = 4,2 Reaktiotuote puristettiin tableteiksi.
Esimerkki 5 100 paino-osaa propaanidiolia-1,2 25 paino-osaa boorihappoa kuumennettiin 98°C:een, jonka jälkeen lämpötila nostettiin 10 minuutissa 160°C:een.
Boorihappopitoisuus = 20 % 6 63595 pH väkevässä reaktiotuotteessa = 1,7 pH 10-prosenttisessa vesiliuoksessa =4,6 Värjättiin metyleenisinisellä.
Esimerkin 2 mukaisesti valmistetulla boorihappo-glyseroli-kompleksil-la on tutkittu eri bakteerilajien yksittäistä herkkyyttä eri bakteerimäärillä ja näytteistä, jotka samanaikaisesti sisältävät monia eri bakteerikantoja, tutkimalla näytteet sekä ennen tavallisesti kyseeseen tulevaa kuljetustapaa (alle vuorokausi) ja sen jälkeen, osaksi myös näytteistä, joita on säilytetty kauemmin ennen viljelyä. Tarkoitus oli myös yksitellen tutkia tuotteeseen sisältyvät eri komponentit niiden antibakteerisen vaikutuksen suhteen sekä yrittää arvioida, kuinka suuria poikkeamia voidaan tehdä ohjeista, joita on annettu boorihappopitoisen säilytysvalmisteen lisätyn määrän tai virtsan määrän suhteen.
On suoritettu kahden tyyppisiä kokeita: 1) Näytteitä on otettu bakteerivirtsaisuudesta kärsivistä potilaista. Osittain näytteet on ottanut laboratorion henkilökunta, osittain osastojen henkilökunta ja kuljetettu tavallista kuljetustietä laboratorioon. Tapauksissa, joissa laboratorion henkilökunta on suorittanut näytteidenoton ja kuljetuksen, näytteenottotekniikka ja kuljetus-aika on ollut täydellisessä valvonnassa. Näytteet on otettu pesun ja kuivauksen jälkeen nk. "mid-stream-näytteinä" ja viljelty tunnin kuluessa. Viljely on suoritettu veriagar-levyillä, drigalski-agarilla ja happosorbitoli-agarilla. Näytteet on kvantitoitu viljelyn jälkeen sarjalaimentamalla virtsanäyte keittosuolassa. Lajin määrittäminen on suoritettu tavanomaisella rutiinimenetelmällä ensin inkuboi-malla 18 tuntia 37°C:ssa.
2) Eri kantojen testaus mahdollistettiin suorittamia 11a laboratoriokokeita kokeellisesti valmistetulla, bakteeripitoisella virtsalla. Kokeissa on käytetty kahdeksaa, virtsatieinfektioissa tavallista bakteerikantaa, so.:
Escherichia coli Klebsiella
Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas mirabilis
II
7
Enterokokit 635 9 5
Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophyticus
Erityisen herkkää koekantaa tarvitsevissa kokeissa on käytetty gonokokkeja.
Kokeet on suoritettu pääasiassa vertaamalla näytteitä, jotka on säilytetty kylmässä ja vastaavasti huoneen lämpötilassa, kun jälkimmäisessä tapauksessa on lisätty boori-glyserolia.
Vertailuarvona on käytetty sitä kasvatustulosta, joka on saatu viljelemällä tunnin sisällä näytteenotosta.
Kokeissa on käytetty osaksi puhdasta boorihappoa jauhemuodossa, osaksi eri konsentraatioina esimerkin 2 mukaista boorihappo-komplek-sia.
Kokeellinen bakteerivirtsaisuus-virtsa:
Agarlevyiltä saaduista bakteeripesäkkeistä tehtiin liete fysiologiseen keittosuolaliuokseen. Kvantitatiivinen määritys suoritettiin niin, että bakteerimäärä saatiin välille noin 100 000 ja 10 miljoonaa/ml virtsaa sen jälkeen, kun liete oli lisätty infektoitumattomaan virtsaan.
Tulokset
Kokeet suoritettiin jauhemuodossa olevalla boorihapolla. 9 ml:aan virtsaa lisättiin 0,1 g boorihappoa. Käytetyt koekannat on esitetty taulukossa 1.
63595 8
Aika, minkä jäi- <1 h 24 h 2h boori- 48 h 48 h boori- keen kasvatettu +4°C happo , .op happo
+22 C * L +22ÖC
Enterococci 6,7 6,3 6,3 6,2 6,2
Proteus mirabilis 6,3 6,3 6,3 6,1 6,1
Staphylococcus aureus 5,8 5,9 5,7 5,9 5,8
Pseudomonas 6,2 6,1 6,0 6,0 5,9
Klebsiella 6,1 5,8 6,2 6,0 6,7 E. coli 5,5 5,5 5,3 5,2 5,1
Taulukko 1 (bakteereiden lukumäärään 10 log)
Menetelmän kuvauksen mukaisesti valmistettu, bakteeripitoinen virtsa tutkittiin kvantitatiivisesti ja jaettiin kahteen osaan. Toinen osa laitettiin +4°C:een ja toiseen osaan lisättiin boorihappoa ja säilytettiin huoneen lämpötilassa. Kvantitatiivinen määritys suoritettiin 24 ja 48 tunnin kuluttua. Taulukosta ilmenee, että mitään huomattavia poikkeamia ei esiinny, kun virtsaa on säilytetty kylmässä tai huoneen lämpötilassa, jolloin jälkimmäisessä tapauksessa on lisätty boorihappoa.
Potilasnäytteet: Näyteet otettiin kuudelta pitkäaikaishoidossa olevalta geriatriselta potilaalta. Näytteet viljeltiin tunnin kuluessa, minkä jälkeen näytteet käsiteltiin samalla tavoin kuin edellä. Taulukosta 2 ilmenee, että sekä jäähdytettynä että boori-hapossa säilytettyjen näytteiden poikkeamat ovat pienempiä kuin 10-potenssi.
1 h 24 h 24 h boori" 48 h 4 h boori- las jälkeen , ,o~ u Λ ,
Viljelty__+4 C +<°C ^apgo 1. E.coli 7,5 7,7 7,7 7,6 7,6 2. E.coli 7,1 6,9 6,9 7,1 6,6 3. Proteus 6,9 6,5 7,0 7,0 7,2 4. Proteus 7,4 7,4 7,2 7,3 7,1 5. Proteus 6,3 5,9 6,3 5,6 6,4 6. Proteus 6,9 6,8 6,7 6,8 6,7
Taulukko 2 9 63595
Jotta voitaisiin selvittää, onko itse glyserolilla ehkäisevä vaikutus bakteereihin, suoritettiin seuraava koe;
Viisitoista bakteerivirtsaisuudesta kärsivästä potilaasta saatua tuoretta bakteerieritettä lisätiin virtsaan, joka tutkittiin kvantitatiivisesti ja jaettiin kolmeen osaan, joista yksi säilytettiin +4°C;ssa, toinen huoneen lämpötilassa lisäämällä boorihappoa ja kolmas 22°C;ssa lisäämällä glyserolia. Testatut bakteerikannat ja havaittujen muutosten 10-logaritmit on esitetty taulukossa 3. Yhdessäkään tapauksessa glyserolin lisääminen ei ole estänyt bakteereiden kasvua. Kylmässä säilytetyissä ja huoneen lämpötilassa säilytetyissä näytteissä, joihin jälkimmäisiin oli lisätty boorihappoa, muutokset olivat kaikissa tapauksissa pienempiä kuin 10-potenssi.
Jotta voitaisiin saada selville, voidaanko negatiivinen vaikutus aikaansaada yhdistämällä esimerkin 2 mukainen boorihappokompleksi ja kylmässä säilyttäminen, suoritettiin seuraava koe: Virtsaan lisättiin viittä erilaista bakteerilajia. Näytteet tutkittiin kvantitatiivisesti ja jaettiin osiin. Käsittelemätöntä virtsaa säilytettiin -20°C;ssa. Esimerkin 2 mukaista boorihappokompleksia lisättiin toiseen näyte-erään ja säilytettiin sekä 24°C;ssa että huoneen lämpötilassa.
10 63595
Aika, minkä jälkeen viljelty- 24 h boori- 24 h glyseroli 1 h 24nh happo ,„°r
+4°C +22°C +22 C
Proteus 1 5,8 5,85 6,0 >9
Proteus 2 5,7 5,8 5,9 >9
Proteus 3 6,5 6,5 7,1 8,15
Proteus 4 8,05 8,05 8,25 8,20
Proteus 5 8,2 8,0 8,25 8,7
Proteus 6 6,05 6,3 6,15 >9
Klebsiella 1 4,75 4,4 4,55 >9
Klebsiella 2 6,7 6,7 6,5 >9
Klebsiella 3 7,3 8,3 7,5 8,2
Klebsiella 4 6,05 5,7 5,45 >9
Klebsiella 5 6,8 6,75 6,9 7,5
Pseudomonas 1 7,5 7,0 7,3 7,8
Pseudomonas 2 7,8 8,0 7,3 8,2
Enterococci 5,35 4,4 5,5 >9 E. coli 7,7 7,7 7,8 8,05
Taulukko 3
Bakteeri Siirroste Boorihappo-glyserolikomp- , leksi (esim. 2 mukainen)
___18 h +4°C 18 h +22°C_-20°C
E. coli 5,7 5,5 5,8 3,5
Prot. mirabilis 6,5 6,0 6,2 2,4
Pseudomonas 6,9 6,1 6,3 3,9
Enterococci 6,5 6,0 6,0 4,2
Staph, aureus 6,0 6,0 6,0 5,7
Taulukko 4 li 11 63595
Taulukosta käy ilmi, että kylmässä säilyttämisen ja esimerkin 2 mukaisen boorihappo-glyseroli-kompleksin yhdistäminen ei anna poikkeavia tuloksia 18-tuntisen säilytyksen jälkeen. Virtsan jäädyttäminen antaa täysin epäluotettavia kvantitatiivisia tuloksia. Gram-nega-tiivisilla kannoilla poikkeamat ovat suurempia kuin gram-positiivi-silla kokeilla.
Jotta saataisiin selville glyserolin vaikutus bakteereihin, suoritettiin koe erityisen herkällä kannalla:
Verrattiin virtsaa, johon oli lisätty glyserolia, ja virtsaa ilman glyserolilisäystä. 9 ml:aan virtsaa lisättiin 0,65 ml glyserolia. Gonokokkeja lisättiin sekä tähän virtsaan että glyserolia sisältämättömään virtsaan. Kvantitatiivinen määritvs suoritettiin yhden, kahden, neljän ja kuuden tunnin kuluttua. Taulukossa 5 on esitetty alkuaan lisättyjen gonokokkien se prosentuaalinen osuus, joka voidaan eristää uudelleen vastaavan ajan kuluttua. Taulukosta käy ilmi, että gonokokit kuolevat virtsassa nopeasti ja että niitä ei voi löytää neljä tuntia lisäyksen jälkeen, kun taas glyserolin lisääminen vaikuttaa sen, että gonokokkeja voidaan eristää kuuden tunnin kuluttua.
Testiorganismi Tuntia Virtsa, jossa 0,65 ml v. .
glyserolia/9 ml virtsa
Gonococci 1 100 % 80 % 2 100 % 60 % 4 40 % 1 % 6 10 % 1 %
Taulukko 5
Suoritettiin kokeita lisäämällä eri väriaineita. Loffler'in metyleeni-sinistä (0,5 g/1000 ml) laimennettiin ja lisättiin virtsaan. Paljas silmä kykenee selvästi havaitsemaan värin konsentraatiossa 0,01 ml/ 9 ml virtsaa. Jotta saataisiin selville metyleenisinisen vaikutus bakteereihin, suoritettiin koe kymmenen kertaa vahvemmalla liuoksella. Näytteeseen lisättiin boorihappo-glyseroli-kompleksia, jossa oli metyleenisinistä, ja kompleksia ilman metyleenisinistä. Taulukosta 6 käy ilmi, että metyleenisinisen lisääminen ei häirinnyt testattujen 63595 12 bakteerikantojen kvantitatiivista tutkimusta.
Siirroste 24 h kuluttua, kun Ilman metyleeni- mukana metyleeni- sinistä _sinistä +22°C_+22°C_ E. Coli 5,6 5,5 5,3
Proteus mirabilis 6,0 5,9 6,0
Pseudomonas aeruginosa 6,0 5,9 5,9
Enterococci 6,2 6,0 5,9
Staph.aureus_6,0_6,0_6,2_
Taulukko 6
Virhemarginaalit;
Jotta saataisiin selville, kuinka paljon voidaan poiketa menetelmän kuvauksessa mainitusta virtsamäärästä ja vastaavasti boorihappo-kompleksi-lisäyksen määrästä, suoritettiin koe eri konsentraatioilla.
Kokeessa käytettiin virtsaa, johon oli lisätty E. coli-bakteereita. Boorihapon sopivaa konsentraatiota koskevien aikaisempien raporttien tulosten perusteella ja suorittamalla kokemukseen perustuvia säätötoimenpiteitä valmistettiin boorihappo-glyserolikompleksi, joka sisälsi 12,4 % boorihappo. Normaliin virtsanäytemäärään (9 ml) lisättiin yhdeksän eri määrää välillä 0,4-0,8 ml (0,65 ml vastaa 0,82 % boori-happoa). Näytteitä säilytettiin 24 tuntia +22°C:ssa. Kvantitatiivinen tutkimus suoritettiin osaksi yli 5 kuukautta vanhalla liuoksella, osaksi juuri valmistetulla liuoksella. Laimennusalueella muutokset olivat pienempiä kuin 10-potenssi. Boorihappokompleksi oli esipakattu annospussiin. Valitsemalla 0,65 ml per annospussi ei todennäköisesti tuloksiin vaikuta se, että huolimattomuudesta tyhjennetään sisällöstä kolmasosa virtsanäytteeseen ja näin saadaan alhaisempi boorihappokon-sentraatio kuin on tarkoitus. Menetelmän tarkkuus ei kärsi siitä, että konsentraatio jonkin verran kasvaa kaadettaessa putkeen liian vähän virtsaa. Laskelmien perusteella menetelmä sallii senkin, että suositellusta 9 mlssta jätetään lisäämättä 3 - 4 ml.
Loppukoe:
Loppukoe suoritettiin näytteillä, jotka oli otettu bakteerivirtsaisuu- 13 63595 desta kärsivistä potilaista. Kaikki näytteidenotot suoritettiin lisäämällä liuosta annospussista ja näytteet kuljetettiin tavanomaisella laboratoriorutiinilla. Näytteiden toiseen osaan lisättiin boorihappo-glyseroli-kompleksia ja säilytettiin huoneen lämpötilassa. Toinen osa jäädytettiin ja kuljetettiin kylmänä. Molempia näytetyyppejä säilytettiin 24 tuntia, minkä jälkeen suoritettiin kvantitatiivinen tutkimus.
Tulokset on esitetty taulukossa 7._
Potilas Syntymäaika Suku- Bakteeri Bakteereiden määrä/ml virtsaa n:o puoli boorihappo-glyseroli-kompleksi _+22°C_+4°C_ 1 96 10 16 N E. coli 6,80 6,86 2 90 04 13 M Klebsiella 7,67 7,48 3 86 03 30 N E. coli 8,42 8,20 4 94 09 06 N Staph.aureus 6,60 7,00
Proteus 6,23 6,69 E. coli . 6,90 7,28 5 07 30 18 N E. coli 6,40 6,76 6 93 12 25 N E. coli 3,30*) 2,00*) 7 96 10 16 N E. coli 7,50 7,65 8 98 10 29 N Enterococci 3,90*) 3,60*) 9 91 02 25 M Enterococci 5,17 5,11
Proteus 6,20 6,00 10 92 12 11 M Klebsiella 7,59 8,36 11 93 04 13 N E. coli 8,15 8,34 12 01 10 05 M Proteus 4,85 5,96
Enterococci 4,15**) 4,11**)
Difteria sauvoja 8,04 8,00 13 97 11 05 N Proteus 6,48 7,70
Enterococci 5,90 5,78
Klebsiella 7,18 7,08 14 N E. coli 8,07 8,17 15 87 02 06 M Enterococci 7,47 7,47
Proteus mirabilis 6,69 6,69
Proteus vulgaris 7,77 7,77 _Staph, epidermidis 7,30_5,60
Taulukko 7. Bakteereiden lukumäärän 10 log. sen jälkeen, kun 9 ml virtsanäytettä, jossa oli 0,65 ml boorihappo-glyseroli-kompleksia eli 0,82 % boorihappoa, säilytettiin huoneen lämpötilassa verrattuna virtsaan, jota säilytettiin +4°C:ssa.
14 63595 ’ Ei huomattavaa bakteerivirtsaisuutta
Luultavasti ei huomattavaa bakteerivirtsaisuutta
Bakteriologiseen viljelyyn tarkoitettujen näytteiden kuljetuksessa esiintyy suuria vaikeuksia. Jos viljely ei tapahdu lyhyen ajan kuluessa näytteen otosta, tapahtuu ei-suotavia muutoksia. Muutokset voidaan estää suorittamalla kuljetus kylmässä. Näytteiden jäähdyttämiseen voi joskus liittyä näytteen jäätyminen, joka on haitallista monille bakteerilajeille. Jäähdytysmenetelmä on kömpelö ja epätaloudellinen. Jo aikaisemmin on osoitettu boorihapon käyttö virtsanäytteiden säilytysaineena ja tämä on vahvistettu uusilla kokeilla. Jauhemaisen boorihapon haitat ovat käynnistäneet kokeet käyttää boorihappoa liuoksena. Esimerkin 2 mukaisesti on valmistettu boori-happo-glyseroli-kompleksi ja lisätty metyleenisinistä, jotta lisäys voitaisiin nähdä näytteessä. Sekä laboratoriomittaiset että kliiniset näytetutkimukset ovat osoittaneet, että keksinnön mukaisella seoksella on haluttu vaikutus. Kahden vuorokauden aikana näytteissä ei ole esiintynyt muutoksia. Testauksen kohteena on ollut suuri joukko erilaisia bakteerilajeja, jotka ovat ajankohtaisia virtsatieinfektioiden etiologiassa. Millään komponentilla ei ole osoittaunut olevan käytetyssä konsentraatiossa mitään antibakteerista vaikutusta. Tuotteen väärinkäytön varmuusmarginaalien arviointi on osoittanut, että todennäköisesti voidaan sietää 30-prosenttinen väärinannostus, sekä ylös- että alaspäin, suositellusta konsentraatiosta.
Tuotteen konsentraatio ei sido mihinkään erityiseen putkityyppiin vaan voidaan joustavasti käyttää niitä näytetilavuuksia ja putkityyp-pejä, joita käytetään eri laboratorioissa.
Ilmeistä on, että tämä menetelmä on selvästi joustavampi kuin kylmä-kuljetus ja että sillä päästään eroon vaarasta, että jäähtyminen vahingoittaa näytteitä. Kuljetuksen kannalta menetelmä tarjoaa suuremman joustavuuden ja merkittävästi alhaisemmat kustannukset. Käytännössä on osoittautunut, että kylmäkuljetus on erittäin vaikea suorittaa oikein.
I·
Claims (4)
1. Menetelmä bakteriologisten näytteiden, erityisesti virtsanäytteiden stabiloimiseksi, näytteiden säilyttämiseksi kuljetuksen aikana, tunnettu siitä, että näytteeseen lisätään boorihappokomplek-sia, jonka kaava on ^°\ /°l r^°x /\" R B H tai R 'R H 1^0^ ^o] jossa R tarkoittaa: etyleeniglykoliä, propaanidiolia-1,2, glyserolia, fruktoosia, mannitolia, sorbitolia tai muita veteen liukenevia dioksi- tai polyoksiyhdisteitä ja että kompleksia lisätään sellainen määrä, että boorihapon pitoisuus näytteessä on 0,2 - 1,4 paino-%, edullisesti 0,4 - 0,8 paino-%.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että näytteeseen lisätään boorihappokompleksin seosta.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään sellaista boorihappokompleksia, joka sisältää värilisäainetta.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että värilisäaineena käytetään metyylisinistä 5-50 ppm.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE7802147A SE419346B (sv) | 1978-02-24 | 1978-02-24 | Forfarande for stabilisering av bakteriologiska prover |
| SE7802147 | 1978-02-24 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI790541A FI790541A (fi) | 1979-08-25 |
| FI63595B FI63595B (fi) | 1983-03-31 |
| FI63595C true FI63595C (fi) | 1983-07-11 |
Family
ID=20334100
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI790541A FI63595C (fi) | 1978-02-24 | 1979-02-19 | Foerfarande foer stabilisering av bakteriologiska prover i synnerhet urinprover |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| CA (1) | CA1140051A (fi) |
| DE (1) | DE2906730C2 (fi) |
| DK (1) | DK80479A (fi) |
| FI (1) | FI63595C (fi) |
| GB (1) | GB2016446B (fi) |
| NO (1) | NO147054C (fi) |
| SE (1) | SE419346B (fi) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8800502D0 (en) * | 1988-01-11 | 1988-02-10 | Cerestar Holding Bv | Method of adding borax/boric acid to mixing/reaction-zone |
| US5505953A (en) | 1992-05-06 | 1996-04-09 | Alcon Laboratories, Inc. | Use of borate-polyol complexes in ophthalmic compositions |
| FR2731008B1 (fr) * | 1995-02-24 | 1999-05-07 | Dev Activites Chimiques Distri | Solution aqueuse boree, notamment pour l'adjuvantation de colle amylacee |
| WO2008131499A1 (fr) * | 2007-04-26 | 2008-11-06 | Realco Sa | Procédé de traitement de la cercosporiose du bananier et composition de traitement |
| US9102700B1 (en) | 2014-08-29 | 2015-08-11 | Vdf Futureceuticals, Inc. | Compositions and methods for borocarbohydrate complexes |
-
1978
- 1978-02-24 SE SE7802147A patent/SE419346B/sv unknown
-
1979
- 1979-02-16 NO NO790518A patent/NO147054C/no unknown
- 1979-02-16 CA CA000321844A patent/CA1140051A/en not_active Expired
- 1979-02-19 FI FI790541A patent/FI63595C/fi not_active IP Right Cessation
- 1979-02-21 DE DE2906730A patent/DE2906730C2/de not_active Expired
- 1979-02-21 GB GB7906062A patent/GB2016446B/en not_active Expired
- 1979-02-23 DK DK80479A patent/DK80479A/da not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO147054B (no) | 1982-10-18 |
| FI63595B (fi) | 1983-03-31 |
| NO147054C (no) | 1983-01-26 |
| SE7802147L (sv) | 1979-08-25 |
| DE2906730A1 (de) | 1979-09-06 |
| FI790541A (fi) | 1979-08-25 |
| DK80479A (da) | 1979-08-25 |
| DE2906730C2 (de) | 1982-04-22 |
| SE419346B (sv) | 1981-07-27 |
| CA1140051A (en) | 1983-01-25 |
| GB2016446A (en) | 1979-09-26 |
| NO790518L (no) | 1979-08-27 |
| GB2016446B (en) | 1982-12-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ingham et al. | Inhibition of phagocytosis in vitro by obligate anaerobes | |
| Pressler et al. | Candida spp. urinary tract infections in 13 dogs and seven cats: predisposing factors, treatment, and outcome | |
| US3963355A (en) | Process and apparatus for analyzing specimens for the presence of microorganisms therein | |
| CN107011511B (zh) | 一种原卟啉荧光碳点及制备方法和应用 | |
| FI63595C (fi) | Foerfarande foer stabilisering av bakteriologiska prover i synnerhet urinprover | |
| Joslyn et al. | A turbidimetric method for the assay of antibiotics | |
| US5026638A (en) | Antibiotic sensitivity test for pathogenic organisms present in mastitic milk | |
| Baskett et al. | Shigella flexneri inhibition by acetic acid | |
| CN116773306B (zh) | 一种阴道分泌物荧光染色液及其制备方法 | |
| CN106496110B (zh) | 金属β-内酰胺酶抑制剂开链吡啶羧酸衍生物及其制备方法 | |
| Demir et al. | Bloodstream infection with Oligella ureolytica in a newborn infant: a case report and review of the literature | |
| DE2547622C3 (de) | Test-Set | |
| Terzi et al. | The antibacterial effects of bilirubin on gram-negative bacterial agents of sepsis | |
| Stickler et al. | N-nitrosamine generation by urinary tract infections in spine injured patients | |
| CN106377527B (zh) | 开链吡啶羧酸衍生物H2dedpa在抗菌领域的应用 | |
| Tan et al. | Mycoplasma isolations from clinically normal cats | |
| BR112019027839A2 (pt) | aplicação de totarol e composição farmacêutica contendo totarol | |
| Petzer et al. | Comparing effects of freezing at-196° C and-20° C on the viability of mastitis pathogens | |
| JP3612095B2 (ja) | 検体輸送用培地 | |
| Hyman et al. | The nitrite reaction as an indicator of urinary infection | |
| Stålberg et al. | Is tubular function impaired during treatment with gentamicin or tobramycin? | |
| Johansen et al. | Antibacterial effects of metrizoate and metrizamide on bacterial growth in vitro | |
| Rajendran et al. | A study of prevalence of culture positive UTI in children: clinical profile, risk factor analysis, and microbiological profile | |
| Qasim et al. | The effect of honey on the growth of pathogenic bacteria isolated from skin infections. | |
| RU2588469C1 (ru) | Способ определения чувствительности helicobacter pylori к антибиотикам |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: OPUS CHEMICAL |