ES2962814T3 - Composición terapéutica que comprende rifapentina para su uso en el tratamiento de la neuropatía craneal amiloide - Google Patents

Composición terapéutica que comprende rifapentina para su uso en el tratamiento de la neuropatía craneal amiloide Download PDF

Info

Publication number
ES2962814T3
ES2962814T3 ES19889734T ES19889734T ES2962814T3 ES 2962814 T3 ES2962814 T3 ES 2962814T3 ES 19889734 T ES19889734 T ES 19889734T ES 19889734 T ES19889734 T ES 19889734T ES 2962814 T3 ES2962814 T3 ES 2962814T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
weight
disease
rifapentine
amyloid
pharmaceutical composition
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES19889734T
Other languages
English (en)
Inventor
Seong Muk Kim
Young Soo Kim
Ji Su Shin
Han Na Jeon
Dong Hee Lee
Hye Ju Kim
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Amyloid Solution Inc
Original Assignee
Amyloid Solution Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=68847847&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2962814(T3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Amyloid Solution Inc filed Critical Amyloid Solution Inc
Application granted granted Critical
Publication of ES2962814T3 publication Critical patent/ES2962814T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/5415—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. phenothiazine, chlorpromazine, piroxicam
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/438—The ring being spiro-condensed with carbocyclic or heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/538—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/322—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the health of the nervous system or on mental function

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

Se proporcionan una nueva composición farmacéutica y un método para inhibir y/o desagregar la agregación de amiloide, y/o descomponer tau y/o inhibir la fosforilación de tau, y/o prevenir y/o tratar enfermedades cerebrales degenerativas. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Composición terapéutica que comprende rifapentina para su uso en el tratamiento de la neuropatía craneal amiloide
Campo técnico
La presente divulgación se refiere a una composición que comprende rifapentina para su uso en el tratamiento de la neuropatía craneal amiloide, en particular para su uso en la prevención o el tratamiento de enfermedades cerebrales neurodegenerativas, como se define en las reivindicaciones.
Antecedentes de la técnica
Las enfermedades cerebrales neurodegenerativas son enfermedades que causan cambios degenerativos en las células nerviosas del sistema nervioso central y, por lo tanto, conducen a diversos síntomas, como funciones motoras y sensoriales alteradas, inhibición de funciones de alta dimensión, tal como la memoria, el aprendizaje y el cálculo. Las enfermedades cerebrales neurodegenerativas comunes incluyen la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson y los trastornos de la memoria. En las enfermedades cerebrales neurodegenerativas, la muerte de las células neuronales se produce debido a la progresión rápida o lenta de la necrosis o la apoptosis. Por consiguiente, para el desarrollo de un método de prevención, control y tratamiento de enfermedades del sistema nervioso central, el mecanismo de muerte de las neuronas necesita ser entendido.
Por otro lado, una característica patológica importante de la enfermedad de Alzheimer, una enfermedad cerebral neurodegenerativa común, es la formación de agregados peptídicos llamados placas seniles, que causan disfunción sináptica y muerte neuronal. El componente principal de estas placas seniles es el beta-amiloide que tiene una longitud de 40-42 aminoácidos. Los monómeros de beta-amiloide se autoensamblan fácilmente en oligómeros, protofibrillas y fibrillas ricas en láminas beta, y están asociadas con el desarrollo de neurotoxicidad.
Aún no se ha identificado la correlación entre las placas de beta-amiloide y la neurotoxicidad. Sin embargo, se cree que el autoensamblaje de beta-amiloide en oligómeros o agregados intermedios está asociado con el desarrollo de enfermedades neurológicas tales como la enfermedad de Alzheimer.
La proteína Tau consiste en cuatro partes, que incluyen el saliente N-terminal, el dominio de agregación de prolina, el dominio de unión al microorganismo y el C-terminal (Mandelkowet al.,Acta.Neuropathol., 103, 26-35, 1996), y se sabe que la hiperfosforilación o deformación anormal de Tau en las neuronas del sistema nervioso central causa enfermedades cerebrales neurodegenerativas tales como la enfermedad de Parkinson y la tauopatía.
Por consiguiente, la inhibición de la agregación de beta-amiloide, la degradación de los agregados de beta-amiloide, o la reducción de proteínas Tau anormalmente hiperfosforiladas se ha sugerido como un método para tratar enfermedades cerebrales neurodegenerativas tales como la enfermedad de Alzheimer y la de Parkinson.
El documento EP-A-0675126 describe un inhibidor de la agregación y/o depósito de proteína beta-amiloide que contiene rifamicina para su uso en el tratamiento o prevención de la demencia senil del tipo Alzheimer. Tomiyamaet al.divulga en Biochem. Biophys. Res. Comm., 204(1), 1994, 76-83, que la rifampicina puede ser un agente terapéutico potencial para inhibir el paso inicial de la formación de amiloide en la enfermedad de Alzheimer. Umedaet al.divulgan en Brain, 139(5), 2016, 1568-1586, que la rifampicina podría ser un medicamento prometedor listo para usar para la prevención de la enfermedad de Alzheimer y otras enfermedades neurodegenerativas. Umedaet al.describen en Alzheimer's & Dementia: Translational Research & Clinical Interventions, 4, 2018, 304-313 el uso de rifampicina para la prevención de la enfermedad de Alzheimer. Izukaet al.notifican en Dement. Geriatr. Cogn. Dis. Extra., 7(2), 2017, 204-214 que la rifampicina tiene efectos preventivos sobre la enfermedad de Alzheimer y el deterioro cognitivo en seres humanos.
Descripción de las realizaciones
Problema técnico
Las referencias a métodos de tratamiento en la presente descripción deben interpretarse como referencias a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la presente invención para su uso en un método para el tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia.
Un aspecto no reivindicado proporciona una composición farmacéutica para la inhibición y/o degradación de la agregación de beta-amiloide, incluyendo la composición farmacéutica, como principio activo, una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas.
Otro aspecto no reivindicado proporciona una composición farmacéutica para la degradación de las proteínas Tau (y/o la inhibición de la agregación de las proteínas Tau) y/o la inhibición de la fosforilación de las proteínas Tau, incluyendo la composición farmacéutica, como principio activo, una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas.
Otro aspecto no reivindicado proporciona un método para inhibir y/o degradar la agregación de amiloide-beta degradando, incluyendo el método administrar, a un sujeto que necesita inhibición y/o degradación de la agregación de beta-amiloide, una cantidad farmacéuticamente eficaz de uno o más seleccionados del grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. El método puede incluir además, antes de administrar, identificar un sujeto que necesite inhibición y/o degradación de la agregación de beta-amiloide.
Otro aspecto no reivindicado proporciona un método para degradar (y/o inhibir la agregación) proteínas Tau y/o inhibir la fosforilación de proteínas Tau, incluyendo el método administrar, a un sujeto que necesita degradación (y/o inhibición de agregación) de proteínas Tau y/o inhibición de la fosforilación de proteínas Tau, una cantidad farmacéuticamente eficaz de uno o más seleccionados del grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. El método puede incluir además, antes de administrar, identificar un sujeto que necesite degradación (y/o inhibición de agregación) de proteínas Tau y/o inhibición de la fosforilación de proteínas Tau.
Una realización de la invención proporciona una composición farmacéutica para su uso en la prevención y/o tratamiento de enfermedades cerebrales neurodegenerativas, incluyendo la composición farmacéutica, como principio activo, rifapentina o sales farmacéuticamente aceptables de la misma
Otro aspecto no reivindicado proporciona un método para prevenir y/o tratar la enfermedad cerebral neurodegenerativa, incluyendo el método administrar, a un sujeto que necesita la prevención y/o el tratamiento de una enfermedad cerebral neurodegenerativa, una cantidad farmacéuticamente eficaz de uno o más seleccionados del grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. El método puede incluir además, antes de administrar, identificar un sujeto que necesite la prevención y/o el tratamiento de una enfermedad cerebral neurodegenerativa.
Otro aspecto no reivindicado proporciona una composición farmacéutica para neuroprotección, incluyendo la composición farmacéutica, como principio activo, una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas.
Otro aspecto no reivindicado proporciona un método para proteger las células neuronales craneales, incluyendo el método administrar, a un sujeto que necesita protección de las células neuronales craneales, una cantidad farmacéuticamente eficaz de uno o más seleccionados del grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. El método puede incluir además, antes de administrar, identificar un sujeto que necesita la protección de las células neuronales craneales.
Otra realización proporciona una composición farmacéutica para usar en la prevención o mejora de trastornos cognitivos o la mejora terapéutica de la memoria, incluyendo la composición farmacéutica, como principio activo, rifapentina o sales farmacéuticamente aceptables de la misma
Otro aspecto no reivindicado proporciona un método para prevenir o mejorar los trastornos cognitivos o mejorar la memoria, incluyendo el método administrar, a un sujeto que necesita prevenir o mejorar los trastornos cognitivos o mejorar la memoria, una cantidad farmacéuticamente eficaz de uno o más seleccionados del grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. El método puede incluir además, antes de administrar, identificar un sujeto que necesita la prevención o mejora de los trastornos cognitivos o la mejora de la memoria.
Otro aspecto no reivindicado proporciona un alimento funcional saludable para inhibir la agregación de beta-amiloide y/o degradar beta-amiloide, los alimentos funcionales para la salud, incluidos, como principio activo, una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y una de sus sales citológicamente aceptables.
Otro aspecto no reivindicado proporciona un alimento funcional saludable para la degradación (y/o inhibición de agregación) de proteínas Tau y/o inhibición de la fosforilación de proteínas Tau, los alimentos funcionales para la salud, incluidos, como principio activo, una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales aceptables para alimentos de la misma.
Otra realización proporciona un alimento funcional saludable para su uso en la prevención y/o mejora de la enfermedad cerebral neurodegenerativa, los alimentos funcionales para la salud, incluidos, como principio activo, rifapentina o sales aceptables para alimentos de la misma.
Otro aspecto no reivindicado proporciona un alimento funcional saludable para la protección de las células neuronales craneales, los alimentos funcionales para la salud, incluidos, como principio activo, una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales aceptables para alimentos de la misma.
Otra realización proporciona un alimento funcional saludable para su uso en la prevención o mejora de los trastornos cognitivos o para el uso terapéutico en la mejora de la memoria, los alimentos funcionales para la salud, incluidos, como principio activo, rifapentina o sales aceptables para alimentos de la misma.
Solución al problema
En la presente memoria descriptiva, se confirma que una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sus sales farmacéuticamente aceptables son terapéuticamente eficaces para la enfermedad cerebral neurodegenerativa mediante la identificación de actividades de inhibición de la agregación de beta-amiloide, degradación de beta-amiloide, degradación (y/o inhibición de la agregación de) de las proteínas Tau y/o inhibir las proteínas Tau hiperfosforiladas y, por lo tanto, se sugiere un uso de estos compuestos para la inhibición y/o la degradación de la agregación de beta-amiloide, y/o la degradación (y/o la inhibición de la agregación) de proteínas Tau y/o la inhibición de la fosforilación de proteínas Tau, y/o la prevención y/o el tratamiento de enfermedades cerebrales neurodegenerativas. Una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sus sales farmacéuticamente aceptables tienen una excelente permeabilidad de la barrera hematoencefálica (BHE) y, por lo tanto, ejercen eficazmente las actividades de inhibición y/o degradación de la agregación de beta-amiloide y/o degradación de las proteínas Tau (y/o inhibición de la agregación de las proteínas Tau), y/o inhibiendo la fosforilación de proteínas Tau, en el cerebro, y/o prevenir y/o tratar la enfermedad cerebral neurodegenerativa.
En consecuencia, un aspecto no reivindicado proporciona una composición farmacéutica para la inhibición y/o degradación de la agregación de beta-amiloide, incluyendo la composición farmacéutica, como principio activo, una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas.
Otro aspecto no reivindicado proporciona una composición farmacéutica para la degradación (y/o inhibición de agregación) de proteínas Tau y/o inhibición de la fosforilación de proteínas Tau, incluyendo la composición farmacéutica, como principio activo, una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas.
Otro aspecto no reivindicado proporciona un método para inhibir y/o degradar la agregación de beta amiloide, incluyendo el método administrar, a un sujeto que necesita la inhibición y/o la degradación de la agregación de betaamiloide, una cantidad farmacéuticamente eficaz de uno o más seleccionados del grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. El método puede incluir además, antes de administrar, identificar un sujeto que necesite inhibición y/o degradación de la agregación de amiloide-beta.
Otro aspecto no reivindicado proporciona un método para degradar (y/o inhibir la agregación de) proteínas Tau y/o inhibir la fosforilación de proteínas Tau, incluyendo el método administrar, a un sujeto que necesita degradar (y/o inhibir la agregación de) proteínas Tau y/o inhibir la fosforilación de proteínas Tau, una cantidad farmacéuticamente eficaz de uno o más seleccionados del grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. El método puede incluir además, antes de administrar, identificar un sujeto que necesite degradación (y/o inhibir la agregación) de proteínas Tau y/o inhibir de la fosforilación de proteínas Tau.
Una realización de la invención proporciona una composición farmacéutica para su uso en la prevención y/o tratamiento de enfermedades cerebrales neurodegenerativas, incluyendo la composición farmacéutica, como principio activo, rifapentina o sales aceptables para alimentos de la misma.
Otro aspecto no reivindicado proporciona un método para prevenir y/o tratar la enfermedad cerebral neurodegenerativa, incluyendo el método administrar, a un sujeto que necesita la prevención y/o el tratamiento de una enfermedad cerebral neurodegenerativa, una cantidad farmacéuticamente eficaz de uno o más seleccionados del grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. El método puede incluir además, antes de administrar, identificar un sujeto que necesite la prevención y/o el tratamiento de una enfermedad cerebral neurodegenerativa.
Otra realización proporciona una composición farmacéutica para usar en la prevención o mejora de trastornos cognitivos o la mejora terapéutica de la memoria, incluyendo la composición farmacéutica, como principio activo, rifapentina o sales farmacéuticamente aceptables de la misma
Otro aspecto no reivindicado proporciona un método para prevenir o mejorar los trastornos cognitivos o mejorar la memoria, incluyendo el método administrar, a un sujeto que necesita la prevención o mejora de los trastornos cognitivos o la mejora de la memoria, una cantidad farmacéuticamente eficaz de uno o más seleccionados del grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas. El método puede incluir además, antes de administrar, identificar un sujeto que necesita la prevención o mejora de los trastornos cognitivos o la mejora de la memoria.
Otro aspecto no reivindicado proporciona un alimento funcional saludable para la inhibición y/o degradación de la agregación de beta-amiloide, los alimentos funcionales para la salud, incluidos, como principio activo, una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y alimentos funcionales para la salud de los mismos.
Otro aspecto no reivindicado proporciona un alimento funcional saludable para la degradación (y/o inhibición de agregación) de proteínas Tau y/o inhibición de la fosforilación de proteínas Tau, incluyendo la composición farmacéutica, como principio activo, una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales aceptables para alimentos de la misma.
Otra realización proporciona un alimento funcional saludable para su uso en la prevención y/o mejora de la enfermedad cerebral neurodegenerativa, los alimentos funcionales para la salud, incluidos, como principio activo, rifapentina o sales aceptables para alimentos de la misma.
Otro aspecto no reivindicado proporciona un alimento funcional saludable para la protección de las células neuronales craneales, los alimentos funcionales para la salud, incluidos, como principio activo, una o más seleccionadas de entre el grupo que consiste en rifamicina, triflupromazina y sales aceptables para alimentos de la misma.
Otra realización proporciona un alimento funcional saludable para su uso en la prevención o mejora de trastornos cognitivos o la mejora terapéutica de la memoria, los alimentos funcionales para la salud, incluidos, como principio activo, rifapentina o sales aceptables para alimentos de la misma.
En lo sucesivo en el presente documento, la presente divulgación proporcionada en el presente documento se describirá con más detalle.
Los inventores de la presente divulgación descubrieron que la rifamicina o sus sales farmacéuticamente aceptables inhiben la agregación de beta-amiloide (véase el Ejemplo 1 y la FIG. 1) y una vez que se induce la agregación de betaamiloide, la rifamicina o sus sales farmacéuticamente aceptables degradan los agregados de la misma (véanse los ejemplos 2 y 3 y las figuras 3, 5 y 7).
Igualmente, se identificó el efecto de la rifamicina de acuerdo con la presente divulgación sobre una disminución de la placa amiloide y la fosforilación de Tau en un modelo animal de Alzheimer y se descubrió que se reducían el número de placas amiloides y el área total de las placas (véase el Ejemplo 4 y las FIGS. 8 a 10).
Además, se confirmó que la rifamicina de la presente divulgación mejora las funciones cognitivas y la memoria en un modelo animal de Alzheimer (véase el Ejemplo 6, las FIGS. 13 y 14).
Igualmente, los inventores de la presente divulgación descubrieron que la triflupromazina o sus sales farmacéuticamente aceptables inhiben la agregación de beta-amiloide (véase el Ejemplo 1 y la FIG. 1) y una vez que se induce la agregación de beta-amiloide, la rifamicina o sus sales farmacéuticamente aceptables degradan los agregados beta-amiloides de la misma (véanse el Ejemplo 2 y las Figuras 4 y 6).
Igualmente, con respecto al efecto de la triflupromazina de acuerdo con la presente divulgación sobre una disminución en el número de placas amiloides y la fosforilación de Tau en un modelo animal de Alzheimer, se confirmó que la triflupromazina reducía el número de placas de amiloide y el área total de las placas (véase el Ejemplo 4 y la FIG. 11), degradó las proteínas Tau totales e inhibió la fosforilación de las proteínas Tau (véase el Ejemplo 5 y la FIG. 12). En la presente memoria descriptiva, se confirmó que, dado que la rifamicina o la triflupromazina inhiben la agregación de beta-amiloide, degrada los agregados que ya han sido agregados, degrada la proteína Tau e inhibe la fosforilación de Tau, tienen efectos terapéuticos sobre la enfermedad cerebral neurodegenerativa en diversas enfermedades tales como la enfermedad de Alzheimer y la enfermedad de Parkinson.
El término "rifamicina" utilizado en el presente documento puede referirse a un grupo de muchos derivados de rifamicina. La rifamicina puede ser una seleccionada entre el grupo que consiste en rifamicina, rifabutina, rifapentina, rifalazil, rifaximina, rifamdina, rifamicina B, rifamicina S y rifamicina SV. La rifamicina según la invención es rifapentina. La rifapentina (según la invención) también puede denominarse 3-[[(4-ciclopentil-1-piperazinil)imino]metil]-rifamicina y puede representarse mediante la Fórmula 1.
[Fórmula 1]
La rifampicina puede ser 5,6,9,17,19,21-hexahidroxi-23-metoxi-2,4,12,16,18,20,22-hepta<iT i>etN-8-[N-(4-<iT i>etiM -piperazmN)formi<iT i>idoN]-2,7-(epoxipentadeca[1,11,13]tneni<iT i>ino)-nafto [2,1-b]furan-1,11(2H)-diona 21-acetato y puede representarse mediante la Fórmula 2.
[Fórmula 2]
La rifabutina puede ser (S,12E,14S,15R,16S,17R,18R,19R,20S,21S,22E,24Z)-6,16,18,20-tetrahidroxM'-isobutiM4-metoxi-7,9,15,17,19,21,25-heptametN-espiro[9,4-epoxipentadeca[1,11,13]trie<m iT i>ino)-2H-furo[2",3":7,8]naft[1,2-diimidazol-2,4"-piperidina]-5,10,26-(3H,9H)-triona-16-acetato, y puede representarse mediante la Fórmula 3.
[Fórmula 3]
El rifalazil puede ser (2S,16Z,18E,20S,21S,22R,23R,24R,25S,26R,27S,28E)-5,12,21,23-tetrahidroxi-27-metoxi-2,4,16,20,22,24,26-heptametil-10-[4-(2-metilpropil)piperazin-1-il]-1,6,15-trioxo-1,2-dihidro-6H-2,7-(epoxipentadeca[1,11,13]trienoimino)[1]benzofuro[4,5-a]fenoxazin-25-il acetato y puede representarse mediante la Fórmula 4.
[Fórmula 4]
La rifaximina puede ser [2S-(2R*, 16Z, 18E, 20R *, 21R *, 22S *, 23S *, 24S *, 25R *, 26S *, 27R*, 22E)]-25-acetiloxi)-5,6,21,23-tetrahidroxi-27-metoxi-2,4,11,16,20,22,24,26-octametil-2,7-(epoxipentadeca [1,11,13] trienimino) benzofuro [4,5-e] pirido [1,2-a] bencimidazol-1,15 (2H)-diona y puede representarse mediante la siguiente Fórmula 5.
[Fórmula 5]
La rifamicina B puede ser ácido {[(2S,12Z,14E,16S,17S,18R,19R,20R,21S,22R,23S,24E)-21-(acetiloxi)-5,6,17,19-tetrahidroxi-23 -metoxi-2,4,12,16,18,20,22-heptametiM,11-dioxo-1,2-dihidro-2,7-(epoxipentadeca[1,11,13]trienoimino)nafto[2,1-b]furan-9-il]oxi}acético, y puede representarse mediante la Fórmula 6.
[Fórmula 6]
La rifamicina S puede ser 5,17,19,21-tetrahidroxi-23-metoxi-2,4,12,16,18,20,22-heptametil-2,7-(epoxipentadeca[1,11,13]trienimino)nafto[2,1-b]furan-1,6,9,11(2H)-tetrona 21-acetato y puede representarse mediante la Fórmula 7.
[Fórmula 7]
La rifamicina SV puede ser 5,6,9,17,19,21-hexahidroxi-23-metoxi-2,4,12,16,18,20,22-hepta<iT i>etN-2,7-(epoxipentadeca[1,11,13]trienimino)nafto[2,1-b]furan-1,11(2H)-diona 21-acetato y puede representarse mediante la Fórmula 8.
[Fórmula 8]
La rifamdina puede ser 3-[[[4-(2-metilpropil)-1-piperazinil]imino]metil]rifamicina y puede estar representada mediante la Fórmula 9.
[Fórmula 9]
La triflupromazina (dimetil ({3-[2-(trifluorometil)-10H-fenotiazin-10-il]propil})amina; N°. CAS 146-54-3; véase la Fórmula 10) se utiliza principalmente en el tratamiento de trastornos mentales y emocionales, tales como esquizofrenia o similares. Sin embargo, no se conoce el efecto de la triflupromazina sobre la inhibición de la agregación y/o degradación de beta-amiloide y/o la degradación (y/o inhibición de agregación) de proteínas Tau y/o la inhibición de la fosforilación de proteínas Tau y/o la prevención y/o el tratamiento de la enfermedad cerebral neurodegenerativa.
[Fórmula 10]
El amiloide-beta humano es una molécula peptídica que contiene aproximadamente 36-43 aminoácidos y es un componente principal de las placas amiloides expresadas en el cerebro de los pacientes de Alzheimer y se sabe que está implicada en el desarrollo de la enfermedad de Alzheimer. La molécula peptídica beta-amiloide puede obtenerse escindiendo una proteína precursora de amiloide (APP; UniProtKB P05067) con beta secretasa y gamma secretasa. Las moléculas peptídicas beta amiloide se agregan para formar oligómeros tóxicos neuronales, que lleva a una enfermedad neurodegenerativa del cerebro.
La proteína Tau consiste en cuatro partes, que incluyen el saliente N-terminal, el dominio de agregación de prolina, el dominio de unión al microorganismo y el C-terminal (Mandelkowet al.,Acta.Neuropathol., 103, 26-35, 1996), y se sabe que la hiperfosforilación o deformación anormal de Tau en las neuronas del sistema nervioso central causa enfermedades cerebrales neurodegenerativas tales como la enfermedad de Parkinson y la tauopatía.
La expresión "enfermedad cerebral neurodegenerativa" que se utiliza en el presente documento se refiere a cualquier enfermedad asociada con cambios degenerativos en el cerebro, en particular, todas las enfermedades (enfermedades cerebrales) que pueden ser causadas por uno o más factores seleccionados de la agregación de amiloide-beta, la agregación de proteínas Tau y la hiperfosforilación de proteínas Tau, en el cerebro y/o células neuronales craneales. En una realización, la enfermedad cerebral neurodegenerativa puede ser, por ejemplo, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, deterioro cognitivo leve, angiopatía amiloidea cerebral, síndrome de Down, accidente cerebrovascular amiloide, enfermedad amiloide sistémica, amiloidosis de tipo holandés, enfermedad de Niemann-Pick, demencia senil, esclerosis lateral amiotrófica, atrofia espinocerebelosa, síndrome de Tourette, ataxia de Friedrich, enfermedad de Machado-Joseph, demencia con cuerpos de Lewy, distonía, parálisis supranuclear progresiva o demencia frontotemporal. Sin embargo, las realizaciones no se limitan a las mismas y la enfermedad cerebral neurodegenerativa puede ser cualquier enfermedad causada por la agregación de beta-amiloide, la agregación de proteínas Tau y/o la fosforilación de proteínas Tau.
El término "tratamiento" utilizado en el presente documento se refiere al alivio o mejora de una afección patológica, la reducción de un sitio de una enfermedad, el retraso o ralentización de la progresión de la enfermedad, la mejora, el alivio o estabilización de un estado de enfermedad o síntoma, la recuperación parcial o total, la prolongación de la supervivencia, otros resultados beneficiosos del tratamiento, etc. El término "prevención" utilizado en el presente documento incluye todos los mecanismos y/o efectos que actúan sobre un sujeto que no tiene una enfermedad particular para evitar que la enfermedad se desarrolle, para retrasar la aparición de la enfermedad o para reducir la frecuencia de la enfermedad. La expresión "protección de las células neuronales craneales" utilizado en el presente documento incluye todos los mecanismos y/o efectos que inhiben el daño y/o la muerte de las células neuronales craneales.
Las sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico o alimentario pueden ser cualquier sal que se utilice habitualmente en el campo farmacéutico. En una realización, las sales farmacéuticamente aceptables pueden ser una o más seleccionadas entre sales formadas usando: ácidos inorgánicos no tóxicos tales como ácido clorhídrico, ácido brómico, ácido sulfónico, ácido amidosulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico y similares; o ácidos orgánicos, tales como ácido acético, ácido propiónico, ácido succínico, ácido glicólico, ácido esteárico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido paratoluenosulfónico, ácido metanosulfónico y similares, y, por ejemplo, puede ser clorhidrato. Sin embargo, las realizaciones no se limitan a los mismos.
La composición farmacéutica proporcionada en el presente documento se puede utilizar para
(1) sujetos (pacientes) que tienen un nivel más alto o un riesgo más alto de agregación de beta-amiloide que los individuos normales;
(2) sujetos (pacientes) que tienen un nivel más alto o un riesgo más alto de agregación de proteínas Tau que los individuos normales;
(3) sujetos (pacientes) que tienen un nivel más alto o un riesgo más alto de fosforilación de proteínas Tau que los individuos normales; y
(4) un sujeto (paciente) seleccionado entre el grupo que consiste en sujetos (pacientes) correspondientes a uno o más de (1) a (3).
El nivel de agregación de las proteínas beta-amiloide o Tau puede referirse a la cantidad (concentración) de los agregados beta-amiloide o los agregados de proteína Tau o la proporción de los agregados beta-amiloide o los agregados de proteína Tau al total de beta-amiloide o la proteína Tau total.
El nivel de fosforilación de la proteína Tau puede referirse a la cantidad (concentración) de proteína Tau fosforilada o la proporción de proteína Tau fosforilada a proteína Tau total.
"Normal" puede referirse a un sujeto que no tiene la "enfermedad cerebral neurodegenerativa" definida anteriormente o un tejido cerebral o células cerebrales (células neuronales craneales) que se separan y/o cultivan del sujeto, de entre sujetos que son homogéneos con el sujeto (paciente) al que se aplica la composición farmacéutica.
En una realización, la composición farmacéutica puede incluir adicionalmente, además del principio activo (rifapentina o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma), uno o más plastificantes seleccionados entre el grupo que consiste en un vehículo, un excipiente, un diluyente, una carga, un extensor, un agente humectante, un disgregante, un emulsionante (un tensioactivo), un lubricante, un edulcorante, un aroma, una suspensión, un conservante y similares, todos los cuales son farmacéuticamente aceptables. Los aditivos pueden ajustarse apropiadamente dependiendo de la forma de dosificación a la que se aplica la composición farmacéutica, y pueden incluir uno o más seleccionados de todos los aditivos que pueden usarse convencionalmente en el campo farmacéutico. En una realización, el vehículo farmacéuticamente aceptable puede ser uno o más seleccionados entre el grupo que consiste en lactosa, dextrosa, sacarosa, trehalosa, arginina, histidina, sorbitol, manitol, almidón, goma arábiga, fosfato de calcio, alginato, gelatina, silicato de calcio, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidona, celulosa, agua, jarabe, metilcelulosa, hidroxibenzoato de metilo, propilhidroxibenzoato, talco, estearato de magnesio, aceite mineral, etc., todos los cuales se utilizan convencionalmente para la formulación de fármacos. Sin embargo, las realizaciones no se limitan a los mismos.
Una cantidad eficaz del principio activo (rifapentina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable) o la composición farmacéutica se puede administrar por vía oral o parenteral. En el caso de administración parenteral, la administración puede realizarse mediante inyección intravenosa, inyección subcutánea, inyección intramuscular, inyección intraperitoneal, administración endotelial, administración intranasal, la administración pulmonar, administración rectal o administración local en los sitios de lesión. En el caso de la administración oral, la composición farmacéutica se puede preparar de tal manera que el principio activo se recubra para que no se degrade en el estómago, o se puede preparar en una formulación que se pueda proteger de la degradación en el estómago.
Además, la expresión "principio activo" utilizado en el presente documento se refiere a una sustancia bioactiva descrita en el presente documento (por ejemplo, rifamicina, triflupromazina o sus sales farmacéuticamente aceptables) para lograr las actividades farmacéuticas descritas en la presente memoria descriptiva (por ejemplo, el tratamiento de enfermedades cerebrales neurodegenerativas). Esto se distingue de la administración de rifamicina o triflupromazina sola o en combinación con otras sustancias o la administración adicional de las mismas con el fin de las actividades conocidas de rifamicina o triflupromazina (por ejemplo, actividad antibiótica, tratamiento de esquizofrenia) para el tratamiento de las enfermedades referidas en el presente documento. Esto es, la rifapentina se puede administrar como el único principio activo para los efectos terapéuticos directos de la enfermedad cerebral neurodegenerativa.
Como se describe en el presente documento, la expresión "cantidad farmacéuticamente eficaz" puede referirse a la cantidad o dosis de un principio activo (rifapentina o sales farmacéuticamente aceptables, etc.) que puede exhibir el efecto farmacológico deseado, en la composición farmacéutica. La cantidad efectiva o principio activo puede determinarse apropiadamente mediante factores, tal como un método de formulación, el modo de administración, la edad, el peso, el sexo, la afección patológica, la alimentación, el tiempo de administración, los intervalos de administración, la vía de administración, la velocidad de excreción y la sensibilidad de la reacción. Por ejemplo, la dosis diaria o única del principio activo puede ser de 0,0001 mg/kg a 1000 mg/kg (peso corporal), de 0,001 a 500 mg/kg, de 0,01 a 100 mg/kg, de 0,1 a 50 mg/kg o de 0,5 a 20 mg/kg, pero no de manera limitativa. La dosis diaria o única se puede preparar en una sola formulación en forma de dosificación unitaria, formulada en cantidades apropiadas o incorporada en un envase multidosis.
La cantidad del principio activo (es decir, rifapentina o sus sales farmacéuticamente aceptables) en la composición farmacéutica puede ajustarse apropiadamente según la forma de uso de la composición farmacéutica, la dolencia del paciente, el efecto objetivo y similares, y puede ser, por ejemplo, de 0,0001 % en peso a 99,9 % en peso, de 0,001 % en peso a 99,9 % en peso, de 0,01 % en peso a 99,9 % en peso, de 0,1 % en peso a 99,9 % en peso, de 0,5 % en peso a 99,9 % en peso, de 1 % en peso a 99,9 % en peso, de 5 % en peso a 99,9 % en peso, de 10 % en peso a 99,9 % en peso, de 15 % en peso a 99,9 % en peso, de 20 % en peso a 99,9 % en peso, de 25 % en peso a 99,9 % en peso, de 30 % en peso a 99,9 % en peso, de 35 % en peso a 99,9 % en peso, de 40 % en peso a 99,9 % en peso, de 45 % en peso a 99,9 % en peso, de 50 % en peso a 99,9 % en peso, de 55 % en peso a 99,9 % en peso, de 0,0001 % en peso a 90 % en peso, de 0,001 % en peso a 90 % en peso, de 0,01 % en peso a 90 % en peso, de 0,1 % en peso a 90 % en peso, de 0,5 % en peso a 90 % en peso, de 1 % en peso a 90 % en peso, de 5 % en peso a 90 % en peso, de 10 % en peso a 90 % en peso, de 15 % en peso a 90 % en peso, de 20 % en peso a 90 % en peso, de 25 % en peso a 90 % en peso, de 30 % en peso a 90 % en peso, de 35 % en peso a 90 % en peso, de 40 % en peso a 90 % en peso, de 45 % en peso a 90 % en peso, de 50 % en peso a 90 % en peso, de 55 % en peso a 90 % en peso, de 0,0001 % en peso a 70 % en peso, de 0,001 % en peso a 70 % en peso, de 0,01 % en peso a 70 % en peso, de 0,1 % en peso a 70 % en peso, de 0,5 % en peso a 70 % en peso, de 1 % en peso a 70 % en peso, de 5 % en peso a 70 % en peso, de 10 % en peso a 70 % en peso, de 15 % en peso a 70 % en peso, de 20 % en peso a 70 % en peso, de 25 % en peso a 70 % en peso, de 30 % en peso a 70 % en peso, de 35 % en peso a 70 % en peso, de 40 % en peso a 70 % en peso, de 45 % en peso a 70 % en peso, de 50 % en peso a 70 % en peso, de 55 % en peso a 70 % en peso, de 0,0001 % en peso a 50 % en peso, de 0,001 % en peso a 50 % en peso, de 0,01 % en peso a 50 % en peso, de 0,1 % en peso a 50 % en peso, de 0,5 % en peso a 50 % en peso, de 1 % en peso a 50 % en peso, de 5 % en peso a 50 % en peso, de 10 % en peso a 50 % en peso, de 15 % en peso a 50 % en peso, de 20 % en peso a 50 % en peso, de 25 % en peso a 50 % en peso, de 30 % en peso a 50 % en peso, de 35 % en peso a 50 % en peso, de 40 % en peso a 50 % en peso, de 45 % en peso a 50 % en peso, de 0,0001 % en peso a 40 % en peso, de 0,001 % en peso a 40 % en peso, de 0,01 % en peso a 40 % en peso, de 0,1 % en peso a 40 % en peso, de 0,5 % en peso a 40 % en peso, de 1 % en peso a 40 % en peso, de 5 % en peso a 40 % en peso, de 10 % en peso a 40 % en peso, de 15%en peso a 40%en peso, de 20%en peso a 40%en peso, de 25%en peso a 40%en peso, de 30%en peso a 40 % en peso o 35 % en peso a 40 % en peso, pero no de manera limitativa.
La composición farmacéutica puede estar en forma de soluciones, suspensiones, jarabes o emulsiones en medio acuoso u oleoso, o pueden formularse en forma de polvo, gránulos, comprimidos o cápsulas, etc., y para la formulación, la composición farmacéutica puede incluir además un dispersante o un estabilizante.
Los sujetos a los que se va a administrar la composición farmacéutica pueden ser primates, incluidos seres humanos, monos, etc., los roedores incluyen ratones, ratas, etc., mamíferos, incluidos perros, gatos, ganado, cerdos, ovejas, cabras, caballos, etc., o células y tejidos aislados de los mamíferos o cultivos de los mismos.
El alimento funcional saludable es un alimento preparado utilizando nutrientes o ingredientes que son útiles para el cuerpo humano (en lo sucesivo denominados "ingredientes funcionales"), que son fácilmente deficientes en las comidas diarias y mantienen la salud o previenen y/o mejoran ciertas enfermedades o síntomas, y el alimento funcional saludable no tiene restricciones específicas sobre la forma del producto final del mismo. Por ejemplo, el alimento funcional saludable puede seleccionarse entre el grupo que consiste en varios alimentos, composiciones de bebidas, aditivos alimentarios y similares, pero no de manera limitativa.
La cantidad del principio activo (es decir, rifapentina o sales farmacéuticamente aceptables de la misma) contenida en el alimento funcional saludable puede ajustarse adecuadamente dependiendo de la forma del alimento, uso deseado, etc. y no está particularmente limitado y puede ser, por ejemplo, basándose en el peso total del alimento, en el intervalo de 0,0001 % en peso a 99 % en peso, de 0,0001 % en peso a 95 % en peso, de 0,0001 % en peso a 90 % en peso, de 0,0001 % en peso a 80 % en peso, de 0,0001 % en peso a 50 % en peso, de 0,001 % en peso a 99 % en peso, de 0,001 % en peso a 95 % en peso, de 0,001 % en peso a 90 % en peso, de 0,001 % en peso a 80 % en peso, de 0,001 % en peso a 50 % en peso, de 0,01 % en peso a 99 % en peso, de 0,01 % en peso a 95 % en peso, de 0,01 % en peso a 90 % en peso, de 0,01 % en peso a 80 % en peso, de 0,01 % en peso a 50 % en peso, de 0,1 % en peso a 99 % en peso, de 0,1 % en peso a 95 % en peso, de 0,1 % en peso a 90 % en peso, de 0,1 % en peso a 80 % en peso, de 0,1 % en peso a 50 % en peso, de 0,1 % en peso a 30 % en peso, de 0,1 % en peso a 10 % en peso, de 1 % en peso a 99 % en peso, de 1 % en peso a 95 % en peso, de 1 % en peso a 90 % en peso, de 1 % en peso a 80 % en peso, de 1 % en peso a 50 % en peso, de 1 % en peso a 30 % en peso, de 1 % en peso a 10 % en peso, de 10 % en peso a 99 % en peso, de 10 % en peso a 95 % en peso, de 10 % en peso a 90 % en peso, de 10 % en peso a 80 % en peso, de 10 % en peso a 50 % en peso, de 10 % en peso a 30 % en peso, de 25 % en peso a 99 % en peso, de 25 % en peso a 95 % en peso, de 25 % en peso a 90 % en peso, de 25 % en peso a 80 % en peso, de 25 % en peso a 50 % en peso, de 25 % en peso a 30 % en peso, de 40 % en peso a 99 % en peso, de 40 % en peso a 95 % en peso, de 40 % en peso a 90 % en peso, de 40 % en peso a 80 % en peso, de 40 % en peso a 50 % en peso, de 50 % en peso a 99 % en peso, de 50 % en peso a 95 % en peso, de 50 % en peso a 90 % en peso, de 50 % en peso a 80 % en peso, de 60 % en peso a 99 % en peso, de 60 % en peso a 95 % en peso, de 60 % en peso a 90 % en peso o de 60 % en peso a 80 % en peso, pero no de manera limitativa.
El alimento funcional saludable puede incluir uno o más seleccionados del grupo que consiste en varios nutrientes, vitaminas, minerales (electrolitos), aromas, tales como aromas sintéticos o aromas naturales, colorantes, potenciadores (queso, chocolate, etc.), ácido péctico o sales del mismo, ácido algínico o sales del mismo, ácidos orgánicos, espesantes coloidales protectores, ajustadores del pH, estabilizantes, conservantes, glicerina, alcoholes, agentes de carbonatación utilizados en bebidas carbonatadas y similares. La proporción de dichos aditivos generalmente se selecciona de 0,001 a aproximadamente 20 partes en peso en base a 100 partes en peso del alimento funcional saludable total, pero no de manera limitativa.
Efectos ventajosos de la divulgación
De acuerdo con la tecnología proporcionada en el presente documento, debido al uso de rifamicina, triflupromazina o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como principio activo, el excelente efecto de inhibición y/o degradación de la agregación de beta-amiloide, se puede obtener la degradación (y/o inhibición de la agregación) de las proteínas Tau, y la inhibición de la hiperfosforilación de las proteínas Tau, y se puede obtener una excelente permeabilidad de la barrera hematoencefálica y, por lo tanto, el principio activo se puede aplicar con éxito al tejido cerebral. Así pues, la tecnología se puede aplicar de manera útil para la prevención y/o el tratamiento de varias enfermedades cerebrales neurodegenerativas relacionadas con la agregación de beta-amiloide, agregación de proteínas tau y/o proteínas tau hiperfosforiladas.
Breve descripción de los dibujos
La Figura 1 muestra el gráfico de resultados que muestra que la inhibición de la agregación de amiloide-beta (Ap) se identificó mediante el análisis de tioflavina T y, en particular, el efecto de inhibición de la agregación de beta-amiloide de la rifapentina (control: un grupo tratado con AP<1-42>50 pM; 2: un grupo tratado con AP<1-42>50 pM rifapentina 2<j>M).
La Figura 2 muestra el gráfico de resultados que muestra que la inhibición de la agregación de Ap se identificó mediante el análisis de tioflavina T y, en particular, el efecto de inhibición de la agregación de Ap del clorhidrato de triflupromazina (control: un grupo tratado con Api-4250 pM; 2: un grupo tratado con Api<-42>50 pM clorhidrato de triflupromazina 2 pM).
La Figura 3 muestra el gráfico de resultados que muestra que la desagregación de Ap se identificó mediante el análisis de tioflavina T y, en particular, el efecto de desagregación de Ap de la rifapentina (control: un grupo tratado con Ap i<-42>
25 pM; 50: un grupo tratado con Ap i<-42>25 pM rifapentina 50 pM; 500: un grupo tratado con Ap<1-42>25 pM rifapentina
500 pM).
La Figura 4 muestra el gráfico de resultados que muestra que la desagregación de Ap se identificó mediante el análisis de tioflavina T y, en particular, el efecto de desagregación de Ap del clorhidrato de triflupromazina (control: un grupo tratado con Api<-42>25 pM; 50: un grupo tratado con Ap i<-42>25 pM clorhidrato de triflupromazina 50 pM; 500: un grupo tratado con Api<-42>25 pM clorhidrato de triflupromazina 500 pM).
La Figura 5 muestra una imagen electroforética mediante la cual se confirmó la desagregación de Ap mediante SDS-PAGE basada en PICUP, que muestra el efecto de desagregación de Ap de la rifapentina.
La Figura 6 muestra una imagen electroforética mediante la cual se confirmó la desagregación de Ap mediante SDS-PAGE basada en PICUP, que muestra el efecto de desagregación de Ap del clorhidrato de triflupromazina.
La Figura 7 muestra el gráfico de resultados que muestra que la desagregación de Ap se identificó mediante análisis de tioflavina T y, en particular, el efecto de desagregación de Ap de los derivados basados en rifamicina, incluyendo rifapentina (rifampicina, rifabutina, rifamicina SV, rifamdina, rifamicina S, rifaximina y rifamicina B) (control: grupos tratados con Ap i<-42>50 pM se agregaron durante 3 días o 5 días para cada uno; Grupos de tratamiento: Se agregó Api-<42>50 pM durante 3 días tratamiento con derivados basados en rifamicina 50 pM seguido de dos días de reacción)
La Figura 8 muestra la imagen de tejido teñido mediante el cual se confirmó la degradación de placas de Ap en animales transgénicos con demencia de Alzheimer (APP/PSi TG) usando el anticuerpo 6Ei0, que muestra el efecto de agregación de Ap de la rifapentina.
La figura 9 muestra el gráfico de resultados en el que se confirmó la degradación de las placas de Ap en animales transgénicos con demencia de Alzheimer (APP/PSi TG) usando el anticuerpo 6Ei0, que muestra el efecto de desagregación de Ap de la rifapentina; el número total de placas de Ap en el hemisferio cerebral, el número de placas de Ap en el hipocampo del hemisferio cerebral y el número de placas de Ap en la corteza cerebral de los hemisferios cerebrales, en el grupo tratado con rifapentina, disminuyeron significativamente en comparación con los de los ratones
TG a los que se administró un vehículo.
La figura i0 muestra el gráfico de resultados en el que se confirmó la degradación de las placas de Ap en animales transgénicos con demencia de Alzheimer (APP/PSi TG) usando el anticuerpo 6Ei0, que muestra el efecto de desagregación de Ap de la rifapentina; el área total de placas Ap en el hemisferio cerebral, el área total de placas de Ap en el hipocampo del hemisferio cerebral, y el área total de placas de Ap en la corteza cerebral de los hemisferios cerebrales, en el grupo tratado con rifapentina, disminuyeron significativamente en comparación con los de los ratones
TG a los que se administró un vehículo.
La Figura i i muestra la imagen de tejido teñido mediante el cual se confirmó la degradación de placas de Ap en un modelo de animales transgénicos con Alzheimer(5X FAD) usando análisis con tioflavina S, que muestra el efecto de desagregación de Ap del clorhidrato de triflupromazina.
La Figura i2 muestra una imagen de electroforesis del modelo animal de Alzheimer transgénico (5X FAD) en el que se confirmaron las proteínas Tau fosforiladas mediante SDS-PAGE, que muestra el efecto de inhibición de la fosforilación de proteínas Tau del clorhidrato de triflupromazina.
La Figura i3 muestra los resultados de la prueba del laberinto en Y (evaluación del laberinto en forma de Y) 8 semanas después de que se administrara rifapentina a los animales transgénicos con demencia de Alzheimer (APP/PSi TG) y los resultados son valores de la alteración espontánea (%) que se refiere a la frecuencia relativa a la que el animal de experimentación entra secuencialmente en el laberinto, que muestra que el nivel de memoria mejora más cerca del grupo de control positivo, SV-Veh, en comparación con el grupo de control negativo, TG-Veh.
La Figura i4 muestra los resultados de la prueba de reconocimiento de objetos novedosos (prueba de reconocimiento de materiales novedosos) 8 semanas después de que se administrara rifapentina a los animales transgénicos con demencia de Alzheimer (APP/PSi TG) y los resultados son el índice de preferencia que se refiere a la frecuencia relativa a la que el animal de experimentación busca un objeto novedoso, que muestra que la memoria aumenta más cerca del grupo de control positivo, SV-Veh, en comparación con el grupo de control negativo, TG-Veh.
Modo de la divulgación
En lo sucesivo en el presente documento, la presente divulgación se describirá con más detalle con referencia a los
i4
ejemplos, que son meramente ilustrativos y no pretenden limitar el alcance de la presente divulgación. Los ejemplos relacionados con la rifapentina son parte de la invención reivindicada; los otros ejemplos son para referencia.
Ejemplo 1: Prueba de inhibición de la agregación de Ap
1.1 Preparación de muestra
La rifapentina se disolvió a una concentración de 5 mM en dimetilsulfóxido (DMSO). A continuación, el compuesto se usó diluido usando DMSO al 6 % (en DW) y se usó.
Se disolvió clorhidrato de triflupromazina (la triflupromazina utilizada en todos los ejemplos siguientes es clorhidrato de triflupromazina) hasta una concentración de 5 mM en DMSO. A continuación, el compuesto se usó diluido con DMSO al 6 % (en DW).
La solución de Ap se preparó disolviendo monómeros de Ap1-42 humanos (UniProtKB-P05067, a.a.672 - 713) a una concentración de 10 mM en DMSO. Después de ello, la mezcla se diluyó a 100 uM usando DW y se almacenó en hielo.
Por otro lado,, se disolvió tioflavina-T (Sigma-Aldrich) a la concentración de 5 mM en tampón de glicina 50 mM (pH 8,5). A continuación, la solución resultante se diluyó a la concentración de 50 pM usando tampón de glicina 50 mM (pH 8,5) y se almacenó en la oscuridad mientras se bloqueaba la luz.
1.2 Medición del efecto de inhibición de la agregación de Ap
La solución de Ap preparada anteriormente se colocó a la concentración de 50 pM en tubos de microcentrífuga de 1,5 ml, cada uno de los cuales se trató con rifapentina o triflupromazina 2 pM, seguido de reacción a 37 °C durante 72 horas.
Se añadieron 25 pl de la solución de reacción en la que se completó la reacción a cada pocillo de una placa de ensayo de fluorescencia de 96 pocillos y se añadieron a cada pocillo 75 pl de la solución de tioflavina-T preparada anteriormente. Después de reaccionar durante 5 minutos en la oscuridad a temperatura ambiente, los valores de fluorescencia se midieron con una excitación de 450 nm y una emisión de 485 nm utilizando un lector de microplacas multimodo.
El valor de fluorescencia del grupo (control) tratado con Ap solo y agregado durante 72 horas se consideró como 100 %, y los valores de fluorescencia medidos se expresaron como un valor relativo a los mismos, y los resultados de los mismos se muestran en la figura 1 y la figura 2.
La Figura 1 muestra el efecto de inhibición de la agregación de Ap de la rifapentina (control: un grupo tratado con Ap<1>-<42>50 pM; 2: un grupo tratado con AP<1-42>50 pM rifapentina 2 pM), y cuando se trató con rifapentina (2 pM), el grado de agregación de Ap fue de aproximadamente 40 % o menos en comparación con el control. En consecuencia, se puede observar que la rifapentina mostraba un efecto de inhibición de la agregación de beta-amiloide de aproximadamente un 60 % o más en comparación con el control.
La Figura 2 muestra el efecto de inhibición de la agregación de Ap de la triflupromazina (control: un grupo tratado con Ap<1-42>50 pM; 2: un grupo tratado con Ap<1-42>50 pM triflupromazina 2 pM) y cuando se trató con triflupromazina (2 pM), el grado de agregación de Ap fue de aproximadamente un 70 % o menos en comparación con el control. En consecuencia, se puede observar que la triflupromazina mostraba un efecto de inhibición de la agregación de betaamiloide de aproximadamente un 30 % o más en comparación con el control.
Además, realizando la misma prueba que se ha descrito anteriormente para 20 pM de varios compuestos usando Ap 50 pM, se midió el grado de agregación de Ap y el resultado se expresa como valor relativo para el control (100 %). La Tabla 1 muestra:
Tabla 1
continuación
Como se muestra en la tabla 1, se puede observar que la actividad de inhibición de la agregación de Ap de la rifapentina y la triflupromazina es significativamente mayor que la de otros compuestos.
Ejemplo 2: Prueba de desagregación de Ap
2.1. Preparación de muestras
La rifapentina se disolvió a una concentración de 5 mM en dimetilsulfóxido (DMSO). A continuación, el compuesto se usó diluido con DMSO al 6 % (en DW).
Se disolvió clorhidrato de triflupromazina a la concentración de 5 mM en DMSO. A continuación, el compuesto se usó<diluido con DMSO al 6 % (en>D<w>).
La solución de Ap se preparó disolviendo monómeros de Ap 1-42 a la concentración de 10 mM en DMSO. Después de ello, la mezcla se diluyó a 100 pM usando DW y se almacenó en hielo.
Por otro lado,, se disolvió tioflavina-T a la concentración de 5 mM en tampón de glicina 50 mM (pH 8,5). A continuación, la solución resultante se diluyó a la concentración de 50 pM usando tampón de glicina 50 mM (pH 8,5) y se almacenó en la oscuridad mientras se bloqueaba la luz.
2.2. Prueba de desagregación de Ap mediante análisis de tioflavina T
La solución de Ap preparada en el Ejemplo 2.1. se colocó en tubos de microcentrífuga de 1,5 ml, cada uno con 25 pM de la solución de Ap y luego reaccionaron a 37 °C durante 72 horas.
Cada tubo de microcentrífuga de 1,5 ml se trató con rifapentina y triflupromazina a diferentes concentraciones de 50 pM o 500 pM, seguido de reacción a 37 °C durante 72 horas.
Se añadieron 25 pl de la solución de reacción en la que se completó la reacción a cada pocillo de una placa de ensayo de fluorescencia de 96 pocillos y se añadieron a cada pocillo 75 pl de la solución de tioflavina-T preparada anteriormente. Después de reaccionar durante 5 minutos en la oscuridad a temperatura ambiente, los valores de fluorescencia se midieron con una excitación de 450 nm y una emisión de 485 nm utilizando un lector de microplacas multimodo.
El valor de fluorescencia del grupo (control) tratado con Ap solo y agregado durante 72 horas se consideró como 100 %, y los valores de fluorescencia medidos se expresaron como un valor relativo a los mismos, y los resultados de los mismos se muestran en la figura 3 y la figura 4.
La Figura 3 muestra el efecto de la desagregación de Ap de la rifapentina (control: un grupo tratado con Ap-M<2>25 pM; 50: un grupo tratado con Ap-M<2>25 pM rifapentina 50 pM; y 500: un grupo tratado con Ap-M<2>25 pM rifapentina 500 pM), y cuando se trata con rifapentina, el grado de agregación de Ap fue de aproximadamente un 10 % o menos (cuando se trató con rifapentina 50 pM) o aproximadamente un 1 % o menos (cuando se trató con rifapentina 500 pM) en comparación con el control. En consecuencia, se puede observar que la rifapentina muestra un efecto de desagregación de beta-amiloide de aproximadamente un 90 % o más (cuando se trata con rifapentina 50 pM) o aproximadamente un 99 % o más (cuando se trató con un tratamiento de 500 pM). Esto significa que la rifapentina tiene un efecto de desagregación dependiente de la concentración.
La Figura 4 muestra el efecto de la desagregación de Ap de la triflupromazina (control: un grupo tratado con Ap-M<2>25 pM; 50: un grupo tratado con Ap-M<2>25 pM triflupromazina 50 pM; y 500: un grupo tratado con Ap-M<2>25 pM triflupromazina 500 pM), y cuando se trató con triflupromazina, el grado de agregación de Ap fue, en comparación con el control, de aproximadamente un 65 % o menos (cuando se trató con triflupromazina 50 pM) o de aproximadamente un 25 % o menos (cuando se trató con triflupromazina 500 pM). En consecuencia, se puede observar que la triflupromazina muestra un efecto de desagregación de beta-amiloide de aproximadamente un 35 % o más (cuando se trató con triflupromazina 50 pM) o aproximadamente un 75 % o más (cuando se trató con un triflupromazina de 500 pM), en comparación con el control. Esto significa que la triflupromazina tiene un efecto de desagregación dependiente de la concentración.
2.3. Prueba de desagregación de Ap mediante análisis SDS-PAGE
Para confirmar la desagregación de Ap en la muestra preparada en el Ejemplo 2.1, el análisis SDS-PAGE se realizó como sigue.
Con detalle, la reserva de persulfato de amonio (APS; 200 mM) y tris(2,2'-bipiridil)diclororutenio (II) hexahidrato (Ru; 10 mM) se preparó un tubo ámbar (Axygen, MCT-150-X) usando un tampón de entrecruzamiento fotoinducido de proteínas no modificadas (PICUP) (fosfato de sodio 0,1 M (pH 7,4)). La reserva se diluyó 10 veces en tampón PICUP (APS: 20 mM/Ru: 1 mM). Se dispensaron 10 pl de cada muestra preparada en el Ejemplo 2.1 en el fondo de un tubo de 0,5 ml (Axygen, PCR-05-C). Se dispensó 1 pl de APS (20 mM) en la pared del tubo y 1 pl de Ru (1 mM) en la tapa del tubo. En este momento, para evitar que la reacción prosiga, la muestra no se mezcló con APS y Ru. Después de cerrar la tapa del tubo y girar hacia abajo con una centrífuga, el tubo se retiró de la centrífuga y se expuso a la luz 3 veces por segundo usando una lámpara incandescente. Se añadieron a cada tubo 3 pl de tampón de muestra reductor 5X (con 5 % de p-mercaptoetanol) a cada tubo. Las muestras se calentaron a 95-100 °C. durante 5 minutos y luego se enfriaron en hielo.
A continuación, las muestras tratadas con PICUP se cargaron en gel de tris/glicina al 4-20 % (p/v) y se sometieron a electroforesis a 100 V durante 1 hora y 30 minutos. Tras la electroforesis, el gel se separó y se confirmó mediante tinción con plata.
Los resultados de electroforesis obtenidos se muestran en las figuras 5 y 6. Excepto por el carril marcador de tamaño más a la izquierda en las figuras 5 y 6, el primer carril (agregados de Ap (-) compuesto (-)) muestra el resultado de la muestra de Ap<42>solo el día 0 (0 días después del tratamiento con Ap 25 pM, no se produjo agregación de betaamiloide), el segundo carril (agregados de Ap (+) compuesto (-)) muestra el resultado de la muestra de Ap<42>solo 3 3 días (tratamiento con Ap 25 pM e incubación durante 3 días para inducir la agregación de beta-amiloide e incubación durante 3 días), y el tercer carril (agregados Ap (+) compuesto 50 pM) y el cuarto carril (agregados Ap (+) compuesto 500 pM ) muestran el efecto de desagregación de Ap de las muestras de Ap<42>+ compuestos (50 pM o 500 pM) 3 3 días (tratamiento con Ap 25 pM, incubación durante 3 días para inducir la agregación de beta amiloide, tratamiento con rifapentina o triflupromazina a una concentración de 50 pM o 500 pM e incubación adicional durante 3 días). Como se muestra en la FIG. 5 y la FIG. 6, se puede observar que a medida que aumenta la concentración de rifapentina o triflupromazina, las bandas de dímeros y fibrillas de Ap agregados (de aproximadamente 10 kDa) están borrosas. Estos resultados muestran que la rifapentina o la triflupromazina tienen una actividad de desagregación de Ap dependiente de la concentración.
Ejemplo 3: Prueba de desagregación de Ap de derivados basados en rifamicina
3.1. Preparación de muestras
Los compuestos (rifapentina, rifampicina, rifabutina, rifamicina SV, rifamicina B, rifamicina S, rifaximina, rifamdina; derivados de rifamicina descritos anteriormente) se disolvieron a la concentración de 5 mM en DMSO. A continuación, el compuesto se usó diluido con DMSO al 6 % (en DW).
La solución de Ap se preparó disolviendo monómeros de Ap 1-42 a la concentración de 10 mM en DMSO. Después de ello, la mezcla se diluyó a 100 pM usando DW y se almacenó en hielo.
Por otro lado, se disolvió tioflavina-T a la concentración de 5 mM en tampón de glicina 50 mM (pH 8,5). A continuación, la solución resultante se diluyó a la concentración de 50 pM usando tampón de glicina 50 mM (pH 8,5) y se almacenó en la oscuridad mientras se bloqueaba la luz.
3.2. Prueba de desagregación de Ap mediante análisis de tioflavina T
La solución de Ap preparada en el Ejemplo 3.1. se colocó en tubos de microcentrífuga de 1,5 ml, cada uno con 50 pM de la solución de Ap y luego reaccionaron a 37 °C durante 72 horas.
Cada tubo de microcentrífuga de 1,5 ml se trató con derivados a base de rifapentina 50 pM, seguido de reacción a 37 °C durante 48 horas.
Se añadieron 25 pl de la solución de reacción en la que se completó la reacción a cada pocillo de una placa de ensayo de fluorescencia de 96 pocillos y se añadieron a cada pocillo 75 pl de la solución de tioflavina-T preparada anteriormente. Después de reaccionar durante 5 minutos en la oscuridad a temperatura ambiente, los valores de fluorescencia se midieron con una excitación de 450 nm y una emisión de 485 nm utilizando un lector de microplacas multimodo.
El valor de fluorescencia del grupo (control) tratado con Ap solo y agregado durante 72 horas tratando solo Ap con se consideró como 100 %, y los valores de fluorescencia medidos se expresaron como un valor relativo a los mismos, y los resultados de los mismos se muestran en la figura 7.
La Figura 7 muestra el efecto de desagregación de Ap de derivados basados en rifamicina, incluyendo rifapentina (control: un grupo tratado con AP<1-42>50 pM y agregados por 3 o 5 días; grupos de ensayo: Api<-42>50 pM se agregó durante 3 días y se trató con derivados a base de rifamicina 50 pM, seguido de 2 días de reacción), en donde el grado de agregación de Ap durante el tratamiento con rifapentina fue de aproximadamente un 10 % o menos en comparación con el control, es decir, la rifapentina exhibió un efecto de desagregación de Ap de alrededor del 90 % o más en comparación con el control. En otras palabras, se puede decir que la rifapentina muestra mejores efectos de desagregación de Ap que los de otros derivados (cuando se trata con rifampicina, ripabutina, rifamicina SV, rifamdina, etc. El efecto de desagregación de Ap fue de aproximadamente un 50 % en comparación con el control, cuando se trató con rifamicina S, el efecto de desagregación de Ap fue de 25 % de desagregación en comparación con el control y cuando se trató con rifaximina y rifamicina B, no se produjo una desagregación significativa en comparación con el control).
Ejemplo 4: Confirmación del efecto de reducción de la placa de amiloide obtenido con rifapentina administrada por vía oral en ratones APP/PS1 TG
4.1. Preparación del modelo de ratón APP/PS1 TG
Los ratones transgénicos (APP/PS1 TG; modelo animal de la enfermedad de Alzheimer; B6C3-Tg(APPswe,PSEN1dE)85Dbo/Mmjax) y los ratones de tipo salvaje (SV) se obtuvieron de Jackson Laboratory (Bar Harbor, Maine, Estados Unidos). Los ratones APP/PS1 TG se cruzaron con ratones de tipo salvaje y se mantuvieron como hemicigotos dobles. Todos los genotipos se confirmaron mediante análisis de PCR usando ADN de la cola de acuerdo con las condiciones estándar de<p>C<r>del Laboratorio Jackson. Cada ratón se alojó en una jaula de plástico en la jaula del animal y la temperatura de la jaula de plástico se mantuvo a 21 ± 1 °C en ciclos de luz alternos de 12 horas, y los ratones se alimentaron libremente con alimento y agua.
4.2. Tratamiento con rifapentina en un modelo de ratón
Se administró rifapentina por vía oral a ratones APP/PS1 TG de 10 meses de edad una vez por semana (TG, RP 200 CS) a una concentración de 200 mg/kg o una vez cada dos días a una concentración de 50 mg/kg (TG, RP 50 en días alternos), durante 9 semanas. El control recibió la misma cantidad de vehículo (Veh) (0,5 % de MC en DW). La rifapentina se disolvió en 10 ml/kg (v/p) del medio según el peso corporal del ratón y luego se administró a través de zonde para administración oral.
4.3. Preparación de muestra de tejido cerebral
Los ratones se anestesiaron con avertina al 2 % (20 mg/g, i.p.). Se perfundió a los ratones con NaCl al 0,9 % y se extirparon los cerebros de los mismos. Los hemicerebros se fijaron durante la noche a 4 °C en paraformaldehído al 4 % (pH 7,4). Los cerebros fijados con paraformaldehído se deshidrataron para preparar bloques de tejido usando parafina.
4.4. Tinción inmunohistoquímica
Los tejidos cerebrales inmovilizados en parafina preparados en el Ejemplo 4.3 se prepararon en secciones con un espesor de 5 a 6 pm, y se les realizó una tinción inmunohistoquímica. Las secciones de tejido se trataron con desparafina, se rehidrataron y peróxido de hidrógeno al 1 % para eliminar la peroxidasa endógena, seguido de 60 minutos de bloqueo con suero normal de cabra al 10 % (v/v) para inhibir las reacciones inespecíficas. A continuación, las placas se tiñeron usando el anticuerpo Ap (durante la noche, 4 °C). Después de lavar con PBS al día siguiente, el anticuerpo secundario se tiñó usando el kit ABC (kit Vectastin ABC, Vector Laboratories) y luego se observó bajo un microscopio. Como se muestra en la imagen de tinción de las placas de Ap de la Figura 8 y el gráfico de las figuras 9 y 10, en comparación con los ratones de control (TG-Veh), el número de placas y el área total de las placas se redujeron en los ratones tratados con rifapentina.
Ejemplo 5: Reducción de placas amiloides y Tau fosforilada mediante la administración oral de triflupromazina en ratones 5X FAD
5.1. Preparación del modelo de ratón 5X FAD
Los ratones transgénicos (5XFAD; modelo de la enfermedad de Alzheimer en animales; B6SJL-Tg (APPSwFILon, PSEN1*M146L*L286V)6799Vas/Mmjax)) y ratones de tipo salvaje se obtuvieron de Jackson Laboratory (Bar Harbor, Maine, Estados Unidos). Los ratones 5X FAD se cruzaron con ratones de tipo salvaje y se mantuvieron como hemicigotos dobles. Todos los genotipos se confirmaron mediante análisis de PCR usando<a>D<n>de la cola de acuerdo con las condiciones estándar de PCR del Laboratorio Jackson. Cuatro de seis ratones se alojaron en una jaula de plástico en la jaula del animal y la temperatura de la jaula de plástico se mantuvo a 21 ± 1 °C en ciclos de luz alternos de 12 horas, y los ratones se alimentaron libremente con alimento y agua.
5.2. Tratamiento con triflupromazina en un modelo de ratón
Se trataron por vía oral ratones 5X FAD de siete meses de edad con 50 mg/kg de triflupromazina una vez cada dos días durante 3 semanas. El control recibió la misma cantidad de vehículo (1 % (p/v) de DMSO en PBS). La rifapentina se disolvió en 10 ml/kg (v/p) del vehículo según el peso corporal del ratón y luego se administró a través de zonde para administración oral.
5.3. Preparación de muestra de tejido cerebral
Los ratones se anestesiaron con avertina al 2 % (p/v) (20 mg/g, i.p.). Se perfundió a los ratones con NaCl al 0,9 % (p/v) y se extirparon los cerebros de los mismos. Los hemicerebros se fijaron durante la noche a 4 °C en paraformaldehído al 4 % (p/v) (pH 7,4). Para la crioconservación, los cerebros se sumergieron en sacarosa al 30 % (p/v) durante 48 horas. Los otros hemicerebros se diseccionaron en regiones corticales e hipocampales y se homogeneizaron en hielo durante 30 minutos en tampón de lisis (Tris-HCl 10 mM, EDTA 5 mM en sacarosa 320 mM, pH 7,4) que contenía 1 cóctel de inhibidores de proteasa. La muestra se centrifugó a 13500 rpm durante 30 minutos a 4 °C. La concentración de lisado se midió usando el kit de ensayo de proteínas BCA (thermoFisher, n.° cat. 232250) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. La absorbancia se leyó a 560 nm.
5.4. Tinción inmunohistoquímica y tinción ThS
Para teñir el cerebro congelado con tioflavina S (ThS), el cerebro se cortó a un grosor de 35 um para crear secciones de tejido usando un criostato (Leica CM 1800) y luego se tiñeron las placas de Ap. La tinción con ThS se realizó durante 7 minutos a una concentración de 500 uM en etanol (50 % (v/v)). A continuación, las secciones se enjuagaron secuencialmente en etanol al 100, 90 y 70% (v/v) durante 10 segundos y se colocaron en PBS. Las imágenes se obtuvieron utilizando un microscopio de fluorescencia Leica DM2500. Como se muestra en la Figura 11, comparar los ratones de control (vehículo, DMSo al 1 % (p/v) en PBS) con los ratones a los que se administró triflupromazina de acuerdo con la presente divulgación, el número de placas y las áreas totales del área de las placas se redujeron en los ratones a los que se administró triflupromazina.
5.5. Método de ensayo de transferencia Western
Los cambios en Tau, una de las principales causas de la demencia de Alzheimer y la enfermedad de Parkinson, junto con placas de Ap, se confirmaron mediante análisis de transferencia Western. Las muestras de los tejidos preparados se separaron mediante SDS-PAGE y se transfirieron a una membrana de PVDF. La membrana se trató durante la noche a 4 °C utilizando el anticuerpo primario. Como anticuerpo primario, se usaron anticuerpos capaces de detectar Tau Total (T-Tau) y Tau fosforilada (P-Tau) y la detección se realizó usando un anticuerpo secundario conjugado con peroxidasa de rábano picante (HRP). El desarrollo de la mancha se realizó con un sustrato Clarity Western ECL (Bio-Rad) de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
Los resultados de la transferencia Western obtenidos se muestran en la Figura 12. Como se muestra en la Figura 12, se compararon los ratones de control (Tg veh, 1 % (p/v) de DMSO en PBS) y los ratones a los que se administró triflupromazina (Tg TFP, n=4) y se descubrió que, en el caso de los ratones tratados con triflupromazina, T-Tau (Total Tau) y P-Tau (Tau fosforilada) se redujeron tanto en la corteza como en el tejido del hipocampo. Estos resultados muestran que la triflupromazina reduce los niveles totales de proteína Tau e inhibe la fosforilación de proteínas Tau en animales transgénicos (Tg) que son el modelo animal de la enfermedad de Alzheimer. Por otro lado, en ratones de tipo salvaje (SV), no se observó una disminución de Tau total (T-Tau) y Tau fosforilada (P-Tau).
Ejemplo 6: Confirmación del aumento del efecto de la función cognitiva obtenido por rifapentina administrada por vía oral en ratones APP/PS1 TG
6.1. Preparación del modelo de ratón APP/PS1 TG
Los ratones transgénicos (APP/PS1 TG; modelo animal de la enfermedad de Alzheimer; B6C3-Tg(APPswe, PSEN1dE)85Dbo/Mmjax) y ratones de tipo salvaje se obtuvieron de Jackson Laboratory (Bar Harbor, Maine, Estados Unidos). Los ratones APP/PS1 TG se cruzaron con ratones de tipo salvaje y se mantuvieron como hemicigotos dobles. Todos los genotipos se confirmaron mediante análisis de PCR usando ADN de la cola de acuerdo con las condiciones estándar de PCR del Laboratorio Jackson. Cada ratón se alojó en una jaula de plástico en la jaula del animal y la temperatura de la jaula de plástico se mantuvo a 21 ± 1 °C en ciclos de luz alternos de 12 horas, y los ratones se alimentaron libremente con alimento y agua.
6.2. Tratamiento con rifapentina en un modelo de ratón
La rifapentina se administró por vía oral a ratones APP/PS1 TG de 10 meses de edad una vez por semana a una concentración de 200 mg/kg o una vez cada dos días a una concentración de 50 mg/kg, durante 9 semanas. El grupo control recibió la misma cantidad de vehículo (0,5%de MC en DW). La rifapentina se disolvió en 10 ml/kg (v/p) del medio según el peso corporal del ratón y luego se administró a través de zonde para administración oral.
6.3. Ensayo de laberinto en Y
La prueba del laberinto en Y se realizó usando una estructura de laberinto hecha colocando los mismos tres brazos de 40 cm de longitud (15 cm de altura de la pared) en un ángulo de 120 grados. Este experimento fue un experimento de comportamiento que utilizó los hábitos de búsqueda instintivos de los roedores y se centró en la posibilidad de explorar nuevas áreas. Cuanto más recordaba el animal de prueba el último brazo que buscaba y no entraba en el mismo brazo, mayor era su memoria. El tiempo de búsqueda fue de 8 minutos por sujeto, y el resultado final se expresó como valor de alteración espontánea (%). El valor de alteración espontánea (%) se calculó mediante la siguiente fórmula.
[Ecuación]
Alteración espontánea (%) = El número de triplete/(entrada total del brazo-2)
Los patrones de comportamiento se analizaron utilizando el software SMART VIDEO TRACKING (Panlab, EE. UU.). Todos los datos obtenidos en los experimentos se expresaron como media ± error estándar medio (SEM), y el grupo al que se le aplicó el fármaco se comparó con el grupo sin fármaco, que era un control, mediante el uso de la prueba t de Student. Como se muestra en la Figura 13, a la 8a semana después de administrar rifapentina a animales transgénicos con demencia de Alzheimer (APP PS1 TG), se realizó la prueba del laberinto en Y y se descubrió que la alteración espontánea (%) valor, que es una frecuencia relativa de entrar en el laberinto secuencialmente mediante la identificación de pistas alrededor, se acercó más al grupo de control positivo (SV-Veh) en comparación con el grupo de control negativo (TG-Veh).
6.4. Prueba de reconocimiento de objetos novedosos
La nueva prueba de reconocimiento de objetos se realizó para evaluar la memoria utilizando dos objetos diferentes en una jaula acrílica de 40 cm x 40 cm. Después de acostumbrar el interior de la jaula de acrílico, se colocaron dos objetos en una posición constante y se permitió a los sujetos reconocer los objetos libremente, y luego se midió el tiempo de búsqueda de cada objeto. Se dio un retraso de 24 horas para cada sujeto y solo se cambió un objeto por otro en el mismo lugar. En este momento, cuando el objeto modificado se reconoció como un objeto nuevo y, por lo tanto, se produjo el tiempo de búsqueda más largo, la memoria correspondiente se evaluó como una buena memoria. Cuando el sujeto no recuerda objetos que se colocan 24 horas antes, el sujeto no puede distinguir entre objetos nuevos y viejos, y puede buscar ambos objetos de manera uniforme. Se permitió un total de 10 minutos para explorar libremente, y el resultado se expresó como un índice de preferencia (tiempo de exploración de objetos nuevos/tiempo de exploración total). El análisis se realizó con el softWare SMART VIDEO TRACKING (Panlab, EE. UU.). Todos los datos obtenidos en los experimentos se expresaron como media ± error estándar medio (SEM), y el grupo al que se le aplicó el fármaco se comparó con el grupo sin fármaco, que era un control, mediante el uso de una prueba t de Student. Como se muestra en la Figura 14, los resultados de la prueba de reconocimiento de objetos novedosos realizada 8 semanas después de la administración de rifapentina al animal transgénico con demencia de Alzheimer (APP/PS1 TG) muestran que el valor que indica un índice de preferencia corresponde a la frecuencia con la que un animal busca nuevos objetos, se incrementó y el nivel de memoria se incrementó más cerca del grupo de control positivo (SV-Veh) que del grupo de control negativo (TG-Veh).

Claims (8)

REIVINDICACIONES
1. Una composición farmacéutica para su uso en la prevención o el tratamiento de enfermedades cerebrales neurodegenerativas, comprendiendo la composición farmacéutica rifapentina o sales farmacéuticamente aceptables de la misma, como principio activo.
2. La composición farmacéutica para su uso de la reivindicación 1, en donde la composición farmacéutica tiene la acción de desagregar las placas de beta-amiloide.
3. La composición farmacéutica para su uso de la reivindicación 1, en donde la composición farmacéutica se administra a un sujeto seleccionado entre:
(1) pacientes que tienen un nivel más alto o un riesgo más alto de agregación de beta amiloide que los individuos normales que no tienen una enfermedad cerebral neurodegenerativa;
(2) pacientes que tienen un nivel más alto o un riesgo más alto de agregación de proteína Tau que los individuos normales que no tienen enfermedad cerebral neurodegenerativa;
(3) pacientes que tienen un nivel más alto o un riesgo más alto de fosforilación de la proteína Tau que los individuos normales que no tienen una enfermedad cerebral neurodegenerativa; y
(4) un paciente que corresponde a uno o más de (1) a (3) anteriores.
4. La composición farmacéutica para su uso de la reivindicación 1, en donde la enfermedad cerebral neurodegenerativa se selecciona entre enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, deterioro cognitivo leve, angiopatía amiloidea cerebral, síndrome de Down, accidente cerebrovascular amiloide, enfermedad amiloide sistémica, amiloidosis de tipo holandés, enfermedad de Niemann-Pick, demencia senil, esclerosis lateral amiotrófica, atrofia espinocerebelosa, síndrome de Tourette, ataxia de Friedrich, enfermedad de Machado-Joseph, demencia con cuerpos de Lewy, distonía, parálisis supranuclear progresiva y demencia frontotemporal.
5. Un alimento funcional saludable para su uso en la prevención o el tratamiento de enfermedades cerebrales neurodegenerativas, comprendiendo el alimento funcional saludable rifapentina.
6. El alimento funcional saludable para su uso de la reivindicación 5, en donde el alimento funcional saludable tiene la acción de disgregar las placas de beta-amiloide.
7. Un alimento funcional saludable para su uso en la prevención o mejora de los trastornos cognitivos o para el uso terapéutico en la mejora de la memoria, comprendiendo el alimento funcional saludable rifapentina.
8. El alimento funcional saludable para su uso de la reivindicación 7, en donde el alimento funcional saludable tiene la acción de disgregar las placas de beta-amiloide.
ES19889734T 2018-11-30 2019-11-28 Composición terapéutica que comprende rifapentina para su uso en el tratamiento de la neuropatía craneal amiloide Active ES2962814T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20180151835 2018-11-30
KR20180160289 2018-12-12
PCT/KR2019/016599 WO2020111824A1 (ko) 2018-11-30 2019-11-28 아밀로이드성 뇌신경질환 치료용 조성물 및 치료 방법

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2962814T3 true ES2962814T3 (es) 2024-03-21

Family

ID=68847847

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES19889734T Active ES2962814T3 (es) 2018-11-30 2019-11-28 Composición terapéutica que comprende rifapentina para su uso en el tratamiento de la neuropatía craneal amiloide

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20200330474A1 (es)
EP (1) EP3888655B1 (es)
JP (1) JP7170875B2 (es)
KR (3) KR102051624B1 (es)
CN (1) CN113164471A (es)
ES (1) ES2962814T3 (es)
WO (1) WO2020111824A1 (es)

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995011248A1 (en) * 1993-10-20 1995-04-27 Teijin Limited AMYLOID β-PROTEIN AGGLUTINATION AND/OR DEPOSITION INHIBITOR
US7820652B2 (en) * 2003-09-24 2010-10-26 Activbiotics Pharma, Llc Regimen for the administration of rifamycin-class antibiotics
CN1775214A (zh) * 2005-11-18 2006-05-24 武汉大学 利福喷丁、利福平、利福布丁或利福定注射剂及其制备方法
TW200812993A (en) * 2006-05-02 2008-03-16 Lundbeck & Co As H New uses of escitalopram
EP3006023B1 (en) * 2009-01-20 2019-06-26 Los Angeles Biomedical Research Institute at Harbor-UCLA Medical Center Sorbic acid and derivatives thereof to enhance the activity of a neuropharmaceutical
US10434116B2 (en) * 2014-04-07 2019-10-08 University Of Maryland, Baltimore Methods of treating coronavirus infection
EP3316883A4 (en) * 2015-06-30 2019-06-12 University of South Florida INHIBITORS OF THE FKBP51 PROTEIN FROM A HIGH-BY-STEP MEDICAMENT SCREENING AND METHOD OF USE THEREOF
US11123311B2 (en) * 2016-01-05 2021-09-21 The Regents Of The University Of California Methods of treating mental disorders
JP7146281B2 (ja) * 2017-07-06 2022-10-04 株式会社メディラボRfp 経鼻投与用医薬組成物

Also Published As

Publication number Publication date
EP3888655A1 (en) 2021-10-06
JP2022515019A (ja) 2022-02-17
WO2020111824A1 (ko) 2020-06-04
EP3888655C0 (en) 2023-08-30
JP7170875B2 (ja) 2022-11-14
EP3888655A4 (en) 2022-03-16
KR102081785B1 (ko) 2020-02-27
KR102651174B1 (ko) 2024-03-26
US20200330474A1 (en) 2020-10-22
EP3888655B1 (en) 2023-08-30
CN113164471A (zh) 2021-07-23
KR20200066268A (ko) 2020-06-09
KR102051624B1 (ko) 2019-12-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
O'Leary et al. Phenothiazine-mediated rescue of cognition in tau transgenic mice requires neuroprotection and reduced soluble tau burden
ES2773480T3 (es) Composiciones y métodos para tratar la enfermedad de Alzheimer
Frederick et al. Rapamycin ester analog CCI-779/Temsirolimus alleviates tau pathology and improves motor deficit in mutant tau transgenic mice
KR20110011669A (ko) Ｒｈｏ 키나제를 억제하고 학습 및 기억력을 개선하기 위한 화합물
BR112018009281B1 (pt) Composições para tratar atrofia muscular espinhal e seu uso
CN105939717B (zh) 治疗和预防同种抗体驱动的慢性移植物抗宿主病的方法
ES2683184T3 (es) Inhibidores de GLyT1 para su uso en el tratamiento de trastornos hemáticos
ES2962814T3 (es) Composición terapéutica que comprende rifapentina para su uso en el tratamiento de la neuropatía craneal amiloide
Gu et al. Histone deacetylase 6 inhibitors with blood-brain barrier penetration as a potential strategy for CNS-Disorders therapy
EP3873439A1 (en) Spak kinase inhibitors as neuroprotective agents
WO2021013028A1 (en) Pharmaceutical combination and use thereof
US20240139178A1 (en) Method for manufacturing composition for composition for increasing cognitive function
US10807958B2 (en) 1,4-bis(3-aminopropyl)piperazine derivative and its use
US20170246245A1 (en) Novel pharmaceutical composition for treating alzheimer&#39;s disease
US20210137953A1 (en) Inhibitors of Mcl-1 and Akt Binding, Pharmaceutical Compositions, and Uses in Treating Cancer
ES2814048B2 (es) Uso combinado de biotina y tiamina en el tratamiento de la enfermedad de huntington
ES2358661B2 (es) Utilización del gambierol para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades neurodegenerativas relacionadas con tau y beta-amiloide.
ES2582427B1 (es) Uso de la ectoína o sus derivados como agentes antiinflamantorios y/o antioxidantes en enfermedades causadas por la formacion de agregados proteicos
WO2017051046A1 (es) Aminofenotiazinas para la modulación del número de sinapsis
WO2011039394A2 (es) Utilización de la gimnodimina, análogos y derivados para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades neurodegenerativas relacionadas con tau y b-amiloide
Gehlot et al. A review on synthetic inhibitors of dual-specific tyrosine phosphorylation-regulated kinase 1A (DYRK1A) for the treatment of Alzheimer’s disease (AD)
III et al. Phenothiazine-mediated rescue of cognition in tau transgenic mice requires neuroprotection and reduced soluble tau burden
BR112021005952A2 (pt) uso de um composto
WO2011047374A1 (en) Methods of treating tauopathies
ES2357934A1 (es) Uso de un espirolido analogos y derivados para el tratamiento y/o la prevencion de patologias relacionadas con las proteinas tau y b-amiloide.