ES2710532T3 - Sustancia citotóxica para usar en combinación con radioterapia en el tratamiento del cáncer - Google Patents

Abstract

Una preparación que comprende al menos una sustancia quimioterapéutica o citotóxica para usar en el tratamiento de cáncer de un paciente mamífero, caracterizada porque el tratamiento comprende al menos las siguientes etapas: - transmisión de una dosis sustancialmente no citotóxica de radiación de microhaz a un tejido tumoral de un paciente, en la que la dosis de radiación de microhaz comprende varios haces de una sección transversal microscópica y está adaptada para generar al menos una región con daño microscópico que comprende una lesión en al menos una estructura de la pared límite de una porción de suministro del tejido tumoral, la porción de suministro es un vaso sanguíneo; - administración de la preparación al paciente después de la transmisión de la dosis de radiación de microhaz, de modo que la sustancia quimioterapéutica o citotóxica y/o un derivado metabólico de esta alcanza la al menos una región con daño microscópico antes que la al menos una región con daño microscópico esté completamente curada por la reparación de tejido endógeno.

Description

DESCRIPCION

Sustancia citotoxica para usar en combinacion con radioterapia en el tratamiento del cancer

Campo tecnico

La presente invencion se refiere a una preparacion que comprende sustancias citotoxicas para usar en el tratamiento de cancer por radioterapia, preferiblemente en el tratamiento de tejido tumoral irradiado, en especial en el tratamiento del tejido tumoral maligno irradiado de cerebro o pulmon de mairnfero.

Tecnica antecedente

A pesar de los riesgos de las intervenciones directas, la cirug^a aun es el metodo de eleccion para el tratamiento curativo del cancer. Sin embargo, la cirugfa no es aplicable en el caso de tumores grandes inoperables o pequenos multiples, especialmente ciertas clases de tumores cerebrales y pulmonares. Por lo tanto, la radioterapia o quimioterapia son tratamientos estandares secuenciales para tales situaciones, para lentificar la enfermedad recurrente y suprimir el crecimiento del tumor.

En 1985, Lelieveld et al. investigaron varios esquemas de radioterapia fraccionada y tratamiento farmacologico en ratones y mostraron supra-aditividad en un tumor RIF-1 en comparacion con el tejido normal, sin embargo, solo para dos de seis farmacos citotoxicos y solo para administracion antes de la radiacion (Lelieveld P., et al., "The Effect of Treatment in Fractionated Schedules with the Combination of X-Irradiation and Six Cytotoxic Drugs on the RIF-1 tumor and Normal Mouse Skin", Int. J. Radiation Oncology Biol. Phys., Vol.11, 111-121, 1985).

En especial para el glioblastoma, se hallo que la quimioterapia seguida por la radioterapia posterior duplica la tasa de supervivencia media. Se considera que el efecto beneficioso de la radioterapia se origina en el hecho de que las celulas del tejido tumoral absorben una dosis letal de energfa despues de interactuar con el haz, es decir, cuando estan presentes en la direccion de propagacion, es decir, el eje del haz, de la radiacion electromagnetica o corpuscular. En consecuencia, la radioterapia esta lejos de ser selectiva sobre el tipo de tejido (maligno o no). Por lo tanto, la dosificacion y el enfoque de la energfa del haz son muy importantes para evitar el dano excesivo del tejido sano. Por lo tanto, la radioterapia conformada tridimensional dirigida espedficamente es favorable (como lo muestran Plan quality and treatment planning for single isocenter cranial radiosurgery with volumetric modulated arc therapy, Practical Radiation Oncology, 2012 Oct; 2(4):306-313; y Thomas EM et al., Effects of flattening filter-free and volumetric-modulated arc therapy delivery on treatment efficiency, Journal of Applied Clinical Medical Physics, 2013 May 6; 14(3):4126) En tales aplicaciones, se encontro que una dosis de radiacion total menor de 100 Gray (Gy) era optima.

Los avances recientes en la investigacion sugieren, sorprendentemente, que la radiacion de desaceleracion altamente energetica (tambien llamada Bremsstrahlung) de partfculas cargadas (por ejemplo, electrones, iones) en forma de radiacion de sincrotron se puede usar en la radioterapia. Un sincrotron es un tipo particular de acelerador de partfculas dclico que se origina a partir del ciclotron en el que el campo magnetico de grna (que curva las partfculas en una trayectoria cerrada) es dependiente del tiempo, y esta sincronizado con un haz de partfculas de energfa cinetica creciente. En un sincrotron, la adaptacion de la creciente masa relativista de partfculas durante la aceleracion se realiza mediante la variacion de la intensidad del campo magnetico en el tiempo, mas que en el espacio. Para partfculas que no estan cerca de la velocidad de la luz, la frecuencia del campo electromagnetico aplicado tambien puede cambiar para seguir su tiempo de circulacion no constante. En consecuencia, mediante el aumento de estos parametros a medida que las partfculas ganan energfa, su trayectoria de circulacion se puede mantener constante a medida que se aceleran. La radiacion de sincrotron cubre un amplio espectro continuo (de microondas a rayos X duros; 1 a 105 kilo electronvoltios (keV)) a alta intensidad y brillo. La alta intensidad permite una dosis de absorcion de alrededor de 100 Gy a varios miles de Gray. Tal impacto de haz usualmente no es adecuado para tratamientos in vivo. Se ha demostrado que se puede lograr un efecto terapeutico en los tumores, especialmente el glioblastoma, o los carcinomas de pulmon, especialmente los que se derivan de celulas epiteliales, cuando se utiliza el intervalo espectral de 50 a 600 keV y se colima la radiacion pulsada corta (menor de 1 s) en abanicos o matrices de haces altamente paralelos de seccion transversal microscopica, con una baja divergencia y una distancia entre haces de unos cien micrometres. Sin embargo, se ha encontrado que tal irradiacion de microhaz enfocada da como resultado regiones microscopicas de celulas danadas que se curan rapidamente, por lo que este tipo de irradiacion no tiene un efecto letal en el tumor ni en el tejido benigno circundante del organo. Si bien el efecto letal es lo que usualmente se desea en la terapia convencional contra el cancer, un impacto no letal en el tejido sano puede ser favorable. El documento US 2010/00329413 A1 sugiere el uso de una fuente no sincrotronica como una alternativa para la terapia de la radiacion de microhaz, sin embargo, en la presente tambien se admite que se necesitan dosis de radiacion muy altas para ser efectivas en la terapia del cancer.

Con la esperanza de aumentar la selectividad del tratamiento del cancer, de tratar las celulas tumorales que forman pequenas estructuras tisulares que no se atacar facilmente y de disminuir aun mas la exposicion necesaria a la radiacion, ya se propuso combinar la quimioterapia con la cirugfa y/o la radioterapia. Pero, hasta ahora, solo la administracion del principio activo temozolomida antes de la radioterapia mostro resultados prometedores. Si bien la temozolomida es moderadamente citotoxica, parece sensibilizar a las celulas tumorales a la radiacion. Sin embargo, su administracion aun es el unico tratamiento estandar para el glioblastoma, cuando se combinan la radioterapia y quimioterapia. Se investigo la administracion de otros principios activos citotoxicos; sin embargo, no proporciono un efecto simbiotico o sinergico de la radioterapia y la quimioterapia. Biston et al., en un intento de optimizar un protocolo de quimio-radioterapia, estudiaron el uso de rayos X de sincrotron despues del tratamiento con cisplatino en ratas con un tipo de glioma F98 radiorresistente (Biston M.-C., et al., "Cure of Fisher Rats Bearing Radioresistant F98 Glioma Treated with cis-Platinum nd Irradiated with Monochromatic Synchrotron X- Rays", Cancer Research 64, 2317-2323, 2004).

Sumario de la invencion

El objetivo de la presente invencion es superar las desventajas mencionadas anteriormente de las preparaciones de ultima generacion y sus metodos de administracion en el tratamiento de enfermedades, especialmente en el tratamiento de tumores.

La invencion se define por las reivindicaciones. Todos los temas que se hallan fuera del alcance de las reivindicaciones se proporcionan solo para informacion.

De acuerdo con una realizacion de la invencion, se proporciona una preparacion que comprende al menos una sustancia quimioterapeutica o citotoxica para usar en el tratamiento de una enfermedad de un paciente mairnfero. Se ha demostrado que la preparacion y su metodo de administracion son especialmente ventajosos en el tratamiento del cancer, especialmente los tumores cerebrales, tales como el glioblastoma. La preparacion de acuerdo con la presente invencion se administra en un tratamiento que comprende al menos las siguientes etapas: - transmision de una dosis de radiacion terapeuticamente activa, sustancialmente no citotoxica a un tejido, preferiblemente un tejido tumoral de un paciente, en que la dosis de radiacion se adapta para generar al menos una region con dano microscopico en al menos una estructura de pared lfmite de una porcion de suministro del tejido, preferiblemente un vaso sangumeo; y posteriormente

- administracion de la preparacion al paciente de modo que la sustancia quimioterapeutica o citotoxica y/o un derivado metabolico de esta alcanza la al menos una region con dano microscopico antes de que la al menos una region con dano microscopico se cure sustancial o completamente mediante la reparacion del tejido endogeno. En otras palabras, la presente invencion se refiere a una preparacion que comprende al menos una sustancia quimioterapeutica o citotoxica para usar en el tratamiento de un tejido tumoral irradiado en una estructura de pared lfmite de una porcion de suministro del tejido tumoral mediante una dosis terapeuticamente activa de radiacion de microhaz, como se define en las reivindicaciones.

La al menos una region con dano microscopico en al menos una estructura de pared lfmite contiene una o mas lesiones o defectos microscopicos en el tejido afectado por la radiacion. El area danada corresponde esencialmente a la seccion transversal del haz o la suma de los haces dirigidos hacia el tejido al que esta destinado la radiacion. El tipo de dano celular puede variar de acuerdo con el tipo, dosis y duracion de la radiacion, asf como el tipo de celula. Las lesiones o defectos pueden incluir perforaciones microscopicas de la pared vascular, defectos o perforaciones de las paredes celulares endoteliales, o defectos de las organelas celulares, etc. La dosis de radiacion es emitida por una fuente de radiacion controlable y es terapeuticamente activa, lo que significa que se refiere al tratamiento medico de la afeccion. Sin estar limitado por la siguiente explicacion, parece que la mayona de las celulas afectadas por la radiacion solo estan danadas en un grado en el que estan esencialmente aun vivas y no muertas directamente por la radiacion. La region esta danada hasta el punto de que aumenta la permeabilidad de la sustancia quimioterapeutica y/o citotoxica en el tejido a tratar de tal manera que la sustancia puede traspasar y/o difundir y/o extravasar desde la porcion de suministro (por ejemplo, un vaso) a traves de la pared lfmite hasta el tejido que se va a tratar de manera mas rapida. y/o mas facil, preferiblemente de manera esencialmente sin impedimentos.

La sustancia quimioterapeutica o citotoxica puede ser, por ejemplo, un complejo de metal noble tal como un agente anticancer que contiene platino, por ejemplo, seleccionado del grupo de carboplatino, oxaliplatino o cisplatino. La sustancia tambien puede ser una sal de metal noble y/o un metal noble en forma de nanopartfculas individuales, por ejemplo, nanopartfculas de oro o plata, preferiblemente en una suspension coloidal. Otras alternativas son otros compuestos de segunda generacion, tales como oxaliplatino, picoplatino, satraplatino, etc.

La preparacion preferiblemente contiene sustancias moderadamente citotoxicas. En forma ventajosa, la preparacion contiene un agente antineoplasico alquilante, tal como por ejemplo un derivado del agente alquilante dacarbazina, preferiblemente un derivado de imidazotetrazina del agente alquilante dacarbazina o procarbazina (Natulan®). La preparacion de acuerdo con una realizacion especialmente preferida contiene temozolomida. Ademas, una preparacion que contiene uno o mas compuestos N-nitrosos, especialmente seleccionados del grupo de nimustina (ACNU), carbomustina (BCNU), lomustina (CCNU) y fotemustina (Muphoran®) tambien es muy preferida.

La dosis transmitida de radiacion de acuerdo con la invencion comprende varios haces de seccion transversal microscopica, que estan adaptados para generar regiones danadas microscopicamente en la al menos una estructura de pared lfmite de la porcion de suministro del tejido. La radiacion comprende preferiblemente varios haces, cuyas secciones transversales forman al menos una matriz o abanico en al menos un plano imaginario dentro del tejido o en la superficie del tejido con cada una de las secciones transversales separadas entre sf en dicho plano.

Una seccion transversal de un microhaz puede exhibir una forma arbitral, por ejemplo, forma eKptica o cuadrada. Preferiblemente, es de forma circular o rectangular, es decir, con forma de ranura. En el caso de haces con una seccion transversal en forma de ranura, la region danada exhibe un patron en capas o cortes, mientras que, en el caso de haces con una seccion transversal sustancialmente circular, la region danada aparece bastante perforada. El ancho caractenstico de la seccion transversal de un microhaz unico, para el proposito de la solicitud actual llamado "ancho de apertura" de un microhaz unico, preferiblemente se encuentra en el intervalo de 10 a 100 micrometros, mas preferiblemente de 20 a 50 micrometros, de maxima preferencia aproximadamente 25 micrometros.

De acuerdo con una realizacion preferida de la presente invencion, se obtiene un procedimiento de irradiacion altamente selectivo cuando los ejes paralelos del microhaz estan separados por una distancia (distancia entre haces) de 100 a 400 micrometros, preferiblemente de 150 a 250 micrometros, y mas preferiblemente de 190 a 210 micrometros.

Se pueden obtener resultados especialmente buenos cuando la radiacion es proporcionada por una fuente de radiacion de sincrotron. En tal caso, el uno o mas microhaces se derivan preferiblemente de la radiacion de sincrotron pulsada por refraccion, filtrado y colimacion, tal como conoce el experto en la tecnica. De manera similar, se pueden obtener buenos resultados cuando la radiacion es proporcionada por una fuente de radiacion laser de rayos X. Con maxima preferencia, se usa un laser de electrones libres (FEL) en tal caso, que de manera similar a un sincrotron proporciona un espectro de Bremsstrahlung emitido por electrones de velocidad relativista que se mueven libremente a traves de una estructura magnetica. Tambien en tal caso, el uno o mas microhaces se derivan preferiblemente de la radiacion FEL por refraccion, filtrado y colimacion, tal como conoce el experto en la materia. Se puede alcanzar una mayor selectividad del tratamiento de radiacion mediante el enfoque de al menos un haz con una seccion transversal microscopica, es decir, un microhaz, en el sistema vascular del tumor, es decir, la porcion de suministro del tejido tumoral. Mediante el desplazamiento espacial paralelo del eje de al menos un haz o mediante la aplicacion de una matriz o una multitud de microhaces con ejes espacialmente fijos, se producen una multitud de lesiones microscopicas dentro de las paredes celulares endoteliales. Estas regiones danadas aumentan la transpermeabilidad de la pared siempre que las regiones danadas queden sin curar.

El efecto localizado de la sustancia se optimiza mediante la administracion de la preparacion que contiene dicha sustancia al paciente despues de la transmision de la dosis de radiacion, preferiblemente por administracion intravenosa local. Sin embargo, la administracion oral u otras vfas de administracion tambien son posibles.

Con el fin de lograr una conjuncion sinergica especialmente ventajosa del tratamiento de radiacion y la administracion del farmaco, la preparacion se administra al paciente inmediatamente despues de que se haya producido la irradiacion por la matriz de microhaces, y antes del momento, cuando las regiones de dano microscopicos de la estructura de la pared de la porcion de suministro del tejido tumoral estan completamente curadas. Mas preferiblemente, la administracion tiene lugar entre 40 y 300 minutos, e incluso mas preferiblemente entre 45 y 150 minutos despues de que la radiacion causo la formacion de la al menos una region con dano microscopico.

Los metodos y tiempos de administracion pueden variar de acuerdo con la enfermedad por tratar y las sustancias involucradas, y dependen de la cinetica de las sustancias comprendidas en la preparacion (tiempo hasta que la sustancia alcanza su blanco). El elemento crucial es que la sustancia citotoxica y/o quimioterapeutica alcance el sitio del dano antes de que el dano se cure de manera sustancial o completa. En otras palabras, el farmaco administrado despues de la transmision de la dosis de radiacion debe llegar al defecto durante la ventana de tiempo en la cual la al menos una region con dano microscopico todavfa esta presente (por ejemplo, mientras los poros producidos por los microhaces todavfa esten abiertos) y por lo tanto pueden ser penetrados por la sustancia. La reparacion generalmente comienza entre 30 minutos y 4 horas despues de la irradiacion.

En la "perforacion" cuasi simultanea, es decir, el tiempo necesario para producir al menos una o la multitud de regiones de dano es al menos de un orden de magnitud mas corto que el lapso de tiempo de su curacion, se forma una ventana de tiempo quimioterapeutica en la cual una preparacion que lleva al menos una sustancia citotoxica y/o quimioterapeutica alcanza el sitio del dano en forma de regiones de dano microscopicos y una dosis citotoxica de al menos una sustancia quimioterapeutica o citotoxica traspasa desde la porcion de suministro a la parte suministrada del tejido enfermo predominantemente por difusion a traves de al menos un defecto microscopico formado en una estructura de pared lfmite de la porcion de suministro de dicho tejido. Con el fin de obtener una alta selectividad y una alta relacion del tiempo de curacion del defecto y el tiempo necesario para producir las regiones danadas, la exposicion total al haz por una suma de microhaces es preferiblemente menor de 30 segundos, mas preferiblemente menor de 3 segundos y con maxima preferencia menor de 1 segundo.

Ademas, un pulso de microhaz unico en la administracion de la dosis de radiacion tiene ventajosamente un ancho menor de 1 segundo.

Se puede lograr un efecto especialmente ventajoso mediante la transmision al paciente de una radiacion pulsada colimada en matrices de haces altamente paralelos de seccion transversal microscopica, preferiblemente con una baja divergencia. El enfoque del tejido blanco durante la radiacion se puede optimizar mediante el llamado "arco de intensidad modulada", "arco modulado volumetrico", "arco rapido" o mediante "fuego cruzado", en el cual el tejido se irradia mediante rayos que aplican un campo de intensidad de radiacion anisotropica, por ejemplo, por irradiacion desde diferentes direcciones.

En este sentido, tambien se pueden usar aparatos terapeuticos convencionales, especialmente si se combinan con escaneres de tomograffa computada (CT) de rayos X o asistidos por escaneres de imagen de resonancia magnetica (MRI) para implementar la presente invencion. Sin embargo, la energfa total transmitida por la suma de microhaces de acuerdo con una realizacion preferida adicional de la invencion corresponde preferiblemente al intervalo de 100 a 4000 Gray, preferiblemente de 150 a 2000 Gray, mas preferiblemente de 190 a 3 l0 Gray.

La alta selectividad del procedimiento de irradiacion se aumenta preferiblemente haciendo uso de un intervalo espectral de la radiacion del haz de 33 a 600 keV y mas preferiblemente de 50 a 350 keV.

Ademas, la transmision de radiacion preferiblemente se lleva a cabo con los anchos de apertura de haz de 10 a 100 micrometros, mas preferiblemente 20 a 50 micrometros y con maxima preferencia 25 micrometros.

La presente invencion sugiere una combinacion simbiotica o sinergica de radioterapia y administracion de farmacos quimioterapeuticos. Contrariamente a la radioterapia convencional, la radiacion utilizada esencialmente no actua de manera citotoxica, en otras palabras, esencialmente no tiene un efecto antiproliferativo sobre el tejido enfermo o tejido tumoral. La radiacion de microhaz utilizada de acuerdo con la presente invencion produce regiones danadas de forma transitoria en las paredes vasculares, de modo que el lfmite, es decir, el tejido tumoral circundante, se vuelve mas accesible para el agente aplicado (compuesto) en lugar de ser "asesinado" directamente. Por lo tanto, la radiacion en sf misma esencialmente no tiene un efecto letal en el tejido enfermo o tumoral, sin embargo, la permeabilidad de la pared vascular del lfmite aumenta, lo que permite que la sustancia quimioterapeutica o citotoxica se "difunda" a traves de las regiones danadas a traves de la pared del tejido suministrado y despliegue ad su efecto citotoxico. El efecto de la presente invencion es sorprendente porque, contrariamente a la radiacion utilizada anteriormente con dosis de varios cientos, incluso mil Gray (duplicados en el modo de fuego cruzado), se pueden lograr buenos resultados utilizando dosis de radiacion en general de aproximadamente 10-50 veces menor que la terapia de radiacion de microhaz (MRT) utilizada hasta ahora para el tratamiento de enfermedades. Al combinar esta forma espedfica de MRT, utilizando radiacion discreta concentrada a dosis mas bajas que en las terapias MRT estandar, con la administracion de sustancias quimioterapeuticas, se lograron resultados sorprendentemente buenos en terminos de regresion tumoral. En particular, se obtuvieron resultados sorprendentemente buenos cuando se pretrato el tejido tumoral con radioterapia convencional a corto plazo antes de administrar la dosis de radiacion de acuerdo con la presente invencion.

El intervalo espectral y la intensidad de los microhaces se pueden elegir con respecto al tejido tumoral espedfico que se va a irradiar, y por lo tanto se pueden usar otros tipos o fuentes de radiacion, por ejemplo. fuentes de luz paralelas y altamente colimadas ultravioleta, visible e infrarrojas, por ejemplo, laseres, o haces de partfculas tales como alfa, beta, deuteron, protones y iones pesados. El al menos un (micro) haz puede ser, por lo tanto, un haz de partfculas, o un haz de luz con un intervalo espectral de luz ultravioleta y/o visible y/o infrarroja o combinaciones de los mismos. En el caso de la luz con un intervalo espectral de rayos X, la fuente de radiacion de al menos un haz puede ser un emisor de rayos X; preferiblemente un magnetron, un tubo de rayos X o un laser de rayos X. La dosis de radiacion tambien puede comprender combinaciones de diferentes tipos de haz.

Tambien el regimen de pulsos, el ancho de la abertura del haz, que significa en general el tamano caractenstico y la forma de la seccion transversal del microhaz, asf como el patron de la matriz de haces, es decir, el numero de microhaces en la matriz y su espaciado, y las distancias entre los ejes del haz, se deben disenar para obtener un procedimiento de irradiacion selectiva y espedfica del tejido enfermo o espedfico del tejido tumoral para cumplir con la aparicion de la ventana de tiempo terapeutico de acuerdo con la presente invencion.

La preparacion de la presente invencion y su metodo de administracion se pueden usar en una amplia variedad de tratamientos. El uso del sistema de administracion no solo se limita a la terapia del cancer, sino que tambien se puede usar en el tratamiento de otras enfermedades. Mediante este metodo, tambien se pueden administrar anticuerpos, vectores, nanopartfculas, tales como partfculas de otro u otro metal o pellets de liberacion o bits a un sitio espedfico en el cuerpo que se ha preparado para la extravasacion de farmacos a traves de regiones danadas por irradiacion localizada espedficamente.

Otras realizaciones de la invencion se establecen en las reivindicaciones dependientes.

Breve descripcion de los dibujos

Las realizaciones preferidas de la invencion se describen a continuacion con referencia a los dibujos, que tienen el proposito de ilustrar las realizaciones preferidas de la presente invencion y no con el proposito de limitar la misma. En los dibujos,

Fig. 1a muestra un montaje esquematico posible para el procedimiento de irradiacion de la matriz de microhaz de acuerdo con una primera realizacion de la presente invencion en la que los microhaces tienen secciones transversales tipo ranura;

Fig. 1 b representa la aparicion de un patron de capas o cortes de las regiones danadas microscopicas producidas por la irradiacion del microhaz en la estructura de la pared de la porcion de suministro del tejido tumoral de acuerdo con la primera realizacion mostrada en la Figura 1 a;

Fig. 2a muestra un montaje esquematico posible para el procedimiento de irradiacion de la matriz de microhaz de acuerdo con una segunda realizacion de la presente invencion en la que los microhaces tienen secciones transversales relativamente circulares;

Fig. 2b representa la aparicion de un patron perforado de las regiones danadas microscopicas producidas por la irradiacion del microhaz en la estructura de la pared de la porcion de suministro del tejido tumoral de acuerdo con la segunda realizacion mostrada en la Figura 2a;

Fig. 3 Ilustra la permeabilidad aumentada de la membrana corioalantoica de pollo normal (CAM) que se irradia como un modelo de tejido para simular la estructura de la pared vascular en la porcion de suministro de un tumor (FITC-dextrano MW 2.000.000 como marcador verde fluorescente, usando un microscopio LEITZ DM RBE);

Fig. 4 muestra una representacion esquematica de la permeabilidad vascular con el tiempo despues de la irradiacion;

Figuras 5-7 ilustran la permeabilidad vascular en un modelo de raton U-87 MG de glioblastoma, donde

Fig. 5 ilustra una comparacion del grado de extravasacion de CD-31 o FITC-dextrano, respectivamente, entre una muestra tratada con MR y un grupo control; y

Fig. 6 muestra una comparacion esquematica del mdice de permeabilidad (relacion) en muestras tratadas con radiacion de microhaz (MRT) versus un grupo control;

Fig. 7 muestra una ultraestructura del vaso tumoral de tumores tratados versus un grupo control (microscopfa de electronica de transmision, CM 12);

Fig. 8a representa una comparacion esquematica de los volumenes tumorales entre animales tratados de modo diferente (xenoinjertos de gliobastoma humano U-87 MG en ratones desnudos Balb/c) despues de un tratamiento quimioterapeutico unico con cisplatino; despues del tratamiento con irradiacion sola, por irradiacion seguida de cisplatino de acuerdo con una realizacion preferida de la presente invencion, y un grupo control;

Fig. 8b muestra imagenes de resonancia de spin magnetico s (xenoinjertos de gliobastoma humano U-87

MG en ratones desnudos Balb/c) despues de un tratamiento quimioterapeutico unico con cisplatino; despues del tratamiento con irradiacion sola, por irradiacion seguida de cisplatino de acuerdo con una realizacion preferida de la presente invencion, y un grupo control.

Descripcion de las realizaciones preferidas

La fuente del haz primario utilizado para el procedimiento de irradiacion debena poder proporcionar las altas tasas de dosis requeridas. Por lo tanto, se prefieren las fuentes de radiacion de sincrotron, como la Fuente de Luz de Sincrotron Nacional (NSLS) en los Estados Unidos, la Instalacion Europea de Radiacion de Sincrotron (ESRF) en Grenoble, Francia, y otras de la lista publicada en http://www.lightsources.org/regions. Las fuentes alternativas son la radiacion emitida desde un laser de electrones libres, especialmente un laser de rayos X, tal como el XFEL del DESY, el Sincrotron Electronico Aleman en Hamburgo, Alemania, o el SwissFEL del Instituto Paul Scherrer en Villigen, Suiza u otros de la lista publicada en http://sbfel3.ucsb.edu/www/vl fel.html. Pero como los dispositivos mas compactos similares a los de los aparatos de radioterapia convencionales pueden ser ventajosos, tambien Bremsstrahlung, la radiacion derivada de la desaceleracion de partfculas o fuentes de haz de parrtculas directas, tal como, por ejemplo, en el sistema de radiacion de microhaz (MR) propuesto en la solicitud de patente US US2010329413 A1, son adecuados para la realizacion de la invencion.

En la Figura 1a, se muestra un montaje rtpico para el procedimiento de radiacion de microhaz (MR) de acuerdo con una realizacion preferida de la presente invencion. El haz primario 1 se desvfa hacia la direccion del tejido biologico, por ejemplo, el tejido tumoral 4 para tratar. Por medio de un dispositivo colimador 2, se genera un paquete de microhaces 3 con ejes de haz paralelos, donde los haces presentan secciones transversales en forma de ranura. De esta manera, las secciones transversales de microhaces forman una matriz 9 en forma de abanico en al menos un plano imaginario 8 que esta configurado como un plano en seccion a traves del tejido o en la superficie del tejido. Las secciones transversales estan separadas entre sf. Como se representa en la Figura 1a, es preferible que las secciones transversales esten igualmente espaciadas en la matriz en forma de abanico 9. De acuerdo con el montaje mostrado en la Figura 1a, la matriz 9 se enfoca en la estructura de la pared de la porcion de suministro de el tejido 5. La estructura de pared 5 separa la porcion de suministro 6 del tejido tumoral 4 de la porcion suministrada 7 del tejido tumoral 4. Por medio de la interaccion de la matriz 9 del paquete de microhaces 3 con la estructura de pared 5, se forman regiones de dano microscopicos en la pared que causan un aumento de la permeabilidad de la pared desde la porcion de suministro 6 a la porcion suministrada 7 del tejido 4. En la Figura 2a, se muestra otro montaje tfpico para el procedimiento de radiacion de microhaz (MR) de acuerdo con una segunda realizacion preferida de la presente invencion. Nuevamente, el haz primario 1 se desvfa hacia la direccion del tejido tumoral 4 para tratar. Aqm, por medio de un dispositivo colimador 2', se genera un paquete de microhaces 3' que exhiben ejes de haz paralelos. De esta manera, las secciones transversales del microhaz forman una matriz 9' en al menos un plano imaginario 8. Aqm, las secciones transversales del haz estan separadas entre sf en las dos dimensiones del plano 8. De nuevo, es preferible que las secciones transversales esten igualmente espaciadas en la matriz 9' y que la matriz 9' este enfocada en la estructura de la pared de la porcion de suministro del tejido 5. De nuevo, se forman regiones de dano microscopicos en la pared que causan un aumento de la permeabilidad de la pared desde la porcion de suministro 6 a la porcion suministrada 7 del tejido 4. Al contrario de la primera realizacion de acuerdo con las Figuras 1a y 1b, la segunda realizacion preferida de acuerdo con las Figuras 2a, 2b de la presente invencion lleva a un procedimiento de irradiacion mas bien de perforacion que e corte de la estructura de pared 5 de los microhaces colimados 3'.

La opcion de cortar (por la matriz en forma de abanico 9 de microhaces de acuerdo con la primera realizacion preferida) o, mas bien, perforar la irradiacion de microhaz por la matriz 9' de acuerdo con la segunda realizacion) se puede usar para controlar o variar la profundidad y/o el ancho de la penetracion en el tejido 4. La aparicion de las regiones de dano 10 y 10' se ilustra en las Figuras 1b y 2b, respectivamente. Por lo tanto, posterior al procedimiento de MR y antes del momento, cuando las regiones de dano microscopicos 10, 10' en la estructura de pared 5 de la porcion de suministro del tejido tumoral se curan completamente, se administra una preparacion que lleva sustancias citotoxicas 11 a la porcion de suministro 6. La preparacion se hace preferiblemente de manera convencional, tipicamente en solucion salina esteril, libre de pirogenos, y tfpicamente para inyeccion intravenosa, como es sabido por el experto en la materia.

A medida que se administra la preparacion, una dosis letal de las sustancias citotoxicas 11 transpermea de la porcion de suministro 6 a traves de las regiones de dano microscopicos 10, 10' a la porcion suministrada 7 del tejido 4 que se va a intoxicar.

Ejemplo 1:

Las membranas corioalantoicas de pollos (CAM) se irradiaron en la lmea de haz biomedica de la Instalacion Europea de Radiacion de Sincrotron (ESRF). Aqm, la fuente del ondulador "ID17" tiene su energfa cntica a 33 keV, con el espectro entero que se extiende a mas de 350 keV. Se requiere un espectro filtrado de haz blanco para lograr tasas de dosis muy altas de hasta 80 Gray/s/mA. El filtrado de carbono de 1,5 mm, aluminio de 1,5 mm y cobre de 1 mm permite cortar el espectro de baja energfa de la radiacion del sincrotron por debajo de aproximadamente 50 keV. La fuente del ondulador proporciona, a una distancia de 34 m del anillo de almacenamiento, un haz primario de hasta aproximadamente 20 mm de ancho y 0,5 mm de altura. La produccion de microhaces con anchos de apertura de 25 micrometres, con un espaciado de centro a centro de 200 micrometres para el ancho completo del haz de tamano de mitad del maximo, se realizo mediante el uso del colimador multi-ranura variable Archer, que administra, despues del pasaje a traves de 16 mm de aluminio, valores de dosis pico de entrada en el intervalo de arios cientos de Gray a una tasa de dosis tfpica de aprox. 40 Grays/seg/mA. El paquete tipo abanico de aproximadamente 10 mm x 10 mm de ancho o matriz de 50 microhaces se aplico para irradiar cAm en una placa de Petri, se escanea verticalmente mas de 1 cm, comenzando 1 mm por encima del fondo de la placa de Petri, lo que cubre mas de la altura del CAM completo. Como tal, las dosis superficiales en la entrada de la placa de Petri fueron 100 Gray, lo que representa una dosis de aproximadamente 2 Gray por microhaz. Se coloco una pelfcula radiocromica GafChromic tipo HD-8ID (1SP Corporation, Wayne, New Jersey 07470 USA) sobre la superficie de la CAM antes de la irradiacion durante un segundo.

El aumento de permeabilidad vascular de la membrana producido, que es un modelo biologico para la estructura de la pared de la porcion de suministro del tejido para tratar, se ilustra en la Figura 3.

La figura 3 muestra la permeabilidad cuarenta y cinco minutos despues del tratamiento con MR y despues del tratamiento con factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), que estimula a las celulas a construir nuevos vasos, es decir, angiogenesis. La Figura 4 muestra que la permeabilidad vascular aumenta en el perredo entre 15 minutos y 240 minutos despues del procedimiento de MRRM, mientras que la permeabilidad aumenta drasticamente entre 40 y 150 minutos despues de que el procedimiento de MR ha iniciado la formacion de regiones de dano vascular. Esto se demuestra en las Figuras 3a y 3b. En la Figura 3a, la extravasacion de la fluorescemaisotiocianato-(FITC)-dextrano produce halos verde-fluorescentes en el area irradiada por la matriz de microhaces segun se indica en la pelfcula radiocromica. Las perlas de rodamina de un diametro caractenstico de 100 nanometres, sin embargo, no se difunden en el tejido circundante y permanecen fijas como puntos fluorescentes rojos a lo largo de las lmeas de propagacion del microhaz, como se muestra en la Figura 3b.

Las Figuras 3d y 3e son micrograffas con un mayor aumento, respectivamente, de las partes izquierda y derecha de la region representada en la figura 3c. Las Figuras 3c y 3d muestran que en el sitio de aplicacion del cubreobjetos Thermanox tratado con VEGF (indicado por asteriscos en el lado izquierdo de las figuras 3c-d), la permeabilidad vascular aumenta mas rapido, es decir, ya a 20 a 25 minutes despues del tratamiento MR, como lo demuestran las extravasaciones de FITC-dextrano (algunas indicadas por las flechas en la Figura 3c y 3d). Mientras que en la zona sin tratamiento con VEGF (se muestra en la parte derecha de la Figura 3c y su version con mayor aumento en la Figura 3eI, no se ha detectado ningun aumento adicional en la permeabilidad vascular.

Ademas, no se observo extravasacion del compuesto verde fluorescente FITC-dextrano 2'000'000 en los tumores de control (ver las Figuras 5a y 5b), ya que no habfa defectos de radiacion presentes, que podnan haber permitido la extravasacion, mientras que en la zona tratada con MR (ver Figuras 5c y 5d), es visible un halo transparente de fluorescencia verde debido a dicha extravasacion a traves de las regiones de dano microscopicos. Aqm, el tejido tumoral tratado con MR (Figura 5c) y los vasos sangumeos en control (Figura 5a) tenidos con la molecula 1 de adhesion de celulas endoteliales plaquetarias (CD-31) son fluorescentes rojas y el FITC-dextrano intravascular en 5b y FITC-dextrano extravasado 5d es verde (Figura 5d y 5b), respectivamente.

Ademas, la Figura 6 proporciona la cuantificacion de la permeabilidad vascular en controles y tumores tratados con MR como una relacion del area fluorescente de FITC-dextrano extravasado por area de vaso.

La Figura 7 muestra una ultraestructura de un vaso tumoral (microscopio electronico de transmision CM 12). Esto revela una morfologfa normal en los tejidos de control como se muestra en la Figura 7a y su mayor aumento del area seleccionada en la Figura 7b) sin extravasacion de FITC-dextrano (puntos oscuros intraluminales, indicados por flechas). A la inversa, en los tumores tratados que se muestran en la Figura 7c y en su mayor aumento del area seleccionada en la Figura 7d), se observo una extravasacion de la sonda fluorescente como puntos oscuros (flechas) en el espacio extravascular. Aqm, los signos "E" representan endotelios alterados que contienen multiples vacuolas de diferentes tamanos (indicados por asteriscos) y los sfmbolos "Er" indican la presencia de eritrocitos. La eficiencia del presente metodo es mas evidente cuando se comparan los volumenes de tumores como se muestra en la Figura 8a y las imagenes de resonancia de spin magnetico de los tumores mostrados en la Figura 8b. En el grupo de tratamiento doble (DT) (columna del extremo derecho de cada grupo) que se ha tratado mediante la administracion de cisplatino (Cis) despues del procedimiento de MR, cuando se usa la ventana quimioterapeutica del aumento de la permeabilidad vascular (comparar con la Figura 4), el tamano del tumor mostro una disminucion progresiva y significativa despues del tratamiento. Ademas del crecimiento descontrolado de los tumores de control (Co) (columna del extremo izquierdo de cada grupo hasta el dfa 24, sin relleno), las etapas terapeuticas individuales de solo cisplatino (Cis) (segunda columna de la izquierda en cada grupo hasta el dfa 24, columna del extremo izquierdo para los dfas 27 y 31) o solo irradiacion (IRR) segun el tratamiento de MR (La segunda columna de la derecha en cada grupo hasta el dfa 24, columna media para los dfas 27 y 31), mostro un aumento gradual en el tamano. En consecuencia, las imagenes MR anatomicas de cero a 27 dfas despues del tratamiento mostro una significativa disminucion de tamano en los tumores que han recibido el tratamiento simbiotico de acuerdo con el presente metodo de la invencion cuando se comparan con los otros grupos experimentales.

Ejemplo 2:

En este ejemplo, las CAM se irradiaron en la lmea de luz biomedica de ESRF. La generacion y la preparacion de los microhaces se produjeron basicamente de la misma manera que se describe en el Ejemplo 1 de acuerdo con una segunda realizacion preferida con la seccion transversal sustancialmente circular de cada microhaz. Sin embargo, la diferencia aqm es que, detras del colimador multi-ranura, se coloco un segundo colimador (tal como un colimador multi-ranura variable Archer) en la trayectoria de la primera matriz de microhaces formada por el primer colimador. Las ranuras del colimador adicional se giraron 90 grados para cortar los microhaces que salen del primer colimador en una matriz de 50 x 50 haces con anchos de apertura y alturas de 25 micrometros y un espacio de centro a centro de 200 micrometros para el ancho completo de los haces de tamano de mitad del maximo

La matriz de aproximadamente 10 mm x 10 mm de 50 x 50 microhaces se aplico para irradiar CAM en una placa de Petri. Una pelteula radiocromica GafChromic tipo HD-81 D (ISP Corporation, Wayne, New Jersey, 07470 USA) se coloco sobre la superficie de la CAM antes de la irradiacion durante un segundo. Debido al corte de la primera matriz de microhaces en forma de abanico en la matriz de 50 x 50 haces, las dosis superficiales aproximadas en la entrada de la placa de Petri fueron de 12 a 25 Gray, lo que representa una dosis de microhaz unica de aproximadamente 0,25 a 0,52 Gray.

Como resultado, el grado de aumento de la permeabilidad vascular es similar al mostrado en la Figura 3 para el Ejemplo 1. Pero en el Ejemplo 2, la irradiacion mas bien perfora el tejido. Por lo tanto, el nivel de exposicion del tejido irradiado es incluso menos letal y da como resultado una ventana quimioterapeutica mucho mas estrecha (en comparacion con la Figura 4). Incluso cuando se administra Cisplatino (Cis) dentro de los 30 minutos a 1 hora despues de la irradiacion, el tamano del tumor de glioblastoma muestra una disminucion progresiva y significativa despues del tratamiento.

Ademas, este ejemplo muestra que la segunda realizacion preferida de la irradiacion por la matriz de haces es especialmente ventajosa para el tratamiento de tumores de tejido pulmonar, ya que los tumores de pulmon son mas comunmente carcinomas que se derivan de celulas epiteliales, que son menos dependientes del crecimiento endotelial, como en el caso de los glioblastomas. Por lo tanto, la perforacion menos letal pero punzante en el tratamiento de los tumores de pulmon, especialmente mediante el fuego cruzado, da como resultado un metodo de tratamiento preferible.

Ejemplo 3:

De acuerdo con una tercera realizacion preferida, las CAM se irradiaron en la lmea de luz biomedica de ESRF solo despues de que el tejido se irradio mediante un aparato radioterapeutico convencional (por ejemplo, el Arco Rapido mediante VARIAN usando un colimador dinamico de hojas multiples para proporcionar una tasa de dosis variable y velocidad de portico variable). La administracion homogenea de irradiacion de 6 MeV a 10 MeV durante 2 a 10 min, lo que da como resultado 4 Gray para la radiacion filtrada a 20 Gray para la radiacion sin filtro al tejido, parece inducir un tejido perfectamente intacto, pero "en hibernacion". En otras palabras, la capacidad para el crecimiento endotelial vascular se reduce drasticamente. La irradiacion del tejido en hibernacion luego con la matriz de microhaces en forma de abanico de acuerdo con el Ejemplo 1 o con la matriz de microhaces de acuerdo con el Ejemplo 2, en el caso de CAM, se extiende la ventana de mayor permeabilidad vascular.

Ejemplo 4:

El montaje experimental y el procedimiento del Ejemplo 1 tambien se aplicaron para estudiar el efecto de la presente invencion sobre el tejido pulmonar maligno en un modelo de raton de carcinoma de pulmon, en cuyo caso el crecimiento del tumor deriva principalmente de las celulas epiteliales. El tratamiento combinado aplicado redujo drasticamente el crecimiento del tumor y aumento la tasa de supervivencia del animal, sorprendentemente sin la aparicion de fibrosis pulmonar, lo que es un resultado unico en comparacion con otros tipos de tratamiento.

El uso de la sustancia en dicho metodo y sus ejemplos de una realizacion preferida tal como se describio anteriormente, da como resultado un tratamiento mas efectivo del tejido tumoral. El metodo de administracion se puede usar, por ejemplo, en el tratamiento del cancer en seres humanos que tienen, por ejemplo, tumores cerebrales o pulmonares, y posiblemente incluso en terapia de radiacion intraoperatoria. Tambien se preve que la sustancia de acuerdo con la invencion y su metodo de administracion se pueden usar para la investigacion del cancer en modelos animales. La estrategia de administracion de principios activos, que tiene un amplio espectro de aplicaciones, se podna aplicar, por ejemplo, al tratamiento de diferentes procesos patologicos en diferentes organos, por ejemplo, tumores del cerebro, especialmente de glioblastoma, del pulmon o de la medula espinal, mediante el uso de diferentes compuestos, tales como nanopartfculas, preferiblemente partfculas metalicas nobles, por ejemplo, nanopartfculas de oro, agentes quimioterapeuticos moderadamente toxicos, asf como anticuerpos y vectores, etc. Lista de signos de referencia

1 haz primario

2,2' dispositivo colimador

3,3' paquete de microhaces

4 tejido tumoral

5 estructura de pared

6 porcion de suministro de 4

7 porcion suministrada de 4

8 plano imaginario

9,9' matriz de 3 o 3', respectivamente

10,10' regiones de dano (microscopicos), defectos producidos por la irradiacion

11 preparacion que lleva las sustancias citotoxicas

Claims (20)

REIVINDICACIONES

1. Una preparacion que comprende al menos una sustancia quimioterapeutica o citotoxica para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mai^ero, caracterizada porque el tratamiento comprende al menos las siguientes etapas:

- transmision de una dosis sustancialmente no citotoxica de radiacion de microhaz a un tejido tumoral de un paciente, en la que la dosis de radiacion de microhaz comprende varios haces de una seccion transversal microscopica y esta adaptada para generar al menos una region con dano microscopico que comprende una lesion en al menos una estructura de la pared lfmite de una porcion de suministro del tejido tumoral, la porcion de suministro es un vaso sangumeo;

- administracion de la preparacion al paciente despues de la transmision de la dosis de radiacion de microhaz, de modo que la sustancia quimioterapeutica o citotoxica y/o un derivado metabolico de esta alcanza la al menos una region con dano microscopico antes que la al menos una region con dano microscopico este completamente curada por la reparacion de tejido endogeno.

2. La preparacion para usar de acuerdo con la reivindicacion 1, en la que la preparacion es para usar en el tratamiento de tumores cerebrales de un paciente mairnfero, especialmente glioblastoma, o en el tratamiento de tumores pulmonares.

3. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mamnfero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la sustancia quimioterapeutica o citotoxica es un agente anticancer que contiene platino, preferiblemente seleccionado del grupo de carboplatino, oxaliplatino o cisplatino.

4. La preparacion para usar e el tratamiento de cancer de un paciente mamffero de acuerdo con la reivindicacion 1, caracterizada porque la preparacion contiene un agente antineoplasico alquilante, preferiblemente un derivado del agente alquilante dacarbazina, mas preferiblemente un derivado de imidazotetrazina del agente alquilante dacarbazina, o que la sustancia quimioterapeutica o citotoxica contenga o sea temozolomida.

5. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mamnfero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la radiacion de microhaz comprende varios haces, cuyas secciones transversales forman al menos una matriz o abanico en al menos un plano imaginario dentro del tejido o en la superficie del tejido con cada una de las secciones transversales separadas entre sf en dicho plano.

6. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mamnfero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la radiacion de microhaz comprende al menos un haz de partfculas y/o al menos un haz de luz, preferiblemente con un intervalo espectral de rayos X.

7. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mamnfero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la radiacion de microhaz es provista por una fuente de radiacion de sincrotron.

8. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente marnffero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque despues de la administracion, la sustancia quimioterapeutica o citotoxica administrada traspasa a la porcion suministrada de dicho tejido, principalmente por difusion desde la porcion de suministro del tejido a una porcion suministrada del tejido por medio de la al menos una region con dano microscopico formada en una estructura de la pared lfmite de dicho tejido.

9. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mamffero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la preparacion se administra al paciente por administracion intravenosa local.

10. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mamffero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la preparacion se administra al paciente entre 40 y 300 minutos despues de la radiacion de microhaz, preferiblemente entre 45 y 150 minutos despues de la radiacion de microhaz.

11. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mamffero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque durante la administracion de la dosis de radiacion de microhaz, una exposicion total al haz mediante una suma de microhaces es menor de 30 segundos, preferiblemente menor de 3 segundos, mas preferiblemente menor de 1 segundo.

12. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mamffero de acuerdo con la reivindicacion 5, caracterizada porque un pulso de microhaz unico en la administracion de la dosis de radiacion tiene un ancho menor de 1 segundo.

13. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mairnfero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que la dosis de radiacion de microhaz comprende radiacion pulsada corta colimada en matrices de haces altamente paralelos de seccion transversal microscopica, preferiblemente con una baja divergencia.

14. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente m ai^ero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 11-13, caracterizada porque la energfa total transmitida por la suma de microhaces en la administracion de la dosis de radiacion de microhaz corresponde al intervalo de 100 a 4000 Gray, preferiblemente 150 a 2000 Gray, mas preferiblemente 190 a 310 Gray.

15. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mai ^ ero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 11-14, caracterizada porque en la administracion de la dosis de radiacion, los microhaces tienen ejes paralelos que estan separados por una distancia entre haces de 100 a 400 micrometros, preferiblemente 150 a 250 micrometros, mas preferiblemente 190 a 210 micrometres.

16. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mam êre de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque en la administracion de la dosis de radiacion de microhaz se usa un intervalo espectral de 33 a 600 keV y mas preferiblemente 50 a 350 keV.

17. La preparacion para usar en el tratamiento de cancer de un paciente mam êre de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 11-16, caracterizada porque en la administracion de la dosis de radiacion de microhaz, un ancho de apertura de un microhaz unico se halla en el intervalo de 10 a 100 micrometros, preferiblemente 20 a 50 micrometros, mas preferiblemente aproximadamente 25 micrometros.

18. Una preparacion que comprende al menos una sustancia quimioterapeutica o citotoxica para usar en el tratamiento de un tejido tumoral de un paciente mam êre irradiado en una estructura de pared lfmite de una porcion de suministro del tejido tumoral por una dosis terapeuticamente activa sustancialmente no citotoxica de radiacion de microhaz, en la que la dosis de radiacion de microhaz comprende varios haces de una seccion transversal microscopica y esta adaptada para generar al menos una region con dano microscopico que comprende una lesion en al menos una estructura de pared lfmite de una porcion de suministro del tejido tumoral, la porcion de suministro es un vaso sangumeo, y en la que la sustancia quimioterapeutica o citotoxica y/o un derivado metabolico de esta alcanza la al menos una region con dano microscopico antes de que la al menos una region con dano microscopico este completamente curada por la reparacion del tejido endogeno.

19. La preparacion de la reivindicacion 18, para usar en el tratamiento de un tejido tumoral irradiado de un paciente marnffero, preferiblemente de un tejido tumoral irradiado de tumores cerebrales, en especial glioblastoma, o de tumores pulmonares, caracterizada porque el tejido tumoral irradiado comprende al menos una region con dano microscopico que comprende una lesion en al menos una estructura de pared lfmite de un vaso sangumeo del tejido tumoral producida por la transmision de una dosis sustancialmente no citotoxica de radiacion de microhaz, en la que la al menos una region con dano microscopico no esta aun completamente curada por la reparacion de tejido endogeno en el momento del tratamiento.

20. La preparacion de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 18-19 para usar en el tratamiento de un tejido tumoral irradiado, caracterizada porque el tejido tumoral irradiado comprende al menos un defecto microscopico causado por la radiacion de microhaz, preferiblemente provisto por una fuente de radiacion de sincrotron, la radiacion de microhaz que comprende varios haces de una seccion transversal microscopica y/o por una radiacion de microhaz que comprende varios haces cuyas secciones transversales forman al menos una matriz o abanico en al menos un plano imaginario dentro del tejido o en la superficie del tejido con cada una de las secciones transversales separadas entre sf en dicho plano.