ES2957767T3 - Triterpenoides modificados en C-3 y C-17 como inhibidores del VIH-1 - Google Patents

Triterpenoides modificados en C-3 y C-17 como inhibidores del VIH-1 Download PDF

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Richard A Hartz
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Jacob Swidorski
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Abstract

Se exponen compuestos que tienen propiedades farmacológicas y bioafectantes, sus composiciones farmacéuticas y métodos de uso. En particular, se proporcionan derivados del ácido betulínico que poseen actividad antiviral única como inhibidores de la maduración del VIH, representados por compuestos de Fórmula I: Estos compuestos son útiles para el tratamiento del VIH y el SIDA. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Triterpenoides modificados en C-3 y C-17 como inhibidores del VIH-1
Campo de la invención
La presente invención se refiere a composiciones que comprenden compuestos útiles contra el VIH y, más particularmente, a compuestos derivados de ácido betulínico y otros compuestos que son útiles como inhibidores de la maduración del VIH, y a composiciones farmacéuticas que contienen los mismos, así como a procedimientos para su preparación.
Antecedentes de la invención
La infección por el VIH-1 (virus de la inmunodeficiencia humana 1) sigue siendo un gran problema médico, y se calcula que hacia finales de 2010 había 45-50 millones de personas infectadas a nivel mundial. La cantidad de casos de VIH y SIDA (síndrome de la inmunodeficiencia adquirida) ha aumentado rápidamente. En 2005, se informaron aproximadamente 5,0 millones de nuevas infecciones y 3,1 millones de personas murieron de SIDA. Los fármacos actualmente disponibles para el tratamiento del VIH incluyen inhibidores de la transcriptasa inversa (RT) nucleósidos o combinaciones de píldoras únicas aprobadas: zidovudina (o AZT o RETROVIR®), didanosina (o VIDEX®), estavudina (o ZERIT®), lamivudina (o 3TC o EPIVIR®), zalcitabina (o DDC o HIVID®), succinato de abacavir (o ZIAGEN®), sal de fumarato de tenofovir disoproxilo (o VIREAD®), emtricitabina (o FTC- EMTRIVA®), COMBIVIR® (contiene -3TC más AZT), TRIZIVIR® (contiene abacavir, lamivudina y zidovudina), EPZICOM® (contiene abacavir y lamivudina), TRUVADA® (contiene VIREAD® y EMTRIVA®); inhibidores de la transcriptasa inversa no nucleósidos: nevirapina (o VIRAMUNE®), delavirdina (o RESCRIPTOR®) y efenzavir (o SUSTIVA®), ATRIPLA® (TRUVADA® SUSTIVA®), y etravirina, e inhibidores de proteasa peptidomiméticos o formulaciones aprobadas: saquinavir, indinavir, ritonavir, nelfinavir, amprenavir, lopinavir, KALETRA®(lopinavir y Ritonavir), darunavir, atazanavir (REYATAZ®) y tipranavir (APTIVUS®) y cobicistat, e inhibidores de integrasa como raltegravir (ISENTRESS®), e inhibidores de entrada como enfuvirtida (T-20) (FUZEON®) y maraviroc (SELZENTRY®).
Cada uno de estos fármacos únicamente puede restringir transitoriamente la replicación vírica si se usan en solitario. Sin embargo, cuando se usan combinados, estos fármacos tienen un gran efecto sobre el avance de la viremia y la enfermedad. De hecho, se han documentado recientemente reducciones significativas de las tasas de mortalidad entre pacientes con SIDA como consecuencia de la extensa aplicación de la terapia de combinación. Sin embargo, a pesar de estos impresionantes resultados, las terapias de fármacos combinados en última instancia pueden fracasar en el 30 al 50 % de los pacientes. Una potencia insuficiente de los fármacos, la falta de cumplimiento, una penetración restringida al tejido y limitaciones específicas de los fármacos en ciertos tipos de células (por ejemplo, la mayoría de los análogos de nucleósidos no se pueden fosforilar en las células en reposo) pueden ser la causa de la supresión incompleta de virus sensibles. Además, la alta tasa de replicación y el rápido recambio de VIH-1, en combinación con la frecuente incorporación de mutaciones, produce la aparición de variantes resistentes a los fármacos y fallos en el tratamiento cuando están presentes concentraciones subóptimas del fármaco. Por lo tanto, se necesitan agentes anti-VIH novedosos que muestren diferentes patrones de resistencia y una farmacocinética favorable, así como perfiles de seguridad, para proporcionar más opciones de tratamiento. Los inhibidores de la fusión del VIH y los antagonistas de correceptores de la entrada del VIH mejorados son dos ejemplos de nuevas clases de agentes anti-VIH estudiados por varios investigadores.
Los inhibidores del acoplamiento del VIH son una subclase adicional de compuestos antivíricos que se unen a la glicoproteína superficial gp120 del VIH e interfieren con la interacción entre la proteína superficial gp120 y el receptor de la célula hospedadora CD4. Por lo tanto, evitan que el VIH se acople al linfocito T humano CD4, y bloquean la replicación del VIH en la primera fase del ciclo de vida del VIH. Las propiedades de los inhibidores del acoplamiento del VIH se han mejorado en un intento por obtener compuestos con máxima utilidad y eficacia como agentes antivíricos. En particular, las Patentes de Estados Unidos n.° 7.354.924 y U.S. 7.745.625 son ilustrativas de los inhibidores de la unión del VIH.
Otra clase emergente de compuestos para el tratamiento del VIH se denominan inhibidores de la maduración del VIH. La maduración es la última de las 10 o más etapas de la replicación del VIH o del ciclo de vida del VIH, en el que el VIH se vuelve infeccioso como consecuencia de varios eventos de escisión mediados por la proteasa del VIH en la proteína gag que, en última instancia, genera la liberación de la proteína de la cápside (CA). Los inhibidores de la maduración evitan que la cápside del VIH se ensamble y madure de manera adecuada, que forme una cubierta externa protectora o que surja de células humanas. En cambio, se producen virus no infecciosos que evitan ciclos posteriores de la infección por VIH.
Ahora se ha mostrado que ciertos derivados del ácido betulínico muestran una potente actividad contra el VIH como inhibidores de la maduración del VIH. Por ejemplo, el documento US 7.365.221 divulga derivados de dihidrobetulina y betulina monoacilados y su uso como agentes anti-VIH. Como se analiza en la referencia '221, la esterificación del ácido betulínico (1) con ciertos grupos acilo sustituidos, tales como grupos 3',3'-dimetilglutarilo y 3',3'-dimetilsuccinilo producía derivados que tienen actividad potenciada (Kashiwada, Y., et al., J. Med. Chem. 39:1016-1017 (1996)). Los derivados del ácido dihidrobetulínico y del ácido betulínico acilados que son potentes agentes anti-VIH también se describen en la Pat. de Estados Unidos n.° 5.679.828. La esterificación del hidroxilo en el carbono 3 de betulina con ácido succínico también produjo un compuesto capaz de inhibir la actividad del VIH-1 (Pokrovskii, A. G., et al., “Synthesis of derivatives of plant triterpenes and study of their antiviral and immunostimulating activity”, Khimiya y Interesakh Ustoichivogo Razvitiya, Vol. 9, N° 3, págs. 485-491 (2001) (Resumen en inglés).
Otras referencias al uso del tratamiento de la infección por VIH con compuestos derivados del ácido betulínico incluyen los documentos US 2005/0239748 y US 2008/0207573, así como los documentos WO2006/053255, WO2009/100532 y WO2011/007230.
Un compuesto de la maduración del VIH en proceso de desarrollo se ha identificado como Bevirimat o PA-457, con la fórmula química de C36H56O6 y el nombre IUPAC de ácido 3p-(3-carboxi-3-metilbutanoiloxi)lup-20(29)-en-28-oico.
En el presente documento también se hace referencia a las solicitudes de Bristol-Myers Squibb tituladas “MODIFIED C-3 BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS” USSN 13/151,706, presentada el 2 de junio de 2011 (ahora documento U.S. 8.754.068) y “C-28 AMIDES OF MODIFIED C-3 BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS” USSN 13/151,722, presentada el 2 de junio de 2011 (ahora documento U.S. 8.802.661). También se hace referencia a la solicitud titulada “C-28 AMINe S OF C-3 MODIFIED BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS” USSN 13/359.680, presentada el 27 de enero de 2012 (ahora el documento U.S. 8.748.415). Además, se hace referencia a la solicitud titulada “C-17 AND C-3 MODIFIED TRITERPENOIDS WITH HIV MATURATION INHIBITORY ACTIVITY” USSN 13/359,727, presentada el 27 de enero de 2012 (ahora el documento U.S. 8.846.647). También se hace referencia adicionalmente a la solicitud “C-3 CYCLOALKENYL TRITERPENOIDS WITH HIV MATURATION INHIBITORY ACTIVITY”, presentada USSN 13/760,726 el 6 de febrero de 2013 (ahora documento U.S. 8.906.889), así como a la solicitud titulada “Triterpenoids with HIV Maturation Inhibitory Activity” USSN 14/682,179, presentada el 9 de abril de 2015.
Los que se necesita ahora en la técnica son nuevos compuestos que sean útiles como inhibidores de la maduración del VIH, así como nuevas composiciones farmacéuticas que contengan estos compuestos. En particular, son necesarios nuevos compuestos que sean eficaces contra los mutantes del VIH genotípicos emergentes.
Sumario de la invención
El alcance de la invención está definido por las reivindicaciones adjuntas. La presente invención proporciona combinaciones que comprenden compuestos de la fórmula I a continuación, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, sus formulaciones farmacéuticas, y su uso en pacientes que padecen o son susceptibles a un virus, tal como el VIH. Los compuestos de la fórmula I son agentes antivíricos eficaces, particularmente como inhibidores del VIH. Son útiles para el tratamiento del VIH y SIDA.
La presente invención se refiere a una combinación que comprende un (i) compuesto de fórmula I, que incluye sales farmacéuticamente aceptables del mismo:
en la que R1 es isopropenilo o isopropilo;
A es -alquilo C1-6-OR0;
en la que R0 es heteroaril-Q0;
Q0 se selecciona del grupo de -H, -CN, -alquilo C1-6, -COOH, -Ph, -O-alquilo C1-6,
-halo, -CF3,
Y se selecciona del grupo
de -COOR2, -C(O)NR2SO2R3, -C(O)NHSO2NR2R2, -SO2NR2C(O)R2, -tetrazol, y -CONHOH;
R2 es -H, -alquilo C1-6, -alquilo C1-6 sustituido con alquilo o -alquilo C1-6 sustituido con arilo;
W está ausente, o es -CH2- o -CO-;
R3 es -H, -alquilo C1-6 o -alquilo C1-6 sustituido con alquilo;
R4 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo C1-6-cicloalquilo C3-6, -alquilo C1-6 sustituido con C1-6, -alquilo C1-6-Q1, -alquilo C1-6-cicloalquilo C3-6-Q1, arilo, heteroarilo, heteroarilo sustituido, -COR6, -SO2R7, -SO2NR2R2, y
en las que G se selecciona del grupo de -O-, -SO2- y -NR12-;
en las que Q1 se selecciona del grupo de -alquilo C1-6, -fluoroalquilo C1-6, heteroarilo, heteroarilo sustituido, halógeno, -CF3, -OR2, -COOR2, -NR8R9, -CONR8R9 y -SO2R7;
R5 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -cicloalquilo C3-6, -alquilo C1-6 sustituido con alquilo, -alquilo C1-6-NR8R9, -COR3, -SO2R7 y -SO2NR2R2;
con la condición de que R4 o R5 no sea -COR6 cuando W sea -CO-;
con la condición adicional de que únicamente uno de R4 o R5 se seleccione del grupo de -COR6, -COCOR6,-SO2R7 y -SO2NR2R2;
R6 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo C1-6 sustituido con alquilo, -cicloalquilo C3-6, -cicloalquilo C3-6-Q2 sustituido, -alquilo C1-6-Q2, -alquilo C1-6-Q2 sustituido con alquilo, -cicloalquilo C3-6-Q2, aril-Q2, -NR13R14, y -OR15; en las que Q2 se selecciona del grupo de arilo, heteroarilo, heteroarilo sustituido, -OR2, -COOR2, -NR8R9, SO2R7, -CONHSO2R3, y -CONHSO2NR2R2;
R7 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo C1-6 sustituido, cicloalquilo C3-6,
-CF3, arilo y heteroarilo;
R8 y R9 se seleccionan independientemente del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo sustituido con C1-6, arilo, heteroarilo, arilo sustituido, heteroarilo sustituido, -alquilo C1-6-Q2, y -COOR3, o R8y R9 se toman junto con el N adyacente para formar un ciclo seleccionado del grupo de:
M se selecciona del grupo de -R 15, -SO2R2, -SO2NR2R2, -OH y -N R 2R12;
V se selecciona del grupo de -C R 10R11-, -SO2-, -O- y -N R 12-;
con la condición de que únicamente uno de R8o R9 pueda ser -COOR3;
R10 y R11 se seleccionan independientemente del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo sustituido con C1-6 y -cicloalquilo C3-6;
R12 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo C1-6 sustituido con alquilo, -CONR2R2, -SO2R3 y - SO2NR2R2; R13 y R14 se seleccionan independientemente del grupo de -H, -alquilo C1-6, -cicloalquilo C3-6, -alquilo sustituido con C1-6, -alquilo C1-6-Q3, -alquilo C1-6-cicloalquilo C3-6-Q3 y alquilo sustituido con C1-6 -Q3;
Q3 se selecciona del grupo de heteroarilo, heteroarilo sustituido, -NR2R12, -CONR2R2, -COOR2, -OR2, y -SO2R3; R15 se selecciona del grupo de -alquilo C1-6, -cicloalquilo C3-6, -alquilo sustituido con C1-6, -alquilo C1-6-Q3, -alquilo C1-6-cicloalquilo C3-6-Q3 y -alquilo sustituido con C1-6-Q3;
R16 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -NR2R2, y -COOR2;
con la condición de que cuando V sea -N R 12-; R16 no sea -N R 2R2; y
R17 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -COOR3, y arilo;
y (ii) un antiviral, inmunomodulador, antiinfeccioso, inhibidor de la entrada del VIH o vacuna contra el VIH.
En una realización más, se proporciona la combinación para usar en un método para tratar mamíferos infectados con un virus, especialmente en los que dicho virus es VIH, que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad antivírica eficaz de un compuesto que se selecciona del grupo de compuestos de la fórmula I, y uno o más vehículos, excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables. Opcionalmente, el compuesto de la fórmula I se puede administrar en combinación con una cantidad antiviral eficaz de otro agente de tratamiento del sida seleccionado del grupo que consiste en: (a) un agente antiviral contra el sida; (b) un agente antiinfeccioso; (c) un inmunomodulador; y (d) otros inhibidores de la entrada del VIH.
Otra realización de la presente invención es una composición farmacéutica que comprende uno o más compuestos de la fórmula I, y uno o más vehículos, excipientes y/o diluyentes farmacéuticamente aceptables; y opcionalmente junto con otro agente para el tratamiento del sida seleccionado del grupo que consiste en: (a) un agente antiviral contra el sida; (b) un agente antiinfeccioso; (c) un inmunomodulador; y (d) otros inhibidores de la entrada del VIH.
En otra realización de la invención, se proporcionan uno o más procedimientos para fabricar los compuestos de la fórmula I en el presente documento.
También se divulgan en el presente documento compuestos intermedios útiles en la fabricación de los compuestos de la fórmula I en el presente documento.
La presente invención se refiere a estos, así como otros extremos importantes, descritos de aquí en adelante.
Descripción detallada de las realizaciones
Como se usa en el presente documento, las formas singulares “un”, “una”, y “el/la” incluyen referencia al plural a menos que el contexto dicte claramente lo contrario.
Dado que los compuestos de la presente invención pueden poseer centros asimétricos y, por lo tanto, aparecer como mezclas de diastereómeros, la presente divulgación incluye la formas diastereoisoméricas individuales de los compuestos de la fórmula I además de las mezclas de los mismos.
Definiciones
A menos que se exponga específicamente en otro lugar de la solicitud, se pueden usar uno o más de los siguientes términos en el presente documento, y tendrán los siguientes significados:
“H” hace referencia a hidrógeno, incluyendo sus isótopos, tales como deuterio.
El término "alquilo C W , como se usa en el presente documento, y en las reivindicaciones (a menos que se especifique otra cosa) significa grupos alquilo de cadena lineal o ramificada, tales como metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, t-butilo, amilo, hexilo y similares.
"Fluoroalquilo C1-C4" hace referencia a alquilo C1-C4 sustituido con F, en donde al menos un átomo de H está sustituido por un átomo de F, y cada átomo de H puede estar independientemente sustituido por un átomo de F;
"Halógeno" o “halo” hace referencia a cloro, bromo, yodo o flúor.
Un grupo "arilo" o "Ar" hace referencia a grupos de solo carbono monocíclicos o policíclicos de anillo fusionado (es decir, anillos que comparten pares adyacentes de átomos de carbono) que tienen un sistema de electrones pi completamente conjugados. Los ejemplos, sin limitación, de grupos arilo son fenilo, naftalenilo y antracenilo. El grupo arilo puede estar sustituido o sin sustituir. Cuando está sustituido, el grupo o grupos sustituyentes son preferiblemente uno o más seleccionados de entre alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, heteroalicíclico, hidroxi, alcoxi, ariloxi, heteroariloxi, heteroalicicloxi, tiohidroxi, tioariloxi, tioheteroariloxi, tioheteroalicicloxi, ciano, halógeno, nitro, carbonilo, O-carbamilo, N-carbamilo, C-amido, N-amido, C-carboxi, O-carboxi, sulfinilo, sulfonilo, sulfonamido, trihalogenometilo, ureido, amino y -NRxRy, en donde Rx y Ry se seleccionan independientemente entre el grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, carbonilo, C-carboxi, sulfonilo, trihalogenometilo, y, un anillo heteroalicíclico combinado de cinco o seis miembros.
Un grupo "heteroarilo" hace referencia a un grupo de anillos monocíclicos o condensados (es decir, anillos que comparten un par adyacente de átomos) que tiene, en el anillo o anillos, uno o más átomos seleccionados del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno y azufre, y que tiene, además, un sistema de electrones pi completamente conjugado. A menos que se indique otra cosa, el grupo heteroarilo se puede acoplar con un átomo de carbono o de nitrógeno dentro del grupo heteroarilo. Debe observarse que el término heteroarilo pretende abarcar un N-óxido del heteroarilo de origen si un N-óxido de este tipo es químicamente viable como se conoce en la técnica. Los ejemplos, sin limitación, de grupos heteroarilo son furilo, tienilo, benzotienilo, tiazolilo, imidazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, benzotiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, pirrolilo, piranilo, tetrahidropiranilo, pirazolilo, piridilo, pirimidinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, purinilo, carbazolilo, benzoxazolilo, bencimidazolilo, indolilo, isoindolilo, pirazinilo, diazinilo, pirazina, triazinilo, tetrazinilo y tetrazolilo. Cuando están sustituidos, el grupo o grupos sustituidos son preferiblemente uno o más seleccionados de entre alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, heteroalicíclico, hidroxi, alcoxi, ariloxi, heteroariloxi, heteroalicicloxi, tioalcoxi, tiohidroxi, tioariloxi, tioheteroariloxi, tioheteroalicicloxi, ciano, halógeno, nitro, carbonilo, O-carbamilo, N-carbamilo, C-amido, N-amido, C-carboxi, O-carboxi, sulfinilo, sulfonilo, sulfonamido, trihalogenometilo, ureido, amino, y -NRxRy, en donde Rx y Ry son como se han definido anteriormente.
Un grupo "heteroalicíclico" hace referencia a un grupo de anillos monocíclicos o condensados que tienen, en el anillo o anillos, uno o más átomos seleccionados del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno y azufre. Los anillos se seleccionan de aquellos que proporcionan disposiciones de enlaces estables y no pretenden incluir sistemas que no existirían. Los anillos también pueden tener uno o más enlaces dobles. Sin embargo, los anillos no tienen un sistema de electrones pi completamente conjugado. Los ejemplos, sin limitación, de grupos heteroalicíclicos son azetidinilo, piperidilo, piperazinilo, imidazolinilo, tiazolidinilo, 3-pirrolidin-1-ilo, morfolinilo, tiomorfolinilo y sus S-óxidos y tetrahidropiranilo. Cuando están sustituidos, el grupo o grupos sustituidos son preferiblemente uno o más seleccionados de alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, heteroalicíclico, hidroxi, alcoxi, ariloxi, heteroariloxi, heteroalicicloxi, tiohidroxi, tioalcoxi, tioariloxi, tioheteroariloxi, tioheteroalicicloxi, ciano, halógeno, nitro, carbonilo, tiocarbonilo, O-carbamilo, N-carbamilo, O-tiocarbamilo, N-tiocarbamilo, C-amido, C-tioamido, N-amido, C-carboxi, O-carboxi, sulfinilo, sulfonilo, sulfonamido, trihalogenometanosulfonamido, trihalogenometanosulfonilo, sililo, guanilo, guanidino, ureido, fosfonilo, amino y -NRxRy, en donde Rx y Ry son como se han definido anteriormente.
Un grupo "alquilo" hace referencia a un hidrocarburo alifático saturado que incluye grupos de cadena lineal y ramificada. Preferentemente, el grupo alquilo tiene de 1 a 20 átomos de carbono (siempre que en el presente documento se indique un intervalo numérico, por ejemplo, "1-20", significa que el grupo, en este caso el grupo alquilo, puede contener 1 átomo de carbono, 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, etc., hasta 20 átomos de carbono inclusive). Más preferiblemente, es un alquilo de tamaño medio que tiene de 1 a 10 átomos de carbono. Lo más preferiblemente, es un alquilo inferior que tiene de 1 a 4 átomos de carbono. El grupo alquilo puede estar sustituido o sin sustituir. Cuando están sustituidos, el grupo o grupos sustituyentes son, preferiblemente, uno o más seleccionados individualmente de trihalogenoalquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, heteroalicíclico, hidroxi, alcoxi, ariloxi, heteroariloxi, heteroalicicloxi, tiohidroxi, tioalcoxi, tioariloxi, tioheteroariloxi, tioheteroalicicloxi, ciano, halo, nitro, carbonilo, tiocarbonilo, O-carbamilo, N-carbamilo, O-tiocarbamilo, N-tiocarbamilo, C-amido, C-tioamido, N-amido, C-carboxi, O-carboxi, sulfinilo, sulfonilo, sulfonamido, trihalometanosulfonamido, trihalometanosulfonilo, y un anillo heteroalicíclico de cinco o seis miembros combinado.
Un grupo "cicloalquilo" hace referencia a un grupo de anillos de solo carbono monocíclicos o condensados (es decir, anillos que comparten un par adyacente de átomos de carbono), en donde uno o más anillos no tiene un sistema de electrones pi completamente conjugado. Los ejemplos, sin limitación, de grupos cicloalquilo son ciclopropano, ciclobutano, ciclopentano, ciclopenteno, ciclohexano, ciclohexeno, cicloheptano, ciclohepteno y adamantano. Un grupo cicloalquilo puede estar sustituido o sin sustituir. Cuando están sustituidos, el grupo o grupos sustituyentes son, preferiblemente, uno o más seleccionados individualmente de alquilo, arilo, heteroarilo, heteroalicíclico, hidroxi, alcoxi, ariloxi, heteroariloxi, heteroalicicloxi, tiohidroxi, tioalcoxi, tioariloxi, tioheteroariloxi, tioheteroalicicloxi, ciano, halógeno, nitro, carbonilo, tiocarbonilo, O-carbamilo, N-carbamilo, O-tiocarbamilo, N-tiocarbamilo, C-amido, C-tioamido, N-amido, C-carboxi, O-carboxi, sulfinilo, sulfonilo, sulfonamido, trihalogenometanosulfonamido, trihalogenometanosulfonilo, sililo, amidino, guanidino, ureido, fosfonilo, amino y -NRxRy, con Rx y Ry como se han definido anteriormente.
Un grupo "alquenilo" hace referencia a un grupo alquilo, como se define en el presente documento, que tiene al menos dos átomos de carbono y al menos un doble enlace carbono-carbono.
Un grupo "alquinilo" hace referencia a un grupo alquilo, como se define en el presente documento, que tiene al menos dos átomos de carbono y al menos un triple enlace carbono-carbono.
Un grupo "hidroxi" hace referencia a un grupo -OH.
Un grupo "alcoxi" hace referencia tanto a un grupo -O-alquilo como a un grupo -O-cicloalquilo, como se define en el presente documento.
Un grupo "ariloxi" hace referencia tanto a un grupo -O-arilo como a un grupo -O-heteroarilo, como se define en el presente documento.
Un grupo "heteroariloxi" hace referencia a un grupo heteroaril-O- con heteroarilo como se define en el presente documento.
Un grupo "heteroalicicloxi" hace referencia a un grupo heteroalicíclico-O- con heteroalicíclico como se define en el presente documento.
Un grupo "tiohidroxi" hace referencia a un grupo -SH.
Un grupo "tioalcoxi" hace referencia tanto a un grupo S-alquilo como un grupo -S-cicloalquilo, como se define en el presente documento.
Un grupo "tioariloxi" hace referencia tanto a un grupo -S-arilo como un grupo -S-heteroarilo, como se define en el presente documento.
Un grupo "tioheteroariloxi" hace referencia a un grupo heteroaril-S- con heteroarilo como se define en el presente documento.
Un grupo "tioheteroalicicloxi" hace referencia a un grupo heteroalicíclico-S- con heteroalicíclico como se define en el presente documento.
Un grupo "carbonilo" hace referencia a un grupo -C(=O)-R", donde R" se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo (unido a través de un carbono del anillo) y heteroalicíclico (unido a través de un carbono del anillo), como se define cada uno en el presente documento.
Un grupo "aldehído" hace referencia a un grupo carbonilo donde R" es hidrógeno.
Un grupo "tiocarbonilo" hace referencia a un grupo -C(=S)-R", con R" como se define en el presente documento. Un grupo "ceto" hace referencia a un grupo -CC(=O)C- en donde el carbono en cualquiera o ambos lados del C=O puede ser alquilo, cicloalquilo, arilo o un carbono de un grupo heteroarilo o heteroalicíclico.
Un grupo "trihalogenometanocarbonilo" hace referencia a un grupo Z3CC(=O)-siendo dicho Z un halógeno.
Un grupo "C-carboxi" hace referencia a un grupo -C(=O)O-R", con R" como se define en el presente documento. Un grupo "O-carboxi" hace referencia a un grupo R"C(-O)O-, con R" como se define en el presente documento. Un grupo "ácido carboxílico" hace referencia a un grupo C-carboxi en el que R" es hidrógeno.
Un grupo "trihalogenometilo" hace referencia a un grupo -CZ3, en donde Z es un grupo halógeno como se define en el presente documento.
Un grupo "trihalogenometanosulfonilo" hace referencia a un grupo Z3CS(=O)2- con Z como se ha definido anteriormente.
Un grupo "trihalogenometanosulfonamido" hace referencia a un grupo Z3CS(=O)2NRx- con Z como se ha definido anteriormente y siendo Rx H o alquilo (C1-6).
Un grupo "sulfinilo" hace referencia a un grupo -S(=O)-R", siendo R" alquilo (C1-6).
Un grupo "sulfonilo" se hace referencia a un grupo -S(=O)2R", siendo R" alquilo (C1-6).
Un grupo "S-sulfonamido" hace referencia a -S(=O)2NRXRy, siendo RX y Ry independientemente H o alquilo (C1-6). Un grupo "N-sulfonamido" hace referencia a un grupo R"S(=O)zNRx-, siendo Rx H o alquilo (C1-6).
Un grupo "O-carbamilo" hace referencia a un grupo -OC(=O)NRxRy, siendo RX and RY independientemente H o alquilo (C1-6).
Un grupo "N-carbamilo" hace referencia a un grupo RxOC(=O)NRy, siendo Rx y Ry independientemente H o alquilo (C1-6).
Un grupo "O-tiocarbamilo" hace referencia a un grupo -OC(=S)NRXRy, siendo RX y Ry independientemente H o alquilo(C1-6).
Un grupo "N-tiocarbamilo" hace referencia a un grupo RXOC(=S)NRy-, siendo RX y Ry independientemente H o alquilo (C1-6).
Un grupo "amino" hace referencia a un grupo -NH2.
Un grupo "C-amido" hace referencia a un grupo -C(=O)NRxRy, siendo Rx y Ry independientemente H o alquilo (C1-6). Un grupo "C-tioamido" hace referencia a un grupo -C(=S)NRXRy, siendo RX y Ry independientemente H o alquilo (C1-6).
Un grupo "N-amido" hace referencia a un grupo RXC(=O)NRy-, siendo RX y Ry independientemente H o alquilo (C1-6). Un grupo "ureido" hace referencia a un grupo -NRXC(=O)NRyRy2, siendo RX, Ry, y Ry2 independientemente H o alquilo (C1-6).
Un grupo "guanidino" hace referencia a un grupo -RXNC(=N)NRyRy2, siendo RX, Ry, y Ry2 independientemente H o alquilo (C1-6).
Un grupo “amidino” hace referencia a un grupo RXRyNC(=N)-, siendo RX y Ry independientemente H o alquilo (C1-6). Un grupo "ciano" hace referencia a un grupo -CN.
Un grupo "sililo" hace referencia a -Si(R")3, siendo R" alquilo (C1-6) o fenilo.
Un grupo "fosfonilo" hace referencia a P(=O)(ORX)2siendo RX alquilo (C1-6).
Un grupo "hidrazino" hace referencia a un grupo -NRXNRyRy2, siendo RX, Ry, y Ry2 independientemente H o alquilo (Cl-6).
Un grupo "N-lactama cíclica de anillo de 4, 5 o 6 miembros" hace referencia a
Un grupo “espiro” es un grupo orgánico bicíclico con anillos conectados a través de un único átomo. Los anillos pueden ser de diferente naturaleza o idénticos. El átomo de conexión también se denomina el espiroátomo, lo más a menudo un carbono cuaternario ("espirocarbono").
Un grupo “oxoespiro” o “oxaespiro” es un grupo espiro que tiene un oxígeno contenido dentro de la estructura anular bicíclica. Un grupo “dioxoespiro” o “dioxaespiro” tiene dos oxígenos dentro de la estructura anular bicíclica.
Cualesquiera dos grupos R adyacentes pueden combinarse para formar un anillo adicional de arilo, cicloalquilo, heteroarilo o heterocíclico fusionado al anillo que lleva inicialmente estos grupos R.
Se sabe en la técnica que los átomos de nitrógeno en los sistemas de heteroarilo pueden "participar en un enlace doble del anillo de heteroarilo", y esto hace referencia a la forma de los enlaces dobles en las dos estructuras tautoméricas que comprenden grupos heteroarilo de cinco miembros. Esto indica si los nitrógenos se pueden sustituir, como se entenderá por los químicos en la técnica. La divulgación y las reivindicaciones de la presente divulgación se basan en los principios generales conocidos de la unión química. Se entiende que las reivindicaciones no incluyen estructuras que se sabe que son inestables y que no pueden existir basándose en la bibliografía.
Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos divulgados en el presente documento están dentro del alcance de la invención. La expresión "sal farmacéuticamente aceptable", como se usa en el presente documento y en las reivindicaciones, pretende incluir sales de adición de bases no tóxicas. Las sales adecuadas incluyen las derivadas de ácidos orgánicos e inorgánicos, tales como, sin limitación, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico, ácido metanosulfónico, ácido acético, ácido tartárico, ácido láctico, ácido sulfínico, ácido cítrico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido sórbico, ácido aconítico, ácido salicílico, ácido ftálico, y similares. La expresión "sal farmacéuticamente aceptable", como se usa en el presente documento, también pretende incluir sales de grupos ácidos, tales como un carboxilato, con contraiones tales como amonio, sales de metales alcalinos, particularmente sodio o potasio, sales de metales alcalinotérreos, particularmente calcio o magnesio, y sales con bases orgánicas adecuadas, tales como alquilaminas inferiores (metilamina, etilamina, ciclohexilamina, y similares) o con alquilaminas inferiores sustituidas (por ejemplo, alquilaminas sustituidas con hidroxilo, tales como dietanolamina, trietanolamina o tris(hidroximetil)aminometano), o con bases tales como piperidina o morfolina.
El término "profármaco", tal como se usa en la presente, abarca tanto el término "ésteres de profármaco" como el término "éteres de profármaco".
Como se ha expuesto anteriormente, la invención se dirige a una combinación que comprende un compuesto, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables del mismo, que se selecciona entre un compuesto de la fórmula I:
en la que R1 es isopropenilo o isopropilo;
A es -alquilo C1-6-OR0;
en la que R0 es heteroaril-Q0;
Q0 se selecciona del grupo de -H, -CN, -alquilo C1-6, -COOH, -Ph, -O-alquilo C1-6, -halo, -CF3,
Y se selecciona del grupo de -COOR2, -C(O)NR2SO2R3, -C(O)NHSO2NR2R2, -SO2NR2C(O)R2, -tetrazol, y -CONHOH; R2 es -H, -alquilo C1-6, -alquilo C1-6 sustituido con alquilo o -alquilo C1-6 sustituido con arilo;
W está ausente, o es -CH2- o -CO-;
R3 es -H, -alquilo C1-6 o -alquilo C1-6 sustituido con alquilo;
R4 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo C1-6-cicloalquilo C3-6, -alquilo C1-6 sustituido con C1-6, -alquilo C1-6-Q1, -alquilo C1-6-cicloalquilo C3-6-Q1, arilo, heteroarilo, heteroarilo sustituido, -COR6, -SO2R7, -SO2NR2R2, y
en las que G se selecciona del grupo de -O-, -SO2- y -NR12-;
en las que Q1 se selecciona del grupo de -alquilo C1-6, -fluoroalquilo C1-6, heteroarilo, heteroarilo sustituido, halógeno, -CF3, -OR2, -COOR2, -NR8R9, -CONR8R9 y -SO2R7;
R5 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -cicloalquilo C3-6, -alquilo C1-6 sustituido con alquilo, -alquilo C1-6-NR8R9, -COR3, -SO2R7 y -SO2NR2R2;
con la condición de que R4 o R5 no sea -COR6 cuando W sea -CO-;
con la condición adicional de que únicamente uno de R4 o R5 se seleccione del grupo de -COR6, -COCOR6,-SO2R7 y -SO2NR2R2;
R6 se selecciona del grupo de -H, alquilo C1-6, alquilo sustituido con alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, cicloalquilo sustituido C3-6-Q2, alquilo C1-6-Q2, alquilo sustituido con alquilo C1-6-Q2, cicloalquilo C3-6-Q2, arilo-Q2, -NR13R14 y -OR15; en donde Q2 se selecciona del grupo de arilo, heteroarilo, heteroarilo sustituido, -OR2, -COOR2, -NR8R9, SO2R7, -CONHSO2R3, y -CONHSO2NR2R2;
R7 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo C1-6 sustituido, -C3-6
cicloalquilo,-CF3, arilo y heteroarilo;
R8 y R9 se seleccionan independientemente entre el grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo sustituido con C1-6, arilo, heteroarilo, arilo sustituido, heteroarilo sustituido, -alquilo C1-6-Q2, y -COOR3, o R8y R9 se toman junto con el N adyacente para formar un ciclo seleccionado del grupo de:
M se selecciona del grupo de -R 15, -SO2R2, -SO2NR2R2, -OH y -N R 2R12;
V se selecciona del grupo de -C R 10R11-, -SO2-, -O- y -N R 12-;
con la condición de que únicamente uno de R8o R9 pueda ser -COOR3;
R10 y R11 se seleccionan independientemente entre el grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo sustituido con C1-6 y -cicloalquilo C3-6;
R12 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo C1-6 sustituido con alquilo, -CONR2R2, -SO2R3, y -SO2NR2R2; R13 y R14 se seleccionan independientemente entre el grupo de -H, -alquilo C1-6, -cicloalquilo C3-6, -alquilo sustituido con C1-6, -alquilo C1-6-Q3, -alquilo C1-6-cicloalquilo C3-6-Q3 y alquilo sustituido con C1-6 -Q3;
Q3 se selecciona del grupo de heteroarilo, heteroarilo sustituido, -NR2R12, -CONR2R2, -COOR2, -OR2, y -SO2R3; R15 se selecciona del grupo de -alquilo C1-6, -cicloalquilo C3-6, -alquilo sustituido con C1-6, -alquilo C1-6-Q3, -alquilo C1-6-cicloalquilo C3-6-Q3 y -alquilo sustituido con C1-6-Q3;
R16 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -NR2R2, y -COOR2;
con la condición de que cuando V sea -N R 12-; R16 no sea -N R 2R2; y
R17 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -COOR3, y arilo.
En una realización preferida de la invención, R1 es isopropenilo.
También se prefiere que Y sea -COOR2. Más preferiblemente, R2 en esta realización es - H.
En otra realización preferida de la invención, en el grupo R0, el resto “heteroarilo" se selecciona preferiblemente de entre el grupo de:
También se prefiere que no haya ningún grupo alquilo intermedio u otro grupo sustituyente entre el resto -O y el grupo Ro en el sustituyente A.
Se prefiere adicionalmente que R4 sea -alquilo Ci-6-Qi.
También se prefiere la realización en la que Q1 es -N R 8R9.
Además, cuando R8y R9 se toman junto con el -N adyacente para formar un ciclo, el ciclo preferido se seleccionará del grupo de:
En algunas realizaciones, también se prefiere que Q0 sea -CN.
En otra realización preferida, R1 es isopropenilo, en el grupo R0 el resto “heteroarilo" se selecciona del grupo de:
Y es -COOH, R4 es -alquilo C1-6-Q1, Q1 es -NR 8R9, y R8y R9 se toman junto con el -N adyacente para formar un ciclo que se selecciona del grupo de:
En esta realización, también se prefiere que R7y R16 sean cada uno -H o -alquilo C1-6.
Los compuestos preferidos, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, como parte de la invención, incluyen los siguientes:
�
�
�
�
�
�
�
y
En otra realización, los compuestos preferidos, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, serán los siguientes:
y
Los compuestos anteriores representan la mezcla de diastereómeros, y los dos diastereómeros individuales. En ciertas realizaciones, uno de los diastereómeros específicos puede ser particularmente preferido.
Los compuestos de la presente invención, de acuerdo con las diversas realizaciones que se han descrito anteriormente, pueden administrarse por vía oral, parenteral (incluyendo inyecciones subcutáneas, intravenosas, intramusculares, intraesternales o técnicas de infusión), por pulverizador para inhalar o por vía rectal, y por otros medios, en formulaciones unitarias de dosificación que contienen vehículos, excipientes y/o diluyentes farmacéuticamente aceptables no tóxicos disponibles para el experto en la técnica. También se pueden incluir uno o más adyuvantes.
Por lo tanto, de acuerdo con la presente invención, se proporciona adicionalmente un procedimiento de tratamiento, y una composición farmacéutica, para tratar infecciones víricas, tales como infección por VIH y sida. El tratamiento implica administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una composición farmacéutica que contiene una cantidad antivírica eficaz de uno o más de los compuestos de la fórmula I, junto con uno o más vehículos, excipientes y/o diluyentes farmacéuticamente aceptables. Como se usa en el presente documento, la expresión "cantidad antivírica eficaz" significa la cantidad total de cada componente activo de la composición y el procedimiento que sea suficiente para mostrar un beneficio considerable para el paciente, es decir, inhibir, mejorar o curar las afecciones agudas caracterizado por la inhibición de la infección por VIH. Cuando se aplica a un principio individual, administrado en solitario, la expresión hace referencia a ese principio en solitario. Cuando se aplica a una combinación, la expresión hace referencia a cantidades combinadas de los principios activos que dan como resultado el efecto terapéutico, ya sea administrados de manera combinada, en serie o simultánea. Las expresiones "tratar, que trata, tratamiento", como se usan en el presente documento y en las reivindicaciones, significan prevenir, mejorar y/o curar enfermedades y afecciones asociadas a una infección por VIH.
Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden estar en forma de suspensiones o comprimidos de administración oral, así como pulverizadores nasales, preparaciones estériles inyectables, por ejemplo, como supositorios o suspensiones oleaginosas o acuosas estériles inyectables. Los vehículos, excipientes o diluyentes farmacéuticamente aceptables se pueden usar en las composiciones farmacéuticas, y son los que se usan en la técnica de las preparaciones farmacéuticas.
Cuando se administran de forma oral, como una suspensión, estas composiciones se preparan de acuerdo con técnicas normalmente conocidas en la técnica de la formulación farmacéutica y pueden contener celulosa microcristalina para generar un mayor volumen, ácido algínico o alginato de sodio como un agente de suspensión, metilcelulosa como un potenciador de la viscosidad, y agentes edulcorantes/aromatizantes conocidos en la técnica. Como comprimidos de liberación inmediata, estas composiciones pueden contener celulosa microcristalina, fosfato dicálcico, almidón, estearato de magnesio y lactosa y/u otros excipientes, aglutinantes, extensores, disgregantes, diluyentes y lubricantes conocidos en la técnica.
Las soluciones o suspensiones inyectables se pueden formular de acuerdo con la técnica conocida, mediante el uso de diluyentes o disolventes parenteralmente aceptables no tóxicos, tales como manitol, 1,3-butanodiol, agua, solución de Ringer o solución isotónica de cloruro de sodio, o agentes de dispersión, humectación o suspensión adecuados, tales como aceites estériles, suaves, fijos, que incluyen mono o diglicéridos sintéticos, y ácidos grasos, que incluyen ácido oleico.
Los compuestos expuestos en el presente documento pueden administrarse por vía oral a seres humanos, en un intervalo de dosificación de aproximadamente 1 a 100 mg/kg de peso corporal en dosis divididas, normalmente durante un período extendido de tiempo, tal como días, semanas, meses o incluso años. Un intervalo de dosificación preferido es de aproximadamente 1 a 10 mg/kg de peso corporal por vía oral en dosis divididas. Otro intervalo de dosificación preferido es de 1 a 20 mg/kg de peso corporal en dosis divididas. Sin embargo, se entenderá que el nivel de dosis específico y la frecuencia de dosificación para cualquier paciente en particular pueden variar y dependerán de diversos factores, incluyendo la actividad del compuesto específico empleado, la estabilidad metabólica y la duración de la acción de ese compuesto, la edad, el peso corporal, el estado de salud general, el sexo, la alimentación, la forma y el tiempo de administración, la velocidad de excreción, la combinación de fármacos, la gravedad de la afección particular, y el hospedador que se somete a terapia.
En el presente documento también se contemplan combinaciones de los compuestos de la fórmula I expuestas en el presente documento, junto con uno o más agentes útiles para el tratamiento del sida. Por ejemplo, los compuestos de esta divulgación pueden administrarse de manera eficaz, ya sea en períodos de preexposición y/o posexposición, junto con cantidades eficaces de antivíricos, inmunomoduladores, antiinfecciosos o vacunas contra el sida, tales como los que se indican en la siguiente tabla no limitante:
ANTIVÍRICOS
INMUNOMODULADORES
ANTIINFECCIOSOS
Además, los compuestos de la divulgación expuestos en el presente documento se pueden usar junto con inhibidores de la entrada del VIH. Los ejemplos de tales inhibidores de la entrada del VIH se analizan en DRUGs OF THE FUTURE 1999, 24(12), págs. 1355-1362; CELL, Vol. 9, págs. 243-246, oct. 29, 1999; y DRUG DISCOVERY TODAY, Vol. 5, N°.
5, mayo de 2000, págs. 183-194 e “Inhibitors of the entry of HIV in host cells”. Meanwell, Nicholas A.; Kadow, John F., Current Opinion en Drug Discovery & Development (2003), 6(4), 451-461. Específicamente, los compuestos pueden utilizarse junto con otros inhibidores del acoplamiento, inhibidores de la fusión y antagonistas del receptor de quimiocina dirigidos al correceptor CCR5 o CXCR4. Los inhibidores del acoplamiento del VIH también se exponen en los documentos US 7.354.924 y US 7.745.625.
Se entenderá que el alcance de las combinaciones de los compuestos de esta solicitud con antivíricos para el sida, inmunomoduladores, antiinfecciosos, inhibidores de la entrada del VIH o vacunas, no se limita a los enumerados en la Tabla anterior, sino que incluye, en principio, cualquier combinación con cualquier composición farmacéutica útil para el tratamiento del sida.
Las combinaciones preferidas son tratamientos simultáneos o alternados con un compuesto de la presente divulgación y un inhibidor de la proteasa del VIH y/o un inhibidor no nucleosídico de la transcriptasa inversa del VIH. Un cuarto componente opcional en la combinación es un inhibidor nucleosídico de la transcriptasa inversa del VIH, tal como AZT, 3TC, ddC o ddI. Un inhibidor preferido de la proteasa del VIH es REYATAZ® (principio activo Atazanavir). Normalmente, se administra una dosis de 300 a 600 mg una vez al día. Ésta puede administrarse conjuntamente con una dosis baja de Ritonavir (de 50 a 500 mg). Otro inhibidor preferido de la proteasa del VIH es<k>A<l>ETRA®. Otro inhibidor útil de la proteasa del VIH es indinavir, que es la sal sulfato de etanolato de N-(2(R)-hidroxi-1-(S)-indanil)-2(R)-fenilmetil-4-(S)-hidroxi-5-(1-(4-(3-piridil-metil)-2(S)-N'-(t-butilcarboxamido)piperazinil))-pentanamida, y se sintetiza de acuerdo con el documento U.S. 5.413.999. Indinavir se administra generalmente a una dosificación de 800 mg tres veces al día. Otros inhibidores preferidos de la proteasa son nelfinavir y ritonavir. Otro inhibidor preferido de la proteasa del VIH es saquinavir, que se administra en una dosificación de 600 o 1200 mg tid. Los inhibidores no nucleosídicos preferidos de la transcriptasa inversa del VIH incluyen efavirenz. Estas combinaciones pueden tener efectos inesperados sobre la limitación de la diseminación y el grado de infección del VIH. Las combinaciones preferidas incluyen aquellas con los siguientes (1) indinavir con efavirenz, y, opcionalmente, AZT y/o 3TC y/o ddI y/o ddC; (2) indinavir, y cualquiera de AZT y/o ddI y/o ddC y/o 3TC, en particular, indinavir y AZT y 3TC; (3) estavudina y 3TC y/o zidovudina; (4) sal fumarato de tenofovir disoproxilo y emtricitabina.
En tales combinaciones, el compuesto o compuestos de la presente invención y otros agentes activos se pueden administrar de manera conjunta o por separado. Además, la administración de un elemento puede ser anterior a, concurrente con, o posterior a la administración de otros agentes.
Química general (procedimientos de síntesis)
La presente invención comprende compuestos de la fórmula I, sus formulaciones farmacéuticas, y su uso en pacientes que padecen o son susceptibles a una infección por VIH. Los compuestos de la fórmula I incluyen también sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los procedimientos para construir los compuestos de la fórmula I e intermedios útiles para su síntesis se describen después de las Abreviaturas.
Abreviaturas
Una o más de las siguientes abreviaturas, la mayoría de las cuales son abreviaturas habituales conocidas por los expertos en la técnica, se pueden usar a lo largo de la descripción de la divulgación y los ejemplos:
TA = temperatura ambiente
BHT = 2,6-di-terc-butil-4-hidroxitolueno
CSA = ácido canforsulfónico
LDA = diisopropilamiduro de litio
KHMDS = bis(trimetilsilil)amiduro potásico
SFC = cromatografía de fluidos supercríticos
Cuant= cuantitativo
TBDMS = terc-butildimetilsilano
PTFE = politetrafluoroetileno
NMO = N-óxido de 4-metilmorfolina
THF = tetrahidrofurano
TLC = cromatografía de capa fina
DCM = diclorometano
DCE = dicloroetano
TFA = ácido trifluoroacético
LCMS = cromatografía líquida-espectroscopía de masas
Prep = preparativo
HPLC = cromatografía líquida de alta resolución
DAST = trifluoruro de (dietilamino)azufre
TEA = trietilamina
DIPEA = N,N-diisopropiletilamina
HATU = [hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio]
DCC = N,N'-diciclohexilcarbodiimida
DMAP = dimetilaminopiridina
TMS = trimetilsililo
RMN = resonancia magnética nuclear
DPPA = difenilfosforilazida
AIBN = azobisisobutironitrilo
TBAF = fluoruro de tetrabutilamonio
DMF = dimetilformamida
TBTU = tetrafluoroborato de O-(benzotriazol-1-il)-W,W,W'N-tetrametiluronio Min(s) = minuto(s)
h = hora(s)
sat. = saturado
TEA = trietilamina
EtOAc = acetato de etilo
TFA = ácido trifluoroacético
PCC = clorocromato de piridinio
TLC = cromatografía de capa fina
Tf2NPh = (trifluorometilsulfonil)metanosulfonamida
dioxano = 1,4-dioxano
PG = grupo protector
atm = atmósfera(s)
mol = mol(es)
mmol = milimol(es)
mg = miligramo(s)
μg = microgramo(s)
μl = microlitro(s)
μm = micrómetro(s)
mm = milímetro(s)
Rμm = revoluciones por minuto
SM = material de partida
TLC = cromatografía de capa fina
AP = porcentaje del área
Equiv. = equivalente(s)
DMP = peroyodinano de Dess-Martin
TMSCl = cloruro de trimetilsililo
TBSCl = cloruro de terc-butildimetilsililo
TBSOTf = trifluorometanosulfonato de trimetilsililo
PhMe = tolueno
PhNTf2 = N-Fenil-bis(trifluorometanosulfonimida)
S-Phos = 2-Diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo
TFDO = metil(trifluorometil)dioxirano
TEMPO = 2,2,6,6-tetrametilpiperidiniloxi
DI = agua desionizada
Las expresiones “C-3” y “C-28” hacen referencia a ciertas posiciones de un núcleo de triterpeno como se enumera de acuerdo con las reglas de la IUPAC (posiciones representadas a continuación con respecto a un triterpeno ilustrativo: betulina):
Se mantiene la misma numeración cuando se hace referencia a la serie de compuestos en los esquemas y las descripciones generales de los procedimientos.
Ejemplos
Los siguientes ejemplos ilustran síntesis típicas de los compuestos de Fórmula I como se ha descrito en general anteriormente. Estos ejemplos son únicamente ilustrativos y no pretenden limitar la divulgación de ningún modo. Los reactivos y materiales de partida están disponibles para un experto en la técnica.
Química
Procedimientos típicos y caracterización de los ejemplos seleccionados:
A menos que se indique otra cosa, se usaron directamente disolventes y reactivos como se obtienen a partir de fuentes comerciales, y se realizaron reacciones en una atmósfera de nitrógeno. La cromatografía ultrarrápida se realizó sobre gel de sílice 60 (tamaño de partícula 0,040-0,063; EM Science supply). Los espectros de RMN-1H se registraron en un Bruker DRX-500f a 500 MHz (o Bruker AV 400 MHz, Bruker DPX-300B, o Varian Gemini 300 a 300 MHz según se indicó). Los desplazamientos químicos se indicaron en ppm en la escala 6 con respecto a 6TMS = 0. Se utilizaron las siguientes referencias internas para los protones residuales en los siguientes disolventes: CDCb (6<h>7,26),CD3OD (6<h>3,30), acético-d4 (Ácido acéticoc4) (6<h>11,6, 2,07), mezcla DMSO o DMSO-D6-CDCl3 (6<h>2,50 y 8,25) (relación 75 %:25 %), y DMSO-D6 (6h 2,50). Se emplearon acrónimos estándares para describir los patrones de multiplicidad: s (singlete), s a (singlete ancho), d (doblete), t (triplete), c (cuadruplete), m (multiplete), a (ancho), ap. (aparente). La constante de acoplamiento (J)está en hercios. Todos los datos de cromatografía líquida (LC) se registraron en un cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS usando un detector SPD-10AV UV-Vis con datos de espectrometría de masas (MS) determinados usando una plataforma Micromass para LC en modo electronebulización.
Procedimientos de LCMS
Método de LCMS 1:
% de inicio de B = 0
% final de B = 100
Tiempo de Gradiente = 2 min
Caudal = 1 ml/min
Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 10 % de MeOH - 90 % de H2O - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 90 % de MeOH - 10 % de H2O - 0,1% de TFA
Columna = Phenomenex C182,0 x 30 mm 3μm
Método de LCMS 2:
% de inicio de B = 20
% final de B = 100
Tiempo de Gradiente = 3 min
Caudal = 0,6 ml/min
Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 10 % de MeOH - 90 % de H2O - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 90 % de MeOH - 10 % de H2O - 0,1% de TFA
Columna = Xbridge Phenyl 2,1 x 50 mm 2,5 μm
Método de LCMS 3:
% de inicio de B = 20
% final de B = 100
Tiempo de Gradiente = 2 min
Caudal = 0,6 ml/min
Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 10 % de MeOH - 90 % de H2O - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 90 % de MeOH - 10 % de H2O - 0,1% de TFA
Columna = Xbridge Phenyl 2,1 x 50 mm 2,5 gm
Método de LCMS 4:
% de inicio de B = 0
% final de B = 100
Tiempo de Gradiente = 4 min
Caudal = 0,8 ml/min
Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 10 % de MeOH - 90 % de H2O - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 90 % de MeOH - 10 % de H2O - 0,1% de TFA
Columna = Phenomenex C182,0 x 50 mm 3 gm
Método de LCMS 5:
% de inicio de B = 20
% final de B = 100
Tiempo de Gradiente = 3 min
Caudal = 0,8 ml/min
Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 10 % de MeOH - 90 % de H2O - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 90 % de MeOH - 10 % de H2O - 0,1% de TFA
Columna = Phenomenex C182,0 x 50 mm 3 gm
Método de LCMS 6:
% de inicio de B = 20
% final de B = 100
Tiempo de Gradiente = 2 min
Caudal = 0,8 ml/min
Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 10 % de MeOH - 90 % de H2O - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 90 % de MeOH - 10 % de H2O - 0,1 % de TFA
Columna = Phenomenex C182,0 x 50 mm 3 gm
Método de LCMS 7:
% de inicio de B = 20
% final de B = 100
Tiempo de Gradiente = 2 min
Caudal = 0,5 ml/min
Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 10 % de MeOH - 90 % de H2O - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 90 % de MeOH - 10 % de H2O - 0,1 % de TFA
Columna = Xbridge Phenyl 2,1 x 50 mm 2,5 μm
Método de LCMS 8:
% de inicio de B = 20
% final de B = 100
Tiempo de Gradiente = 2 min
Caudal = 0,8 ml/min
Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 10 % de MeOH - 90 % de H2O - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 90 % de MeOH - 10 % de H2O - 0,1 % de TFA
Columna = Xbridge Phenyl 2,1 x 50 mm 2,5 μm
Método de LCMS 9:
% de inicio de B = 0
% final de B = 100
Tiempo de Gradiente = 2 min
Caudal = 1,0 ml/min
Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 5 % de MeCN - 95 % de H2O - Acetato Amónico 10 mM Disolvente B = 95 % de MeCN - 5 % de H2O - Acetato Amónico 10 mM Columna = PHENOMENEX-LUNA C182,0 x 30 mm 3 μm
Método de LCMS 10:
% de inicio de B = 0
% final de B = 100
Tiempo de Gradiente = 4 min
Caudal = 0,6 ml/min
Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 10 % de MeOH - 90 % de H2O - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 90 % de MeOH - 10 % de H2O - 0,1 % de TFA Columna = Xbridge Phenyl 2,1 x 50 mm 2,5 |jm
Método de LCMS 11:
% de inicio de B = 0
% final de B = 100
Tiempo de Gradiente = 4 min
Caudal = 0,8 ml/min
Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 10 % de MeOH - 90 % de H2O - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 90 % de MeOH - 10 % de H2O - 0,1 % de TFA
Columna = Phenomenex C182,0 x 50 mm 3 jm
Método de LCMS 12:
% de inicio de B = 40
% final de B = 60
Tiempo de Gradiente = 4 min
Caudal = 0,8 ml/min
Longitud de onda = 254 nm
Disolvente A = 10 % de MeOH - 90 % de H2O - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 90 % de MeOH - 10 % de H2O - 0,1 % de TFA
Columna = Xbridge Phenyl 2,1 x 50 mm 2,5 jm
Método de LCMS 13:
% de inicio de B = 35
% final de B = 100
Tiempo de Gradiente = 4 min
Caudal = 0,8 ml/min
Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 10 % de MeOH - 90 % de H2O - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 90 % de MeOH - 10 % de H2O - 0,1 % de TFA
Columna = Phenomenex C182,0 x 50 mm 3 jm
Método de LCMS 14
Condiciones: 0% B al 100 % durante un gradiente de 4 minutos; mantenimiento en B al 100 % durante 1 min Disolvente A: 90 % de agua, 10 % de metanol, 0,1 % de TFA
Disolvente B: 10% de agua, 90% de metanol, 0,1 % de TFA
Columna: Phenomenex Luna C18, 3 mm, 2,0 x 50 mm
Caudal: 1 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Método de LCMS 15
Condiciones: 0% B al 100 % durante un gradiente de 2 minutos; mantenimiento en B al 100 % durante 1 min Disolvente A: 90 % de agua, 10 % de metanol, 0,1 % de TFA
Disolvente B: 10% de agua, 90% de metanol, 0,1 % de TFA
Columna: Phenomenex Luna C18, 2,0 x 50 mm, 3 |jm
Caudal: 1 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Método de LCMS 16
% de inicio de B = 2, % final de B = 98 durante un gradiente de 1,5 minutos; mantenimiento en B al 98 % durante 0,5 min
Caudal = 0,8 ml/min
Detector Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 100 % de agua, 0,05 % de TFA
Disolvente B = 100 % de acetonitrilo, 0,05 % de TFA
Columna = Waters Aquity UPLC BEH C182,1 x 50 mm 1,7 um
Temp. estufa = 40 °C
Método de LCMS 17
% de inicio de B = 2, % final de B = 98 durante un gradiente de 3 minutos; mantenimiento en B al 98 % durante 1 min Caudal = 0,8 ml/min
Detector Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 100 % de agua, 0,05 % de TFA
Disolvente B = 100 % de acetonitrilo, 0,05 % de TFA
Columna = Waters Aquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, 1,7 jm
Temp. estufa = 40 °C
Método de LCMS 18
% de inicio de B = 0, % final de B = 100 durante un gradiente de 4 minutos; mantenimiento en B al 100 % durante 1 min
Caudal = 0,8 ml/min
Detector Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 95 % de agua, 5 % de acetonitrilo, acetato amónico 10 mM
Disolvente B = 5 % de agua, 95 % de acetonitrilo, acetato amónico 10 mM
Columna = Phenomenex Luna C18, 50 x 2 mm, 3 μm
Temp. estufa = 40 °C
Método de LCMS 19
% de inicio de B = 2, % final de B = 98 durante un gradiente de 4 minutos; mantenimiento en B al 98 % durante 1 min Caudal = 0,8 ml/min
Detector Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 100 % de agua, 0,05 % de TFA
Disolvente B = 100 % de acetonitrilo, 0,05 % de TFA
Columna = Waters Aquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, 1,7 μm
Temp. estufa = 40 °C
Método de LCMS 20
% de inicio de B = 2, % final de B = 98 durante un gradiente de 2 minutos; mantenimiento en B al 98 % durante 1 min Caudal = 0,8 ml/min
Detector Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 100 % de agua, 0,05 % de TFA
Disolvente B = 100 % de acetonitrilo, 0,05 % de TFA
Columna = Waters Aquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, 1,7 μm
Temp. estufa = 40 °C
Método de LCMS 21
% de inicio de B = 0, % final de B = 100 durante un gradiente de 2 minutos; mantenimiento en B al 100 % durante 3 min
Caudal = 0,8 ml/min
Detector Longitud de onda = 220 nm
Disolvente A = 95 % de agua, 5 % de acetonitrilo, acetato amónico 10 mM
Disolvente B = 5 % de agua, 95 % de acetonitrilo, acetato amónico 10 mM
Columna = Phenomenex Luna C18, 50 x 2 mm, 3 μm
Temp. estufa = 40 °C
Procedimientos de HPLC preparativa
Método de HPLC preparativa 1
Condiciones: 30% B al — 7100 % durante un gradiente de 20 minutos; mantenimiento en B al 100 % durante 4 min Disolvente A: 5 % de acetonitrilo, 95 % de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B: 95 % de acetonitrilo, 5 % de agua, 0,1 % de TFA
Columna: Waters Xbridge 30 x 100 mm, 5 |jm
Caudal: 40 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Método de HPLC preparativa 2
Condiciones: B al 10%^ B al 100%durante un gradiente de 25 minutos
Disolvente A: 5 % de acetonitrilo, 95 % de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B: 95 % de acetonitrilo, 5 % de agua, 0,1 % de TFA
Columna: Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 um
Caudal: 40 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Método de HPLC preparativa 3
Condiciones: B al 10% ^ B al 100 % durante un gradiente de 20 minutos; mantenimiento en B al 100 % durante 5 min Disolvente A: 5 % de acetonitrilo, 95 % de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B: 95 % de acetonitrilo, 5 % de agua, 0,1 % de TFA
Columna: Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 um
Caudal: 40 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Método de HPLC preparativa 4
Condiciones: B al 30% ^ B al 100 % durante un gradiente de 20 minutos; mantenimiento en B al 100 % durante 5 min Disolvente A: 5 % de acetonitrilo, 95 % de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B: 95 % de acetonitrilo, 5 % de agua, 0,1 % de TFA
Columna: Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 um
Caudal: 40 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Método de HPLC preparativa 5:
% de inicio de B = 20, % final de B = 100 durante un gradiente de 10 min, mantenido en B al 100 % durante 4 min Caudal = 50 ml/min
Longitud de onda = 220
Par de disolventes = Agua - acetonitrilo - TFA
Disolvente A = 90 % de agua - 10 % de acetonitrilo - 0,1 % de TFA
Disolvente B = 10 % de a - 90 % de acetonitrilo - 0,1 % de TFA
Columna = Waters Sunfire C18, 5 jm , 30 x 150 mm
Método de HPLC preparativa 6
Condiciones: B al 0% ^ B al 100%durante un gradiente de 20 minutos
Disolvente A: 10% de acetonitrilo, 90% de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B: 90% de acetonitrilo, 10% de agua, 0,1 % de TFA
Columna: Waters Sunfire C18, 30 x 150 mm, 5 μm
Caudal: 50 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Método de HPLC preparativa 7
Condiciones: B al 30% ^ B al 100 % durante un gradiente de 20 minutos
Disolvente A: 10% de acetonitrilo, 90% de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B: 90% de acetonitrilo, 10% de agua, 0,1 % de TFA
Columna: Waters Sunfire C18, 30 x 150 mm, 5 μm
Caudal: 50 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Método de HPLC preparativa 8
Condiciones: B al 20% ^ B al 100 % durante un gradiente de 15 minutos
Disolvente A: 10% de acetonitrilo, 90% de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B: 90% de acetonitrilo, 10% de agua, 0,1 % de TFA
Columna: Waters Sunfire C18, 30 x 150 mm, 5 μm
Caudal: 50 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Procedimientos de MPLC preparativa
Procedimiento de MPLC preparativa 1
Condiciones: B al 30 % para 1 volumen de columna, gradiente de B al 30 % a B al 80 % para 7 volúmenes de columna, gradiente de B al 80 % a B al 100 % para 0,5 volúmenes de columna, B al 100 % para 2 volúmenes de columna Disolvente A = 5 % de acetonitrilo, 95 % de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B = 95 % de acetonitrilo, 5 % de agua, 0,1 % de TFA
Columna = Redi Sep Gold (150 g)
Caudal = 60 ml/min
Detector Longitud de onda = 220 nm
Procedimiento de MPLC preparativa 2
Condiciones: B al 30 % para 1 volumen de columna, gradiente de B al 30 % a B al 80 % para 10 columnas volúmenes, 100%B para 2 volúmenes de columna
Disolvente A = 5 % de acetonitrilo, 95 % de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B = 95 % de acetonitrilo, 5 % de agua, 0,1 % de TFA
Columna = Redi Sep Gold (150 g)
Caudal = 60 ml/min
Detector Longitud de onda = 220 nm
Procedimientos de HPLC analítica
Procedimiento de HPLC analítica 1
Condiciones: B al 10%^ B al 100%durante un gradiente de 15 min; mantenimiento en B al 100%durante 10 min Disolvente A: 10% de metanol, 90% de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B: 90% de metanol, 10% de agua, 0,1 % de TFA
Columna: Waters Sunfire C18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm
Caudal: 1 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Procedimiento de HPLC analítica 2
Condiciones: B al 10 % ^ B al 100 % durante un gradiente de 15 min; mantenimiento en B al 100 % durante 10 min Disolvente A: 10% de metanol, 90% de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B: 90% de metanol, 10% de agua, 0,1 % de TFA
Columna: Waters Xbridge fenilo, 4,6 x 150 mm, 3,5 mm
Caudal: 1 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Procedimiento de HPLC analítica 3
Condiciones: B al 10 % ^ B al 100 % durante un gradiente de 15 min; mantenimiento en B al 100 % durante 10 min Disolvente A: 5 % de acetonitrilo, 95 % de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B = 95 % de acetonitrilo, 5 % de agua, 0,1 % de TFA
Columna: Waters Sunfire C18, 3,0 x 150 mm, 3,5 um
Caudal: 0,5 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Procedimiento de HPLC analítica 4
Condiciones: B al 10 % ^ B al 100 % durante un gradiente de 15 min; mantenimiento en B al 100 % durante 10 min Disolvente A: 5 % de acetonitrilo, 95 % de agua, 0,1 % de TFA
Disolvente B = 95 % de acetonitrilo, 5 % de agua, 0,1 % de TFA
Columna: Waters Xbridge fenilo, 3,0 x 150 mm, 3,5 um
Caudal: 0,5 ml / min
Detector Longitud de onda: 220 nm
Preparación de intermedios
Intermedio 1. Preparación de 1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
Una mezcla de 4-oxociclohexanocarboxilato de etilo (12,7 g, 75 mmol), etilenglicol (21 ml, 373 mmol), ácido (1S)-(+)-10-canforsulfónico (0,175 g, 0,75 mmol) y tolueno anhidro (300 ml) se calentó a reflujo con una trampa de agua Dean-Stark durante 8 horas. La mezcla se inactivó con 100 ml de una solución saturada de bicarbonato sódico y se agitó vigorosamente. La fase orgánica separada se lavó con agua (100 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo al 0-15 %/hexanos para dar el producto deseado en forma de un aceite (15,9 g, 99 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) ó 4,13 (c, J=7,2 Hz, 2H), 3,95 (s, 4H), 2,34 (tt, J=10,4, 4,0 Hz, 1H), 1,98 - 1,90 (m, 2H), 1,87 - 1,75 (m, 4H), 1,61 - 1,51 (m, 2H), 1,25 (t, J=7,2 Hz, 3H).
Intermedio 2. Preparación de 8-formil-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
A una solución de 1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo (21 g, 98 mmol) en THF (150 ml) a -78 °C se le añadió gota a gota LDA 2 M (64 ml, 127 mmol). La solución resultante se agitó a -78 °C durante 1 h, después en un baño de hielo durante 1,5 h. La mezcla de reacción se enfrió de nuevo a -78 °C y se añadieron tamices moleculares. Se añadió lentamente gota a gota formiato de etilo seco (12 ml, 147 mmol) durante 1 h. La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 1 h. El baño frío se retiró y la reacción se inactivó gota a gota con una solución saturada de NH4CI en HCl 0,5 N (250 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se lavó con una solución saturada de NHaCl en HCl 0,5 N (200 ml) y salmuera (200 ml), se secó sobre Na2SO4, y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo al 0-20 %/hexanos para dar el producto deseado en forma de un aceite (9,3 g, 39 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 59,54 (s, 1H), 4,21 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 3,98 - 3,90 (m, 4H), 2,25 - 2,16 (m, 2H), 2,10 - 2,01 (m, 2H), 1,74 - 1,60 (m, 4H), 1,27 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Intermedio 3. Preparación de 8-(hidroximetil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
A una solución de 8-formil-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo (1,0 g, 4,13 mmol) en EtOH (10 ml) a 0 °C se le añadió NaBH4 (0,187 g, 4,95 mmol). La mezcla se agitó a 0 °C durante 1 h. La reacción se inactivó con NH4Cl saturado (10 ml) y después se diluyó con H2O hasta que se disolvió. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml), se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4y se concentróa l vacío.El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo al 0-25 %/hexanos para dar el producto deseado en forma de un aceite (0,86 g, 85 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,21 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 3,99 - 3,91 (m, 4H), 3,65 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 2,19 - 2,11 (m, 2H), 1,68 (dd, J = 6,8, 5,5 Hz, 4H), 1,63 - 1,57 (m, 2H), 1,29 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
Intermedio 4. Preparación de 8-((benzoiloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
A una solución de 8-(hidroximetil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo (3,0 g, 12,3 mmol) en piridina (60 ml) se le añadió D<m>A<p>(0,3 g, 2,5 mmol). La mezcla se calentó a 50 °C y se añadió anhídrido benzoico (3,1 g, 13,5 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 3 h. La mezcla de reacción se concentróa l vacío.El residuo se disolvió en EtOAc (50 ml), se lavó con salmuera (50 ml), se secó sobre Na2SO4, y se concentróa l vacío.El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con hexano al 0-20 %/EtOAc para dar el producto deseado en forma de un aceite (4,3 g, 100 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,01 (dd, J = 8,4, 1,4 Hz, 2H), 7,60 - 7,54 (m, 1H), 7,47 - 7,40 (m, 2H), 4,35 (s, 2H), 4,20 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 3,99 - 3,92 (m, 4H), 2,36 - 2,23 (m, 2H), 1,76 - 1,63 (m, 6H), 1,24 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Intermedio 5. Preparación de benzoato de (1-(etoxicarbonil)-4-oxociclohexil)metilo.
Una solución de 8-((benzoiloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo (4,3 g, 12,4 mmol) en acetona (120 ml) y HCl 0,5 N (24,8 ml, 12,4 mmol) se agitó a 50 °C durante una noche. La mezcla de reacción se neutralizó con Na2CO3 acuoso saturado y se concentró parcialmente al vacío para retirar la acetona. El residuo se diluyó con H2O (50 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con hexano al 0-30 %/EtOAc para dar el producto deseado en forma de un aceite (3,8 g, 100 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,01 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,62 - 7,55 (m, 1H), 7,49 - 7,42 (m, 2H), 4,45 (s, 2H), 4,28 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 2,61 - 2,48 (m, 4H), 2,47 - 2,37 (m, 2H), 1,91 - 1,79 (m, 2H), 1,28 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
Intermedio 6. Preparación de benzoato de (1-(etoxicarbonil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-en-1-il)metilo.
Una solución de benzoato de (1-(etoxicarbonil)-4-oxociclohexil)metilo (3,8 g, 12,4 mmol) y 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-((trifluorometil)sulfonil)metanosulfonamida (4,95 g, 13,8 mmol) en THF (120 ml) se enfrió a -78 °C. A esta solución se le añadió K<h>M<d>S (1 M en THF) (16,4 ml, 16,4 mmol). La solución resultante se agitó a -78 °C durante 2 h. La reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado (50 ml), se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo al 0-20 %/hexanos para dar el producto deseado (3,8 g, 69 %) en forma de un aceite. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,00 (dd, J=8,4, 1,1 Hz, 2H), 7,62 - 7,56 (m, 1H), 7,49 - 7,44 (m, 2H), 5,80 (td, J=3,2, 1,6 Hz, 1H), 4,46 - 4,40 (m, 2H), 4,21 (cd, J=7,1,2,1 Hz, 2H), 2,93 - 2,83 (m, 1H), 2,59 - 2,27 (m, 4H), 1,99 - 1,90 (m, 1H), 1,25 (t, J=7,2 Hz, 3H).
Intermedio 7. Benzoato de (1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo.
Una mezcla de benzoato de (1-(etoxicarbonil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-en-1-il)metilo (3,8 g, 8,7 mmol), bis(pinacolato)diboro (2,4 g, 9,5 mmol), acetato potásico (2,6 g, 26,0 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,2 g, 0,260 mmol) en 1,4-dioxano (80 ml) se enfrió a -78 °C. Se realizaron tres ciclos de evacuación del matraz y purga con nitrógeno. La mezcla se agitó a 70 °C durante 3 h. La mezcla se diluyó con agua (50 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo al 0-20 %/hexanos para dar el producto deseado (5,8 g, 67 %) en forma de un aceite. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,00 (dd, J=8,4, 1,4 Hz, 2H), 7,59 - 7,54 (m, 1H), 7,46 - 7,41 (m, 2H), 6,54 (dt, J=3,6, 1,9 Hz, 1H), 4,44 (d, J=10,8 Hz, 1H), 4,39 (d, J=10,8 Hz, 2H), 4,17 (q, J=7,2 Hz, 2H), 2,77 - 2,68 (m, 1H), 2,29 - 2,20 (m, 3H), 2,05 - 1,97 (m, 1H), 1,92 - 1,83 (m, 1H), 1,27 (s, 12H), 1,22 (t, J=72 Hz, 3H).
Intermedios 8 y 9. Separación quiral de benzoato de (S)-(1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo y benzoato de (R)-(1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1 -il)metilo.
La mezcla racémica se separó por cromatografía de fluidos supercríticos (SFC) para dar benzoato de (S)-(1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo y benzoato de (R)-(1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo.
Detalles experimentales SFC:
Columna: ChiralCel OJ-H, 30 x 250mm, 5gm
Fase móvil: 5% MeOH / 95% CO2
Presión: 100 bar
Temperatura: 40°C
Caudal: 70 ml/min
UV: 225 nm
Inyección: 0,50 ml (~100 mg/ml en IPA:ACN:MeOH, 2:2:1)
Recolección de fracciones: Pendiente y nivel (con 6 ml/min de composición de MeOH):
Ventana del pico 1: 3,00' - 4,50'
Ventana del pico 2: 3,80' - 7,00'
Intermedio 10. Preparación de 8-(((metilsulfonil)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
A 8-(hidroximetil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo secado al vacío (280 mg, 1,146 mmol) en DCM (2 ml) se le añadió N,N-diisopropiletilamina (0,299 ml, 1,719 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. La solución transparente se enfrió en un baño de hielo hasta que estuvo fría. A esto se le añadió, gota a gota, cloruro de metanosulfonilo puro (0,106 ml, 1,375 mmol) y la solución resultante se agitó en el baño de hielo y se dejó alcanzar la TA durante una noche. La mezcla de reacción en bruto se purificó sobre una columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo al 50 %/hexanos para dar el producto deseado (304 mg, 82 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,26 - 4,17 (m, 4H), 3,97 - 3,93 (m, 4H), 3,00 (s, 3H), 2,24 - 2,15 (m, 2H), 1,73 - 1,61 (m, 6H), 1,29 (t,J= 7,2 Hz, 3H).
Procedimiento General A: Preparación de derivados de ácido ciclohexenocarboxílico a-sustitu idos en C-3.
Etapa 1: Preparación del éter.
Etapa 1 -A: A una solución de 8-(hidroximetil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo (intermedio 3) (1 equiv.), reactante Ar-OH (1 equiv.) y trifenilfosfina (1,2 equiv.) en THF se le añadió gota a gota diazeno-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (1,2 equiv.) en una atmósfera de nitrógeno. La solución resultante se agitó a TA durante 1 h, después a 50 °C durante 3 días. La mezcla de reacción se diluyó con NH4Cl saturado, se extrajo con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4y se concentróa l vacío.El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo/hexanos para dar el producto deseado.
Etapa 1-B: Una mezcla de 8-(((metilsulfonil)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo (1 equiv.), carbonato de cesio (2,15 equiv.) y Ar-OH (3,5 equiv.) en acetonitrilo se agitó a 85 °C durante 48 horas. Las sales inorgánicas se retiraron por filtración, y el filtrado se lavó con agua, se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica combinada se concentróa l vacío.El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo/hexanos para dar el producto deseado.
Etapa 2: Preparación de cetona.
Una solución del producto de la etapa 1 (1 equiv.) y HCl 0,5 N (1 equiv.) en acetona se agitó a 50 °C durante 1-2 días. La mezcla de reacción se neutralizó con una solución acuosa saturada. Na2CO3y se concentró parcialmentea l vacíopara eliminar la acetona. El residuo se diluyó con H2O, se extrajo con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, y se concentróa l vacío.El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo/hexanos para dar la cetona deseada.
Etapa 3: Preparación de triflato.
A una solución de cetona de la etapa 2 (1 equiv.) y 1,1,1-trifluoro-N-fenil-N-((trifluorometil)sulfonil)metanosulfonamida (1,1 equiv.) en THF a -78 °C se le añadió<k>H<m>DS (1 M en THF) (1,3 equiv.). La solución de color amarillo a naranja resultante se agitó a -78 °C durante 2 h. La reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado. La mezcla se extrajo con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo/hexanos para dar el triflato deseado.
Etapa 4: Preparación de boronato.
En un recipiente a presión, una mezcla de triflato de la etapa 3 (1 equiv.), bis(pinacolato)diboro (1,1 equiv.), KOAc (2,5 equiv.) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,03 equiv.) en 1,4-dioxano se purgó con nitrógeno, se cerró herméticamente y se calentó a 70 °C durante 2 h. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo/hexanos para dar el boronato deseado.
Etapa 5: Preparación de éster ciclohexenocarboxílico a-sustituido en C-3.
Una mezcla de C3-triflato (1 equiv.), boronato de la etapa 4 (1 equiv.), Na2CO3H2O (3 equiv.) y Pd(Ph3P)4 (0,06 equiv.) en dioxano y H2O (4:1) se purgó con nitrógeno, se cerró herméticamente y se calentó a 70 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se concentróa l vacío,y el residuo se repartió entre EtOAc y H2O. La capa acuosa separada se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo/hexanos para dar el éster ciclohexenocarboxílico a-sustituido en C-3.
Etapa 6: Preparación de ácido carboxílico.
Una solución de éster de la etapa 5 en 1,4-dioxano, MeOH y NaOH 1 N (2 : 1 : 1) se agitó a 60-70 °C durante 1-2 h. La mezcla de reacción se purificó por HPLC preparativa de fase inversa para dar el producto final.
Ejemplo 1
Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-((piridin-2-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 83%en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando piridin-2-ol como reactante. RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 58,14 (ddd, J = 5,0, 2,0, 0,8 Hz, 1H), 7,59 - 7,53 (m, 1H), 6,87 (ddd, J = 7,1,5,1,0,9 Hz, 1H), 6,73 (dt, J = 8,4, 0,8 Hz, 1H), 4,38 (s, 2H), 4,17 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 4,01 - 3,93 (m, 4H), 2,35 - 2,24 (m, 2H), 1,79 - 1,67 (m, 6H), 1,23 (t, J = 7,1 Hz, 3H). LC/MSm/z322,10 (M+H)+, 1,93 min (Método de LCMS 1).
Etapa 2. Preparación de 4-oxo-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 99 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-((piridin-2-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,14 (ddd, J = 5,1, 1,9, 0,8 Hz, 1H), 7,61 - 7,55 (m, 1H), 6,90 (ddd, J = 7,1,5,1,0,9 Hz, 1H), 6,74 (dt, J = 8,3, 0,8 Hz, 1H), 4,45 (s, 2H), 4,24 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 2,59 - 2,48 (m, 4H), 2,46 - 2,37 (m, 2H), 1,94 - 1,83 (m, 2H), 1,26 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MSm/z278,05 (M+H)+, 1,74 min (Método de lCm S 1).
Etapa 3. Preparación de 1-((piridin-2-iloxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 110 % (que contenía PhNHTf) en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 4-oxo-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohexano-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,14 (ddd, J=5,0, 2,0, 0,8 Hz, 1H), 7,62 - 7,55 (m, 1H), 6,90 (ddd, J=7,1,5,1,0,9 Hz, 1H), 6,73 (dt, J=8,3, 0,8 Hz, 1H), 5,80 - 5,76 (m 1H), 4,45 (d, J=10,3 Hz, 1H), 4,39 (d, J=10,3 Hz, 1H), 4,18 (cd, J=7,1, 1,3 Hz, 2H), 2,88 - 2,80 (m, 1H), 2,56 - 2,25 (m, 4H), 2,02 - 1,93 (m, 1H), 1,22 (t, J=7,2 Hz, 3H). RMN-19F (376MHz, CLOROFORMO-d) 5 -73,87 (s, 3F). /LC/MSm/z410,00 (M+H)+, 2,24 min (Método de LCMS 1).
Etapa 4. Preparación de 1-((piridin-2-iloxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 75 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-((piridin-2-iloxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,13 (ddd, J=5,0, 2,0, 0,8 Hz, 1H), 7,58 - 7,51 (m, 1H), 6,86 (ddd, J=7,0, 5,1, 0,9 Hz, 1H), 6,71 (dt, J=8,4, 0,8 Hz, 1H), 6,57 - 6,53 (m, 1H), 4,42 (d, J=10,0 Hz, 1H), 4,33 (d, J=10,0 Hz, 1H), 4,14 (cd, J=6,7, 1,4 Hz, 2H), 2,73 (dc, J=18,8, 2,8 Hz, 1H), 2,31 - 2,18 (m, 3H), 2,03 - 1,95 (m, 1H), 1,91 - 1,83 (m, 1H), 1,27 (s, 6H), 1,26 (s, 6H), 1,19 (t, J=7,0 Hz, 3H). LC/MSm/z388,20 (M+H)+, 2,22 min (Método de LCMS 1).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 71 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1-((piridin-2-iloxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,13 (dd, J = 5,1, 1,4 Hz, 1H), 7,55 (ddd, J = 8,6, 7,0, 2,0 Hz, 1H), 6,85 (ddd, J = 7,0, 5,3, 0,8 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,35 (s a, 1H), 5,18 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,47 - 4,37 (m, 2H), 4,14 ((cd, J = 6,7, 1,4 Hz, 2H), 3,12 - 2,99 (m, 8H), 2,73 - 2,39 (m, 6H), 2,23 - 0,84 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,20 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,05 (s, 3H), 0,96 - 0,90 (m, 9H), 0,89 (s, 3H). LC/MSm/z830,00 (M+H)+, 3,74 min (Método de LCMS 2).
Etapa 6. Se preparó 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 32 % como sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,14 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 7,59 - 7,52 (m, 1H), 6,89 - 6,84 (m, 1H), 6,73 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,35 (s a, 1H), 5,21 - 5,16 (m, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,50 - 4,38 (m, 2H), 3,14 - 2,99 (m, 8H), 2,86 - 2,57 (m, 6H), 2,29 - 0,89 (m, 27H), 1,68 (s, 3H), 1,10 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,97 - 0,91 (m, 6H), 0,85 (s, 3H). LC/MSm/z802,50 (M+H)+, 3,56 min (Método de LCMS 2).
Ejemplo 2
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 99 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando 1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-ol como reactante. RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 57,78 - 7,70 (m, 2H), 7,39 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 7,32 - 7,28 (m, 1H), 5,83 (s, 1H), 4,21 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 4,12 (s, 2H), 4,01 - 3,94 (m, 4H), 3,67 (s, 3H), 2,37 - 2,26 (m, 2H), 1,80 - 1,65 (m, 6H), 1,31 - 1,26 (m, 3H). LC/MSm/z401,10 (M+H)+, 2,17 min (Método de LCMS 1).
Etapa 2. Preparación de 1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 81 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. 1H-RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5
7,75 - 7,71 (m, 2H), 7,42 - 7,35 (m, 2H), 7,32 - 7,27 (m, 1H), 5,84 (s, 1H), 4,28 (q, J=7,0 Hz, 2H), 4,19 (s, 2H), 3,68 (s, 3H), 2,63 - 2,51 (m, 4H), 2,48 - 2,39 (m, 2H), 1,92 - 1,81 (m, 2H), 1,30 (t, J=7,2 Hz, 3H). LC/MSm /z357,15 (M+H)+, 1,99 min (Método de LCMS 1).
Etapa 3. Preparación de 1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 68 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,75 - 7,71 (m, 2H), 7,41 - 7,35 (m, 2H), 7,32 - 7,29 (m, 1H), 5,84 (s, 1H), 5,83 - 5,79 (m, 1H), 4,25 - 4,10 (m, 4H), 3,67 (s, 3H), 2,92 - 2,82 (m, 1H), 2,59 -2,25 (m, 4H), 2,00 (ddd,J= 13,7, 7,8, 6,4 Hz, 1H), 1,27 (t,J= 7,2 Hz, 3H). RMN-19F (376 MHz, CLOROFORMO-d) 5 -73,83 (s, 3F). LC/MSm /z489,20 (M+H)+, 2,30 min (Método de LCMS 1).
Etapa 4. Preparación de 1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 68 % en forma de una cera, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFOr Mo -d) 57,75 - 7,71 (m, 2H), 7,41 - 7,34 (m, 2H), 7,31 - 7,28 (m, J = 7,5 Hz, 1H), 6,57 - 6,53 (m, 1H), 5,83 (s, 1H), 4,23 -4,11 (m, 4H), 3,65 (s, 3H), 2,76 - 2,67 (m, 1H), 2,32 - 2,12 (m, 3H), 2,03 - 1,86 (m, 2H), 1,27 (s, 12H), 1,23 (t, J = 7,0 Hz 3H). LC/MSm /z467,30 (M+H)+, 3,58 min (Método de LCMS 2).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 59 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,74 - 7,70 (m, 2H), 7,40 - 7,33 (m, 2H), 7,31 - 7,25 (m, 1H), 5,83 (s, 1H), 5,36 (s a, 1H), 5,19 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,24 - 4,15 (m, 4H), 3,65 (s, 3H), 3,10 - 2,98 (m, 8H), 2,74 - 2,43 (m, 6H), 2,32 - 1,02 (m, 27H), 1,68 (s, 3H), 1,26 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,06 (s, 3H), 0,97 - 0,91 (m, 9H), 0,86 (s, 3H). LC/MSm /z909,60 (M+H)+, 3,89 min (Método de LCMS 2).
Etapa 6. Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 81 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-metil-3-fenil-1H-pirazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. r Mn-1H (400 MHz, METANOL-d4) 57,73 - 7,68 (m, 2H), 7,40 - 7,34 (m, 2H), 7,31 - 7,26 (m, 1H), 6,04 (s, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,22 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,65 (s, 1H), 4,31 - 4,23 (m, 2H), 3,64 (s, 3H), 3,20 - 3,04 (m, 8H), 2,92 - 2,61 (m, 6H), 2,24 - 1,10 (m, 27H), 1,73 (s, 3H), 1,16 (s, 3H), 1,06 (s, 3H), 1,00 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,92 (s, 3H). LC/MSm /z881,55 (M+H)+, 3,77 min (Método de LCMS 2).
Ejemplo 3
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 86 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando 1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-ol como reactante. RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 55,99 (s, 1H), 4,20 (c,J= 7,2 Hz, 2H), 4,19 (s, 2H), 3,96 (t,J= 3,0 Hz, 4H), 3,82 (s, 3H), 2,31 - 2,19 (m, 2H), 1,78 - 1,64 (m, 6H), 1,26 (t,J= 7,1 Hz, 3H). LC/MSm/z393,05 (M+H)+, 2,18 min (Método de LCMS 1).
Etapa 2. Preparación de 1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 98 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. Rm N-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,99 (s, iH), 4,26 (s, 2H), 4,26 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 3,82 (d,J= 0,8 Hz, 3H), 2,59 - 2,34 (m, 6H), 1,92 - 1,79 (m, 2H), 1,28 (t,J= 6,8 Hz, 3H). 19F RMN (376MHz, CLOROFORMO-d) 5 -60,88 (s, 3F). LC/MSm/z349,15 (M+H)+, 2,08 min (Método de LCMS 1).
Etapa 3. Preparación de 1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 70 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,99 (s, iH ), 5,79 -5,76 (m, 1H), 4,29 - 4,16 (m, 4H), 3,81 (d, J = 0,8 Hz, 3H), 2,85 - 2,75 (m, 1H), 2,55 - 2,19 (m, 4H), 2,02 - 1,93 (m, 1H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H). 19F RMN (376MHz, CLOROFORMO-d) 5 -60,89 (s, 3F), -73,88 (s, 3F). LC/MSm/z481,10 (M+H)+, 2,32 min (Método de LCMS 1).
Etapa 4. Preparación de 1 -(((1 -metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 79 % en forma de una cera, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFOr Mo -d) 56,55 - 6,51 (m, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,25 (d, J=9,3 Hz 1H), 4,19 - 4,13 (m, 3H), 3,81 (d, J=0,8 Hz, 3H), 2,69 (dc, J=19,1,2,8 Hz, 1H), 2,27 - 2,16 (m, 3H), 2,00 - 1,81 (m, 2H), 1,26 (s, 12H), 1,22 (t, J=7,2 Hz, 3H). RMN-19F (376MHz, CLOROFORMO-d) 5 -60,84 (s, 3F). LC/MSm/z481,13 (M+Na)+, 2,41 min (Método de LCMS 1).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 88 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,98 (s, 1H), 5,33 (s a, 1H), 5,17 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,29 - 4,09 (m, 4H), 3,80 (s, 3H), 3,12 - 3,00 (m, 8H), 2,79 - 2,46 (m, 6H), 2,24 - 0,88 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,22 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,05 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,96 - 0,89 (m, 6H), 0,85 (s, 3H). 19F RMN (376MHz, CLOROFORMO-d) 5 -60,83 (s, 3F). LC/MSm/z901,50 (M+H)+, 3,89 min (Método de LCMS 2).
Etapa 6. Se preparó 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidothiomorfolino) etil) amino)-5 a, 5 b, 8, 8,11 a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 56 % como sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando etilo 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-metil-5-(trifluorometil)-1H-pirazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,00 (s, 1H), 5,35 (s a, 1H), 5,19 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,34 - 4,21 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,14 - 2,99 (m, 8H), 2,76 - 2,54 (m, 6H), 2,23 - 1,04 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,08 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,97 - 0,92 (m, 6H), 0,86 (s, 3H). 19F RMN (376MHz, CLOROFORMO-d) 5 -60,81 (s, 3F). LC/MSm/z873,45 (M+H)+, 3,73 min (Método de LCMS 2).
Ejemplo 4
Preparación de 2-((1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS, 11,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)metoxi)ácido tiazol-4-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 2-((8-(etoxicarbonil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decan-8-il)metoxi)tiazol-4-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó en forma de un aceite sin purificación adicional, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando 2-hidroxitiazol-4-carboxilato de etilo como reactante. LC/MSm/z400,30 (M+H)+, 2,18 min (Método de LCMS 1).
Etapa 2. Preparación de 2-((1-(etoxicarbonil)-4-oxociclohexil)metoxi)tiazol-4-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 26%(rendimiento calculado en 2 etapas) en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 2-((8-(etoxicarbonil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decan-8-il)metoxi)tiazol-4-carboxilato de etilo en bruto como reactante. R<m>N-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,61 (s, 1H), 4,66 (s, 2H), 4,38 (c, J = 7,3 Hz, 2H), 4,26 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 2,58 - 2,48 (m, 4H), 2,45 - 2,36 (m, 2H), 1,92 - 1,81 (m, 2H), 1,39 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,28 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Etapa 3. Preparación de 2-((1-(etoxicarbonil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-en-1-il)metoxi)tiazol-4-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 40 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 2-((1-(etoxicarbonil)-4-oxociclohexil)metoxi)tiazol-4-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,60 (s, 1H), 5,80 - 5,76 (m, 1H), 4,66 (d, J=10,0 Hz, 1H), 4,60 (d, J=10,3 Hz, 1H), 4,38 (c,J=7,0Hz, 2H), 4,19 (cd, J=7,1, 0,8 Hz, 2H), 2,87 - 2,79 (m, 1H), 2,56 - 2,23 (m, 4H), 1,99 - 1,90 (m, 1H), 1,38 (t, J=7,2 Hz, 3H), 1,24 (t, J=7,0 Hz, 3H). 19F RMN (376MHz, CLOROFORMO-d) 5 73,84 (s, 3F). LC/MSm /z488,15 (M+H)+, 2,41 min (Método de LCMS 1).
Etapa 4. Preparación de 2-((1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)metoxi)tiazol-4-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 57%en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 2-((1-(etoxicarbonil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-en-1-il)metoxi)tiazol-4-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,58 (s, 1H), 6,54 - 6,49 (m, 1H), 4,64 (d,J= 10,0 Hz, 1H), 4,56 (d,J= 10,0 Hz, 1H), 4,37 (c,J= 7,0 Hz, 2H), 4,16 (c,J= 7,2 Hz, 2H), 2,68 (dc,J= 19,1, 3,0 Hz, 1H), 2,27 - 2,16 (m, 3H), 2,00 - 1,81 (m, 2H), 1,38 ((t,J= 7,0 Hz, 3H), 1,26 (s, 12H), 1,21 ((t,J= 7,0 Hz, 3H). LC/MSm /z466,30 (M+H)+, 2,42 min (Método de LCMS 1).
Etapa 5. Preparación de 2-((4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1 -il)metoxi)tiazol-4-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 79 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 2-((1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)metoxi)tiazol-4-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 7,58 (s, 1H), 5,33 (s a, 1H), 5,18 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,67 - 4,60 (m, 2H), 4,59 (s, 1H), 4,37 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 4,20 - 4,09 (m, 2H), 3,12 - 2,96 (m, 8H), 2,74 - 2,41 (m, 6H), 2,21 - 0,86 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,38 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,22 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,05 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,96 - 0,90 (m, 6H), 0,85 (s, 3H). LC/MSm/z908,60 (M+H)+, 3,05 min (Método de LCMS 3).
Etapa 6. Se preparó 2-((1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidothiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)metoxi)tiazol-4-carboxílico con un rendimiento del 85% como sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A, etapa 6, usando 2-((4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]criseno-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metoxi)tiazol-4-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (500 MHz, METANOL-d4) 57,49 (s, 1H), 5,34 (s a, 1H), 5,21 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,68 (s, 1H), 4,61 - 4,53 (m, 2H), 3,27 - 3,06 (m, 11H), 2,99 - 2,96 (m, 1H), 2,89 - 2,80 (m, 1H), 2,67 - 2,58 (m, 1H), 2,35 - 1,04 (m, 27H), 1,73 (s, 3H), 1,18 (s, 3H), 1,09 (s, 3H), 1,00 - 0,96 (m, 6H), 0,92 (s, 3H). LC/MSm /z852,50 (M+H)+, 2,86 min (Método de LCMS 3).
Ejemplo 5
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 64%en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando 4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-ol como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,43 (s, 2H), 4,18 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 3,99 - 3,92 (m, 4H), 2,36 (s, 3H), 2,31 - 2,24 (m, 2H), 1,75 - 1,66 (m, 6H), 1,24 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MSm/z343,20 (M+H)+, 2,17 min (Método de LCMS 1).
Etapa 2. Preparación de 1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 81 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,51 (s, 2H), 4,26 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 2,61 - 2,38 (m, 6H), 2,37 (s, 3H), 1,91 - 1,82 (m, 2H), 1,28 (t,J= 7,2 Hz, 3H). LC/MSm/z299,20 (M+H)+, 1,94 min (Método de LCMS 1).
Etapa 3. Preparación de 1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 60 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,82 - 5,78 (m, 1H), 4,52 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,47 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,26 - 4,12 (m, 2H), 2,90 - 2,82 (m, 1H), 2,59 - 2,27 (m, 4H), 2,36 (s, 3H), 2,00 - 1,93 (m, 1H), 1,24 (t, J = 7,0 Hz, 3H). 19F RMN (376MHz, CLOROFORMO-d) 5 -73,83 (s, 3F). LC/MSm/z431,15 (M+H)+, 2,41 min (Método de LCMS 1).
Etapa 4. Preparación de 1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 74%en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFOr Mo -d) 56,56 - 6,52 (m, 1H), 4,51 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,44 (d,J= 10,0 Hz, 1H), 4,16 (cd,J= 7,1, 1,1 Hz, 2H), 2,71 (dc, J = 19,1, 3,3 Hz, 1H), 2,35 (s, 3H), 2,31 - 2,17 (m, 3H), 2,04 - 1,85 (m, 2H), 1,26 (s 12H), 1,21 (t, J=7,0 Hz, 3H). LC/MSm/z409,25 (M+H)+, 2,45 min (Método de LCMS 1).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 73 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 5,36 (s a, 1H), 5,19 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,63 (s, 1H), 4,56 - 4,44 (m, 2H), 4,21 - 4,09 (m, 2H), 3,17 - 3,00 (m, 8H), 2,98 - 2,59 (m, 6H), 2,23 - 0,82 (m, 27H), 2,35 (s, 3H), 1,70 (s, 3H), 1,22 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,06 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,97 - 0,91 (m, 6H), 0,85 (s, 3H). LC/MSm/z851,55 (M+H)+, 3,07 min (Método de LCMS 3).
Etapa 6. Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 53 % como sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((4-metil-1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante.
RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,36 (s a, 1H), 5,18 (s a, 1H), 4,74 (s a, 1H), 4,65 (s a, 1H), 4,59 - 4,45 (m, 2H), 3,24 - 2,98 (m, 9H), 2,89 - 2,51 (m, 5H), 2,34 (s, 3H), 1,68 (s, 3H), 2,22 - 0,97 (m, 27H), 1,15 (s, 3H), 1,02 (s, 3H), 0,97 - 0,89 (m, 6H), 0,86 (s, 3H). LC/MSm/z823,55 (M+H)+, 2,85 min (Método de LCMS 3).
Ejemplo 6
Preparación de ácido 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 92 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando 1,2,5-tiadiazol-3-ol como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,97 (s, 1H), 4,46 (s, 2H), 4,18 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 4,00 - 3,92 (m, 4H), 2,32 - 2,21 (m, 2H), 1,76 - 1,66 (m, 6H), 1,24 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MSm/z329,20 (M+H)+, 2,07 min (Método de LCMS 1).
Etapa 2. Preparación de 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 80%en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,99 (s, 1H), 4,54 (s, 2H), 4,26 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 2,60 - 2,50 (m, 4H), 2,47 - 2,38 (m, 2H), 1,93 - 1,82 (m, 2H), 1,28 (t, J = 7,0 Hz, 3H). LC/MSm/z285,15 (M+H)+, 1,85 min (Método de LCMS 1).
Etapa 3. Preparación de 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 34 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,99 (s, 1H), 5,81 - 5,78 (m, 1H), 4,55 (d, J=10,3 Hz, 1H), 4,50 (d, J=10,3 Hz, 1H), 4,20 (cd, J=7,1,0,8 Hz, 2H), 2,90 - 2,81 (m, 1H), 2,57 - 2,25 (m, 4H), 2,04 - 1,95 (m, 1H), 1,24 (t, J=7,2 Hz, 3H). 19F RMN (376 MHz, CLOROFORMO-d) 5 - 73,83 (s, 3F). LC/MSm/z417,10 (M+H)+, 2,37 min (Método de LCMS 1).
Etapa 4. Preparación de 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 69 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi) metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil) oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. Rm N-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,96 (s, 1H), 6,56 - 6,52 (m, 1H), 4,54 (d, J=10,0 Hz, 1H), 4,45 (d, J=10,0 Hz, 1H), 4,16 (c, J=7,0 Hz, 2H), 2,71 (dc, J=18,9, 3,4 Hz, 1H), 2,30 - 2,17 (m, 3H), 2,03 - 1,94 (m, 1H), 1,92 - 1,83 (m, 1H), 1,26 (s, 12H), 1,21 (t, J=7,2 Hz, 3H). LC/MSm/z395,30 (M+H)+, 2,40 min (Método de LCMS 1).
Etapa 5. Preparación de 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 76 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,97 (s, 1H), 5,35 (s a, 1H), 5,18 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,58 - 4,49 (m, 2H), 4,16 (c,J=7,5Hz, 2H), 3,13 - 2,98 (m, 8H), 2,76 - 2,43 (m, 6H), 2,22 - 0,82 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,22 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,06 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,96 - 0,91 (m, 6H), 0,85 (s, 3H). LC/MSm/z837,55 (M+H)+, 3,08 min (Método de LCMS 3).
Etapa 6. Se preparó ácido 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidothiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico en un rendimiento del 56 % como sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 1-(((1,2,5-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a, 5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5 a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]criseno-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,98 (s, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,19 (s a, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,66 (s, 1H), 4,62 - 4,49 (m, 2H), 3,23 - 3,00 (m, 8H), 2,90 - 2,53 (m, 6H), 2,28 - 0,89 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,16 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 0,97 - 0,91 (m, 6H), 0,86 (s, 3H). LC/MSm/z809,50 (M+H)+, 2,90 min (Método de LCMS 3).
Ejemplo 7
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 56%en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-B, usando 1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-ol como reactante. RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 57,07 (s, 1H), 4,19 (c, J = 7,1 Hz, 3H), 4,17 (c, J = 7,3 Hz, 2H), 4,10 (s, 2H), 4,01 - 3,92 (m, 4H), 2,33 - 2,24 (m, 2H), 1,76 - 1,61 (m, 6H), 1,44 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MSm/z340,25 (M+Na)+, 1,91 min (Método de LCMS 1).
Etapa 2. Preparación de 1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 86 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,09 (s, 1H), 4,26 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 4,18 (c, J = 7,5 Hz, 2H), 4,17 (s, 2H), 2,61 - 2,50 (m, 4H), 2,47 - 2,38 (m, 2H), 1,89 - 1,78 (m, 2H), 1,45 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 1,28 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MSm/z296,25 (M+H)+, 1,62 min (Método de LCMS 1). Etapa 3. Preparación de 1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 35 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,09 (s, 1H), 5,82 - 5,78 (m, 1H), 4,24 -4,13 (m, 6H), 2,90 - 2,81 (m, 1H), 2,60 - 2,24 (m, 4H), 2,00 - 1,92 (m, 1H), 1,44 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H). RMN-19F (376 MHz, CLOROFORMO-d) 5 -73,82 (s, 3F). LC/MSm/z428,20 (M+H)+, 2,15 min (Método de LCMS 1).
Etapa 4. Preparación de 1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 57 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFOr Mo -d) 57,07 (s, 1H), 6,55 - 6,50 (m, 1H), 4,21 - 4,11 (m, 6H), 2,69 (dc, J = 19,0, 2,9 Hz, 1H), 2,31 - 2,09 (m, 3H), 2,02 -1,85 (m, 2H), 1,43 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 1,27 (s, 12H), 1,22 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MSm/z406,20 (M+H)+, 2,22 min (Método de LCMS 1).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 90 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOR0FORMO-d) 5 7,07 (s, 1H), 5,35 (s a, 1H), 5,18 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,70 (s, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,23 - 4,11 (m, 6H), 3,11 - 2,97 (m, 8H), 2,71 - 2,42 (m, 6H), 2,24 - 0,86 (m, 27H), 1,68 (s, 3H), 1,42 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 1,23 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,05 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,95 - 0,90 (m, 6H), 0,85 (s, 3H). LC/MSm/z848,60 (M+H)+, 2,74 min (Método de LCMS 3).
Etapa 6. Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 61 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 4 ((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-etil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante.
RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,10 (s, 1H), 5,36 (s a, 1H), 5,18 (s a, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,28 -4,20 (m, 2H), 4,16 (c, J = 7,3 Hz, 2H), 3,13 - 2,99 (m, 8H), 2,82 - 2,55 (m, 6H), 2,24 - 1,00 (m, 27H), 1,68 (s, 3H), 1,43 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 1,09 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,96 - 0,91 (m, 6H), 0,85 (s, 3H). LC/MSm/z820,55 (M+H)+, 2,86 min (Método de LCm S 3).
Ejemplo 8
Preparación de ácido 1-((benzo[d]isotiazol-3-iloxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-((benzo[d]isotiazol-3-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 26%en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-B, usando benzo[d]isotiazol-3(2H)-ona como reactante. RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 57,88 (dd, J=8,1, 0,9 Hz, 1H), 7,78 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,53 (ddd, J=8,2, 7,1, 1,1 Hz, 1H), 7,39 (td, J=7,5, 0,8 Hz, 1H), 4,63 - 4,59 (m, 2H), 4,20 (c, J=7,1 Hz, 2H), 3,97 (t, J=2,6 Hz, 4H), 2,41 - 2,31 (m, 2H), 1,82 - 1,73 (m, 6H), 1,23 (t, J=7,1 Hz, 3H). LC/MSm/z378,25 (M+H)+, 4,17 min (Método de LCMS 4).
Etapa 2. Preparación de 1-((benzo[d]isotiazol-3-iloxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 88 % en forma de una cera, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-((benzo[d]isotiazol-3-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,87 (dt, J=8,0, 1,0 Hz, 1H), 7,79 (dt, J=8,2, 0,8 Hz, 1H), 7,54 (ddd, J=8,2, 7,0, 1,1 Hz, 1H), 7,40 (ddd, J=8,0, 7,0, 1,0 Hz, 1H), 4,68 (s, 2H), 4,26 (c, J=7,3 Hz, 2H), 2,66 - 2,51 (m, 4H), 2,49 - 2,40 (m, 2H), 1,99 - 1,88 (m, 2H), 1,26 (t, J=7,2 Hz, 3H). LC/MSm/z334,20 (M+H)+, 2,31 min (Método de LCm S 1).
Etapa 3. Preparación de 1-((benzo[d]isotiazol-3-iloxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 64%en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 1-((benzo[d]isotiazol-3-iloxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 7,86 (dt, J=8,0, 1,0 Hz, 1H), 7,79 (dt, J=8,1,0,8 Hz, 1H), 7,54 (ddd, J=8,2, 7,0, 1,1 Hz, 1H), 7,43 - 7,39 (m, 1H), 5,83 - 5,79 (m, 1H), 4,68 (d, J=10,0 Hz, 1H), 4,63 (d, J=10,3 Hz, 1H), 4,20 (cd, J=7,2, 2,1 Hz, 2H), 2,97 - 2,88 (m, 1H), 2,59 - 2,32 (m, 4H), 2,07 - 1,98 (m, 1H), 1,23 (t, J=7,2 Hz, 3H). RMN 19F (376MHz, CLOROFORMO-d) 5 -73,83 (s, 3F). LC/MSm/z466,15 (M+H)+, 2,51 min (Método de LCMS 1).
Etapa 4. Preparación de 1-((benzo[d]isotiazol-3-iloxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 61 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-((benzo[d]isotiazol-3-iloxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. Rm N-1H (400 MHz, CLOROFOr Mo -d) 57,85 (dt, J=7,9, 0,9 Hz, 1H), 7,76 (dt, J=8,2, 0,8 Hz, 1H), 7,52 (ddd, J=8,2, 7,0, 1,1 Hz, 1H), 7,42 - 7,37 (m, 1H), 6,58 - 6,54 (m. 1H), 4,66 (d, J=10,0 Hz, 1H), 4,58 (d, J=10,0 Hz, 1H), 4,16 (cd, J=7,1, 1,0 Hz, 2H), 2,76 (dc, J=18,9, 2,7 Hz, 1H), 2,37 - 2,28 (m, 1H), 2,27 - 2,20 (m, 2H), 2,07 - 1,89 (m, 2H), 1,28 - 1,25 (m, 12H), 1,19 (t, J=7,2 Hz, 3H). LC/MSm/z444,25 (M+H)+, 2,58 min (Método de LCMS 1).
Etapa 5. Preparación de 1-((benzo[d]isotiazol-3-iloxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 47 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1-((benzo[d]isotiazol-3-iloxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,87 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,77 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,52 (td, J=7,6, 1,1 Hz, 1H), 7,37 (td, J=7,5, 1,0 Hz, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,20 (d, J=6,0 Hz, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,64 (s, 1H), 4,19 - 4,16 (m, 2H), 4,13 (c, J=7,1 Hz, 2H), 3,17 - 3,03 (m, 8H), 2,79 - 2,36 (m, 6H), 2,28 - 0,83 (27H), 1,70 (s, 3H), 1,27 (t, J=7,3 Hz, 3H), 1,08 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 0,99 - 0,95 (m, 6H), 0,85 (s, 3H). LC/MSm/z886,55 (M+H)+, 3,07 min (Método de LCMS 3).
Etapa 6. Se preparó ácido 1-((benzo[d]isotiazol-3-iloxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1, 1-dioxidothiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8, 11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico en un rendimiento del 21 % como sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6 usando 1-((benzo[d]isotiazol-3-iloxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8, 11 a-pentametil-1 -(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]criseno-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,88 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,77 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,55 - 7,49 (m, 1H), 7,40 - 7,33 (m, 1H), 5,39 (s a, 1H), 5,20 (s a, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,74 - 4,64 (m, 2H), 3,34 - 2,52 (m, 14H), 2,33 - 1,00 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,15 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 0,98 - 0,91 (m, 6H), 0,87 (s, 3H). LC/MSm/z858,50 (M+H)+, 2,88 min (Método de LCMS 3).
Ejemplo 9
Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-4-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-((piridin-4-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 77 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando 4-hidroxipiridina como reactante. RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,46 - 8,41 (m, 2H), 6,81 - 6,77 (m, 2H), 4,20 (c,J= 7,2 Hz, 2H), 4,04 (s, 2H), 4,01 - 3,93 (m, 4H), 2,37 - 2,25 (m, 2H), 1,80 - 1,66 (m, 6H), 1,24 (t,J= 7,1 Hz, 3H). LC/MS: m/e 322,05 (M+H)+, 2,26 min (Método de LCMS 11).
Etapa 2. Preparación de 4-oxo-1-((piridin-4-iloxi)metil)ciclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 64 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-((piridin-4-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,27 - 8,23 (m, 2H), 6,67 - 6,62 (m, 2H), 3,97 (s, 2H), 3,92 (c,J= 7,3 Hz, 2H), 2,43 - 2,31 (m, 4H), 2,27 - 2,17 (m, 2H), 1,77 - 1,66 (m, 2H), 1,07 (t,J =7,3 Hz, 3H). LC/MS: m/e 278,05 (M+H)+, 0,81 min (Método de LCMS 8).
Etapa 3. Preparación de 1-((piridin-4-iloxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)cidohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 66 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 4-oxo-1-((piridin-4-iloxi)metil)ciclohexanocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,47 - 8,44 (m, 2H), 6,83 - 6,79 (m, 2H), 5,82 (t,J= 4,1 Hz, 1H), 4,21 (c,J= 7,2 Hz, 2H), 4,17 - 4,07 (m, 2H), 2,91 - 2,82 (m, 1H), 2,59 - 2,47 (m, 1H), 2,45 - 2,25 (m, 4H), 2,09 - 2,00 (m, 2H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 410,00 (M+H)+, 1,92 min (Método de LCMS 8).
Etapa 4. Preparación de 1-((piridin-4-iloxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 59 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-((piridin-4-iloxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. R<m>N-1H (400<m>H<z>, CLOROFORMO-d) 58,33 - 8,30 (m, 2H), 6,73 - 6,69 (m, 2H), 6,46 (s a, 1H), 4,10 - 4,04 (m, 2H), 4,02 - 3,95 (m, 2H), 2,63 (dd, J = 19,2, 2,9 Hz, 1H), 2,23 - 2,12 (m, 2H), 2,12 -2,01 (m, 1H), 1,94 - 1,77 (m, 2H), 1,17 (s, 12H), 1,11 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 388,10 (M+H)+, 1,90 min (Método de LCMS 8).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-4-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 34 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1-((piridin-4-iloxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. lC/MS: m/e 831,45 (m H)+, 2,54 min (Método de LCMS 3). Rm N-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,42 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 6,80 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 5,36 (s a, 1H), 5,18 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,20 - 4,06 (m, 4H), 3,12 - 2,97 (m, 8H), 2,74 - 2,51 (m, 4H), 2,51 - 2,40 (m, 1H), 2,31 - 2,12 (m, 4H), 2,11 - 1,98 (m, 3H), 1,98 - 1,80 (m, 5H), 1,80 - 1,62 (m, 2H), 1,69 (s, 3H), 1,62 - 1,37 (m, 10H), 1,37 - 1,17 (m, 4H), 1,26 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,16 - 0,99 (m, 3H), 0,99 - 0,93 (m, 6H), 0,93 - 0,87 (m, 3H), 0,87 - 0,81 (m, 3H).
Etapa 6. Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-4-iloxi)metil)cidohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 47 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-4-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, METANOL-d4) 58,33 (d,J= 6,3 Hz, 2H), 6,98 (d,J= 5,5 Hz, 2H), 5,38 (s a, 1H), 5,21 (d,J= 5,0 Hz, 1H), 4,80 - 4,71 (m, 1H), 4,65 (s, 1H), 4,28 - 4,12 (m, 2H), 3,24 - 3,00 (m, 8H), 2,94 - 2,72 (m, 5H), 2,66 (d, J = 18,1 Hz, 1H), 2,37 - 1,97 (m, 8H), 1,97 - 1,78 (m, 1H), 1,72 (s, 3H), 1,78 - 1,69 (m, 3H), 1,66 - 1,21 (m, 14H), 1,16 (s, 3H), 1,20 - 1,08 (m, 2H), 1,05 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,91 (s, 3H). LC/MS: m/e 802,45 (M+H)+, 2,50 min (Método de LCMS 3).
Ejemplo 10
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-3-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-((piridin-3-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 84 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando 3-hidroxipiridina como reactivo. RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,30 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,24 (dd, J = 4,4, 1,4 Hz, 1H), 7,25 - 7,15 (m, 2H), 4,21 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 4,05 (s, 2H), 4,00 - 3,93 (m, 4H), 2,38 - 2,25 (m, 2H), 1,83 - 1,66 (m, 6H), 1,32 - 1,22 (m, 3H). LC/MS: m/e 322,10 (M+H)+, 2,534 min (Método de LCMS 11).
Etapa 2. Preparación de 4-oxo-1-((piridin-3-iloxi)metil)ciclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 47,8 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-((piridin-3-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. LCMS: m/e 279,00 (M+H)+, 2,079 min (Método de LCMS 8). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,22 (dd, J = 2,6, 0,9 Hz, 1H), 8,16 (dd, J = 4,3, 1,8 Hz, 1H), 7,19 - 7,09 (m, 2H), 4,18 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 4,07 - 4,04 (m, 2H), 2,55 - 2,41 (m, 4H), 2,38 - 2,28 (m, 2H), 1,88 - 1,75 (m, 2H), 1,19 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Etapa 3. Preparación de 1-((piridin-3-iloxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 51,9 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 4-oxo-1-((piridin-3-iloxi)metil)ciclohexanocarboxilato de etilo como reactante. LCMS: m/e 410,00 (M+H)+, 1,983 min (Método de LCMS 8). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,26 - 8,21 (m, 1H), 8,19 - 8,13 (m, 1H), 7,20 - 7,09 (m, 2H), 5,78 - 5,70 (m, 1H), 4,16 - 4,10 (m, 2H), 4,09 - 4,02 (m, 2H), 2,84 - 2,74 (m, 1H), 2,52 - 2,40 (m, 1H), 2,38 - 2,26 (m, 2H), 2,26 - 2,17 (m, 1H), 2,01 - 1,92 (m, 1H), 1,21 - 1,15 (m, 3H).
Etapa 4. Preparación de etil 1-((piridin-3-iloxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 88 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-((piridin-3-iloxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. LCMS: m/e 388,10 (M+H)+, 1,986 min (Método de LCMS 8). r Mn 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,20 (dd, J=2,4, 0,9 Hz, 1H), 8,13 (dd, J=4,0, 2,0 Hz, 1H), 7,18 - 7,10 (m, 2H), 6,52 - 6,45 (m, 1H), 4,16 - 3,95 (m, 4H), 2,71 - 2,60 (m, 1H), 2,26 - 2,03 (m, 3H), 1,96 - 1,79 (m, 2H), 1,20 - 1,18 (m, 12H), 1,14 (t, J=7,2 Hz, 3H).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-il)-1-((piridin-3-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo y 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11apentametil-3a-((2-(4-(metilsulfonil)piperidin-1-il)etil)amino)-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-3-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
Los compuestos del título se prepararon con rendimientos del 26,4 % y del 28,4 %, respectivamente, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1-((piridin-3-iloxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante.
Para 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino) etil) amino)-5 a, 5 b, 8, 8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridin-3-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de LCMS: m/e 830,50 (M+H)+, 2,363 min (Método LCMS 8). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,28 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 8,21 (dd, J= 4,0, 2,0 Hz, 1H), 7,23 - 7,16 (m, 2H), 5,35 (s a, 1H), 5,17 (d, J= 4,8 Hz, 1H), 4,72 (d, J= 1,8 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,15 - 4,09 (m, 4H), 3,14 - 2,96 (m, 8H), 2,91 - 2,48 (m, 6H), 1,68 (s, 3H), 1,05 (s, 3H), 2,29 - 1,00 (m, 30H), 0,97 - 0,89 (m, 9H), 0,86 - 0,81 (m, 3H).
Para 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-3a-((2-(4-(metilsulfonil)piperidin-1-il) etil) amino)-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridin-3-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxilato de etilo: LCMS: m/e 858,55 (M+H)+, 2,454 min (Método LCMS 8). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,28 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,21 (dd, J = 4,0, 1,8 Hz, 1H), 7,20 - 7,16 (m, 2H), 5,35 (s a, 1H), 5,17 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,72 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,20 - 4,05 (m, 4H), 3,11 (t, J = 8,5 Hz, 2H), 2,83 (s, 3H), 2,88-2,76 (m, 1H), 2,2,74 - 2,38 (m, 7H), 1,68 (s, 3H), 1,06 (s, 3H), 2,27 - 0,78 (m, 47H).
Etapa 6. Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-3-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxílico con un rendimiento del 68,1 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-3-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,32 (s, 1H), 8,21 (s a, 1H), 7,23 (s a, 2H), 5,37 (s a, 1H), 5,18 (s a, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,23 - 4,08 (m, 2H), 3,16 - 2,99 (m, 8H), 2,89 - 2,57 (m, 6H), 2,33 - 1,79 (m, 9H), 1,68 (s, 3H), 1,11 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,93-0,92 (m, 3H), 0,86 (s, 3H), 1,75 - 0,81 (m, 18H). LC/MS: m/e 802,45 (M+H)+, 2,346 min (Método de LCMS 8).
Ejemplo 11
Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,1 1aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-3a-((2-(4-(metilsulfonil)piperidin-1-il)etil)amino)-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridin-3-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxílico.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 4,02 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11apentametil-3a-((2-(4-(metilsulfonil)piperidin-1-il)etil)amino)-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridin-3-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. LCMS: m/e 830,50 (M+H)+, 2,367 min (Método de LCMS 8). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,31 (s, 1H), 8,20 (t, J = 2,9 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 2,3 Hz, 2H), 5,37 (s a, 1H), 5,18 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 4,76 - 4,67 (m, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,16 (s a, 2H), 3,13 (t, J = 10,2 Hz, 2H), 2,92 - 2,59 (m, 9H), 2,48 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 2,31 - 1,78 (m, 15H), 1,68 (s, 3H), 1,12 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,93-0,92 (m, 3H), 0,85 (s, 3H), 1,71 - 0,77 (m, 18H).
Ejemplo 12
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((5-metilisotiazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-((isotiazol-3-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 69 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando 5-metilisotiazol-3-ol como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,32 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 4,37 (s a, 2H), 4,17 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 3,95 (s, 4H), 2,47 (d, J = 1,0 Hz, 3H), 2,28 - 2,21 (m, 2H), 1,76 - 1,63 (m, 6H), 1,23 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 342,10 (M+H)+, 3,67 min (Método de LCMS 11).
Etapa 2. Preparación de 1-(((5-metilisotiazol-3-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 87 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-(((5-metilisotiazol-3-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,34 (s, 1H), 4,48 (s, 2H), 4,26 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 2,59 - 2,45 (m, 4H), 2,45 - 2,36 (m, 2H), 1,94 - 1,82 (m, 2H), 1,29 (t, J = 7,1 Hz, 3H). LC/MS: m/e 298,05 (M+H)+, 2,20 min (Método de<l>C<m>S 8).
Etapa 3. Preparación de 1-(((5-metilisotiazol-3-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 87 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 1-(((5-metilisotiazol-3-il)oxi)metil)-4-oxociclohexanocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,31 (s, 1H), 5,74 (s a, 1H), 4,43 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,37 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,17 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 2,79 (dd, J = 17,8, 2,8 Hz, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,43 - 2,17 (m, 4H), 1,97 - 1,86 (m, 1H), 1,22 (t, J = 7,3 Hz, 3H). LC/MS: m/e 430,2 (M+H)+, 2,20 min.
Etapa 4. Preparación de 1-(((5-metilisotiazol-3-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 32 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-(((5-metilisotiazol-3-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,51 - 6,45 (m, 1H), 6,26 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 4,42 - 4,37 (m, 1H), 4,33 - 4,26 (m, 1H), 4,11 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 2,69 - 2,58 (m, 1H), 2,42 (d, J = 1,0 Hz, 3H), 2,22 - 2,12 (m, 3H), 2,02 (s, 1H), 1,95 - 1,87 (m, 1H), 1,82 - 1,74 (m, 1H), 1,22 (d, J = 2,0 Hz, 12H), 1,16 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((5-metilisotiazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 43 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1-(((5-metilisotiazol-3-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,30 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 5,33 (s a, 1H), 5,17 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 4,70 (s, 2H), 4,58 (d, J = 1,5 Hz, 2H), 4,49 - 4,43 (m, 1H), 4,42 - 4,36 (m, 1H), 4,17 - 4,12 (m, 2H), 3,13 - 2,96 (m, 8H), 2,73 - 2,62 (m, 2H), 2,62 - 2,52 (m, 2H), 2,50 - 2,41 (m, 1H), 2,46 (d, J = 1,0 Hz, 3H), 2,22 - 2,10 (m, 8H), 2,10 - 1,97 (m, 3H), 1,96 - 1,65 (m, 4H), 1,68 (s, 3H), 1,64 - 1,37 (m, 7H), 1,37 - 1,23 (m, 6H), 1,20 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,16 - 0,98 (m, 5H), 0,98 - 0,81 (m, 9H). LC/MS: m/e 850,55 (M+H)+, 2,99 min (Método de LCMS 3).
Etapa 6. Se preparó 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidothlomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11apentametil-11-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(((5-metilisotiazol-3-il)oxi) metil) ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 36 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(((5-metilisotiazol-3-il)oxi) metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,36 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,30 - 5,10 (m, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,51 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,45 (dd, J = 10,0, 3,5 Hz, 1H), 3,39 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 3,28 - 2,87 (m, 11H), 2,86 - 2,57 (m, 2H), 2,49 (d, J = 0,8 Hz, 3H), 2,31 - 1,83 (m, 12H), 1,83 - 1,67 (m, 2H), 1,71 (s, 3H), 1,67 - 1,23 (m, 13H), 1,16 (s, 3H), 1,13 - 1,02 (m, 2H), 1,06 (s, 3H), 0,97 (m, 3H), 0,93 (m, 3H), 0,88 (s, 3H). LC/MS: m/e 822,60 (M+H)+, 2,83 min (Método de LCMS 3).
Ejemplo 13
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 82 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando 1-metil-1H-tetrazol-5-ol como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,57 (s, 2H), 4,18 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 3,97 - 3,92 (m, 4H), 3,77 (s, 3H), 2,29 - 2,21 (m, 1H), 2,18 - 2,10 (m, 1H), 1,76 - 1,63 (m, 6H), 1,24 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 327,20 (M+H)+, 2,15 min (Método de LCMS 3).
Etapa 2. Preparación de 1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 91 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,67 (s, 2H), 4,27 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 3,79 (s, 3H), 2,61 - 2,36 (m, 6H), 1,92 - 1,75 (m, 2H), 1,28 (t, J = 7,3 Hz, 3H). LC/MS: m/e 283,15 (M+H)+, 3,01 min (Método de LCMS 10).
Etapa 3. Preparación de 1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 29 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oxi)metil)-4-oxociclohexanocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,80 - 5,72 (m, 1H), 4,70 - 4,57 (m, 2H), 4,22 - 4,15 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 2,89 - 2,81 (m, 1H), 2,50 - 2,23 (m, 4H), 1,97 - 1,88 (m, 1H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 415,25 (M+H)+, 2,51 min (Método de LCMS 3).
Etapa 4. Preparación de 1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 90 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante.<r>M<n>-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,54 - 6,40 (m, 1H), 4,64 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 4,56 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 4,17 - 4,10 (m, 2H), 3,74 (s, 3H), 2,72 - 2,63 (m, 1H), 2,34 - 2,11 (m, 3H), 2,00 -1,92 (m, 1H), 1,88 - 1,80 (m, 1H), 1,23 (s, 12H), 1,21 (t, J = 7,2 Hz 3H). LC/MS: m/e 393,35 (M+H)+, 4,06 min (Método de LCMS 10).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-metil-1H-tetrazol-5 -il)oxi)metil)ciclohex-3 -ene- 1 - carboilato de etilo
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 56 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,33 (s a, 1H), 5,17 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 4,70 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,58 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 4,20 - 4,10 (m, 4H), 3,75(s, 3H), 3,12 - 2,97 (m, 8H), 2,76 - 2,40 (m, 6H), 2,26 - 0,87 (m, 27H), 1,68 (s, 3H), 1,21 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,04 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 0,94 - 0,87 (m, 6H), 0,84 (s, 3H). LC/MS: m/e 835,60 (M+H)+, 2,82 min (Método de LCMS 3).
Etapa 6. Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 74 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,37 (s a, 1H), 5,20 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 4,79 - 4,61 (m, 4H), 3,79 (s, 2H), 3,26 - 2,98 (m, 10H), 2,82 (d, J = 9,3 Hz, 4H), 2,76 - 2,55 (m, 1H), 2,33 - 2,11 (m, 1H), 2,08 (s, 3H), 2,11 - 1,82 (m, 8H), 1,70 (s, 3H), 1,65 - 1,37 (m, 10H), 1,36 - 1,22 (m, 4H), 1,16 (s, 3H), 1,11 - 1,01 (m, 2H), 1,03 (s, 3H), 0,98 (s, 1,5H), 0,97 (s, 1,5H), 0,94 (s, 1,5H), 0,93 (s, 1,5H), 0,87 (s, 3H). LC/MS: m/e 807,60 (M+H)+, 2,90 min (Método de LCMS 3).
Ejemplo 14
Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-tiadiazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 90 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando 5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-ol como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,45 (s, 2H), 4,17 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 3,98 - 3,91 (m, 4H), 2,68 (s, 3H), 2,31 - 2,21 (m, 2H), 1,77 - 1,66 (m, 6H), 1,24 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 375,10 (M+H)+, 2,50 min (Método de LCMS 3).
Etapa 2. Preparación de 1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-oxociclohexanocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 100 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,53 (s, 2H), 4,25 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 2,69 (s, 3H), 2,58 - 2,48 (m, 4H), 2,44 - 2,35 (m, 2H), 1,96 - 1,86 (m, 2H), 1,28 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 331,05 (M+H)+, 2,32 min (Método de LCMS 3).
Etapa 3. Preparación de 1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 55 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-oxociclohexanocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,74 (td, J = 3,1, 1,8 Hz, 1H), 4,50 (d,J= 10,3 Hz, 1H), 4,45 (d,J= 10,3 Hz, 1H),4,15 (c,J= 7,0 Hz, 2H), 2,84 - 2,75 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 2,51 - 2,19 (m, 4H), 2,02 - 1,94 (m, 1H), 1,21 (t,J= 7,2 Hz, 3H).
Etapa 4. Preparación de 1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 39 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4 durante 7 h, usando 1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 6,50 (dt, J = 3,5, 1,8 Hz, 1H), 4,49 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,11 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 2,72 - 2,64 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,28 - 2,16 (m, 3H), 1,98 - 1,81 (m, 2H), 1,23 (s, 12H), 1,17 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 441,25 (M+H)+, 2,92 min (Método de LCMS 3).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5 a 90 °C durante 4 h, usando 1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. LC/MS: m/e 883,55 (M+H)+, 3,11 min (Método de LCMS 3).
Etapa 6. Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-tiadiazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 10 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((5-(metiltio)-1,2,4-tiadiazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,80 (s, 1H), 4,76 - 4,69 (m, 1H), 4,60 - 4,50 (m, 2H), 3,35 - 3,01 (m, 10H), 3,01 - 2,78 (m, 4H), 2,67 - 2,51 (m, 4H), 2,51 - 2,36 (m, 5H), 2,36 - 2,14 (m, 2H), 1,81 - 1,75 (m, 2H), 1,72 (s, 3H), 1,75 - 1,68 (m, 2H), 1,68 - 1,34 (m, 11H), 1,27 (s, 3H), 1,26 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,08 (s, 3H), 1,13 - 1,03 (m, 4H), 0,94 (s, 3H). LC/MS: m/e 825,50 (M+H)+, 2,78 min (Método de LCMS 3).
Ejemplo 15
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((tiazol-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1: Preparación de 8-((tiazol-2-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 35 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando tiazol-2-ol como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,39 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,03 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 4,09 (c, J = 7,3 Hz, 2H), 3,86 (s, 4H), 3,76 (s, 2H), 2,11 - 2,03 (m, 2H), 1,68 - 1,46 (m, 6H), 1,20 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MSm/z328,10 (M+H)+, 2,09 min (Método de LCMS 3).
Etapa 2. Preparación de 4-oxo-1-((tiazol-2-iloxi)metil)ciclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 80 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-((tiazol-2-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,47 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,13 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 4,28 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 3,97 (s, 2H), 2,55 - 2,35 (m, 6H), 1,89 - 1,77 (m, 2H), 1,34 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MSm/z284,20 (M+H)+, 1,72 min (Método de Lc m S 3).
Etapa 3. Preparación de 1-((tiazol-2-iloxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 22%en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 4-oxo-1-((tiazol-2-iloxi)metil)ciclohexano-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1 H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,43 (d,J= 5,5 Hz, 1H), 6,11 (d,J= 5,3 Hz, 1H), 5,73 (td,J= 3,4, 1,5 Hz, 1H), 4,16 (cd,J= 7,2, 2,6 Hz, 2H), 3,90 (s, 2H), 2,74 - 2,64 (m, 1H), 2,45 - 2,39 (m, 2H), 2,33 - 2,20 (m, 2H), 1,85 - 1,76 (m, 1H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MSm/z416,20 (M+H)+, 2,75 min (Método de LCMS 3).
Etapa 4. Preparación de 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-((tiazol-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 71 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-((tiazol-2-iloxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,49 - 6,46 (m, 1H), 6,45 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 6,06 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 4,12 (cd, J = 7,2, 2,6 Hz, 2H), 3,86 (s, 2H), 2,63 - 2,54 (m, 1H), 2,31 - 1,99 (m, 4H), 1,60 (ddd, J = 13,0, 9,0, 5,6 Hz, 1H), 1,23 (s, 12H), 1,22 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MSm/z394,30 (M+H)+, 2,65 min (Método de LCMS 3).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((tiazol-2-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 30 % como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A, etapa 5, usando trifluorometanosulfonato de (1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-ilo y 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1-((tiazol-2-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,46 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,06 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 5,30 (s a, 1H), 5,18 - 5,13 (m, 1H), 4,70 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,11 (c, J = 7,3 Hz, 2H), 3,96 - 3,84 (m, 2H), 3,11 - 2,97 (m, 8H), 2,74 -2,42 (m, 6H), 2,22 - 0,85 (m, 27H), 1,67 (s, 3H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,04 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 0,93 - 0,86 (m, 6H), 0,83 (s, 3H). MSm/z836,65 (M+H)+, 2,98 min (Método de LCMS 3).
Etapa 6. Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((tiazol-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 68 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((tiazol-2-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,70 (d, J=5,5 Hz, 1H), 6,08 (d, J=5,5 Hz, 1H), 5,42 - 5,28 (m, 1H), 5,20 (dd, J=16,2, 4,9 Hz, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,19 -4,01 (m, 1H), 4,02 - 3,85 (m, 1H), 3,29 (d, J=15,8 Hz, 1H), 3,24 - 2,95 (m, 7H), 2,85 (d, J=10,8 Hz, 2H), 2,61 (d, J=16,6 Hz, 1H), 2,43 (d, J=15,1 Hz, 1H), 2,31 - 2,12 (m, 8H), 2,12 - 1,85 (m, 6H), 1,85 - 1,75 (m, 1H), 1,70 (s, 3H), 1,75 - 1,60 (m, 2H), 1,59 - 1,21 (m, 12H), 1,17 (s, 3H), 1,13 - 1,01 (m, 2H), 1,04 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,86 (s, 3H). LC/MS: m/e 808,55 (M+H)+, 1,832 min (Método de LCMS 3).
Ejemplo 16
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1 -A, usando 1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-ol como reactante. Este material se usó en la siguiente etapa sin purificación. LC/MS: m/e 388,20 (M+H)+, 2,32 min (Método de LCMS 3).
Etapa 2. Preparación de 4-oxo-1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)ciclohexanocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 9%siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,66 - 7,59 (m, 2H), 7,53 - 7,45 (m, 1H), 7,45 - 7,36 (m, 2H), 7,20 (s, 1H), 4,22 (s, 2H), 4,15 (c, J=7,1 Hz, 2H), 2,53 - 2,42 (m, 4H), 2,40 - 2,30 (m, 2H), 1,83 - 1,71 (m, 2H), 1,15 (t, J=7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 388,20 (M+H)+, 2,32 min (Método de LCMS 3).
Etapa 3. Preparación de 1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 144 % siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 4-oxo-1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il) oxi) metil)ciclohexanocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,69 - 7,63 (m, 2H), 7,54 - 7,48 (m, 2H), 7,46 - 7,40 (m, 1H), 7,22 (s, 1H), 5,80 - 5,75 (m, 1H), 4,29 (d, J=9,0 Hz, 1H), 4,22 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,17 - 4,11 (m, 2H), 2,87 - 2,79 (m, 1H), 2,56 - 2,44 (m, 1H), 2,42 - 2,22 (m, 3H), 1,97 - 1,89 (m, 1H), 1,17 (t, J=7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 476,25 (M+H)+, 2,65 min (Método de LCm S 3).
Etapa 4. Preparación de 1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 91 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 7,68 - 7,63 (m, 2H), 7,50 - 7,43 (m, 2H), 7,41 - 7,35 (m, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,49 (dt, J = 3,5, 1,8 Hz, 1H), 4,25 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 4,08 (cd, J = 7,1, 1,0 Hz, 2H), 2,69 - 2,60 (m, 1H), 2,28 - 2,05 (m, 3H), 1,98 - 1,90 (m, 1H), 1,88 - 1,81 (m, 1H), 1,23 (s, 12H), 1,12 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 454,35 (M+H)+, 2,63 min (Método de LCMS 3).
Etapa 4. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1Hciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 58 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1 -(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,71 - 7,65 (m, 2H), 7,51 - 7,44 (m, 2H), 7,41 - 7,35 (m, 1H), 7,19 (s, 1H), 5,32 (s a, 1H), 5,15 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,68 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,30 - 4,20 (m, 2H), 4,09 (c, J = 7,3 Hz, 2H), 3,09 - 2,96 (m, 8H), 2,71 - 2,38 (m, 6H), 2,25 - 0,86 (m, 27H), 1,66 (s, 3H), 1,14 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1.03 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 0,93 - 0,87 (m, 6H), 0,83 (s, 3H).
Etapa 6. El compuesto del título se preparó en un rendimiento del 20% como sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A, etapa 5, usando etilo 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a, 5b,8,8,11a-pentametIl-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a, 13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-fenil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 7,79 - 7,70 (m, 2H), 7,53 - 7,46 (m, 2H), 7,43 - 7,37 (m, 1H), 7,26 - 7,22 (m, 1H), 5,36 (s a, 1H), 5,18 (t,J=5,5Hz, 1H), 4,70 (s, 1H), 4,61 (s, 1H), 4,38 - 4,23 (m, 2H), 3,09 - 2,92 (m, 8H), 2,90 - 2,80 (m, 2H), 2,78 - 2,54 (m, 4H), 2,31 - 2,10 (m, 4H), 2.04 - 1,80 (m, 6H), 1,73 (d, J=11,3 Hz, 1H), 1,67 (s, 3H), 1,54 (d, J=17,8 Hz, 3H), 1,49 - 1,35 (m, 6H), 1,35 - 1,15 (m, 5H), 1,11 (s, 3H), 1,14 - 1,02 (m, 2H), 1,00 (s, 3H), 0,97 - 0,94 (m, 1H), 0,96 (s, 3H), 0,93 - 0,92 (m, 3H), 0,85 (s, 3H). LC/MS: m/e 868,65 (M+H)+, 2,83 min (Método de LCMS 3).
Ejemplo 17
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-isopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-(((1-isopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 43%en forma de un semisólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-B a 105 °C, usando 1-isopropil-1H-1,2,3-triazol-5-ol como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,06 (s, 1H), 4,59 (spt, J=6,8 Hz, 1H), 4,18 (c, J=7,2 Hz, 2H), 4,08 (s, 2H), 4,00 - 3,91 (m, 4H), 2,33 - 2,24 (m, 2H), 1,76 - 1,65 (m, 6H), 1,51 (d, J=6,8 Hz, 6H), 1,24 (t, J=7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 354,30 (M+H)+, 3,33 min (Método de LCMS 11).
Etapa 2. Preparación de 1-(((1-isopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 91 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2, usando 8-(((1-isopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,02 (s, 1H), 4,50 (spt, J=6,8 Hz, 1H), 4,17 (c, J=7,0 Hz, 2H), 4,11 (s, 2H), 2,52 - 2,40 (m, 4H), 2,38 - 2,28 (m, 2H), 1,82 - 1,71 (m, 2H), 1,43 (d, J=7,0 Hz, 6H), 1,19 (t, J=7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 354,30 (M+H)+, 1,96 min (Método de LCMS 3).
Etapa 3. Preparación de 1-(((1-isopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 97 % en forma de un aceite, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3, usando 1-(((1-isopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-oxociclohexanocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,04 (s, 1H), 5,79 - 5,73 (m, 1H), 4,53 (spt, J = 6,8 Hz, 1H), 4,19 - 4,04 (m, 4H), 2,88 - 2,76 (m, 1H), 2,55 - 2,21 (m, 4H), 1,92 (ddd, J = 13,7, 7,9, 6,3 Hz, 1H), 1,47 (d, J = 6,8 Hz, 6H), 1,20 (t, J = 7,2 Hz, 3H). RMN-19F (376MHz, CLOROFORMO-d) 5 -73,94 (s, 3F). LC/MS: m/e 442,20 (M+H)+, 2,64 min (Método de LCMS 3).
Etapa 4. Preparación de 1-(((1-isopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 100 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4, usando 1-(((1-isopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 7,02 (s, 1H), 6,48 (dt, J = 3,3, 1,7 Hz, 1H), 4,53 (spt, J = 6,8 Hz, 1H), 4,16 - 4,06 (m, 4H), 2,69 - 2,60 (m, 1H), 2,28 -2,05 (m, 3H), 1,98 - 1,81 (m, 2H), 1,46 (dd, J = 6,8, 2,3 Hz, 6H), 1,22 (s, 12H), 1,17 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 420,30 (M+H)+, 2,65 min (Método de LCMS 3).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-isopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 100 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5, usando 1-(((1-isopropil-1H-1,2,3-triazol-5-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,05 (s, 1H), 5,33 (s a, 1H), 5,16 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,68 (s, 1H), 4,56 (s, 1H), 4,56 (spt, J = 6,7 Hz, 1H), 4,20 - 4,09 (m, 4H), 3.11 - 2,93 (m, 8H), 2,71 - 2,36 (m, 6H), 2,30 - 0,86 (m, 27H), 1,66 (s, 3H), 1,49 (d, J = 6,3 Hz, 6H), 1,21 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,04 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 0,93 - 0,87 (m, 6H), 0,83 (s, 3H). LC/MS: m/e 862,73 (M+H)+, 2,35 min (Método de LCMS 1).
Etapa 6. Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-isopropil-1H-1.2.3- triazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 45 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6, usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((1-isopropil-1H-1.2.3- triazol-5-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 7.12 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 5,36 (s a, 1H), 5,19 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,63 (s, 1H), 4,67 - 4,52 (h, J = 6,8 Hz, 1H), 4,32 - 4,10 (m, 2H), 3,20 - 2,89 (m, 8H), 2,87 - 2,68 (m, 3H), 2,68 - 2,53 (m, 1H), 2,34 - 2,21 (m, 1H), 2,21 - 1,85 (m, 11H), 1,85 - 1,73 (m, 1H), 1,71 - 1,65 (m. 1H), 1,68 (s, 3H), 1,51 (d, J = 6,5 Hz, 6H), 1,64 - 1,36 (m, 9H), 1,36 -1,19 (m, 4H), 1,14 (s, 3H), 1,07 (s a, 2H), 1,01 (s, 3H), 0,97 - 0,96 (m, 4H), 0,94 - 0,89 (m, 3H), 0,87 (s, 3H). LC/MS: m/e 834,69 (M+H)+, 2,32 min (Método de LCMS 1).
Ejemplo 18
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((5-(prop-1-en-2-il)isotiazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-((isotiazol-3-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 36 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 1-A, usando isotiazol-3(2H)-ona como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,42 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,42 (s, 2H), 4,17 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 3,99 - 3,93 (m, 4H), 2,31 -2,20 (m, 2H), 1,75 - 1,65 (m, 6H), 1,23 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 328,20 (M+H)+, 3,59 min (Método de LCMS 12).
Etapa 2. Preparación de 8-(((5-(2-hidroxipropan-2-il)isotiazol-3-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
A una solución de 8-((isotiazol-3-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo (100 mg, 0305 mmol) en THF (2 ml) en una atmósfera de nitrógeno a -78 °C se le añadió una solución 2 M de LDA (0,305 ml, 0,611 mmol). Se agitó a -78 °C durante 20 minutos antes de añadir propan-2-ona pura (0,045 ml, 0,611 mmol). La agitación continuó durante 30 minutos más a -78 °C. La reacción se inactivó con un cloruro de amonio semisaturado en HCl 0,5 M, se extrajo con acetato de etilo y se concentró al vacío. La mezcla en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con EtOAc al 0-45 %/hexanos para dar el producto deseado en forma de un aceite (83 mg, 70 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,35 (s, 1H), 4,32 (s, 2H), 4,13 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 3,91 (s, 4H), 2,84 (s, 1H), 2,26 - 2,12 (m, 2H), 1,72 - 1,61 (m, 6H), 1,58 (s, 6H), 1,19 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 386,20 (M+H)+, 2,75 min (Método de LCMS 13).
Etapa 3. Preparación de 1-(((5-(2-hidroxipropan-2-il)isotiazol-3-il)oxi)metil)-4-oxociclohexanocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 100 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2 usando 8-(((5-(2-hidroxipropan-2-il)isotiazol-3-il)oxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. R<m>N-1H (400<m>H<z>, CLOROFORMO-d) 56,36 (s, 1H), 4,41 (s, 2H), 4,20 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 2,99 (s, 1H), 2,52 - 2,41 (m, 4H), 2,39 - 2,29 (m, 2H), 1,88 - 1,75 (m, 2H), 1,59 (s, 6H), 1,23 (t, J = 7,0 Hz, 3H). LC/MS: m/e 342,15 (M+H)+, 2,03 min (Método de LCMS 3).
Etapa 4. Preparación de 1-(((5-(prop-1-en-2-il)isotiazol-3-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 22 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3 usando 1-(((5-(2-hidroxipropan-2-il)isotiazol-3-il)oxi)metil)-4-oxociclohexanocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,50 (s, 1H), 5,76 (td, J= 3,3, 1,8 Hz, 1H), 5,45 (s, 1H), 5,18 (s, 1H), 4,47 (d, J= 10,0 Hz, 1H), 4,41 (d,J= 10,0 Hz, 1H), 4,19 (cd,J= 7,1,0,8 Hz, 2H), 2,85 - 2,77 (m, 1H), 2,53 - 2,22 (m, 4H), 2,09 (s, 3H), 1,98 - 1,90 (m, 1H), 1,24 (t,J= 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 456,10 (M+H)+, 2,76 min (Método de LCMS 3).
Etapa 5. Preparación de 1-(((5-(prop-1-en-2-il)isotiazol-3-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 78 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4 usando 1-(((5-(prop-1-en-2-il)isotiazol-3-il)oxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. R<m>N-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 6,55 - 6,50 (m, 1H), 6,49 (s, 1H), 5,43 (s, 1H), 5,14 (s, 1H), 4,46 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,37 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 4,15 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 2,74 - 2,64 (m, 1H), 2,28 - 2,16 (m, 3H), 2,09 (s, 3H), 2,01 - 1,80 (m, 2H), 1,26 (s, 12H), 1,21 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 434,20 (M+H)+, 2,79 min (Método de LCMS 3).
Etapa 6. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((5-(prop-1-en-2-il)isotiazol-3-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 42 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5 usando 1-(((5-(prop-1-en-2-il)isotiazol-3-il)oxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,51 (s, 1H), 5,44 (s, 1H), 5,35 (s a, 1H), 5,19 (s a, 1H), 5,17 (s, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,51 - 4,38 (m, 2H), 4,21 - 4,12 (m, 2H), 3,41 - 2,92 (m, 11H), 2,78 - 2,54 (m, 3H), 2,22 - 0,89 (m, 27H), 2,09 (s, 3H), 1,69 (s, 3H), 1,23 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,13 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 0,96 - 0,91 (m, 6H), 0,87 (s, 3H). LC/MS: m/e 876,60 (M+H)+, 3,01 min (Método de LCMS 3).
Etapa 7. Se preparó 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((5-(prop-1-en-2-il)isotiazol-3-il)oxi)metil) ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 56 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6 usando 4 (1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-il)-1-((5-(prop-1-en-2-il)isotiazol-3-il) oxi) metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,55 (s, 1H), 5,47 (s, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,21 (d,J=5,3Hz, 1H), 5,19 (s, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,56 - 4,50 (m, 1H), 4,50 - 4,43 (m, 1H), 3,40 (d, J=11,8 Hz, 1H), 3,29 - 2,91 (m, 10H), 2,80 - 2,72 (m, 1H), 2,72 - 2,62 (m, 1H), 2,34 - 2,09 (m, 6H), 2,11 (s, 3H), 2,09 - 1,97 (m, 4H), 1,97 - 1,83 (m, 2H), 1,83 - 1,68 (m, 2H), 1,71 (s, 3H), 1,67 - 1,37 (m, 12H), 1,37 - 1,23 (m, 1H), 1,15 (s, 3H), 1,13 - 1,03 (m, 2H), 1,06 (s, 3H), 0,98 - 0,97 (m, 3H), 0,95 - 0,93 (m, 3H), 0,89 (s, 3H). LC/MS: m/e 848,50 (M+H)+, 3,05 min (Método de LCMS 3).
Ejemplo 19
Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b--octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridazin-3-iloxi)metil) ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-((piridazin-3-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo.
A la solución de 8-(hidroximetil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo (300 mg, 1,23 mmol) en DMF (6 ml) a 0 °C se le añadió terc-butóxido de potasio (1,84 ml, 1,84 mmol) seguido de 3-cloropiridazina (211 mg, 1,84 mmol). La suspensión resultante se agitó a 0 °C y luego se calentó a TA durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (10 ml), se lavó con agua, se secó sobre sulfato sódico y se concentró al vacío para dar el producto en bruto. LC/MS: m/e 323,20 (M+H)+, 2,09 min (Método de LCMS 7).
Etapa 2. Preparación de 4-oxo-1-((piridazin-3-iloxi)metil)ciclohexanocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 70 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 2 usando 8-((piridazin-3-iloxi)metil)-1,4-dioxaespiro[4,5]decano-8-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1 H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,82 (dd, J = 4,5, 1,3 Hz, 1H), 7,37 (dd, J = 9,0, 4,5 Hz, 1H), 6,96 (dd, J = 8,9, 1,4 Hz, 1H), 4,64 (s, 2H), 4,21 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 2,57 - 2,28 (m, 6H), 1,92 - 1,82 (m, 2H), 1,28 (t, J = 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 279,15 (M+H)+, 1,71 min (Método de LCMS 7).
Etapa 3. Preparación de 1-((piridazin-3-iloxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)cidohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 39 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 3 usando 4-oxo-1-((piridazin-3-iloxi)metil)ciclohexanocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,82 (dd,J= 4,5, 1,3 Hz, 1H), 7,36 (dd, J = 9,0, 4,5 Hz, 1H), 6,94 (dd,J= 9,0, 1,3 Hz, 1H), 5,75 (td,J= 3,1, 1,8 Hz, 1H), 4,62 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 4,59 (d,J= 10,5 Hz, 1H), 4,18 - 4,11 (m, 2H), 2,88 - 2,79 (m, 1H), 2,53 - 2,23 (m, 4H), 1,97 - 1,90 (m, 1H), 1,21 (t,J= 7,2 Hz, 3H). LC/MS: m/e 411,15 (M+H)+, 2,66 min (Método de LCMS 7).
Etapa 4. Preparación de 1-((piridazin-3-iloxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 43 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 4 usando 1-((piridazin-3-iloxi)metil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,78 (dd, J = 4,5, 1,3 Hz, 1H), 7,32 (dd, J = 8,9, 4,4 Hz, 1H), 6,91 (dd, J = 8,9, 1,4 Hz, 1H), 6,49 (dt, J = 3,7, 1,8 Hz, 1H), 4,62 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,53 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 4,07 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 2,72 - 2,64 (m, 1H), 2,27 - 2,08 (m, 3H), 1,98 - 1,80 (m, 2H), 1,21 (s, 12H), 1,21 (t, J = 7,3 Hz, 3H). LC/MS: m/e 389,25 (M+H)+, 2,74 min (Método de LCMS 7).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridazin-3-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 5 usando 1-((piridazin-3-iloxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. El material en bruto se llevó directamente a la siguiente etapa sin purificación.
Etapa 6. Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridazin-3-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 22 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general A etapa 6 usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridazin-3-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 Mh z , CLOROFORMO-d) 59,09 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 7,74 (dd, J = 9,0, 4,5 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 5,38 (s a, 1H), 5,21 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,76 - 4,64 (m, 2H), 3,39 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 3,25 - 3,02 (m, 9H), 3,02 - 2,86 (m, 2H), 2,86 - 2,62 (m, 2H), 2,32 - 2,06 (m, 5H), 2,06 - 1,84 (m, 6H), 1,82 - 1,67 (m, 2H), 1,71 (s, 3H), 1,66 - 1,35 (m, 10H), 1,35 - 1,20 (m, 4H), 1,17 (s, 3H), 1,14 - 1,04 (m, 2H), 1,05 (s, 3H), 0,97 - 0,95 (m, 3H), 0,92 - 0,91 (m, 3H), 0,87 (s, 3H). LC/MS: m/e 803,48 (M+H)+, 2,27 min (Método de LCMS 1).
Procedimiento General B: Preparación de derivados de (R)ácido ciclohexenocarboxílico a-sustituidos.
Etapa 1. Preparación de benzoato de ((S)-4-((12R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo.
Una mezcla de trifluorometanosulfonato de (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-ilo (1 eq), (R)-(1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo (1,2 eq), Na2CO3(3 eq) y Pd(Ph3P)4 (0,06 eq) en 1,4-dioxano y H2O (4 : 1) se purgó con nitrógeno, se selló y se calentó a 70 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo al 0-35 %/hexanos para dar el producto deseado en forma de un sólido (rendimiento del 68 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,01 (dd, J=8,4, 1,4 Hz, 2H), 7,60 - 7,53 (m, 1H), 7,47 - 7,40 (m, 2H), 5,36 (s a, 1H), 5,20 (dd, J=6,0, 1,8 Hz, 1H), 4,71 (d, J=2,0 Hz, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,49 - 4,39 (m, 2H), 4,18 (cd, J=7,2, 1,4 Hz, 2H), 3,13 - 2,98 (m, 8H), 2,73 - 2,43 (m, 6H), 2,27 -0,89 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,25 - 1,20 (m, 3H), 1,07 (s, 3H), 0,97 (s a, 3H), 0,96 (s a, 3H), 0,94 (s, 3H), 0,87 (s, 3H). LC/MSm/z857,65 (M+H)+, 2,43 min (Método de LCMS 1).
Etapa 2. Preparación de (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroxietil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
Una suspensión de benzoato de ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo (1 eq) y NaOH 1N (1 eq) en MeOH y THF se agitó a TA durante 2 días. La mezcla se neutralizó con HCl 1N y el disolvente se retiróa l vacío.El residuo se recogió en CH2Cl2, se lavó con H2O seguido de salmuera, se secó sobre Na2SO4, y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó sobre gel de sílice eluido con acetato de etilo/hexanos para dar el producto deseado (rendimiento del 85 %) en forma de un sólido. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,32 (s a, 1H), 5,18 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,19 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 3,69 (s a, 2H), 3,12 - 2,98 (m, 8H), 2,72 - 2,43 (m, 6H), 2,28 - 0,89 (m, 27H), 1,70 (s, 3H), 1,28 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,07 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,86 (s, 3H). LC/MSm/z753,65 (M+H)+, 3,79 min (Método de LCMS 2).
Etapa 3. Preparación de (R)-a-metil éter.
A una solución de (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo (1 equiv.) y Ar-X (2 equiv.) en DMF se le añadió KOtBu (2 equiv.) a 0 °C. La mezcla resultante se calentó a TA y se agitó durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con EtAOc, se lavó con agua, se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para dar el producto en bruto que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
Etapa 4: Preparación de (R)-ácido ciclohexenocarboxílico a-sustituido.
Una solución de (R)-a-metil éter de la Etapa 3 en 1,4-dioxano, MeOH y NaOH 1N (2:1:1) se agitó a 50 °C. La mezcla de reacción se purificó por HPLC preparativa de fase inversa para dar el producto final.
Ejemplo 20
Preparación de ácido (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-2: Procedimiento general B.
Etapa 3. Preparación de (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-ene-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general B etapa 3, usando 2-cloropiridina como reactante. LC/MSm/z830,55 (M+H)+, 3,56 min (Método de LCMS 5). Etapa 4. Se preparó ácido (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,1lb,12,13,l3a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 41 % (2 etapas) en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general B etapa 4 durante 6 h, usando (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,21 (dd, J = 5,3, 1,4 Hz, 1H), 7,70 (ddd, J = 8,6, 7,0, 2,0 Hz, 1H), 6,98 (ddd, J = 7,1, 5,3, 0,8 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,20 (dd, J = 6,1, 1,7 Hz, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,49 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,45 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,38 - 3,31 (m, 1H), 3,25 - 3,00 (m, 9H), 2,98 - 2,85 (m, 2H), 2,79 (dt, J = 10,9, 5,6 Hz, 1H), 2,70 - 2,62 (m, 1H), 2,28 - 1,86 (m, 11H), 1,76 - 1,07 (m, 16H), 1,70 (s, 3H), 1,16 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,87 (s, 3H). LC/MSm/z802,45 (M+H)+, 3,34 min (Método de LCMS 5).
Ejemplo 21
Preparación de ácido (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((pirimidin-4-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-2: Procedimiento general B.
Etapa 3. Preparación de (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((pirimidin-4-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general B etapa 3, usando 4-cloropirimidina como reactante. LC/MSm/z831,55 (M+H)+, 3,45 min (Método de LCMS 5).
Etapa 4. Se preparó ácido (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((pirimidin-4-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 31 % (2 etapas) en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general B etapa 4 durante 4 h, usando (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((pirimidin-4-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,95 (s, 1H), 8,57 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 6,96 (dd, J = 6,3, 0,9 Hz, 1H), 5,38 (s a, 1H), 5,21 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,70 (s, 1H), 4,66 (s, 2H), 3,37 - 3,31 (m, 1H), 3,23 - 3,01 (m, 9H), 2,97 - 2,86 (m, 2H), 2,80 (dt, J = 10,6, 5,6 Hz, 1H), 2,69 - 2,62 (m, 1H), 2,30 - 1,87 (m, 11H), 1,76 - 1,01 (m, 16H), 1,70 (s, 3H), 1,16 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,87 (s, 3H). LC/MSm/z725,50 (M+H)+, 3,23 min (Método de LCMS 5).
Ejemplo 22
Preparación de ácido (R)-1-(((3-cloropiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-2: Procedimiento general B.
Etapa 3. Preparación de (R)-1-(((3-cloropiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general B etapa 3, usando 2,3-dicloropiridina como reactante. LC/MSm/z864,45 (M+H)+, 3,83 min (Método de LCMS 5).
Etapa 4. Se preparó ácido (R)-1-(((3-cloropiridin-2-il)oxi)metil)-4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un 69 % de rendimiento (2 etapas) como sólido, siguiendo el procedimiento descrito en procedimiento general B, etapa 4, durante 6 h, usando (R)-1-(((3-cloropiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-ene-1-carboxilato de etilo como reactante.<r>M<n>-1H (500MHz, CLOROFORMO-d) 58,04 (dd, J=4,9, 1,7 Hz, 1H), 7,64 (dd, J=7,6, 1,5 Hz, 1H), 6,87 (dd, J=7,6, 5,0 Hz, 1H), 5,38 (s a, 1H), 5,21 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,54 (d, J=10,4 Hz, 1H), 4,51 (d, J=10,2 Hz, 1H), 3,43 - 3,36 (m, 1H), 3,25 - 3,01 (m, 9H), 2,99 - 2,87 (m, 2H), 2,75 (td, J=10,9, 5,7 Hz, 1H), 2,69 - 2,62 (m, 1H), 2,30 - 1,85 (m, 11H), 1,76 - 1,07 (m, 16H), 1,69 (s, 3H), 1,16 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,87 (s, 3H). LC/MSm/z836,45 (M+H)+, 3,48 min (Método de LCMS 5). Ejemplo 23
Preparación de ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-cidopenta[a]crisen-9-il)cidohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-2: Procedimiento general B.
Etapa 3. Preparación de (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ddopenta[a]crisen-9-il)ddohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 97%en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general B etapa 3, usando 2-fluoronicotinonitrilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,33 (dd, J = 5,0, 2,0 Hz, 1H), 7,87 (dd, J = 7,4, 1,9 Hz, 1H), 7,00 - 6,95 (m, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,19 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,57 - 4,53 (m, 2H), 4,18 (cd, J = 7,2, 2,6 Hz, 2H), 3,12 - 2,99 (m, 8H), 2,76 - 2,41 (m, 6H), 2,28 - 0,90 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,27 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,06 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,86 (s, 3H). LC/MSm/z855,60 (M+H)+, 4,03 min (Método de LCMS 2).
Etapa 4. Se preparó ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 67 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general B etapa 3 a TA durante 2 días, usando (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. r Mn -1H (400 MHz, METANOL-d4) 58,37 (dd, J = 5,0, 2,0 Hz, 1H), 8,06 (dd, J = 7,5, 1,8 Hz, 1H), 7,10 (dd, J = 7,5, 5,0 Hz, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,22 (dd, J = 6,0, 1,5 Hz, 1H), 4,85 (s, 1H), 4,76 (t, J = 1,5 Hz, 1H), 4,63 - 4,55 (m, 2H), 3,27 - 3,07 (m, 11 H), 2,91 (ddd, J = 14,4, 10,0, 4,6 Hz, 1H), 2,79 -2,61 (m, 2H), 2,32 - 1,09 (m, 27H), 1,77 (s, 3H), 1,17 (s, 3H), 1,12 (s, 3H), 1,00 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,93 (s, 3H). LC/MSm/z827,60 (M+H)+, 3,70 min (Método de LCMS 2).
Ejemplo 24
Preparación de ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ddopenta[a]crisen-9-il)cidohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título era un subproducto formado durante la Etapa 4 de la preparación de (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,Í1a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ddopenta[a]crisen-9-il)ddohex-3-eno-1-carboxilato de etilo. El material se aisló con un rendimiento del 14 % en forma de un sólido. RMN-1H (400 MHz, METANOL-d4) 58,40 (dd, J = 7,8, 2,0 Hz, 1H), 8,29 (dd, J = 5,0, 2,0 Hz, 1H), 7,13 (dd, J = 7,7, 4,9 Hz, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,21 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,83 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,64 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,53 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,28 - 3,03 (m, 11H), 3,01 - 2,90 (m, 1H), 2,84 - 2,68 (m, 2H), 2,37 - 1,06 (m, 27H), 1,75 (s, 3H), 1,18 (s, 3H), 1,10 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,92 (s, 3H). LC/MSm/z845,60 (M+H)+, 3,66 min (Método de LCMS 2).
Procedimiento General C: Preparación de derivados de (S)ácido ciclohexenocarboxílico a-sustituidos.
Etapa 1. Preparación de benzoato de ((S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 86% como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general B, etapa 1, usando benzoato de (S)-(1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) ciclohex-3-en-1-il)metilo en lugar de benzoato de (R)-(1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo como reactante. LC/MSm/z857,50 (M+H)+, 3,055 min (Método de LCMS 3). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,07 - 7,90 (m, 2H), 7,64 - 7,52 (m, 1H), 7,49 - 7,37 (m, 2H), 5,37 (s a, 1H), 5,21 (dd, J=6,0, 1,8 Hz, 1H), 4,72 (d, J=1,8 Hz, 1H), 4,61 (d, J=1,3 Hz, 1H), 4,52 - 4,37 (m, 2H), 4,25 - 4,16 (m, 2H), 3,15 - 3,00 (m, 8H), 2,78 - 2,53 (m, 5H), 2,51 - 2,42 (m, 1H), 2,34-2,23 (m, 1H), 1,70 (s, 3H), 1,07 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,87 (s, 3H), 2,22 - 0,80 (m, 29H).
Etapa 2. Preparación de (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroxietil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un 94% de rendimiento como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general B, etapa 2, usando benzoato de ((S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo en lugar de benzoato de ((R)-4-(((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-(((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentamtil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il] etoxi-1-carbonil) etoxi-1-hexilo de benzoato de metilo como reactante. LC/MSm/z753,55 (M+H)+, 2,754 min (Método de LCMS 3). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,30 (s, 1H), 5,16 (d, J=5,0 Hz, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,61 (s, 1H), 4,23 - 4,12 (m, 2H), 3,67 (s, 2H), 3,28 - 2,65 (m, 13H), 2,54 (d, J=16,1 Hz, 1H), 1,68 (s, 3H), 1,09 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,89 (s, 3H), 0,85 (s, 3H), 2,23 - 0,78 (m, 30H).
Etapa 3. Preparación de (S)-1-((ariloxi)metil)-4-((1R,1R,3aS,5aR,5bR,1aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
A una solución de (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroxietil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo (1 eq) en DMF a -78 °C se añadió KOtBu (2 eq). La mezcla resultante se agitó durante 20 minutos antes de añadir Ar-X (2 eq). A continuación, la reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con EtAOc, se lavó con agua, se secó sobre Na2SO4y se concentróa l vacíopara proporcionar el producto bruto que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional o se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo/hexanos como eluyentes.
Etapa 4. Preparación de ácido (S)-1-((ariloxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,l3bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Una solución de (S)-1-((ariloxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo del Paso 3 en 1,4-dioxano, MeOH y NaOH 1N (2 : 1 : 1) se agitó a 50 °C durante 2-18 horas. La mezcla de reacción se purificó luego mediante HPLC preparativa de fase inversa para proporcionar el producto final. Ejemplo 25
Preparación de ácido (S)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-2: Procedimiento general C etapa 1-2.
Etapa 3. Preparación de (S)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general C etapa 3, usando 2-cloronicotinonitrilo como reactante. LC/MSm/z855,50 (M+H)+, 3,004 min (Método de LCMS 3).
Etapa 4. Se preparó ácido (S)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il) ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 29 % (en 2 etapas) como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general C etapa 4 durante 7 h, usando etilo (S)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato como reactante. LC/MS: m/e 827,50 (M+H)+, 3,393 min (Método de LCMS 7). RMN-1H (400 MHz, METANOL-d4) 58,40 (dd, J=5,1, 1,9 Hz, 1H), 8,08 (dd, J=7,5, 2,0 Hz, 1H), 7,12 (dd, J=7,5, 5,0 Hz, 1H), 5,39 (s a, 1H), 5,25 - 5,21 (m, 1H), 4,85 (s, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,62 (d, J=10,3 Hz, 1H), 4,58 (d, J=10,3 Hz, 1H), 3,31 -3. 18 (m, 8H), 3,16 - 3,12 (m, 2H), 3,12 - 3,07 (m, 1H), 3,02 - 2,87 (m, 1H), 2,80 (td, J=11,0, 5,5 Hz, 1H), 2,73 - 2. 63 (m, 2H), 2,37 - 2,27 (m, 1H), 2,26 - 2,01 (m, 8H), 1,97 - 1,91 (m, 1H), 1,88 - 1,75 (m, 2H), 1,78 (s, 3H), 1,72 - 1,44 (m, 10H), 1,42 - 1,31 (m, 1H), 1,20 (s, 3H), 1,27 - 1,09 (m, 3H), 1,13 (s, 3H), 1,02 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,95 (s, 3H). Alternativamente, el Ejemplo 28 se puede preparar usando el siguiente procedimiento:
Etapa 1: Preparación de ácido (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxílico, HCl. A un matraz que contenía una suspensión de ácido (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(fluorometil) ciclohex-3-en carboxílico (4,08 g, 5,61 mmol) preparado como se describe en el documento WO 2015157483 en 1,4-dioxano (50,0 ml) se le añadió hidróxido de tetrabutilamonio (55% en agua) (26,5 g, 56,1 mmol). El matraz se conectó al condensador de reflujo y se calentó en un baño de aceite a 100 °C. Después de 8,5 días de calentamiento, LC/MS mostró que la reacción se había completado. La mezcla se enfrió a ta y se transfirió a un embudo de adición graduado. Al permanecer en el embudo de adición, se formaron dos capas distintas. La capa inferior que contenía el producto se dividió por la mitad en función de la graduación del embudo. La mitad del material se acidificó añadiendo HCl 1N. Los sólidos que se formaron se recogieron por filtración y se lavaron con agua. A continuación, los sólidos se trituraron con éter y se recogieron por filtración. Los sólidos se lavaron con éter y después se dejaron secar en el papel de filtro. El producto del título se aisló en forma de un sólido de color blanco (1,95 g, 2,56 mmol, rendimiento del 45,6 %, 91 % si se calculó como la mitad de la mezcla). LCMS: m/e 725,4 (M+H)+, 1,15 min (procedimiento 16).
Etapa 2. A una suspensión de HCl del ácido (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxílico (1,95 g, 2,56 mmol) en THF (30 ml) se le añadió KHMDS (0,91 M en THF) (9,0 ml, 8,19 mmol). La mezcla se agitó durante 5 minutos, y después se añadió 2-fluoronicotinonitrilo (1,0 g, 8,19 mmol). Después de 2,5 h, se retiró una alícuota. El análisis por Lc /m S mostró que la reacción se había completado. La mezcla de reacción se diluyó con HCl 1 N (30 ml) y después se extrajo con acetato de etilo (3 x 75 ml). Las capas orgánicas se lavaron con NaCl ac. sat., y se secaron sobre sulfato de magnesio. El agente se secado se retiró por filtración. El agente de secado no se filtró bien, por lo que era probable que precipitase sólido mientras estaba en reposo a ta, de modo que la torta de filtro sólida se agitó con acetato de etilo, después con diclorometano, y después se filtró de nuevo. Los filtrados combinados se concentraron a presión reducida. El residuo se trituró con éter y los sólidos que se formaron se recogieron por filtración y se lavaron con éter. El residuo se disolvió en metanol y se purificó por cromatografía de fase inversa usando una columna de 275 g Isco Redisep gold C18 y un gradiente del 20 % de B-80 % de A a B al 100 %, donde A era 90 % de agua, 10 % de acetonitrilo con 0,1 % de tampón TFA y B era 10 % de agua, 90 % de acetonitrilo con 0,1 % de tampón TFA. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y se concentraron a presión reducida para dar ácido (S)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (1,50 g, 1,59 mmol, 62 %) en forma de un sólido de color blanco. LCMS: m/e 827,4 (M+H)+, 1,32 min (procedimiento 16).
Ejemplo 26
Preparación de ácido (S)-1 -(((3-carbamoilpiridina-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR, 13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó como un producto secundario con un rendimiento del 7 % (en 2 etapas) como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general C Etapa 4 durante 7 h, usando etil (S)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi) metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato como reactante. LC/MS: m/e 845,55 (M+H-H2O)+, 3,349 min (Método de LCMS 7). RMN-1H (400MHz, METANOL-d4) 58,42 (dd, J=7,5, 2,0 Hz, 1H), 8,31 (dd, J=4,8, 2,0 Hz, 1H), 7,16 (dd, J=7,5, 5,0 Hz, 1H), 5,40 (s a, 1H), 5,24 (d, J=4,5 Hz, 1H), 4,86 (s a, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,66 - 4,62 (d, J=10,5 Hz, 1H), 4,57 - 4,53 (d, J=10,5 Hz, 1H), 3,30 - 3,17 (m, 7H), 3,12 (d, J=17,3 Hz, 3H), 2,96 - 2,92 (m, 1H), 2,81 - 2,71 (m, 2H), 2,45 - 2,30 (m, 1H), 2,25 - 2,12 (m, 5H), 2,12 - 2,00 (m, 3H), 1,92 - 1,67 (m, 6H), 1,78 (s, 3H), 1,67 - 1,41 (m, 10H), 1,26 - 1,06 (m, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,13 (s, 3H), 1,02 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 0,95 (s, 3H).
Ejemplo 27
Preparación de ácido (R)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((3-(metoxicarbonil)piridin-2-il)oxi)metil) ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó como un producto secundario con un rendimiento del 0,6 % (en 2 etapas) como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general B, etapa 4, durante 15 h, usando (R)-1-((((3-cianopiridin-2-il)oxi) metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. L<c>/MS: m/e 860,65 (M+H)+, 2,93 min (Método de LCMS 7). RMN-1H (400 MHz, METANOL-d4) 58,30 (dd, J=5,0, 2,0 Hz, 1H), 8,17 (dd, J=7,5, 2,0 Hz, 1H), 7,06 (dd, J=7,5, 5,0 Hz, 1H), 5,39 (s a, 1H), 5,25 - 5,21 (m, 1H), 4,85 (s, 1H), 4,75 (s, 1H), 4,57 - 4,47 (m, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,30 - 3,17 (m, 8H), 3,16 - 3,07 (m, 3H), 3,02 - 2,90 (m, 1H), 2,81 (td, J=11,0, 5,4 Hz, 1H), 2,73 - 2,63 (m, 1H), 2,36 - 2,00 (m, 9H), 2,00 - 1,90 (m, 1H), 1,90 - 1,75 (m, 3H), 1,77 (s, 3H), 1,75 - 1,34 (m, 12H), 1,26 - 1,09 (m, 2H), 1,20 (s, 3H), 1,12 (s, 3H), 1,01 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,95 (s, 3H).
Ejemplo 28
Preparación de ácido (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((6-metoxipiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-2: Procedimiento general C etapa 1-2.
Etapa 3. Preparación de (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((6-fluoropiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general C etapa 3, usando 2,6-difluoropiridina como reactante. LC/MSm/z848,50 (M+H)+, 3,031 min (Método de LCMS 3).
Etapa 4. Se preparó ácido (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((6-metoxipiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 3,7 % (en 2 etapas) en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general C etapa 4 durante 15 h, usando (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((6-fluoropiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. LC/MS: m/e 832,50 (M+H)+, 3,267 min (Método de LCMS 7). RMN-1H (500MHz, METANOL-d4) 57,54 (t, J=7,9 Hz, 1H), 6,32 (d, J=2,9 Hz, 1H), 6,30 (d, J=2,9 Hz, 1H), 5,38 (s a, 1H), 5,29 - 5,15 (m, 1H), 4,85 (s, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,485 - 4,345 (m, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,30 - 3,17 (m, 8H), 3,17 - 3,07 (m, 3H), 2,94 (ddd, J=14,5, 10,2, 4,7 Hz, 1H), 2,78 (td,J=11,0,5,4 Hz, 1H), 2,67 - 2,60 (m, 1H), 2,30 (d, J=18,2 Hz, 1H), 2,22 - 2,09 (m, 3H), 2,09 - 2,00 (m, 2H), 1,96 - 1,66 (m, 8H), 1,78 (s, 3H), 1,66 - 1,43 (m, 10H), 1,43 - 1,29 (m, 2H), 1,29 - 1,09 (m, 1H), 1,19 (s, 3H), 1,13 (s, 3H), 1,01 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,95 (s, 3H).
Ejemplo 29
Preparación de ácido (S)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(((6-fluoropiridin-2-il)oxi)metil) ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 69,8 % en forma de un sólido (2 etapas) siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general C etapa 4 durante 7 h, usando (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((6-fluoropiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. LC/MS: m/e 820,45 (M+H)+, 3,136 min (Método de LCMS 7). RMN-1H (500MHz, ACETONAS) 57,85 (q, J=8,1 Hz, 1H), 6,71 (dd, J=8,0, 1,3 Hz, 1H), 6,61 (dd, J=7,8, 2,3 Hz, 1H), 5,42 - 5,35 (m, 1H), 5,23 (dd, J=6,2, 1,8 Hz, 1H), 4,79 (d, J=1,2 Hz, 1H), 4,68 (d, J=1,4 Hz, 1H), 4,46 (d, J=10,2 Hz, 1H), 4,41 (d, J=10,2 Hz, 1H), 3,43 - 3,24 (m, 8H), 3,23 - 3,12 (m, 5H), 3,12 - 3,05 (m, 3H), 3,02 (td, J=10,8, 5,7 Hz, 1H), 2,70 - 2,61 (m, 1H), 2,38 - 2,16 (m, 4H), 2,17 - 2,01 (m, 3H), 1,95 - 1,84 (m, 2H), 1,84 -1,68 (m, 2H), 1,74 (s, 3H), 1,64 (d, J=16,8 Hz, 1H), 1,61 - 1,42 (m, 8H), 1,40 - 1,22 (m, 1H), 1,26 (s, 3H), 1,23 - 1,11 (m, 2H), 1,13 (s, 3H), 1,02 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,94 (s, 3H).
Ejemplo 30
Preparación de ácido (S)-1-(((4-carbamoilpiridina-2-il)oxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-2: Procedimiento general C etapa 1-2.
Etapa 3. Preparación de (S)-1-(((4-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general C etapa 3, usando 2-fluoroisonicotinonitrilo como reactante. LC/MSm/z855,50 (M+H)+, 3,048 min (Método LCMS 3).
Etapa 4. Se preparó ácido (S)-1-(((4-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1, 1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1 -(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il) ciclohex-3-eno-1-carboxílico se preparó con un rendimiento del 30,5 % (más de 2 etapas) en forma sólida, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general C, etapa 4, durante 7 h, usando (S)-1-(((4-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. LC/MS: m/e 845,55 (M+H)+, 3,048 min (Método de LCMS 7). RMN-1H (4,0 MHz, CLOROFORMO-d) 58,02 (d, J=5,3 Hz, 1H), 7,12 (d, J=5,3 Hz, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,16 (s a, 1H), 5,00 (d, J=5,5 Hz, 1H), 4,58 (s a, 1H), 4,48 (s a, 1H), 4,35 - 4,18 (m, 2H), 3,25 - 2,65 (m, 18H), 2,47 (d, J=17,1 Hz, 1H), 2,14 - 1,64 (m, 10H), 1,52 - 1,48 (m, 2H), 1,50 (s, 3H), 1,45 - 1,03 (m, 10H), 0,98 (s, 3H), 0,88 - 0,84 (m, 2H), 0,86 (s, 3H), 0,78 (s, 3H), 0,73 (s, 3H), 0,68 (s, 3H).
Ejemplo 31
Preparación de ácido (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,1 1bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-2: procedimiento general C etapa 1-2.
Etapa 3. Preparación de (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general C, etapa 3, usando 2-bromopiridina como reactante. LC/MS m/z M+1=830,55. 2,822 min (Método de LCMS 3).
Etapa 4. (S)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b--octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil) ciclohex-3-eno-1-carboxílico se preparó con un rendimiento del 22,9 % (más de 2 etapas) como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general C etapa 4 durante 7 h, usando (S)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como el reactante. LC/MS: m/e 802,45 (M+H)+, 2,824 min (Método de LCMS 3). RMN-1H (400M Hz, CLOROFORMO-d) 58,21 (dd, J=5,1, 1,4 Hz, 1H), 7,69 (ddd, J=8,6, 7,0, 1,8 Hz, 1H), 6,97 (td, J=6,2, 0,9 Hz, 1H), 6,83 (d, J=8,5 Hz, 1H), 5,38 (s a, 1H), 5,21 (d, J=4,5 Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,51 (d, J=10,0 Hz 1H), 4,46 (d, J=10,0 Hz 1H), 3,37 - 3,34 (m, 1H), 3,25 - 3,10 (m, 7H), 3,10 - 3,01 (m, 2H), 3,00 - 2,87 (m, 2H), 2,82 (dt, J=10,9, 5,6 Hz, 1H), 2,73 (d, J=15,3 Hz, 1H), 2,35 - 2,13 (m, 4H), 2,13 - 1,88 (m, 7H), 1,81 - 1,67 (m, 2H), 1,71 (s, 3H), 1,66 - 1,26 (m, 13H), 1,18 (s, 3H), 1,13 - 1,03 (m, 1H), 1,06 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 0,89 (s, 3H).
Ejemplo 32
Preparación de ácido (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,1 1bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((pirazin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-2: procedimiento general C etapa 1-2.
Etapa 3. Preparación de (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((pirazin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general C etapa 3, usando 2-fluoropirazina como reactante. LC/MSm/zM+1=831,55. 2,922 min (Método de LCMS 3).
Etapa 4. Se preparó (S)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1 -((pirazin-2-iloxi)metil) ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 77,0 % (más de 2 etapas) como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general C etapa 4 durante 9 h, usando (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((pirazin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. LC/MS: m/e 803,42 (M+H)+, 2,38 min (Método de LCMS 1). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,27 (s a, 2H), 8,17 (s a, 1H), 5,39 (s a, 1H), 5,22 (d, J=4,8 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,62 - 4,48 (dd, J=10,5, 17,3 Hz, 2H), 3,44 - 3,32 (m, 1H), 3,30 - 2,89 (m, 11H), 2,84 - 2,64 (m, 2H), 2,38 - 1,83 (m, 11H), 1,83 - 1,67 (m, 2H), 1,71 (s, 3H), 1,68 - 1,37 (m, 10H), 1,38 - 1,22 (m, 2H), 1,16 (s, 3H), 1,13 - 1,03 (m, 2H), 1,06 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,89 (s, 3H).
Procedimiento General D: Preparación de derivados del ácido a-piridin-2-iloxi ciclohexenocarboxílico.
Etapa 1. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
Una mezcla de trifluorometanosulfonato de (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-ilo (1 eq), 1-((piridin-2-iloxi)metil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo (1eq), Na2CO3 (3 eq) y Pd(Ph3P)4 (0,06 eq) en 1,4-dioxano y H2O (4 : 1), se enjuagó con nitrógeno, se selló y se calentó a 70 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentróa l vacío.El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo al 0-55 %/hexanos para dar el producto deseado en forma de un sólido (rendimiento del 57 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,13 (dd, J=5,0, 1,5 Hz, 1H), 7,58 - 7,52 (m, 1H), 6,86 (ddd, J=7,2, 5,1, 0,8 Hz, 1H), 6,72 (d, J=8,5 Hz, 1H), 5,35 (s a, 1H), 5,19 (d, J=5,8 Hz, 1H), 4,73 (d, J=2,3 Hz, 1H), 4,60 (dd, J=2,3, 1,3 Hz, 1H), 4,48 -4,37 (m, 2H), 4,18 - 4,11 (m, 2H), 2,70 - 2,62 (m, 1H), 2,54 (td, J=10,9, 5,3 Hz, 1H), 2,29 - 0,84 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,20 (t, J=7,2 Hz, 3H), 1,07 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,97 - 0,91 (m, 6H), 0,86 (s, 3H). LC/MSm /z669,60 (M+H)+, 2,82 min (Método LCMS 3).
Etapa 2: Preparación del derivado de amina C-17.
A una solución de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1 -((piridin-2-iloxi) metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo (1 eq) y aldehído (2 eq) en DCE se le añadió isopropóxido de titanio (IV) (2 eq). La mezcla se agitó a TA durante 1 h. Se añadió triacetoxiborohidruro de sodio (2 eq) y la mezcla se agitó a TA durante la noche. La reacción se inactivó con Na2CO3acuoso saturado. La suspensión resultante se extrajo con diclorometano, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4y se concentróa l vacío.El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo/hexanos para dar el producto deseado.
Etapa 3: Preparación de ácido carboxílico.
Una solución de éster de la etapa 2 en 1,4-dioxano, MeOH y NaOH 1N (2: 1 : 1) se agitó a 60 - 70 °C. La mezcla de reacción se purificó por HPLC preparativa de fase inversa para dar el producto final.
Ejemplo 33
Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-hidroxi-1,1-dioxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((pirimidin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1: Procedimiento general D etapa 1.
Etapa 2. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-hidroxi-1,1-dioxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((pirimidin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 78 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general D etapa 2, usando 2-(4-hidroxi-1,1-dioxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)acetaldehído como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 68,12 (dd, J=5,0, 1,5 Hz, 1H), 7,57 - 7,52 (m, 1H), 6,85 (ddd, J=7,0, 5,1, 0,9 Hz, 1H), 6,72 (d, J=8,5 Hz, 1H), 5,34 (s a, 1H), 5,18 (d, J=5,8 Hz, 1H), 4,73 (d, J=1,8 Hz, 1H), 4,61 (s, 1H), 4,48 - 4,36 (m, 2H), 4,18 - 4,08 (m, 4H), 3,57 - 3,43 (m, 2H), 2,91 - 2,61 (m, 5H), 2,50 (td, J=10,7, 5,5 Hz, 1H), 2,24 - 0,88 (31H), 1,68 (s, 3H), 1,19 (t, J=7,2 Hz, 3H), 1,03 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,95 - 0,90 (m, 6H), 0,85 (s, 3H). LC/MSm/z845,60 (M+H)+, 3,59 min (Método LCMS 4).
Etapa 3. Se preparó 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-hidroxi-1,1-dioxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)etil)amino)-Sa,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1 -((piridin-2-iloxi)metil) ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 76 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general D etapa 3 a 60° C durante 12 h, usando 44-((1R,3aS,SaR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-hidroxi-1,1-dioxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)etil)-5a,5b,8,8,11a-pentil-1-propil)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 68,29 (s a, 1H), 7,96 (t, J=7,0 Hz, 1H), 7,17 (s a, 1H), 7,04 (d, J=8,3 Hz, 1H), 5,35 (s a, 1H), 5,18 (d, J=5,3 Hz, 1H), 4,75 (s, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,53 - 4,39 (m, 2H), 3,58 - 3,35 (m, 2H), 3,21 (s a, 2H), 2,97 - 2,84 (m, 2H), 2,76 - 2,62 (m, 2H), 2,58 - 2,44 (m, 1H), 2,34 - 1,04 (m, 32H), 1,68 (s, 3H), 1,07 (s, 3H), 1,02 (s, 3H), 0,95 -0,91 (m, 6H), 0,87 (s, 3H). LC/MSm/z817,55 (M+H)+, 5,51 min (Método de LCMS 4).
Procedimiento general E. Preparación de derivados de ácido ciclohexenocarboxílico a-sustituido mediante alquilación de alcohol a-metílico.
Etapa 1. Preparación de benzoato de (4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo.
Una mezcla de trifluorometanosulfonato de (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-ilo (1 eq), benzoato de (1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo (1,05 eq), Na2CO3H2O (3 eq) y Pd(Ph3P)4 (0,06 eq) en 1,4-dioxano y H2O (4: 1) se enjuagó con nitrógeno y se calentó a 70 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se concentróa l vacíoy el residuo se repartió entre EtOAc y H2O. La capa acuosa separada se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo al 0 - 60 %/hexanos para dar el producto deseado en forma de un sólido (rendimiento del 67 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 8,01 (dd, J = 8,2, 1,1 Hz, 2H), 7,59 - 7,53 (m, 1H), 7,46 - 7,40 (m, 2H), 5,36 (s a, 1H), 5,20 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,48 - 4,39 (m, 2H), 4,21 - 4,14 (m, 2H), 3,12 - 2,98 (m, 8H), 2,73 - 2,53 (m, 5H), 2,50 -2,42 (m, 1H), 2,31 - 0,81 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,22 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,06 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,98 - 0,92 (m, 6H), 0,86 (s, 3H). LC/MS: m/e 857,50 (M+H)+, 2,91 min (Método de LCMS 3).
Etapa 2:. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-hidroxietil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
Una suspensión de benzoato de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo (1 eq) y NaOH 1 N (1 eq) en MeOH y THF se agitó a TA durante 1 día. La mezcla se neutralizó con ácido cítrico acuoso saturado y el disolvente se retiró al vacío. El residuo se recogió en EtOAc, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4y se concentróa l vacíopara dar el producto deseado (rendimiento del 99%) como un sólido sin purificación adicional. LC/MSm /z753,70 (M+H)+, 2,85 min (Método de LCMS 3).
Etapa 3. Preparación de éster ciclohexenocarboxílico a-sustituido.
A una solución de -4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo (1 equiv.) y Ar-X (2 equiv.) en DMF se le añadió KOtBu (2 equiv.). La mezcla resultante se calentó hasta TA y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con EtAOc, se lavó con agua, se secó sobre Na2SO4y se concentró al vacío para dar el producto en bruto, que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
Etapa 4. Preparación de ácido ciclohexenocarboxílico a-sustituido.
Una solución de éter a-metílico de la etapa 4 en 1,4-dioxano, MeOH y NaOH 1 N (2:1:1) se agitó a 50 °C. La mezcla de reacción se purificó por HPLC preparativa de fase inversa para dar el producto final.
Ejemplo 34
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((pirimidin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-2: Procedimiento general E.
Etapa 3. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)
2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((pirimidin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó en forma de un producto en bruto, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general E etapa 3, usando 2-bromopirimidina como reactante. LC/MSm/z831,60 (M+H)+, 2,76 min (Método de LCMS 3).
Etapa 4. Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((pirimidin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 11 % en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general E etapa 4, usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((pirimidin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,62 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 7,10 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 5,39 (s a, 1H), 5,21 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,64 - 4,54 (m, 2H), 3,39 (d a, J = 13,1 Hz, 1H), 3,27 - 3,03 (m, 9H), 3,03 - 2,89 (m, 2H), 2,80 - 2,70 (m, 1H), 2,33 - 2,06 (m, 4H), 2,06 -2,02 (m, 6H), 2,02 - 1,85 (m, 4H), 1,81 - 1,67 (m, 2H), 1,71 (s, 3H), 1,67 - 1,37 (m, 10H), 1,37 - 1,25 (m, 2H), 1,16 (s, 3H), 1,12 - 1,03 (m, 1H), 1,06 (s, 3H), 0,98 - 0,97 (m, 3H), 0,95 - 0,94 (m, 3H), 0,89 (s, 3H). LC/MS: m/e 803,50 (M+H)+, 2,80 min (Método de<l>C<m>S 3).
Ejemplo 35
Preparación de ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((7-metoxiisoquinolin-1-il)oxi)metil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-2: procedimiento general E.
Etapa 3. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((7-metoxiisoquinolin-1 -il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó en forma de un producto en bruto, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general E etapa 3, usando 1-cloro-7-metoxiisoquinolina como reactante. LC/MS: m/e 910,65 (M+H)+, 2,98 min (Método de LCMS 3).
Etapa 4: Se preparó ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(((7-metoxiisoquinolin-1-il)oxi) metil) ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 39 % como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general E etapa 4-usando 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11apentametil-1 -(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-il)-1-(((7-metoxiisoquinolin-1-il)oxi) metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. Lc /m S: m/e 882,60 (M+H)+, 2,83 min (Método de LCMS 3).
Ejemplo 36
Preparación de ácido 1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-2: procedimiento general E.
Etapa 3. Preparación de 1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de etilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 41 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general E etapa 3, usando 2-cloronicotinonitrilo como reactante. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,31 (dd, J=5,0, 1,8 Hz, 1H), 7,86 (dd, J=7,5, 2,0 Hz, 1H), 6,97 (dd, J=7,4, 5,1 Hz, 1H), 5,34 (s a, 1H), 5,17 (d, J=5,0 Hz, 1H), 4,69 (d, J=1,8 Hz, 1H), 4,57 (s a, 1H), 4,53 (s, 2H), 4,21 - 4,12 (m, 2H), 3,10 - 2,97 (m, 8H), 2,74 - 2,40 (m, 6H), 2,28 - 0,82 (m, 27H), 1,67 (s, 3H), 1,25 (t, J=7,2 Hz, 3H), 1,04 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 0,93 - 0,88 (m, 6H), 0,84 (s, 3H). LC/MS: m/e 855,60 (M+H)+, 3,08 min (Método de LCMS 7).
Etapa 4. Se preparó ácido 1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 33 %, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general E etapa 3 a TA, usando 1 -(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1, 1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo como reactante. R<m>N-1H (400 MHz, METANOL-d4) 58,41 - 8,38 (m, 1H), 8,08 (dd, J = 7,5, 1,8 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 7,7, 5,1 Hz, 1H), 5,39 (s a, 1H), 5,23 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 4,85 (s, 1H), 4,75 (s, 1H), 4,63 (dd, J = 3,8, 10,5 Hz, 1H), 4,58 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 3,30 - 3,17 (m, 8H), 3,17 - 3,07 (m, 3H), 2,99 - 2,89 (m, 1H), 2,80 (td, J = 11,0, 5,4 Hz, 1H), 2,72 - 2,64 (m, 1H), 2,40 - 2,23 (m, 1H), 2,23 - 2,15 (m, 2H), 2,15 - 2,01 (m, 7H), 1,99 - 1,90 (m, 1H), 1,90 - 1,76 (m, 3H), 1,78 (s, 3H), 1,76 - 1,64 (m, 2H), 1,63 - 1,41 (m, 9H), 1,41 - 1,29 (m, 1H), 1,24 - 1,18 (m, 1H), 1,20 (s, 3H), 1,18 - 1,10 (m, 1H), 1,13 (s, 3H), 1,025 - 1,015 (m, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,95 (s, 3H). LC/MS: m/e 827,65 (M+H)+, 3,12 min (Método de Lc m S 7).
Procedimiento general F. Preparación de derivados de ácido ciclohexenocarboxílico a-sustituidos a través de carboxilato de sililo.
Etapa 1. Preparación de benzoato de (1-((benciloxi)carbonil)-4-oxociclohexil)metilo.
A una solución de 1-(hidroximetil)-4-oxociclohexanocarboxilato de bencilo (4,3 g, 16,4 mmol) en piridina (20 ml) se le añadió anhídrido benzoico (4,45 g, 19,7 mmol) seguido de DMAP (2,00 g, 16,4 mmol). La solución resultante se agitó a 55 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con 50 ml de acetato de etilo y se lavó con HCl 0,5 N a pH = 4. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo al 0-50 %/hexanos para dar el producto deseado en forma de un aceite (3,3 g, 49 %).
RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,92 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,65 - 7,54 (m, 1H), 7,44 - 7,37 (m, 2H), 7,35 - 7,27 (m, 5H), 5,25 (s, 2H), 4,46 (s, 2H), 2,63 - 2,35 (m, 6H), 1,86 (td, J = 12,4, 5,0 Hz, 2H).
Etapa 2. Preparación de benzoato de (1-((benciloxi)carbonil)-4-(((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-en-1-il)metilo.
A una solución de benzoato de (1-((benciloxi)carbonil)-4-oxociclohexil)metilo (4,2 g, 11,5 mmol) y 1,1,1 -trifluoro-N-fenil-N-((trifluorometil)sulfonil)-metanosulfonamida (4,5 g, 12,6 mmol) en THF (50 ml) a -78 °C se le añadió KHMDS (1 M en THF) (14,9 ml, 14,9 mmol). La solución de color amarillo resultante se agitó a -78 °C durante 2 h. La reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado. La mezcla se extrajo con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo al 0 15 %/hexanos para dar el triflato deseado en forma de un aceite (3,6 g, 63 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,92 (d, J=7,8 Hz, 2H), 7,62 - 7,55 (m, 1H), 7,42 (t,J=7,5Hz, 2H), 7,35 - 7,27 (m, 5H), 5,80 (s a, 1H), 5,26 - 5,14 (m, 2H), 4,50 - 4,41 (m, 2H), 2,90 (dd, J=17,9, 2,4 Hz, 1H), 2,57 - 2,28 (m, 4H), 2,02 - 1,91 (m, 1H).
Etapa 3. Preparación de benzoato de (1-((benciloxi)carbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1 -il)metilo.
Una mezcla de (1-((benciloxi)carbonil)-4-((((trifluorometil)sulfonil)oxi)ciclohex-3-en-1-il)benzoato de metilo (3,32 g, 6,66 mmol), bis(pinacolato)diboro (1,71 g, 6,73 mmol), KOAc (1,64 g, 16. 7 mmol)) y el aducto PdCh(dppf)-CH2Cl2 (0,16 g, 0,2 mmol) en 1,4-dioxano (30 ml) se purgó con nitrógeno, se cerró herméticamente y se calentó a 70 °C durante 20 h. La mezcla se diluyó con agua (150 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 125 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo al 0-20 %/hexanos para dar el boronato deseado en forma de un aceite (2,2 g, 69 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,90 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,58 - 7,51 (m, 1H), 7,42 - 7,36 (m, 2H), 7,32 - 7,22 (m, 5H), 6,54 (s a, 1H), 5,16 (s, 2H), 4,48 - 4,36 (m, 2H), 2,75 (d, J=17,6 Hz, 1H), 2,32 - 2,19 (m, 3H), 2,07 - 2,00 (m, 1H), 1,92 - 1,86 (m, 1H), 1,27 (s, 12H). LC/MS: m/e 499,20 (M+Na)+, 3,10 min (Método de LCMS 7).
Etapa 4. Preparación de (4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-1-(buta-2,3-dien-2-il)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-il)-1-((benciloxi)carbonil) ciclohex-3-en-1-il)metilo.
Una mezcla de (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9 trifluorometanosulfonato de -ilo (2,4 g, 4,3 mmol), (1-((benciloxi)carbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-benzoato de en-1 -il)metilo (2,05 g, 4,3 mmol), Na2CO3 H2O (1,60 g, 12,9 mmol) y Pd(Ph3P)4 (0,3 g, 0,26 mmol) en 1,4-dioxano (100 ml) y H2O (25 ml) se lavó con nitrógeno, se selló y se calentó a 70 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante columna de gel de sílice eluida con 0-55 % de acetato de etilo/ hexanos para proporcionar el éster ciclohexenocarboxílico C-3 a-sustituido deseado (1,8 g, 55 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,91 (d, J=7,0 Hz, 2H), 7,58 - 7,51 (m, 1H), 7,42 - 7,35 (m, 2H), 7,33 - 7,28 (m, 2H), 7,26 - 7,22 (m, 3H), 5,34 (s a, 1H), 5,21 - 5,11 (m, 3H), 4,73 (s, 1H), 4,60 (s a, 1H), 4,51 - 4,39 (m, 2H), 2,71 (d, J=17,3 Hz, 1H), 2,54 (td, J=10,9, 5,1 Hz, 1H), 2,25 -0,92 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,13 - 0,85 (m, 15H). LC/MS: m/e 758,70 (M+H)+, 3,24 min (Método de LCMS 7).
Etapa 5. Preparación de benzoato de (1-((benciloxi)carbonil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo.
Una suspensión de benzoato de (4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a]crisen-9-il)-1-((benciloxi)carbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo (1,6 g, 2,11 mmol), clorhidrato de 1,1 -dióxido de 4-(2-cloroetil)tiomorfolina (1,5 g, 6,33 mmol), yoduro sódico (0,35 g, 2,32 mmol) y K3PO4 (2,24 g, 10,55 mmol) en acetonitrilo (20 ml) se enjuagó con N2, se selló y se calentó a 100 °C durante 15 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (100 ml), se lavó con agua (100 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó en columna de gel de sílice eluida con 25-60% EtOAc/hexano para dar el producto deseado (1,3 g, rendimiento del 67%). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 57,92 (d, J=7,8 Hz, 2H), 7,58 - 7,51 (m, 1H), 7,43 - 7,36 (m, 2H), 7,31 (d, J=4,6 Hz, 2H), 7,25 (d, J=4,4 Hz, 3H), 5,35 (s a, 1H), 5,22 - 5,12 (m, 3H), 4,71 (s, 1H), 4,60 (s a, 1H), 4,45 (c, J=10,7 Hz, 2H), 3,15 - 2,99 (m, 8H), 2,78 - 2,42 (m, 6H), 2,23 - 0,81 (m, 27H), 1,69 (s, 3H), 1,07 - 0,79 (m, 15H). LC/MS: m/e 919,60 (M+H)+, 3,27 min (Método de LCMS 7).
Etapa 6. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroxietil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de bencilo.
A una solución de benzoato de (1-((benciloxi)carbonil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo (1,0 g, 1,09 mmol) en MeOH (15 ml) se añadió NaOH 1N (1,09 ml, 1,09 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 12 h, se neutralizó con ácido cítrico acuoso saturado y se retiró el disolvente al vacío. El residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4y se concentróa l vacíopara dar el producto deseado (rendimiento del 56 % con subproducto de éster metílico en cantidad traza) sin purificación adicional.
LC/MS: m/e 815 (M+H)+, 4,803 min (Método de LCMS 7). Para éster metílico: LC/MS: m/e 739,55 (M+H)+, 4,615 min (Método de LCMS 7).
Etapa 7. Preparación de 1-((ariloxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de bencilo.
A una solución de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta|a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato (1 eq) en DMF a -78 °C se añadió KOtBu (2 eq). La mezcla resultante se agitó durante 20 minutos antes de añadir Ar-X (2 eq). A continuación, la reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc, se lavó con agua, se secó sobre Na2SO4y se concentróa l vacíopara proporcionar el producto bruto que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional o se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con acetato de etilo/hexanos como eluyentes.
Etapa 8. Preparación de 1-((ariloxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de terc-butildimetilsililo.
A una solución del producto en bruto (1 eq) del procedimiento general F, etapa 7 en DCE (3 ml) se le añadió TEA (1,6 eq), t-butildimetilsilano (2,0 eq) y acetato de paladio (0,25 eq). La mezcla se purgó con N2durante 5 minutos y luego se calentó a 60 °C durante 2-6 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró a través de una almohadilla de celite y gel de sílice y se lavó con EtOAc al 50 % en hexanos, y después con diclorometano. El filtrado se concentró a presión reducida y el producto en bruto obtenido se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
Etapa 9. Preparación de ácido 1-((ariloxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,1b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
A una solución del producto en bruto (1 equiv.) del procedimiento general F, etapa 8 en THF (3 ml) se le añadió una solución de TBAF (1,6 equiv.) en THF. La mezcla resultante se agitó durante 2 horas. La solución se purificó por HPLC preparativa de fase inversa. Las fracciones que contenían el producto deseado se recogieron y se secaron para proporcionar el ácido 1-((ariloxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico deseado.
Ejemplo 37
Preparación de ácido 1-(((4-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-6: Procedimiento general F etapa 1-6
Etapa 7. Preparación de 1-(((4-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de bencilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 22% en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general F, etapa 7, usando 2-fluoroisonicotinonitrilo como reactante. LC/MS m/z M+1 = 917,65, 4,765 min (Método de LCMS 7).
Etapa 8. Preparación de 1-(((4-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de terc-butildimetilsililo.
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general F, etapa 8, usando 1-(((4-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de bencilo como reactante. LC/MSm/zM+1 = 941,75, 3,467 min (Procedimiento de LCMS 7).
Etapa 9. Se preparó 1-(((4-cianopiridin-2-il)oxi)metil)4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il) ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 10,7% en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general F, etapa 9, usando 1-(((4-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de terc-butildimetilsililo como reactante. LC/MS: m/e 827,60 (M+H)+, 3,00 min (Método de LCMS 7). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,31 (d, J=5,0 Hz, 1H), 7,21 (dd,J=5,1, 1,1 Hz, 1H), 7,14 (s, 1H), 5,36 (s a, 1H), 5,21 (d, J=4,8 Hz, 1H), 4,84 (s, 1H), 4,75 (s, 1H), 4,52 (dd, J=4,3, 10,3 Hz, 1H), 4,45 (dd, J=1,8, 10,3 Hz, 1H), 3,28 - 3,15 (m, 8H),3,14 - 3,06 (m, 4H), 2,98 - 2,87 (m, 1H), 2,76 (td, J=11,1,5,4 Hz, 1H), 2,45 - 2,58 (m, 1H), 2,35 - 2,21 (d, J=8,5 Hz, 1H), 2,21 - 1,98 (m, 8H), 1,92 - 1,73 (m, 2H), 1,77 (s, 3H), 1,73 - 1,41 (m, 11H), 1,40 -1,28 (m, 2H), 1,27 - 1,08 (m, 2H), 1,18 (s, 3H), 1,11 (s, 3H), 1,00 - 0,99 (m, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,93 (s, 3H).
Ejemplo 38
Preparación de ácido 1-(((5-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-6: Procedimiento general F etapa 1-6
Etapa 7. Preparación de 1-(((5-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de bencilo.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 35,5%en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general F, etapa 7, usando 6-fluoronicotinonitrilo como reactante. LC/MSm /zM+1 = 917,65, 3,136 min (Método de LCMS 7).
Etapa 8: Preparación de 1-(((5-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de terc-butildimetilsililo.
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general F, etapa 8, usando 1-(((5-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de bencilo como reactante. LC/MSm /zM+1 = 941,70, 3,311 min (Procedimiento de LCMS 7).
Etapa 9. Se preparó 1-(((5-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il) ciclohex-3-eno-1-carboxílico se preparó con un rendimiento del 10,5 % como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general F, etapa 9, usando 1-(((5-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de terc-butildimetilsililo como reactante. LC/MS: m/e 827,55 (M+H)+, 3,049 min (Método de LCMS 7). RMN-1H (400MHz, METANOL-d4) 58,52 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,96 (dd, J=8,8, 2,3 Hz, 1H), 6,92 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,35 (s a, 1H), 5,21 (d, J=4,5 Hz, 1H), 4,84 (s, 1H), 4,75 (s, 1H), 4,56 (dd, J=2,8, 10,5 Hz, 1H), 4,49 (d, J=10,5 Hz, 1H), 3,28 - 3,15 (m, 8H), 3,14 - 3,06 (m, 3H), 2,93 (dt, J=14,2, 5,2 Hz, 1H), 2,81 - 2,71 (m, 1H), 2,67 - 2,57 (m, 1H), 2,35 - 2,21 (m, 1H), 2,21 - 1,97 (m, 10H), 1,92 - 1,72 (m, 5H), 1,77 (s, 3H), 1,72 - 1,39 (m, 11H), 1,39 - 1,20 (m, 1H), 1,20 - 1,07 (m, 1H), 1,18 (s, 3H), 1,11 (s, 3H), 1,02 - 0,98 (m, 1H), 0,96 (s, 3H), 0,93 (s, 3H).
Ejemplo 39
Preparación de ácido 1 -(((6-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1, 1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1-6: Procedimiento general F etapa 1-6
Etapa 7. Preparación de 1-(((6-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de bencilo.
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general F, etapa 7, usando 6-cloropicolinonitrilo como reactante. LC/MSm/zM+1 = 917,65, 3,083 min (Método de LCMS 7).
Etapa 8. Preparación de 1-(((6-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de terc-butildimetilsililo.
El compuesto del título se preparó en forma de un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general F, etapa 8, usando 1-(((6-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de bencilo como reactante. LC/Msm /zM+1 = 941,70, 3,516 min (Método de LCm S 7).
Etapa 9. Se preparó 1-(((6-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il) ciclohex-3-eno-1-carboxílico se preparó con un rendimiento del 17,6 % como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general F, etapa 9, usando 1-(((6-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de terc-butildimetilsililo como reactante. LC/MS: m/e 827,55 (M+H)+, 3,003 min (Método de LCMS 7). RMN-1H (400MHz, METANOL-d4) 57,84 (dd, J=8,5, 7,3 Hz, 1H), 7,47 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,09 (d, J=8,5 Hz, 1H), 5,38 (s a, 1H), 5,24 (d, J=6,0 Hz, 1H), 4,86 (s, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,59 - 4,53 (m, 1H), 4,48 - 4,43 (m, 1H), 3,30 - 3,17 (m, 8H), 3,09 - 3,17 (m, 3H), 2,98 - 2,89 (m, 1H), 2,78 (td, J=10,9, 5,5 Hz, 1H), 2,65 (s. d, J=15,8 Hz, 1H), 2,37 - 2,00 (m, 9H), 1,94 - 1,74 (m, 5H), 1,79 (s, 3H), 1,74 - 1,44 (m, 11H), 1,44 - 1,29 (m, 2H), 1,26 - 1,10 (m, 2H), 1,20 (s, 3H), 1,13 (s, 3H), 1,03 - 1,02 (m, 3H), 1,00 - 0,99 (m, 3H), 0,95 (s, 3H).
Ejemplo 40
Preparación de ácido 1-(((6-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 1-(((6-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de metilo.
El compuesto del título se preparó como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general F, etapa 7, usando 6-cloropicolinonitrilo y metil, 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta| a] crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato en lugar de 4-bencilo ((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-il)-1-(hidroximetil) ciclohex-3-eno-1-carboxilato como los reactantes. LC/MSm /zM+1 = 841,60, 3,164 min (Método de LCMS 7).
Etapa 2. Se preparó 1-(((6-carbamoilpiridin-2-il)oxi) metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino) etil) amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il) ciclohex-3-eno-1-carboxílico con un rendimiento del 19,9% como un sólido, siguiendo el procedimiento descrito en el procedimiento general E, etapa 4, usando 1-(((6-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1 -dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de metilo como reactante. LC/MS: m/e 845,60 (M+H)+, 2,931 min (Método de LCMS 7). Rm N-1H (400MHz, METANOL-d4) 57,84 (dd, J=8,3, 7,3 Hz, 1H), 7,72 (dd, J=7,3, 0,8 Hz, 1H), 6,99 (d, J=7,8 Hz, 1H), 5,39 (s a, 1H), 5,23 (d, J=4,3 Hz, 1H), 4,87 (s, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,61 - 4,56 (m, 1H), 4,55 - 4,50 (m, 1H), 3,25 (d, J=8,8 Hz, 5H), 3,20 (s a, 2H), 3,17 - 3,09 (m, 3H), 2,97 - 2,87 (m, 1H), 2,77 (d, J=5,3 Hz, 1H), 2,68 (d, J=13,6 Hz, 1H), 2,41 - 1,99 (m, 9H), 1,94 - 1,68 (m, 6H), 1,79 (s, 3H), 1,68 - 1,44 (m, 9H), 1,43 - 1,30 (m, 3H), 1,29 - 1,11 (m, 2H), 1,19 (s, 3H), 1,13 (s, 3H), 1,01 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,95 (s, 3H).
Preparación de 4-(metilsulfonil)ciclohexanona.
A una solución de (metilsulfonil)eteno (10,0 g, 94 mmol) en benceno (50 ml) se le añadió (buta-1,3-dien-2-iloxi)trimetilsilano (14,07 g, 99 mmol) e hidroquinona (20 mg, 0,182 mmol). La mezcla se desgasificó varias veces a -78 °C antes del calentamiento. El contenido se cerró herméticamente y se calentó a 105 °C durante 48 horas. La reacción se analizó por RMN en CDChque mostró aproximadamente el 10 % del residuo de vinilsulfona. Se añadió más cantidad de (buta-1,3-dien-2-iloxi)trimetilsilano (4 ml) y el calentamiento se reanudó durante 48 horas más. El análisis por RMN de nuevo en el punto temporal de 72 h mostró una reducción adicional de la cantidad de vinilsulfona (-3%). La muestra del tubo de RMN se combinó con la mezcla de reacción y se evaporó para dar una goma espesa al vacío a temperatura ambiente (~19 °C). La mezcla se diluyó de nuevo con acetona (250 ml), dando como resultado la formación de una solución transparente. La mezcla se enfrió en un baño de hielo hasta que estuvo fría. Se añadieron 4 ml de HCl 0,25 N (enfriado previamente en el mismo baño de hielo), dando como resultado la formación de una mezcla turbia, que se volvió transparente después de 15 minutos de agitación a 0 °C, y después regresó a un estado turbio en 10 minutos más, y permaneció turbia durante el resto del periodo de agitación. Se retiró una alícuota de 50 μl, se secó rápidamente en una película, y se analizó por RMN en CDCh. El análisis por RMN mostró ~7 % de vinilsulfona con respecto al producto deseado. La solución de acetona se filtró a través de un lecho corto de gel de sílice tipo H después de un tiempo de reacción total de aproximadamente una hora, y después se lavó con más acetona. El filtrado se concentró en el rotovapor a una temperatura de baño de 19 °C. El producto en bruto se subdividió en dos partes, 7,75 g cada una, para la purificación. El producto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30^-%, acetato de etilo al 1,0% en hexanos; dos columnas de 330 g) para proporcionar 4-(metilsulfonil) ciclohexanona (16,7 g, 100% de rendimiento) como un sólido blanco: RMN-1H (400 MHz, cloroformod) 53,29 (tt, J=11,0, 3,9 Hz, 1H), 2,94 (s, 3H), 2,73 - 2,62 (m, 2H), 2,58 - 2,37 (m, 4H), 2,15 (cd, J=11,9, 4,5 Hz, 2H).
Preparación de 2-(cis-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)acetaldehído y 2-(trans-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)acetaldehído.
Etapa 1. Preparación de (cis)-1-alil-4-(metilsulfonil)ciclohexanol y (trans)-1-alil-4-(metilsulfonil)ciclohexanol.
A una solución de 4-(metilsulfonil)ciclohexanona (1,03 g, 5,84 mmol) en THF (40 ml) a 0 °C se le añadió a través de una cánula bromuro de alilmagnesio (7,60 ml, 7,60 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min. La reacción se inactivó mediante la adición de solución saturada de NH4Cl (25 ml). La mezcla se transfirió a un embudo de decantación y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (5 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron sobre MgSÜ4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 70% con metanol al 1%/hexanos al 30% acetato de etilo al ^ 100% con metanol al 1%; columna de 40 g) para proporcionar (c/'s)-1-alil-4-(metilsulfonil)ciclohexanol (374 mg, 1,713 mmol, 29% de rendimiento) como un sólido blanco y (trans)-1-alil-4-(metilsulfonil)ciclohexanol (551 mg, 2,52 mmol, rendimiento del 43%) como un aceite incoloro.
(c/s)-1-alil-4-(metilsulfonil)ciclohexanol:
RMN-1H (400 MHz, CDCh) 55,96 - 5,79 (m, 1H), 5,26 - 5,21 (m, 1H), 5,18 (ddt, J=17,1,2,1, 1,2 Hz, 1H), 2,85 (s, 3H), 2,80 (tt, J= 12,5, 3,6 Hz, 1H), 2,25 (d, J= 7,5 Hz, 2H), 2,15 - 2,07 (m, 2H), 1,97 (cd, J=13,0, 3,8 Hz, 2H), 1,88 - 1,81 (m, 2H), 1,52 - 1,42 (m, 2H); 13C RMN (100 MHz, CDCh) 5 132,50, 120,02, 69,06, 62,26, 47,86, 36,85, 35,67, 21,13. La estructura de (cis)-1-alil-4-(metilsulfonil)ciclohexanol se confirmó por cristalografía de rayos X.
(trans)-1-alil-4-(metilsulfonil)ciclohexanol:
RMN-1H (400MHz, CDCh) 55,88 (ddt, J=17,2, 10,1,7,4 Hz, 1H), 5,28 - 5,16 (m, 2H), 2,98 - 2,91 (m, 1H), 2,90 (s, 3H), 2,35 (d,J=7,5Hz, 2H), 2,23 - 2,14 (m, 2H), 2,02 - 1,93 (m, 2H), 1,90 - 1,78 (m, 2H), 1,57 - 1,46 (m, 2H); RMN-13C (100MHz, CDCh) 5132,62, 120,19, 69,20, 62,41,48,00, 36,98, 35,83, 21,29.
Etapa 2a. Preparación de 2-((c/s)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)acetaldehído.
Se disolvió (trans)-1-alil-4-(metilsulfonil)ciclohexanol (3,4 g, 15,57 mmol) en CH2Ch (160 ml) y MeÜH (32,0 ml) en un matraz de fondo redondo de 500 ml. Se añadió N-óxido de N-metilmorfolina (NMÜ) (2,189 g, 18,69 mmol) y la mezcla se enfrió a -78 °C [Schwartz, C., Raible, J., Mott, K., Dussault, P. H. Ürg. Lett. 2006, 8, 3199 - 3201]. Se burbujeó ozono a través de la mezcla de reacción hasta que la solución se saturó con ozono (se volvió de color azul) y varios minutos posteriormente (tiempo total de 25 min). Después, se burbujeó nitrógeno a través de la mezcla de reacción hasta la desaparición del color azul. Después, se añadió sulfuro de dimetilo (11,52 ml, 156 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 16 h. La mezcla se concentró al vacío. El producto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 50% con metanol al 1%/hexanos al 50% acetato de etilo al ^ 95% con metanol al 1%/hexanos al 5%; columna de 330 g) para proporcionar 2-((1s,4s)-1-hidroxi-4-(metilsulfon¡l)c¡clohex¡l)acetaldehído (3,31 g, 15,03 mmol, 96% de rendimiento) como un sólido blanco: RMN-1H (400 MHz, cloroformo-d) 69,87 (t, J=1,1 Hz, 1H), 2,85 (s, 3H), 2,82 - 2,76 (m, 1H), 2,67 (d, J=1,3 Hz, 2H), 2,13 - 1,98 (m, 6H), 1,50 - 1,38 (m, 2H); RMN-13C (101 MHz, cloroformo-d) 6202,5, 68,9, 61,9, 54,9, 36,8, 35,9, 20,8.
Etapa 2b. Preparación de 2-((trans)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)acetaldehído.
Se disolvió (1r,4r)-1-alil-4-(metilsulfonil)ciclohexanol (2 g, 9,16 mmol) en CH2Cl2 (80 ml) y MeOH (16,00 ml) en un matraz de fondo redondo de 500 ml. Se añadió N-óxido de N-metilmorfolina (NMO) (1,288 g, 10,99 mmol) y la mezcla se enfrió a -78 °C [Schwartz, C., Raible, J., Mott, K., Dussault, P. H. Org. Lett. 2006, 8, 3199 - 3201]. Se burbujeó ozono (exceso) a través de la mezcla de reacción hasta que la solución se saturó con ozono (se volvió de color azul) y varios minutos posteriormente (tiempo total 25 min). Después, se burbujeó nitrógeno a través de la mezcla de reacción hasta la desaparición del color azul. Después, se añadió sulfuro de dimetilo (6,78 ml, 92 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 16 h. La mezcla se concentró al vacío. El producto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 70% con metanol al 5%/hexanos al 30 ^% acetato de etilo al 100% con metanol al 5%; columna de 220 g) para proporcionar 2-((1 r,4r)-1 -hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)acetaldehído (1,58 g, 7,17 mmol, rendimiento del 78%) como un sólido blanco: RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 69,82 (t, J=1,8 Hz, 1H), 2,99 - 2,88 (m, 1H), 2,85 (s, 3H), 2,67 (d, J=1,8 Hz, 2H), 2,20 - 2,10 (m, 2H), 2,06 - 1,98 (m, 2H), 1,74 (dtd, J=14,0, 10,6, 3,5 Hz, 2H), 1,61 - 1,50 (m, 2H); RMN-13C (101MHz, CLOROFORMO-d) 6202,4, 70,0, 59,3, 50,3, 38,2, 34,9, 21,1.
Ejemplo A1. Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxílico.
Etapa 1. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1 -((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
Una mezcla de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,1lb,12,13,l3a,l3b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1 -((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo (65 mg, 0,097 mmol), 2-((1s,4s)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)acetaldehído (47,1 mg, 0,214 mmol) y complejo de borano-2-picolina (22,86 mg, 0,214 mmol) en MeOH (1 ml) y ácido acético (0,2 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (10 ml) y una solución acuosa saturada de carbonato de sodio (2 ml). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (4 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (10% 9:1 acetona:metanol/90% hexanos ^ 65% 9:1 acetona:metanol/35% hexanos; columna de 24 g, A = 220 nm) para proporcionar 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxilato (69 mg, rendimiento del 81%) como un sólido incoloro: RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 58,15 (dd, J=5,0, 1,8 Hz, 1H), 7,56 (dd, J=8,5, 6,9, 2,0 Hz, 1H), 6,87 (td, J=6,1,0,7 Hz, 1H), 6,73 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,20 (d, J=6,1 Hz, 1H), 4,75 (d, J=1,5 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,50 - 4,44 (m, 1H), 4,43 - 4,37 (m, 1H), 4,21 - 4,10 (m, 2H), 2,85 (s, 3H), 2,84 - 2,67 (m, 4H), 2,55 (td, J=10,8, 5,5 Hz, 1H), 2,22 - 0,88 (m, 43H), 1,70 (s, 3H), 1,21 (t, J=7,1 Hz, 3H), 1,06 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,87 (s, 3H); LC/MS m/e 873,7 [(M+H)+, calculado para C53H81N2O6S 873,6], tR = 4,67 min (Método LCMS 14).
Etapa 2. Se trató una solución de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR))-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxilato de etilo (65 mg, 0,074 mmol) en dioxano (1 ml) y MeOH (0,5 ml) con hidróxido de sodio (0,372 ml, 0,744 mmol, 2M ac.). La mezcla de reacción se calentó a 50 °C durante 3 h y luego a 60 °C durante 6 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 2 N (200 uL). La mezcla se filtró a través de un filtro de jeringa y se purificó mediante HPLC de fase inversa (Método 1 de HPLC preparativa). El producto (61,7 mg) contenía una impureza (aprox. 6%). El producto se volvió a purificar mediante HPLC de fase inversa (Método 2 de HPLC preparativa). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (48,4 mg, rendimiento del 67%) como un sólido amorfo blanco: RMN-1H (500 MHz, ácido acético-d4) 58,29 (dd, J=5,3, 1,7 Hz, 1H), 7,90 - 7,82 (mH), 7,13 - 7,08 (m, 1H), 6,99 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,41 (s a 1H), 5,26 (d, J=5,8 Hz, 1H), 4,83 (s, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,56 - 4,50 (m, 1H), 4,49 - 4,44 (m, 1H), 3,48 -3,34 (m, 2H), 3,09 - 2,99 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 2,89 - 2,79 (m, 1H), 2,72 (d, J=16,0 Hz, 1H), 2,32 - 1,32 (m, 35H), 1,75 (s, 3H), 1,17 (s, 3H), 1,13 (d, J=7,5 Hz, 2H), 1,09 (s, 3H), 1,02 (d, J=3,7 Hz, 3H), 0,99 (d, J=3,7 Hz, 3H), 0,95 (s, 3H); LC/MS m/e 845,6 [(M+H)+, calculado para C51H77N2O6S 845,6], tR = 4,36 min (Método LCMS 14); HPLC (Método analítico de HPLC 1):ír= 18,86 min; HPLC (Método analítico de HPLC 2):ír= 20,24 min.
Ejemplo A2. Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1-en-2-y1)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxílico.
Etapa 1. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1 -((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo.
Una mezcla de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a]crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de etilo (65 mg, 0,097 mmol), 2-((1r,4r)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)acetaldehído (47,1 mg, 0,214 mmol) y complejo de borano-2-picolina (22,86 mg, 0,214 mmol) en MeOH (1 ml) y ácido acético (0,2 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La reacción no se ha completado. Luego se añadió 2-((1r,4r)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)acetaldehído adicional (21 mg, 0,097 mmol, 1 eq.) y 1 h después se añadió complejo de borano-2-picolina (10 mg, 0,097 mmol, 1 eq.) a la mezcla de reacción y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (10 ml) y una solución acuosa saturada de carbonato de sodio (2 ml). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (4 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (10% 9:1 acetona:metanol/90% hexanos ^ 65% 9:1 acetona:metanol/35% hexanos; columna de 24 g, A = 220 nm) para proporcionar 4 -((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1 r,4S)-1 -hidroxi-4-(metilsulfonil) ciclohexil) etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxilato (42,4 mg, rendimiento del 50%) como una espuma incolora:RMN-1H (500MHz, CLOROFORMO-d) 58,14 (dd, J=5,0, 1,8 Hz, 1H), 7,61 - 7,54 (1H), 6,87 (ddd, J=7,0, 5,1, 0,8 Hz, 1H), 6,73 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,36 (s a, 1H), 5,20 (d, J=6,0 Hz, 1H), 4,72 (d, J=1,4 Hz, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,51 - 4,44 (m, 1H), 4,43 - 4,36 (m, 1H), 4,21 - 4,10 (m, 2H), 2,99 - 2,91 (m, 1H), 2,89 (s, 3H), 2,83 - 2,76 (m, J=12,1 Hz, 1H), 2,72 - 2,62 (m, 2H), 2,59 - 2,51 (m, 1H), 2,21 - 0,88 (m, 43H), 1,69 (s, 3H), 1,21 (t, J=7,1 Hz, 3H), 1,06 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,87 (s, 3H); LC/MS m/e 873,7 [(M+H)+, calculado para C53H81N2O6S 873,6], tR = 4,62 min (Método LCMS 14).
Etapa 2. Se trató una solución de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)
2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1 -((piridin-2-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxilato de etilo (42 mg, 0,048 mmol) en dioxano (1 mL) y MeOH (0,5 mL) con hidróxido de sodio (0,361 mL, 0,721 mmol, 2 M ac.). La mezcla de reacción se calentó a 60 °C durante 24 h. Se añadió hidróxido de sodio adicional (0,120 ml, 0,240 mmol, 5 eq, 2 M ac.) y la mezcla de reacción se calentó a 70 °C durante 8 h. La reacción se había completado. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 2 N (400 μl). La mezcla se filtró a través de un filtro de jeringa y se purificó mediante HPLC de fase inversa (Método 3 de HPLC preparativa). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1 -((piridin-2-iloxi)metil)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (31,3 mg, rendimiento del 67%) como un sólido amorfo blanco. RMN-1H (500Mhz, Ácido acético-d4) 68,30 - 8,25 (m, 1H), 7,85 - 7,78 (m, 1H), 7,10 - 7,04 (m, 1H), 6,95 (dd, J=8,5, 0,6 Hz, 1H), 5,41 (s a, 1H), 5,26 (d, J=6,0 Hz, 1H), 4,83 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,55 - 4,49 (m, 1H), 4,48 - 4,43 (m, 1H), 3,46 - 3,37 (m, 1H), 3,36 - 3,28 (m, 1H), 3,18 - 3,10 (m, 1H), 2,98 (s, 3H), 2,91 - 2,81 (m, 1H), 2,71 (d, J=16,3 Hz, 1H), 2,32 - 1,32 (m, 35H), 1,75 (s, 3H), 1,16 - 1,12 (m, 2H), 1,14 (s, 3H), 1,09 (s, 3H), 1,02 (d, J=3,7 Hz, 3H), 0,99 (d, J=3,2 Hz, 3H), 0,94 (s, 3H); LC/MS m/e 845,6 [(M+H)+, calculado para C51H77N2O6S 845,6], tR = 4,33 min (Método LCMS 14); HPLC (Método analítico HPLC 1):ír= 18,86 min; HPLC (Método analítico HPLC 2):ír= 20,48 min.
Ejemplo A3. Preparación de ácido (S)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a]crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxílico.
Etapa 1. Preparación de benzoato de ((S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo.
A un matraz que contenía trifluorometanosulfonato de (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-ilo (1,00 g, 1,79 mmol) se añadió benzoato de (R)-(1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo (1,337 g, 3,23 mmol), fosfato de potasio tribásico (1,52 g, 7,17 mmol), 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenil (S-Phos) (0,055 g, 0,134 mmol) y acetato de paladio(II) (0,020 g, 0,090 mmol). La mezcla se diluyó con 1,4-dioxano (25 ml) y agua (6,25 ml), luego se purgó con N2y se calentó a 75 °C durante 16 h. La mezcla se enfrió a ta. La mezcla se diluyó con agua (100 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 75 ml). Las capas orgánicas se lavaron con salmuera (150 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 50% con MeOH al 4% e hidróxido de amonio al 0,8%/hexanos al 50%, acetato de etilo al ^ 70% con MeOH al 4% e hidróxido de amonio al 0,8%/hexanos al 30%, columna de 120 g) para proporcionar benzoato de ((S)-4-(1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil) ciclohex-3-en-1-il) metilo (1,15 g, rendimiento del 92%) como un sólido blancuzco: RMN-1H (400 MHz (400MHz, CLOROFORMO-d) 58,06 - 8,00 (m, 2H), 7,62 - 7,55 (m, 1H), 7,49 - 7,41 (m, 2H), 5,38 (sa, 1H), 5,22 (dd, J=6,3, 1,8 Hz, 1H), 4,75 (d, J=2,0 Hz, 1H), 4,62 (dd, J=2,3, 1,3 Hz, 1H), 4,52 - 4,40 (m, 2H), 4,20 (cd, J=7,2, 2,1 Hz, 2H), 2,70 (d, J=18,3 Hz, 1H), 2,56 (td, J=10,9, 5,3 Hz, 1H), 2,35 - 1,95 (m, 6H), 1,91 - 1,81 (m, 1H), 1,78 - 1,13 (m, 20H), 1,71 (s, 3H), 1,24 (t, J=7,3 Hz, 3H), 1,09 (s, 3H), 1,00 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,88 (s, 3H); LC/MS m/e 696,7 [M+H)+, calculado para C46H65NO4696,5], tR = 2,60 min (Método LCMS 15).
Etapa 2. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxilato de (S)-etilo.
A una solución de ((S)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)benzoato de metilo (1,07 g, 1,537 mmol) en THF (10 mL) y MeOH (1 mL) se añadió hidróxido sódico (1,691 mL, 1,691 mmol). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 14 h. El sólido se retiró por filtración. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía una solución acuosa saturada de NaHCOs (10 ml)/agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con metanol al 5 % en acetato de etilo (5 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). El lavado de salmuera se extrajo de nuevo con metanol al 5 % en acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para proporcionar 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxilato de (S)-etilo (0,535 g, rendimiento del 59 %) en forma de un sólido de color blanco. El producto en bruto se usó directamente en la siguiente etapa. RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,34 (t, J = 3,8 Hz, 1H), 5,20 (dd, J = 6,1, 1,9 Hz, 1H), 4,75 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 4,21 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 3,70 (s, 2H), 2,62 - 2,51 (m, 2H), 2,23 - 2,15 (m, 2H), 2,09 - 1,92 (m, 4H), 1,83 - 1,12 (m, 21H), 1,72 (s, 3H), 1,30 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,09 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,88 (s, 3H); LC/MS (ESI)m /e614,6 [(M+H)+, calculado para C39H61NOsNa 614,5], te = 4,28 min (Método de LCMS 14).
Etapa 3. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil) ciclohex-3-enocarboxilato de (S)-etilo.
A una solución de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxilato de potasio (495 mg, 0,836 mmol) y 2-fluoronicotinonitrilo (204 mg, 1,673 mmol) en THF (7 mL) y DMF (1 mL) a 0 °C se le añadió terc-butóxido de potasio (1,004 mL, 1,004 mmol). El baño de enfriamiento se retiró y la mezcla de reacción se agitó a 20 °C durante 1,5 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía una solución acuosa saturada de NaHCO3(15 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (4 * 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron.
El producto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (50% de una solución de metanol en acetato de etilo al 5%/hexanos al 50% - 100% de una solución de metanol en acetato de etilo al 5%; columna de 40 g) para proporcionar 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (344 mg, rendimiento del 59%) como un sólido blancuzco: RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,34 (dd, J=5,0, 2,0 Hz, 1H), 7,88 (dd, J=7,5, 2,0 Hz, 1H), 6,99 (dd, J=7,5, 5,0 Hz, 1H), 5,38 (s a, 1H), 5,21 (dd, J=6,1, 1,6 Hz, 1H), 4,75 (d, J=2,3 Hz, 1H), 4,62 (dd, J=2,1, 1,4 Hz, 1H), 4,57 (s, 2H), 4,25 - 4,15 (m, 2H), 2,78 - 2,68 (m, 1H), 2,56 (td, J=10,9, 5,1 Hz, 1H), 2,35 - 1,89 (m, 6H), 1,79 - 1,11 (m, 21H), 1,71 (s, 3H), 1,27 (t, J=6,8 Hz, 3H), 1,09 (s, 3H)), 0,99 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,88 (s, 3H); LC/MS (ESI)m /e694,7 [(M+H)+, calculado para C45H64N3O3694,5], te = 4,52 min (Método lCm S 14).
Etapa 4. Preparación de 1-(((3-cianopiridin-2-il) oxi) metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxilato de (S)-etilo.
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1)-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (S)-etilo (150 mg, 0,216 mmol) y 2-((1s,4s)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)acetaldehído (76 mg, 0,346 mmol) se disolvieron en MeOH (1,6 ml) y ácido acético (0,32 ml). Se añadió complejo de borano-2-picolina (37,0 mg, 0,346 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (3 ml) y solución de carbonato de sodio (2 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (5 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (5 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (30% de acetato de etilo con 5% de metanol/70% de hexanos ^ 100% de acetato de etilo con 5% de metanol; columna de 24 g, gradiente de 25 min) para proporcionar 1-((((3-cianopiridin-2-il) oxi) metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil) ciclohexil) etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxilato (134,6 mg, 69% de rendimiento) como una espuma blanca: RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 6 8,34 (dd, J=5,0, 2,0 Hz, 1H), 7,88 (dd, J=7,6, 1,9 Hz, 1H), 6,99 (dd, J=7,5, 5,0 Hz, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,20 (dd, J=6,2, 1,6 Hz, 1H), 4,74 (d, J=1,5 Hz, 1H), 4,61 (s, 1H), 4,56 (s, 2H), 4,24 - 4,15 (m, 2H), 2,85 (s, 3H), 2,83 - 2,67 (m, 4H), 2,55 (td, J=10,9, 5,6 Hz, 1H), 2,31 - 0,88 (m, 37H), 1,70 (s, 3H), 1,26 (t, J=7,1 Hz, 3H), 1,05 (s, 3H)), 0,98 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,87 (s, 3H); LC/MS (ESI)m/e898,7 [(M+H)+, calculado para C54H80N3O6S 898,6], ír = 4,44 min (Método LCMS 14).
Etapa 5. A una solución de 1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxilato de (S)-etilo (123 mg, 0,137 mmol) en dioxano (4 ml) y MeOH (2 ml) se le añadió hidróxido de litio (2 ml, 2,00 mmol, 1 M ac.). La mezcla se calentó a 60 °C durante 12,5 h. Únicamente se detectó una pequeña cantidad de material de partida por LC/MS (Método de LCMS 16). La reacción se detuvo en este punto debido a la hidrólisis competitiva del grupo nitrilo a la amida correspondiente. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 6 N (250 jl). Luego, la mezcla se filtró a través de un filtro de jeringa y se purificó mediante HPLC de fase inversa (5 inyecciones) (Método de HPLC preparativa 4). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar ácido (S)-1 -(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1 -hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (51,6 mg, rendimiento del 38%) como un sólido amorfo blanco: RMN-1H (500 MHz, Ácido acético-d4) 68,42 (dd, J=5,1, 1,9 Hz, 1H), 8,05 (dd, J=7,6, 1,9 Hz, 1H), 7,11 (dd, J=7,6, 5,1 Hz, 1H), 5,43 (s, 1H), 5,27 (d, J=4,7 Hz, 1H), 4,83 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,68 - 4,61 (m, 2H), 3,47 - 3,33 (m, 2H), 3,08 -2,99 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 2,90 - 2,81 (m, 1H), 2,74 (d, J=15,6 Hz, 1H), 2,38 - 1,13 (m, 37H), 1,75 (s, 3H), 1,18 (s, 3H), 1,09 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 0,95 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 870,6 [(M+H)+, calculado para C52H76N3O6S 870,5], tR = 1,31 min (Método LCMS 16); HPLC (Método analítico de HPLC 3):ír= 12,19 min; HPLC (Método analítico de HPLC 4):ír= 11,64 min.
Ruta alternativa para la preparación del Ejemplo A3
Preparación de ácido (S)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a]crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxílico.
Etapa 1. Preparación de benzoato de ((S)-1-(etoxicarbonil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo.
Se disolvieron benzoato de ((S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo (7,63 g, 10,96 mmol) y 2-((1s,4s)-1-hidroxi-4-(metilsulfoni¡)ciclohexil)acetaldehído (3,86 g, 17,54 mmol) en MeOH (30 ml) y ácido acético (6 ml). Se añadió complejo de borano-2-picolina (1,876 g, 17,54 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (50 ml) y solución de carbonato de sodio (50 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (7 x 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (25 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30% con metanol al 5%/hexanos al 70% acetato de etilo al ^ 100% con metanol al 5%; columna de 330 g, gradiente de 30 min) para proporcionar benzoato de ((S)-1-(etoxicarbonil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil) etil) amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il) ciclohex-3-en-1-il) metilo (8,81 g, rendimiento del 89%) como un sólido blanco: RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 58,06 - 8,00 (m, 2H), 7,61 -7,54 (mH), 7,50 -7,42 (2H), 5,37 (5,37H) s a, 1H), 5,21 (dd, J=6,2, 1,6 Hz, 1H), 4,75 (d, J=1,8 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,47 - 4,41 (m, 2H), 4,24 - 4,16 (m, 2H), 2,85 (s, 3H), 2,83 - 2,65 (m, 4H), 2,55 (td, J=10,9, 5,6 Hz, 1H), 2,33 -2,23 (m, 1H), 2,20 - 1,03 (m, 36H), 1,70 (s, 3H), 1,24 (t, J=7,1 Hz, 3H), 1,05 (s, 3H), 0,99 - 0,87 (m, 12H); LC/MS (ESI) m/e 900,4 [(M+H)+, calculado para C55H82NO7S 900,6], tR = 4,55 min (Método Lc Ms 14).
Etapa 2. Preparación de ácido (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxílico.
A una solución de benzoato de ((S)-1-(etoxicarbonil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo (8,00 g, 8,89 mmol) en 1,4-dioxano (160 mL) y metanol (80 mL) en un recipiente a presión se le añadió hidróxido de litio (89 mL, 89 mmol). El recipiente se selló y la mezcla se calentó a 65 °C (temperatura interna) durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 4 N (15,5 mL, 7 eq.). A continuación, la mezcla se concentró. El producto en bruto se recogió en dioxano (40 ml)/metanol (20 ml)/agua (5 ml) y se acidificó mediante la adición de TFA (gota a gota hasta acidez). La suspensión se convirtió en una solución. La solución contenía parte de materia sólida suspendida. Se pasó a través de un lecho corto de arena seguido de filtración a través de un filtro de jeringa. Después, el producto se purificó por MPLC de fase inversa en una columna C18 Redi Sep Gold (150 g) en Biotage (Procedimiento de MPLC preparativa 1,6 inyecciones). El disolvente orgánico se evaporó en el evaporador rotatorio y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar ácido (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR, 11aS,11 bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1 -hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (6,57 g, rendimiento del 84 %) en forma de un sólido de color blanco amorfo. Después, el producto se secó adicionalmente al vacío en un desecador de vacío con Dryrite. RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) ó 8,54 (s a, 1H), 8,02 (s a, 1H), 5,34 (s a, 1H), 5,23 - 5,16 (m, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,70 (s, 1H), 3,76 (s, 2H), 3,22 (d, J = 3,1 Hz, 2H), 2,86 (s, 3H), 2,83 - 2,68 (m, 2H), 2,59 (d, J = 15,3 Hz, 1H), 2,47 - 2,34 (m, 1H), 2,26 - 1,06 (m, 36H), 1,71 (s, 3H), 1,09 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,88 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 768,4 [(M+H)+, calculado para C46H74NO6S 768,5], tR = 3,85 min. (Método de LCMS 14).
Etapa 3. A una solución de ácido (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (5,92 g, 6,71 mmol) en THF (80 ml) a 0 °C se le añadió hidruro sódico (2,147 g, 53,7 mmol). El baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. La mezcla se enfrió a 0 °C y se añadió 2-fluoronicotinonitrilo (3,28 g, 26,8 mmol) en THF (10 ml) mediante una cánula. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1,5 h. La reacción se inactivó mediante la adición de ácido acético (3,84 ml, 67,1 mmol, 10 equiv.). La solución se inyectó directamente en una columna y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (metanol al 5 % en CH2Cl2 para eluir el material de alto Rf y después metanol al 12 % en CH2Cl2 para eluir el producto. Se obtuvieron 6,70 g de producto. Después, el producto se purificó adicionalmente por MPLC de fase inversa en una columna C18 Redi Sep Gold (150 g) en Biotage (Procedimiento de MPLC preparativa 2, 5 inyecciones). El disolvente orgánico se evaporó en el evaporador rotatorio y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar ácido (S)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1 -hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (5,06 g, 5,14 mmol) en forma de un sólido de color blanco amorfo.
Después, el producto (sal de TFA) se disolvió en MeCN/H2O (60/40) y se pasó lentamente a través de una forma de cloruro de resina de intercambio iónico AG 1-x2 (Bio-Rad malla 100-200 cat. n° 140-1241, prelavado con 90 % de acetonitrilo/10 % de agua). Se usaron 140 gramos de resina. Las fracciones que contenían producto se combinaron y el disolvente orgánico se retiró en el rotovapor y el agua se congeló y se colocó en el liofilizador para proporcionar ácido (S)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ácido ciclohex-3-enocarboxílico, HCl (4,26 g, rendimiento del 66%) como sólido amorfo blanco: RMN-1H (500 Mhz, Ácido acético-d4) ó 8,42 (dd, J=5,1, 1,9 Hz, 1H), 8,05 (dd, J=7,6, 1,9 Hz, 1H), 7,11 (dd, J=7,6, 5,1 Hz, 1H), 5,43 (s a, 1H), 5,27 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,89 (s, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,69 - 4,60 (m, 2H), 3,45 - 3,33 (m, 2H), 3,13 (td, J=10,8, 5,1 Hz, 1H), 3,08 - 3,00 (m, 1H), 2,97 (s, 3H), 2,74 (d, J=15,1 Hz, 1H), 2,61 - 2,53 (m, 1H), 2,38 - 1,13 (m, 36H), 1,76 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,10 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 0,95 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 870,3 [(M+H)+, calculado para C52H76N3O6S 870,5], tR = 4,56 min (Método LCMS 14); HPLC (Método HPLC 3):ír= 13,13 min; HPLC (Método HPLC 4):ír= 12,46 min.
Ejemplo A4. Preparación de ácido (S)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi) metil1)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico.
Etapa 1. Preparación de 1-(((3-cianopiridin-2-il) oxi) metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil) ciclohexil) etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxilato de (S)-etilo.
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1)-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (S)-etilo (150 mg, 0,216 mmol) y 2-((1 r,4r)-1 -hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)acetaldehído (76 mg, 0,346 mmol) se disolvieron en MeOH (1,6 ml) y ácido acético (0,32 ml). Se añadió complejo de borano-2-picolina (37,0 mg, 0,346 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (20 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (5 * 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 30% con metanol al 5%/hexanos al 70% acetato de etilo al ^ 100% con metanol al 5%; columna de 24 g) para proporcionar (S)-etil 1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-ilo)ciclohex-3-enocarboxilato (131 mg, rendimiento 68 %) como una espuma blanca: RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,33 (dd, J=5,0, 2,0 Hz, 1H), 7,87 (dd, J=7,5, 2,0 Hz, 1H), 6,98 (dd, J=7,4, 5,1 Hz, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,20 (d, J=4,5 Hz, 1H), 4,72 (d, J=1,8 Hz, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,56 (s, 2H), 4,24 - 4,15 (m, 2H), 2,99 - 2,89 (m, 1H), 2,88 (s, 3H), 2,83 - 2,61 (m, 3H), 2,55 (td, J=10,8, 5,5 Hz, 1H), 2,31 - 1,02 (m, 37H), 1,69 (s, 3H), 1,27 (q, J=7,2 Hz, 3H), 1,06 (s, 3H), 0,98 (s, 6H), 0,92 (s, 3H), 0,87 (s, 3H); LC/MSm/e898,7 [(M+H)+, calculado para C54H79N3O6S 898,6], tR = 4,44 min (Método LCMS 14).
Etapa 2. A una solución de 1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,S,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b--octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxilato de (S)-etilo (131 mg, 0,146 mmol) en dioxano (4 ml) y MeOH (2 ml) se le añadió hidróxido de litio (2 ml, 2,00 mmol, 1 M ac.). La mezcla se calentó a 60 °C durante 10,5 h. Únicamente se detectó una pequeña cantidad de material de partida por LC/MS (Método de LCMS 16). La reacción se detuvo en este punto. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 6 N (250 μl). Luego, la mezcla se filtró a través de un filtro de jeringa y se purificó mediante HPLC de fase inversa (5 inyecciones) (Método de HPLC preparativa 4). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar ácido (S)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (69 mg, rendimiento del 48%) como un sólido amorfo blanco: RMN-1H (400 MHz, ácido acéticod4) ó 8,43 (dd, J=5,0, 2,0 Hz, 1H), 8,06 (dd, J=7,5, 2,0 Hz, 1H), 7,12 (dd, J=7,5, 5,3 Hz, 1H), 5,44 (s a, 1H), 5,27 (d, J=4,8 Hz, 1H), 4,83 (s, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,69 - 4,61 (m, 2H), 3,43 - 3,29 (m, 2H), 3,20 - 3,10 (m, 1H), 2,99 (s, 3H), 2,91 - 2,81 (m, J=9,0 Hz, 1H), 2,74 (d, J=17,6 Hz, 1H), 2,40 - 1,33 (m, 37H), 1,76 (s, 3H), 1,15 (s, 3H), 1,10 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 1,00 (s, 3H), 0,95 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 870,7 [(M+H)+, calculado para C52H75N3O6S 870,5], tn = 2,37 min (Método LCMS 15); HPLC (Método analítico de HPLC 3): tn = 16,00 min; HPLC (Método analítico de HPLC 4): tn = 13,90 min.
Ejemplo A5. Preparación de ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR, 11 aS,11 bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1 -hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,S,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a]crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxílico.
Etapa 1. Preparación de benzoato de ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo.
A un matraz que contenía trifluorometanosulfonato de (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,l2,13,13a,l3b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-ilo(2,2 g, 3,94 mmol) se añadió benzoato de (S)-(1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo (2,94 g, 7,10 mmol), fosfato de potasio tribásico (3,35 g, 15,78 mmol), 2-diclohexilfosfino-2 ',6'-dimetoxibifenil (S-Phos) (0,121,0,296 mmol) y acetato de paladio(II) (0,044 g, 0,197 mmol). La mezcla se diluyó con 1,4-dioxano (60 ml) y agua (15 ml) y se purgó con N2y se calentó a 75 °C durante 16 h. La mezcla se enfrió a ta. La mezcla se diluyó con agua (150 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 ml). Las capas orgánicas se lavaron con salmuera (200 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 50% con MeOH al 4% e hidróxido de amonio al 0,8%/hexanos al 50%, acetato de etilo al ^ 70% con MeOH al 4% e hidróxido de amonio al 0,8%/hexanos al 30%, columna de 220 g) para proporcionar benzoato de ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-Il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il) metilo (2,47 g, rendimiento del 90%) como un sólido blancuzco: RMN-1 H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,05 - 8,00 (m, 2H), 7,61 - 7,55 (m, 1H), 7,45 (t, J=7,7 Hz, 2H), 5,38 (s a, 1H), 5,25 - 5,19 (m, 1H), 4,75 (s, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,46 (q, J=10,8 Hz, 2H), 4,19 (q, J=7,0 Hz, 2H), 2,74 -2,66 (m, 1H), 2,56 (td, J=10,9, 5,1 Hz, 1H), 2,29 - 1,96 (m, 6H), 1,87 (dt, J=12,9, 6,2 Hz, 1H), 1,78 - 1,11 (m, 20H), 1,71 (s, 3H), 1,24 (t, J=7,3 Hz, 3H), 1,09 (s, 3H), 0,98 (s a, 3H), 0,97 (s a, 3H), 0,95 (s, 3H), 0,89 (s, 3H); LC/MS m/e 696,7 [(m H)+, calculado para C46H65NO4696,5], tR = 2,55 min (Método LCm S 15).
Etapa 2. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo.
A una solución de benzoato de ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo (1,20 g, 1,724 mmol en THF (10 ml) y MeOH (1 ml) se le añadió hidróxido sódico (1,897 ml, 1,897 mmol). La mezcla de reacción se agitó a t.a. durante 14 h. El sólido se retiró por filtración. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía una solución acuosa saturada de NaHCOs (10 ml)/agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con metanol al 5 % en acetato de etilo (5 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 ml). El lavado de salmuera se extrajo de nuevo con metanol al 5 % en acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para proporcionar 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo (450 mg, rendimiento del 44 %) en forma de un sólido de color blanco. El producto en bruto se usó directamente en la siguiente etapa. RMN-1H (4,0 MHz, CLOROFORMO-d) 55,34 (s a, 1H), 5,20 (dd, J = 6,0, 1,8 Hz, 1H), 4,75 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,20 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 3,70 (s, 2H), 2,62 - 2,51 (m, 2H), 2,21 - 2,14 (m, 2H), 2,10 - 1,94 (m, 4H), 1,82 - 1,12 (m, 21H), 1,71 (s, 3H), 1,29 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,09 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 0,89 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 614,6 [(M+H)+, calculado para CsgH61NO3Na 614,5], tR= 4,27 min (Método de LCMS 14).
Etapa 3. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,1lb,12,13,l3a,l3b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo.
A una solución de (R)-etilo 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(hidroximetil) ciclohex-3-enocarboxilato de (412 mg, 0,696 mmol) y 2-fluoronicotinonitrilo (170 mg, 1,392 mmol) en THF (7 mL) y DMF (1 mL) a 0 °C se le añadió terc-butóxido de potasio (0,835 mL, 0,835 mmol). El baño de enfriamiento se retiró y la mezcla de reacción se agitó a 20 °C durante 1,5 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía una solución acuosa saturada de NaHCO (15 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (4 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (50% de una solución de metanol en acetato de etilo al 5^-%/hexanos al 50% 100% de una solución de metanol en acetato de eti lo al 5%; columna de 40 g) para proporcionar 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato(365 mg, 0,526 mmol, rendimiento del 76%) como un sólido blancuzco: RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,34 (dd, J=5,0, 2,0 Hz, 1H), 7,88 (dd, J=7,4, 1,9 Hz, 1H), 6,99 (dd, J=7,5, 5,0 Hz, 1H), 5,38 (s a., 1H), 5,21 (dd, J=6,3, 1,8 Hz, 1H), 4,74 (d, J=2,0 Hz, 1H), 4,62 (dd, J=2,1, 1,4 Hz, 1H), 4,60 - 4,52 (m, 2H), 4,19 (cd, J=7,1,2,5 Hz, 2H), 2,73 (d, J=17,1 Hz, 1H), 2,56 (td, J=10,9, 5,4 Hz, 1H), 1,78 - 1,13 (m, 21H), 2,27 - 1,87 (m, 6H), 1,71 (s, 3H), 1,26 (t, J=6,8 Hz, 3H), 1,09 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,94 (s, 3H), 0,88 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 694,7 [(M+H)+, calculado para C45H64N3O3694,5], tR = 4,51 min (Método LCMS 14).
Etapa 4. Preparación de 1-(((3-cianopyridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo.
Se disolvieron 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo (150 mg, 0,216 mmol) y 2-((1s,4s)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)acetaldehído (76 mg, 0,346 mmol) en MeOH (1,4 ml) y ácido acético (0,28 ml). Se añadió complejo de borano-2-picolina (37,0 mg, 0,346 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (3 ml) y solución de carbonato de sodio (2 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (5 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (5 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (30% de acetato de etilo con 5% de metanol/70% de hexanos ^ 100% de acetato de etilo con 5% de metanol; columna de 24 g, gradiente de 25 min) para proporcionar para proporcionar (R)-etil 1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxilato (130 mg, rendimiento del 67 %) como una espuma blanca: RMN-1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) 68,34 (dd, J=5,0, 2,0 Hz, 1H), 7,88 (dd, J=7,5, 2,0 Hz, 1H), 6,99 (dd, J=7,5, 5,0 Hz, 1H), 5,38 (s a, 1H), 5,23 - 5,19 (m, 1H), 4,75 (d, J=1,7 Hz, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,59 - 4,52 (m, 2H), 4,19 (dtt, J=10,8, 7,2, 3,8 Hz, 2H), 2,85 (s, 3H), 2,83 - 2,70 (m, 4H), 2,55 (td, J=10,9, 5,6 Hz, 1H), 2,28 - 0,89 (m, 37H), 1,70 (s, 3H), 1,26 (t, J=7,1 Hz, 3H), 1,06 (s, 3H), 0,98 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 0,87 (s, 3H); LC/MS (ESI)m/e898,7 [(M+H)+, calculado para C54H80N3O6S 898,6], ír = 4,43 min (Método LCMS 14).
Etapa 5. A una solución de 1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo (124 mg, 0,138 mmol) en dioxano (4 ml) y MeOH (2 ml) se le añadió hidróxido de litio (2 ml, 2,00 mmol, 1 M ac.). La mezcla se calentó a 60 °C durante 10 h. Se detectó parte del material de partida por LC/MS (Método LCMS 16) junto con la formación de un subproducto de amida debido a la hidrólisis del nitrilo. La reacción se detuvo en este punto. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 6 N (250 μl). Luego, la mezcla se filtró a través de un filtro de jeringa y se purificó mediante HPLC de fase inversa (5 inyecciones) (Método de HPLC preparativa 4). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1s,4R)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1 -((piridin-2-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (48,1 mg, rendimiento del 34%) como un sólido amorfo blanco: RMN-1H (500 MHz, ácido acético-d4) 68,42 (dd, J=5,1, 1,9 Hz, 1H), 8,05 - 7,82 (mH), 7,6 - 7,08 (m, 1H), 7,11 (d, J=5,2 Hz, 1H), 5,43 (s a, 1H), 5,27 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,83 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,68 - 4,59 (m, 1H), 3,46 - 3,33 (m, 1H), 3,48 - 3,34 (m, 2H), 3,09 - 2,99 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 2,89 - 2,81 (m, 1H), 2,74 (d, J=16,5 Hz, 1H), 2,34 - 1,13 (m, 37H), 1,75 (s, 3H), 1,17 (s, 3H), 1,09 (d, j=7,5 Hz, 2H), 1,02 (s, 3H), 1,00 (d, J=3,7 Hz, 3H), 0,95 (d, J=3,7 Hz, 3H), 0,95 (s, 3H); ESI/MS m/e 845,6 [(M+H)+, calculado para C52H76N2O6S 845,6], tR = 1,24 min (Método LCMS 16); HPLC (Método analítico de HPLC 3):ír= 12,24 min; HPLC (Método analítico de HPLC 4):ír= 11,77 min.
Ejemplo A6. Preparación de ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxílico.
Etapa 1. Preparación de 1-(((3-cianopyridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo.
Se disolvieron 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,1lb,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1 -(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo (150 mg, 0,216 mmol) y 2-((1 r,4r)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)acetaldehído (76 mg, 0,346 mmol) en MeOH (1,6 ml) y ácido acético (0,32 ml). Se añadió complejo de borano-2-picolina (37,0 mg, 0,346 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 14 h. La mezcla se transfirió a un embudo de decantación que contenía una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (20 ml). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (5 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El producto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (30%acetato de etilo con 5%metanol/70%hexanos ^ 100%acetato de etilo con 5 % metanol; columna de 24 g) para proporcionar 1-(((3 -cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo (131 mg, rendimiento del 68%) como una espuma blanca: RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,33 (dd, J=5,1, 1,9 Hz, 1H), 7,87 (dd, J=7,4, 1,9 Hz, 1H), 6,98 (dd, J=7,4, 5,1 Hz, 1H), 5,37 (s a, 1H), 5,22 - 5,17 (m, 1H), 4,71 (d, J=1,8 Hz, 1H), 4,61 - 4,51 (m, 3H), 4,23 - 4,14 (m, 2H), 2,99 - 2,90 (m, 1H), 2,87 (s, 3H), 2,82 - 2,61 (m, 3H), 2,54 (td, J=10,8, 5,5 Hz, 1H), 2,23 - 1,02 (m, 37H), 1,68 (s, 3H), 1,26 (q, J=7,3 Hz, 3H), 1,06 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,86 (s, 3H); LC/MSmíe898,7 [(M+H)+, calculado para C54H79N3O6S 898,6], tR = 4,43 min (Método Lc Ms 14).
Etapa 2. A una solución de 1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo (107 mg, 0,119 mmol) en dioxano (4 ml) y MeOH (2 ml) se le añadió hidróxido de litio (2 ml, 2,00 mmol, 1 M ac.). La mezcla se calentó a 60 °C durante 10,5 h. Únicamente se detectó una pequeña cantidad de material de partida por LC/MS (Método de LCMS 16). La reacción se detuvo en este punto. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó parcialmente mediante la adición de HCl 6 N (250 μl). Luego, la mezcla se filtró a través de un filtro de jeringa y se purificó mediante HPLC de fase inversa (5 inyecciones) (Método de HPLC preparativa 4). El disolvente orgánico se evaporó en el rotovapor y la mezcla acuosa se liofilizó para proporcionar ácido 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11 bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1 r,4S)-1 -hidroxi-4-(metilsulfonil)ciclohexil)etil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-((piridin-2-iloxi)metil) ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (58 mg, rendimiento del 49%) como un sólido amorfo blanco: RMN-1H (400Mhz, Ácido acético-d4) 58,43 (dd, J=5,1, 1,9 Hz, 1H), 8,06 (dd, J=7,5, 1,8 Hz, 1H), 7,12 (dd, J=7,5, 5,0 Hz, 1H), 5,44 (s a, 1H), 5,27 (d, J=4,8 Hz, 1H), 4,83 (s, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,69 - 4,60 (m, 2H), 3,43 - 3,29 (m, 2H), 3,20 - 3,09 (m, 1H), 2,99 (s, 3H), 2,91 - 2,81 (m, 1H), 2,75 (d, J=15,3 Hz, 1H), 2,32 - 1,33 (m, 37H), 1,76 (s, 3H), 1,15 (s, 3H), 1,10 (s, 3H), 1,03 (s, 3H), 1,00 (s, 3H), 0,95 (s, 3H); LC/MS (ESI) míe 870,6 [(M+H)+, calculado para C52H75N3O6S 870,5], tR = 2,30 min (Método de LCMS 15); HPLC (Método analítico de h PlC 3):tR= 14,96 min; HPLC (Método analítico de HPLC 4): ír = 14,64 min.
Ejemplo A7 y Ejemplo A8. Preparación de ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (Ejemplo A7) y ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11 b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico (Ejemplo A8).
Etapa 1. Preparación de benzoato de ((R)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo.
En un matraz de presión media de 150 ml se combinaron trifluorometanosulfonato de (1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11 aR,11 bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1 -(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-ilo (1,5 g, 2,69 mmol), benzoato de (R)-(1-(etoxicarbonil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)ciclohex-3-en-1-il)metilo (1,259 g, 3,04 mmol) y precatalizador de Buchwald (0,127 g, 0,161 mmol) en THF (25 ml). A la mezcla de reacción se le añadió una solución de K3PO4acuoso 0,5 M (13,45 ml, 6,72 mmol). La solución de color pardo resultante se roció con N2(g), se agitó a 72 °C durante una noche. Después de 16 h, la reacción se dejó enfriar a ta, se diluyó con EtOAc (50 ml) y se lavó con K3PO41,5 M (50 ml). La capa acuosa se extrajo con 2 * 50 ml de EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para dar una espuma de color gris. El material en bruto se disolvió en DCM y se cargó sobre una columna de gel de sílice (SiO2cartucho de 80 g Isco, eluido con 0 % de B a 50 % de B en 4 volúmenes de columna, y mantenimiento en el 50 % de B hasta que todo el producto se eluyó, disolvente A= DCM, disolvente B = DCM:MeOH 90:10) y se secó al vacío para dar benzoato de ((R)-4((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)metilo (1,8 g, 2,59 mmol, rendimiento del 96 %) en forma de un sólido de color marrón. LCMS: m/z 696,6 (M+H+), tiempo de retención 1,589 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 58,06 - 7,96 (m, 2H), 7,63 - 7,53 (m, 1H), 7,48 - 7,39 (m, 2H), 5,36 (s a, 1H), 5,20 (dd, J = 6,1, 1,7 Hz, 1H), 4,73 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,61 (s, 1H), 4,44 (c, J = 10,8 Hz, 2H), 4,18 (cd, J = 7,1, 1,0 Hz, 2H), 2,77 - 2,64 (m, 1H), 2,55 (td, J = 10,9, 5,3 Hz, 1H), 2,26 - 2,13 (m, 3H), 2,08 (td, J = 12,7, 5,7 Hz, 2H), 2,00 (dd, J = 17,0, 6,5 Hz, 1H), 1,85 (dt, J = 13,1, 6,4 Hz, 1H), 1,78 - 1,71 (m, 2H), 1,70 (s, 3H), 1,67 - 1,56 (m, 6H), 1,55 - 1,49 (m, 4H), 1,48 - 1,38 (m, 6H), 1,37 - 1,26 (m, 3H), 1,24 - 1,19 (m, 3H), 1,08 (s, 3H), 0,97 (s, 3H), 0,96 (s a, 3H), 0,94 (s, 3H), 0,87 (s, 3H).
Etapa 2. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo.
A una solución de ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a, 5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(etoxicarbonil)ciclohex-3-en-1-il)benzoato de metilo (0,692 g, 0,994 mmol) en THF (10 mL) y MeOH (1 mL) se añadió hidróxido sódico (0,994 mL, 0,994 mmol) y la mezcla resultante se agitó a ta. Después de 3 h, la reacción se concentró hasta sequedad y el material se disolvió en DCM:MeOH y se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida (SiO2, cartucho de 40 g Isco, eluido con 95:5 DCM:MeOH) y se secóal vacíopara dar 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo (427 mg, 0,721 mmol, rendimiento del 72,6 %) en forma de un sólido de color amarillo claro. LCMS: m/z 592,5 (M+H+), tiempo de retención 1,705 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400MHz,1:1 CDCI3: M ETANOLd)55,30 (s a, 1H), 5,14 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,72 (s a, 1H), 4,60 (s a, 1H), 4,22 -4,00 (m, 2H), 3,74 - 3,53 (m, 2H), 2,60 - 2,42 (m, 2H), 2,13 (s a, 2H), 2,06 - 1,87 (m, 4H), 1,78 - 1,70 (m, 1H), 1,67 (s a, 5H), 1,63 - 1,51 (m, 6H), 1,43 (s a, 7H), 1,32 (s a, 1H), 1,24 (t, J=7,0 Hz, 4H), 1,06 (s a, 4H), 0,97 (s a, 3H), 0,92 (s a, 3H), 0,90 (s a, 3H), 0,85 (s a, 3H).
Etapa 3. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo.
Se combinaron 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(hidroximetil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo (420 mg, 0,710 mmol) y 3-ciano-2-fluoropiridina (130 mg, 1,064 mmol) en<d>M<f>(3 mL) y THF (3 mL) se enfriaron hasta 0 °C. La suspensión amarilla se trató con una solución de terc-butóxido de potasio (0,781 mL, 0,781 mmol) en THF. La reacción se volvió casi totalmente homogénea; el baño frío se retiró y la reacción se agitó hasta ta. Después de 3,5 h, aún quedaba una pequeña cantidad de material de partida; por lo tanto, a la reacción se le añadió más cantidad de 3-ciano-2-fluoropiridina (43,3 mg, 0,355 mmol) y terc-butóxido potásico (0,142 ml, 0,142 mmol) y se agitó a TA durante 1 h más. La reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con 25 ml de HCl 0,5 N. La capa acuosa se extrajo con 2 x 50 ml de EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con NaHCO3saturado y salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para dar una pasta de color marrón. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (SiO2, cartucho de 40 g Isco, eluido con DCM:MeOH 95:%) y se secó al vacío para dar 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo (426 mg, 0,614 mmol, rendimiento del 87 %) en forma de un sólido de color marrón claro. LCMS: m/z 694,9 (M+H+), tiempo de retención 1,517 min (Método de<l>C<m>S 16).
Etapa 4. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-hidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((3-cianopiridin-2-il) oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo, TFA.
A una solución de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo (48,5 mg, 0,070 mmol) en acetonitrilo (0,5 mL) y 1,4-dioxano (0,5 mL) se añadió terc-butildimetilsilil(R)-(-)-glicidil éter (0,094 mL, 0,489 mmol) y la mezcla se agitó a 100 °C durante la noche. Después de 19 h, la reacción se dejó enfriar a TA y se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa usando el método de HPLC preparativa 8 y se secó al vacío para dar 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,1aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-hidroxipropil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo (TFA) (22,8 mg, 0,023 mmol, rendimiento del 32,7, rendimiento del 53,5% basado en el material de partida recuperado) y el material de partida recuperado (21,9 mg), ambos como un sólido de vidrio transparente. LCMS: m/z 882,4 (M+H+), tiempo de retención 1,849 min (Método de LCMS 16).
Etapa 5. A una solución de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-hidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo, TFA (22,8 mg, 0,023 mmol) en 2-Me-THF (1 mL) y H2O (0,3 mL) se le añadió una solución de hidróxido de tetrabutilamonio (0,105 mL, 0,160 mmol) y la mezcla se agitó a t A durante 4 h pero LC/MS no mostró reacción. A continuación, la reacción se agitó a 50 °C. Después de 14 h, la LC/MS mostró que quedaba aproximadamente el 60% del material de partida; por lo tanto, la mezcla se agitó a 50 °C durante otra noche. Después de 40 h, la mezcla de reacción se purificó por HPLC preparativa de fase inversa usando el procedimiento 8 de HPLC preparativa y las fracciones de producto se secaron al vacío para dar dos productos, ambos en forma de sólidos vitreos.
El Ejemplo A8 fue el primero de los dos productos aislados en eluirse de la columna de HPLC preparativa: ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi) metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (4,0 mg, 4,36 gmol, rendimiento del 19,04 %). LCMS: m/z 758,7 (M+H+), tiempo de retención 1,219 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400MHz,1:1 CDCl3:METANOL-d4)58,47 - 8,36 (m, 1H), 8,25 (d, J=3,2 Hz, 1H), 7,08 (dd, J=7,6, 4,9 Hz, 1H), 5,34 (s a, 1H), 5,19 (d, J=4,9 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 (s a, 1H), 4,06 - 3,90 (m, 1H), 3,66 (d, J=4,2 Hz, 2H), 3,23 - 3,11 (m, 1H), 3,03 -2,92 (m, 1H), 2,80 - 2,61 (m, 2H), 2,48 - 1,90 (m, 10H), 1,84 (d, J=6,6 Hz, 1H), 1,71 (s, 4H), 1,69 - 1,21 (m, 15H), 1,15 (d, J=12,7 Hz, 1H), 1,08 (s, 3H), 1,05 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 0,86 (s, 3H).
El Ejemplo A7 fue el segundo de los dos productos aislados en eluirse de la columna de HPLC preparativa: ácido (R)-1 -(((3-cianopiridin-2-il)oxi) metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (6,5 mg, 7,46 gmol, rendimiento del 32,6 %). LCMS: m/z 740,6 (M+H+), tiempo de retención 1,289 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400MHz,1:1 CDCh: METANOL-d4)ó 8,33 (dd, J=5,0, 1,8 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=7,6, 1,7 Hz, 1H), 7,03 (dd, J=7,6, 5,1 Hz, 1H), 5,34 (s a, 1H), 5,18 (d, J=4,9 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 3,99 (dd, J=8,6, 3,9 Hz, 1H), 3,66 (d, J=4,2 Hz, 2H), 3,18 (dd, J=12,1, 3,5 Hz, 1H), 2,98 (dd, J=11,9, 8,9 Hz, 1H), 2,78 - 2,56 (m, 2H), 2,35 - 2,08 (m, 4H), 2,08 - 1,87 (m, 6H), 1,75 (s a, 1H), 1,72 (s, 3H), 1,70 - 1,53 (m, 6H), 1,51 - 1,22 (m, 8H), 1,21 - 1,12 (m, 1H), 1,08 (s, 3H), 1,05 (s, 0,96 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,81 (s, 3H).
Ejemplo A9 y Ejemplo A10. Preparación de ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-hidroxi-3-metoxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, (Ejemplo A9) y ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-hidroxi-3-metoxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametií-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico (Ejemplo A10).
Los compuestos del título se prepararon con rendimientos del 7,1% y del 16,1%,respectivamente, a partir de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo siguiendo el mismo procedimiento como se describe para la preparación de ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-cyclopenta[a]chrysen-9-il)cyclohex-3-enocarboxílico, TFA y ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, excepto que se usó (R)-(-)-metil glicidil éter em lugar de terc-butildimetilsilil-(R)-(-)-glicidil éter en la Etapa 4. El Ejemplo A10 fue el primero de los dos productos aislados en eluirse de la columna de HPLC preparativa: ácido (R)-1 -(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR, 13bR)-3a-(((R)-2-hidroxi-3-metoxipropil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxílico (5,6 mg, 7,25 pmol, rendimiento del 16,13%). LCMS: m/e 772,6 (M+H+), 1,284 min (Método de LCMS 16).
El Ejemplo A9 fue el segundo de los dos productos aislados en eluirse de la columna de HPLC preparativa: ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi) metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-hidroxi-3-metoxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (2,9 mg, 3,17 pmol, 7,06 % de rendimiento). LCMS: m/z 754,6 (M+H+), tiempo de retención 1,345 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400 MHz,1:1 CDCh: M ETANOLd) ó 8,33(dd, J=5,0, 1,8 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=7,5, 1,8 Hz, 1H), 7,03 (dd,J=7,5,5,0 Hz, 1H), 5,34 (s a, 1H), 5,18 (d, J=4,4 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,07 (dd, J=9,9, 4,0 Hz, 1H), 3,54 - 3,44 (m, 2H), 3,39 (s, 3H), 3,15 (dd, J=11,9, 3,3 Hz, 1H), 2,93 (t, J=11,1 Hz, 1H), 2,75 - 2,59 (m, 2H), 2,31 - 2,08 (m, 4H), 2,07 - 1,89 (m, 6H), 1,79 -1,73 (m, 1H), 1,71 (s, 3H), 1,67 (s a, 1H), 1,65 - 1,57 (m, 3H), 1,56 - 1,39 (m, 6H), 1,37 - 1,22 (m, 4H), 1,21 - 1,13 (m, 1H), 1,08 (s, 3H), 1,05 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,91 (s, 3H), 0,86 (s, 3H).
Ejemplo A11 y Ejemplo A12. Preparación de ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((S)-2-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (Ejemplo A11) y ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico. TFA (Ejemplo A12).
Los compuestos del título se prepararon con rendimientos del 26,9% y 6,1%, respectivamente, a partir de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi) metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo siguiendo el mismo procedimiento descrito para la preparación de ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA y ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, excepto que se usó (S)-(+)-metil glicidil éter en lugar de terc-butildimetilsilil (R)-(-)-glicidil éter en la Etapa 4. El Ejemplo A12 fue el primero de los dos productos aislados en eluirse de la columna de HPLC preparativa: ácido (R)-1 -(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi) metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR,13bR)-3a-(((S)-2-hidroxi-3-metoxipropil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxílico (2,2 mg, 2,359 pmol, rendimiento del 6,11 %). LCMS: m/z 772,6 (M+H+), tiempo de retención 1,279 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400 MHz,1:1 CDCh.METANOLd)68,41 (dd, J=7,6, 2,0 Hz, 1H), 8,25 (dd, J=4,8, 2,1 Hz, 1H), 7,08 (dd, J=7,6, 4,9 Hz, 1H), 5,35 (s a, 1H), 5,19 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,11 (t, J=4,0 Hz, 1H), 3,69 - 3,63 (m, 1H), 3,61 - 3,55 (m, 1H), 3,44 (s, 3H), 3,27 - 3,20 (m, 1H), 3,19 - 3,12 (m, 1H), 2,72 (d, J=15,9 Hz, 1H), 2,63 - 2,52 (m, 1H), 2,26 (s a, 1H), 2,22 - 2,08 (m, 4H), 2,07 - 1,95 (m, 4H), 1,88 - 1,74 (m, 3H), 1,72 (s, 3H), 1,70 - 1,62 (m, 2H), 1,62 - 1,41 (m, 8H), 1,41 - 1,22 (m, 4H), 1,16 (s a, 1H), 1,09 (s, 3H), 1,05 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 0,87 (s, 3H).
El Ejemplo A11 fue el segundo de los dos productos aislados en eluirse de la columna de HPLC preparativa: ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi) metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((S)-2-hidroxi-3-metoxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (9,5 mg, 10,40 pmol, rendimiento del 26,9 %). LCMS: m/z 754,6 (M+H+), tiempo de retención 1,347 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400 MHz,1:1 CDCh: M ETANOLd)68,33 (dd, J=5,1,2,0 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=7,6, 2,0 Hz, 1H), 7,03 (dd, J=7,6, 4,9 Hz, 1H), 5,34 (s a, 1H), 5,18 (d, J=4,4 Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,11 (t, J=4,0 Hz, 1H), 3,70 - 3,54 (m, 2H), 3,44 (s, 3H), 3,27 - 3,20 (m, 1H), 3,19 - 3,12 (m, 1H), 2,64 (d, J=15,9 Hz, 1H), 2,60 - 2,51 (m, 1H), 2,20 (d, J=16,6 Hz, 3H), 2,11 - 1,89 (m, 7H), 1,82 - 1,74 (m, 2H), 1,72 (s, 3H), 1,70 - 1,63 (m, 2H), 1,63 - 1,22 (m, 12H), 1,20 - 1,11 (m, 1H), 1,09 (s, 3H), 1,05 (s, 2H), 0,96 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 0,87 (s, 3H). RMN-13C (101 MHz,1:1 CDCh:METANOL-d4)6 178,3, 164,5, 152,27 -152,01, 148,9, 147,7, 144,1, 139,7, 122,7, 121,9, 117,7, 112,5, 97,5, 78,5, 76,6, 72,6, 71,5, 65,1,60,2, 53,8, 50,0, 46,8, 46,6, 45,3, 42,8, 41,4, 38,6, 38,3, 36,9, 34,2, 32,6, 31,1, 30,2, 30,1, 28,1, 27,4, 26,8, 25,9, 22,0, 21,7, 20,3, 19,2, 17,0, 16,0, 15,0.
Ejemplo A13 y Ejemplo A14 Preparación de ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxi-2-metilpropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (Ejemplo A13) y ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxi-2-metilpropil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (ejemplo A14).
Los compuestos del título se prepararon con rendimientos del 26,0 % y del 13,6 %, respectivamente, a partir de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,1lbR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentamet¡l-1-(prop-1-en-2-¡l)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo siguiendo el mismo procedimiento descrito para la preparación de ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA y ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,S,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, excepto que se usó 4-notrobenzoato de (2R)-(-)-2-metilglicidilo en lugar de terc-butildimetilsilil (R)-(-)-glicidil éter en la Etapa 4.
El Ejemplo A14 fue el primero de los dos productos aislados en eluirse de la columna de HPLC preparativa: ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)2-3-dihidroxi-3-metilpropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxílico (4,8 mg, 5,91 pmol, rendimiento del 13,57 %). LCMS: m/z 772,6 (M+H+), tiempo de retención 1,242 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400MHz,1:1 CDCÍ3:METANOL-d4)ó 8,41 (dd, J=7,6, 2,0 Hz, 1H), 8,25 (dd, J=4,9, 2,0 Hz, 1H), 7,08 (dd, J=7,6, 4,9 Hz, 1H), 5,34 (s a, 1H), 5,19 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,81 (s, 1H), 4,73 (s, 1H), 3,69 (s, 2H), 2,97 (d, J=12,2 Hz, 1H), 2,79 - 2,68 (m, 1H), 2,68 - 2,59 (m, 1H), 2,34 - 2,23 (m, 1H), 2,22 - 2,08 (m, 3H), 2,08 - 1,95 (m, 4H), 1,90 - 1,80 (m, 1H), 1,79 - 1,74 (m, 1H), 1,73 (s, 3H), 1,71 - 1,66 (m, 1H), 1,66 - 1,53 (m, 4H), 1,52 - 1,33 (m, 6H), 1,30 (s a, 2H), 1,23 (s, 3H), 1,20 - 1,09 (m, 2H), 1,06 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 0,86 (s, 3H).
El Ejemplo A13 fue el segundo de los dos productos aislados en eluirse de la columna de HPLC preparativa: ácido (R)-1 -(((3-cianopiridin-2-il)oxi) metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR,13bR)-3a-(((R)2-3-dihidroxi-3-metilpropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13boctadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il) ciclohex-3-enocarboxílico (8,7 mg, 0,011 mmol, rendimiento del 26,0 %). LCMS: m/z 754,6 (M+H+), tiempo de retención 1,309 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400 MHz,1:1 CDCÍ3:METANOL-d4)ó 8,33 (dd, J=5,0, 1,8 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=7,6, 2,0 Hz, 1H), 7,03 (dd, J=7,6, 5,1 Hz, 1H), 5,34 (s a, 1H), 5,18 (d, J=4,4 Hz, 1H), 4,81 (s, 1H), 4,73 (s, 1H), 3,69 (s, 2H), 2,97 (d, J=12,0 Hz, 1H), 2,72 - 2,59 (m, 2H), 2,30 - 2,15 (m, 3H), 2,12 - 1,99 (m, 5H), 1,98 - 1,88 (m, 2H), 1,81 - 1,74 (m, 1H), 1,73 (s, 3H), 1,71 - 1,66 (m, 1H), 1,66 - 1,53 (m, SH), 1,52 - 1,33 (m, 7H), 1,31 - 1,25 (m, 1H), 1,23 (s, 3H), 1,19 - 1,09 (m, 2H), 1,06 (s, 3H), 1,04 (s, 2H), 0,96 (s, 3H), 0,91 (s, 3H), 0,86 (s, 3H). RMN-13C (101 MHz,1:1 CDCÍs'.METANOLd)ó 178,3, 164,5, 152,2, 148,9, 147,8, 144,1, 139,7, 122,7, 121,9, 117,7, 112,4, 97,5, 78,6, 72,2, 71,6, 71,5, 69,6, 53,8, 50,0, 46,3, 45,3, 42,9, 42,6, 41,4, 38,6, 38,3, 36,9, 34,2, 32,1, 31,1, 30,2, 30,08 - 30,04, 28,5, 28,1, 27,7, 26,9, 26,0, 23,5, 22,0, 21,7, 20,3, 19,4, 17,0, 16,0, 15,0.
Ejemplo A15 y Ejemplo A16. Preparación de ácido (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-carboxi-2-hidroxietil) amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il) oxi) metil)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (Ejemplo A15) y ácido 2-(((R)-1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)metoxi)nicotínico, TFA (Ejemplo A16).
Los compuestos del título se prepararon con rendimientos del 19,5% y del 17,9%, respectivamente, a partir de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentamet¡l-1-(prop-1-en-2-¡l)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo siguiendo el mismo procedimiento descrito para la preparación de ácido (R)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA y ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1 -(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, excepto que se usó (R)-metilglicidato en lugar de terc-butildimetilsilil (R)-(-)-glicidil éter en la Etapa 4.
El Ejemplo A16 fue el primero de los dos productos aislados en eluirse de la columna de HPLC preparativa: ácido 2-(((R)-1 -carboxi-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR, 13bR)-3a-(((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)metoxi)nicotínico (6,0 mg, 7,37 pmol, rendimiento del 17,94 %). LCMS: m/z 773,5 (M+H+), tiempo de retención 1,224 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400MHz,1:1 CDChiMETANOLd)ó 8,41 (dd, J=7,6, 2,0 Hz, 1H), 8,25 (dd, J=4,9, 2,0 Hz, 1H), 7,08 (dd, J=7,6, 4,9 Hz, 1H), 5,35 (s.a, 1H), 5,19 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,44 (dd, J=10,0, 4,2 Hz, 1H), 3,40 - 3,34 (m, 1H), 3,06 (t, J=11,0 Hz, 1H), 2,77 -2,62 (m, 2H), 2,26 (s.a, 1H), 2,22 - 2,05 (m, 5H), 2,04 - 1,94 (m, 3H), 1,89 - 1,74 (m, 3H), 1,72 (s, 3H), 1,69 - 1,57 (m, 4H), 1,57 - 1,40 (m, 5H), 1,39 - 1,22 (m, 4H), 1,22 - 1,12 (m, 1H), 1,10 (s, 3H), 1,05 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 0,87 (s, 3H).
El Ejemplo A15 fue el segundo de los dos productos aislados en eluirse de la columna de HPLC preparativa: ácido (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR, 11aS,11 bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2-carboxi-2-hidroxietil)amino)-5a,5b,8,8,11 apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxílico (6,3 mg, 8,02 pmol, rendimiento del 19,52 %). LCMS: m/z 754,6 (M+H+), tiempo de retención 1,289 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400MHz,1:1 CDCl3:METANOL-d4) ó8,33 (dd, J=5,0, 1,8 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=7,6, 2,0 Hz, 1H), 7,03 (dd, J=7,5, 5,0 Hz, 1H), 5,34 (s.a, 1H), 5,18 (d, J=4,4 Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,41 (d, J=5,4 Hz, 1H), 3,06 (t, J=10,8 Hz, 1H), 2,65 (d, J=19,1 Hz, 2H), 2,20 (d, J=15,9 Hz, 3H), 2,14 - 2,05 (m, 2H), 2,05 - 1,87 (m, 5H), 1,82 - 1,69 (m, 5H), 1,68 - 1,57 (m, 4H), 1,56 - 1,41 (m, 5H), 1,39 - 1,22 (m, 4H), 1,21 - 1,12 (m, 1H), 1,10 (s, 3H), 1,05 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 0,87 (s, 3H).
Ejemplo A17 y Ejemplo A18. Preparación de ácido (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((S)-2-carboxi-2-hidroxietil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a] crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (Ejemplo A17) y ácido (R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((S)-4-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-(etoxicarbonil)ciclohex-1-en-1-il)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-ácido(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-3a-il)amino)-2-hidroxipropanoico, TFA (Ejemplo A18).
Los compuestos del título se prepararon con rendimientos del 19,5% y del 16,0%, respectivamente, a partir de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato siguiendo el mismo procedimiento descrito para la preparación de (R)-1-(((3-cianopyridin-2-il)oxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR, 13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA y ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, excepto que se usó (S)-metilglicidato en lugar de terc-butildimetilsilil (R)-(-)-glicidil éter en la Etapa 4.
El Ejemplo A18 fue el primero de los dos productos aislados en eluirse de la columna de HPLC preparativa: ácido (R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11 bR,13aR,13bR)-9-((S)-4-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi) metil)-4-(etoxicarbonil)ciclohex-1-en-1-il)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-3a-il)amino)-2-hidroxipropanoico, TFA (5,7 mg, 6,11 pmol, rendimiento del 15,98 %). LCMS: m/z 772,7 (M+H+), tiempo de retención 1,222 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400MHz,1:1 CDCi3:METANOL-d4)68,41 (dd, J=7,6, 2,0 Hz, 1H), 8,25 (dd, J=4,9, 2,0 Hz, 1H), 7,08 (dd, J=7,6, 4,9 Hz, 1H), 5,35 (s.a, 1H), 5,19 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,41 (t, J=6,6 Hz, 1H), 3,20 (d, J=6,4 Hz, 2H), 2,71 (d, J=13,4 Hz, 2H), 2,36 - 2,23 (m, 1H), 2,16 (d, J=14,9 Hz, 2H), 2,13 - 2,06 (m, 2H), 2,05 - 1,95 (m, 4H), 1,89 - 1,80 (m, 1H), 1,79 - 1,74 (m, 1H), 1,72 (s, 3H), 1,68 (s.a, 2H), 1,65 -1,57 (m, 2H), 1,57 - 1,50 (m, 2H), 1,49 - 1,39 (m, 4H), 1,39 - 1,22 (m, 4H), 1,12 (s, 3H), 1,08 (d, J=9,5 Hz, 1H), 1,04 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 0,87 (s, 3H).
El Ejemplo A17 fue el segundo de los dos productos aislados en eluirse de la columna de HPLC preparativa: ácido (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR, 11aS,11 bR,13aR,13bR)-3a-(((S)-2-carboxi-2-hidroxietil)amino)-5a,5b,8,8,11 apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA (6,8 mg, 7,44 pmol, rendimiento del 19,46 %). LCMS: m/z 754,6 (M+H+), tiempo de retención 1,284 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400MHz,1:1 CDCi3:METANOL-d4)68,33 (dd, J=5,0, 1,8 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=7,6, 2,0 Hz, 1H), 7,03 (dd, J=7,6, 5,1 Hz, 1H), 5,34 (s.a, 1H), 5,18 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,79 (s.a, 1H), 4,71 (s.a, 1H), 4,41 (s.a, 1H), 3,20 (d, J=5,1 Hz, 2H), 2,70 (s.a, 1H), 2,64 (d, J=18,8 Hz, 1H), 2,20 (d, J=16,1 Hz, 3H), 2,12 - 1,89 (m, 7H), 1,75 (s.a, 2H), 1,72 (s, 3H), 1,70 - 1,51 (m, 6H), 1,51 - 1,39 (m, 4H), 1,38 - 1,22 (m, 4H), 1,12 (s, 3H), 1,08 (d, J=9,0 Hz, 1H), 1,04 (s, 3H), 0,96 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 0,87 (s, 3H).
Ejemplo A19
Preparación de ácido (1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-carboxi-2-hidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxílico.
El compuesto del título se preparó con un rendimiento del 19,4% a partir de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-amino-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)ciclohex-3-enocarboxilato de (R)-etilo siguiendo el mismo procedimiento descrito para la preparación de ácido (R)-1 -(((3-cianopiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico, TFA y ácido (R)-1-(((3-carbamoilpiridin-2-il)oxi)metil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR,13aR,13bR)-3a-(((R)-2,3-dihidroxipropil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-enocarboxílico; excepto que se usó 2-metilglicidato de metilo en lugar de terc-butildimetilsilil (R)-(-)-glicidil éter en la Etapa 4. LCMS: m/z 768,5 (M+H+), tiempo de retención 1,295 min (Método de LCMS 16). RMN-1H (400 MHz,1:1 CDCl3:METANOL-d4)58,33 (dd, J=5,0, 1,8 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=7,6, 2,0 Hz, 1H), 7,03 (dd, J=7,5, 5,0 Hz, 1H), 5,34 (s a, 1H), 5,18 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,79 (s a, 1H), 4,71 (s a, 1H), 3,08 - 2,89 (m, 1H), 2,80 - 2,57 (m, 2H), 2,33 - 2,09 (m, 4H), 2,08 - 1,87 (m, 6H), 1,82 - 1,74 (m, 1H), 1,72 (s, 3H), 1,70 - 1,57 (m, 4H), 1,56 - 1,41 (m, 8H), 1,40 - 1,22 (m, 4H), 1,12 (s, 1H), 1,09 (s a, 1,5H), 1,07 (s a, 1,5H), 1,05 (s, 3H), 1,01 (s, 1H), 0,96 (s, 3H), 0,92 (s, 3H), 0,86 (s a, 3H).
Preparación de 8-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2-oxaespiro[4,5]dec-7-en-1-ona.
Etapa 1: Preparación de 8-((trimetilsilil)oxi)-2-oxaespiro[4,5]dec-7-en-1-ona.
En un recipiente a presión Chemglass de 350 ml con tapón roscado se añadieron 3-metilenodihidrofuran-2(3H)-ona (4,31 g, 43,9 mmol) y (buta-1,3-dien-2-iloxi)trimetilsilano (7,50 g, 52,7 mmol) y benceno (100 ml). Se añadió hidroquinona (0,726 g, 6,59 mmol), después la solución se purgó con nitrógeno, se cerró herméticamente y se calentó a 123 °C durante 20 h. Después, en el recipiente se añadieron 2,4 equivalentes más de (buta-1,3-dien-2-iloxi)trimetilsilano (15,0 g, 105,4 mmol), y la mezcla se calentó a 123 °C durante 60 h más. La mezcla se concentró al vacío para dar aproximadamente 19 g de aceite de color amarillo. La mezcla en bruto se cargó con DCM mínimo y hexanos sobre un cartucho de sílice Isco de 330 g preequilibrado con hexanos. Gradiente de elución de hexanos al 100 % a hexanos:EtOAc 11:1 en 2 volúmenes de columna, después mantenimiento en hex:EtOAc 11:1 en 3 volúmenes de columna, después gradiente a hex:EtAc 5:1 en 2 volúmenes de columna, después mantenimiento en hex:EtOAc 5:1 en 6 volúmenes de columna. La concentración de fracciones combinadas que contenían el material deseado proporcionó el producto en forma de un sólido de color blanco: 7,50 g (71,0 % de rendimiento). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,85 (d, J=5,6 Hz, 1H), 4,40 - 4,23 (m, 2H), 2,47 (dd, J=16,6, 2,2 Hz, 1H), 2,19 - 2,10 (m, 4H), 2,06 (d, J=3,4 Hz, 1H), 2,04 - 1,99 (m, 1H), 1,75 - 1,65 (m, 1H), 0,22 (s, 9H).
Etapa 2. Preparación de 2-oxaespiro[4,5]decano-1,8-diona.
Se combinó 8-((trimetilsilil)oxi)-2-oxaespiro[4,5]dec-7-en-1-ona (7,50 g, 31,2 mmol) con THF (100 ml) y ácido clorhídrico, acuoso 0,05 M (3,12 ml, 0,156 mmol). La mezcla se agitó durante 18 h a TA. Después, la mezcla de reacción se concentró al vacío para dar un residuo. El residuo se recogió en EtOAc (200 ml) y se lavó con NaHCO3saturado (50 ml) y con salmuera (50 ml). La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró al vacío. La mezcla en bruto se cargó en DCM mínimo sobre un cartucho de sílice Isco de 330 g preequilibrado con hexanos. Gradiente de elución de hexanos al 100 % a hexanos:EtOAc 1:1 para 10 volúmenes de columna, mantenimiento en hexanos:EtOAc 1:1 en 6 volúmenes de columna. Se consiguió la separación parcial de los dos materiales. Las fracciones similares se combinaron y se apartaron, y las fracciones mixtas se sometieron a cromatografía de nuevo de una manera similar. El material deseado era el producto principal de la reacción y era el segundo de los dos materiales en eluir de la columna de sílice. Por lo tanto, el material deseado se recuperó en forma de un sólido de color blanco: 4,14 g, rendimiento del 79,0 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 54,40 (t, J=7,1 Hz, 2H), 2,87 - 2,70 (m, 2H), 2,44 - 2,29 (m, 4H), 2,24 (ddd, J=13,6, 8,3, 5,5 Hz, 2H), 1,96 (dt, J=13,6, 6,5 Hz, 2H).
Etapa 3. Preparación de trifluorometanosulfonato de 1-oxo-2-oxaespiro[4,5]dec-7-en-8-ilo.
En un matraz de fondo redondo de 250 ml equipado con un agitador magnético y un tapón de caucho se combinaron 2-oxaespiro[4,5]decano-1,8-diona (4,13 g, 24,6 mmol) y N,N-bis(trifluorometilsulfonil)anilina (10,1 g, 28,2 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (100 ml). La solución se enfrió a -78 °C en un baño de hielo seco/acetona. A la solución fría se le añadió gota a gota hexametildisilazida potásica, 0,5 M en tolueno (56,5 ml, 28,2 mmol) durante 15 min. La mezcla se agitó a -78 °C durante un total de 4 h, cuando se trató lentamente con 100 ml de cloruro de amonio acuoso saturado. La mezcla se agitó a TA durante 15 min y se concentró al vacío para retirar la mayor parte del THF, después al residuo se le añadió acetato de etilo (300 ml). La mezcla resultante se agitó y las fases se separaron. El producto orgánico se lavó con agua (2 * 100 ml) y con salmuera (50 ml). El producto orgánico se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró al vacío para dar un aceite de color amarillo en bruto. El residuo en bruto se cargó en forma de un aceite sobre un cartucho de sílice Isco de 220 g preequilibrado con hexanos y el matraz se aclaró con DCM mínimo, y éste se añadió también a la columna. Gradiente de elución de hexanos al 100 % a hexanos:EtOAc 3:1 en 3 volúmenes de columna, después mantenimiento en hex:EtOAc 3:1 en 3 volúmenes de columna, después hex:EtOAc 2:1 en 3 volúmenes de columna. Las fracciones de producto similares se combinaron y se concentraron al vacío para dar el material deseado en forma de un aceite ligeramente amarillo: 6,44 g(rendimiento del 87,0 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,86 - 5,76 (m, 1H), 4,44 - 4,29 (m, 2H), 2,63 (dd, J=17,7, 2,8 Hz, 1H), 2,59 - 2,38 (m, 2H), 2,30 - 2,16 (m, 3H), 2,16 - 2,04 (m, 1H), 1,86 (dt, J=13,7, 2,9 Hz, 1H).
Etapa 4. En un matraz de fondo redondo de 250 ml equipado con un condensador de reflujo, se combinaron trifluorometanosulfonato de 1-oxo-2-oxaespiro[4,5]dec-7-en-8-ilo (6,43 g, 21,4 mmol), acetato potásico (5,25 g, 53,5 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (5,71 g, 22,5 mmol) y PdCl2(dppf).CH2Cl2 (0,529 g, 0,642 mmol) en 1,4-dioxano seco (100 ml). La mezcla se purgó con nitrógeno y se calentó a 70 °C durante 5 h. La mezcla de reacción se concentró al vacío hasta aprox. 25 ml de volumen total y se diluyó con acetato de etilo (300 ml) y agua (150 ml). La mezcla se agitó y las fases se separaron. El producto orgánico se lavó de nuevo con agua (100 ml) y después con salmuera (100 ml). La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró al vacío para dar un residuo de color rojo intenso. La mezcla en bruto se disolvió en DCM mínimo y se cargó sobre un cartucho de sílice Isco de 220 g preequilibrado con hexanos. Gradiente de elución de hexanos al 100 % a acetato de etilo al 20 % en hexanos en 10 volúmenes de columna, después mantenimiento en acetato de etilo al 20 % en hexanos en 6 volúmenes de columna, después gradiente de acetato de etilo al 15 % en hexanos en 2 volúmenes de columna, después mantenimiento en acetato de etilo al 25 % en hexanos en 6 volúmenes de columna. Las fracciones de producto se combinaron y se concentraron al vacío para dar el material deseado en forma de un sólido espumoso de color blanco = 4,94 g (rendimiento del 83,0 %). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 56,60 - 6,49 (m, 1H), 4,39 - 4,22 (m, 2H), 2,50 (d, J=17,6 Hz, 1H), 2,40 (dd, J=18,1, 3,9 Hz, 1H), 2,21 - 2,01 (m, 4H), 1,85 (td, J=12,3, 5,5 Hz, 1H), 1,73 - 1,62 (m, 1H), 1,29 (s, 12H).
Ejemplo A20. Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1 -(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-(piridin-2-iloxi)etil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 8-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11 a-pentametil-1 -(prop-1 -en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-2-oxaespiro[4,5]dec-7-en-1-ona.
En un recipiente a presión Chemglass de 150 mL con barra de agitación magnética se combinaron (1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il trifluorometanesulfonato(2,00 g, 2,78 mmol) con 8-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2-oxaspiro[4,5]dec-7-en-1-ona (0,851 g, 3,06 mmol) y precatalizador Buchwald 13 (0,131 g, 0,167 mmol). El recipiente se cerró herméticamente con un tapón de caucho. Se insertó una aguja en el tapón y se hizo el vacío repetidamente en el recipiente y después se purgó con nitrógeno en una estufa de vacío a TA cuatro veces durante un periodo de 15 min. En el matraz de reacción purgado con nitrógeno se añadió THF anhidro (40 ml) y se añadió K3PO40,5 M acuoso recién preparado y rociado con nitrógeno (13,9 ml, 6,95 mmol). El recipiente se cerró herméticamente y la solución de color amarillo resultante se agitó a 80 °C durante 20,5 h. La mezcla se oscureció hasta un color verde muy intenso después de 30 min de calentamiento, y después de 20,5 h de calentamiento, estaba presente una mezcla bifásica casi incolora. La mezcla se diluyó con EtOAc (150 ml) y se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (50 ml x 2) y luego con salmuera (50 ml). La capa acuosa combinada se extrajo con 2 x 100 ml de cloroformo y las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se concentraron para dar un sólido de espuma ligeramente amarillo. El material de color amarillo en bruto se cargó en DCM mínimo sobre un cartucho de sílice Isco de 80 g preequilibrado con hexanos. Gradiente de elución de hexanos al 100 % a hexanos:EtOAc 1:1 en 2 volúmenes de columna, mantenimiento en hexanos:EtOAc 1:1 en 3 volúmenes de columna, después gradiente de hexanos:EtOAc 1:1 a hex:EtOAc 1:4 en 8 volúmenes de columna, después mantenimiento en hexanos:EtOAc 1:4 en 10 volúmenes de columna. Las fracciones del producto se combinaron y se concentraron al vacío para dar un sólido vitreo blanquecino: 1,63 g (rendimiento del 81,0%). LCMS m/z = 721,6 (M+H+), tiempo de retención 2,404 min (Método de LCMS 17). RMN 1H (400 MHz, mezcla 1:1 de CDCl3 y CD3OD, bloqueo de CD3OD) 55,41 - 5,30 (m, 1H), 5,22 (d, J=5,6 Hz, 1H), 4,70 (s a, 1H), 4,42 - 4,27 (m, 2H), 3,19 - 2,97 (m, 8H), 2,78 - 2,53 (m, 4H), 2,52 - 2,32 (m, 2H), 2,29 -2,10 (m, 4H), 2,04 - 1,75 (m, 6H), 1,69 (s, 4H), 1,66 - 1,54 (m, 4H), 1,53 (s a, 1H), 1,45 (s a, 4H), 1,40 - 1,32 (m, 2H), 1,32 - 1,13 (m, 5H), 1,10 (s, 6H), 1,04 (s a, 1H), 0,99 (s a, 5H), 0,95 (d, J=7,3 Hz, 3H), 0,88 (s, 3H).
Etapa 2. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,11aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-hidroxietil)ciclohex-3-eno-1 -carboxilato potásico.
En un matraz de fondo redondo de 250 ml equipado con un condensador de reflujo, se combinaron 8-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-2-oxaespiro[4,5]dec-7-en-1-ona (1,61 g, 2,23 mmol) con carbonato potásico (1,54 g, 11,2 mmol) en una mezcla de MeOH (20 ml) y THF (20 ml). El resultado se calentó a 70 °C en un baño de aceite durante 2,5 h. El disolvente se retiró al vacío para dejar un residuo de color marrón sólido que se usó en la siguiente etapa sin manipulación adicional. LCMS m/z = 739,5 (M+H+), tiempo de retención 1,852 min (Método de LCMS 18).
Etapa 3. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-hidroxietil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de isopropilo.
En un matraz de fondo redondo de 250 ml equipado con un condensador de reflujo, se combinaron la mezcla de reacción en bruto de la Etapa 2 que contenía 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-hidroxietil)ciclohex-3-enocarboxilato potásico (1,73 g, 2,23 mmol) con carbonato potásico (1,543 g, 11,17 mmol) en una mezcla de acetonitrilo (20 ml) y DMF (20 ml). A la mezcla se le añadió 2-yodopropano (4,46 ml, 44,7 mmol). La suspensión resultante se agitó a 80 °C durante 2,5 h. La mezcla se concentró al vacío para dar un residuo. Se añadieron acetato de etilo (120 ml) y agua (100 ml) y la mezcla se agitó y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó dos veces más con agua (2 x 50 ml) y después con salmuera (20 ml). El producto orgánico de color ligeramente amarillo se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró al vacío para dar un residuo. El material se cargó en DCM sobre un cartucho de gel de sílice Isco de 120 g que se preequilibró con DCM. Gradiente de elución de DCM al 100 % a DCM:MeOH 19:1 en 6 volúmenes de columna, mantenimiento en DCM:MeOH 19:1 en 8 volúmenes de columna. Las fracciones de producto combinadas se concentraronal vacíopara dar una espuma de color beige: 1,55 g (rendimiento del 89% sobre 2 etapas). LCMS m/z = 781,5 (M+H+), tiempo de retención 2,873 min (Método de LCMS 19). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,34 (s a, 1H), 5,18 (d, J=5,6 Hz, 1H), 5,04 (dt, J=12,4, 6,1 Hz, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,61 (s, 1H), 3,73 (d, J=4,9 Hz, 1H), 3,16 - 2,97 (m, 7H), 2,75 - 2,54 (m, 4H), 2,54 - 2,42 (m, 1H), 2,28 - 2,16 (m, 1H), 2,13 (dd, J=12,1,6,5 Hz, 1H), 2,07 - 1,91 (m, 4H), 1,89 - 1,75 (m, 4H), 1,71 (s, 3H), 1,70 - 1,62 (m, 2H), 1,62 - 1,49 (m, 5H), 1,49 - 1,39 (m, 4H), 1,39 - 1,29 (m, 3H), 1,29 - 1,22 (m, 7H), 1,22 - 1,11 (m, 2H), 1,08 (s, 6H), 1,01 - 0,95 (m, 6H), 0,94 - 0,90 (m, 3H), 0,88 (s, 3H).
Etapa 4. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-((metilsulfonil)oxi)etil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de isopropilo.
Se disolvió 4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-hidroxietil)ciclohex-3-enocarboxilato de isopropilo (0,800 g, 1,02 mmol) en una mezcla de trietilamina (5 ml) y DCM (5 ml). La mezcla transparente se enfrió en un baño de hielo y a ésta se le añadió lentamente una solución de anhídrido metanosulfónico (0,446 g, 2,56 mmol) en DCM (3 ml). La solución incolora adoptó un color ligeramente amarillo que se volvió naranja intenso y finalmente marrón en el transcurso de la reacción. La mezcla de color marrón se agitó a 0 °C durante 4 h y después se concentró al vacío para dar un residuo sin calentamiento. El residuo en bruto se diluyó con EtOAc (100 ml) y se lavó con NaHCO3acuoso al 5 % (2 x 20 ml), agua (20 ml) y salmuera (20 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró al vacío para dar una espuma de color rojizo/marrón. El material en bruto se cargó en DCM mínimo sobre un cartucho de sílice de 80 g Isco que se preequilibró con hexanos. Gradiente de elución de hexanos al 100 % a hexanos:acetona 3:2 en 3 volúmenes de columna, mantenimiento en hexanos:acetona 3:2 en 10 volúmenes de columna. Las fracciones de producto deseadas se combinaron y se concentraronal vacíopara dar una espuma de color amarillo: 667 mg(rendimiento del 76,0%). LCMS m/z = 859,6 (M+H+), tiempo de retención 3,160 min (Método de LCMS 19). RMN-1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 55,33 (s a, 1H), 5,18 (d, J=5,4 Hz, 1H), 5,04 (dt, J=12,2, 6,3 Hz, 1H), 4,75 (s a, 1H), 4,63 (s a, 1H), 4,29 (t, J=7,0 Hz, 1H), 3,72 (t, J=6,5 Hz, 1H), 3,25 (s, 1H), 3,16 (s, 1H), 3,08 (s a, 6H), 3,01 (s, 2H), 2,83 (s, 1H), 2,77 - 2,54 (m, 4H), 2,49 (s a, 1H), 2,30 - 2,09 (m, 3H), 2,09 - 1,95 (m, 4H), 1,95 - 1,76 (m, 4H), 1,72 (s a, 3H), 1,66 (dd, J=14,3, 7,2 Hz, 3H), 1,61 - 1,50 (m, 5H), 1,50 - 1,38 (m, 5H), 1,33 (t, J=13,1 Hz, 3H), 1,29 - 1,21 (m, 7H), 1,18 - 1,03 (m, 6H), 1,00 (s a, 3H), 0,97 (d, J=7,3 Hz, 3H), 0,93 (d, J=5,4 Hz, 3H), 0,88 (s, 3H).
Etapa 5. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-(piridin-2-iloxi)etil)ciclohex-3-eno-1-carboxilato de isopropilo.
En un vial de 3,7 ml con tapón de rosca de PTFE, se combinaron piridin-2-ol (0,0190 g, 0,204 mmol) y 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-((metilsulfonil)oxi)etil)ciclohex-3-enocarboxilato de isopropilo (0,0250 g, 0,0290 mmol) en DMF anhidra (0,5 ml). A la mezcla se le añadió NaHMDS, 1,0 M en THF (0,175 ml, 0,175 mmol) con agitación. La mezcla de color ligeramente amarillo resultante se calentó a 50 °C y se agitó durante 3 d. La mezcla en bruto se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método de HPLC preparativa 6). Por lo tanto, se aisló el material deseado (0,00940 g, rendimiento del 29,7 %) en forma de una sal de TfA sólida de color blanco. LCMS m/z = 858,6 (M+H+), tiempo de retención 1,627 min (Método de LCMS 16).
Etapa 6. En un vial de 3,7 ml con tapón de rosca de PTFE, se combinaron 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-(piridin-2-iloxi)etil)ciclohex-3-enocarboxilato de isopropilo, sal de TFA (0,00940 g, 8,65 μmol) con hidróxido de litio, acuoso 1,0 M (0,087 ml, 0,087 mmol) y una mezcla de THF (0,3 ml) y MeOH (0,3 ml). La mezcla resultante se agitó a 75 °C durante 48 h. La mezcla en bruto se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método de HPLC preparativa 6). La fracción que contenía el material deseado se concentró al vacío para dar el compuesto del título en forma de un sólido vitreo de color blanco (0,0035 g, rendimiento del 33 %). LCMS m/z = 816,5 (M+H+), tiempo de retención 2,182 min (Método de LCMS 17). RMN-1H (400 MHz, mezcla 1:1 de CDCl3 y CD3OD, bloqueo de CD3OD) 58,07 (d, J=5,1 Hz, 1H), 7,65 - 7,59 (m, 1H), 6,90 (t, J=6,1 Hz, 1H), 6,74 (d, J=8,3 Hz, 1H), 5,33 (s a, 1H), 5,18 (d, J=5,6 Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,34 (t, J=6,6 Hz, 2H), 3,24 (s a, 3H), 3,21 - 3,13 (m, 3H), 3,12 - 2,96 (m, 4H), 2,84 - 2,72 (m, 1H), 2,60 (d, J=15,4 Hz, 1H), 2,26 - 1,96 (m, 10H), 1,87 - 1,70 (m, 6H), 1,69 - 1,59 (m, 3H), 1,57 (s a, 2H), 1,53 - 1,43 (m, 5H), 1,40 (s a, 1H), 1,39 - 1,22 (m, 2H), 1,15 (s, 3H), 1,11 (s a, 1H), 1,08 (s, 3H), 1,04 - 0,99 (m, 1H), 0,97 (s a, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,90 (s, 3H).
Ejemplo A21. Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-((5-metilisotiazol-3-il)oxi)etil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se obtuvo mediante los mismos procedimientos usados en la preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-(piridin-2-iloxi)etil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico, excepto que se usó 5-metilisotiazol-3-ol (0,023 g, 0,204 mmol) en lugar de piridin-2-ol en la Etapa 5. Por lo tanto, se obtuvo el compuesto del título en forma de un sólido vítreo de color blanco (0,0027 g, rendimiento combinado del 8,3 % para las Etapas 5 y 6). LCMS m/z = 836,5 (M+H+), tiempo de retención 2,394 min (Método de LCMS 17). Rm N-1H (400MHz, mezcla 1:1 de CDCl3 y CD3OD, bloqueo de CD3OD) 5 5,32 (s a, 1H), 5,18 (d, J=5,4 Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,36 (t, J=6,6 Hz, 2H), 3,75 (t, J=6,0 Hz, 2H), 3,27 -3,12 (m, 8H), 3,12 - 2,94 (m, 5H), 2,78 (td, J=10,8, 4,4 Hz, 1H), 2,58 (d, J=16,1 Hz, 1H), 2,25 - 1,95 (m, 11H), 1,92 -1,70 (m, 8H), 1,70 - 1,59 (m, 3H), 1,59 - 1,39 (m, 9H), 1,39 - 1,24 (m, 3H), 1,22 (s, 1H), 1,18 - 1,04 (m, 7H), 0,97 (d, J=2,7 Hz, 3H), 0,92 (s a, 3H), 0,90 (s, 3H).
Ejemplo A22. Preparación de ácido 1-(2-((3-cianopiridin-2-il)oxi)etil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
Etapa 1. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11as,11bR, 13aR, 13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-hidroxietil)ciclohex-3-eno-1 -carboxilato potásico.
En un matraz de fondo redondo de 50 ml equipado con un condensador de reflujo, se combinaron 8-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-2-oxaespiro[4,5]dec-7-en-1-ona (0,700 g, 0,971 mmol) con carbonato potásico (1,34 g, 9,71 mmol) en una mezcla de MeOH (10 ml) y THF (15 ml). El resultado se calentó a reflujo en un baño de aceite a 85 °C durante 24 h. La mezcla se dejó enfriar a TA, después se añadió DCM y el resultado se filtró para retirar sólidos de color blanco. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se secó en una estufa de vacío a 50 °C durante una noche para proporcionar el material deseado en forma de un polvo de color blanco (0,940 g, rendimiento del 125 %). La recuperación de masa indicó que el material era puro aproximadamente al 80 % con el remanente en forma de sales potásicas en exceso. Este material se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional. LCMS m/z = 739,5 (M+H+), tiempo de retención 1,852 min (Método de LCMS 17).
Etapa 2. Al producto en polvo en bruto de la Etapa 1 que contenía aprox. el 80 % en peso de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-hidroxietil)ciclohex-3-enocarboxilato potásico (0,025 g, 0,026 mmol), se le añadieron 2-fluoronicotinonitrilo (0,016 g, 0,129 mmol), DMF anhidra (0,4 ml) y THF anhidro (0,3 ml) para dar una mezcla de color amarillo ligeramente turbia. A la mezcla se le añadió terc-butóxido potásico, 1,0 M en THF (0,103 ml, 0,103 mmol). La mezcla se agitó a TA durante 2 h, y después se añadió más cantidad de 6-fluoropicolinonitrilo (0,032 g, 0,258 mmol) y terc-butóxido potásico, 1,0 M en THF (0,206 ml, 0,206 mmol) y más DMF (0,2 ml), y la mezcla se agitó durante 1 h más. La mezcla en bruto se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método de HPLC preparativa 7). Por lo tanto, el compuesto del título se obtuvo en forma de un polvo de color ligeramente amarillo (0,0086 g, rendimiento del 25 %) en forma de una sal de TFA. LCMS m/z = 841,6 (M+H+), tiempo de retención 2,289 min (Método de LCMS 17). RMN-1H (400 MHz, mezcla 1:1 de CDCl3y CD3OD, bloqueo de CD3OD) 58,34 (dd, J=4,2, 1,0 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=8,1, 1,7 Hz, 1H), 7,03 (dd, J=7,1,5,1 Hz, 1H), 5,40 - 5,28 (m, 1H), 5,17 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,80 (s a, 1H), 4,71 (s a, 1H), 4,39 - 4,31 (m, 1H), 3,28 - 3,12 (m, 7H), 3,09 (s a, 2H), 3,01 (s a, 2H), 2,82 (s a, 1H), 2,61 (d, J=17,4 Hz, 1H), 2,25 - 1,96 (m, 10H), 1,86 (d, J=10,5 Hz, 1H), 1,78 - 1,68 (m, 5H), 1,67 - 1,53 (m, 5H), 1,53 - 1,38 (m, 6H), 1,38 - 1,24 (m, 3H), 1,19 - 1,03 (m, 8H), 1,03 - 0,82 (m, 9H).
Ejemplo A23. Preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico.
Etapa 1. Preparación de 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,11aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-hidroxietil)ciclohex-3-eno-1 -carboxilato potásico.
En un matraz de fondo redondo de 50 ml equipado con un condensador de reflujo, se combinaron 8-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-2-oxaespiro[4,5]dec-7-en-1-ona (0,700 g, 0,971 mmol) con carbonato potásico (1,34 g, 9,71 mmol) en una mezcla de MeOH (10 ml) y THF (15 ml). El resultado se calentó a reflujo en un baño de aceite a 85 °C durante 24 h. La mezcla se dejó enfriar a TA, después se añadió DCM y el resultado se filtró para retirar sólidos de color blanco. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se secó en una estufa de vacío a 50 °C durante una noche para proporcionar el material deseado en forma de un polvo de color blanco (0,940 g, rendimiento del 125 %). Se disolvieron 0,9155 g de este material con agitación en 10 ml de DCM:MeOH 9:1 y esta suspensión (las sales no se disolvieron) se cargó sobre un lecho corto de 40 ml de gel de sílice en un embudo de succión de frita de vidrio de 60 ml. El material se eluyó con 400 ml de DCM:MeOH 9:1. La mayor parte del color naranja asociado al producto impuro se dejó atrás en la sílice. La concentración al vacío proporcionó un sólido de color rosado/blanco que se puso en una estufa de vacío a 45 °C durante varias horas. Por lo tanto, el material deseado se obtuvo en forma de un polvo de color blanco (0,5082 g, rendimiento del 69,4 %). LCMS m/z = 739,6 (M+H+), tiempo de retención 1,978 min (Método de LCMS 21).
Etapa 2. Al producto purificado de la Etapa 1 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-hidroxietil)ciclohex-3-enocarboxilato potásico (0,025 g, 0,032 mmol), se le añadió ácido 2-cloroisonicotínico (0,025 g, 0,161 mmol) seguido de DMF anhidra (0,35 ml). A la mezcla se le añadió terc-butóxido potásico, 1,0 M en THF (0,322 ml, 0,322 mmol). La mezcla se volvió de color ligeramente amarillo y turbia con sólido suspendido tras la adición de la base. La mezcla se agitó a TA durante 70 h. La mezcla de reacción se inactivó mediante la adición de 3 gotas de ácido acético. Después, se añadieron 0,5 ml de MeOH y la mezcla se filtró. La mezcla en bruto se purificó por HPLC preparativa de fase inversa en una única inyección (Método de HPLC preparativa 8). Por lo tanto, se obtuvo el compuesto del título en forma de una sal de TFA sólida de color blanco (0,0069 g, rendimiento del 18 %). LCMS m/z = 860,6 (M+H+), tiempo de retención 1,559 min (Método de LCMS 20).
Ejemplo A24. Preparación de ácido 1-(2-((4-cianopiridin-2-il)oxi)etil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito para la preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico, excepto que se usó en el presente caso 2-fluoroisonicotinonitrilo (0,020 g, 0,161 mmol) en lugar de ácido 2-cloroisonicotínico, y también hubo menos terc-butóxido potásico, 1,0 M en THF usado en el presente caso (0,129 ml, 0,129 mmol). El compuesto del título se aisló en forma de una sal de TFA sólida de color ligeramente amarillo (0,0133 g, rendimiento del 36,0 %). LCMS m/z = 841,6 (M+H+), tiempo de retención 1,689 min (Método de LCMS 20). RMN-1H (400MHz, mezcla 1:1 de CDCl3y CD3OD, bloqueo CD3OD) 58,28 (d, J=5,4 Hz, 1H), 7,11 (dd, J=5,1, 1,2 Hz, 1H), 7,00 (s, 1H), 5,33 (s a, 1H), 5,17 (d, J=4,4 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,47 - 4,39 (m, 2H), 3,28 - 3,04 (m, 9H), 3,04 - 2,96 (m, 2H), 2,86 - 2,74 (m, 1H), 2,59 (d, J=16,4 Hz, 1H), 2,24 - 1,95 (m, 11H), 1,89 - 1,74 (m, 3H), 1,73 (s, 4H), 1,68 - 1,42 (m, 10H), 1,42 - 1,29 (m, 3H), 1,15 (s, 3H), 1,11 (s a, 2H), 1,08 (s, 4H), 0,96 (d, J=2,4 Hz, 3H), 0,92 (d, J=2,9 Hz, 3H), 0,90 (s, 3H).
Ejemplo A25. Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-(pirimidin-2-iloxi)etil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito para la preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico, excepto que se usó en el presente caso 2-bromopirimidina (0,026 g, 0,161 mmol) en lugar de ácido 2-cloroisonicotínico, y también hubo menos terc-butóxido potásico, 1,0 M en THF usado en el presente caso (0,129 ml, 0,129 mmol). El compuesto del título se aisló en forma de una sal de TFA sólida de color blanco (0,0056 g, rendimiento del 14,2 %). LCMS m/z = 817,6 (M+H+), tiempo de retención 1,547 min (Método de LCMS 20). RMN-1H (400MHz, mezcla 1: 1 de CDCl3y CD3OD, bloqueo CD3OD) 58,50 (d, J=4,9 Hz, 1H), 7,02 (t, J=4,8 Hz, 1H), 5,35 (dd, J=14,7, 2,9 Hz, 1H), 5,25 - 5,14 (m, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,50 - 4,44 (m, 1H), 4,38 -4,31 (m, 1H), 3,27 - 2,98 (m, 10H), 2,84 - 2,75 (m, 1H), 2,64 - 2,58 (m, 1H), 2,25 - 1,96 (m, 10H), 1,89 - 1,75 (m, 3H), 1,73 (s, 3H), 1,69 - 1,53 (m, 5H), 1,53 - 1,25 (m, 8H), 1,15 (d, J=2,9 Hz, 3H), 1,11 (s a, 2H), 1,08 (s, 3H), 1,03 - 0,84 (m, 9H).
Ejemplo A26. Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-((4-metilpirimidin-2-il)oxi)etil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito para la preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico, excepto que se usó en el presente caso 2-cloro-4-metilpirimidina (0,021 g, 0,161 mmol) en lugar de ácido 2-cloroisonicotínico, y también hubo menos terc-butóxido potásico, 1,0 M en t Hf usado en el presente caso (0,129 ml, 0,129 mmol). El compuesto del título se aisló en forma de una sal de TFA sólida de color blanco (0,0056 g, rendimiento del 14,2 %). Lc Ms m/z = 831,7 (M+H+), tiempo de retención 1,550 min (Método de LCMS 20). RMN-1H (400 MHz, mezcla 1:1 de CDCl3y CD3OD, bloqueo de CD3OD) 58,21 (d, J=6,1 Hz, 1H), 6,52 (d, J=5,9 Hz, 1H), 5,40 - 5,34 (m, 1H), 5,23 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,41 - 4,27 (m, 2H), 3,30 -3,05 (m, 10H), 3,01 (d, J=3,4 Hz, 2H), 2,81 (td, J=11,2, 4,9 Hz, 1H), 2,49 - 2,33 (m, 2H), 2,27 - 1,98 (m, 10H), 1,93 -1,81 (m, 2H), 1,81 - 1,74 (m, 2H), 1,72 (s, 4H), 1,69 - 1,40 (m, 12H), 1,38 - 1,34 (m, 1H), 1,21 - 1,03 (m, 9H), 1,02 -0,86 (m, 8H).
Ejemplo A27. Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta [a] crisen-9-il)-1-(2-((4metoxipirimidin-2-il)oxi)etil) ciclohex-3-eno-1 -carboxílico.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito para la preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico, excepto que se usó en el presente caso 2-cloro-4-metoxipirimidina (0,023 g, 0,161 mmol) en lugar de ácido 2-cloroisonicotínico, y también hubo menos terc-butóxido potásico, 1,0 M en THF usado en el presente caso (0,129 ml, 0,129 mmol). El compuesto del título se aisló en forma de una sal de TFA sólida de color blanco (0,0116 g, rendimiento del 28,8 %). Lc Ms m/z = 847,7 (M+H+), tiempo de retención 1,525 min (Método de LCMS 20). RMN-1H (400 MHz, mezcla 1:1 de CDCls y CD3OD, bloqueo de CD3OD) 5 7,28 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,62 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,40 - 5,33 (m, 1H), 5,23 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,41 - 4,29 (m, 2H), 3,27 - 2,97 (m, 12H), 2,81 (td, J = 11,2, 4,9 Hz, 1H), 2,43 - 2,33 (m, 1H), 2,28 - 1,98 (m, 10H), 1,92 - 1,81 (m, 2H), 1,80 - 1,73 (m, 2H), 1,73 (s, 3H), 1,70 - 1,40 (m, 12H), 1,38 - 1,34 (m, 1H), 1,16 (s, 3H), 1,15 - 1,09 (m, 2H), 1,08 (s, 3H), 1,00 (d, J = 3,2 Hz, 3H), 0,96 (d, J = 7,6 Hz, 3H), 0,91 (s, 3H).
Ejemplo A28. Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-((3-metilpiridin-2-il)oxi)etil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito para la preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico, excepto que se usó en el presente caso 2-fluoro-3-metilpiridina (0,018 g, 0,161 mmol) en lugar de ácido 2-cloroisonicotínico, y también hubo menos terc-butóxido potásico, 1,0 M en THF usado en el presente caso (0,129 ml, 0,129 mmol). El compuesto del título se aisló en forma de una sal de TFA sólida de color blanco (0,0262 g, rendimiento del 74,7 %). LCMS m/z = 830,7 (M+H+), tiempo de retención 1,707 min (Método de LCMS 20). RMN-1H (400MHz, mezcla 1: 1 de CDCl3y CD3OD, bloqueo CD3OD) 57,89 (dd, J=5,1, 1,2 Hz, 0,35H), 7,44 (dd, J=7,1, 1,0 Hz, 0,35H), 7,42 - 7,37 (m, 0,65H), 7,22 (dd, J=6,5, 1,3 Hz, 0,65H), 6,81 (dd, J=7,0, 5,3 Hz, 0.35H), 6,29 (t, J=6,7 Hz, 0.65H), 5,39 - 5,30 (m, 1H), 5,23 (d, J=4,9 Hz, 0.65H), 5,18 (d, J=4,6 Hz, 0.35H), 4,79 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,41 - 4,29 (m, 2H), 3,27 - 2,98 (m, 12H), 2,81 (td, J=11,1, 4,6 Hz, 1H), 2,43 - 2,33 (m, 1H), 2,30 - 2,07 (m, 10H), 2,07 - 1,94 (m, 4H), 1,92 - 1,73 (m, 4H), 1,72 (s, 3H), 1,69 - 1,40 (m, 12H), 1,38 - 1,34 (m, 1H), 1,20 - 1,05 (m, 9H), 1,02 - 0,86 (m, 9H).
Ejemplo A29. Preparación de ácido 1-(2-((3-cloropiridin-2-il)oxi)etil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito para la preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico, excepto que se usó en el presente caso 3-cloro-2-fluoropiridina (0,021 g, 0,161 mmol) en lugar de ácido 2-cloroisonicotínico, y también hubo menos terc-butóxido potásico, 1,0 M en THF usado en el presente caso (0,129 ml, 0,129 mmol). El compuesto del título se aisló en forma de una sal de TFA sólida de color blanco (0,0156 g, rendimiento del 42,7 %). LCMS m/z = 850,6 (M+H+), tiempo de retención 1,770 min (Método de LCMS 20). RMN-1H (400 MHz, mezcla 1:1 de CDCl3y CD3OD, bloqueo CD3OD) 57,99 (dd, J=4,9, 1,7 Hz, 1H), 7,65 (dd, J=7,7, 1,6 Hz, 1H), 6,86 (dd, J=7,6, 4,9 Hz, 1H), 5,33 (s a, 1H), 5,17 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,45 (t, J=6,6 Hz, 2H), 3,27 - 2,98 (m, 12H), 2,80 (td, J=11,1,4,8 Hz, 1H), 2,60 (d, J=15,7 Hz, 1H), 2,25 - 1,95 (m, 10H), 1,90 - 1,74 (m, 3H), 1,73 (s, 3H), 1,68 - 1,42 (m, 10H), 1,40 (s a, 1H), 1,38 - 1,29 (m, 2H), 1,29 - 1,23 (m, 1H), 1,15 (s, 3H), 1,12 (d, J=5,4 Hz, 1H), 1,08 (s, 3H), 0,99 - 0,84 (m, 9H).
Ejemplo A30. Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-((3-(trifluorometil)piridin-2-il)oxi)etil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito para la preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico, excepto que se usó en el presente caso 2-cloro-3-(trifluorometil)piridina (0,029 g, 0,161 mmol) en lugar de ácido 2-cloroisonicotínico, y también hubo menos terc-butóxido potásico, 1,0 M en THF usado en el presente caso (0,129 ml, 0,129 mmol). El compuesto del título se aisló en forma de una sal de TFA sólida de color blanco (0,0020 g, rendimiento del 4,9 %). LCMS m/z = 884,6 (M+H+), tiempo de retención 1,810 min (Método de LCMS 20).
Ejemplo A31. Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-(pirazin-2iloxi)etil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito para la preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1- (prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico, excepto que se usó en el presente caso 2-cloropirazina (0,018 g, 0,161 mmol) en lugar de ácido 2-cloroisonicotínico, y también hubo menos terc-butóxido potásico, 1,0 M en THF usado en el presente caso (0,129 ml, 0,129 mmol). El compuesto del título se aisló en forma de una sal de TFA sólida de color blanco (0,0102 g, rendimiento del 28,2 %). LCMS m/z = 817,6 (M+H+), tiempo de retención 1,592 min (Método de LCMS 20). RMN-1H (400 MHz, mezcla 1:1 de CDCls y CD3OD, bloqueo de CD3OD) 58,16 - 8,08 (m, 2H), 8,05 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,33 (s a, 1H), 5,18 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 (s a, 1H), 4,44 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,27 - 3,13 (m, 7H), 3,13 - 3,05 (m, 3H), 3,05 - 2,95 (m, 2H), 2,86 - 2,74 (m, 1H), 2,60 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 2,25 - 1,96 (m, 10H), 1,89 - 1,81 (m, 1H), 1,81 - 1,74 (m, 2H), 1,73 (s, 4H), 1,65 - 1,42 (m, 10H), 1,40 (s a, 1H), 1,38 - 1,24 (m, 3H), 1,15 (s, 3H), 1,11 (s a, 2H), 1,08 (s, 3H), 1,01 - 0,86 (m, 9H).
Ejemplo A32. Preparación de ácido 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)-1-(2-((4-metoxipiridin-2- il)oxi)etil)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito para la preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico, excepto que se usó en el presente caso 2-bromo-4-metoxipiridina (0,030 g, 0,161 mmol) en lugar de ácido 2-cloroisonicotínico, y también hubo menos terc-butóxido potásico, 1,0 M en<t>H<f>usado en el presente caso (0,129 ml, 0,129 mmol). El compuesto del título fue uno de dos compuestos aislados a partir de esta reacción. El material se obtuvo en forma de una sal de TFA sólida de color blanco (0,0068 g, rendimiento del 18,3 %). LCMS m/z = 846,7 (M+H+), tiempo de retención 1,335 min (Método de LCMS 20). RMN-1H (400 MHz, mezcla 1:1 de CDCl3y CD3OD, bloqueo de CD3OD) 57,97 (d, J=6,6 Hz, 1H), 6,76 (dd, J=6,6, 2,2 Hz, 1H), 6,59 (d, J=2,0 Hz, 1H), 5,34 (s a, 1H), 5,18 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,42 (t, J=6,7 Hz, 2H), 3,98 (s, 3H), 3,27 - 3,04 (m, 10H), 3,01 (d, J=3,4 Hz, 2H), 2,86 - 2,76 (m, 1H), 2,67 - 2,57 (m, 1H), 2,27 - 2,15 (m, 3H), 2,15 - 1,96 (m, 8H), 1,85 (td, J=12,2, 3,3 Hz, 1H), 1,81 - 1,73 (m, 2H), 1,72 (s, 4H), 1,66 - 1,38 (m, 10H), 1,38 - 1,28 (m, 2H), 1,15 (s, 3H), 1,12 (s a, 2H), 1,07 (s, 3H), 1,01 - 0,85 (m, 9H).
Ejemplo A33. Preparación de ácido 1-(2-((4-bromopiridin-2-il)oxi)etil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito para la preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico, excepto que se usó en el presente caso 2-bromo-4-metoxipiridina (0,030 g, 0,161 mmol) en lugar de ácido 2-cloroisonicotínico, y también hubo menos terc-butóxido potásico, 1,0 M en t Hf usado en el presente caso (0,129 ml, 0,129 mmol). El compuesto del título fue uno de dos compuestos aislados a partir de esta reacción. El material se obtuvo en forma de una sal de TFA sólida de color blanco (0,0045 g, rendimiento del 12,2 %). LCMS m/z = 894,5 (M+H+), tiempo de retención 1,672 min (Método de LCMS 20). RMN-1H (400 MHz, mezcla 1:1 de CDCl3y CD3OD, bloqueo CD3OD) 58,09 (d, J=5,9 Hz, 1H), 7,06 (d, J=2,2 Hz, 1H), 6,86 (dd, J=5,9, 2,2 Hz, 1H), 5,33 (s a, 1H), 5,21 - 5,15 (m, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,16 (t, J=6,6 Hz, 2H), 3,27 - 2,98 (m, 12H), 2,84 - 2,74 (m, 1H), 2,60 (dd, J=18,7, 2,8 Hz, 1H), 2,24 - 1,96 (m, 11H), 1,87 - 1,74 (m, 3H), 1,73 (s, 4H), 1,68 - 1,55 (m, 4H), 1,55 - 1,38 (m, 7H), 1,38 - 1,25 (m, 2H), 1,15 (s, 3H), 1,14 - 1,10 (m, 1H), 1,08 (s, 3H), 1,01 - 0,96 (m, 3H), 0,91 - 0,91 (m, 3H), 0,90 (s, 3H).
Ejemplo A34. Preparación de ácido 1-(2-((4-cloropiridin-2-il)oxi)etil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito para la preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico, excepto que se usó en el presente caso 2,4-dicloropiridina (0,024 g, 0,161 mmol) en lugar de ácido 2-cloroisonicotínico, y también hubo menos terc-butóxido potásico, 1,0 M en THF usado en el presente caso (0,129 ml, 0,129 mmol). El compuesto del título fue uno de dos compuestos aislados a partir de esta reacción. El material se obtuvo en forma de una sal de TFA sólida de color ligeramente amarillo (0,0143 g, rendimiento del 38,7 %). LCMS m/z = 850,6 (M+H+), tiempo de retención 1,637 min (Método de LCMS 20). RMN-1H (400 MHz, 1:1 mezcla CDCl3y CD3OD, CD3OD bloqueo) 58,11 (d, J=5,9 Hz, 1H), 6,91 (d, J=2,2 Hz, 1H), 6,83 (dd, J=5,9, 2,2 Hz, 1H), 5,33 (s a, 1H), 5,18 (d, J=4,6 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,17 (t, J=6,6 Hz, 2H), 3,27 - 2,98 (m, 12H), 2,80 (td, J=11,2, 4,8 Hz, 1H), 2,60 (d, J=16,6 Hz, 1H), 2,26 - 1,97 (m, 11H), 1,89 - 1,74 (m, 3H), 1,72 (s, 4H), 1,67 - 1,38 (m, 11H), 1,38 - 1,27 (m, 2H), 1,15 (s, 3H), 1,10 (d, J=11,0 Hz, 1H), 1,07 (s, 3H), 0,99 - 0,86 (m, 9H).
Ejemplo A35. Preparación de ácido 1-(((2-cloropiridin-4-il)oxi)etil)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-dioxidotiomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11a-pentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-eno-1-carboxílico.
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito para la preparación de ácido 2-(2-(1-carboxi-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1--dioxidothlomorfolino)etil)amino)-5a,5b,8,8,11apentametil-1-(prop-1-en-2-il)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-octadecahidro-1H-ciclopenta[a]crisen-9-il)ciclohex-3-en-1-il)etoxi)isonicotínico, excepto que en el presente caso se utilizó 2,4-dicloropiridina (0,024 g, 0,161 mmol) en lugar de ácido 2-cloroisonicotínico, y también hubo menos terc-butóxido de potasio, 1,0 M en THF utilizado en el presente caso (0,129 ml, 0,129 mmol). El compuesto del título fue uno de los dos compuestos aislados de esta reacción. El material se obtuvo en forma de una sal de TFA sólida de color ligeramente amarillo (0,0168 g, rendimiento del 41,2 %). LCMS m/z = 850,6 (M+H+), tiempo de retención 1,809 min (Método de LCMS 20). RMN-1H (400MHz, 1: 1 mezcla de CDCl3y CD3OD, CD3OD bloqueo) 58,00 (d, J=5,6 Hz, 1H), 6,90 (dd, J=5,6, 1,7 Hz, 1H), 6,76 (d, J=1,7 Hz, 1H), 5,32 (s a, 1H), 5,17 (d, J=4,9 Hz, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,41 - 4,33 (m, 2H), 3,28 - 2,98 (m, 12H), 2,80 (td, J=11,0, 4,6 Hz, 1H), 2,58 (d, J=15,4 Hz, 1H), 2,26 - 1,96 (m, 11H), 1,89 - 1,73 (m, 2H), 1,72 (s, 4H), 1,67 - 1,38 (m, 11H), 1,38 - 1,26 (m, 2H), 1,18 - 1,04 (m, 8H), 1,01 - 0,86 (m, 9H).
ENSAYO DE CULTIVO DE CÉLULAS CON VIH
Células. Se obtuvieron células MT-2 y células 293T del NIH AIDS Research y Reference Reagent Program. Las líneas celulares se subcultivaron dos veces a la semana en medios RPMI 1640 (MT-2) o DMEM (293T, HeLa) complementados con suero fetal bovino (FBS) inactivado por calor al 10 %, 100 unidades/ml de penicilina G y 100 μg/ml de estreptomicina. El medio DMEM se complementó adicionalmente con tampón HEPES 10 mM, pH 7,55, L-glutamina 2 mM y 0,25 μg/ml de anfotericina B.
Virus. El virus NLRepRluc contiene el marcador de luciferasa deRenillaen lugar del gennefvírico. El plásmido provírico pNLRepRluc se construyó en Bristol-Myers Squibb, partiendo de un clon provírico NL4-3 (subtipo B) que se obtuvo del NIH AlDS Research y Reference Reagent Program. El virus de tipo silvestre (WT) recombinante parental (NLRepRlucP373S) derivaba de NLRepRluc y contiene la sustitución adicional de P373 para serina en Gag (dentro del espaciador SP1), la variación 373 más común en el subtipo B. Otros virus recombinantes (A364V, V370A/AT371 y el “triple T332S” (T332S/V362I proteasa del VIH-1 R41G)) se generaron por mutagénesis dirigida a sitio del plásmido pNLRepRlucP373S para introducir estas sustituciones aminoacídicas en Gag y la proteasa. Después, se usó ADN vírico recombinante para generar reservas de virus por transfección de células 293T (kit Lipofectamine PLUS, Invitrogen). Los títulos de reservas víricas se determinaron usando un criterio de valoración de un ensayo de luciferasa (sistema de ensayo de indicador Dual-Luciferase®, Promega, Milwaukee, WI, Estados Unidos).
Ensayo de susceptibilidad farmacológica de ciclo múltiple. Se infectaron sedimentos de células MT-2 con virus dirigidos al sitio NLRepRlucP373S Gag, donde los inóculos iniciales de las cepas indicadoras se normalizaron usando señales de actividad de luciferasa de criterios de valoración equivalentes. Dichas mezclas de células-virus se resuspendieron en medio, se incubaron durante 1 hora a 37 °C/CÜ2, y se añadieron a placas de 96 pocillos que contenían compuesto a una densidad celular final de 10.000 células por pocillo. Los compuestos de ensayo se diluyeron en serie 3 veces en DMSO al 100 %, y se ensayaron a una concentración de DMSO final del 1 %. Después de 4 - 5 días de incubación a 37 °C/CO2, los rendimientos del virus se determinaron por la actividad de luciferasa deRenilla(sistema de ensayo indicador Dual-Luciferase®, Promega). La luminiscencia del criterio de valoración se detectó en un Wallac Trilux (PerkinElmer).
Las concentraciones inhibidoras al 50 % (CE50) se calcularon usando la forma exponencial de la ecuación del efecto mediano donde el Porcentaje de Inhibición = 1/[1+ (CE50/conc. del fármaco)m], donde m es un parámetro que refleja la pendiente de la curva de concentración-respuesta. El fondo se tomó como la señal residual observada tras la inhibición a la mayor concentración de un inhibidor de proteasa de control, NFV (3 μM).
Las concentraciones inhibidoras al 90 % (CE90) se calcularon usando la forma exponencial de la ecuación del efecto mediano donde CE<f>= [(F/(100-F)]1/<h c>E50, donde H es un parámetro que refleja la pendiente de la curva de concentración-respuesta. El fondo se tomó como señal residual observada tras la inhibición a la mayor concentración de un inhibidor de proteasa de control, NFV (3 μM).
Ensayo de cultivo de células con VIH
Se convirtió NL4-3 de VIH-1 que expresa el gen de luciferasa deRenillaen el virus gag V370A/AT371 por mutagénesis dirigida a sitio. A364V es un mutante dirigido a sitio.
El virus T332s/V362I/Pr R41G (Nl4.3, clado B) se obtuvo de la siguiente manera: Selección de resistencia del virus de la cepa NL4-4 del VIH-1 con el compuesto inhibidor de la maduración (MI) del VIH
se inició a la CE50 para este virus (2 nM), con un aumento de dos veces en la concentración del compuesto inhibidor de la maduración aplicada en cada pase. En el pase 8, el virus se cosechó y se secuenció. La población vírica seleccionada contenía las sustituciones aminoacídicas T332S y V362I en Gag y la sustitución R41G en la proteasa. Estas sustituciones se introdujeron posteriormente en NLRepRlucP373, un derivado del clon NL4-3 de VIH-1 modificado para contener P373S, la sustitución polimórfica más común en el subtipo B en la posición 373, y el gen de luciferasa deRenillase insertó en el locusnef.
La aparición de las sustituciones seleccionadas en el fondo genotípico wt se analiza en el presente documento:
Partiendo del virus wt, la sustitución R41G de proteasa del VIH se detectó en una de tres seleccionesin vitropara la resistencia al compuesto MI anterior junto con V362I de Gag y T332S. R41G no es una sustitución de resistencia a PI primariai y no está presente en la base de datos de LANL (2010). Existe un único informe de R41G asociado a la selecciónin vitropara la resistencia con respecto a un PI de investigación". Sin embargo, en ese caso, R41G no portaba por sí mismo resistencia al PI. Un cambio relacionado, R41K, es un polimorfo de subtipo B común (27 % de la base de datos de LANL), y R41K puede estar implicado en la aparición de resistencia de la proteasa a un inhibidor de proteasa de investigación.^ R41 se sitúa en un bucle próximo al sitio de unión al sustrato de proteasa del VIH-1, y este cambio podría actuar alostéricamente para facilitar el cierre del bolsillo de sitio activo de la proteasa sobre el sustrato, permitiendo de esta manera la catálisis. Puede ser que R41G altere la dinámica del movimiento del bucle y el posicionamiento final del bucle, lo que podría causar que el sitio activo reconozca mejor los cambios seleccionados del compuesto MI primario (anterior) (V362I/T332S). Un análisis de las sustituciones V362I/T332S/Pr R41G, y sus efectos sobre la susceptibilidad del compuesto MI y el crecimiento vírico, se describen en la Tabla 1 a continuación:
Tabla 1: Sensibilidad antiviral de mutantes dirigidos al sitio
Se construyeron virus que contenían combinaciones de T332S y R41G de proteasa del VIH, con y sin V362I.). Los virus únicamente con un cambio son sólo ~2 veces menos sensibles al compuesto MI, mientras que las combinaciones dobles de estas 3 sustituciones son de 5,7 a 9,3 veces menos sensibles. El virus con el cambio triple es mucho menos sensible al compuesto MI, lo que sugiere que el cambio R41G en la proteasa puede "solapar" con los cambios de Gag para reducir adicionalmente la sensibilidad al compuesto MI, un hallazgo inesperado. Por lo tanto, el virus mutante dirigido a sitio T332S/V362I (SDM) muestra un cambio en veces de únicamente 5,7, pero la adición del cambio de la proteasa R41G aumenta sustancialmente el FC a 217.
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Se usaron todos los tres virus recombinantes como se ha descrito anteriormente en el ensayo de cultivo de células con VIH para el virus NL4-3. Los datos de CE50 WT, CE50 V370A/AT371, CE50 A364V y CE50 T332s/V362I/Pr R41G para los compuestos se muestran en la Tabla 2.
Clave de datos biológicos para las CE50
Tabla 2.
En la Tabla 3 a continuación, se sometieron a prueba dos compuestos correspondientes a dos realizaciones de la invención (Ejemplos 25 y A3) y se compararon con dos compuestos (comparativos) diferentes fuera del alcance de los mismos. Cada compuesto se evaluó para determinar los valores de CE50 (WT) o CE90 (véanse las cepas identificadas a continuación, incluyendo el mutante triple T332S/V362I/pr R41G):
Tabla 3
Como puede deducirse a partir de la Tabla 3, los dos compuestos identificados de acuerdo con la invención tenían mejores valores de CE90 frente a los compuestos comparativos, cuando se sometieron a prueba frente a las cepas mutantes especificadas que se han identificado anteriormente.
La descripción anterior es meramente ilustrativa y no debe entenderse que limite el alcance o los principios subyacentes de la invención de ninguna manera. De hecho, diversas modificaciones de la invención, además de las mostradas y descritas en el presente documento, resultarán evidentes para los expertos en la técnica a partir de los siguientes ejemplos y la descripción anterior.

Claims (20)

  1. REIVINDICACIONES Una combinación que comprende i) un compuesto de fórmula I, que incluye sales farmacéuticamente aceptables del mismo:
    en donde R1 es isopropenilo o isopropilo; A es -alquilo C1-6-OR0; en donde R0 es heteroaril-Q0; Q0 se selecciona del grupo de -H, -CN, -alquilo C1-6, -COOH, -Ph, -Oalquilo C1-6, -halo, -CF3, Y se selecciona del grupo de -COOR2, -C(O)NR2SO2R3, -C(O)NHSO2NR2R2, -SO2NR2C(O)R2, -tetrazol, y -CONHOH, en donde n = 1-6; R2 es -H, -alquilo C1-6, -alquilo C1-6 sustituido con alquilo o -alquilo C1-6 sustituido con arilo; W está ausente o es -CH2- o -CO-; R3 es -H , -alquilo C1-6 o -alquilo C1-6 sustituido con alquilo; R4 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo C1-6-cicloalquilo C3-6, -alquilo C1-6 sustituido con C1-6, -alquilo C1-6-Q1, -alquilo C1-6-cicloalquilo C3-6-Q1, arilo, heteroarilo, heteroarilo sustituido, -COR6, -SO2R7, -SO2NR2R2, y
    en las que G se selecciona del grupo de -O-, -SO2- y -NR12-; en donde Q1 se selecciona del grupo de alquilo-C1-6, -fluoroalquilo C1-6, heteroarilo, heteroarilo sustituido, halógeno, -CF3, -OR2, -COOR2, -NR8R9, -CONR8R9 y -SO2R7; R5 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, cicloalquilo-C3-6, alquilo C1-6sustituido, -alquilo C1-6-NR8R9, -COR3, -SO2R7 y -SO2NR2R2; con la condición de que R4 o R5 no sea -COR6 cuando W sea -CO-; con la condición adicional de que únicamente uno de R4 o R5 se seleccione del grupo de -COR6, -COCOR6,-SO2R7 y -SO2NR2R2; R6 se selecciona del grupo de -H, alquilo C1-6, alquilo sustituido con alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, cicloalquilo sustituido C 3-6-Q2, alquilo C1-6-Q2, alquilo sustituido con alquilo C1-6-Q2, cicloalquilo C3-6-Q2, arilo-Q2, -NR13R14 y -OR15; en donde Q2 se selecciona del grupo de arilo, heteroarilo, heteroarilo sustituido, -OR2, -COOR2, -NR8R9, SO2R7, -CONHSO2R3, y -CONHSO2NR2R2; R7 se selecciona del grupo de -H , -alquilo C1-6, -alquilo sustituido con C1-6, -cicloalquilo C3-6, -CF3, arilo y heteroarilo; R8 y R9 se seleccionan independientemente del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo sustituido con C1-6, arilo, heteroarilo, arilo sustituido, heteroarilo sustituido, -alquilo C1-6-Q2, y -COOR3, o Rs y R9 se toman junto con el N adyacente para formar un ciclo seleccionado del grupo de:
    M se selecciona del grupo de -R 15, -SO2R2, -SO2NR2R2, -OH y -N R 2R12; V se selecciona del grupo de -C R 10R11-, -SO2-, -O- y -N R 12-; con la condición de que únicamente uno de Rs o R9 pueda ser -COOR3; R10 y R11 se seleccionan independientemente del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo sustituido con C1-6 y -cicloalquilo C3-6; R12 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -alquilo C1-6 sustituido con alquilo, -CONR2R2, -SO2R3, y -SO2NR2R2; R13 y R14 se seleccionan independientemente entre el grupo de -H, -alquilo C1-6, -cicloalquilo C3-6, -alquilo sustituido con C1-6, -alquilo C1-6-Q3, -alquilo C1-6-cicloalquilo C3-6-Q3, y alquilo sustituido con C1-6-Q3; Q3 se selecciona del grupo de heteroarilo, heteroarilo sustituido, -NR2R12, -CONR2R2, -COOR2, -OR2, y -SO2R3, R15 se selecciona del grupo de -alquilo C1-6, -cicloalquilo C3-6, -alquilo C1-6 sustituido, -alquilo C1-6-Q3, -alquilo C1-6-cicloalquilo C3-6-Q3 y -alquilo C1-6 sustituido-Q3; R16 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -NR2R2, y -COOR2; con la condición de que cuando V sea -N R 12-; R16 no sea -N R 2R2; y R17 se selecciona del grupo de -H, -alquilo C1-6, -COOR3, y arilo; y (ii) un antiviral, inmunomodulador, antiinfeccioso, inhibidor de la entrada del VIH o vacuna contra el VIH.
  2. 2. La combinación de la reivindicación 1, en donde el resto heteroarilo en el grupo R0 se selecciona del grupo de
  3. 3. La combinación de la reivindicación 2, en donde R1 es isopropenilo.
  4. 4. La combinación de la reivindicación 3, en donde Y es -COOR2.
  5. 5. La combinación de la reivindicación 4, en donde R2 es -H.
  6. 6. La combinación de la reivindicación 1, en donde R4 es -alquilo C1-6-Q1.
  7. 7. La combinación de la reivindicación 6, en donde Q1 es -NR8R9.
  8. 8. La combinación de la reivindicación 7, en donde cuando R8y R9 se toman junto con el -N adyacente para formar un ciclo, el ciclo se selecciona del grupo de:
  9. 9. La combinación de la reivindicación 8, en donde R7y R16 se seleccionan cada uno del grupo de -H y -alquilo C1-6.
  10. 10. La combinación de la reivindicación 1, en donde Q0 es -CN.
  11. 11. La combinación de la reivindicación 1, en donde R1 es isopropenilo, en el grupo R0 el resto “heteroarilo" se selecciona del grupo de:
    Y es -COOH, R4 es -alquilo C1-6-Q1, Q1 es -NR8R9, y R8y R9 se toman junto con el -N adyacente para formar un ciclo que se selecciona del grupo de:
  12. 12. La combinación de la reivindicación 1, en donde el compuesto de Fórmula I, incluyendo sus sales farmacéuticamente aceptables, se selecciona del grupo de:
    5
    5
    5
  13. 13. La combinación de la reivindicación 1, en donde el compuesto de fórmula I, incluyendo sus sales farmacéuticamente aceptables, se selecciona del grupo de:
  14. 14. La combinación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-13, en donde la combinación incluye un antiviral contra el sida que es GSK1265744.
  15. 15. La combinación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-13, en donde la combinación incluye un antiviral contra el sida que es dolutegravir.
  16. 16. La combinación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-15, en donde la combinación se administra por separado o en conjunto.
  17. 17. Una composición que comprende la combinación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-15 junto con uno o más vehículos, excipientes y/o diluyentes farmacéuticamente aceptables.
  18. 18. Una combinación como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1-15 para su uso en el tratamiento de un mamífero infectado con el virus del VIH.
  19. 19. Una composición como se reivindica en la reivindicación 17 para su uso en el tratamiento de un mamífero infectado con el virus del VIH.
  20. 20. Una combinación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-15 para su uso en terapia.
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