ES2589459T3

ES2589459T3 - Derivados de pirimidin-4-ona y su uso en el tratamiento, mejora o prevención de una enfermedad viral

Info

Publication number: ES2589459T3
Application number: ES12787384.2T
Authority: ES
Inventors: Dirk Classen-Houben; Andrea Wolkerstorfer; Oliver Szolar; Mark Smith; Sung-Sau So; Stephen Cusack; Thierry Langer; Bruno Giethlen; Christophe Morice; Céline MICHAUT-SIMON; Laurence JUNG
Original assignee: Savira Pharmaceuticals GmbH; F Hoffmann La Roche AG; Europaisches Laboratorium fuer Molekularbiologie EMBL
Current assignee: Savira Pharmaceuticals GmbH; F Hoffmann La Roche AG; Europaisches Laboratorium fuer Molekularbiologie EMBL
Priority date: 2011-10-21
Filing date: 2012-10-19
Publication date: 2016-11-14
Anticipated expiration: 2032-10-19
Also published as: JP2014530838A; JP6033873B2; EP2794616A1; HK1199881A1; MX2014003801A; WO2013057253A1; CA2852843A1; US20130102601A1; RU2014120477A; KR20140097197A; CN103958521A; EP2794616B1; CN103958521B; BR112014008412A2; US20160376286A1; MX342176B

Abstract

Un compuesto que tiene la fórmula general (II), opcionalmente en forma de una sal, solvato, polimorfo, tautómero, racemato, enantiómero o diaestereómero farmacéuticamente aceptable o mezcla de los mismos,**Fórmula** en la que Y es S; R21 está seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-arilo, -(CH2)q-heterociclilo, -(CH2)q-cicloalquilo, -(CH2)p-OR25 y -(CH2)p-NR25R26; R22 está seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-cicloalquilo, -Hal, -CF3 y -CN; R23 está seleccionado de -arilo, -heterociclilo, -cicloalquilo, -C(-R28)(-R29)-arilo, -C(-R28)(-R29)-heterociclilo y -C(-R28)(-R29)-cicloalquilo; R25 está seleccionado de -H, -alquilo C1-6 y -(CH2CH2O)rH; R26 está seleccionado de -H y -alquilo C1-6; R27 está seleccionado independientemente de -alquilo C1-6, -C(O)-alquilo C1-6, -Hal, -CF3, -CN, -COOR25, -OR25, -(CH2)qNR25R26, -C(O)-NR25R26 y -NR25-C(O)-alquilo C1-6; R28 y R29 están seleccionados independientemente de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-arilo, -(CH2)q-heterociclilo, -(CH2)q-cicloalquilo, -OH, -O-alquilo C1-6, -O-(CH2)q-arilo, -O-(CH2)q-heterociclilo y -O-(CH2)q-cicloalquilo; o R28 y R29 son juntos >=O -CH2CH2-, -CH2CH2CH2- o -CH2CH2CH2CH2-; p es de 1 a 4; q es de 0 a 4; y r es de 1 a 3; en la que el grupo arilo, grupo heterociclilo y/o grupo cicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes R27; con la condición de que el compuesto no sea uno de los siguientes compuestos:**Fórmula**

Description

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

DESCRIPCION

Derivados de pirimidin-4-ona y su uso en el tratamiento, mejora o prevencion de una enfermedad viral Campo de la invencion

La presente invencion se refiere a un compuesto que tiene la formula general II, opcionalmente en forma de una sal, solvato, polimorfo, profarmaco, tautomero, racemato, enantiomero o diaestereomero farmaceuticamente aceptable, o una mezcla de los mismos.

imagen1

que es util en el tratamiento, mejora o prevencion de una enfermedad viral. Ademas, se desvelan terapias de combinacion espedficas.

Antecedentes de la Invencion

En los ultimos anos, la seria amenaza planteada por el virus de la gripe a la salud publica mundial ha sido realzada, en primer lugar, por la transmision de nivel bajo en curso para los seres humanos de la cepa H5N1 aviar altamente patogena (63 % de mortalidad en los seres humanos infectados,
http://www.who.int/csr/disease/avian_influenza/en/) y en segundo lugar, el surgimiento inesperado en 2009 de una cepa pandemica novedosa A/H1N1, que rapidamente se ha dispersado alrededor de todo el mundo (
http://www.who.int/csr/disease/swineflu/en/). Aunque la nueva cepa es altamente contagiosa, pero comunmente solo ocasionan en general una enfermedad leve, la futura evolucion de este virus es impredecible. En un escenario mucho mas serio, pero altamente plausible, H5N1 podna haber sido mas facilmente transmisible entre los seres humanos o la nueva A/H1N1 podna haber sido mas virulenta y podna haber llevado la mutacion puntual unica que le confiere resistencia a Tamiflu (Neumann et al., Nature, 2009 (18; 459(7249) 931-939), como lo han hecho recientemente muchas cepas de H1N1 estacional (Dharan et al., The Journal of the American Medical Association, 2009 Mar 11; 301 (10), 1034-1041; Moscona et al., The New England Journal of Medicine, 2009 (Mar 5;360(10) pp 953-956). En este caso, el retardo en la generacion y el despliegue de una vacuna (~6 meses en el caso relativamente favorable del A/H1N1 y todavfa ningun problema resuelto para H5N1) podna haber sido costoso catastroficamente en las vidas de los seres humanos y la alteracion de la sociedad.

Es ampliamente reconocido que para relacionar el periodo antes de que una nueva vacuna llegue a estar disponible y para tratar casos graves, ademas de para contar el problema de la resistencia viral, se requiere una eleccion mas amplia de farmacos contra la gripe. Por lo tanto, el desarrollo de nuevos farmacos contra la gripe llega a ser nuevamente de una alta prioridad, habiendo sido ampliamente abandonado por las principales comparuas farmaceuticas una vez que los farmacos de anti-neuraminidasa estuvieron disponibles.

Un punto de partida excelente para el desarrollo de una medicacion antiviral son los datos estructurales de las protemas virales esenciales. Asf, la determinacion de la estructura cristalina, por ejemplo, del antfgeno superficial del virus de la gripe neuraminidasa (Von Itzstein, M. et al., (1993), Nature, 363, pp. 418-423) condujo directamente al desarrollo de inhibidores de neuraminidasa con actividad antiviral que previenen la liberacion del virus de las celulas, sin embargo, no la produccion del virus. Estos y sus derivados se han desarrollado posteriormente en farmacos contra la gripe, zanamivir (Glaxo) y oseltamivir (Roche), que estan siendo actualmente almacenados por muchos pafses como una primera lmea de defensa contra una pandemia eventual. Sin embargo, estos medicamentos solamente proporcionan una reduccion en la duracion de la enfermedad clmica. Alternativamente, otros compuestos contra la gripe tales como la amantidina y la rimantadina tienen como diana una protema del canal de iones, es decir, la protema M2, en la membrana viral que interfiere con la perdida de la envoltura del virus dentro de la celula. Sin embargo, no han sido ampliamente usados debido a sus efectos secundarios y al rapido desarrollo de mutantes de los virus resistentes (Magden, J. et al., (2005), Appl. Microbiol. Biotechnol., 66, pp, 612-621). Ademas, se ha mostrado que mas farmacos virales no espedficos, tales como ribavirina, trabajan para el tratamiento de la gripe y de otras infecciones virales (Eriksson, B. et al., (1977), Antimicrob. Agents Chemother., 11, pp. 946-951). Sin embargo, la ribavirina solamente esta aprobada en algunos pafses (Furuta et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2005 Mar 49(3); 981-986), probablemente debido a los graves efectos secundarios. Claramente, se necesitan nuevos compuestos antivirales, preferentemente dirigidos contra diferentes dianas.

El virus de la gripe, ademas del Thogotovirus, pertenecen a la familia de Orthomyxoviridae que, ademas de la familia de Bunyaviridae, que incluye el Hantavirus, Nairovirus, Orthobunyavirus y Phlebovirus, son virus de ARN de hebra negativa. Su genoma esta segmentado y viene en partmulas de ribonucleoprotema que incluyen la ARN polimerasa

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

dependiente de ARN que lleva a cabo (i) la copia inicial del ARN del virion monocatenario (ARNv) en los ARNm virales y (ii) la replicacion del ARNv. Esta enzima, un complejo trimerico compuesto de las subunidades PA, PB1 y PB2, es fundamental para el ciclo de vida del virus ya que es responsable de la replicacion y la transcripcion del ARN viral. En el trabajo previo, la estructura atomica de los dos dominios claves de la polimerasa, el dominio de union al extremo del ARNm en la subunidad PB2 (Guilligay et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2005 Mar 49(3); pp 981-986) y el sitio activo de endonucleasa en la subunidad de PA (Dias et al., Nature 2009; Apr 16;458(7240); 914-918) han sido identificados y determinados. Estos dos sitios son cnticos para el modo de secuestro de extremo unico de la transcripcion que es usada por el virus de la gripe para generar los ARNm virales. Para la generacion de ARNm viral, la polimerasa hace uso del asf llamado mecanismo de “secuestro del extremo” (Plotch, S. J. et al., (1981), Cell, 23, pp. 847-858; Kukkonen, S. K. et al (2005), Arch. Virol. , 150, pp. 533-556; Leahy, M. B. et al, (2005), J. Virol., 71, pp. 8347-8351; Noah, D. L., et al., (2005), Adv. Virus Res., 65, pp. 121-145). Un extremo 5' (tambien llamado un extremo de ARN, extremo de 7-metilguanosina de ARN o un extremo de m7G del ARN) es un nucleotido de guanina modificado que ha sido anadido al extremo 5' de cada ARN mensajero celular. El extremo del 5'ARN consiste en un residuo de 7-metilguanosina terminal que esta enlazado mediante un enlace 5'-5'- trifosfato al primer nucleotido transcrito. Tras la infeccion por el virus de la gripe, el extremo del 5'ARN de las moleculas de ARNm celular se une por el complejo de la polimerasa viral, especialmente el dominio de union al extremo dentro de la subunidad PB2 del complejo de la polimerasa, y el extremo del ARN junto con un estiramiento de 10 a 15 nucleotidos se escinde por la endonucleasa viral que reside dentro de la subunidad PA del complejo de polimerasa viral. Los fragmentos del ARN protegidos en los extremos sirven entonces de cebadores para la smtesis de ARNm viral.

El dominio de union al extremo en la subunidad PB2 de la polimerasa viral ha sido identificado ineqmvocamente y caracterizado estructuralmente por Guilligay et al., 2008. La union del ARNm de la celula huesped protegida en los extremos mediante el sitio de union al extremo y, por consiguiente, que lleva la hebra del ARNm de la celula huesped en una proximidad espacial cercana del sitio activo de la endonucleasa, es un requisito previo para que la endonucleasa secuestre el extremo. Por lo tanto, el sitio de union al extremo en PB2 es esencial para la transcripcion dependiente del extremo por las RNP virales y obligatorio para el ciclo de replicacion viral. Esto junto con el hecho de que el dominio de union al extremo de PB2 es estructuralmente distinto de otras protemas de union al extremo, esto sugiere que el sitio de union del ligando es una buena diana para el desarrollo de nuevos farmacos antivirales.

Generalmente, el complejo de polimerasa parece que va a ser una diana de un farmaco antiviral apropiado ya que es esencial para la smtesis de ARNm viral y la replicacion viral y contiene varios sitios activos funcionales que probablemente van a ser significativamente diferentes de aquellos encontrados en las protemas de las celulas huesped (Magden, J. et al., (2005), Appl. Microbiol. Biotechnol., 66, pp. 612-621). Asf, por ejemplo, ha habido intentos para interferir con el ensamblaje de las subunidades de polimerasa por un peptido de 25 aminoacidos que se asemeja al dominio de union de pA dentro de PB1 (Ghanem, A. et al., (2007), J. Virol., 81, pp. 7801-7804). Ademas, la actividad de endonucleasa de la polimerasa ha sido elegida como diana y una serie de compuestos del acido 2,4-dioxobutanoico 4-sustituidos han sido identificados como inhibidores selectivos de esta actividad en el virus de la gripe (Tomassini, J. et al., (1994), Antimicrob. Agents Chemother., 38, pp. 2827-2837). Ademas, se ha mostrado que la flutimida, una 2,6-dicetopiperazina sustituida, identificada en los extractos de Delitschia confertaspora, una especie fungica, inhibe la endonucleasa del virus de la gripe (Tomassini, J. et al., (1996), Antimicrob. Agents Chemother., 40, pp. 1189-1193). Ademas, ha habido intentos para interferir con la transcripcion viral por los analogos de los nucleosidos, tales como la 2'-desoxi-2'-fluoroguanosina (Tisdale, M. et al., (1995), Antimicrob. Agents Chemother., 39, pp. 2454-2458).

Se desvela que heterociclos bidclicos espedficos, tales como las tienopirimidinas, son supuestamente adecuados para tratar trastornos inmunitarios y autoinmunitarios, ademas de rechazos de trasplantes de organos y de celulas en el documento WO 2010/103130.

La smtesis de 2-amino-4-oxo-6-benciltieno[2,3-d]pirimidinas como posibles inhibidores de la timidilato sintasa se desvela en Journal of Heterocyclic Chemistry (2004), 41(6), 941-946.

Las smtesis de derivados de azolotienopirimidina y pirimidotienotriazina espedficos se describe en Egyptian Journal of Chemistry (1995), 38(6), 635-44.

Compuestos heterodclicos que contienen N utiles para el tratamiento de enfermedades virales se describen en el documento WO2009/062258.

Hasta la fecha, el dominio de union del extremo en PB2 todavfa no ha sido considerado una diana para el desarrollo de farmacos contra la gripe. Es un objetivo de la presente invencion identificar compuestos que se dirigen espedficamente al dominio de union al extremo del virus de la gripe y, por consiguiente, son eficaces contra enfermedades virales y que tienen propiedades farmacologicas mejoradas.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Sumario de la invencion

La presente invencion es como se define en las reivindicaciones adjuntas.

Por consiguiente, en una primera realizacion, la presente invencion proporciona un compuesto que tiene la formula general (II).

Se entiende que en toda presente memoria descriptiva, el termino “un compuesto que tiene la formula general (II)” engloba sales, solvatos, polimorfos, profarmacos, tautomeros, racematos, enantiomeros o diaestereomeros o mezclas de los mismos, farmaceuticamente aceptables, a menos que se mencione de otro modo.

Otra realizacion de la presente invencion se refiere a una composicion farmaceutica que comprende un compuesto que tiene la formula general (II) y opcionalmente uno o mas excipiente(s) y/o vehnculo(s) farmaceuticamente aceptable(s).

Los compuestos que tienen la formula general (II) son utiles para el tratamiento, mejora o prevencion de enfermedades virales.

Descripcion detallada de la invencion

Antes que la presente invencion sea descrita en detalle mas adelante, debe entenderse que la presente invencion no se limita a la metodologfa, protocolos y reactivos particulares descritos en el presente documento ya que estos pueden variar. Tambien debe entenderse que la terminologfa usada en el presente documento es con el fin de describir realizaciones particulares solo, y no pretende limitar el alcance de la presente invencion que se limitara solo por las reivindicaciones adjuntas. A menos que se defina de otro modo, todos los terminos tecnicos y cientfficos usados en el presente documento tienen los mismos significados que comunmente son entendidos por un experto habitual en la materia.

Preferentemente, los terminos usados en el presente documento estan definidos como se describe en “A multilingual glossary of biotechnological terms: (IUPAC Recommendations)”, Leuenberger, H. G. W. Nagel, B, y Kolbl, H. eds. (1995), Helvetica Chimica Acta, CH-4010 Basilea, Suiza).

En toda esta memoria descriptiva y las reivindicaciones que siguen, a menos que el contexto lo requiera de otro modo, la palabra “comprende”, y variaciones tales como “comprende” y “que comprende”, se entendera que implican la inclusion de un numero entero establecido o etapa o grupo de numeros enteros o etapas, pero no la exclusion de cualquier otro numero entero o etapa de numeros enteros o etapas. En los siguientes parrafos se definen diferentes aspectos de la invencion en mayor detalle. Cada aspecto asf definido puede combinarse con cualquier otro aspecto o aspectos a menos que se indique claramente lo contrario. En particular, cualquier caractenstica indicada como una que es preferida o ventajosa puede combinarse con cualquier otra caractenstica o caractensticas indicadas como unas que son preferidas o ventajosas.

Definiciones

El termino “alquilo” se refiere a una cadena de carbono lineal o ramificada saturada.

El termino “cicloalquilo” representa una version dclica de “alquilo”. El termino “cicloalquilo” tambien pretende incluir las versiones bidclica, tridclica y polidclica de las mismas. A menos que se especifique lo contrario, el grupo cicloalquilo puede 5 a 12 atomos de carbono.

“Hal” representa F, Cl, Br e I.

El termino “arilo” se refiere preferentemente a un anillo monodclico aromatico que contiene 6 atomos de carbono, un sistema de anillo bidclico aromatico que contiene 10 atomos de carbono o un sistema de anillo tridclico aromatico que contiene 14 atomos de carbono. Ejemplos son fenilo, naftilo o antracenilo, preferentemente fenilo.

El termino “heterociclo de 5 o 6 miembros” o “heterodclico de 5 o 6 miembros” cubre cualquier anillo de cinco o seis miembros en el que al menos uno de los atomos de carbono en el anillo se ha sustituido con 1, 2, 3 o 4 (para el anillo de cinco se ha miembros) o 1, 2, 3, 4 o 5 (para el anillo de seis miembros) del mismo heteroatomo o de heteroatomos diferentes, por lo que los heteroatomos son seleccionados de O, N y S. El termino “anillo heterodclico” tambien cubre anillos de heteroarilo. Ejemplos incluyen pirrol, pirrolidina, oxolano, furano, imidazolidina, imidazol, pirazol, oxazolidina, oxazol, tiazol, piperidina, piridina, morfolina, piperazina y dioxolano.

El termino “heteroanillo mono o bidclico, de 5 a 10 miembros” cubre cualquier sistema de anillo mono o bidclico que contenga al menos un heteroatomo seleccionado de N, O y S. En una realizacion preferida, el heteroanillo mono o bidclico de 5 a 10 miembros es

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

imagen2

El termino “heteroarilo” se refiere preferentemente a un anillo aromatico de cinco o seis miembros en el que uno o mas de los atomos de carbono en el anillo han sido sustituidos con 1, 2, 3 o 4 (para el anillo de cinco miembros) o 1, 2, 3, 4 o 5 (para el anillo de seis miembros) del mismo heteroatomo o de heteroatomos diferentes, por lo que los heteroatomos estan seleccionados de O, N y S. Ejemplos del grupo heteroarilo se dan anteriormente.

El termino “heterociclilo” cubre cualquier anillo de cinco o seis miembros en el que al menos uno de los atomos de carbono en el anillo ha se ha sustituido con 1, 2, 3 o 4 (para el anillo de cinco miembros) o 1, 2, 3, 4 o 5 (para el anillo de seis miembros) del mismo heteroatomo o de heteroatomos diferentes, por lo que los heteroatomos estan seleccionados de O, N y S. El termino “heterociclilo” tambien cubre anillos de heteroarilo. Ejemplos incluyen pirrol, pirrolidina, oxolano, furano, imidazolidina, imidazol, pirazol, oxazolidina, oxazol, tiazol, piperidina, piridina, morfolina, piperazina y dioxolano.

El termino “carbociclo” o “carbodclico” cubre cualquier anillo de cinco o seis miembros que no incluya los heteroatomos en el anillo. El termino “anillo carbodclico” tambien cubre anillos de arilo.

Si un compuesto o resto es referido como que esta “opcionalmente sustituido”, puede incluir en cada caso 1 o mas de los sustituyentes indicados, por lo que los sustituyentes pueden ser iguales o diferentes.

El termino “sal farmaceuticamente aceptable” se refiere a una sal de un compuesto de la presente invencion. Sales farmaceuticamente aceptables adecuadas incluyen sales de adicion de acido que pueden formarse, por ejemplo, mezclando una solucion de los compuestos de la presente invencion con una solucion de un acido farmaceuticamente aceptable, tal como el acido clorhfdrico, acido sulfurico, acido fumarico, acido maleico, acido sucdnico, acido acetico, acido benzoico, acido dtrico, acido tartarico, acido carbonico o acido fosforico. Ademas, si el compuesto lleva un resto acido, sales farmaceuticamente aceptables adecuadas del mismo pueden incluir sales de metales alcalinos (por ejemplo, sales de sodio o potasio); sales de metales alcalinoterreos (por ejemplo, sales de calcio o magnesio); y sales formadas con ligandos organicos adecuados (por ejemplo, cationes amonio, amonio cuaternario y amina formados usando contraiones tales como haluro, hidroxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, sulfonato de alquil y sulfonato de arilo). Ejemplos ilustrativos de sales farmaceuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, acetato, adipato, alginato, ascorbato, aspartato, bencenosulfonato, benzoato, bicarbonato, bisulfato, bitartrato, borato, bromuro, butirato, edetato de calcio, alcanforato, alcanforsulfonato, camsilato, carbonato, cloruro, citrato, clavulanato, ciclopentanopropionato, digluconato, diclorhidrato, dodecilsulfato, edetato, edisilato, estolato, esilato, etanosulfonato, formiato, fumarato, gluceptato, glucoheptonato, gluconato, glutamato, glicerofosfato, glicolilarsanilato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromhidrato, clorhidrato, yodhidrato, 2-hidroxi-etanosulfonato, hidroxinaftoato, yoduro, isotionato, lactato, lactobionato, laurato, laurilsulfato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metanosulfonato, metilsulfato, mucato, 2-naftalenosulfonato, napsilato, nicotinato, nitrato, sal de amonio de N-metilglucamina, oleato, oxalato, pamoato (embonato), palmitato, pantotenato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato/difosfato, picrato, pivalato, poligalacturonato, propionato, salicilato, estearato, sulfato, subacetato, succinato, tannato, tartrato, teoclato, tosilato, trietyoduro, undecanoato, valerato y similares (vease, por ejemplo, S. M, Berge et al., “Pharmaceutical Salts”, J. Pharm. Sci., 66, pp. 1-19 (1977)).

Cuando los compuestos de la presente invencion se proporcionan en forma cristalina, la estructura puede contener moleculas de disolvente. Los disolventes normalmente son disolventes farmaceuticamente aceptables e incluyen, entre otros, agua (hidratos) o disolventes organicos. Ejemplos de posibles solvatos incluyen etanolatos y e iso- propanolatos.

Compuestos que tienen la formula general (II)

La presente invencion proporciona un compuesto que tiene la formula general (II):

imagen3

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

En las reivindicaciones adjuntas se citan ciertas condiciones. Se entiende que cualquiera de los compuestos que estan incluidos en cualquiera de las condiciones pueden ser excluidos, ya sea individualmente o en combinacion con otros compuestos, de una o mas de las reivindicaciones independientes que tienen una categona diferente aun si no es renunciada actualmente en la reivindicacion independiente de esta categona. Tambien se entiende que la renuncia cubra los compuestos en la forma de sus sales, solvatos, polimorfos, profarmacos, tautomeros, racematos, enantiomeros y diaestereomeros farmaceuticamente aceptables.

La presente invencion proporciona un compuesto que tiene la formula general (II) en la que aplican las siguientes definiciones.

Y es S.

R21 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-arilo, -(CH2)q-heterociclilo, -(CH2)q-cicloalquilo, -(CH2)P-OR25 y -(CH2)p-NR25R26. Preferentemente, R21 es -H, -alquilo C1-6 o -(CH2)p-OR25, en un aspecto mas preferido de esta realizacion R25 es H.

R22 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-cicloalquilo, -Hal, -CF3 y -CN. Preferentemente, R22 es -H, - alquilo C1-6 o Hal (preferentemente Hal = CI).

R23 esta seleccionado de -arilo, -heterociclilo, -cicloalquilo, -C(-R28)(-R29)-arilo, -C(-R28)(-R29)-heterociclilo y -C(- R28)(-R29)-cicloalquilo. En una realizacion preferida, R23 es -(CH2)q-arilo, o -(CH2)q-heteroarilo, en los que el grupo arilo y/o grupo heteroarilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes R27. Mas preferentemente, R23 es -fenilo, -bencilo o -piridilo, en el que el uno o mas sustituyentes R27 estan seleccionados independientemente de -Hal, -CF3, -CN, -alquilo C1-6, -C(O)-alquilo C1.6 o -(CH2)qNR25R26, en el que R25 y R26 estan seleccionados independientemente de H y -alquilo C1-6.

R25 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6 y -(CH2CH2O)rH. Preferentemente, R25 esta seleccionado de -H y - alquilo C1-6.

R26 esta seleccionado de -H y -alquilo C1-6.

R27 esta seleccionado independientemente de -alquilo C1.6, -C(O)-alquilo C1-6, -Hal, -CF3, -CN, -COOR25, -OR25, -(CH2)qNR25R26, -C(O)-NR25R26 y -NR25-C(O)-alquilo Cm Preferentemente, R27 esta seleccionado independientemente de -Hal, -CF3, -CN, -alquilo C1.6, -C(O)-alquilo C1.6 o -(CH2)qNR25R26, en el que R25 y R26 estan seleccionados independientemente de H y -alquilo Cm

R28 y R29 estan seleccionados independientemente de -H, -alquilo Cm -(CH2)q-arilo, -(CH2)q-heterociclilo, - (CH2)q-cicloalquilo, -OH, -O-alquilo Cm -O-(CH2)q-arilo, -O-(CH2)q-heterociclilo y -O-(CH2)q-cicloalquilo. Preferentemente, R28 y R29 estan seleccionados independientemente de -H y -alquilo Cm

En una realizacion alternativa R28 y R29 son juntos =O, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2- o -CH2CH2CH2CH2-.

p es de 1 a 4.

q es de 0 a 4, preferentemente q es 0 o 1. r es de 1 a 3.

En las definiciones anteriores, el grupo arilo, grupo heterociclilo y/o grupo cicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes R27, que cuales pueden ser iguales o diferentes. Los compuestos de la presente invencion pueden administrarse a un paciente en forma de una composicion farmaceutica que puede comprender opcionalmente uno o mas excipiente(s) y/o vehfculo(s) farmaceuticamente aceptable(s).

Los compuestos de la presente invencion pueden administrarse por diversos vfas muy conocidas, que incluyen administracion oral, rectal, intragastrica, intracraneal y parenteral, por ejemplo, las vfas de administracion intravenosa, intramuscular, intranasal, intradermica, subcutanea, y vfas de administracion similares. La administracion oral, intranasal y parenteral son particularmente preferidas. Dependiendo de la via de administracion se requieren diferentes formulaciones farmaceuticas y algunas de aquellas pueden requerir que se apliquen recubrimientos protectores a la formulacion del farmaco para prevenir la degradacion de un compuesto de la invencion, por ejemplo, en el tubo digestivo.

Asi, preferentemente, un compuesto de la invencion se formula como un jarabe, una infusion o una solucion para inyeccion, un espray, un comprimido, una capsula, un comprimido oblongo, pastilla para chupar, un liposoma, un supositorio, una gasa, una tirita, una capsula retardante, un polvo, o una formulacion de liberacion lenta. Preferentemente el diluyente es agua, un tampon, una solucion salina tamponada o una solucion salina y el vehfculo esta preferentemente seleccionado del grupo que consiste en manteca de cacao y vitebesole.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Formas farmaceuticas preferidas particulares para la administracion de un compuesto de la invencion son formas adecuadas para un uso inyectable e incluyen soluciones o dispersiones acuosas esteriles y polvos esteriles para la preparacion extemporanea de soluciones o dispersiones inyectables esteriles. En todos los casos, la forma de la solucion o dispersion final debe ser esteril y fluida. Normalmente, tal solucion o dispersion incluira un solvente o medio de dispersion que contiene, por ejemplo, soluciones acuosas tamponadas con agua, por ejemplo, tampones biocompatibles, etanol, poliol, tal como glicerol, propilenglicol, polietilenglicol, mezclas adecuadas de los mismos, tensioactivos o aceites vegetales. Un compuesto de la invencion tambien puede formularse en liposomas, en particular para administracion parenteral. Los liposomas proporcionan la ventaja de una semivida elevada en la circulacion, si se compara con el farmaco libre y una liberacion aun mas prolongada del farmaco encerrado.

La esterilizacion de las soluciones para inyeccion o infusion puede llevarse a cabo por cualquier numero de tecnicas reconocidas en la materia que incluyen, pero no se limitan a, adicion de conservantes como agentes antibacterianos o antifungicos, por ejemplo, parabeno, clorobutanol, fenol, acido sorbico o timerosal. Ademas, pueden incorporarse agentes isotonicos tales como azucares o sales, en particular cloruro sodico, en las soluciones para infusion o inyeccion.

La produccion de soluciones inyectables esteriles que contienen uno o varios de los compuestos de la invencion se lleva a cabo incorporando el compuesto respectivo en la cantidad requerida en el disolvente apropiado con diversos componentes enumerados anteriormente segun se requiera, seguido de esterilizacion. Para obtener un polvo esteril, las soluciones anteriores se secan al vacfo o se liofilizan segun sea necesario. Diluyentes preferidos de la presente invencion son agua, tampones fisiologicamente aceptables, soluciones salinas de tampones fisiologicamente aceptables o soluciones salinas. Vehuculos preferidos son manteca de cacao y vitebesole. Excipientes que pueden usarse con las diversas formas farmaceuticas de un compuesto de la invencion pueden elegirse de la siguiente lista no limitante:

a) aglutinantes tales como la lactosa, manitol, sorbitol cristalino, fosfatos dibasicos, fosfatos de calcio,

azucares, celulosa microcristalina, carboximetilcelulosa, hidroxietilcelulosa, polivinilpirrolidona y similares;

b) lubricantes tales como estearato de magnesio, talco, estearato de calcio, estearato de zinc, acido estearico,

aceite vegetal hidrogenado, leucina, gliceridos y fumaratos de estearilo sodicos,

c) disgregantes tales como almidones, croscarmelosa, metilcelulosa sodica, agar, bentonita, acido algmico,

carboximetilcelulosa, polivinilpirrolidona y similares.

En una realizacion, la formulacion es para administracion por via oral y la formulacion comprende uno o mas o la totalidad de los siguientes componentes: almidon pregelatinizado, talco, povidona K 30, croscarmelosa sodica, fumarato de estearilo sodico, gelatina, dioxido de titanio, sorbitol, citrato de monosodio, goma xantana, dioxido de titanio, aromatizante, benzoato de sodio y sacarina sodica.

Si un compuesto de la invencion se administra por via intranasal en una realizacion preferida, puede administrarse en forma de un inhalador de polvo seco o un espray de aerosol de un recipiente presurizado, bomba, espray o nebulizador con el uso de un propulsor apropiado, por ejemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, un hidrofluoroalcano tal como 1,1,1,2-tetrafluoroetano (HFA 134A™) o 1,1,1,2,3,3,3- heptafluoropropano (HFA 227EA™), dioxido de carbono, u otro gas adecuado. El recipiente presurizado, bomba, espray o nebulizador puede contener una solucion o suspension del compuesto de la invencion, por ejemplo usando una mezcla de etanol y el propulsor como disolvente, que adicionalmente puede comprender un lubricante, por ejemplo, trioleato de sorbitano.

Otros excipientes adecuados pueden encontrarse en Handbook of Pharmaceutical Excipients, publicado por la American Pharmaceutical Association, que se incorpora en el presente documento por referencia.

Debe entenderse que, dependiendo de la gravedad del trastorno y el tipo particular que es tratable con uno de los compuestos de la invencion, ademas del paciente respectivo que va a tratarse, por ejemplo, el estado de salud general de paciente, etc., se requieren diferentes dosis del compuesto respectivo para provocar un efecto terapeutico o profilactico. La determinacion de la dosis apropiada radica dentro del criterio del medico adjunto. Se contempla que la dosificacion de un compuesto de la invencion en el uso terapeutico o profilactico de la invencion debe estar en el intervalo de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 1 g del principio activo (es decir, el compuesto de la invencion) por kg de peso corporal. Sin embargo, en un uso preferido de la presente invencion, un compuesto de la invencion se administra a un sujeto en necesidad del mismo en una cantidad que oscila de 1,0 a 500 mg/kg de peso corporal, preferentemente que oscila de 1 a 200 mg/kg de peso corporal. La duracion de la terapia con un compuesto de la invencion variara, dependiendo de la gravedad de la enfermedad que esta tratandose y de la condicion y la respuesta idiosincratica de cada paciente individual. En una realizacion preferida de un uso profilactico o terapeutico, entre 100 mg y 200 mg del compuesto se administran por via oral a un adulto por dfa, dependiendo de la severidad de la enfermedad y/o del grado de exposicion a los portadores de la enfermedad.

Como se conoce en la tecnica, la cantidad farmaceuticamente eficaz de una composicion dada tambien dependera de la via de administracion. En general, la cantidad requerida sera mayor si la administracion es por el tubo gastrointestinal, por ejemplo, por supositorio, rectal, o por una sonda intragastrica, e inferior si la via de

5

10

15

20

25

administracion es parenteral, por ejemplo, intravenosa. Normalmente, un compuesto de la invencion se administrara en intervalos de 50 mg a 1 g/kg de peso corporal, preferentemente 100 mg a 500 mg/kg de peso corporal, si se usa administracion rectal o intragastrica y en intervalos de 10 a 100 mg/kg de peso corporal, si se usa administracion parenteral.

Si se sabe que una persona esta en riesgo de desarrollar una enfermedad que se puede tratar con un compuesto de la invencion, puede ser posible la administracion profilactica del suero de la sangre biologicamente activo o la composicion farmaceutica segun la invencion. En estos casos, el compuesto respectivo de la invencion se administra diariamente preferentemente en las dosis preferidas descritas anteriormente y las dosis preferidas particulares. Preferentemente, de 0,1 mg a 1 g/kg de peso corporal una vez al dfa, preferentemente 10 a 200 mg/kg de peso corporal. Esta administracion puede continuarse hasta que se reduzca el riesgo de desarrollar el trastorno viral respectivo. En la mayona de los casos, sin embargo, un compuesto de la invencion se administrara una vez se ha diagnosticado una enfermedad/trastorno. En estos casos, se prefiere que una primera dosis de un compuesto de la invencion se administre una, dos, tres o cuatro veces al dfa.

Los compuestos de la presente invencion son particularmente utiles para el tratamiento, mejora o prevencion de enfermedades virales. El tipo de la enfermedad viral no esta particularmente limitado. Ejemplos de posibles enfermedades virales incluyen, pero no estan limitadas a, enfermedades virales que se producen por Poxviridae, Herpesviridae, Adenoviridae, Papillomaviridae, Polyomaviridae, Parvoviridae, Hepadnaviridae, Retroviridae, Reoviridae, Filoviridae, Paramyxoviridae, Rhabdoviridae, Orthomyxoviridae, Bunyaviridae, Arenaviridae, Coronaviridae, Picornaviridae, Hepeviridae, Caliciviridae, Astroviridae, Togaviridae, Flaviviridae, Deltavirus, Bornaviridae y priones. Preferentemente, las enfermedades virales que se producen por Herpesviridae, Retroviridae, Filoviridae, Paramyxoviridae, Rhabdoviridae, Orthomyxoviridae, Bunyaviridae, Arenaviridae, Coronaviridae, Picornaviridae, Togaviridae, Flaviviridae, mas preferentemente las enfermedades virales que se producen por Orthomyxoviridae.

Ejemplos de diversos virus se dan en la siguiente tabla.

Familia: Virus (ejemplos preferidos)

Poxviridae: Virus de la viruela Virus Molluscum contagiosum

Herpesviridae: Virus del herpes simple Virus de la varicela zoster Citomegalovirus Virus de Epstein-Barr Virus del herpes asociado al sarcoma de Kaposi

Adenoviridae: Adenovirus humano A-F

Papillomaviridae: Virus del papiloma

Polyomaviridae: Virus de BK Virus de JC

Parvoviridae: Virus B19 Virus adeno-asociado 2/3/5

Hepadnaviridae: Virus de la hepatitis B

Retroviridae: Virus de la inmunodeficiencia humana tipos 1/2 Virus de leucemia de linfocitos T humanos Virus espumoso humano

Reoviridae: Reovirus 1/2/2 Rotavirus A/B/C Virus de la fiebre por garrapatas del Colorado

Filoviridae: Virus del Ebola Virus de Marburgo

Paramyxoviridae: Virus de la paragripe 1-4 Virus de las paperas Virus de sarampion Virus respiratorio sincitial Hendravirus

Rhabdoviridae: Virus de la estomatitis vesicular Virus de la rabia Virus de Mokola Virus del murcielago europeo Virus de Duvenhage

Orthomyxoviridae: Virus de la gripe tipos A-C del

Familia: Virus (ejemplos preferidos)

Bunyaviridae: Virus de la encefalitis de California Vinas de La Crosse Virus de Hantaan Virus de Puumala Virus Sin Nombre Virus de Seul Virus de la fiebre hemorragica de Crimea-Congo Virus de Sakhalin Virus del valle del Rift Virus de la fiebre del jejen Virus de Uukuniemi

Arenaviridae: Virus de Lassa Virus de la coriomeningitis linfodtica Virus de Guanarito Virus de Junin Virus de Machupo Virus de Sabia

Coronaviridae: Coronavirus humano

Picornaviridae: Enterovirus humano tipos A-D (Poliovirus, Ecovirus, virus A/B de Coxsackie) Rinovirus tipos A/B/C d Virus de la hepatitis A Parechovirus Virus de la enfermedad de pies y boca

Hepeviridae: Virus de la hepatitis E

Caliciviridae: Virus de Norwalk Virus de Sapporo

Astroviridae: Astrovirus 1 humano

Togaviridae: Virus del no Ross Virus de Chikungunya Virus de O'nyong-nyong Virus de la rubeola

Flaviviridae: Virus de encefalitis transmitida por garrapatas Virus del dengue Virus de la fiebre amarilla Virus de la encefalitis japonesa Virus del valle de Murray Virus de la encefalitis de San Luis Virus del Nilo occidental Virus de la hepatitis C Virus de la hepatitis G Virus de la hepatitis GB

Deltavirus: Deltavirus de la hepatitis

Bornaviridae: Bomavirus

Priones

Preferentemente, los compuestos de la presente invencion se emplean para tratar gripe. Dentro de la presente invencion, el termino “gripe” incluye la gripe A, B, C, isavirus y thogotovirus y tambien cubre la gripe aviar y la gripe porcina. El sujeto que va a tratarse no esta restringido particularmente y puede ser cualquier vertebrado, tal como 5 aves y mairnferos (incluyendo los seres humanos).

Sin desear cenirse a teona alguna, se supone que los compuestos de la presente invencion son capaces de inhibir la union de las estructuras del extremo del ARNm huesped con respecto al dominio de union del extremo (CBD), particularmente del virus de la gripe. Mas espedficamente, se supone que interfieren directamente con el CBD de la 10 protema PB2 de la gripe. Sin embargo, la administracion de un compuesto en una celula puede representar un problema dependiendo, por ejemplo, de la solubilidad del compuesto o sus capacidades para cruzar la membrana celular. La presente invencion no solo muestra que los compuestos reivindicados tienen una actividad inhibidora de la polimerasa in vitro, sino tambien una actividad antiviral in vitro.

15 Una medida posible de la actividad inhibidora de la polimerasa in vitro de los compuestos que tienen la formula (I) es el ensayo de la actividad de endonucleasa de FRET desvelado en el presente documento. Preferentemente, los compuestos presentan un % de reduccion de al menos aproximadamente el 50 % a 25 pM en el ensayo de FRET. En este contexto, el % de reduccion es el % de la reduccion de la velocidad de reaccion inicial (v0) de la escision del sustrato de las muestras tratadas con el compuesto en comparacion con las muestras no tratadas. Preferentemente, 20 los compuestos presentan una CI50 de al menos aproximadamente 40 pM, mas preferentemente al menos

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

aproximadamente 20 jM, en el ensayo de FRET. La concentracion inhibidora al 50 % (CI50) es una medida de la eficacia de un compuesto en la inhibicion de la funcion biologica o bioqmmica y se calculo a partir de las velocidades de reaccion iniciales (v0) en una serie de concentraciones dadas que oscila del maximo 100 jM hasta al menos 2 nM.

Una posible medida de la actividad antiviral in vivo de los compuestos que tienen la formula (I) o (II) es el ensayo de CPE desvelado en el presente documento. Preferentemente, los compuestos presentan un % de reduccion de al menos aproximadamente el 30 % a 50 jM. Con relacion a esto, se calculo la reduccion en el efecto citopatico mediado por el virus (CPE) tras el tratamiento con los compuestos del siguiente modo: Se determino la viabilidad celular de las celulas infectadas-tratadas y no infectadas-tratadas usando un ensayo de viabilidad celular basado en ATP (Promega). Se resto la respuesta en unidades relativas luminiscentes (RLU) de las muestras infectadas-no tratadas de la respuesta (RLU) de las muestras infectadas-tratadas y luego se normalizo a la viabilidad de la muestra no infectada correspondiente produciendo la reduccion del % de CPE. Preferentemente, los compuestos presentan una CI50 de al menos aproximadamente 45 jM, mas preferentemente al menos aproximadamente 10 jM, en el ensayo de CPE. La concentracion inhibidora al 50 % (CI50) es una medida de la eficacia de un compuesto que inhibe la funcion biologica o bioqmmica y se calculo a partir de la respuesta de RLU en una serie de concentraciones dadas que oscila del maximo 100 jM a al menos 100 nM.

Una posible medicion de la actividad inhibidora de la polimerasa in vitro de los compuestos que tienen la formula (II) es el ensayo de union de Biacore desvelado en el presente documento. El sistema Biacore se basa en un fenomeno optico conocido como la resonancia de plasmones superficiales (SPR). Esta tecnica es la base para la medicion de la adsorcion de un material sobre superficies metalicas planas tales como oro o plata. El SPR se usa como una tecnica poderosa para medir las interacciones biomoleculares en tiempo real en un entorno libre de marcas. Mientras que uno de los interactuantes esta inmovilizado a la superficie del sensor, la otra esta libre en la solucion y pasa sobre la superficie. La asociacion y la disociacion se miden en unidades arbitrarias y se representan en una grafica llamada sensograma.

Se inmovilizo el dominio de union al extremo de PB2 (CBD) de un virus de gripe H5N1 aviar sobre la superficie de un chip sensor CM7 (GE Healthcare) por acoplamiento de amina segun el protocolo del fabricante. La protema se diluyo en un tampon fosfato 10 mM a pH 6,5. Como tampon de electroforesis para la inmovilizacion se uso un tampon HBS-EP (HePES 10 mM, NaCl 150 mM, EDTA 3 mM, 0,005 % de tensioactivo p20). Usando una concentracion de protema de 30 jg/ml y un tiempo de contacto de 12 minutos se logro un nivel de inmovilizacion de aproximadamente 8000 RU (unidades de respuesta relativas).

Para la seleccion del compuesto se uso un tampon de electroforesis que contiene TRIS 10 mM, EDTA 3 mM, NaCl 150 mM, 0,005% de tensioactivo p20 (GE Healthcare/Biacore), DtT 1 mM, 0,5% de DMSO. Se diluyeron soluciones madre de DMSO 2 mM de cada compuesto en 1,005X tampon de muestra sin DMSO (1,005X TRIS/EDTA/NaCl/p20/DTT; diluido a partir de una solucion madre 10X) hasta una concentracion del compuesto final de 10 jM y 0,5 % de DMSO. Se usaron m7GTP (Sigma Aldrich) y SAV-7160

imagen4

como referencias y controles de estabilidad del chip a una concentracion de 4 mM y 10 jM, respectivamente. Se prepararon soluciones madre de cada compuesto de referencia y las almuotas se almacenaron a -20 °C. En este contexto, la RU es una medida de la union del compuesto a PB2-CBD y generalmente se evalua con relacion a la union en RU de SAV-7160.

Para los efectos volumetricos del tampon (matriz) se considero reducir la respuesta obtenida para la celda de flujo de referencia Fc1 de la celda de flujo activo Fc2 que produce unidades de respuesta relativas (RU) que reflejan la union de los compuestos al ligando. Disolventes organicos tales como DMSO en el tampon producen altos efectos volumetricos que difieren en la celda de flujo de referencia y la celda de flujo activo debido a la inmovilizacion del ligando. Para explicar estas diferencias, se establecio una curva de calibracion. Se midieron ocho concentraciones de DMSO que oscilan del 0,1 % al 1,5 % en tampon y se calculo una curva de calibracion lineal representando Fc2- Fc1 frente a Fc1. La respuesta relativa de cada muestra se corrigio entonces por el factor del disolvente dado por la senal de Fc1 respectiva sobre la curva de calibracion y la diferencia Fc2-Fc1 correspondiente. Para explicar el tamano diferente de los compuestos, las unidades de respuesta corregidas del tampon y del disolvente se normalizaron al peso molecular.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

Se determinaron las constantes de afinidad (valores de KD) midiendo la afinidad de la union del analito al ligando sobre un intervalo de la concentracion que oscila de 200 pM a 1 nM. El valor de KD es aquella concentracion a la que 50 % de los sitios de union estan saturados y se calculo usando un modelo de ajuste de la curva lineal.

En el ensayo de Biacore (RU) de los compuestos que van a ser inmovilizados, PB2-CBD es preferentemente como maximo 15 RU, mas preferentemente como maximo 7,5 RU. La constante de afinidad (KD) es preferentemente como maximo 50 pM, mas preferentemente como maximo 10 pM.

Los compuestos que tienen la formula general (II) pueden usarse en combinacion con uno o varios de otros medicamentos. El tipo de los otros medicamentos no esta particularmente limitado y dependera del trastorno que va a tratarse. Preferentemente, el otro medicamento sera un medicamento adicional que es util en el tratamiento, mejora o prevencion de una enfermedad viral, mas preferentemente un medicamento adicional que es util en el tratamiento, mejora o prevencion de la gripe.

Se contempla que las siguientes combinaciones de medicamentos son particularmente adecuadas:

(i) La combinacion de endonucleasa e inhibidores de la union al extremo (que tienen como objetivo particularmente la gripe). Los inhibidores de la endonucleasa no estan particularmente limitados y pueden ser cualquier inhibidor de la endonucleasa, particularmente cualquier inhibidor de la endonucleasa viral. Los inhibidores de la endonucleasa preferidos son aquellos que tienen la formula general (I).

Los inhibidores de union al extremo no van a estar particularmente limitados de ninguna manera y pueden ser cualquier inhibidor de la union al extremo, particularmente cualquier inhibidor de union al extremo viral. Inhibidores de union al extremo preferidos son aquellos que tienen la formula general (II) y/o los compuestos desvelados en el documento WO2011/000566.

Los compuestos del documento WO2011/000566 tienen la formula general (XXI):

imagen5

o una sal, un solvato, un profarmaco, un tautomero, un racemato, un enantiomero o un diaestereomero del mismo farmaceuticamente eficaz; en el que

uno de Y y Z es -XR12 y el otro es R10;

R , R y R estan seleccionados cada uno individualmente del grupo que consiste en hidrogeno, alquilo C1- Ca, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C8, -(CH2)nC(O)OH, -(CH2)nC(O)OR1a -(CH2)nOH, -(CH2)nOR, -CF3, -(CH2V cicloalquilo, -(CH2)nC(O)NH2, -(CH2)nC(O)NHR16, -(CH2)nC(O)NR1aR17, -(CH2)nS(O)2NH2, -(CH2)nS(O)2NHR1a, - (CH2)nS(O)2NR1aR17, -(CH2)nS(O)2R1a, halogeno, -CN, -(CH2)n-arilo, -(CH2)n-heteroarilo, -(CH2)nNH2, - (cH2)nNHR1a y -(CH2)nNR1aR17; opcionalmente sustituidos;

R11 esta seleccionado del grupo que consiste en hidrogeno, alquilo C1-Ca, -CF3, alquenilo C2-Ca, alquinilo C2- C8, -(CH2)n-cicloalquilo, -(CH2)n-arilo, -(CH2)n-heterocicloalquilo y -(CH2)n-heteroarilo; opcionalmente sustituido;

X esta seleccionado del grupo que consiste en CH2, C(O), C(S), CH(OH), CH(OR1a), S(O)2, -S(O>N(H)-, - S(O)2-N(R1a)-, -N(H)-S(O)2-, -N(R1a)-S(O)2-, C(=NH), C(=N-R1a), CH(NH2), CH(NHR1a), CH(NR1aR17), -C(O)- N(H)-, -C(O)-N(R1a)-, -N(H)-C(O)-, -N(R1a)-C(O)-, N(H), N(-R1a) y O;

R12 esta seleccionado del grupo que consiste en alquilo C1-Ca, -CF3, alquenilo C2-Ca, alquinilo C2-C8, -(CH2)n- cicloalquilo, -(CH2)n-heterocicloalquilo, -(CH2)n-arilo, -NR1aR17y -(CH2)n-heteroarilo; opcionalmente sustituido;

R1a y R17 estan seleccionados independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-Ca, alquenilo C2-Ca, alquinilo C2-Ca, -(CH2)n-cicloalquilo, -(CH2)n-arilo, -CF3, -C(o)r18 y -S(O)2R18; opcionalmente sustituidos;

R18 esta seleccionado independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-Ca, alquenilo C2-Ca, alquinilo C2-Ca, -(CH2)n-cicloalquilo y -CF3; opcionalmente sustituido; y

n se selecciona en cada caso de 0, 1 y 2.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

En el contexto del documento WO2011/000566, el termino “opcionalmente sustituido” se refiere en cada caso a entre 1 y 10 sustituyentes, por ejemplo 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 sustituyentes que estan seleccionados en cada caso preferentemente independientemente del grupo que consiste en halogeno, en particular F, Cl, Br o I; -NO2, -CN, -OR', -NR'R", -(CO)OR', -(CO)OR'", -(CO)NR'R", -NR'COR"", -NR'COR', -NR"CONR'R", -NR"SO2A, -COR'"; - SO2NRR', -OOCR"', -CR"'R""OH, -R"'OH, =O y -E;

R' y R" estan seleccionados cada uno independientemente del grupo que consiste en hidrogeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, -OE, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo y aralquilo, o juntos forman un heteroarilo, o heterocicloalquilo; opcionalmente sustituido;

R'" y R"" estan seleccionados cada uno independientemente del grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, alcoxi, arilo, aralquilo, heteroarilo y -NR'R"; y

E esta seleccionado del grupo que consiste en alquilo, alquenilo, cicloalquilo, alcoxi, alcoxialquilo, heterocicloalquilo, un sistema alidclico, arilo y heteroarilo; opcionalmente sustituido.

La amplia resistencia a ambas clases de antivirales de la gripe con licencia (inhibidores del canal de iones M2 (adamantanos) e inhibidores de la neuraminidasa (Oseltamivir)) se produce en virus tanto pandemicos como estacionales, haciendo que estos grupos sean de utilidad marginal en la realizacion de tratamiento. Para los inhibidores del canal de iones M2, la frecuencia de resistencia viral ha ido aumentando desde 2003 y para la gripe estacional A/H3N2 los adamantanos estan considerados ahora como ineficaces. Practicamente todas las cepas H1N1 del 2009 y H3N2 estacional son resistentes a los adamantanos (rimantadina y amantadina), y la mayona de las cepas H1N1 estacionales son resistentes a oseltamivir, el inhibidor de la neuraminidasa (NAI) mas ampliamente recetado. Para el oseltamivir, la OMS informo de una aparicion significativa de resistencia de la gripe A/H1N1 a partir de la estacion de la gripe del 2007/2008; y durante el segundo y tercer trimestres del 2008 en el hemisferio sur. Se publicaron numeros aun mas serios para el cuarto trimestre del 2008 (hemisferio norte), en el que el 95 % de todas las cepas aisladas probadas no revelaron susceptibilidad al oseltamivir. Considerando el hecho que ahora la mayona de los gobiernos nacionales han estado almacenando en grandes cantidades el oseltamivir como parte de su plan de preparacion pandemica contra la gripe, es obvio que la demanda de nuevos farmacos eficaces esta creciendo significativamente. Para tratar la necesidad de una terapia mas eficaz se han realizado estudios preliminares usando combinaciones dobles o incluso triples de farmacos antivirales con diferentes mecanismos de accion. Se analizaron los adamantanos y los inhibidores de la neuraminidasa en combinacion in vitro e in vivo y se encontro que actuaron de manera altamente sinergica. Sin embargo, se sabe que para ambos tipos de antivirales surgen virus resistentes mas bien rapidamente y esta cuestion no es detenida por la combinacion de estos farmacos antivirales establecidos.

Los inhibidores de la polimerasa del virus de la gripe son farmacos novedosos que tienen como objetivo la actividad de transcripcion de la polimerasa. Los inhibidores selectivos contra los sitios activos de aglutinacion al extremo y de la endonucleasa de la polimerasa viral atenuan gravemente la infeccion por el virus deteniendo el ciclo reproductivo viral. Estas dos dianas estan localizadas dentro de distintas subunidades del complejo de polimerasa y asf representan dianas de los farmacos unicas. Debido al hecho de que ambas funciones son requeridas para el llamado mecanismo de “secuestro del extremo” obligatorio para la transcripcion viral, se espera que la inhibicion concurrente de ambas funciones actue de una manera altamente sinergica. Esta combinacion de farmacos altamente eficaz producina concentraciones de sustancia inferiores y, por consiguiente, relaciones de dosis- respuesta mejoradas y mejores perfiles de efectos secundarios.

Ambos de estos sitios activos estan compuestos de residuos identicos en todas las cepas de la gripe A (por ejemplo, aviar y humana) y, por consiguiente, este alto grado de conservacion de la secuencia respalda la percepcion de que no es probable que estas dianas desencadenen una generacion de virus de resistencia rapida. Asf, los inhibidores de la endonucleasa y de union al extremo individualmente y en combinacion son candidatos de los farmacos ideales para combatir tanto la gripe estacionaria como la pandemica, independientemente de la cepa del virus.

La combinacion de un inhibidor de la endonucleasa y un inhibidor de la union al extremo o un inhibidor de la polimerasa espedfico dual que tiene como objetivo tanto el sitio activo de la endonucleasa como el dominio de union al extremo sena eficaz contra cepas de virus resistentes contra los adamantanos y los inhibidores de la neuraminidasa y ademas combinan la ventaja de una baja susceptibilidad a la generacion de resistencia con la actividad contra una amplia gama de cepas de virus.

(ii) La combinacion de inhibidores de diferentes dianas antivirales (que tienen particularmente como objetivo la gripe) que se basan en la combinacion con los inhibidores de la polimerasa (preferentemente de la gripe) como terapia de combinacion doble o de combinaciones multiples. Los inhibidores de la polimerasa del virus de la gripe son farmacos novedosos que tienen como objetivo la actividad de transcripcion de la polimerasa. Los inhibidores selectivos contra la union al extremo y los sitios activos de la endonucleasa de la polimerasa viral atenuan gravemente la infeccion por el virus deteniendo el ciclo reproductivo viral. Se espera que la combinacion de un inhibidor de la polimerasa que se dirige espedficamente a una diana intracelular viral con un inhibidor de una diana antiviral diferente actue de manera altamente sinergica. Esto se basa en el hecho de que estos tipos diferentes de farmacos antivirales presentan mecanismos de accion y propiedades farmacocineticas completamente diferentes que actuan ventajosa y sinergicamente sobre la eficacia antiviral de la combinacion.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Esta combinacion de farmacos altamente eficaz podna producina concentraciones de sustancia mas bajas y, por consiguiente, relaciones de dosis-respuesta mejoradas y mejores perfiles de efectos secundarios. Ademas, las ventajas descritas bajo (i) para los inhibidores de la polimerasa prevalecenan para las combinaciones de inhibidores de diferentes dianas antivirales con los inhibidores de la polimerasa. Normalmente, al menos un compuesto seleccionado del primer grupo de inhibidores de la polimerasa se combina con al menos un compuesto seleccionado del segundo grupo de inhibidores de la polimerasa.

El primer grupo de inhibidores de la polimerasa que puede usarse en este tipo de terapia combinada incluye, pero no se limita a, los compuestos que tienen la formula general (I) descritos mas adelante, los compuestos que tienen la formula general (II) descritos mas adelante y/o los compuestos desvelados en el documento WO2011/000566.

El segundo grupo de inhibidores de la polimerasa que puede usarse en este tipo de terapia de combinacion incluye, pero no se limita a, los compuestos desvelados en los documentos WO 2010/11023l, WO 2010/110409, Wo 2006/030807 y US 5.475.109 ademas de flutimida y analogos, favipiravir y analogos, galato de epigalocatecina y analogos, ademas de analogos de nucleosidos tales como la ribavirina.

(iii) La combinacion de inhibidores de la polimerasa con inhibidores de la neuraminidasa.

Los inhibidores de la polimerasa del virus de la gripe son farmacos novedosos que tienen como objetivo la actividad de transcripcion de la polimerasa. Los inhibidores selectivos contra los sitios activos de union al extremo y de la endonucleasa de la polimerasa viral atenuan gravemente la infeccion por el virus deteniendo el ciclo reproductivo viral. Se espera que la combinacion de un inhibidor de la polimerasa que se dirige espedficamente a una diana intracelular viral con un inhibidor de una diana antiviral extracelular diferente, especialmente la neuraminidasa (por ejemplo, viral), actue de manera altamente sinergica. Esto se basa en el hecho de que estos tipos diferentes de farmacos antivirales presentan mecanismos de accion y propiedades farmacocineticas completamente diferentes que actuan ventajosa y sinergicamente sobre la eficacia antiviral de la combinacion.

Esta combinacion de farmacos altamente eficaz producina concentraciones de sustancia mas bajas y, por consiguiente, relaciones de dosis-respuesta mejoradas y mejores perfiles de efectos secundarios. Ademas, las ventajas descritas bajo (i) para los inhibidores de la polimerasa prevalecenan para combinaciones de inhibidores de diferentes dianas antivirales con los inhibidores de la polimerasa. Normalmente, al menos un compuesto seleccionado del primer grupo de inhibidores de la polimerasa anteriormente mencionado se combina con al menos un inhibidor de la neuraminidasa.

El inhibidor de la neuraminidasa (particularmente el inhibidor de la neuraminidasa de la gripe) no esta espedficamente limitado. Ejemplos incluyen zanamivir, oseltamivir, paramivir, KDN DANA, FANA y derivados de ciclopentano.

(iv) La combinacion de inhibidores de la polimerasa con inhibidores del canal M2

Los inhibidores de la polimerasa del virus de la gripe son farmacos novedosos que tienen como objetivo la actividad de transcripcion de la polimerasa. Los inhibidores selectivos contra los sitios activos de union al extremo y de la endonucleasa de la polimerasa viral atenuan gravemente la infeccion por el virus deteniendo el ciclo reproductivo viral. Se espera que la combinacion de un inhibidor de la polimerasa que se dirige espedficamente a una diana intracelular viral con un inhibidor de una diana antiviral extracelular y citoplasmica diferente, especialmente el canal de iones M2 viral, actue de manera altamente sinergica. Esto se basa en el hecho de que estos tipos diferentes de farmacos antivirales presentan mecanismos de accion y propiedades farmacocineticas completamente diferentes que actuan ventajosa y sinergicamente sobre la eficacia antiviral de la combinacion.

Esta combinacion de farmacos altamente eficaz producina concentraciones de sustancia mas bajas y, por consiguiente, relaciones de dosis-respuesta mejoradas y mejores perfiles de efectos secundarios. Ademas, las ventajas descritas bajo (i) para los inhibidores de la polimerasa prevalecenan para combinaciones de inhibidores de diferentes dianas antivirales con inhibidores de la polimerasa.

Normalmente, al menos un compuesto seleccionado del primer grupo anteriormente mencionado de los inhibidores de la polimerasa se combina con al menos un inhibidor del canal M2.

El inhibidor del canal M2 (particularmente el inhibidor del canal M2 de la gripe) no esta espedficamente limitado. Ejemplos incluyen amantadina y rimantadina.

(v) La combinacion de inhibidores de la polimerasa con inhibidores de alfa-glucosidasa

Los inhibidores de la polimerasa del virus de la gripe son farmacos novedosos que tienen como objetivo la actividad de transcripcion de la polimerasa. Los inhibidores selectivos contra los sitios activos de union al extremo y de la endonucleasa de la polimerasa viral atenuan gravemente la infeccion por el virus deteniendo el ciclo reproductivo viral. Se espera que la combinacion de un inhibidor de la polimerasa que se dirige espedficamente a una diana

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

intracelular viral con un inhibidor de una diana extracelular diferente, espedficamente la alfa-glucosidasa, actue de manera altamente sinergica. Esto se basa en el hecho de que estos diferentes tipos de farmacos antivirales presentan mecanismos de accion y propiedades farmacocineticas completamente diferentes que actuan ventajosa y sinergicamente sobre la eficacia antiviral de la combinacion.

Normalmente, al menos un compuesto seleccionado del primer grupo anteriormente mencionado de inhibidores de la polimerasa se combina con al menos un inhibidor de alfa-glucosidasa.

El inhibidor de alfa-glucosidasa (particularmente el inhibidor de alfa-glucosidasa de la gripe) no esta espedficamente limitado. Ejemplos incluyen los compuestos descritos en Chang et al., Antiviral Research 2001, 89, 26-34.

(vi) La combinacion de inhibidores de la polimerasa con ligandos de otras dianas de la gripe

Los inhibidores de la polimerasa del virus de la gripe son farmacos novedosos que tienen como objetivo la actividad de transcripcion de la polimerasa. Los inhibidores selectivos contra los sitios activos de union al extremo y de la endonucleasa de la polimerasa viral atenuan gravemente la infeccion por el virus deteniendo el ciclo reproductivo viral. Se espera que la combinacion de un inhibidor de la polimerasa que se dirige espedficamente a una diana intracelular viral con un inhibidor de diferentes dianas extracelulares, citoplasmicas o nucleicas antivirales actue de manera altamente sinergica. Esto se basa en el hecho de que estos tipos diferentes de farmacos antivirales presentan mecanismos de accion y propiedades farmacocineticas completamente diferentes que actuan ventajosa y sinergicamente sobre la eficacia antiviral de la combinacion.

Normalmente, al menos un compuesto seleccionado del primer grupo anteriormente mencionado de los inhibidores de la polimerasa se combina con al menos un ligando de otra diana de la gripe.

El ligando de otra diana de la gripe no esta espedficamente limitado. Ejemplos incluyen compuestos que actuan sobre la protema de fusion de la sialidasa, por ejemplo, Fludase (DAS181), ARNip y oligonucleotidos de fosforotioato, inhibidores de la transduccion de la senal (tirosina cinasa ErbB, familia de la cinasa Abl, cinasas MAP, activacion mediada por PKCa de la senalizacion de ERK, ademas de interferon (inductores).

(vii) La combinacion de inhibidores de la polimerasa (preferentemente de la gripe) con un compuesto usado como adyuvante para minimizar los smtomas de la enfermedad (antibioticos, agentes antiinflamatorios como inhibidores de la COX (por ejemplo, inhibidores de la COX-1/COX-2, inhibidores selectivos de la COX-2), inhibidores de lipoxigenasa, ligandos de EP (particularmente ligandos de EP4), ligandos de bradiquinina y/o los ligandos cannabinoides (por ejemplo, agonistas de CB2). Los inhibidores de la polimerasa del virus de la gripe son farmacos novedosos que tienen como objetivo la actividad de transcripcion de la polimerasa. Los inhibidores selectivos contra los sitios activos de union al extremo y de la endonucleasa de la polimerasa viral atenuan gravemente la infeccion por el virus deteniendo el ciclo reproductivo viral. La combinacion de un inhibidor de la polimerasa que se dirige espedficamente a una diana intracelular viral con un compuesto usado como adyuvante para minimizar los smtomas de la enfermedad trata las consecuencias patologicas causantes y sintomaticas de la infeccion viral. Se espera que esta combinacion actue sinergicamente debido a que estos tipos diferentes de farmacos presentan mecanismos de accion y propiedades farmacocineticas completamente diferentes que actuan de manera ventajosa y sinergica sobre la eficacia antiviral de la combinacion.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Compuestos que tienen la formula general I

En una divulgacion, los compuestos que tienen la formula general (I) se identifican a continuacion.

imagen6

Se entiende que en toda la presente memoria descriptiva el termino “un compuesto que tiene la formula general (I)” engloba sales, solvatos, polimorfos, profarmacos, tautomeros, racematos, enantiomeros, o diaestereomeros o mezclas de los mismos, farmaceuticamente aceptables, a menos que se mencione de otro modo.

Las siguientes definiciones aplican con respecto a los compuestos que tienen la formula general (I).

R1 esta seleccionado de -H, -alquilo Ci-6, -(cicloalquilo C3.7) y -CH2-(cicloalquilo C3.7). Preferentemente, R1 esta seleccionado de -H y -alquilo C1-6. Incluso mas preferentemente, R1 es -H. R2 esta seleccionado de -H,

NH2

ho'A

I

-alquilo Ci-6, -Hal, -(cicloalquilo C3-7), -CH2-(cicloalquilo C3-7), -(CH2)m-(arilo opcionalmente sustituido) y -(anillo heterodclico de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido que contiene al menos un heteroatomo seleccionado de N, O y S). Preferentemente, R2 esta seleccionado de -H,

NH2

ho'A,

-alquilo Ci-6, -(CH2)m-(arilo opcionalmente sustituido), -(anillo heterodclico de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido que contiene al menos un heteroatomo seleccionado de N, O y S). Incluso mas preferentemente, R2 esta seleccionado de -H, -alquilo Ci-6, -fenilo, siendo R2 -H que es el mas preferido. Con respecto a R2, el anillo heterodclico no esta particularmente limitado, pero es preferentemente piperidina o pirrolidina.

El (Los) sustituyente(s) del arilo opcionalmente sustituido y el anillo heterodclico opcionalmente sustituido estan seleccionados independientemente de -alquilo C1-4, -halogeno, -CN, -CHah, -arilo, -Nr6R7 y -CONR6R7. Ejemplos preferidos del sustituyente que se selecciona de -alquilo C1-4.

R3 esta seleccionado de -H;

-alquilo Ci-6;

-(CH2)n-NR6R8 (con respecto a este sustituyente n es preferentemente 0 o 1, mas preferentemente 0); y -(anillo carbo- o heterodclico de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido en el que el anillo heterodclico contiene al menos un heteroatomo seleccionado de N, O y S). El anillo heterodclico puede ser cualquier anillo carbo- o heterodclico, pero es preferentemente fenilo, piperidina, morfolina o piperazina.

El sustituyente del anillo carbo- o heterodclico esta seleccionado de -Hal, -alquilo C1-4, -NR9R10, -(CH2VOH, -C(O)- NR9R10, -SO2-NR9R10, -NH-C(O)-O-R11, -C(O)-O-R11 y un anillo heterodclico de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroatomo seleccionado de N, O y S (con respecto al sustituyente del anillo carbo- o heterodclico el anillo heterodclico como sustituyente es preferentemente pirrolidina, piperidina o dioxolano).

En una divulgacion, R3 esta seleccionado de -H; -alquilo C1-6;

-NR6-SO2-(CH2)n-(arilo opcionalmente sustituido), en el que el sustituyente esta seleccionado preferentemente de - Hal y -CF3;

-(arilo opcionalmente sustituido), en el que el sustituyente esta seleccionado preferentemente de Hal, -NR9R10 y - C(O)-O-R11; y

-(anillo heterodclico de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido en el que el anillo heterodclico contiene al menos un heteroatomo seleccionado de N, O y S), en el que el sustituyente esta seleccionado preferentemente de -Hal, - NR9R10, -C(O)-O-R11 y un anillo heterodclico de 5 o 6 miembros que contiene al menos un heteroatomo seleccionado de N, O y S tal como pirrolidina, piperidina o dioxolano.

En una divulgacion, R1 y R2tomados conjuntamente pueden formar un anillo de fenilo.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

En una divulgacion alternativa, R2 y R3 tornados conjuntamente pueden formar un anillo de fenilo.

R4 es -H.

R5 esta seleccionado del grupo que consiste en -H o -(CH2)n-(arilo opcionalmente sustituido), preferentemente R5 esta seleccionado del grupo que consiste en -H o -(CH2)-(fenilo opcionalmente sustituido), incluso mas preferentemente R5 es -H. En la definicion de R5, n es 0, 1,2 o 3, preferentemente n es 0 o 1, mas preferentemente n es 1. Con respecto a R5, el sustituyente esta seleccionado de -Hal y -alquilo C1-4.

en una divulgacion alternativa, R4 y R5 forman juntos un grupo metileno -CH2-, grupo etileno -CH2CH2- o grupo etino -CHCH-, que puede estar opcionalmente sustituido con -alquilo C1-4, -halogeno, -CHah, -R6R7, -OR6, -CONr6R7, - SO2R6R7, arilo o heteroarilo.

R6 esta seleccionado de -H y -alquilo C1-4 y es, por ejemplo, -H.

R7 esta seleccionado de -H y -alquilo C1-4.

R8 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)n-(arilo opcionalmente sustituido), -SO2-(CH2)n-(arilo opcionalmente sustituido), -SO2-(CH2)n-(heteroanillo mono- o bidclico de 5 a 10 miembros opcionalmente sustituido que contiene al menos un heteroatomo seleccionado de N, O y S), -(CH2)n-(anillo heterodclico de 5 o 6 miembros opcionalmente sustituido que contiene al menos un heteroatomo seleccionado de N, O y S) (preferentemente el anillo heterodclico es piperidina o pirrolidina), en el que el sustituyente esta seleccionado de -Hal, -CF3, -alquilo C1-4 y -(CH2)n-arilo. En una opcion preferida, R8 puede ser -SO2-(CH2)n-(arilo opcionalmente sustituido), siendo n preferentemente 0 o 1, siendo mas preferentemente 1.

R esta seleccionado de -H, -alquilo C1-4, y -alquilen C1-4-NR R .

R esta seleccionado de -H, -alquilo C1-4y -alquilen C1-4-NR R .

R11 esta seleccionado de -H, -CF3 y -alquilo C1-4.

Cada m es 0 o 1.

Cada n es independientemente 0, 1, 2 o 3.

Sin desear cenirse a teoria alguna, se supone que los compuestos que tienen la formula general (I) son capaces de inhibir la actividad de la endonucleasa, particularmente del virus de la gripe. Mas espedficamente, se supone que interfieren directamente con la parte del extremo N de la protema PA de la gripe, que aloja la actividad de la endonucleasa. Sin embargo, la administracion de un compuesto en una celula puede representar un problema dependiendo de, por ejemplo, la solubilidad del compuesto o de sus capacidades para cruzar la membrana celular. La presente divulgacion no solo muestra que los compuestos tienen una actividad inhibidora de polimerasa in vitro sino tambien actividad antiviral in vivo.

EJEMPLOS DE REFERENCIA 1 a 111

Ensayo de actividad de la endonucleasa de FRET

Se genero el fragmento PA-Nter del virus de la gripe A (IAV) (aminoacidos 1 - 209) que aloja la actividad de endonucleasa de la gripe y se purifico como se describe en Dias et al., 2009. La protema se disolvio en tampon que contiene Tris 20 mM a pH 8,0, NaCl 100 mM y p-mercaptoetanol 100 mM y las almuotas se almacenaron a -20 °C.

Se uso un oligo de ARN con marcado doble de 20 bases con el fluoroforo 5'-FAM y el extintor 3'-BHQ1 como sustrato para ser escindido por la actividad de la endonucleasa del PA-Nter. La escision del substrato de ARN libera el fluoroforo del extintor, produciendo un aumento de la senal fluorescente.

Todos los componentes del ensayo se diluyeron en el tampon del ensayo que contiene Tris-HCl 20 mM a pH 8,0, NaCl 100 mM, MnCh 1 mM, MgCh 10 mM y p-mercaptoetanol 10 mM. La concentracion final de PA-Nter fue substrato de ARN 0,5 pM y 1,6 pM. Los compuestos de prueba se disolvieron en DMSO y generalmente se probaron a dos concentraciones o a una serie de concentraciones que produce una concentracion de DMSO por pocillo de la placa final del 0,5 %. En aquellos casos en los que los compuestos no fueron solubles a esta concentracion, se probaron a la mayor concentracion soluble. Se uso SAV-6004 como patron en el ensayo a una concentracion de 0,1 pM.

Se proporcionaron 5 pl de cada dilucion de compuesto en los pocillos de las placas de microtitulacion de 384 pocillos blancas (PerkinElmer) en ocho duplicados. Despues de la adicion de la disolucion de PA-Nter, las placas se taparon y se incubaron durante 30 min a temperatura ambiente antes de la adicion de sustrato de ARN 1,6 pM diluido en

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

tampon de ensayo. Posteriormente, se midio el aumento de la senal de fluorescencia de ARN escindido en un lector de microplacas (Synergy HT, Biotek) a 485 nm de excitacion y 535 nm de longitud de onda de emision. El intervalo de lectura cinetica fue 35 s a una sensibilidad de 35. Se usaron los datos de la senal de fluorescencia durante un periodo de 20 min para calcular la velocidad inicial (v0) de la escision de sustrato. La lectura final fue el % de reduccion de v0 de las muestras tratadas con compuesto en comparacion con sin tratar. La concentracion inhibidora al 50 % (CI50) es una medida de la eficacia de un compuesto en inhibir la funcion biologica o bioqmmica y se calculo a partir de las velocidades de reaccion iniciales (v0) en una serie de concentraciones dadas que oscila del maximo 100 |jM hasta al menos 2 nM.

Ensayo del efecto citopatico (CPE)

Se obtuvo el virus de la gripe A (IAV) de la Coleccion Americana de Cultivos de Tejido (A/Aichi/2/68 (H3N2); VR- 547). Se prepararon soluciones madre de virus por propagacion de virus sobre celulas de rinon canino de Mardin- Darby (MDCK; ATCC CCL-34) y se determinaron los tttulos infecciosos de soluciones madre de virus por el analisis de la dosis infecciosa de tejido de cultivo al 50 % (TCID50) como se describe en Reed, L. J., y H. Muench. 1938, Am. J. Hyg. 27:493-497.

Se sembraron celulas MDCK en placas de 96 pocillos a 2*104 celulas/pocillo usando medio DMEM/Ham's F-12 (1:1) que contiene 10 % de suero bovino fetal (FBS), L-glutamina 2 mM y 1 % de antibioticos (todos de PAA). Hasta la infeccion las celulas se incubaron durante 5 h a 37 °C, 5,0% de CO2 para formar una monocapa ~80 % de confluente sobre el fondo del pocillo. Cada compuesto de prueba se disolvio en DMSO y generalmente se probo a 25 jM y 250 jM. En aquellos casos en los que los compuestos no fueron solubles a esa concentracion se probaron a la mayor concentracion soluble. Los compuestos se diluyeron en medio de infeccion (DMEM/Ham's F-12 (1:1) que contema 5 jg/ml de tripsina y 1 % de antibioticos) para una concentracion de DMSO por pocillo de la placa final del 1 %. La solucion madre de virus se diluyo en medio de infeccion (DMEM/Ham's F-12 (1:1) que contiene 5 jg/ml de tripsina, 1 % de DMSO y 1 % de antibioticos) a una multiplicidad de infeccion (MOI) teorica de 0,05.

Despues de eliminar el medio de cultivo y una etapa de lavado con PBS, el virus y el compuesto se anadieron juntos a las celulas. En los pocillos usados para la determinacion de la citotoxicidad (es decir, en ausencia de infeccion viral), no se anadio suspension de virus. En su lugar, se anadio medio de infeccion. Cada tratamiento se realizo en dos duplicados. Despues de la incubacion a 37 °C, 5 % de CO2 durante 48 h, cada pocillo se observo microscopicamente para citotoxicidad aparente, formacion de precipitados, u otras anomalfas notables. Entonces, se determino la viabilidad celular usando el ensayo de viabilidad celular luminiscente CellTiter-Glo (Promega). El sobrenadante se elimino cuidadosamente y se anadieron 65 jl del reactivo reconstituido a cada pocillo y se incubaron con agitacion suave durante 15 min a temperatura ambiente. Entonces, se transfirieron 60 jl de la disolucion a una placa opaca y la luminiscencia (RLU) se midio usando el lector de placas Synergy HT (Biotek).

Se usaron los valores de la viabilidad celular relativa de celulas no infectadas-tratadas frente a no infectadas-sin tratar para evaluar la citotoxicidad de los compuestos. Las sustancias con una viabilidad relativa por debajo del 80 % a la concentracion probada se consideraron citotoxicos y se volvieron a probar a concentraciones mas bajas.

Se calculo la reduccion en el efecto citopatico mediado por el virus (CPE) tras el tratamiento con los compuestos del siguiente modo: Se resto la respuesta (RLU) de muestras infectadas-no tratadas de la respuesta (RLU) de las muestras infectadas-tratadas y entonces se normalizo a la viabilidad de la muestra no infectada correspondiente produciendo el % de reduccion de CPE. La concentracion inhibidora al 50 % (CI50) es una medida de la eficacia de un compuesto que inhibe la funcion biologica o bioqmmica y se calculo a partir de la respuesta de RLU en una serie de concentraciones dadas que oscila del maximo 100 jM a al menos 100 nM.

Ensayo de Biacore

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen7

como referencias y controles de estabilidad del chip a una concentracion de 4 mM y 10 jM, respectivamente. Se prepararon soluciones madre de cada compuesto de referencia y las alfcuotas se almacenaron a -20 °C.

Se determinaron las constantes de afinidad (valores de KD) midiendo la afinidad de la union del analito al ligando sobre un intervalo de la concentracion que oscila de 200 jM a 1 nM. El valor de KD es aquella concentracion a la que 50 % de los sitios de union estan saturados y se calculo usando un modelo de ajuste de la curva lineal.

Compuestos que tienen la formula general (I)

Producto intermedio clave I

Clorhidrato de O,N-dibencilhidroxilamina

imagen8

imagen9

A una suspension de clorhidrato de O-bencilhidroxilamina (1,2 g, 10 mmoles, 1 eq) en etanol absoluto (16 ml) se anadio carbonato de potasio (1,5 g, 11 mmoles, 1,1 eq) y benzaldehfdo (1,0 ml, 10 mmoles, 1 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 5 h y entonces se vertio en agua (50 ml). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vacfo. El residuo se disolvio en diclorometano (21 ml) y se enfrio a 0 °C. A esta disolucion se anadieron gota a gota bajo argon dimetilfenilsilano (2,3 ml, 14,3 mmoles, 1,4 eq) y acido trifluoroacetico (2,6 ml, 35,6 mmoles, 3,5 eq). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Los disolventes se eliminaron a vacfo y se anadio una disolucion 2 N de acido clorhndrico (5 ml) en el residuo diluido en diclorometano (5 ml). El precipitado se filtro, se lavo con eter dietilico y se seco a vacfo proporcionando el compuesto esperado como un polvo blanco (966 mg, rendimiento del 48 %).

5

10

15

20

25

30

35

40

Producto intermedio clave II

Ester metilico del acido 4-amino-piridin-2-carboxilico

imagen10

Se anadio cloruro de oxalilo (6,7 ml, 76,8 mmoles, 1,2 eq) a una disolucion de acido 4-cloro-piridin-2-carboxflico (10,0 g, 63,4 mmoles, 1 eq) en diclorometano (270 ml). La disolucion se enfrio hasta 0 °C y se anadio dimetilformamida (1,1 ml) gota a gota. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1,5 h y se evaporo a sequedad. El residuo naranja se diluyo en metanol (110 ml) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 30 min y se evaporo a sequedad. Se vertio una disolucion al 5 % de bicarbonato sodico (50 ml) sobre el residuo y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 40 ml). Las fases organicas se lavaron con salmuera (3 x 20 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron proporcionando el ester metilico del acido 4-cloro- piridin-2-carboxnico como un polvo beis (10,0 g, rendimiento del 92 %).

Etapa 2:

Se solubilizo ester metilico del acido 4-cloro-piridin-2-carboxflico (13,7 g, 79,9 mmoles, 1 eq) en una mezcla de dimetilformamida (120 ml) y agua (6 ml). Se anadio azida de sodio (6,2 g, 95,9 mmoles, 1,2 eq) y la mezcla se calento a 80 °C durante 24 h. Despues de enfriarse, la mezcla se diluyo con acetato de etilo (40 ml) y se lavo con agua (30 ml) y salmuera (30 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. En esta etapa, la reaccion no estaba completa (se detecto 15 % de material de partida) y se ejecuto otra vez el mismo procedimiento con reactivos nuevos a 80 °C durante 24 h. Despues del mismo tratamiento, la evaporacion de las fases organicas proporciono el ester metilico del acido 4-azido-piridin-2-carboxflico como un aceite naranja que cristalizo (10,2 g, rendimiento del 72 %).

Etapa 3:

Se solubilizo ester metilico del acido 4-azido-piridin-2-carboxflico (3,9 g, 22 mmoles, 1 eq) en metanol (50 ml) y se anadio 10 % de paladio en peso sobre carbono (400 mg). La mezcla se agito a temperatura ambiente a mas de 4 bar de presion de hidrogeno hasta que se completo la reaccion. La mezcla se filtro entonces sobre una almohadilla corta de Celite, y se aclaro con metanol proporcionando el compuesto esperado como un polvo amarillo (3,0 g, rendimiento del 90 %).

Productos intermedios clave III y IV

Bencil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amida del acido 4-bromo-piridin-2-carboxflico y bencil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amida del acido 4-amino-piridin-2-carboxilico

imagen11

5

10

15

20

25

30

35

40

45

imagen12

Etapa 1:

Se anadio cloruro de oxalilo (5,1 ml, 58,6 mmoles, 1,3 eq) a una disolucion de acido 4-bromo-pindin-2-carboxflico (9,1 g, 45,0 mmoles, 1 eq) en diclorometano (250 ml). La disolucion se enfrio hasta 0 °C y se anadio dimetilformamida (0,6 ml) gota a gota. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1,5 h y se evaporo a sequedad. El residuo se diluyo en diclorometano (250 ml) y se anadio clorhidrato de N-bencilhidroxilamina (10,8 g, 67,5 mmoles, 1,5 eq). Se anadio trietilamina (18,8 ml, 135 mmoles, 3 eq) gota a gota a 0 °C y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 18 h. La disolucion se vertio entonces sobre una disolucion saturada de bicarbonato sodico (50 ml) y se extrajo con diclorometano (3 x 50 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 70/30) proporcionando la bencil-hidroxi-amida del acido 4-bromo-piridin-2- carboxflico como un aceite naranja (8,0 g, rendimiento del 58 %).

Etapa 2:

Se anadieron dihidropirano (9,4 ml, 104 mmoles, 4 eq) y acido para-toluenosulfonico (99 mg, 0,52 mmoles, 0,02 eq) a una disolucion de bencil-hidroxi-amida del acido 4-bromo-piridin-2-carboxflico (8,0 g, 26 mmoles, 1 eq) en tetrahidrofurano (200 ml). La mezcla se calento a 65 °C durante 48 h. Despues de enfriarse, la mezcla se vertio sobre una disolucion saturada de bicarbonato sodico (60 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 40 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 80/20) proporcionando el Producto intermedio clave II como un aceite amarillo palido que cristalizo (7,8 g, rendimiento del 76 %).

Etapa 3:

Se solubilizo bencil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amida del acido 4-bromo-piridin-2-carboxflico (5,0 g, 12,8 mmoles, 1 eq) en una mezcla de dimetilformamida (41 ml) y agua (3 ml). Se anadio azida de sodio (997 mg, 15,3 mmoles, 1,2 eq) y la mezcla se calento a 80 °C durante 24 h. Despues de enfriarse, la mezcla se diluyo con acetato de etilo (40 ml) y se lavo con agua (30 ml) y salmuera (30 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. En esta etapa, la reaccion no estaba completa y se ejecuto otra vez el mismo procedimiento con reactivos nuevos a 80 °C durante 24 h. Despues del mismo tratamiento, el residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 60/40) proporcionando la bencil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amida del 4-azido-piridin-2-acido carboxflico (2,8 g, rendimiento del 61 %).

Etapa 4:

A una disolucion de bencil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amida del acido 4-azido-piridin-2-carboxflico (2,5 g, 7,1 mmoles, 1 eq) en metanol (55 ml) se anadio borohidruro de sodio (296 mg, 37,8 mmoles, 1,1 eq) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 h. Entonces se anadio agua (20 ml) y la mezcla se evaporo a sequedad. El residuo se diluyo con acetato de etilo (20 ml) y la fase organica se lavo con agua, se seco sobre sulfato de magnesio, se filtro y se evaporo a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando acetato de etilo y metanol (100/0 a 90/10) proporcionando el Producto intermedio clave IV como un aceite incoloro (883 mg, rendimiento del 38 %).

5

10

15

20

25

30

35

Productos intermedios clave V y VI

Ester terc-butilico del acido 5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-3,4-dihidro-2H-piridin-1-carboxflico y ester terc-butilico del acido 5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-3,6-dihidro-2H-piridin-1 -carboxilico

imagen13

Etapa 1:

A -78 °C, a una disolucion de diisopropilamida de litio 1,5 M en ciclohexano (8 ml, 12 mmoles, 1,2 eq) en tetrahidrofurano (8 ml) se anadio gota a gota una disolucion de ester terc-butnico del acido 3-oxo-piperidin-1- carboxflico (2,0 g, 10 mmoles, 1 eq) en tetrahidrofurano (8 ml). La mezcla se agito a -78 °C durante 1 h y se anadio una disolucion de N-fenil-bis-trifluorometanosulfonamida (3,9 g, 11 mmoles, 1,1 eq) en tetrahidrofurano (8 ml). La mezcla se agito a -78 °C durante 2 h y entonces se dejo calentar hasta temperatura ambiente y se agito 18 horas adicionales a temperatura ambiente. La mezcla se evaporo a sequedad y el residuo se recogio con eter dietilico (20 ml). La fase organica se lavo con agua (10 ml), una disolucion 2 M de hidroxido sodico (3 x 10 ml), agua (10 ml) y salmuera (10 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatogratia ultrarrapida usando ciclohexano y diclorometano (100/0 a 0/100) proporcionando por separado ester terc-butilico del acido 5-trifluorometanosulfoniloxi-3,4-dihidro-2H-piridin-1- carboxflico (980 mg, rendimiento del 29 %) y ester terc-butilico del acido 5-trifluorometanosulfoniloxi-3,6-dihidro-2H- piridin-1 -carboxflico (340 mg, rendimiento del 10 %).

Etapa 2:

A una disolucion desgasificada de ester terc-butilico del acido 5-trifluorometanosulfoniloxi-dihidro-2H-piridin-1- carboxflico (340 mg, 1,0 mmol, 1 eq) en dioxano (10 ml) se anadio bis-(pinacolato)-diboro (287 mg, 1,1 mmoles, 1,1 eq), acetato de potasio (302 mg, 3,0 mmoles, 3 eq), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno (17 mg, 0,03 mmoles, 0,03 eq) y dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio) (23 mg, 0,03 mmoles, 0,03 eq). La mezcla se agito a 80 °C durante 18 h. Despues de enfriarse, la mezcla se filtro y el filtrado se concentro y se purifico por cromatogratia ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 96/4) proporcionando el ester boronico correspondiente (225 mg, rendimiento del 70 %).

imagen14

A 0 °C, a una disolucion de clorhidrato del acido piridinil-2-carboxilico (1,0 mmol, 1 eq) en diclorometano (8 ml) se anadio una gota de dimetilformamida y cloruro de oxalilo (1,3 mmoles, 1,3 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 30 min y se evaporo a sequedad. El residuo se solubilizo entonces en diclorometano (8 ml) y se enfrio a 0 °C. Se anadieron trietilamina (3,1 mmoles, 3 eq) y clorhidrato de hidroxilamina (2,1 mmoles, 2 eq) gota a gota y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 h. Entonces se evaporaron los disolventes y el residuo

5

10

15

20

25

30

35

40

en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando diclorometano y metanol (100/0 a 80/20) proporcionando el compuesto esperado.

Ejemplo 1:

Clorhidrato de hidroxiamida del acido 3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,4']bipiridinil-2'-carbox^lico

o

imagen15

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general A usando clorhidrato del acido 3,4,5,6-tetrahidro- 2H-[1,4']bipiridinil-2'-carboxflico y clorhidrato de hidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 6 %).

EM: 222,1

P.f.: 200 °C - 202 °C

Ejemplo 2:

(3,4,5,6-Tetrahidro-2H-[1,4']bipiridinil-2'-carboniloxi)-amida del acido 3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,4']bipiridinil-2'- carbox^lico

imagen16

Este compuesto se aislo como un subproducto del Ejemplo 1 y se obtuvo como un polvo blanco (rendimiento del 4 %).

EM: 410,2

P.f.: 210 °C - 215 °C

Ejemplo 3:

Clorhidrato de etoxi-amida del acido 4-morfolin-4-il-piridin-2-carboxflico

imagen17

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general A usando clorhidrato del acido 4-morfolin-4-il-piridin-2- carboxflico y clorhidrato de O-etilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 42 %).

EM: 252,1

P.f.: 200 °C - 202 °C

Ejemplo 4:

Bencil-hidroxi-amida del acido 5-pirrolidin-1-il-piridin-2-carboxflico

imagen18

5

10

15

20

25

30

35

40

45

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general A usando acido 5-pirrolidin-1-il-piridin-2-carboxilico y clorhidrato de N-bencilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 32 %). EM: 298,1 P.f.: 115 °C-120 °C

Ejemplo 5:

Bencil-hidroxi-amida del acido 3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,4']bipiridinil-2'-carboxilico

imagen19

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general A usando clorhidrato del acido 3,4,5,6-tetrahidro-2H- [1,4']bipiridinil-2'-carboxilico y clorhidrato de N-bencilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un aceite amarillo (rendimiento del 15 %).

EM: 312,2

Ejemplo 6:

Hidroxi-metil-amida del acido isoquinolin-3-carboxflico

imagen20

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general A usando acido isoquinolin-3-carboxflico y clorhidrato de N-metilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 43 %).

EM: 203,0

P.f.: 110 °C-115 °C

Ejemplo 7:

Bencil-hidroxi-amida del acido isoquinolin-3-carboxflico

imagen21

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general A usando acido isoquinolin-3-carboxflico y clorhidrato de N-bencilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 19 %).

EM: 279,1

P.f.: 120 °C-125 °C Procedimiento general B

0

1 HOBT, EDCI, DMF

R1 OH ------------------------------

HN'°'R3 NEtg.TA R2 HCI

A una disolucion de acido carboxflico (3,6 mmoles, 1 eq) en dimetilformamida (30 ml) se anadieron HOBT (7,2 mmoles, 2 eq), EDCI (7,2 mmoles, 2 eq) y entonces clorhidrato de hidroxilamina (7,2 mmoles, 2 eq) y trietilamina (10,8 mmoles, 3 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 h. Entonces la mezcla se vertio sobre disolucion de salmuera (20 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando diclorometano y metanol (100/0 a 85/15) proporcionando el compuesto esperado.

imagen22

10

15

20

25

30

35

40

45

o

imagen23

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general B usando acido 4-amino-pindin-2-carboxflico y clorhidrato de O-etilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un aceite incoloro (rendimiento del 3 %).

EM: 182,0

P.f.: 114 °C-120 °C

Ejemplo 9:

Etoxi-amida del acido piridin-2-carbox^lico

imagen24

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general B usando acido piridin-2-carboxflico y clorhidrato de O- etilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un aceite incoloro (rendimiento del 63 %).

EM: 167,1

Ejemplo 10:

Benciloxi-amida del acido 6-metil-piridin-2-carboxflico

imagen25

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general B usando acido 6-metil-piridin-2-carboxflico y clorhidrato de O-bencilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 71 %).

EM: 243,1 P.f.: 75 °C - 80 °C

Ejemplo 11:

Etoxi-amida del acido 6-metil-piridin-2-carboxflico

imagen26

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general B usando acido 6-metil-piridin-2-carboxflico y clorhidrato de O-etilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un aceite incoloro (rendimiento del 83 %).

EM: 181,0

Ejemplo 12:

Benciloxi-amida del acido 5-fenil-piridin-2-carboxflico

imagen27

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general B usando acido 5-fenil-piridin-2-carboxflico y clorhidrato de O-bencilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 79 %).

EM: 305,1

5

10

15

20

25

30

35

40

45

P.f.: 155 °C-160 °C Ejemplo 13:

o

imagen28

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general B usando acido 5-feml-piridin-2-carboxflico y clorhidrato de O-etilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 64 %).

EM: 243,1

P.f.: 100 °C-105 °C

Ejemplo 14:

Benciloxi-amida del acido 3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,4']bipiridinil-2'-carbox^lico

imagen29

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general B usando clorhidrato del acido 3,4,5,6-tetrahidro-2H- [1,4']bipiridinil-2'-carboxflico y clorhidrato de O-bencilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 26 %).

EM: 312,2

P.f.: 135 °C-140 °C

Ejemplo 15:

Benciloxi-amida del acido 5-pirrolidin-1-il-piridin-2-carboxflico

imagen30

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general B usando acido 5-pirrolidin-1-il-piridin-2-carboxflico y clorhidrato de O-bencilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 54 %). EM: 298,1

P.f.: 165 °C-170 °C Ejemplo 16:

Benciloxi-amida del acido isoquinolin-3-carboxflico

imagen31

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general B usando acido isoquinolin-3-carboxflico y clorhidrato de O-bencilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 77 %).

EM: 279,1 P.f.: 85 °C - 90 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

45

imagen32

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general B usando acido 5-pirrolidin-1-il-piridin-2-carboxilico y clorhidrato de O,N-dibencilhidroxilamina (Producto intermedio clave I). El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 12 %).

EM: 388,2

P.f.: 95 °C-100 °C

Ejemplo 18:

Bencil-benciloxi-amida del acido isoquinolin-3-carboxflico

imagen33

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general B usando acido isoquinolin-3-carboxflico y clorhidrato de

O, N-dibencilhidroxilamina (Producto intermedio clave I). El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 36 %).

EM: 369,2

P. f.: 70 °C - 75 °C

Ejemplo 19:

Hidroxiamida del acido isoquinolin-3-carboxilico

imagen34

Etapa 1:

Se obtuvo terc-butoxi-amida del acido isoquinolin-3-carboxflico segun el procedimiento general B usando acido isoquinolin-3-carboxflico y clorhidrato de O-terc-butilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo palido (rendimiento del 46 %).

Etapa 2:

Se calentaron terc-butoxi-amida del acido isoquinolin-3-carboxflico (195 mg, 1 eq) y acido trifluoroacetico (4 ml) a 50 °C durante 20 h. La mezcla se evaporo entonces a sequedad. El residuo se diluyo en acetato de etilo (10 ml) y se anadio trietilamina (3 ml). La mezcla se absorbio sobre gel de silice para purificarse por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 0/100) proporcionando el compuesto esperado como un polvo rosa palido (70 mg, rendimiento del 65 %).

EM: 189,0

P.f.: 160 °C-165 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen35

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento del ejemplo 19 usando acido 5-pirrolidin-1-il-piridin-2-carboxilico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 208,0

P.f.: 220 °C - 225 °C

Ejemplo 21:

imagen36

Etapa 1:

A una disolucion de ester metflico del acido 5-bromo-piridin-2-carboxflico (500 mg, 2,3 mmoles, 1 eq) en dimetoxietano (6 ml) se anadio acido 3-isopropilfenilboronico (495 mg, 3 mmoles, 1,3 eq) y fluoruro de cesio (1,05 g, 6,9 mmoles, 3 eq). La mezcla se desgasifico durante 15 min y se anadio tetraquis(trifenilfosfina)paladio (133 mg, 0,12 mmoles, 0,05 eq). La mezcla se calento a 100 °C durante 15 min bajo irradiacion de microondas. Despues de enfriarse, la mezcla se vertio sobre agua (10 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a sequedad. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 0/100) proporcionando el ester metilico del acido 5-(3-isopropil-fenil)-piridin-2-carboxnico como un aceite incoloro (380 mg, rendimiento del 64 %).

Etapa 2:

Se calentaron ester metflico del acido 5-(3-isopropil-fenil)-piridin-2-carboxnico (380 mg, 1,5 mmoles, 1 eq) diluido en metanol (6 ml) y una disolucion 5 N de hidroxido sodico (0,5 ml) a 80 °C durante 20 h en un tubo cerrado. Despues de enfriarse, la mezcla se evaporo y el residuo se diluyo en agua (6 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). La fase acuosa entonces se acidifico con una disolucion 1 N de acido clortudrico y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a sequedad proporcionando el acido 5-(3-isopropil-fenil)-piridin-2-carboxnico como un aceite incoloro (230 mg, rendimiento del 64 %).

Etapa 3:

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general B usando acido 5-(3-isopropilfenil)-piridin-2-carboxnico y clorhidrato de O-etilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un aceite incoloro (rendimiento del 60 %). EM: 285,2

5

10

15

20

25

30

35

40

45

imagen37

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general A usando acido 5-m-tolil-piridin-2-carbox^lico (obtenido segun el procedimiento del ejemplo 21, etapas 1 y 2) y clorhidrato de N-bencilhidroxilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 11 %).

EM: 319,1

P.f.: 139 °C-140 °C Procedimiento general C

imagen38

A una disolucion de oxi-amida de acido carboxflico (0,4 mmoles, 1 eq) en tetrahidrofurano (5 ml) se anadio hidruro de sodio (0,5 mmoles, 1,3 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 15 min y se anadio yoduro de metilo (0,6 mmoles, 1,5 eq). La mezcla se calento a 50 °C en un tubo cerrado durante 20 h. Despues de enfriarse, la mezcla se vertio sobre agua (10 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando diclorometano y metanol (100/0) a (90/10) proporcionando el compuesto esperado.

Ejemplo 23:

Benciloxi-metil-amida del acido 6-metil-piridin-2-carboxflico

imagen39

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general C usando benciloxi-amida del acido 6-metil-piridin-2- carboxflico (descrito en el ejemplo 10).El compuesto esperado se aislo como un aceite incoloro (rendimiento del 55 %).

EM: 257,1

Ejemplo 24:

Etoxi-metil-amida del acido 6-metil-piridin-2-carboxflico

imagen40

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general C a partir de etoxi-amida del acido 6-metilpiridin-2- carboxflico (descrito en el ejemplo 11). El compuesto esperado se aislo como un aceite incoloro (rendimiento del 51 %).

EM: 195,0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

imagen41

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general C a partir de etoxi-amida del acido 5-fenilpiridin-2- carbox^lico (descrito en el ejemplo 13). El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 41 %).

EM: 257,1 P.f.: 70 °C - 75 °C

Ejemplo 26:

Benciloxi-metil-amida del acido 5-fenil-piridin-2-carbox^lico

imagen42

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general C a partir de benciloxi-amida del acido 5-fenilpiridin-2- carboxflico (descrito en el ejemplo 12). El compuesto esperado se aislo como un aceite amarillo (rendimiento del 30 %).

EM: 319,1

Ejemplo 27:

Benciloxi-metil-amida del acido isoquinolin-3-carboxflico

imagen43

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general C a partir de benciloxi-amida del acido isoquinolin-3- carboxflico (descrito en el ejemplo 16). El compuesto esperado se aislo como un polvo beis (rendimiento del 45 %). EM: 293,1 P.f.: 70 °C - 75 °C

Ejemplo 28:

Etoxi-metil-amida del acido 5-(3-Isopropil-fenil)-piridin-2-carboxflico

o

imagen44

Este compuesto se preparo segun procedimiento general C a partir de etoxi-metil-amida del acido 5-(3-isopropil- fenil)-piridin-2-carboxflico (descrito en el ejemplo 21). El compuesto esperado se aislo como un aceite incoloro (rendimiento del 50 %).

EM: 299,2

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen45

Etapa 1:

Se preparo terc-butoxi-amida del acido isoquinolin-3-carbox^lico segun el procedimiento general B usando acido isoquinolin-3-carboxflico y clorhidrato de terc-butoxi-hidroxilamida. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco (rendimiento del 86 %).

Etapa 2:

A una disolucion de terc-butoxi-amida del acido isoquinolin-3-carboxflico (200 mg, 0,8 mmoles, 1 eq) en dimetilformamida (7 ml) se anadio carbonato de potasio (454 mg, 3,3 mmoles, 4 eq) y (2-bromoetil)benceno (220 pl, 1,6 mmoles, 2 eq). La mezcla se agito a 50 °C durante 20 h. Despues de enfriarse, la mezcla se vertio sobre agua (10 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 80/20) proporcionando la terc-butoxi-fenetil-amida del acido isoquinolin-3-carboxflico como un aceite incoloro (220 mg, rendimiento del 77 %).

Etapa 3:

A una disolucion de terc-butoxi-fenetil-amida del acido isoquinolin-3-carboxflico (220 mg, 0,63 mmoles, 1 eq) en diclorometano (10 ml) se anadio gota a gota a 0 °C una disolucion 1 M de tetracloruro de titanio en diclorometano (1,7 ml, 1,7 mmoles, 3 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 h. Entonces se anadio a isopropanol (15 ml) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 h y se evaporo a sequedad. El residuo se diluyo con acetato de etilo (15 ml) y se lavo con una disolucion saturada de bicarbonato sodico (3 x 20 ml). La fase organica se filtro sobre Celite y el filtrado se evaporo a sequedad. El residuo se trituro en eter dietnico y se filtro proporcionando el compuesto esperado como un solido blanco (75 mg, rendimiento del 11 %).

EM: 293,2 P.f.: 90 °C - 95 °C

Ejemplo 30:

Hidroxi-(3-fenil-propil)-amida del acido isoquinolin-3-carboxflico

imagen46

Este compuesto se preparo segun el procedimiento del ejemplo 29 a partir de acido isoquinolin-3-carboxflico. El compuesto esperado se aislo como un aceite incoloro. EM: 307,2

5

10

15

20

25

30

35

imagen47

Este compuesto se preparo segun el procedimiento del ejemplo 29 a partir de clorhidrato del acido 3,4,5,6-tetrahidro- 2H-[1,4']bipiridinil-2'-carbox^lico y usando el procedimiento general A para la etapa 1 en lugar del procedimiento general B . El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 340,2

P.f.: 125 °C-130 °C

Ejemplo 32:

Hidroxi-fenetil-amida del acido 5-(3-isopropil-fenil)-piridin-2-carboxilico

imagen48

Etapa 1:

Se preparo terc-butoxi-fenetil-amida del acido 5-bromo-piridin-2-carboxflico segun el ejemplo 29, etapas 1 y 2, a partir de acido 5-bromo-piridin-2-carboxflico. El compuesto deseado se obtuvo como un aceite incoloro (rendimiento global del 65 %).

Etapa 2:

Se preparo terc-butoxi-fenetil-amida del acido 5-(3-isopropil-fenil)-piridin-2-carboxnico segun el ejemplo 21, etapa 1, a partir de terc-butoxi-fenetil-amida del acido 5-bromo-piridin-2-carboxflico y acido 3-isopropilfenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un aceite amarillo (rendimiento del 86 %).

Etapa 3:

El compuesto esperado se preparo segun el ejemplo 29 etapa 3 a partir de terc-butoxi-fenetil-amida del acido 5-(3- isopropil-fenil)-piridin-2-carboxnico. Se aislo como un polvo amarillo (rendimiento del 15 %).

EM: 361,2

P.f.: 110 °C-115 °C

5

10

15

20

25

30

35

imagen49

Se solubilizo la terc-butoxi-fenetil-amida del acido 5-(3-isopropil-fenil)-piridin-2-carbox^lico preparada segun el ejemplo 32 etapas 1 y 2 (220 mg, 0,53 mmoles, 1 eq) en acido trifluoroacetico (5 ml) y se calento a 100 °C durante 10 min bajo irradiacion de microondas. Entonces, la mezcla se evaporo a sequedad y el residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 80/20) proporcionando el compuesto esperado como un polvo amarillo (19 mg, rendimiento del 10 %).

EM: 257,1

P.f.: 130 °C-135 °C Ejemplo 34:

Etoxi-amida del acido 4-[3-(3-cloro-fenil)-propilamino]-piridin-2-carboxflico

imagen50

Etapa 1:

En un tubo cerrado, se solubilizaron ester metflico del acido 4-amino-piridin-2-carboxflico (200 mg, 1,3 mmoles, 1 eq) y 3-(3-cloro-fenil)-propionaldel'ndo (0,4 ml, 2,6 mmoles, 2 eq) en acido acetico (190 pl, 3,3 mmoles, 2,5 eq) y metanol anhidro (7 ml) en presencia de tamices moleculares. La mezcla se calento a 80 °C durante 20 h. Despues de enfriarse, se anadio cianoborohidruro de sodio (123 mg, 1,9 mmoles, 1,5 eq) y la mezcla se calento a 80 °C durante 4 h. Despues de enfriarse, la mezcla se vertio sobre una disolucion saturada de bicarbonato sodico (10 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando diclorometano y metanol (100/0 a 90/10) proporcionando el compuesto esperado como un aceite incoloro (144 mg, rendimiento del 36 %).

Etapa 2:

El compuesto esperado se preparo segun el ejemplo 21, etapas 2 y 3, a partir de ester metflico del acido 4-[3-(3- cloro-fenil)-propilamino]-piridin-2-carboxflico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 334,2

P.f.: 100 °C-105 °C

5

10

15

20

25

30

35

imagen51

Este compuesto se preparo segun el procedimiento del ejemplo 34 a partir de ester metilico del acido 4-amino- piridin-2-carboxflico y 1-bencil-piperidin-4-carbaldehndo. El compuesto esperado se aislO como un polvo blanco.

EM: 369,3

P.f.: 125 °C-130°C

Ejemplo 36:

Clorhidrato de etoxi-amida del acido 4-(3-benciloxi-bencilamino)-piridin-2-carboxflico

imagen52

Este compuesto se preparO segUn el procedimiento del ejemplo 34 a partir de ester metflico del acido 4-amino- piridin-2-carboxnico y 3-benciloxi-benzaldehndo. El compuesto esperado se aislO como un polvo rosa.

EM: 378,2 P.f.: 70 °C -75 °C

Ejemplo 37:

Clorhidrato de etoxi-amida del acido 5-(3-{[metil-(3-fenil-propil)-amino]-metil}-fenil)-piridin-2-carboxflico

imagen53

Etapa 1:

Se preparO 5-(3-formil-fenil)-piridin-2-carbonitrilo segUn el ejemplo 21 etapa 1 a partir de 3-bromo-benzaldehndo y 5- (4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-piridin-2-carbonitrilo. El compuesto esperado se aislO como un polvo blanco (rendimiento del 88 %).

5

10

15

20

25

30

35

40

Se preparo 5-{3-[(3-fenil-propilamino)-metil]-fenil}-piridin-2-carbonitrilo segun el ejemplo 34, etapa 1 a partir de 5-(3- formil-fenil)-piridin-2-carbonitrilo y 3-fenil-propilamina. El compuesto esperado se aislo como un aceite incoloro (rendimiento cuant.).

Etapa 3:

Se solubilizaron 5-{3-[(3-fenil-propilamino)-metil]-fenil}-piridin-2-carbonitrilo (384 mg, 1,1 mmoles, 1 eq), formaldetudo al 37 % en agua (210 jl), acido formico (97 jl, 2,6 mmoles, 2,4 eq) en agua (5 ml) y se calento a 100 °C durante 20 h. Despues de enfriarse, la mezcla se basifico con una disolucion 5 N de hidroxido sodico, se vertio sobre agua (10 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). La fase organica se seco sobre sulfato de magnesio, se filtro y se evaporo a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 80/20) proporcionando 5-(3-{[metil-(3-fenil-propil)-amino]-metil}-fenil)-piridin-2-carbonitrilo como un aceite incoloro (rendimiento cuant.).

Etapa 4:

En un tubo cerrado, se calentaron 5-(3-{[metil-(3-fenil-propil)-amino]-metil}-fenil)-piridin-2-carbonitrilo (365 mg, 1,1 mmoles, 1 eq), acido sulfurico (5 ml) y etanol (5 ml) a 80 °C durante 48 h. Despues de enfriarse, la mezcla se evaporo a sequedad. El residuo se recogio en acetato de etilo (10 ml) y se lavo con una disolucion saturada de bicarbonato sodico (3 x 10 ml). La fase organica se seco sobre sulfato de magnesio, se filtro y se evaporo a vado proporcionando el ester etflico del acido 5-(3-{[metil-(3-fenil-propil)-amino]-metil}-fenil)-piridin-2-carboxflico como un aceite amarillo (224 mg, rendimiento cuant.).

Etapa 5:

Este compuesto se preparo segun el ejemplo 21 etapas 2 y 3 a partir de ester etflico del acido 5-(3-{[metil-(3-fenil- propil)-amino]-metil}-fenil)-piridin-2-carboxflico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 404,3 P.f.: 50 °C - 55 °C Ejemplo 38:

Clorhidrato de etoxi-amida del acido 5-{3-[(bencil-metil-amino)-metil]-fenil}-piridin-2-carboxflico

imagen54

Este compuesto se preparo segun el procedimiento del ejemplo 37 a partir de bromo-benzaldehudo y 5-(4,4,5,5- tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-piridin-2-carbonitrilo y usando bencilamina en lugar de 3-fenil-propilamina en la etapa 2. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 376,2 P.f.: 85 °C-90 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

3~Bromo-6-hidroxi~5,6-dihidro-pirrolo[3,4-b]piridin~7~ona

imagen55

Etapa 1:

A una disolucion de ester metilico del acido 5-bromo-3-metil-piridin-2-carbox[lico (200 mg, 0,87 mmoles, 1 eq) en tetraclorometano (10 ml) se anadieron N-bromosuccinimida (162 mg, 0,91 mmoles, 1,05 eq) y 2,2’-azobis(2- metilpropionitrilo) (3 mg, 0,017 mmoles, 0,02 eq). La mezcla se agito a 50 °C durante 5 h. Entonces, el disolvente se evaporo y el residuo en bruto se purifico por cromatografia ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 80/20). Se aislo ester metilico del acido 5-bromo-3-bromometil-piridin-2-carboxilico como un polvo blanco como una mezcla 6/4 con el material de partida (160 mg, rendimiento del 39 %). La mezcla se uso en la siguiente etapa.

Etapa 2:

Se calento una suspension de ester metilico del acido 5-bromo-3-bromometil-piridin-2-carbox[lico (160 mg, 0,5 mmoles, 1 eq), carbonato de potasio (716 mg, 5,2 mmoles, 1 eq) y clorhidrato de O-terc-butil-hidroxilamina (325 mg, 2,6 mmoles, 5 eq) en acetonitrilo (8 ml) a 80 °C durante 20 h. Despues de enfriarse, la mezcla se filtro y se lavo con acetato de etilo (10 ml). El filtrado se evaporo y el residuo en bruto se purifico por cromatografia ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 70/30) proporcionando el ester metilico del acido 5-bromo-3-(terc- butoxiamino-metil)-piridin-2-carboxilico como un polvo blanco (70 mg, rendimiento del 43 %).

Etapa 3:

A una disolucion de ester metilico del acido 5-bromo-3-(terc-butoxiamino-metil)-piridin-2-carboxilico (70 mg, 0,22 mmoles, 1 eq) en metanol (2 ml) se anadio etoxido de sodio (30 mg, 0,44 mmoles, 2 eq) recien preparado. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 h. Se anadieron algunas gotas de acido acetico y agua (5 ml). El precipitado se filtro y se lavo con agua (5 ml), se solubilizo en metanol (10 ml) y se evaporo a sequedad proporcionando 3-bromo-6-terc-butoxi-5,6-dihidro-pirrolo[3,4-b]piridin-7-ona como un polvo blanco (45 mg, rendimiento del 72 %).

Etapa 4:

Se solubilizo 3-bromo-6-terc-butoxi-5,6-dihidro-pirrolo[3,4-b]piridin-7-ona (45 mg, 0,16 mmoles, 1 eq) en acido trifluoroacetico (2 ml) y se calento a 100 °C durante 5 min bajo irradiacion de microondas. Entonces, la mezcla se evaporo a sequedad y el residuo se trituro agua (5 ml). El precipitado se filtro y se seco a vacio proporcionando el compuesto esperado como un polvo beis (22 mg, rendimiento del 60 %).

EM: 228,9

P.f.: descompone a 230 °C - 235 °C.

5

10

15

20

25

30

6-Hidroxi-3-(3-isopropil-fenil)-5,6-dihidro-pirrolo[3,4-b]piridin-7-ona

imagen56

Etapa 1:

A una disolucion de 3-bromo-6-terc-butoxi-5,6-dihidro-pirrolo[3,4-b]piridin-7-ona descrita en el ejemplo 39, etapas 1 a 3 (200 mg, 0,7 mmoles, 1 eq) en acetonitrilo (3 ml) se anadieron acido 3-isopropilfenilboronico (150 mg, 0,9 mmoles, 1,3 eq) y una disolucion 2 M de carbonato sodico (3 ml). La mezcla se desgasifico durante 15 min y se anadio trans- diclorobis(trifenilfosfina)paladio (25 mg, 0,035 mmoles, 0,05 eq). La mezcla se calento a 100 °C durante 10 min bajo irradiacion de microondas. Despues de enfriarse, la mezcla se vertio sobre agua (10 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a sequedad. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 50/50) proporcionando 6-terc-butoxi-3-(3-isopropil-fenil)-5,6-dihidro-pirrolo[3,4-b]piridin-7-ona como un polvo blanco (150 mg, rendimiento del 66 %).

Etapa 2:

El compuesto se preparo segun el ejemplo 39, etapa 4. Despues de la trituracion, el polvo se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando diclorometano y metanol (100/0 a 80/20) proporcionando el compuesto esperado como un polvo amarillo (rendimiento del 16 %).

EM: 269,1

P.f.: descompone a 155 °C -160 °C.

Procedimiento general D

imagen57

Etapa 1:

Se solubilizo ester mefflico del acido 4-amino-piridin-2-carboxflico (Producto intermedio clave II) (600 mg, 3,9 mmoles, 1 eq) en piridina (20 ml). Se anadieron dimetilaminopiridina (482 mg, 3,9 mmoles, 1 eq) y cloruro de

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

sulfonilo (1,3 eq) y la mezcla se agito a 60 °C durante 15 h. Despues de enfriarse, el disolvente se evaporo. Se anadio agua (10 ml) y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida proporcionando el compuesto esperado.

Etapa 2:

Se solubilizo el ester mefflico del acido sulfonilamino-piridin-2-carbox^lico (1,0 g, 1 eq) en una mezcla de metanol / agua (17 ml / 1,7 ml) y se anadio hidroxido de litio (2 eq). La mezcla se calento a 65 °C durante 18 h. Despues de enfriarse, se anadio una disolucion 2 M de cloruro de hidrogeno en eter diefflico hasta pH = 1. Entonces, la mezcla se evaporo a sequedad proporcionando el acido correspondiente con rendimiento cuantitativo.

Etapa 3:

A una disolucion de acido sulfonilamino-piridin-2-carboxflico (800 mg, 1 eq) en diclorometano (13 ml) se anadieron HOBT (2 eq), EDCI (2 eq), trietilamina (3 eq) y O-(tetrahidropiran-2-il)-hidroxilamina (2 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 18 h. La reaccion se inactivo con agua (10 ml) y la mezcla se extrajo con diclorometano (3 X 15 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida proporcionando (tetrahidro-piran-2-iloxi)-amida del acido sulfonilamino-piridin-2-carboxflico.

Etapa 4:

A una disolucion de (tetrahidro-piran-2-iloxi)-amida del acido sulfonilamino-piridin-2-carboxflico (1 eq) en metanol (10 ml) se anadio una disolucion 2 M de cloruro de hidrogeno en eter diefflico (2 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 h. El precipitado se filtro, se aclaro con eter diefflico y se seco a vado proporcionando la sal de clorhidrato de hidroxiamida del acido sulfonilamino-piridin-2-carboxflico.

Ejemplo 41:

Hidroxiamida del acido 4-fenilmetanosulfonilamino-piridin-2-carboxflico

imagen58

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de fenilmetanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 308,1

P.f.: 187 °C-192 °C

Ejemplo 42:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-(4-fluoro-fenilmetanosulfonilamino)-piridin-2-carboxflico

imagen59

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de (4-fluoro-fenil)-metanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 326,1

P.f.: 183 °C-188 °C

5

10

15

20

25

30

35

imagen60

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de (3-fluoro-fenil)-metanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 326,1

P.f.: 195 °C - 200 °C Ejemplo 44:

Clorhidrato de hidroxiamida del acido 4-(2-fluorofemlmetanosulfomlamino)-pindin-2-carboxflico

imagen61

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de 2-fluorofenilmetanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 326,1

P.f.: 209 °C - 216 °C Ejemplo 45:

Clorhidrato de hidroxiamida del acido 4-(3-clorofenilmetanosulfonilamino)-piridin-2-carboxflico

imagen62

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de 3-clorofenil-metanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 342,1

P.f.: 198 °C - 204 °C

Ejemplo 46:

Clorhidrato de hidroxiamida del acido 4-(2-cloro-fenilmetanosulfonilamino)-piridin-2-carboxflico

imagen63

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de 2-clorofenil-metanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 342,1

P.f.: 215 °C-220 °C 5

Ejemplo 47:

Clorhidrato de hidroxiamida del acido 4-(4-cloro-fenilmetanosulfonilamino)-piridin-2-carbox^lico

10

imagen64

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de 4-clorofenil-metanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 342,1

15 P.f.: 210°C-230°C

Ejemplo 48:

Clorhidrato de hidroxi-amida del acido 4-(3,5-diclorofenilmetanosulfonilamino)-piridin-2-carboxflico

20

imagen65

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de 3,5-diclorofenil-metanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

25 EM: 376,2

P.f.: 203 °C - 205 °C

Ejemplo 49:

30 Clorhidrato de hidroxi-amida del acido 4-(3,4-dicloro-fenilmetanosulfonilamino)-piridin-2-carboxflico

imagen66

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de 3,4-diclorofenil-metanosulfonilo. El 35 compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 376,2

P.f.: 228 °C - 238 °C

5

10

15

20

25

30

35

imagen67

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de 2,3-diclorofenil-metanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 376,2

P.f.: 210 °C - 218 °C

Ejemplo 51:

Clorhidrato de hidroxiamida del acido 4-(3-bromofemlmetanosulfonilamino)-pindin-2-carboxflico

imagen68

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de 3-bromofenil-metanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 386,3

P.f.: 197 °C - 205 °C

Ejemplo 52:

Clorhidrato de hidroxiamida del acido 4-(3-trifluorometilfenilmetanosulfonilamino)-piridin-2-carboxflico

imagen69

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de 3-trifluorometil-fenilmetanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 376,1

P.f.: 201 °C - 204 °C Ejemplo 53:

Clorhidrato de hidroxiamida del acido 4-(quinolin-8-ilmetanosulfonilamino)-piridin-2-carboxflico

imagen70

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general D usando cloruro de quinolin-8-il-metanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

5 EM: 359,0

P.f.: 220 °C - 228 °C

Ejemplo 54:

10 Clorhidrato de hidroxiamida del acido 4-(difenilmetanosulfonilamino)-piridin-2-carbox^lico

imagen71

Debido a que el cloruro de difenilmetanosulfonilo no esta comercialmente disponible, este compuesto se obtuvo 15 segun una version modificada del procedimiento general D.

imagen72

Etapa 5:

20 A una suspension de benzofenona-hidrazona (5,0 g, 25,5 mmoles, 1 eq) y sulfato de sodio (5,4 g, 38,2 mmoles, 1,5 eq) en eter dietilico (80 ml) se anadio una disolucion saturada de hidroxido potasico en etanol (2 ml). Se anadio oxido de mercurio (13,8 g, 63,7 mmoles, 2,5 eq) y la solucion roja obtenida se agito a temperatura ambiente durante

5

10

15

20

25

30

1,5 h. El solido obtenido se filtro y el filtrado se evaporo a sequedad. El residuo se disolvio con hexano (40 ml) y la disolucion puso en el refrigerador durante la noche. Los cristales blancos obtenidos se filtraron y el filtrado se concentro proporcionando difenildiazometano como un aceite purpura parcialmente cristalizado (4,0 g, rendimiento del 80 %).

Etapa 1:

A 0 °C, en una solucion de ester metilico del acido 4-amino-piridin-2-carbox^lico (Producto intermedio clave II) (1,2 g, 7,8 mmoles, 2 eq) y difenildiazometano (758 mg, 3,9 mmoles, 1 eq) en tetrahidrofurano (40 ml), se burbujeo dioxido de azufre hasta que desaparecio el color rojo. La disolucion se agito entonces de 0 °C hasta temperatura ambiente durante 3 dfas. La mezcla se filtro y el filtrado se evaporo. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (0/100 a 100/0) proporcionando el ester metflico del acido 4- (difenil-metanosulfonilamino)-piridin-2-carboxflico como un polvo amarillo palido (665 mg, rendimiento del 45 %).

Etapa 2 a etapa 4:

Estas etapas fueron similares al procedimiento general D , etapas 2 a 4.

El compuesto esperado final se aislo como un polvo beis.

EM: 384,0

P.f.: 162 °C -168 °C

Ejemplo 55:

Hidroxiamida del acido 4-(metil-fenilmetanosulfonil-amino)-piridin-2-carboxflico

imagen73

Etapa 1:

A una disolucion de ester metflico del acido 4-fenilmetanosulfonilamino-piridin-2-carboxflico preparada segun el procedimiento general D etapa 1 (500 mg, 1,6 mmoles, 1 eq) en dimetilformamida (10 ml) se anadieron carbonato de

5

10

15

20

25

30

35

40

potasio (676 mg, 4,9 mmoles, 3 eq) y yoduro de metilo (0,2 ml, 3,3 mmoles, 2 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 h. Entonces, la mezcla se vertio sobre agua (10 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 15 ml). Las fases organicas se lavaron con salmuera (3 x 15 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a sequedad proporcionando el ester metilico del acido 4-(metil-fenilmetanosulfonil-amino)-piridin-2- carboxflico como un aceite naranja (400 mg, rendimiento del 77 %).

Etapas 2 a 4:

Estos procedimientos fueron similares al procedimiento general D, etapas 2 a 4.

El compuesto esperado se aislo como una espuma naranja palida.

EM: 322,1

Ejemplo 56:

Hidroxiamida del acido 4-benzoilaminopiridin-2-carboxflico

imagen74

Etapa 1:

Se solubilizo ester metflico del acido 4-amino-piridin-2-carboxflico (Producto intermedio clave II) (400 mg, 2,6 mmoles, 1 eq) en piridina (10 ml). Se anadieron dimetilaminopiridina (cantidad catalftica) y cloruro de benzofto (366 |jl, 3,15 mmoles, 1,2 eq) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 18 h. Entonces, el disolvente se evaporo, se anadio agua (10 ml) y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 50/50) proporcionando el ester metflico del acido 4-benzoilamino-piridin-2-carboxflico como una espuma blanca (654 mg, rendimiento del 97 %).

Etapa 2:

A una disolucion de ester metflico del acido 4-benzoilamino-piridin-2-carboxflico (100 mg, 0,4 mmoles, 1 eq) en una mezcla de metanol (2 ml) y tetrahidrofurano (2 ml) se anadieron cianuro de potasio (cantidad catalftica) y una disolucion acuosa al 50% de hidroxilamina (1,6 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 4 dfas. Entonces se anadieron una disolucion saturada de acido citrico (10 ml) y agua (10 ml) y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se recogio en acetato de etilo (5 ml) y diclorometano (5 ml) y se sonico. El solido se filtro y se seco proporcionando el compuesto esperado como un polvo blanco (78 mg, rendimiento del 78 %).

EM: 258,0

P.f.: 175 °C-184 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

Procedimiento general E

imagen75

Este procedimiento fue similar al procedimiento general D, etapas 1 y 4. Ejemplo 57:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-fenilmetanosulfonilamino-piridin-2-carboxflico

imagen76

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general E usando cloruro de fenilmetanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 398,2

P.f.: 190 °C-195 °C

Ejemplo 58:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-bencenosulfonilamino-piridin-2-carboxflico

imagen77

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general E usando cloruro de bencenosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un aceite rosa palido.

EM: 384,2

P.f.: 175 °C-180 °C

Ejemplo 59:

Clorhidrato de bencil-hidroxi-amida del acido 4-(4-fluoro-fenilmetanosulfonilamino)-piridin-2-carboxflico

imagen78

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general E usando cloruro de 4-fluorofenil-metanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 416,3

P.f.: 178 °C-183 °C

5

10

15

20

25

30

35

imagen79

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general E usando cloruro de 3-fluorofenil-metanosulfonilo. El compuesto esperado se obtuvo como un polvo beis.

EM: 416,2

P.f.: 111 °C-113 °C

Ejemplo 61:

Clorhidrato de bencilhidroxi-amida del acido 4-(3-dorofemlmetanosulfonilamino)-pindin-2-carboxflico

imagen80

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general E usando cloruro de 3-clorofenil-metanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 432,3

P.f.: 115 °C-125 °C

Ejemplo 62:

Clorhidrato de bencilhidroxiamida del acido 4-(3,5-diclorofenilmetanosulfonilamino)-piridin-2-carboxflico

imagen81

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general E usando cloruro de 3,5-diclorofenil-metanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 466,3

P.f.: 189 °C -194 °C

Ejemplo 63:

Clorhidrato de bencilhidroxiamida del acido 4-(3-trifluorometilfenilmetanosulfonilamino)-piridin-2-carboxilico

imagen82

5

10

15

20

25

30

35

40

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general E usando cloruro de 3-trifluorometil-fenilmetanosulfonilo. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 466,2

P.f.: 178 °C -182 °C

Procedimiento general F

imagen83

Etapa 1:

A una solucion desgasificada de bencil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amida del acido 4-bromo-piridin-2-carbox^lico (Producto intermedio clave III) (150 mg, 0,4 mmoles, 1 eq) en una mezcla de acetonitrilo (3 ml) y disolucion 1 M de carbonato sodico (3 ml) se anadieron acido boronico (0,5 mmoles, 1,3 eq) y trans-diclorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (13 mg, 0,02 mmoles, 0,05 eq). La mezcla se calento bajo irradiacion de microondas a 100 °C durante 10 min. Despues de enfriarse, la mezcla se vertio sobre agua (5 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida proporcionando el compuesto esperado.

Etapa 2:

El compuesto de la etapa 1 (1 eq) se solubilizo en metanol (10 ml) y se anadio p-toluenosulfonato de piridinio (1 eq). La mezcla se calento a 65 °C durante 5 h y se evaporo a sequedad. El residuo se trituro en agua, se filtro, se aclaro con agua y se seco proporcionando el compuesto esperado.

Ejemplo 64:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-fenil-piridin-2-carboxilico

imagen84

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando acido fenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo rosa palido.

EM: 304,9

P.f.: 160 °C -165 °C

Ejemplo 65:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-(4-cloro-fenil)-piridin-2-carboxflico

imagen85

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando acido 4-clorofenil-boronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

5

10

15

20

25

30

35

EM: 339,2

P.f.: 190 °C -195 °C

Ejemplo 66:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-(3,4-dicloro-fenil)-piridin-2-carbox^lico

imagen86

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando acido 3,4-diclorofenil-boronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo naranja palido.

EM: 373,2

P.f.: 125 °C-130 °C

Ejemplo 67:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-(3-carbamoil-fenil)-pindin-2-carboxflico

imagen87

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando acido 3-carbamoil-fenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 348,1

P.f.: 158 °C-162 °C

Ejemplo 68:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-(4-carbamoil-fenil)-piridin-2-carboxflico

imagen88

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando acido 4-carbamoil-fenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo palido.

EM: 348,2

P.f.: 155 °C -160 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen89

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando acido 3-metilcarbamoil-fenilbor6nico. El compuesto esperado se aislo como una espuma amarilla palida.

EM: 362,2

Ejemplo 70:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-(3-dimetilcarbamoil-fenil)-pindin-2-carboxflico

imagen90

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando acido 3-dimetil-carbamoil-fenilboronico. El compuesto esperado se aislo como una espuma amarilla. EM: 376,2.

Ejemplo 71:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-[3-(2-dimetilamino-etilcarbamoil)-fenil]-piridin-2-carboxflico

imagen91

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando acido 3-(2-(dimetil- amino)etilcarbamoil)fenilboronico. El compuesto esperado se aislo como una espuma blanca.

EM: 419,3 P.f.: 65 °C - 70 °C

Ejemplo 72:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-(3-dimetilsulfamoil-fenil)-piridin-2-carboxflico

imagen92

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando acido 3-dimetilsulfamoil-fenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo.

EM: 412,2

P.f.: 110 °C -115 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

45

imagen93

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando acido 3-hidroximetil-fenilbor6nico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 335,2

P.f.: 150 °C-155 °C

Ejemplo 74:

Bencilhidroxiamida del acido 4-ciclohex-1-enil-piridin-2-carbox^lico

imagen94

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando ester de pinacol del acido ciclohexen-1- ilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 309,2

P.f.: 118 °C-122 °C

Ejemplo 75:

Bencilhidroxi-amida del acido 4-ciclohexilpiridin-2-carboxflico

imagen95

Se solubilizo la bencilhidroxiamida del acido 4-ciclohex-1-enil-piridin-2-carboxflico (100 mg, 0,3 mmoles, 1 eq) obtenida en el ejemplo 74 en etanol (10 ml) y se anadio 10 % en peso de paladio sobre carbon. La mezcla se agito a temperatura ambiente sobre atmosfera de hidrogeno durante 30 min. Entonces, la mezcla se filtro sobre una almohadilla corta de Celite y se aclaro con etanol y diclorometano. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 70/30) proporcionando el compuesto esperado como un polvo blanco (72 mg, rendimiento del 72 %).

EM: 311,2

P.f.: 106 °C-110°C

Ejemplo 76:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-(1,4-dioxa-espiro[4.5]dec-7-en-8-il)-piridin-2-carboxflico

imagen96

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando ester de pinacol del acido 1,4-dioxa- espiro[4.5]dec-7-en-8-boronico. El compuesto esperado se aislo como una espuma amarilla.

EM: 367,2 Ejemplo 77:

imagen97

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando ester de pinacol del acido 1-metil-1,2,3,6- 10 tetrahidropiridin-4-boronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo claro.

EM: 324,2

P.f.: 135 °C -155 °C

Ejemplo 78:

15

Bencil-hidroxi-amida del acido 2',2',6',6'-tetrametil-1',2',3',6'-tetrahidro-[4,4']bipmdiml-2-carboxflico

imagen98

20 Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando ester de pinacol del acido 2,2,6,6-tetrametil- 1,2,3,6-tetrahidro-4-piridinbor6nico. El compuesto esperado se aislo como un aceite cristalizado amarillo.

EM: 366,3

Ejemplo 79:

25 ,

Ester terc-butilico del acido 2'-(bencil-hidroxi-carbamoil)-3,6-dihidro-2H-[4,4']bipiridinil-1-carboxflico

imagen99

30 Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando ester de pinacol del acido N-Boc-1,2,3,6- tetrahidropiridin-4-boronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 410,3 P.f.: 125 °C

5

10

15

20

25

30

35

imagen100

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando ester terc-butilico del acido 5-(4,4,5,5- tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-3,4-dihidro-2H-piridin-1-carbox^lico (Producto intermedio clave V). El compuesto esperado se aislo como una espuma amarilla.

EM: 410,3

Ejemplo 81:

Ester terc-butilico del acido 2'-(bencilhidroxicarbamoil)-5,6-dihidro-2H-[3,4']bipiridinil-1-carboxilico

imagen101

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando ester terc-butilico del acido 5-(4,4,5,5- tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-3,6-dihidro-2H-piridin-1-carboxflico (Producto intermedio clave VI). El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo.

EM: 410,3

P.f.: 128 °C-134 °C

Ejemplo 82:

Ester terc-butilico del acido 3-[2-(bencilhidroxicarbamoil)-piridin-4-il]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-2-eno-8-carboxflico

imagen102

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F usando 8-boc-3-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan- 2-il)-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-2-eno. El compuesto esperado se aislo como un aceite amarillo.

EM: 436,3

Procedimiento general G

imagen103

5

10

15

20

25

30

35

40

El compuesto obtenido del procedimiento general F (1 eq) se solubilizo en diclorometano (10 ml) y se anadio gota a gota una disolucion 2 M de acido clorhudrico en eter dietilico (16 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 h. El precipitado se filtro y se trituro con diclorometano y eter dietflico proporcionando el compuesto esperado (rendimiento del 60 %).

Ejemplo 83:

Diclorhidrato de bencil-hidroxi-amida del acido 1',2',3',6'-tetrahidro-[4,4']bipiridinil-2-carboxflico

imagen104

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general G usando el ester terc-butilico del acido 2'-(bencil-hidroxi- carbamoil)-3,6-dihidro-2H-[4,4']bipiridinil-1-carbox^lico descrito en el ejemplo 79. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 310,1

P.f.: 140 °C-150 °C

Ejemplo 84:

Clorhidrato de bencilhidroxi-amida del acido 1,2,5,6-tetrahidro-[3,4']bipiridinil-2'-carboxflico

imagen105

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general G usando el ester terc-butflico del acido 2'-(bencilhidroxi- carbamoil)-5,6-dihidro-2H-[3,4']bipiridinil-1-carboxflico descrito en el ejemplo 81. El compuesto esperado se aislo como un aceite cristalizado amarillo.

EM: 310,2

Ejemplo 85:

Bencilhidroxiamida del acido 4-(8-azabiciclo[3.2.1]oct-2-en-3-il)-piridin-2-carboxflico

imagen106

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general G usando el ester terc-butflico del acido 3-[2- (bencilhidroxicarbamoil)-piridin-4-il]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-2-eno-8-carboxflico descrito en el ejemplo 82. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo.

EM: 336,1

P.f.: 95 °C-100 °C

5

10

15

20

25

30

Procedimiento general H

imagen107

Se solubilizo el compuesto obtenido a partir del procedimiento general G (1 eq) en etanol (10 ml) y se anadio 10 % en peso de paladio sobre carbon. La mezcla se agito a temperature ambiente sobre atmosfera de hidrogeno durante 30 min. Entonces, la mezcla se filtro sobre una almohadilla corta de Celite y el residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando acetato de etilo y metanol (100/0 a 80/20) proporcionando el compuesto esperado.

Ejemplo 86:

Bencilhidroxiamida del acido 1,2,3,4,5,6-hexahidro-[3,4']bipiridinil-2'-carbox^lico

imagen108

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general H usando el clorhidrato de bencilhidroxi-amida del acido 1,2,5,6-tetrahidro-[3,4']bipiridinil-2'-carboxilico descrito en el ejemplo 84. El compuesto esperado se aislo como un aceite cristalizado amarillo.

EM: 312,2

Ejemplo 87:

Ester terc-butflico del acido 2'-(bencil-hidroxi-carbamoil)-3,4,5,6-tetrahidro-2H-[4,4']bipiridinil-1-carboxflico

imagen109

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general F, etapa 1, a partir del Producto intermedio clave III y ester de pinacol del acido N-Boc-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-boronico.

5

10

15

20

25

30

Etapa 2:

Se solubilizo el compuesto de la etapa 1 (485 mg, 1 mmoles, 1 eq) en etanol (20 ml) y se anadio 10 % en peso de paladio sobre carbon. La mezcla se agito a temperatura ambiente sobre atmosfera de hidrogeno durante 1,5 h. Entonces, la mezcla se filtro sobre una almohadilla corta de Celite y el residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 40/60) proporcionando el ester terc-bufflico del acido 2'- [bencil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-carbamoil]-3,4,5,6-tetrahidro-2H-[4,4']bipiridinil-1-carbox^lico como un aceite incoloro (320 mg, rendimiento del 66 %).

Etapa 3:

Se solubilizo el compuesto de la etapa 2 (360 mg, 0,6 mmoles, 1 eq) en metanol (20 ml) y se anadio p- toluenosulfonato de piridinio (182 mg, 0,6 mmoles, 1 eq). La mezcla se calento a 65 °C durante 18 h y se evaporo a sequedad. Se anadio acetato de etilo (10 ml) y la fase organica se lavo con una disolucion saturada de bicarbonato sodico (3 x 10 ml), se seco sobre sulfato de magnesio, se filtro y se evaporo a vacfo. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (80/20 a 30/70) proporcionando el compuesto esperado como un aceite naranja (230 mg, rendimiento del 77 %).

EM: 412,3

Ejemplo 88:

Clorhidrato de bencil-hidroxi-amida del acido 1',2',3',4',5',6'-hexahidro-[4,4']bipiridinil-2-carboxflico

imagen110

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general G usando el ester terc-bufflico del acido 2'-(bencil-hidroxi- carbamoil)-3,4,5,6-tetrahidro-2H-[4,4']bipiridinil-1-carboxflico descrito en el ejemplo 87. El compuesto esperado se aislo como una espuma blanca.

EM: 312,1

Ejemplo 89:

(4-Fluoro-bencil)-hidroxi-amida del acido 4-fenil-piridin-2-carboxflico

5

10

15

20

25

30

35

imagen111

Se anadio cloruro de oxalilo (0,2 ml, 2,1 mmoles, 1,3 eq) a una solucion de acido 4-bromo-pindin-2-carboxflico (334 mg, 1,6 mmoles, 1 eq) en diclorometano (15 ml). La solucion se enfrio hasta 0°C y se anadio gota a gota dimetilformamida (varias gotas). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 30 min y se evaporo a sequedad. El residuo se diluyo en diclorometano (15 ml) y se anadio N-(4-fluoro-bencil)-O-(tetrahidropiran-2-il)- hidroxilamina (560 mg, 2,5 mmoles, 1,5 eq). Se anadio gota a gota trietilamina (0,7 ml, 4,9 mmoles, 3 eq) a 0 °C y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 18 h y se absorbio sobre gel de sflice para purificarse por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 70/30) proporcionando la (4-fluoro-bencil)- (tetrahidro-piran-2-iloxi)-amida del acido 4-bromo-piridin-2-carboxflico como un aceite incoloro (230 mg, rendimiento del 34 %).

Etapa 2:

A una solucion desgasificada de la (4-fluoro-bencil)-(tetrahidropiran-2-iloxi)-amida del acido 4-bromo-piridin-2- carboxflico (230 mg, 0,6 mmoles, 1 eq) en una mezcla de acetonitrilo (4 ml) y disolucion 1 M de carbonato sodico (4 ml) se anadieron acido fenilboronico (89 mg, 0,7 mmoles, 1,3 eq) y trans-diclorobis(trifenilfosfina)paladio (20 mg,

O, 03 mmoles, 0,05 eq). La mezcla se calento bajo irradiacion de microondas a 100 °C durante 10 min. Despues de enfriarse, la mezcla se vertio sobre agua (5 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 50/50) proporcionando la (4-fluoro-bencil)- (tetrahidropiran-2-iloxi)-amida del acido 4-fenil-piridin-2-carboxilico como un aceite incoloro (130 mg, rendimiento del 57 %).

Etapa 3:

Se solubilizo la (4-fluoro-bencil)-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amida del acido 4-fenil-piridin-2-carboxnico (130 mg, 0,3 mmoles, 1 eq) en metanol (5 ml) y se anadio p-toluenosulfonato de piridinio (97 mg, 0,4 mmoles, 1,2 eq). La mezcla se calento a 65 °C durante 5 h. El precipitado obtenido se filtro y se lavo con un mmimo de metanol proporcionando el compuesto esperado como un polvo blanco (13 mg, rendimiento del 13 %).

EM: 323,1

P. f.: 135 °C-140 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen112

A 0 °C, se anadio cloruro de oxalilo (0,2 ml, 2,3 mmoles, 1,5 eq) a una solucion de acido 5-fenilpiridin-2-carboxilico (300 mg, 1,5 mmoles, 1 eq) en diclorometano (10 ml). La mezcla se agito a temperature ambiente durante 30 min y se evaporo a sequedad. El residuo se diluyo en diclorometano (10 ml) y se anadieron clorhidrato de N-bencil- hidroxilamina (361 mg, 2,3 mmoles, 1,5 eq) y trietilamina (0,6 ml, 4,5 mmoles, 3 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 18 h y se absorbio sobre gel de silice para purificarse por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 0/100) proporcionando el compuesto esperado como un polvo beis (60 mg, rendimiento del 13 %).

EM: 305,2

P.f.: 145 °C-150 °C

Ejemplo 91:

Hidroxiamida del acido 5-fenil-piridin-2-carboxilico

imagen113

Etapa 1:

A una disolucion de acido 5-fenil-piridin-2-carboxilico (130 mg, 0,6 mmoles, 1 eq) en diclorometano (6 ml) se anadieron HOBT (176 mg, 1,3 mmoles, 2 eq), EDCI (249 mg, 1,3 mmoles, 2 eq), trietilamina (0,3 ml, 1,8 mmoles, 3 eq) y O-(tetrahidro-piran-2-il)-hidroxilamina (153 mg, 1,3 mmoles, 2 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 18 h y se absorbio sobre gel de sflice para purificarse por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 50/50) proporcionando la (tetrahidropiran-2-iloxi)-amida del acido 5-fenil-piridin-2-carboxnico como un aceite incoloro (160 mg, rendimiento del 83 %).

Etapa 2:

A una disolucion de (tetrahidro-piran-2-iloxi)-amida del acido 5-fenil-piridin-2-carboxflico (160 mg, 0,54 mmoles, 1 eq) en dioxano (5 ml) se anadio una disolucion 4 N de cloruro de hidrogeno en dioxano (0,5 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 h y se evaporo a sequedad. El residuo se diluyo en metanol (5 ml) y se anadio amoniaco 7 N en metanol (0,5 ml). La mezcla se evaporo y el residuo se trituro en agua proporcionando el compuesto esperado como un polvo rosa palido (90 mg, rendimiento del 78 %).

EM: 215,1

P.f.: 175 °C -180 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

45

Procedimiento general I

imagen114

Etapa 1:

A una disolucion desgasificada de bencil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amida del acido 4-bromo-piridin-2-carboxflico (Producto intermedio clave III) (500 mg, 1,3 mmoles, 1 eq) en tolueno (10 ml) se anadieron carbonato de cesio (1,3 g, 3,8 mmoles, 3 eq), amina (1,66 mmoles, 1,3 eq), BINAp (40 mg, 0,06 mmoles, 0,05 eq) y acetato de paladio (15 mg, 0,06 mmoles, 0,05 eq). La mezcla se calento en un tubo cerrado a 100 °C durante 20 h. Despues de enfriarse, la mezcla se vertio sobre agua (10 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida proporcionando el compuesto esperado.

Etapa 2:

El compuesto de la etapa 1 (1 eq) se solubilizo en metanol (10 ml) y se anadio p-toluenosulfonato de piridinio (1 eq). La mezcla se calento a 65 °C durante 20 h. Despues de enfriarse, se anadio una disolucion 7 N de amoniaco en metanol (10 ml) y la mezcla se evaporo a sequedad. El residuo se diluyo en diclorometano (10 ml) y la fase organica se lavo con agua (3 x 10 ml), se seco sobre sulfato de magnesio, se filtro y se evaporo a vado. El compuesto en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida proporcionando el compuesto esperado.

Ejemplo 92:

Bencil-hidroxi-amida del acido 3,3-difluoro-3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,4']bipiridinil-2'-carboxflico

imagen115

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general I usando clorhidrato de 3,3-difluoropiperidina. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo palido.

EM: 348,1

P.f.: 140 °C-145 °C

Ejemplo 93:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4,4-difluoro-3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,4']bipiridinil-2'-carboxflico

imagen116

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general I usando clorhidrato de 4,4-difluoropiperidina, seguido por la adicion de disolucion 2 M de cloruro de hidrogeno en eter diefflico. Despues de agitar 2 h a temperatura ambiente, filtracion y trituracion con eter diefflico, el compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 348,2 P.f.: 90 °C - 95 °C

5

10

15

20

25

30

35

imagen117

Este compuesto se obtuvo segun una version modificada del procedimiento general I usando clorhidrato de 4- fluoropiperidina. Durante la etapa 2, en lugar de usar p-toluenosulfonato de piridinio, se anadio disolucion 2 M de cloruro de hidrogeno en eter dietflico (20 eq) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 h. Entonces, el precipitado se filtro y se trituro con diclorometano y eter dietflico proporcionando el compuesto esperado como una espuma amarilla clara.

EM: 330,1

Ejemplo 95:

Clorhidrato de bencil-hidroxi-amida del acido 4-(3,3-difluoro-pirrolidin-1-il)-piridin-2-carboxflico

imagen118

Este compuesto se obtuvo segun una version modificada del procedimiento general I usando clorhidrato de 3,3- difluoropirrolidina. Durante la etapa 2, en lugar de usar p-toluenosulfonato de piridinio, se anadio disolucion 2 M de cloruro de hidrogeno en eter dietflico (20 eq) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 h. Entonces, el precipitado se filtro y se trituro con diclorometano y eter dietflico proporcionando el compuesto esperado como un polvo beis.

EM: 334,1

P.f.: 162 °C-166 °C Ejemplo 96:

Ester terc-butflico del acido [2'-(bencil-hidroxi-carbamoil)-3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,4']bipiridinil-4-il]-carbamico

imagen119

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general I usando 4-N-BOC-aminopiperidina. El compuesto esperado se aislo como una espuma blanca.

EM: 427,3

P.f.: 135 °C-140 °C

5

10

15

20

25

30

35

imagen120

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general G usando el ester terc-butilico del acido [2'-(bencil- hidroxi-carbamoil)-3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,4']bipiridinil-4-il]-carbamico descrito en el ejemplo 96. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 327,2

P.f.: descompone a 160 °C -165 °C

Ejemplo 98:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-dimetilamino-3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,4']bipiridiml-2'-carboxflico

imagen121

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general I usando dimetil-piperidin-4-il-amina. El compuesto esperado se aislo como un aceite amarillo.

EM: 355,2

Ejemplo 99:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-pirrolidin-1-il-3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,4']bipiridinil-2'-carboxflico

imagen122

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general I usando 4-(1-pirrolidinil)piperidina. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo palido.

EM: 381,2

P.f.: 135 °C -140 °C

Ejemplo 100:

Bencil-hidroxi-amida del acido 3,4,5,6,3',4',5',6'-octahidro-2H,2'H-[1,4';1',4"]terpiridin-2"-carboxflico

imagen123

5

10

15

20

25

30

35

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general I usando 4 N-(4-piperidino)piperidina. El compuesto esperado se aislo como un aceite azul.

EM: 395,2

Ejemplo 101:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-(1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]dec-8-il)-piridin-2-carbox^lico

imagen124

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general I usando 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decano. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo.

EM: 370,2

P.f.: 98 °C-102 °C

Ejemplo 102:

Ester terc-butilico del acido 4-[2-(bencil-hidroxi-carbamoil)-piridin-4-il]-piperazina-1-carboxflico

imagen125

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general I usando N-BOC-piperazina. El compuesto esperado se aislo como una espuma amarilla.

EM: 413,3

Ejemplo 103:

Clorhidrato de bencil-hidroxi-amida del acido 4-piperazin-1-il-piridin-2-carboxflico

imagen126

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general G usando el ester terc-butflico del acido 4-[2-(bencil- hidroxi-carbamoil)-piridin-4-il]-piperazina-1-carboxflico descrito en el ejemplo 102. El compuesto esperado se aislo como una espuma amarilla.

EM: 313,2

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen127

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general I usando N-metil-piperazina. El compuesto esperado se aislo como un aceite amarillo.

EM: 327,2

Ejemplo 105:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-morfolin-4-il-pindin-2-carboxflico

imagen128

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general I usando morfolina. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo palido.

EM: 314,1

P.f.: 105 °C-110 °C

Ejemplo 106:

Clorhidrato de bencil-hidroxi-amida del acido 4-morfolin-4-il-piridin-2-carboxflico

imagen129

Se solubilizo la bencil-hidroxi-amida del acido 4-morfolin-4-il-piridin-2-carboxflico descrita en el ejemplo 105 en diclorometano (10 ml) y se anadio disolucion 2 M de cloruro de hidrogeno en eter dietflico (1,2 eq). La mezcla se agito a ambiente durante 3 h y se evaporo a sequedad proporcionando el compuesto esperado como un polvo amarillo palido.

EM: 314,1

P.f.: 185 °C-190 °C

Ejemplo 107:

Bencil-hidroxi-amida del acido 4-((2R,6S)-2,6-dimetil-morfolin-4-il)-piridin-2-carboxflico

imagen130

Este compuesto se obtuvo segun el procedimiento general I usando (2R,6S)-2,6-dimetil-morfolina. El compuesto esperado se aislo como un polvo naranja.

EM: 342,2

P.f.: 180 °C-185 °C

5

10

15

20

25

30

35

Hidroxiamida del acido 4-bendlamino-pindin-2-carboxflico

imagen131

Etapa 1:

A una disolucion de acido 4-bromo-pindin-2-carboxflico (1,0 g, 4,9 mmoles, 1 eq) en diclorometano (40 ml) se anadieron HOBT (1,3 g, 9,9 mmoles, 2 eq), EDCI (1,9 g, 9,9 mmoles, 2 eq), trietilamina (2,1 ml, 14,8 mmoles, 3 eq) y clorhidrato de O-terc-butilhidroxilamina (1,2 g, 9,9 mmoles, 2 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 18 h y se vertio sobre agua (20 ml). La fase organica se extrajo con diclorometano (3 x 20 ml), se seco sobre sulfato de magnesio, se filtro y se evaporo a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 50/50) proporcionando la terc-butoxi-amida del acido 4-bromo-piridin- 2-carboxflico como un polvo blanco (1,0 g, rendimiento del 74 %).

Etapa 2:

En un tubo cerrado, se solubilizo terc-butoxi-amida del acido 4-bromo-piridin-2-carboxflico (410 mg, 1,5 mmoles, 1 eq) en etanol (10 ml) y se anadio bencilamina (161 mg, 3 mmoles, 2 eq). La mezcla se calento a 180 °C durante 20 h. Despues de enfriarse, la mezcla se absorbio sobre gel de sflice para purificarse por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 0/100) proporcionando la terc-butoxi-amida del acido 4-bencilamino- piridin-2-carboxilico como un aceite incoloro (57 mg, rendimiento del 13 %).

Etapa 3:

Se calentaron terc-butoxi-amida del acido 4-bencilamino-piridin-2-carboxflico (57 mg, 0,19 mmoles, 1 eq) y acido trifluoroacetico (3 ml) bajo irradiacion de microondas a 100 °C durante 10 min. Despues de enfriarse, la mezcla se evaporo a sequedad. El residuo se solubilizo en diclorometano (5 ml) y se anadieron algunas gotas de solucion de hidroxido de amonio. La mezcla se absorbio sobre gel de silice para purificarse por cromatograffa ultrarrapida usando diclorometano y metanol (100/0 a 85/15) proporcionando el compuesto esperado como un aceite incoloro (15 mg, rendimiento del 32 %).

EM: 244,1

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen132

Etapa 1:

A una disolucion desgasificada de ester metilico del acido 4-bromo-pindin-2-carboxflico (650 mg, 3,0 mmoles, 1 eq) en tolueno (15 ml) se anadieron carbonato de cesio (1,9 g, 6,0 mmoles, 2 eq), N-metilbencilamina (0,5 ml, 3,9 mmoles, 1,3 eq), BlNAP (93 mg, 0,15 mmoles, 0,05 eq) y acetato de paladio (34 mg, 0,15 mmoles, 0,05 eq). La mezcla se calento en un tubo cerrado a 100 °C durante 20 h. Despues de enfriarse, la mezcla se vertio sobre agua (10 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando diclorometano y metanol (100/0 a 97/3) proporcionando ester metflico del acido 4-(bencil-metil-amino)-piridin-2-carboxflico como un aceite amarillo (230 mg, rendimiento del 30 %).

Etapa 2:

Se solubilizo ester metflico del acido 4-(bencil-metil-amino)-piridin-2-carboxflico (230 mg, 0,9 mmoles, 1 eq) en una mezcla de metanol / agua (6 ml / 1 ml) y se anadio hidroxido de litio (75 mg, 1,8 mmoles, 2 eq). La mezcla se calento a 80 °C durante 3 h. Despues de enfriarse, se anadio una disolucion 1 M de cloruro de hidrogeno en eter dietilico (1,8 ml, 1,8 mmoles, 2 eq). Entonces, la mezcla se evaporo a sequedad proporcionando acido 4-(bencil-metil- amino)-piridin-2-carboxflico con rendimiento cuantitativo.

Etapa 3:

Se anadio gota a gota cloruro de oxalilo (0,12 ml, 1,3 mmoles, 1,5 eq) a una disolucion de acido 4-(bencil-metil- amino)-piridin-2-carboxflico (0,9 mmoles, 1 eq) en diclorometano (10 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 15 min y se evaporo a sequedad. El residuo se diluyo en diclorometano (10 ml) y se anadieron trietilamina (0,38 ml, 2,7 mmoles, 3 eq) y clorhidrato de N-bencilhidroxilamina (215 mg, 1,3 mmoles, 1,5 eq). Despues de agitar a temperatura ambiente durante 20 h, la mezcla se absorbio sobre gel de silice para purificarse usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 40/60). El compuesto esperado se obtuvo como un aceite amarillo (85 mg, rendimiento del 27 %).

EM: 348,2

Ejemplo 110:

Hidroxiamida del acido 4-morfolin-4-il-piridin-2-carboxilico

imagen133

5

10

15

20

25

30

35

imagen134

Se anadio gota a gota cloruro de oxalilo (0,11 ml, 1,3 mmoles, 1,3 eq) a una disolucion de clorhidrato del acido 4- morfolin-4-il-piridin-2-carboxilico (240 mg, 1,0 mmol, 1 eq) en diclorometano (10 ml). A 0 °C, se anadio gota a gota dimetilformamida (2-3 gotas) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 15 min y se evaporo a sequedad. El residuo se diluyo en diclorometano (10 ml) y se anadieron trietilamina (0,41 ml, 2,9 mmoles, 3 eq) y clorhidrato de O-terc-butilhidroxilamina (185 mg, 1,5 mmoles, 1,5 eq). Despues de agitar a temperatura ambiente durante 20 h, la mezcla se absorbio sobre gel de sflice para purificarse usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 0/100). Se obtuvo terc-butoxi-amida del acido 4-morfolin-4-il-piridin-2-carboxilico como un polvo blanco (110 mg, rendimiento del 40 %).

Etapa 2:

Se calentaron terc-butoxi-amida del acido 4-morfolin-4-il-piridin-2-carboxnico (110 mg, 0,4 mmoles, 1 eq) y acido trifluoroacetico (3 ml) bajo irradiacion de microondas a 100 °C durante 10 min. Despues de enfriarse, la mezcla se evaporo a sequedad. El residuo se solubilizo en diclorometano (5 ml) y se anadieron algunas gotas de solucion de hidroxido de amonio. La mezcla se absorbio sobre gel de silice para purificarse por cromatograffa ultrarrapida usando diclorometano y metanol (100/0 a 90/10) proporcionando el compuesto esperado como un polvo beis (12 mg, rendimiento del 14 %).

EM: 224,1

P.f.: 215 °C-220 °C (dec.)

Ejemplo 111:

Bencil-hidroxi-amida del acido 3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,3']bipiridinil-6'-carboxilico

imagen135

A una disolucion desgasificada de ester metilico del acido 5-bromo-piridin-2-carboxflico (450 mg, 2,1 mmoles, 1 eq) en tolueno (10 ml) se anadieron piperidina (213 mg, 2,5 mmoles, 1,2 eq), fosfato de potasio (618 mg, 2,9 mmoles, 1,4 eq), 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo (171 mg, 0,42 mmoles, 0,2 eq) y tris(dibencilidenacetona)dipaladio (95 mg, 0,10 mmoles, 0,05 eq). La mezcla se calento en un tubo cerrado a 100 °C durante 48 h. Despues de enfriarse, la mezcla se vertio sobre agua (5 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Las fases organicas se

5

10

15

20

25

secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 0/100) proporcionando ester medico del acido 3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,3']bipiridiml-6'-carboxflico como un polvo amarillo palido (165 mg, rendimiento del 36 %).

Etapa 2:

Se solubilizo ester medico del acido 3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,3']bipiridinil-6'-carboxflico (165 mg, 0,75 mmoles, 1 eq) en metanol (8 ml) y se anadio hidroxido de litio (63 mg, 1,5 mmoles, 2 eq). La mezcla se calento a 70 °C durante 20 h. Despues de enfriarse, se anadio una solucion 3 N de cloruro de hidrogeno (0,2 ml). Entonces, la mezcla se evaporo a sequedad proporcionando acido 3,4,5,6-tetrahidro-2H-[1,3']bipiridinil-6'-carboxflico como un aceite amarillo con rendimiento cuantitativo.

Etapa 3:

Se anadio gota a gota cloruro de oxalilo (0,1 ml, 1,12 mmoles, 1,5 eq) a una solucion de acido 3,4,5,6-tetrahidro-2H- [1,3']bipiridinil-6'-carboxflico (0,75 mmoles, 1 eq) en diclorometano (6 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 15 min y se evaporo a sequedad. El residuo se diluyo en diclorometano (6 ml) y se anadieron trietilamina (0,31 ml, 2,25 mmoles, 3 eq) y clorhidrato de N-bencilhidroxilamina (179 mg, 1,12 mmoles, 1,5 eq). Despues de agitar a temperatura ambiente durante 20 h, la mezcla se absorbio sobre gel de sflice para purificarse usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 30/70). El compuesto esperado se obtuvo como un polvo amarillo palido (125 mg, rendimiento del 54 %).

EM: 312,2

P.f.: 110 °C-115 °C

Datos de actividad para los compuestos que tienen la formula general (I)

Estructura Mol.: tipo de actividad criterio de valoracion de la actividad conc de actividad resultado de la actividad

NHj, HO„ N n OH: FRET CI50 [|jM] 20

CPE H3N2: reduccion (%) 50 -4,8

H_C^ ,N_ 1 O GHj: FRET CI50 [jM]

CPE H3N2: reduccion (%) 50 -1,2

o,ch3 1 HaC Xj h3c: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -0,9

0 O: CPE H3N2 reduccion (%) 50 29

CPE H3N2: CI50 [jM] 37

.Nw JL T CEH 0: FRET CI50 [jM] 4,9

CPE H3N2: reduccion (%) 5 -4,1

O T OH O: FRET CI50 [jM]

CPEH3N2: reduccion (%) 50 1,3

w. aw: CPE H3N2 reduccion (%) 50 10,5

0 X ,C) CH, fT H: CPE H3N2 reduccion (%) 50 12,5

<f**j o. -CH, 0XS oX'CH> Xh,: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -0,3

l**. JL A. a ^ N o CHj O: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -2,2

XT GT'-'X: CPE H3N2 reduccion (%) 20 1,6

o (VV^ A: CPE H3N2 reduccion (%) 1 -0,3

„ rvV''"' craj: CPE H3N2 reduccion (%) 50 14,8

j f^\: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -2,7

o ^yNAN'Q^CHi U n: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -2,1

(A'J0: CPE H3N2 reduccion (%) 2 -4

o: CPE H3N2 reduccion (%) 5 -3

c (VV^ oh: CPE H3N2 reduccion (%) 1 1,2

o H3Cs V iTl H OA N N - o^CH A I ^: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -0,4

a, °^H ■'Xxx,.,: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -1,9

jOC-jO: CPE H3N2 reduccion (%) 20 -8,7

Cr^ X5: CPE H3N2 reduccion (%) 5 -2,7

a ^o: CPEH3N2 reduccion (%) 5 1,3

o cr^ So: CPE H3N2 reduccion (%) 25 1

FRET: CI50 [|jM] 4,3

o JI „OH if H v'OXJ: CPE H3N2 reduccion (%) 10 15,5

: CPE H3N2 reduccion (%) 5 -1,5

o .N. X, ,GH 0 u: CPE H3N2 reduccion (%) 5 1,1

FRET: CI50 [jM] 1,4

FRET: CI50 [jM] 1,45

^JiN,oO JXJ in3: CPE H3N2 reduccion (%) 50 0,6

H3c N^X^o^jO KiJ CHS: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -2,3

o: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -1,9

QrV'-'® 0: CPE H3N2 reduccion (%) 5 1

CH CH= 15 X j w H,C: CPE H3N2 reduccion (%) 5

0 CHS ^NJY^'N'°'^'CH3: CPE H3N2 reduccion (%) 5

r'VA'°'AD 6h3: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -2,6

o: CPE H3N2 reduccion (%) 20 -8,7

f-JL .«j0 cr^ Sd: CPE H3N2 reduccion (%) 5 -2,7

: CPE H3N2 reduccion (%) 5 1,3

G cr^ ‘'O: CPEH3N2 reduccion (%) 25 1

FRET: CI50 [|jM] 4,3

o ^NL A. .oh rj" ‘i5r'^N "o: CPE H3N2 reduccion (%) 10 15,5

: CPE H3N2 reduccion (%) 5 -1,5

o C?VL 0 u: CPE H3N2 reduccion (%) 5 1,1

FRET: CI50 [jM] 1,4

FRET: CI50 [jM] 1,45

Cji ^Hj: CPEH3N2 reduccion (%) 50 0,6

o JL „ch if y? Cjj ^: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -0,6

0 _^SL JL OH rf *if^N <y "o: FRET CI50 [jM] 9,09

CPE H3N2: reduccion (%) 50 34,2

FRET: CI50 [jM] 19

: FRET CI50 [jM] 14,7

CPE H3N2: reduccion (%) 50 94,3

FRET: CI50 [jM] 16

CPE H3N2: CI50 [jM] 45

o -N,JL„OH s' =--Y N: CPE H3N2 reduccion (%) 20 -1,8

: CPE H3N2 reduccion (%) 2 7,7

jryV0H o: FRET CI50 [jM] 6,25

CPEH3N2: reduccion (%) 50 -4,3

FRET: CI50 [|jM] 5,4

o j-Li_l OH i3 X j «: CPE H3N2 reduccion (%) 2 -2,1

0: CPE H3N2 reduccion (%) 2 4,4

o P rVrm: CPE H3N2 reduccion (%) 2 2,1

c/Ai: FRET CI50 [jM] 9,4

CPEH3N2: reduccion (%) 5 -3,4

o (rhl'Y^'N'0H o,y "o o: FRET CI50 [jM] 10,1

FRET: CI50 [jM] 1,7

CPE H3N2: reduccion (%) 50 6,2

o iQrV -NH O: FRET CI50 [jM] 3,9

FRET: CI50 [jM] 6,4

CPE H3N2: reduccion (%) 5 -0,5

o 0 K0: FRET CI50 [jM] 3,1

CPE H3N2: reduccion (%) 10 -9,3

o C^rV 0: FRET CI50 [jM] 5,94

FRET: CI50 [jM] 7,1

CPE H3N2: reduccion (%) 50 -7,1

,OH Yl k0 a°: FRET CI50 [jM] 10

CPEH3N2: reduccion (%) 50 -5,2

o s,*A*ai Y "o f 'W, ^ o: FRET CI50 [jM] 1,2

CPE H3N2: reduccion (%) 5 3,8

imagen136

CPE H3N2

reduccion (%)

12

13,4

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

12

22

21,7

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

2,6

26,6

imagen137

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

50

2,9

10,5

imagen138

FRET

CPEH3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

1,2

-6,7

imagen139

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

0,91

8,1

imagen140

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

-2,7

imagen141

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

50

32

12,3

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

9,6

-3,2

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

50

1,2

8,9

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

50

4,6

2,4

5

2

5

2

5

1

p> o: CPE H3N2 reduccion (%) 50 10,7

fo "br: CPE H3N2 reduccion (%) 50 8,3

.N. Ji .OH kr h-ci: FRET CI50 [mM] 0,33

CPE H3N2: reduccion (%) 50 0,4

: CPEH3N2 reduccion (%) 5 1,2

: FRET CI50 [mM] 3,2

CPE H3N2: reduccion (%) 50 8,9

6: CPE H3N2 reduccion (%) 50 18,8

,w JL W 5f"o O^HH,: FRET CI50 [mM] 1

CPE H3N2: reduccion (%) 5 -2,5

-N^JL .oh .Fo 1 O CH,: FRET CI50 [mM] 5,8

CPE H3N2: reduccion (%) 5 -1,8

0: FRET CI50 [mM] 38

CPE H3N2: reduccion (%) 50 3,2

-KfeJL Q ^° <5: FRET CI50 [mM] 0,51

CPE H3N2: reduccion (%) 50 9,5

W~XV- 0: FRET CI50 [mM] 15

chs o o cm Cr*'jT'Z: FRET CI50 [mM] 13

OvUjXiJ” CHj 0 H: FRET CI50 [mM] 121

: CPE H3N2 reduccion (%) 50 5,3

0 g\,: CPE H3N2 reduccion (%) 5 7,7

FRET: CI50 [|jM] 2,6

O 0 l°: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -3,4

FRET: CI50 [jM] 2,3

Ai OH: CPE H3N2 reduccion (%) 50 6,3

FRET: CI50 [jM] 1,9

O CrVL Cy?: CPE H3N2 reduccion (%) 5 -7,5

FRET: CI50 [jM] 3,2

o gf^ A ^ chCH*: CPE H3N2 reduccion (%) 50 34

O o ■s-VW-: CPE H3N2 reduccion (%) 50 2,8

j-hL-JL *L&ri J 4?IH: FRET CI50 [jM] 2,3

CPE H3N2: reduccion (%) 50 -1,4

(jjrV1 O-Eo CH A: FRET CI50 [jM] 0,73

CPE H3N2: reduccion (%) 50 -1,4

CrV 0": CPE H3N2 reduccion (%) 50 -0,9

9% Q~: FRET CI50 [jM] 3,5

CPEH3N2: reduccion (%) 50 -4,5

cA" 1 CH NH 0=8=s0 V: FRET CI50 [jM] 0,67

CPE H3N2: reduccion (%) 50 -2,4

imagen142

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

32

-1,7

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

50

5,4

imagen143

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

2,4

-2,5

CPE H3N2

reduccion (%)

20

31,3

imagen144

CPE H3N2

reduccion (%)

3,9

imagen145

CPE H3N2

reduccion (%)

10,2

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

3,6

3,4

imagen146

FRET

CPEH3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

-0,5

imagen147

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

50

2,9

-3,2

imagen148

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

50

7,7

10,6

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

50

-1,1

FRET

CI50 [pM]

5

2

5

1

3

5

2

3

: CPE H3N2 reduccion (%) 50 5,1

Ab 0- <„: CPE H3N2 reduccion (%) 50 9,5

CrV" 0 CH,.: CPE H3N2 reduccion (%) 50 2,6

o prV 0: CPE H3N2 reduccion (%) 50 5,7

oA asssasc: FRET CI50 [mM] 1,9

CPE H3N2: reduccion (%) 50 9,6

cA" Y* («=o ^cr: FRET CI50 [mM] 0,2

CPE H3N2: reduccion (%) 50 5,9

□: FRET CI50 [mM] 0,76

CPE H3N2: reduccion (%) 50 -0,5

<Ao: CPE H3N2 reduccion (%) 50 6,1

- 1A> V: FRET CI50 [mM] 0,4

CPE H3N2: reduccion (%) 20 26,9

n Jl vA: FRET CI50 [mM] 2,2

CPE H3N2: reduccion (%) 50 34

bo Q- t: FRET CI50 [mM] 1,8

CPE H3N2: reduccion (%) 20 4,6

K_ JL j!>\ _ Ao: FRET CI50 [mM] 0,33

CPE H3N2: reduccion (%) 50 9,5

______i_1_£»!____: FRET CI50 [mM] 2

: CPE H3N2 reduccion (%) 50 22,4

■&= W-C**! HJtT“V: CPE H3N2 reduccion (%) 2 -5,3

e jV-r X ^ \: FRET CI50 [jM] 0,58

CPE H3N2: reduccion (%) 50 9,3

o 0^ I “ XT': FRET CI50 [|jM] 1,8

CPE H3N2: reduccion (%) 50 -5,6

C IT Ow iiiiiO jq: FRET CI50 [jM] 0,83

CPE H3N2: reduccion (%) 50 1,5

o a1"-": FRET CI50 [jM] 75

CPE H3N2: reduccion (%) 50 3,15

0 SY5*'*: CPE H3N2 reduccion (%) 50 -5,53

0“ o .NlAN>o« V a 0 u: FRET CI50 [jM] 23

CPE H3N2: reduccion (%) 5 -1,83

cA" I H-* 0C3&=* A.: FRET CI50 [jM] 1,1

CPE H3N2: reduccion (%) 50 -3,98

© *&> K: FRET CI50 [jM] 3,5

CPE H3N2: reduccion (%) 50 5,49

£ 1 ^ 1 (irV0^: FRET CI50 [jM]

0 JNj. JL Onf I jD |L H ,ca;: FRET CI50 [jM] 3,2

CPE H3N2: reduccion (%) 50 53,43

5

10

15

20

25

30

imagen149

FRET

CPE H3N2

CI50 [pM]

reduccion (%)

50

60,07

CPE H3N2

FRET

reduccion (%)

CI50 [pM]

50

24,39

78

0,28

imagen150

CPE H3N2

FRET

reduccion (%)

CI50 [pM]

50

2,29

1,8

2

Compuestos que tienen la formula general (II) Producto intermedio clave I

Ester etflico del acido 5-bromo-2-terc-butoxicarbonilamino-4-metil-tiofeno-3-carbox^lico

imagen151

Etapa 1:

A una disolucion de ester etilico del acido 2-amino-4-metil-tiofeno-3-carbox^lico (25,0 g, 135 mmoles, 1 eq) en diclorometano (80 ml) se anadieron dicarbonato de di-terc-butilo (48,0 g, 220 mmoles, 1,6 eq) y 4- dimetilaminopiridina (1,6 g, 13,5 mmoles, 0,1 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente hasta que se completo la reaccion. Entonces, el disolvente se evaporo y el residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 90/10) proporcionando el ester etilico del acido 2-terc-butoxicarbonilamino-4- metil-tiofeno-3-carboxflico como un solido blanco (18,8 g, rendimiento del 49 %).

Etapa 2:

A 0 °C, a una disolucion de ester etflico del acido 2-terc-butoxicarbonilamino-4-metil-tiofeno-3-carboxflico (10,2 g, 35,9 mmoles, 1 eq) en cloroformo (40 ml) se anadio N-bromosuccinimida (6,4 g, 35,9 mmoles, 1 eq). La mezcla se agito a 0 °C durante 2 h y el disolvente se evaporo. El residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 70/30) proporcionando el compuesto esperado como un solido blanco (11,9 g, rendimiento del 91 %).

Producto intermedio clave II

5-Metil-2-metilsulfanil-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen152

Producto intermedio clave II

imagen153

Se calentaron ester etnico del acido 2-ammo-4-metil-5-feml-tiofeno-3-carboxflico (10,0 g, 38,3 mmoles, 1 eq), tiocianato de metilo (2,8 g, 38,3 mmoles, 1 eq) y acido clorhndrico concentrado (1,4 ml, 38,3 mmoles, 1 eq) en un 5 tubo cerrado a 130 °C durante 18 h. Despues de enfriarse, el precipitado se filtro, se aclaro con etanol y se seco proporcionando el compuesto esperado como un solido amarillo (7,7 g, rendimiento del 70 %).

Producto intermedio clave III

10 2-(2-Amino-etilamino)-5-metil-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen154

Se solubilizo 5-metil-2-metilsulfanil-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (Producto intermedio clave II) (1,2 g, 4,2 15 mmoles, 1 eq) en etilendiamina (3 ml) y la disolucion se calento en un tubo cerrado a 130 °C durante 18 h. Despues de enfriarse, se filtro la suspension amarilla. El precipitado se aclaro con diclorometano y eter dietilico y se seco a vacfo proporcionando el compuesto esperado como un polvo blanco (550 mg, rendimiento del 44 %).

Procedimiento general A

20

imagen155

A 0 °C, se anadio cianamida (1,0 mmol, 1,5 eq) a una disolucion 2 M de cloruro de hidrogeno en eter dietilico (1,0 ml, 3 eq). Despues de agitar durante 15 min, la suspension se filtro. El solido blanco resultante se anadio en un tubo 25 cerrado a ester etflico del acido 2-amino-tiofeno-3-carboxflico (0,7 mmoles, 1 eq) y dimetilsulfona (250 mg). La mezcla se calento a 130 °C durante 2 h. Despues de enfriarse, el residuo se disolvio en metanol y se anadio una disolucion 7 N de amoniaco en metanol (10 ml). Entonces, el disolvente se evaporo y el solido obtenido se lavo con diclorometano (2 x 10 ml) y agua (2 x 10 ml) proporcionando el compuesto esperado (5% al rendimiento del 90 %).

30 Ejemplo 1:

2-Amino-6-isopropil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen156

35

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general A usando el ester metflico del acido 2-amino-5- isopropil-tiofeno-3-carboxflico comercialmente disponible.

El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

40 EM: 210,0

P.f.: 347 °C - 349 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

45

imagen157

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general A usando el ester metflico del acido 2-amino-5- fenil-tiofeno-3-carbox^lico comercialmente disponible. El compuesto esperado se aislo como un solido gris.

EM: 244,0 P.f. >360 °C

Ejemplo de referencia 3:

2-Amino-5-metil-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen158

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general A usando el ester etilico del acido 2-amino-4- metil-5-fenil-tiofeno-3-carboxflico comercialmente disponible. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis. EM: 258,1

P.f.: 356 °C - 358 °C Ejemplo 4:

2-Amino-5-(4-fluoro-fenil)-6-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen159

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general A usando el ester metflico del acido 2-amino-4-(4- fluoro-fenil)-5-metil-tiofeno-3-carboxflico comercialmente disponible. El compuesto esperado se aislo como un solido gris.

EM: 276,1

P.f.: 360 °C - 362 °C

Ejemplo 5:

2-Amino-6-bencil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen160

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general A usando el ester etflico del acido 2-amino-5- bencil-tiofeno-3-carboxflico comercialmente disponible. El compuesto esperado se aislo como un solido verde.

EM: 258,1

P.f.: 294 °C - 296 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

imagen161

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general A usando el ester metrnco del acido 2-amino-5-(1- fenil-etil)-tiofeno-3-carboxilico comercialmente disponible. El compuesto esperado se aislo como un polvo gris.

EM: 272,0

P.f.: 260 °C - 270 °C

Ejemplo 7:

Fenilamida del acido 2-amino-5-metil-4-oxo-3,4-dihidro-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilico

imagen162

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general A usando el ester etilico del acido 2-amino-4- metil-5-fenilcarbamoil-tiofeno-3-carboxilico comercialmente disponible. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo.

EM: 301,0

P.f.: descompone a 290 °C - 296 °C Procedimiento general B

R + S2 +

imagen163

Eton

Piperidina

90°C

etapa 1

imagen164

1. NH2CN, HCI, Et20

2. Dimetilsulfona 130°C

etapa 2

imagen165

Etapa 1:

Se dispusieron propan-2-ona (28,0 mmoles, 1 eq), azufre (900 mg, 28,0 mmoles, 1 eq), cianoacetato de etilo (3,0 ml, 28,0 mmoles, 1 eq) y una cantidad catalftica de piperidina en suspension en etanol (15 ml) y se calentaron en un tubo cerrado a 90 °C durante 18 h. Entonces, la mezcla de reaccion se evaporo y el residuo en bruto se purifico por cromatografia ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 0/100) proporcionando el ester etilico del acido 2-amino-tiofeno-3-carboxilico (rendimiento del 6 % al 95 %).

Etapa 2:

A 0 °C, se anadio cianamida (1,0 mmol, 1,5 eq) a una disolucion 2 M de cloruro de hidrogeno en eter dietilico (1,0 ml, 3 eq). Despues de agitar durante 15 min, la suspension se filtro. El solido blanco resultante se anadio en un tubo cerrado al ester etilico del acido 2-amino-tiofeno-3-carboxflico obtenido en la etapa 1 (0,7 mmoles, 1 eq) y dimetilsulfona (250 mg). La mezcla se calento a 130 °C durante 2 h. Despues de enfriarse, el residuo se disolvio en metanol y se anadio una disolucion 7 N de amoniaco en metanol (10 ml). Entonces, el disolvente se evaporo y el solido obtenido se lavo con diclorometano (2 x 10 ml) y agua (2 x 10 ml) proporcionando el compuesto esperado (rendimiento del 5 % al 90 %).

Ejemplo 8:

2-Amino-6-(4-cloro-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen166

5

10

15

20

25

30

35

40

45

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general B usando 1-(4-cloro-fenil)-propan-2-ona. El compuesto esperado se aislo como un polvo gris. EM: 292,0 P.f.: descompone a 351 °C

Ejemplo 9:

2-Amino-6-(3-cloro-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

o

imagen167

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general B usando 1-(3-cloro-fenil)-propan-2-ona. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 292,1

P.f.: descompone a 265 °C Ejemplo 10:

2-Amino-5-metil-6-p-tolil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen168

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general B usando 1-p-tolil-propan-2-ona. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 272,1

P.f.: descompone a 330 °C Ejemplo 11:

2-Amino-6-(4-metoxi-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

O

imagen169

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general B usando 1-(4-metoxi-fenil)-propan-2-ona. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 288,1

P.f.: descompone a 311 °C Ejemplo 12:

2-Amino-5-metil-6-(3-trifluorometil-fenil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen170

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general B usando 1-(3-trifluorometil-fenil)-propan-2-ona. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 326,1

P.f.: descompone a 345 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

imagen171

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general B usando 1-piridin-4-il-propan-2-ona. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo.

EM: 259,1

P.f.: descompone a 355 °C Ejemplo 14:

2-Amino-5-metil-6-piridin-3-il-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen172

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general B usando 1-piridin-3-il-propan-2-ona. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo.

EM: 259,0

P.f.: 280 °C - 290 °C

Ejemplo 15:

2-Amino-5-metil-6-pirazin-2-il-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen173

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general B usando 1-pirazin-2-il-propan-2-ona. El compuesto esperado se aislo como un polvo naranja.

EM: 260,0

P.f.: 280 °C - 300 °C

Ejemplo 16:

2-Amino-6-bencil-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen174

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general B usando 4-fenil-butan-2-ona. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 272,1

P.f.: 292 °C - 294 °C Ejemplo 17:

2-Amino-6-(4-cloro-bencil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen175

5

10

15

20

25

30

35

40

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general B usando 4-(4-cloro-fenil)-butan-2-ona. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 306,1

P.f.: 300 °C - 320 °C Procedimiento general C

imagen176

Etapa 1:

A una disolucion desgasificada de ester etnico del acido 5-bromo-2-terc-butoxicarbonilamino-4-metil-tiofeno-3- carbox^lico (Producto intermedio clave I) (200 mg, 0,6 mmoles, 1 eq) y acido o ester boronico (1,8 mmoles, 3 eq) en dimetilformamida seca (4 ml) se anadieron fluoruro de cesio (183 mg, 1,2 mmoles, 2,2 eq) y dicloro[1,1'- bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (0,12 mmoles, 90 mg, 0,2 eq). La mezcla se agito a 120 °C bajo radiacion de microondas durante 20 min. Despues de enfriarse, la mezcla se filtro sobre una almohadilla corta de Celite y se absorbio sobre gel de sflice para purificarse por cromatograffa ultrarrapida (rendimiento del 30 % al 95 %).

Etapa 2:

Se solubilizo el compuesto de la etapa 1 (2,4 mmoles, 1 eq) en una disolucion 4 N de cloruro de hidrogeno en dioxano (10 ml) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 18 h. Entonces, la mezcla se concentro y el residuo se recogio en diclorometano (10 ml) y se lavo con una disolucion saturada de bicarbonato sodico (3 x 10 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida proporcionando el ester de amino (35 % hasta rendimiento cuantitativo).

Etapa 3:

A 0 °C, se anadio cianamida (1,0 mmol, 1,5 eq) a una disolucion 2 M de cloruro de hidrogeno en eter dietilico (1,0 ml, 3 eq). Despues de agitar durante 15 min, la suspension se filtro. El solido blanco resultante se anadio en un tubo cerrado a ester efflico del acido 2-amino-tiofeno-3-carboxflico (0,7 mmoles, 1 eq) y dimetilsulfona (250 mg). La mezcla se calento a 130 °C durante 2 h. Despues de enfriarse, el residuo se disolvio en metanol y se anadio una disolucion 7 N de amoniaco en metanol (10 ml). Entonces, el disolvente se evaporo y el solido obtenido se lavo con diclorometano (2 x 10 ml) y agua (2 x 10 ml) proporcionando el compuesto esperado (rendimiento del 5 % al 90 %).

Ejemplo 18:

2-Amino-5-metil-6-m-tolil-3H-tieno [2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen177

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 3-metilbencenoboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 272,1

5

10

15

20

25

30

35

40

45

P.f.: descompone a 330 °C - 338 °C Ejemplo 19:

2-Amino-6-(2-cloro-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen178

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 2-clorobencenoboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo rosa.

EM: 292,1

P.f.: 334 °C - 336 °C Ejemplo 20:

2-Amino-6-(2-fluoro-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen179

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 2-fluorobencenoboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 271,1

P.f.: 325 °C - 330 °C Ejemplo 21:

2-Amino-6-(4-fluoro-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen180

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 4-fluorobencenoboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo gris.

EM: 276,0

P.f.: 325 °C - 335 °C

Ejemplo 22:

2-Amino-6-(3-fluoro-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen181

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 3-fluorobencenoboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo purpura.

EM: 276,0

P.f.: 310 °C-330 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

45

imagen182

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 2,4-difluorofenilbor6nico. El compuesto esperado se aislo como un polvo purpura.

EM: 294,1

P.f.: 330 °C - 350 °C

Ejemplo 24:

2-Amino-6-(3-cloro-2-fluoro-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen183

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 3-cloro-2-fluorofenilbor6nico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 310,1

P.f.: 330 °C - 350 °C

Ejemplo 25:

2-Amino-6-(4-cloro-2-fluoro-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

o

imagen184

F

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 4-cloro-2-fluorobencenoboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 310,0

P.f.: 320 °C - 340 °C

Ejemplo 26:

2-Amino-6-(3-cloro-2,6-difluoro-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen185

ci F

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 3-cloro-2,6-difluorofenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 328,1

P.f.: 330 °C - 350 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

45

imagen186

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 4-cloro-3-fluorofenilbor6nico. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 310,1

P.f.: 350 °C - 370 °C

Ejemplo 28:

2-Amino-6-(4-cloro-3-metoxi-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen187

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 4-cloro-3-metoxifenilbor6nico. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 322,1

P.f.: 312 °C-322 °C

Ejemplo 29:

2-Amino-6-(4-cloro-3-metil-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

o

imagen188

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 4-cloro-3-metilfenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 306,1

P.f.: 330 °C - 350 °C

Ejemplo 30:

2-Amino-6-(4-cloro-3-hidroxi-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen189

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido (4-cloro-3-hidroxifenil)boronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 308,1 P.f. > 350 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

45

imagen190

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 4-cloro-3- trifluorometilfenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 360,2 P.f. > 350 °C

Ejemplo 32:

5-(2-Amino-5-metil-4-oxo-3,4-dihidro-tieno[2,3-d]pirimidin-6-il)-2-cloro-N,N-dimetil-benzamida

o

ci

N—

/

imagen191

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 4-cloro-3- (dimetilaminocarbonilfenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 363,1

P.f.: 300 °C - 320 °C

Ejemplo 33:

3-(2-Amino-5-metil-4-oxo-3,4-dihidro-tieno[2,3-d]pirimidin-6-il)-benzonitrilo

o

imagen192

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 3-cianofenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 283,1 P.f. > 350 °C

Ejemplo 34:

5-(2-Amino-5-metil-4-oxo-3,4-dihidro-tieno[2,3-d]pirimidin-6-il)-2-cloro-benzonitrilo

imagen193

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 4-cloro-3-cianofenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 317,0 P.f. > 360 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

45

imagen194

El compuesto esperado se obtuvo segun el compuesto esperado se aislo como un polvo EM: 317,1 P.f. > 350 °C

Ejemplo 36:

5-(2-Amino-5-metil-4-oxo-3,4-dihidro-tieno[2,

El compuesto esperado se obtuvo segun el compuesto esperado se aislo como un polvo EM: 301,1

P.f.: 330 °C - 350 °C Ejemplo 37:

3-(2-Amino-5-metil-4-oxo-3,4-dihidro-tieno[2,

El compuesto esperado se obtuvo segun el compuesto esperado se aislo como un polvo EM: 301,0 P.f.: 332 °C - 336 °C

Ejemplo 38:

3-(2-Amino-5-metil-4-oxo-3,4-dihidro-tieno[2,

El compuesto esperado se obtuvo segun el compuesto esperado se aislo como un polvo EM: 301,0 P.f.: 350 °C - 370 °C

procedimiento general C usando acido 2-cloro-5-cianofenilboronico. El beis.

3-d]pirimidin-6-il)-2-fluoro-benzonitrilo

o

imagen195

NC

procedimiento general C usando acido 3-ciano-4-fluorofenilboronico. El blanco.

3-d]pirimidin-6-il)-4-fluoro-benzonitrilo

imagen196

procedimiento general C usando acido 5-ciano-2-fluorofenilboronico. El beis.

3-d]pirimidin-6-il)-2-fluorobenzonitrilo

0

imagen197

NC F

procedimiento general C usando acido 3-ciano-2-fluorofenilboronico. El blanco.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

o

imagen198

NC F

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 2,4-difluoro-3-cianofenilbor6nico. El compuesto esperado se aislo como un polvo gris.

EM: 319,0

P.f.: 360 °C - 380 °C

Ejemplo 40:

2-Amino-6-(3,5-bis-trifluorometil-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen199

f3c

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 3,5- bis(trifluorometil)bencenobor6nico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 394,1

P.f.: 344 °C - 347 °C

Ejemplo 41:

2-Amino-6-(4-fluoro-3-trifluorometil-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen200

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 4-fluoro-3- trifluorometilfenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 343,1

P.f.: 310 °C-330 °C Ejemplo 42:

2-Amino-6-(3-dimetilaminometil-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen201

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando ester de pinacol del acido 3-(N,N- dimetilamino)metilfenilboronico, sal de clorhidrato. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 315,1

P.f.: 207 °C - 212 °C

5

10

15

20

25

30

35

40

45

2-Amino-6-(5-dimetilaminometil-2-fluoro-fenil)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]-pirimidin-4-ona

imagen202

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando ester de pinacol del acido 2-fluoro-5- (dimetilaminometil)fenilboronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 333,2

P.f.: 230 °C - 250 °C

Ejemplo 44:

2-Amino-6-(6-cloro-piridin-3-il)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen203

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 2-cloropiridin-5-bor6nico. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo.

EM: 293,1

P.f.: 230 °C - 250 °C Ejemplo 45:

2-Amino-6-(2-cloro-3-fluoro-piridin-4-il)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen204

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 2-cloro-3-fluoropiridin-4-boronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo.

EM: 311,1

P.f.: 330 °C - 350 °C Ejemplo 46:

2-Amino-6-(2,6-difluoro-piridin-3-il)-5-metil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen205

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 2,6-difluoropiridin-3-boronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 295,0

P.f.: 330 °C - 335 °C

5

10

15

20

25

30

35

2-Amino-5-metil-6-(2-trifluorometil-piridin-4-il)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen206

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando acido 2-(trifluorometil)piridin-4-bor6nico. El compuesto esperado se aislo como un polvo amarillo.

EM: 327,0

P.f.: 335 °C - 355 °C

Ejemplo 48:

2-Amino-5-metil-6-(2-metil-2H-imidazol-4-il)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen207

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 262,0

P.f.: 335 °C - 345 °C

Ejemplo 49:

2-Amino-5-metil-6-(1,2,3,6-tetrahidro-piridin-4-il)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen208

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general C usando ester de pinacol del acido N-Boc- 1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-boronico. El compuesto esperado se aislo como un polvo naranja.

EM: 263,1

P.f.: 290 °C - 310 °C Ejemplo 50:

3-(2-Amino-5-metil-4-oxo-3,4-dihidro-tieno[2,3-d]pirimidin-6-il)-benzamida

imagen209

5

10

15

20

25

30

35

40

45

El procedimiento para obtener el compuesto esperado empezo con el procedimiento general C usando acido 3- carbamoilfenilboronico. Despues del ciclado, se obtuvo 3-(2-amino-5-metil-4-oxo-3,4-dihidro-tieno[2,3-d]pirimidin-6- il)-benzonitrilo en lugar del compuesto deseado.

Etapa 2:

Se solubilizo 3-(2-amino-5-metil-4-oxo-3,4-dihidro-tieno[2,3-d]pirimidin-6-il)-benzonitrilo (100 mg, 0,35 mmoles, 1 eq) en acido sulfurico concentrado (12 ml) y se calento a 140 °C durante 3 h. Despues de enfriarse, se anadio agua (10 ml) y el precipitado obtenido se filtro proporcionando una mezcla 60/40 de acido y compuesto de amida.

Etapa 3:

La mezcla de la etapa 2 se puso en suspension en diclorometano (6 ml). A 0 °C, se anadieron trietilamina (42 pl, 0,3 mmoles, 1,2 eq) y cloroformiato de etilo (26 pl, 0,28 mmoles, 1,1 eq). Despues de 1 h a 0 °C, se anadio hidroxido de amonio disolucion (15 ml) y la mezcla se agito de 0 °C hasta temperatura ambiente durante 3 dfas. El disolvente se evaporo y se anadio agua (10 ml). El precipitado obtenido se filtro y se seco a vado proporcionando el compuesto esperado como un polvo beis.

EM: 301,1

P.f.: descompone a 295 °C - 300 °C Procedimiento general D

imagen210

Se dispuso 5-metil-2-metilsulfanil-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (Producto intermedio clave II) (1,3 g, 4,4 mmoles, 1 eq) en suspension en la amina apropiada (3 ml) y dependiendo de las reacciones, en acido acetico (1 ml). La mezcla resultante se calento en un tubo cerrado a 130 °C durante 18 h. Despues de enfriarse, se anadio etanol (20 ml) y el precipitado se filtro, se aclaro con metanol, diclorometano y eter y se seco a vado proporcionando el compuesto esperado (rendimiento del 10 % al 70 %).

Ejemplo 51:

2-(2-Hidroxi-etilamino)-5-metil-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen211

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general D usando etanolamina y acido acetico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 302,1

P.f.: 227 °C - 229 °C

Ejemplo 52:

2-(3-Hidroxi-propilamino)-5-metil-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen212

5

10

15

20

25

30

35

40

45

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general D usando 3-amino-propan-1-ol y acido acetico. Despues de enfriarse, la mezcla de reaccion se evaporo y se anadio agua. El precipitado obtenido se filtro y se aclaro con eter dietilico y diclorometano. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 316,2

P.f.: 227 °C - 229 °C

Ejemplo 53:

2-(2-Amino-etilamino)-5-metil-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona Producto intermedio clave III

imagen213

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general D usando etilendiamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 301,1

P.f.: 192 °C-194 °C

Ejemplo 54:

2-(2-Dimetilamino-etilamino)-5-metil-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen214

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general D usando N,N-dimetiletilendiamina y acido acetico. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis.

EM: 329,2

P.f.: 199 °C - 201 °C

Ejemplo 55:

5-Metil-6-fenil-2-fenilamino-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen215

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general D usando anilina y acido acetico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 334,1

P.f.: 270 °C - 290 °C

Ejemplo 56:

2-Ciclohexilamino-5-metil-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

o

imagen216

5

10

15

20

25

30

35

40

45

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general D usando ciclohexilamina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 340,2

P.f.: 265 °C - 270 °C

Ejemplo 57:

5-Metil-2-(2-morfolin-4-il-etilamino)-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen217

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general D usando 4-(2-aminoetil)morfolina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 371,1

P.f.: 240 °C - 246 °C

Ejemplo 58:

5-Metil-2-morfolin-4-il-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen218

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general D usando morfolina. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 328,1

P.f.: 300 °C - 320 °C Procedimiento general E

imagen219

A una disolucion de 2-(2-amino-etilamino)-5-metil-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (Producto intermedio clave III) (200 mg, 0,66 mmoles, 1 eq) en dimetilformamida (5 ml) se anadieron HOBT (180 mg, 1,33 mmoles, 2 eq), EDCI (255 mg, 1,33 mmoles, 2 eq), trietilamina (0,28 ml, 1,98 mmoles, 3 eq) y el acido carboxflico apropiado (1,33 mmoles, 2 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 h. Entonces, la mezcla se vertio sobre agua (10 ml) y se extrajo con diclorometano (3 x 20 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vado. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando diclorometano y amoniaco 7 N en metanol (100/0 a 80/20) proporcionando el compuesto esperado (rendimiento del 10 al 40 %).

Ejemplo 59:

N-[2-(5-Metil-4-oxo-6-fenil-3,4-dihidro-tieno[2,3-d]pirimidin-2-ilamino)-etil]-3-(4-metil-piperazin-1-il)-propionamida

imagen220

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general E usando acido 3-(4-metil-piperazin-1-il)- propionico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 455,1

5

10

15

20

25

30

35

P.f.: 235 °C - 245 °C

Ejemplo 60:

N-[2-(5-Metil-4-oxo-6-fenil-3,4-dihidro-tieno(2,3-d]pirimidin-2-ilamino)-etil]-4-(4-metil-piperazin-1-il)-butiramida

imagen221

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general E usando clorhidrato del acido 4-(4- metilpiperazin-1-il)butanoico. El compuesto esperado se aislo como un polvo blanco.

EM: 469,2

P.f.: 192 °C-196 °C

Ejemplo 61:

2-Amino-5-bromo-6-fenil-3H-tieno [2,3-d]pirimidin-4-ona, sal de bromhidrato

imagen222

Etapa 1:

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general A usando ester metilico del acido 2-amino-5-fenil- tiofeno-3-carboxflico. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis (3,5 g, rendimiento del 70 %).

Etapa 2:

A una solucion de 2-amino-6-fenil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (2,0 g, 8,2 mmoles, 1 eq) en dimetilformamida (100 ml) se anadieron dicarbonato de di-terc-butilo (3,6 g, 16,4 mmoles, 2 eq) y 4-dimetilaminopiridina (200 mg, 1,6 mmoles, 0,2 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 18 h. Entonces, el disolvente se evaporo y el residuo se recogio con diclorometano (20 ml). El solido amarillo insoluble se separo por filtracion y el filtrado se lavo con una disolucion saturada de bicarbonato sodico (2 X 20 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando diclorometano y metanol (100/0 a 80/20) proporcionando el ester terc-butnico del acido (4-oxo-6-fenil-3,4-dihidro- tieno[2,3-d]pirimidin-2-il)-carbamico como un solido amarillo claro (900 mg, rendimiento del 32 %).

Etapa 3:

El compuesto de la etapa 2 (350 mg, 1,0 mmol, 1 eq) se solubilizo en cloroformo (10 ml) y se anadio bromo (52 pl, 1,0 mmol, 1 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 h. Se anadio mas bromo (52 pl, 1,0 mmol, 1

5

10

15

20

25

30

35

40

eq) y la mezcla se agito durante una hora adicional a temperatura ambiente. Entonces, la mezcla se evaporo y el residuo se lavo con diclorometano (5 ml) y metanol (5 ml) proporcionando el compuesto esperado como un polvo beis (150 mg, rendimiento del 46 %).

EM: 324,1

Ejemplo 62:

2-Amino-5-cloro-6-fenil-3H-tieno [2,3-d]pirimidin-4-ona

imagen223

Etapa 1:

A una disolucion de ester efflico del acido 2-amino-5-fenil-tiofeno-3-carbox^lico (5,0 g, 20,2 mmoles, 1 eq) en diclorometano (40 ml) se anadieron dicarbonato de di-terc-butilo (6,6 g, 30,3 mmoles, 1,5 eq) y 4- dimetilaminopiridina (247 mg, 2,0 mmoles, 0,1 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 48 h. La mezcla se lavo con una solucion saturada de bicarbonato sodico (3 X 20 ml) y las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 90/10) proporcionando por separado ester efflico del acido 2-terc- butoxicarbonilamino-5-fenil-tiofeno-3-carboxflico (1,9 g, rendimiento del 27 %) como un aceite amarillo y ester efflico del acido bis(2-terc-butoxicarbonilamino)-5-fenil-tiofeno-3-carboxflico (4,1 g, rendimiento del 45%) como un polvo naranja claro.

Etapa 2:

A una disolucion del compuesto de diBoc de la etapa 1 (3,1 g, 6,9 mmoles, 1 eq) en cloroformo (100 ml) se anadio acido tricloroisocianurico (640 mg, 2,8 mmoles, 0,4 eq). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 18 h. El precipitado se separo por filtracion y el filtrado se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 90/10) proporcionando el compuesto esperado como un aceite naranja claro (1,1 g, rendimiento del 33 %).

Etapa 3:

El compuesto de la etapa 2 (950 mg, 2,0 mmoles, 1 eq) se solubilizo en una solucion 4 N de cloruro de hidrogeno en dioxano (20 ml) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 18 h. Entonces, la mezcla se concentro y el residuo se recogio en diclorometano (10 ml) y se lavo con una disolucion saturada de bicarbonato sodico (3 x 10 ml). Las fases organicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron a vacfo. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa ultrarrapida usando ciclohexano y acetato de etilo (100/0 a 85/15) proporcionando el ester efflico del acido 2-amino-4-cloro-5-fenil-tiofeno-3-carboxflico como un aceite naranja claro (300 mg, rendimiento del 54 %).

Etapa 4:

El compuesto esperado se obtuvo segun el procedimiento general A usando ester efflico del acido 2-amino-4-cloro-

5-fenil-tiofeno-3-carboxflico. El compuesto esperado se aislo como un polvo beis (175 mg, rendimiento del 61 %). EM: 278,0 P.f. > 350°C

5 ________________Datos de actividad para los compuestos que tienen la formula general (II)

Molregno: estructura tipo de actividad criterio de valoracion de la actividad conc de actividad resultado de la actividad

SAV-7475: Biacore Union (RU) 10 94,5

Biacore: KD (mM) 4,6

CPE H3N2: reduccion (%) 5 8,9

Biacore PA- Nter: Union (RU) 50 13,16

CPE H3N2: CI50 (mM) 21

SAV-7517: Biacore Union (RU) 10 39,3

Biacore: KD(mM) 13

CPE H3N2: reduccion (%) 10 -2,64

SAV-7521: CQ^ Biacore Union (RU) 10 64,7

Biacore: KD (mM) 6

CPEH3N2: reduccion (%) 25 33,6

SAV-7549: o-ctix. Biacore Union (RU) 10 65,5

CPE H3N2: reduccion (%) 50 -2,4

Biacore: KD (mM) 8,8

SAV-7575: Biacore Union (RU) 10 35,9

CPEH3N2: reduccion (%) 20 9,02

Biacore: KD (mM) 4

SAV-7577: h,c y Biacore Union (RU) 10 81,1

Biacore: KD (mM) 6,8

CPE H3N2: reduccion (%) 20 2,85

SAV-7579: Biacore Union (RU) 10 21,4

CPE H3N2: reduccion (%) 20 11,3

Biacore: KD (mM) 0,27

SAV-7580: a Biacore Union (RU) 10 25,2

CPE H3N2: reduccion (%) 2 89,8

CPE H3N2: CI50 (mM) 11

Biacore: KD (mM) 8,9

SAV-75B1: F P V&iu Biacore Union (RU) 10 20,5

CPE H3N2: reduccion (%) 50 87,8

Biacore: KD (mM) 1,4

CPE H3N2: CI50 (mM) 17

SAV-7582: H.C | O-WL Biacore Union (RU) 10 102,9

Biacore: KD (mM) 4,2

CPE H3N2: reduccion (%) 50 53,1

SAV-7583: Biacore Union (RU) 10 77,8

CPEH3N2: reduccion (%) 5 4,8

Biacore: KD (mM) 68

SAV-7585: CPE H3N2 reduccion (%) 2,5 28,9

Biacore: Union (RU) 10 29,2

CPE H3N2: CI50 (mM) 3,5

Biacore: KD (mM) 2

SAV-7586: CPE H3N2 reduccion (%) 15 81,2

Biacore: Union (RU) 10 100,2

Biacore: KD (mM) 12

CPE H3N2: CI50 (mM) 5,3

SAV-7588: c^r„ CPE H3N2 reduccion (%) 5 2,2

Biacore: Union (RU) 10 110,6

Biacore: KD (mM)

SAV-7589: CPE H3N2 reduccion (%) 50 63,1

Biacore: Union (RU) 10 88

Molregno

estructura

tipo de actividad

criterio de valoracion de la actividad

conc de actividad

resultado de la actividad

imagen224

Biacore

KD (mM)

CPE H3N2

CI50 (mM)

10

27

SAV-7594

Biacore

imagen225

KD (mM)

Biacore

Union (RU)

CPE H3N2

reduccion (%)

CPE H3N2

CI50 (mM)

10

31,9

14,5

14

SAV-7596

imagen226

Biacore

KD (mM)

Union (RU)

CPE H3N2

reduccion (%)

10

11

29,6

13,6

SAV-7598

imagen227

Biacore

Union (RU)

Biacore

KD (mM)

CPE H3N2

reduccion (%)

10

21,3

3,7

11,4

SAV-7599

imagen228

CPE H3N2

reduccion (%)

Biacore

Union (RU)

Biacore

KD (mM)

20

12,5

-0,7

65,3

5,3

SAV-7600

imagen229

CPE H3N2

reduccion (%)

Biacore

KD (mM)

Biacore

Union (RU)

10

5,8

3,8

SAV-7601

imagen230

CPE H3N2

reduccion (%)

Biacore

KD (mM)

Union (RU)

50

10

69,2

1,1

44,3

SAV-7602

imagen231

CPE H3N2

reduccion (%)

Biacore

KD (mM)

Biacore

Union (RU)

20

10

67,9

1,7

35,1

SAV-7603

imagen232

CPE H3N2

reduccion (%)

Biacore

KD (mM)

20

1,1

42

SAV-7604

CPE H3N2

reduccion (%)

Biacore

KD (mM)

20

-4,7

6,4

SAV-7606

Biacore

KD (mM)

CPE H3N2

reduccion (%)

21,8

SAV-7607

imagen233

Biacore

KD (mM)

CPE H3N2

reduccion (%)

5,4

-0,4

SAV-7608

Biacore

KD (mM)

CPE H3N2

reduccion (%)

10

5,7

3,8

SAV-7609

X

CPE H3N2 (insoluble)

reduccion (%) insoluble

SAV-7610

-Q-b6

Biacore

CPE H3N2

KD (mM)

reduccion (%)

ALPHA screen

EC50 (mM)

3,8

-1,6

0,62

SAV-7611

Biacore

KD (mM)

CPEH3N2

reduccion (%)

1,1

-1

SAV-7613

imagen234

Biacore

KD (mM)

CPE H3N2

reduccion (%)

50

1,5

2,5

SAV-7614

Biacore

KD (mM)

CPE H3N2

reduccion (%)

50

190

10,6

SAV-7615

imagen235

Biacore

CPE H3N2

KD (mM)

reduccion (%)

20

CPE H3N2

CI50 (mM)

59,2

12

SAV-7616

Biacore

KD (mM)

3,1

2

5

2

8

5

2

3

imagen236


: CPE H3N2 reduccion (%) 10 68,7

CPE H3N2: CI50 (mM) 34

SAV-7617: Biacore KD (mM) 2

CPE H3N2: reduccion (%) 2 5,1

SAV-7618: •-Q-&6U Biacore KD (mM) 0,65

CPE H3N2: reduccion (%) 50 77,4

CPE H3N2: CI50 (mM) 43

SAV-7619: Biacore KD (mM) 1,1

CPE H3N2: reduccion (%) 2 3,4

SAV-7620: Biacore KD (mM)

CPE H3N2: reduccion (%) 50 57,8

CPE H3N2: CI50 (mM) 29

SAV-7621: Biacore KD (mM)

CPE H3N2: CI50 (mM) 70

CPE H3N2: reduccion (%) 25 14,3

SAV-7622: MO Biacore KD (mM) 2,4

CPEH3N2: reduccion (%) 2 6,2

SAV-7623: Biacore KD (mM)

CPE H3N2: reduccion (%) 5 1,9

SAV-7624: F Biacore KD (mM) 0,2

CPE H3N2: CI50 (mM) 64

SAV-7625: Biacore KD (mM) 12

CPE H3N2: reduccion (%) 2,5 -4

SAV-7626: "A=/ K Biacore KD (mM) 6,4

CPE H3N2: reduccion (%) 25 -4,6

SAV-7627: Hr O J~\ NH Biacore KD (mM) 4,2

CPE H3N2: reduccion (%) 50 71,2

CPE H3N2: CI50 (mM) 10

SAV-7628: -<>Wr Biacore KD(mM) 7,3

CPE H3N2: reduccion (%) 50 84,3

CPE H3N2: CI50 (mM) 43

SAV-7629: p-^6r HP, >—f w^Sr'-NHf h/ Biacore KD (mM) 61

CPE H3N2: reduccion (%) 50 38,3

CPE H3N2: CI50 (mM) 35

SAV-7630: Biacore KD (mM) 57

CPE H3N2: reduccion (%) 50 23,2

CPE H3N2: CI50 (mM)

SAV-7631: Biacore KD (mM) 0,86

CPE H3N2: reduccion (%) 5 4

CPE H3N2: CI50 (mM)

SAV-7632: -cA&u Biacore KD (mM) 0,75

CPE H3N2: reduccion (%) 50 53

CPEH3N2: CI50 (mM)

SAV-7633: Biacore KD (mM) 1,2

CPE H3N2: reduccion (%) 50 63,1

CPEH3N2: CI50 (mM) 39

SAV-7637: __________t** i___________ CPE H3N2 reduccion (%) 5 1,5


: CPE H3N2 CI50 (mM) 18

Biacore: KD (mM) 1,1

SAV-7638: ^ 1 <y~wL 6 CPE H3N2 reduccion (%) 5 8,7

CPE H3N2: CI50 (mM)

Biacore: KD (mM)

SAV-7639: CPE H3N2 reduccion (%) 50 59,9

CPE H3N2: CI50 (mM)

Biacore: KD (mM) 1,8

SAV-7640: o CPE H3N12 reduccion (%) 5 -3,2

CPE H3N2: CI50 (mM)

Biacore: KD (mM)

Claims

5

10

15

20

25

30

1. Un compuesto que tiene la formula general (II), opcionalmente en forma de una sal, solvato, polimorfo, tautomero, racemate, enantiomero o diaestereomero farmaceuticamente aceptable o mezcla de los mismos,

imagen1

en la que Y es S;

R21 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-arilo, -(CH2)q-heterociclilo, -(CH2)q-cicloalquilo, -(CH2)p-OR25 y -(CH2)p-NR25R26;

R22 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-cicloalquilo, -Hal, -CF3 y -CN;

R23 esta seleccionado de -arilo, -heterociclilo, -cicloalquilo, -C(-R28)(-R29)-arilo, -C(-R28)(-R29)-heterociclilo y -C(-R28)(-R29)-cicloalquilo;

R25 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6 y -(CH2CH2O)rH;

R26 esta seleccionado de -H y -alquilo C1-6;

R27 esta seleccionado independientemente de -alquilo C1-6, -C(O)-alquilo C1.6, -Hal, -CF3, -CN, -COOR25, -OR25, -(CH2)qNR25R26, -C(O)-NR25R26 y -NR25-C(O)-alquilo C1.6;

R28 y R29 estan seleccionados independientemente de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-arilo, -(CH2)q-heterociclilo, -(CH2)q-cicloalquilo, -OH, -O-alquilo C1.6, -O-(CH2)q-arilo, -O-(CH2)q-heterociclilo y -O-(CH2)q-cicloalquilo; o R28 y R29 son juntos =O -CH2CH2-, -CH2CH2CH2- o -CH2CH2CH2CH2-; p es de 1 a 4; q es de 0 a 4; y r es de 1 a 3;

en la que el grupo arilo, grupo heterociclilo y/o grupo cicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes R27;

con la condicion de que el compuesto no sea uno de los siguientes compuestos:

imagen2

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen3
2. El compuesto segun la reivindicacion 1, en el que R21 es -H, -alquilo C1-6 o -(CH2)p-OR25.
3. El compuesto segun la reivindicacion 1 o 2, en el que R22 es -H, -alquilo C1-6 o Hal.
4. El compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que R23 es -(CH2)q-arilo; o -(CH2)q- heteroarilo, y en el que el grupo arilo y/o grupo heteroarilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes R27.
5. El compuesto segun cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que R23 es -fenilo, -bencilo o -piridilo y en el que los sustituyentes estan seleccionados independientemente de -Hal, -CF3, -CN, -alquilo C1-6, -C(O)- alquilo C1.6 o -(CH2)qNR25R26, en la que R25 y R26 estan seleccionados independientemente de H y -alquilo C1-6.
6. Una composicion farmaceutica que comprende:

un compuesto que tiene la formula general (II), opcionalmente en forma de una sal, solvato, polimorfo, tautomero, racemato, enantiomero o diaestereomero farmaceuticamente aceptable o mezcla de los mismos,

en la que

imagen4

Y es S;

R21 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-arilo, -(CH2)q-heterociclilo, -(CH2)q-cicloalquilo, -(CH2)p- OR25 y -(Ch2)p-NR25R26;

R22 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-cicloalquilo, -Hal, -CF3 y -CN;

R23 esta seleccionado de -arilo, -heterociclilo, -cicloalquilo, -C(-R28)(-R29)-arilo, -C(-R28)(-R29)-heterociclilo y -C(-R28)(-R29)-cicloalquilo;

R25 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6 y -(CH2CH2O)rH;

R28 esta seleccionado de -H y -alquilo C1-6;

R esta seleccionado independientemente de -alquilo C1-6, -C(O)-alquilo C1.6, -Hal, -CF3, -CN, -COOR , -OR25, -(CH2)qNR25R26, -C(O)-NR25R26 y -NR25-C(O)-alquilo Cm

R28 y R29 estan seleccionados independientemente de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-arilo, -(CH2)q-heterociclilo, -(CH2)q-cicloalquilo, -OH, -O-alquilo C1-6, -O-(CH2)q-arilo, -O-(CH2)q-heterociclilo y -O-(CH2)q-cicloalquilo; o R28 y R29 son juntos =O, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2- o -CH2CH2CH2CH2-; p es de 1 a 4; q es de 0 a 4; y r es de 1 a 3;

en la que el grupo arilo, grupo heterociclilo y/o grupo cicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes R27;

con la condicion de que el compuesto no sea uno de los siguientes compuestos:

imagen5

5

10

15

20

25

30

35

imagen6

y opcionalmente uno o mas excipiente(s) y/o vehnculo(s) farmaceuticamente aceptable(s).
7. La composicion farmaceutica segun la reivindicacion 6, en la que R21 es -H, -alquilo C1-6 o -(CH2)p-OR25.
8. La composicion farmaceutica segun la reivindicacion 6 o 7, en la que R22 es -H, -alquilo Ci-6 o Hal.
9. La composicion farmaceutica segun cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en la que R23 es -(CH2)q-arilo; o -(CH2)q-heteroarilo, y en la que el grupo arilo y/o grupo heteroarilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes R27.
10. La composicion farmaceutica segun cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9, en la que R23 es -fenilo, -bencilo o -piridilo y en la que los sustituyentes estan seleccionados independientemente de -Hal, -CF3, -CN, -alquilo C1-6, -C(O)-alquilo C1.6 o -(CH2)qNR25R26, en la que R25 y R26 estan seleccionados independientemente de H y -alquilo

C1-6.
11. Un compuesto que tiene la formula general (II), opcionalmente en forma de una sal, solvato, polimorfo, tautomero, racemato, enantiomero o diaestereomero farmaceuticamente aceptable o mezcla de los mismos,

imagen7

en la que

Y es S;

R21 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-arilo, -(CH2)q-heterociclilo, -(CH2)q-cicloalquilo, -(CH2)p-OR25 y -(CH2)p-NR25R26;

R22 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-cicloalquilo, -Hal, -CF3 y -CN;

R23 esta seleccionado de -arilo, -heterociclilo, -cicloalquilo, -C(-R28)(-R29)-arilo, -C(-R28)(-R29)-heterociclilo y -C(-R28)(-R29)-cicloalquilo;

R25 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6 y -(CH2CH2O)rH;

R26 esta seleccionado de -H y -alquilo C1-6;

R27 esta seleccionado independientemente de -alquilo C1-6, -C(O)-alquilo C1.6, -Hal, -CF3, -CN, -COOR25, -OR25, -(CH2)qNR25R26, -C(O)-NR25R26 y -NR25-C(O)-alquilo C1.6;

R28 y R29 estan seleccionados independientemente de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-arilo, -(CH2)q-heterociclilo, -(CH2)q-cicloalquilo, -OH, -O-alquilo C1.6, -O-(CH2)q-arilo, -O-(CH2)q-heterociclilo y -O-(CH2)q-cicloalquilo; o R28 y R29 son juntos =O, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2- o -CH2CH2CH2CH2-; p es de 1 a 4;

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

q es de 0 a 4; y r es de 1 a 3;

en la que el grupo arilo, grupo heterociclilo y/o grupo cicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes R27;

en la que el compuesto es para su uso en el tratamiento, mejora o prevencion de una enfermedad viral.
12. El compuesto para su uso segun la reivindicacion 11, en el que la enfermedad viral se produce por Herpesviridae, Retroviridae, Filoviridae, Paramyxoviridae, Rhabdoviridae, Orthomyxoviridae, Bunyaviridae, Arenaviridae, Coronaviridae, Picornaviridae, Togaviridae o Flaviviridae; mas espedficamente en el que la enfermedad viral es gripe.
13. El compuesto para su uso segun la reivindicacion 11 o 12, en el que R21 es -H, -alquilo C1-6 o -(CH2)p-OR25
14. El compuesto para su uso segun cualquiera de las reivindicaciones 11 a 13, en el que R22 es -H, -alquilo C1-6 o Hal.
15. El compuesto para su uso segun cualquiera de las reivindicaciones 11 a 14, en el que R23 es -(CH2)q-arilo; o -(CH2)q-heteroarilo, y en el que el grupo arilo y/o grupo heteroarilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes R27.
16. El compuesto para su uso segun cualquiera de las reivindicaciones 11 a 15, en el que R23 es -fenilo, -bencilo o -piridilo y en el que los sustituyentes estan seleccionados independientemente de -Hal, -CF3, -CN, -alquilo C1-6, -C(O)-alquilo C1-6 o -(CH2)qNR25R26, en la que R25 y R26 estan seleccionados independientemente de H y -alquilo C1-6, y opcionalmente uno o mas excipiente(s) y/o vedculo(s) farmaceuticamente aceptable(s).
17. Una composicion farmaceutica que comprende:

(i) un compuesto que tiene la formula general (II), opcionalmente en forma de una sal, solvato, polimorfo, tautomero, racemato, enantiomero o diaestereomero farmaceuticamente aceptable o mezcla de los mismos,

imagen8

en la que Y es S;

R21 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-arilo, -(CH2)q-heterociclilo, -(CH2)q-cicloalquilo, -(CH2)p- OR25 y -(CH2)p-NR25R26;

R22 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-cicloalquilo, -Hal, -CF3 y -CN;

R23 esta seleccionado de -arilo, -heterociclilo, -cicloalquilo, -C(-R28)(-R29)-arilo, -C(-R28)(-R29)-heterociclilo y -C(-R28)(-R29)-cicloalquilo;

R25 esta seleccionado de -H, -alquilo C1-6 y -(CH2CH2O)rH;

R26 esta seleccionado de -H y -alquilo C1-6;

R esta seleccionado independientemente de -alquilo C1-6, -C(O)-alquilo C1.6, -Hal, -CF3, -CN, -COOR , -OR25, -(CH2)qNR25R26, -C(O)-NR25R26 y -NR25-C(O)-alquilo Cm

R28 y R29 estan seleccionados independientemente de -H, -alquilo C1-6, -(CH2)q-arilo,-(CH2)q-heterociclilo, -(CH2)q-cicloalquilo, -OH, -O-alquilo C1.6, -O-(CH2)q-arilo, -O-(CH2)q-heterociclilo y -O-(CH2)q-cicloalquilo; o R28 y R29 son juntos =O -CH2CH2-, -CH2CH2CH2- o -CH2CH2CH2CH2-; p es de 1 a 4; q es de 0 a 4; y r es de 1 a 3;

en la que el grupo arilo, grupo heterociclilo y/o grupo cicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes R27;

y

(ii) otro compuesto seleccionado de:

(a) al menos un inhibidor de la polimerasa que es diferente del compuesto que tiene la formula general (II);

(b) al menos una inhibidor de la neuraminidasa;

10

15

(c) al menos un inhibidor del canal M2;

(d) al menos un inhibidor de la alfa-glucosidasa;

(e) al menos un ligando de otra diana de la gripe; y

(f) al menos un medicamento seleccionado de antibioticos, agentes antiinflamatorios, inhibidores de la lipoxigenasa, ligandos EP, ligandos de la bradiquinina y ligandos cannabinoides;

y opcionalmente uno o mas excipiente(s) y/o vehnculo(s) farmaceuticamente aceptable(s).
18. La composicion farmaceutica como se define en la reivindicacion 17 para su uso en el tratamiento, mejora o prevencion de una enfermedad viral.
19. La composicion farmaceutica para su uso segun la reivindicacion 18, en la que la enfermedad viral se produce por Herpesviridae, Retroviridae, Filoviridae, Paramyxoviridae, Rhabdoviridae, Orthomyxoviridae, Bunyaviridae, Arenaviridae, Coronaviridae, Picornaviridae, Togaviridae o Flaviviridae; mas espedficamente en la que la enfermedad viral es la gripe.