ES2349066T3

ES2349066T3 - Compuestos de piridilmetilbiciclocarboxamida sustituida.

Info

Publication number: ES2349066T3
Application number: ES07804935T
Authority: ES
Inventors: Hirotaka Tanaka; Satoshi Nagayama; Yuji Shishido
Original assignee: Pfizer Corp Belgium; Pfizer Corp SRL
Current assignee: Pfizer Corp Belgium; Pfizer Corp SRL
Priority date: 2006-09-15
Filing date: 2007-09-10
Publication date: 2010-12-22
Anticipated expiration: 2027-09-10
Also published as: EP2069302B1; JP2010503657A; CA2663408A1; WO2008032204A8; ATE478847T1; EP2069302A1; US8178558B2; US20090318497A1; WO2008032204A1; CA2663408C; DE602007008742D1

Abstract

Un compuesto de la fórmula (I): en la que A 1 es N y A 2 es CR 7 , o A 1 es CR 7 y A 2 es N Y 1 , Y 2 e Y 3 son, cada uno independientemente, CH o N, Y 4 e Y 5 son, cada uno independientemente, CR 8 o N, con la condición de que, cuando uno de Y 1 , Y 2 , Y 3 , Y 4 e Y 5 es N, los otros no sean N, R 1 y R 2 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo C1-6, halo alquilo C1-6 o hidroxialquilo C1-6, R 3 y R 8 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, hidroxi, alquilo C1-6, 20 hidroxialcoxi C1-6, alcoxi C1-6 alquilo C1-6, alcoxi C1-6 alcoxi C1-6, haloalquilo C1-6, alquil C1-6 tio, alquil C1-6 sulfinilo o alquil C1-6 sulfonilo, R 4 es halógeno, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, haloalcoxi C1-6, hidroxialcoxi C1-6, alcoxi C1-6 alquilo C1-6, alcoxi C1-6 alcoxi C1-6, haloalquil C1-6 sulfonilo, haloalquil C1-6 sulfinilo, haloalquil C1-6 tio, [alquil C1-6]NH- o [alquil C1-6]2N-; y 5 , R 6 y R 7 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6 o alcoxi C1-6, o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable.

Description

Campo técnico

Esta invención se refiere a nuevos compuestos de piridimetilbiciclocarboxamida sustituida y a su uso en terapia. Estos compuestos son particularmente útiles como moduladores del receptor VR1 (Vainilloide de tipo I) y son así útiles en el tratamiento del dolor, neuralgia, lesión de nervios, migraña, síndrome del túnel carpiano, fibromialgia, neuritis, ciática, hipersensibilidad pélvica, enfermedad de la vejiga, inflamación o similares en mamíferos, especialmente seres humanos. La presente invención se refiere también a una composición farmacéutica que comprende los anteriores compuestos.

Técnica anterior

El receptor Vainilloide 1 (VR1) es un canal catiónico no selectivo controlado. Se cree que es un miembro de la superfamilia de potenciales receptores transitorios. El VR1 se reconoce como un nociceptor polimodal que integra estímulos de dolor múltiples, por ejemplo, calor nocivo, protones y vainilloides (European Journal of Physiology 451: 151-159, 2005). Una distribución importante de VR1 está en las fibras sensoriales (Aδ y C-), que son neuronas bipolares que tienen somatomas en ganglios sensoriales. Las fibras periféricas de estas neuronas inervan la piel, las membranas mucosas y casi todos los órganos internos. Se reconoce también que el VR1 existe en la vejiga, riñón, cerebro, páncreas, y diversas clases de órganos. Un cuerpo de estudios usando agonistas de VR1, por ejemplo, capsaicina o resiniferatoxina, ha sugerido que los nervios positivos de VR1 se cree que participan en varias respuestas fisiológicas, incluida la nocicepción (Clinical Therapeutics, 13(3): 338-395, 1991, Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 314:410-421, 2005, y Neuroscience Letter 388: 75-80, 2005). Sobre la base de la distribución de tejidos y los papeles de VR1, los antagonistas de VR1 tendrían un buen potencial terapéutico.

El documento WO 2005070929 da a conocer derivados heterocíclicos amina como ligandos de receptores vainilloides. El documento WO 2005070885 da a conocer derivados amida útiles como ligandos de receptores vainilloides. El documento WO 2005003084 discute análogos de 4-(metilsulfonilamino)fenilo que se indica que tienen actividad como antagonistas de VR1. El documento WO 2004069792 da a conocer derivados amida derivados de quinolina útiles para la prevención o tratamiento de, por ejemplo, dolor inflamatorio, dolor de quemaduras, enfermedad pulmonar obstructiva crónica y osteoartritis, que son moduladores del receptor vainilloide 1. El documento WO 2003080578 da a conocer derivados de urea heteroaromáticos que son moduladores del receptor vainilloide 1 usados para tratar

enfermedades y afecciones en las que predomina el dolor y/o la inflamación. El documento WO 20033068749 da a conocer derivados carboxamida de quinolina o isoquinolina útiles como antagonistas del receptor vainilloide (VR1). El documento 2003014064 da a conocer derivados amida útiles como antagonistas del receptor vainilloide (VR1). El documento WO 2002100819 5 da a conocer derivados de N-arilfenilacetamida que son antagonistas del receptor vainilloide VR1 para tratar, por ejemplo, el dolor, la manía y la rinitis alérgica. El documento WO2006051378 da a conocer una variedad de derivados de N-sulfonilaminobencil-2fenoxiamida como modulador para receptor vainilloide. Japan Kokai Tokio Koho de JP11080107 da a conocer compuestos amida como promotores de la formación de hueso para

10 uso como agentes antiosteoporóticos. El documento WO 2005033079 da a conocer derivados heterocíclicos útiles para tratar infecciones fúngicas. El documento WO 03035621 da a conocer compuestos de naftilamida como inhibidores de proteinquinasa y fosfatasa para tratar, por ejemplo, la diabetes, obesidad y la pérdida de oído.

Sería deseable que se proporcionaran antagonistas selectivos de VR1 mejorados con

15 una actividad intensificada de unón con el receptor VR1 por administración sistémica y con una buena estabilidad metabólica. Entre otras ventajas potenciales figuran menos toxicidad, buena absorción, buena estabilidad, buena solubilidad, baja afinidad de unión a proteínas, menos interacción de fármaco-fármaco, una actividad inhibidora del canal HERG reducida, prolongación reducida del TQ y buena estabilidad metabólica.

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Breve descripción de la invención Se ha encontrado ahora que ciertos derivados de carboxamida sustituida son potentes antagonistas de VR1 con actividad analgésica por administración sistémica. La presente invención proporciona un compuesto de la siguiente fórmula (I)

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imagen1

en la que

A1 es N yA2 es CR7,o A1 es CR7 yA2 es N

Y1, Y2 e Y3 son, cada uno independientemente, CH o N, Y4 e Y5 son, cada uno 30 independientemente, CR8o N, con la condición de que, cuando uno de Y1, Y2, Y3 , Y4 e Y5 es N, los otros no sean N,

R1 y R2 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo C1-6, halo alquilo C1-6 o hidroxialquilo C1-6,

R3 y R8 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, hidroxi, alquilo C1-6, hidroxialcoxi C1-6, alcoxi C1-6 alquilo C1-6, alcoxi C1-6 alcoxi C1-6, haloalquilo C1-6, alquil C1-6 tio, alquil C1-6 sulfinilo o alquil C1-6 sulfonilo,

R4 es halógeno, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, haloalcoxi C1-6, hidroxialcoxi C1-6, alcoxi C1-6 alquilo C1-6, alcoxi C1-6 alcoxi C1-6, haloalquil C1-6 sulfonilo, haloalquil C1-6 sulfinilo, haloalquil C1-6 tio, [alquil C1-6]NH-o [alquil C1-6]2N-; y

R5, R6 y R7 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6 o alcoxi C1-6,

o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable.

Descripción detallada de la invención

Tal como se usa aquí, el término “halógeno” significa flúor, cloro, bromo o yodo, preferiblemente flúor o cloro.

Tal como se usan aquí, los términos “alquilo C1-6” y “alquilo C1-4” significan radicales de hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada que tienen el número requerido de átomos de carbono, entre los que figuran, no exclusivamente, los grupos metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, s-butilo, t-butilo y 2-metilbutilo. Los grupos preferidos son metilo, etilo, n-propilo, n-butilo, t-butilo y 2-metilbutilo.

Tal como se usa aquí, el término “cicloalquilo C3-6” significa un anillo de hidrocarburo no aromático saturado o insaturado que tiene el número requerido de átomos de carbono, entre ellos, no exclusivamente, los grupos ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.

Tal como se usa aquí, el término “alcoxi C1-6 ” significa alquilo C1-6 –O, en el que el radical alquilo C1-6 es lo definido antes, entre los que figuran, no exclusivamente, metoxi, etoxi, n-prpoxi, isopropoxi, n-butoxi, isobutoxi, s-butoxi y t-butoxi. Los grupos preferidos son los grupos metoxi, etoxi, n-propoxi, n-butoxi y t-butoxi.

Tal como se usa aquí, el término “hidroxialquilo C1-6 ” significa un radical alquilo C1-6 según se ha definido antes, que está sustituido con como mínimo un grupo hidroxi, entre ellos, no exclusivamente, hidroximetilo, hidroxietilo, hidroxi n-propilo, hidroxiisopropilo (por ejemplo, 1-hidroxi-1,1-dimetilmetilo), hidroxi n-butilo, hidroxiisobutilo, hidroxi s-butilo e hidroxi-t-butilo. Los grupos preferidos son hidroximetilo, hidroxietilo, hidroxi n-propilo, hidroxiisopropilo (por ejemplo 1-hidroxi-1,1-dimetilmetilo), hidroxi n-butilo e hidroxi t-butilo.

Tal como se usa aquí, el término “hidroxialcoxi C1-6” significa un radical alcoxi según se ha definido antes que está sustituido con un grupo hidroxi, entre ellos, no exclusivamente, hidroximetoxi, hidroxietoxi, hidroxi n-propoxi, hidroxiisopropoxi, hidroxi n-butoxi, hidroxiisobutoxi, hidroxi s-butoxi e hidroxi t-butoxi. Los grupos preferidos son hidroximetoxi, hidroxietoxi, hidroxi n-propoxi e hidroxi n-butoxi.

Tal como se usa aquí, el término “alcoxi C1-6 alquilo C1-6” significa un radical alquilo C1-6 según se ha definido antes que esta sustituido con un grupo alcoxi C1-6 según se ha definido antes.

Tal como se usa aquí, el termino “alcoxi C1-6 alcoxi C1-6” significa un radical alcoxi C1-6 según se ha definido antes que está sustituido con un grupo alcoxi C1-6 según se ha definido antes. Son grupos preferidos los grupos metoximetoxi, metoxietoxi o etoxietoxi.

Tal como se usa aquí, el término “hidroxialcoxi C1-6 alquilo C1-6 ” significa un radical alquilo C1-6 según se ha definido antes sustituido con un grupo o radical hidroxialcoxi C1-6 según se ha definido antes.

Tal como se usa aquí, los terminos “haloalquilo C1-6 ” y “haloalquilo C1-4 ” significan un radical alquilo C1-6 o alquilo C1-4 que está sustituido con uno o varios átomos de halógeno según se ha definido antes, entre los que figuran, no exclusivamente, los grupos fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, 2-fluoroetilo, 2,2-difluoroetilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 2,2,2-trifluoro-1,1dimetiletilo, 2,2,2-tricloroetilo, 3-fluoropropilo, 4-fluorobutilo, clorometilo, triclorometilo, yodometilo, bromo metilo y 4,4,4-trifluoro-3-metilbutilo. Son grupos preferidos los grupos fluorometilo,, difluorometilo, trifluorometilo, 2-fluoroetilo, 2,2-difluoroetilo, 2,2,2-trifluoroetilo y 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetiletilo.

Tal como se usa aquí, el término “haloalcoxi C1-6” significa un radical alquilo C1-6 -O-que está sustituido con uno o varios átomos de halógeno según se ha definido antes, entre los que figuran, no exclusivamente, los grupos fluorometoxi, difluorometoxi, trifluorometoxi, 2fluoroetoxi, 2,2-difluoroetoxi, 2,2,2-trifluoroetoxi, 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetiletoxi, 2,2,2tricloroetoxi, 3-fluoropropoxi, 4-fluorobutoxi, clorometoxi, triclorometoxi, yodometoxi, bromometoxi y 4,4,4-trifluoro-3-metilbutoxi. Son grupos haloalcoxi C1-6 o alquilo C1-6 -Opreferidos los grupos fluorometoxi, difluorometoxi, trifluorometoxi, 2-fluoroetoxi, 2,2difluoroetoxi, 2,2,2-trifluoroetoxi y 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetiletoxi.

Tal como se usa aquí, el término “alquil C1-6 tio” significa alquilo C1-6 –S, en el que el radical alquilo C1-6 es lo definido antes, entre los que figuran, no exclusivamente, metiltio, etiltio, propioltio y butiltio. Son grupos preferidos los grupos metiltio y etiltio.

Tal como se usa aquí, el término “alquil C1-6 sulfinilo” significa alquil C1-6 –SO-, en el que el radical alquilo C1-6 es lo definido antes, entre los que figuran, no exclusivamente, metilsulfinilo, etilsulfinilo, propilsulfinilo y butilsulfinilo. Son grupos preferidos los grupos metilsulfinilo y metilsulfinilo.

Tal como se usa aquí, el término “alquil C1-6 sulfonilo” significa alquil C1-6 –SO2-, en el que el radical alquilo C1-6 es lo definido antes, entre los que figuran, no exclusivamente, metilsulfonilo, etilsulfonilo, propilsulfonilo y butilsulfonilo. Son grupos preferidos los grupos metilsulfonilo y metilsulfinilo.

Tal como se usa aquí, el término “haloalquil C1-6 tio” significa un radical alquil C1-6 tio que está sustituido con uno o varios átomos de halógeno según se ha definido antes, entre los que figuran, no exclusivamente, los grupos fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, 2-fluoroetiltio, 2,2-difluoroetiltio, 2,2,2-trifluoroetiltio, 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetiltio, 2,2,2-trifluoroetiltio, 3fluoropropiltio, 4-fluorobutiltio, clorometiltio, triclorometiltio, yodometiltio, bromometiltio y 4,4,4trifluoro-3-metilbutiltio. Son grupos preferidos los grupos fluorometiltio, difluorometiltio, trifluorometiltio, 2-fluoroetiltio, 2,2-difluoroetiltio, 2,2,2-trifluoroetiltio y 2,2,2-trifluoro-1,1dimetiletiltio.

Tal como se usa aquí, el término “haloalquil C1-6 sulfinilo” significa un grupo alquil C1-6 – SO-, que está sustituido con uno o varios halógenos según se ha definido antes, entre los que se encuentran, no limitativamente, los grupos fluorometilsulfinilo, difluorometilsulfinilo, trifluorometilsulfinilo, 2-fluoroetilsulfinilo, 2,2-difluoroetilsulfinilo, 2,2,2-trifluoroetilsulfinilo, 2,2,2trifluoro-1,1-dimetiletilsulfinilo, 2,2,2-trifluoroetilsulfinilo, 3-fluoro-propilsulfinilo, 4fluorobutilsulfinilo, clorometilsulfinilo, triclorometilsulfinilo, yodometilsulfinilo, bromometilsulfinilo y 4,4,4-trifluoro-3-metilbutilsulfinilo. Son grupos preferidos los grupos fluorometilsulfinilo, difluorometilsulfinilo, trifluorometilsulfinilo, 2-fluoroetilsulfinilo, 2,2-difluoroetilsulfinilo, 2,2,2trifluoroetilsulfinilo y 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetiletilsulfinilo.

Tal como se usa aquí, el término “haloalquil C1-6 sulfonilo” significa un grupo alquil C1-6 – SO2-, que está sustituido con uno o varios halógenos según se ha definido antes, entre los que se encuentran, no limitativamente, los grupos fluorometilsulfonilo, difluorometilsulfonilo, difluorometilsulfonilo, trifluorometilsulfonilo, 2-fluoroetilsulfonilo, 2,2-difluoroetilsulfonilo, 2,2,2trifluoroetilsulfonilo, 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetiletilsulfonilo, 2,2,2-trifluoroetilsulfonilo, 3-fluoropropilsulfonilo, 4-fluorobutilsulfonilo, clorometilsulfonilo, triclorometilsulfonilo, yodometilsulfonilo, bromometilsulfonilo y 4,4,4-trifluoro-3-metilbutilsulfonilo. Son grupos preferidos los grupos fluorometilsulfonilo, difluorometilsulfonilo, trifluorometilsulfonilo, 2-fluoroetilsulfonilo, 2,2difluoroetilsulfonilo, 2,2,2-trifluoroetilsulfonilo y 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetiletilsulfonilo.

Tal como se usa aquí, el término “(alquil C1-6)NH-“ significa alquilo-NH-, en el que alquilo es lo definido antes, entre los que figuran, no limitativamente, metilamino, etilamino, npropilamino, isopropilamino, n-butilamino, isobutilamino, s-butilamino, t-butilamino. Son grupos alquilamino preferidos metilamino, etilamino, n-propilamino y n-butilamino.

Tal como se usa aquí, el término “(alquil C1-6)2N-“ significa dialquil-N-, en el que alquilo es lo definido antes, entre los que figuran, no limitativamente, dimetilamino, dietilamino, di npropilamino, diisopropilamino, di n-butilamino, diisobutilamino, di s-butilamino, di t-butilamino. Son grupos dialquilamino preferidos dimetilamino, dietilamino, di n-propilamino y di nbutilamino.

Las estructuras de fórmula (I) preferidas incluyen lo siguiente.

Preferiblemente, Y1, Y2 y Y3 son CH y Y4 e Y5 son CR8; Y1 es N, Y2 y Y3 son CH y Y4 y Y5sonCR8;Y3esN,Y1yY2sonCH,yY4yY5 sonCR8;oY4esN,Y1,Y2yY3sonCHyY5es CR8.

Preferiblemente, R1 y R2 son, cada uno independientemente, hidrógeno, alquilo C1-4, halo alquilo C1-4 o hidroxialquilo C1-4, más preferiblemente hidrógeno, alquilo C1-4 o hidroxialquilo C1-4, aún más preferiblemente hidrógeno, metilo, etilo, propilo, hidroximetilo, trifluorometilo o hidroxietilo, muy preferiblemente hidrógeno, metilo, trifluorometilo o etilo.

Preferiblemente, R3 y R8 son hidrógeno, halógeno, hidroxi, alquilo C1-6, hidroxialcoxi C1-6 o haloalquilo C1-6; más preferiblemente hidrógeno, halógeno o alquilo C1-4; más preferiblemente hidrógeno o alquilo; más preferiblemente aún hidrógeno o halógeno flúor o cloro; muy preferiblemente hidrógeno.

Preferiblemente, R4 es halógeno, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, haloalcoxi C1-6, haloalquil C1-6 sulfonilo, haloalquil C1-6 sulfinilo, o haloalquil C1-6 tio; más preferiblemente, halógeno, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, haloalcoxi C1-6, haloalquilo C1-6 sulfoniloo haloalquil C1-6 sulfinilo; aún más preferiblemente alquilo C1-4 o haloalquilo C1-4; aún más preferiblemente isopropilo, t-butilo, trifluorometilo, o 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetiletilo; muy preferiblemente t-butilo, trifluorometilo o 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetiletilo.

Preferiblemente, R5, R6 y R7 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, metoxi, etoxi, hidroximetilo, hidroxietilo o hidroxiisopropilo; aún más preferiblemente hidrógeno, halógeno, metilo, etilo, metoxi, etoxi, hidroximetilo, hidroxietilo, 1,2-dihidroxietilo o hidroxiisopropilo (por ejemplo, 1-hidroxi-1,1dimetilmetilo); muy preferiblemente hidrógeno, flúor, cloro, metilo, metoxi o hidroximetilo.

Entre los compuestos preferidos de la invención están incluidos aquellos en los que cada variable de la fórmula (I) se selecciona entre los grupos preferidos de cada variable.

Son compuestos específicos preferidos de la invención los listados en la sección de Ejemplos que figura más adelante y sus sales y solvatos farmacéuticamente aceptables.

Los compuestos de fórmula (I) que son antagonistas de VR1 son potencialmente útiles en el tratamiento de una gama de trastornos, en particular en el tratamiento de la isquemia cerebral aguda, el dolor, dolor crónico, dolor agudo, dolor nociceptivo, dolor neuropático, dolor inflamatorio, neuralgia postherpética, neuropatías, neuralgia, neuropatía diabética, neuropatía relacionada con VIH, lesión de nervios, dolor de artritis reumatoide, dolor osteoartrítico, quemaduras, dolor lumbar, dolor visceral, dolor de cáncer, dolor de muelas, dolor de cabeza, migraña, síndrome de túnel carpiano, fibromialagia, neuritis, ciática, hipersensibilidad pélvica, dolor de pelvis, dolor menstrual, enfermedad de la vejiga tal como incontinencia, trastornos de la micción, cólico renal y cistitis, inflamación tal como por quemaduras, artritis reumatoide y osteoartritis, enfermedad neurodegenerativa tal como accidente cerebrovascular, dolor postaccidente cerebrovascular y esclerosis múltiple, enfermedad pulmonar tal como asma, tos, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) y broncoconstricción, trastornos gastrointestinales tales como enfermedad de reflujo gastroesofágico (ERGE), disfagia, úlcera, síndrome de intestino irritable (SII), enfermedad de intestino inflamatorio (EII), colitios y enfermedad de Crohn, isquemia tal como isquemia cerebrovascular, emesis tal como emesis inducida por quimioterapia del cancer, y obesidad y similares en mamíferos, especialmente seres humanos. El uso preferido es el tratamiento del dolor, en particular dolor neuropático.

El dolor fisiológico es un importante mecanismo protector diseñado para advertir del daño de estímulos potencialmente lesivos del medio exterior. El sistema actúa a través de un conjunto específico de neuronas sensoriales y es activado por estímulos dañinos a través de mecanismo transductores periféricos (véase Millan, 1999, Prog. Neurobiol., 57, 1-164 para una recopilación). Estas fibras sensoriales son conocidas como nociceptores y característicamente son axones de pequeño diámetro con velocidades de conducción bajas. Los nociceptores codifican la intensidad, duración y calidad de estímulos dañinos y, en virtud de su protección topográficamente organizada de la médula espinal, la localización de los estímulos. Los nociceptores se encuentran en fibras nerviosas nociceptivas de las que hay dos tipos, fibras A-delta (mielinadas) y fibras C (no mielinadas). La actividad generada por la entrada del nociceptor se transfiere, después de un procesamiento complejo en el asta dorsal directamente

o a través de los núcleos de transmisor del tallo cerebral al tálamo ventrobasal y luego al cortex, donde se genera la sensación de dolor.

Generalmente, el dolor se clasifica como dolor agudo o crónico. El dolor agudo empieza de repente y dura poco (usualmente 12 semanas o menos). Usualmente esta asociado con una causa específica tal como una lesión específica y a menudo es intenso y fuerte. Es la clase de dolor que se puede presentar después de lesiones específicas resultantes de cirugía, tratamiento dental, una deformación o un esguince. Generalmente el dolor agudo no da lugar a una respuesta fisiológica persistente. A diferencia, el dolor crónico es un dolor a largo plazo, tipicamente persistente durante tres meses o más y conduce a problemas fisiológicos y emotivos significativos. Son ejemplos comunes de dolor crónico dolor neuropático (por ejemplo, neuropatía diabética dolorosa, neuralgia postherpética), síndrome de túnel carpiano, dolor lumbar, dolor canceroso, dolor artrítico y dolor posquirúrgico crónico.

Cuando se produce una lesión sustancial en el tejido del cuerpo, por enfermedad o trauma, se alteran las características de la activación nociceptora y hay una sensibilización en la periferia, localmente en torno a la lesión y centralmente donde terminan los nociceptores. Estos efectos conducen a una sensación intensificada de dolor. En el dolor agudo, estos mecanismos pueden ser útiles en cuanto a la promoción de comportamientos protectores que pueden permitir que tengan lugar procesos de reparación. Normalmente sería de esperar que la sensibilidad volviera a la normalidad una vez que ha sanado la lesión. Sin embargo, en muchos estados de dolor crónico, la hipersensibilidad perdura después de la curación de la lesión y a menudo es debida a una lesión del sistema nervioso. Esta lesión conduce frecuentemente a anormalidades en las fibras nerviosas sensoriales asociadas con una mala adaptación y una actividad aberrante (Wolf y Salter, 2000, Science, 288, 1765-1768).

El dolor clínico se presenta con incomodidad y rasgos de sensibilidad anormal entre los síntomas del paciente. Entre tales síntomas figuran: (1) dolor espontáneo que puede ser sordo, ardiente o punzante; (2) respuestas de dolor exageradas a los estímulos dañinos (hiperalgesia), y (3) dolor producido por estímulos normalmente inócuos (alodinia, Meyer y otros, 1994, Textbook of Pain, 13-44). Aunque los pacientes que sufren varias formas de dolor agudo y crónico pueden tener síntomas similares, los mecanismos subyacentes pueden ser diferentes y, por tanto, pueden requerir estrategias de tratamiento diferentes. Por ello, el dolor se puede dividir también en un número de diferentes subtipos de acuerdo con diversas patofisiologías, entre los que figuran dolor nociceptivo, inflamatorio y neuropático.

El dolor nociceptivo está inducido por lesión tisular o por estímulos intensos con el potencial de causar lesión. Los aferentes de dolor se activan por transducción de estímulos por nociceptores en el sitio de la lesión y neuronas activadas en la médula espinal a nivel de su terminación. Luego es transmitido mediante los tractos espinales al cerebro, donde se percibe el dolor (Meyer y otros, 1994, Textbook of Pain, 13-44). La activación de los nociceptores activa dos tipos de fibras nerviosas aferentes. Las fibras A-delta mielinadas transmiten rápidamente y son responsables de sensaciones de dolor ardiente y punzante, mientras que las fibras C no mielinadas transmiten a menor velocidad y conducen un dolor sordo o molesto. El dolor nociceptivo agudo de moderado a fuerte es un rasgo prominente de dolor de trauma del sistema nervioso central, deformaciones/esguinces, quemaduras, infarto de miocardio y pancreatitis aguda, dolor postoperativo (dolor que sigue a cualquier tipo de intervención quirúrgica), dolor postraumático, cólico renal, dolor canceroso y dolor lumbar. El dolor canceroso puede ser dolor crónico tal como dolor relacionado con un tumor (por ejemplo, dolor de hueso, dolor de cabeza, dolor facial o dolor visceral) o dolor asociado con terapia del cáncer (por ejemplo, síndrome de posquimioterapia, síndrome de dolor posquirúrgico crónico o síndrome posradiactivo). El dolor canceroso se puede presenta también en respuesta a la quimioterapia, inmunoterapia, terapia hormonal o radioterapia. El dolor lumbar puede ser debido a discos intervertebrales herniados o rotos o a anormalidades de las uniones de estrías lumbares, uniones sacroilíacas, músculos paraespinales o el ligamento longitudinal posterior. El dolor lumbar puede desaparecer naturalmente pero, en algunos pacientes en los que dura más de 12 semanas, se convierte en una afección crónica que puede ser particularmente debilitadora.

Corrientemente se define el dolor neuropático como dolor iniciado o causado por una lesión o disfunción primaria del sistema central. La lesión del nervio puede estar causada por trauma o enfermedad y, por ello, el término “dolor neuropático” abarca muchos trastornos con diversas etiologías. Entre ellas figuran, no limitativamente, neuropatía periférica, neuropatía diabética, neuralgia postherpética, neuralgia del trigémino, dolor lumbar, neuropatía de VIH, sensación de dolor en un miembro fantasma, síndrome de túnel carpal, dolor post accidente cerebro vascular central y dolor asociado con alcoholismo crónico, hipotiroidismo, uremia, esclerosis múltiple, lesión de la médula espinal, enfermedad de Parkinson, epilepsia y deficiencia de vitaminas. El dolor neuropático es patológico dado que no tiene papel protector. A menudo está presente después de haberse disipado la causa original, que comúnmente dura años, haciendo disminuir significativamente la calidad de vida del paciente (Wolf y Mannon, 1999, Lancet, 353, 1959-1964). Los síntomas del dolor neuropático son de difícil tratamiento dado que con frecuencia son heterogéneos incluso en pacientes con la misma enfermedad (Wolf y Decosterd, 1999, Pain Supp., 6, S141-S147; Wolf y Mannon, 1999, Lancet, 353, 19591964). Entre ellos figuran dolor espontáneo que puede ser continuo, y dolor invocado paroxismal o anormal, tal como hiperalgesia (sensibilidad incrementada a estímulos dañinos) y alodinia (sensibilidad a estímulos normalmente inócuos).

El proceso inflamatorio es una serie compleja de acontecimientos bioquímicos y celulares activados en respuesta a una lesión tisular o la presencia de sustancias foráneas que da lugar a hinchamiento y dolor (Levine y Taiwo, 1994, Texdtbook of Pain, 45-56). El dolor artrítico es el dolor más corriente. La enfermedad reumatoide es una de las afecciones inflamatorias crónicas más comunes en países desarrollados y la artritis reumatoide es una causa corriente de incapacidad. Se desconoce la etiología exacta de la artritis reumatoide, pero las hipótesis en boga sugieren que pueden ser importantes factores genéticos y microbiológicos (Grennam y Jayson, 1994, Textbook of Pain, 397-404). Se ha estimado que casi 16 millones de americanos tienen osteoartritis sintomática (OS) o enfermedad degenerativa de articulaciones, la mayoría de los cuales tienen una edad de más de 60 años, y se espera que el número aumente a 40 millones a medida que aumente la edad de la población, llegando esto a ser un problema de salud pública de enorme magnitud (Houge y Mersfelder, 2002, Ann. Pharmacother., 36, 679-686; McCarthy y otros, 1994, Textbook of Pain, 387-395). La mayoría de los pacientes con osteoartritis buscan atención médica a causa del dolor asociado. La artritis tiene un impacto significativo sobre la función psicosocial y física y se sabe que es la causa que conduce a la discapacidad a más edad. La espondilitis anquilosante es también una enfermedad reumática que causa artritis de la espina dorsal y articulaciones sacroilíacas. Varía de episodios intermitentes de dolor lumbar que se presentan a lo largo de la vida a enfermedad crónica fuerte que ataca la espina dorsal, las articulaciones periféricas y otros órganos del cuerpo.

Otro tipo de dolor inflamatorio es el dolor visceral, que incluye dolor asociado con enfermedad de intestino inflamado (EII). El dolor visceral es dolor asociado con las vísceras, que abarca los órganos de la cavidad abdominal. Entre estos órganos están incluidos los órganos del sexo, el bazo y parte del sistema digestivo. El dolor asociado con las vísceras puede dividirse en dolor de vísceras digestivas y dolor de vísceras no digestivas. Los trastornos gastrointestinales (GI) comúnmente encontrados que causan dolor incluyen el trastorno funcional del intestino (TFI) y la enfermedad del intestino inflamado (EII). Estos trastornos GI incluyen una amplia variedad de estados de enfermedad que corrientemente sólo se controlan de forma moderada, incluidas entre ellas, respecto a TFI, reflujo gastroesofágico, dispepsia, síndrome de intestino irritable (SII) y síndrome de dolor abdominal funcional (SDAF) y, respecto a EII, enfermedad de Crohn, ileítis y colitis ulcerosa, que producen, todas ellas, dolor visceral. Entre otros tipos de dolor visceral figuran el dolor asociado con dismenorrea, cistitis, pancreatitis y dolor pélvico.

Debe tenerse en cuenta que algunos tipos de dolor tienen etiologías múltiples y pueden así clasificarse en más de un área, por ejemplo, el dolor lumbar y el dolor canceroso tienen componentes nociceptivos y neuropáticos.

Entre otros tipos de dolor figuran:

-dolor resultante de trastornos músculo-esqueléticos, incluidos mialgia, fibromialgia,

espondilitis, artropatías seronegativas (no reumatoides), reumatismo no articular,

distrofinopatía, glicogenolisis, polimiositis y piromiositis,

-dolor cardíaco y vascular, incluidos dolor causado por angina, infarto de miocardio,

estenosis mitral, pericarditis, fenómeno de Reynaud, escleredoma e isquemia muscular

esquelético,

-dolor de cabeza, tal como migraña (incluidas migraña con aura y migraña sin aura),

dolor de cabeza, cefalea en brotes y dolor de cabeza asociado con trastornos

vasculares, y -dolor orofacial, incluidos dolor de muelas, dolor de oído, síndrome de boca ardiente y dolor miofascial temporomandibular. La presente invención proporciona una composición farmacéutica que incluye un

compuesto de fórmula (I), o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable, junto con un excipiente farmacéuticamente aceptable. Preferiblemente la composición es útil para el tratamiento de las enfermedades descritas antes.

La presente invención proporciona una composición farmacéutica que incluye un compuesto de fórmula (I) o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo junto con un excipiente farmacéuticamente aceptable. La composición se usa preferiblemente para el tratamiento de las afecciones de enfermedad definidas antes.

La presente invención proporciona además un compuesto de fórmula (I), o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable, para uso en el tratamiento de un trastorno para el que está indicado un antagonista de VR1, preferiblemente para el tratamiento del dolor.

Además, la presente invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I), o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable, para el tratamiento de las afecciones de enfermedad definidas antes. Preferiblemente, la afección de enfermedad es dolor.

La presente invención proporciona además una combinación de un compuesto de fórmula (I), o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable, y otro agente farmacológicamente activo.

En esta solicitud, especialmente en Síntesis General y Ejemplos, se pueden usar las abreviaturas siguientes:

BEP: tetrafluoroborato de 2-bromo-1-etilpiridinio

BOP: hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi-tris(dimetilamino)fosfonio

CDI: cloruro de 2-cloro-1,3-dimetilimidazolinio

DCC: diciclohexilcarbodiimida

DCM: diclorometano

DME: 1,2-dimetoxietano, dimetoxietano

DMF: N,N-dimetilformamida

DMSO dimetilsulfóxido EDC hidrocloruro de 1-etil-3-(3’-dimetilaminopropil)carbodiimida

Et2O dietil éter EtOAc acetato de etilo EtOH etanol HBTU hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio HOBt 1-hidroxibenzotriazol Me metilo MeOH metanol

NMP THF TFA

Síntesis General

Esquema 1: N-metil-2-pirrolidona tetrahidrofurano ácido trifluoroacético

imagen1

15

Ilustra la preparación de compuestos de fórmula (I):

Etapa 1A: En esta etapa se pueden preparar compuestos amida de fórmula (I) por la reacción

20 de acoplamiento de un compuesto amina de fórmula (I) con el compuesto ácido de fórmula (III) en presencia o ausencia de un reactivo de acoplamiento en un disolvente inerte. Son reactivos de acoplamiento adecuados aquellos usados tópicamente en la síntesis de péptidos, incluidos, por ejemplo, diimidas (por ejemplo, DCC, EDC, 2-etoxi-N-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina, BEP, CDI, BOP, dietilazodicarboxilato-trifenilfosfina, dietilcianofosfato, dietilfosforilazida, yoduro

25 de 2-cloro-1-metilpiridinio, N,N’-carbonildiimidazol, fosfato de benzotriazol-1-il dietilo, cloroformiato de etilo o cloroformiato de isobutilo). La reacción se puede realizar en presencia de una base tal como HOBt, N,N-diisopropiletilamina, N-metilmorfolina o trietilamina. El compuesto amida de fórmula (I) se puede formar mediante un haluro de acilo, que se puede obtener por reacción con agentes halogenantes tales como cloruro de oxalilo, oxicloruro de

30 fósforo o cloruro de tionilo. Normal y preferiblemente la reacción se realiza en presencia de un

disolvente. No hay una restricción particular sobre la naturaleza del disolvente a emplear con tal que no tenga efecto adverso sobre la reacción o sobre los reactivos implicados y que pueda disolver los reactivos, al menos en cierta cuantía. Entre los ejemplos de disolventes adecuados figuran acetona, nitrometano, DMF, NMP, sulfolano, DMSO, 2-butanona, acetonitrilo, 5 hidrocarburos halogenados tales como DCM, dicloroetano o cloroformo, y éteres tales como THF o 1,4-dioxano. La reacción puede realizarse en un amplio intervalo de temperaturas y no es crítica en la invención la temperatura de reacción exacta. La temperatura de reacción preferida dependerá de factores tales como la naturaleza del disolvente y el material de partida

o el reactivo usado. Sin embargo, en general, los inventores han encontrado que es

10 conveniente realizar la reacción entre -20ºC y 100ºC, más preferiblemente entre aproximadamente 0ºC y 60ºC. El tiempo requerido para efectuar la reacción puede variar también ampliamente dependiendo de muchos factores, de modo notable de la temperatura de reacción y la naturaleza de los reactivos y disolventes empleados. Sin embargo, con tal que la reacción se lleve a cabo en las condiciones preferidas señaladas antes, usualmente será

15 suficiente un período de 5 minutos a 1 semana, más preferiblemente de 30 minutos a 24 horas. Esquema 2

imagen1

20 Cuando R2 es metilo, el compuesto de fórmula (II) se puede preparar a partir de un compuesto de fórmula (IV). Esto ilustra la preparación de compuestos de fórmula (II).

Etapa 2A: En la fórmula anterior, se puede preparar un compuesto de fórmula (V) por reacción

de acoplamiento del compuesto de fórmula (IV) en condiciones básicas en presencia de un 25 catalizador de un metal de transición y aditivos en un disolvente. Entre los ejemplos de

disolventes adecuados figuran disolventes próticos tales como agua, alcoholes tales como MeOH o EtOH y codisolventes de agua o alcoholes como disolventes próticos mezclados con THF, 1,4-dioxano, DMF o acetonitrilo. La reacción se puede realizar en presencia de un catalizador adecuado. De igual modo no hay una restricción particular sobre la naturaleza del catalizador usado y típicamente se puede usar aquí igualmente cualquier catalizador usado en reacciones de este tipo. Entre los ejemplos de tales catalizadores figuran tetraquis(trifenilfosfina)paladio, cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II), cobre(0), acetato de cobre(I), bromuro de cobre(I), cloruro de cobre(I), yoduro de cobre(I), óxido de cobre(I), trifluorometanosulfonato de cobre(II), acetato de cobre (II), bromuro de cobre (II), cloruro de cobre (II), yoduro de cobre (II), óxido de cobre (II), trifluorometanosulfonato de cobre (II), acetato de paladio (II), cloruro de paladio (II), bisacetonitrilodicloropaladio(0); bis(dibencilidenacetona)paladio(0); tris(dibencilidenacetona)-dipaladio(0) o dicloruro de [1,1’bis(difenilfosfina)ferroceno]paladio(II). Los catalizadores preferibles son tetraquis(trifenilfosfino)paladio, cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II), acetato de paladio(II), cloruro de paladio(II), bisacetonanitrilo dicloropaladio(0), bis(dibenciidenacetona)paladio(0), tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) o dicloruro de [1,1’-bis(difenilfosfina)ferroceno]paladio(II). Esta reacción se puede llevar a cabo en presencia de un agente aditivo adecuado. Entre los ejemplos de tales agentes aditivos adecuados figuran trifenilfosfina, di-t-butilfosfina, 1,2-bis(difenilfosfina)etano, 1,3bis(difenilfosfino)propano, 1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno, tri-2-furilfosfina, tri-o-tolilfosfina, 2(diclorohexilfosfino)bifenilo o trifenilarsina. Esta reacción se puede llevar a cabo a una temperatura de 0ºC a 200ºC, más preferiblemente de 20ºC a 120ºC. En general será suficiente un tiempo de reacción de 5 minutos a 48 horas, más preferiblemente de 30 minutos a 24 horas.

Etapa 2B. En esta etapa se puede preparar el compuesto de fórmula (VII) por reacción de acoplamiento del compuesto de fórmula (V) con la amina de fórmula (VI) bajo reactivo deshidratado y/o HCl-MeOH y/o un ácido de Lewis. Como reactivos deshidratantes preferidos figuran sulfato sódico, sulfato magnésico, sulfato calcico o formiato de metilo. Entre los ejemplos de disolventes adecuados figuran THF, 1,4-dioxano, DMF, acetonitrilo, alcoholes tales como MeOH o EtOH, hidrocarburos halogenados tales como DCM, 1,2-dicloroetano, cloroformo o tetracloruro de carbono, o ácido acético. Generalmente la temperatura de reacción está en el intervalo de 0ºC a 200ºC, preferiblemente en el intervalo de 100ºC a 140ºC. En general, el tiempo de reacción es de 1 minuto a 1 día, preferiblemente de 5 minutos a 1 hora. Si es necesario se aplican a la reacción microondas.

Etapa 2C. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (VIII) por reducción del compuesto de fórmula (VII) con un agente reductor. Esta reacción se puede llevar a cabo en presencia de un agente reductor adecuado tal como diborano, complejo de borano-sulfuro de metilo, borohidruro sódico, borohidruro de litio, borohidruro sódico o hidruro de aluminiolitio en un disolvente inerte seleccionado entre THF y dietil éter. Generalmente la temperatura de reacción está en el intervalo de -100ºC a 250ºC, preferiblemente en el intervalo de 0ºC a la temperatura de reflujo; pero, si es necesario, se pueden emplear temperaturas más bajas o más altas. Generalmente, el tiempo de reacción es de 1 minuto a 1 día, preferiblemente de 20 minutos a 5 horas, aunque se pueden emplear, si es necesario, tiempos más cortos o más largos. La reducción se puede realizar también en condiciones de hidrogenación conocidas tales como en presencia de un catalizador tal como níquel Raney en presencia o ausencia de hidrazina, catalizadores de paladio o catalizadores de platino en atmósfera de hidrógeno. Esta reacción se puede llevar a cabo en un disolvente inerte tal como MeOH, EtOH y THF en presencia o ausencia de cloruro de hidrógeno. Si es necesario, esta reducción se puede efectuar a presión adecuada, en el intervalo de aproximadamente 0,5 kg/cm2 a 10 kg/cm2, preferiblemente en el intervalo de 1 kg/cm2 a 6 kg/cm2. Los ejemplos de disolventes adecuados son similares a los mencionados en la Etapa 2B. La temperatura de reacción generalmente está en el intervalo de -100ºC a 250ºC, preferiblemente en el intervalo de 0ºC a la temperatura de reflujo; pero, si es necesario, se pueden emplear temperaturas más bajas o más altas. En general, el tiempo de reacción es de 1 minuto a 2 días, preferiblemente de 20 minutos a 24 horas.

Etapa 2D. En esta etapa se puede preparar el compuesto de fórmula (II) por desprotección y/o formación de sal del compuesto (VIII) en condiciones ácidas en un disolvente orgánico usando un procedimiento de Journal of American Chemical Society, 1999, 121, 268-269, por D. Cogan y otros. Un ácido es, por ejemplo, no limitativamente, cloruro de hidrógeno, bromuro de hidrógeno, ácido trifluorometanosulfónico, ácido acético o ácido p-toluenosulfónico. La reacción se puede realizar también en condiciones de hidrogenación conocidas, tales como en presencia de un catalizador metálico tal como un catalizador de paladio-carbón o un catalizador de platino, en atmósfera de hidrógeno. Esta reacción se puede llevar a cabo en un disolvente inerte tal como MeOH o EtOH y THF en presencia o ausencia de cloruro de hidrógeno. Si es necesario, esta reducción se puede realizar a una presión adecuada en el intervalo de aproximadamente 0,5 a 10 kg/cm2, preferiblemente en el intervalo de 1 a 6 kg/cm2. Generalmente la temperatura está en el intervalo de -100ºC a 250ºC, preferiblemente en el intervalo de 0ºC a la temperatura de reflujo; pero, si es necesario, se pueden emplear temperaturas más bajas o más altas. En general, el tiempo de reacción es de 1 minuto a 2 días, preferiblemente de 20 minutos a 24 horas.

imagen1

Esquema 3

R’: t-butilsulfinilo, fenetilo, NH2, bencilo o difenilmetilo 5 M: un metal tal como litio, o MgZ, siendo Z halógeno Cuando R2 no es H, el compuesto de fórmula (II) se puede preparar a partir de un compuesto de fórmula (IV).

Etapa 3A. En esta etapa se puede preparar el compuesto de fórmula (IX) haciendo reaccionar

10 el compuesto de fórmula (X) con monóxido de carbono y alcohol (por ejemplo, MeOH, EtOH) en presencia de un catalizador y/o una base en un disolvente inerte. Son ejemplos de catalizador, no exclusivamente, reactivos de paladio tales como acetato de paladio o dibencilacetona paladio. Entre los ejemplos de bases adecuadas figuran N,Ndiisopropiletilamina, N-metilmorfolina o trietilamina. Si se desea, esta reacción puede realizarse en presencia o ausencia de un aditivo tal como 1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno, trifenilfosfina o 1,3-bis-(difenilfosfino)propano (DPPP). Normal y preferiblemente la reacción se realiza en presencia de un disolvente. No hay restricción particular en cuanto a la naturaleza del disolvente a emplear, con tal que no tenga efecto adverso sobre la reacción o los reactivos involucrados y que pueda disolver los reactivos, al menos en cierta cuantía. Entre los ejemplos de disolventes adecuados figuran acetona, nitrometano, DMF, sulfolano, DMSO, NMP, 2butanona, acetonitrilo, hidrocarburos halogenados tales como DCM, dicloroetano o cloroformo;

o éteres tales como THF o 1,4-dioxano. La reacción se puede efectuar en un amplio intervalo de temperaturas y la temperatura exacta de reacción no es crítica para la invención. La temperatura de reacción preferida dependerá de factores tales como la naturaleza del disolvente y el material de partida o disolvente usados. Sin embargo, en general, los inventores han encontrado que es conveniente realizar la reacción entre -20ºC y 150ºC, más preferiblemente entre aproximadamente 50ºC y 80ºC. El tiempo requerido para la invención puede variar también ampliamente dependiendo de muchos factores, de modo notable de la temperatura de reacción y la naturaleza de los reactivos y disolventes empleados. Sin embargo, con tal que la reacción se lleve a cabo en las condiciones preferidas señaladas antes, usualmente será suficiente un período de 30 minutos a 24 horas, más preferiblemente de 1 hora a 10 horas.

Etapa 3B-1. En esta etapa se puede preparar un compuesto ácido por hidrólisis del compuesto de fórmula (IX) en un disolvente. La hidrólisis se puede realizar por procedimientos convencionales. En un procedimiento típico, la hidrólisis realizada en condición básica en presencia de agua; entre las bases adecuadas figuran hidróxido sódico, hidróxido potásico o hidróxido de litio. Entre los disolventes adecuados figuran, por ejemplo, alcoholes tales como MeOH, EtOH, propanol, butanol, 2-metoxietanol o etilenglicol; éteres tales como THF, DME o 1,4-dioxano; amidas tales como DMF o hexametilfosforictriamida; o sulfóxidos tales como DMSO. Esta reacción se puede llevar a cabo a una temperatura en el intervalo de -20ºC a 100ºC, usualmente de 20ºC a 65ºC, durante 30 minutos a 24 horas, usualmente de 60 minutos a 10 horas. La hidrólisis se puede realizar también en condiciones ácidas, por ejemplo en presencia de haluros de hidrógeno tales como cloruro de hidrógeno y bromuro de hidrógeno; ácidos sulfónicos tales como ácido p-toluenosulfónico y ácido bencenosulfónico, ptoluenosulfonato de piridinio; y ácidos carboxílicos tales como ácido acético y ácido trifluoroacético. Entre los disolventes adecuados figuran, por ejemplo, alcoholes tales como MeOH, EtOH, propanol, butanol, 2-metoxietanol y etilenglicol; éteres tales como THF, DME o 1,4-dioxano; amidas tales como DMF o hexametilfosforotriamida; y sulfóxidos tales como DMSO. Esta reacción se puede llevar a cabo a una temperatura en el intervalo de -20ºC a 100ºC, usualmente de 20ºC a 65ºC, durante 30 minutos a 24 horas, usualmente de 60 minutos a 10 horas.

Etapa 3B-2. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (X) a partir de l compuesto de 3B-1 por el mismo procedimiento de la Etapa 1.

Etapa 3C. En esta etapa se puede preparar el compuesto de fórmula (XI) por reacción del compuesto de fórmula (X) con un reactivo organometálico R2M. R2M se puede preparar por reacción de un compuesto haluro de R2. Por ejemplo, se puede generar R2M, en el que M representa MgZ, agitando Mg y R2Z, dibromometano e I2 con calentamiento a 30-80ºC. Esta reacción se puede realizar en presencia de un reactivo organometálico o un metal. Entre los ejemplos de reactivos organometálicos adecuados figuran compuestos alquil-litio tales como nbutil-litio, s-butil-litio o t-butil-litio; compuestos aril-litio tales como fenil-litio o naftiluro de litio. Entre los ejemplos de metales adecuados figura magnesio. Entre los disolventes inertes preferidos figuran, por ejemplo, hidrocarburos tales como hexano; éteres tales como dietil éter, diisopropil éter, DME, THF o 1,4-dioxano; o mezclas de los mismos. Generalmente la temperatura de reacción está en el intervalo de -100ºC a 50ºC, preferiblemente en el intervalo de -100ºC a temperatura ambiente. El tiempo de reacción es, en general, de 1 minuto a 1 día, preferiblemente de 1 hora a 10 horas.

Ruta 1 Etapa 3D. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula XII) por reducción del compuesto de fórmula (XI). La reducción del grupo carbonilo del compuesto (XI) se puede realizar por procedimientos convencionales. En un procedimiento típico, la reducción se realiza por tratamiento con hidruro de aluminio-litio, borohidruro de litio o borano en un disolvente inerte adecuado. Entre los disolventes adecuados figuran, por ejemplo, éteres tales como THF, DME o 1,4-dioxano. Esta reacción se puede llevar a cabo a una temperatura en el intervalo de 20ºC a 100ºC, usualmente de 20ºC a 65ºC durante 30 minutos a 24 horas, usualmente de 60 minutos a 10 horas. Un procedimiento de reducción alternativo se puede realizar por tratamiento con un agente reductor tal como el complejo BH3Me2S que tiene como ligando (R)3,3-difenil-1-metilpirrolidino[1,2,C]-1,3,2-oxaazoborol. Entre los disolventes inertes adecuados figura THF. La reacción se puede realizar a una temperatura de -10ºC durante 30 minutos a 24 horas, usualmente durante 60 minutos a 10 horas.

Etapa 3E-1. En esta etapa se puede convertir un compuesto de fórmula (XII) en un compuesto con un grupo saliente bajo condiciones conocidas por los expertos en la técnica. Por ejemplo, el grupo hidroxi del compuesto de fórmula (XII) se puede convertir en el cloruro usando un agente de cloración, por ejemplo cloruro de tionilo, cloruro de oxalilo, en presencia o ausencia de un disolvente inerte, por ejemplo hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno, cloroformo, tetracloruro de carbono o 1,2-diclorometano; éteres tales como dietil éter, diisopropil éter, THF o 1,4-dioxano; DMF o DMSO.

Como otro ejemplo, el grupo hidroxi del compuesto de fórmula (XII) se puede convertir en el grupo sulfonato usando un agente de sulfonación, por ejemplo, cloruro de ptoluenosulfonilo, anhídrido p-toluenosulfónico, cloruro de metanosulfonilo, anhídrido metanosulfónico, anhídrido trifluorometanosulfónico en presencia o ausencia de una base, por ejemplo, un hidróxido de un metal alcalino o alcalinotérreo, un alcóxido, carbonato, haluro o hidruro tal como hidróxido sódico, hidróxido potásico, metóxido sódico, etóxido sódico, tbutóxido potasico, carbonato sódico, carbonato potásico, fluoruro potásico, hidruro sódico o hidruro potásico, o una amina tal como trietilamina, tributilamina, diisopropiletilamina, piridina o dimetilaminopiridina en presencia o ausencia de un disolvente inerte, por ejemplo, hidrocarburos alifáticos tales como hexano, heptano, o éter de petróleo; hidrocarburos aromáticos tales como benceno, tolueno, o-diclorobenceno, nitrobenceno, piridina o xileno; hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno, cloroformo, tetracloruro de carbono o 1,2-diclorometano; éteres tales como dietil éter, diisopropil éter; THF o 1,4-dioxano, DMF o DMSO.

Etapa 3E-2. Se puede preparar un compuesto de fórmula (XIII) por introducción de un grupo azido. El compuesto obtenido en la Etapa 3E-1 puede tratarse con difenilfosforilazida (DPPA), azida sódica o HN3 en presencia de azodicarboxilato de dialquilo tal como azodicarboxilato de dietilo (DEAD) y un reactivo fosfina tal como trifenilfosfina. Preferiblemente, esta reacción se puede llevar a cabo en un disolvente inerte. Entre los disolventes inertes preferidos figuran, no limitativamente, THF, dietil éter, DMF, benceno, tolueno, xileno, o-diclorobenceno, nitrobenceno, DCM, 1,2-dicloroetano o DME, o mezclas de ellos. La reacción se puede realizar en presencia de un agente reductor adecuado tal como hidruro de litioaluminio, borohidruro sódico, fosfito de trietilo, trifenilfosfina, zinc, anhídrido dibutílico o diborano en un disolvente inerte seleccionado entre, no exclusivamente, THF, dietil éter, MeOH y EtOH. Si se desea, la reacción puede realizarse en condiciones ácidas en presencia de ácido clorhídrico o ácido acético. Generalmente la temperatura de reacción está en el intervalo de -100ºC a 250ºC, preferiblemente en el intervalo de 0ºC a la temperatura de reflujo; pero, si es necesario, se pueden emplear temperaturas más bajas o más altas. En general, el tiempo de reacción es de 1 minuto a 1 día, preferiblemente de 20 minutos a 5 horas, aunque, si es necesario, se pueden emplear tiempos de reacción más cortos o más largos.

Etapa 3F. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (II) por reducción del compuesto azida de fórmula (XIII) con un agente reductor. Esta reacción se puede llevar a cabo en presencia de un agente reductor adecuado tal como diborano, complejo de boranosulfuro de metilo o hidruro de aluminiolitio en un disolvente inerte tal como THF o dietil éter. La reacción se puede realizar también en condiciones similares a las descritas en la Etapa 2D anterior. Generalmente la temperatura de reacción está en el intervalo de -100ºC a 250ºC, preferiblemente en el intervalo de 0ºC a la temperatura de reflujo; pero, si es necesario, se puede usar una temperatura superior o inferior. El tiempo de reacción es, en general, de 1 minuto a 1 día, preferiblemente de 20 minutos a 5 horas, aunque, si es necesario, se pueden emplear tiempos de reacción más cortos o más largos. La reducción se puede realizar en condiciones de hidrogenación conocidas tales como en presencia de un catalizador metálico tal como catalizadores de níquel Raney en presencia o ausencia de hidrazina, catalizadores de paladio o catalizadores de platino, en atmósfera de hidrógeno. La reacción se puede llevar a cabo en un disolvente inerte tal como MeOH, EtOH o THF, en presencia o ausencia de cloruro de hidrógeno. Si es necesario, esta reducción se puede llevar a cabo a una presión adecuada en el intervalo de aproximadamente 0,5 a 10 kg/cm2, preferiblemente en el intervalo de 1 a 6 kg/cm2. Generalmente, la temperatura de reacción está en el intervalo de -100ºC a 250ºC, preferiblemente en el intervalo de 0ºC a la temperatura de reflujo; pero, si es necesario, se pueden emplear temperaturas más bajas o más altas. En general, el tiempo de reacción es de 1 minuto a 2 días, preferiblemente de 20 minutos a 24 horas.

Ruta 2 Etapa 3G. En esta etapa se puede preparar el compuesto de fórmula (XIV) por reacción de acoplamiento del compuesto de fórmula (XI) con la amina de fórmula (VI) por el procedimiento descrito en la Etapa 2B anterior. Etapa 3H. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (XV) a partir del compuesto de fórmula (XIV) por el procedimiento descrito en la Etapa 2C anterior.

Etapa 3I. En esta etapa, se puede preparar un compuesto de fórmula (II) a partir del compuesto de fórmula (XV) por el procedimiento descrito en la Etapa 2D anterior.

Ruta 3

En esta ruta, se puede preparar un compuesto de fórmula (II) por el procedimiento descrito en la Etapa 3C, la Etapa 3E-1 y 3E-2 y la Etapa 3F anteriores.

Ruta 4

En esta ruta, se puede preparar un compuesto de fórmula (II) por el procedimiento descrito en la Etapa 3G, la Etapa 3C y la Etapa 3I anteriores. Esquema 4

imagen1

10

L: grupo saliente

M: MgZ, Z: halógeno.

Cuando R2 no es hidrógeno y R1 es hidrógeno, se puede preparar un compuesto de 15 fórmula (XI) a partir de un compuesto de fórmula (IV). Esto ilustra la preparación alternativa de compuestos de fórmula (XI).

Etapa 4A. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (XIX) por cianuración de un compuesto de fórmula (IV) en condiciones de cianuración con un catalizador de un metal de 20 transición y un reactivo cianuro en un disolvente inerte. Entre los ejemplos de disolventes inertes figuran THF, 1,4-dioxano, DMF, acetonitrilo, alcoholes tales como MeOH o EtOH, hidrocarburos halogenados tales como DCM, 1,2-dicloroetano, cloroformo o tetracloruro de carbono, o DME. Entre los reactivos adecuados figuran, por ejemplo, cianuros de metales alcalinos tales como cianuro de litio, cianuro sódico, cianuro potásico, cianuros de metales de 25 transición tales como cianuro de hierro(II), cianuro de cobalto(II), cianuro de cobre(I), cianuro de cobre(II), cianuro de zinc(II) o cianuro de trimetilsililo. Esta reacción se puede llevar a cabo en presencia de un catalizador adecuado. De igual modo no hay una restricción particular sobre la naturaleza de los catalizadores usados y se puede usar aquí igualmente cualquiera de los catalizadores comúnmente usados en reacciones de este tipo. Entre los ejemplos de tales 30 catalizadores figuran: tetraquis(trifenilfosfina)-paladio, cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II), cobre(0), acetato de cobre(I), bromuro de cobre(I), cloruro de cobre(I), yoduro de cobre(I), óxido de cobre(I), trifluorometanosulfonato de cobre(II), acetato de cobre(II), bromuro de cobre(II), cloruro de cobre(II), yoduro de cobre(II), óxido de cobre(II), trifluorometanosulfonato de cobre(II), acetato de paladio(II), cloruro de paladio(II), bisacetonitrilodicloropaladio(0), bis(dibencilidenacetona)paladio(0), tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) o dicloruro de [1,1’-bis5 (difenilfosfina)ferroceno]paladio(II). Son catalizadores preferibles tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0), cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II), acetato de paladio(II), cloruro de paladio(II), bisacetonitrilodicloropaladio(0), bis(dibencilidenacetona)paladio(0), tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) o dicloruro de [1,1’-bis(difenilfosfina)ferroceno]paladio(II). Esta reacción se puede realizar en presencia de un agente aditivo adecuado. Entre los ejemplos de tales agentes

10 aditivos figuran trifenilfosfina, tri-t-butilfosfina, 1,1’-bis(difenilfosfina)ferroceno, tri-2-furilfosfina, tri-o-tolilfosfina, 2-(diclorohexilfosfina)bifenilo o trifenilarsina. La reacción se puede realizar a una temperatura de 0ºC a 200ºC, más preferiblemente de 20ºC a 120ºC. El tiempo de reacción es en general de 5 minutos a 48 horas, más preferiblemente será suficiente un tiempo de 30 minutos a 24 horas. Si es necesario se aplican microondas a la reacción.

15 Etapa 4B. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (XI) por reacción del compuesto de fórmula (XIX) con reactivos de Grignard seguida de hidrólisis con solución acuosa de bicarbonato sódico o cloruro amónico. Entre los ejemplos de reactivos de Grignard adecuados figuran, por ejemplo, no limitativamente, bromuro de alquilmagnesio, tal como

20 bromuro de metilmagnesio, de etilmagnesio, de fenilmagnesio. Entre los disolventes inertes preferidos figuran, por ejemplo, éteres tales como dietil éter, diisopropil éter, DME, THF o 1,4dioxano, o mezclas de los mismos. Generalmente la temperatura de reacción está en el intervalo de -100ºC a 50ºC, preferiblemente en el intervalo de -100ºC a temperatura ambiente. En general, el tiempo de reacción es de 1 minuto a 1 día, preferiblemente de 1 hora a 10 horas.

25

Esquema 5

imagen1

Cuando R2 es metilo, se puede preparar un compuesto de fórmula (XI) a partir de un 30 compuesto de fórmula (IV). Esto ilustra una preparación alternativa de compuestos de fórmula (XI).

Etapa 5A. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (XI) por reacción de Friedel-Crafts a partir de un compuesto de fórmula (IV) en condiciones de acilación con un catalizador ácido de Lewis y reactivo en un disolvente inerte. Entre los ejemplos de disolventes 5 adecuados figuran: hidrocarburos halogenados tales como DCM, 1,2-dicloroetano, cloroformo o tetracloruro de carbono, o DME. Es reactivo adecuado el cloruro de acilo. Esta reacción se puede llevar a cabo en presencia de un catalizador adecuado tal como cloruro de aluminio(III), cloruro de titanio(IV) o cloruro de zirconio. Generalmente la temperatura de reacción está en el intervalo de -100ºC a 90ºC, preferiblemente en el intervalo de la temperatura ambiente a 70ºC. 10 En general, el tiempo de reacción es de 1 minuto a 1 día, preferiblemente de 1 hora a 10 horas.

Esquema 6

imagen1

15

Etapa 6A. En esta etapa se puede preparar un compuesto amida de fórmula (XXI) a partir del compuesto de fórmula (XX) por el mismo procedimiento de le Etapa 1.

Etapa 6B. En esta etapa se puede preparar el compuesto cetona de fórmula (XXII) a partir del 20 compuesto de fórmula (XXI) por el mismo procedimiento de le Etapa 3C.

Etapa 6C. En esta etapa se puede preparar también un compuesto de fórmula (XXIII) por reacción de alquilación del compuesto de fórmula (XXII) con un reactivo de alquilación geminal en un disolvente inerte. Entre los ejemplos de agentes de alquilación preferidos figuran 25 trialquilmetales tales como trimetilaluminio, trietilaluminio; haluros de alquilmagnesio tales como bromuro de metilmagnesio en presencia de un compuesto aditivo tal como bromuro de litio; haluros de dialquiltitanio tales como dicloruro de dimetiltitanio, preparado por reacción de dimetilzinc y cloruro de titanio y, muy preferiblemente, dicloruro de dimetiltitanio. Entre los

ejemplos de disolventes inertes preferidos para la reacción figuran hidrocarburos halogenados tales como DCM, 1,2-diclorometano, cloroformo o tetracloruro de carbono; éteres tales como dietil éter, diisopropil éter, DME, THF y 1,4-dioxano; hidrocarburos tales como n-hexano, ciclohexano, benceno y tolueno; o mezclas de los mismos. Generalmente las temperaturas de

5 reacción están en el intervalo de -100ºC a 200ºC, preferiblemente en el intervalo de -40ºC a 100ºC. Los tiempos de reacción son, en general, de 1 minuto a 1 día, preferiblemente de 1 hora a 10 horas.

Etapa 6D. En esta etapa se puede preparar también el compuesto de fórmula (XXIV) a partir

10 del compuesto de fórmula (XXIII) por el mismo procedimiento de la Etapa 3A. Etapa 6E. En esta etapa se puede preparar también un compuesto ácido de fórmula (III) a partir del compuesto de fórmula (XXIV) por el mismo procedimiento de la Etapa 3B-1 en un disolvente.

15 Esquema 7

imagen1

Etapa 7A. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (XXVI) por acilación N

20 sustituida del compuesto de fórmula (XXV) con alcoximetilenmalonato de dialquilo en un disolvente de reacción inerte o sin disolvente. Entre los ejemplos de disolventes adecuados figuran alcoholes tales como MeOH, EtOH, propanol, butanol, 2-metoxietanol y etilenglicol; éteres tales como THF, DME, y 1,4-dioxano. Como se ha señalado, esta reacción se puede realizar también sin disolvente. La reacción se puede llevar a cabo a una temperatura en el

25 intervalo de 50ºC a 150ºC durante 30 minutos a 24 horas, usualmente en un tiempo de 60 minutos a 3 horas.

Etapa 7B. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (XXVII) por ciclación térmica del compuesto de fórmula (XXVI) en un disolvente de reacción inerte. Entre los ejemplos de disolventes adecuados figuran éteres tales como fenil éter. Esta reacción se puede llevar a cabo a una temperatura en el intervalo de 200ºC a 300ºC en un tiempo de 30 minutos a 24 horas, usualmente a 250ºC en un tiempo de 30 minutos 5 horas. (Journal of Medicinal Chemistry, 1998, vol. 41, nº. 25).

Etapa 7C. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (XXVIII) por halogenación del compuesto de fórmula (XXVII). La reacción se puede realizar en condiciones de halogenación con un reactivo halogenante en un disolvente de reacción o sin disolvente. Entre los ejemplos de disolventes adecuados figuran THF, 1,4-dioxano, DMF, acetonitrilo, hidrocarburos halogenados tales como DCM, 1,2-dicloroetano, cloroformo o tetracloruro de carbono, y ácido acético. Entre los ejemplos de reactivos de halogenación adecuados figuran oxihaluros de fósforo tales como oxihaluro de fósforo y oxibromuro de fósforo. La reacción se puede realizar a una temperatura de 0ºC a 200ºC, más preferiblemente entre la temperatura ambiente y 150ºC. En general, los tiempos de reacción son de 5 minutos a 48 horas, más preferiblemente, usualmente serán suficientes de 30 minutos a 6 horas,

Etapa 7D. En esta etapa se puede preparar un compuesto deshalogenado de fórmula (XXIX) por hidrogenación del compuesto de fórmula (XXVIII) en un disolvente. La reacción de deshidrogenación se realiza, por ejemplo, en condiciones de hidrogenolisis conocidas en presencia de un catalizador metálico bajo atmósfera de hidrógeno o en presencia de fuentes de hidrógeno tales como ácido fórmico o formiato amónico en un disolvente de reacción inerte. Si se desea, la reacción se lleva a cabo en condiciones básicas, por ejemplo, en presencia de trietilamina. Los reactivos preferidos se seleccionan entre, por ejemplo, catalizadores de níquel tales como níquel Raney, paladio-carbón, hidróxido de paladio-carbón, óxido de platino, platino-carbón, rutenio-carbón, rodio-óxido de aluminio, cloruro de tris[fenilfosfina]rodio. Entre los ejemplos de disolventes orgánicos acuosos o no acuosos adecuados figuran alcoholes tales como MeOH, EtOH; éteres tales como THF o 1,4-dioxano; acetona; dimetilformamida; hidrocarburos halogenados tales como DCM, dicloroetano o cloroformo; y ácido acético, y mezclas de los mismos. La reacción se puede llevar a cabo a una temperatura en el intervalo de 20ºC a 100ºC, preferiblemente de 20ºC a 60ºC. En general, los tiempos de reacción son de 10 minutos a 48 horas, preferiblemente de 30 minutos a 24 horas. La reacción se puede llevar a cabo en atmósfera de hidrógeno a una presión que varía de 1 a 100 atmósferas, preferiblemente de 1 a 10 atmósferas. La condición preferible es el uso de paladio-carbón al 510% a temperatura ambiente durante 1 a 24 horas bajo atmósfera de hidrógeno usando un globo.

Etapa 7E. En esta etapa se puede preparar un compuesto ácido de fórmula (III) por hidrólisis del compuesto de fórmula (XXIX) en un disolvente por el procedimiento descrito en la Etapa 3B-1.

Esquema 8.

imagen1

10

Etapa 8A. En esta etapa se puede preparar un compuesto N-óxido de fórmula (XXXI) por

oxidación del compuesto de fórmula (XXX) en un disolvente de reacción inerte. La reacción de

oxidación se puede realizar en ausencia o presencia de un agente aditivo en un disolvente de 15 reacción inerte. Son ejemplos de reactivos de oxidación preferidos ácido meta

cloroperbenzoico (mCPBA), peróxido de hidrógeno, ácido peracético. Entre los ejemplos de

disolventes de reacción inertes preferidos figuran hidrocarburos halogenados tales como

cloruro de metileno, cloroformo, tetracloruro de carbono y dicloroetano; éteres tales como dietil

éter, diisopropil éter, DME, THF y 1,4-dioxano; acetonitrilo, ácido acético y agua, o mezclas de 20 los mismos. Generalmente, las temperaturas de reacción están en el intervalo de 0ºC a 250ºC,

más preferiblemente en el intervalo de 0ºC a 100ºC. En general, los tiempos de reacción son

de 1 minuto a 10 días, más preferiblemente de 20 minutos a 6 horas. Esta reacción se puede

realizar en presencia de un catalizador adecuado. De igual modo, no hay una restricción

particular sobre la naturaleza del catalizador usado y se puede usar aquí igualmente cualquier 25 catalizador comúnmente usado en reacciones de este tipo. Entre los ejemplos de tales

catalizadores figuran metiltrioxirrenio(VII), ácido wolfrámico y wolframato sódico deshidratado.

Etapa 8B. En esta etapa se puede preparar un compuesto ciano de fórmula (XXXII) por cianuración del compuesto de fórmula (XXXI) en un disolvente de reacción inerte. Entre los ejemplos de reactivos de cianuración preferidos figuran trimetilsilanocarbonitrilo (TMSCN), la combinación de trimetilclorosilano y cianuro sódico, la combinación de agentes de acilación tales como cloruro de N,N-dimetilcarbamoílo con trimetilsilanocarbonitrilo (TMSCN). Un reactivo de cianuración preferido es trimetilsilanocarbonitrilo (TMSCN) en presencia de una base tal como hidrocarburos trietilamina en un disolvente de reacción inerte. Entre los ejemplos de disolventes de reacción inertes figuran hidrocarburos halogenados como cloruro de metileno, cloruro de etileno, tetracloruro de carbono y dicloroetano; éteres tales como dietil éter, DME, THF y 1,4-dioxano; acetonitrilo, DMF, DMSO o mezclas de los mismos. Generalmente las temperaturas de reacción están en el intervalo de 0ºC a 250ºC, más preferiblemente en el intervalo de 0ºC a 100ºC. Generalmente, el tiempo de reacción es de 1 minuto a 10 días, más preferiblemente de 20 minutos a 24 horas.

Etapa 8C. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (III) por hidrólisis del compuesto ciano de fórmula (XXXII) en un disolvente. La hidrólisis se puede llevar a cabo por procedimientos convencionales. En un procedimiento típico, la hidrólisis se puede realizar en condiciones básicas, por ejemplo, en presencia de hidróxido sódico, hidróxido potásico o hidróxido de litio. Entre los ejemplos de disolventes adecuados figuran alcoholes tales como MeOH, EtOH, propanol, butanol, 2-metoxietanol y etilenglicol; éteres tales como THF, DME y 1,4-dioxano; amidas tales como DMF y hexametilfosfolictriamida; y sulfóxidos tales como DMSO. Los disolventes preferidos son MeOH, EtOH, propanol, THF, DME, 1,4-dioxano, DMF y DMSO. Esta reacción se puede realizar a una temperatura en el intervalo de -20ºC a 150ºC, usualmente entre 20ºC y 100ºC durante 30 minutos a 24 horas, usualmente durante 60 minutos a 10 horas.

Esquema 9 Etapa 9A. En esta etapa se puede preparar un compuesto N-óxido de fórmula (XXXIV) por oxidación del compuesto de fórmula (XXXIII) en un disolvente por el procedimiento descrito en la Etapa 8A.

imagen1

5 Etapa 9B. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (XXXV) por trifluorometilación del compuesto de fórmula (XXXIV) en un disolvente de reacción inerte. Entre los ejemplos de reactivois de trifluorometilación preferidos figura la combinación de trifluorometiltrimetilsilano (TMSCF3) y reactivos iniciadores. Entre los ejemplos de reactivos iniciadores catalíticos preferidos figuran fluoruro de tetrabutilamonio, fluoruro de cesio, acetato

10 de litio, acetato sódico, acetato potasico, acetato de tetrabutilamonio, pivalato de litio, benzoato de litio, t-butóxido potásico, t-butóxido sódico. Entre los ejemplos de disolventes de reacción inertes preferidos figuran hidrocarburos tales como hexano, benceno, tolueno; hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno, cloroformo, tetracloruro de carbono y dicloroetano; éteres tales como dietil éter, diisopropil éter, DME, THF y 1,4-dioxano;

15 acetonitrilo, EtOAc, DMF, DMSO y mezclas de los mismos. Generalmente, la temperatura de reacción está en el intervalo de -78ºC a 200ºC, más preferiblemente en el intervalo de -78ºC a 100ºC. En general, el tiempo de reacción es de 1 minuto a 10 días, más preferiblemente de 20 minutos a 24 horas.

20 Etapa 9C. En esta etapa se puede preparar un compuesto ácido de fórmula (III) que es una parte de la fórmula (III) por hidrólisis del compuesto de fórmula (XXXV) en un disolvente por el procedimiento descrito en la Etapa 3B-1.

Esquema 10

25

imagen1

Etapa 10A. En esta etapa se puede preparar un compuesto 1,2-dihidroquinolina de fórmula

(XXXVII) por alquilación del compuesto de fórmula (XXXVI) en un disolvente de reacción inerte.

30 El compuesto organometálico de fórmula R4-MX se puede preparar por reacción de un compuesto haluro de R, siendo R alquilo. M representa un metal tal como litio, o MgX, representando X un átomo de hidrógeno, un átomo de halógeno tal como flúor, cloro, bromo o yodo. Entre los ejemplos de reactivos organometálicos adecuados figuran compuestos alquillitio tales como metil-litio, n-butil-litio, s-butil-litio y t-butil-litio; aril-litio tales como fenil-litio y naftiluro de litio; haluro de alquilmagnesio tales como haluro de metilmagnesio, haluro de isopropilmagnesio y haluro de t-butilmagnesio; haluro de arilmagnesio tales como haluro de fenilmagnesio. Entre los ejemplos de disolventes de reacción inertes preferidos figuran hidrocarburos tales como hexano; éteres tales como dietil éter, diisopropil éter, DME, THF y 1,4-dioxano, o mezclas de los mismos. Generalmente las temperaturas de reacción están en el intervalo de -100ºC a 100ºC, preferiblemente en el intervalo de -100ºC a la temperatura ambiente. En general, el tiempo de reacción es de 1 minuto a 1 día, preferiblemente de 1 hora a 24 horas.

Etapa 10B. En esta etapa se puede preparar un compuesto de fórmula (XXXVIII) por oxidación del compuesto de fórmula (XXXVII) en un disolvente. Entre los ejemplos de agentes de oxidación adecuados figuran reactivos de Cr tales como trióxido de cromo (CrO3), cromato potásico (K2CrO4), dicromato potásico (K2Cr2O7); reactivos de Mn tales como dióxido de manganeso (MnO2), permanganato potasico (KMnO4); reactivos de quinina tales como 2,3,5,6tetracloro-1,4-benzoquinona (p-cloranil), 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (DQD), y oxidación por aire. Entre los ejemplos de disolventes adecuados figuran THF, 1,4-dioxano, DMF, acetonitrilo, hidrocarburos halogenados (por ejemplo, DCM, diocloroetano, cloroformo), agua, o mezclas de los mismos. La reacción se puede realizar en un amplio intervalo de temperaturas y la temperatura de reacción exacta no es crítica para la invención. La temperatura de reacción preferida dependerá de factores tales como la naturaleza del disolvente y el material de partida o reactivo usado. Sin embargo, los inventores han encontrado que en general es conveniente realizar la reacción a una temperatura de -78ºC a 100ºC, más preferiblemente de aproximadamente -60ºC a 60ºC. El tiempo requerido para realizar la reacción puede variar también ampliamente dependiendo de muchos factores, notablemente la temperatura de reacción y la naturaleza de los reactivos y el disolvente empleados. Sin embargo, con tal que la reacción se efectúe en las condiciones de reacción preferidas señaladas antes, usualmente será suficiente un período de 1 minuto a 24 horas, más preferiblemente de 30 minutos a 12 horas.

Etapa 10C. En esta etapa se puede preparar un compuesto ácido de fórmula (III) por hidrólisis del compuesto de fórmula (XXXVIII) en un disolvente por el procedimiento descrito en la Etapa 3B-1.

Los diferentes procedimientos generales descritos en lo que antecede pueden ser útiles para la introducción de los grupos deseados en cualquier tramo de la formación en etapas del compuesto requerido y se apreciará que estos procedimientos generales se pueden combinar de diferentes formas en tales procedimientos multietapa. La secuencia de las reacciones en procedimientos multietapa debe escogerse, obviamente, de manera que las condiciones de reacción no afecten a los grupos de la molécula que se desean en el producto final.

Procedimiento para estimar las actividades biológicas

Ensayo antagonista de VR1 humano

La actividad antagonística de VR1 se puede determinar por el ensayo de imagen de Ca2+ usando células de VR1 humano altamente expresado. Las células de receptor VR1 humano altamente expresado son obtenibles por diferentes procedimientos convencionales. Un procedimiento estándar es clonar del ganglio de raíz dorsal (DRG) o riñón de acuerdo con procedimientos tales como los descritos en el artículo de Nature, 389, págs. 816-824, 1997. Alternativamente, también son conocidos receptores VR1 que expresan mucho queratinocitos humanos y que han sido publicados en un artículo de revista (Biochemical and Biophysical Research Communications, 291, págs. 124-129, 2002). En este artículo queratinocitos humanos demostraron un aumento de Ca2+ intracelular mediado por VR1 por adición de capsaicina. Además, se dispone también del procedimiento de regulación por hiperproducción de gen de VR1 humano, que usualmente es un gen silente o que no produce un nivel detectable de receptores VR1, para producir células convenientes. Tal procedimiento de modificación genética se describió detalladamente en Nat. Biotechnol., 19, págs. 440-445, 2001.

Las células que expresan receptores VR1 humanos se mantuvieron en un matraz de cultivo a 37ºC en un ambiente que contenía 5% de CO2 hasta que se usaron en el ensayo. El ensayo de imagen intracelular de Ca2+ para determinar las actividades antagonísticas de VR1 se hizo por los procedimientos siguientes.

Se retiró del matraz el medio de cultivo y se añadió al matraz el indicador de calcio fluorescente fura-2/AM a una concentración de 5 µM en el medio. El matraz se puso en una incubadora con CO2 y se incubó durante 1 hora. Luego se separaron del matraz las células que expresan los receptores VR1 humano y se lavaron con tampón salino de fosfato, PBS(-) y se volvió a ponerlos en suspensión en tampón de ensayo. A la placa de ensayo se añadieron los 80 µl de alícuota de la suspensión de células (3,75 x 105 células/ml) y las células se sedimentaron por centrifugación (950 rpm, 20ºC, 3 minutos).

Los compuestos de los ejemplos se ensayaron por el ensayo de antagonistas de VR1

humano descrito antes. Los valores de concentración de inhibición al 50% (CI50) se presentan

en la Tabla siguiente.

Tabla 1

Ejemplo nº.: CI50, nM Ejemplo nº. CI50, nM

A1: 250 C1 451

A2: 67,8 C 2 203

A3: 96,0 C 3 77,5

A4: 271 C4 32,5

A5: 127 D1 231

A6: 261 D2 85,1

B1: 426 Capsazepina (control) 237-455

Ensayo de estimulación con capsaicina Los cambios inducidos por capsaicina en la concentración de calcio intracelular se controlaron usando FDSS 6000 (Hamamatsu Photonics, Japón), un sistema de obtención

10 fluorométrica de imágenes. Se preincubó la suspensión de células en tampón HEPES de Krebs-Ringer (HKR) (NaCl 115 mM, KCl 5,4 mM, MgSO4 1 mM, CaCl2 1,8 mM, D-glucosa 11 mM, HEPES 25 mM, Na2HPO4 0,96 mM, pH 7,3) con concentraciones variables de los compuestos a ensayar o tampón HKR (tampón de control) durante 15 minutos a temperatura ambiente en la oscuridad. La solución de capsaicina, que da 300 nM en la mezcla de ensayo,

15 se añadió automáticamente a la placa de ensayo por el FDSS 6000.

Ensayo de estimulación con ácido Los cambios inducidos por ácido en la concentración de calcio intracelular se controlaron usando FDSS 6000 (Hamamatsu Photonics, Japón), un sistema de obtención

20 fluorométrica de imágenes. La suspensión de células en tampón residual (HBSS suplementado con HEPES 10 mM, pH 7,4) se preincubó con cantidades variables de los compuestos a ensayar o tampón residual (tampón de control) durante 15 minutos a temperatura ambiente en la oscuridad. Las células se añadieron automáticamente a la solución estimulante (HBSS suplementado con MES, tampón de ensayo final, pH 5,8) por el FDSS 6000 . Los valores de

25 CI50 de los antagonistas de VR1 se determinaron a partir del semiincremento demostrado por las muestras de tampón de control después de estimulación por ácido.

Determinación de la actividad antagonista

El control de los cambios de las señales de fluorescencia (λex= 340 nm/380 nm, λem= 510-520 nm) se inició 1 minuto antes de añadir la solución de capsaicina o tampón ácido y se continuó durante 5 minutos. Los valores de CI50 de los antagonistas de VR1 se determinaron a partir del semiincremento demostrado por las muestras de tampón de control después de estimulación por ácido.

Ensayo agonista de VR1 humano

Las células que expresan receptores de VR1 humano se mantuvieron en matraz de cultivo a 37ºC en un ambiente que contenía 5% de CO2 hasta su uso en el ensayo. El ensayo de obtención de imagen de Ca2+ intracelular para determinar las actividades agonísticas de VR1 se hizo por los procedimientos siguientes.

Se eliminó del matraz el medio de cultivo y se añadió al matraz el indicador de calcio fluorescente fura-2/AM a una concentración de 5 µM en el medio. El matraz se puso en una incubadora con CO2 y se incubó durante 1 hora. Luego se separaron del matraz las células que expresan los receptores VR1 humano, a lo que siguió el lavado con solución salina tampón de fosfato, PBS(-) y se volvieron a poner en suspensión en tampón HEPES de Krebs-Ringer (HKR): NaCl 115 mM, KCl 5,4 mM, MgSO4 1 mM, CaCl2 1,8 mM, D-glucosa 11 mM, HEPES 25 mM, Na2HPO4 0,96 mM, pH 7,3).

Ensayo en formato de 96 pocillos

Los cambios inducidos por los compuestos de ensayo en la concentración de calcio intracelular se controlaron usando FDSS 6000 (Hamamatsu Photonics, Japón), un sistema de obtención fluorométrica de imágenes. Los 80 µl de alícuota de la suspensión de células (3,75 x 105 células/ml) en tampón HKR se distribuyeron en la placa de 96 pocillos y luego esta placa se puso en el FDSS 6000. Finalmente, 20 µl de concentraciones variables de los compuestos de ensayo o tampón HKR (tampón de control) o capsaicina 1 µM (control de respuesta máxima) se añadieron automáticamente a la placa de ensayo por el FDSS 6000.

Ensayo en formato de 384 pocillos

Los 30 µl de alícuota de la suspensión de células (8x105 células/ml) en tampón HKR se distribuyeron en la placa de ensayo de 384 pocillos y luego la placa de ensayo se puso en el FDSS 6000. Finalmente el FDSS 6000 añadió automáticamente 15 µl de concentraciones variables de compuestos de ensayo o tampón HKR (tampón de control) o capsaicina 2 µM (control de respuesta maxima) a la placa de ensayo.

Determinación de la actividad agonista

El control de los cambios de las señales de fluorescencia (λex= 340 nm/380 nm, λem= 510-520 nm) se inició 1 minuto (formato de 96 pocillos) o 15 segundos (formato de 384 pocillos) antes de añadir los compuestos de ensayo y se continuó durante 5 minutos. Los valores de CI50 de los antagonistas de VR1 se determinaron a partir de la respuesta máxima de los compuestos de ensayo. Los valores de EI50 se determinaron como porcentaje de la respuesta inducida por capsaicina a 1 µM (formato de 96 pocillos) o 2 µM (formato de 384 pocillos).

Modelo de lesión por constricción crónica (Modelo LCC)

Se usaron ratas macho Sprague-Dawley (270-300 g, B.W. Charles River, Tsukuba, Japón). La operación de lesión de constricción crónica (CCI) se realizó de acuerdo con el procedimiento descrito por Bennett y Xie (Bennett, G.J. y Xie, Y.K. Pain, 33:87-107, 1988). En resumen, los animales se anestesiaron con pentobarbital sódico (64,8 mg/kg,i.p.) y el nervio ciático izquierdo se expuso al nivel del centro del muslo por disección roma a través del bíceps femoris. Proximalmente a la bifurcación ciática se liberó de que se adhiriera tejido y se unió flojamente con 4 ligaduras (seda 4-0) en torno a él con un espacio de aproximadamente 1 mm. La operación de arreglo se realizó de forma igual a la operación de CCl excepto la ligación del nervio ciático. Dos semanas después de la cirugía, se evaluó la alodinia mecánica por aplicación de cabellos de von Frey (VFH) a la superficie plantar de la zarpa trasera. Se registró la cantidad menor de VFH requerida para que se manifieste una respuesta como umbral de retraimiento (PWT). El ensayo de VFH se realizó a las 0,5, 1 y 2 horas después de administrar la dosis. Se analizaron los datos experimentales usando el ensayo de Kruskal-Walis seguido del ensayo de Dunn para comparaciones múltiples o el ensayo en U de Mann-Whitney para comparación apareada.

Modelo OA inducido por monoyodoacetato (MIA)

Se anestesiaron ratas macho Sprague-Dawley (SD, Japan SLC o Charles River Japan) de 6 semanas con pentobarbital. Se afeitó el sitio de inyección (rodilla) de MIA y se limpió con EtOH al 70%. Se inyectaron con aguja 39G en la articulación de la rodilla derecha 25 µl de solución de MIA o solución salina. El efecto de la lesión de la articulación sobre la distribución del peso a través de la rodilla derecha (dañada) y la izquierda (no dañada) se evaluó usando un dispositivo de ensayo de incapacidad (Linton Instrumentation, Norfolk, RU). Se midió en gramos la fuerza ejercida por cada pata trasera. El déficit de soporte de peso (WB) se determinó por diferencia de peso cargado sobre cada pata. Las ratas se acostumbraron para medir el WB una vez por semana hasta 20 días tras inyeccción de MIA. Los efectos analgésicos de los compuesto se midieron a los 21 días después de la inyección de MIA. Antes de la administración del compuesto, se midió el “valor previo” del déficit de WB. Después de la administración de los compuestos se determinó como efectos analgésicos la atenuación de los déficits de WB.

Hiperalgesia térmica y mecánica inducida por coadyuvante completo de Freund (CFA) en ratas

Hiperalgesia térmica

Se usaron ratas macho SD de 6 semanas. En la superficie plantar de las patas traseras de las ratas se inyectó coadyuvante completo de Freund (CFA, 300 µg de H37RA de Mycobacterium Tuberculosis (Difco, Ml) en 100 µl de parafina líquida (Wako, Osaka, Japón). Dos días después de la inyección de CFA se determinó la hiperalgesia térmica por el procedimiento descrito previamente (Hargreaves y otros, 1988) usando el aparato de ensayo plantar (Ugo-Basil, Varese, Italia). Las ratas se adaptaron al medio de ensayo durante al menos 15 minutos antes de cualquier estimulación. A la superficie plantar de patas traseras se aplicó calor radiante y se determinaron las latencias de retraimiento de la pata (PWL, segundos). La intensidad del calor radiante se ajustó para producir la PWL estable de 10 a 15 segundos. El compuesto de ensayo se administró en un volumen de 0,5 ml por 100 g de peso corporal. Las PWL se midieron después de 1, 3 o 5 horas tras la administración del fármaco.

Hiperalgesia mecánica

Se usaron ratas macho SD de 4 semanas. Se inyectó en la superficie plantar de patas traseras de la ratas CFA, (300 µg de H37RA de Mycobacterium Tuberculosis (Difco, Ml) en 100 µl de parafina líquida (Wako, Osaka Japón). Dos días después de la inyección de CFA se determinó la hiperalgesia mecánica midiendo el umbral de retraimiento de la pata (PWT, gramos) a la presión usando el analgesímetro (Ugo-Basil, Italia). Los animales fueron constreñidos con suavidad y se aplicó una presión constantemente creciente a la superficie dorsal de una pata trasera mediante una pinza de plástico. Se determinó la presión requerida para que se retrajera la pata. El compuesto de ensayo se administró en un volumen de 0,5 ml por 100 g de peso corporal. Las PWL se midieron después de 1, 3 o 5 horas tras la administración del fármaco.

Ensayo paralelo de penetración de membrana artificial (PAMPA)

Se realizaron experimentos en placas aceptoras y dadoras de 96 pocillos. Tal sistema de 96 pocillos fue descrito en Journal of Medicinal Chemistry, 1998, vol. 41, nº. 1007-1010. Como material de membrana artificial se usó fosfatidilcolina al 4% y ácido esteárico al 1% en dodecano. La placa aceptora (placa filtrante hidrófoba de 96 pocillos (MAIP N45, Millipore)) se preparó añadiendo 5 µl de material de membrana artificial a la parte superior del filtro y la placa se llenó con 250 µl de solución de ácido 2-(N-morfolino)etanosulfónico (MES) tamponado en solución salina equilibrada de Hank (HBSS) (pH 6,5). La placa dadora (Transport Receiver plate (MATRNPS50, Millipore) se llenó con 300 µl de MES tamponado con HBSS (pH 6,5) que contenía 10 µM de los compuestos de ensayo. La placa aceptora se puso sobre la placa dadora formando un emparedado y se incubó a 30ºC durante 2,5 horas. Después del período de incubación, la solución aceptora, la dadora y la dadora inicial (referencia) se analizaron por CL-EM/EM. Los datos se dieron como valor de permeabilidad efectivo en cm x 106 segundos y el valor de retención de la membrana.

Unión de dofetilida humana

Se puede poner en suspensión pasta de células de HEK-293 que expresan producto de HERG en un volumen de 10 veces de tampón Tris 50 mM ajustado a pH 7,5 a 25ºC con HCl 2 M que contienen MgCl2 1 mM, KCl 10 mM. Las células se homogeneizaron usando un homogeneizador Polytron (a la potencia máxima durante 20 s) y se centrifugaron a 48.000g durante 20 min a 4ºC. El sedimento se volvió a poner en suspensión, se homogeneizó y se centrifugó una vez más de la misma manera. Se desechó el material sobrenadante resultante y se volvió a poner en suspensión el sedimento final (un volumen de 10 veces de tampón Tris 50) y se homogeneizó a la potencia máxima durante 20 s. Se dividió en partes alícuotas el homogeneizado de membrana y se almacenó a -80ºC hasta su uso. Se usó una parte alícuota del homogeneizado de membrana para la determinación de proteína usando un kit Protein Assay Rapid y un lector de placas ARVO SX (Wallac). Toda la manipulación, la solución madre y el equipo se mantuvieron en todo momento sobre hielo. Para los ensayos de saturación, los experimentos se realizaron en un volumen total de 200 µl. La saturación se determinó por incubación de 20 µl de [3H]-dofelitide y 160 µl de homogeneizados de membrana (20-30 µg de proteína por pocillo) durante 60 min a temperatura ambiente en ausencia o presencia de dofetilida 10 µM a concentraciones finales (20 µl) para unión total o no específica, respectivamente. Todas las incubaciones se terminaron por filtración rápida en vacío sobre papeles de fibra de vidrio empapados de polieterimida (PEI) usando un cosechador de células Skatron, a lo que siguieron dos lavados con tampón Tris 50 mM (pH 7,5 a 25ºC). Se cuantificó la radiactividad unida a receptor por recuento de centelleo de líquidos usando un contador Packard LS.

Para el ensayo de competición, se diluyeron los compuestos en placas de polipropileno de 96 pocillos como diluciones de 4 puntos en formato semilogarítmico. Todas las diluciones se hicieron en DMSO primeramente y luego se pasaron a tampón Tris 50 mM (pH 7,5 a 25ºC) que contenía MgCl2 1 mM, KCl 10 mM de manera que la concentración final de DMSO fuera de 1%. Los compuestos se dispensaron por triplicado en placas de ensayo (4 µl). Los pocillos de unión total y unión no específica se pusieron en 6 pocillos como vehículo y dofetilide 10 µM a la concentración final, respectivamente. El radioligando se preparó a la concentración final de 5,6x y esta solución se añadió a cada pocillo (36 µl). El ensayo se inició añadiendo perlas (50 µl, 1 mg/pocillo) del ensayo de centelleo de proximidad con YSI poli-L-lisina (SPA) (25 µl, 1 mg/pocillo) y membranas (110 µl, 20 mg/pocillo). La incubación se continuó durante 60 minutos a temperatura ambiente. Las placas se incubaron durante otras 3 horas a temperatura ambiente para que sedimentaran las perlas. La radiactividad unida al receptor se cuantificó por recuento con el contador de placas Wallac MicroBeta.

Ensayo de IHERG

Para el estudio electrofisiológico se usaron células HEK 293 que expresan establemente el canal de potasio de HERG. La metodología para transfección estable de este canal en células HEK se puede encontrar en otra referencia (Z. Zhou y otros, 1998, Biophysical Journal, 74, págs. 230-241). Antes del día en el que se hizo el experimentó se cosecharon las células de matraces de cultivo y se cultivaron sobre portaobjetos de vidrio en medio esencial mínimo (MEM) estándar con suero fetal bovino de ternera al 10% (SFB). Las células cultivadas se almacenaron en una incubadora a 37ºC en atmósfera de 95% de O2/5% de CO2. Las células se estudiaron durante 15-28 horas después de su recolección.

Las corrientes de HERG se estudiaron usando técnicas de pinzamiento zonal estándar al modo de célula entera. Durante el experimento, las células fueron perfundidas con una solución patrón de la composición siguiente (mM): NaCl 130; KCl 4; CaCl2 2; MgCl2 1; glucosa 10; HEPES 5; pH 7,4 con NaOH. Los registros de célula entera se hicieron usando un amplificador de pinzamiento zonal y pipetas Match que tienen una resistencia de 1-3 MOhm cuando se llenan con solución interna patrón de la composición siguiente (mM): KCl 130; MgATP 5; MgCl2 1,0; HEPES 10; EGTA 5; pH 7,2 con KOH. Sólo las células con una resistencia de acceso inferior a 15 MΩ y resistencias de cierre > 1 GΩ se aceptaron para más experimentos. Se aplicó compensación de resistencia en serie hasta un máximo de 80%. No se hizo sustracción por escape. Sin embargo, la resistencia de acceso en serie dependía del tamaño de las corrientes registradas y el nivel de compensación de la resistencia en serie que se puede usar con seguridad. Después de alcanzar la configuración celular total y un tiempo suficiente para la diálisis de células con solución de la pipeta (> 5 min) se aplicó a la célula un protocolo de voltaje patrón para estimular corrientes de membrana. El protocolo de voltaje era como sigue. Se despolarizó la membrana de un potencial de mantenimiento de -80 mV a +40 mV durante 1000 min. A ello siguió un rampa descendente de voltaje (velocidad 0,5 mV m.s-1) al potencial de mantenimiento. El protocolo de voltaje se aplicó a la célula continuamente a lo largo del experimento cada 4 segundos (0,25 Hz). Se midió la amplitud de la corriente pico manifestada en torno a -40 mV durante la rampa. Una vez que se obtuvieron respuestas estimuladas estables en la solución externa, se aplicó vehículo (DMSO al 0,5% en la solución patrón externa) durante 10-20 min con una bomba peristáltica. Con tal que hubiera cambios mínimos en la amplitud de la respuesta de corriente estimulada en la condición de control del vehículo, se aplicó durante un período de 10 minutos el compuesto de ensayo, 0,3, 1,3 o 10 µM. El período de 10 min incluía el tiempo que la solución de suministro pasaba a través del tubo desde el depósito de la solución a la cámara de registro a través de la bomba. El tiempo de exposición de las células a la solución del compuesto fue de más de 5 min después de que la concentración de fármaco en el pocillo de la cámara alcanzara la concentración pretendida. Posteriormente había un período de lavado de 10-20 min para estimar la reversibilidad. Finalmente se expusieron las células a una dosis alta de dofetilida (5 µM), un bloqueante específico de IKr, para evaluar la corriente endógena insensible.

Todos los experimentos se realizaron a temperatura ambiente (23+1ºC). Las corrientes de membrana estimuladas se registraron en línea en un ordenador, se filtraron a 500-1 KHz (Bessel-3dB) y se probaron a 1-2 HKz usando el amplificador de pinzamiento zonal y software específico de análisis de datos. La amplitud de corriente pico, que se presentó a aproximadamente -40 mV, se midió fuera de línea en el ordenador.

Se calculó la media aritmética de los 10 valores de la amplitud en condiciones de control por vehículo y en presencia de fármaco. La disminución porcentual de IN en cada experimento se obtuvo por el valor de corriente normalizada usando la fórmula siguiente: IN = (1-ID/IC)x100, en la que ID es el valor medio de la corriente en presencia de fármaco e IC es el valor medio de la corriente en condiciones de control. Para cada concentración de fármaco o control acoplado en el tiempo se realizaron experimentos separados y la media aritmética de cada experimento se define como el resultado de este estudio.

Estudio de la interacción de fármaco-fármaco Este procedimiento implica esencialmente la determinación de la inhibición porcentual de la formación de producto a partir de sonda de fluorescencia a 3 µM de cada compuesto.

5 Más específicamente, el ensayo se realiza como sigue. Los compuestos se preincubaron con CYPs recombinante, tampón de fosfato potásico 100 mM y sonda de fluorescencia como sustrato durante 5 min. La reacción se inició añadiendo un sistema calentado generador de NADPH, constituido por NADP 0,5 mM (espera, para 2D6 0,03 mM), MgCl2 10 mM, ácido DL-isocítrico 6,2 mM y 0,5 U/ml de deshidrogenasa isocítrica (DIC). La

10 placa de ensayo se incubó a 37ºC (espera; para 1A2 y 3A4 a 30ºC) y tomando lecturas de la fluorescencia cada minuto a lo largo de 20 a 30 minutos. El cálculo de datos se hizo como sigue:

1. La pendiente (tiempo frente a unidades de fluorescencia) se calculó en la región lineal

15 2. La inhibición porcentual en los compuestos se calculó con la ecuación siguiente:

{(v0-vi)/v0} x 100 = inhibición porcentual

en la que 20 v0 = velocidad de reacción de control (no hay inhibidor) vi = velocidad de reacción en presencia de compuestos. Tabla 2. Condiciones para el ensayo de interacción de fármaco-fármaco

1A2: 2C9 2C19 2D6 3A4

Sustrato Sustrato (µM) Enzima (pmol) EX/Em(λ): Azul vivo (Aurora) 10 50 408/465 MFC (Gentest) 30 50 408/535 Azul vivo (Aurora) 10 5 408/465 AMMC (Gentest) 1 50 400/465 Rojo vivo (Aurora) 2 5 530/595

25 Aclaración intrínseco Se incubaron los compuestos a ensayar (1 µM) en MgCl2 1 mM, NaDP 1 mM + ácido isocítrico 5 mM, 1 U/ml de deshidrogenada isocítrica y 0,8 mg/ml de HLM (microsomas de hígado humano) en tampón de fosfato potásico 100 mM (pH 7,4) a 37ºC en varias placas de 384 pocillos. En distintos momentos se eliminó una placa de la incubadora y se terminó la

reacción con dos volúmenes de incubación de acetonitrilo. Se midió por el sistema de CL/EM/EM la concentración de compuesto en el material sobrenadante. El valor de aclaramiento intrinseco (AIint) se calculó con las ecuaciones siguientes:

AIint (µl/min/mg de proteína) = (k x volumen de incubación)/concentración de proteína k(min-1) = -pendiente de ln(concentración frente a tiempo)

Sustancia fármaco

Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula (I) incluyen sus sales de adición de ácido y de adición de base.

Se forman sales de adición de ácido adecuadas a partir de ácidos que forman sales no tóxicas. Entre los ejemplos figuran sales acetato, aspartato, benzoato, besilato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, borato, camsilato, citrato, edisilato, esilato, formiato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hexafluorofosfato, hibenzato, hidrocloruro/cloruro, hidrobromuro/bromuro, hidroyoduro/yoduro, isetionato, lactato, malato, maleato, malonato, mesilato, metilsulfato, naftilato, 2-napsilato, nicotinato, nitrato, orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/dihidrogenofosfato, sacarato, estearato, succinato, tartrato, tosilato y trifluoroacetato.

Se forman sales de base adecuadas a partir de bases que forman sales no tóxicas. Entre los ejemplos figuran sales de aluminio, arginina, benzatina, calcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnesio, meglumina, olamina, potasio, sodio, trometamina y zinc.

Para una recapitulación de sales adecuadas véase Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, por Stahl y Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Alemania, 2002).

Se puede preparar fácilmente una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de fórmula (I) mezclando soluciones del compuesto de fórmula (I) y el ácido o la base deseado, según proceda. La sal se puede precipitar a partir de la solución y recoger por filtración, o se puede recuperar por destilación del disolvente. El grado de ionización de la sal puede variar desde completamente ionizado a casi no ionizado.

Los compuestos de la invención pueden existir en forma no solvatada o en forma solvatada. El término “solvato” se usa aquí para describir un complejo molecular que comprende el compuesto de la invención y una o varias moléculas de un disolvente aceptable, por ejemplo, EtOH. El término “hidrato” se emplea cuando el disolvente es agua.

Están incluidos en el alcance de la invención complejos tales como clatratos, complejos de inclusión de fármaco-hospedador en los que, a diferencia de los solvatos antes mencionados, el fármaco y el hospedador están presentes en cantidades estequiométricas o no estequiométricas. También están incluidos complejos del fármaco que contienen dos o más componentes orgánicos y/o inorgánicos que pueden estar en cantidades estequiométricas o no estequiométricas. Los complejos resultantes pueden estar ionizados, parcialmente ionizados o no ionizados. Para una recapitulación de tales complejos, véase J. Pharm. Sci., 64(8), 12691288, por Haleblian (agosto 1975).

En lo que sigue, todas las referencias de compuestos de fórmula (I) incluyen referencias de sus sales, solvatos y complejos de sus sales.

Entre los compuestos de fórmula (I), según se han definido antes, están incluidos compuestos de la invención, sus polimorfos, profármacos e isómeros (incluidos los isómeros ópticos, geométricos y tautómeros), según se ha definen después, y compuestos de fórmula (I) marcados con isótopos.

Como se ha señalado, la invención incluye todos los polimorfos de los compuestos de fórmula (I) según lo definido antes.

Ciertos derivados de los compuestos de fórmula (I) que pueden tener en sí poca o ninguna actividad farmacológica, cuando se administran en un cuerpo, se pueden convertir en compuestos de fórmula (I) que tienen la actividad deseada, por ejemplo, por escisión hidrolítica. Tales derivados se denominan “profármacos”. Se puede encontrar más información sobre el uso de profármacos en Pro-drugs as Novel Delivery Systems, vol. 14, ACS Symposium Series

(T. Higuchi y W. Stella) y Bioreversible Carriers in Drug Design, Pergamon Press, 1987 (ed.

E.B. Roche, American Pharmaceutical Association).

Los profármacos se pueden producir, por ejemplo, reemplazando funcionalidades apropiadas presentes en los compuestos de la invención de fórmula (I) con ciertos restos, conocidos por los expertos en la técnica como “pro-restos”, descritos en, por ejemplo, Design of Prodrugs, por H. Bundgaard (Elsevier, 1985).

Entre algunos ejemplos de profármacos figuran:

(i): cuando el compuesto de fórmula (I) contiene una funcionalidad ácido carboxílico (-COOH), uno de sus ésteres, por ejemplo, reemplazando el hidrógeno con alquilo C1-8;

(ii): cuando el compuesto de fórmula (I) contiene una funcionalidad alcohol (-OH), uno de sus éteres, por ejemplo, reemplazando el hidrógeno con alcanoiloximetilo C1-6; y

(iii) cuando el compuesto de fórmula (I) contiene una funcionalidad amina primaria o secundaria (–NH2 o –NHR, no siendo R hidrógeno), una de sus amidas, por ejemplo, reemplazando uno o dos hidrógenos con alcanoílo C1-10.

En las referencias anteriores se pueden encontrar más ejemplos de grupos de reemplazo de acuerdo con los ejemplos anteriores y ejemplos de otros tipos de profármacos.

Finalmente, ciertos compuestos de fórmula (I) pueden actuar en sí como profármacos de otros compuestos de fórmula (I).

Los compuestos de fórmula (I) que contienen uno o varios átomos de carbono asimétricos pueden existir como dos o más estereoisómeros. Cuando un compuesto de fórmula

(I) contiene un grupo alquenilo o alquenileno, son posibles isómeros cis/trans (o Z/E). Cuando el compuesto contiene, por ejemplo, un grupo ceto u oxima, un resto aromático o un anillo heteroaromático que incluye más de dos nitrógenos, puede presentar isomería tautómera (“tautomería”). Se deduce que un compuesto individual puede presentar más de un tipo de isomería.

Están incluidos en el alcance de la presente invención todos los estereoisómeros, isómeros geométricos y formas tautómeras de los compuestos de fórmula (I), incluidos compuestos que presentan más de un tipo de isomeria, y mezclas de uno o varios de ellos. También están incluidas sales de adición de ácido o base en las que el ión asociado es ópticamente activo, por ejemplo, D-lactato o L-lisina, o racémico, por ejemplo, DL-tartrato o DLarginina.

Los isómeros cis/trans se pueden separar por técnicas convencionales, bien conocidas por los expertos en la técnica, por ejemplo, cromatografía y cristalización fraccionada.

Entre las técnicas convencionales para la preparación /aislamiento de enantiómeros individuales figuran síntesis quiral de un precursor adecuado ópticamente puro o la resolución de la modificación racémica (o la modificación racémica de una sal o derivado) usando, por ejemplo, cromatografía quiral de líquidos a alta presión (HPLC).

Alternativamente, se puede hacer reaccionar la modificación racémica (o el precursor racémico) con un compuesto ópticamente activo adecuado, por ejemplo, un alcohol o, en el caso de que el compuesto de fórmula (I) contenga un resto ácido o básico, un ácido o una base tal como ácido tartárico o 1-feniletilamina. La mezcla diastereómera resultante se puede separar por cromatografía y/o cristalización fraccionada y convertir uno o ambos de los diastereoisómeros en el (los) correspondiente(s) enantiómero(s) puro(s) mediante procedimientos bien conocidos por una persona experta.

Los compuesto quirales de la invención (y los precursores quirales de los mismos) se pueden obtener en forma enantioméricamente enriquecida usando cromatografía, típicamente HPLC, sobre una resina asimétrica con una fase móvil consistente en un hidrocarburo, típicamente hexano o heptano, que contiene de 0 a 50% de isopropanol, típicamente de 2 a 20%, y de 0 a 5% de una alquilamina, típicamente 0,1% de dietilamina. La concentración del eluido proporciona la mezcla enriquecida.

Los conglomerados estereoisómeros se pueden separar por técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica; véase, por ejemplo, Stereochemistry of Organic Compouns, por E.L. Eliel (Wiley, New York, 1994).

La presente invención incluye todos los compuestos farmacéuticos aceptables de fórmula (I) marcados isotópicamente en los que uno o varios átomos están reemplazados por átomos que tienen el mismo número atómico pero una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica o el número de masa encontrado usualmente en la naturaleza. Entre los ejemplos de isótopos adecuados para inclusión en los compuestos de la invención figuran isótopos de hidrógeno, tales como 2H y 3H, de carbono, tales como 11C, 13C y 14C, cloro, tales como 35Cl, flúor, tales como 18F, yodo, tales como 123I, nitrógeno, tales como 13N y 15N, oxígeno, tales como 15O, 17O y 18O, fósforo, tales como 32P, y azufre, tales como 35S. Ciertos compuestos de fórmula (I) marcados isotópicamente, por ejemplo, los que incorporan un isótopo radiactivo, son útiles en estudios de distribución de fármacos y/o tejido sustrato. Los isótopos radiactivos tritio, esto es, 3H, y carbono-14, esto es, 14C, son oparticularmente útiles para esta finalidad por su facilidad de incorporación y medios de detección disponibles. La sustitución con isótopos más pesados tales como deuterio, esto es, 2H, puede aportar ciertas ventajas terapéuticas resultantes de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, una semivida in vivo mayor o menores dosis de administración necesarias, por lo que en ciertas circunstancias pueden ser preferidas tales sustituciones. La sustitución con isótopos que emiten positrones, tales como 11C, 18F, 15O y 13N puede ser útil en estudios de topografía de emisión de positrones (TEP) para estudios de examen de la ocupación de receptores de sustrato. Generalmente, los compuestos de fórmula (I) marcados isotópicamente se pueden preparar por técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica, o por procedimientos análogos a los descritos en los Ejemplos y Preparaciones que se acompañan, usando reactivos apropiados marcados isotópicamente en vez del reactivo no marcado usado previamente.

Entre los solvatos farmacéuticamente aceptables de acuerdo con la invención están incluidos aquellos en los que el disolvente de cristalización puede estar isotópicamente sustituido, por ejemplo, D2O, acetona-d6, DMSO-d6.

Los compuestos de la invención previstos para uso farmacéutico pueden administrarse como productos cristalinos o amorfos. Se pueden obtener, por ejemplo, como rellenos sólidos, polvos o películas por procedimientos tales como precipitación, cristalización, liofilización o secado por pulverización. A este fin se puede usar el secado por microondas o radiofrecuencia.

Se pueden administrar solos o en combinación con uno o varios otros compuestos de la invención o en combinación con uno o varios otros fármacos (o como cualquier combinación de los mismos). Generalmente, se administrarán como formulación en asociación con uno o varios excipientes farmacéuticamente aceptables. El término “excipiente” es usa aquí para describir cualquier ingrediente que no sea el (los) compuesto(s) de la invención. La elección del excipiente dependerá en gran medida de factores tales como el modo de administración, el efecto del excipiente sobre la solubilidad y la estabilidad y la naturaleza de la forma que se administra.

Las composiciones farmacéuticas adecuadas para suministrar las composiciones de la presente invención y los procedimientos para su preparación serán evidentes para los expertos en la técnica. Tales composiciones y procedimientos para su preparación se pueden encontrar, por ejemplo, en Remington’s Pharmaceutical Sciences, 19ª edición (Mack Publishing Company, 1995).

ADMINISTRACIÓN ORAL

Los compuestos de la invención se pueden administrar oralmente. La administración oral puede implicar tragar de manera que el compuesto entre en el tracto gastronintestinal, o se puede emplear la administración bucal o sublingual mediante la cual el compuesto entra directamente en la corriente sanguínea desde la boca.

El grupo de formulaciones adecuadas para administración oral incluye formulaciones sólidas tales como comprimidos, cápsulas que contienen partículas, líquidos o polvos, pastillas para chupar (incluidas las rellenas de líquido), chicles, multipartículas y nanopartículas, geles, soluciones sólidas, liposomas, películas (incluidas las mucoadhesivas), óvulos, aerosoles y formulaciones líquidas.

Entre las formulaciones líquidas figuran suspensiones, soluciones, jarabes y elixires. Tales formulaciones se pueden emplear como cargas en cápsulas blandas o duras y típicamente comprenden un vehículo, por ejemplo, agua, EtOH, polietilenglicol, propilenglicol, propilenglicol, metilcelulosa, o un aceite adecuado, y uno o varios agentes emulsivos y/o agentes suspensivos. Las formulaciones líquidas se pueden preparar también por reconstitución de un sólido, por ejemplo, contenido en un saquito.

Los compuestos de la invención se pueden usar también en formas de administración que se disuelven rápidamente, o que se desintegran rápidamente, tales como las descritas en Expert Opinión in Therapeutic Patents, 11(6), 981-986, por Liang y Chen (2001).

Para la administración como comprimidos, dependiendo de la dosis, el fármaco puede constituir de 1% en peso a 80% en peso del comprimido, más típicamente de 5% a 60% del comprimido. Además, del fármaco, los comprimidos generalmente contienen un desintegrante. Entre los ejemplos de desintegrantes figuran glicolato de almidón sódico, carboximetilcelulosa sódica, carboximetilcelulosa cálcica, croscarmelosa sódica, crospovidona, polivinilpirrolidona, metilcelulosa, celulosa microcristalina, hidroxipropilcelulosa sustituida con alquilo inferior, almidón, almidón pregelatinizado y alginato sódico. Generalmente, el desintegrante comprenderá de 1% en peso a 25% en peso, preferiblemente de 5% en peso a 20% en peso, del comprimido.

Generalmente se usan aglutinantes para impartir cualidades cohesivas a la formulación de comprimido. Entre los aglutinantes adecuados figuran celulosa microcristalina, gelatina, azúcares, polietilenglicol, gomas naturales y sintéticas, polivinilpirrolidona, almidón pregelatinizado, hidroxipropilcelulosa e hidroxipropilmetilcelulosa. Los comprimidos pueden contener también diluyentes tales como lactosa (monohidrato, monohidrato secado por pulverización, anhidra y similares), manitol, xilitol, dextrosa, sacarosa, sorbitol, celulosa microcristalinba, almidón y fosfato cálcico dibásico dihidratado.

Opcionalmente, los comprimidos pueden comprender también tensioactivos tales como laurilsulfato sódico y polisorbato 80, y agentes deslizantes tales como dióxido de silicio y talco. Cuando están presentes, los agentes tensioactivos pueden comprender de 0,2% en peso a 5% en peso del comprimido, y los agentes deslizantes pueden comprender de 0,2% en peso a 1% en peso del comprimido.

Los comprimidos generalmente contienen también lubricantes tales como estearato magnésico, estearato cálcico, estearato de zinc, estearilfumarato sódico, y mezclas de estearato magnésico con laurilsulfato sódico. Generalmente los lubricantes comprenden de 0,25% en peso a 10% en peso, preferiblemente de 0,5% en peso a 3% en peso del comprimido.

Entre otros posibles ingredientes figuran antioxidantes, colorantes, agentes saboreadores, conservantes y agentes que disimulan el sabor.

Los comprimidos ejemplares pueden contener hasta aproximadamente 80% de fármaco, de aproximadamente 10% en peso a aproximadamente 90% en peso de aglutinante, de aproximadamente 0% en peso a aproximadamente 85% en peso de diluyente, de aproximadamente 2% en peso a aproximadamente 10% en peso de desintegrante y de aproximadamente 0,25% en peso a aproximadamente 10% en peso de lubricante.

Las mezclas para comprimidos se pueden comprimir directamente o mediante un rodillo para formar comprimidos. Alternativamente, las mezclas o porciones de mezclas para comprimidos se pueden granular en húmedo, en seco, congelar fundidas o extruir antes de comprimir. La formulación final puede comprender una o varias capas y puede ser revestida o no revestida; incluso puede ser encapsulada.

La formulación de comprimidos se discute en Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, vol. 1, por H. Lieberman y L. Lachman, Marcel Dekker, NY, NY, 1980 (ISBN 0-8247-6918-X).

Las formulaciones sólidas para administración oral se pueden formular para liberación inmediata y/o modificada controlada. El grupo de formulaciones de liberación modificada incluye las de liberación demorada, sostenida, pulsada, controlada, dirigida a diana y programada.

En la patente U.S. nº. 6.106.864 se describen formulaciones de liberación modificada adecuadas a los fines de la invención. Se pueden encontrar detalles de otras tecnologías de liberación adecuadas tales como dispersiones de alta energía y partículas osmóticas y revestidas en Verma y otros, Pharmaceutical Technologies On-line, 25(2)-1-14 (2001). En el documento WO 00/35298 se describe el uso de chicles para lograr una liberación controlada.

ADMINISTRACIÓN PARENTERAL

Los compuestos de la invención se pueden administrar también directamente en la corriente sanguínea, en músculo o en un órgano interno. Los medios adecuados para administracin parenteral incluyen la administración intravenosa, intraarterial, intraperitoneal, intratecal, intraventricular, intrauretral, intraesternal, intracraneal, intramuscular y subcutánea. Entre los dispositivos adecuados para administración parenteral figuran inyectores de aguja (incluidas microagujas), inyectores sin aguja y técnicas de infusión.

Típicamente, las formulaciones parenterales son soluciones acuosas que pueden contener excipientes tales como sales, carbohidratos y agentes tampón (preferiblemente a pH de 3 a 9) pero, en algunas aplicaciones, se pueden formular más adecuadamente como solución no acuosa estéril, o como una forma seca en polvo a usar junto con un vehículo adecuado tal como agua estéril exenta de pirógeno.

La preparación de formulaciones parenterales en condiciones estériles, por ejemplo, por liofilización, puede realizarse fácilmente usando técnicas farmacéuticas estándar bien conocidas por los expertos en la técnica.

La solubilidad de los compuestos de fórmula (I) usados en la preparación de soluciones parenterales puede aumentarse usando técnicas de formulación adecuadas tales como la incorporación de agentes que intensifican la solubilidad. Las formulaciones para uso con administración por inyección sin aguja comprenden un compuesto de la invención en forma de polvo junto con un vehículo adecuado tal como agua estéril exenta de pirógeno.

Las formulaciones para administración parenteral se pueden formular para liberación inmediata y/o modificada controlada. El grupo de formulaciones de liberación modificada incluye las de liberación demorada, sostenida, pulsada, controlada, dirigida a diana y programada. Así, los compuestos de la invención se pueden formular en forma de sólido, semisólido o líquido tixotrópico para administración como un depósito implantado que proporciona una liberación modificada del compuesto activo. Entre los ejemplos de tales formulaciones figuran endoprótesis vasculares revestidas y microesferas de PAGL.

ADMINISTRACIÓN TÓPICA

Los compuestos de la invención también se pueden administrar tópicamente en la piel o en mucosa, esto es, dérmica o transdérmicamente, Entre las formulaciones típicas para este fin figuran geles, hidrogeles, lociones, soluciones, cremas, pomadas, polvos muy finos, apósitos, espumas, películas, parches para la piel, obleas, implantes, esponjas, fibras, vendas y microemulsiones. También se pueden usar liposomas. Entre los vehículos tipicos figuran alcohol, agua, aceite mineral, vaselina, vaselina blanca, glicerina, polietilenglicol y propilenglicol. Se pueden incorporar agentes intensificadores de la penetración; véase, por ejemplo, J. Pharm. Sci. 88 (10), 955-958, por Finnin y Morgan (octubre de 1999).

Entre otros métodos para administración tópica figuran electroporación, iontoforesis, fenoforesis, sonoforesis e inyección con microaguja o sin aguja (por ejemplo, PowderjectMC , BiojectMC).

ADMINISTRACIÓN POR INHALACIÓN/INTRANASAL

Los compuestos de la invención también se pueden administrar intranasalmente o por inhalación, típicamente en forma de un polvo seco (solo o como mezcla, por ejemplo, una mezcla seca con lactosa o como una partícula de componente mixto, por ejemplo, mezclado con fosfolípidos, como fosfatidilcolina) desde un inhalador de polvos en seco, o como aerosol desde un recipiente a presión, una bomba, o un atomizador (preferiblemente un atomizador que usa agentes electrohidrodinámicos para producir una niebla) o nebulizador, sin propulsor o con un propulsor adecuado tal como 1,1,1,2-tetrafluoroetano o 1,1,1,2,3,3,3heptafluoropropano. Para uso intranasal, el polvo puede comprender un agente bioadhesivo, por ejemplo, quitosano o ciclodextrina.

El recipiente a presión, la bomba, el dispositivo para aerosol, el atomizador o el nebulizador contiene una solución o suspensión del (los) compuesto(s) de la invención que comprende(n), por ejemplo, EtOH, EtOH acuoso o un agente alternativo adecuado para dispersar, solubilizar o extender la liberación del compuesto activo, un(os) propulsor(es) como disolvente y un tensioactivo opcional, tal como trioleato de sorbitano, ácido oleico o ácido oligoláctico.

Las formulaciones para administración por inhalación/intranasal se pueden formular para liberación inmediata y/o modificada controlada usando, por ejemplo, poliácido (DL-lácticocoglicólico) (PAGL). Las formulaciones de liberación modificada controlada incluyen las de liberación demorada, sostenida, pulsada, controlada, dirigida a diana y programada.

En el caso de inhaladores de polvo seco y aerosoles, la unidad de dosificación se determina mediante una válvula que suministra una cantidad medida. Las unidades de acuerdo con la invención típicamente están dispuestas para administrar una dosis medida o una “calada” que contiene de 1 µg a 10 mg del compuesto de fórmula (I). La dosis diaria total típicamente estará en el intervalo de 1 µg a 10 mg, que se puede administrar en una sola dosis o, más usualmente, en varias a lo largo del día.

ADMINISTRACIÓN RECTAL/INTRAVAGINAL

Los compuestos de la invención se pueden administrar rectal o intravaginalmente, por ejemplo, en forma de un supositorio, un pesario o un enema. La manteca de cacao es una base de supositorios tradicional, pero se pueden usar como apropiadas otras varias alternativas.

OTRAS TÉCNICAS

Los compuestos de la invención se pueden combinar con compuestos macromoleculares solubles tales como ciclodextrina y derivados adecuados de la ciclodextrina,

o polímeros que contienen polietilenglicol, con el fin de mejorar su solubilidad, su velocidad de disolución, enmascarar el sabor, mejorar la biodisponibilidad y/o la estabilidad para uso en cualquiera de los modos de administración antes mencionados.

Se ha visto que los complejos de fármaco-ciclodextrina generalmente son útiles para la mayoría de las formas de dosificación y las rutas de administración. Se pueden usar tanto complejos de inclusión como de no inclusión. Como alternativa para la formación directa de complejo con el fármaco, la ciclodextrina se puede usar como un aditivo auxiliar, esto es, como vehículo, diluyente o agente solubilizante. Las más corrientemente usadas para este fin son las ciclodextrinas alfa, beta y gamma, de las que se pueden encontrar ejemplos en los solicitudes de patente internacional nos. WO 91/11172, WO 94/02518 y WO 98/55148.

DOSIFICACIÓN

Para la administración a pacientes humanos, la dosis total diaria de los compuestos de la invención típicamente está en el intervalo de 0,1 mg a 3000 mg, preferiblemente de 1 mg a 500 mg, dependiendo, obviamente, del modo de administración. Por ejemplo, la administración oral puede requerir una dosis total diaria de 0,1 mg a 3000 mg, preferiblemente de 1 mg a 500 mg, mientras que una dosis intravenosa puede requerir sólo de 0,1 mg a 1000 mg, preferiblemente de 0,1 mg a 300 mg. La dosis total diaria puede administrarse en una sola dosis individual o en varias divididas.

Estas dosificaciones están basadas en un sujeto humano medio que tenga un peso de aproximadamente 65 a 70 kg. El médico podrá determinar fácilmente las dosis para sujetos cuyo peso está fuera de este intervalo, como pueden ser niños y personas mayores.

Para: evitar dudas, las referencias que aquí se hacen a “tratamiento” incluyen

tratamiento curativo, paliativo y profiláctico.

Un: antagonista de VR1 puede combinarse útilmente con otro compuesto

farmacológicamente activo, o con otros dos o más compuestos farmacológicamente activos, en particular en el tratamiento del dolor. Por ejemplo, un antagonista de VR1, en particular un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales o solvatos farmacéticamente aceptable, según lo definido antes, se puede administrar simultáneamente, secuencialmente o separadamente en combinación con uno o varios agentes más seleccionados entre:

-un analgésico opioide, por ejemplo, morfina, heroína, hidromorfona, oximorfona, levorfanol, levalorfano, metadona, meperidina, fentanil, cocaína, codeína, dihidrocodeína, oxicodona, hidroxicodona, propoxifeno, nalmefeno, nalorfina, naxolona, naltrexona, buprenorfina, butorfanol, nalbufina o pentazocina;

-un farmaco antiinflamatorio no esteroideo (AINE), por ejemplo, aspirina, diclofenac, diflusinal, etodolac, fenbufeno, fenoprofeno, flufesinal, flurbiprofeno, ibuprofeno, indometacina, cetoprofeno, cetorolac, ácido meclofenámico, ácido mefenámico, meloxicam, nabumetona, naproxeno, nimesulida, nitroflurbiprofeno, olsalazina, oxaprozina, fenilbutazona, piroxicam, sulfazina, sulindac, tolmetina o zomepirac;

-un sedativo barbiturato, por ejemplo, amobarbital, aprobarbital, butabarbital, butabital, mefobarbital, metarbital, metohexital, pentobarbital, fenobarbital, secobarbital, talbutal, teamilal o tiopental;

-una benzodiazepina que tenga acción sedativa, por ejemplo, clordiazepóxido, clorazepato, diazepam, flurazepam, lorozepam, oxazepam, temazepam o triazolam; -un antagonista de H1 que tenga acción sedativa, por ejemplo, difenilhidramina,

pirilamina, prometazina, clorfeniramina o clorciclizina;

- un sedativo tal como glutetimida, meprobamato, metacualona o dicloralfenazona;

-un relajante músculo-esquelético, por ejemplo, baclofeno, carisoprodol, clorzoxazona, ciclobenzaprina, metocarbamol u orfernadina;

-un antagonista de receptor NMDA, por ejemplo, dextrometorfan ((+)-3-hidroxi-Nmetilmorfinano) o su metabolito dextrofano ((+)-3-hidroxi-N-metilmorfinano), cetamina, memantina, pirroloquinolinquinina, ácido cis-4-(fosfonometil)-2-piperidincarboxílico, butipina, EN-3231 (MorfDex®, una formulación de combinación de morfina y dextrometorfano), topiramato, neramexano o perzinfotel que incluye un antagonista de NE2B, por ejemplo, ifenprodil, traxoprodil o (-)-(R)-6-{2-(4-(3-fluorofenil)-4-hidroxi-1piperidinil}-1-hidroxietil-3,4-dihidro-2-(1H)-quinolinona;

-un alfa-adrenérgico, por ejemplo, doxazosina, tamsulosina, clonidina, guanfacina, dexmetatomidina, modafinil o 4-amino-6,7-dimetoxi-2-(5-metano-sulfonamido-1,2,3,4tetrahidroisoquinol-2-il)-5-(2-piridil)quinazolina;

-un antidepresivo tricíclico, por ejemplo, desipramina, imipramina, amitriptilina o nortriptilina;

- un anticionvulsivo, por ejemplo, carbamazepina, lamotrigina, topiratmato o valproato;

-un antagonista de taquicina (NK), en particular un antagonista NK-3, NK-2 o NK-1, por ejemplo, (αR,9R)-7-[3,5-bis(trifluorometil)bencil]-8,9,10,11-tetrahidro-9-metil-5-(4-metilfenil)-7H-[1,4]diazocino[2,1-g][1,7]-naftiridina-6-13-diona (TAK-637); 5-[[(2R,3S)-2-[(1R)-1-[3,5-bis(trifluorometl)fenil]etoxi-3-(4-fluorofenill-4-morfolinil]-metil]1,2-dihidro-3H-1,2,4-triazol-3-ona (MK-869), aprepitant, lanepitant, dapitant o 3-[[2metoxi-5-(trifluorometoxi)fenil]-metilamino]-2-fenilpiperidina (2S, 3S);

-un antagonista muscarínico, por ejemplo, oxibutinina, tolterodina, propiverina, cloruro de tropsio, darifenacina, solifenacina, temiverina e ipatropio;

-un inhibidor selectivo de COX-2, por ejemplo, celecoxib, rofecoxib, parecoxib, valecoxib, deracoxib, etoricoxib o lumiracoxib;

- un analgésico de alquitrán de hulla, en particular paracetamol;

-un neuroléptico tal como droperidol, clorpromazina, halopendol, ferfenazina, tioridazina, mesoridazina, trifluoperazina, flufenazina, clozapina, olanzapina, risperidona, ziprasidona, quetiapina, sertindol, aripiprazol, sonepiptazol, blonanserina, iloperidona, perospirona, racloprida, zotepina, bifeprunox, asenapina, lurasidona, amisulprida, balaperidona, palindora, eplivanserina, osanetant, rimonabant, meclinertant, Miraxion®

o sarizotan;

- un agonista de receptor vainilloide (por ejemplo, resinferatoxina) o antagonista (por ejemplo, capsazepina);

-un beta-adrenérgico tal como propranolol;

-un anestésico local tal como mexiletina;

-un corticoesteroide tal como dexametasona;

-un agonista o antagonista de receptor 5-HT, en particular un agonista de 5-HT1B/1D tal como eletriptano, sumatriptano, naratriptano, zolmitriptano o rizatriptano;

-un antagonista del receptor 5-HT2A tal como R(+)-alfa-(2,3-dimetoxifenil)-1-[2-(4-fluorofeniletil)-4-piperidinmetanol (MDL-100907);

-un analgésico colinergico (nicotínico), tal como isproniclina (TC-1734), (E)-N-metil-4-(3piridinil)-3-buten-1-amina (RJR-2403), (R)-5-(2-azetidinilmetoxi)-2-cloropiridina (ABT594) o nicotina;

-Tramadol®;

-un inhibidor de PDEV tal como: 5-[2-etoxi-5-(4-metil-1-piperazinil-sulfonil)fenil]-1-meti-3-n-propil-1,6-dihidro-7Hpirazolo[4,3-d]pirimidin-7-diona (sildenafilo), (6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahidro-2-metil-6-(3,4-metilendioxifenil)-pirazino[2’:1’:6,1]pirido[3,4-b]indol-1,4-diona (IC-351 o tadalafilo), 2-[2-etoxi-5-(4-etil-piperazin-1-il-1-sulfonil)-fenil]-5-metil-7-propil-3H-imidazo[5,1-f][1,2,4]triazin-4-ona (vardenafilo), 5-(5-acetil-2-butoxi-3-piridinil)-3-etil-2-(1-etil-3-azetidinil)-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ona, 5-(5-acetil-2-propoxi-3-piridinil)-3-etil-2-(1-isopropil-3-azetidinil)-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]-pirimidin-7-ona, 5-[2-etoxi-5-(4-etilpiperazin-1-ilsulfonil)piridin-3-il]-3-etil-2-[2-metoxietil]-2,6-dihidro-7Hpirazolo-[4,3-d]-pirimidin-7-ona, 4-[(3-cloro-4-metoxibencil)amino]-2-[(2S)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]-N-(pirimidin-2-ilmetil)pirimidin-5-carboxamida, 3-(1-metil-7-oxo-3-propil-6,7-dihidro-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-5-il)-N-[2-(1-metilpirrolidin-2-il)etil]-4-propoxibencenosulfonamida;

-un ligando alfa-2-delta tal como gabapentina, pregabalina, 3-metilgabapentina, ácido (1α,3α,5α(3-amino-metil-biciclo[3.2.0]hept-3-il)acético, ácido (3S,5R)-3-aminometil-5-metil-heptanoico, ácido (3S,5R)-3-amino-5-metilheptanoico, ácido (3S,5R)-3-amino-5-metil-octanoico, (2S,4S)-4-(3-clorofenoxi)prolina, (2S,4S)-4-(3-fluorobencil)prolina, ácido [(1R,5R,6S)-6-(aminometil)biciclo[3.2.0]hept-6-il) acético,

3-(1-aminometil-ciclohexilmetil)-4H-[1,2,4]oxadiazol-5-ona, C-[1-(1H-tetrazol-5-ilmetil)-cicloheptil]-metilamina, ácido (3S,4S)-(1-aminometil-3,4-dimetil-ciclopentil)-acético, ácido (3S,5R)-3-aminometil-5-metil-octanoico, ácido (3S,SR)-3-amino-5-metilnonanoico, ácido (3S,5R)-3-amino-5-metil-octanoico, ácido (3R, 4R, 5R)-3-amino-4,5-dimetil)heptanoico, ácido (3R,4R,5R)-3-amino-4,5-dimetil-octanoico, ácido (2S)-2-amino-4-etil-2-metilhexanoico y ácido (2S)-2-aminometil-5-etil-heptanoico;

-un canabinoide;

-un antagonista metabotrópico del receptor de subtipo 1 de glutamato (mGluR1);

-un inhibidor de recaptación de serotonina tal como sertralina, demetilsertralina metabolito de sertralina, fluoxetina, norfluoxetina (metabolito de fluoxetindesmetilo), fluvoxamina, paroxetina, citalopram, desmetilcitalopram metabolito de citalopram, escitalopram, d,l-fenfluramina, femoxetina, ifoxetina, cianodotiepina, litoxetina, dapoxetina, nefazodona, cericlamina y trazodona;

-un inhibidor de la recaptación de noradrenalina (norepinefrina), tal como maprotilina, lofepramina, mirtazepina, oxaprotilina, fezolamina, tomoxetina, mianserina, bupropriona, hidroxibupropriona metabolito de bupropriona, nomifensina y viloxazina (Vivalan®), en espacial un inhibidor selectivo de la reasimilación de noradrenalina tal como reboxetina, en particular (S,S)-reboxetina;

-un inhibidor dual de la recaptación de serotonina-noradrenalina, tal como venlafaxina, O-desmetilvenlafaxina metabolito de venlafaxina, clomipramina, desmetilclomipramina metabolito de clomipramina, duloxetina, milnacipran e imipramina;

-un inhibidor inducible de óxido nítrico sintasa tal como: S-[2-[(1-iminoetil)amino]etil]-L-homocisteína, S-[2-[(1-iminoetil)-amino]etil]-4,4-dioxo-L-cisteína, S-[2-[(1-iminoetil)amino]etil]-2-metil-L-cisteína, ácido (2S,5Z)-2-amino-2-metil-7-[(1-iminoetil)amino]-5-heptenoico, 2-[[(1R,3S)-3-amino4-hidroxi-1-(5-tiazolil)-butil]tio]-5-cloro-3-piridincarbonitrilo, 2-[[(1R,3S)-3-amino-4-hidroxi-1-(5-tiazolil)-butil]tio]-4-cloro-benzonitrilo, (2S,4R)-2-amino-4-[[2-cloro-5-(trifluorometil)fenil]tio]-5-tiazolbutanol, 2-[[(1R,3S)-3-amino-4-hidroxi-1-(5-tiazolil)-butil]tio]-6-(trifluorometil)-3-piridincarbonitrilo, 2-[[(1R,3S)-3-amino-4-hidroxi-1-(5-tiazolil)-butil]tio]-5-clorobenzonitrilo,

N-[4-[2-(3-clorobencilamino)etil]fenil]tiofen-2-carboxamidina o disulfuro de guanidinoetilo, -un inhibidor de acetilcolinaestearasa tal como donepezilo; -un antagonista del subtipo 4 de prostaglandina E2 (EP4) tal como

N-[({2-[4-(2-etil-4,6-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)fenil]etil}amino)-carbonil]-4-metilbencenosulfonamida o ácido 4-[(1S)-1-({[5-cloro-2-(3-fluorofenoxi)piridin-3-il]carbonil}amino)etil]benzoico;

-un antagonista de leucotrieno B4, tal como: ácido 1-(3-bifenil-4-ilmetil-4-hidroxi-croman-7-il)-ciclopentanocarboxílico (CP-105696), ácido 5-[2-(2-carboxietil)-3-[6-(4-metoxifenil)-5E-hexenil]oxifenoxi]-valérico (ONO-4057)

o DPC-11870;

-un inhibidor de 5-lipoxigenasa, tal como zileuton, 6-[(3-fluoro-5-[4-metoxi-3,4,5,6-tetrahidro-2H-piran-4-il])fenoxi-metil]-1-metil-2-quinolona (ZD-2138) o 2,3,5-trimetil-6-(3-piridilmetil)-1,4-benzoquinona (CV-6504);

-un bloqueante de canal de sodio, tal como lidocaína; -un antagonista de 5-HT3, tal como ondansetrón; y sus sales y solvatos farmacéuticamente aceptables.

En tanto que puede ser deseable administrar una combinación de compuestos activos, por ejemplo, con el fin de tratar una enfermedad o afección particular, está dentro del alcance de la presente invención que se puedan combinar dos o más composiciones farmacéuticas de las que al menos una contiene un compuesto de acuerdo con la invención, en forma de un kit adecuado para coadministración de las composiciones.

Así, el kit de la invención comprende dos o más composiciones farmacéuticas separadas, de las que al menos una contiene un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la invención, y medios para retener separadamente las composiciones mencionadas, como pueden ser un recipiente, una botella dividida o un envase de hoja dividido. Un ejemplo de tal kit es el envase blister familiar usado para envasar comprimidos, cápsulas y similares.

El kit de la invención es particularmente adecuado para administrar formas farmacéuticas diferentes, por ejemplo, orales o parenterales, para administrar las composiciones separadas a diferentes intervalos de tiempo, o para ajustar las dosis de las composiciones separadas entre sí. Para facilitar una práctica correcta, el kit típicamente comprende instrucciones para administración y puede tener un denominado recordatorio.

Ejemplos

La invención se ilustra con los siguientes ejemplos no limitativos en los que, a no ser que se indique lo contrario, todas las operaciones se realizaron a temperatura ambiente, esto es, en el intervalo de 18-25ºC; la evaporación de disolvente se realizó usando un evaporador rotatorio a presión reducida con una temperatura del baño de hasta 60ºC; las reacciones se controlaron por cromatografía en capa fina (TLC) y los tiempos de reacción se dieron sólo a fines de ilustración; los puntos de fusión (pf) dados no se han corregido (el polimorfismo puede dar lugar a diferentes puntos de fusión); la estructura y pureza de todos los compuestos aislados se aseguró por al menos una de las técnicas siguientes: TLC (placas de TLC revestidas con gel de sílice Merck 60 F254), espectrometría de masas, espectros de resonancia magnética nuclear (RMN), espectros de absorción de infrarrojo (IR) o microanálisis. Los rendimientos se han dado sólo a fines ilustrativos. La cromatografía rápida se realizó usando gel de sílice Merck (malla 230-400 según ASTM) o sílice unida a amino Fuji Sylsia (Chromatorex, 30-50 uM) o sílice unida a amino Biotage (35-75 µm, KP-NH) o sílice Biotage (32-63 µM, KP-Sil). La purificación por HPLC se realizó con el aparato y bajo las condiciones siguientes: Aparato. Sistema HPLC preparativo con iniciador UV; columna Waters (columna Xterra MS C18, 5 um, 19x50 mm o 30x50 mm); detector de UV 254 nm. Condiciones, CH3CN/solución acuosa al 0,05% de HCOOH o CH3CN/solución acuosa al 0,01% de NH3, 20 ml/min (19x50 mm) a temperatura ambiente. El aparato de microondas usado en el reactor fue Emrys optimizer (Personal Chemistry). La rotación óptica se midió con P-1020 (Jasco). Los datos de los espectros de masas de baja resolución (EI) se midieron con un espectrómetro de masas Integrity (Wafers). Los datos de los espectros de masas de baja resolución se midieron (ESI) en espectrómetro de masas ZMD (Micromass). Los datros de RMN se determinaron a 270 MHz (espectrómetro JEOL JNMLA 270) o a 300 MHz (espectrómetro JEOL JNMLA300) usando cloroformo deuteriado (99,8% D) o DMSO (99,9% D) como disolvente, a no ser que se indique lo contrario, en comparación con tetrametlsilano (TMS) como patrón interno en partes por millón (ppm). Las abreviaturas convencionales usadas fueron: s, singlete; d, doblete; t, triplete; q, cuadriplete; quint, quintuplete; m, multiplete; br, ancha, etc. Los espectros de IR se midieron con un espectrómetro de infrarrojos Shimazu (IR-470). Los símbolos químicos tienen el significado usual; pe (punto de ebullición), pf (punto de fusión), l (litro(s)), ml (mililitros), mol (moles), equiv (equivalente(s)), cuant (rendimiento cuantitativo), sat (saturado), ag (agua). En los ejemplos siguientes, “Me” significa metilo y “Et” significa etilo.

Preparación

Aminas

Las aminas usadas en los ejemplos siguientes se prepararon por los procedimientos siguientes como compuesto libre o sal.

Amina 1: Hidrocloruro de [(6-metilpiridin-3-il)metil]amina

El compuesto del título se sintetizó por el procedimiento descrito en la Solicitud de Patente Europea 1108711, 20 de junio de 2001. Amina 2: Hidrocloruro de 1-(6-metilpiridin-3-il)etanamina

El compuesto del título se sintetizó por el procedimiento descrito en Nipón Kagaku Zasshi (1962), 83, 218-222.

Amina 2’: Hidrocloruro de (1R)-1-(6-metilpiridin-3-il)etanamina

N-metoxi-N-6-dimetilnicotinamida

1A). A una solución en DMF (300 ml) de N,O-dimetilhidroxilamina (5350 mg, 87,5 mmol), se añadió ácido 6-metilnicotínico (10000 mg, 72,9 mmol), HBTU 33200 mg, 87,5 mmol) y trietilamina (22100 mg) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. La reacción se apagó con agua y el producto se extrajo con EtOAc. Luego, tras evaporación y purificación mediante cromatografía en columna de gel de sílice eluyendo con acetato de etilo/hexano (1/1), se obtuvo el compuesto del título (13141 mg, 53%) como un sólido blanco.

Hidrocloruro de 1-(6-metilpiridin-3-il)etanona

1B). A una solución del producto en THF (300 ml) se añadió una solución 0.8 M en hexano de bromuro de metilmagnesio (96 ml, 76,6 mmol) a 0ºC y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Luego se apagó la reacción con solución acuosa de cloruro amónico y el producto se extrajo con AcOEt, se lavó con salmuera y se secó sobre sulfato magnésico. La evaporación en vacío dio 1-(6-metilpiridin-3-il)etanona.

A una solución de 1-(6-metilpiridin-3-il)etanona (2,1 g, 15,5 mmol) en THF (25 ml) se añadió (R)-(+)-2-metil-2-propanosulfinilamida (2,26 g, 18,6 mmol) y etóxido de titanio(IV) (25 ml) y la mezcla se agitó durante 24 horas a 70ºC. Luego se enfrió la mezcla a 0ºC y se añadió borohidruro sódico (2060 mg, 54 mmol). Después de agitar durante 2 horas, se añadió a la mezcla agua y EtOH agitando durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de filtración y evaporación se obtuvo la N-[(1R)-1-(6-metilpiridin-3-il)etil]-2-metilpropano-2-sulfinimida, que se trató con ácido clorhídrico-MeOH (2,0 M, 15,0 ml) y 1,4-dioxano (15,0 ml) durante 1,5 horas a temperatura ambiente. Luego se evaporó la mezcla de reacción y se añadió dietil éter, formándose un precipitado, que se recogió y se lavó con dietil éter, obteniéndose hidrocloruro de (1R)-1-(6-metilpiridin-3-il)etanamina (2,12 g, 28%). EM (ESI) m/z 161 (M-H)-.

Amina 3: Hidrocloruro de (1R)-1-(5-cloro-6-metilpiridin-3-il)etanamina

Etapa 3A).(5-acetil-3-cloropiridin-2-il)malonato de dimetilo

Se disolvió malonato de dimetilo (4,69 g, 35,5 mmol) en DMSO (24,0 ml). A esta solución se añadió NaH al 70% (1,33 g, 33,2 mmol) a 0ºC. La mezcla resultante se calentó a temperatura ambiente y se agitó a la misma temperatura durante 40 min. A esta solución se añadió 1-(5,6-dicloropiridin-3-il)etanona (Tetrahedron 1992, 48, 9233-9236, 4,50 g, 23,7 mmol) a temperatura ambiente y luego se agitó la mezcla resultante a 100ºC durante 4 horas. La mezcla se repartió entre Et2O y agua. La capa organica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na2SO4 y luego se concentró, obteniéndose un líquido denso de color marrón. El material en bruto se purificó por cromatografía en columna de SiO2 (100 g, EtOAc/hexano (1/2), obteniéndose el compuesto del título (2,18 g, 32%) como un aceite amarillo. RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 2,64 (3H, s), 3,83 (6H, s), 5,31 (1H, s), 8,26 (1H, s), 9,02 (1H, s).

Etapa 3B). 1-(5-cloro-6-metilpiridin-3-il)etanona

Se agitó a 120ºC durante 1,5 horas una mezcla de (5-acetil-3-cloropiridin-2-il)malonato de dimetilo (2,18 g, 7,63 mmol) y solución acuosa al 48% de HBr (10,0 ml). La mezcla se neutralizó añadiendo solución acuosa saturada de NaHCO3, obteniéndose el compuesto del título (810 mg, 63%) como un sólido ligeramente amarillo. RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 2,62 (3H, s), 2,71 (6H, s), 8,17 (1H, s), 8,92 (1H, s).

Etapa 3C). Hidrocloruro de (1R)-1-(5-cloro-6-metilpiridin-3-il)etanamina

El compuesto del título se preparó por el procedimiento de la etapa 1B del ejemplo amina 2’, usándose 1-(5-cloro-6-metilpiridin-3-il)etanona en vez de 1-(6-metilpiriidn-3il)etanona. RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 1,66 (3H, d, J = 6,6 Hz), 2,54 (3H, s)), 4,47 (1H, m), 7,96 (1H, s), 8,50 (1H,s). EM (ESI) m/z 171 (M+H)+.

Amina 4: Hidrocloruro de (1R)-1-(6-metilpiridin-3-il)etanamina

El compuesto del título se sintetizó por el procedimiento análogo al de la etapa 1B de la amina 20, usándose 1-[6-(hidroximetil)piridin-3-il]etanona (Japan Tokkyo Koho (1968); JP43000518, 19680109) en vez de 1-(6-metilpiridin-3-il)etanona. El producto deseado se obtuvo al 100% como un aceite de color amarillo 189 (M+H)+.

Amina 5: Hidrocloruro de (1R)-1-(6-metilpiridin-3-il)propan-1-amina

Etapa 5A). 1-(6-metilpiridin-3-il)propan-1-ona

El compuesto del título se sintetizó por el procedimiento análogo al de la etapa 1A, en el que se usó cloruro de etilmagnesio en vez de bromuro de metilmagnesio. El producto deseado se obtuvo con un rendimiento de 61% como un aceite de color amarillo claro después de cromatografía en gel de sílice (hexano/EtOAc 70:30 a 50:50 como eluyente). RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 1,24 (3H, t, J = 6,0 Hz), 2,63 (3H, s), 3,01 (2H, q, J = 6,0 Hz), 7,27 (1H, d, J = 6,0 Hz), 8,13-8,16 (1H, m), 9,07 (1H, s). EM (ESI) m/z 150 (M+H)+.

Etapa 5B. (S)-2-metil-N-((R)-1-(6-metilpiridin-3-il)propil)propano-2-sulfinamida

El compuesto del título se preparó usando el mismo procedimiento de la etapa 1B de la amina 2’, usándose 1-(6-metilpiridin-3-il)propan-1-ona en vez de 1-(6-metilpiridin-3-il)etanona. El producto deseado se obtuvo con un rendimiento de 85% como un aceite amarillo pálido después de cromatografía en gel de sílice (CH2Cl2/MeOH 50:1 a 30:1 como eluyente. RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 0,87 (3H, t, J = 6,0 Hz), 1,23 (9H, s), 1,73-1,90 (2H, m), 2,75 (3H, s), 3,47 (1H, d, J = 3,0 Hz), 4,30 (1H, q, J = 6,6 Hz), 7,37 (1H, d, J = 6,0 Hz), 7,82-7,86 (1H, m), 8,70 (1H, s). EM (ESI) m/z 253 (M-H)-, 255 (M+H)+. La relación diastereomérica se determinó que era 85:15 por RMN 1H de las señales siguientes: δ 7,82-7,86 (mayor, 1H), 7,72-7,76 (menor, 0,18).

Etapa 5C. Hidrocloruro de (R)-1-(6-metilpiridin-3-il)propan-1-amina

El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general para la etapa 1B de la amina 2’, obteniéndose el producto deseado con un rendimiento de 72% como un sólido blanco. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 0,78 (3H, t, J = 6,0 Hz), 1,89-2,04 (2H, m), 2,66 (3H, s), 4,35 (1H s br), 7,77 (1H, d, J = 9,0 Hz), 8,28-8,37 (1H, m), 8,73 (3H, s br), 8,82 (1H, s). EM (ESI) m/z 151 (M+H)+.

Amina 6: Hidrocloruro de (1R)-1-piridin-4-iletanamina

El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento descrito en el documento WO 2003076440 A1.

Amina 7: 1-(2-metoxipiridin-4-il)metanamina El compuesto del título era asequible comercialmente como producto químico.

Amina 8: Hidrocloruro de (1R)-1-(2-metilpiridin-4-il)etanamina

Amina 9: Hidrocloruro de 1-(2,5-dimetilpiridin-4-il)metanamina

Se agitó bajo nitrógeno (4 atm) a temperatura ambiente durante 2 horas una suspensión en metanol (2 ml) de 2,5-dimetilisonicotinonitrilo (500 mg, 3,78 mmol, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 1966, 14(5), 518), hidróxido de paladio al 10% sobre carbón (50 mg) y solución de hidrocloruro al 10% en metanol (2 ml). Se eliminó por filtración con celita el catalizador y se lavó con metanol. Se combinaron el filtrado y los lavados y se concentró la combinación, obteniéndose el compuesto del título (446 mg, rendimiento de 56%) como un sólido blanco. RMN 1H (300 MHz, DMSO) δ 2,35 (3H, s), 2,59 (3H, s), 4,15 (2H, s br), 7,65 (1H, s), 8,50 (1H, s), 8,83 (2H, s br). EM (ESI) : m/z 137 (M+H)+.

Ácidos carboxílicos

Los ácidos carboxílicos usados en los ejemplos siguientes se prepararon por los procedimentos siguientes.

Ácido carboxílico 1: Ácido 6-t-butil-2-naftoico

6-t-butil-2-naftoato de metilo

Se calentó a 80ºC bajo monóxido de carbono gas durante 15 horas, usando un globo, una mezcla de 2-bromo-6-t-butilnaftaleno (980 mg, 3,72 mmol), acetato de paladio (94 mg, 0,37 mmol), 1,3-bis(difenilfosfino)propano (153 mg, 0,37 mmol) y trietilamina (1,56 ml, 11,2 mmol) en MeOH (6 ml) y DMF (10 ml). Después de que se enfriara a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con EtOAc/tolueno (8:1) (160 ml) y se filtró a través de un lecho corto de celita. El filtrado y los lavados se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato sódico y se evaporaron en vacío, obteniéndose el producto en bruto que se purificó por cromatogarfía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con hexano/EtOAc (10:1), resultando el compuesto del título como un aceite incoloro (843 mg, 94%). RMN 1H (CDCl3) δ 1,43 (9H, s), 3,97 (3H, s), 7,61-7,67 (1H, m), 7,79-7,93 (3H, m), 8,01-8,07 (1H, m), 8,57 (1H, s br).

Ácido 6-t-butil-2-naftoico

Se calentó a 60ºC durante 3 horas una mezcla de 6-t-butil-2-naftoato de metilo (843 mg, 3,48 mmol) y solución 2 M de hidróxido sódico (6,96 mmol, 3,48 mmol) en MeOH (36 ml). Después de enfriar a temperatura ambiente, se evaporó el disolvente en vacío y el residuo se acidificó a pH 2 con solución acuosa de ácido clorhídrico. La capa acuosa se sometió a extracción con EtOAc y la solución combinada se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó en vacío, resultando el producto en bruto que se recristalizó en EtOAc y hexano, obteniéndose el compuesto del título como un sólido blanco (614 mg, 77%). RMN 1H (DMSO) δ 1,39 (9H, s), 7,70-7,76 (1H, m), 7,90-8,08 (4H, m), 8,55 (1H, s br), 13,00 (1H, s br).

Ácido carboxílico 2: Ácido 6-t-butilquinolin-2-carboxílico

6-t-butilquinolin-1-óxido

Se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas una mezcla de 6-t-butilquinolina (400 mg, 2,16 mmol, Journal of the Indian Chemical Society, 1998, 823), mCPBA (639 mg, 2,59 mmol) en cloroformo (10 ml). Se concentró la mezcla y el residuo en bruto se aplicó a una columna de cromatografía sobre gel de sílice (sílice NH) y se eluyó con DCM/MeOH (20:1), obteniéndose el compuesto del título (433 mg, cuantitativo) como un aceite de color naranja pálido. RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 1,43 (9H, s), 7,26-7,30 (1H, m), 7,73 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,78 (1H, s), 7,85 (1H, dd, J = 1,5, 8,8 Hz), 8,49 (1H, d, J = 5,9 Hz), 8,67 (1H, d, J = 8,8 Hz). EM (ESI) : m/z 202 (M+H)+.

6-t-butilquinolin-2-carbonitrilo

Se agitó a 120ºC durante 15 minutos, bajo irradiación con microondas, una mezcla de 6t-butilquinolin-1-óxido (310 mg, 1,54 mmol), cianuro de trimetilsililo (458 mg, 4,62 mmol), trimetilamina (312 mg, 3,08 mmol) en acetonitrilo (3 ml). La mezcla se aplicó a una columna de cromatografía sobre gel de sílice y se eluyó con hexano/EtOAc (20:1), obteniéndose el compuesto del título (295 mg, rend. 91%) como un sólido blanco. RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 1,44 (9H, s), 7,68 (1H, d, J = 8,8 Hz), 7,79 (1H, d, J = 2,2 Hz), 7,94 (1H, d, J = 2,2, 8,8 Hz), 8,11 (1H, d, J = 8,8 Hz), 8,26 (1H, d, J = 8,8 Hz). EM (ESI) : m/z 211 (M+H)+.

Ácido 6-t-butilquinolin-2-carboxílico

Se agitó a reflujo durante 4 horas una solución de 6-t-butilquinolin-2-carbonitrilo (295 mg, 1,40 mmol) y solución acusa 2M de hidróxido sódico (3 ml) en EtOH (4,5 ml). La mezcla se diluyó con agua (10 ml), se neutralizó con ácido clorhídrico acuoso 2M y se sometió a extracción con EtOAc (30 ml). La capa acuosa se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró en vacío, obteniéndose el compuesto del título (313 mg, rend. cuantitativo) como un sólido blanco. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,40 (9H, s), 7,93-7,97 (2H, m), 8,01-8,11 (2H, m), 8,41 (1H, d, J = 8,1 Hz). EM (ESI) : m/z 230 (M+H)+.

5

Ejemplos A1-A6

Ejemplo 1: A una solución en DMF (30 ml) de la Amina 1 (100 mg, 0,44 mmol), se añadió el Ácido carboxílico 1 (73 mg, 0,44 mmol), HBTU (178 mg, 0,47 mmol) y trimetilamina (1 ml) y la

10 mezcla se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. La reacción se apagó con agua y el producto se sometió a extracción con EtOAc. Luego, la purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice dio el compuesto del título (72,9 mg, 50%) como un sólido blanco.

Los compuestos de los Ejemplos 2A a 6A se prepararon por un procedimiento similar al Ejemplo 1 usando los materiales de partida y un disolvente apropiado como se describe en el 15 Ejemplo 1.

Materiales de partida: Ejemplo A2: Amina 2 y Ácido Carboxílico 1 Ejemplo A3: Amina 2’ y Ácido Carboxílico 1

20 Ejemplo A4: Amina 3 y Ácido Carboxílico 1 Ejemplo A5: Amina 4 y Ácido Carboxílico 1 Ejemplo A6: Amina 5 y Ácido Carboxílico 1

25

30

35

Tabla 3

imagen1

Ejemplo B1

El compuesto del Ejemplo B1 se preparó por un procedimiento similar al del Ejemplo A1 usando procedimientos similares al del Ejemplo A1 con los siguientes materiales de partida y el disolvente apropiado según se indica en el Esquema 1.

Materiales de partida

Ejemplo B1: Amina 2 y Ácido Carboxílico 2. Tabla 4

imagen2

Ejemplos C1-C4 Los compuestos de los Ejemplos C1 a C4 se prepararon por un procedimiento similar al del Ejemplo A1 usando los siguientes materiales de partida y el disolvente apropiado según se 15 indica en el Esquema 1.

Materiales de partida

Ejemplo C1: Amina 6 y Ácido Carboxílico 1 Ejemplo C2: Amina 7 y Ácido Carboxílico 1 20 Ejemplo C3: Amina 8 y Ácido Carboxílico 1 Ejemplo C4: Amina 9 y Ácido Carboxílico 1

25

30

Tabla 5

imagen1

10 Ejemplos D1-D2 Los compuestos de los Ejemplos D1 a D2 se prepararon por un procedimiento similar al del Ejemplo A1 usando los siguientes materiales de partida y el disolvente apropiado según se indica en el Esquema 1.

15 Materiales de partida

Ejemplo D1: Amina 8 y Ácido Carboxílico 2 Ejemplo D2: Amina 9 y Ácido Carboxílico 2

Tabla 6

imagen1

15

20

Claims

REIVINDICACIONES

1.

Un compuesto de la fórmula (I):

10

imagen1

en la que A1 es N yA2 es CR7,o A1 es CR7 yA2 es N Y1, Y2 e Y3 son, cada uno independientemente, CH o N, Y4 e Y5 son, cada uno

15 independientemente, CR8 o N, con la condición de que, cuando uno de Y1, Y2, Y3 , Y4 e Y5 es N, los otros no sean N, R1 y R2 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo C1-6, halo alquilo C1-6 o hidroxialquilo C1-6, R3 y R8 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, hidroxi, alquilo C1-6, 20 hidroxialcoxi C1-6, alcoxi C1-6 alquilo C1-6, alcoxi C1-6 alcoxi C1-6, haloalquilo C1-6, alquil C1-6 tio, alquil C1-6 sulfinilo o alquil C1-6 sulfonilo,

R4 es halógeno, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, haloalcoxi C1-6, hidroxialcoxi C1-6, alcoxi C1-6 alquilo C1-6, alcoxi C1-6 alcoxi C1-6, haloalquil C1-6 sulfonilo, haloalquil C1-6 sulfinilo, haloalquil C1-6 tio, [alquil C1-6]NH-o [alquil C1-6]2N-; y

25 R5, R6 y R7 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6 o alcoxi C1-6,

o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable.
2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R1 y R2 son, cada uno 30 independientemente, hidrógeno, alquilo C1-6 o hidroxialquilo C1-6,

R3 y R8 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, hidroxi, alquilo C1-6, hidroxialcoxi C1-6 o haloalquilo C1-6,

R4 es halógeno, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, haloalcoxi C1-6, haloalquil C1-6 sulfonilo, haloalquil C1-6 sulfinilo o haloalquil C1-6 tio, y

R5, R6 y R7 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6 o alcoxi C1-6,

o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable.
3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R1 y R2 son, cada uno

independientemente, hidrógeno, alquilo C1-6 o hidroxialquilo C1-6,

R3 y R8 son, cada uno independientemente, hidrógeno o halógeno,

R4 es halógeno, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-6, haloalquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6,

haloalcoxi C1-6, haloalquil C1-6 sulfonilo o haloalquil C1-6 sulfinilo, y R5, R6 y R7 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6 o alcoxi C1-6,

o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable.
4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R1 y R2 son, cada uno

independientemente, hidrógeno, alquilo C1-6 , haloalquilo C1-4 o hidroxialquilo C1-6,

R3 y R8 son, cada uno independientemente, hidrógeno o halógeno,

R4 es alquilo C1-6 o haloalquilo C1-6, y

R5, R6 y R7 son, cada uno independientemente, hidrógeno, halógeno, alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6 o alcoxi C1-6,

o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable.
5. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que Y1, Y2 yY3 son CH, yY4yY5 son CR8, Y1 es N,Y2 yY3 son CH,yY4 yY5 son CR8, Y3 es N,Y1 yY2 son CH,yY4 yY5 son CR8, y Y4 es N,Y1, Y2 yY3 sonCH, yY5 es CR8,

o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable.
6. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que R4 es alquilo C1-4 o haloalquilo C1-4,

o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable.
7. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R4 es t-butilo, 2,2,2-trifluoro-1,1-dimetiletilo o trifluorometilo,

o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable.
8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, compuesto que se selecciona entre el grupo constituido por: 6-t-butil-N-[1-(6-metilpiridin-3-il)etil]-2-naftamida, 6-t-butil-N-[(1R)-(6-metilpiridin-3-il)etil]-2-naftamida, 6-t-butil-N-[(1R)-1-(2-metilpiridin-4-il)etil]-2-naftamida, 6-t-butil-N-[(2,5-dimetilpiridin-4-il)metil]-2-naftamida, y 6-t-butil-N-[(2,5-dimetilpiridin-4-il)metil]quinolin-2-carboxamida,

o sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptables.
9.

Una composición farmacéutica que incluye un compuesto de la fórmula (I), o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable, según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, junto con un excipiente farmacéuticamente aceptable.
10.

Un compuesto de la fórmula (I), o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable, según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, para uso como medicamento.
11.

Uso de un compuesto de la fórmula (I), o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable, según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para la fabricación de un medicamento para tratar una enfermedad para la que está indicado un antagonista de VR1.
12.

Uso de acuerdo con la reivindicación 11, en el que la enfermedad se selecciona entre isquemia cerebral aguda, dolor, dolor crónico, dolor neuropático, dolor inflamatorio, neuralgia posherpética, neuropatías, neuralgia, neuropatía diabética, neuropatía relacionada con el VIH, lesión de nervios, dolor artrítico reumatoide, dolor osteoartrítico, quemaduras, dolor lumbar, dolor visceral, dolor de cáncer, dolor dental, dolor de cabeza, migraña, síndrome de túnel carpiano, fibromialgia, neuritis, ciática, hipersensibilidad pélvica, dolor pélvico, dolor menstrual, enfermedad de la vejiga tal como incontinencia, trastorno de la micción, cólico renal y cistitis; inflamaciones tales como quemaduras, artritis reumatoide y osteoartritis; enfermedad neurodegenerativa tal como apoplejía, dolor posapoplético y esclerosis múltiple; enfermedad

pulmonar tal como asma, tos, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) y broncoconstricción; enfermedad gastrointestinal tal como enfermedad de reflujo gastroesofágico (ERGE), disfagia, úlcera, síndrome de intestino irritable (SII), enfermedad inflamatoria del intestino (EII), colitis y enfermedad de Crohn, isquemia tal como isquemia

5 cerebrovascular, o emesis tal como emesis inducida por quimioterapia del cáncer, y obesidad.
13. Una combinación de un compuesto de la fórmula (I), o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable, según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, y otro agente farmacológicamente activo.

10 14. Una composición farmacéutica que incluye un compuesto de la fórmula (I), o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente aceptable, según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, y otro agente farmacológicamente activo.
15. Un compuesto de la fórmula (I), o una de sus sales o solvatos farmacéuticamente

15 aceptable, según se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, para uso en el tratamiento de un trastorno para el que está indicado un antagonista de VR1.