ES2605957T3 - Uso cosmético de la dermicidina o fragmentos de ésta - Google Patents

Uso cosmético de la dermicidina o fragmentos de ésta Download PDF

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Abstract

Uso (i) de por lo menos una secuencia de aminoácidos codificada por una secuencia de ácidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID Nº: 1, SEC ID Nº: 2, SEC ID Nº: 3, SEC ID Nº: 4, SEC ID Nº: 5, SEC ID Nº: 6, SEC ID Nº: 7, SEC ID Nº: 8, SEC ID Nº: 9, SEC ID Nº: 10 o (ii) de dicha secuencia de ácidos nucleicos, como biomarcador de un estado de la piel madura y/o de los signos cutáneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutánea.

Description

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Uso cosmetico de la dermicidina o fragmentos de esta
[0001] La presente patente se refiere al dominio de los biomarcadores de la piel, y particularmente de la piel madura, asociada o no a una sequedad cutanea, y en su aplicacion como dianas o agentes activos cosmeticos.
[0002] La epidermis, parte superficial de la piel, es un tejido cuyas celulas estan juntas y unidas unas con otras y descansan sobre una membrana basal.
Esta forma un revestimiento externo que incluye glandulas sebaceas o sudoriparas y los foliculos pilosos.
[0003] Mas precisamente, la epidermis es una estructura cuya homeostasis resulta de la ejecucion de un conjunto finamente regulado de senales intracelulares y extracelulares que actuan en todas las etapas de la proliferacion, de la migracion, de la diferenciacion celular, asi como de la sintesis de diferentes componentes de la matriz extracelular.
Estas senales pueden, particularmente, resultar de la accion de factores producidos por los queratinocitos.
[0004] La epidermis se divide convencionalmente en un estrato basal de queratinocitos que contiene, particularmente, celulas madre cutaneas y que constituye el estrato germinativo de la epidermis, un estrato llamado espinoso constituido por varias capas de celulas poliedricas dispuestas sobre el estrato basal, un estrato llamado granuloso que comprende de una a tres capas dichas de celulas aplanadas con inclusiones citoplasmicas distintas, los granos de queratohialina, y finalmente, un conjunto de capas superiores, llamado capa cornea, o estrato corneo, constituido por queratinocitos en la fase terminal de su diferenciacion, llamados corneocitos.
[0005] La capa cornea, la parte mas externa de la piel que asegura la funcion barrera entre el organismo y el ambiente, y el tallo piloso, parte emergente del foliculo piloso que constituye el cabello, representan ambos la terminacion del proceso de diferenciacion de los queratinocitos.
La diferenciacion epidermica sigue un proceso de maduracion en el cual los queratinocitos del estrato basal se diferencian y migran para acabar en la formacion de los corneocitos, celulas muertas totalmente queratinizadas.
Esta diferenciacion es la resultante de fenomenos perfectamente coordinados que conduciran al mantenimiento de la homeostasis de la epidermis, y conferiran a la piel un aspecto sano, joven, luminoso y liso.
[0006] Con el envejecimiento, numerosas alteraciones fisiologicas de la piel, resultantes de una disfuncion de la homeostasis de la epidermis, y particularmente de una disfuncion de la diferenciacion epitelial de los queratinocitos y/o de la sintesis de los proteoglicanos, se producen.
[0007] Las alteraciones de la homeostasis de la epidermis que se producen con el envejecimiento se traducen principalmente en una disminucion de la diferenciacion de los queratinocitos que causa un deficit de la matriz proteica de las celulas corneas, en un aumento de las metaloproteasas y de su actividad de degradacion de la matriz extracelular, asi como en una disminucion de la sintesis de diferentes glicosaminoglicanos.
[0008] Durante el envejecimiento de la piel, estas alteraciones se traducen, habitualmente, en la aparicion de un microrrelieve de la piel mas marcado, incluso de arrugas y, al final, la aparicion de lineas de expresion profundas, una perdida de la elasticidad, un tacto rugoso y una sequedad cutanea.
En el plano histologico, se observa un aplastamiento de la union dermoepidermica y una disminucion del grosor de la dermis y de la epidermis.
[0009] Los trastornos de la hidratacion cutanea, y particularmente una sequedad cutanea, pueden ser ademas observados a menudo con la edad.
[0010] Por otra parte, muchos factores exteriores pueden reforzar ademas el desecamiento de la piel o agravar este estado.
Entre estos factores, se pueden citar las condiciones climaticas tales como el frio o el viento, los rayos solares, la exposicion a ciertos agentes quimicos o terapeuticos.
[0011] En el plano fisiologico, una piel seca esta a menudo asociada a una bajada de los indices de hidratacion cutanea y a una modification del proceso de maduracion del estrato corneo que tiene como signo mas visible la aparicion de escamillas en la superficie cutanea.
En el plano sensorial, una piel seca se puede caracterizar por una sensation de tirantez y/o de tension cutanea.
[0012] El contenido de colageno y de glicosaminoglicanos de la piel se ve igualmente disminuido y la funcion barrera de la piel madura puede verse alterada.
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[0013] Se sabe que muchos factores epidermicos, de los cuales la expresion, la actividad biologica o la maduracion son alterados, disminuidos o aumentados, estan implicados, directamente o indirectamente, en la produccion y la manifestation de la piel madura o de diferentes signos de envejecimiento cutaneo asociados, como la sequedad cutanea.
[0014] Estos factores se pueden utilizar como biomarcadores de la piel, como dianas de cribado, incluso como activos cosmeticos.
[0015] Por ejemplo, se conoce por el documento FR 2 924 946 el uso cosmetico y/o terapeutico de la ceramidasa acida, de polipeptidos derivados de esta proteina o de analogos de estos, de una secuencia nucleica que codifica un tal polipeptido o de un agente modulador de la expresion o de la actividad, biologica o bioquimica, de un tal polipeptido, para prevenir y/o tratar los signos del envejecimiento cutaneo, y como marcador para la valoracion de un estado de un epitelio.
[0016] Sin embargo, aun sigue habiendo numerosas incognitas en cuanto al mecanismo interno y en cuanto al conjunto de los factores implicados en el envejecimiento de la piel, asociado o no a una deshidratacion.
[0017] Asi, sigue habiendo una necesidad de identificar nuevos biomarcadores de la piel y, particularmente, que sean aptos para caracterizar una piel madura o signos del envejecimiento cutaneo, en particular una piel madura y seca o signos de sequedad cutanea asociados a una piel madura.
[0018] Existe igualmente una necesidad de disponer de nuevos biomarcadores que permitan caracterizar un estado de la piel y, en particular, una piel madura o signos del envejecimiento cutaneo, en particular una piel madura y seca o signos de sequedad cutanea asociados a una piel madura.
[0019] Existe aun una necesidad de disponer de nuevas herramientas de cribado de agentes activos o de tratamientos fisicos convenientes para el cuidado de la piel, y particularmente utiles para prevenir y/o tratar una piel madura o signos del envejecimiento cutaneo, en particular una piel madura y seca o signos de sequedad cutanea asociados a una piel madura.
[0020] Existe aun una necesidad de disponer de nuevos activos o de nuevos tratamientos para la prevention y/o el tratamiento de una piel madura o signos del envejecimiento cutaneo, en particular una piel madura y seca o signos de sequedad cutanea asociados a una piel madura.
[0021] Existe aun una necesidad de disponer de nuevos objetivos cosmeticos para el cuidado de la piel, y en particular para la prevencion y/o el tratamiento de una piel madura o signos del envejecimiento cutaneo, asociados o no a una sequedad cutanea.
[0022] La presente invention tiene como objeto satisfacer estas necesidades.
[0023] La presente invencion se refiere a, segun uno de sus primeros objetos, el uso (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos codificados por una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10 o (ii) de dicha secuencia de acidos nucleicos, como biomarcador de un estado de la piel madura y/o de los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0024] En la presente patente tambien se describe el uso (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos codificados por una secuencia de acidos nucleicos representados por SEC ID N°: 1, de un analogo o de un fragmento de dicha secuencia de aminoacidos, o (ii) de dicha secuencia de acidos nucleicos, como biomarcador de un estado de hidratacion de la piel, y en particular de la piel seca y/o de los signos de sequedad cutanea.
[0025] En el contexto de la invencion, se entiende por « biomarcador », una molecula o la actividad de una molecula, cuya presencia, contenido o grado de actividad es caracteristico de un proceso biologico, fisiologico o patologico, o del impacto o del efecto inducido por la administration de un agente activo o de un tratamiento fisico sobre un tal proceso.
[0026] En el contexto de la invencion, se entiende por « piel » el conjunto de la epidermis del cuerpo humano, incluyendo el cuero cabelludo y los labios.
De una forma mas particular, la piel considerada en la presente invencion es preferiblemente los labios, la piel de la cara, del escote, de los brazos o de las piernas y, de manera preferida, la piel de la cara y/o del escote.
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[0027] De manera inesperada, en el transcurso de un estudio de proteomica diferencial con la tecnologia « iTRAQ », los inventores observaron a partir de proteinas extraidas con cintas adhesivas (stripping) de poblaciones de grupos de edad diferentes que la dermicidina (o DCD) resulta ser un biomarcador sensible y especifico de la piel madura.
[0028] Ademas, se debe senalar que la secuencia de acido nucleico SEC ID N° :1, que codifica la secuencia de aminoacido SEC ID N° :11, tambien ha sido descrita como siendo el polinucleotido hcap (para «protema asociada a caquexia humana»), aislado a partir de una libreria de cancer de mama, como se describe en la patente US 5,834,192.
[0029] Mas precisamente, los inventores han observado que los indices de expresion de la dermicidina, y particularmente de peptidos resultantes de la dermicidina e identificados por las secuencias SEC ID N°: 17 y SEC ID N°: 18 estaban sistematicamente disminuidos en las pieles maduras respecto a las pieles jovenes.
[0030] Ademas, de manera inesperada, en el transcurso de un estudio de proteomica comparativa por Western Blot, los inventores observaron a partir de proteinas extraidas con cintas adhesivas (stripping) de poblaciones de grupos de edad diferentes que presentaban diferentes grados de hidratacion cutanea que la dermicidina (o DCD) resulta ser un biomarcador sensible y especifico de la piel seca. Asi, los inventores han observado que los indices de expresion de la dermicidina, y particularmente de un peptido identificado por la secuencia SEC ID N°: 16 estaban sistematicamente disminuidos en las pieles secas respecto a las pieles normalmente hidratadas.
Segun el conocimiento de los inventores, esta proteina antimicrobiana de la superficie cutanea nunca ha sido clasificada como variante en el curso del envejecimiento o durante la deshidratacion de la piel y aun menos como uno de los biomarcadores mas pertinentes en salir de este tipo de estudios.
[0031] Se sabe que la sudacion disminuye con la edad (Anderson and Kenney 1987; Kenney and Fowler 1988) y que la dermicidina es una proteina sudoripara (Schittek, Hipfel et al., 2001).
Por el contrario, los datos experimentales obtenidos por los inventores muestran manera inesperada que existe un deficit especifico de expresion y/o de maduracion de la DCD en el transcurso del envejecimiento cutaneo, porque esta esta subrepresentada en las muestras cutaneas, incluso con respecto a otras proteinas de origen sudoriparo.
Ademas, se puede destacar que la sequedad cutanea es un fenomeno complejo que no esta sistematicamente asociado a un deficit sudoriparo.
[0032] Segun otro mas de sus objetos, la presente invention se refiere al uso (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, sEc ID N°: 12, SEC ID N°: 13 y SEC ID N°: 16, o (ii) de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3 y SEC ID N°: 6, para cribar agentes activos o tratamientos fisicos para el cuidado de la piel madura y/o la prevention y/o el tratamiento de los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea, susceptibles de modular la actividad, la expresion o la maduracion de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos.
[0033] Los agentes activos o los tratamientos fisicos cribados pueden estar de forma mas particular destinados a prevenir y/o tratar la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0034] En la presente patente, tambien se describe un uso (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos, o (ii) de una secuencia de acidos nucleicos, para cribar agentes activos o tratamientos fisicos susceptibles de modular la actividad, la expresion o la maduracion de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos y destinados a favorecer y/o reforzar la hidratacion de la piel.
[0035] De manera preferida, tales agentes activos o tratamientos fisicos se pueden destinar a prevenir y/o tratar la piel seca y/o los signos de sequedad cutanea.
[0036] En el sentido de la invencion, se entiende por « expresion » con respecto a una secuencia de aminoacidos, por ejemplo una proteina o un peptido, o a una secuencia de acidos nucleicos, por ejemplo un ARNm, su contenido o la variation de su contenido con respecto a una referencia.
[0037] En el sentido de la invencion, se entiende por « maduracion » con respecto a una secuencia de aminoacidos, por ejemplo una proteina o un peptido, o a una secuencia de acidos nucleicos, por ejemplo un ARNm, las modificaciones que siguen a su sintesis en un ambiente celular.
Por ejemplo, en el caso de una secuencia de aminoacidos, se entiende por « maduracion » las modificaciones post- traduccionales, tales como la glicosilacion o la farnesilacion de ciertos aminoacidos, o las etapas proteoliticas que conducen a la eliminacion de secuencias llamadas « senal » o « secretora » o a la liberacion de secuencias que presentan propiedades biologicas particulares.
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En el caso de una secuencia de acidos nucleicos, se entiende por « maduracion », por ejemplo, el splicing alternative de un ARNm.
[0038] En sentido de la invention, se entiende por « actividad », con respecto a una secuencia de aminoacidos, por ejemplo una proteina o un peptido, la actividad biologica de la secuencia de aminoacidos, en su caso despues de la maduracion, tal como una actividad enzimatica, una actividad de agonista o de antagonista frente a un receptor, o de activadora o de inhibidora de una enzima, una actividad llamada de « estructura », o una actividad antimicrobiana.
[0039] En el sentido de la invencion se entiende por « actividad », con respecto a una secuencia de acidos nucleicos, por ejemplo un ARNm, su traduction.
[0040] Segun otro de sus objetos, la presente invencion se refiere al uso (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13, SEC ID N°: 14, SEC ID N°: 15, SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19, SEC ID N°: 20, o (ii) de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10, para caracterizar la eficacia de un tratamiento cosmetico de la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0041] En la presente patente, tambien se describe un uso (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos, o (ii) de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos, para caracterizar la eficacia de un tratamiento cosmetico de la piel seca y/o de los signos de sequedad cutanea.
[0042] Segun otro mas de sus objetos, la presente invencion se refiere al uso cosmetico de una cantidad eficaz (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13 y SEC ID N°: 16, o (ii) de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, Sec ID N°: 2, SEC ID N°: 3 y SEC ID N°: 6, como agente activo para prevenir y/o tratar la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0043] En la presente patente tambien se describe un uso cosmetico de una cantidad eficaz (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos, o (ii) de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos, o (III) de por lo menos un agente modulador de la actividad, de la expresion o de la maduracion de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos, como agente activo para favorecer y/o reforzar la hidratacion de la piel.
[0044] De manera preferida, tal uso se puede dedicar a prevenir y/o tratar la piel seca y/o los signos de sequedad cutanea.
[0045] En el sentido de la presente invencion, se entiende por « cantidad eficaz » de un compuesto de la invencion una cantidad suficiente y necesaria de este compuesto para obtener un efecto deseado, y particularmente un efecto cosmetico o de cuidado con respecto a la piel madura y/o a los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
Igualmente, una « cantidad eficaz » de un compuesto puede ser una cantidad suficiente y necesaria de este compuesto para obtener un efecto cosmetico o de cuidado con respecto a la hidratacion de la piel, y en particular de la piel seca y/o de los signos de sequedad cutanea.
[0046] En el contexto de la invencion, se entiende por « prevenir », el hecho de reducir el riesgo de que ocurra o de ralentizar la ocurrencia de un fenomeno dado, a saber en la presente invencion, la piel madura y/o los signos del envejecimiento cutaneo, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
Igualmente, en el sentido de la patente, se entiende por « prevenir », el hecho de reducir el riesgo de que ocurra o de ralentizar la ocurrencia de una piel seca y/o de los signos de sequedad cutanea.
[0047] Segun otro mas de sus objetos, la presente invencion se refiere al uso de una cantidad eficaz (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13 y SEC ID N°: 16, o (ii) de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SeC ID N°: 2, SEC ID N°: 3 y SEC ID N°: 6, para preparar un modelo celular epitelial pluriestratificado, preferiblemente un modelo de piel reconstruida, imitando una piel madura, eventualmente asociada a una sequedad cutanea.
[0048] Segun otro mas de sus objetos, la presente invencion se refiere a un procedimiento in vitro o ex vivo para caracterizar un estado de la piel madura y/o de los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea, que comprende al menos las etapas consistentes en:
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a) efectuar, en una muestra aislada de una piel, una medida cualitativa o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13, SEC ID N°: 14, SEC ID N°: 15, SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19, SEC ID N°: 20 o de al menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10, y
b) comparar dicha medida efectuada en la etapa a) con una medida de referencia.
[0049] Segun la diferencia observada entre la medida obtenida y la medida de referencia, la piel sera calificada como piel normalmente joven o como piel madura, incluso madura y seca.
[0050] Segun una forma de realizacion preferida, un estado de la piel considerada en la invencion es una piel madura elegida de entre pieles que han sufrido un envejecimiento cronologico y/o un envejecimiento fotoinducido.
[0051] En la presente patente, tambien se describe un procedimiento para caracterizar un estado de hidratacion de la piel, y en particular una piel seca y/o signos cutaneos de sequedad, que comprende al menos las etapas consistentes en:
a) efectuar, en una muestra aislada de una piel, una medida cualitativa o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos, y
b) comparar dicha medida efectuada en la etapa a) con una medida de referencia.
[0052] Segun la diferencia observada entre la medida obtenida y la medida de referencia, la piel sera calificada como piel normalmente hidratada o como piel seca.
[0053] Segun otro mas de sus objetos, la presente patente describe un procedimiento de cribado de agentes activos o de tratamientos fisicos susceptibles de modular la actividad, la expresion o la maduracion de una secuencia de aminoacidos de la invencion o de una secuencia de acidos nucleicos de la invencion, que comprende al menos las etapas consistentes en:
a) disponer dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos en condiciones propicias para la actividad, la expresion o la maduracion de dichas secuencias,
b) poner en contacto dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos con al menos un agente activo por testar, o exponer dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos a un tratamiento fisico por testar,
c) efectuar una medida cualitativa o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos, y
d) comparar dicha medida a una medida de referencia.
[0054] Segun la diferencia observada entre la medida obtenida y la medida de referencia, el compuesto o el tratamiento fisico cribado seran caracterizados o no como utiles para prevenir y/o tratar la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0055] Segun una forma de realizacion, el o los agentes activos o el o los tratamientos fisicos cribados pueden estar de forma mas particular dedicados a prevenir y/o tratar la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0056] En la presente patente tambien se describe un procedimiento de cribado de agentes activos o de tratamientos fisicos susceptibles de modular la actividad, la expresion o la maduracion de una secuencia de aminoacidos o de una secuencia de acidos nucleicos y destinados a favorecer y/o reforzar la hidratacion de la piel seca, que comprende al menos las etapas consistentes en:
a) disponer dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos en condiciones propicias para la actividad, la expresion o la maduracion de dichas secuencias,
b) poner en contacto dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos con al menos un agente activo por testar, o exponer dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos a un tratamiento fisico por testar,
c) efectuar una medida cualitativa o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos, y
d) comparar dicha medida a una medida de referencia.
[0057] Segun otro objeto, la invencion se refiere a un procedimiento de cribado in vitro o ex vivo de agentes activos o de tratamientos fisicos para el cuidado de la piel madura y/o la prevencion y/o el tratamiento de los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea, susceptibles de modular la actividad, la expresion o la
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maduracion de una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13 y SEC ID N°: 16, o de una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3 y SEC ID N°: 6, que comprende al menos las etapas consistentes en:
a) disponer dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos en condiciones propicias para la actividad, la expresion o la maduracion de dichas secuencias,
b) poner en contacto dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos con al menos un agente activo por testar, o exponer dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos a un tratamiento fisico por testar,
c) efectuar una medida cualitativa o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos, y
d) comparar dicha medida a una medida de referencia, y
e) observar una diferencia entre dicha medida y la medida de referencia para caracterizar el agente activo o el tratamiento como util para prevenir y/o tratar la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0058] Segun otra forma mas de realizacion, la presente invencion se refiere a un peptido aislado representado por la secuencia de aminoacidos SEC ID N°: 18.
[0059] La presente invencion tiene como ventaja proponer un nuevo biomarcador sensible y especifico, de un estado de la piel madura y/o signos del envejecimiento cutaneo, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0060] Igualmente, la presente patente tiene como ventaja proponer un nuevo biomarcador sensible y especifico de la hidratacion de la piel, y en particular de la piel seca o signos de sequedad cutanea.
[0061] La observacion de la presencia de la dermicidina en el estrato corneo, y particularmente de peptidos salidos especificamente de esta proteina, hace ventajosamente posible una determinacion cuantitativa o cualitativa de la expresion o de la actividad de esta proteina, o de los peptidos correspondientes, por simple muestra topica.
[0062] El metodo de obtencion de muestra puede por ejemplo ser una tecnica de tipo stripping que consiste en aplicar sobre la epidermis considerada una porcion de cinta adhesiva.
Al despega esta cinta adhesiva, una fraccion de la superficie de la piel es tomada como muestra.
Despues de la extraccion proteica, esta puede ser a continuacion analizada a traves de metodos convencionales, tales como la dosificacion immunoenzimatica ELISA o un analisis Western Blot, o de una forma mas particular por el metodo de proteomica diferencial iTRAQ tal y como se define a continuacion.
[0063] Asimismo, la presente invencion tiene como ventaja poder proporcionar un nuevo biomarcador conveniente para el cribado de nuevos agentes activos o de nuevos tratamientos fisicos convenientes a la prevencion y/o al tratamiento de la piel madura y/o signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
Igualmente, la presente patente tiene como ventaja poder proporcionar un nuevo biomarcador conveniente para el cribado de nuevos agentes activos o de nuevos tratamientos fisicos utiles para favorecer y/o reforzar la hidratacion de la piel.
De manera preferida, tales agentes o tratamiento pueden convenir para la prevencion y/o al tratamiento de la piel seca y/o signos de sequedad cutanea.
[0064] Igualmente, segun otra ventaja, la presente invencion permite proponer nuevos agentes activos convenientes para la prevencion y/o el tratamiento de las pieles mayores y/o signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
Secuencias de aminoacidos y de acidos nucleicos
[0065] La dermicidina o preproteolisina (DCD) es una proteina de 110 aminoacidos (SEC ID N°: 11) que comprende un peptido senal de 19 aminoacidos (SEC ID N°: 14) cuyo gen se localiza sobre el cromosoma 12, locus 12q13.1.
Dos isoformas de esta proteina son recensadas, una mas corta, isoforma 1 (SEC ID N°: 12), la otra mas larga, isoforma 2 (SEC ID N°: 13).
Esta es secretada en el sudor (Schittek, Hipfel et al. 2001).
[0066] Despues de la division del peptido senal, la dermicidina (DCD) es una proteina de 90 aminoacidos segun la secuencia Sec ID N°: 16.
[0067] Despues de una maduracion post-traduccional proteolitica, esencialmente por la catepsina D, que tiene lugar en el sudor (Baechle, Flad et al., 2006), este precursor proteico da nacimiento a la DcD-1 (SeC ID N°: 19) y a la DCD-1L
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(SEC ID NO :20) asi como a numerosos peptidos cuya longitud varia de 25 a 48 aa (Flad, Bogumil et al. 2002).
[0068] Excepto si se indica lo contrario, el termino « dermicidina » pretende designar en la presente patente las secuencias de aminoacidos representadas por SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13, SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 19 y SEC ID N°: 20, que han sufrido o no una maduracion post-traduccional.
[0069] Segun una forma de realizacion preferida, se entiende por dermicidina de una forma mas particular la secuencia de aminoacidos representada por la SEC ID N°: 16.
[0070] Entre los peptidos resultantes de la maduracion de la dermicidina, como se describe en US 2008/020976, algunos muestran actividades antimicrobianas contra diferentes microorganismos, como Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Enterococcus faecalis, o Candida albicans.
Los peptidos antimicrobianos son derivados de la parte C-terminal de la proteina.
[0071] La parte N-terminal de la proteina (SEC ID N°: 15) esta constituida por un factor biologicamente activo que favorece la supervivencia celular (Cunningham, Hodge et al. 1998).
[0072] Esta proteina es expresada de manera constitutiva en la glandula sudoripara (Rieg, Garb et al. 2004), y esta implicada en las vias de serialization de tipo PI3K/AKT/mTOR, particularmente importante en los fenomenos de proliferation y de supervivencia celular (Moreira, Strauss et al.2008).
La disminucion de la DCD observada en el sudor de los individuos que padecen atopia podria explicar en parte su susceptibilidad microbiana (Rieg, Steffen et al. 2005).
[0073] Algunos de los fragmentos antimicrobianos, asi como de la parte N-terminal, son capaces de estimular la production de citocinas/quimiocinas a traves de queratinocitos u otros tipos celulares que la implican en la regulation de la inmunidad cutanea (Watchorn, Dowidar et al. 2005; Niyonsaba, Suzuki et al. 2009).
Recientemente se ha propuesto el uso de la DCD como un marcador especifico particularmente sensible de la presencia de rastros de sudor por RT-PCR o por ELISA utilizable en el dominio forense (Sakurada, Akutsu et al. 2009).
[0074] Una secuencia de aminoacidos tal y como se describe en la presente patente se puede codificar por una secuencia de acidos nucleicos representados por SEC ID N°: 1, o ser un analogo o un fragmento de esta secuencia de aminoacidos.
[0075] Por « analogo de una secuencia de aminoacidos », se pretende designar toda secuencia de aminoacidos que tiene una identidad de secuencia de por lo menos 85%, preferiblemente de por lo menos 90%, y mas preferiblemente de por lo menos 95 % con dicha secuencia, y una actividad biologica de la misma naturaleza.
[0076] Por « actividad biologica de la misma naturaleza » con respecto a una secuencia de aminoacidos se puede entender las propiedades antimicrobianas o de estimulo de la supervivencia y/o de la proliferacion celular habitualmente atribuidas a la dermicidina.
Preferiblemente, por « actividad biologica de la misma naturaleza » con respecto a una secuencia de aminoacidos se entiende las propiedades de prevention y/o de tratamiento con respecto a la piel madura o signos del envejecimiento cutaneo, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea, incluso con respecto a la piel seca y/o signos de sequedad cutanea.
[0077] La identidad de secuencia se puede determinar por comparacion visual o mediante cualquier herramienta informatica habitualmente utilizada en el dominio, como los programas BLAST disponibles en
www.ncbi.nlm.nih.gov y utilizados con los parametros configurados por defecto.
[0078] Un analogo puede ser un agente peptidomimetico.
[0079] Un analogo de una secuencia de aminoacidos puede resultar de modificaciones salidas de mutation o de variation en las secuencias de los peptidos provenientes ya sea de la elimination o de la insertion de uno o varios aminoacidos, ya sea de la sustitucion de uno o varios aminoacidos, ya sea incluso de un splicing alternativo.
Varias de estas modificaciones pueden combinarse.
[0080] Ventajosamente, un analogo de una secuencia de acidos puede comprender sustituciones conservadoras con respecto a esta secuencia de aminoacidos.
[0081] Como ejemplo de mutaciones que se pueden considerar en la presente patente, se puede mencionar, de manera no exhaustiva, el reemplazo de uno o varios residuos de aminoacidos por residuos de aminoacidos que tienen un indice
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hidropatico similar sin afectar, no obstante, de manera sensible a las propiedades biologicas del polipeptido.
El indice hidropatico es un indice atribuido a los aminoacidos en funcion de su hidrofobicidad y de su carga (Kyte et al. (1982), J. Mol. Biol., 157: 105).
[0082] Una secuencia de aminoacidos o un analogo a esta puede ser una secuencia de aminoacidos que ha sufrido una o varias maduracion(es) post-traduccional(es).
[0083] Por « maduracion(es) post-traduccional(es) », se pretende englobar el conjunto de las modificaciones que una secuencia de aminoacidos es susceptible de sufrir a la salida de su sintesis en una celula, tal y como por ejemplo una o varias fosforilacion(es), una o varias tiolacion(es), una o varias acetilacion(es), una o varias glicosilacion(es), una varias lipidacion(es), tales como una farnesilacion o una palmitoilacion, una nueva disposicion estructural de tipo formation de puentes disulfuros y/o de tipo division dentro de la secuencia peptidica.
[0084] Un analogo de una secuencia de aminoacidos presenta, ademas, sensiblemente la misma actividad biologica que esta secuencia de aminoacidos.
[0085] Ademas, se sabe que una secuencia primaria de aminoacidos puede comprender sitios especificamente reconocidos por enzimas de tipo proteasa, tales como la tripsina, que, una vez el reconocimiento de estos sitios sea efectivo, induciran la division de la secuencia por proteolisis.
Esta proteolisis resulta en la generation de diversos peptidos, o fragmentos de secuencias de aminoacidos.
[0086] En consecuencia, la patente describe igualmente fragmentos de la dermicidina, salidos en su caso de su proteolisis.
[0087] En el sentido de la patente, se entiende por « fragmento de una secuencia de aminoacidos » toda portion de la secuencia de aminoacidos que comprende de 3 a 48 aminoacidos consecutivos de dicha secuencia, preferiblemente de 6 a 36, preferiblemente 8 a 32, y mas preferiblemente de 10 a 30 aminoacidos consecutivos de dicha secuencia, y tiene una actividad biologica de la misma naturaleza.
[0088] Una secuencia de aminoacidos puede ser una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11 a 20, particularmente entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13, un analogo, o un fragmento de esta.
[0089] Una secuencia de aminoacidos puede ser una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 14, SEC ID N°: 15, SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19, SEC ID N°: 20, un analogo, o un fragmento de esta.
[0090] Una secuencia de aminoacidos puede ser una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17, o SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19 o SEC ID N°: 20, un analogo o un fragmento de esta.
[0091] Una secuencia de aminoacidos puede ser una secuencia de aminoacidos representados por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19 o SEC ID N°: 20, un analogo o un fragmento de esta.
[0092] Una secuencia de aminoacidos puede ser una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, un analogo o un fragmento de esta.
[0093] Un polipeptido puede igualmente ser una secuencia de aminoacidos natural o sintetica, en su caso susceptible de ser obtenida despues de la lisis enzimatica o quimica de la dermicidina o por sintesis quimica o biologica o por extraction de un tejido biologico, como por ejemplo la piel, expresando naturalmente esta secuencia de aminoacidos o despues de la transfection de este, asi como las distintas formas post-traduccionales de este, o incluso cualquier secuencia de aminoacidos natural o sintetica cuya secuencia comprenda totalmente o parcialmente una secuencia de aminoacidos anteriormente mencionada, por ejemplo las variantes y los analogos.
[0094] El experto en la tecnica puede obtener una secuencia de aminoacidos conforme a la invention mediante procedimientos a base de ADN recombinante, como por ejemplo los descritos en el manual « Molecular Cloning - A Laboratory Manual » (2nd edition), Sambrook el al., 1989, vol. I-III, Coldspring Harbor Laboratory, Coldspring Harbor Press, NY, (Sambrook).
[0095] Segun un objeto, la presente patente describe como tal un peptido aislado representado por una secuencia de aminoacidos elegida de entre SEC ID N°: 17 o SEC ID N°: 18, un analogo o un fragmento de esta.
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[0096] La invencion se refiere en particular a un peptido aislado representado por la secuencia de aminoacidos SEC ID N°: 18.
[0097] Segun otra forma de realizacion, una secuencia de aminoacidos puede igualmente ser una secuencia de aminoacidos tal y como se ha definido previamente, fusionada con otra secuencia de aminoacidos, un agente de cribaje hidrofilo o hidrofobo, un precursor de bioconversion, un agente de marcaje luminiscente, radioactivo o colorimetrico.
[0098] De manera no limitativa, se pueden citar, como ejemplo de compuestos susceptibles de ser acoplados a una secuencia de aminoacidos conforme a la invencion, las proteinas fluorescentes como la « proteina verde fluorescente », los compuestos quimicos fluorescentes, tales como la rodamina, la fluoresceina, o el Texas Red®, compuestos
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fosforescentes, elementos radioactivos, tales como H, 1 C, S, I o I, o agentes de marcaje colorimetrico como los substratos cromogenos sensibles a la accion de la galactosidasa, de la peroxidasa, de la cloranfenicol acetiltransferasa, de la luciferasa o de la fosfatasa alcalina.
[0099] Segun la naturaleza de los compuestos susceptibles de ser acoplados con una secuencia de aminoacidos segun la patente, el acoplamiento se puede llevar a cabo a traves de procedimientos quimicos, particularmente mediante funciones quimicas reactivas o a traves de procedimientos de biologia molecular conocidos por el experto en la tecnica.
[0100] Ventajosamente, una secuencia de aminoacidos segun la patente puede ser codificada por una secuencia de acidos nucleicos elegida de entre una secuencia representada por SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10, un analogo o un fragmento de esta.
[0101] La presente patente describe asimismo secuencias de acidos nucleicos que codifican una secuencia de aminoacidos y su aplicacion en las distintas utilizaciones y procedimiento de la patente.
[0102] Asi, la presente patente describe igualmente una secuencia de acidos nucleicos, particularmente de acidos desoxirribonucleicos, o de acidos ribonucleicos, representada por la SEC ID N°: 1, un analogo o un fragmento de esta.
[0103] En el sentido de la presente patente, se entiende por « fragmento de secuencia de acidos nucleicos », una secuencia de acidos nucleicos que comprende de 9 a 144 pares de bases consecutivas de dicha secuencia, preferiblemente de 18 a 108, preferiblemente 24 a 96, y mas preferiblemente de 30 a 90 pares de bases consecutivas de dicha secuencia, y que codifica para una secuencia de aminoacidos que tiene una actividad biologica de la misma naturaleza que la secuencia de aminoacidos codificada por dicha secuencia.
[0104] En el sentido de la presente patente, se entiende por « analogo de una secuencia de acidos nucleicos » una secuencia de acidos nucleicos que tiene una identidad de secuencia de por lo menos 85%, preferiblemente de por lo menos 90%, y mas preferiblemente de por lo menos 95 % con dicha secuencia, y que codifica una secuencia de aminoacidos que tiene una actividad biologica igualmente naturaleza que la secuencia de aminoacidos codificada por dicha secuencia.
[0105] Por « analogo de una secuencia de acidos nucleicos », se pretende designar una secuencia de acidos nucleicos, eventualmente resultante de la degeneracion del codigo de los acidos nucleicos, y que codifica una secuencia de aminoacidos segun la patente, particularmente como se ha definido previamente.
[0106] Una secuencia de acidos nucleicos segun la patente se puede representar por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9 y SEC ID N°: 10, un analogo o un fragmento de esta.
[0107] Una secuencia de acidos nucleicos segun la patente puede ser de cualquier origen posible, a saber o bien animal, en particular de mamiferos y aun mas particularmente humano, o bien vegetal, ya sea microorganismos, tales como por ejemplo virus, fagos, o bacterias entre otros, o incluso de hongos, sin prejuzgar el hecho de que esten presentes de manera natural o no en dicho organismo de origen.
[0108] La patente describe asimismo secuencias de acidos nucleicos aisladas y purificadas que codifican una secuencia de aminoacidos considerados segun la patente, y sus analogos y fragmentos.
[0109] Una secuencia de acidos nucleicos segun la patente puede comprender una secuencia sentido, anti-sentido o interferencial correspondiente a una secuencia que codifica un polipeptido segun la patente.
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[0110] La patente tiene igualmente como objetivo secuencias de acidos nucleicos, particularmente de acidos ribonucleicos o desoxirribonucleicos, que comprenden una secuencia sentido o anti-sentido, particularmente « ARN interferente pequeno» (ARNip), correspondiente al menos a una secuencia que codifica un polipeptido de la invention o una secuencia de acidos nucleicos representada por SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10, un analogo o un fragmento de esta.
Piel madura y signos cutaneos del envejecimiento
[0111] Por « piel madura », se entiende un estado general de la piel resultante del envejecimiento cronologico y/o del envejecimiento fotoinducido.
[0112] Por « signos cutaneos del envejecimiento », se entienden todas las modificaciones del aspecto exterior de la piel debido al envejecimiento ya sea de origen cronologico y/o fotoinducido.
[0113] Como ejemplo de estas modificaciones consideradas en la invencion, se pueden citar las lineas de expresion y las arrugas, la piel marchita, la falta de elasticidad y/o de tono de la piel, el adelgazamiento de la dermis y/o el deterioro de las fibras de colageno, lo que comporta una aparencia de piel blanda y arrugada.
[0114] Se entiende igualmente todas las modificaciones internas de la piel que no se traducen sistematicamente en un aspecto exterior modificado, como por ejemplo todos los deterioros internos de la piel, y particularmente el deterioro de las fibras de elastina, o fibras elasticas, despues de una exposition a la radiation ultravioleta.
[0115] En particular, los signos cutaneos del envejecimiento considerados por la invencion son elegidos de entre un adelgazamiento de la piel, una perdida de firmeza, una perdida de elasticidad, una perdida de densidad, o una perdida de tonicidad de la piel, una sequedad de la piel, la aparicion de un microrrelieve de la piel marcada, la formation y/o la presencia de arrugas y/o de lineas de expresion, una alteration del brillo de la tez de la piel, un aspecto papiraceo de la piel, una alteracion del olor de la piel, un hundimiento de la piel, y un envejecimiento de la piel.
De manera preferida, los signos cutaneos del envejecimiento considerados por la invencion son elegidos entre un adelgazamiento de la piel, la aparicion de un microrrelieve de la piel marcada, la formacion y/o la presencia de arrugas y/o de lineas de expresion, un hundimiento de la piel, y un envejecimiento de la piel.
[0116] De manera mas preferida, los signos cutaneos del envejecimiento considerados por la invencion son elegidos de entre la aparicion de un microrrelieve de la piel marcada, la formacion y/o la presencia de arrugas y/o de lineas de expresion, un hundimiento de la piel, y un envejecimiento de la piel.
[0117] Se entiende por « hidratacion de la piel », el conjunto de los mecanismos celulares y moleculares que llevan a asegurar y a mantener la presencia de una cantidad de agua fisiologica en la epidermis y la dermis, asi como la cantidad de agua resultante.
[0118] Segun un aspecto, la patente tiene como objetivo mantener e incluso estimular la homeostasis de estos mecanismos, y asi a favorecer y/o reforzar la hidratacion de la piel.
Asi, segun un aspecto, la patente esta dirigida a las pieles que presentan un estado hidratado fisiologico, igualmente calificado de normal.
[0119] Segun otro aspecto, la patente tiene como objetivo restaurar el equilibrio o reducir el riesgo de que se produzca un desequilibrio en la homeostasis de estos mecanismos, y asi prevenir y/o tratar la piel seca y/o los signos de sequedad cutanea.
[0120] Por « signos de sequedad cutanea », se entienden todas las modificaciones del aspecto de la piel debidas a un deficit de agua en la epidermis y/o la dermis.
[0121] Segun el grado de manifestation del deficit de agua de la piel, una piel seca puede parecer rugosa al tacto, arrugada, incluso cubierta de escamillas.
Una piel seca puede manifestarse, esencialmente, por una sensation de tirantez y/o de tension.
[0122] Por « piel seca », se entiende un estado general de la piel resultante de un deficit de agua en la epidermis y/o de la dermis.
[0123] Una piel seca puede manifestarse por un trastorno de la descamacion y presentar diferentes estadios en funcion de la gravedad de esta descamacion.
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[0124] Cuando la piel es ligeramente seca, estas escamillas son abundantes pero poco visibles a simple vista, la eliminacion se efectua corneocito a corneocito.
Estas son cada vez menos numerosas pero cada vez mas visibles a simple vista cuando este desorden se agrava, los cumulos pueden comprender varias centenas de corneocitos, representando asi cumulos mas o menos grandes, llamados escamillas.
[0125] La sequedad cutanea puede ser constitucional o adquirida.
[0126] En el caso de la piel seca constitucional, se pueden distinguir dos categorias: las pieles patologicas y las pieles no patologicas.
[0127] Las pieles secas constitucionales patologicas estan esencialmente representadas por la dermatitis atopica y las ictiosis.
Estas son casi independientes de las condiciones exteriores y tienen su origen en modificaciones geneticas conocidas o desconocidas.
Entre las modificaciones geneticas conocidas que afectan a la hidratacion cutanea se pueden citar, por ejemplo, las modificaciones del gen de la Transglutaminasa-1 o las del gen de la filagrina.
[0128] Tambien se describe una composicion farmaceutica o dermatologica que comprende, en un medio fisiologicamente aceptable una, cantidad eficaz (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos segun la patente, o (ii) de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos segun la patente, o (III) de por lo menos un agente modulador de la actividad, de la expresion o de la maduracion de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos, como agente activo para prevenir y/o tratar las pieles secas constitucionales patologicas seleccionadas de entre la dermatitis atopica y la ictiosis.
[0129] En el caso de las pieles secas constitucionales no patologicas, la gravedad del estado de sequedad puede, por su parte, depender de factores exteriores.
Entran en esta categoria de piel la piel senil (caracterizada por una disminucion general del metabolismo cutaneo con la edad), la piel fragil (muy sensible a los factores exteriores y a menudo acompanada de eritema y de rosacea) y la xerosis vulgar (de origen genetico probable y que se manifiesta de forma prioritaria en la cara, las extremidades y el dorso de las manos).
[0130] En el caso de piel seca adquirida, la intervencion de parametros exteriores tales como la exposicion a los agentes quimicos, a condiciones climaticas dificiles, a los rayos solares o tambien a ciertos tratamientos terapeuticos (retinoides, por ejemplo) es determinante.
Bajo estas influencias exteriores, la epidermis puede volverse momentaneamente y localmente seca.
Esto puede suceder a cualquier tipo de epidermis.
[0131] Cualquiera que sea el origen, una piel con sequedad cutanea puede presentar, habitualmente, los signos siguientes: aspecto rugoso y escamoso al tacto, asi como una flexibilidad y una elasticidad disminuidas.
[0132] La piel seca, igualmente denominada « xerosis », puede aparecer a cualquier edad, y no estar unida a una condicion patologica.
Se hablara en este caso de sequedad « adquirida ».
[0133] Sin embargo, la xerosis se vuelve mas frecuente y molesta con la edad, particularmente en caso de las mujeres. Se habla entonces de xerosis senil.
Ademas, las mujeres sufren habitualmente un agravamiento del desecamiento cutaneo durante la menopausia, probablemente debido al desajuste hormonal caracteristico de este fenomeno.
Las zonas mas afectadas son la parte inferior de las piernas, la parte dorsal del antebrazo y las manos.
[0134] Como ya se ha mencionado previamente, la sequedad adquirida puede sufrir la influencia de factores exteriores. Por ejemplo, la aparicion de la piel seca se puede ver favorecida por un tiempo frio, seco e invernal.
Se habla entonces de xerosis invernal.
La sequedad cutanea puede igualmente ser inducida por un estres exogeno, de origen quimico, por ejemplo de tipo detergente anionico, o incluso de origen mecanico (rozamiento, afeitado).
[0135] Un uso cosmetico segun la patente puede convenir ventajosamente para prevenir y/o tratar las pieles secas seniles o fragiles, o la xerosis, particularmente elegida de entre la xerosis vulgar, la xerosis senil y la xerosis invernal.
[0136] Aunque ningun estudio haya demostrado una incidencia de la sequedad sobre el origen y la formacion de las
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lineas de expresion y arrugas que son esencialmente atribuibles al envejecimiento, en el plano visual una piel seca las hace mas aparentes.
Una piel seca puede, por lo tanto, ser asociada a una piel madura con lineas de expresion o arrugas.
[0137] Ademas, en el plano sensorial, la sequedad cutanea se caracteriza por una sensacion de tirantez y/o de prurito. Por razones evidentes, estas manifestaciones no son solo fuente de, por ejemplo, dolores, sino tambien de una aparencia antiestetica.
[0138] Tambien se describe un uso cosmetico que puede convenir ventajosamente para prevenir y/o tratar las sensaciones de tirantez y/o de prurito asociadas a las pieles secas.
[0139] Como ejemplos de signos de sequedad cutanea considerados en la patente, se pueden citar la piel marchita, la falta de elasticidad, de flexibilidad y/o de tono de la piel, el tacto rugoso, la presencia de grietas, la descamacion, la presencia de escamas, o las lineas de expresion y arrugas asociadas a la piel seca.
[0140] Los signos de sequedad cutanea considerados tambien son todas las modificaciones internas de la piel que no se traducen sistematicamente en un aspecto exterior modificado, como por ejemplo todos los deterioros internos de la piel, y particularmente el deterioro de las fibras de elastina, o fibras elasticas, consecutivas a un desecamiento de la dermis. Segun un aspecto, los signos de sequedad cutanea son elegidos de entre una piel marchita, una falta de elasticidad, de flexibilidad y/o de tono de la piel, un tacto rugoso, una presencia de grietas, una descamacion, una presencia de escamas, las lineas de expresion y arrugas asociadas a la piel seca, y una sensacion de tirantez y/o de prurito.
[0141] Segun la invention, la piel madura o los signos cutaneos del envejecimiento pueden estar asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
Biomarcador
[0142] La presente invencion se refiere al uso de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11 a SEC ID N°: 20, y preferiblemente se elige entre SEC ID N°: 16, SeC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19, SEC ID N°: 20, o de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10, como biomarcador de un estado de la piel madura y/o signos cutaneos del envejecimiento, asociado(a) o no a una sequedad cutanea.
[0143] La presente invencion se refiere al uso de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11 a SEC iD N°: 20, y preferiblemente se elige entre SEC ID N°: 16, SeC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19, SEC ID N°: 20, como biomarcador de un estado de la piel madura y/o signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0144] En la presente patente, tambien se describe el uso de por lo menos una secuencia de aminoacidos segun la patente, o de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos segun la patente, como biomarcador de un estado de hidratacion de la piel, y particularmente de la piel seca y/o signos de sequedad cutanea.
[0145] De manera preferida, un uso conforme a la patente permite caracterizar un estado de la piel como la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0146] Segun una forma de realization, una disminucion de la actividad, de la expresion o de la maduracion de dicho biomarcador puede ser indicativa de una piel madura y/o de signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0147] Segun una forma de realizacion, tambien se describe que una disminucion de la actividad, de la expresion o de la maduracion de dicho biomarcador puede ser indicativa de una piel con deficit de hidratacion, y particularmente de una piel seca y/o de signos de sequedad cutanea.
La patente tambien se refiere al uso de por lo menos una secuencia de aminoacidos segun la patente, o de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos segun la patente, para caracterizar la eficacia de un tratamiento cosmetico de la piel, y preferiblemente de la piel madura y/o signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0148] Tambien se describe el uso de por lo menos una secuencia de aminoacidos segun la patente, o de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos segun la patente, para caracterizar la eficacia de un tratamiento cosmetico de la piel seca y/o de los signos de sequedad cutanea.
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[0149] Segun una forma de realizacion, un aumento de la actividad, de la expresion o de la maduracion de dicho biomarcador puede ser indicativo de un tratamiento cosmetico eficaz para ejercer un efecto beneficioso sobre la piel y, mas preferiblemente, un efecto con respecto a la piel madura y/o signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0150] Tambien se describe que un aumento de la actividad, de la expresion o de la maduracion de dicho biomarcador puede ser indicativo de un tratamiento cosmetico eficaz para ejercer un efecto beneficioso sobre la piel con deficit de hidratacion y, mas preferiblemente, un efecto con respecto a la piel seca y/o signos de sequedad cutanea.
[0151] En un uso conforme a la patente, una disminucion o un aumento de la actividad, de la expresion o de la maduracion de dicho biomarcador se puede determinar por comparacion a una medida de referencia obtenida segun cualquier metodo conocido por el experto en la tecnica.
[0152] Una « medida de referencia » respecto a un parametro dado es una medida cualitativa o cuantitativa de este parametro efectuada en condiciones llamadas « controles » o « normales », por ejemplo determinada en una muestra de referencia, o determinada en una muestra en ausencia de un tratamiento que se presume tiene un efecto sobre el parametro.
[0153] Por ejemplo, una medida de referencia para una secuencia de aminoacidos o una secuencia de acidos nucleicos segun la patente puede ser un valor cuantitativo o cualitativo relativo a la expresion, la maduracion o la actividad de dichas secuencias determinado en una muestra de piel joven y fisiologicamente sana, o determinado en una muestra de piel, particularmente de piel madura, antes de un tratamiento cosmetico.
[0154] Igualmente, por ejemplo, una medida de referencia para una secuencia de aminoacidos o una secuencia de acidos nucleicos segun la patente puede ser un valor cuantitativo o cualitativo relativo a la expresion, la maduracion o la actividad de dichas secuencias determinado en una muestra de piel fisiologicamente sana y normalmente hidratada, o determinado en una muestra de piel seca, antes de un tratamiento cosmetico.
[0155] Preferiblemente, una medida de referencia es una medida estadistica, es decir, que ha sido repetida sobre diferentes muestras para obtener una media.
[0156] La medida de referencia se puede efectuar paralelamente o secuencialmente a la medida de prueba.
[0157] Tambien puede ser una medida « historica », es decir, efectuada anteriormente a la medida de prueba, y almacenada, por ejemplo en una base de datos, para un uso posterior.
[0158] Una comparacion de la medida de prueba a una medida de referencia, y una observacion de una desviacion o de una ausencia de desviacion entre las dos medidas, permite sacar una informacion en cuanto al parametro medido, por ejemplo la disminucion o el aumento de la expresion, de la maduracion o de la actividad de una secuencia de aminoacidos o de una secuencia de acidos nucleicos segun la patente.
[0159] Tal informacion puede ser posteriormente aplicada para determinar el caracter joven o maduro de una piel. Igualmente, tal informacion puede ser posteriormente aplicada para determinar el caracter normalmente hidratado o seco de una piel
[0160] Un procedimiento segun la patente puede igualmente ser efectuado sobre una muestra de piel, tomada de un modelo celular epidermico, o de una piel aislada reconstruida con el fin de calificar su estado.
[0161] Segun una forma de realizacion, la patente se refiere a un procedimiento, en particular in vitro o ex vivo, para caracterizar un estado de la piel.
[0162] Tambien se describe un procedimiento, en particular in vitro o ex vivo, para caracterizar un estado de hidratacion de la piel.
[0163] Un procedimiento segun la patente permite ventajosamente caracterizar un estado de edad de la piel y/o signos del envejecimiento cutaneo, y particularmente caracterizar un estado de edad de la piel de origen cronologico y/o fotoinducido.
[0164] Tambien se describe que un procedimiento segun la patente permite ventajosamente caracterizar un estado seco de la piel y/o signos de sequedad cutanea.
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[0165] La invencion se refiere a un procedimiento cosmetico in vitro o ex vivo, para caracterizar la eficacia de un tratamiento cosmetico de la piel madura y/o signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea, en un individuo que lo necesite, que comprende al menos las etapas consistentes en:
a) efectuar, antes de la aplicacion del tratamiento cosmetico, en una primera muestra de piel aislada tomada de dicho individuo, al menos una primera medida cualitativa o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de por lo menos una secuencia de aminoacidos elegida de entre la SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13, SEC ID N°: 14, SEC ID N°: 15, SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19, SEC ID N°: 20 o de al menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre la SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10,
b) efectuar, despues de la aplicacion del tratamiento cosmetico, en una segunda muestra de piel aislada tomada de dicho individuo, al menos una segunda medida, cualitativa o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos, y
c) comparar la primera y la segunda medida, particularmente con el fin de obtener una informacion relativa a un efecto al menos de la aplicacion del tratamiento cosmetico.
[0166] Segun una forma de realizacion particular, la secuencia de aminoacidos es representada entre una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 17 y SEC ID N°: 18.
[0167] Es evidente que las medidas efectuadas en las etapas a) y b) deben ser comparables una a la otra, y por lo tanto ser relativas al mismo parametro.
[0168] De manera preferida, este procedimiento de la invencion permite resaltar un efecto de un tratamiento cosmetico susceptible de hacer disminuir la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0169] Tambien se describe un procedimiento cosmetico, o no terapeutico, en particular in vitro o ex vivo, para caracterizar la eficacia de un tratamiento cosmetico de la piel seca y/o signos de sequedad cutanea, en un individuo que lo necesita, que comprende al menos las etapas consistentes en:
a) efectuar, antes de la aplicacion del tratamiento cosmetico, en una primera muestra de piel aislada tomada de dicho individuo, al menos una primera medida cualitativa o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de una secuencia de aminoacidos segun la patente o de una secuencia de acidos nucleicos segun la patente,
b) efectuar, despues de la aplicacion del tratamiento cosmetico, en una segunda muestra de piel aislada tomada de dicho individuo, al menos una segunda medida, cualitativo o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de dicha secuencia de aminoacidos segun la patente o de dicha secuencia de acidos nucleicos segun la patente, y
c) comparar la primera y segunda medidas, particularmente con el fin de obtener una informacion relativa a un efecto al menos de la aplicacion del tratamiento cosmetico.
[0170] Es evidente que las medidas efectuadas en las etapas a) y b) deben ser comparables una a la otra, y por lo tanto ser relativas al mismo parametro.
[0171] De manera preferida, tambien se describe que un procedimiento de la invencion permite resaltar un efecto de un tratamiento cosmetico susceptible de hacer retroceder la piel seca y/o los signos de sequedad cutanea.
[0172] La medida cualitativa o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de una secuencia de acidos nucleicos descrita por la patente se puede determinar por cualquier metodo conocido por el experto en la tecnica.
[0173] Como ejemplo de metodos que convienen a la invencion, se puede hacer mencion a la reaccion de polimerizacion en cadena (PCR), cuantitativa (Q-PCR) o no, en presencia o no de transcriptasa inversa (RT-PCR o Q-RT-PCR), el Northern blot, el metodo « ensayo de proteccion con ribonucleasa », los metodos con chips de ADN, los metodos con chips transcriptomicos, los metodos con chips de oligonucleotidos, los metodos de hibridacion in situ.
[0174] Como ejemplo de agentes convenientes para la deteccion de una secuencia de acidos nucleicos segun la patente, y en particular de una secuencia de ARNm, se puede hacer mencion a sondas de acidos nucleicos marcados que se pueden hibridar a una secuencia de acidos nucleicos segun la patente.
[0175] Tal sonda de acidos nucleicos puede ser facilmente obtenida por cualquier metodo conocido por el experto en la tecnica.
[0176] Asi, las secuencias de acidos nucleicos descritas por la patente se pueden utilizar para realizar cebadores
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oligonucleotidos sentido y/o anti-sentido, que se hibridan en condiciones de fuerte astringencia con al menos una de las secuencias SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID NO:6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10, un analogo o un fragmento de estas.
[0177] La expresion de una secuencia de acidos nucleicos puede igualmente ser determinada, de manera indirecta, por la determinacion de la expresion de la secuencia de aminoacidos codificada por dicha secuencia, mediante cualquier tecnica conocida en el dominio, tal y como el Western Blot, el ELISA, el metodo de Bradford o de Lowry, o como se indica a continuacion.
[0178] La medida cualitativa o cuantitativa, de la expresion, de la maduracion, o de la actividad de una secuencia de aminoacidos se puede efectuar mediante cualquier metodo conocido por el experto en la tecnica.
[0179] En calidad de metodos de detection de la expresion, de la maduracion, o de la actividad de una secuencia de aminoacidos, se puede hacer mention al Western blot, el Slot blot, el Dot blot, los metodos ELISA (Enzime Linked Immuno-Sorbent Assay) de tipo singleplex o multiplex, los metodos de proteomica o de glicomica, de coloration de polipeptidos en un gel de poliacrilamida por un colorante a base de plata, por azul de Coomassie o por SYPRO, la immunofluorescencia, la absorcion UV, los metodos inmunohistoquimicos en microscopia tradicional, electronica o confocal, FRET (fluorescence resonance energy transfer/transferencia de energia por resonancia de fluorescencia), los metodos de TR-FRET (time resolved FRET/fReT en tiempo resuelto), los metodos de FLIM (fluorescencia lifetime imaging microscopy/conjunto de imagenes por microscopia en tiempo de fluorescencia), los metodos de FSPIM (fluorescence spectral imaging microscopy/conjunto de imagenes por microscopia en espectro de fluorescencia), los metodos de FRAP (fluorescence recovery after photobleaching/recuperacion de fluorescencia posterior al fotoblanqueo), los metodos por gen transportador, los metodos de AFR (atomic force microscopy/microscopia por fuerza atomica), los metodos de resonancia plasmonica de superficie, los metodos de microcalorimetria, los metodos de citometria en flujo, los metodos de biosensores, los metodos de radioimmunoensayos (RIA), los metodos de focalizacion isoelectrica, y las pruebas enzimaticas, los metodos que aplican chips a peptidos, los chips de azucar, los chips de anticuerpos, los metodos de espectrometria de masa, los metodos de espectrometria de tipo SELDI-TOF (Ciphergen).
[0180] De manera mas general, se pueden usar metodos de dosificacion immunoenzimaticos a partir de soluciones de proteinas, mas cuantitativas y sensibles.
Estos metodos de tipo ELISA asocian parejas de anticuerpos de captura y de deteccion especifica del antigeno dirigido. Se pueden utilizar anticuerpos comerciales o anticuerpos policlonales, monoclonales o recombinantes desarrollados especificamente.
Tambien se pueden llevar a cabo tecnicas ELISA multiplex de gran capacidad.
Asi, se puede citar el metodo multiplex de tipo anticuerpo sobre bolas Luminex (por ejemplo Bioplex de Bio-Rad), de tipo anticuerpo sobre superficie plana (« antibodies-arrays ») (por ejemplo el metodo propuesto por la empresa MesoScale Discovery).
[0181] En particular, puede ser ventajoso detectar la expresion de una secuencia de aminoacidos, a traves de un anticuerpo, en su caso bajo una forma marcada.
Un tal anticuerpo se puede marcar a traves de una sustancia detectable directamente o detectable por reaction con otro reactivo.
[0182] Por « anticuerpo », se pretende designar manera general anticuerpos monoclonales o policlonales, asi como fragmentos de inmunoglobina susceptibles de ligar un antigeno y que se pueden producir por cualquier tecnica de ingernieria genetica conocida por el experto en la tecnica o por corte enzimatico o quimico de anticuerpos intactos.
[0183] Un anticuerpo susceptible de ser utilizado como herramienta de evaluation de un estado de una epidermis puede ser obtenido mediante cualquier procedimiento conocido por el experto en la tecnica, tal como se describe en « Antibodies: A Laboratory Manual », Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990).
[0184] Segun una forma de realization preferida, puede ser ventajoso detectar la expresion de una secuencia de aminoacidos de la invention por medio de un metodo proteomico diferencial « iTRAQ ».
[0185] Segun una forma de realizacion preferida, puede ser igualmente ventajoso detectar la expresion de una secuencia de aminoacidos de la invencion a traves de un Western Blot.
[0186] Tal metodo es conocido por el experto en la tecnica y puede ventajosamente ser llevado a cabo como se describe en los ejemplos a continuation.
[0187] De manera particular, por « actividad » con respecto a una secuencia de aminoacidos se entiende una actividad
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antimicrobiana, una actividad de estimulo de la supervivencia celular, una actividad de estimulo de la proliferation celular, o una actividad de reduction o de prevention de la piel madura y/o signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea, como se indica anteriormente.
[0188] Tambien de manera particular, por « actividad » con respecto a una secuencia de aminoacidos se entiende una actividad antimicrobiana, una actividad de estimulacion de la supervivencia celular, una actividad de estimulacion de la proliferacion celular, o una actividad de reduccion o de prevencion de la piel seca y/o signos de sequedad cutanea, como se indica anteriormente.
[0189] Tal actividad se puede determinar por cualquier metodo conocido por el experto en la tecnica, como por ejemplo, por valoracion de la proliferacion o de la supervivencia de celulas epidermicas en cultivos, tales como queratinocitos, o por valoracion de la actividad antimicrobiana sobre bacterias en cultivo, tales como Staphylococcus aureus o Escherichia coli.
[0190] De manera preferida, la determination de un estado de la piel o la caracterizacion de la eficacia de un tratamiento cosmetico de la piel se pueden efectuar por medicion de la variation de la expresion de una secuencia de aminoacidos, y preferiblemente representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19 o SEC ID N°: 20, un analogo o un fragmento de esta.
[0191] Los procedimientos de la patente son particularmente ventajosos en la medida en que su realization no necesita de recurrir a una tecnica invasiva.
Una muestra de epidermis puede asi ser obtenida por las tecnicas llamadas de « stripping » y directamente analizada por una tecnica de analisis convencional conocida por el experto en la tecnica.
[0192] Estos strippings son superficies adhesivas aplicadas a la superficie de la epidermis como el Blenderm® de 3M, el D'squam (adhesivo comercial de CuDERM), el pegamento cianoacrilato o el metodo del « stripping » con tiras adhesivas. Gracias a estos « strippings », los corneocitos adheridos y el contenido de sus espacios intercelulares se pueden tomar y someter despues a una extraction que permite tener acceso al contenido proteico.
[0193] La toma de una muestra conveniente para un procedimiento de la patente puede tambien ser efectuada de manera mas directa por « lavados » de la superficie cutanea, por medio por ejemplo de accesorios de tipo turbina con aleta, de tipo celula con espiral tal y como se describe en la patente FR 2 667 778 asociada a un circuito fluidico, o simplemente por adicion/extraccion de una gota de tampon a la superficie de la piel.
[0194] A titulo indicativo, otros metodos de extraccion adaptados a la ejecucion de los procedimientos de la patente pueden ser mencionados, tales como los metodos por raspado de la parte superior del estrato corneo a traves de un sistema bilaminas.
Esta tecnica permite recoger escamillas que pueden a continuation ser directamente analizadas por diferentes tecnicas para determinar los indices de minerales, aminoacidos o lipidos.
[0195] Ventajosamente, uno de los marcadores de la patente se puede aplicar con el fin de una election preclinica, mas eficaz y mas rigurosa, de individuos, con el objetivo de evaluar la eficacia del tratamiento o del activo cosmetico para el cuidado de la piel.
[0196] Asimismo, de manera ventajosa, uno de los marcadores de la patente se puede aplicar con el fin de una selection preclinica, mas eficaz y mas rigurosa, de individuos, con el objetivo de evaluar la eficacia del tratamiento o del activo cosmetico para el cuidado de la piel seca.
[0197] Asimismo, un biomarcador de la patente puede ser aplicado ventajosamente como se indica anteriormente para evaluar la eficacia de un agente activo, in vitro, ex vivo o in vivo con respecto a un deficit de hidratacion de la piel, o pieles secas o signos de sequedad cutanea.
[0198] Asimismo, un biomarcador de la patente puede ser aplicado ventajosamente como se indica anteriormente para evaluar la eficacia de un agente activo, in vitro, ex vivo o in vivo.
[0199] Asimismo, un biomarcador de la patente se puede aplicar para establecer un consejo personalizado de un tratamiento cosmetico para un individuo en funcion de su perfil de expresion de biomarcadores cutaneos.
Cribado
[0200] Segun uno de sus aspectos, la presente patente se refiere al uso de una secuencia de aminoacidos, de acidos
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nucleicos tal y como se describe en la patente, para cribar o en un procedimiento de cribado, en particular in vitro o ex vivo, de agentes activos o de tratamientos fisicos, conveniente particularmente para el cuidado de la piel.
Los agentes activos o los tratamientos fisicos cribados pueden convenir particularmente para el cuidado de la piel madura, y/o para la prevencion y/o el tratamiento de los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0201] Tambien se describe el uso de una secuencia de aminoacidos, de acidos nucleicos segun la patente, para cribar o en un procedimiento de cribado, en particular in vitro o ex vivo, de agentes activos o de tratamientos fisicos, conveniente particularmente para el cuidado de la piel y destinados a favorecer y/o reforzar la hidratacion de la piel.
[0202] Igualmente, los agentes activos o los tratamientos fisicos cribados pueden convenir particularmente para el cuidado de la piel seca, y/o a la prevencion y/o el tratamiento de los signos de sequedad cutanea.
[0203] Un uso o un procedimiento de la patente puede comprender la comparacion de una medida de la actividad, de la expresion o de la maduracion de una secuencia de aminoacidos o de una secuencia de acidos nucleicos segun la patente con una medida de referencia.
[0204] Una medida de referencia puede ser tal y como se ha definido previamente.
[0205] En particular, una medida de referencia puede ser un valor cuantitativo o cualitativo relativo a la expresion, la maduracion o la actividad de dichas secuencias determinado en una muestra en ausencia de agente activo o de tratamiento fisico testado.
[0206] Asi, una medida de referencia se puede obtener repitiendo las etapas de un procedimiento de la invencion, y particularmente las etapas a), b) y c) de un procedimiento de la invencion como se ha definido previamente, en ausencia de compuestos biologicos o quimicos, o de tratamientos fisicos por testar.
[0207] Una comparacion de la medida de prueba con una medida de referencia, y una observacion de una desviacion o de una ausencia de desviacion entre las dos medidas permite obtener una information en cuanto al efecto del agente activo o del tratamiento fisico testado.
[0208] La determination cuantitativa o cualitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de una secuencia de aminoacidos o de una secuencia de acidos nucleicos se puede efectuar por cualquier metodo conocido por el experto en la tecnica, y particularmente como se ha descrito anteriormente.
[0209] Segun una forma de realization, el cribado de un agente activo o de un tratamiento fisico susceptible de modular la actividad de una secuencia de aminoacidos puede hacerse por medicion de la actividad o de la expresion de una molecula objetivo que pertenece a las vias de serialization o de metabolismo en las cuales se puede implicar dicha una secuencia de aminoacidos, como por ejemplo un sistema de gen reportero.
[0210] Segun una forma de realizacion, un procedimiento segun la patente se puede aplicar en un sistema acelular, esto es, en un sistema que no comprende celulas pero que reproduce funciones celulares, o en una muestra celular aislada.
[0211] Un procedimiento conforme a la patente se puede efectuar sobre una muestra celular aislada, una muestra acelular, sobre una secuencia de aminoacidos aislada o sobre una secuencia de acidos nucleicos aislada descrita por la patente, obtenidos por biopsia cutanea, a partir de celulas en cultivo, particularmente de un modelo epidermico, o de una toma de superficie cutanea no invasiva, particularmente por adhesivo (« tape-stripping ») de estrato corneo o por simple lavado, como se ha descrito anteriormente.
[0212] Ventajosamente, como muestra celular conveniente para la patente, se puede mencionar una muestra de queratinocitos o cualquier otro tipo celular de la piel que expresa una secuencia de aminoacidos descrita por la patente.
[0213] De manera preferida, el cribado de un agente activo o de un tratamiento fisico se puede efectuar por medida de la variation de la expresion, en presencia y en ausencia del agente activo o del tratamiento fisico cribado, de una secuencia de aminoacidos segun la patente, y preferiblemente representada por una secuencia elegida entre SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17, o SEC ID N°: 18, un analogo o un fragmento de esta.
Agente modulador
[0214] Se entiende por « agente modulador » o « agente activo o un tratamiento fisico susceptible de modular la expresion, la maduracion o la actividad de una secuencia de aminoacidos o de una secuencia de acidos nucleicos »,
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todo compuesto o fenomeno fisico susceptible de actuar, directamente o indirectamente, sobre al menos una secuencia de aminoacidos o una secuencia de acidos nucleicos conformes a la patente, o sobre un elemento de una via de serialization intra o extracelular, o de una via metabolica, o de regulation de la transcription y/o de la traduction que implica dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos.
[0215] Se entiende por « modular », respecto a un efecto dado, la action de estimular o de inhibir este efecto.
[0216] Los agentes activos o los tratamientos fisicos salidos de un cribado segun la patente pueden ser ventajosamente utilizados con fines cosmeticos, particularmente para la piel madura o signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
Tambien se describe que los agentes activos o los tratamientos fisicos salidos de un cribado segun la patente pueden ser ventajosamente utilizados con fines cosmeticos, particularmente para la hidratacion de la piel, y en particular de la piel seca o signos de sequedad cutanea.
[0217] Segun una forma de realization, un agente activo segun la patente puede ser un agente estimulador de la actividad, de la expresion o de la maduracion de una secuencia de aminoacidos de la invencion.
[0218] En particular, un agente estimulador se puede elegir entre un lisado de Bifidobacterium sp. y una mezcla compuesta de un lisado de Bifidobacterium sp. y de fitoesfingosina-salicilato.
[0219] De manera preferida, un lisado de Bifidobacterium sp. puede ser un lisado de Bifidobacterium longum.
Un lisado de Bifidobacterium longum que conviene a una realizacion segun la patente puede ser el lisado registrado bajo el nombre I NCI: Bifidat ferment Lysate, bajo el nombre EINECS: Bifidobacterium longum, bajo el N° EINECS: N° 306168-4, y bajo el N° CAS: N° 96507-89-0.
Un tal lisado es particularmente comercializado con la denomination Repair Complex CLR® por la empresa K. RICHTER GmbH.
[0220] Una mezcla compuesta de un lisado de Bifidobacterium sp. y de fitoesfingosina-salicilato segun la patente puede comprender un lisado de Bifidobacterium longum como se ha definido previamente y un derivado de fitoesfingosina- salicilato.
[0221] Un derivado de fitoesfingosina-salicilato conveniente a la ejecucion de la patente puede ser el derivado comercializado por la empresa EVONICK GOLDSCHMIDT con la denominacion Phytosphingosine SLC®.
[0222] Una mezcla segun la patente puede comprender un lisado de Bifidobacterium sp. en una proportion de 10 % y un derivado de fitoesfingosina-salicilato en una proporcion de 0,002 %.
[0223] Como agente modulador susceptible de ser cribado segun un uso o un procedimiento conforme a la patente, tambien se puede mencionar los anticuerpos, o los ARN interferentes.
Composiciones
[0224] La presente patente tambien se refiere a composiciones, particularmente cosmeticas, que comprenden, en un medio fisiologicamente o cosmeticamente aceptable, una cantidad eficaz de por lo menos una secuencia de aminoacidos descrita por la patente, o de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos descrita por la patente.
[0225] De una forma mas particular, la patente describe una composition cosmetica que comprende un peptido representado por una secuencia de aminoacidos elegida de entre SEC ID N°: 17 o SEC ID N°: 18, un analogo o un fragmento de esta o una secuencia de acidos nucleicos que codifica un tal peptido.
[0226] La invention se refiere a una composicion cosmetica que comprende un peptido aislado representado por la secuencia de aminoacidos SEC ID N°: 18 o una secuencia de acidos nucleicos que codifica un tal peptido.
[0227] En el sentido de la presente invencion, se entiende por « medio fisiologicamente aceptable », un medio conveniente para la administration de una composicion por via topica sobre la piel, el cuero cabelludo, o los labios, o por via oral o por via parenteral tal y como la via intradermica o subcutanea.
[0228] Una composicion segun la patente puede contener adyuvantes habituales en el dominio considerado, tales como gelificantes hidrofilos o lipofilos, aditivos hidrofilos o lipofilos, conservantes, antioxidantes, solventes, perfumes, cargas, filtros, absorbentes de olores y materias colorantes.
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[0229] Las cantidades de los diferentes componentes de las composiciones segun la patente son las habitualmente utilizadas en los dominios considerados.
[0230] La cantidad de secuencia de aminoacidos, o de secuencia de acidos nucleicos descrita en la patente, tambien llamada « cantidad eficaz » es, por supuesto, funcion de la naturaleza del activo y del efecto deseado y puede, por lo tanto, variar en gran medida.
[0231] Para dar un orden de tamano, una composicion puede contener una secuencia de aminoacidos, o una secuencia de acidos nucleicos, en una cantidad que representa de 0,00001 % a 50 % del peso total de la composicion, en particular en una cantidad que representa de 0,001 % a 10 % del peso total de la composicion, y particularmente en una cantidad que representa de 0,1 % a 1 % del peso total de la composicion.
[0232] Segun otra forma de realizacion, una composicion cosmetica de la patente puede comprender, ademas, al menos un agente activo cosmetico y/o terapeutico adicional.
Activos adicionales
[0233] Como ejemplos de agentes activos adicionales utilizables en el contexto de la presente patente, se puede hacer mencion a los aceites cosmeticos, tales como los aceites de silicona, los aceites vegetales de tipo trigliceridos, los aceites hidrocarbonados tales como el aceite de PARLEAM y los esteres de acidos grasos y de alcohol graso.
[0234] Tambien puede ser posible utilizar otros agentes activos que permiten mejorar el estado de la piel y/o de sus anexos, tales como activos hidratantes o humidificantes o agentes activos que permiten mejorar la barrera lipidica natural, tales como ceramidas, sulfatos de colesterol y/o acidos grasos, y sus mezclas.
[0235] Tambien puede ser posible utilizar otros agentes activos que permiten mejorar el estado de la piel y/o de sus anexos, tales como activos anti-envejecimiento.
[0236] Tambien puede ser posible utilizar enzimas que tienen una actividad sobre la piel y/o sus anexos, tales como proteasas, lipasas, glucosidasas, amidasas, cerebrosidasas y/o melanasas, y sus mezclas.
[0237] Como otros ejemplos de agentes activos convenientes para la realizacion de la presente patente figuran: los activos analgesicos, los activos anti-levaduras, los activos antibacterianos, los activos antiparasitarios, los activos antifungicos, los activos antivirales, los activos antiinflamatorios esteroideos, los activos anestesicos, los activos antipruriginosos, los activos queratoliticos, los activos anti-radicales libres, los activos anti-seborreicos, los activos antipeliculares, los activos antiacne, los activos para prevenir el envejecimiento de la piel y/o para mejorar su estado, los activos antidermatitis, los activos antiirritantes, los activos inmunomoduladores, los activos para el tratamiento de la piel seca, los activos antitranspirantes, los activos anti-psoriasicos, los activos protectores contra los UV, los activos antihistaminicos, los activos cicatrizantes, los activos autobronceantes, los antioxidantes tales como el te verde o fracciones activas de este, la glicerina, la laponita, la cafeina, los aceites esenciales aromaticos, los colorantes, los activos despigmentantes, los liporreguladores, los activos suavizantes, refrescantes, desodorantes, insensibilizantes, blanqueantes, nutrientes, los activos que disminuyen la diferenciacion y/o la proliferacion y/o la pigmentacion cutanea, y sus mezclas.
[0238] Como activos adicionales susceptibles de convenir a una forma mas particular a la ejecucion de la patente tambien se pueden mencionar los microorganismos probioticos, ademas de los considerados en el lisado previamente descrito, los activos prebioticos, los activos que favorecen la sintesis de factor de defensa de la piel, los activos que permiten restablecer el equilibrio entre diferenciacion/proliferacion de las celulas de la epidermis, en particular tales como los activos de tipo retinol o similares al retinol, los activos hidratantes o activos que estimulan la actividad de proteasa cutanea, particularmente de la catepsina D.
Uso cosmetico
[0239] La presente patente se refiere al uso cosmetico de una cantidad eficaz de por lo menos una secuencia de aminoacidos o de acidos nucleicos descrita en la patente, como agente activo para prevenir y/o tratar la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
[0240] Tambien se describe el uso cosmetico de una cantidad eficaz de por lo menos una secuencia de aminoacidos o de acidos nucleicos descrita en la patente o de por lo menos un agente modulador de la actividad, de la expresion o de la maduracion de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos, y particularmente un agente modulador como se ha definido previamente, como agente activo para favorecer y/o reforzar la hidratacion de la
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piel.
[0241] Tambien se describe que un uso segun la patente se puede dedicar a prevenir y/o tratar una piel seca y/o signos de sequedad cutanea.
[0242] Segun otro aspecto, la presente invencion se refiere a un procedimiento cosmetico para prevenir y/o tratar una piel madura y/o signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea de un individuo que lo necesite, que comprende al menos una etapa que consiste en administrar a dicho individuo al menos una composicion que comprende como agente activo (i) al menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13 y SEC ID N°: 16, o (ii) al menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre Sec ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3 y SEC ID N°: 6.
[0243] Un procedimiento o un uso de la patente permiten prevenir y/o tratar el envejecimiento cutaneo, particularmente cronologico y/o fotoinducido.
[0244] Un procedimiento o un uso segun la patente permiten conferir y/o restaurar un aspecto joven a la piel, que se manifiesta por una piel lisa, elastica, tonica, o firme, o una tez luminosa.
[0245] Un procedimiento o un uso segun la patente permiten prevenir y/o reducir la presencia de un microrrelieve marcado de la piel, en particular a nivel de la comisura de los labios y las patas de gallo.
[0246] Un procedimiento o un uso segun la patente permiten reforzar las propiedades de barrera de la piel.
[0247] En la presente patente tambien se describe un procedimiento cosmetico, o no terapeutico, para favorecer y/o reforzar la hidratacion de la piel, y preferiblemente para prevenir y/o tratar una piel seca y/o signos de sequedad cutanea, de un individuo que lo necesite, el procedimiento que comprende al menos una etapa que consiste en administrar a dicho individuo al menos una composicion que comprende como agente activo (i) al menos una secuencia de aminoacidos descrita por la patente o (ii) al menos una secuencia de acidos nucleicos descrita por la patente, o (III) al menos un agente modulador de la actividad, de la expresion o de la maduracion de dichas secuencias descritas por la patente, particularmente tal como se ha definido anteriormente.
[0248] Un procedimiento o un uso segun la patente tambien permiten conferir y/o restaurar un aspecto hidratado y sano a la piel, que se manifiesta en una piel lisa, elastica, tonica, o firme, o una tez luminosa.
[0249] Un procedimiento o un uso segun la patente tambien permite prevenir y/o reducir la presencia de escamillas, de rugosidades, de grietas, de escamas y/o de lineas de expresion o arrugas asociadas a la piel seca o con deficit de hidratacion.
[0250] Un procedimiento o un uso segun la patente permiten igualmente reforzar las propiedades de barrera de la piel.
[0251] De manera preferida, un procedimiento segun la patente puede comprender la aplicacion por via topica sobre al menos una parte de la piel de un individuo que lo necesite, en particular sobre la piel de la cara y/o del escote, de por lo menos una capa de una composicion topica de la invencion.
[0252] Ventajosamente, un procedimiento segun la patente por via topica puede comprender la aplicacion sobre la piel, y particularmente sobre la piel de la cara, de una composicion segun la patente en forma de una mascara.
[0253] Un procedimiento cosmetico por via topica segun la patente puede comprender ventajosamente la aplicacion de una composicion segun la patente, en asociacion de manera simultanea, sucesiva o separada en el tiempo respecto a una composicion cosmetica o dermatologica adicional diferenciada de la composicion segun la patente y destinada al cuidado y/o al maquillaje de la piel.
[0254] Segun otra forma de realization preferida, un procedimiento cosmetico segun la patente se puede aplicar por via oral, particularmente por administration de por lo menos una composicion alimenticia o dietetica con fines cosmeticos.
[0255] Segun otra forma de realizacion preferida, un procedimiento cosmetico segun la patente se puede aplicar por via parenteral.
La realizacion por via parenteral de un procedimiento cosmetico segun la patente se efectua con exception de toda intervention quirurgica y solo pretende ejercer un tratamiento superficial de la piel con fines esteticos.
[0256] Asi, un procedimiento cosmetico segun la patente por via parenteral se aplica por cualquier tecnica de inyeccion o
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dispositivo conveniente para una inyeccion intraepidermica y/o intradermica y/o subcutanea.
[0257] Tal administracion puede ser efectuada, por ejemplo, por mesoterapia.
[0258] Un procedimiento cosmetico por via parenteral solo se traduce, por lo tanto, en una fractura superficial de la piel y sale por lo tanto de todo marco medico o terapeutico.
[0259] Para la via parenteral, se podra alternativamente dar preferencia a la administracion mediante parches de alcance sistemico.
[0260] Un procedimiento cosmetico segun la patente se puede aplicar de manera diaria, por ejemplo a razon de una unica administracion por dia, o de una administracion fraccionada en dos o tres veces al dia, por ejemplo una vez por la manana y una vez por la tarde.
[0261] Un procedimiento cosmetico segun la patente se puede aplicar a lo largo de un periodo de tiempo que varia de una semana a varias semanas, incluso varios meses, este periodo que puede ademas ser repetido despues de los periodos de no tratamiento durante varios meses, incluso varios anos.
[0262] Como ejemplo de procedimiento cosmetico segun la patente, se puede prever una administracion de una composition descrita por la patente, por ejemplo, en una proportion de 1, 2 o 3 veces al dia, o mas, y habitualmente durante una duration prolongada de por lo menos 4 semanas, incluso de 4 a 15 semanas, con, en su caso uno o varios periodos de interruption.
Piel reconstruida
[0263] Segun otro aspecto, la presente patente se refiere al uso de una cantidad eficaz de por lo menos una secuencia de aminoacidos descrita por la patente, o de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos descrita por la patente, para preparar un modelo celular epitelial pluriestratificado, preferiblemente un modelo de piel reconstruida.
[0264] El interes de desarrollar modelos organotipicos mas cercanos a las condiciones in vivo es grande para la evaluation de la seguridad y eficacia de los activos y formulas para aplicaciones cosmeticas y dermatologicas.
[0265] El uso de por lo menos una secuencia de aminoacidos descrita por la patente, o de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos descrita por la patente, o de por lo menos un agente modulador descrito por la patente, en un medio de cultivo es susceptible de mejorar la calidad de los modelos desarrollados.
[0266] Un modelo de piel reconstruida segun la patente puede ser util para imitar una piel madura, eventualmente asociada a una sequedad cutanea, o las condiciones de una restauracion de la homeostasis de una piel madura, eventualmente asociada a una sequedad cutanea.
[0267] Segun otro aspecto, la presente patente se refiere a un procedimiento de preparation de un modelo celular epitelial pluriestratificado aislado, y preferiblemente una piel reconstruida aislada que comprende al menos la etapa de poner en contacto al menos una cantidad eficaz de por lo menos una secuencia de aminoacidos, o de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos, con celulas susceptibles de generar una piel reconstruida aislada, y particularmente queratinocitos.
[0268] Un modelo de piel reconstruida puede comprender diferentes tipos celulares, tales como queratinocitos, fibroblastos, celulas de Langerhans y melanocitos.
Las celulas de tipo fibroblastos pueden ser irradiadas o no.
[0269] Tales modelos y su preparacion son conocidos por el experto en la tecnica.
[0270] Segun otro aspecto mas, la presente patente tambien describe un procedimiento de preparacion de un modelo celular epitelial pluriestratificado, preferiblemente un modelo de piel reconstruida, que comprende al menos una etapa de puesta en cultivo de celulas de por lo menos un tipo celular de dicho modelo, dichas celulas habiendo sido geneticamente modificadas para suprimir la expresion de una secuencia de aminoacidos o de una secuencia de acido nucleicos descrita por la patente.
[0271] La adquisicion de celulas geneticamente modificadas para suprimir la expresion de una secuencia de aminoacidos o de una secuencia de acidos nucleicos descrita por la patente, celulas llamadas « knock-out », se puede realizar por cualquier metodo conocido por el experto en la tecnica.
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[0272] Por ejemplo, tales celulas se pueden obtener por transfeccion y recombinacion homologa de un fragmento de acido nucleico que se inserta en o toma la ubicacion del gen que expresa la secuencia de aminoacidos cuya expresion se desea suprimir.
[0273] Igualmente, puede ser posible suprimir la expresion de un gen dado por transfeccion en la celula de una secuencia de acido nucleico que codifica un ARN interferente especifico del ARNm sacado del gen cuya expresion se desea suprimir.
Leyendas de las figuras
[0274] Figura 1: representa la variacion de la expresion de la dermicidina (media ± sem) medida por Western Blot en funcion del grado de hidratacion de la piel.
[0275] En el sentido de la presente patente, « un » debe entenderse, excepto si se indica lo contrario, en el sentido de « al menos un ».
[0276] Los ejemplos y figuras a continuacion se presentan a titulo ilustrativo y no limitativo.
Ejemplos
Ejemplo 1
Expresion de la dermicidina, en la piel 1- Materiales y metodos a- protocolo iTRAQ
[0277] La deteccion de la expresion de la dermicidina (DCD) se realizo mediante el metodo iTRAQ (Isobaric Tagging Reagents for Quantitative Proteomic Analysis) desarrollado por la empresa Applied Biosystems.
Este metodo permite la cuantificacion de peptidos previamente marcados por un marcador isobarico.
Existe 4 marcadores diferentes y se pueden comparar hasta 4 tipos de muestras distintas en una mismo analisis LC-MS- MS.
[0278] El principio de este metodo es el siguiente:
- Digestion de extractos proteicos y marcaje:
[0279] En primer lugar, cada extracto proteico es digerido por una enzima proteolitica: la tripsina.
[0280] En segundo lugar, cada mezcla peptidica obtenida es marcada con un marcador isobarico de una masa total 145, que comprende un grupo « reportero » de masa 114, 115,116 o 117, y un grupo « balance » de masa 31, 30,29 o 28, ligados entre si por un sito de fragmentacion MS.
[0281] El marcaje es obtenido por reaccion del Peptide Reactive Group de cada marcador con las aminas primarias de los peptidos (extremo N-terminal de los peptidos o la cadena lateral de las lisinas o de las tirosinas.
- Analisis LC-MS-MS y cuantificacion:
[0282] Despues de la etapa de marcaje, las muestras se ponen en comun y son analizadas por espectrometria de masa. Un peptido dado, presente en varias muestras, tendra una masa progenitora identica pero su espectro de fragmentacion MS/MS generara la masa del grupo transportador caracteristico de cada uno de los reactivos iTRAQ.
La comparacion de la intensidad de cada ion transportador (114, 115,116 o 117) permite entonces la cuantificacion del peptido.
[0283] El metodo iTRAQ es descrito mas precisamente por Zieske (J. Exp.mBot., 2006,57 :1501) o Wiese et al.(Proteomics, 2007,7 :340).
b- Extraccion y tratamiento de las muestras cutaneas
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[0284] Las extracciones de tipo stripping con tira adhesiva del estrato corneo de una superficie de 90 cm2 se obtienen segun el protocolo descrito por Mehul et al., J. Biol. Chem., 2000,275(17):12841-7, a nivel de la cara externa de la pierna. Se realiza la extraccion de dos grupos de sujetos:
1) Grupo « Piel Moven »: 18-40 anos, 27 sujetos masculinos;
2) Grupo « Piel Madura »: superior a 60 anos, 35 sujetos masculinos.
[0285] Estas extracciones de piel son a continuacion analizadas por proteomica por medio de la tecnica llamada de « marcaje isobarico », previamente descrita, utilizando el kit iTRAQ Reagents Multiplex kit (4352135), de Applied Biosystems, segun las instrucciones del fabricante.
2- Resultados
[0286] Entre las proteinas identificadas, los peptidos representados por las secuencias SEC ID N°: 17 y SEC ID N°: 18 salidas de la dermicidina (N° de deposito P81605 - Ref.: Swissprot/Uniprot) son detectados y cuantificados en cuatro experimentos.
[0287] Los resultados de cuantificacion de la dermicidina se dan en la tabla siguiente:
Proteina
N°Experimento Ratio 116/114 Maduro/Joven
1 2 3 4 Media Desviacion estandar
Dermicidina
0,3937 0,2465 0,4356 0,4209 0,37 0,09
[0288] Estos resultados muestran que el ratio iTRAQ medio de maduro/joven es igual a 0,37 ± 0,09.
Esta medida traduce una fuerte expresion de la dermicidina en las pieles del grupo « piel joven », y una fuerte disminucion de su expresion en las pieles del grupo « piel madura ».
[0289] La dermicidina se revela por lo tanto como un biomarcador interesante y especifico de la piel, y particularmente de un estado de edad de la piel, asociado o no a una sequedad cutanea.
[0290] La expresion de la apolipoproteina D y de la cadena pesada de la catepsina D ha sido medida a modo de datos comparativos.
[0291] Los resultados obtenidos se expresan en la tabla siguiente.
Proteina
N°Experimento Ratio 116/114 Maduro/Joven
1 2 3 4 Media Desviacion estandar
Apolipoproteina D
0,7975 0,7455 0,8205 0,9062 0,82 0,07
Cadena pesada de la catepsina D
0,9580 1,1068 0,9595 0,9537 0,99 0,07
[0292] En comparacion con la dermicidina, la apolipoproteina D y la cadena pesada de la catepsina D no estan mas que muy ligeramente subexpresadas en el grupo « piel madura » en relacion al grupo « piel joven ».
[0293] Este estudio valida asi el uso de la dermicidina como biomarcador de excepcion de la piel, y particularmente de la piel madura, asociada o no a una sequedad cutanea.
Ejemplo 2
Expresion de la dermicidina en la piel 1- Materiales y metodos a- Protocolo Western-Blot
[0294] La detection de la expresion de la dermicidina (DCD) se realizo a traves de un metodo de Western-Blot.
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[0295] El principio de este metodo es el siguiente: las proteinas se separan por migracion electroforetica sobre un gel Criterion SDS-PAGE 10-20 % (Bio-Rad). Despues de una transferencia semi seca sobre membrana PVDF, las proteinas se incuban en una solucion de bloqueo (TBS+ 0,1 %de Tween+ 1 de % leche) y luego son incubadas con el anticuerpo primario dirigido contra la proteina de interes durante una noche a 4 °C.
Una segunda incubacion con el anticuerpo secundario (acoplado a una peroxidasa) dirigido contra el anticuerpo primario se efectua durante una hora a temperatura ambiente.
[0296] Segun el grado de sensibilidad, diferentes kits se utilizan para la revelacion: ECL, ECL+ o ECL Advance (Amersham). La imagen es adquirida en FluorSmax (Biorad) y las bandas cuantificadas con ayuda de un software Quantity-One (Biorad)
Proteina
Naturaleza de las muestras Anticuerpo I Dilution Anticuerpo II Detection Peso mol. calculado
Dermicidina
Desnaturalizada Sc-27466/poly 1/100 IgG anti- Cabra-HRP ECL+ 60seg 9kDa
b- Extraccion y tratamiento de las muestras cutaneas
[0297] 120 individuos de sexo femenino, mayores de 18 a 70 anos, fueron seleccionadas para este estudio.
[0298] Se delimitaron cuatro zonas por pierna (pierna izquierda externa/interna, pierna derecha externa/interna).
Las extracciones se realizan por stripping con tira adhesiva (en la parte inferior de la pierna) segun el protocolo descrito por Mehul et al., (J. Biol. Chem., 2000,275(17):12841-7).
[0299] Para este estudio, el analisis se efectua sobre una zona: la pierna izquierda externa.
[0300] Las muestras salidas de la extraccion con cintas adhesivas (stripping) fueron utilizadas para el analisis Western Blot.Antes de la realization de las tomas, los tipos de pieles fueron caracterizados por una puntuacion clinica.
[0301] La puntuacion clinica es realizada por un dermatologo segun el « Atlas de la piel seca en las piernas » con el fin de identificar los diferentes tipos de pieles segun los grados que aparecen a continuation:
0: piel normal, relieve cutaneo regular, aspecto liso
1: piel ligeramente seca, relieve cutaneo estriado, aspecto aspero
2: piel seca, relieve cutaneo estriado y algunas escamillas, aspecto aspero
3: piel muy seca, numerosas escamillas y algunas escamas, aspecto rugoso
4: piel extremadamente seca, numerosas pieles, aspecto rugoso
Preparation de los polvos acetonicos
[0302] Cada tira de stripping de 75 cm2 se sumerge en 75 ml de acetona. El barniz se disuelve y los corneocitos estan en suspension. La mezcla se filtra en bomba de vacio sobre membrana de nylon de 40 pm para recoger los corneocitos.
Dos lavados sucesivos se efectuan con el mismo volumen de acetona. Se obtienen polvos acetonicos de estrato corneo en forma seca.
Extraccion de las muestras
[0303] Se realizan dos tipos de extraccion de manera sucesiva: extraccion nativa y luego desnaturalizante.
Extraccion nativa
[0304] Los polvos acetonicos se pesan y se colocan en tubos Eppendorf de 1,5 ml (Trefflab cat.N°.96,07246,9,01). 100 pl de tampon PBS 0,1 % triton X100 se anaden a 1 mg de polvo acetonico y la mezcla se deja una hora en contacto en el cristal.
Luego se tritura durante 30 segundos en el cristal.
El medio es a continuacion recuperado en columnas Millipore Ultraree de 0,45 pm y luego centrifugado durante 5 min a 10000 g a 4 °C: el sobrenadante es entonces recogido.
Una dosificacion de proteinas se realiza segun la tecnica del BCA (kit BCA Pierce).
Las muestras se ajustan a una concentration de 0,15 mg/ml en tampon Laemmli 4X y son conservadas a -20 °C a la espera del analisis.
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Extraccion desnaturalizante
[0305] Se realiza a partir del sedimento del extracto nativo. En tubos Eppendorf de 1,5 ml (Trefflab cat.N°96,07246,9,01) se agregan 100pl de tampon Laemmli 1X al sedimento para 1 mg de polvo acetonico.
La mezcla se hierve durante 10 min a 90 °C y luego se tritura durante 20 segundos y se centrifuga durante 10 min a 10000 G/min. El sobrenadante es recogido. Una dosificacion de proteinas se realiza segun la tecnica de Bradford.
Las muestras se ajustan a 1 mg/ml y son conservadas a -20 °C a la espera del analisis.
[0306] Estas muestras de piel son a continuacion analizadas por Western Blot como se ha descrito previamente.
Los resultados se obtuvieron a partir de los extractos desnaturalizados.
Analisis estadistico
[0307] El efecto de la sequedad cutanea (puntuacion clinica) sobre el nivel de expresion de los biomarcadores ha sido analizado a la vez graficamente representando los valores medios con su intervalo de confianza en funcion de los grupos de edad o de la puntuacion clinica de sequedad cutanea, y con ayuda de un modelo de regresion multiple con los parametros edad y puntuacion de sequedad cutanea en covariables.
[0308] La significatividad de los coeficientes (prueba de Student) asociados a las covariables permite testar la asociacion entre el biomarcador estudiado con la edad y la puntuacion de sequedad.
Tener en cuenta los dos parametros del modelo permite apreciar el efecto de uno de los parametros ajustando sobre el efecto del segundo (con los otros parametros manteniendose iguales).
[0309] El nivel de significatividad de las pruebas se fija en 5 % en un metodo bilateral no ajustado.
Los analisis han sido efectuados con ayuda del software SPPSS version 17.
Los niveles de expresion de los biomarcadores fueron previamente transformados (raiz cuadrada o Log10) cuando era util para, a la vez, simetrizar su distribucion y estabilizar su variacion.
2- Resultados
[0310] Los resultados obtenidos, ilustrados por la figura 1, muestran claramente una disminucion de la expresion de la dermicidina correlacionada con un aumento del grado de deshidratacion, o de sequedad, de la epidermis.
[0311] El analisis estadistico confirma una disminucion significativa de la expresion de la dermicidina en las pieles secas respecto a las pieles normales (p=0,046).
[0312] Este estudio valida asi el uso de la dermicidina como biomarcador de excepcion de la hidratacion de la piel, y particularmente de la piel seca.
Ejemplo 3
Efecto de un lisado de Bifidobacterium sp. sobre la expresion de la dermicidina 1- Materiales y metodos
[0313] Las extracciones de muestras de pieles, y las medidas de la expresion de la dermicidina se realizan como se indica en el ejemplo 1.
[0314] Los voluntarios son sujetos femeninos mayores de 30 a 65 anos.
Se han combinado y distribuido en dos subgrupos segun el tratamiento administrado, un grupo « Placebo », y un grupo « Tratado ».
[0315] El grupo « tratado » recibe por via topica, sobre la pierna, en una proporcion de 2 veces al dia, manana y tarde, durante 56 dias, o sea 2 meses, una composicion que comprende 10 % de Repair Complex® en una formula soporte correspondiente a una emulsion aceite en agua desmineralizada Arlacel/Myrj que contiene 5 % de Parleam, 15 % de ciclopentasiloxano, 3 % de glicerina y 2 % de vaselina.
[0316] El Repair Complex® comprende un lisado de Bifidobacterium longum registrado bajo el nombre INCI: Bifida ferment Lysate, bajo el nombre EINECS: Bifidobacterium longum, bajo el N° EINECS: N° 306-168-4, y bajo el N° CAS: N° 96507-89-0.
Este lisado es comercializado con la denominacion Repair Complex CLR® por la empresa K. RICHTER GmbH.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
[0317] El grupo « Placebo » recibe, por el contrario, unicamente la formula soporte.
[0318] Para cada condition de sujetos « Tratado » y « Placebo », se obtiene una media de los ratios J56/J0, permitiendo de este modo de evaluar el efecto del tratamiento.
[0319] Los ratios J56/J0 se calculan segun la formula siguiente:
Ratio J56/J0 « Tratado » - Ratio J56/J0 « Placebo »
% de efecto del tratamiento= 100* ----------------------------------------------------------------------
ratio J56/J0 « Placebo »
2- Resultados
[0320] Los datos sin procesar obtenidos al final del analisis son los siguientes:
Experimento 1
Ratio J56/J0 Placebo
Ratio J56/J0 Tratado
2,70
3,10
Experimento 2
Ratio J56/J0 Placebo
Ratio J56/J0 Tratado
1,00
1,62
[0321] El valor medio del ratio J56/J0 « Placebo » es de 1,85, mientras que el valor medio del ratio J56/J0 « Tratado » es de 2,36.
[0322] El tratamiento con el Repair Complex® se traduce en un aumento de la serial de 27 % respecto al placebo.
[0323] Asi, la administracion, por via topica, de un lisado de Bifidobacterium longum incrementa la expresion de la dermicidina aproximadamente un 30 % despues de 2 meses de tratamiento.
[0324] La administracion, por via topica, de un lisado de Bifidobacterium sp. Permite, por lo tanto, restaurar un nivel de expresion de la dermicidina a nivel de la piel, y particularmente de la piel madura, asociada o no a una sequedad cutanea, propicio para reforzar su accion de proteccion de la piel, para reforzar las propiedades de barrera de la piel y para reducir los signos cutaneos del envejecimiento, asociados o no a una sequedad cutanea.
[0325] La administracion, por via topica, de un lisado de Bifidobacterium sp. permite igualmente restaurar un nivel de expresion de la dermicidina a nivel de la piel seca, propicio para reforzar su accion de proteccion de la piel, para reforzar las propiedades de barrera de la piel y para reducir los signos de sequedad cutanea.
[0326] Este estudio valida ademas el uso de la dermicidina como biomarcador para evaluar la eficacia de un tratamiento cosmetico de la piel madura, y como herramienta de cribado de nuevos agentes activos destinados al tratamiento de la piel madura, asociada o no a una sequedad cutanea.
Ejemplo 4
Efecto de una mezcla lisada de Bifidobacterium longum y de fitoesfingosina salicilato sobre la expresion de la dermicidina
1- Materiales y metodos
[0327] Las extracciones de muestras de pieles y las medidas de la expresion de la dermicidina se realizan como se indica en el ejemplo 1.
[0328] Los voluntarios son sujetos femeninos mayores de 40 a 45 anos. Cada sujeto es su propia muestra de control, se extraen muestras de los dos brazos pero solo uno se trata con el producto testado y el segundo brazo recibe un placebo.
[0329] El brazo « tratado » recibe por via topica, en una proportion de 2 veces al dia, manana y tarde, durante 56 dias,
5
10
15
20
25
30
35
40
45
es decir 2 meses, una composicion que comprende 10 % de Repair Complex® y 0,002 % de Phytosphingosine-SLC en una formula soporte correspondiente a una emulsion aceite en agua desmineralizada Arlacel/Myrj que contiene 5 % de Parleam, 15 % de ciclopentasiloxano, 3 % de glicerina y 2 % de vaselina.
[0330] El Repair Complex® comprende un Bifidobacterium longum registrado bajo el nombre INCI: Bifida ferment Lysate, bajo el nombre EINECS: Bifidobacterium longum, bajo el N° EINECS: N° 306-168-4, y bajo el N° CAS: N° 96507-89-0. Este lisado es comercializado con la denominacion Repair Complex CLR® por la empresa K. RICHTER GmbH.
[0331] El derivado fitoesfingosina-salicilato es el comercializado por la empresa EVONICK GOLDSCHMIDT con la denominacion Phytosphingosine SLC®.
[0332] El brazo « Placebo » recibe unicamente la formula soporte.
[0333] Para cada condicion « Tratado » y « Placebo », se obtiene una media de los ratios J56/J0 como se indica anteriormente, permitiendo de este modo evaluar el efecto del tratamiento.
2- Resultados
[0334] Los datos sin procesar obtenidos al final del experimento son los siguientes:
Experimento n° 1
Ratio J56/J0 Placebo
Ratio J56/J0 Tratado
0,75
1,66
Experimento n°2
Ratio J56/J0 Placebo
Ratio J56/J0 Tratado
0,45
0,81
[0335] El valor medio del ratio J56/J0 « Placebo » es de 0,6, mientras que el valor medio del ratio J56/J0 « tratado » es de 1,235.
[0336] El efecto del tratamiento es igual a 105%, y traduce una duplicacion de la expresion de la dermicidina en relacion al « Placebo ».
[0337] Asi, la administracion, por via topica, de una mezcla que comprende un lisado de Bifidobacterium longum y fitoesfingosina-salicilato incrementa la expresion de la dermicidina en mas de 100 %.
[0338] La administracion, por via topica, de una mezcla que comprende un lisado de Bifidobacterium longum y fitoesfingosina-salicilato permite, por lo tanto, restaurar un nivel de expresion de la dermicidina a nivel de la piel, y particularmente de la piel madura, asociada o no a una sequedad cutanea, propicio para reforzar su accion de protection de la piel, para reforzar las propiedades de barrera de la piel, y para reducir los signos cutaneos del envejecimiento, asociados o no a una sequedad cutanea.
La administracion, por via topica, de una mezcla que comprende un lisado de Bifidobacterium longum y fitoesfingosina- salicilato permite igualmente restaurar un nivel de expresion de la dermicidina a nivel de la piel, y particularmente de la piel seca, propicio para reforzar su accion de proteccion de la piel, para reforzar las propiedades de barrera de la piel, y para reducir los signos de sequedad cutanea.
Bibliografia
[0339]
Anderson, R. K. and W. L. Kenney (1987). « Effect of age on heat-activated sweat gland density and flow during exercise in dry heat » J. Appl. Physiol. 63(3): 1089-1094.
Baechle, D., T. Flad, et al. (2006). « Cathepsin D is present in human eccrine sweat and involved in the postsecretory processing of the antimicrobial peptide DCD-1L » J. Biol. Chem. 281(9):5406-5415.
5
10
15
20
25
30
Cunningham, T. J., L. Hodge et al. (1998) «Identification of a survival-promoting peptide in medium conditioned by oxidatively stressed cell lines of nervous system origin » J. Neurosci 18(18):7047-7060.
Flad, T., R. Bogumil et al. (2002) « Detection of dermcidin-derived peptides in sweat by ProteinChip Technology. » J. Immunol. Methods 270(1): 53-62.
Kenney, W. L. and S. R. Fowler (1988) « Methylcholine-activated eccrine sweat gland density and output as a function of age » J. Appl. Physiol. 65(3):1082-1086.
Kyte et al., (1982), J. Mol. Biol., 157: 105.
Mehul B. et al., (2000) « Identification and Cloning of a New Calmodulin-like Protein from Human Epidermis » J. Biol. Chem. 275(17):12841-12847
Moreira, D. F, B. E. Strauss et al. (2008) « Genes up- and down-regulated by dermcidin in breast cancer: a microarray analysis » Genet. Mol. Res. 7(3): 925-932.
Niyonsaba, F. A. Suzuki et al. (2009) « The human antimicrobial peptide dermcidin activates normal human keratinocytes » Br. J. Dermatol. 160(2): 243-249.
Rieg, S.C., Garbe et al. (2004) « Dermcidin is constitutively produced by eccrine sweat gland and is not induced in epidermal cells under inflammatory skin conditions » Br. J. Dermatol. 151(3): 534-539.
Rieg S., II Steffen et al. (2005) « Deficiency of dermcidin-derived antimicrobial peptides in sweat of patients with atopic dermatitis correlates with an impaired innate defense of human skin in vivo » J. Immunol. 174(12):8003-8010.
Sakurada K., T. Akutsu, et al., (2009) « Detection of dermcidin for sweat identification by real-time RT-PCR and ELISA » Forensic. Sci. Int. 2010 Jan. 30;194(1-3):80-4. Epub 2009 Nov. 13.
Sambrook et al., 1989, Vol. I-III, Coldspring Harbor Laboratory, Coldspring Harbor Press, NY.
Schittek, B, R. Hipfel et al. (2001) : « Dermcidin: a novel human antibiotic peptide secreted by sweat glands » Nat. Immunol. 2(12): 1133-11137.
Watchorn, T. M. N. Dowidar et al. (2005) « The chachectic mediator proteolysis inducing factor activates NF-kappaB and STAT3 in human Kupffer cells and monocytes » Int. J. Oncol. 27(4): 1105-1111.
Wiese et al., (2007) « Protein labeling by iTRAQ: A new tool for quantitative mass spectrometry in proteome research » Proteomics 7(3):340-350
Zieske et al. (2006) « A perspective on the use of iTRAQ reagent technology for protein complex and profiling studies » J. Exp. Bot. 57(7):1051-1058.
Listado de secuencias
[0340]
<110> L'OREAL
<120> Utilizacion cosmetica de la Dermicidina, analogos o fragmentos de esta
5
10
15
20
25
<150> FR 10 57690 <151> 2010-09-24
<150> FR 10 57699 <151> 2010-09-24
<150> US 61/344826 <151> 2010-10-19
<150> US 61/344827 <151> 2010-10-19
<160> 20
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1 <211> 333 <212> ADN <213> Homo Sapiens
<400> 1

atgaggttca tgactctcct cttcctgaca gctctggcag gagccctggt ctgtgcctat 60

gatccagagg ccgcctctgc cccaggatcg gggaaccctt gccatgaagc atcagcagct 120

caaaaggaaa atgcaggtga agacccaggg ttagccagac aggcaccaaa gccaaggaag 180

cagagatcca gccttctgga aaaaggccta gacggagcaa aaaaagctgt ggggggactc 240

ggaaaactag gaaaagatgc agtcgaagat ctagaaagcg tgggtaaagg agccgtccat 300

gacgttaaag acgtccttga ctcagtacta tag 333
<210>2 <211> 234 <212> ADN <213> Homo Sapiens
<400> 2
atgaggttca tgactctcct cttcctgaca gctctggcag
gatccagagg ccgcctctgc cccaggatcg gggaaccata
ctacagaagc ccccttcaga gactgccaaa tttctgtcct
agagagaagc tagtgccctc tgcaaaacct ccccacacta
<210>3 <211> 366
gagccctggt
ctgtgcctat 60
aacaaatgga
ttgtttacag 120
catccaccaa
cctgcctaga 180
gggggctggt
ataa 234
<212> ADN <213> Homo Sapiens
<400>3

atgaggttca tgactctcct cttcctgaca gctctggcag gagccctggt ctgtgcctat 60

gatccagagg ccgcctctgc cccaggatcg gggaaccctt gccatgaagc atcagcagct 120

caaaaggaaa atgcaggtga agacccaggg ttagccagac aggcaccaaa gccaaggaag 180

cagagatcca gccttctgga aaaaggccta gacggagcaa aaaaagctgt ggggggactc 240

ggaaaactag gaaaagatgc agtcgaagat ctagaaagcg tgggtaaagg tggggaagag 300

aggttggtct ttggggctcc tgtgaatcta acctccatcc ctctgacttc tgtgagccgt 360

ccatga 366
5 <210>4
<211> 57 <212> ADN <213> Homo Sapiens
<400> 4
10 atgaggttca tgactctcct cttcctgaca gctctggcag gagccctggt ctgtgcc 57
<210>5 <211> 90 <212> ADN <213> Homo Sapiens
15 <400> 5
tatgatccag aggccgcctc tgccccagga tcggggaacc cttgccatga agcatcagca 60
gctcaaaagg aaaatgcagg tgaagaccca 90
<210>6 <211> 276 <212> ADN
20 <213> Homo Sapiens
<400> 6

tatgatccag aggccgcctc tgccccagga tcggggaacc cttgccatga agcatcagca 60

gctcaaaagg aaaatgcagg tgaagaccca gggttagcca gacaggcacc aaagccaagg 120

aagcagagat ccagccttct ggaaaaaggc ctagacggag caaaaaaagc tgtgggggga 180

ctcggaaaac taggaaaaga tgcagtcgaa gatctagaaa gcgtgggtaa aggagccgtc 240

catgacgtta aagacgtcct tgactcagta ctatag 276
5
10
15
20
25
<210>7 <211> 33 <212> ADN <213> Homo Sapiens
<400>7
gaaaatgcag gtgaagaccc agggttagcc aga 33
<210>8 <211> 87 <212> ADN <213> Homo Sapiens
<400> 8
aaagctgtgg ggggactcgg aaaactagga aaagatgcag tcgaagatct agaaagcgtg 60 ggtaaaggag ccgtccatga cgttaaa 87
<210>9 <211> 138 <212> ADN <213> Homo Sapiens
<400> 9
imagen1
60
120
138
<210> 10 <211> 141 <212> ADN <213> Homo Sapiens
<400> 10
imagen2
60
120
141
<210> 11 <211> 110 <212> PRT <213> Homo Sapiens
<400> 11
imagen3
<210> 12 <211> 77 <212> PRT <213> Homo Sapiens
5
<400> 12

Met Arg Phe Met Thr Leu Leu Phe Leu Thr Ala Leu Ala Gly Ala Leu 15 10 15

Val Cys Ala Tyr Asp Pro Glu Ala Ala Ser Ala Pro Gly Ser Gly Asn 20 25 30

His Lys Gin Met Asp Cys Leu Gin Leu Gin Lys Pro Pro Ser Glu Thr 35 40 45

Ala Lys Phe Leu Ser Ser Ser Thr Asn Leu Pro Arg Arg Glu Lys Leu 50 55 60

Val Pro Ser Ala Lys Pro Pro His Thr Arg Gly Leu Val 65 70 75
<210> 13 <211> 121 <212> PRT
5 <213> Homo Sapiens
<400> 13
5
imagen4
lie Pro Leu Thr Ser Val Ser Arg Pro 115 120
<210> 14 <211> 19 <212> PRT <213> Homo Sapiens
<400> 14
imagen5
<210> 15 <211> 30 <212> PRT <213> Homo Sapiens
<400> 15
Tyr Asp Pro Glu Ala Ala Ser Ala Pro Gly Ser Gly Asn Pro Cys His 15 10 15
Glu Ala Ser Ala Ala Gin Lys Glu Asn Ala Gly Glu Asp Pro 20 25 30
<210> 16 <211> 91 <212> PRT
5 <213> Homo Sapiens
<400> 16

Tyr Asp Pro Glu Ala Ala Ser Ala Pro Gly Ser Gly Asn Pro Cys His 15 10 15

Glu Ala Ser Ala Ala Gin Lys Glu Asn Ala Gly Glu Asp Pro Gly Leu 20 25 30

Ala Arg Gin Ala Pro Lys Pro Arg Lys Gin Arg Ser Ser Leu Leu Glu 35 40 45

Lys Gly Leu Asp Gly Ala Lys Lys Ala Val Gly Gly Leu Gly Lys Leu 50 55 60

Gly Lys Asp Ala Val Glu Asp Leu Glu Ser Val Gly Lys Gly Ala Val 65 70 75 80
His Asp Val Lys Asp Val Leu Asp Ser Val Leu

85 90
<210> 17 <211> 11
10 <212> PRT
<213> Homo Sapiens
<400> 17
Glu Asn Ala Gly Glu Asp Pro Gly Leu Ala Arg 15 10
<210> 18 15 <211> 29
<212> PRT <213> Homo Sapiens
<400> 18
Lys Ala Val Gly Gly Leu Gly Lys Leu Gly Lys Asp Ala Val Glu Asp 15 10 15
Leu Glu Ser Val Gly Lys Gly Ala Val His Asp Val Lys 20 25
<210> 19 <211> 47 5 <212> PRT
<213> Homo Sapiens
<400> 19

Ser Ser Leu Leu Glu Lys Gly Leu Asp Gly Ala Lys Lys Ala Val Gly 15 10 15

Gly Leu Gly Lys Leu Gly Lys Asp Ala Val Glu Asp Leu Glu Ser Val 20 25 30

Gly Lys Gly Ala Val His Asp Val Lys Asp Val Leu Asp Ser Val 35 40 45
<210> 20 10 <211> 48
<212> PRT <213> Homo Sapiens
<400> 20

Ser Ser Leu Leu Glu Lys Gly Leu Asp Gly Ala Lys Lys Ala Val Gly 15 10 15

Gly Leu Gly Lys Leu Gly Lys Asp Ala Val Glu Asp Leu Glu Ser Val 20 25 30
Gly Lys

Gly Ala Val His Asp Val Lys Asp Val Leu Asp Ser Val Leu 35 40 45

Claims (13)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
    60
    1. Uso (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos codificada por una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10 o (ii) de dicha secuencia de acidos nucleicos, como biomarcador de un estado de la piel madura y/o de los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
  2. 2. Uso segun la reivindicacion 1, en la cual dicha secuencia de aminoacidos esta representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11 a SEC ID N°: 20, y preferiblemente elegida de entre SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19, SEC ID N°: 20.
  3. 3. Uso (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SeC ID N°: 12, SEC ID N°: 13 y SEC ID N°: 16, o (ii) de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3 y SEC ID N°: 6, para cribar agentes activos o tratamientos fisicos para el cuidado de la piel madura y/o la prevencion y/o el tratamiento de los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea, susceptibles de modular la actividad, la expresion o la maduracion de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos.
  4. 4. Uso (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13, SEC ID N°: 14, SEC ID N°: 15, SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19, SEC ID N°: 20, o (ii) de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10, para caracterizar la eficacia de un tratamiento cosmetico de la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
  5. 5. Uso cosmetico de una cantidad eficaz (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13 y SEC ID N°: 16, o (ii) de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3 y SEC ID N°: 6, como agente activo para prevenir y/o tratar la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
  6. 6. Uso de una cantidad eficaz (i) de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13 y SEC ID N°: 16, o (ii) de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, Sec ID N°: 2, SEC ID N°: 3 y SEC ID N°: 6, para preparar un modelo celular epitelial pluriestratificado, preferiblemente un modelo de piel reconstruida, imitando una piel madura, eventualmente asociada a una sequedad cutanea.
  7. 7. Procedimiento in vitro o ex vivo para caracterizar un estado de la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea que comprende al menos las etapas consistente en:
    a) efectuar, en una muestra aislada de una piel, una medida cualitativa o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13, SEC ID N°: 14, SEC ID N°: 15, SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19, SEC ID N°: 20 o de al menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10, y
    b) comparar dicha medida efectuada en la etapa a) a una medida de referencia.
  8. 8. Procedimiento de cribado in vitro o ex vivo de agentes activos o de tratamientos fisicos para el cuidado de la piel madura y/o la prevencion y/o el tratamiento de los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea, susceptibles de modular la actividad, la expresion o la maduracion de una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13 y SEC ID N°: 16, o de una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3 y SEC ID N°: 6, que comprende al menos las etapas consistentes en:
    a) disponer dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos en condiciones propicias para la actividad, la expresion o la maduracion de dichas secuencias,
    b) poner en contacto dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos con al menos un agente activo por testar, o exponer dicha secuencia de aminoacidos o dicha secuencia de acidos nucleicos a un tratamiento fisico por testar,
    c) efectuar una medida cualitativa o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos, y
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    d) comparar dicha medida a una medida de referenda, y
    e) observar una diferencia entre dicha medida y la medida de referencia para caracterizar el agente activo o el tratamiento como util para prevenir y/o tratar la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea.
  9. 9. Procedimiento cosmetico para prevenir y/o tratar una piel madura y/o signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea de un individuo que lo necesite, que comprende al menos una etapa que consiste en administrar a dicho individuo al menos una composicion que comprende como agente activo (i) al menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13 y SEC ID N°: 16, o (ii) al menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, plato ID NO: 3 y SEC ID N°: 6.
  10. 10. Procedimiento cosmetico, in vitro o ex vivo, para caracterizar la eficacia de un tratamiento cosmetico de la piel madura y/o los signos cutaneos del envejecimiento, asociado/a(s) o no a una sequedad cutanea, en un individuo que lo necesite, que comprende al menos las etapas consistentes en:
    a) efectuar, antes de la aplicacion del tratamiento cosmetico, en una primera muestra de piel aislada tomada de dicho individuo, al menos una primera medida cualitativa o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de por lo menos una secuencia de aminoacidos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 11, SEC ID N°: 12, SEC ID N°: 13, SEC ID N°: 14, SEC ID N°: 15, SEC ID N°: 16, SEC ID N°: 17, SEC ID N°: 18, SEC ID N°: 19, SEC ID N°: 20, o de por lo menos una secuencia de acidos nucleicos representada por una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 1, SEC ID N°: 2, SEC ID N°: 3, SEC ID N°: 4, SEC ID N°: 5, SEC ID N°: 6, SEC ID N°: 7, SEC ID N°: 8, SEC ID N°: 9, SEC ID N°: 10,
    b) efectuar, despues de la aplicacion del tratamiento cosmetico, en una segunda muestra de piel aislada tomada de dicho individuo, al menos una segunda medida, cualitativo o cuantitativa de la expresion, de la maduracion o de la actividad de dicha secuencia de aminoacidos o de dicha secuencia de acidos nucleicos, y
    c) comparar la primera y segunda medidas, particularmente con el fin de deducir una information relativa a un efecto al menos de la aplicacion del tratamiento cosmetico.
  11. 11. Procedimiento segun la reivindicacion 10, en el cual la secuencia de aminoacidos esta representada entre una secuencia elegida de entre SEC ID N°: 17 y SEC ID N°: 18.
  12. 12. Peptido aislado representado por la secuencia de aminoacidos SEC ID N°: 18.
  13. 13. Composicion cosmetica que comprende un peptido como se define en la reivindicacion 12 o una secuencia de acidos nucleicos que codifica un tal peptido.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3006897A1 (fr) * 2013-06-14 2014-12-19 Oreal Utilisation cosmetique ou therapeutique, notamment dermatologique de la dermicidine, analogues ou fragments de celle-ci pour prevenir l'apparition d'imperfections, ainsi que pour le traitement et le diagnostic de la peau acneique ou a tendance acneique
EP3007718A2 (fr) * 2013-06-14 2016-04-20 L'oreal Utilisation de la dermicidine pour le traitement de la peau a tendance acneique, grasse ou pour la prevention d'apparition d'imperfections
FR3011739A1 (fr) * 2013-06-27 2015-04-17 Oreal Utilisation cosmetique de la dermcidine, analogues ou fragments de celle-ci pour prevenir et/ou traiter les odeurs corporelles ainsi que pour le diagnostique des sueurs odorantes
WO2016148324A1 (ko) * 2015-03-19 2016-09-22 (주)아모레퍼시픽 태양광 차단 기능성 물질 스크리닝 방법 및 태양광 차단 효능 평가 방법
EP3360891B1 (en) 2017-02-14 2022-03-30 Karlsruher Institut für Technologie Cell penetrating peptides of human origin
FR3070494B1 (fr) * 2017-08-23 2022-07-01 Oreal Methode de diagnostic d'une peau presentant des signes de vieillissement
FR3100452B1 (fr) * 2019-09-05 2021-09-17 Oreal Méthode de diagnostic de peaux agées

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2667778B1 (fr) 1990-10-16 1995-05-12 Oreal Cellule permettant de collecter sur la peau, par circulation de liquide, au moins un compose a doser.
US5834192A (en) * 1996-04-05 1998-11-10 Incyte Pharmaceuticals, Inc. Human cachexia associated protein
DE10129983A1 (de) 2001-06-13 2003-01-30 Univ Eberhard Karls Antimikrobiell wirkendes Peptid
US7608696B2 (en) * 2001-10-26 2009-10-27 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. IBC-1 (invasive breast cancer-1), a putative oncogene amplified in breast cancer
US7485619B2 (en) * 2005-01-31 2009-02-03 Yeon Sook KIM Antimicrobial agent
FR2908784B1 (fr) * 2006-11-17 2012-12-14 Oreal Utilisation cosmetique d'une proteine de la famille des ribonucleases
FR2924946B1 (fr) * 2007-12-18 2010-02-26 Oreal Utilisation cosmetique de proteines de type ceramidase acide
FR2940908B1 (fr) * 2009-01-12 2012-08-24 Oreal Association cosmetique d'un microorganisme et d'un derive phytosphingosine

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