ES2380134T3 - Use of Clostridium perfringens type C bacteria for vaccine preparation - Google Patents

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ES2380134T3 ES07822693T ES07822693T ES2380134T3 ES 2380134 T3 ES2380134 T3 ES 2380134T3 ES 07822693 T ES07822693 T ES 07822693T ES 07822693 T ES07822693 T ES 07822693T ES 2380134 T3 ES2380134 T3 ES 2380134T3
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Jozef Franciscus Maria Smeets
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Abstract

The present invention relates to the use of a vaccine comprising Clostridium perfringens type C bacterium for protecting swine against Clostridium perfringens type A infection.

Description

Uso de la bacteria Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna Use of Clostridium perfringens type C bacteria for vaccine preparation

5 La presente invención se refiere al uso de la bacteria Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna. The present invention relates to the use of Clostridium perfringens type C bacteria for the preparation of a vaccine.

Las Clostridia son bacterias anaerobias formadoras de esporas Gram-positivas. Las Clostridia son ampliamente reconocidas como patógenos de animales tanto domésticos como salvajes. Una visión general de las diversas Clostridia y las enfermedades animales que producen se facilita por Songer, J.G. en The Clostridia; Capítulo 10: Clostridial Diseases in Animals, Molecular Biology and Pathogenesis, ed. Rood, J.I. y col., Academic Press Ltd (1997) ISBN 20-9. Clostridia are anaerobic bacteria that form Gram-positive spores. Clostridia are widely recognized as pathogens of both domestic and wild animals. An overview of the various Clostridia and the animal diseases they produce is provided by Songer, J.G. in The Clostridia; Chapter 10: Clostridial Diseases in Animals, Molecular Biology and Pathogenesis, ed. Rood, J.I. et al., Academic Press Ltd (1997) ISBN 20-9.

De las especies clostridiales actualmente conocidas, la Clostridium perfringens se considera algunas veces que es el Of the currently known clostridial species, Clostridium perfringens is sometimes considered to be the

15 patógeno bacteriano más extendido, y de todas las especies clostridiales, es ciertamente la causa más importante de enfermedad entérica clostridial en animales domésticos. The most widespread bacterial pathogen, and of all clostridial species, is certainly the most important cause of clostridial enteric disease in domestic animals.

La especie Clostridium perfringens se subdivide en cinco tipos; tipo A-E, basándose en las principales toxinas que producen. The species Clostridium perfringens is subdivided into five types; type A-E, based on the main toxins they produce.

Los tipos A y Cde Clostridium perfringens, y Clostridium difficile, son los principales patógenos clostridiales entéricos del cerdo. Types A and Cde Clostridium perfringens, and Clostridium difficile, are the main enteric clostridial pathogens of the pig.

Las infecciones entéricas clostridiales en cerdos se han descrito más específicamente por Songer, J.G. y Uzal, F.A. 25 (J. Vet. Diagn. Invest 17: 528-536 (2005)). Clostridial enteric infections in pigs have been described more specifically by Songer, J.G. and Uzal, F.A. 25 (J. Vet. Diagn. Invest 17: 528-536 (2005)).

Clostridium perfringens tipo C infecta cerdos, ganado vacuno, pollos, seres humanos, ovejas, perros y caballos. Los cochinillos son los más vulnerables a la infección por Clostridium perfringens tipo C. En cochinillos de 1-2 días de edad, la infección produce tasas de morbilidad de entre el 30%-50% e índices de letalidad del 50%-100%. Cochinillos mayores (1-2 semanas de edad) pueden tener una evolución más larga de la infección. Clostridium perfringens type C infects pigs, cattle, chickens, humans, sheep, dogs and horses. Piglets are the most vulnerable to Clostridium perfringens type C infection. In 1-2-day-old piglets, the infection produces morbidity rates between 30% -50% and lethality rates of 50% -100%. Older piglets (1-2 weeks of age) may have a longer course of infection.

Las cerdas son la fuente común de infección. Sows are the common source of infection.

El enfoque común para la protección de cochinillos es la vacunación de cerdas con una vacuna de Clostridium The common approach to piglet protection is the vaccination of sows with a Clostridium vaccine

35 perfringens tipo C con el fin inducir anticuerpos que se transfieren a sus crías mediante el calostro. Esto conduce a un alto nivel de protección en cochinillos en ese momento de tiempo en el que son más vulnerables a la infección crostridial. Tales vacunas se basan en toxoides. Normalmente, son vacunas de sobrenadante desintoxicado en las que no están presentes células. Las vacunas de toxoide se han descrito, entre otros, por Springer, S. y Selbitz, H.-J. (FEMS Immun. and Medical Microbiol. 24: 333-336 (1999)). 35 type C perfringens in order to induce antibodies that are transferred to their offspring by colostrum. This leads to a high level of protection in piglets at that time when they are most vulnerable to crostridial infection. Such vaccines are based on toxoids. Normally, they are detoxified supernatant vaccines in which cells are not present. The toxoid vaccines have been described, among others, by Springer, S. and Selbitz, H.-J. (FEMS Immun. And Medical Microbiol. 24: 333-336 (1999)).

Clostridium perfringens tipo A infecta corderos, cabras, terneros, pollos, cerdos caballos, perros y seres humanos. En cerdos completamente desarrollados, Clostridium perfringens tipo A es un miembro de la flora normal del intestino. Por tanto, actualmente se asume que cerdos completamente desarrollados no son adversamente afectados por la presencia de Clostridium perfringens tipo A en el intestino. Clostridium perfringens type A infects lambs, goats, calves, chickens, pigs, horses, dogs and humans. In fully developed pigs, Clostridium perfringens type A is a member of the normal flora of the intestine. Therefore, it is currently assumed that fully developed pigs are not adversely affected by the presence of Clostridium perfringens type A in the intestine.

45 Sin embargo, puede producir enterocolitis necrótica porcina en cerdos neonatales y destetados. Las vacunas para la protección de cerdos contra Clostridium perfringens tipo A son raras. Actualmente sólo hay una vacuna (condicionalmente autorizada) comercialmente disponible. 45 However, it can cause swine necrotic enterocolitis in neonatal and weaned pigs. Vaccines for the protection of pigs against Clostridium perfringens type A are rare. There is currently only one commercially available (conditionally authorized) vaccine.

Uno de los motivos para esto puede ser el hecho de que, como se ha dicho anteriormente, Clostridium perfringens tipo A sea un miembro de la flora normal. Por tanto, no se esperaría que desencadenara el sistema inmunitario. One of the reasons for this may be the fact that, as stated above, Clostridium perfringens type A is a member of the normal flora. Therefore, it would not be expected to trigger the immune system.

Como consecuencia, no se esperaría que se indujera la producción de anticuerpos contra Clostridium perfringens tipo A. Si se indujeran anticuerpos, Clostridium perfringens tipo A no sobreviviría en el intestino, dejando de ser un As a consequence, the production of antibodies against Clostridium perfringens type A would not be expected to be induced. If antibodies were induced, Clostridium perfringens type A would not survive in the intestine, ceasing to be a

55 miembro de la flora normal. Como otra consecuencia, por supuesto no se esperaría que las cerdas transmitieran alguna protección a sus crías por el calostro. Por cualquier motivo, parece que Clostridium perfringens tipo A no induce inmunoestimulación suficiente. Selbitz y col. (Tierärztl Prax. 28(G) :337-340; (2000)) describen el uso de vacunas específicas para rebaño contra la infección por C. perfringens tipo A. 55 member of the normal flora. As another consequence, of course, the bristles would not be expected to transmit any protection to their young by colostrum. For any reason, it seems that Clostridium perfringens type A does not induce sufficient immunostimulation. Selbitz et al. (Tierärztl Prax. 28 (G): 337-340; (2000)) describe the use of herd-specific vaccines against C. perfringens type A infection.

Ahora se ha encontrado sorprendentemente que las vacunas contra Clostridium perfringens tipo C que comprenden sobrenadante de cultivo desintoxicado pueden inducir protección cruzada contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. It has now been surprisingly found that vaccines against Clostridium perfringens type C comprising detoxified culture supernatant can induce cross protection against Clostridium perfringens type A infection.

Se encontró más sorprendentemente que la vacunación de cerdas con sobrenadante de cultivo de Clostridium It was found more surprisingly than the vaccination of sows with Clostridium culture supernatant

65 perfringens tipo C conduce a una protección significativa de sus cochinillos contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. 65 type C perfringens leads to significant protection of your piglets against Clostridium perfringens type A infection.

Se encontró incluso más sorprendentemente que incluso las cerdas rinden mejor después de esta vacunación. Esto es sorprendente debido a que generalmente se asumía, como se ha mencionado anteriormente, que los cerdos completamente desarrollados, tales como cerdas, no estaban afectados adversamente por infección por Clostridium perfringens tipo A. Este hallazgo demuestra por primera vez que lo opuesto es el caso. It was found even more surprisingly that even sows perform better after this vaccination. This is surprising because it was generally assumed, as mentioned above, that fully developed pigs, such as sows, were not adversely affected by Clostridium perfringens type A infection. This finding demonstrates for the first time that the opposite is the case. .

5 Por tanto, una primera realización de la presente invención se refiere al uso de una bacteria de Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna para la protección de cerdos completamente desarrollados contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. 5 Thus, a first embodiment of the present invention relates to the use of a Clostridium perfringens type C bacterium for the preparation of a vaccine for the protection of fully developed pigs against Clostridium perfringens type A infection.

Una segunda realización de la presente invención se refiere al uso de una bacteria Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna para la protección de cerdas contra la infección por Clostridium perfringens tipo A second embodiment of the present invention relates to the use of a Clostridium perfringens type C bacterium for the preparation of a vaccine for the protection of sows against Clostridium perfringens type infection.

A. TO.

Una tercera realización de la presente invención se refiere al uso de una bacteria Clostridium perfringens tipo C para A third embodiment of the present invention relates to the use of a Clostridium perfringens type C bacterium for

15 la preparación de una vacuna para cerdas, para la protección de cochinillos contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. 15 the preparation of a vaccine for sows, for the protection of piglets against infection by Clostridium perfringens type A.

Una cuarta realización de la presente invención se refiere al uso de una bacteria Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna para la protección de cochinillos contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. A fourth embodiment of the present invention relates to the use of a Clostridium perfringens type C bacteria for the preparation of a vaccine for the protection of piglets against Clostridium perfringens type A infection.

Como el experto entenderá, de hecho, el uso de una bacteria Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna es un procedimiento de dos etapas: la bacteria Clostridium perfringens tipo C se usa para el crecimiento en un medio de cultivo con el fin de obtener el sobrenadante de cultivo que es la base para la preparación de la vacuna según la invención. As the expert will understand, in fact, the use of a Clostridium perfringens type C bacterium for the preparation of a vaccine is a two-stage procedure: the Clostridium perfringens type C bacterium is used for growth in a culture medium in order to Obtain the culture supernatant which is the basis for the preparation of the vaccine according to the invention.

25 Por tanto, otra realización de la presente invención se refiere al uso de un sobrenadante de cultivo de Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna para la protección de cerdos completamente desarrollados contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. Therefore, another embodiment of the present invention relates to the use of a culture supernatant of Clostridium perfringens type C for the preparation of a vaccine for the protection of fully developed pigs against Clostridium perfringens type A infection.

Todavía otra realización de la presente invención se refiere al uso de un sobrenadante de cultivo de Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna para la protección de cerdas contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. Yet another embodiment of the present invention relates to the use of a culture supernatant of Clostridium perfringens type C for the preparation of a vaccine for the protection of sows against infection by Clostridium perfringens type A.

De nuevo, otra realización de la presente invención se refiere al uso de un sobrenadante de cultivo de Clostridium Again, another embodiment of the present invention relates to the use of a Clostridium culture supernatant.

35 perfringens tipo C para la preparación de una vacuna para cerdas, para la protección de cochinillos contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. 35 type C perfringens for the preparation of a vaccine for sows, for the protection of piglets against Clostridium perfringens type A infection.

También una realización de la presente invención se refiere al uso de un sobrenadante de cultivo de Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna para la protección de cochinillos contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. Also an embodiment of the present invention relates to the use of a culture supernatant of Clostridium perfringens type C for the preparation of a vaccine for the protection of piglets against Clostridium perfringens type A infection.

Dentro del tipo de toxina de Clostridium perfringens tipo C puede hacerse una división entre aquellas cepas que producen toxinas beta-2 y aquellas cepas que no producen. Aproximadamente el 40% de todas las cepas de Clostridium perfringens tipo C producen esta toxina. Within the type of Clostridium perfringens toxin type C a division can be made between those strains that produce beta-2 toxins and those strains that do not produce. Approximately 40% of all strains of Clostridium perfringens type C produce this toxin.

45 Se encontró que una bacteria Clostridium perfringens tipo C que produce toxina beta-2 es incluso más adecuada que una bacteria Clostridium perfringens tipo C no productora de toxina beta-2. Tales cepas y su identificación se han descrito, entre otros, por Fisher, D.J. y col. (Inf. & Immun. 74: 5200-5210 (2006)). 45 It was found that a Clostridium perfringens type C bacterium that produces beta-2 toxin is even more suitable than a Clostridium perfringens type C bacterium that does not produce beta-2 toxin. Such strains and their identification have been described, among others, by Fisher, D.J. et al. (Inf. & Immun. 74: 5200-5210 (2006)).

Por tanto, una forma preferida de esta realización se refiere a un uso en el que usa una bacteria Clostridium perfringens tipo C que produce toxina beta-2. Therefore, a preferred form of this embodiment refers to a use in which it uses a Clostridium perfringens type C bacterium that produces beta-2 toxin.

Las vacunas preparadas como se ha descrito anteriormente no son ni mucho menos las únicas vacunas que se administran a cerdos en el proceso de cría de cerdos comercial. Las vacunas crostridiales se administran Vaccines prepared as described above are by no means the only vaccines administered to pigs in the commercial pig farming process. Crostridial vaccines are administered

55 frecuentemente aproximadamente en el mismo momento que las vacunas contra otros organismos y virus patógenos del cerdo. 55 frequently at about the same time as vaccines against other organisms and pathogenic viruses of the pig.

Por tanto, en otra realización preferida, la vacuna preparada como se describe en la presente invención comprende adicionalmente uno o más antígenos derivados de organismos o virus patógenos del cerdo, anticuerpos contra aquellos antígenos o información genética que codifica tales antígenos. Therefore, in another preferred embodiment, the vaccine prepared as described in the present invention further comprises one or more antigens derived from pathogenic organisms or viruses of the pig, antibodies against those antigens or genetic information encoding such antigens.

Tales organismos o virus se seleccionan preferentemente del grupo de virus de la seudorrabia, virus PRRS, virus de la gripe porcina, parvovirus porcino, virus de la gastroenteritis transmisible, rotavirus, Escherichia coli, Erysipelothrix rhusiopathiae, Bordetella bronchiseptica, Salmonella typhimurium, Salmonella choleraesuis, Haemophilus parasuis, Such organisms or viruses are preferably selected from the group of pseudo -rabia virus, PRRS virus, swine flu virus, porcine parvovirus, transmissible gastroenteritis virus, rotavirus, Escherichia coli, Erysipelothrix rhusiopathiae, Bordetella bronchiseptica, Salmonella typhimurium, Salmonella choleraesu Haemophilus parasuis,

65 Pasteurella multocida, Streptococcus suis, Mycoplasma hyopneumoniae, Brachyspira hyodysenteriae y Actinobacillus pleuropneumoniae. 65 Pasteurella multocida, Streptococcus suis, Mycoplasma hyopneumoniae, Brachyspira hyodysenteriae and Actinobacillus pleuropneumoniae.

Por tanto, una forma más preferida de esta realización se refiere a una vacuna preparada como se describe en la presente invención que comprende adicionalmente uno o más antígenos derivados de organismos o virus patógenos del cerdo, en la que estos organismos o virus se seleccionan del grupo de virus de la seudorrabia, virus PRRS, virus de la gripe porcina, parvovirus porcino, virus de la gastroenteritis transmisible, rotavirus, Escherichia coli, Therefore, a more preferred form of this embodiment relates to a vaccine prepared as described in the present invention that additionally comprises one or more antigens derived from pathogenic organisms or viruses of the pig, in which these organisms or viruses are selected from the group of pseudorrabia virus, PRRS virus, swine flu virus, porcine parvovirus, transmissible gastroenteritis virus, rotavirus, Escherichia coli,

5 Erysipelothrix rhusiopathiae. Bordetella bronchiseptica. Salmonella typhimurium, Salmonella choleraesuis, Haemophilus parasuis, Pasteurella multocida, Streptococcus suis, Mycoplasma hyopneumoniae, Brachyspira hyodysenteriae y Actinobacillus pleuropneumoniae. 5 Erysipelothrix rhusiopathiae. Bordetella bronchiseptica. Salmonella typhimurium, Salmonella choleraesuis, Haemophilus parasuis, Pasteurella multocida, Streptococcus suis, Mycoplasma hyopneumoniae, Brachyspira hyodysenteriae and Actinobacillus pleuropneumoniae.

A continuación de la infección por Clostridium perfringens, los cochinillos frecuentemente sufren infección por Following Clostridium perfringens infection, piglets frequently suffer from infection by

10 Escherichia coli. La Escherichia coli es la causa de otra grave enfermedad entérica en cochinillos. Por tanto, los cochinillos o las cerdas preñadas se vacunan frecuentemente con vacunas contra Escherichia coli. Las vacunas contra E. coli se usan comúnmente en el campo y están comercialmente disponibles. 10 Escherichia coli. Escherichia coli is the cause of another serious enteric disease in piglets. Therefore, piglets or pregnant sows are frequently vaccinated with vaccines against Escherichia coli. Vaccines against E. coli are commonly used in the field and are commercially available.

Por tanto, es muy deseable una vacuna de combinación que comprenda tanto componentes de sobrenadante de 15 cultivo de Clostridium perfringens tipo C como de vacuna contra Escherichia coli debido a que protege contra la infección por Clostridium perfringens tipo C, Clostridium perfringens tipo A y Escherichia coli. Therefore, a combination vaccine comprising both supernatant components of culture of Clostridium perfringens type C and vaccine against Escherichia coli is very desirable because it protects against infection by Clostridium perfringens type C, Clostridium perfringens type A and Escherichia coli .

Por tanto, una forma más preferida de esta realización se refiere a una vacuna preparada como se describe en la presente invención que comprende adicionalmente uno o más antígenos derivados del organismo patógeno del 20 cerdo Escherichia coli. Therefore, a more preferred form of this embodiment relates to a vaccine prepared as described in the present invention which additionally comprises one or more antigens derived from the pathogenic organism of the pig Escherichia coli.

La invención se ejemplifica en los siguientes ejemplos. The invention is exemplified in the following examples.

Ejemplos Examples

25 Producción de antígeno de Clostridium perfringens tipo C 25 Production of Clostridium perfringens type C antigen

Una cepa de Clostridium perfringens tipo C estándar, la cepa 587 (también llamada CWC 1/S, de la Colección de A standard type C Clostridium perfringens strain, strain 587 (also called CWC 1 / S, from the Collection of

R.U. Weybridge) se cultivó en un fermentador hasta el comienzo de la fase de crecimiento estacionario. El cultivo se R.U. Weybridge) was grown in a fermenter until the beginning of the stationary growth phase. The crop is

30 centrifugó y el sedimento que contenía las células bacterianas se desechó. Se añadió formaldehído al sobrenadante a una concentración final de 0,5% v/v para inactivar las toxinas, seguido de concentración por medio de ultrafiltración y filtración a 0,2 μm. 30 centrifuged and the sediment containing the bacterial cells was discarded. Formaldehyde was added to the supernatant at a final concentration of 0.5% v / v to inactivate the toxins, followed by concentration by ultrafiltration and filtration at 0.2 μm.

Preparación de vacunas Vaccine Preparation

35 Se formuló una vacuna mezclando el antígeno de Clostridium perfringens tipo C y un adyuvante basado en tocoferol. Cada dosis de vacuna (2 ml) comprendió 20 μl de un concentrado de sobrenadante de cultivo de toxoide de antígeno de Clostridium perfringens tipo C concentrado 17 veces. 35 A vaccine was formulated by mixing Clostridium perfringens type C antigen and a tocopherol-based adjuvant. Each vaccine dose (2 ml) comprised 20 µl of a Clostridium perfringens antigen toxoid culture supernatant concentrate type C concentrated 17 times.

40 La vacuna cumplió con la monografía de la Farmacopea europea 0363 (vacuna contra Clostridium perfringens para uso veterinario) en lo referente a seguridad y potencia de las vacunas de tipo C. 40 The vaccine complied with the monograph of the European Pharmacopoeia 0363 (vaccine against Clostridium perfringens for veterinary use) in terms of safety and potency of type C vaccines.

Adicionalmente, en este experimento se añadieron antígenos de E. coli purificados (fimbrias F4ab, F4ac, F5 y F6 y toxina lábil al calor) para suprimir la posible infección por E. coli. Estos componentes se conocen en la técnica, y el 45 experto sabría cómo preparar una vacuna basándose de estos componentes. Additionally, in this experiment purified E. coli antigens (F4ab, F4ac, F5 and F6 fimbriae and heat labile toxin) were added to suppress possible E. coli infection. These components are known in the art, and the expert would know how to prepare a vaccine based on these components.

Alternativamente, sin embargo, el experto podría usar una vacuna contra E. coli comercialmente disponible y lista para uso tal como Porcilis Porcoli DF (obtenible por Intervet Int. B.V., Wim de Korverstraa 35, Boxmeer, Los Países Bajos). Alternatively, however, the expert could use a commercially available and ready-to-use E. coli vaccine such as Porcilis Porcoli DF (obtainable from Intervet Int. B.V., Wim de Korverstraa 35, Boxmeer, The Netherlands).

50 La vacuna de control comprende los mismos componentes, excepto el antígeno de Clostridium perfringens tipo C, que no estaba presente en el grupo de control. 50 The control vaccine comprises the same components, except for Clostridium perfringens type C antigen, which was not present in the control group.

Protección de cerdas Bristle protection

55 Una granja productora de cerdos holandesa en la que hubo un brote clínico de Clostridium perfringens tipo A se seleccionó para un estudio de eficacia en campo de doble ciego aleatorizado. Se encontró que la cepa aislada de Clostridium perfringens tipo A de la granja producía tanto α-toxina como β2-toxina. 55 A Dutch pig-producing farm in which there was a clinical outbreak of Clostridium perfringens type A was selected for a randomized double-blind field efficacy study. It was found that the isolated strain of Clostridium perfringens type A from the farm produced both α-toxin and β2-toxin.

60 Las cerdas se vacunaron IM durante el embarazo a aproximadamente 6 y 2 semanas antes de parir con tanto una vacuna que contenía antígenos de E. coli solos (grupo de control) como con una vacuna que contenía antígenos de 60 The sows were vaccinated during pregnancy at approximately 6 and 2 weeks before giving birth with both a vaccine containing E. coli antigens alone (control group) and a vaccine containing antigens from

E. coli y antígeno de Clostridium perfringens tipo C (grupo de prueba). Las vacunas se codificaron por color (2 x vacuna de prueba, 1 x vacuna de control) para asegurar el cegado, y la distribución de las cerdas con respecto a los grupos fue aproximadamente 2:1 (Tabla 1). E. coli and Clostridium perfringens type C antigen (test group). Vaccines were color coded (2 x test vaccine, 1 x control vaccine) to ensure blinding, and the distribution of the sows with respect to the groups was approximately 2: 1 (Table 1).

Tabla 1. Tamaños de grupo Table 1. Group sizes

Grupo Group
Número de cerdas Número de cochinillos nacidos vivos por cerda Número total de cochinillos Number of bristles Number of piglets born alive per sow Total number of piglets

Control Control
41 11,6 453 41 11.6 453

Prueba Proof
77 12,1 904 77 12.1 904

Desde el día de la primera vacunación hasta el momento del destete de los cochinillos (3-4 semanas después del parto), las cerdas se observaron cada 3 días para salud general, ingesta de alimentos y diarrea. Para facilitar el From the day of the first vaccination until weaning of the piglets (3-4 weeks after delivery), the sows were observed every 3 days for general health, food intake and diarrhea. To facilitate the

5 análisis estadístico se usó un sistema de puntuación clínico (Tabla 2). Los cochinillos nacidos de las cerdas vacunadas se observaron diariamente durante la primera semana de vida, una vez cada tres días a partir de una semana hasta el destete y después semanalmente hasta el final del periodo de cría. Se registraron la salud general, ingesta de alimentos, diarrea y mortalidad (Tabla 2). 5 statistical analysis a clinical scoring system was used (Table 2). Piglets born from vaccinated sows were observed daily during the first week of life, once every three days from one week until weaning and then weekly until the end of the breeding period. General health, food intake, diarrhea and mortality were recorded (Table 2).

10 Tabla 2 Sistema de puntuación usado para cerdas y cochinillos: 10 Table 2 Scoring system used for sows and piglets:

Puntuación clínica Clinical score
Comportamiento Apetito Consistencia fecal Composición fecal Behavior Appetite Fecal consistency Fecal composition

0 0
Normal Normal Normal Normal Normal Normal Normal Normal

1 one
Deprimido Ligeramente inapetente Blanda Moco presente Depressed Slightly unappetizing Soft Mucus present

2 2
Aletargado Marcada inapetencia Líquida Moco con sangre presente Torpid Marked inapetence Liquid Mucus with blood present

3 3
Moribundo No mama Acuosa Sangre presente con cilindros intestinales Dying No mama Watery Blood present with intestinal cylinders

Resultados Results

Tabla 3. Observaciones clínicas de cerdas Table 3. Clinical observations of sows

Puntuación (N) Score (N)
0 1 2 3 Media 0 one 2 3 Half

Comportamiento general General behavior
Control 687 99 51 20 0,30 Control 687 99 51 twenty 0.30

Prueba Proof
1623 33 0 0 0,02 1623 33 0 0 0.02

Apetito Appetite
Control 597 139 71 49 0,50 Control 597 139 71 49 0.50

Prueba Proof
1598 47 9 0 0,04 1598 47 9 0 0.04

Consistencia fecal Fecal consistency
Control 385 250 153 68 0,89 Control 385 250 153 68 0.89

Prueba Proof
1564 67 17 7 0,07 1564 67 17 7 0.07

Composición fecal Fecal composition
Control 780 71 4 0 0. 09 Control 780 71 4 0 0. 09

Prueba Proof
1647 8 0 0 0,01 1647 8 0 0 0.01

15 La Tabla 3 muestra el efecto de la vacunación con una vacuna que comprende los antígenos de Clostridium perfringens tipo C en comparación con la vacunación con una vacuna sin antígenos de Clostridium perfringens tipo 15 Table 3 shows the effect of vaccination with a vaccine comprising Clostridium perfringens type C antigens compared to vaccination with a vaccine without Clostridium perfringens type antigens

C. C.

20 Como se deduce inequívocamente de la Tabla 3, la vacunación con la vacuna que comprende los antígenos de Clostridium perfringens tipo C produjo un mejora muy significativa del estado de salud de las cerdas. 20 As can be deduced unequivocally from Table 3, vaccination with the vaccine comprising Clostridium perfringens type C antigens produced a very significant improvement in the health status of the sows.

Protección de las crías de cerdas vacunadas Protection of vaccinated sows

25 Por tanto, la tasa de mortalidad en las camadas de las cerdas que se habían vacunado con la vacuna que comprende los antígenos de Clostridium perfringens tipo C se comparó con las camadas de las cerdas que se habían vacunado con una vacuna sin antígenos de Clostridium perfringens tipo C. 25 Therefore, the mortality rate in the litters of the sows that had been vaccinated with the vaccine comprising Clostridium perfringens type C antigens was compared with the litters of the sows that had been vaccinated with a vaccine without Clostridium perfringens antigens type C.

Como se deduce inequívocamente de la Tabla 4, la tasa de mortalidad en las camadas de las cerdas que se había 30 vacunado con la vacuna que comprende los antígenos de Clostridium perfringens tipo C fue significativamente menor que en el grupo de control. As is unequivocally deduced from Table 4, the mortality rate in the litters of sows that had been vaccinated with the vaccine comprising Clostridium perfringens type C antigens was significantly lower than in the control group.

Además, la Tabla 5 muestra que los cochinillos de cerdas que se habían vacunado con la vacuna que comprende los antígenos de Clostridium perfringens tipo C tenían puntuaciones clínicas significativamente menores que el grupo 35 de control. In addition, Table 5 shows that sow piglets that had been vaccinated with the vaccine comprising Clostridium perfringens type C antigens had significantly lower clinical scores than the control group.

Tabla 4. Mortalidad semanal en las camadas de control y de prueba Table 4. Weekly mortality in control and test litters

Edad (días) Age (days)
Control Prueba Control Proof

0-6 0-6
29 22 29 22

7-13 7-13
3 3 3 3

14-21 14-21
7 2 7 2

21-27 21-27
6 1 6 one

28-34 28-34
2 1 2 one

35-41 35-41
0 0 0 0

42-48 42-48
1 1 one one

49-55 49-55
1 1 one one

56-62 56-62
1 0 one 0

63-70 63-70
0 0 0 0

Total (%) Total (%)
50 (11,04) 31 (3,43) 50 (11.04) 31 (3.43)

Tabla 5. Observaciones clínicas de cochinillos Table 5. Clinical observations of piglets

Puntuación (N) Score (N)
0 1 2 3 Media 0 one 2 3 Half

Comportamiento general General behavior
Control 336 232 137 73 0,93 Control 336 232 137 73 0.93

Prueba Proof
1159 271 55 11 0,28 1159 271 55 eleven 0.28

Apetito Appetite
Control 426 166 128 58 0,77 Control 426 166 128 58 0.77

Prueba Proof
1336 125 31 4 0,13 1336 125 31 4 0.13

Consistencia fecal Fecal consistency
Control 544 118 71 40 0,49 Control 544 118 71 40 0.49

Prueba Proof
1419 48 17 12 0,08 1419 48 17 12 0.08

Composición fecal Fecal composition
Control 636 104 31 6 0,24 Control 636 104 31 6 0.24

Prueba Proof
1414 70 10 1 0,06 1414 70 10 one 0.06

Conclusión: Los datos muestran que la vacunación de cerdas con una vacuna que contiene antígenos de Clostridium perfringens tipo C produce una mejora significativa del estado de salud de tanto las cerdas vacunadas como de sus crías en medio de un brote de Clostridium perfringens tipo A. Conclusion: The data show that the vaccination of sows with a vaccine containing Clostridium perfringens type C antigens produces a significant improvement in the health status of both vaccinated sows and their offspring amid an outbreak of Clostridium perfringens type A.

Claims (7)

REIVINDICACIONES 1. Uso de un sobrenadante de cultivo de Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna para la 1. Use of a culture supernatant of Clostridium perfringens type C for the preparation of a vaccine for protección de cerdos completamente desarrollados contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. 5 protection of fully developed pigs against Clostridium perfringens type A infection. 5 2. Uso de un sobrenadante de cultivo de Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna para la protección de cerdas contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. 2. Use of a culture supernatant of Clostridium perfringens type C for the preparation of a vaccine for the protection of sows against infection with Clostridium perfringens type A. 3. Uso de un sobrenadante de cultivo de Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna para 10 cerdas para la protección de cochinillos contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. 3. Use of a culture supernatant of Clostridium perfringens type C for the preparation of a vaccine for 10 sows for the protection of piglets against infection with Clostridium perfringens type A. 4. Uso de un sobrenadante de cultivo de Clostridium perfringens tipo C para la preparación de una vacuna para la protección de cochinillos contra la infección por Clostridium perfringens tipo A. 4. Use of a culture supernatant of Clostridium perfringens type C for the preparation of a vaccine for the protection of piglets against Clostridium perfringens type A infection. 15 5. Uso según la reivindicación 1-4, caracterizado por que se usa una bacteria Clostridium perfringens tipo C que produce toxina beta-2. Use according to claim 1-4, characterized in that a Clostridium perfringens type C bacterium that produces beta-2 toxin is used. 6. Uso según las reivindicaciones 1-5, caracterizado por que para la preparación de dicha vacuna se usan 6. Use according to claims 1-5, characterized in that for the preparation of said vaccine are used adicionalmente uno o más antígenos derivados de organismos o virus patógenos del cerdo, anticuerpos contra 20 aquellos antígenos o información genética que codifica tales antígenos. additionally one or more antigens derived from pathogenic organisms or viruses of the pig, antibodies against those antigens or genetic information encoding such antigens. 7. Uso según la reivindicación 6, caracterizado por que dicho organismo o virus patógeno se selecciona del grupo de virus de la seudorrabia, virus PRRS, virus de la gripe porcina, parvovirus porcino, virus de la gastroenteritis transmisible, rotavirus, Escherichia coli, Erysipelothrix rhusiopathiae, Bordetella bronchiseptica, Salmonella 7. Use according to claim 6, characterized in that said organism or pathogenic virus is selected from the group of pseudorabies virus, PRRS virus, swine flu virus, porcine parvovirus, transmissible gastroenteritis virus, rotavirus, Escherichia coli, Erysipelothrix rhusiopathiae, Bordetella bronchiseptica, Salmonella 25 choleraesuis, Salmonella typhimurium, Haemophilus parasuis, Pasteurella multocida, Streptococcus suis, Mycoplasma hyopneumoniae, Brachyspira hyodysenteriae y Actinobacillus pleuropneumoniae. 25 choleraesuis, Salmonella typhimurium, Haemophilus parasuis, Pasteurella multocida, Streptococcus suis, Mycoplasma hyopneumoniae, Brachyspira hyodysenteriae and Actinobacillus pleuropneumoniae. 8. Uso según la reivindicación 7, caracterizado por que dicho organismo patógeno del cerdo es Escherichia coli. 8. Use according to claim 7, characterized in that said pathogenic organism of the pig is Escherichia coli.
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