FI104405B - Starch capsules containing microorganisms and process for their preparation - Google Patents

Starch capsules containing microorganisms and process for their preparation Download PDF

Info

Publication number
FI104405B
FI104405B FI980707A FI980707A FI104405B FI 104405 B FI104405 B FI 104405B FI 980707 A FI980707 A FI 980707A FI 980707 A FI980707 A FI 980707A FI 104405 B FI104405 B FI 104405B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
starch
granules
filled
coated
process according
Prior art date
Application number
FI980707A
Other languages
Finnish (fi)
Swedish (sv)
Other versions
FI980707A (en
FI980707A0 (en
Inventor
Kaisa Poutanen
Tiina Mattila-Sandholm
Paeivi Myllaerinen
Pirkko Forssell
Atte Von Wright
Minna Alander
Original Assignee
Valtion Teknillinen
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Valtion Teknillinen filed Critical Valtion Teknillinen
Publication of FI980707A0 publication Critical patent/FI980707A0/en
Priority to FI980707A priority Critical patent/FI104405B/en
Priority to CA002324363A priority patent/CA2324363A1/en
Priority to JP2000543122A priority patent/JP2002511404A/en
Priority to BR9909133-0A priority patent/BR9909133A/en
Priority to JP2000543121A priority patent/JP2002511403A/en
Priority to CA002324364A priority patent/CA2324364A1/en
Priority to EP99911844A priority patent/EP1063976A1/en
Priority to PCT/FI1999/000260 priority patent/WO1999052512A1/en
Priority to PCT/FI1999/000259 priority patent/WO1999052511A1/en
Priority to AU30386/99A priority patent/AU3038699A/en
Priority to AU30387/99A priority patent/AU3038799A/en
Priority to US09/647,157 priority patent/US6514526B1/en
Priority to EP99911845A priority patent/EP1063977A1/en
Publication of FI980707A publication Critical patent/FI980707A/en
Application granted granted Critical
Publication of FI104405B publication Critical patent/FI104405B/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1652—Polysaccharides, e.g. alginate, cellulose derivatives; Cyclodextrin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

104405104405

Mikro-organismeja sisältävät tärkkelyskapselit ja niiden valmistusmenetelmäStarch capsules containing microorganisms and process for their preparation

Esillä oleva keksintö liittyy tärkkelyskapseleihin. Etenkin keksintö koskee patentti-5 vaatimuksen 1 mukaista menetelmää tärkkelyskapselien valmistamiseksi.The present invention relates to starch capsules. In particular, the invention relates to a process for preparing starch capsules according to claim 5 of claim 5.

Keksintö koskee myös patenttivaatimuksen 26 mukaista tärkkelyskapselia.The invention also relates to a starch capsule according to claim 26.

Elintarvikkeiseen lisättyjä mikrobeja, jotka edesauttavat ihmisen terveyttä parantamalla 10 suoliston mikrobitasapainoa, kutsutaan probiooteiksi. Maitohappobakteerien, kuten esimerkiksi Lactobacillus, Streptococcus, Pediococcus, Lactococcus, Leuconostoc,The microbes that are added to food and which contribute to human health by improving the microbial balance of the gut are called probiotics. Lactic acid bacteria such as Lactobacillus, Streptococcus, Pediococcus, Lactococcus, Leuconostoc,

Corynebacterium, Enterococcus ja Bifidobacterium probioottinen vaikutus ihmisen ravitsemuksessa on tunnettua. Ihmisen suolistossa luonnostaan olevien mikrobien tehtävänä on estää haittamikrobien lisääntyminen ja erilaisten tulehdustilojen syntyminen. Probioottien : 15 on havaittu estävän myös suolistoperäisten syöpien syntyä. Ruoka-aineiden, joissa on probiootteja, on todettu lisäävän maitosokerin sietokykyä ihmisillä, jotka eivät voi - käyttää maitotuotteita. Erilaisten sairaustilojen tai esimerkiksi antibioottihoitojen yhteydessä suoliston hyödyllinen mikrobikanta voi tuhoutua. Nopea palautuminen voidaan saada aikaan nauttimalla tuotteita, joissa on maitohappobakteereita. Tällaisia tuotteita ,· 20 ovat esimerkiksi erilaiset hapatetut maitotuotteet tai maitohappobakteereiden avulla hapatetut kasvis- tai viljatuotteet. Kaupallisesti on saatavissa suun kautta nautittavia maitohappobakteerivalmisteita kapseleina, tabletteina tai jauheina. Probiootit kuitenkin tuhoutuvat herkästi happamissa olosuhteissa. Nautituista probiooteista suuri osa tuhoutuu jo ruoansulatuskanavan yläosassa alhaisen pH:n (pH 2) tai sappihappojen vaikutuksesta.The probiotic effect of Corynebacterium, Enterococcus and Bifidobacterium on human nutrition is known. The microbes naturally found in the human intestine serve to prevent the growth of harmful microbes and the development of various inflammatory conditions. Probiotics: 15 have also been found to prevent the development of intestinal cancers. Foods containing probiotics have been found to increase the tolerance of milk sugar in people who cannot - use dairy products. In the case of various medical conditions or antibiotic treatments, for example, the beneficial microbial strain of the intestine can be destroyed. Rapid recovery can be achieved by consuming products containing lactic acid bacteria. Examples of such products are, for example, various fermented milk products or vegetable or cereal products fermented with lactic acid bacteria. Oral lactic acid bacterial preparations are available commercially in the form of capsules, tablets or powders. However, probiotics are easily destroyed under acidic conditions. Many of the probiotics consumed are already destroyed in the upper gastrointestinal tract by low pH (pH 2) or bile acids.

• 25 Vaikka maitohappobakteerivalmisteet siis sinänsä sisältäisivät oikeanlaisia maitohappo- t bakteerikantoja, jotka kykenisivät tehokkaasti palauttamaan suoliston mikrobitasapainon, .Thus, even if the lactic acid bacterial preparations themselves contain the correct strains of lactic acid bacteria that are capable of effectively restoring the microbial balance of the gut,.

suurin osa maitohappobakteereista kuolee jo ennen kuin ne ovat kunnolla päässeet Ϊ suolistoon. Suoliston tasapainoisen toiminnan kannalta olisi tärkeätä, että maitohappo-bakteerit selviäisivät suoliston läpi paksuun suoleen asti. Maitohappobakteereja sisältäviä ·: 30 ruoka-aineita tai maitohappobakteerivalmisteita pitää siis nauttia pitkiä aikoja ja suuria 2 104405 määriä ennen kuin ne saavat aikaan halutun vaikutuksen.most lactic acid bacteria die before they have properly entered the Ϊ intestine. It is important for the smooth functioning of the intestine that the lactic acid bacteria survive through the intestine to the large intestine. · Lactic acid bacteria-containing ·: 30 foods or lactic acid bacterial products must be consumed for long periods and in large quantities of 2,104405 before they can produce the desired effect.

Maitohappobakteerien säilyvyys apteekin tai kaupan hyllyllä on myös ongelma. Mikrobit pitäisi suojata hapen vaikutukselta ja kosteuden ja lämpötilan vaihteluilta. Muuten maito-5 happobakteerivalmisteiden maitohappobakteeripitoisuus on jo ostohetkellä niin alhaisella tasolla, ettei tuotteen nauttimisella ole toivottua vaikutusta.Keeping lactic acid bacteria on the shelf of a pharmacy or store is also a problem. Microbes should be protected from the effects of oxygen and humidity and temperature variations. Otherwise, the lactic acid bacterial content of milk-5 acid bacterial preparations is already at such a low level at the time of purchase that the consumption of the product does not have the desired effect.

Probiootteja voitaisiin lisätä myös erilaisiin - lähinnä kuiviin - elintarvikkeisiin kuten viljatuotteet, mysli ja makeiset, mikäli probioottien säilyvyys tuotteessa ja kaupan 10 hyllyllä ei olisi ongelma.Probiotics could also be added to various - mainly dry - foods, such as cereal products, muesli and confectionery, provided the probability of the probiotics in the product and on the store 10 shelves was not a problem.

Eläviä mikrobeja on pyritty suojaamaan erilaisilla pakkaustavoilla, pakkaamalla mikrobit kapseleihin tai tabletteihin, joiden pinta sulaa kosteuden vaikutuksesta tai tietyssä pH:ssa. Muita tapoja on esimerkiksi pakkaskuivaus. Jokaista mikrobiryhmää varten pitää kuiten-15 kin etsiä sopivat olosuhteet ennen pakkaskuivausta, kuten kasvatusalusta, solujen kon-sentraatio, suoja-aine, pH, kosteus, jäähdytysnopeus, pääkuivaus-ja jälkikuivausaika, astioiden sulkemistapa jne. Pakkaskuivauksella suojattujen solujen säilyvyyttä lisää säilytys vakuumissa tai kaasuatmosfaärissä. Optimaaliset olosuhteet varastointikestävyy-den kannalta tarkoittavat suojausta valolta ja kosteuden vaihteluilta sekä alhaista varas-20 tointilämpötilaa. Varastointilämpötilan nosto lisää solujen inhiboitumista. Esimerkiksi pakkaskuivattuja startteriviljelmiä tulisi säilyttää -40 .. -20°C:een lämpötilassa. Pakkas-kuivattujen solujen rehydratointiolosuhteilla, kuten lämpötilalla ja liuoksen koostumuksella on todettu olevan ratkaiseva vaikutus viljelmien toimintakyvyn palautumiseen.Efforts have been made to protect living microbes by various packing methods, packing the microbes in capsules or tablets, the surface of which melts when exposed to moisture or at a certain pH. Other ways include freeze drying. However, suitable conditions for each microbial group must be sought prior to freeze-drying, such as culture medium, cell concentration, preservative, pH, humidity, cooling rate, main drying and post-drying time, container closure method, etc. . Optimal conditions for storage durability include protection against light and moisture variations and low storage temperature. Raising the storage temperature increases cellular inhibition. For example, freeze-dried starter cultures should be stored at -40 to -20 ° C. Freeze-dried cell rehydration conditions, such as temperature and solution composition, have been found to play a crucial role in the restoration of the cultures' viability.

: 25 Esillä olevan keksinnön tarkoituksena on saada aikaan menetelmä, jolla elävät mikrobit i voidaan suojata ympäristön vaikutuksilta siten, että olennainen osa mikrobeista säilyy elävinä.It is an object of the present invention to provide a method by which live microbes can be protected from environmental influences so that a substantial portion of the microbes remain alive.

Esillä olevan keksinnön tarkoituksena on saada aikaan tietynlainen suojapakkaus, joka 30 suojaa eläviä mikrobeita siten, että mikrobit säilyvät huoneenlämmössä pitkiäkin aikoja .104405 3 sellaisenaan tai esimerkiksi sekoitettuina elintarvikkeisiin. Suojapakkauksen tarkoituksena on lisäksi antaa suojaa mahalaukun happamuutta ja sappihappoja ym suoliston olosuhteita vastaan siten, että mikrobien elävyys suolistossa säilyy niin pitkälle kuin mikrobien vaikutuksen kannalta on tarkoituksenmukaista.The object of the present invention is to provide a kind of protective package which protects the living microbes so that the microbes remain at room temperature for long periods of time or, for example, mixed with food. In addition, the purpose of the protective packaging is to provide protection against gastric acidity and bile acids and intestinal conditions so that microbial viability in the intestine is maintained to the extent appropriate to the action of the microbes.

55

Esillä oleva keksintö perustuu siihen yllättävään havaintoon, että tärkkelyksestä voidaan muodostaa kapseleita, jotka antavat juuri halutunlaisen suojan eläville mikrobeille.The present invention is based on the surprising discovery that starch can be formed into capsules that give just the desired protection to living microbes.

Keksinnön erään toisen suoritusmuodon mukaisesti tärkkelyksestä muodostettavien 10 kapseleiden avulla voidaan suojata myös erilaisia polypeptidejä ja proteiineja, etenkin entsyymejä, joiden halutaan säilyttävän aktiivisuutensa varastoinnin ja säilytyksen aikana r tai suolistossa.According to another embodiment of the invention, starch capsules can also protect various polypeptides and proteins, in particular enzymes, which are desirable to retain their activity during storage and storage in the gut or intestine.

Tärkkelys on kasvien varastopolysakkaridi. Se koostuu kahdesta glukoosin polymeeristä, 15 lineaarisesta amyloosista ja runsaasti haaroittuneesta amylopektiinistä. Tärkkelysjyväset 1 voidaan hydrolysoida amylolyyttisillä entsyymeillä kuten α-amylaaseilla. Tällöin tärkke-lysjyväsen amorfiset osat hydrolysoituvat ja kiteiset alueet jäävät jäljelle. Eri alkuperää olevat tärkkelykset poikkeavat kooltaan ja koostumukseltaan.Starch is a plant storage polysaccharide. It is composed of two polymers of glucose, a linear amylose and a highly branched amylopectin. Starch granules 1 can be hydrolyzed by amylolytic enzymes such as α-amylases. The amorphous portions of the starch lysate are then hydrolyzed and crystalline regions remain. Starches of different origins differ in size and composition.

.· 20 EP-patenttijuIkaisussa 0 539 910 AI on kuvattu tärkkelysjyvästen käsittely amylaasilla. I· EP 0 539 910 A1 describes the treatment of starch granules with amylase. I

Pyrkimyksenä on ollut muuttaa tärkkelysjyvästen keittoviskositeettia. Amylaasilla Γ käsiteltyjä tärkkelysjyväsiä on ehdotettu käytettäväksi esimerkiksi nestemäisissä pika- ; ruoissa tai sekoitettuna käsittelemättömien tärkkelysjyvästen kanssa, jolloin saadaan ' viskositeetiltaan erilaisia tärkkelysjyvässeoksia. Julkaisun mukaan amylaasilla käsitellyt , 25 tärkkelysjyväset saattavat adsorboida hydrofobisia aineita kuten aromaattisia yhdisteitä.Efforts have been made to change the cooking viscosity of starch granules. Amylase-treated starch granules have been proposed for use, for example, in liquid instant; in food or mixed with untreated starch granules to form mixtures of starches with different viscosities. According to the publication, amylase-treated starch granules may adsorb hydrophobic substances such as aromatic compounds.

Glukoamylaasilla käsiteltyjen tärkkelysjyvästen on arveltu kykenevän adsorboimaan ~ öljyjä.Glucoamylase-treated starch granules are thought to be capable of adsorbing ~ oils.

Kansainvälisessä patenttijulkaisussa WO 89/04842 on kuvattu tärkkelysjyvästen käyttö 30 absorboituneiden toiminnallisten yhdisteiden kantajana. Tärkkelysjyväsiä on käsitelty a- ” 4 104405 amylaasilla tai glukoamylaasilla. Tärkkelysjyväsiä on ehdotettu käytettäväksi anti-perspiranttien apuaineena tai ruokien ja juomien täyteaineena. Nestemäisiä aineita on ehdotettu formuloitavaksi käsiteltyjen tärkkelysjyvästen avulla jauheiksi, tahnoiksi tai voiteiksi, jotka ovat helpommin pakattavia tai muuten käytännöllisempiä. Hydrolysoi-5 tujen tärkkelysjyvästen rakenteen vahvistamiseksi on ehdotettu tärkkelyksen käsittelyä kemiallisesti ristiinreagoivien aineiden kuten natriumtrimetafosfaatin kanssa. Jos tärkkelysjyväsiin absorboitava aine on luonteeltaan lipidi, tärkkelysmatriisi voidaan julkaisun mukaan käsitellä aineilla, jotka tekevät huokosten pinnan lipofiilisemmäksi. Tällaisia aineita ovat esimerkiksi synteettiset polymeerit kuten metyyliselluloosa.International Patent Publication No. WO 89/04842 describes the use of starch granules as a carrier for absorbed functional compounds. Starch grains have been treated with α- 4 104405 amylase or glucoamylase. Starch granules have been proposed for use as an anti-perspirant adjuvant or as a filler in food and beverages. Liquid substances have been proposed to be formulated with treated starch granules into powders, pastes or creams which are easier to pack or otherwise more practical. In order to strengthen the structure of hydrolyzed starch granules, it has been proposed to treat starch with chemically cross-reactive agents such as sodium trimetaphosphate. If the substance to be absorbed into the starch granules is lipid in nature, the starch matrix may be treated, according to the publication, with agents which render the surface of the pores more lipophilic. Such materials include, for example, synthetic polymers such as methylcellulose.

10 Julkaisussa on mainittu, että absorboitavat aineet voivat olla esimerkiksi salaattiöljyjä, aromeita, hyönteiskarkotteita, insektisidejä, herbisidejä, parfyymejä, kosteusaineita, saippuoita, vahoja, ihovoiteita ja -lotioneita, vitamiineja ja terapeuttisia lääkeaineita.It is mentioned in the publication that the substances to be absorbed may be, for example, salad oils, aromas, insect repellents, insecticides, herbicides, perfumes, moisturizers, soaps, waxes, lotions and lotions, vitamins and therapeutic drugs.

US-patenttijulkaisussa 4,551,177 on kuvattu kokoonpuristuva tärkkelys, jota voidaan 15 käyttää sitomisaineena tableteissa. Kylmään veteen liukenemattomat tärkkelysjyväset käsiteltiin hapolla, emäksellä tai α-amylaasilla, jolloin saatiin muuttuneita, heikentyneitä jyväsiä, joiden sitomiskyky oli hyvä, kun niitä puristettiin kokoon.U.S. Patent 4,551,177 describes a compressible starch which can be used as a binder in tablets. Cold water-insoluble starch granules were treated with acid, base or α-amylase to give altered, weakened grains with good binding capacity when compressed.

: US-patenttijulkaisussa 5,670,490 on kuvattu tärkkelysjyväsistä sitovien aineiden avulla 20 muodostettuja huokoisia aggregaatteja, joiden sisään jäävää tyhjää tilaa on käytetty hyväksi erilaisten toiminnallisten aineiden kantajana. Aineet vapautuvat aggregaatista mekaanisen paineen/hajottamisen, sitovien tai muiden aineiden hajoamisen tai liuotuksen tai diffuusion avulla huokoiselta pinnalta. Pyöreiden aggregaattien halkaisija oli 15 -150 μπι. Sitova aine oli tyypillisesti polymeeri. Patentissa on ehdotettu aggregaattien käyttä-25 mistä mm. suun kautta annosteltavien farmaseuttisten yhdisteiden formuloinnissa siten, että formulaatio suojaisi aktiivisia aineita mahalaukun happamilta ja sulattavilta olosuh-I: teiltä ja siten, että aktiiviset aineet vapautuisivat vasta ohutsuolessa. Aggregaatit valmis- !! tettiin suspendoimalla tärkkelysjyväset sopivaan sitovia aineita sisältävään liuokseen ja il spray- kuivaamalla suspensio. Julkaisun mukaan aggregaatit voitaisiin päällystää poly- „ 30 meerillä sen jälkeen kun toiminnalliset yhdisteet olisi viety aggregaattien sisään. Sitovat tl ia ia 5 104405 aineet voisivat olla biohajoavia polymeerejä kuten polysakkarideja (levistä tai kasveista peräisin olevia kumeja, pektiineitä, agaria, alginaattia, gelatiinia, dekstriiniä, tärkkelys-johdannaisia) ja selluloosapitoisia aineita kuten karboksimetyyliselluloosa, hydroksi-metyyliselluloosa, hydroksipropyyliselluloosa jne. proteiineja, erityisesti sellaisia, joita ei 5 ole luonnostaan tärkkelysjyväsissä, ja polyestereitä. Polymeerit voisivat olla myös ei-biohajoavia, synteettisiä tai semisynteettisiä kuten polyvinyylialkoholi poly-N-vinyyli-2-pyrrolidoni tai akryyli- tai metakryylihapon polymeerejä tai kopolymeereja tai näiden amidijohdannaisia kuten polyakrylamidi. Päällystysaineet voisivat olla samoja tai eri polymeerejä kuin sitovat aineet. Toiminnallisia aineita, jotka voitaisiin absorboida 10 aggregaattien sisään olisivat samat aineet, jotka on lueteltu hakemuksessa WO 89/04842.U.S. Patent No. 5,670,490 discloses porous aggregates formed from starch granules by means of binding agents in which the residual voids content is utilized as a carrier for various functional agents. The substances are released from the aggregate by mechanical pressure / decomposition, decomposition or dissolution of binding or other substances from the porous surface. The diameter of the circular aggregates was 15-150 μπι. The binding agent was typically a polymer. The patent proposes the use of aggregates, e.g. in the formulation of oral pharmaceutical compositions such that the formulation protects the active ingredients from acidic and digestible conditions in the stomach and that the active ingredients are released only in the small intestine. Aggregate ready- !! was suspended by suspending the starch granules in a suitable binding agent solution and spray-drying the suspension. According to the publication, the aggregates could be coated with a polymer after the functional compounds had been introduced into the aggregates. Binding agents and agents could be biodegradable polymers such as polysaccharides (algae or vegetable gums, pectins, agar, alginate, gelatin, dextrin, starch derivatives) and cellulosic agents such as carboxymethyl cellulose, hydroxy, cellulose, especially those which are not naturally present in starch granules, and polyesters. The polymers could also be non-biodegradable, synthetic or semisynthetic, such as polyvinyl alcohol poly-N-vinyl-2-pyrrolidone or polymers or copolymers of acrylic or methacrylic acid or amide derivatives thereof such as polyacrylamide. The coating agents could be the same or different polymers as the binding agents. Functional agents that could be absorbed within the aggregates would be the same agents listed in WO 89/04842.

Patenttijulkaisussa WO 89/04803 ehdotetun menetelmän epäkohta on se, että hydrolysoidut tärkkelysjyväset voivat kyllä ottaa erilaisia aineita huokosrakenteittensa sisään, mutta mikään ei estä aineita vapautumasta ulos tärkkelysjyväsistä, eivätkä aineet toisaalta 15 ole suojassa ympäristön vaikutukselta (valo, pH, kosteus, happi, lämpötila). US-patentti-julkaisussa 5,670,490 tärkkelysjyväset sidotaan toisiinsa siten, että ne muodostavat aggregaatin, jonka sisään jää kotelomainen tila, jonka sisään on ehdotettu suljettavaksi 1 erilaisia aineita. Aggregaattien muodostamisessa käytetään erilaisia sitovia aineita, esimerkiksi erilaisia polymeerejä, joista voi olla haittaa elimistöön vietynä tai valmis-20 tusprosessin aikana.The disadvantage of the method proposed in WO 89/04803 is that hydrolyzed starch granules may absorb various substances into their pore structures, but nothing prevents the substances from being released from the starch granules and, on the other hand, the substances are not protected from environmental influences (light, pH, humidity). . In U.S. Patent No. 5,670,490, the starch granules are bonded together to form an aggregate which retains a enclosed space in which 1 different substances have been proposed to be enclosed. Aggregates are formed using a variety of binding agents, for example various polymers, which may be harmful when introduced into the body or during the manufacturing process.

Esillä olevan keksinnön tarkoituksena on poistaa tunnettuun tekniikkaan liittyvät epäkohdat ja saada aikaan aivan uudenlainen menetelmä, jossa käytetään luonnon polymeerejä. Menetelmän avulla erilaisia aineita voidaan suojaata ympäristön vaikutukselta . : 25 säilytyksen aikana tai ihmisten tai eläinten suolistossa.It is an object of the present invention to overcome the drawbacks of the prior art and to provide a completely novel process using natural polymers. The method can protect various substances from environmental influences. : 25 during storage or in the gut of humans or animals.

Keksinnön mukaisessa menetelmässä tärkkelysjyväset hydrolysoidaan siten, että niiden rakenne muuttuu pinnalta reiälliseksi ja sisältä huokoiseksi, jolloin jyväsen sisätila muodostaa onton kotelomaisen tilan. Kotelomainen tila voidaan täyttää halutuilla aineilla 30 ja jyväsen pinta peittää haluttaessa ohuella kerroksella kalvonmuodostukseen kykenevää 6 104405 biopolymeeriä kuten selluloosaa, pektiiniä, proteiinia, edullisesti tärkkelystä. Tärkke-lyspinta voidaan muodostaa kuumaan veteen liuotetusta tärkkelyksestä tai tärkkelyksen komponentista, amyloosista, tai sulkemalla tärkkelysjyväsen pinnassa olevat huokoset sopivan kokoisilla, pienemmillä tärkkelysjyväsillä.In the process of the invention, the starch granules are hydrolyzed so that their structure becomes porous on the surface and porous on the inside, whereby the interior of the granule forms a hollow enclosure. The cavity may be filled with the desired substances 30 and the surface of the granule, if desired, covered with a thin film-forming 6,104,405 biopolymers such as cellulose, pectin, protein, preferably starch. The starch surface may be formed from starch dissolved in hot water or starch component, amylose, or by sealing the pores on the surface of the starch grain with smaller sized starch grains.

55

Keksintö perustuu siihen havaintoon, että tärkkelys hydrolysoituu amylolyyttisilla entsyymeillä kuten a-amylaaseilla, β-amylaaseilla tai glukoamylaaseilla. Jyväsen amorfiset osat hydrolysoituvat ja kiteiset alueet jäävät jäljelle. Nämä kiteiset osat ovat melko stabiileja myöskin ihmisen ruoansulatuskanavassa. Hydrolysoinnin jälkeen tärkke-10 lysjyvänen täytetään halutuilla aineilla kuten elävillä mikrobeilla tai entsyymeillä tai näiden seoksella. Mikrobiviljelmissä voi luonnostaankin olla tiettyjä mikrobien tuottamia entsyymejä. Mikrobit voivat myös tuottaa tärkkelysjyväsen hydrolysoinnissa tarvittavat hydrolyyttiset entsyymit, kun niiden annetaan kasvaa sopivissa olosuhteissa tärkkelys-jyvästen sisään.The invention is based on the finding that starch is hydrolyzed by amylolytic enzymes such as α-amylases, β-amylases or glucoamylases. The amorphous portions of the grain are hydrolyzed and crystalline regions remain. These crystalline components are also quite stable in the human digestive tract. After hydrolysis, starch 10 lysate is filled with desired substances such as living microbes or enzymes or a mixture thereof. Microbial cultures may, of course, contain certain enzymes produced by microbes. Microbes can also produce the hydrolytic enzymes required for starch granule hydrolysis when allowed to grow under appropriate conditions inside the starch granules.

1515

Haluttaessa tärkkelys voidaan päällystää luonnon biopolymeereillä, kuten selluloosalla, pektiineillä, proteiineilla, edullisesti tärkkelyksellä. Tärkkelys, erityisesti toinen sen komponenteista, lineaarinen amyloosi, kykenee muodostamaan kalvoja. Tärkkelystä voidaan modifioida fysikaalisin keinoin (esimerkiksi lämpötilan avulla) siten, että se : .· 20 muuttuu stabiilimmaksi ja resitentimmäksi mahan ja ohutsuolen nesteille. Erilaisia ] tekniikoita päällystää tärkkelysjyväsiä ovat esimerkiksi päällystäminen sumuttamalla j tärkkelys/amyloosiliuoksella tai sekoittamalla jyväset tärkkelys/amyloosiliuokseen ja antamalla tärkkelyksen kiteytyä jyväsen pintaan. Tärkkelys/amyloosiliuos voidaan saostaa jyvästen pintaan myös etanolilla. Keksinnön erään sovellusmuodon mukaan tärkkelys-25 jyväsen pinnalla olevat reiät voidaan sulkea myös sopivan pienikokoisilla tärkkelys-jyväsillä. Tärkkelysjyvästen päällystämisessä voidaan tärkkelyksen/amyloosin sijasta käyttää muitakin biopolymeerejä, mikäli niiden kalvonmuodostusominaisuudet ja liukenemisominaisuudet ovat yhtä hyvät kuin tärkkelyksen ja amyloosin.If desired, the starch may be coated with natural biopolymers such as cellulose, pectins, proteins, preferably starch. Starch, in particular one of its components, linear amylose, is capable of forming films. The starch may be modified by physical means (for example by means of temperature) so that it:. · 20 becomes more stable and more resistant against the gastric and intestinal fluids. Various techniques for coating starch granules include, for example, coating by spraying with starch / amylose solution or mixing the granules with starch / amylose solution and allowing the starch to crystallize on the surface of the granule. The starch / amylose solution may also be precipitated on the grain surface with ethanol. According to one embodiment of the invention, the holes on the surface of the starch-25 grain can also be sealed with suitably small starch-grain. Other biopolymers may be used in the coating of starch granules other than starch / amylose, provided that their film-forming and dissolving properties are as good as those of starch and amylose.

m 30 Tärkkelysjyväset voidaan täyttää elävillä mikrobeilla kuten maitohappobakteereilla tai 7 104405 elintarviketeollisuuden käyttämillä starttereilla tai polypeptideillä tai proteiineilla, kuten entsyymeillä.m 30 Starch granules can be filled with live microbes such as lactic acid bacteria or 7,104,040 starters used by the food industry or with polypeptides or proteins such as enzymes.

Tärkkelyskapselit on valmistettu edullisesti natiivitärkkelyksestä. Eri alkuperää olevat 5 tärkkelykset poikkeavat kooltaan ja koostumukseltaan. Näitä eroja voidaan käyttää hyväksi erilaisissa sovelluksissa.The starch capsules are preferably made from native starch. The 5 starches of different origins differ in size and composition. These differences can be utilized in a variety of applications.

Esillä olevan menetelmän mukaan tärkkelyskapseli valmistetaan seuraavasti: - valitaan käyttötarkoituksen mukaan sopivaa kokoluokkaa edustavat tärkkelysjyväset ja 10 - täytetään jyväset mikro-organismeilla j a/tai polypeptideillä tai proteiineilla, kuten entsyymeillä.According to the present method, a starch capsule is prepared by: - selecting starch granules of a suitable size for use, and - filling the granules with microorganisms and / or polypeptides or proteins such as enzymes.

Tärkkelysjyvästen huokoisuutta parannetaan hydrolysoimalla tärkkelysjyväset kemiallisesti tai entsymaattisesti.The porosity of the starch granules is improved by hydrolyzing the starch granules chemically or enzymatically.

1515

Haluttaessa jyväset päällystetään biopolymeerillä, edullisesti tärkkelyksellä.If desired, the granules are coated with a biopolymer, preferably starch.

Täsmällisemmin sanottuna keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista se, mikä on esitetty patenttivaatimuksen 1 tunnusmerkkiosassa.More specifically, the method according to the invention is characterized in what is set forth in the characterizing part of claim 1.

20 : • = : Keksinnön kohteena ovat myös tärkkelyskapselit, jotka koostuvat tärkkelysjyväsestä, joka ” on rakenteeltaan huokoinen ja täytetty halutulla aineella, edullisesti mikrobeilla ja/ tai polypeptideillä, tai proteiineilla kuten entsyymeillä. Haluttaessa tärkkelyskapselit on päällystetty biopolymeerillä, edullisesti tärkkelyksellä.The invention also relates to starch capsules consisting of a starch granule which is "porous in structure and filled with the desired substance, preferably microbes and / or polypeptides, or proteins such as enzymes. If desired, the starch capsules are coated with a biopolymer, preferably starch.

25 ‘ Täsmällisemmin sanottuna keksinnön kohteena on patenttivaatimuksen 26 tunnusmerkkiosan mukainen tärkkelyskapseli.More particularly, the invention relates to a starch capsule according to the characterizing part of claim 26.

Keksinnön avulla saavutetaan huomattavia etuja. Niinpä keksinnön mukaiset tärkkelys-30 jyväset säilyvät hyvin huoneenlämmössä useita kuukausia.The invention provides considerable advantages. Thus, the starch-30 granules of the invention are well preserved at room temperature for several months.

Ψ 9 m 8 104405Ψ 9 m 8 104405

Keksinnön mukaisiin tärkkelyskapseleihin säilöttyjä maitohappobakteereja tai elintarviketeollisuuden käyttämiä starttereita, probiootteja sisältäviä elintarvikkeita tai entsyymejä voidaan säilyttää huoneenlämmössä pitkähköjä aikoja. Eläviä mikrobeita sisältävien valmisteiden kuten maitohappobakteerivalmisteiden tai probiootteja sisältävien 5 elintarvikkeiden laatu paranee, kun mikrobipitoisuus tuotteessa saadaan jo alunperin korkealle tasolle. Entsyymien aktiivisuus ja teho paranee, kun entsyymi ei ole alttiina ympäristön kosteusvaihteluiden, lämpötilan, hapen tai happamuuden vaikutukselle.Lactic acid bacteria preserved in starch capsules according to the invention or foods or enzymes containing starters, probiotics used by the food industry can be stored at room temperature for extended periods of time. Preparations containing live microbes, such as lactic acid bacterial preparations or foods containing probiotics, will improve when the microbial content of the product is initially high. Enzyme activity and potency are improved when the enzyme is not exposed to environmental humidity, temperature, oxygen or acidity.

Keksinnön mukaisiin tärkkelyskapseleihin säilöttyjen eläviä mikrobeita sisältävien 10 valmisteiden teho paranee, koska mikrobit eivät vapaudu tärkkelyskapseleista liian aikaisin suolistossa. Samoin entsyymien vaikutus paranee ja vaikutusaika pitenee, kun entsyymipreparaatin aktiivisuus ei pääse laskemaan ennen käyttökohteeseen pääsyä.The efficacy of preparations containing live microbes preserved in the starch capsules of the invention is improved because the microbes are not released from the starch capsules too early in the gut. Likewise, the effect of enzymes is improved and the duration of action is prolonged when the activity of the enzyme preparation cannot be reduced before reaching the site of use.

Esillä olevaa keksintöä ryhdytään seuraavassa lähemmin tarkastelemaan yksityiskohtaisen 15 selityksen ja sovellusesimerkkien avulla.The present invention will now be further explored by means of the detailed description and application examples.

Kuvio 1. Eroteltujen tärkkelysjyvästen kokojakauma Coulterilla.Figure 1. Size distribution of separated starch grains on Coulter.

Kuvio 2. Tärkkelysjyvänen, joka on hydrolysoitu a-amylaasilla.Figure 2. Starch grain hydrolyzed by α-amylase.

Kuvio 3. Amyloosilla päällystetty tärkkelysjyvänen.Figure 3. Amylose coated starch grain.

20 Kuvio 4. Maitohappobakteereilla täytetty tärkkelysjyvänen (leikepaksuus 4pm)20 Figure 4. Starch grain filled with lactic acid bacteria (slice thickness 4pm)

Kuvio 5. Maitohappobakteerien kasvukäyrä.Figure 5. Growth curve of lactic acid bacteria.

Tärkkelyskapseleiden valmistuksessa käytetty tärkkelys on edullisimmin natiivia tärkkelystä. Se voi olla peräisin ohrasta, perunasta, vehnästä, kaurasta, herneestä, j '·] 25 maissista, tapiokasta, sagos ta, riisistä tai sentapaisesta mukula- tai viljakasvista, j edullisimmin se on peräisin perunasta, ohrasta, vehnästä tai maissista.The starch used in the manufacture of the starch capsules is most preferably native starch. It may be derived from barley, potato, wheat, oats, peas, maize, tapioca, sago, rice or similar tuber or cereal crops, most preferably from potato, barley, wheat or corn.

t |t |

Esillä olevassa keksinnössä käytetään tärkkelysjyväsiä, jotka ovat kooltaan 10 -100 pm , edullisesti 30-100 pm suuruisia, edullisimmin 50-100 pm suuruisia. Koska joidenkin 30 kasvien tärkkelysjyväset ovat luonnostaan sopivan kokoisia, jyvästen fraktiointia ei tarvita.The present invention employs starch granules of 10 to 100 µm, preferably 30 to 100 µm, most preferably 50 to 100 µm. Because starch granules of some 30 plants are naturally sized, fractionation of the granules is not required.

9 1044059 104405

Muussa tapauksessa tärkkelysjyväset fraktioidaan eri kokoluokkia edustaviin fraktioihin ja valitaan käyttötarkoituksen kannalta sopiva tärkkelysjyväsfraktio.Otherwise, the starch granules are fractionated into fractions of different size ranges and a starch grain fraction suitable for the application is selected.

Jyväset hydrolysoidaan kemiallisesti tai entsymaattisesti. Entsyymeinä käytetään a-5 amylaaseja tai glukoamylaaseja, jotka ovat tyypillisesti peräisin Rhizopus, Aspergillus tai Bacillus-suvuista. Esimerkkejä sopivista α-amylaaseista ja β-amylaaseista ovat esimerkiksi MEGAZYME® (Australia).The granules are hydrolyzed chemically or enzymatically. As enzymes, α-5 amylases or glucoamylases, typically of the genus Rhizopus, Aspergillus or Bacillus, are used. Examples of suitable α-amylases and β-amylases are, for example, MEGAZYME® (Australia).

Hydrolysointia varten tärkkelysjyväset suspendoidaan veteen noin 5-15 % liuokseksi.For hydrolysis, the starch granules are suspended in water to a solution of about 5-15%.

10 Amylaasiliuosta lisätään 1000-10 000 U/g jyväsiä riippuen entsyymituotteesta.1000 to 10,000 U / g of granules are added to the amylase solution depending on the enzyme product.

Hydrolysointi tehdään lämpötilassa, joka sopii entsyymin toiminnalle, mutta joka ei muuta tärkkelyksen rakennetta, esimerkiksi 30-40 °C:ssa tai vaihtoehtoisesti korkean paineen alaisena, jolloin lämpötilan ei tarvitse olla näin korkea. Hydrolyysin tavoitteena on saada valituista tärkkelysjyväsistä 3-60%, edullisesti 30 - 50 %, edullisimmin 40% kuiva-aineesta 15 hydrolysoitua.The hydrolysis is carried out at a temperature suitable for the enzyme's function but which does not alter the structure of the starch, for example at 30-40 ° C or alternatively under high pressure, whereby the temperature need not be so high. The aim of hydrolysis is to obtain 3-60%, preferably 30-50%, most preferably 40% of the dry matter of the selected starch granules.

Tärkkelysjyväsiä sekoitetaan sopiva määrä, esimerkiksi 1 paino-osa 10 -100 paino-osaanThe starch granules are blended in a suitable amount, for example 1 part by weight to 10-100 parts by weight

elävien bakteerien liuosta (PFU 10* -109) tai 1 paino-osa 10-100 paino-osaan sopivan Tsolution of live bacteria (PFU 10 * -109) or 1 part by weight of 10-100 parts by weight of suitable T

konsentraatioista entsyymiliuosta tai muuta ainetta, jolla tärkkelysjyväset halutaan täyttää.concentrations of enzyme solution or other material to fill the starch granules.

2020

Keksinnön yhden edullisen suoritusmuodon mukaisesti hydrolysoidut tärkkelysjyväset kylmäkuivataan, täytetään halutulla aineella ja jälleen kylmäkuivataan.According to a preferred embodiment of the invention, the hydrolyzed starch granules are freeze-dried, filled with the desired material and again freeze-dried.

Keksinnön toisen edullisen sovellusmuodon mukaisesti hydrolysoidut tärkkelysjyväset • · *— 25 täytetään halutulla aineella ja kylmäkuivataan ne samanaikaisesti tai täytön jälkeen.According to another preferred embodiment of the invention, the hydrolyzed starch granules • · * - 25 are filled with the desired substance and freeze-dried at the same time or after filling.

Keksinnön kolmannen edullisen sovellusmuodon mukaisesti tärkkelysjyväset sekoitetaan amylolyyttisiä entsyymejä sisältävään mikrobiliuokseen, edullisesti maitohappobakteerien ^ kasvuliuokseen, sopivissa olosuhteissa siten, että mikrobit lisääntyvät ja kasvavat 30 tärkkelysjyvästen pintaan ja onttoon sisätilaan käyttäen tärkkelysjyväsistä vapautuvia _ 10 104405 hydrolyysituotteita ravintonaan tuottaen samalla omia aineenvaihduntatuotteitaan kuten maito- ja etikkahappoa, jotka laskevat pH:n mikrobien kasvun kannalta edulliselle tasolle, polysakkarideja, jotka stabiloivat lisää tärkkelysjyväsen rakennetta ja entsyymejä, jotka hydrolysoivat tärkkelysjyväsiä. Liuokseen on edullista lisätä myös maitohappo/etikka-5 happoliuosta ja säätää liuoksen pH mikrobien kasvulle edulliseksi.According to a third preferred embodiment of the invention, the starch granules are admixed with a microbial solution containing amylolytic enzymes, preferably a lactic acid bacterial growth medium, under appropriate conditions such that which lower the pH to a level favorable to microbial growth, polysaccharides which further stabilize the structure of the starch granule and enzymes that hydrolyze the starch granules. It is also advantageous to add the lactic acid / acetic acid solution and adjust the pH of the solution to microbial growth.

Voidaan ajatella myös sovellusta, jossa tärkkelysjyvästen ja mikrobien seokseen ei lisätä lainkaan hydrolysoivia entsyymejä tai kemikaaleja, vaan annetaan mikrobien tuottaa hydrolyysissä tarvittavat entsyymit.It is also contemplated an application in which no hydrolyzing enzymes or chemicals are added to the mixture of starch granules and microbes, but the microbes are allowed to produce the enzymes required for hydrolysis.

1010

Sekoitettaessa tärkkelysjyväset mikrobiliuokseen lämpötila voidaan valita siten, että se on edullinen mikrobien kasvulle, alle 40 °C , edullisesti 30 - 37 °C ja sekoitusaika voi olla niin pitkä, että mikrobit ehtivät lisääntyä ja kasvaa tärkkelysjyvästen huokoiseen ja onttoon sisätilaan.When mixing the starch granules in the microbial solution, the temperature may be selected to be favorable for microbial growth, below 40 ° C, preferably 30 to 37 ° C, and the mixing time may be long enough for the microbes to multiply and grow into the porous and hollow interior of the starch granules.

1515

Hydrolysoinnin ja täytön jälkeen tärkkelysjyväset voidaan erilaisia sovelluksia varten , erottaa käsittelyliuoksesta ja kylmäkuivata, jäähdyttää pakastimessa tai nestetypessä.After hydrolysis and filling, the starch granules can be separated for various applications, separated from the treatment solution and freeze-dried, cooled in a freezer or liquid nitrogen.

Tuloksena on helposti käsiteltävä jauhe, jossa tärkkelysjyvästen muodostamat kapselit ovat oleellisesti erillisinä, eivätkä muodosta aggregaatteja.The result is an easy-to-handle powder in which the starch granule capsules are substantially separate and do not form aggregates.

!· 20 Täytetyt tärkkelysjyväset voidaan haluttaessa päällystää siten, etteivät tärkkelysjyväsen sisään suljetut aineet pääse vapautumaan ennenaikaisesti tai ettei ympäristö vaikuta niihin I haitallisesti. Tämä on edullista varsinkin kun tärkkelysjyväset on täytetty mikrobeilla.! · 20 If desired, the filled starch granules may be coated so that substances contained in the starch granule cannot be prematurely released or adversely affected by the environment. This is advantageous especially when the starch granules are filled with microbes.

i ‘ 9 25 Päällystys voidaan tehdä jollain kalvonmuodostukseen kykenevällä biopolymeerillä, edullisesti tärkkelyksellä ja edullisimmin amyloosilla. Tärkkelyksestä tai amyloosista | ’ voidaan valmistaa 0,1 - 70 % tai 0,1-2 % liuos tärkkelyksen suhteen. Tärkkelys- tai amyloosiliuos voidaan sumuttaa jyvästen pintaan siten että tärkkelys- tai amyloosipitoisuus ' on 1 -6% jyvästen painosta ja antaa jäähtyä siten, että tärkkelys/amyloosi muodostaa geelin ä 30 jyvästen pintaan. Tällöin on edullista käyttää 0,1 - 2 % tärkkelysliuosta. Vaihtoehtoisesti 104405 π jyväset voidaan sekoittaa tärkkelys- tai amyloosiliuoksen kanssa ja antaa kiteytyä viileässä (4-10 °C). Tällöin on edullista käyttää 0,1 - 70 % tärkkelysliuosta. Tärkkelys- tai amyloosi-liuos voidaan myös saostaa jyvästen pintaan etanolilla. Erään vaihtoehdon mukaan tärkkelysjyväset voidaan päällystää itseään pienemmillä tärkkelysjyväsillä, jotka ovat 5 kooltaan esimerkiksi 1 -10 pm suuruisia. ! Tärkkelyskalvopäällystys voidaan toteuttaa vesipohjaisena, mikä on selkeä etu orgaanisia liuottimia käyttävään kalvopäällystykseen nähden (työturvallisuus, Iiuotinjäämät, ympäristönäkökohdat).The coating may be carried out with a biopolymer capable of film formation, preferably starch, and most preferably amylose. Of starch or amylose A 0.1 to 70% or 0.1 to 2% starch solution can be prepared. The starch or amylose solution can be sprayed onto the grain surface such that the starch or amylose content is 1 to 6% by weight of the grain and allowed to cool so that the starch / amylose forms a gel on the grain surface. In this case, it is preferable to use a 0.1 to 2% starch solution. Alternatively, 104405 π grains may be mixed with a starch or amylose solution and allowed to crystallize in a cool (4-10 ° C). In this case, it is preferable to use a 0.1 to 70% starch solution. The starch or amylose solution can also be precipitated on the grain surface with ethanol. According to one alternative, the starch granules may be coated with smaller starch granules themselves, e.g., 5 to 10 µm in size. ! The starch film coating can be carried out in water-based form, which has a clear advantage over organic solvent-based film coating (occupational safety, solvent residues, environmental aspects).

1010

Voidaan myös ajatella, että kapselin päällystyksessä käytettävää biopolymeeriä, edullisesti ' tärkkelystä tai amyloosia kombinoidaan erilaisten farmasiassa käytettävien kalvopäällystys-materiaalien kanssa. Tällä tavoin tärkkelyskalvojen hajoamisnopeutta ruoansulatuskanavassa voitaisiin säädellä. Päällystysmateriaali on edullisesti 50- 100 %, edullisimmin 15 90 - 100 % biopolymeerejä, kuten tärkkelystä/amyloosia, loppuosa 0 - 50 %, edullisesti 0 - = 10 % farmasiassa käytettäviä kalvomateriaaleja.It is also contemplated that the biopolymer for coating the capsule, preferably starch or amylose, will be combined with various film coating materials for pharmaceutical use. In this way, the rate of degradation of the starch films in the gastrointestinal tract could be controlled. The coating material is preferably 50 to 100%, most preferably 90 to 100% biopolymers such as starch / amylose, the remainder 0 to 50%, preferably 0 to 10%, of pharmaceutical film materials.

Keksinnön mukaisesti jyväset voidaan täyttää mikro-organismeilla kuten erilaisilla bakteereilla, hiivoilla tai homeilla.According to the invention, the granules can be filled with microorganisms such as various bacteria, yeasts or molds.

'· - 20'· - 20

Bakteerit voivat olla maitohappobakteereita ja kuulua sukuihin Lactobacillus,The bacteria may be lactic acid bacteria and belong to the genus Lactobacillus,

Streptococcus, Pediococcus, Lactococcus, Leuconostoc, Corynebacterium, Enterococcus ~~ tai kuulua Bifidobacterium-sukuun tai ne voivat olla hiivoja ja kuulua sukuun -Streptococcus, Pediococcus, Lactococcus, Leuconostoc, Corynebacterium, Enterococcus, or may belong to the genus Bifidobacterium or may be yeasts and may belong to the genus -

Saccharomyces. .Saccharomyces. .

' · 25'· 25

Keksinnön mukaisesti jyväset voidaan täyttää erilaisilla polypeptideilla tai proteiineilla - kuten entsyymeillä. Entsyymit ovat esimerkiksi leivontaentsyymejä, joiden toimiminen liian ” aikaisin halutaan estää.According to the invention, the granules can be filled with various polypeptides or proteins - such as enzymes. Enzymes, for example, are baking enzymes that we want to prevent from working too early.

30 Seuraavat ei-rajoittavat esimerkit havainnollistavat keksintöä.The following non-limiting examples illustrate the invention.

12 10440512 104405

Esimerkki 1 1. Tärkkelysjyvästen erottelu 5 Perunatärkkelys suspendoidaan veteen (5%:nen liuos). Kaadetaan liuos lasiputkeen (halk. 4 cm ja korkeus 15 cm). Sekoitetaan ja annetaan jyvästen sedimentoitua 8 min ajan. Isot jyväset (30 - lOOpm) laskeutuvat putken pohjaan. Sakan päältä kaadetaan liuos (pienet jyväset) pois toiseen astiaan. Sedimentointi toistetaan 3 kertaa. Sakka (isot jyväset) pakkaskuivataan. Sedimentti sentrifugoidaanjapakkaskuivataan. Erotellun tärkkelysjakeen 10 kokojakauma (määritetty Coulterilla) on esitetty kuviossa 1.Example 1 1. Separation of starch granules 5 Potato starch is suspended in water (5% solution). Pour the solution into a glass tube (4 cm in diameter and 15 cm in height). Mix and allow the granules to sediment for 8 min. Large grains (30-100pm) descend to the bottom of the tube. Pour the solution (small granules) off the precipitate into another container. Sedimentation is repeated 3 times. The precipitate (large grains) is freeze-dried. The sediment is centrifuged and freeze-dried. The size distribution (determined by Coulter) of the separated starch fraction 10 is shown in Figure 1.

2. Tärkkelyksen hydrolyysi a-amylaasilla Tärkkelysjyväset suspendoitiin veteen (10 % liuos). Lisättiin oc-amylaasiliuosta 15 (MEGAZYME®, Australia) 1000 - 10 000 U/g jyväsiä. Hydrolysoitiin yön yli 30°C:n lämpötilassa magneettisekoittimella varustetussa vesihauteessa. Sentrifugoitiin liuos ja pakkaskuivattiin sakka. Perunatärkkelyksestä hydrolysoitui n. 3 % ja erotelluista isoista perunatärkkelysjyväsistä hydrolysoitui n. 40 % kuiva-aineesta. Kuviossa 2 on esitetty ; hydrolysoitu tärkkelysjyvänen.2. Hydrolysis of starch by α-amylase The starch granules were suspended in water (10% solution). Α-amylase solution 15 (MEGAZYME®, Australia) was added at 1000-10,000 U / g of granules. Hydrolyzed overnight at 30 ° C in a water bath equipped with a magnetic stirrer. The solution was centrifuged and the precipitate was freeze-dried. Approximately 3% of the potato starch was hydrolyzed and about 40% of the separated large potato starch granules were dry. Figure 2 shows; hydrolysed starch granules.

1 20 ! 3. Hydrolysoitujen tärkkelysjyvästen täyttö maitohappobakteereilla Tärkkelysjyväset (10 g) ja 100 ml MRS-liuosta (deMan-Rogose-Sharpe-elatusaine, Oxoid, Unipath Ltd, Basingstoke, Hampshire, England), jossa oli kasvatettu Lactobacillus / 25 rhamnosus (ATCC 53109) (10® -109 CFU/ml) tai Lactococcus lactis (VTT E-90414) (108 - 109 CFU/ml) maitohappobakteereita yhdistettiin. Seoksia pidettiin magneettisekoittajalla vesihauteessa (30°C) yön yli. Liuos sentrifugoitiin pois. Pestiin sakka vedellä ja pesuvesi sentrifugoitiin pois. Täytetyt tärkkelysjyväset pakkaskuivattiin. Maitohappobakteereilla täytetty tärkkelysjyvänen on esitetty kuviossa 4.1 20! 3. Filling of hydrolyzed starch granules with lactic acid bacteria Starch granules (10 g) and 100 ml of MRS solution (deMan-Rogose-Sharpe medium, Oxoid, Unipath Ltd, Basingstoke, Hampshire, England) with Lactobacillus / 25 rhamnosus (ATCC) 10® -109 CFU / ml) or Lactococcus lactis (VTT E-90414) (108-109 CFU / ml) lactic acid bacteria were combined. The mixtures were kept on a magnetic stirrer in a water bath (30 ° C) overnight. The solution was centrifuged off. The precipitate was washed with water and the wash water was centrifuged off. The filled starch granules were freeze-dried. The starch grain filled with lactic acid bacteria is shown in Figure 4.

.. 30 11 13 104405 4. Bakteerien elävyys 5 Bakteerien elävyys oli tuoreena huoneenlämpötilassa (20°C) 3x107 CFU/g ja 2 kk:n ! varastoinnin (eksikaattorissa 20°C:n lämpötilassa) jälkeen 3x105 CFU/g. Pakastimessa i (-18°C) 2 kk:n ajan säilytetyn näytteen elävyys oli 2xl07 CFU/g... 30 11 13 104405 4. Bacterial Viability 5 Bacterial Viability was fresh at room temperature (20 ° C) 3x107 CFU / g for 2 months! after storage (in a desiccator at 20 ° C) 3x10 5 CFU / g. The viability of the sample stored in freezer i (-18 ° C) for 2 months was 2x107 CFU / g.

Esimerkki 2 10Example 2 10

Hydrolysoidut tärkkelysjyväset täytettiin maitohappobakteereilla kuten esimerkissä 1 kohdissa 1-3 on kuvattu. Pakkaskuivatut tärkkelysmaitohappobakteeripartikkelit päällystettiin amyloosilla. Valmistettiin amyloosista 0,1 -2% vesiliuos kuumentamalla se 170°C:n lämpötilaan. Liuos jäähdytettiin 60 °C:seksi tai 30°C:seksi. Liuosta sumutettiin 15 partikkeleihin siten, että amyloosipitoisuus oli n. 1 - 6 % partikkelien painosta tai partikkelit sekoitettiin liuokseen ja annettiin kiteytyä yön yli + 4°C:n lämpötilassa.The hydrolyzed starch granules were filled with lactic acid bacteria as described in Example 1, paragraphs 1-3. Freeze-dried starch lactic acid bacterial particles were coated with amylose. A 0.1 to 2% aqueous solution of amylose was prepared by heating it to 170 ° C. The solution was cooled to 60 ° C or 30 ° C. The solution was sprayed onto the particles so that the amylose content was about 1-6% by weight of the particles or the particles were mixed with the solution and allowed to crystallize overnight at + 4 ° C.

Amyloosilla päällystetty tärkkelysjyvänen on esitetty kuviossa 3.The amylose coated starch grain is shown in Figure 3.

Esimerkki 3 20 : Tärkkelysjyvästen hydrolyysi ja täyttö tehtiin samanaikaisesti. Erotellut isot tärkkelys- jyväset (lOg), maitohappobakteeri MRS-liuoksessa (108 - 109 CFU/ml/100 ml), entsyymi (α-amylaasi, MEG ΑΖΥΜΕ® 1000U) ja maitohappo/etikkahappoliuos (0,1 ml/liuoksen pH 4,5) sekoitettiin. Hydrolysoitiin yön yli 30 °C:n lämpötilassa magneettisekoittajalla. Maito-25 happobakteeripitoisuuden todettiin lisääntyvän paremmin kun MRS-liuokseen lisättiin • a-amylaasia (1=10 IU/ml, 2=50 IU/ml, 3=100 IU/ml, 4=200 IU/ml, 5=300 IU/ml, PS=kontrolli; kuvio 5,). Seos sentrifugoitiin ja sakka pakkaskuivattiin. Täytetyt partikkelit päällystettiin esimerkin 2 mukaisesti. Bakteerien elävyys oli tuoreena 7x109 CFU/g, 1 kk I.Example 3 20: The hydrolysis of the starch granules and the filling were done simultaneously. Separated large starch granules (10g), lactic acid bacterium in MRS solution (108-109 CFU / ml / 100 ml), enzyme (α-amylase, MEG ΑΖΥΜΕ 1000U) and lactic acid / acetic acid solution (0.1 ml / pH 4, 5) stirred. Hydrolyzed overnight at 30 ° C with a magnetic stirrer. Milk-25 acid bacterial concentration was found to increase better when? -Amylase (1 = 10 IU / ml, 2 = 50 IU / ml, 3 = 100 IU / ml, 4 = 200 IU / ml, 5 = 300 IU / ml) was added to MRS solution. ml, PS = control; Figure 5,). The mixture was centrifuged and the precipitate was freeze-dried. The charged particles were coated as in Example 2. The bacterial viability when fresh was 7x10 9 CFU / g, 1 month I.

säilytyksen jälkeen 4x108 CFU/g ja 2 kk säilytyksen jälkeen lxlO9 CFU/g.4x108 CFU / g after storage and 1x109 CFU / g after 2 months storage.

3030

Claims (39)

1. Förfarandeförframställningavfylldastärkelsekapslar, kännetecknatavatt förfarandet omfattar följande steg: 5. stärkelsegranuler i en lämplig storleksklass väljes enligt användningsändamal, - stärkelsegranulema hydrolyseras pä sä sätt, att granulemas struktur blir porös, och - granulema fylls med mikroorganismer och/eller polypeptider eller proteiner. i1. Process preparation for filling starch capsules, characterized in that the process comprises the following steps: 5. starch granules of a suitable size class are selected according to end use, - the starch granules are hydrolyzed in such a way that the structure of the granules becomes porous, or the granules are filled or the granules are filled. in 2. Förfarande enligt patentkrav 1, kännetecknat av att stärkelsegranulema 10 hydrolyseras enzymatiskt.Process according to claim 1, characterized in that the starch granules 10 are enzymatically hydrolyzed. 3. Förfarande enligt patentkrav 1 eller 2, kännetecknat av att stärkelsegranulema hydrolyseras med a-amylas, β-amylas eller glukoamylas. 15 4. Förfarande för framställning av iyllda stärkelsekapslar, k ä n n e t e c k n a t av att förfarandet omfattar följande steg: - stärkelsegranuler i en lämplig storleksklass väljes enligt användningsändamäl, och - levande mikroorganismer tilläts att växa in i stärkelsegranulema och producera enzym, som behövs vid hydrolys. 20Process according to claim 1 or 2, characterized in that the starch granules are hydrolyzed with α-amylase, β-amylase or glucoamylase. 4. A process for preparing filled starch capsules, characterized in that the process comprises the following steps: - starch granules of a suitable size class are selected for use, and - living microorganisms are allowed to grow into starch granules and produce enzymes which are needed to produce hydrogels, producing enzymes. 20 5. Förfarande enligt nägot av de föregäende patentkraven, kännetecknat av att ~ ?' hydrolysen far ske pä sä sätt, att 3 - 60 %, företrädesvis 30 - 50 %, av stärkelsegranuler- nas torrsubstans hydrolyseras. 25 6. Förfarande enligt nägot av de föregäende patentkraven, kännetecknat av att stärkelsegranulerna beläggs med en biopolymer.Process according to any of the preceding claims, characterized in that ~? ' The hydrolysis may be carried out in such a way that 3 - 60%, preferably 30 - 50%, of the starch granules' dry substance is hydrolyzed. Process according to any of the preceding claims, characterized in that the starch granules are coated with a biopolymer. 7. Förfarande enligt nägot av de föregäende patentkraven, k ä n n e t e c k n a t av att i stärkelsegranulema beläggs med cellulosa, pektin, protein, stärkelse och/eller amylos. 307. A process according to any of the preceding claims, characterized in that cellulose, pectin, protein, starch and / or amylose are coated in the starch granules. 30 8. Förfarande enligt nägot av de föregäende patentkraven, kännetecknat av att « « 104405 stärkelsegranulema beläggs med en blandning av cellulosa, pektin, protein, stärkelse och/eller amylos och ett farmaceutiskt filmbeläggningsmaterial.Process according to any of the preceding claims, characterized in that the starch granules are coated with a mixture of cellulose, pectin, protein, starch and / or amylose and a pharmaceutical film coating material. 9. Förfarande enligt nägot av de foregäende patentkraven, kännetecknat avatt 5 stärkelsegranulema fraktioneras i fraktioner representerande olika storleksklasser fore hydrolys.Process according to any of the preceding claims, characterized in that the starch granules are fractionated in fractions representing different size classes for hydrolysis. 10. Förfarande enligt nägot av de foregäende patentkraven, kännetecknat avatt stärkelsegranulema hydrolyseras och fylls samtidigt. 10Process according to any of the preceding claims, characterized in that the starch granules are hydrolyzed and filled simultaneously. 10 11. Förfarande enligt nägot av de foregäende patentkraven, kännetecknat avatt stärkelsegranulema frystorkas efter hydrolysen och/eller efter fyllningen.Process according to any of the preceding claims, characterized in that the starch granules are freeze-dried after the hydrolysis and / or after the filling. 12. Förfarande enligt nägot av de foregäende patentkraven, kännetecknat avatt 15 de hydrolyserade stärkelsegranulema fylls och fiystorkas samtidigt eller efter fyllningen.Process according to any of the preceding claims, characterized in that the hydrolyzed starch granules are filled and freeze-dried simultaneously or after filling. 13. Förfarande enligt nägot av de foregäende patentkraven, kännetecknat avatt de levande mikroorganismema far växa in i stärkelsegranulema i närvaro av hydrolytiska enzym. , 20 1 14. Förfarande enligt nägot av de foregäende patentkraven, kännetecknat avatt J : stärkelsegranulema härstammar frän kom, potatis, vete, havre, ärt, majs, tapioka, sago, ris eller en liknande knöl- eller spannmälsväxt, företrädesvis potatis, kom, vete eller majs. 25Process according to any of the preceding claims, characterized in that the living microorganisms are allowed to grow into the starch granules in the presence of hydrolytic enzymes. A method according to any one of the preceding claims, characterized in that J: the starch granules are derived from cereals, potatoes, wheat, oats, peas, maize, tapioca, sago, rice or a similar tuber or cereal plant, preferably potatoes, cereals, wheat or corn. 25 15. Förfarande enligt nägot av de foregäende patentkraven, kännetecknat avatt stärkelsegranulema har en storlek pä 10 -100 pm, företrädesvis 50- 100 pm.Method according to any of the preceding claims, characterized in that the starch granules have a size of 10-100 µm, preferably 50-100 µm. 16. Förfarande enligt nägot av de foregäende patentkraven, kännetecknat avatt i? 30 stärkelsegranulema fylls med mikroorganismer, säsom bakterier, jäst eller mögel. IB 10440516. A method according to any of the preceding claims, characterized in The starch granules are filled with microorganisms, such as bacteria, yeast or mold. IB 104405 17. Förfarande enligt patentkrav 16, kännetecknat avatt stärkelsegranulema fylls med mjölksyrabakterier, säsom bakterier tillhörande stammama Lactobacillus, Streptococcus, Pediococcus, Lactococcus, Leuconostoc, Corynebacterium, Enterococcus, eller bakterier tillhörande stammen Bifidobacterium. 517. A method according to claim 16, characterized by the reduced starch granules being filled with lactic acid bacteria, such as bacteria belonging to the strains Lactobacillus, Streptococcus, Pediococcus, Lactococcus, Leuconostoc, Corynebacterium, Enterococcus, or bacteria belonging to the strain. 5 18. Förfarande enligt patentkrav 16, kännetecknat av att mikroorganismerna utgörs av jäst och hör till stammen Saccharomyces.18. A method according to claim 16, characterized in that the microorganisms are yeast and belong to the strain Saccharomyces. 19. Förfarande enligt nägot av patentkraven 1-15, kännetecknat av att 10 stärkelsegranulema fylls med enzym.Process according to any of claims 1 to 15, characterized in that the starch granules are filled with enzyme. 20. Förfarande enligt nägot av de föregäende patentkraven, kännetecknat av att stärkelsegranulema beläggs medelst kristallisering eller sprutning av en stärkelselösning pä ytan av granulema. 15Method according to any of the preceding claims, characterized in that the starch granules are coated by crystallization or spraying of a starch solution on the surface of the granules. 15 21. Förfarande enligt patentkrav 20, kännetecknat av att den vid kristalliseringen använda stärkelselösningen uppgär tili 0,1 - 70 % i förhällande tili stärkelsen. Γ21. Process according to claim 20, characterized in that the starch solution used in crystallization is in the range 0.1 to 70% in relation to the starch. Γ 22. Förfarande enligt patentkrav 20, kännetecknat av att den vid sprutningen “ 20 använda stärkelselösningen uppgär tili 0,1 - 2 % i förhällande tili stärkelsen. I • — :_Method according to claim 20, characterized in that the starch solution used in the spraying process is in the range 0.1 to 2% in relation to the starch. I • -: _ 23. Förfarande enligt nägot av patentkraven 1-20, kännetecknat av att I stärkelsegranulema beläggs genom sammanblandning av granulema med en 0,1 - 70- procentig stärkelselösning, som vid avkylning bildar ett gel pä ytan av granulema. _Process according to any of claims 1-20, characterized in that the starch granules are coated by mixing the granules with a 0.1-70% starch solution which, upon cooling, forms a gel on the surface of the granules. _ 25 I25 I 24. Förfarande enligt nägot av patentkraven 1 - 20, k ä n n e t e c k n a t av att • stärkelsegranulema beläggs genom sammanblandning av granulema med en stärkelselös- ϋ , ning, som vid utfällning medelst etanol bildar ett gel pä ytan av granulema. 30 25. Förfarande enligt nägot av patentkraven 1-19, kännetecknat av att den z; perforerade ytan av stärkelsegranulema fylls med stärkelsepartiklar med en storlek pä : 104405 1-10 μην24. A process according to any one of claims 1 to 20, characterized in that the starch granules are coated by mixing the granules with a starch solution which, when precipitated by ethanol, forms a gel on the surface of the granules. Method according to any of claims 1-19, characterized in that it z; the perforated surface of the starch granules is filled with starch particles having a size of: 104405 1-10 μην 26. Stärkelsekapsel, kännetecknad avatt den bestar av en stärkelsegranul, som till sin struktur är porös tili följd av hydrolys och fylld med mikroorganismer och/eller 5 polypeptider eller proteiner.26. Starch capsule, characterized in that it consists of a starch granule which, in its structure, is porous due to hydrolysis and filled with microorganisms and / or polypeptides or proteins. 27. Stärkelsekapsel enligt patentkrav 26, kännetecknad av att stärkelsegranulen är enzymatiskt hydrolyserad.The starch capsule according to claim 26, characterized in that the starch granule is enzymatically hydrolyzed. 28. Stärkelsekapsel enligt patentkrav 26 eller 27, kännetecknad av att stärkelsegranulen är hydrolyserad med a-amylas, β-amylas eller glukoamylas.The starch capsule according to claim 26 or 27, characterized in that the starch granule is hydrolyzed with α-amylase, β-amylase or glucoamylase. 29. Stärkelsekapsel enligt nägot av patentkraven 26-28, kännetecknad av att stärkelsegranulen är belagd med en biopolymer. 15The starch capsule according to any of claims 26-28, characterized in that the starch granule is coated with a biopolymer. 15 30. Stärkelsekapsel enligt nägot av patentkraven 26-29, kännetecknad av att stärkelsegranulen är belagd med cellulosa, pektin, protein, stärkelse och/eller amylos.The starch capsule according to any of claims 26-29, characterized in that the starch granule is coated with cellulose, pectin, protein, starch and / or amylose. 31. Stärkelsekapsel enligt nägot av patentkraven 26-30, kännetecknad av att 20 stärkelsegranulen är belagd med en blandning av cellulosa, pektin, protein, stärkelse och/eller amylos och ett farmaceutiskt filmbeläggningsmaterial.The starch capsule according to any of claims 26-30, characterized in that the starch granule is coated with a mixture of cellulose, pectin, protein, starch and / or amylose and a pharmaceutical film coating material. 32. Stärkelsekapsel enligt nägot av patentkraven 26-31, kännetecknad av att j stärkelsegranulen härstammar frän kom, potatis, vete, havre, ärt, majs, tapioka, sago, 25 ris eller en liknande knöl- eller spannmälsväxt, företrädesvis potatis, kom, vete eller majs. 1 2 II • « Stärkelsekapsel enligt nägot av patentkraven 26-32, kännetecknad av att i « stärkelsegranulen har en storlek pä 10 -100 pm, företrädesvis 50 - 100 pm. 30 2 Stärkelsekapsel enligt nägot av patentkraven 26-33, kännetecknad av att 104405 stärkelsegranulen är fylld med mikroorganismer, säsom bakterier, jäst eller mögel.The starch capsule according to any of claims 26-31, characterized in that the starch granule is derived from cereals, potatoes, wheat, oats, peas, maize, tapioca, sago, rice or a similar tuber or cereal flour, preferably potatoes, cereals, wheat. or corn. The starch capsule according to any one of claims 26-32, characterized in that the starch granule has a size of 10-100 µm, preferably 50-100 µm. 2 Starch capsule according to any of claims 26-33, characterized in that the starch granule is filled with microorganisms, such as bacteria, yeast or mold. 35. Stärkelsekapsel enligt patentkrav 34, k ä n n e t e c k n a d av att stärkelsegranulen är fylld med mjölksyrabakterier, säsom bakterier tillhörande stammama Lactobacillus,The starch capsule according to claim 34, characterized in that the starch granule is filled with lactic acid bacteria, such as bacteria belonging to the strains Lactobacillus, 5 Streptococcus, Pediococcus, Lactococcus, Leuconostoc, Corynebacterium, Enterococcus, eller bakterier tillhörande stammen Bifidobacterium.Streptococcus, Pediococcus, Lactococcus, Leuconostoc, Corynebacterium, Enterococcus, or bacteria belonging to the strain Bifidobacterium. 36. Stärkelsekapsel enligt patentkrav 34, k ä n n e t e c k n a d av att mikroorganismer-na utgörs av jäst och hör till stammen Saccharomyces. 10The starch capsule according to claim 34, characterized in that the microorganisms are yeast and belong to the strain Saccharomyces. 10 37. Stärkelsekapsel enligt nägot av patentkraven 26 - 33, k ä n n e t e c k n a d av att 1 granulen är fylld med enzym.37. The starch capsule according to any of claims 26 to 33, characterized in that the 1 granule is filled with enzyme. 38. Stärkelsekapsel enligt nägot av patentkraven 26-37, kännetecknad av att 15 stärkelsekapseln är belagd med en stärkelselösning med en koncentration pä 0,1 - 70 % i forhällande tili stärkelsen.38. The starch capsule according to any of claims 26-37, characterized in that the starch capsule is coated with a starch solution having a concentration of 0.1 - 70% in the ratio of the starch. 39. Stärkelsekapsel enligt nägot av patentkraven 26-38, kännetecknad av att I stärkelsekapseln är belagd med en stärkelselösning med en koncentration pä 0,1 - 2 % 20. forhällande tili stärkelsen. I t39. Starch capsule according to any of claims 26-38, characterized in that the starch capsule is coated with a starch solution having a concentration of 0.1 - 2% 20. ratio to the starch. I t 40. Stärkelsekapsel enligt nägot av patentkraven 26-37, kännetecknad av att I den perforerade ytan av stärkelsegranulema är fylld med stärkelsepartiklar med en L storlek pä 1 - 10 pm. 25 • — • ·Starch capsule according to any of claims 26-37, characterized in that in the perforated surface of the starch granules is filled with starch particles having an L size of 1 - 10 µm. 25 • - • ·
FI980707A 1998-03-27 1998-03-27 Starch capsules containing microorganisms and process for their preparation FI104405B (en)

Priority Applications (13)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI980707A FI104405B (en) 1998-03-27 1998-03-27 Starch capsules containing microorganisms and process for their preparation
EP99911844A EP1063976A1 (en) 1998-03-27 1999-03-29 Tarch capsules containing microorganisms and/or polypeptides or proteins and a process for producing them
PCT/FI1999/000259 WO1999052511A1 (en) 1998-03-27 1999-03-29 Tarch capsules containing microorganisms and/or polypeptides or proteins and a process for producing them
BR9909133-0A BR9909133A (en) 1998-03-27 1999-03-29 Starch capsules containing microorganisms and / or polypeptides and proteins and a process for producing them
JP2000543121A JP2002511403A (en) 1998-03-27 1999-03-29 Starch capsule containing microorganism and / or polypeptide or protein, and method for producing the same
CA002324364A CA2324364A1 (en) 1998-03-27 1999-03-29 Starch capsules containing microorganisms and/or polypeptides or proteins and a process for producing them
CA002324363A CA2324363A1 (en) 1998-03-27 1999-03-29 Coated starch capsules and a process for producing them
PCT/FI1999/000260 WO1999052512A1 (en) 1998-03-27 1999-03-29 Coated starch capsules and a process for producing them
JP2000543122A JP2002511404A (en) 1998-03-27 1999-03-29 Coated starch capsules and methods for their manufacture
AU30386/99A AU3038699A (en) 1998-03-27 1999-03-29 Starch capsules containing micro-organisms and/or polypeptides or proteins and a process for producing them
AU30387/99A AU3038799A (en) 1998-03-27 1999-03-29 Coated starch capsules and a process for producing them
US09/647,157 US6514526B1 (en) 1998-03-27 1999-03-29 Coated starch capsules and a process for producing them
EP99911845A EP1063977A1 (en) 1998-03-27 1999-03-29 Coated starch capsules and a process for producing them

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI980707 1998-03-27
FI980707A FI104405B (en) 1998-03-27 1998-03-27 Starch capsules containing microorganisms and process for their preparation

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI980707A0 FI980707A0 (en) 1998-03-27
FI980707A FI980707A (en) 1999-09-28
FI104405B true FI104405B (en) 2000-01-31

Family

ID=8551403

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI980707A FI104405B (en) 1998-03-27 1998-03-27 Starch capsules containing microorganisms and process for their preparation

Country Status (7)

Country Link
EP (1) EP1063976A1 (en)
JP (1) JP2002511403A (en)
AU (1) AU3038699A (en)
BR (1) BR9909133A (en)
CA (1) CA2324364A1 (en)
FI (1) FI104405B (en)
WO (1) WO1999052511A1 (en)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8563522B2 (en) 1997-07-08 2013-10-22 The Iams Company Method of maintaining and/or attenuating a decline in quality of life
DE19962427A1 (en) * 1999-12-22 2001-07-12 Nutrinova Gmbh Encapsulated multifunctional, biologically active food component, process for their production and their application
KR100395633B1 (en) * 2001-05-30 2003-08-21 문장조 Microencapsulation Using Porous Dextrin with Matrix Inside and Manufacturing Method the Same
US20030198682A1 (en) * 2002-02-12 2003-10-23 Gruber James V. Composition and method for protecting labile active components during high temperature drying
US8871266B2 (en) * 2003-10-01 2014-10-28 Commonwealth Scientific & Industrial Research Organisation Probiotic storage and delivery
US8894991B2 (en) 2003-12-19 2014-11-25 The Iams Company Canine probiotic Lactobacilli
US20050158294A1 (en) 2003-12-19 2005-07-21 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum
US20050152884A1 (en) 2003-12-19 2005-07-14 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria globosum
US7785635B1 (en) 2003-12-19 2010-08-31 The Procter & Gamble Company Methods of use of probiotic lactobacilli for companion animals
US8877178B2 (en) 2003-12-19 2014-11-04 The Iams Company Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals
JP2006280263A (en) * 2005-03-31 2006-10-19 Snow Brand Milk Prod Co Ltd Bacillus bifidus cell powder
CA2607949C (en) 2005-05-31 2012-09-25 Thomas William-Maxwell Boileau Feline probiotic bifidobacteria
AR052472A1 (en) 2005-05-31 2007-03-21 Iams Company PROBIOTIC LACTOBACILOS FOR FELINOS
AU2008211600B8 (en) 2007-02-01 2014-02-13 Mars, Incorporated Method for decreasing inflammation and stress in a mammal using glucose antimetabolites, avocado or avocado extracts
US9771199B2 (en) 2008-07-07 2017-09-26 Mars, Incorporated Probiotic supplement, process for making, and packaging
US10104903B2 (en) 2009-07-31 2018-10-23 Mars, Incorporated Animal food and its appearance
KR101902035B1 (en) * 2011-01-25 2018-09-27 오스트리아노바 싱가포르 피티이 리미티드 Protection of microbial cells from acidic degradation
WO2019156096A1 (en) * 2018-02-06 2019-08-15 日清フーズ株式会社 Potato starch
AU2020289319A1 (en) * 2019-06-07 2022-01-06 Basf Se New formulations of microorganisms

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5160745A (en) * 1986-05-16 1992-11-03 The University Of Kentucky Research Foundation Biodegradable microspheres as a carrier for macromolecules
US4859377A (en) * 1987-07-10 1989-08-22 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Starch encapsulation of entomopathogens
US5403799A (en) * 1992-12-21 1995-04-04 W. R. Grace & Co.-Conn. Process upset-resistant inorganic supports for bioremediation
US5486507A (en) * 1994-01-14 1996-01-23 Fuisz Technologies Ltd. Porous particle aggregate and method therefor
GB2311027B (en) * 1996-03-15 1999-10-27 Johnson & Johnson Medical Coated bioabsorbable beads for wound treatment

Also Published As

Publication number Publication date
EP1063976A1 (en) 2001-01-03
WO1999052511A1 (en) 1999-10-21
CA2324364A1 (en) 1999-10-21
BR9909133A (en) 2000-12-05
FI980707A (en) 1999-09-28
AU3038699A (en) 1999-11-01
JP2002511403A (en) 2002-04-16
FI980707A0 (en) 1998-03-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI104405B (en) Starch capsules containing microorganisms and process for their preparation
Razavi et al. Microencapsulating polymers for probiotics delivery systems: Preparation, characterization, and applications
Nezamdoost-Sani et al. Alginate and derivatives hydrogels in encapsulation of probiotic bacteria: An updated review
US9480276B2 (en) Dry food product containing live probiotic
JP6229188B2 (en) Stabilized composition for biomaterials
Paramera et al. Yeast cells and yeast-based materials for microencapsulation
JP2006512059A (en) Dietary supplement and aquatic animal feeding method
Das et al. Microencapsulation of probiotic bacteria and its potential application in food technology
BE1024197A1 (en) Process for coating microorganisms, powder of said coated microorganisms obtained and pharmaceutical, nutraceutical, cosmetic, food or sanitary composition comprising it.
Peltzer et al. Use of edible films and coatings for functional foods developments: A review
Harel et al. Protection and delivery of probiotics for use in foods
US20200154702A1 (en) Stable Bioactive Substances and Methods of Making
Radosavljević et al. Encapsulation technology of lactic acid bacteria in food fermentation
US6514526B1 (en) Coated starch capsules and a process for producing them
KR102483912B1 (en) Method for producing soft capsule type functional health food
JP2000302694A (en) Substance usable as medicine and food
Xie et al. The encapsulation of probiotics by polysaccharides
Mortazavian et al. Microencapsulation of probiotics and applications in food fermentation
FI104406B (en) Starch capsules and a process for the preparation thereof
KR100846672B1 (en) Improved productivity and survival of bacillus polyfermenticus scd by alginate/methyl-cellulose encapsulelation and use thereof
Tuladhar et al. Recent Advances in Applications of Encapsulation Technology for the Bioprotection of Phytonutrients in Complex Food Systems
Martın et al. ÔØ Å ÒÙ× Ö ÔØ
Champagne K. Kailasapathy, University of Western Sydney, Australia
Li Polymer-Based Microencapsulation Delivery Systems in the Food Industry

Legal Events

Date Code Title Description
MA Patent expired