ES2597803T3 - Derivados de naftiridinona y su uso en el tratamiento, mejora o prevención de una enfermedad viral - Google Patents

Derivados de naftiridinona y su uso en el tratamiento, mejora o prevención de una enfermedad viral Download PDF

Info

Publication number
ES2597803T3
ES2597803T3 ES14703780.8T ES14703780T ES2597803T3 ES 2597803 T3 ES2597803 T3 ES 2597803T3 ES 14703780 T ES14703780 T ES 14703780T ES 2597803 T3 ES2597803 T3 ES 2597803T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
alkyl
optionally substituted
compound
group
virus
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES14703780.8T
Other languages
English (en)
Inventor
Andrea Wolkerstorfer
Oliver Szolar
Norbert Handler
Helmut Buschmann
Stephen Cusack
Mark Smith
Sung-Sau So
Ronald Charles Hawley
Achyutharao Sidduri
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Savira Pharmaceuticals GmbH
F Hoffmann La Roche AG
Europaisches Laboratorium fuer Molekularbiologie EMBL
Original Assignee
Savira Pharmaceuticals GmbH
F Hoffmann La Roche AG
Europaisches Laboratorium fuer Molekularbiologie EMBL
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Savira Pharmaceuticals GmbH, F Hoffmann La Roche AG, Europaisches Laboratorium fuer Molekularbiologie EMBL filed Critical Savira Pharmaceuticals GmbH
Application granted granted Critical
Publication of ES2597803T3 publication Critical patent/ES2597803T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4985—Pyrazines or piperazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Un compuesto que tiene la fórmula general (V), opcionalmente en forma de una sal farmacéuticamente aceptable, solvato, polimorfo, profármaco, cofármaco, cocristal, tautómero, racemato, enantiómero, o diastereómero o mezcla de los mismos, en la que X51 es CH o N; X52-R54 es N o C-R57; X53 es NR55, N(R55)C(O), C(O)NR55, O, C(O), C(O)O, OC(O); N(R55)SO2, SO2N(R55), S, SO, o SO2; R50 es -H, -(alquilo C1-6 opcionalmente sustituido), -(cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido), -(arilo opcionalmente sustituido), -alquil C1-4-(cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido), o -alquil C1-4-(arilo opcionalmente sustituido); R51 es -H, un grupo -alquilo C1-6, o un grupo -alquilo C1-6 que está sustituido con uno o más átomos de halógeno; R52 es -H, un grupo -alquilo C1-6, o un grupo -alquilo C1-6 que está sustituido con uno o más átomos de halógeno; o en la que R51 y R52 se pueden unir en conjunto para formar un anillo carbo o heterocíclico de 3 a 7 miembros; R53 es -R56, o -X53-R56; R55 es -H, -(alquilo C1-6 opcionalmente sustituido), -(cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido), -(arilo opcionalmente sustituido), -alquil C1-4-(cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido), o -alquil C1-4-(arilo opcionalmente sustituido); R66 es -(grupo hidrocarburo opcionalmente sustituido que contiene de 5 a 20 átomos de carbono y opcionalmente de 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S y que contiene al menos un anillo); R67 es -H, -Hal o -alquilo C1-6; R58 es -H, -alquilo C1-6, o -(CH2CH2O)rH; R59 es -H, o -alquilo C1-6; R se selecciona independientemente entre -alquilo C1-6, -C(O)-alquilo C1-6, -Hal, -CF3, -CN, -COOR58, -OR58, - (CH2)qNR58R59, -C(O)-NR58R59, y -NR58-C(O)-alquilo C1-6; q es de 0 a 4; y r es de 1 a 3; en el que el grupo alquilo, grupo arilo, grupo hidrocarburo y/o grupo cicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes R; en el que un profármaco es un compuesto en el que COOH está sustituido por C(O)OR*, en el que R* se selecciona entre H, arilo C5-10, alquil C1-6-arilo C5-10, alquilo C1-6, y alquil C1-6(-O-alquil C1-6)n (con n >= 1 a 30); con la condición de que se excluyan los siguientes compuestos:**Fórmula** y 4-oxo-1-{[4-(1H-pirazolo-1-il)fenil]metil}-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo.

Description

5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
DESCRIPCION
Derivados de naftiridinona y su uso en el tratamiento, mejora o prevencion de una enfermedad viral Campo de la invencion
La presente invencion se refiere a un compuesto que tiene la formula general (V), opcionalmente en forma de una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, polimorfo, cofarmaco, cocristal, profarmaco, tautomero, racemato, enantiomero, o diastereomero o mezcla de los mismos
imagen1
que es util en el tratamiento, mejora o prevencion de una enfermedad viral. Ademas, se desvelan terapias de combinacion espedficas.
Antecedentes de la invencion
En los ultimos anos, la grave amenaza planteada para la salud publica a nivel mundial por la infeccion del virus de la gripe se ha visto destacada, en primer lugar, por el continuo nivel de transmision a los seres humanos de la cepa altamente patogena H5N1 del virus de la gripe A aviar (63 % de mortalidad en seres humanos infectados,
http://www.who.int/csr/disease/avian_influenza/en/) y, en segundo lugar, por la aparicion inesperada en 2009 de la nueva cepa pandemica A/H1N1 del virus de la gripe que se ha extendido rapidamente alrededor del mundo (
http://www.who.int/csr/disease/swineflu/en/). Aunque la nueva cepa del virus es altamente contagiosa pero en la actualidad generalmente da como resultado una enfermedad relativamente leve, la evolucion futura de este virus es impredecible. En un escenario mucho mas grave, pero altamente plausible, H5N1 y los virus de la gripe aviar altamente patogenos relacionados podnan adquirir mutaciones que los hagan mas facilmente transmisibles entre seres humanos o el nuevo A/H1N1 podna volverse mas virulento y solo una mutacion puntual individual podna ser suficiente para conferir resistencia a oseltamivir (Neumann et al., Nature, 2009 (18; 459 (7249) 931-939)); como numerosas cepas estacionales de H1N1 han hecho recientemente (Dharan et al., The Journal of the American Medical Association, 11 de marzo de 2009; 301 (10), 1034-1041; Moscona et al., The New Engly Journal of Medicine, 2009 (5 de marzo; 360 (10) pp 953-956)). En este caso, el retraso en crear y desarrollar una vacuna (~6 meses en el caso relativamente favorable de A/H1N1 y un problema aun no resuelto para H5N1) podna ser catastroficamente costoso en vidas humanas y trastorno social.
Se acepta ampliamente que, para cubrir el periodo antes de que una nueva vacuna este disponible y para tratar los casos graves, asf como para contrarrestar el problema de la resistencia viral, se requiere una mayor variedad de medicamentos antigripales. Por lo tanto, el desarrollo de nuevos farmacos antigripales ha vuelto a ser alta prioridad, despues de haber sido abandonado en gran medida por las principales compares farmaceuticas una vez que los inhibidores de la neuraminidasa llegaron a estar disponibles.
Un excelente punto de partida para el desarrollo de medicacion antiviral son los datos estructurales de protemas virales esenciales. Por lo tanto, la determinacion de la estructura cristalina por ejemplo de la neuraminidasa de antfgeno de superficie del virus de la gripe (Von Itzstein, M. et al., (1993), Nature, 363, pag. 418-423) condujo directamente al desarrollo de inhibidores de neuraminidasa con actividad antiviral que previenen la liberacion de virus de las celulas, sin embargo, no la produccion del virus en sf mismo. Estos y sus derivados se han desarrollado posteriormente en los farmacos antigripales, zanamivir (Glaxo) y oseltamivir (Roche), que se estan almacenando en la actualidad en muchos pafses como una primera lmea de defensa frente a una posible pandemia. Sin embargo, estos medicamentos solamente proporcionan una reduccion de la duracion de la enfermedad clmica. Como alternativa, los adamantanos, la otra clase de farmacos antigripales con licencia (por ejemplo amantadina y rimantadina) atacan a la protema viral del canal ionico M2, que se localiza en la membrana viral que interfiere con el no revestimiento de la partfcula del virus dentro de la celula. Sin embargo, no se han usado ampliamente debido a sus efectos secundarios y al rapido desarrollo de mutantes de virus resistentes (Magden, J. et al., (2005), Appl. Microbiol. Biotechnol., 66, pag. 612-621). Ademas, los farmacos virales mas inespedficos, tales como ribavirina, han
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
mostrado que funcionan para tratamiento de la gripe y otras infecciones por virus (Eriksson, B. et al., (1977), Antimicrob. Agents Chemother., 11, pag. 946-951). Sin embargo, la ribavirina solamente esta aprobada en algunos pafses, debido probablemente a efectos secundarios graves (Furuta et al., ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY, 2005, p. 981-986). Claramente, se necesitan nuevos compuestos antivirales, dirigidos preferentemente frente a diferentes dianas.
El virus de la gripe, asf como Thogotovirus e Isavirus, pertenecen a la familia de Orthomyxoviridae que, asf como la familia de los Bunyaviridae, incluyendo el Hantavirus, Nairovirus, Orthobunyavirus, y Phlebovirus, entre otros, son virus de ARN de cadena negativa. Su genoma esta segmentado y entra en partmulas de ribonucleoprotemas que incluyen la ARN polimerasa dependiente de ARN que realiza (i) la copia inicial del ARN viral de sentido negativo de cadena sencilla (ARNv) en los ARNm virales (es decir, transcripcion) y (ii) la replicacion del ARNv. Esta enzima, un complejo trimerico formado por subunidades PA, PB1 y PB2, es fundamental para el ciclo de vida del virus, ya que es responsable de la replicacion y la transcripcion del ARN viral. En trabajos anteriores se han identificado la estructura atomica de dos dominios fundamentales de la polimerasa, el dominio de union de proteccion de ARNm en la subunidad PB2 (Guilligay et al., Nature Structural & Molecular Biology 2008; Mayo; 15 (5): 500-506) y el sitio activo de endonucleasa que reside dentro de la subunidad PA (Dias et al., Nature 2009, 458, 914-918) y se ha caracterizado su arquitectura molecular. Estos dos sitios son fundamentales para el modo unico de "agarre de la proteccion" usado para iniciar la transcripcion del ARNm que es usado por el virus de la gripe y otras ciertas familias de virus de este genero para generar ARNm virales. Una proteccion en el extremo en la posicion 5' es un nucleotido de guanina modificada que se ha anadido al extremo en la posicion 5' de un ARNm mensajero. La proteccion en la posicion 5' (tambien denominada una proteccion de ARN o proteccion m7G de ARN) consiste en un resto de 7- metilguanosina terminal que se une a traves de un enlace 5'-5'-trifosfato al primer nucleotido transcrito. La polimerasa viral se une a la proteccion de ARN en la posicion 5' de moleculas de ARNm celular y escinde la proteccion del ARN junto con un tramo de 10 a 15 nucleotidos. Los fragmentos de ARN protegidos sirven a continuacion como cebadores para la smtesis del ARNm viral (Plotch, S. J. et al., (1981), Cell, 23, pag. 847-858; Kukkonen, S. K. et al (2005), Arch. Virol., 150, pag. 533-556; Leahy, M. B. et al., (2005), J. Virol., 71, pag. 83478351; Noah, D. L. et al., (2005), Adv. Virus Res., 65, pag. 121-145).
El complejo de polimerasa parece ser una diana terapeutica antiviral adecuada ya que es esencial para smtesis de ARNm viral y replicacion viral y contiene varios sitios activos funcionales que con probabilidad son significativamente diferentes a los encontrados en protemas de celula hospedadora (Magden, J. et al., (2005), Appl. Microbiol. Biotechnol., 66, pag. 612-621). Por lo tanto, por ejemplo, se han realizado intentos para interferir con el ensamblaje de subunidades de polimerasa con un peptido de 25 aminoacidos que se asemeja al dominio de union de PA dentro de PB1 (Ghanem, A. et al., (2007), J. Virol., 81, pag. 7801-7804). Ademas, se ha dirigido la actividad de endonucleasa de la polimerasa y se ha identificado una serie de compuestos de acido 2,4-dioxobutanoico 4- sustituidos como inhibidores selectivos de esta actividad en virus de la gripe (Tomassini, J. et al., (1994), Antimicrob. Agents Chemother., 38, pag. 2827-2837). Ademas, se ha mostrado que la flutimida, una 2,6-dicetopiperazina sustituida, identificada en extractos de Delitschia confertaspora, una especie fungica, inhibe la endonucleasa del virus de la gripe (Tomassini, J. et al., (1996), Antimicrob. Agents Chemother., 40, pag. 1189-1193). Ademas, se han realizado intentos para interferir con la transcripcion viral con analogos de nucleosido, tales como 2'-desoxi-2'- fluoroguanosina (Tisdale, M. et al., (1995), Antimicrob. Agents Chemother., 39, pag. 2454-2458). En el Ejemplo 1 del documento WO 2011/041143, se desvela el 4-oxo-1-{[4-(1H-pirazolo-1-il)fenil]metil}-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3- carboxilato de etilo como un compuesto intermedio de smtesis. Scott D. Kuduk et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 20 (2010) 2533-2537 describen ciertos moduladores alostericos positivos M1 de acido piridona carboxflico fusionados con heterodclico.
El documento WO020444 desvela carboxamidas heterodclicas como agentes antivirales. Un objeto de la presente invencion es identificar compuestos adicionales que sean eficaces frente a enfermedades virales y que tengan propiedades farmacologicas mejoradas.
Sumario de la invencion
Por consiguiente, en una primera realizacion, la presente invencion proporciona un compuesto que tiene la formula general (V).
imagen2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Se entiende que a traves de la presente memoria descriptiva, la expresion "un compuesto que tiene la formula general (V)" incluye sales farmaceuticamente aceptables, solvatos, polimorfos, profarmacos, cofarmacos, cocristales, tautomeros, racematos, enantiomeros, o diastereomeros o mezclas de los mismos a menos que se mencione de otro modo.
Otra realizacion de la presente invencion se refiere a una composicion farmaceutica que comprende un compuesto que tiene la formula general (V) y opcionalmente uno o mas excipientes(s) y/o vehnculo(s) farmaceuticamente aceptables.
Los compuestos que tienen la formula general (V) son utiles para tratar, mejorar o prevenir enfermedades virales. Descripcion detallada de la invencion
Antes de describir la presente invencion con detalle a continuacion, se debe entender que la presente invencion no se limita a la metodologfa, protocolos y reactivos que se describen en particular en el presente documento ya que estos pueden variar. Tambien se debe entender que la terminologfa usada en el presente documento es solamente con el fin de describir realizaciones en particular, y no se pretende que limite el alcance de la presente invencion que se limitara solamente con las reivindicaciones adjuntas. A menos que se defina de otro modo, todos los terminos tecnicos y cientfficos usados en el presente documento tienen los mismos significados como lo entiende normalmente una persona con experiencia habitual en la materia.
Preferentemente, los terminos usados en el presente documento se definen tal como se describe en "A multilingual glossary of biotechnological terms: (IUPAC Recommendations)", Leuenberger, H.G.W, Nagel, B. y Kolbl, H. eds. (1995), Helvetica Chimica Acta, CH-4010 Basilea, Suiza.
A traves de la presente memoria descriptiva y las reivindicaciones que siguen a continuacion, a menos que el contexto lo requiera de otro modo, se entendera que el termino "comprender", y variaciones tales como "comprende" y "que comprende", implican la inclusion de un numero entero o etapa o grupo de numeros enteros o etapas indicados pero no la exclusion de cualquier otro numero entero o etapa o grupo de numeros enteros o etapas. En los siguientes parrafos, se definen diferentes aspectos de la invencion con mas detalle. Cada aspecto definido de este modo se puede combinar con cualquier otro aspecto o aspectos a menos que se indique claramente lo contrario. En particular, cualquier caractenstica indicada como preferente o ventajosa se puede combinar con cualquier otra caractenstica o caractensticas indicadas como preferentes o ventajosas.
Definiciones
El termino "alquilo" se refiere a una cadena de carbono lineal o ramificada saturada.
El termino "cicloalquilo" representa una version dclica de "alquilo". El termino "cicloalquilo" tambien pretende incluir versiones bidclicas, tridclicas y polidclicas del mismo. A menos que se especifique de otro modo, el grupo cicloalquilo puede tener de 3 a l2 atomos de carbono.
"Hal" o "halogeno" representa F, Cl, Br e I.
"Anillo carbo o heterodclico de 3 a 7 miembros" se refiere a un anillo de tres, cuatro, cinco, seis o siete miembros en el que ninguno, uno o mas de los atomos de carbono en el anillo se han sustituido por 1 o 2 (para el anillo de tres miembros), 1, 2 o 3 (para el anillo de cuatro miembros) 1, 2, 3 o 4 (para el anillo de cinco miembros) o 1, 2, 3, 4 o 5 (para el anillo de seis miembros) y 1, 2, 3, 4, 5 o 6 (para el anillo de siete miembros) del mismo o diferentes heteroatomos, por lo que los heteroatomos se seleccionan entre O, N y S.
El termino "arilo" se refiere preferentemente a un anillo monodclico aromatico que contiene 6 atomos de carbono, un sistema de anillo bidclico aromatico que contiene 10 atomos de carbono o un sistema de anillos tridclico aromatico que contiene 14 atomos de carbono. Algunos ejemplos son fenilo, naftilo o antracenilo, preferentemente fenilo. El termino "heteroarilo" se refiere preferentemente a un anillo aromatico de cinco o seis miembros en el que uno o mas de los atomos de carbono en el anillo se han sustituido por 1,2, 3 o 4 (para el anillo de cinco miembros) o 1, 2, 3, 4 o 5 (para el anillo de seis miembros) del mismo o diferentes heteroatomos, por lo que los heteroatomos se seleccionan entre O, N y S. Algunos ejemplos del grupo heteroarilo incluyen pirrol, pirrolidina, oxolano, furano, imidazolidina, imidazol, pirazol, oxazolidina, oxazol, tiazol, piperidina, piridina, morfolina, piperazina, y dioxolano.
La expresion "grupo hidrocarburo que contiene de 5 a 20 atomos de carbono y opcionalmente de 1 a 4 heteroatomos seleccionados entre O, N y S y que contiene al menos un anillo" se refiere a cualquier grupo que tenga de 5 a 20 atomos de carbono y opcionalmente de 1 a 4 heteroatomos seleccionados entre O, N y 2 siempre y cuando el grupo contenga al menos un anillo. La expresion tambien pretende hacer referencia a la inclusion de versiones bidclicas, tridclicas y polidclicas del mismo. Si esta presente mas de un anillo, estos se pueden separar entre sf o se pueden anelar. El anillo(s) puede ser carbodclico o heterodclico y puede ser saturado, insaturado o aromatico. Todos los atomos de carbono y heteroatomos pueden estar presentes en el uno o mas anillos o algunos de los atomos de
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
carbono y/o heteroatomos pueden estar presentes fuera del anillo, por ejemplo, en un grupo conector (tal como - (CH2)p- con p = 1 a 6). Algunos ejemplos de estos grupos incluyen -(cicloalquilo C3.7 bifenilo opcionalmente sustituido), -(arilo opcionalmente sustituido) en el que el grupo arilo puede ser, por ejemplo, fenilo, -(opcionalmente sustituido), adamantilo, -(cicloalquil C3-7)-arilo as^ como los compuestos correspondientes con un conector.
Si se hace referencia a que un compuesto o resto esta "opcionalmente sustituido", este puede incluir en cada caso 1 o mas de los sustituyentes indicados, por lo que los sustituyentes pueden ser los mismos o diferentes.
La expresion "sal farmaceuticamente aceptable" se refiere a una sal de un compuesto de la presente invencion. Las sales farmaceuticamente aceptables adecuadas incluyen sales de adicion de acido que se pueden formar, por ejemplo, por mezcla de una solucion de compuestos de la presente invencion con una solucion de un acido farmaceuticamente aceptable tal como acido clortndrico, acido sulfurico, acido fumarico, acido maleico, acido succmico, acido acetico, acido benzoico, acido cftrico, acido tartarico, acido carbonico o acido fosforico. Ademas, cuando el compuesto porta un resto acido, las sales farmaceuticamente aceptables adecuadas del mismo pueden incluir sales de metales alcalinos (por ejemplo, sales de sodio o potasio); sales de metales alcalinoterreos (por ejemplo, sales de calcio o magnesio); y sales formadas con ligandos organicos adecuados (por ejemplo, amonio, amonio cuaternario y cationes de amina formados usando contraiones tales como haluro, hidroxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, alquilsulfonato y arilsulfonato). Los ejemplos ilustrativos de sales farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, acetato, adipato, alginato, ascorbato, aspartato, bencenosulfonato, benzoato, bicarbonato, bisulfato, bitartrato, borato, bromuro, butirato, edetato de calcio, canforato, canforsulfonato, camsilato, carbonato, cloruro, citrato, clavulanato, ciclopentanopropionato, digluconato, diclorhidrato, dodecilsulfato, edetato, edisilato, estolato, esilato, etanosulfonato, formiato, fumarato, gluceptato, glucoheptonato, gluconato, glutamato, glicerofosfato, glicolilarsanilato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromhidrato, clorhidrato, yodhidrato, 2-hidroxi-etanosulfonato, hidroxinaftoato, yoduro, isotionato, lactato, lactobionato, laurato, lauril sulfato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metanosulfonato, metilsulfato, mucato, 2-naftalenosulfonato, napsilato, nicotinato, nitrato, sal de N-metilglucamina amonio, oleato, oxalato, pamoato (embonato), palmitato, pantotenato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato/difosfato, picrato, pivalato, poligalacturonato, propionato, salicilato, estearato, sulfato, subacetato, succinato, tanato, tartrato, teoclato, tosilato, trietyoduro, undecanoato, valerato, y similares (vease, por ejemplo, S. M. Berge et al., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci., 66, pag. 1-19 (1977)).
Cuando los compuestos de la presente invencion se proporcionan en forma cristalina, la estructura puede contener moleculas de disolvente. Por lo general, los disolventes son disolventes farmaceuticamente aceptables e incluyen, entre otros, agua (hidratos) o disolventes organicos. Algunos ejemplos de solvatos posibles incluyen etanolatos e iso-propanolatos.
El termino "cofarmaco" se refiere a dos o mas compuestos terapeuticos unidos a traves de un enlace qmmico covalente. Una definicion detallada se puede encontrar, por ejemplo, en N. Das et al., European Journal of Pharmaceutical Sciences, 41, 2010, 571-588.
El termino "cocristal" se refiere a un cristal de multiples componentes en el que todos los componentes son solidos en condiciones ambientales cuando estan en su forma pura. Estos componentes coexisten en forma de una proporcion estequiometrica o no estequiometrica de una molecula diana o ion (es decir, el compuesto de la presente invencion) y uno o mas agentes formadores de cocristal molecular neutro. Una discusion detallada se puede encontrar, por ejemplo, en Ning Shan et al., Drug Discovery Today, 13 (9/10), 2008, 440-446 y en D. J. Good et al., Cryst. Growth Des., 9 (5), 2009, 2252-2264.
Los compuestos de la presente invencion tambien se pueden proporcionar en forma de un profarmaco, es decir, un compuesto que ser metabolica in vivo en el metabolito activo. Los profarmacos son compuestos en los que COOH esta sustituido por C(O)OR; en el que R se selecciona entre H, arilo C5-10, alquil C1-6-arilo C5-10, alquilo C1-6, alquil C1- 6(-O-alquil C1-6)n (con n = 1 a 30), alquil C1-6-C(O)OR, y aril C5-10-C(O)OR.
Compuestos que tienen la formula general (V)
La presente invencion proporciona un compuesto que tiene la formula general (V).
5
10
15
20
25
30
35
40
45
imagen3
En las reivindicaciones adjuntas se mencionan ciertas condiciones. Se entiende que cualquiera de los compuestos que estan incluidos en cualquiera de las condiciones se puede excluir, ya sea de forma individual o en combinacion con otros compuestos, de una o mas de las reivindicaciones independientes que tienen una categona diferente incluso si en la actualidad no se suprime en la reivindicacion independiente de esta categona. Tambien se entiende que la supresion cubre los compuestos en forma de sales farmaceuticamente aceptables, solvatos, polimorfos, tautomeros, racematos, enantiomeros, y diastereomeros.
La presente invencion proporciona un compuesto que tiene la formula general (V) en la que se aplican las siguientes definiciones.
X51 es CH o N. En una realizacion, X51 es CH. En otra realizacion X51 es N.
X52-R54 es N o C-R57. En una realizacion, X52-R54 es N. En otra realizacion X52-R54 es C-R57.
X53 es NR55, N(R55)C(O), C(O)NR55, O, C(O), C(O)O, OC(O); N(R55)SO2, SO2N(R55), S, SO, o SO2;
preferentemente X53 es nR55 o N(R55)SO2; mas preferentemente NR55.
R50 es -H, -(alquilo Ci-6 opcionalmente sustituido), -(cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido), -(arilo
opcionalmente sustituido), -alquil Ci-4-(cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido), o -alquil Ci-4-(arilo opcionalmente sustituido); preferentemente R50es-H, o -(alquilo C1-6 opcionalmente sustituido).
R51 es -H, un grupo -alquilo C1-6. o un grupo -alquilo C1-6 que esta sustituido con uno o mas atomos de
halogeno; preferentemente R51 es -H.
R52 es -H, un grupo -alquilo C1-6, o un grupo -alquilo C1-6 que esta sustituido con uno o mas atomos de halogeno; preferentemente R52 es -H.
En una realizacion, R51 y R52 se pueden unir en conjunto para formar un anillo carbo o heterodclico de 3 a 7 miembros.
R53
es -R56, o -X53-R56. En una realizacion
R53 es -R56. En una realizacion alternativa, R53 es -X50-R56.
R55 es -H, -(alquilo C1-6 opcionalmente sustituido), -(cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido), -(arilo opcionalmente sustituido), -alquil C1-4-(cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido), o -alquil C1-4-(arilo opcionalmente sustituido). En una realizacion preferente R55 es -H o -(alquilo C1-6 opcionalmente sustituido).
R56 es -(grupo hidrocarburo opcionalmente sustituido que contiene de 5 a 20 atomos de carbono y opcionalmente de 1 a 4 heteroatomos seleccionados entre O, N y S y que contiene al menos un anillo). Preferentemente, el al menos un anillo es aromatico tal como un anillo de arilo o heteroarilo. Mas preferentemente, R56 es un grupo hidrocarburo que contiene de 5 a 20 atomos de carbono y opcionalmente de 1 a 4 heteroatomos y que contiene al menos dos anillos, en el que el grupo hidrocarburo puede estar opcionalmente sustituido. Incluso mas preferentemente, al menos uno de los al menos dos anillos es aromatico tal como un anillo de arilo o heteroarilo. Los ejemplos preferentes de R56 se pueden seleccionar entre el grupo que consiste en
5
10
15
20
25
30
35
40
45
imagen4
X esta ausente, CH2, NH, C(O)NH, S u O. Ademas,
Y es CH2.
En una realizacion alternativa, X e Y se pueden unir en conjunto para formar un anillo anelado, carbo o heterodclico de 3 a 8 miembros que puede estar saturado o insaturado. Los ejemplos espedficos de X-Y incluyen -CH2-, -CH2- CH2-, -O-, y -NH-.
Z es O o S.
R se selecciona independientemente entre -H, -alquilo C1-6, -CF3, -halogeno, -CN, -OH, y -O-alquilo C1-6.
R57 es -H, -Hal o -alquilo C1-6; preferentemente R57 es -H, o -alquilo C1.6.
R58 es -H, -alquilo C1-6, o -(CH2CH2O)rH; preferentemente R58 es -H, o -alquilo C1-6.
R59 es -H, o -alquilo C1.6.
R se selecciona independientemente entre -alquilo C1-6, -C(O)-alquilo C1.6, -Hal, -CF3, -CN, -COOR58, -OR58, - (CH2)qNR58R59, -C(O)-NR58R59, y -NR58-C(O)-alquilo C1.6. preferentemente R es -Hal, -CF3, o -CN; mas preferentemente -Hal, o -CF3.
q es de 0 a 4.
R es de 1 a 3.
El sustituyente opcional del grupo alquilo, grupo arilo, grupo hidrocarburo y/o grupo cicloalquilo se selecciona entre el grupo que consiste en uno o mas sustituyentes R, que incluye -alquilo C1-6, -C(O)-alquilo C1-6, -Hal, -CF3, -CN, - COOR57, -OR57, -(CH2)qNR57R58, -C(O)-NR57R58, y -NR57-C(O)-alquilo C1.6. Preferentemente, el sustituyente opcional del grupo arilo, grupo hidrocarburo y/o grupo cicloalquilo es -halogeno (preferentemente F), -OCH3 o -CN. Preferentemente, el sustituyente opcional del grupo alquilo se selecciona entre el grupo que consiste en halogeno, - CN, -NR58R58 (en el que cada R58 se elige independientemente entre si), -OH, y -O-alquilo C1-6. Preferentemente el sustituyente del grupo alquilo es -halogeno, mas preferentemente F.
Los presentes inventores han encontrado de forma sorprendente que los compuestos de la presente invencion que tienen un resto R53 voluminoso tienen propiedades farmacologicas mejoradas en comparacion con los compuestos correspondientes que tienen un resto R53 mas pequeno. Sin desea quedar ligado por la teoria, se supone que la proterna de la polimerasa viral tiene un bolsillo para union y que el resto R53 voluminoso de los compuestos de la presente invencion llena este bolsillo en una mayor medida. Ademas se supone que el resto R53 de mayor tamano es capaz de proporcionar mas interaccion hidrofoba con el bolsillo que los restos mas pequenos tales como metilo.
Los compuestos de la presente invencion se pueden administrar a un paciente en forma de una composicion farmaceutica que puede comprender opcionalmente uno o mas excipiente(s) y/o vehfculo(s) farmaceuticamente aceptable.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Los compuestos de la presente invencion se pueden administrar mediante diversas v^as bien conocidas, incluyendo administracion oral, rectal, intragastrica, intracraneal y parenteral, por ejemplo v^as de administracion intravenosa, intramuscular, intranasal, intradermica, subcutaneo, y similares. La administracion oral, intranasal y parenteral son particularmente preferentes. Dependiendo de la via de administracion, se requieren diferentes formulaciones farmaceuticas y algunas de ellas pueden requerir que se apliquen revestimientos protectores a la formulacion del farmaco para prevenir la degradacion de un compuesto de la invencion, por ejemplo, en el tracto digestivo.
Por lo tanto, preferentemente, un compuesto de la invencion se formula en forma de un jarabe, una infusion o solucion de inyeccion, una pulverizacion, un comprimido, una capsula, un comprimido encapsulado, pastilla para chupar, un liposoma, un supositorio, un aposito, una tirita, una capsula de retardo, un polvo, o una formulacion de liberacion lenta. Preferentemente, el diluyente es agua, un tampon, una solucion salina tamponada o una solucion salina y el vehnculo se selecciona preferentemente entre el grupo que consiste en manteca de cacao y vitebesol.
Las formas farmaceuticas preferentes en particular para la administracion de un compuesto de la invencion son formas adecuadas para uso inyectable e incluyen soluciones o dispersiones acuosas esteriles y polvos esteriles para la preparacion extemporanea de soluciones o dispersiones inyectables esteriles. En todos los casos la forma de solucion o dispersion final debe ser esteril y fluida. Por lo general, una solucion o dispersion de este tipo incluira un disolvente o medio de dispersion, que contiene, por ejemplo, soluciones acuosas tamponadas con agua, por ejemplo tampones biocompatibles, etanol, poliol, tal como glicerol, propilenglicol, polietilenglicol, mezclas adecuadas de los mismos, agentes tensioactivos o aceites vegetales. Un compuesto de la invencion tambien se puede formular en liposomas, en particular, para administracion parenteral. Los liposomas proporcionan la ventaja de aumentar la semivida en la circulacion, si se compara con el farmaco libre y una liberacion mas uniforme prolongada del farmaco encerrado.
La esterilizacion de soluciones de infusion o de inyeccion se puede realizar mediante cualquier numero de tecnicas reconocidas en la tecnica que incluyen, pero no se limitan a, adicion de conservantes tales como agentes antibacterianos o antifungicos, por ejemplo parabeno, clorobutanol, fenol, acido sorbico o timersal. Ademas, en soluciones para infusion o inyeccion se pueden incorporar agentes isotonicos, tales como azucares o sales, en particular, cloruro sodico.
La produccion de soluciones inyectables esteriles que contienen uno o varios de los compuestos de la invencion se consigue mediante la incorporacion del compuesto respectivo en la cantidad requerida en el disolvente apropiado con diversos ingredientes enumerados anteriormente si fuera necesario seguido de esterilizacion. Para obtener un polvo esteril, las soluciones anteriores se secan al vacfo o se liofilizan segun sea necesario. Los diluyentes preferentes de la presente invencion son agua, tampones fisiologicos aceptables, soluciones salinas tampon fisiologicas aceptables o soluciones salinas. Los vehuculos preferentes son manteca de cacao y vitebesol. Los excipientes que se pueden usar con las diversas formas farmaceuticas de un compuesto de la invencion se pueden elegir entre la siguiente lista no limitante:
a) aglutinantes tales como lactosa, manitol, sorbitol cristalino, fosfatos dibasicos, fosfatos de calcio, azucares,
celulosa microcristalina, carboximetil celulosa, hidroxietil celulosa, polivinil pirrolidona y similares;
b) lubricantes tales como estearato de magnesio, talco, estearato de calcio, estearato de cinc, acido estearico,
aceite vegetal hidrogenado, leucina, gliceridos y estearil fumaratos de sodio,
c) agentes disgregantes tales como almidones, croscarmelosa, metil celulosa sodica, agar, bentonita, acido
algmico, carboximetil celulosa, polivinil pirrolidona y similares.
En una realizacion, la formulacion es para administracion oral y la formulacion comprende uno o mas o todos de los siguientes ingredientes: almidon pregelatinizado, talco, povidona K 30, croscarmelosa sodica, estearil fumarato sodico, gelatina, dioxido de titanio, sorbitol, citrato monosodico, goma de xantano, dioxido de titanio, agentes saborizantes, benzoato sodico y sacarina sodica.
Si un compuesto de la invencion se administra por via intranasal en una realizacion preferente, este se puede administrar en forma de un inhalador de polvo seco o un pulverizador de aerosol desde un recipiente presurizado, bomba, pulverizador o nebulizador con el uso de un propulsor adecuado, por ejemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, un hidrofluoroalcano tal como 1,1,1,2-tetrafluoroetano (HFA 134A™) o 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropano (HFA 227EA™), dioxido de carbono, u otro gas adecuado. El recipiente presurizado, bomba, pulverizador o nebulizador puede contener una solucion o suspension del compuesto de la invencion, por ejemplo, usando una mezcla de etanol y el propulsor como disolvente, que ademas puede contener un lubricante, por ejemplo, trioleato de sorbitan.
Otros excipientes adecuados se pueden encontrar en el Handbook of Pharmaceutical Excipients, publicado por la American Pharmaceutical Association, que se incorpora en el presente documento por referencia.
Se debe observar que dependiendo de la gravedad de la enfermedad y el tipo en particular que se puede tratar uno de los compuestos de la invencion, asf como del paciente respectivo a tratar, por ejemplo el estado de salud general del paciente, etc., se requieren diferentes dosis del compuesto respectivo para obtener un efecto terapeutico o
5
10
15
20
25
30
35
40
profilactico. La determinacion de la dosis apropiada esta dentro del criterio del medico que trata. Se contempla que la dosis de un compuesto de la invencion en el uso terapeutico o profilactico de la invencion debena estar en el intervalo de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 1 g del principio activo (es decir, el compuesto de la invencion) por kg de peso corporal. Sin embargo, en un uso preferente de la presente invencion, un compuesto de la invencion se administra a un sujeto con necesidad del mismo en una cantidad que vana de 1,0 a 500 mg/kg de peso corporal, que vana preferentemente de 1 a 200 mg/kg de peso corporal. La duracion del tratamiento con un compuesto de la invencion variara, dependiendo de la gravedad de la enfermedad que se esta tratando y la afeccion y respuesta idiosincrasica de cada paciente individual. En una realizacion preferente de un uso profilactico o terapeutico, se administran de 10 mg a 200 mg el compuesto por via oral a un adulto al dfa, dependiendo de la gravedad de la enfermedad y/o el grado de exposicion a vetnculos de enfermedad.
Como se sabe en la tecnica, la cantidad farmaceuticamente eficaz de una composicion dada tambien dependera de la via de administracion. En general, la cantidad requerida sera mayor si la administracion se realiza a traves del tracto gastrointestinal, por ejemplo, mediante supositorios, rectal, o mediante una sonda intragastrica, y menor si la via de administracion es parenteral, por ejemplo, intravenosa. Por lo general, un compuesto de la invencion se administrara en intervalos de 50 mg to 1 g/kg de peso corporal, preferentemente de 10 mg a 500 mg/kg de peso corporal, si se usa administracion rectal o intragastrica y en intervalos de 1 a 100 mg/kg de peso corporal si se usa la administracion parenteral. Para administracion intranasal, se preven de 1 a 100 mg/kg de peso corporal.
Si se sabe que una persona esta en riesgo de desarrollar una enfermedad que se puede tratar con un compuesto de la invencion, puede ser posible la administracion profilactica del suero de sangre biologicamente activo o la composicion farmaceutica de acuerdo con la invencion. En estos casos, el compuesto respectivo de la invencion se administra preferentemente en dosis preferentes y particularmente preferentes descritas anteriormente sobre una base diaria. Preferentemente, de 0,1 mg a 1 g/kg de peso corporal una vez al dfa, preferentemente de 10 a 200 mg/kg de peso corporal. Esta administracion puede continuar hasta que el riesgo de desarrollar el respectivo trastorno viral haya disminuido. En la mayona de casos, sin embargo, un compuesto de la invencion se administrara una vez que se haya diagnosticado la enfermedad/trastorno. En estos casos es preferente administrar una primera dosis de un compuesto la invencion uno, dos, tres o cuatro veces al dfa.
Los compuestos de la presente invencion son particularmente utiles para tratar, mejorar o prevenir enfermedades virales. El tipo de enfermedad viral no esta limitado en particular. Los ejemplos de posibles enfermedades virales incluyen, pero no se limitan a, enfermedades virales que estan causadas por Poxviridae, Herpesviridae, Adenoviridae, Papillomaviridae, Polyomaviridae, Parvoviridae, Hepadnaviridae, Retroviridae, Reoviridae, Filoviridae, Paramyxoviridae, Rhabdoviridae, Orthomyxoviridae, Bunyaviridae, Arenaviridae, Coronaviridae, Picornaviridae, Hepeviridae, Caliciviridae, Astroviridae, Togaviridae, Flaviviridae, Deltavirus, Bornaviridae, y priones. Preferentemente, enfermedades virales que estan causadas por Herpesviridae, Retroviridae, Filoviridae, Paramyxoviridae, Rhabdoviridae, Orthomyxoviridae, Bunyaviridae, Arenaviridae, Coronaviridae, Picornaviridae, Togaviridae, Flaviviridae, mas preferentemente enfermedades virales que estan causadas por Ortomyxoviridae. Los ejemplos de los diversos virus se proporcionan en la tabla siguiente.
Familia
Virus (ejemplos preferentes)
Poxviridae
Virus de la viruela
Virus del molusco contagioso
Herpesviridae
Virus del herpes simple Virus de la varicela zoster Citomegalovirus Virus de Epstein Barr Virus del herpes asociado con el sarcoma de Kaposi
Adenoviridae
Adenovirus A-F humano
Papillomaviridae
Virus del papiloma
Polyomaviridae
Virus BK
Virus JC
Parvoviridae
Virus B19
Virus 2/3/5 adeno asociado
Familia
Virus (ejemplos preferentes)
Hepadnaviridae
Virus de la hepatitis B
Retroviridae
Virus de la inmunodeficiencia humana de tipos 1/2 Virus de la leucemia de linfocitos T humana Virus espumoso humano
Reoviridae
Reovirus 1/2/3 Rotavirus A/B/C Virus de la fiebre de garrapata del Colorado
Filoviridae
Virus del Ebola Virus de Marburg
Paramyxoviridae
Virus 1-4 de la parainfluenza Virus de las paperas Virus del sarampion Virus sincitial respiratorio Hendravirus
Rhabdoviridae
Virus de la estomatitis vesicular Virus de la rabia Virus de Mokola Virus del murcielago europeo Virus de Duvenhage
Orthomyxoviridae
Virus de la gripe tipos A-C
Bunyaviridae
Virus de la encefalitis de California Virus La Crosse Virus de Hantaan Virus de Puumala Virus Sin Nombre Virus de Seul Virus de la fiebre hemorragica de Crimea-Congo Virus de Sakhalin Virus del valle del Rift Virus de la fiebre de la mosca de la arena Virus de Uukuniemi
Arenaviridae
Virus de Lassa Virus de coriomeningitis linfodtica Virus de Guanarito Virus de Junin Virus de Machupo Virus de Sabia
Coronaviridae
Coronavirus humano
Picornaviridae
Enterovirus humanos tipos A-D (Poliovirus, Echovirus,
Familia
Virus (ejemplos preferentes)
Virus Coxsackie A/B) Rinovirus tipos A/B/C Virus de la hepatitis A Parechovirus Virus de la enfermedad de alimento y boca
Hepeviridae
Virus de la hepatitis E
Caliciviridae
Virus de Norwalk Virus de Sapporo
Astroviridae
Astrovirus 1 humano
Togaviridae
Virus de Ross River Virus de Chikungunya Virus de O'nyong-nyong Virus de la rubeola
Flaviviridae
Virus de encefalitis transmitida por garrapatas Virus del Dengue Virus de la fiebre amarilla Virus de la encefalitis japonesa Virus del valle de Murray Virus de la encefalitis de St. Louis Virus del Nilo occidental Virus de la hepatitis C Virus de la hepatitis G Virus de la hepatitis GB
Deltavirus
Deltavirus de hepatitis
Bornaviridae
Bornavirus
Priones
Preferentemente, los compuestos de la presente invencion se usan para tratar la gripe. La presente invencion cubre todos los generos de virus que pertenecen a la familia de ortomyxoviridae, de forma espedfica el virus de la gripe de tipo A, B, y C, isavirus, y thogotovirus. Dentro de la presente invencion, el termino "gripe" incluye gripe causada por 5 cualquier virus de la gripe tal como virus de la gripe de tipo A, B, y C incluyendo sus diversas cepas y aislados, y
tambien cubre en las cepas del virus de la gripe A denominadas comunmente gripe aviar y gripe porcina. El sujeto a tratar no esta limitado en particular y puede ser cualquier vertebrado, tal como pajaros y mairnferos (incluyendo seres humanos).
10 Sin desear quedar ligado por la teona, se supone que los compuestos de la presente invencion son capaces de
inhibir la actividad de endonucleasa, en particular la del virus de la gripe. De forma mas espedfica, se supone que interfieren directamente con la parte N-terminal de la protema PA del virus de la gripe, que alberga actividad de endonucleasa y esencial para la replicacion del virus de la gripe. La replicacion del virus de la gripe se produce en el interior de la celula dentro del nucleo. Por lo tanto, los compuestos disenados para inhibir la actividad de
15 endonucleasa de PA necesitan cruzar tanto la membrana celular como la membrana nuclear, una propiedad que depende fuertemente de las propiedades fisicoqmmicas disenadas de los compuestos. La presente invencion muestra que los compuestos reivindicados tienen actividad inhibitoria de endonucleasa in vitro y tienen actividad antiviral in vitro en ensayos basados en celulas.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Una posible medida de la actividad inhibitoria de endonucleasa in vitro de los compuestos que tienen la formula (V) es el ensayo de actividad de endonucleasa basado en FRET (transferencia de energfa por resonancia de fluorescencia) desvelado en el presente documento. Preferentemente, los compuestos presentan un % de reduccion de al menos aproximadamente un 50 % a 25 mM en el ensayo de FRET. En este contexto, el % de reduccion es el % de reduccion de la velocidad de reaccion inicial (v0) medido como aumento de fluorescencia de un sustrato de ARN etiquetado dual escindido por la subunidad de endonucleasa del virus de la gripe (PA-Nter) despues de tratamiento con el compuesto en comparacion con muestras sin tratar. Preferentemente, los compuestos presentan una CI50 inferior a aproximadamente 40 jM, mas preferentemente inferior a aproximadamente 20 jM, en este ensayo. La concentracion inhibitoria semimaxima (CI50) es una medida de la eficacia de un compuesto para inhibir la funcion biologica o bioqmmica y se calculo a partir de las velocidades de reaccion iniciales (v0) en una serie de concentraciones dadas que vanan de 100 jM al menos 2 nM.
Los compuestos que tienen la formula general (V) se pueden usar en combinacion con uno u otros medicamentos mas. El tipo de los otros medicamentos no esta limitado en particular y dependera del trastorno a tratar. Preferentemente, el otro medicamento sera un medicamento adicional que sea util para tratar, mejorar o prevenir una enfermedad viral, mas preferentemente un medicamento adicional que sea util para tratar, mejorar o prevenir la gripe que ha sido causada por infeccion por el virus de la gripe y afecciones asociadas con esta infeccion viral tales como neumoma viral o neumoma bacteriana secundaria y medicamentos para tratar smtomas tales como escalofnos, fiebre, dolor de garganta, dolores musculares, dolor de cabeza grave, tos, debilidad y fatiga. Ademas, los compuestos que tiene la formula general (I) se pueden usar en combinacion con antiinflamatorios.
Se preve que las siguientes combinaciones de medicamentos son particularmente adecuadas:
(i) La combinacion con inhibidores endonucleasa y union de proteccion (en particular direccion de gripe). Los inhibidores de endonucleasa no estan limitados en particular y pueden ser cualquier inhibidor de endonucleasa, en particular cualquier inhibidor de endonucleasa viral. Los inhibidores de endonucleasas precedentes son los que se definen en las solicitudes de Estados Unidos con los numeros de serie 61/550.045 (presentada el 21 de octubre, 2011), 61/650.713 (presentada el 23 de mayo, 2012), 61/650.725 (presentada el 23 de mayo, 2012) y 61/679.968 (presentada el 6 de agosto, 2012). La divulgacion completa de estas solicitudes se incorpora en el presente documento por referencia. En particular, todas las descripciones con respecto a la formula general de los compuestos de acuerdo con estas solicitudes de Estados Unidos, las realizaciones preferentes de los diversos sustituyentes asf como la utilidad medica y ventajas de los compuestos se incorporan en el presente documento por referencia.
Los inhibidores de endonucleasa preferentes adicionales son los compuestos que tienen la formula general (I) , se detiene en la solicitud relacionada con el numero de expediente del mandatario U2797 US, y los compuestos que tienen la formula general (II) como se define la solicitud relacionada con el numero de expediente del mandatario U2798 US, que se presentaron en la misma fecha que la presente, cuya divulgacion completa se incorpora por referencia. En particular, todas las descripciones con respecto a la formula general de estos compuestos, las realizaciones preferentes de los diversos sustituyentes asf como la utilidad medica y ventajas de los compuestos se incorporan en el presente documento por referencia. Estos compuestos pueden estar opcionalmente en forma de una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, polimorfo, cofarmaco, cocristal, profarmaco, tautomero, racemato, enantiomero, o diastereomero o mezcla de los mismos.
Los inhibidores de union de proteccion no estan limitados en particular y pueden ser cualquier inhibidor de union de proteccion, en particular cualquier inhibidor de union de proteccion viral. Los inhibidores de union de proteccion preferentes son los que tienen la formula general (II) como se define en la solicitud de Estados Unidos 61/550.057 (presentada el 21 de octubre, 2011) y/o los compuestos desvelados en el documento WO2011/000566, cuya divulgacion completa se incorpora por referencia. En particular, todas las descripciones con respecto a la formula general de los compuestos de acuerdo con el documento US 61/550.057 o el documento WO2011/000566, las realizaciones preferentes de los diversos sustituyentes asf como la utilidad medica y ventajas de los compuestos se incorporan en el presente documento por referencia.
La resistencia generalizada a ambas clases de agentes antivirales para la gripe con licencia (inhibidores del canal ionico M2 (adamantanos) e inhibidores de neuraminidasa (por ejemplo, oseltamivir)) se produce en ambas cepas de la gripe emergentes pandemicas y estacionales, lo que hace que estos farmacos sean de utilidad minima en la modalidad de tratamiento. Para inhibidores del canal ionico m2, la frecuencia de resistencia viral ha ido en aumento desde 2003 y para la gripe estacional A/H3N2, los adamantanos ahora se consideran ineficaces. Practicamente todas las cepas 2009 H1N1 y H3N2 estacional son resistentes a los adamantanos (rimantadina y amantadina), y para el oseltamivir, el inhibidor de la neuraminidasa (NAI) mas ampliamente prescrito, la OMS informo sobre la emergencia significativa de resistencia de la gripe A/H1 N1 comenzando en la temporada de gripe de 2007/2008; y para el segundo y tercer trimestres de 2008 en el hemisferio sur. En el cuarto trimestre de 2008 se publicaron numeros incluso mas serios (hemisferio norte) en el que un 95 % de todos los aislados sometidos a ensayos no revelaron susceptibilidad al oseltamivir. Teniendo en cuenta el hecho de que ahora la mayona de los gobiernos nacionales han estado almacenando los NAI como parte de su plan de preparacion para una pandemia de gripe, es evidente que la demanda de nuevos farmacos eficaces, esta creciendo de forma significativa. Para abordar la necesidad de terapias mas eficaces, se han realizado estudios preliminares que usan combinaciones dobles o incluso triples de farmacos antivirales con diferentes mecanismos de accion. Se analizaron adamantanos e inhibidores de neuraminidasa en combinacion in vitro e in vivo y se encontro que
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
actuaban de forma altamente sinergicas. Sin embargo, se sabe que para ambos tipos de agentes antivirales, surgen virus resistentes con bastante rapidez y este problema no se resuelve mediante la combinacion de estos farmacos antivirales establecidos.
Los inhibidores de la polimerasa del virus de la gripe son nuevos farmacos que se dirigen a la actividad de transcripcion de la polimerasa. Los inhibidores selectivos frente a la union de proteccion y sitios activos de endonucleasa de la polimerasa viral atenuan gravemente la infeccion por virus mediante la detencion del ciclo de reproduccion viral. Estas dos dianas se localizan dentro de distintas subunidades del complejo de polimerasa y por lo tanto representan dianas farmacologicas unicas. Debido al hecho de que se requieren ambas funciones para el denominado mecanismo de "agarre de la proteccion" que esencial para la transcripcion viral, se espera que la inhibicion simultanea de ambas funciones actue de forma altamente sinergicas. Esta combinacion de farmacos altamente eficaz podna dar como resultado concentraciones de sustancia mas bajas y por lo tanto un aumento de las relaciones de dosis-respuesta y mejores perfiles de efectos secundarios.
Ambos sitios activos estan altamente conservados entre todas las cepas de la gripe A (por ejemplo, aviar y humana) e incluso los virus de la gripe B y, por lo tanto, este alto grado de conservacion de secuencia sustenta la percepcion de que estas dianas probablemente no van a desencadenar la generacion rapida de virus resistentes. Ademas, una interaccion proxima con protemas hospedadoras hace que estas protemas virales sean menos propensas a las mutaciones. Por lo tanto, los inhibidores de endonucleasa y de union de proteccion individualmente y en combinacion son farmacos candidatos ideales para combatir la gripe tanto estacional como pandemica, independientemente de la cepa del virus.
La combinacion de un inhibidor de la endonucleasa y un inhibidor de union de proteccion o un inhibidor de polimerasa espedfico dual que se dirige tanto al sitio activo de endonucleasa como al dominio de union de proteccion podna ser eficaz frente a cepas de virus resistentes frente a adamantanos e inhibidores de neuraminidasa y ademas combinar la ventaja de una baja susceptibilidad a la generacion de resistencia con actividad frente a una amplia gama de cepas de virus.
(ii) La combinacion de inhibidores de diferentes dianas antivirales (en particular la direccion del virus de la gripe) centrandose en la combinacion con (preferentemente el virus de la gripe) inhibidores de polimerasa como terapia de combinacion dual o multiple. Los inhibidores de la polimerasa del virus de la gripe son nuevos farmacos que se dirigen a la actividad de transcripcion y replicacion de la polimerasa. Los inhibidores selectivos frente a la polimerasa viral atenuan fuertemente la infeccion por virus al detener el ciclo de reproduccion viral. Se espera que la combinacion de un inhibidor de la polimerasa que se dirige de forma espedfica a una diana intracelular viral con un inhibidor de una diana antiviral diferente actue de forma altamente sinergica. Esto se basa en el hecho de que estos tipos diferentes de farmacos antivirales presentan mecanismos de accion completamente diferentes que requieren diferentes propiedades farmacocineticas que actuen de forma ventajosa y de manera sinergica con respecto a la eficacia antiviral de la combinacion.
Esta combinacion de farmacos altamente eficaz podna dar como resultado concentraciones de sustancia menores y por lo tanto un aumento de las relaciones de dosis-respuesta y mejores perfiles de efectos secundarios. Ademas, las ventajas que se han descrito anteriormente para inhibidores de polimerasa podnan prevalecer para combinaciones de inhibidores de diferentes dianas antivirales con inhibidores de polimerasa. Por lo general, al menos un compuesto seleccionado entre el primer grupo de inhibidores de polimerasa (por ejemplo, inhibidores de union de proteccion y de endonucleasa) se combinan con al menos un compuesto seleccionado entre el segundo grupo de inhibidores de polimerasa.
El primer grupo de inhibidores de polimerasa que se puede usar en este tipo de terapia de combinacion incluye, pero no se limita a, los compuestos que tienen la formula (V).
El segundo grupo de inhibidores de polimerasa que se pueden usar en este tipo de terapia de combinacion incluye, pero no se limita a, los compuestos que tienen la formula general (I) como se define en la solicitud de Estados Unidos con el numero de serie 61/550.045 presentada el 21 de octubre, 2011, los compuestos que tienen la formula general (II) como se define en la solicitud Estados Unidos 61/550.057 presentada el 21 de octubre, 2011, los compuestos desvelados en los documentos WO 2011/000566, WO 2010/110231, WO 2010/110409, WO 2006/030807 o US 5.475.109 asf como flutimida y analogos, favipiravir y analogos, galato de epigalocatequina y analogos, asf como analogos de nucleosido tales como ribavirina.
(iii) La combinacion de inhibidores de polimerasa con inhibidores de neuraminidasa
Los inhibidores de polimerasa del virus de la gripe son nuevos farmacos que se dirigen a la actividad de transcripcion y replicacion de la polimerasa. La combinacion de un inhibidor de polimerasa que se dirige de forma espedfica a una diana intracelular viral con un inhibidor de una diana antiviral extracelular diferente, especialmente se espera que la neuraminidasa (por ejemplo, viral) actue de forma altamente sinergica. Esto se basa en el hecho de que estos diferentes tipos de farmacos antivirales presentan mecanismos de accion completamente diferentes que requieren diferentes propiedades farmacocineticas que actuen de forma ventajosa y sinergica sobre la eficacia antiviral de la combinacion.
Esta combinacion de farmacos altamente eficaz podna dar como resultado una disminucion de las concentraciones de sustancia y por lo tanto un aumento de las relaciones de dosis-respuesta y mejores perfiles de efectos secundarios. Ademas, las ventajas descritas anteriormente para inhibidores de polimerasa podnan prevalecer para combinaciones de inhibidores de diferentes dianas antivirales con inhibidores de polimerasa.
Por lo general, al menos un compuesto seleccionado entre el primer grupo de inhibidores de polimerasa mencionado anteriormente se combina con al menos un inhibidor de neuraminidasa.
El inhibidor de neuraminidasa (en particular el inhibidor de neuramidasa de la gripe) no esta limitado de forma espedfica. Los ejemplos incluyen zanamivir, oseltamivir, peramivir, KDN DANA, FANA, y derivados de
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
ciclopentano.
(iv) La combinacion de inhibidores de polimerasa con inhibidores del canal M2
Los inhibidores de polimerasa del virus de la gripe son nuevos farmacos que se dirigen a la actividad de transcripcion y replicacion de la polimerasa. Se espera que la combinacion de un inhibidor de polimerasa que se dirige de forma espedfica a una diana intracelular viral con un inhibidor de una diana antiviral extracelular y citoplasmatica diferente, especialmente el canal ionico M2 viral, actue de forma altamente sinergica. Esto se basa en el hecho de que estos diferentes tipos de farmacos antivirales presentan mecanismos de accion completamente diferentes que requieren diferentes propiedades farmacocineticas que actuen de forma ventajosa y sinergica sobre la eficacia antiviral de la combinacion.
Esta combinacion de farmacos altamente eficaz podna dar como resultado una disminucion de las concentraciones de sustancia y por lo tanto un aumento de las relaciones de dosis-respuesta y mejores perfiles de efectos secundarios. Ademas, las ventajas descritas anteriormente para inhibidores de polimerasa podnan prevalecer para combinaciones de inhibidores de diferentes dianas antivirales con inhibidores de polimerasa.
Por lo general, al menos un compuesto seleccionado entre el primer grupo de inhibidores de polimerasa mencionado anteriormente se combina con al menos un inhibidor del canal M2.
El inhibidor del canal M2 (en particular el inhibidor del canal M2 de la gripe) no esta limitado de forma espedfica. Los ejemplos incluyen amantadina y rimantadina.
(v) La combinacion de inhibidores de polimerasa con inhibidores de alfa glucosidasa
Los inhibidores de polimerasa del virus de la gripe son nuevos farmacos que se dirigen a la actividad de transcripcion y replicacion de la polimerasa. Se espera que la combinacion de un inhibidor de polimerasa que se dirige de forma espedfica a una diana intracelular viral, con un inhibidor de una diana de celula hospedadora diferente, especialmente alfa glucosidasa, actue de forma altamente sinergica. Esto se basa en el hecho de que estos diferentes tipos de farmacos antivirales presentan mecanismos de accion completamente diferentes que requieren diferentes propiedades farmacocineticas que actuen de forma ventajosa y sinergica sobre la eficacia antiviral de la combinacion.
Esta combinacion de farmacos altamente eficaz podna dar como resultado una disminucion de las concentraciones de sustancia y por lo tanto un aumento de las relaciones de dosis-respuesta y mejores perfiles de efectos secundarios. Ademas, las ventajas descritas anteriormente para inhibidores de polimerasa podnan prevalecer para combinaciones de inhibidores medianas celulares que interactuan por la replicacion viral con inhibidores de polimerasa.
Por lo general, al menos un compuesto seleccionado entre el primer grupo de inhibidores de polimerasa mencionado anteriormente se combina con al menos un inhibidor de alfa glucosidasa.
El inhibidor de alfa glucosidasa no esta limitado de forma espedfica. Los ejemplos incluyen los compuestos que se describen en Chang et al., Antiviral Research 2011, 89, 26-34.
(vi) La combinacion de inhibidores de polimerasa con ligandos de otras dianas de gripe
Los inhibidores de polimerasa del virus de la gripe son nuevos farmacos que se dirigen a la actividad de transcripcion y replicacion de la polimerasa. Se espera que la combinacion de un inhibidor de polimerasa que se dirige de forma espedfica a una diana intracelular viral con un inhibidor de diferentes dianas antivirales extracelulares, citoplasmaticas o nucleicas actue de forma altamente sinergica. Esto se basa en el hecho de que estos diferentes tipos de farmacos antivirales presentan mecanismos de accion completamente diferentes que requieren diferentes propiedades farmacocineticas que actuen de forma ventajosa y sinergica sobre la eficacia antiviral de la combinacion.
Esta combinacion de farmacos altamente eficaz podna dar como resultado una disminucion de las concentraciones de sustancia y por lo tanto un aumento de las relaciones de dosis-respuesta y mejores perfiles de efectos secundarios. Ademas, las ventajas descritas anteriormente para inhibidores de polimerasa podnan prevalecer para combinaciones de inhibidores de diferentes dianas antivirales con inhibidores de polimerasa.
Por lo general, al menos un compuesto seleccionado entre el primer grupo de inhibidores de polimerasa mencionado anteriormente se combina con al menos un ligando de otra diana de gripe.
El ligando de otra diana de gripe no esta limitado de forma espedfica. Los ejemplos incluyen compuestos que actuan en la protema de fusion de sialidasa (por ejemplo, Fludase (DAS181), los ARNsi y oligonucleotidos de fosforotioato), inhibidores de transduccion de senales (por ejemplo, ErbB tirosina quinasa, familia de Abl quinasa, MAP quinasas, activacion mediada por PKCa de la senalizacion de ERK) asf como interferon (inductores).
(vii) La combinacion de inhibidores de polimerasa (preferentemente gripe) con un compuesto usado como un adyuvante para minimizar los smtomas de la enfermedad (antibioticos, agentes antiinflamatorios tales como inhibidores de la COX (por ejemplo, inhibidores de COX-1/COX-2, inhibidores de COX-2 selectivos), inhibidores de lipoxigenasa, ligandos de Ep (en particular ligandos de EP4), ligandos de bradiquinina, y/o ligandos cannabinoides (por ejemplo, agonistas de CB2)). Los inhibidores de polimerasa del virus de la gripe son nuevos farmacos que se dirigen a la actividad de transcripcion y replicacion de la polimerasa. La combinacion de un inhibidor de polimerasa que se dirige de forma espedfica a una diana intracelular viral con un compuesto usado como un adyuvante para minimizar los smtomas de la enfermedad y que las consecuencias patologicas causales y sintomaticas de la infeccion viral.
Se espera que esta combinacion actue de forma sinergica porque estos tipos de farmacos diferentes presentan mecanismos de accion completamente diferentes que requieren diferentes propiedades farmacocineticas que actuen de forma ventajosa y sinergica en la eficacia antiviral de la combinacion.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Esta combinacion de farmacos altamente eficaz podna dar como resultado concentraciones de sustancia mas bajas y por lo tanto un aumento de las relaciones de dosis-respuesta y mejores perfiles de efectos secundarios. Ademas, las ventajas que se han descrito anteriormente para inhibidores de polimerasa podnan prevalecer para combinaciones de inhibidores de diferentes dianas antivirales con inhibidores de polimerasa.
Diversas modificaciones y variaciones de la invencion seran evidentes para los expertos en la materia sin apartarse del alcance de la invencion. Aunque la invencion se ha descrito en relacion con realizaciones preferentes espedficas, se debena entender que la invencion tal como se reivindica no se debena limitar excesivamente a tales realizaciones espedficas. De hecho, se pretende que diversas modificaciones de los modos descritos para realizar la invencion, que son evidentes para los expertos en los campos pertinentes, esten cubiertas por la presente invencion.
Los siguientes ejemplos son simplemente ilustrativos de la presente invencion y no se debena interpretar que limitan el alcance de la invencion como se indica con las reivindicativas adjuntas en modo alguno.
Ejemplos
Ensayo de actividad de endonucleasa por FRET
El fragmento PA-Nter (aminoacidos 1 - 209) del virus de la gripe A (IAV) que alberga la actividad de endonucleasa de la gripe se genero y se purifico como se describe en Dias et al., Nature 2009; abril de 16; 458 (7240), 914-918. La protema se disolvio en tampon que contema Tris 20 mM a pH 8,0 NaCl, 100 mM y p-mercaptoetanol 10 mM y alfcuotas se almacenaron a -20 °C.
Un oligo ARN etiquetado de forma dual de 20 bases con fluoroforo 5'-FAM e interruptor 3'-BHQ1 se uso como un sustrato a escindir mediante la actividad de endonucleasa del PA-Nter. La escision del sustrato de ARN libera el fluoroforo del interruptor dando como resultado un aumento de la senal fluorescente.
Todos los componentes del ensayo se diluyeron en tampon de ensayo que contema Tris-HCl 20 mM a pH 8,0, NaCl 100 mM, MnCl2 1 mM, MgCh 10 mM y p-mercaptoetanol 10 mM. La concentracion final de PA-Nter era de 0,5 pM y 1,6 pM de sustrato de ARN. Los compuestos de ensayo se disolvieron en DMSO y generalmente se sometieron a ensayo a dos concentraciones o una serie de concentraciones dando como resultado una concentracion final de DMSO en el pocillo de la placa de un 0,5 %. En esos casos en los que los compuestos no eran solubles a esa concentracion, se sometieron a ensayo a la concentracion soluble mas elevada.
En los pocillos de placas de microtitulacion de 384 pocillos de color blanco (PerkinElmer) se proporcionaron 5 pl de cada dilucion de compuesto en ocho replicados. Despues de la adicion de dilucion de PA-Nter, las placas se cerraron hermeticamente y se incubaron durante 30 min a temperatura ambiente antes de la adicion de sustrato de ARN 1,6 pM diluido en tampon de ensayo. Posteriormente, el aumento de la senal de fluorescencia del ARN escindido se midio en un lector de microplacas (Synergy HT, Biotek) a una longitud de onda de excitacion de 485 nm y de emision de 535 nm. El intervalo de lectura cinetica fue de 35 segundos a una sensibilidad de 35, Los datos de la senal de fluorescencia durante un periodo de 20 min se usaron para calcular la velocidad inicial (v0) de la escision del sustrato. La lectura final era un % de reduccion de v0 de las muestras tratadas un compuesto en comparacion con las no tratadas. La concentracion inhibitoria semimaxima (CI50) es una medida de la eficacia de un compuesto en la inhibicion de la funcion biologica o bioqmmica y se calculo a partir de las velocidades de reaccion iniciales (v0) en una serie de concentraciones dada que variaban de un maximo de 100 pM a al menos 2 nM.
Formula n.°
FRET Formula n.° FRET
0 0 6
CI50= 0,6 pM O O ho"VStni CI50= 0,76 pM
Formula n.°
FRET Formula n.° FRET
jPfX) 0=( o X
CI50= 9,7 pM O O hoVy"^ CI50= 7,8 pM
0 o hoAxV"x ^O0O
6 % @ 1 pM 0 0 uaAA/NV HO ^ ^ (19) CI50 = 1,5 pM
0 o COO (23)
14 % @ 1 pM O O h°Yxni (33) CI50 =0,5 pM
0 0 hoVi^ (38)
CI50 = 6,76 pM 0 0 HoAto (29) CI50= 0,43 pM
imagen5
imagen6
imagen7
imagen8
imagen9
Formula n.°
Formula n.°
FRET
7 % @ 1 |jM
33 % @ 1 jM
FRET
CI50= 0,57 jM
CI50 = 5,6 jM
Ruta de smtesis para (7):
5
10
15
20
25
30
35
40
Experimental: Preparacion de (3):
imagen10
Ester etilico del acido 3-(3-fluoro-piridin-2-il)-3-oxo-propionico
A una solucion de malonato de etilo y potasio (2) (452 mg, 2,66 mmol) en tetrahidrofurano (5 ml) se anadio MgCh (202 mg, 2,13 ml). La mezcla se agito a 50 °C durante 4 h y a continuacion se enfrio a temperatura ambiente. En otro matraz se tomo una solucion de acido 3-fluoro-piridina-2-carboxflico (1) (250 mg, 1,77 mmol) en tetrahidrofurano (5 ml) y se anadio CDI (carbonildiimidazol) (489 mg, 3,01 mmol) a 10 °C. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 h, a continuacion esta mezcla de reaccion se anadio a la suspension mencionada anteriormente y se agito a temperatura ambiente durante 18 h. Despues de finalizar la reaccion, se anadio agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lavo con solucion salina saturada, se seco sobre Na2SO4 y se concentro.
El residuo se purifico usando cromatograffa en columna sobre gel de sflice normal (usando un 2 % de metanol: diclorometano) para obtener el ester etflico del acido 3-(3-fluoro-piridin-2-il)-3-oxo-propionico (3) (150 mg, 40 %) en forma de un lfquido pegajoso.
LC-MS: 212,4 (M+H).
Preparacion de (4):
imagen11
Ester etflico del acido 3-dimetilamino-2-(3-fluoro-piridin-2-carbonil)-acnlico
A una solucion agitada de ester etflico del acido 3-(3-fluoro-piridin-2-il)-3-oxo-propionico (3) (15 mg, 0,07 mmol) en 3- hidroxitetrahidrofurano (2 ml) se anadio lentamente dietilacetal de dimetilformamida (0,085 ml, 0,5 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a 50 °C durante 6 h. Despues de finalizar la reaccion, el disolvente se evaporo al vacfo para obtener el ester etflico del acido 3-dimetilamino-2-(3-fluoro-piridin-2-carbonil)-acnlico (4) en bruto (18 mg, en bruto) en forma de un lfquido pegajoso de color marron. LC-MS: 267,4 (M+H). El compuesto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purificacion.
Preparacion de (6):
imagen12
5
10
15
20
25
30
35
Ester etnico del acido 1 -bifenil-2-ilmetil-4-oxo-1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carbox^lico
A una solucion agitada de ester etflico del acido 3-dimetilamino-2-(3-fluoro-piridin-2-carbonil)-acnlico (4) (18 mg, 0,067 mmol) en dimetilacetamida (2 ml) se anadio K3PO4 (28 mg, 0,14 mmol) seguido de C-bifenil-2-il-metilamina (5) (11 mg, 0,06 mmol) a temperature ambiente. La mezcla se agito a 70 °C durante 14 h. Despues de finalizar la reaccion, la mezcla de reaccion se vertio en agua enfriada con hielo y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lavo con solucion salina saturada, se seco sobre Na2SO4 y se concentro. El residuo se purifico usando cromatograffa en columna sobre gel de silice normal (3 % de metanol : diclorometano) para obtener el ester etnico del acido 1-bifenil-2-ilmetil-4-oxo-1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxflico (6) (9 mg, 35%) en forma de un solido pegajoso.
LC-MS: 385,4 (M+H).
Preparacion de (7):
imagen13
Acido 1 -bifenil-2-ilmetil-4-oxo-1,4-dihidro-[1,5]na1tiridina-3-carboxnico
A una solucion agitada de ester etnico del acido 1-bifenil-2-ilmetil-4-oxo-1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxflico (6) (850 mg, 2,4 mmol) en MeOH (8 ml) se anadio LOH-H2O (100,2 mg, 4,8 mmol) y se agito a TA durante 16 h. Despues de finalizar la reaccion, el disolvente se retiro de la reaccion por destilacion y se diluyo con agua. La parte acuosa se acidifico con HCl 2 N, se extrajo con EtOAC y la fase organica se lavo con solucion salina saturada. Se seco sobre Na2SO4, se concentro y el residuo se purifico por HPLC Preparativa para obtener acido 1-bifenil-2-ilmetil- 4-oxo-1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxnico (7) (88 mg, 11 %) en forma de un solido blanquecino.
LC-MS: 357,4 (M+H).
Ruta de smtesis para 10:
imagen14
Preparacion de (8):
imagen15
C-(1-Fenil-ciclopentil)-metilamina
A una solucion agitada de 1-fenil-ciclopentanocarbonitrilo (4 g, 23,5 mmol) en tetrahidrofurano (50 ml) se anadio 5 hidruro de litio y aluminio lentamente (1 M en tetrahidrofurano, 70 ml, 70,6 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h. Despues de finalizar la reaccion, la mezcla de reaccion se inactivo con solucion acuosa saturada de Na2SO4 lentamente a 0 °C. A continuacion se filtro y el residuo se lavo con acetato de etilo. La parte organica se concentro para obtener C-(1-fenil-ciclopentil)-metilamina (8) (2,5 g, en bruto) en forma de un ifquido.
10
LC-MS: 176,2 (M+H).
Preparacion de (9):
15
imagen16
Ester etflico del acido 4-oxo-1-(1-fenil-ciclopentilmetil)-1,4-dihidro-[1,5]na1tiridina-3-carbox^lico
El ester etilico del acido 4-oxo-1-(1-fenil-ciclopentilmetil)-1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxflico (9) (140 mg, 20 49,46 %) se sintetizo en forma de un lfquido pegajoso a partir de 200 mg de ester etflico del acido 3-dimetilamino-2-
(3-fluoro-piridin-2-carbonil)-acnlico (4) siguiendo el procedimiento descrito para el ester etflico del acido 1 -bifenil-2- ilmetil-4-oxo-1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxflico (6).
LC-MS: 377,4 (M+H).
25
Preparacion de (10):
imagen17
30 Acido 4-oxo-1-(1-fenil-ciclopentilmetil)-1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxflico
El acido 4-oxo-1-(1-fenil-ciclopentilmetil)-1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxflico (10) (310 mg, 33,46%) se sintetizo en forma de un solido de color blanquecino a partir de 1 g de ester etflico del acido 4-oxo-1-(1-fenil-ciclopentilmetil)- 1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxflico (9) siguiendo el procedimiento descrito para el acido 1-bifenil-2-ilmetil-4-oxo- 35 1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxflico (7).
LC-MS: 349,4 (M+H).
5
10
15
20
25
30
Ruta de smtesis para 15:
imagen18
Esquema 3
B0 XT
6 h (en hnito) MaJN,f CI^ 'N
KjFOj, DMA 70 "C. 14 ti
LiOH, MeOH
Preparacion de (12):
imagen19
Ester etnico del acido 3-(3-cloro-pirazin-2-il)-3-oxo-propi6nico
El ester etilico del acido 3-(3-cloro-pirazin-2-il)-3-oxo-propionico (12) (2 g, 39,54 %) se sintetizo en forma de un tiquido de color amarillo a partir de 3,5 g de acido 3-cloro-pirazina-2-carboxflico (11) y 5,64 g de malonato de etilo y potasio (2) siguiendo el procedimiento descrito para el ester etilico del acido 3-(3-fluoro-piridin-2-il)-3-oxo-propi6nico (3).
LC-MS: 229,2 (M+H).
Preparacion de (13):
imagen20
Ester etnico del acido 2-(3-cloro-pirazin-2-carbonil)-3-dimetilamino-acnlico
El ester etnico del acido 2-(3-cloro-pirazin-2-carbonil)-3-dimetilamino-acnlico (13) (1,2 g, en bruto) se sintetizo en forma de un lfquido pegajoso a partir de 1 g de ester etilico del acido 3-(3-cloro-pirazin-2-il)-3-oxo-propionico (12) siguiendo el procedimiento descrito para el ester etilico del acido de 3-dimetilamino-2-(3-fluoro-piridin-2-carbonil)- acnlico (4).
LC-MS: 284,4 (M+H).
5
10
15
20
25
30
Preparacion de (14):
imagen21
Ester etnico del acido 5-bifenil-2-ilmetil-8-oxo-5,8-dil^idro-pirido[2,3-b]pirazina-7-carbox^lico
El ester etilico del acido 5-bifenil-2-ilmetil-8-oxo-5,8-dil^idro-pirido[2,3-b]pirazina-7-carbox^lico (14) (0,600 g, 36,71 %) se sintetizo en forma de un solido pegajoso de color marron a partir de 1,2 g de ester etflico del acido 2-(3- cloropirazin-2-carbonil)-3-dimetilamino-acnlico (13) siguiendo el procedimiento descrito para el ester etflico del acido 1 -bifenil-2-ilmetil-4-oxo-1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxnico (6).
LC-MS: 386,0 (M+H).
Preparacion de (15):
imagen22
Acido 5-bifenil-2-ilmetil-8-oxo-5,8-dihidro-pirido[2,3-b]pirazina-7-carboxflico
El acido 5-bifenil-2-ilmetil-8-oxo-5,8-dihidro-pirido[2,3-b]pirazina-7-carboxflico (15) (300 mg, 54%) se sintetizo en forma de un solido de color amarillo claro a partir de 600 mg de ester etflico del acido 5-bifenil-2-ilmetil-8-oxo-5,8- dihidro-pirido[2,3-b]pirazina-7-carboxflico (14) siguiendo el procedimiento descrito para el acido 1-bifenil-2-ilmetil-4- oxo-1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxflico (7).
LC-MS: 358,4 (M+H).
Ruta de smtesis para 17:
imagen23
5
10
15
20
25
30
Preparacion de (16):
imagen24
Ester etilico del acido 8-oxo-5-(1-fenil-ddopentilmetil)-5,8-dil^idro-pirido[2,3-b]pirazina-7-carbox^lico
El ester etilico del acido 8-oxo-5-(1-feml-cidopentilmetil)-5,8-dihidro-pindo[2,3-b]pirazina-7-carboxflico (16) (600 mg, 30 %) se sintetizo en forma de un lfquido pegajoso de color marron a partir de 1,5 g de ester etilico del acido 2-(3- cloro-pirazin-2-carbonil)-3-dimetilamino-acnlico (13) siguiendo el procedimiento descrito para el ester etflico del acido 1-bifeml-2-ilmetil-4-oxo-1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxflico (6).
LC-MS: 378,4 (M+H).
Preparacion de (17):
imagen25
Acido 8-oxo-5-(1-fenil-ddopentilmetil)-5,8-dihidro-pirido[2,3-b]pirazina-7-carboxflico
El acido 8-oxo-5-(1-fenil-dclopentilmetil)-5,8-dihidro-pirido[2,3-b]pirazina-7-carboxflico (17) (70 mg, 14 %) se sintetizo en forma de un solido de color amarillo a partir de 550 mg de ester etflico del acido 8-oxo-5-(1-fenil-ciclopentilmetil)- 5,8-dihidro-pirido[2,3-b]pirazina-7-carboxflico (16) siguiendo el procedimiento descrito para el acido 1 -bifenil-2-ilmetil- 4-oxo-1,4-dihidro-[1,5]naftiridina-3-carboxflico (7).
LC-MS: 350,4 (M+H).
Los siguientes eductos (derivados del acido 4-oxo-1,4-dihidro[1,5]naftiridina-3-carboxflico sustituidos) se sintetizaron de acuerdo con la bibliograffa:
Referencia 1: JCS, Perkin Trans 1: 1980, 1347-1351,
Referencia 2: Bioorg. Med. Chem. Lett; 2010, 20, 2533-2537.
5
10
15
20
25
imagen26
Preparacion de (19):
Acido 1-(bifenil-2-ilmetil)-7-bromo-4-oxo-1,4-dil^idro-1,5-naftiridina-3-carbox^lico (19)
imagen27
Etapa 1
1-(Bifenil-2-ilmetil)-7-bromo-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (18)
imagen28
A una mezcla de 7-bromo-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (100 mg, 0,34 mmol), 2- (bromometil)bifenilo (91,5 mg, 0,370 mmol), carbonato potasico (140 mg, 1,01 mmol) y yoduro potasico (5,59 mg, 0,034 mmol) en un vial de 20 ml se anadiO dimetilformamida (10 ml) a temperatura ambiente en una atmOsfera de nitrOgeno. La lmea de nitrOgeno se retirO de la mezcla de reacciOn y la suspension de color marrOn claro se agitO durante 3 dfas a temperatura ambiente momento en el que el analisis de LCMS indicaba la presencia de la masa deseada. A continuaciOn, se diluyO con -10 ml de agua y la soluciOn turbia resultante se vertiO en aprox. 100 ml de agua. Los sOlidos resultantes se recogieron por filtraciOn y se lavaron con agua y hexanos. Despues de secar al aire, se aislaron 116 mg de 1-(bifenil-2-ilmetil)-7-bromo-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (18) (rendimiento de un 74 %) en forma de un sOlido de color blanquecino.
LC/MS calcd. para C24H1gBrN2Oa (m/e) 463,32, obsd. 465,2 [M+H, ES+].
5
10
15
20
25
imagen29
A una solucion incolora de 1-(bifenil-2-ilmetil)-7-bromo-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (18) (50 mg, 0,11 mmol) en metanol (5 ml) se anadio monohidrato de hidroxido de litio solido (22,6 mg, 0,54 mmol) a temperatura ambiente. La solucion incolora resultante se agito durante 15 h a temperatura ambiente momento en el que el analisis de LCMS indicaba la ausencia de material de partida. A continuacion, la mezcla se diluyo con agua y el metanol se retiro al vado. La solucion acuosa basica resultante se diluyo con agua (-50 ml) y NaOH 1,0 N (-10 ml) y a continuacion se neutralizo con HCl 1,0 N. Los solidos de color blanquecino resultantes se recogieron por filtracion y se lavaron con agua y hexanos. Despues de secar al aire, se aislaron 32 mg de acido 1-(bifenil-2-ilmetil)-7-bromo- 4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxflico (19) (rendimiento de un 67%) en forma de un solido de color blanquecino.
RMN 1H (DMSO-da) 6: 12,9 (s, 1 H), 8,96 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,88 (s, 1 H), 8,2 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,26-7,48 (m, 9H), 5,8 (s, 2H).
LC/MS calcd. para C22H-,5BrN2O3 (m/e) 435,27, obsd. 437,1 [M+H, ES+].
Preparacion de (21):
Acido 1-(bifenil-2-ilmetil)-7-metil-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxflico (21)
imagen30
5
10
15
20
25
30
35
40
imagen31
El cloruro de cinc solido (409 mg, 3,00 mmol) en un matraz de fondo redondo de 50 ml se fundio a alto vado mediante calentamiento con una pistola de calor durante 10 minutos. A continuacion, el mismo se enfrio a temperature ambiente y se disolvio en tetrahidrofurano (5 ml).
En otro matraz de fondo redondo de 25 ml de 2 bocas se anadio una solucion 3,0 M de bromuro de metilmagnesio (1,00 ml, 3,00 mmol) en tetrahidrofurano hasta una solucion de tetrahidrofurano (3 ml) puro. La solucion resultante se enfrio a -70 °C y a continuacion se anadio la solucion de cloruro de cinc preparada anteriormente. Como resultado, se formo un precipitado de color blanco que a continuacion se permitio que se calentara a aprox. 0 °C en 10 minutos. La suspension de color blanco resultante se uso directamente. Otro matraz de fondo redondo de 50 ml de 2 bocas se cargo con acetato de paladio (II) (67,4 mg, 0,3 mmol) y 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo (246 mg, 0,6 mmol) a temperatura ambiente en una atmosfera de nitrogeno. A continuacion, este se disolvio en tetrahidrofurano (2 ml). Despues de 5 minutos, se anadio una solucion de 1-(bifenil-2-ilmetil)-7-bromo-4-oxo-1,4- dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (695 mg, 1,5 mmol) en tetrahidrofurano (5 ml), seguido de la suspension de color blanco preparada anteriormente de cloruro de metilcinc y magnesio en tetrahidrofurano. La suspension de color marron resultante se calento a 55 °C y se agito durante 15 h momento en el que se convirtio en una solucion de color negro y el analisis de LCMS indicaba la ausencia de material de partida. A continuacion, la mezcla de reaccion se inactivo con solucion saturada de cloruro de amonio y el compuesto organico se extrajo en acetato de etilo (3 x 70 ml). Los extractos combinados se lavaron con agua y solucion salina saturada, y se secaron sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron el producto en bruto (1,2 g) que se purifico usando una cromatograffa en columna ISCo (80 g), eluyendo con acetato de etilo en hexanos (de un 0 a un 100%) y a continuacion con un 10% de metanol y diclorometano. Las fracciones deseadas se combinaron y el disolvente se retiro al vado para obtener 1-(bifenil-2-ilmetil)-7-metil-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (20) (80 mg, rendimiento de un 13,4 %) en forma de un solido de color amarillo.
LC/MS calcd. para C25H23N2O3 (m/e) 398,4, obsd. 399,2 [M+H, ES+].
Etapa 2
Acido 1-(bifenil-2-ilmetil)-7-metil-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxflico (21)
imagen32
A una solucion de 1-(bifenil-2-ilmetil)-7-metil-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (20) (80 mg, 0,2 mmol) en metanol (10 ml) se anadio el monohidrato de hidroxido de litio solido (168 mg, 4,02 mmol) a temperatura ambiente en atmosfera de nitrogeno. Este proporciono una solucion transparente en 30 minutos y esta
5
10
15
20
25
30
35
solucion de color amarillo claro se agito durante 15 h momento en el que el analisis de LCMS indicaba la ausencia de material de partida. A continuacion, este se diluyo con agua y el metanol se retiro al vado. La fase acuosa basica se diluyo con agua y a continuacion se extrajo con acetato de etilo (50 ml) para retirar cualquier impureza neutra. A continuacion, la fase acuosa basica se neutralizo con HCl 1,0 N. A continuacion, el acido se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 ml) y los extractos combinados se lavaron con solucion salina saturada y se secaron sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron los solidos de color amarillo que se disolvieron en acetonitrilo y agua. La mezcla se congelo y a continuacion se liofilizo a alto vado para obtener acido 1-(bifenil-2-ilmetil)-7-metil-4-oxo- 1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxflico (21) (15 mg, rendimiento de un 20 %) en forma de un solido de color amarillo claro.
RMN 1H (DMSO-da) 6: 12,9 (s, 1 H), 8,93 (s, 1 H), 8,75 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 864 (d, J = 2 Hz, 1 H), 7,19-7,48 (m, 9H), 5,78 (s, 2H), 2,4 (s, 3H). LC/MS calcd. para C23H18N2O3 (m/e) 370,4, obsd. 371,2 [M+H, ES+].
Preparacion de (23):
Acido 7-bromo-4-oxo-1-(2-fenoxibencil)-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxflico (23)
imagen33
Etapa 1
7-Bromo-4-oxo-1-(2-fenoxibencil)-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (22)
imagen34
A una mezcla de 7-bromo-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (150 mg, 0,51 mmol), 1-(clorometil)- 2-fenoxibenceno (121 mg, 0,56 mmol), carbonato potasico (209 mg, 1,51 mmol) y yoduro potasico (92,2 mg, 0,56 mmol) en un vial de 20 ml se anadio dimetilformamida (10 ml) a temperatura ambiente en una atmosfera de nitrogeno. La lmea de nitrogeno se retiro de la mezcla de reaccion y la suspension de color marron claro se agito durante 2 dfas a temperatura ambiente momento en el que el analisis de LCMS indicaba la presencia de la masa deseada. A continuacion, se anadieron aprox. 10 ml de agua y la solucion turbia resultante se vertio en aprox. 100 ml de agua con agitacion con una espatula. Los solidos de color blanco resultantes se extrajeron en acetato de etilo (2 x 50 ml) y los extractos combinados se lavaron con solucion salina saturada y se secaron sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron 7-bromo-4-oxo-1-(2-fenoxibencil)-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (22) (232 mg, rendimiento de un 96 %) en forma de un aceite de color marron.
LC/MS calcd. para C24H-,gBrN2O4 (m/e) 479,32, obsd. 481,1 [M+H, ES+].
5
10
15
20
25
imagen35
A una solucion de color marron claro de 7-bromo-4-oxo-1-(2-fenoxibencil)-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (22) (230 mg, 0,5 mmol) en metanol (20 ml) se anadio el monohidrato de hidroxido de litio solido (438 mg, 10,4 mmol) a temperatura ambiente. La solucion de color marron claro resultante se agito durante 15 h a temperatura ambiente momento en el que el analisis de LCMS indicaba la ausencia de material de partida. A continuacion, este se diluyo con agua y el metanol se retiro al vado. La pasta de color marron resultante era dificil de disolver en NaOH 1,0 N y agua. A continuacion, las impurezas neutras se extrajeron en acetato de etilo y la fase acuosa basica se diluyo con agua (-100 ml). A continuacion, la solucion acuosa basica se neutralizo con HCl 1,0 N. Los solidos resultantes se recogieron por filtracion y se lavaron con agua y hexanos. Despues de secar al aire, se aislaron 40 mg de acidos 7-bromo-4-oxo-1-(2-fenoxibencil)-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxflico (23) (rendimiento de un 17 %) en forma de un solido de color blanquecino.
RMN 1H (DMSO-da) 6: 12,9 (s, 1 H), 9,27 (s, 1 H), 9,05 (s, 1 H), 8,7 (s, 1 H), 7,36-7,47 (m, 3H), 6,96-7,2 (m, 6H), 5,9 (s, 2H).
LC/MS calcd. para C22H-,5BrN2O4 (m/e) 451,27, obsd. 453,1 [M+H, ES+].
imagen36
5
10
15
20
25
30
35
40
Preparacion de (27):
imagen37
Etapa 1
2-((Piridin-3-ilamino)metilen)malonato de dietilo (24)
imagen38
La piridin-3-amina (9,41 g, 100 mmol) y el 2-(etoximetilen)malonato de dietilo (21,6 g, 100 mmol) se combinaron en un recipiente cerrado con rosca de 250 ml y esta mezcla se puso en un bano de aceite calentado previamente a 80 °C y la solucion de color marron claro resultante se agito durante 15 h momento en el que el analisis de LCMS indicaba la presencia de una nueva aplicacion puntual. A continuacion, la solucion de color marron claro se enfrio a temperatura ambiente y como resultado se comenzaron a formar algunos solidos. La mezcla se dejo a temperatura ambiente durante 2 h. Los solidos eran diffciles de romper, pero los trozos grandes se recogieron por filtracion y se lavaron con hexanos. Despues de secar al aire, se aislaron 25,18 g de 2-((piridin-3-ilamino)metilen)malonato de dietilo (24) (rendimiento de un 95,3 %) en forma de un solido de color blanco.
LC/MS calcd. para C13H16N2O4 (m/e) 264,28, obsd. 265,2 [M+H, ES+].
Etapa 2
4-Oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (25)
imagen39
A una solucion caliente (248 °C, se usaron cobertura y termometro) e incolora de difenil eter (100 ml) se anadio gota a gota una solucion de color marron claro de 2-((piridin-3-ilamino)metilen)malonato de dietilo (24) (3 g, 11,4 mmol) en difenil eter (4 ml, calentado para disolver) a 248 °C durante 10 min. Durante la adicion, la mezcla de reaccion se convirtio en una solucion de color marron y a continuacion en la solucion de color marron oscuro. La mezcla de reaccion resultante de color marron se calento a reflujo (la temperatura interior era de 245 a 248 °C) durante 1 h. A continuacion, el calentamiento se detuvo y se dejo enfriar a aprox. 80 °C momento en el que algunos solidos comenzaron a precipitar y a continuacion se retiro la cobertura. La suspension resultante se vertio en aprox. 300 ml de hexanos y los solidos de color marron se recogieron por filtracion y se lavaron con hexanos. El analisis de RMN 1H y LCMS de este solido indicaban la presencia de los regioisomeros en una proporcion de aprox. 4:1. A continuacion, los dos picos se separaron con el metodo de HPLC y el 4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (25) (1,25 g, rendimiento de un 50 %) deseado se aislo en forma de un solido de color marron.
5
10
15
20
25
30
35
40
LC/MS calcd. para C11H10N2O3 (m/e) 218,21, obsd. 219,2 [M+H, ES+].
Etapa 3
1-(2-(4-Clorofeniltio)bencil)-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (26)
imagen40
A una mezcla de 4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (218 mg, 1,0 mmol), (2-(clorometil)fenil)(4- clorofenil)sulfano (25) (296 mg, 1,1 mmol), carbonato potasico (415 mg, 3,00 mmol) y yoduro potasico (183 mg, 1,1 mmol) en un vial de 20 ml se anadio dimetilformamida (15 ml) a temperatura ambiente en una atmosfera de nitrogeno. La lmea de nitrogeno se retiro de la mezcla de reaccion y la suspension de color marron claro se agito durante 15 h a temperatura ambiente momento en el que el analisis de LCMS indicaba la presencia de la masa deseada. A continuacion, se anadieron aprox. 10 ml de agua y el compuesto organico se extrajo en acetato de etilo (2 x 100 ml). Los extractos combinados se lavaron con solucion salina saturada y se secaron sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron la pasta de color marron en bruto que se purifico usando una cromatograffa en columna ISCo (80 g), eluyendo con acetato de etilo en hexanos (de un 0 a un 100 %) y a continuacion con un 5 % de metanol en diclorometano para obtener 1-(2-(4-clorofeniltio)bencil)-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (26) (208 mg, rendimiento de un 46 %) en forma de un aceite de color marron claro.
LC/MS calcd. para C24H-,9ClN2O3S (m/e) 450,94, obsd. 451,2 [M+H, ES+].
Etapa 4
Acido 1-(2-(4-clorofeniltio)bencil)-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxflico (27)
imagen41
A una solucion de color marron claro de 1-(2-(4-clorofeniltio)bencil)-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (26) (203 mg, 0,450 mmol) en metanol (20 ml) se anadio el monohidrato de hidroxido de litio solido (189 mg, 4,5 mmol) a temperatura ambiente. La solucion de color marron claro resultante se agito durante 15 h a temperatura ambiente momento en el que el analisis de LCMS indicaba la ausencia de material de partida. A continuacion, este se diluyo con agua y el metanol se retiro al vado. Los solidos resultantes de color marron claro eran diffciles de disolver en NaOH 1,0 N y agua, pero se disolvfan en dimetilformamida (aprox. 10 ml) y la solucion se diluyo con agua (aprox. 100 ml). A continuacion, la solucion acuosa basica resultante se neutralizo con HCl 1,0 N. Los solidos resultantes se recogieron por filtracion y se lavaron con agua y hexanos. Despues de secar al aire, se aislaron 102 mg de acido 1-(2-(4-clorofeniltio)bencil)-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxflico (27) (rendimiento de un 53,6 %) en forma de un solido de color blanquecino.
RMN 1H (DMSO-d6) 6: 12,8 (s a, 1H), 9,18 (s, 1 H), 8,9 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,84 (dd, J = 5,9, 2,2 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 7,34-7,44 (m, 4H), 7,1-7,17 (m, 3H), 5,9 (s, 2H).
LC/MS calcd. para C22H-,5ClN2O3S (m/e) 422,88, obsd. 423,2 [M+H, ES+].
5
10
15
20
25
Preparacion de (29):
imagen42
Etapa 1
1-((4'-Clorobifenil-2-il)metil)-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (28)
imagen43
A una mezcla de 4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (25) (235 mg, 1,08 mmol), 4'-cloro-2- (clorometil)bifenilo (281 mg, 1,18 mmol), carbonato potasico (447 mg, 3,23 mmol) y yoduro potasico (197 mg, 1,18 mmol) en un vial de 20 ml se anadio dimetilformamida (12 ml) a temperatura ambiente en una atmosfera de nitrogeno. La lmea de nitrogeno se retiro de la mezcla de reaccion y la suspension de color marron claro se agito durante 3 dfas a temperatura ambiente momento en el que el analisis de LCMS indicaba la presencia de la masa deseada. A continuacion, se anadieron aprox. 10 ml de agua y esta se convirtio en una solucion turbia que a continuacion se vertio en aprox. 100 ml de agua con agitacion con espatula. Como resultado, se formo una gran cantidad de solidos de color blanquecino, pero no eran buenos solidos. A continuacion, el compuesto organico se extrajo en acetato de etilo (2 x 100 ml) y los extractos combinados se lavaron con solucion salina saturada y se secaron sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron el solido de color marron claro en bruto que se purifico usando cromatograffa en columna ISCO (80 g), eluyendo con acetato de etilo en hexanos (de un 0 a un 100 %) y a continuacion con un 5-10 % de metanol en diclorometano para obtener el 1-((4'-clorobifenil-2-il)metil)-4- oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo deseado (28) (257 mg, rendimiento de un 57 %) en forma de un solido de color marron claro.
LC/MS calcd. para C24H1gClN2Oa (m/e) 418,87, obsd. 421,0 [M+H, ES+].
5
10
15
20
25
imagen44
A una solucion de color marron de 1 -((4'-clorobifenil-2-il)metil)-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (28) (257 mg, 0,61 mmol) en metanol (15 ml) se anadio el monohidrato de hidroxido de litio solido (515 mg, 12,3 mmol) a temperatura ambiente en una atmosfera de nitrogeno. Esto dio una solucion transparente en 30 minutos y la solucion de color marron oscuro resultante se agito durante 15 h momento en el que el analisis de LCMS indicaba la ausencia de material de partida. A continuacion, la mezcla se diluyo con agua y el metanol se retiro al vado. La fase acuosa basica se diluyo con agua y los solidos de color marron se retiraron por filtracion usando papel de filtro. A continuacion, el filtrado se neutralizo con HCl 1,0 N. Los solidos de color blanquecino precipitados se recogieron por filtracion y se lavaron con agua y hexanos. Despues de secar en aire, se aislaron 165 mg de acido 1-((4'-clorobifenil-2-il)metil)-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxflico (29) (rendimiento de un 68,8 %) en forma de un solido de color blanquecino.
RMN 1H (DMSO-da) 6: 12,8 (s a, 1 H), 9,0 (s, 1 H), 8,9 (d, J = 4,0 Hz, 1 H), 7,9 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,75-7,8 (m, 1 H), 7,25-7,5 (m, 7H), 7,05 (d, J = 8 Hz, 1 H), 5,8 (s, 2H).
LC/MS calcd. para C22H-,5ClN2O3 (m/e) 422,88, obsd. 423,2 [M+H, ES+].
Preparacion de (33):
imagen45
5
10
15
20
25
30
35
imagen46
Etapa 1
Cloruro de 3-fluoropicolinono (30)
imagen47
Una suspension de acido 3-fluoropicolmico (4,23 g, 30 mmol) y cloruro de tionilo (35,7 g, 21,9 ml, 300 mmol) se calento a reflujo durante 15 h momento en el que se convirtio en una solucion de color marron oscuro. A continuacion, el calentamiento se detuvo y la mezcla de reaccion se dejo enfriar a temperatura ambiente y esta se diluyo con tolueno. A continuacion, el disolvente y el exceso de cloruro de tionilo se retiraron al vado. Se formaron azeotropos del residuo una vez mas con tolueno y el residuo de color marron resultante se seco a alto vado para obtener cloruro de 3-fluoropicolinono (30) (4,70 g, rendimiento de un 98,2 %) en forma de una pasta de color marron que se uso directamente en la siguiente etapa.
Etapa 2
(Z)-3-(dimetilamino)-2-(3-fluoropicolinoil)acrilato de etilo (31)
imagen48
A una solucion de color amarillo claro de (E)-3-(dimetilamino)acrilato de etilo (5,15 g, 36,0 mmol) en tolueno (50 ml) se anadio trietilamina (3,64 g, 5,02 ml, 36,0 mmol) a temperatura ambiente. A esto se le anadio una suspension de color marron oscuro de cloruro de 3-fluoropicolinono (30) (4,79 g, 30 mmol) en tolueno (50 ml, calentado para disolver, pero no se disuelve completamente) en una porcion usando un embudo. A continuacion, la solucion de color marron oscuro resultante se calento a 83 °C y se agito durante 1,5 h a esta temperatura. Durante este periodo, se volvio en una solucion de color marron oscuro y el analisis de TLC indicaba la presencia de una nueva aplicacion puntual. A continuacion, el calentamiento se detuvo y la mezcla de color marron oscuro se diluyo con acetato de etilo (200 ml) y la solucion de color marron se lavo con agua y solucion salina saturada, y se seco sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron la mezcla de color marron en bruto que se purifico usando cromatograffa en columna ISCO (120 g), eluyendo con acetato de etilo en hexanos (de un 0 a un 100 %) y a continuacion de un 5 a un 20 % de metanol en diclorometano. Las fracciones deseadas se combinaron y el disolvente se retiro al vado para obtener el (Z)-3-(dimetilamino)-2-(3-fluoropicolinoil)acrilato de etilo (31) (1,33 g, rendimiento de un 15 %) en forma de una pasta de color marron oscuro.
LC/MS calcd. para C13H15FN2O3 (m/e) 266,27, obsd. 267,2 [M+H, ES+].
5
10
15
20
25
30
35
40
imagen49
A una solucion de color marron de (Z)-3-(dimetilamino)-2-(3-fluoropicolinoil)acrilato de etilo (31) (200 mg, 0,751 mmol) en DMA (dimetilacetamida) (8 ml) en un vial de 20 ml se anadieron un polvo solido de fosfato potasico tribasico (399 mg, 1,88 mmol) y (3'-(trifluorometil)bifenil-2-il)metanamina (208 mg, 0,826 mmol) a temperature ambiente en una atmosfera de nitrogeno. La suspension de color marron resultante se calento a 74 °C y se agito durante 15 h momento en el que el analisis de LCMS indicaba la ausencia de material de partida. A continuacion, esta se enfrio a temperatura ambiente y se vertio lentamente en agua (100 ml), pero no precipitaron solidos. A continuacion, el compuesto organico se extrajo con diclorometano y los extractos combinados se lavaron con agua y solucion salina saturada, y se secaron sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron el aceite de color marron en bruto que se purifico usando cromatograffa en columna ISCO (120 g), eluyendo con acetato de etilo en hexanos (de un 0 a un 100 %) y la continuacion de un 5 a un 10 % de metanol en diclorometano. Las fracciones deseadas se combinaron y el disolvente se retiro al vacfo para obtener 4-oxo-1-((3'-(trifluorometil)bifenil-2-il)metil)- 1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (32) (126 mg, rendimiento de un 37 %) en forma de un solido de color marron claro.
LC/MS calcd. para C25H19F3N2O3 (m/e) 452,43, obsd. 453,2 [M+H, ES+].
Etapa 4
Acido 1-oxo-1-((3'-(trifluorometil)bifenil-2-il)metil)-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxflico (33)
imagen50
A una solucion de color marron claro de 4-oxo-1-((3'-(trifluorometil)bifenil-2-il)metil)-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3- carboxilato de etilo (32) (114 mg, 0,252 mmol) en metanol (10 ml) se anadio el monohidrato de hidroxido de litio solido (211 mg, 5,04 mmol) a temperatura ambiente en una atmosfera de nitrogeno. La solucion de color marron resultante se agito durante 15 h momento en el que el analisis de LCMS indicaba la ausencia de material de partida. A continuacion, la mezcla de reaccion se diluyo con agua y el metanol se retiro al vado. La solucion acuosa basica contiene algunos solidos que se disolvieron mediante la adicion de 5 ml de dimetilformamida y a continuacion se neutralizo con HCl 1,0 N. A continuacion, el compuesto organico se extrajo en acetato de etilo (2 x 50 ml) y los extractos combinados se lavaron con solucion salina saturada y se secaron sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron el aceite en bruto (puede contener una cierta cantidad de dimetilformamida) que se diluyo con acetonitrilo y agua. A continuacion, se congelo y se liofilizo durante 3 dfas para aislar el acido 4-oxo-1-((3'- (trifluorometil)bifenil-2-il)metil)-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxflico (33) (59 mg, rendimiento de un 55 %) en forma de un solido de color marron claro.
RMN 1H (DMSO-da) 6: 12,8 (s a, 1 H), 8,96 (s, 1 H), 8,89 (d, J = 6,0 Hz, 1 H), 8,0 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,63-7,8 (m, 5H), 7,3-7,48 (m, 3H), 7,08 (d, J = 8 Hz, 1 H), 5,84 (s, 2H).
LC/MS calcd. para C23H15F3N2O3 (m/e) 424,37, obsd. 425,2 [M+H, ES+].
5
Preparacion de (38):
imagen51
Etapa 1
15 Cloruro de 3-cloropicolinoflo (34)
imagen52
A una suspension de acido 3-cloropicolrnico (1,58 g, 10 mmol) en tolueno (6 ml) se anadio un exceso de cloruro de 20 tionilo (9,52 g, 5,84 ml, 80,0 mmol) a temperature ambiente en una atmosfera de nitrogeno. La suspension resultante se calento a 120 °C (temperatura del bano de aceite) y se agito durante 20 h. A continuacion, el disolvente y el
5
10
15
20
25
30
35
40
45
exceso de cloruro de tionilo se retiraron al vado y el residuo se disolvio una vez mas en tolueno y el disolvente se retiro de nuevo. El residuo resultante se seco a alto vado y se uso en la siguiente etapa.
Etapa 2
(Z)-3-(dimetilamino)-2-(3-cloropicolinoil)acrilato de etilo (35)
imagen53
A una solucion de color amarillo claro de (E)-3-(dimetilamino)acrilato de etilo (1,72 g, 12,0 mmol) en tolueno (20 ml) se anadio trietilamina (1,21 g, 1,67 ml, 12,0 mmol) a temperatura ambiente. A esto se le anadio una solucion de cloruro de 3-cloropicolinono (34) (1,76 g, 10 mmol) en tolueno (5 ml, calentado para disolver). A continuacion, la solucion de color marron oscuro resultante se calento a 83 °C y se agito durante 12 h a esta temperatura. Durante este periodo, se convirtio en una solucion de color marron oscuro. A continuacion, encabezamientos se detuvo y la mezcla de color marron oscuro se retiro por filtracion y los solidos se lavaron con acetato de etilo. La solucion de acetato de etilo de color marron se lavo con agua que se diluyo con HCl 1,0 N. La fase acuosa acido se extrajo una vez mas con acetato de etilo y la fase organica combinada se lavo con solucion salina saturada y se seco sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron solamente 1,6 g de mezcla de color marron en bruto. A continuacion, la fase acuosa acida se extrajo con diclorometano (2 x 100 ml) y a continuacion la fase acuosa se neutralizo con a una solucion saturada de bicarbonato sodico y a continuacion se extrajo una vez mas con diclorometano. Los extractos de diclorometano combinados se lavaron con solucion salina saturada y se secaron sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron otros 1,2 g de aceite de color marron oscuro que se combinaron con el primer residuo de color marron y la mezcla se purifico usando una columna ISCO (120 g), eluyendo con acetato de etilo en hexanos (de un 0 a un 100%) y a continuacion con un 10% de metanol en diclorometano. Las fracciones puras se combinaron y el disolvente se retiro al vado para obtener (Z)-3- (dimetilamino)-2-(3-cloropicolinoil)acrilato de etilo (35) (1,16 g, rendimiento de un 41 %) en forma de un aceite de color marron oscuro.
LC/MS calcd. para C-isH^C^a (m/e) 282,72, obsd. 283,2 [M+H, ES+].
Etapa 3
1-(2-Bromobencil)-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (36)
imagen54
A una solucion de color marron de (Z)-2-(3-cloropicolinoil)-3-(dimetilamino)acrilato de etilo (35) (850 mg, 3,01 mmol) en DMA (dimetilacetamida) (50 ml) se anadieron un polvo solido de fosfato potasico tribasico (1,4 g, 6,61 mmol) y a continuacion (2-bromofenil)metanamina (615 mg, 3,31 mmol) a temperatura ambiente en una atmosfera de nitrogeno. La suspension de color marron resultante se calento a 74 °C y se agito durante 15 h momento en el que el analisis de LCMS indicaba la ausencia de material de partida. A continuacion, se enfrio a temperatura ambiente y se vertio lentamente en agua (100 ml). A continuacion, el compuesto organico se extrajo en diclorometano (2 x 200 ml). Los extractos combinados se lavaron con agua y solucion salina saturada, y se secaron sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron un aceite de color marron en bruto que se purifico usando una columna ISCO (120 g), eluyendo con acetato de etilo en hexanos (de un 0 a un 100 %) y a continuacion de un 5 a un 10 % de metanol en diclorometano. Las fracciones puras se combinaron y el disolvente se retiro al vado para obtener 1-(2- bromobencil)-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (36) (574 mg, rendimiento de un 46,8%) en forma de un solido de color marron claro.
5
10
15
20
25
30
35
LC/MS calcd. para C^H^Br^Oa (m/e) 387,23, obsd. 389,1 [M+H, ES+].
Etapa 4
1-Oxo-1-((4'-(trifluorometil)bifenil-2-il)metil)-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (37)
imagen55
A una mezcla de 1-(2-bromobencil)-4-oxo-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (136 mg, 0,35 mmol), acido 4-(trifluorometil)fenilboronico (133 mg, 0,7 mmol), acetato de paladio (II) (15,7 mg, 0,07 mmol), 2-diciclohexilfosfino- 2',6'-dimetoxibifenilo (57,5 mg, 0,140 mmol) y fosfato potasico tribasico (371 mg, 1,75 mmol) en un vial de 20 ml se anadieron tolueno previamente desgasificado (4,5 ml) y agua (1,0 ml) a temperatura ambiente en una atmosfera de nitrogeno. La suspension resultante se calento a 100 °C y se agito durante 15 h momento en el que el analisis de LCMS indicaba la ausencia de material de partida. A continuacion, la mezcla de reaccion de color negro se enfrio a temperatura ambiente y se vertio en una mezcla de agua y solucion salina saturada y el compuesto organico se extrajo en acetato de etilo (2 x 100 ml). Los extractos combinados se lavaron con solucion salina saturada y se secaron sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron un aceite de color marron en bruto que se purifico usando una cromatograffa en columna ISCO (40 g), eluyendo con acetato de etilo en hexanos (de un 0 a un 100 %) y de un 10 a un 20 % de metanol en diclorometano. Las fracciones deseadas se combinaron y el disolvente se retiro al vacfo para obtener 4-oxo-1-((4'-(trifluorometil)bifenil-2-il)metil)-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (37) (12 mg, rendimiento de un 7,6 %) en forma de un solido de color marron.
LC/MS calcd. para C25H19F3N2O3 (m/e) 452,43, obsd. 453,2 [M+H, ES+].
Etapa 5
Acido 1-oxo-1-((4'-(trifluorometil)bifenil-2-il)metil)-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxflico (38)
imagen56
A una solucion de 4-oxo-1-((4'-(trifluorometil)bifenil-2-il)metil)-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo (37) (11 mg, 0,024 mmol) en dimetilsulfoxido (1 ml) y metanol (5 ml) se anadio el monohidrato de hidroxido de litio solido (51,0 mg, 1,22 mmol) a temperatura ambiente en una atmosfera de nitrogeno. Esto proporciono una solucion transparente en 30 minutos y esta solucion decora amarillo claro se agito durante 15 h momento en el que el analisis de LCMS indicaba la ausencia de material de partida. A continuacion, la mezcla se diluyo con agua y el metanol se retiro al vacfo. La fase acuosa basica se diluyo con agua y a continuacion se neutralizo con HCl 1,0 N. El acido
resultante se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 ml) y los extractos combinados se lavaron con solucion salina saturada y se secaron sobre MgSO4 anhidro. La filtracion y la concentracion dieron un residuo de color marron que se disolvio en acetonitrilo y agua. Este se congelo y a continuacion se liofilizo a alto vacfo para obtener acido 4-oxo- 1-((4-(trifluorometil)bifenil-2-il)metil)-1,4-dil^idro-1,5-naftiridina-3-carbox^lico (38) (4,4 mg, rendimiento de un 42,6%) 5 en forma de un solido de color amarillo claro.
RMN 1H (DMSO-da) 6: 12,8 (s a, 1 H), 8,96 (s, 1 H), 8,89 (d, J = 6,0 Hz, 1 H), 7,95 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,75-7,8 (m, 2H), 7,58 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,3-7,48 (m, 5H), 7,15 (d, J = 8 Hz, 1H), 5,85 (s, 2H).
10 LC/MS calcd. para C23H15F3N2O3 (m/e) 424,37, obsd. 425,1 [M+H, ES+].

Claims (12)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto que tiene la formula general (V), opcionalmente en forma de una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, polimorfo, profarmaco, cofarmaco, cocristal, tautomero, racemato, enantiomero, o diastereomero o mezcla de los mismos,
    imagen1
    en la que
    X51 es CH o N;
    X52-R54 es N o C-R57;
    X53 es NR55, N(R55)C(O), C(O)NR55, O, C(O), C(O)O, OC(O); N(R55)SO2, SO2N(R55), S, SO, o SO2;
    R50 es -H, -(alquilo Ci-6 opcionalmente sustituido), -(cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido), -(arilo opcionalmente sustituido), -alquil Ci-4-(cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido), o -alquil Ci-4-(arilo opcionalmente sustituido);
    R51 es -H, un grupo -alquilo C1-6, o un grupo -alquilo C1-6 que esta sustituido con uno o mas atomos de halogeno; R52 es -H, un grupo -alquilo C1-6, o un grupo -alquilo Ci-6 que esta sustituido con uno o mas atomos de halogeno;
    o
    en la que R51 y R52 se pueden unir en conjunto para formar un anillo carbo o heterodclico de 3 a 7 miembros;
    R53 es -R56, o -X53-R56;
    R55 es -H, -(alquilo C1-6 opcionalmente sustituido), -(cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido), -(arilo opcionalmente sustituido), -alquil C1-4-(cicloalquilo C3-7 opcionalmente sustituido), o -alquil C1-4-(arilo opcionalmente sustituido);
    R66 es -(grupo hidrocarburo opcionalmente sustituido que contiene de 5 a 20 atomos de carbono y opcionalmente de 1 a 4 heteroatomos seleccionados entre O, N y S y que contiene al menos un anillo);
    R67 es -H, -Hal o -alquilo C1-6;
    R58 es -H, -alquilo C1.6, o -(CH2CH2O)rH;
    R59 es -H, o -alquilo C1-6;
    R se selecciona independientemente entre -alquilo C1.6, -C(O)-alquilo C1.6, -Hal, -CF3, -CN, -COOR58, -OR58, -
    (CH2)qNR58R59, q es de 0 a 4; y r es de 1 a 3;
    -C(O)-NR58R59, y -NR58-C(O)-alquilo C1.6;
    en el que el grupo alquilo, grupo arilo, grupo hidrocarburo y/o grupo cicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes R;
    en el que un profarmaco es un compuesto en el que COOH esta sustituido por C(O)OR*,
    en el que R* se selecciona entre H, arilo C5-10, alquil C1-6-arilo C5-10, alquilo C1-6, y alquil C1-6(-O-alquil C1-6)n (con n = 1 a 30);
    con la condicion de que se excluyan los siguientes compuestos:
    5
    10
    15
    20
    imagen2
    y 4-oxo-1-{[4-(1H-pirazolo-1-il)fenil]metil}-1,4-dihidro-1,5-naftiridina-3-carboxilato de etilo.
  2. 2. El compuesto de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que R53 es -R56.
  3. 3. El compuesto de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que R53 es -X53-R56 y X53 es N(R55)SO2.
  4. 4. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R51 y R52 son -H.
  5. 5. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que R50 es -H, o -(alquilo C1-6
    opcionalmente sustituido).
  6. 6. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que R56 se selecciona entre
    imagen3
    en el que
    X esta ausente, CH2, NH, C(O)NH, S u O;
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    Y es CH2;
    Z es O o S; y
    R se selecciona independientemente entre -H, -alquilo C1-6, -CF3, -halogeno, -CN, -OH, y -O-alquilo C1-6.
  7. 7. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en las que el compuesto que tiene la formula general (V) presenta una CI50 inferior a aproximadamente 40 pM en el ensayo de actividad de endonucleasa por FRET desvelado en el presente documento.
  8. 8. Una composicion farmaceutica que comprende:
    un compuesto que tiene la formula general (V) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, opcionalmente en forma de una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, polimorfo, profarmaco, cofarmaco, cocristal, tautomero, racemato, enantiomero, o diastereomero o mezcla de los mismos, y opcionalmente uno o mas excipiente(s) y/o vefnculo(s) farmaceuticamente aceptables; con la condicion de que se excluyan los siguientes compuestos:
    imagen4
    y
    imagen5
  9. 9. La composicion farmaceutica de acuerdo con la reivindicacion 8, que adicionalmente comprende al menos un medicamento adicional que se selecciona entre el grupo que consiste en un inhibidor de polimerasa que es diferente del compuesto que tiene la formula general (V); inhibidor de neuramidasa; inhibidor del canal M2; inhibidor de alfa glucosidasa; ligando de otra diana de gripe; antibioticos, agentes antiinflamatorios, inhibidores de lipoxigenasa, ligandos de EP, ligandos de bradiquinina, y ligandos de cannabinoides.
  10. 10. Un compuesto que tiene la formula general (V) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, opcionalmente en forma de una sal farmaceuticamente aceptable, solvato, polimorfo, profarmaco, cofarmaco, cocristal, tautomero, racemato, enantiomero, o diastereomero o mezcla de los mismos,
    en el que el compuesto es para su uso en el tratamiento, mejora o prevencion de una enfermedad viral; y en el que los compuestos suprimidos en la reivindicacion 1 no se suprimen.
  11. 11. El compuesto de acuerdo con la reivindicacion 10, en el que la enfermedad viral esta causada por Herpesviridae, Retroviridae, Filoviridae, Paramyxoviridae, Rhabdoviridae, Orthomyxoviridae, Bunyaviridae, Arenaviridae, Coronaviridae, Picornaviridae, Togaviridae, o Flaviviridae; de forma mas espedfica en el que la enfermedad viral es la gripe.
  12. 12. El compuesto de acuerdo con la reivindicacion 10 u 11, en el que al menos un medicamento adicional que se selecciona entre el grupo que consiste en un inhibidor de polimerasa que es diferente del compuesto que tiene la formula general (V); inhibidor de neuramidasa; inhibidor del canal M2; inhibidor de alfa glucosidasa; ligando de otra diana de gripe; antibioticos, agentes antiinflamatorios, inhibidores de lipoxigenasa, ligandos de EP, ligandos de bradiquinina, y ligandos de cannabinoides se administra de forma simultanea con, de forma secuencial con o por separado del compuesto que tiene la formula general (V).
ES14703780.8T 2013-01-08 2014-01-07 Derivados de naftiridinona y su uso en el tratamiento, mejora o prevención de una enfermedad viral Active ES2597803T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361750032P 2013-01-08 2013-01-08
US201361750032P 2013-01-08
PCT/EP2014/050168 WO2014108408A1 (en) 2013-01-08 2014-01-07 Naphthyridinone derivatives and their use in the treatment, amelioration or prevention of a viral disease

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2597803T3 true ES2597803T3 (es) 2017-01-23

Family

ID=50073147

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES14703780.8T Active ES2597803T3 (es) 2013-01-08 2014-01-07 Derivados de naftiridinona y su uso en el tratamiento, mejora o prevención de una enfermedad viral

Country Status (12)

Country Link
US (3) US9199987B2 (es)
EP (1) EP2945945B1 (es)
JP (1) JP2016504376A (es)
KR (1) KR20150103672A (es)
CN (1) CN104903319B (es)
BR (1) BR112015013414A2 (es)
CA (1) CA2894821A1 (es)
ES (1) ES2597803T3 (es)
HK (1) HK1211288A1 (es)
MX (1) MX2015008292A (es)
RU (1) RU2015132977A (es)
WO (1) WO2014108408A1 (es)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HRP20230215T1 (hr) 2015-04-28 2023-04-14 Shionogi & Co., Ltd. Supstituirani policiklički derivati piridona i njihov predlijek
HRP20241039T1 (hr) 2015-04-28 2024-11-08 Shionogi & Co., Ltd Supstituirani derivat policikličkog piridona i njegov predlijek
SG10201911957QA (en) * 2015-12-15 2020-02-27 Shionogi & Co Medicine for treating influenza characterized by comprising combination of cap-dependent endonuclease inhibitor with anti-influenza drug
UA125218C2 (uk) 2016-08-10 2022-02-02 Сіоногі Енд Ко., Лтд. Фармацевтичні композиції, що містять заміщені поліциклічні піридонові похідні та їх проліки
JP2020176263A (ja) * 2019-04-19 2020-10-29 住友化学株式会社 フィルム及び農園芸用施設

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5475109A (en) 1994-10-17 1995-12-12 Merck & Co., Inc. Dioxobutanoic acid derivatives as inhibitors of influenza endonuclease
US6559145B2 (en) * 2000-07-12 2003-05-06 Pharmacia & Upjohn Company Heterocycle carboxamides as antiviral agents
EP1790638B1 (en) 2004-09-15 2013-04-03 Shionogi Co., Ltd. Carbamoylpyridone derivative having hiv integrase inhibitory activity
AR057023A1 (es) 2005-05-16 2007-11-14 Gilead Sciences Inc Compuestos heterociclicos con propiedades inhibidoras de hiv-integrasa
CA2711500A1 (en) * 2008-01-07 2009-07-16 Huanming Chen Novel hiv integrase inhibitors and methods of use
US8835461B2 (en) 2009-03-26 2014-09-16 Shionogi & Co., Ltd. Substituted 3-hydroxy-4-pyridone derivative
TWI518084B (zh) 2009-03-26 2016-01-21 鹽野義製藥股份有限公司 哌喃酮與吡啶酮衍生物之製造方法
WO2011000566A2 (en) 2009-06-30 2011-01-06 Savira Pharmaceuticals Gmbh Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of negative-sense ssrna virus infections
EP2483275B1 (en) * 2009-10-01 2014-10-15 Merck Sharp & Dohme Corp. HETEROCYCLIC-FUSED PYRAZOLO[4,3-c]PYRIDIN-3-ONE M1 RECEPTOR POSITIVE ALLOSTERIC MODULATORS

Also Published As

Publication number Publication date
CA2894821A1 (en) 2014-07-17
US20160039818A1 (en) 2016-02-11
CN104903319B (zh) 2017-05-31
WO2014108408A1 (en) 2014-07-17
MX2015008292A (es) 2016-06-02
US9199987B2 (en) 2015-12-01
US20170290834A1 (en) 2017-10-12
KR20150103672A (ko) 2015-09-11
CN104903319A (zh) 2015-09-09
BR112015013414A2 (pt) 2017-07-11
JP2016504376A (ja) 2016-02-12
RU2015132977A (ru) 2017-02-14
US9505758B2 (en) 2016-11-29
HK1211288A1 (en) 2016-05-20
EP2945945B1 (en) 2016-08-31
EP2945945A1 (en) 2015-11-25
US20140194432A1 (en) 2014-07-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2864338B1 (en) 7-oxo-thiazolopyridine carbonic acid derivatives and their use in the treatment, amelioration or prevention of a viral disease
ES2589459T3 (es) Derivados de pirimidin-4-ona y su uso en el tratamiento, mejora o prevención de una enfermedad viral
EP2861232A1 (en) 7-oxo-4,7 -dihydro- pyrazolo [1, 5 -a]pyrimidine derivatives which are useful in the treatment, amelioration or prevention of a viral disease
KR20150039832A (ko) 디하이드록시피리미딘 탄산 유도체 및 바이러스성 질환의 치료, 개선 또는 예방에서의 이의 용도
US8952039B2 (en) Pyridone derivatives and their use in the treatment, ameloriation or prevention of a viral disease
ES2597803T3 (es) Derivados de naftiridinona y su uso en el tratamiento, mejora o prevención de una enfermedad viral
EP3166951A1 (en) Dihydropyridopyrazine-1,8-diones and their use in the treatment, amelioration or prevention of viral diseases
WO2017046362A1 (en) Pyrazolopyrazines and their use in the treatment, amelioration or prevention of a viral disease
CN107001355A (zh) 吡啶并吡嗪化合物和它们在治疗、改善或预防流感中的用途
HK1205128B (en) 7-oxo-thiazolopyridine carbonic acid derivatives and their use in the treatment, amelioration or prevention of a viral disease