ES2642316T3 - Nanoemulsiones de perfluorocarbono con superficie de potenciación de la endocitosis para transferencia génica - Google Patents

Description

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nuevamente. Si la temperatura del lecho había llegado a 30ºC, entonces se mantuvo a esta temperatura reducida durante 10 min. Durante este periodo de tiempo, la presión arterial se midió 5 min y 10 min después de que la temperatura del lecho había alcanzado 30ºC (30 min y 40 min después de haber iniciado el perfil). 10 min después de que la temperatura del lecho alcanzó 30ºC la misma se ajustó nuevamente a 42ºC. Los siguientes valores de presión arterial se determinaron cuando la temperatura del lecho llega a 41,5ºC, es decir 47 min después del punto de inicio del perfil. Por consiguiente, tres valores de presión arterial adicionales se evaluaron en intervalos de cinco minutos, concretamente a 52 min, 57 min y 62 min después de que se inició el perfil de presión arterial. El perfil de temperatura del lecho de calentamiento se muestra en la Tabla 1.

Tabla 1: El perfil de temperatura

Tiempo transcurrido después del inicio del perfil [min]

Temperatura

15

42ºC

30

30,5ºC

35

30ºC

40

30ºC

43

41,5ºC

47

42ºC

52

42ºC

57

42ºC

62

42ºC

Resultados de transferencia génica ilustrativa: Para evaluar si el ARNic de angiotensinógeno se administra satisfactoriamente a las células de un animal vivo, se indujo una reducción de la presión arterial mediante una reducción de la temperatura corporal de los animales usando un lecho de temperatura regulada. El perfil de temperatura provocó una reducción significativa en la temperatura corporal media de los ratones anestesiados de 38ºC a 35ºC y una recuperación después de recalentamiento del lecho. La Figura 1 muestra la temperatura corporal media a continuación del perfil de temperatura descrito en la unidad de calentamiento.

Para comparación con el efecto de ARNic de angiotensinógeno sobre la presión arterial, se estudió el efecto del perfil de temperatura en animales tratados con el bloqueante de la enzima convertidora de angiotensina captopril, una opción terapéutica común para suprimir el sistema de renina angiotensina en seres humanos. Posteriormente, el efecto del perfil de temperatura se ensayó en animales que recibieron ARNic de angiotensinógeno en el nanotransportador que contenía la nanoemulsión de perfluorocarbono y transferrina o únicamente la nanoemulsión. Los datos se compararon con los valores de presión arterial de animales de control tratados con el nanotransportador, el nanotransportador y ARNic no codificante o ARNic en solitario. El nanotransportador funcional y el ARNic se toleraron bien por los animales.

Perfil de presión sanguínea en animales no tratados: La Figura 2 muestra la presión arterial media de ratones no tratados.

Perfil de presión arterial en animales tratados con bloqueante de enzima convertidora de angiotensina: Ratones tratados con el bloqueante de la enzima convertidora de angiotensina captopril tienen un sistema de renina angiotensina alterado. Se ensayó el efecto de una temperatura corporal reducida sobre la presión arterial durante un perfil de temperatura definido. Por lo tanto, se documentó una reducción pronunciada de la presión arterial cinco y diez minutos después de que la temperatura del lecho había llegado a 30ºC. En estos animales la recuperación a valores de presión sanguínea basal normales ocurrió de forma lenta, de forma que los animales aún tenían presiones arteriales bajas a los 52 min (Figura 3).

Perfil de presión arterial en ratones después de administración de ARNic de angiotensinógeno a través del nanotransportador: Los animales recibieron la secuencia de ARNic de angiotensinógeno CCG GTT CTT GCC ACT GAG AAA (SEC ID Nº: 1) administrada por el nanotransportador. Mediante inyección intravenosa se aplicaron 60 g de ARNic en 300 l del nanotransportador. Un periodo de incubación de 24 h permitió que el ARNic impidiera la traducción de angiotensinógeno y de ese modo influyera sobre el sistema de renina angiotensina. En comparación con los controles los animales tenían presiones arteriales basales alteradas y una reducción clara de la presión arterial a continuación de la reducción de la temperatura corporal. Además, la presión arterial permaneció a valores bajos para el min 57. Por tanto los valores de presión arterial medidos fueron similares entre animales tratados con el inhibidor de la enzima convertidora de angiotensina y los animales que recibieron ARNic de angiotensina administrado a través del nanotransportador. La Figura 4 muestra la reducción de la presión arterial a continuación de la inhibición inducida por ARNic de angiotensinógeno.

Perfil de presión arterial en animales de control adicionales: Cuatro grupos de control recibieron el compuesto expuesto en la Tabla 2. En estos grupos de animales como una respuesta a una temperatura corporal reducida la

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Claims (1)

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