ES2490915B1 - Método para monitorizar las respuestas de linfocitos T citotóxicos (LTC) mediante una reacción de hipersensibilidad de tipo retardado usando epítopos de LTC definidos - Google Patents

Método para monitorizar las respuestas de linfocitos T citotóxicos (LTC) mediante una reacción de hipersensibilidad de tipo retardado usando epítopos de LTC definidos Download PDF

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Abstract

Método para monitorizar las respuestas de linfocitos T citotóxicos (LTC) mediante una reacción de hipersensibilidad de tipo retardado usando epítopos de LTC definidos.#La presente invención se refiere a un método in vivo para monitorizar las repuestas de linfocitos T citotóxicos (LTC) induciendo una reacción de hipersensibilidad de tipo retardado (DTH) usando epítopos de LTC definidos. Se refiere además a los epítopos y sus kits.

Description

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P201490028
12-03-2014
Basándose en las consideraciones previas y en datos experimentales anteriores, también se evaluaron los marcadores BLT1 y CXCR1 en LTC específicos de SL9 de VIH y GL9 del virus de la gripe. En contraste a la expresión de CLA y CD103, se encontró que ambos marcadores estaban elevados en células específicas de SL9 de VIH comparados con
5 la población de LTC específica de GL9 (para la expresión de BLT1: mediana de GL9: 56,9% frente a mediana de SL9; 88,45%; valor de p: 0,0001; para CXCR1: mediana de GL9: 12,97% frente a mediana de SL9: 32,27%; valor de p <0,0001, Mann-Whitney). Véase la figura 3C. Como para CLA y CD103, la expresión de estos marcadores de emigración tisular inflamatorios no estaba modulada entre el momento de la inyección del antígeno y el tiempo
10 de 72h tras la inyección, lo que sugiere que una gran fracción de GL9 y SL9 derivados de PBMC o bien no se estimulaban por la inyección intradérmica del antígeno o que las células específicas de SL9 expresan constitutivamente más BLT1 y CXCR1 que los LTC específicos de GL9. Por tanto, estos datos sugieren que ambos, CLA y CD103, pero no BLT1 o CXCR1, pueden estar implicados en fomentar la migración hacia o la retención de LTC específicos
15 de GL9 en el sitio de inyección dérmica del antígeno. La ausencia de ambos de estos marcadores en células específicas de SL9 de VIH es consistente con la falta de reactividad DTH a este antígeno y puede indicar perfiles de funciones efectoras diferenciales de los LTC dirigidos contra estas infecciones víricas.
20
Tabla 1
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DTH1
+ - N.D n.a. n.a. 0 11 9 12 0
DTH2
+ - N.D n.a. n.a. 0 9 11 15 0
DTH3
+ - N.D n.a. n.a. 0 13 8 14 0
DTH4
- - N.D n.a. n.a. 0 8 6 0 0
DTH5
+ - N.D n.a. n.a. 0 6 9 7 0
DTH6
+ - N.D n.a. n.a. 0 5 11 10 0
DTH7
+ - N.D n.a. n.a. 0 12 12 8 0
DTH8
+ - N.D n.a. n.a. 0 10 13 3 0
DTH9
+ - N.D n.a. n.a. 0 12 9 5 0
DTH10
- - N.D n.a. n.a. 0 11 8 0 0
21
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P201490028
12-03-2014
Tabla 2
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TINCIÓN DE DEXTRÁMERO
GL9 Dextrámero
R-PE Immudex
SL9 Dextrámero
APC Immudex
CD3
SK7 Ratón IgG1,κ APC-Cy7 BD
CD8
SK1 Ratón IgG1,κ Amcyam BD
CCR7
3D12 Rata IgG2a, κ PeCy7 BD
Marcadores de activación
CD45RA
HI100 Ratón IgG2b,κ PeCy5 BD
CD27
M-T271 Ratón IgG1,κ V450 BD
Marcadores de emigración
CLA
HECA-452 Rata IgM, κ FITC BD
CD103
Ver-ACT8 Ratón IgG1,κ FITC BD
CXCR1
5A12 Ratón IgG2b,κ PeCy5 BD
BLTRbiot
203/14F11 Ratón IgG1 Strept.V450 BD
Fuentes: Immudex AS (Copenhague, DK), BD Biosciences Corp (Franklin Lakes, NJ, EE UU)
23

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