ES2616045T3

ES2616045T3 - Forma estabilizada de tetrofosmina y su uso

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Publication number: ES2616045T3
Application number: ES15703024.8T
Authority: ES
Inventors: Eik SCHILLER
Original assignee: ROTOP PHARMAKA GmbH
Current assignee: ROTOP PHARMAKA GmbH
Priority date: 2014-01-28
Filing date: 2015-01-28
Publication date: 2017-06-09
Anticipated expiration: 2035-01-28
Also published as: AU2015212915A1; CA2936884C; EP3022215B1; US9963473B2; PL3022215T3; EP2899195A1; AU2015212915B2; US20160355532A1; EP3022215A1; HUE031983T2; WO2015114002A1; CA2936884A1

Abstract

Una forma estabilizada de tetrofosmina representada por la formula general (1);**Fórmula** en donde R es H o un resto alquilo de C1 a C3 opcionalmente sustituido y/o ramificado y x es un número entre 1 y 2.

Description

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DESCRIPCION

Forma estabilizada de tetrofosmina y su uso

[0001] Esta invencion se refiere a una forma estabilizada de tetrofosmina en el campo de los radiofarmacos de diagnostico, en especial para estudios de perfusion miocardica en pacientes con arteriopatfas coronarias y en oncologfa.

[0002] Los radiofarmacos basados en 99mTc se usan habitualmente en medicina nuclear de diagnostico, en especial para la imagenologfa in vivo (p. ej., por inmunocentelleograffa o radiomarcaje). Normalmente se fabrican kits frfos con antelacion, de acuerdo con requisitos estrictos de las Directrices de las Buenas Practicas de Fabricacion (BPF), que contienen los ingredientes qufmicos (p. ej., ligandos de coordinacion del 99mTc, conservantes) en forma liofilizada. El isotopo radiactivo 99mTc (ti/2 = 6 h) se anade a esos kits antes de la aplicacion al paciente por inyeccion intravenosa o subcutanea. Se conocen varios ligandos de coordinacion del 99mTc que contienen atomos de fosforo de coordinacion con sustituyentes alquilo y capaces de formar complejos cationicos de "mTc. Una de las estructuras de ligando de ejemplo descrita en el documento EP 0311352 A1 es la siguiente:

ch2 — ch2

I I

Me— P P— Me

MeOCH2 CH2OMe

(1)

[0003] El documento EP 0337654 A2 describe ligandos (L) difosfina de coordinacion del 99mTc, en los que un ejemplo preferido de los mismos es el ligando difosfina funcionalizado con eter 1,2-bis[bis(2-etoxi-etil)fosfino]etano de acuerdo con la formula (2), llamado tetrofosmina ("P53"):

imagen1

que forma una complejo de dioxo-fosfina de tecnecio (V) cationico dimerico, [TcO2L2]+ con 99mTc, util como agente de imagenologfa miocardica.

Tambien se describe que el 99mTc-tetrofosmina es util para el diagnostico de tumores, en particular de cancer de mama y cancer de glandulas paratiroideas, y para la investigacion de la multirresistencia a farmacos (MDR).

[0004] Con respecto al documento EP 0337654 A2 se distribuye un kit que contiene tetrofosmina con el nombre Myoview™ (GE Healthcare). El kit es un kit de un vial que contiene 0,23 mg de tetrofosmina, 0,03 mg de cloruro estannoso dihidrato, 0,32 mg de sulfosalicilato disodico, 1,0 mg de D-gluconato sodico, 1,8 mg de hidrogenocarbonato sodico y nitrogeno como gas protector. De acuerdo con el fabricante, el kit tiene una vida en anaquel de 35 semanas cuando se almacena de 2 °C a 8 °C y protegido de la luz. Sin embargo, debido a la potencial presencia de demasiado nitrogeno gaseoso en el kit de Myoview durante el procedimiento de marcaje, se describieron varias variaciones en la pureza radioqufmica del 99mTc-tetrofosmina [Murray y col., Nucl. Med. Comm. 2000, 21,845-849].

[0005] Se describe una formulacion optimizada del kit de tetrofosmina en el documento EP 1345630 B1. Presenta la preparacion de Myoview™ 24 (GE Healthcare) que contiene acido ascorbico (o alternativamente acido para- aminobenzoico o acido gentfsico) como un radioprotector y un conservante de parabeno como antimicrobiano.

[0006] Otra formulacion optimizada del kit de tetrofosmina se describe en el documento EP 1824525 B1. Este kit se dirige principalmente a aumentar la estabilidad despues del marcaje del complejo de 99mTc-tetrofosmina y contiene ademas acido ascorbico como estabilizante sin ningun conservante antimicrobiano. Este kit multidosis es un farmaco registrado en EE.UU. con el nombre Myoview™ 30 (GE Healthcare) y contiene 1,38 mg de tetrofosmina, 0,99 mg de cloruro estannoso dihidrato, 1,92 mg de sulfosalicilato disodico, 3 mg de D-gluconato sodico, 11 mg de hidrogenocarbonato sodico y 3 mg de acido ascorbico. De acuerdo con el documento EP 1824525 B1 el kit Myoview™ 30 (GE Healthcare) tiene una vida en anaquel de 78 semanas cuando se almacena de 2 °C a 8 °C y protegido de la luz.

[0007] El documento WO 2009/037336 A2 se refiere a otra composicion de radiofarmaco de 99mTc-tetrofosmina que comprende tetrofosmina y un radioprotector como acido ascorbico en un intervalo particular de proporciones molares.

[0008] El documento CN 1331081 A describe sales de tetrofosmina que contienen cloruro o bromuro o arilsulfonatos como contraiones con carga negativa, que se pueden usar para preparar una composicion

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radiofarmaceutica de 99mTc-tetrofosmina. Estas sales se pueden almacenar hasta 3 meses. De acuerdo con el documento CN 1331081 A, el hidrocloruro de tetrofosmina es un lfquido viscoso. Los experimentos de los autores de la presente invencion, pusieron de manifiesto que las sales de haluro de las sales de tetrofosmina son aceites higroscopicos, que son complicados de manejar, p. ej., cuando se pesan. Las propiedades aceitosas e higroscopicas del hidrocloruro de tetrofosmina complican su uso en preparaciones farmaceuticas. Los intentos de sintetizar la sal de sulfosalicilato de tetrofosmina fracasaron debido a que el material de partida, el acido sulfosalicflico, no era soluble en eter en la concentracion especificada en el documento CN 1331081 A (3,4 g en 15 ml).

[0009] El documento WO 2007/148088 A2 describe un recubrimiento de copolfmero de etileno-tetrafluoroetileno para los envases sellados en los que se proporcionan las composiciones radiofarmaceuticas. El objetivo de esta invencion es la reduccion del contenido de oxfgeno en el espacio de cabeza de las formulaciones de kit liofilizadas y la prevencion del filtrado de impurezas por el cierre.

[0010] La tetrofosmina es extremadamente sensible al oxfgeno atmosferico, lo que hace complicada la sfntesis de la sustancia, asf como la fabricacion y manipulacion del kit, puesto que la sustancia debe manipularse constantemente en una atmosfera exenta de oxfgeno.

[0011] La alta pureza y estabilidad son requisitos centrales para los compuestos qufmicos usados como principios activos en radiofarmacos.

[0012] El objetivo de la invencion es principalmente proporcionar formas estabilizadas de la tetrofosmina, que son estables en contacto con el oxfgeno y permiten una manipulacion mas sencilla de la sustancia durante la sfntesis, control de calidad y fabricacion del kit. Otro objetivo de la invencion es proporcionar un kit que contiene una forma estabilizada de tetrofosmina que da como resultado una mayor estabilidad, p. ej., una vida en anaquel prolongada del kit.

[0013] De acuerdo con la presente invencion, el objetivo se resuelve por una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la formula (I)

ch3ch2o

imagen2

(I)

x RBF4

en la que x es un numero entre 1 y 2, mas preferiblemente 1 o 2, mientras que cada R esta unido covalentemente a un atomo de fosforo. R se elige de H o se selecciona de restos alquilo de C1 a C3 lineales o ramificados, no sustituidos, sustituidos, preferiblemente R es H.

[0014] Preferiblemente, la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion es una sal seleccionada de las siguientes formulas:

imagen3

o una mezcla de las mismas.

[0015] R es H o se selecciona de restos alquilo de C1 a C3 lineales o ramificados, no sustituidos, sustituidos, preferiblemente R es H, BF4- es el anion tetrafluoroborato.

[0016] Preferiblemente, la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la formula (I), es la sal de tetrafluoroborato de bis-fosfonio de tetrofosmina.

Ventajosamente una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion es solida, estable a temperatura ambiente sin ninguna necesidad de almacenamiento en condiciones inertes. Ademas, la sal de la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion se disuelve rapidamente cuando se pone en contacto con una solucion acuosa (p. ej., solucion salina, solucion de pertecnetato). Preferiblemente la sal estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion se puede volver a transformar rapidamente en el ligando tetrofosmina libre a un pH > 7, mas preferiblemente entre 7,5 y 9,0.

[0017] Ademas, la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion no es de naturaleza

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higroscopica por lo que no tiende a aglomerarse o hacerse liquido cuando se expone a la humedad del aire. Al mismo tiempo, la forma estabilizada de tetrofosmina como un solido estabilizado, se pueden pesar con precision en condiciones normales de las BPF, p. ej., flujo de aire laminar, sin degradacion. De esta forma, el estado agregado solido de la forma estabilizada de tetrofosmina proporciona ventajosamente la manipulacion rapida y facil en comparacion con las formas de tetrofosmina disponibles hasta ahora.

[0018] Ademas, la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion reacciona directamente con el pertecnetato (99mTcO4") para formar un complejo de tecnecio- tetrofosmina con alto rendimiento radioquimico >90 % (en conformidad con la monografia de la Farmacopea de Estados Unidos de la 99mTc-tetrofosmina).

[0019] Tambien se ha encontrado sorprendentemente que el contraion con carga negativa BF4- de la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion, no forma ninguna estructura compleja con un ion metalico radiactivo, preferiblemente iones de tecnecio, de modo que el contenido de complejo esta por debajo del limite de deteccion por metodos de analisis.

[0020] Preferiblemente, en una sal de acuerdo con la invencion, la relacion molar de anion tetrafluoroborato al cation de fosfonio de la tetrofosmina esta en el intervalo de 2:1 a 1:1.

[0021] Preferiblemente, la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion tiene la siguiente formula (II):

imagen4

en donde x es un numero entre 1 y 2, mas preferiblemente 1 o 2.

[0022] Mas preferiblemente, la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion es una sal seleccionada de las siguientes formulas:

imagen5

o una mezcla de las mismas.

[0023] La forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion se obtiene por conversion quimica de la tetrofosmina con acido fluoroborico.

[0024] Por lo tanto, la presente invencion incluye tambien un procedimiento para obtener una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion, con las etapas de:

a) anadir acido fluoroborico (llamado tambien acido tetrafluoroborico, HBF4) a la tetrofosmina,

b) aislar una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion, de la mezcla de reaccion.

[0025] Preferiblemente, la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion se obtiene anadiendo acido fluoroborico (llamado tambien acido tetrafluoroborico; HBF4) despues de completarse la sintesis de la tetrofosmina o a la tetrofosmina disponible en el comercio.

[0026] La tetrofosmina se puede sintetizar en condiciones de sobrepresion y en atmosfera exenta de oxigeno de acuerdo con el documento EP 1824525 B1 (vease el ejemplo 1) o el documento EP 0337654 A2. La sintesis habitual implica hacer reaccionar eter de etilo y vinilo con 1,2-bis(fosfino)etano usando a-azoisobutironitrilo como un iniciador de radicales libres. La tetrofosmina tambien se puede obtener por sintesis quimica, tal como las descritas por Reid y col. (Synth. Appl. Isotop. Lab. Comp. 2006, 7, 252-255).

[0027] Cuando se anade el acido fluoroborico (HBF4), la tetrofosmina o una solucion que contiene tetrofosmina debe estar sustancialmente exenta de eteres de enol (como eteres de etilo y vinilo) para evitar reacciones secundarias. Por lo tanto, cuando se usa directamente tetrofosmina despues de la sintesis a partir de eter de etilo y

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vinilo con 1,2-bis(fosfino)etano, el exceso de eter de etilo y vinilo debe separarse, p. ej., por evaporacion.

Por la expresion “sustancialmente exento de eteres de enol” se entiende que el contenido del eter de enol en la tetrofosmina o una solucion que contiene tetrofosmina cuando se anade el tetrafluoroborato o acido fluoroborico, esta por debajo del limite de deteccion por metodos de analisis, preferiblemente por debajo de 1 por ciento, mas preferiblemente 0,1 por ciento en peso de la tetrofosmina y por lo tanto no se pueden excluir cantidades en trazas de contaminantes de eter de enol.

[0028] Alternativamente, una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion, se puede obtener cuando se anade un acido fuerte (p. ej., HCl) a la tetrofosmina o una solucion que contiene tetrofosmina. Posteriormente se puede anadir una sal de tetrafluoroborato (p. ej., tetrafluoroborato sodico), y viceversa.

[0029] Preferiblemente, el HBF4 se anade en forma de una solucion acuosa de HBF4 o alternativamente una solucion organica de HBF4. Preferiblemente, la solucion organica comprende eter como disolvente, mas preferiblemente eter de alquilo, tal como eter dietilico.

[0030] Si se anade una solucion de HBF4 a la tetrofosmina pura, la sal de tetrafluoroborato de bis-fosfonio de acuerdo con la invencion se puede extraer de esta solucion con rendimiento alto, preferiblemente >80 %, y con alta pureza.

[0031] En el procedimiento de acuerdo con la invencion, se usa una solucion de HBF4 como reaccionante que contiene boro (B) y fluor (F). La concentracion de la solucion de HBF4 usada en el presente documento no parece que sea critica. Preferiblemente, la solucion de HBF4 usada comprende al menos 30 por ciento, mas preferiblemente al menos 40 por ciento y hasta 50 por ciento en peso de HBF4.

[0032] Es particularmente sorprendente el descubrimiento de que la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion es soluble en disolventes organicos (p. ej., cloruro de metileno, cloroformo y metiletilcetona), lo que permite el enriquecimiento selectivo de la forma estabilizada de tetrofosmina como una sal en la fase organica.

Por ejemplo, la tetrofosmina (p. ej., obtenida por sintesis quimica) se disuelve practicamente primero en un disolvente organico, preferiblemente un disolvente organico aprotico (p. ej., cloruro de metileno, cloroformo o metiletilcetona) y se anade una solucion acuosa de HBF4 a la solucion con agitacion energica. Despues de un tiempo de reaccion corto, preferiblemente menos de 10 minutos, la reaccion da una conversion sustancialmente cuantitativa, de modo que la fase organica que contiene la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion se puede separar de la mezcla de reaccion y el disolvente organico se separa por evaporacion. Posteriormente, el producto se seca con vacio.

Ventajosamente, la forma estabilizada de tetrofosmina tiene una pureza de mas de 96 %, en particular mas de 99 %, lo que la hace directamente adecuada para uso farmaceutico. No es necesaria purificacion.

[0033] La forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion, que preferiblemente esta en la forma protonada, ventajosamente es estable cuando se almacena al aire a temperatura ambiente, al menos durante varios meses, preferiblemente al menos durante un ano.

[0034] La estabilizacion de la tetrofosmina de acuerdo con la invencion por adicion de HBF4 tiene, por lo tanto, la ventaja de que se puede llevar a cabo la fabricacion de un kit con cualquiera de las sales estabilizadas en condiciones de BPF normales, p. ej., flujo de aire laminar. Ademas, la tetrofosmina estabilizada como principio activo farmaceutico se puede almacenar durante tiempo prolongado y manipular sin degradacion, ventajosamente a temperatura ambiente y en presencia de aire-oxigeno. Como se usa en el presente documento, la expresion “temperatura ambiente” se refiere a una temperatura de 15 °C a 30 °C, mas preferiblemente 20 ± 5 °C.

[0035] Donde en lo que antecede y en lo sucesivo se hace referencia a documentos, estos se incorporan en la medida en que sean necesarios.

Los terminos generales usados en el presente documento antes y en el presente documento mas adelante tienen los significados dados en el presente documento mas adelante.

[0036] El objeto de la invencion es tambien un kit no radiactivo para la preparacion de una composicion radiofarmaceutica, que comprende al menos un envase, en donde un envase contiene:

(i) una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion.

[0037] Preferiblemente, el kit comprende uno o varios ingredientes adicionales seleccionados de:

(ii) agente reductor, preferiblemente una sal de estano (II),

(iii) ligando de transferencia, tal como gluconato y/o sulfosalicilato,

(iv) conservante,

(v) agentes para ajustar el pH, tales como sales de hidrogenocarbonato o de fosfato, y

(vi) cargas.

Mientras que los componentes (i) a (iii) estan preferiblemente comprendidos en el kit, los componentes (iv) a (vi) lo estan opcionalmente.

[0038] El kit preferiblemente comprende la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion en forma de polvo, mas preferiblemente en una forma en polvo liofilizado.

A diferencia de kits previamente conocidos que contenian tetrofosmina en forma liofilizada, tal como se describe en los documentos EP 0337654 A2 o EP 1824525 B1, un kit no radiactivo de acuerdo con la invencion se puede almacenar a temperatura ambiente durante al menos 52 semanas sin degradacion, dando como resultado

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ventajosamente un procedimiento de fabricacion del kit mas economico) p. ej., tamano de lote mayor) minimizacion de los costes de transporte y almacenamiento.

[0039] Preferiblemente, la forma estabilizada de tetrofosmina en el kit no radiactivo es la forma protonada, como se representa en la formula (II):

imagen6

(II)

con x como se ha definido antes.

[0040] En la presente invencion, el kit preferiblemente comprende un envase esteril. Los envases esteriles permiten mantener la esterilidad de las formulaciones farmaceuticas, facilitan el transporte y almacenamiento, y permiten la administracion (p. ej., intravenosa) de las formulaciones farmaceuticas sin etapa de esterilizacion previa. Preferiblemente, el envase es un envase esterilizado y sellado seleccionado del grupo que comprende vial, frasco de jeringa o ampolla, en donde el envase puede venir en diferentes tamanos y capacidades. Por ejemplo, el envase puede comprender entre 1 y 50 ml, preferiblemente entre 5 y 25 ml, mas preferiblemente entre 10 y 20 ml de la composicion farmaceutica.

[0041] Preferiblemente, la formulacion de un kit no radiactivo se produce mezclando todos los ingredientes en una solucion acuosa. La formulacion despues se puede esterilizar por filtracion, p. ej., a traves de un filtro esteril de 0,2 pm. La formulacion preferiblemente se carga en envases esteriles. Los envases posteriormente se sellan y opcionalmente se liofilizan. Esto se lleva a cabo preferiblemente sellando primero parcialmente los envases, seguido de liofilizacion y posteriormente sellado y tapado.

Cuando se anade la solucion de pertecnetato al kit no radiactivo de acuerdo con la invencion, se forma el complejo de 99mTc-tetrofosmina deseado con alto rendimiento (>90 %) en 15 minutos a temperatura ambiente. Cuando se almacena a temperatura ambiente tiene una vida en anaquel utilizable de al menos 6 horas, mas preferiblemente de 12 horas o mas.

[0042] Un “agente reductor” es un agente de reduccion, que es adecuado para reducir el tecnecio que esta en un estado de oxidacion alto (p. ej., pertecnetato Tc(VII)), a estados de oxidacion menores del tecnecio, que se usa para estudios in vivo. Para asegurar que todo el pertecnetato se convierte a un estado de oxidacion inferior, preferiblemente, en un kit de acuerdo con la invencion, un agente reductor esta en un exceso molar respecto al compuesto de 99mTc. Los agentes reductores adecuados se seleccionan del grupo que ditionito sodico, bisulfito sodico, acido ascorbico, acido sulfinico de formamidina, estano, hierro (II) o cobre (I). Preferiblemente, un agente reductor potente comprende preferiblemente iones estannoso, estano metalico o una aleacion de los mismos. Preferiblemente, un kit comprende iones en forma de estano (II), en donde las sales de estano (II) se seleccionan preferiblemente de cloruro estannoso dihidrato y tartrato estannoso.

Preferiblemente, la fraccion en masa del agente reductor usada en los kits no radiactivos de la presente invencion esta adecuadamente entre 1 a 15 % (p/p), mas preferiblemente entre 4 a 10 % (p/p) basado en el peso total de la forma estabilizada de tetrofosmina.

[0043] La fraccion en masa se define en el presente documento como el peso de un componente solido (p) por peso del peso total de la forma estabilizada de tetrofosmina (p) en un kit de dosis para el paciente de una sola unidad o multiples unidades. La fraccion en masa es independiente del contenido de una carga o agente para ajustar el pH.

[0044] Un “ligando de transferencia” es un compuesto de quelacion auxiliar que reacciona rapidamente con el tecnecio o pertecnetato para formar un complejo debil, en el que el ligando de transferencia puede ser desplazado por la tetrofosmina. Tambien se denominan transqueladores o ligandos intermedios. La presencia de un ligando de transferencia minimiza el riesgo de formacion de tecnecio hidrolizado reducido (RHT) debido a la rapida reduccion del pertecnetato que compite con la complejacion del tecnecio. Dichos ligandos de transferencia adecuados son sales de acidos organicos con un cation biocompatible, preferiblemente “acidos organicos debiles” que tienen un pKa en el intervalo de 3 a 7. Los acidos organicos debiles adecuados se seleccionan de acido acetico, acido citrico, acido tartarico, acido gluconico, acido glucoheptonico, acido benzoico, fenoles o acidos fosfonicos. Por lo tanto, las sales adecuadas son acetatos, citratos, tartratos, gluconatos, glucohpetonatos, benzoatos, fenolatos o fosfonatos. Dichas sales preferidas son tartratos, gluconatos, glucoheptnatos, benzoatos. Lo mas preferiblemente, un ligando de

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transferencia es una sal de acido gluconico, con un cation biocompatible, en especial gluconato sodico. Los ligandos de transferencia preferidos adicionales se seleccionan del acido dimercaptosuccmico, oxima de hexametilpropilenamina, mercaptoacetiltriglicina, acido 5-sulfosalicflico o sales de los mismos con cationes biocompatibles. Se pueden usar dos o mas ligandos de transferencia en combinacion, y los kits de tetrofosmina de la presente invencion comprenden lo mas preferiblemente una combinacion de acido 2-hidroxi-5-sulfo-benzoico, sal disodica, trihidrato (5-sulfosalicilato disodico) y gluconato sodico.

[0045] Preferiblemente, la fraccion en masa de los ligandos de transferencia usados en los kits no radiactivos de la presente invencion esta adecuadamente entre 10 a 600 % (p/p), mas preferiblemente entre 50 a 500 % (p/p), lo mas preferiblemente entre 50 a 300 % (p/p), basado en el peso total de la forma estabilizada de tetrofosmina.

[0046] Como se ha explicado antes, la reaccion de marcaje para formar un complejo de tecnecio se puede llevar a cabo en condiciones acidas, preferiblemente por encima de pH 4. Por lo tanto, no es necesario un agente para ajustar el pH en el kit. En este caso, el complejo de tecnecio-tetrofosmina se forma con pertecnetato (([99mTc]TcO4-) en condiciones de pH acido (pH de 7,0 o menos), preferiblemente en un intervalo de pH entre pH 2,0 y 6,0, mas preferiblemente entre 3,0 y 5,0. Esta solucion acida en general es aceptable para la administracion a seres humanos o mamfferos.

[0047] No obstante, el kit no radiactivo de acuerdo con la invencion comprende preferiblemente un agente para ajustar el pH, para ajustar el pH de la composicion radiofarmaceutica dentro de intervalos preferidos (aproximadamente de pH 4,0 a 10,0), mas preferiblemente mas cerca de o dentro del intervalo de pH fisiologico, lo que se prefiere para la administracion a seres humanos o mamfferos, y esta entre pH 6 y 9,5, preferiblemente entre 7,5 y 9,0. Preferiblemente, los agentes para ajustar el pH o agente reguladores del pH comprenden soluciones esteriles o polvos esteriles de las sales.

[0048] El agente para ajustar el pH preferiblemente comprende un miembro seleccionado del grupo que consiste en tampones o agentes para ajustar el pH farmaceuticamente aceptables, tales como citrato, hidrogenocarbonatos y/o carbonatos de sodio, hidrogenofosfatos, TRIS, tricina o mezclas de los mismos. Un agente preferido para ajustar el pH para los kits de acuerdo con la invencion es una sal de acido carbonico, como carbonato o hidrogenocarbonato, mas preferiblemente hidrogenocarbonato sodico (NaHCO3).

[0049] En el caso de que el kit no radiactivo de acuerdo con la invencion comprenda un tampon o agente para ajustar el pH, el tampon o agente para ajustar el pH preferiblemente no esta en el mismo envase que la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion. Por lo tanto, para el marcaje con tecnecio, primero la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion mezclada con ingredientes adicionales se disuelve anadiendo una solucion del tampon o un agente para ajustar el pH. Posteriormente, se anade la solucion de pertecnetato para formar el complejo de tecnecio-tetrofosmina. Igualmente, el tampon o agente de ajuste del pH opcional se puede anadir a la composicion radiofarmaceutica despues de terminar el procedimiento de radiomarcaje.

[0050] El termino “carga” como se usa en el presente documento se refiere a un agente de carga farmaceuticamente aceptable, que puede facilitar la manipulacion durante la produccion de un kit o una composicion radiofarmaceutica del mismo. Las cargas adecuadas incluyen sales inorganicas tales como cloruro sodico, y azucares solubles en agua o alcoholes de azucares tales como sacarosa, maltosa, D(-)-manitol o trehalosa. Algunas sales de tampones o agentes para ajustar el pH tambien pueden funcionar como agentes de carga.

[0051] La fraccion en masa de la carga usada en los kits no radiactivos de la presente invencion se elige libremente, pero esta tfpicamente en el intervalo entre 1 a 30 mg, mas preferiblemente entre 5 a 25 mg basado en el peso total de la forma de la tetrofosmina estabilizada.

[0052] Ademas, si se desea o es necesario, el kit no radiactivo de la presente invencion contiene ademas opcionalmente conservantes farmaceuticamente aceptables para prevenir la descomposicion de materia organica, p. ej., debido a la contaminacion microbiana, de modo que la formulacion de los productos de un kit se puede almacenar durante periodos de tiempo largos.

[0053] Los conservantes se seleccionan preferiblemente del grupo que consiste en acido ascorbico, alcohol bencflico, cresol; cetrimida, tiomersal, fenol y los parabenos (p. ej., metil, etil, propil o butil-parabeno o mezclas de los mismos).

[0054] Preferiblemente un kit de acuerdo con la invencion comprende al menos un envase.

En un kit no radiactivo preferido particular el envase contiene:

(i) una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la formula (I), preferiblemente la sal de tetrafluoroborato de tetrofosmina de acuerdo con la formula (II),

(ii) un agente reductor, preferiblemente una sal de estano (II),

(iii) uno o mas ligandos de transferencia, preferiblemente gluconato y sulfosalicilato

(iv) opcionalmente una carga, preferiblemente D(-)-manitol.

[0055] En este caso, un kit no radiactivo preferiblemente contiene solo un envase,

en el que todos los componentes contenidos en el mismo, estan disponibles en forma solida, y

en el que el complejo de tecnecio preferiblemente se forma disolviendo el contenido del envase con una solucion de

pertecnetato.

[0056] En una realizacion particularmente preferida de la invencion, el kit no radiactivo comprende:

1) un primer envase que contiene:

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(i) una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion, preferiblemente la sal de tetrafluoroborato de tetrofosmina de acuerdo con la formula (II),

(ii) un agente reductor, preferiblemente una sal de estano (II),

(iv) opcionalmente una carga, preferiblemente D(-)-manitol.

2) un segundo envase que comprende:

(i) un tampon o agente para ajustar el pH, preferiblemente una sal de acido carbonico, como carbonato o hidrogenocarbonato (como polvo o solucion).

[0057] En este caso, el complejo de tecnecio preferiblemente se forma por adicion primero al primer envase del contenido del segundo envase, liberando asi el ligando de tetrofosmina libre. En el caso de un tampon o agente de ajuste del pH en polvo, se anade un diluyente que comprende agua, preferiblemente agua para inyecciones o una solucion salina (solucion esteril de cloruro sodico) al segundo vial antes de anadir el contenido al primer vial. Posteriormente, se anade la solucion de pertecnetato a la mezcla del primer y segundo vial, dando como resultado la formacion de una formulacion farmaceutica para la administracion intravenosa.

[0058] Alternativamente, el complejo de tecnecio se forma anadiendo la solucion de pertecnetato al primer envase e inmediatamente o despues de terminar el marcaje, se transfiere el contenido del segundo envase al primer envase.

[0059] En otra realizacion preferida de la invencion, el kit no radiactivo comprende:

1) un primer envase que contiene:

(ii) opcionalmente una carga, preferiblemente D(-)-manitol.

2) un segundo envase que comprende:

(i) un agente reductor, preferiblemente una sal de estano (II),

(ii) uno o mas ligandos de transferencia, preferiblemente gluconato y sulfosalicilato

(iii) un agente para ajustar el pH, preferiblemente hidrogenocarbonato.

[0060] De nuevo, el complejo de tecnecio se forma preferiblemente mezclando primero el contenido del primer envase y el segundo envase despues de la adicion de un diluyente biocompatible que comprende agua, preferiblemente agua para inyecciones o una solucion salina (solucion salina esteril de cloruro sodico), seguido de la adicion de solucion de pertecnetato, dando como resultado la formacion de una formulacion farmaceutica para administracion intravenosa.

[0061] Alternativamente, el complejo de tecnecio se forma anadiendo la solucion de pertecnetato al segundo envase y posteriormente transfiriendo el contenido del segundo envase al primer envase. Igualmente, el complejo de tecnecio se forma por adicion de la solucion de pertecnetato al primer envase y posteriormente transfiriendo el contenido del primer envase al segundo envase.

[0062] El kit no radiactivo de acuerdo con la invencion se puede formular como un kit de una sola dosis o kit de multiples dosis. Preferiblemente, el kit es un kit de multiples dosis, que comprende suficiente material para multiples dosis para el paciente de la misma composicion radiofarmaceutica.

[0063] Como se ha descrito antes el kit de multiples dosis comprende al menos un envase, preferiblemente uno o dos envases diferentes. Preferiblemente al menos un envase contiene la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion en una cantidad suficiente, de modo que se pueden obtener preferiblemente de 2 a 20 dosis unitarias individuales para el paciente de una composicion radiofarmaceutica, que comprende el complejo de 99mTc-tetrofosmina.

[0064] Ventajosamente, debido a la vida en anaquel util del complejo de 99mTc-tetrofosmina de al menos 6 horas, mas preferiblemente al menos 12 horas, cuando se anade la solucion de pertecnetato al kit de multiples dosis unitarias para pacientes, se puede preparar una composicion radiofarmaceutica en una base centralizada, distribuir a clinicas y posteriormente aplicar a pacientes, que reflejan una situacion clinica tipica.

[0065] La invencion comprende tambien el uso de una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion o un kit de acuerdo con la invencion, para la fabricacion de un complejo de tetrofosmina con un metal

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radiactivo, preferiblemente tecnecio.

[0066] Preferiblemente, el complejo de tetrofosmina-tecnecio tiene la siguiente formula:

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[0067] En otro aspecto, un asunto de acuerdo con la invencion es proporcionar una composicion radiofarmaceutica que comprende:

1. una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion,

2. un complejo de tetrofosmina-tecnecio en un diluyente biocompatible que comprende agua, preferiblemente una solucion salina,

en donde el complejo de tetrofosmina marcado con 99mTc en la composicion radiofarmaceutica comprende una concentracion radiactiva en el intervalo entre 0,05 y 10,0 GBq/ml, mas preferiblemente entre 0,1 y 3,0 GBq/ml.

La concentracion radiactiva se define como la radiactividad del tecnecio-99m (GBq) por volumen del diluyente (biocompatible) (ml), que comprende el complejo de tetrofosmina-tecnecio.

[0068] La expresion “composicion radiofarmaceutica” tiene su significado convencional, y describe en el presente documento un farmaco radiactivo, que se forma cuando se mezcla el contenido de un kit no radiactivo de acuerdo con la invencion con una solucion de pertecnetato. Las composiciones radiofarmaceuticas son adecuadas para la administracion intravenosa al mamifero, en especial el cuerpo humano, y preferiblemente se pueden usar para la imagenologia de diagnostico o radioterapia, mas preferiblemente para la imagenologia de diagnostico.

[0069] Preferiblemente, los kits de acuerdo con la invencion se usan para la preparacion de radiofarmacos de 9mTc, en los que el complejo del metal radiactivo (preferiblemente 99mTc-tetrofosmina) se forma, preferiblemente en la clinica, por adicion de una solucion de pertecnetato a uno de los envases. Ventajosamente, estos kits permiten al usuario mantener existencias de envases no radiactivos y esteriles, que contienen los ligandos necesarios en forma de una sal termoestable.

[0070] Sorprendentemente, se ha encontrado que en un kit que contiene una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la invencion, el complejo del metal radiactivo (preferiblemente 99mTc-tetrofosmina) se forma rapidamente con alto rendimiento radioquimico cuando se pone en contacto con una solucion que contiene un metal radiactivo, preferiblemente una solucion de pertecnetato.

[0071] Preferiblemente, la solucion de pertecnetato es una solucion acuosa isotonica de pertecnetato [99mTcO4]-, p. ej., el eluyente de un generador de tecnecio.

[0072] El contenido radiactivo de 99mTc-pertecnetato en una solucion de pertecnetato que se va a usar para la adicion a los componentes contenidos en un kit no radiactivo de acuerdo con la invencion, es adecuadamente de hasta 20 GBq, preferiblemente de 5 a 15 GBq.

[0073] El complejo de metal radiactivo preferiblemente se forma a temperatura ambiente, cuando se usa preferiblemente un ligando de transferencia gluconato, en el que la formacion del complejo deseado de 99mTc- tetrofosmina normalmente se completa en un tiempo de complejacion de 15 minutos.

La invencion tambien comprende el uso medico de la forma estabilizada de tetrofosmina o kit de acuerdo con la invencion, en particular en un metodo de diagnostico del corazon, por administracion de (una dosis adecuada de) el complejo de metal radiactivo de tetrofosmina (preferiblemente 99mTc-tetrofosmina) a un paciente. La administracion intravenosa del complejo de metal radiactivo preferiblemente conduce a una rapida absorcion miocardica del complejo de metal radiactivo, y eliminaciones rapidas de la sangre, higado y pulmon, de modo que el complejo de metal radiactivo se puede usar para la imagenologia de diagnostico radiofarmaceutica adecuada para la imagenologia del corazon in vivo. Cuando se administran inyecciones en reposo y en tension el mismo dia, un kit de acuerdo con la invencion preferiblemente comprende suficiente material para multiples dosis para el paciente.

[0074] La invencion se ilustra mediante los siguientes ejemplos y figuras sin representar una restriccion del alcance de la proteccion definida en las reivindicaciones.

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Advertencia: Debido a la radiacion del isotopo nuclear 99mTc, deben tomarse medidas de proteccion, cuando se manipulan los compuestos de 99mTc.

Fig. 1: Espectro de RMN 1H de tetrofosmina x 2 HBF4.

Fig. 2: Cromatograma de TLC (cromatografia en capa fina) de la tetrofosmina marcada con 99mTc usando un kit no radiactivo que comprende un envase y D-(-)-manitol como carga.

Fig. 3: Cromatograma de TLC (cromatografia en capa fina) de la tetrofosmina marcada con 99mTc usando un kit no radiactivo que comprende dos envases.

Fig. 4: Cromatograma de TLC (cromatografia en capa fina) de la tetrofosmina marcada con 99mTc usando un kit no radiactivo que comprende dos envases y D-(-)-manitol como carga.

Ejemplo 1. Sintesis de la sal de tetrafluoroborato de la tetrofosmina (tetrofosmina x 2 HBF4)

[0075] En una atmosfera de N2 un recipiente de autoclave se carga con 1 g (10,5 mmol) de 1,2-bisfosfinoetano, 7 ml de eter de etilo y vinilo (72,3 mmol) y 19,6 mg (0,12 mmol) de azobisisobutironitrilo (AIBN). La mezcla de reaccion se agita en un bano de aceite a una temperatura de 75 0C a 80 0C durante 3 horas. La mezcla de reaccion despues se transfiere a un matraz de dos bocas. El eter se separa en una corriente de N2. Posteriormente, se anaden 30 ml de cloruro de metileno y 3,0 ml de solucion acuosa de HBF4 8 N (mol/l) con agitacion energica. Se separa la fase organica y el disolvente se separa con un rotavapor. El aceite incoloro transparente que queda se seca mas durante la noche con vacio. Rendimiento: 5,268 g (89,9 %) de solido blanco.

[0076] Como se muestra mas adelante, la tetrofosmina estabilizada x 2 HBF4 se analizo por RMN de 1H, 31P y 19F asi como por analisis elementales. El espectro de RMN 1H de la tetrofosmina x 2 HBF4 se representa en la figura 1. RMN 31P (ppm, CDCh): 16,92 (s); 16,93 (s)

RMN 1H (ppm, CDCls): 1,17 (t, J = 7,2 Hz, 12 H, CH 3), 2,76 (m, 12 H, PCH 2), 3,53 (m, 8 H, OCH2), 3,77 (m, 8 H, OCH2), 6,23 (d, J = 503,6 Hz, 2 H, PH)

RMN 19F (ppm, CDCls): 150,2 (m)

Analisis elemental: encontrado (calc.): C 39,0 % (38,7 %)

H 7,69 % (7,59 %)

[0077] La tetrofosmina x 2 HBF4 se caracterizo por tener una pureza superior a 99 % (qRMN 1H con dimetil-acido malonico como referencia interna), lo que la hace directamente adecuada para uso farmaceutico sin necesidad de purificacion adicional.

Ejemplo 2. Estabilidad de la sal de tetrafluoroborato de tetrofosmina

[0078] La tetrofosmina x 2 HBF4 se almaceno a temperatura ambiente sin gas protector (p. ej., argon o nitrogeno). De acuerdo con el ejemplo 1, los espectros de 1H y 31P no habian cambiado despues de 12 meses.

[0079] Ademas, la tetrofosmina x 2 HBF4 se calento en una atmosfera normal (con oxigeno) a 50 °C durante 6 horas. Los espectros de 1H y 31P no mostraron signos de degradacion.

[0080] Se almaceno un vial abierto de tetrofosmina x 2 HBF4 a temperatura ambiente, atmosfera normal y 50 % de humedad. Despues de 72 h no se observo cambio de peso indicando la naturaleza no higroscopica del compuesto.

Ejemplo 3 - Formulacion de kit de un vial con sal de tetrafluoroborato de tetrofosmina

[0081] La tetrofosmina x 2 HBF4 se marca usando un kit que comprende la siguiente composicion:

0,34 mg tetrofosmina x 2 HBF4 0,32 mg sulfosalicilato disodico

1,0 mg D-gluconato sodico 20 mg D-(-)-manitol 0,03 mg SnCl2 x 2 H2O

[0082] El kit se marca en aproximadamente 3,5 ml de eluato de pertecnetato con 99mTc 300 MBq a pH 4-5 y temperatura ambiente. La mezcla se agito suavemente hasta completa disolucion del polvo. La solucion se dejo durante 15 min. Se llevo a cabo la radio-TLC (cromatografia en capa fina) con acido silicico (ITLC-SA) usando una mezcla de disolventes de acetona y diclorometano (65:35 v/v). Cada componente (pico) se caracteriza por los valores de frente relativos (Rf), que se definen como la relacion de la posicion del componente [mm] respecto a la distancia total recorrida por el frente del disolvente.

[0083] La TLC puso de manifiesto un rendimiento radioquimico de 95,7 % de un complejo de 99mTc-tetrofosmina y una pureza de 96,1 % despues de 6 horas a temperatura ambiente. Solo se detectan cantidades en trazas de

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pertecnetato. El correspondiente cromatograma de TLC (cromatografia en capa fina) de la tetrofosmina marcada con 9mTc se muestra en la figura 2.

Ejemplo 4 - Formulacion de kit de dos vial con sal de tetrafluoroborato de tetrofosmina

[0084] La tetrofosmina x 2 HBF4 se marca usando un kit que comprende dos viales, que tienen la siguiente composicion:

Vial I 0,34 mg tetrofosmina x 2 HBF4

0,32 mg sulfosalicilato disodico

1.0 mg D-gluconato sodico 0,03 mg SnCl2 x 2 H2O

Vial II 3,6 mg/ml hidrogenocarbonato sodico (solucion salina)

[0085] El kit se marco anadiendo una parte alicuota de 0,5 ml del vial II (1,8 mg de NaHCO3) al vial I con una jeringa. El kit se agito suavemente hasta disolucion completa del polvo. Posteriormente, se anadieron 3,5 ml de eluato de pertecnetato con tecnecio-99m (450 MBq) dando como resultado un pH de 7-8. Despues de agitar de nuevo, la solucion se dejo durante 15 min. De acuerdo con el ejemplo 3, se llevo a cabo la radio-TLC con ITLC-SA/ acetona: diclorometano (65:35).

[0086] La TLC puso de manifiesto un rendimiento radioquimico de 93,2 % de un complejo de 99mTc-tetrofosmina y una pureza de 94,6 % despues de 6 horas a temperatura ambiente. El correspondiente cromatograma de TLC (cromatografia en capa fina) de la tetrofosmina marcada con 99mTc se muestra en la figura 3.

Ejemplo 5 - Formulacion de kit de dos viales con sal de tetrafluoroborato de tetrofosmina y carga

[0087] En una formulacion de kit especialmente preferida, el kit comprende dos viales, que comprenden la siguiente composicion:

Vial I 0,34 mg tetrofosmina x 2 HBF4

0,32 mg sulfosalicilato disodico

1.0 mg D-gluconato sodico 0,03 mg SnCl2 x 2 H2O

10.0 mg D-(-)-manitol

Vial II 9,0 mg/ml hidrogenocarbonato sodico (solucion salina)

El kit se marco anadiendo una parte alicuota de 0,5 ml del vial II (4,5 mg de NaHCOs) al vial I con una jeringa. El kit se agito suavemente hasta disolucion completa del polvo. Posteriormente, se anadieron 3,5 ml de eluato de pertecnetato con tecnecio-99m (3 o 10,5 GBq, respectivamente) dando como resultado un pH de aproximadamente 8. Despues de agitar de nuevo, la solucion se dejo durante 15 min. De acuerdo con el ejemplo 3, se llevo a cabo la radio-TLC con ITLC-SA/ acetona: diclorometano (65:35).

[0088] La TLC puso de manifiesto los rendimientos radioquimicos de las respectivas muestras que formaban el complejo de 99mTc-tetrofosmina (x=2) despues de 15 min, 30 min y 6 horas a temperatura ambiente.

: Concentracion de radiactividad

3 GBq / 4 ml: 10,5 GBq / 4ml

t0 (15 min):: 92,7 % 93,2 %

t = 30 min: 96,2 % 96,2 %

t = 6 h: 97,9 % 97,8 %

[0089] En la figura 4 se muestra un cromatograma de TLC (cromatografia en capa fina) de ejemplo de la tetrofosmina marcada con 99mTc.

Ejemplo 6. Comparacion de la formulacion de kit de marcado con Tc-99m que contiene sal de tetrafluoroborato de tetrofosmina con una formulacion de kit que contiene tetrofosmina no estabilizada

[0090] Se determino la biodistribucion despues del marcaje con tenecio-99m de diferentes formulaciones que contenian tetrofosmina estabilizada o no. Se inyectaron por via intravenosa partes alicuotas de cada solucion en una vena de la cola de ratas macho Wistar. La biodistribucion se determino a los 2 min, 60 min y 24 g p.i. (4 animales en cada punto de medicion). Las siguientes tablas ponen de manifiesto que el patron de biodistribucion es esencialmente el mismo en las tres formulaciones ensayadas. Por lo tanto, se formo el complejo de tecnecio-99m- tetrofosmina identico igualmente a partir de tetrofosmina estabilizada o no estabilizada.

Formulacion de kit marcado con tecnecio-99m con tetrofosmina no estabilizada - Myoview™

[0091] El producto disponible en el comercio Myoview™ (GE Healthcare) se uso como un ejemplo comparativo:

organo: 2 min 60 min 24 h

% ID/ organo: Des. est. % ID/ organo Des. est. % ID/ organo Des. est.

sangre: 0,14 0,131 0,017 0,006 0,001 0,001

cerebro: 0,04 0,034 0,021 0,006 0,003 0,001

pancreas: 0,30 0,273 0,301 0,118 0,018 0,010

bazo: 0,31 0,269 0,157 0,052 0,007 0,001

rinon: 7,58 1,011 2,972 2,053 0,074 0,007

grasa: 0,03 0,029 0,040 0,017 0,001 0,001

musculo: 0,22 0,199 0,227 0,125 0,170 0,038

corazon: 1,64 0,101 1,044 0,514 0,139 0,022

pulmon: 0,79 0,080 0,241 0,516 0,024 0,008

tiroides: 0,09 0,078 0,065 0,018 0,030 0,004

higado: 11,44 1,642 2,397 0,432 0,201 0,002

estomago: 1,19 1,324 0,723 0,353 5,162 6,451

intestino delgado: 9,49 8,044 26,264 14,279 3,498 1,294

intestino grueso: 0,39 0,341 0,478 0,251 0,124 0,016

heces: 0,42 0,500 0,681 0,402 1,045 0,469

orina: 0,20 0,329 5,130 4,219 0,031 0,017

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Formulacion de kit de marcado con tecnecio-99m de acuerdo con el ejemplo 4:

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organo: 2 min 60 min 24 h

% ID/ organo: Des. est. % ID/ organo Des. est. % ID/ organo Des. est.

sangre: 0,24 0,092 0,022 0,007 0,002 0,000

cerebro: 0,05 0,005 0,020 0,003 0,004 0,000

pancreas: 0,60 0,113 0,352 0,084 0,018 0,010

bazo: 0,35 0,093 0,257 0,032 0,014 0,003

rinon: 6,22 0,896 1,701 0,091 0,098 0,010

grasa: 0,07 0,038 0,041 0,011 0,006 0,005

musculo: 0,24 0,006 0,230 0,105 0,191 0,105

corazon: 1,46 0,196 1,302 0,104 0,177 0,069

pulmon: 0,51 0,075 0,285 0,582 0,026 0,013

tiroides: 0,10 0,002 0,063 0,024 0,032 0,011

higado: 17,81 1,416 6,117 1,727 0,435 0,055

estomago: 1,16 0,259 0,983 0,316 0,104 0,025

intestino delgado: 13,75 1,929 28,599 0,310 2,750 0,516

intestino grueso: 0,64 0,082 0,512 0,055 0,179 0,034

heces: 0,40 0,141 0,654 0,131 1,356 1,066

orina: 0,61 0,798 11,314 1,863

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Formulacion de kit de marcado con tecnecio-99m de acuerdo con el ejemplo 5:

organo: 2 min 60 min 24 h

% ID/ organo: Des. est. % ID/ organo Des. est. % ID/ organo Des. est.

sangre: 0,14 0,060 0,028 0,018 0,002 0,000

cerebro: 0,05 0,007 0,028 0,007 0,005 0,002

pancreas: 0,47 0,105 0,413 0,016 0,025 0,010

bazo: 0,40 0,057 0,301 0,083 0,022 0,004

rinon: 3,05 1,827 5,816 0,978 0,098 0,003

grasa: 0,05 0,029 0,041 0,024 0,003 0,001

musculo: 0,37 0,167 0,404 0,261 0,245 0,013

corazon: 1,74 0,146 1,634 0,315 0,279 0,047

pulmon: 0,97 0,547 0,372 0,750 0,024 0,010

tiroides: 0,10 0,014 0,089 0,019 0,025 0,011

higado: 18,31 5,309 6,320 2,521 0,532 0,035

estomago: 1,07 0,028 1,573 0,469 0,104 0,021

intestino delgado: 14,61 1,106 28,227 5,763 2,337 0,305

intestino grueso: 0,65 0,047 0,664 0,155 0,183 0,010

heces: 0,53 0,254 0,414 0,120 0,801 0,631

orina: 0,06 0,012 5,752 5,423

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REIVINDICACIONES

1. Una forma estabilizada de tetrofosmina representada por la formula general (I):

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en donde R es H o un resto alquilo de C1 a C3 opcionalmente sustituido y/o ramificado y x es un numero entre 1 y 2.
2. Una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la reivindicacion 1, con la formula (II)

imagen2

en donde x es un numero entre 1 y 2
3. Un kit no radiactivo que comprende al menos un envase, en el que un envase contiene una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la reivindicacion 1 o 2.
4. El kit no radiactivo de acuerdo con la reivindicacion 3, en el que el kit comprende adicionalmente uno o mas de lo siguiente:

(i) agente reductor,

(ii) ligando de transferencia,

(iii) conservante,

(iv) agente para ajustar el pH y

(v) cargas.
5. El kit no radiactivo de acuerdo con la reivindicacion 3 o 4, en el que el envase es un vial sellado y esterilizado, frasco de jeringa o ampolla.
6. El kit no radiactivo de acuerdo con una de las reivindicaciones 3 a 5, en el que el periodo de almacenamiento del kit no radiactivo a temperatura ambiente es al menos 52 semanas.
7. El kit no radiactivo de acuerdo con una de las reivindicaciones 3 a 6, en el que el agente reductor es una sal de estano (II).
8. El kit no radiactivo de acuerdo con una de las reivindicaciones 3 a 7, en el que el ligando de transferencia es gluconato y/o sulfosalicilato.
9. El kit no radiactivo de acuerdo con una de las reivindicaciones 3 a 8, en el que el agente para ajustar el pH es una sal de hidrogenocarbonato y/o de fosfato.
10. Uso de una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la reivindicacion 1 o 2, en un kit no radiactivo de dosis de pacientes de multiples unidades.
11. Uso de una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la reivindicacion 1 o 2, o kit de acuerdo con una de las reivindicaciones 3 a 9, para la fabricacion de un complejo de tetrofosmina con un ion de metal radiactivo, preferiblemente tecnecio.
12. Metodo de fabricacion de una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la reivindicacion 1 o 2, que

comprende las siguientes etapas:

a. proporcionar tetrofosmina en forma disuelta,

b. anadir una solucion de acido tetrafluoroborico,

5 c. aislar una forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la reivindicacion 1.
13. Metodo de acuerdo con la reivindicacion 12, en el que la solucion de la etapa a, esta sustancialmente exenta de eteres de enol.

10 14. Metodo de acuerdo con la reivindicacion 12 o 13, en el que la tetrofosmina se disuelve en un disolvente organico

aprotico.
15. Metodo de acuerdo con una de las reivindicaciones 12 a 14, en el que la forma estabilizada de tetrofosmina de acuerdo con la reivindicacion 1 o 2, se seca por evaporacion.

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