ES2544962T9

ES2544962T9 - Composiciones proteicas biocompatibles de fase invertible

Info

Publication number: ES2544962T9
Application number: ES08856256.6T
Authority: ES
Inventors: Ronald Dieck; Ian J. Handley; Neil Winterbottom; Joanna Wang
Original assignee: Tenaxis Medical Inc
Current assignee: Tenaxis Medical Inc
Priority date: 2007-12-03
Filing date: 2008-12-02
Publication date: 2016-03-08
Anticipated expiration: 2028-12-02
Also published as: CA2706701A1; EP2219555B1; US8586671B2; PL2219555T3; ES2544962T3; EP2219555A4; WO2009073668A1; US10279073B2; EP2219555A1; US10675378B2; US20190255214A1; CA2706701C; US8198363B2; JP2014012220A; US20200297895A1; PT2219555E; EP2219555B9; US9789221B2; US20120222584A1; US11583611B2

Description

DESCRIPCION

Composiciones proteicas biocompatibles de fase invertible 5 INTRODUCCION

[0001] Un numero de composiciones sellantes han pasado a estar disponibles para controlar la fuga de fluido en un lugar quirurgico, as^ como para otras aplicaciones. Sin embargo, las composiciones sellantes actualmente disponibles pueden sufrir serias limitaciones con respecto al campo en el que se pueden usar, as^ como su

10 biocompatibilidad y sus propiedades ffsicas. Efectos secundarios, como la inflamacion, la formacion fibrosa aguda en el lugar de la herida, la toxicidad, la incapacidad de usarse en un campo ensangrentado, las malas propiedades ffsicas del sellante, y la mala adhesion al lugar quirurgico, pueden tener un serio impacto en el paciente y como resultado pueden jugar un papel significativo en la eficacia a largo plazo de la reparacion. Asimismo, los sellantes utiles tienen propiedades que pueden hacerles mas efectivos para la aplicacion quirurgica. Caractensticas, como la 15 capacidad de estar localizado en una ubicacion espedfica, los tiempos de polimerizacion adecuadamente largos o cortos, y las caractensticas de resorcion in vivo adecuadas, son vitales para una finalizacion exitosa del procedimiento de sellado.

[0002] La patente FR-2-754-268 da a conocer una composicion adhesiva biocompatible que comprende colageno 20 o gelatina disuelta y al menos un polialdetffdo macromolecular biodegradable. Robert y col., "Chemistry for peptide

and rotein PEGylation", ADVANCED DRUG DELIVERY REVIEWS vol. 54, num. 4, 2002 proporciona una revision de las qmmicas de PEGilacion de primera y segunda generacion.

[0003] Asf pues, hay una necesidad continuada del desarrollo de nuevas composiciones biocompatibles para el 25 uso como sellantes, asf como del uso en otras aplicaciones.

DESCRIPCION RESUMIDA

[0004] Se proporcionan composiciones proteicas biocompatibles de fase invertible y procedimientos para hacer y 30 usar las mismas. Las composiciones de fase invertible de acuerdo con aspectos de la invencion se preparan

combinando un sustrato proteico ffquido y un componente de reticulacion ffquido, donde el componente de reticulacion ffquido incluye un agente de reticulacion macromolecular; y en las que dicho agente de reticulacion macromolecular es un producto reactivo de un exceso de un agente de reticulacion y un poffmero fisiologicamente aceptable seleccionado de un glicosoaminoglicano; y en las que la composicion experimenta una transicion de fase 35 de un primer estado ffquido a un segundo estado solido.

[0005] El agente de reticulacion macromolecular se produce combinando un exceso de un agente de reticulacion, por ejemplo, un dialdetffdo tratado termicamente, con una cantidad de un poffmero fisiologicamente aceptable, como un glicosoaminoglicano. El exceso de agente de reticulacion y el poffmero fisiologicamente

40 aceptable reaccionan para producir un agente de reticulacion macromolecular. Al combinarse el agente de reticulacion macromolecular con el sustrato proteico, el agente de reticulacion macromolecular reacciona con las protemas en el componente del sustrato para producir una composicion final caracterizada por la presencia de una red interpenetrante.

45 [0006] Tambien se proporcionan equipos para el uso en la preparacion de las composiciones en cuestion. Las composiciones en cuestion, los equipos y los sistemas encuentran uso en una variedad de aplicaciones diferentes.

BREVE DESCRIPCION DE LA FIGURA

50 [0007] La FIG. 1 proporciona una tabla de resultados observados con diferentes composiciones sellantes, como se describe en la Seccion experimental, mas adelante.

DESCRIPCION DETALLADA

55 [0008] Se proporcionan composiciones proteicas biocompatibles de fase invertible y procedimientos para hacer y usar las mismas. Las composiciones de fase invertible en cuestion se preparan combinando un sustrato proteico ffquido y una composicion de reticulacion ffquida, donde la composicion de reticulacion ffquida incluye un agente de reticulacion macromolecular; y en las que dicho agente de reticulacion macromolecular es un producto reactivo de un exceso de un agente de reticulacion y un poffmero fisiologicamente aceptable seleccionado de un

glicosoaminoglicano; y en las que la composicion experimenta una transicion de fase de un primer estado Uquido a un segundo estado solido.

[0009] Tambien se proporcionan equipos para el uso en la preparacion de las composiciones en cuestion. Las 5 composiciones en cuestion, los equipos y los sistemas encuentran uso en una variedad de aplicaciones diferentes.

[00010] Antes de que la presente invencion se describa en mayor detalle, se debe entender que esta invencion no esta limitada a formas de realizacion particulares descritas, asf pues puede, por supuesto, variar. Tambien se debe entender que la terminologfa usada en este documento solo tiene el fin de describir formas de realizacion

10 particulares, y no esta destinada a ser limitadora, ya que el ambito de la presente invencion estara limitado solo por las reivindicaciones anexas.

Cuando se proporciona un intervalo de valores, se entiende que cada valor intermedio, hasta la decima parte de la unidad del lfmite inferior, a menos que el contexto claramente dicte lo contrario, entre el lfmite superior y el lfmite inferior de ese intervalo y cualquier otro valor indicado o intermedio en ese intervalo indicado, estan comprendidos 15 en la invencion. Los lfmites superior e inferior de estos intervalos mas pequenos pueden estar incluidos independientemente en los intervalos mas pequenos y tambien estan comprendidos en la invencion, sujetos a cualquier lfmite espedficamente excluido en el intervalo indicado. Cuando el intervalo indicado incluye uno o ambos lfmites, los intervalos que excluyen alguno o ambos de estos lfmites incluidos tambien se incluyen en la invencion.

20 [0011] Ciertos intervalos se presentan en este documento con valores numericos precedidos por el termino “aproximadamente”. El termino “aproximadamente” se utiliza en este documento para proporcionar soporte literal para el numero exacto que precede, asf como un numero que esta proximo a o es aproximadamente el numero que el termino precede. Al determinar si un numero esta proximo a o es aproximadamente un numero espedficamente indicado, el numero proximo o aproximadamente no indicado puede ser un numero que, en el contexto en el que se 25 presenta, proporciona el equivalente sustancial del numero espedficamente indicado.

[0012] A menos que se defina lo contrario, todos los terminos tecnicos y cientfficos utilizados en este documento tienen el mismo significado que el entendido habitualmente por un experto en la materia al que pertenece la invencion. Aunque cualquier procedimiento y material similar o equivalente a los descritos en este documento se

30 pueden tambien utilizar en la practica o evaluacion de la presente invencion, a continuacion se describen los procedimientos y materiales ilustrativos representativos.

[0013] Cabe indicar que, tal como se utiliza en el presente documento y en las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares “un”, “una” y “el/la”” incluyen los referentes en plural, a menos que el contexto dicte claramente lo

35 contrario. Cabe indicar tambien que las reivindicaciones pueden estar redactadas para excluir cualquier elemento opcional. Por tanto, esta afirmacion pretende servir como base antecedente para el uso de terminologfa exclusiva, tal como "unicamente", "solo" y similares en conexion con la mencion de los elementos de las reivindicaciones, o el uso de una limitacion "negativa".

40 [0014] Como sera evidente para los expertos en la materia al leer esta divulgacion, cada una de las formas de realizacion individuales descritas e ilustradas en este documento tienen componentes separados y caractensticas que se pueden separar facilmente de o combinar con las caractensticas de cualquiera de las otras diversas formas de realizacion sin desviarse del ambito de la presente invencion. Cualquier procedimiento mencionado se puede llevar a cabo en el orden de eventos mencionados o en cualquier otro orden que sea logicamente posible.

45

[0015] Al describirse aun mas la invencion en cuestion, las composiciones de fase invertible de acuerdo con la invencion se describen primero en mayor detalle, seguido de una revision de aplicaciones en las que las composiciones encuentran uso, asf como una revision de los equipos y los sistemas que encuentran uso al hacerse o usarse las composiciones de fase invertible en cuestion.

50

COMPOSICION PROTEICA BIOCOMPATIBLE DE FASE INVERTIBLE

[0016] Como se resume anteriormente, la invencion en cuestion proporciona una composicion proteica biocompatible de fase invertible. La composicion, con el paso del tiempo, experimenta una inversion de fase de un

55 primer estado lfquido a un segundo estado solido. En el primer estado lfquido, la composicion de fase invertible tiene una viscosidad suficiente de tal manera que se le puede hacer que fluya a traves de una canula medica o rociar sobre un lugar de tejido objetivo. Las composiciones de fase invertible estan caracterizadas por ser capaces de unir tejido en entornos tanto mojados (por ejemplo, sangre) como secos, donde la adhesion de la composicion al tejido es excepcionalmente fuerte. Un aspecto de las composiciones es que, una vez que se aplican a una ubicacion de

tejido objetivo, permanecen en la ubicacion de tejido objetivo. Un aspecto adicional de las composiciones en cuestion es que son bien toleradas por el cuerpo y no provocan una respuesta inflamatoria sustancial, si es que la hay.

5 [0017] Las composiciones proteicas de fase invertible en cuestion se preparan combinando o mezclando un sustrato proteico lfquido con una composicion de reticulacion lfquida como se da a conocer en la reivindicacion 1.

[0018] Cada uno de estos componentes o composiciones precursoras se revisa ahora por separado en mayor detalle.

10

Composicion de agente reticulante

[0019] Como se indica anteriormente, la composicion de fase invertible se produce combinando un sustrato proteico lfquido, como se describe anteriormente, con una composicion de agente reticulante lfquida que incluye un

15 agente de reticulacion macromolecular. Mientras que la viscosidad del componente de reticulacion puede variar, en ciertas formas de realizacion se aproxima a la viscosidad del componente proteico, expresada en centistokes (cSt) a 25°C aproximadamente, oscilando entre 10 cSt y 150 cSt, como de 30 cSt a 70 cSt. El componente de reticulacion se puede esterilizar de acuerdo con cualquier protocolo conveniente, donde los protocolos de esterilizacion de interes incluyen, pero no estan limitados a: gamma, rayo de electrones, y similares. El componente de reticulacion

20 lfquido es estable durante el almacenamiento. Por estable durante el almacenamiento se quiere decir que el sustrato

se puede mantener bajo condiciones de almacenamiento, como a temperatura ambiente durante un periodo de

tiempo de al menos 1 ano o mas, como 3 anos o mas, sin que experimente ningun cambio sustancial que impacte negativamente en la funcion del sustrato de tal manera que ya no sea adecuado para el uso en la preparacion de una composicion biocompatible de fase invertible de la invencion.

25

[0020] El componente de reticulacion se produce combinando un exceso de un agente de reticulacion con una cantidad de un polfmero fisiologicamente aceptable. Ejemplos de agentes de reticulacion incluyen, pero no estan limitados a: moleculas foto-oxidativas; carbodiimidas; compuestos que contienen carbonilo, por ejemplo, mono- y dicarbonilos, incluyendo acidos carboxflicos, por ejemplo, acidos dicarboxflicos, como acido adfpico, acido glutarico y

30 similares, y aldetndos, incluyendo mono- y dialdetndos, por ejemplo glutaraldetndo; etc. En ciertas formas de

realizacion, el agente reticulante empleado es un agente reticulante aldetndo. En ciertas de estas formas de

realizacion, el agente reticulante aldehfdo es pretratado para producir un agente reticulante aldetndo estabilizado, por ejemplo, un agente reticulante glutaraldetndo estabilizado, por ejemplo, donde el agente reticulante es aldetndo estabilizado termicamente, como glutaraldetndo estabilizado termicamente (como se describe en la Patente

35 estadounidense num. 7.303.757).

[0021] Mientras que la cantidad de agente de reticulacion en la composicion puede variar, en ciertas formas de realizacion la cantidad de agente de reticulacion oscila entre el 0,1 y el 20% (v/v), como del 0,5 al 15% (v/v) e incluyendo del 1 al 10% (v/v).

40

[0022] Ademas del agente de reticulacion, la composicion de reticulacion incluye ademas una cantidad de un polfmero fisiologicamente aceptable. El polfmero fisiologicamente aceptable puede ser cualquier polfmero que sea tolerado por el cuerpo y reaccione con el agente de reticulacion para producir un producto de reticulacion macromolecular prepolimerico. El producto prepolimerico es un producto reactivo entre el agente de reticulacion y el

45 polfmero, e incluye un esqueleto polimerico con una o mas moleculas de reticulacion unidas de forma covalente al mismo de tal manera que el esqueleto polimerico incluye uno o mas grupos funcionales de reticulacion, donde los grupos funcionales de reticulacion incluyen al menos una mitad reactiva, por ejemplo, una mitad de aldetndo, que se puede unir de forma covalente al componente de protemas del sustrato proteico. Asf pues, el producto prepolimerico conserva la capacidad de reticularse al entrar en contacto con el sustrato proteico. El producto prepolimerico de

50 ciertas formas de realizacion es una macromolecula soluble que comprende una molecula del esqueleto polimerico unida a moleculas del agente de reticulacion, donde al menos una porcion de las moleculas del agente de reticulacion unidas conservan una mitad de reticulacion libre que puede unir protemas en el sustrato proteico. Este agente de reticulacion "macromolecular" del producto prepolimerico puede variar de peso molecular medio, y en ciertas formas de realizacion puede oscilar en peso entre 10.000 y 4 millones de Daltons, como de 500.000 a 2

55 millones de Daltons.

[0023] En ciertas formas de realizacion, el polfmero fisiologicamente aceptable es un glicosoaminoglicano (es decir, un mucopolisacarido). Glicosoaminoglicanos espedficos de interes incluyen, pero no estan limitados a: sulfato de condroitina; sulfato de dermatan; sulfato de queratan; tieparina; sulfato de tieparan; e tiialuronano (es decir, acido

hialuronico). En ciertas formas de realizacion, el componente de glicosoaminoglicano es hialuronano.

[0024] El agente de reticulacion esta presente en la composicion de reticulacion en exceso con respecto a la cantidad de poKmero fisiologicamente aceptable. En ciertas formas de realizacion, la cantidad de polfmero

5 fisiologicamente aceptable constituye hasta del 0,01 al 5% (w/v), como del 0,05 al 3% (w/v) incluyendo del 0,1 al 1% (w/v) de la composicion de reticulacion.

[0025] En ciertas formas de realizacion, la composicion de agente reticulante puede incluir ademas una cantidad de un agente modificador de la viscosidad. Agentes modificadores de la viscosidad de interes incluyen,

10 pero no estan limitados a: polfmeros de polioxietileno o de polioxipropileno o copolfmeros de los mismos, como polietilenglicol y polipropilenglicol; eteres de celulosa no ionicos como metilcelulosa, etilcelulosa, hidroximetilcelulosa, hidroxietilcelulosa, carboximetilcelulosa, carboxietilcelulosa e hidroxipropilcelulosa; celulosas adicionales, como carboximetilcelulosa sodica, carboximetilcelulosa calcica, carboximetilalmidon; y similares. En ciertas formas de realizacion de particular interes, el agente emulsionante es un eter de celulosa, particularmente un eter de celulosa 15 no ionico, como carboximetilcelulosa. La carboximetilcelulosa esta disponible en una variedad de fuentes comerciales, incluyendo pero no estando limitadas a Sigma, Hercules, Fluka y Noviant. En ciertas formas de realizacion, el peso molecular medio del eter de celulosa es de al menos 1000 Daltons aproximadamente, como de al menos 5000 Daltons aproximadamente, donde el peso molecular medio puede ser tan elevado como de 10.000 Daltons o mayor, por ejemplo, de 50.000 Daltons o mayor, de 100.000 Daltons o mayor, y oscila en ciertas formas de 20 realizacion entre aproximadamente 5.000 y aproximadamente 100.000 Daltons, como de aproximadamente 10.000 a aproximadamente 50.000 Daltons. La proporcion del agente modificador de la viscosidad en el sellante en ciertas formas de realizacion oscila entre el 0,01 y el 10% (v/v), como del 0,1 al 4% (v/v) incluyendo del 0,5 al 2% (v/v).

Sustrato proteico 25

[0026] El sustrato proteico lfquido a partir del cual se preparan las composiciones de fase invertible en cuestion es una composicion lfquida, por ejemplo, una composicion acuosa, que esta compuesta de al menos un componente proteico y, en ciertas formas de realizacion, un modificador de adhesion, donde el sustrato puede incluir uno o mas componentes adicionales, incluyendo, pero no estando limitado a: un plastificante; un carbohidrato; y

30 similares.

[0027] El sustrato se puede esterilizar de acuerdo con cualquier protocolo conveniente, donde los protocolos de esterilizacion de interes incluyen, pero no estan limitados a: radiacion gamma, rayo de electrones y similares.

35 [0028] El sustrato proteico lfquido es estable durante el almacenamiento. Por estable durante el almacenamiento se quiere decir que el sustrato se puede mantener bajo condiciones de almacenamiento, como a temperatura ambiente durante un periodo de tiempo de al menos 1 ano o mas, como 3 anos o mas, sin que experimente ningun cambio sustancial que impacte negativamente en la funcion del sustrato de tal manera que ya no sea adecuado para el uso en la preparacion de una composicion biocompatible de fase invertible de la invencion. 40

Componente proteico

[0029] El componente proteico (es decir, material proteico) del sustrato esta compuesto de una o mas protemas distintas. Las protemas de este componente pueden ser protemas sinteticas o bien que se produzcan de

45 forma natural, donde las protemas se pueden obtener/preparar usando cualquier protocolo conveniente, por ejemplo, purificacion a partir de fuentes que se produzcan de forma natural, produccion recombinante, produccion sintetica, y similares, donde en ciertas formas de realizacion las protemas se obtienen a partir de fuentes que se produzcan de forma natural, por ejemplo, bovina, porcina o humana. Protemas espedficas de interes incluyen, pero no estan limitadas a: albuminas, colagenos, elastinas, fibrinas, y similares.

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[0030] La cantidad de protema en la composicion de sustrato puede variar, donde la seleccion de concentracion espedfica depende de la aplicacion deseada y de los parametros del producto deseados por lo tanto, como las caractensticas de tenacidad, dureza, elasticidad, resorcion y los efectos de la agregacion plaquetaria. En ciertas formas de realizacion, la concentracion total de protemas totales en las composiciones de sustrato oscila

55 entre el 1 y el 75% (w/w) aproximadamente, como del 1-50% (w/w), incluyendo del 5 al 40% (w/w).

[0031] En ciertas formas de realizacion, la protema primaria de la composicion de sustrato de esta forma de realizacion es albumina, donde la albumina puede ser una albumina que se produzca de forma natural, por ejemplo, albumina humana, albumina bovina, albumina porcina etc., o una variante de las mismas. Como se conoce en la

tecnica, la albumina se puede comprar en polvo y despues disolver en una suspension acuosa, o de forma alternativa, se puede comprar en forma acuosa. La albumina purificada se puede derivar de una cualquiera de un numero de fuentes diferentes incluyendo, bovina, ovina, equina, humana, o aviar de acuerdo con procedimientos bien conocidos (ref.: Cohn y col, J. Amer. Chem. Soc. 69:1753) o se puede comprar en forma purificada de un 5 proveedor, como Aldrich Chemical (St. Louis, Missouri), en forma liofilizada o acuosa. La albumina se puede derivatizar para que actue como un portador para farmacos, como sulfato de heparina, factores de crecimiento, antibioticos, o se puede modificar en un esfuerzo por moderar la viscosidad, o la hidrofilia. La derivatizacion usando agentes acetilantes, como, pero no estando limitado a, anhudrido succmico, y cloruros de laurilo, son utiles para la produccion de lugares de union para la adicion de moleculas utiles. En estas formas de realizacion donde el 10 componente proteico incluye albumina, la albumina puede estar presente en concentraciones que oscilen entre aproximadamente el 10 y aproximadamente el 50% (w/w), como de aproximadamente el 30 a aproximadamente el 40% (w/w).

[0032] En ciertas formas de realizacion, el componente proteico tambien incluye un colageno, por ejemplo, un 15 colageno que se produzca de forma natural (humano, bovino, porcino) o una variante sintetica del mismo. De

acuerdo con la invencion, el colageno puede ser en las formas seca o acuosa cuando se mezcla con la albumina. El colageno se puede derivatizar para aumentar su utilidad. Se ha comprobado que agentes acetilantes, como anhudridos o cloruros acidos, producen lugares utiles para la union de moleculas como factores de crecimiento, y antibioticos. Cuando esta presente, el colageno a veces oscila entre aproximadamente el 1 y aproximadamente el 20 20% (w/w), incluyendo de aproximadamente el 1 a aproximadamente el 10% (w/w), como de aproximadamente el 1 a aproximadamente el 4% (w/w), incluyendo del 2 al 4% (w/w) aproximadamente.

[0033] El componente proteico en cuestion, como se describe anteriormente, puede o no incluir uno o mas agentes activos, por ejemplo, farmacos, presentes en el, como se desee. Cuando esta presente, el/los agente/s se

25 puede/n unir a los polfmeros, como se desee.

Agente adherente

[0034] Tambien presente puede haber uno o mas agentes adherentes. Los agentes adherentes mejoran la 30 adherencia del sellante a la superficie biologica. En muchas formas de realizacion, los modificadores de adhesion

son compuestos polimericos que tienen funciones cargadas, por ejemplo, aminas, etc. Mientras que se pueden usar numerosos agentes adherentes, uno de particular aplicabilidad es polietilenimina (PEI). PEI es un polfmero de alquilo ramificado, de larga cadena que contiene aminas primarias, secundarias y terciarias. La presencia de estos grupos altamente ionicos da como resultado un acoplamiento significativo a traves de interacciones ionicas con la 35 superficie subyacente. Ademas, la presencia de PEl en el sustrato aumenta significativamente la presencia de aminos terminales adecuados para producir reticulados con el agente de reticulacion. Agentes adherentes adicionales de interes incluyen, pero no estan limitados a: gelatina, carboximetilcelulosa, butilhidroxitolueno, quitosano, etc.

40 [0035] En ciertas formas de realizacion de la invencion, se usan agentes adherentes para modificar la adhesion al sustrato biologico mientras que simultaneamente se crea un procoagulante. En ciertas formas de realizacion, los agentes adherentes estan presentes en concentraciones de desde aproximadamente el 0,1 hasta aproximadamente el 10% (w/w), como desde aproximadamente el 0,1 hasta aproximadamente el 4% (w/w).

45 Componentes opcionales

[0036] El componente del sustrato descrito anteriormente de las composiciones en cuestion puede, en ciertas formas de realizacion, incluir uno o mas componentes opcionales que modifiquen las propiedades de la composicion de fase invertible producida a partir del sustrato y el agente reticulante. Componentes opcionales representativos de

50 interes se analizan ahora en mayor detalle a continuacion.

Agentes plastificantes

[0037] De acuerdo con la invencion, un agente plastificante puede estar presente en el sustrato. El agente 55 plastificante proporciona un numero de funciones, incluyendo el humedecimiento de una superficie, o de forma

alternativa, aumentar el modulo elastico del material, o mas aun, ayudar en la mezcla y aplicacion del material. Existen numerosos agentes plastificantes, incluyendo acidos grasos, por ejemplo, acido oleico, acido palmttico, etc., ftalato de dioctilo, fosfolfpidos, y acido fosfatfdico. Puesto que los plastificantes son habitualmente sustancias organicas no solubles en agua y no facilmente miscibles con agua, a veces es ventajoso modificar su miscibilidad

con agua, mezclando previamente el plastificante apropiado con un alcohol para reducir la tension superficial asociada con la solucion. Para este fin, se puede usar cualquier alcohol. En una forma de realizacion representativa de esta invencion, se mezcla acido oleico con etanol para formar una solucion al 50% (w/w) y esta solucion se usa entonces para plastificar el sustrato proteico durante el proceso de formulacion. Mientras que el tipo y la 5 concentracion del agente plastificante dependen de la aplicacion, en ciertas formas de realizacion la concentracion final del agente plastificante es de aproximadamente el ,01 al 10% (w/w), incluyendo de aproximadamente el 2 a aproximadamente el 4% (w/w). Otros agentes plastificantes de interes incluyen, pero no se limitan a: polietilenglicol, glicerina, butilhidroxitolueno, etc.

10 Carbohidrato procoagulante

[0038] En ciertas formas de realizacion, los sustratos incluyen un carbohidrato procoagulante. El quitosano y los derivados del quitosano son potentes coaguladores de sangre y, por lo tanto, son beneficiosos en la formulacion de materiales sellantes capaces de sellar lesiones vasculares. Mientras que se ha demostrado que practicamente

15 todos los materiales de quitina tienen cierta actividad procoagulante, de acuerdo con la invencion, el uso de quitina acetilada se emplea como un aditivo para la formulacion de sellante destinado al control sangumeo. La acetilacion de la molecula se puede conseguir en un numero de modos diferentes, pero un procedimiento comun es el tratamiento de mezclas de quitosano / acido acetico con anhndridos de acido, como sucdnico. Esta reaccion se lleva a cabo facilmente a temperatura ambiente. De acuerdo con la invencion, los geles creados de esta manera 20 combinados con sustratos proteicos y reticulados in situ son beneficiosos para la creacion de un miembro estructural biocompuesto. Asf pues, el carbohidrato procoagulante puede ser quitosano, quitosano de bajo peso molecular, quitina, oligosacaridos de quitosano, y derivados de quitosano de los mismos. De acuerdo con las ensenanzas de esta invencion el componente de carbohidrato, por ejemplo, quitosano, puede estar presente en concentraciones que oscilen entre aproximadamente el 0 y aproximadamente el 20%, como de aproximadamente el 0,1 a 25 aproximadamente el 5% (w/w).

Rellenos

[0039] Rellenos de interes incluyen rellenos tanto reforzantes como no reforzantes. Se pueden incluir rellenos 30 reforzantes, como seda fibrosa picada, poliester, PTFE, NAILON, fibras de carbono, polipropileno, poliuretano, vidrio,

etc. Las fibras se pueden modificar, por ejemplo, como se describe anteriormente para los otros componentes, como se desee, por ejemplo, para aumentar la humectabilidad, la miscibilidad, etc. Los rellenos reforzantes pueden estar presentes del 0 al 40% aproximadamente, como de aproximadamente el 10 a aproximadamente el 30%. Tambien se pueden incluir rellenos no reforzantes, por ejemplo, arcilla, mica, hidroxiapatita, sulfato de calcio, astillas oseas, etc. 35 Donde se desee, estos rellenos tambien se pueden modificar, por ejemplo, como se describe anteriormente. Los rellenos no reforzantes pueden estar presentes del 0 al 40% aproximadamente, como de aproximadamente el 10 a aproximadamente el 30%.

Agentes biologicamente activos 40

[0040] Se pueden incluir agentes biologicamente activos, por ejemplo, factores de crecimiento oseo, activadores tisulares, activadores de crecimiento de cartflago, agentes activos de moleculas pequenas, etc. De ese modo, los agentes biologicamente activos pueden incluir, peptidos, polipeptidos, protemas, sacaridos, polisacaridos y carbohidratos, acidos nucleicos, y materiales organicos e inorganicos de moleculas pequenas. Agentes

45 biologicamente activos espedficos incluyen antibioticos, antivirales, antiinflamatorios esteroideos y no esteroideos, antineoplasicos, antiespasmodicos incluyendo bloqueadores de los canales, moduladores de interacciones de las celulas con la matriz extracelular incluyendo inhibidores de crecimiento celular y moleculas anti-adhesion, encimas e inhibidores de encimas, anticoagulantes, factores de crecimiento, ADN, ARN e inhibidores de smtesis de protemas, agentes contra la migracion celular, vasodilatadores, y otros farmacos usados para el tratamiento de lesion en el 50 tejido. Ejemplos de estos compuestos incluyen inhibidores de la enzima convertidora de la angiotensina, agentes antitromboticos, prostaciclina, heparina, salicilatos, agentes trombodticos, agentes antiproliferativos, nitratos, farmacos bloqueadores de los canales de calcio, estreptoquinasa, uroquinasa, activador tisular del plasminogeno (TPA) y activador del plasminogeno acilado (PA) y complejo activador estreptoquinasa-plasminogeno acilado (APSAC), colchicina, y agentes alquilantes, factores moduladores de crecimiento como interleucinas, factor de 55 crecimiento de transformacion P y congeneres de factor de crecimiento derivado de las plaquetas, anticuerpos monoclonales dirigidos contra factores de crecimiento, componentes de la matriz extracelular modificados o sus receptores, secuestrantes de lfpidos y colesterol y otros agentes que puedan modular el tono vascular, la funcion, la arteriosclerosis, y la respuesta cicatrizante para la lesion del vaso o del organo despues de la intervencion.

Agente espumante

[0041] En ciertas formas de realizacion, el sustrato puede incluir un agente espumante que, al combinarse con la composicion de agente reticulante, de como resultado una composicion espumada, por ejemplo, una composicion 5 que incluya burbujas de aire gaseosas intercaladas por todas partes. Puede estar presente cualquier agente espumante conveniente, donde el agente espumante puede ser un agente que, al entrar en contacto con la composicion de reticulacion, produzca un gas que proporcione una generacion de burbujas y, por tanto, las caractensticas de espumado deseadas de la composicion. Por ejemplo, una sal como bicarbonato de sodio en una cantidad que oscile entre aproximadamente el 2 y aproximadamente el 5% w/w puede estar presente en el sustrato.

10 Al combinarse el sustrato con una composicion de agente reticulante acida, por ejemplo, que tenga un pH de 5 aproximadamente, se produce una composicion espumada.

Modificadores adicionales

15 [0042] Tambien puede haber presentes modificadores adicionales. Por ejemplo, puede haber presentes mezclas de uno o mas polfmeros (por ejemplo, polimezclas), como Teflon, PET, NAILON, hidrogeles, polipropileno, etc. Las polimezclas se pueden modificar, por ejemplo, como se describe anteriormente, para garantizar las propiedades deseadas. Estos modificadores adicionales pueden estar presentes en cantidades que oscilen entre el 0 y el 50% aproximadamente, incluyendo de aproximadamente el 10 a aproximadamente el 30%.

20

Amortiguador

[0043] Al mezclarse el sustrato proteico y el agente reticulante para producir la composicion de fase invertible en cuestion, se emplea la amortiguacion de la composicion de fase invertible en ciertas formas de realizacion por un

25 numero de razones, por ejemplo, para optimizar la resistencia de union de la composicion a la superficie de acoplamiento, para optimizar las condiciones necesarias para que se produzca la reticulacion interna, etc. Por ejemplo, la reticulacion optima para protemas usando agentes reticulantes de glutaraldetudo se produce en un intervalo de pH de aproximadamente 6 a aproximadamente 8. Los amortiguadores capaces de mantener este intervalo son utiles en esta invencion, siempre y cuando no interfieran con el carbonilo terminal del agente reticulante

30 o modifiquen el extremo amino de los aminoacidos. Por ejemplo, los amortiguadores de fosfato tienen un valor pKa en el intervalo de pH 7.0 y no interfieren con el proceso de reticulacion puesto que no contienen funciones carboxflicas o ammicas. El amortiguador de fosfato de una resistencia de hasta 1 M es adecuado para el uso como un amortiguador en la presente invencion, donde en ciertas formas de realizacion el amortiguador de fosfato tiene una resistencia de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 0,3M. Mientras que la amortiguacion de fosfato de las

35 soluciones es ideal para la estabilidad del sustrato de protemas en aplicaciones en las que se requiere una adhesion aumentada, tambien se puede usar un amortiguador acido. Se ha comprobado que los amortiguadores de citrato 0,1-1 M y que tienen un intervalo de pH de aproximadamente 4,5 a aproximadamente 6,5 son utiles para esta invencion.

40 [0044] El amortiguador puede estar presente en el componente del agente reticulante inicial o bien en el componente del sustrato proteico inicial, o presente en ambos componentes, como se desee.

Combinacion de sustrato y agente reticulante para producir la composicion de fase invertible

45 [0045] Como se resume anteriormente, las composiciones de fase invertible en cuestion se preparan combinando un sustrato proteico lfquido y un agente reticulante lfquido en cantidades apropiadas y bajo condiciones suficientes para que se produzca la composicion de fase invertible. En ciertas formas de realizacion, el sustrato y el agente reticulante se combinan en una relacion (v/v) que oscila entre 1/5 aproximadamente y 5/1 aproximadamente; de manera que se produzca una composicion de fase invertible resultante en la que la concentracion total de

50 protemas oscile entre aproximadamente el 10 y aproximadamente el 60%, como de aproximadamente el 20% a aproximadamente el 50%, incluyendo de aproximadamente el 30 a aproximadamente el 40% y la composicion de agente reticulante total oscile entre aproximadamente el 0,1 y aproximadamente el 20%, como de aproximadamente el 0,5 a aproximadamente el 15%, incluyendo de aproximadamente el 1 a aproximadamente el 10%.

55 [0046] La combinacion del sustrato y el agente reticulante se produce habitualmente bajo condiciones de mezcla, de tal manera que los dos componentes lfquidos se combinan o se mezclan completamente el uno con el otro. La combinacion o la mezcla se puede llevar a cabo usando cualquier protocolo conveniente, por ejemplo, combinando manualmente dos componentes, empleando un dispositivo que combine los dos componentes, etc. La combinacion o la mezcla se lleva a cabo habitualmente a una temperatura que oscila entre aproximadamente los 20

y aproximadamente los 40°C, como a temperatura ambiente.

[0047] La combinacion del sustrato proteico y el agente reticulante como se describe anteriormente da como resultado la produccion de una composicion de fase invertible. Por composicion de fase invertible se quiere decir una

5 composicion que va de un primer estado lfquido a un segundo estado solido. En el segundo estado solido, la composicion es sustancialmente, si no completamente, incapaz del flujo de fluido. La composicion de fase invertible permanece habitualmente en un estado solido, despues de la combinacion de los componentes del sustrato y del agente reticulante, durante un periodo de tiempo que oscila entre 10 segundos aproximadamente y 10 minutos aproximadamente, tal como de 20 segundos aproximadamente a 5 minutos aproximadamente, incluyendo de 30 10 segundos aproximadamente a 120 segundos aproximadamente, cuando se mantiene a una temperatura que oscila entre los 15°C aproximadamente y los 40°C aproximadamente, tal como de los 20°C aproximadamente a los 30°C aproximadamente.

[0048] Formulaciones de fase invertible espedficas incluyen como componentes: (i) una primera composicion 15 que comprende una composicion de sustrato proteico que tiene albumina al 30%-50% aproximadamente, y cloruro

de quitosano al 0,1%-0,3% aproximadamente; y (ii) una segunda composicion que comprende una composicion de reticulacion que tiene glutaraldehndo tratado termicamente al 3%-10% aproximadamente, acido hialuronico al 0,1%- 1% aproximadamente, y opcionalmente, sal sodica al 0%-1,5% aproximadamente de carboximetilcelulosa alta viscosidad. Tales formulaciones de fase invertible tienen generalmente un tiempo de curacion medio de 5-60 20 segundos aproximadamente al anadirse y mezclarse las composiciones primera y segunda, y una rotura media de 125-1000 mmHg aproximadamente, y mas habitualmente, un tiempo de curacion medio de 10-30 segundos aproximadamente, y una rotura media de 200-850 mmHg aproximadamente, segun se mida a temperatura ambiente aproximadamente.

25 [0049] En una forma de realizacion particular, se proporciona una formulacion de fase invertible que incluye como componentes: (i) una primera composicion que comprende una composicion de sustrato proteico que tiene albumina al 40% aproximadamente, y cloruro de quitosano al 0,2% aproximadamente; y (ii) una segunda composicion que comprende una composicion de reticulacion que tiene glutaraldehndo tratado termicamente al 4,4%-7,5% aproximadamente, acido hialuronico al 0,2% aproximadamente, y opcionalmente, sal sodica al 0%-0,75% 30 aproximadamente de carboximetilcelulosa alta viscosidad. Tales formulaciones de fase invertible tienen generalmente un tiempo de curacion medio de 10-30 segundos aproximadamente al anadirse y mezclarse las composiciones primera y segunda, y una rotura media de 250-800 mmHg aproximadamente, y mas habitualmente, un tiempo de curacion medio de 10-15 segundos aproximadamente, y una rotura media de 350-700 mmHg aproximadamente, segun se mida a temperatura ambiente aproximadamente.

35

[0050] Como tambien se describe anteriormente, se pueden incorporar diversos materiales adicionales a las composiciones de fase invertible para servir a cualquiera de los diversos propositos, como para modificar las caractensticas ffsicas de la composicion, y/o ayudar en la reparacion de un tejido o material biologico objetivo al que se aplique la composicion. Por ejemplo, se pueden incorporar agentes biologicamente activos como peptidos,

40 protemas, acidos nucleicos, moleculas de carbohidratos, moleculas pequenas y similares para atraer y unir tipos de celulas espedficos, como globulos blancos y plaquetas, o materiales como fibronectina, vimentina, y colageno, se pueden usar para aumentar la cicatrizacion mediante una union no espedfica. Tambien se puede incluir material de rastreo, como bario, yodo o sales de tantalo, para permitir la visualizacion y/o la monitorizacion de la composicion de fase invertible. En ciertas formas de realizacion, se pueden usar diferentes agentes biologicamente activos en 45 diferentes aplicaciones o capas cuando una o mas composiciones de fase invertible se apliquen de forma diferencial.

[0051] En ciertas formas de realizacion, tambien se pueden incorporar celulas a o aplicar en conexion con las composiciones de fase invertible antes, durante y/o despues de la aplicacion de la composicion. Cuando se emplean, las celulas generalmente se incluyen en la composicion de sustrato proteico, o se aplican en conjuncion

50 con o por separado de la composicion de fase invertible de una manera que permite su adherencia en el lugar de aplicacion. Las celulas pueden ser celulas vivas, artificiales, fantasmas de celulas (es decir, fantasmas de globulos rojos o plaquetas), o pseudoviriones, dependiendo de un uso final dado. Por ejemplo, las celulas se pueden seleccionar para producir agentes espedficos como factores de crecimiento en el lugar de aplicacion. Tambien se pueden incluir agentes biologicamente activos que modulen la viabilidad, la diferenciacion, y/o el crecimiento celular. 55 En algunas formas de realizacion, las celulas pueden ser celulas madre, o en otras formas de realizacion, celulas progenitoras que correspondan al tipo de tejido en la ubicacion del tratamiento u otras celulas, que proporcionen ventajas terapeuticas. Por ejemplo, celulas hepaticas incorporadas a la composicion de fase invertible y aplicadas a una herida o superficie del hngado de un paciente pueden ayudar a su regeneracion y reparacion. Esto puede ser particularmente util en casos en los que enfermedades como la cirrosis, la fibrosis, la enfermedad qrnstica o el

cancer da como resultado un tejido no funcional, la formacion de cicatrices o el reemplazo de tejido con celulas cancerosas. Se pueden aplicar procedimientos similares a otros organos y tejidos tambien.

[0052] Los agentes biologicamente activos se pueden incorporar ffsicamente y/o mediante acoplamiento 5 qmmico. La incorporacion ffsica se lleva a cabo mezclando el agente biologicamente activo con el material de fase

invertible antes de y/o durante la aplicacion a la superficie objetivo y la curacion. El material normalmente se mezcla en la solucion de sustrato proteico para formar una solucion, suspension o dispersion. En una forma de realizacion, el agente biologicamente activo se puede encapsular dentro de dispositivos de administracion como microesferas, microcapsulas, liposomas, fantasmas de celulas o pseudoviriones, que en sf mismos afectan a las tasas de 10 liberacion y a la absorcion por las celulas. La incorporacion qmmica del agente biologicamente activo se lleva a cabo acoplando qmmicamente el agente a un material polimerico del sustrato proteico o bien de la composicion de reticulacion, normalmente del sustrato proteico, antes o en el momento de la polimerizacion (por ejemplo, mediante la conjugacion a traves de grupos funcionales reactivos, como aminos, hidroxilos, tioles, y similares). Para garantizar que se mantengan los tiempos de curacion y las propiedades de rotura deseadas de la composicion de fase 15 invertible, la incorporacion ffsica y/o qmmica de un agente biologicamente activo tiene en consideracion las cantidades relativas de sustrato proteico y agente reticulante presentes en la composicion final, y se puede ajustar como corresponda.

PROCEDIMIENTOS

20

[0053] Las composiciones biocompatibles de fase invertible en cuestion se emplean en procedimientos en los que una cantidad de la composicion de fase invertible se administra a un lugar o ubicacion particular de un sujeto, paciente o huesped con necesidad de la misma. El sujeto, paciente o huesped es habitualmente un "mairnfero" o "Mammalia", donde estos terminos se usan ampliamente para describir organismos que se encuentran dentro de la

25 clase Mammalia, incluyendo, pero no estando limitada a, las ordenes carnivora (por ejemplo, perros y gatos), roedores (por ejemplo, ratones, conejillos de indias, y ratas), lagomorfos (por ejemplo conejos) y primates (por ejemplo, humanos, chimpances, y monos). En muchas formas de realizacion, los animales o huespedes, es decir, los sujetos (tambien denominados en este documento pacientes) seran humanos.

30 [0054] La cantidad que se administra al sujeto en cualquier aplicacion dada variara necesariamente dependiendo de la naturaleza de la aplicacion y el uso de la composicion, pero en ciertas formas de realizacion representativas oscila entre aproximadamente 1 y aproximadamente 50 ml, como de aproximadamente 1 a aproximadamente 25 ml, incluyendo de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 ml, por ejemplo, 3 ml aproximadamente.

35

[0055] Mientras que depende necesariamente de la aplicacion particular en la que la composicion en cuestion se esta empleando, la composicion en cuestion, en muchas formas de realizacion, se administra localmente a una region, lugar o ubicacion particular del huesped, donde el lugar o ubicacion puede, por supuesto, variar. Lugares o ubicaciones representativas incluyen, pero no estan limitadas a: vasos, organos, y similares. Dependiendo de la

40 aplicacion particular, la composicion se puede administrar al lugar de interes manualmente o con un dispositivo de administracion, por ejemplo, el dispositivo de administracion empleado para administrar la composicion en aplicaciones de implantacion de estent, descrito en mayor detalle mas adelante.

UTILIDAD

45

[0056] Las composiciones biocompatibles de fase invertible en cuestion encuentran uso en una variedad de aplicaciones diferentes. Aplicaciones representativas de las composiciones de fase invertible en cuestion incluyen las descritas en las Patentes estadounidenses nums. 3.438.374; 5.092.841; 5.292.362; 5.385.606; 5.575.815; 5.583.114; 5.843.156; 6.162.241; 6.290.729; 6.302.898; 6.310.036; 6.329.337; 6.371.975; 6.372.229; 6.423.333;

50 6.458.147; 6.475.182; 6.547.806; y 7.303.757; asf como las Solicitudes estadounidenses nums. 2002/0015724; 2002/0022588; 2002/0133193; 2002/0173770; 2002/0183244; 2002/019490; 2002/0032143.

SISTEMAS

55 [0057] Tambien se proporcionan sistemas para el uso en la practica de los procedimientos en cuestion. Los sistemas pueden incluir elementos de administracion de fluido para la administracion de la composicion de sustrato y de reticulacion al lugar de administracion, elementos de mezcla, etc. Ejemplos de tales sistemas incluyen los descritos en la Patente estadounidense num. 7.303.757.

EQUIPOS

[0058] Tambien se proporcionan equipos para el uso en la practica de los procedimientos en cuestion, donde los equipos incluyen habitualmente componentes de una composicion distinta de sustrato lfquido y de reticulacion 5 lfquida de una composicion de fluido de fase invertible, como se describe anteriormente. Las composiciones de sustrato y de reticulacion pueden estar presentes en contenedores separados en el equipo, por ejemplo, donde el sustrato esta presente en un primer contenedor y el agente de reticulacion esta presente en un segundo contenedor, donde los contenedores pueden o no estar presentes en una configuracion combinada.

10 [0059] Los equipos en cuestion tambien pueden incluir un dispositivo de mezcla, para mezclar el sustrato y el agente reticulante entre sf para producir la composicion de fase invertible. Los equipos tambien pueden incluir un dispositivo de administracion (que puede o no incluir un elemento de mezcla), como una jeringa de doble cilindro, dispositivos de cateter, y similares, como se describe anteriormente.

15 [0060] El equipo puede incluir ademas otros componentes, por ejemplo, alambres de gma, cables sensores, etc., que puedan encontrar uso en la practica de los procedimientos en cuestion.

[0061] Ademas de los componentes antes mencionados, los equipos en cuestion habitualmente incluyen ademas instrucciones para usar los componentes del equipo para poner en practica los procedimientos en cuestion.

20 Las instrucciones para poner en practica los procedimientos en cuestion generalmente se registran en un medio de registro adecuado. Por ejemplo, las instrucciones se pueden imprimir en un sustrato, como papel o plastico, etc. Asf pues, las instrucciones pueden estar presentes en los equipos como un prospecto, en el etiquetado del contenedor del equipo o los componentes del mismo (es decir, asociadas con el envase o envase mas pequeno incluido en el) etc. En otras formas de realizacion, las instrucciones estan presentes como un archivo de datos de almacenamiento 25 electronico presente en un medio de almacenamiento legible por ordenador adecuado, por ejemplo, CD-ROM, disquete, etc. En otras formas de realizacion mas, las instrucciones propiamente dichas no estan presentes en el equipo, sino que se proporcionan medios para obtener las instrucciones de una fuente remota, por ejemplo a traves de internet. Un ejemplo de esta forma de realizacion es un equipo que incluye una direccion de internet en la que las instrucciones se pueden ver y/o desde la que las instrucciones se pueden descargar. Al igual que con las 30 instrucciones, este medio para obtener las instrucciones se registra en un sustrato adecuado.

[0062] Los siguientes ejemplos se proporcionan a modo de ilustracion y no a modo de limitacion.

EXPERIMENTAL

35

[0063] Se prepararon diversas formulaciones de composiciones de fase invertible en las que la sal sodica de acido hialuronico (AH) se incluyo en el componente de protemas y el componente de reticulacion. Las formulaciones ilustrativas se probaron como se muestra en la Tabla 1.

40 Tabla 1

Lote#: Formulacion de protemas Formulacion de reticulacion

Alb: AH Cl Quit 213 GATT AH CMC alta vis

004-49: 40% 0,0% 0,2% 7,5% 0,2% 0,00%

004-42-1: 40% 0,2% 0,2% 4,4% 0,0% 0,75%

004-42-2: 40% 0,2% 0,2% 7,5% 0,0% 0,75%

004-42-3: 40% 0,2% 0,2% 4,4% 0,0% 0,00%

003-118-2: 40% 0,0% 0,2% 7,5% 0,2% 0,75%

Abreviaturas: Alb=Albumina; AH= Acido hialuronico; Cl Quit 213 = Cloruro de quitosano; GATT= glutaraldehndo tratado termicamente; y CMC alta vis=la sal sodica de carboximetilcelulosa alta viscosidad_____________________

La solucion de protemas se prepara en una solucion de amortiguador de fosfato 10mM, pH 6.2. La solucion de agente reticulante se prepara en una solucion de amortiguador de fosfato 10mM, pH 7.

Se uso un sistema de prueba in vitro para determinar la resistencia a la rotura de cada formulacion. Una porcion 45 cuadrada de una pulgada de pared aortica porcina se asegura a un recipiente a presion sobre un orificio con un diametro de 5 mm. Un orificio se perfora a traves de la aorta usando una aguja de calibre 14. El sellante se aplica a la aorta sobre el orificio de la aguja de calibre 14 y se deja que se cure. Se aplica una presion de aire al interior del recipiente a presion hasta que se rompa el sellante. La presion de aire requerida para causar la ruptura se mide usando un manometro.

[0064] Las propiedades observadas de estas formulaciones se muestran en forma tabular en la FIG. 1, y en la Tabla 2, para el sistema de prueba de la aorta.

Tabla 2

Lote#: Tiempo de curacion medio (seg) n=2 Rotura media (mmHg) n=2

004-49: 19,50 565,20

004-42-1: 22,00 353,70

004-42-2: 13,50 566,20

004-42-3: 33,50 246,20

003-118-2: 11,50 499,20

5

[0065] Los resultados en la FIG. 1 y la Tabla 2 demuestran que cuando se proporciona acido hialuronico (AH) en el componente de reticulacion y no en el componente de protemas, se eliminan las interacciones no deseadas con el componente de protemas y se aumenta la viscosidad del componente de reticulacion, lo cual da como

10 resultado una composicion sellante global de 2 componentes mejorada.

[0066] Aunque la invencion precedente se ha descrito con cierto detalle a modo de ilustracion y ejemplo a efectos de claridad de entendimiento, es facilmente evidente para aquellos con conocimientos basicos en la materia a tenor de las ensenanzas de esta invencion que se pueden hacer ciertos cambios y modificaciones a la misma sin

15 desviarse del espmtu o ambito de las reivindicaciones anexas.

[0067] Asf pues, lo anterior simplemente ilustra los principios de la invencion. Se apreciara que los expertos en la materia podran concebir diversas disposiciones que, aunque no se describan o se muestren explfcitamente en este documento, plasmen los principios de la invencion y esten incluidas dentro de su ambito. Asimismo, todos los

20 ejemplos y el lenguaje condicional mencionados en este documento estan destinados principalmente a ayudar al lector a entender los principios de la invencion y los conceptos aportados por los inventores para promover la tecnica, y se debe interpretar que son sin limitacion para tales ejemplos y condiciones espedficamente mencionados.

Claims

REIVINDICACIONES

I. Una composicion de fase invertible producida combinando:

5 (a) un sustrato proteico lfquido, y

(b) una composicion de reticulacion Uquida que comprende un agente de reticulacion macromolecular; y

en la que dicho agente de reticulacion macromolecular es un producto reactivo de un exceso de un agente de 10 reticulacion y un polfmero fisiologicamente aceptable seleccionado de un glicosoaminoglicano; y

en la que la composicion experimenta una transicion de fase de un primer estado lfquido a un segundo estado solido.

15 2. La composicion de fase invertible de acuerdo con la reivindicacion 1, en la que dicho

glicosoaminoglicano es hialuronano.
3. La composicion de fase invertible de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que dicho sustrato proteico lfquido comprende un material proteico seleccionado del grupo que consiste en:

20 albumina, elastina, fibrina y formas de colageno solubles e insolubles y combinaciones de los mismos.
4. La composicion de fase invertible de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que dicho sustrato proteico comprende ademas al menos uno de un agente adherente, un plastificante, y un carbohidrato.

25
5. La composicion de fase invertible de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que dicho agente de reticulacion comprende un aldetudo, como glutaraldetudo, en la que dicho glutaraldetudo opcionalmente se estabiliza termicamente.

30 6. Un procedimiento de producir una composicion de fase invertible, combinando dicho procedimiento:

(a) un sustrato proteico lfquido; y

(b) una composicion de reticulacion lfquida que comprende un agente de reticulacion macromolecular;

35

para producir dicha composicion de fase invertible; y

en el que dicho agente de reticulacion macromolecular es un producto reactivo de un exceso de un agente de reticulacion y un polfmero fisiologicamente aceptable seleccionado de un glicosoaminoglicano; y 40

en el que la composicion experimenta una transicion de fase de un primer estado lfquido a un segundo estado solido.
7. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 6, en el que dicho glicosoaminoglicano es 45 hialuronano.
8. El procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 6 o 7, en el que dicho sustrato proteico comprende un material proteico seleccionado del grupo que consiste en: albumina, elastina, fibrina y formas de colageno solubles e insolubles y combinaciones de los mismos.

50
9. El procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en el que dicho agente de reticulacion comprende un aldehfdo, como glutaraldehfdo, en el que dicho glutaraldehfdo opcionalmente se estabiliza termicamente.

55 10. Una composicion de fase solida producida mediante el procedimiento de una cualquiera de las

reivindicaciones 6 a 9.

II. Un equipo para producir una composicion de fase invertible, comprendiendo dicho equipo:

(a) un sustrato proteico; y

(b) una composicion de reticulacion que comprende un agente de reticulacion macromolecular; y

5 (c) un dispositivo de administracion de fluido de fase invertible; y

en el que dicho agente de reticulacion macromolecular es un producto reactivo de un exceso de un agente de reticulacion y un polfmero fisiologicamente aceptable seleccionado de un glicosoaminoglicano; y

10 en el que la composicion experimenta una transicion de fase de un primer estado lfquido a un segundo estado solido.
12. El equipo de acuerdo con la reivindicacion 11, en el que dicho glicosoaminoglicano es hialuronano.