ES2339400T3 - Antagonistas del receptor de histamina que comprenden un nucleo de azepina. - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula (I) **(Ver fórmula)** en la que el anillo de quinolinilo está sustituido en la posición 2 ó 3 con R1 y está opcionalmente sustituido en la posición 5, 6 ó 7 con R2; R1 representa -CH2CH2COOH, -CH=C(CH3)COOH o -CH=CHCOOH; R2 representa alquilo C1-6, arilo o alquilarilo C1-6; n representa 0 ó 1; y una sal del mismo.

Description

Antagonistas del receptor de histamina que comprenden un núcleo de azepina.

Compuestos

La presente invención se refiere compuestos, composiciones farmacéuticas que los contienen y a su uso en el tratamiento de diversas enfermedades, en particular enfermedades inflamatorias y/o alérgicas del tracto respiratorio.

La rinitis alérgica, la inflamación y la congestión pulmonar son afecciones médicas que se asocian a menudo con otras afecciones tales como asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), rinitis alérgica estacional y rinitis alérgica perenne. En general, estas afecciones están mediadas, al menos en parte, por la inflamación asociada con la liberación de histamina de diversas células, en particular mastocitos.

La rinitis alérgica, también conocida como "fiebre del heno", afecta a una gran proporción de la población mundial. Existen dos tipos de rinitis alérgica; estacional y perenne. Los síntomas clínicos de la rinitis alérgica estacional incluyen típicamente picor e irritación nasal, estornudos y rinorrea acuosa, que a menudo se acompaña de congestión nasal. Los síntomas clínicos de la rinitis alérgica perenne son similares excepto por que la obstrucción nasal puede ser más pronunciada. Cualquier tipo de rinitis alérgica también puede causar otros síntomas tales como picor de ojos y/o garganta, epífora y edema alrededor de los ojos. Los síntomas de rinitis alérgica pueden variar en intensidad del nivel molesto al debilitante.

La rinitis alérgica y otras afecciones alérgicas están asociadas con la liberación de histamina de diversos tipos celulares, pero particularmente mastocitos. Los efectos fisiológicos de la histamina están mediados clásicamente por tres subtipos de receptor, denominados H1, H2 y H3. Los receptores H1 están ampliamente distribuidos por todo el SNC y la periferia y están implicados en la vigilia y en la inflamación aguda. Los receptores H2 median la secreción ácida gástrica en respuesta a la histamina. Los receptores H3 están presentes en las terminaciones nerviosas tanto en el SNC como en la periferia y median la inhibición de la liberación de neurotransmisores [Hill y col., Pharmacol. Rev., 49: 253-278, (1997)]. Recientemente se ha identificado un cuarto miembro de la familia de receptores de histamina denominado el receptor H4 [Hough, Mol. Pharmacol., 59: 415-419, (2001)]. Aunque la distribución del receptor H4 parece estar limitada a células de los sistemas inmune e inflamatorio, todavía no se ha aclarado el papel fisiológico de este receptor.

La activación de receptores H1 en vasos sanguíneos y terminaciones nerviosas es responsable de muchos de los síntomas de la rinitis alérgica, que incluyen picor, estornudos y la producción de rinorrea acuosa. Los compuestos antihistamínicos orales (tales como clorfeniramina, cetirizina, desloratidina y fexofenadina) y antihistamínicos intranasales (tales como azelastina y levocabastina), que son antagonistas selectivos del receptor H1, son eficaces en el tratamiento del picor, los estornudos y la rinorrea asociados con la rinitis alérgica, pero no son eficaces contra los síntomas de congestión nasal [Aaronson, Ann. Allergy, 67; 541-547, (1991)]. Por lo tanto, los agonistas de receptor H1 se han administrado en combinación con agentes simpaticomiméticos tales como pseudoefedrina u oximetazolina para tratar los síntomas de congestión nasal de la rinitis alérgica. Se piensa que estos fármacos producen una acción descongestiva por acción de receptores \alpha-adrenérgicos y aumento del tono vascular de los vasos sanguíneos en la mucosa nasal. Frecuentemente, el uso de fármacos simpaticomiméticos para el tratamiento de la congestión nasal está limitado por las propiedades estimulantes del SNC y sus efectos sobre la presión arterial y la frecuencia cardíaca. Por lo tanto, un tratamiento que disminuya la congestión nasal sin tener efectos sobre el SCN y el sistema cardiovascular puede ofrecer ventajas sobre las terapias existentes.

Los receptores de histamina H3 se expresan ampliamente en las terminaciones nerviosas tanto periféricas como del SNC y median la inhibición de la liberación de neurotransmisores. La estimulación eléctrica in vitro de nervios simpáticos periféricos en vena safena humana aislada da como resultado un aumento en la liberación de noradrenalina y en la contracción del músculo liso que puede inhibirse mediante agonistas del receptor de histamina H3 [Molderings y col., Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol., 346: 46-50, (1992); Valentine y col., Eur. J. Pharmacol., 366: 73-78, (1999)]. Los agonistas del receptor H3 también inhiben el efecto de la activación de nervios simpáticos sobre el tono muscular en la mucosa nasal porcina [Varty y Hey., Eur. J. Pharmacol., 452: 339-345, (2002)]. In vivo, los agonistas del receptor H3 inhiben la disminución en la resistencia de las vías respiratorias producida por la activación de nervios simpáticos [Hey y col., Arzneim-Forsch Drug Res., 48: 881-888, (1998)]. La activación de receptores de histamina H3 en la mucosa nasal humana inhibe la vasoconstricción simpática [Varty y col., Eur. J. Pharmacol., 484: 83-89, (2004)]. Además, se ha demostrado que los antagonistas del receptor H3, en combinación con antagonistas del receptor de histamina H1, invierten los efectos de la activación de mastocitos sobre la resistencia de las vías respiratorias y el volumen de la cavidad nasal, un índice de congestión nasal [Mcleod y col., Am. J. Rhinol., 13: 391-399, (1999)], y se proporcionan pruebas adicionales de la contribución de los receptores H3 a la obstrucción nasal inducida por histamina mediante estudios de exposición nasal a histamina realizados en sujetos humanos normales [Taylor-Clark y col., Br. J. Pharmacol., 144, 867-874, (2005)], aunque el mecanismo de H3 a este respecto parecería ser novedoso y sin precedentes y, en última instancia, puede resultar clínicamente silencioso.

El documento WO2004/035556 desvela piperazinas sustituidas, (1,4)diazepinas y 2,5-diazabiciclo[2,2,1]heptanos como antagonistas o agonistas inversos de histamina H3 o dobles de histamina H1/H3.

Se ha descubierto una nueva clase de compuestos que son antagonistas dobles de receptores de histamina H1 y H3. Por antagonistas "dobles" de receptores de histamina H1 y H3 se entiende que los compuestos tienen actividad en ambos subtipos de receptor. Por ejemplo, la actividad del receptor H1 puede estar dentro de aproximadamente 100 veces la actividad del receptor H3, tal como dentro de aproximadamente 10 veces o menos.

Por lo tanto, se proporciona, en un primer aspecto de la presente invención un compuesto de fórmula (I)

1

en la que

el anillo de quinolinilo puede estar sustituido en la posición 2 ó 3 con R^{1} y en la posición 5, 6 ó 7 con R^{2};

R^{1} representa -CH_{2}CH_{2}COOH, -CH=C(CH_{3})COOH o -CH=CHCOOH;

R^{2} representa alquilo C_{1-6}, arilo o -alquilarilo C_{1-6};

n representa 0 ó 1; o una sal del mismo.

Puede esperarse que los compuestos de fórmula (I) sean útiles en el tratamiento de diversas enfermedades, en particular enfermedades inflamatorias y/o alérgicas, tales como enfermedades inflamatorias y/o alérgicas del tracto respiratorio, por ejemplo rinitis alérgica, que están asociadas con la liberación de histamina de células tales como mastocitos. Además, los compuestos de fórmula (I) pueden mostrar un perfil mejorado en el sentido de que puedan poseer una o más de las siguientes propiedades:

(i)

actividad antagonista y/o agonista inversa de H3 con un pKi (pKb) de más de aproximadamente 7, por ejemplo más de aproximadamente 8;

(ii)

actividad antagonista y/o agonista inversa del receptor H1 con un pKi (pKb) de más de 7, por ejemplo más de aproximadamente 8;

(iii)

menor penetración en el SNC.

Los compuestos que tienen dicho perfil pueden ser adecuados para la dosificación intranasal, y/o capaces de administrarse una vez al día y/o pueden tener además un perfil de efectos secundarios mejorados en comparación con otras terapias existentes.

En otro aspecto, se proporciona un compuesto de fórmula (I) en la que el anillo de quinolinilo está sustituido en la posición 2 con R^{1}.

En otro aspecto, se proporciona un compuesto de fórmula (I) en la que R^{1} representa -CH_{2}CH_{2}COOH.

En otro aspecto, se proporciona un compuesto de fórmula (I) en la que el anillo de quinolinilo está sustituido en la posición 6 con R^{2}.

En otro aspecto, se proporciona un compuesto de fórmula (I) en la que R^{2} representa alquilo C_{1-4} (por ejemplo, metilo o etilo), fenilo o -alquilfenilo C_{1-4} (por ejemplo, -metilfenilo).

En otro aspecto, n es 1.

En otro aspecto, se proporciona un compuesto que es ácido 3-[8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il}propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-6-(fenilmetil)-2-quinolinil]propanoico o una sal del mismo, particularmente una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los compuestos representativos incluyen pero sin limitación los Ejemplos 1 a 6 descritos en el presente documento, y sales de los mismos.

Debe apreciarse que la invención incluye todas las combinaciones posibles de grupos, aspectos y sustituyentes descritos en el presente documento.

Alquilo C_{1-6}, ya sea solo o como parte de otro grupo, puede ser de cadena lineal o ramificada. Los ejemplos representativos incluyen metilo, etilo, n-propilo, iso-propilo, n-butilo, sec-butilo, iso-butilo, t-butilo, n-pentilo, neo-pentilo y n-hexilo. Los grupos alquilo particulares son alquilo C_{1-4}, por ejemplo metilo, etilo, propilo y butilo, tal como metilo y etilo.

Debe apreciarse que la presente invención incluye compuestos de fórmula (I) en forma de la base libre y en forma de sales de los mismos, por ejemplo, en forma de una sal farmacéuticamente aceptable.

Debe entenderse además que las referencias en lo sucesivo en el presente documento a compuestos de la invención o a compuestos de fórmula (I) se refieren a un compuesto de fórmula (I) en forma de la base libre, o en forma de una sal, o en forma de un solvato.

Debido a su uso potencial en medicina, las sales de los compuestos de fórmula (I) son de forma deseable farmacéuticamente aceptables. Las sales farmacéuticamente aceptables adecuadas pueden incluir sales de adición de ácidos o bases. Como se usa en el presente documento, la expresión "sal farmacéuticamente aceptable" significa cualquier sal o solvato farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la invención, que después de la administración al receptor es capaz de proporcionar (directa o indirectamente). Para una revisión sobre sales adecuadas véase Berge y col., J. Pharm. Sci., 66:1-19, (1977). Típicamente, una sal farmacéuticamente aceptable puede prepararse fácilmente usando un ácido o base deseada según sea apropiado. La sal resultante puede precipitar de la solución y recogerse por filtración o puede recuperarse por evaporación del disolvente.

Una sal de adición de bases farmacéuticamente aceptable puede formarse por reacción de un compuesto de fórmula (I) con una base inorgánica u orgánica adecuada (por ejemplo, trietilamina, etanolamina, trietanolamina, colina, arginina, lisina o histidina), opcionalmente en un disolvente adecuado, para dar la sal de adición de bases que normalmente se aísla, por ejemplo, por cristalización y filtración.

Las sales de bases farmacéuticamente aceptables incluyen sales de amonio, sales de metales alcalinos tales como las de sodio y potasio, sales de metales alcalinotérreos tales como las de calcio y magnesio y sales con bases orgánicas, incluyendo sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, tales como isopropilamina, dietilamina, etanolamina, trimetilamina, diciclohexil amina y N-metil-D-glucamina.

Una sal de adición de ácidos farmacéuticamente aceptable puede formarse por reacción de un compuesto de fórmula (I) con un ácido inorgánico u orgánico adecuado (tal como ácido bromhídrico, clorhídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico, succínico, maleico, fórmico, acético, propiónico, fumárico, cítrico, tartárico, láctico, benzoico, salicílico, glutámico, aspártico, p-toluenosulfónico, bencenosulfónico, metanosulfónico, etanosulfónico, naftalenosulfónico tal como 2-naftalenosulfónico o hexanoico), opcionalmente en un disolvente adecuado tal como un disolvente orgánico, para dar la sal que normalmente se aísla, por ejemplo, por cristalización y filtración. Una sal de adición de ácidos farmacéuticamente aceptable de un compuesto de fórmula (I) puede comprender o ser, por ejemplo, una sal bromhidrato, clorhidrato, sulfato, nitrato, fosfato, succinato, maleato, formiato, acetato, propionato, fumarato, citrato, tartrato, lactato, benzoato, salicilato, glutamato, aspartato, p-toluenosulfonato, bencenosulfonato, metanosulfonato, etanosulfonato, naftalenosulfonato (por ejemplo, 2-naftalenosulfonato) o hexanoato.

En otro aspecto se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal formiato del mismo.

Otras sales que no son farmacéuticamente aceptables, por ejemplo oxalatos o trifluoroacetatos, pueden usarse, por ejemplo, en el aislamiento de los compuestos de fórmula (I), y se incluyen dentro del ámbito de esta invención.

La invención incluye dentro de su ámbito todas las formas estequiométricas y no estequiométricas posibles de las sales de los compuestos de fórmula (I).

Se apreciará que muchos compuestos orgánicos pueden formar complejos con disolventes en los que se hacen reaccionar o a partir de los cuales precipitan o cristalizan. Estos complejos se conocen como "solvatos". Por ejemplo, un complejo con agua se conoce como un "hidrato". Los disolventes con altos puntos de ebullición y/o capaces de formar enlaces hidrógeno tales como agua, xileno, N-metil pirrolidinona, metanol y etanol pueden usarse para formar solvatos. Los procedimientos para la identificación de solvatos incluyen, pero sin limitación, RMN y microanálisis. Los solvatos de los compuestos de fórmula (I) están dentro del ámbito de la invención.

Los compuestos de fórmula (I) pueden estar en forma cristalina o amorfa. Además, algunas de las formas cristalinas de los compuestos de fórmula (I) pueden existir como polimorfos, que se incluyen dentro del ámbito de la presente invención. La forma polimórfica más termodinámicamente estable de los compuestos de fórmula (I) es de particular interés.

Las formas polimórficas de compuestos de fórmula (I) pueden caracterizarse y diferenciarse usando varias técnicas analíticas convencionales, incluyendo, pero sin limitación, patrones de difracción de polvo de rayos X (XRPD), espectros de infrarrojos (IR), espectros Raman, calorimetría diferencial de barrido (DSC), análisis termogravimétrico (TGA) y resonancia magnética nuclear en estado sólido (RMN).

Además, se entenderá que la presente invención incluye isómeros geométricos de los compuestos de fórmula (I) incluyendo configuraciones cis y trans, y regioisómeros incluyendo dobles enlaces exo y endo (por ejemplo, -CH=C(CH_{3})CO_{2}H y -CH-C(=CH_{2})CO_{2}H), en forma de isómeros individuales aislados tales como sustancialmente libres de los otros isómeros (es decir, puros) o como mezclas de los mismos. Por lo tanto, por ejemplo la presente invención incluye un isómero individual aislado tal como uno sustancialmente libre del otro isómero (es decir, puro) tal que está presente menos del 10%, por ejemplo menos del 1% o menos del 0,1% del otro isómero. La separación de isómeros geométricos puede conseguirse por técnicas convencionales, por ejemplo por cristalización fraccionada, cromatografía o HPLC.

Ciertos compuestos de fórmula (I) pueden existir en una de varias formas tautoméricas. Se entenderá que la presente invención incluye todos los tautómeros de los compuestos de fórmula (I) en forma de tautómeros individuales o en forma de mezclas de los mismos.

Se apreciará a partir de lo anterior que dentro del ámbito de la invención se incluyen solvatos, hidratos, complejos, isómeros y formas polimórficas de los compuestos de fórmula (I) y sus sales.

En el presente documento se desvelan procedimientos para la preparación de compuestos de fórmula (I) o sales de los mismos.

De acuerdo con un primer procedimiento A, un compuesto de fórmula (I) puede prepararse por desprotección de un compuesto de fórmula (Ia):

2

en la que

el anillo de quinolinilo está sustituido en la posición 2 ó 3 con R^{1a} y en la posición 5, 6 ó 7 con R^{2}; R^{1a} representa un derivado protegido de R^{1}, tal como un éster de R^{1}, por ejemplo, -CH_{2}CH_{2}COOR^{x}, -CH=C(CH_{3})COOR^{x} o -CH=CHCOOR^{x} en los que R^{x} representa independientemente un grupo protector tal como alquilo C_{1}-C_{6}, por ejemplo metilo, etilo o t-butilo, particularmente metilo, e isómeros de los mismos; y R^{2} y n son como se han definido para la fórmula (I) anterior.

La desprotección puede realizarse en condiciones convencionales. Por lo tanto, la hidrólisis de un éster del ácido carboxílico puede realizarse en presencia de una base adecuada, por ejemplo, hidróxido sódico o hidróxido potásico, en un sistema de disolventes acuosos adecuado tal como metanol/agua o tetrahidrofurano/agua, opcionalmente a una temperatura elevada tal como a la temperatura de reflujo. Como alternativa, la hidrólisis de un éster del ácido carboxílico, por ejemplo, el éster t-butílico, puede realizarse en presencia de un ácido adecuado tal como cloruro de hidrógeno en dioxano en condiciones convencionales para hidrólisis del ácido.

Los compuestos de fórmula (Ia) pueden prepararse haciendo reaccionar un compuesto de la fórmula (II)

3

en la que el anillo de quinolinilo está sustituido como se ha definido anteriormente en el presente documento y R^{1a}, R^{2} y n son como se han definido anteriormente en el presente documento, con un compuesto de fórmula (III)

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en la que L representa un grupo saliente tal como un hidroxilo activado, por ejemplo, mesilato o tosilato. La amina terciaria puede prepararse en condiciones convencionales para N-alquilación de una amina secundaria tal como las descritas en el presente documento, típicamente en presencia de una base, por ejemplo carbonato ácido sódico y un disolvente adecuado tal como acetonitrilo a una temperatura elevada tal como a aproximadamente 80ºC.

Un compuesto de fórmula (III) puede prepararse de acuerdo con el siguiente esquema de reacción general:

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Reactivos y condiciones de reacción: (i) base adecuada, por ejemplo carbonato potásico (K_{2}CO_{3}), disolvente, por ejemplo 2-butanona, normalmente a una temperatura elevada, opcionalmente usando irradiación con microondas, y opcionalmente con una cantidad catalítica de agente de activación, por ejemplo yoduro potásico; (ii) agente de activación adecuado, por ejemplo cloruro de tosilo (TsCl) o cloruro de mesilo (MsCl), una base apropiada, por ejemplo diisopropiletilamina (DIPEA), en un disolvente adecuado, tal como diclorometano (DCM).

El 1-bromo-3-cloropropano, la hexahidro-1H-azepina y el compuesto de fórmula V (2-(4-hidroxifenil)etanol) están disponibles en el mercado, por ejemplo, en Aldrich.

Un compuesto de fórmula (II) puede prepararse de acuerdo con los siguientes esquemas de reacción (Esquemas 1 a 3):

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Esquema 1

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en el que el anillo de quinolinilo está sustituido en la posición 3 con CH_{3}, y cuando n es 1, en la posición 5, 6 ó 7 con Br, R^{1a} es como se ha definido anteriormente en el presente documento y P representa un grupo protector tal como carbamato de bencilo (cbz) o dicarbonato de di-terc-butilo (BOC).

Reactivos y condiciones de reacción: (i) reacción con piperazina en un disolvente adecuado por ejemplo dimetilsulfóxido en presencia de una base adecuada tal como carbonato potásico, a una temperatura elevada, por ejemplo de aproximadamente 100ºC a aproximadamente 150ºC; (ii) protección con un grupo protector adecuado tal como cbz o BOC usando cloroformiato de bencilo o dicarbonato de di-terc-butilo, típicamente en presencia de una base adecuada tal como trietilamina y/o dimetilaminopiridina, en un disolvente apropiado tal como diclorometano (DCM); (iii) oxidación con un oxidante adecuado tal como dióxido de selenio, en un disolvente apropiado tal como dioxano, a una temperatura elevada tal como de aproximadamente 55ºC a aproximadamente 80ºC, en una atmósfera de nitrógeno; (iv) reacción de Wittig con un iluro de fósforo adecuado tal como (bifenilfosforanilideno)acetato de metilo o carboetoximetilenotrifenilfosforano en un disolvente adecuado tal como tetrahidrofurano (THF), a una temperatura elevada tal como a aproximadamente 65ºC; (v) alquilación con un alquilboro apropiado tal como trietilborano o B-Bencil-9-borabiciclononano, típicamente con catálisis de paladio, en presencia de una base adecuada, por ejemplo carbonato potásico, en un disolvente adecuado tal como DMF, opcionalmente a una temperatura elevada, o un procedimiento alternativo a partir de un reactivo de Grignard apropiado en presencia de un catalizador de hierro tal como acetoacetato de hierro (III) (Fe(acac)_{3}) en un disolvente tal como THF: N-metil pirrolidinona (9:1), típicamente entre 5ºC y 20ºC: (vi) desprotección en condiciones convencionales tal como en presencia de un ácido adecuado tal como ácido trifluoroacético o en el caso de desprotección con BOC, cloruro de hidrógeno en dioxano.

Los compuestos de fórmula (XI) pueden prepararse a partir de materiales conocidos o disponibles en el mercado. Los compuestos de fórmula (XI) en la que el grupo metilo está en la posición 2 pueden prepararse por síntesis de quinolina de Skraup que implica típicamente reacción con crotonaldehído y la anilina apropiada, en presencia de un ácido fuerte tal como cloruro de hidrógeno 5 M, en un disolvente adecuado, por ejemplo tolueno a una temperatura elevada tal como a aproximadamente 100ºC. Las anilinas disponibles incluyen 4-bromo-2-fluoroanilina y 5-bromo-2-fluoroanilina que están disponibles en el mercado, por ejemplo en Fluorochem. El 3-bromo-2-fluoronitrobenceno se desvela en Acta Chem. Scand. Series B, 1975, B29, 981-2, que puede convertirse en 3-bromo-2-fluoranilina por reducción del grupo nitro usando procedimientos bien conocidos por los expertos en la materia, por ejemplo, usando un agente reductor apropiado, tal como cloruro de estaño o hierro, con un ácido adecuado, por ejemplo ácido clorhídrico.

Los compuestos de fórmula (VII) en el esquema 1, en los que n es 0 también pueden prepararse de acuerdo con el siguiente esquema de reacción (Esquema 2):

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Esquema 2

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en el que el anillo de quinolinilo está sustituido en la posición 2 ó 3 por CHO o R^{1a} como se ha indicado y R^{1a} es como se ha definido anteriormente en el presente documento.

Reactivos y condiciones de reacción: (i) reacción de Wittig usando un iluro adecuado tal como los que se han descrito anteriormente, en un disolvente adecuado tal como tolueno, opcionalmente a una temperatura elevada, por ejemplo de aproximadamente 50ºC; (ii) hidrogenación opcional en presencia de paladio al 10% p/p sobre carbono en un disolvente adecuado tal como acetato de etilo para dar compuestos en los que R^{1a} representa -CH_{2}-CH_{2}COOR^{x} en el que R^{x} es como se ha definido anteriormente en el presente documento; (iii) activación con un agente de activación adecuado, por ejemplo N-fenil bis(trifluorometanosulfonamida, en presencia de una base adecuada, por ejemplo trietilamina, en un disolvente adecuado tal como DMF, o con anhídrido tríflico en presencia de piridina a una temperatura reducida, por ejemplo a aproximadamente 0ºC; (iv) alquilación con 1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo, carbonato de cesio, tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (0), 2-(diciclohexilfosfino)-2'-(N,N-dimetilamino)bifenilo en presencia de un disolvente adecuado, por ejemplo THF, opcionalmente a una temperatura elevada.

Los compuestos de fórmula (XV), tal como 8-hidroxiquinolin-2-carboxaldehído, están disponibles en el mercado en Acros o pueden prepararse a partir de materiales conocidos. Por lo tanto, por ejemplo, el compuesto de fórmula (XV) en la que el grupo aldehído está en la posición 3 puede prepararse a partir de la metilquinolina correspondiente, que se desvela en Tetrahedron, 1996, 52, 2937-2944 (véase el esquema 2, compuesto 2a), por oxidación con un agente de oxidación apropiado, tal como dióxido de selenio.

Se apreciará que un compuesto de fórmula (VII) también puede prepararse por interconversión de otros compuestos de fórmula (VII) usando el procedimiento de interconversión convencional tal como hidrogenación en condiciones convencionales como se describe en el presente documento, y por isomerización de isómeros geométricos también como se describe en el presente documento.

Los compuestos de fórmula (VII) en el esquema 1, en los que n es 0 también pueden prepararse de acuerdo con el siguiente esquema de reacción (Esquema 3):

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Esquema 3

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en el que el anillo de quinolinilo está sustituido en la posición 3 con I o R^{1a} como se ha indicado y R^{1a} es como se ha descrito anteriormente en el presente documento.

Reactivos y condiciones de reacción: (i) reacción con piperazina, en un disolvente adecuado, por ejemplo dimetilsulfóxido, en presencia de una base adecuada tal como carbonato potásico, a una temperatura elevada tal como de aproximadamente 100ºC a aproximadamente 150ºC; (ii) protección con un grupo protector adecuado tal como BOC usando dicarbonato de di-terc-butilo, típicamente en presencia de una base adecuada tal como trietilamina y/o dimetilaminopiridina, en un disolvente apropiado tal como DCM; (iii) reacción de Heck con un éster de acrilato tal como metacrilato de metilo, metacrilato de etilo o metacrilato de t-butilo, una base adecuada tal como trietilamina, una fosfina tal como trifenilfosfina, un catalizador adecuado tal como acetato de paladio (II), en un disolvente adecuado tal como DMF, a una temperatura elevada, por ejemplo a aproximadamente 100ºC.

El compuesto de fórmula (XVIII) en la que el yodo está sustituido en la posición 3 (es decir 8-fluoro-3-yodoquinolina) se desvela en la Solicitud de Patente Internacional WO05/095346 (véase la Descripción 1, página 12) y/o se desvela en la Solicitud de Patente Internacional WO2007039220A1 (véase la página 16, Descripción 1).

Los ésteres de acrilato son conocidos y/o están disponibles en el mercado. Por lo tanto, por ejemplo, el acrilato de metilo, el metacrilato de metilo, el metacrilato de etilo y el metacrilato de t-butilo están disponibles en Aldrich y/o Acros.

En un procedimiento alternativo, los compuestos de fórmula (Ia) en la que n es 0 pueden prepararse haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (XII) o un compuesto de fórmula (XIX)

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en la que el anillo de quinolinilo está sustituido en la posición 2 ó 3 con R^{1a} con un compuesto de fórmula (XX)

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La reacción de Büchwald se realiza típicamente en presencia de una base adecuada, por ejemplo carbonato de cesio, un catalizador de paladio tal como tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (0), y un ligando tal como 2-(diciclohexilfosfi-
no)-2'-(N,N-dimetilamino)bifenilo, en un disolvente adecuado tal como THF, a una temperatura elevada, por ejemplo a la temperatura de reflujo.

Un compuesto de fórmula (XIX) puede prepararse por una reacción de Wittig en la que un compuesto de fórmula (XXI):

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se hace reaccionar con un iluro de fósforo apropiado, en condiciones similares a la reacción de Wittig descrita anteriormente.

Los compuestos de fórmula (XXI) pueden prepararse por oxidación de la metilquinolina apropiada como se describe en el presente documento. Las metilquinolinas están disponibles en el mercado y/o son conocidas, por ejemplo, la 8-bromo-2-metilquinolina está disponible en ACB Blocks o puede prepararse de acuerdo con los procedimientos descritos por Leir, C. M., J. Org. Chem. 42(5):911-913 (1977) véase la Tabla 1. La 8-yodo-2-metilquinolina está disponible en Maybridge y la 8-bromo-3-metilquinolina se desvela en la Solicitud de Patente Internacional WO2002010131.

Un compuesto de fórmula (XX) puede prepararse de acuerdo con el siguiente esquema de reacción:

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Reactivos y condiciones de reacción: (i) base, por ejemplo bicarbonato sódico, disolvente, por ejemplo acetonitrilo, opcionalmente a una temperatura elevada, por ejemplo a la temperatura de reflujo; (ii) desprotección, por ejemplo en presencia de fluoruro de tetrabutilamonio en un disolvente adecuado, por ejemplo tetrahidrofurano; (iii) alquilación con 1-bromo-3-cloropropano en presencia de una base adecuada, por ejemplo carbonato potásico, un disolvente adecuado, por ejemplo 2-butanona; (iv) alquilación con homopiperazina en presencia de una base adecuada, por ejemplo carbonato potásico, un disolvente adecuado, por ejemplo 2-butanona, opcionalmente en presencia de un agente de activación, por ejemplo yoduro potásico y opcionalmente a una temperatura elevada, por ejemplo a la temperatura de reflujo; (v) desprotección, por ejemplo en presencia de ácido trifluoracético.

De acuerdo con un segundo procedimiento (B), los compuestos de fórmula (I) pueden prepararse

(i)

haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (II) con un compuesto de fórmula (III) para formar un compuesto de fórmula (Ia); y

(ii)

desprotegiendo el compuesto de fórmula (Ia) para formar un compuesto de fórmula (I). En el procedimiento (B), el compuesto intermedio de fórmula (Ia) no necesita aislarse.

De acuerdo con un tercer procedimiento, C, un compuesto de fórmula (I), puede prepararse por interconversión a partir de otros compuestos de fórmula (I). Por lo tanto, los compuestos de fórmula (I) también pueden prepararse a partir de otros compuestos de fórmula (I) usando procedimientos de interconversión convencionales tales como isomerización de isómeros geométricos, por ejemplo interconversión entre isómeros cis y trans e interconversión entre un doble enlace exo y endo, por ejemplo, interconversión entre -CH=C(CH_{3})COOH y -CH_{2}-C(=CH_{2})COOH. Por lo tanto, la interconversión en otros compuestos de fórmula (I) (procedimiento C) forma otro aspecto adicional de la presente invención.

De acuerdo con un cuarto procedimiento, D, una sal de un compuesto de fórmula (I) puede prepararse por intercambio de contraiones, o precipitación de dicha sal a partir de la base libre.

Los ejemplos de grupos protectores que pueden emplearse en las rutas sintéticas descritas y los medios para su retirada pueden encontrarse en T. W. Greene "Protective Groups in Organic Synthesis" (3ª edición, J. Wiley y Sons, 1999). Los grupos protectores de amina adecuados incluyen sulfonilo (por ejemplo, tosilo), acilo (por ejemplo, acetilo, 2',2',2'-tricloroetoxicarbonilo, benciloxicarbonilo o t-butoxicarbonilo) y arilalquilo (por ejemplo, bencilo), que pueden retirarse por hidrólisis (por ejemplo, usando un ácido tal como cloruro de hidrógeno en dioxano o ácido trifluoroacético en diclorometano) o de forma reductora (por ejemplo, hidrogenólisis de un grupo bencilo o retirada reductora de un grupo 2',2',2'-tricloroetoxicarbonilo usando cinc en ácido acético) según sea apropiado. Otros grupos protectores de amina adecuados incluyen trifluoroacetilo (-COCF_{3}), que puede retirarse por hidrólisis catalizada con una base o un grupo bencilo unido a una resina de fase sólida, tal como un grupo 2,6-dimetoxibencilo unido a resina de Merrifield (enlazador de Ellman), que puede retirarse por escisión ácida, por ejemplo con ácido trifluoroacético.

Los ejemplos de patologías en las que un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede tener efectos antiinflamatorios y/o antialérgicos potencialmente beneficiosos incluyen enfermedades inflamatorias y/o alérgicas del tracto respiratorio, tales como rinitis alérgica u otras enfermedades tales como bronquitis (incluyendo bronquitis crónica), asma (incluyendo reacciones asmáticas inducidas por alérgenos), enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), sinusitis y rinitis alérgica (estacional y perenne).

Además, los compuestos de fórmula (I) pueden ser de utilidad en el tratamiento de la nefritis, enfermedades de la piel tales como psoriasis, eccema, dermatitis alérgica y reacciones de hipersensibilidad. Además, los compuestos de fórmula (I) pueden ser útiles en el tratamiento de picaduras y mordeduras de insectos.

Los compuestos de fórmula (I) también pueden ser de utilidad en el tratamiento de la poliposis nasal, la conjuntivitis o el prurito.

Una enfermedad de interés particular es la rinitis alérgica.

Otras enfermedades en las que la histamina puede tener un papel fisiopatológico incluyen la rinitis no alérgica y también enfermedades del tracto gastrointestinal tales como enfermedades inflamatorias intestinales, incluyendo la enfermedad inflamatoria del intestino (por ejemplo, enfermedad de Crohn o colitis ulcerosa), y enfermedades inflamatorias intestinales secundarias a la exposición a radiación o a la exposición a alergeno.

Los expertos en la materia apreciarán que las referencias en el presente documento a tratamiento o terapia abarcan la profilaxis, así como al tratamiento de afecciones establecidas.

Como se ha mencionado anteriormente, los compuestos de fórmula (I) pueden ser útiles como agentes terapéuticos. Por lo tanto, se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia.

En otra realización, se proporciona un compuesto que es ácido 3-[8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-6-(fenilmetil)-2-quinolinil]propanoico o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo para su uso en terapia.

En una realización, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de cualquiera de las enfermedades ante-
riores.

En otra realización, se proporciona el uso de un compuesto que es ácido 3-[8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-6-(fenilmetil)-2-quinolinil]propanoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de cualquiera de las enfermedades anteriores.

La divulgación proporciona un procedimiento para el tratamiento de cualquiera de las enfermedades anteriores, en un sujeto humano o animal que lo necesite, comprendiendo dicho procedimiento administrar una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La divulgación proporciona un procedimiento para el tratamiento de cualquiera de las enfermedades anteriores, en un sujeto humano o animal que lo necesite, comprendiendo dicho procedimiento administrar una cantidad eficaz de un compuesto que es ácido 3-[8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil}-1-piperazinil}-6-(fenilmetil)-2-quinolinil]propanoico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Cuando se usan en terapia, los compuestos de fórmula (I) o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos pueden formularse típicamente en una composición adecuada. Dichas composiciones pueden prepararse usando procedimientos convencionales.

Por lo tanto, se proporciona una composición que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, opcionalmente con uno o más vehículos y/o excipientes farmacéuticamente acepta-
bles.

Se proporciona además una composición que comprende un compuesto que es ácido 3-[8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-6-(fenilmetil)-2-quinolinil]propanoico o una sal farmacéuticamente del mismo, opcionalmente con uno o más vehículos y/o excipientes farmacéuticamente aceptables.

Una composición que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que puede prepararse por mezcla, convenientemente a temperatura ambiente y presión atmosférica, puede ser adecuada para su administración tópica (que incluye la administración epicutánea, por inhalación, intranasal u ocular), administración por vía enteral (que incluye la administración por vía oral o rectal) o administración por vía parenteral (tal como por inyección o infusión). Son de interés composiciones que comprenden un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, adecuadas para su administración tópica, particularmente adecuadas para su administración por vía intranasal.

Generalmente, las composiciones pueden estar en forma de soluciones o suspensiones (acuosas o no acuosas), comprimidos, cápsulas, preparaciones líquidas orales, polvos, gránulos, grageas, lociones, cremas, pomadas, geles, espumas, polvos reconstituibles o supositorios, según sea necesario para la vía de administración.

Generalmente, las composiciones que comprenden un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo pueden contener de aproximadamente el 0,1% al 99% (p/p), tal como de aproximadamente el 10 al 60% (p/p) (basándose en el peso total de la composición), del compuesto de fórmula (I) o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo, dependiendo de la vía de administración. La dosis del compuesto usado en el tratamiento de las enfermedades mencionadas anteriormente variará del modo habitual con la gravedad de las enfermedades, el peso del que las padece y otros factores similares. Sin embargo, como normal general, las dosis unitarias adecuadas pueden ser de aproximadamente 0,05 a 1000 mg, por ejemplo de aproximadamente 0,05 a 200 mg, y dichas dosis unitarias pueden administrarse más de una vez al día, por ejemplo, de dos a tres veces al día o según se desee.

Dicha terapia puede prolongarse durante varias semanas o meses.

La proporción del compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en una composición tópica dependerá del tipo exacto de composición a preparar y de la vía de administración particular, pero generalmente estará en el intervalo de aproximadamente el 0,001 al 10% (p/p), basándose en el peso total de la composición. Generalmente, sin embargo, para la mayoría de los tipos de preparaciones, la proporción usada estará en el intervalo de aproximadamente el 0,005 al 1% (p/p), tal como de aproximadamente el 0,01 al 1% (p/p), por ejemplo, de aproximadamente el 0,01 al 0,5% (p/p), basándose en el peso total de la composición. Sin embargo, en polvos para administración por inhalación la proporción usada estará generalmente en el intervalo de aproximadamente el 0,1 al 5% (p/p), basándose en el peso total de la composición.

Generalmente, las composiciones adecuadas para su administración intranasal o por inhalación pueden formularse convenientemente como aerosoles, soluciones, suspensiones, gotas, geles o polvos secos, opcionalmente con uno o más vehículos y/o excipientes farmacéuticamente aceptables, tales como vehículos acuosos o no acuosos, agentes espesantes, agentes de ajuste de la isotonicidad, antioxidantes y/o conservantes.

Para composiciones adecuadas para su administración intranasal o por inhalación, el compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede tener típicamente una forma de tamaño de partícula reducido que puede prepararse por técnicas convencionales, por ejemplo, micronización y molienda. Generalmente, el compuesto de fórmula (I) de tamaño reducido (por ejemplo, micronizado), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, puede definirse por un valor D_{50} de aproximadamente 0,5 a 10 micrómetros, tal como de aproximadamente 2 a 4 micrómetro (por ejemplo, según se mide usando difracción de láser).

En un aspecto, las composiciones que comprenden un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo son adecuadas para su administración intranasal. Las composiciones intranasales que comprenden un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo pueden permitir que el compuesto o compuestos se suministren a todas las áreas de las cavidades nasales (el tejido diana) y, además, pueden permitir que el compuesto o compuestos permanezcan en contacto con el tejido diana durante periodos de tiempo más prolongados. Un régimen de dosificación adecuado para composiciones intranasales sería que el paciente inhale lentamente a través de la nariz después de que se despeje la cavidad nasal. Durante la inhalación, la composición se administraría a un orificio nasal mientras que el otro se comprime manualmente. Después este procedimiento se repetiría para el otro orificio nasal. Típicamente, se administrarían una o dos pulverizaciones por orificio nasal mediante el procedimiento anterior hasta de dos a tres veces al día, idealmente una vez al día. Son de interés particular composiciones intranasales adecuadas para su administración una vez al día.

Las composiciones intranasales pueden contener opcionalmente uno o más agentes de suspensión, uno o más conservantes, uno o más agentes humectantes y/o uno o más agentes de ajuste de la isotonicidad, según se desee. Las composiciones adecuadas para su administración intranasal pueden contener además opcionalmente otros excipientes, tales como antioxidantes (por ejemplo, metabisulfito sódico), agentes de enmascaramiento del sabor (tales como mentol) y agentes edulcorantes (por ejemplo dextrosa, glicerol, sacarina y/o sorbitol).

El agente de suspensión, si se incluye, estará presente típicamente en la composición intranasal en una cantidad de entre aproximadamente el 0,1 y el 5% (p/p), tal como de entre aproximadamente el 1,5% y el 2,4% (p/p), basándose en el peso total de la composición. Los ejemplos de agentes de suspensión incluyen Avicel®, carboximetilcelulosa, veegum, tragacanto, bentonita, metilcelulosa y polietilenglicoles, por ejemplo celulosa microcristalina o carboximetilcelulosa sódica. También pueden incluirse agentes de suspensión en composiciones adecuadas para su administración por inhalación, ocular y oral, según sea apropiado.

Con fines de estabilidad, las composiciones intranasales que comprenden un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo pueden protegerse de la contaminación y crecimiento microbiano o fúngico por inclusión de un conservante. Los ejemplos de agentes antimicrobianos o conservantes farmacéuticamente aceptables pueden incluir compuestos de amonio cuaternario (por ejemplo, cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, cetrimida y cloruro de cetilpiridinio), agentes mercuriales (por ejemplo, nitrato fenilmercúrico, acetato fenilmercúrico y timerosal), agentes alcohólicos (por ejemplo, clorobutanol, alcohol feniletílico y alcohol bencílico), ésteres antibacterianos (por ejemplo, ésteres de ácido para-hidroxibenzoico), agentes quelantes tales como etilendiaminotetraacetato disódico (EDTA) y otros agentes antimicrobianos tales como clorhexidina, clorocresol, ácido sórbico y sus sales (tales como sorbato de potasio) y polimixina. Los ejemplos de agentes antifúngicos o conservantes farmacéuticamente aceptables pueden incluir benzoato de sodio. El conservante, si se incluye, puede estar presente en una cantidad de entre aproximadamente el 0,001 y el 1% (p/p), tal como de aproximadamente el 0,015% (p/p), basándose en el peso total de la composición. Los conservantes pueden incluirse en composiciones adecuadas para otras vías de administración, según sea apropiado.

Las composiciones que contienen un medicamento suspendido pueden incluir un agente humectante farmacéuticamente aceptable que funcione humedeciendo las partículas de medicamento para facilitar la dispersión de las mismas en la fase acuosa de la composición. Típicamente, la cantidad de agente humectante usada no provocará la formación de espuma de la dispersión durante la mezcla. Los ejemplos de agentes humectantes incluyen alcoholes, ésteres y éteres grasos, tales como monooleato de polioxietilen (20) sorbitán (Polisorbato 80). El agente humectante puede estar presente en composiciones intranasales en una cantidad de entre aproximadamente el 0,001 y el 0,05% (p/p), por ejemplo de aproximadamente el 0,025% (p/p), basándose en el peso total de la composición. Los agentes humectantes pueden incluirse en composiciones adecuadas para otras vías de administración, por ejemplo, para administración por inhalación y/o ocular, según sea apropiado.

Puede incluirse un agente de ajuste de la isotonicidad para lograr la isotonicidad con los fluidos corporales, por ejemplo, fluidos de la cavidad nasal, dando como resultado niveles reducidos de irritación. Los ejemplos de agentes de ajuste de la isotonicidad incluyen cloruro sódico, dextrosa, xilitol y cloruro cálcico. Un agente de ajuste de la isotonicidad puede incluirse en composiciones intranasales en una cantidad de entre aproximadamente el 0,1 y el 10% (p/p), tal como de aproximadamente el 5,0% (p/p), basándose en el peso total de la composición. Los agentes de ajuste de la isotonicidad también pueden incluirse en composiciones adecuadas para otras vías de administración, por ejemplo, en composiciones adecuadas para su administración por inhalación, ocular, líquida oral y parenteral, según sea apropiado.

Además, las composiciones intranasales que comprenden un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo pueden tamponarse por adición de agentes tamponantes adecuados tales como citrato sódico, ácido cítrico, fosfatos tales como fosfato disódico (por ejemplo, las formas de dodecahidrato, heptahidrato, dihidrato y anhidra) o fosfatos sódico y mezclas del mismo. También pueden incluirse agentes tamponantes en composiciones adecuadas para otras vías de administración, según sea apropiado.

Las composiciones para su administración por vía tópica en la nariz o el pulmón, .por ejemplo, para el tratamiento de la rinitis, incluyen composiciones de aerosol presurizado y composiciones acuosas suministradas a las cavidades nasales mediante una bomba presurizada. Son de interés particular composiciones que no están presurizadas y que están adaptadas para administrarse por vía tópica a la cavidad nasal. Las composiciones adecuadas contienen agua como diluyente o vehículo con este fin. Las composiciones acuosas para su administración en el pulmón o la nariz pueden estar provistas de excipientes convencionales tales como agentes tamponantes, agentes modificadores de la tonicidad y similares. Las composiciones acuosas también pueden administrarse en la nariz por nebulización.

Típicamente, puede usarse un dispensador de líquido para suministrar una composición líquida a las cavidades nasales. La composición líquida puede ser acuosa o no acuosa, pero típicamente es acuosa. Dicho dispensador de líquido puede tener una boquilla dispensadora u orificio dispensador a través del cual se dispensa una dosis medida de la composición líquida tras la aplicación de una fuerza aplicada por el usuario a un mecanismo de bomba del dispensador de líquido. Dichos dispensadores de líquidos están provistos generalmente de un depósito de múltiples dosis medidas de la composición líquida, pudiendo dispensarse las dosis tras accionamientos secuenciales de la bomba. La boquilla u orificio dispensador puede estar configurado para su inserción en los orificios nasales del usuario para dispensar por pulverización la composición líquida en la cavidad nasal. Un dispensador de líquido del tipo mencionado anteriormente se describe y se ilustra en el documento WO05/044354, cuyo contenido completo se incorpora por la presente en el presente documento por referencia. El dispensador tiene una carcasa que aloja un dispositivo de descarga de líquido que tiene una bomba de compresión montada sobre un recipiente que contiene una composición líquida. La carcasa tiene al menos una palanca lateral accionable con el dedo que puede moverse hacia dentro con respecto a la carcasa para actuar como leva para mover el recipiente hacia arriba en la carcasa para provocar que la bomba comprima y bombee una dosis medida de la composición desde un vástago de bomba a través de una boquilla nasal de la carcasa. En una realización, el dispensador de líquido es del tipo general ilustrado en las Figuras 30-40 del documento WO05/044354.

En un aspecto, se proporciona una composición intranasal que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En otro aspecto, dicha composición intranasal es una composición sin cloruro de benzalconio.

La administración por inhalación implica la administración tópica en el pulmón, tal como mediante una composición de aerosol o de polvo seco.

Las composiciones de aerosol adecuadas para su administración por inhalación pueden comprender una solución o suspensión fina del compuesto en un disolvente acuoso o no acuoso farmacéuticamente aceptable. Las composiciones de aerosol adecuadas para inhalación pueden ser una suspensión o una solución y generalmente contienen un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un propulsor adecuado tal como un fluorocarbono o clorofluorocarbono que contiene hidrógeno, o mezclas de los mismos, tales como hidrofluoroalcanos, por ejemplo, 1,1,1,2-tetrafluoroetano, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoro-n-propano o una mezcla de los mismos. La composición de aerosol puede contener opcionalmente excipientes adicionales bien conocidos en la técnica tales como tensioactivos o codisolventes. Los ejemplos de tensioactivos incluyen, pero sin limitación, ácido oleico, lecitina, un ácido oligoláctico o derivado, por ejemplo, como se describe en los documentos WO94/21229 y WO98/34596. Un ejemplo de un codisolvente incluye, pero sin limitación, etanol. Las composiciones de aerosol pueden presentarse en cantidades individuales o multidosis en forma estéril en un recipiente cerrado herméticamente que puede adoptar la forma de un cartucho o recarga para su uso con un dispositivo atomizador o inhalador. Como alternativa, el recipiente cerrado herméticamente puede ser un dispositivo dispensador unitario tal como un inhalador nasal de dosis individual o un dispensador de aerosol equipado con una válvula de medición (inhalador de dosis medida), que está destinado a desecharse una vez se ha agotado el contenido del recipiente.

Las composiciones inhalables de polvo seco pueden adoptar la forma de cápsulas y cartuchos de, por ejemplo, gelatina o blísteres de, por ejemplo, papel de aluminio laminado, para su uso en un inhalador o insuflador. Pueden formularse composiciones tales que comprendan una mezcla en polvo de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y una base en polvo adecuada tal como lactosa o almidón.

Opcionalmente, para composiciones inhalables de polvo seco, una composición adecuada para su administración por inhalación puede incorporarse en una pluralidad de recipientes de dosis cerrados herméticamente (por ejemplo, que comprenden la composición de polvo seco), montados longitudinalmente en una tira o cinta en el interior de un dispositivo de inhalación adecuado. El recipiente puede romperse o abrirse despegando el protector a petición y la dosis de, por ejemplo, la composición de polvo seco puede administrarse por inhalación por medio del dispositivo, tal como el dispositivo DISKUS^{TM} comercializado por GlaxoSmithKline. El dispositivo de inhalación DISKUS^{TM} se describe, por ejemplo, en el documento GB 2242134 A, y en dicho dispositivo se define al menos un recipiente para la composición en forma de polvo (el recipiente o recipientes pueden ser, por ejemplo, una pluralidad de recipientes de dosis cerrados herméticamente montados longitudinalmente en una tira o cinta) entre elementos despegables bien cerrados entre sí; el dispositivo comprende: un medio para definir un puesto de apertura para dicho o recipientes; un medio para despegar los elementos en el puesto de apertura para abrir el recipiente y una salida que comunique con el recipiente abierto, a través de la cual un usuario puede inhalar la composición en forma de polvo desde el recipiente abierto.

Las composiciones de aerosol se disponen típicamente de modo que cada dosis medida o "descarga" de aerosol contiene aproximadamente 20 \mug-2000 \mug, particularmente aproximadamente 20 \mug-500 \mug de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. La administración puede ser una vez al día o varias veces al día, por ejemplo 2, 3, 4 u 8 veces, administrando por ejemplo 1, 2 ó 3 dosis cada vez. La dosis diaria global con un aerosol estará en el intervalo de aproximadamente 100 \mug-10 mg, tal como entre aproximadamente 200 \mug-2000 \mug. La dosis diaria global y la dosis medida suministrada por cápsulas y cartuchos en un inhalador o insuflador serán generalmente del doble de las de composiciones de aerosol.

En otro aspecto, se proporciona una composición que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo que es adecuada para su administración epicutánea. Una composición epicutánea que se aplicará al área afectada, por ejemplo, la piel, mediante una o más aplicaciones al día, puede estar en forma de, por ejemplo, una pomada, una crema, emulsión, una loción, una espuma, un pulverizado, un gel acuoso o una microemulsión. Dichas composiciones pueden contener opcionalmente uno o más agentes solubilizantes, agentes potenciadores de la penetración en la piel, tensioactivos, fragancias, conservantes o agentes emulsionantes.

Por ejemplo, pueden formularse pomadas, cremas y geles con una base acuosa u oleosa con la adición de un agente espesante y/o gelificante y/o disolventes adecuados. Por lo tanto, dichas bases pueden incluir, por ejemplo, agua y/o un aceite tal como parafina líquida o un aceite vegetal tal como aceite de cacahuete o aceite de ricino, o un disolvente tal como polietilenglicol. Los agentes espesantes y agentes gelificantes que pueden usarse de acuerdo con la naturaleza de la base incluyen parafina blanda, estearato de aluminio, alcohol cetoestearílico, polietilenglicoles, grasa de lana, cera de abeja, carboxipolimetileno y derivados de celulosa, y/o monoestearato de glicerilo y/o agentes emulsionantes no iónicos. Pueden formularse lociones con una base acuosa u oleosa y, en general, también contienen uno o más agentes emulsionantes, agentes estabilizantes, agentes de dispersión, agentes de suspensión o agentes espesantes.

En otro aspecto, se proporciona una composición que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo que es adecuada para su administración ocular. Dichas composiciones pueden contener opcionalmente uno o más agentes de suspensión, uno o más conservantes, uno o más agentes humectantes/lubricantes y/o uno o más agentes de ajuste de la isotonicidad. Los ejemplos de agentes humectantes/lubricantes oftálmicos pueden incluir derivados de celulosa, dextrano 70, gelatina, polioles líquidos, alcohol polivinílico y povidona tal como derivados de celulosa y polioles.

En otro aspecto, se proporciona una composición que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo que es adecuada para su administración oral. Los comprimidos y cápsulas para administración oral pueden estar en forma de dosis unitaria y pueden contener excipientes convencionales tales como agentes de unión, cargas, lubricantes para preparación de comprimidos, disgregantes y agentes humectantes aceptables. Los comprimidos pueden recubrirse de acuerdo con procedimientos bien conocidos en la práctica farmacéutica normal.

Las preparaciones líquidas orales pueden estar en forma de, por ejemplo, suspensión acuosa u oleosa, soluciones, emulsiones, jarabes o elixires, o pueden estar en forma de un producto seco para su reconstitución con agua u otro vehículo adecuado antes del uso. Dichas preparaciones líquidas pueden contener aditivos convencionales tales como agentes de suspensión, agentes emulsionantes, vehículos no acuosos (que pueden incluir aceites comestibles), conservantes y si se desea saporíferos o colorantes convencionales.

En otro aspecto, se proporciona una composición que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo que es adecuada para su administración parenteral. Pueden prepararse formas farmacéuticas unitarias líquidas adecuadas para su administración parenteral utilizando un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo estéril que puede ser de base acuosa u oleosa. El compuesto, dependiendo del vehículo y de la concentración usada, puede suspenderse o disolverse en el vehículo. En la preparación de soluciones, el compuesto puede disolverse para inyección y esterilizarse por filtración antes de cargarse en un vial o ampolla adecuada y cerrarse herméticamente. Opcionalmente, pueden disolverse en el vehículo adyuvantes tales como un anestésico local, conservantes y agentes tamponantes. Para aumentar la estabilidad, la composición puede congelarse después de cargarse en el vial y retirarse el agua al vacío. La composición parental liofilizada puede reconstituirse con un disolvente adecuado justo antes de la administración. Pueden prepararse suspensiones parenterales sustancialmente de la misma forma, excepto por que el compuesto se suspende en el vehículo en lugar de disolverse, y por que la esterilización no puede efectuarse por filtración. El compuesto puede esterilizarse por exposición a óxido de etileno antes de la suspensión en un vehículo estéril. Puede incluirse un tensioactivo o agente humectante en la composición para facilitar la distribución uniforme del compuesto.

También pueden usarse composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de fórmula (I) en combinación con, o incluyendo otro o más agentes terapéuticos, por ejemplo, otros agentes antihistamínicos, por ejemplo antagonistas del receptor H4, agentes anticolinérgicos, agentes antiinflamatorios tales como corticosteroides (por ejemplo, propionato de fluticasona, dipropionato de beclometasona, furoato de mometasona, acetónido de triamcinolona, budesonida y furoato de fluticasona); o fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINE) (por ejemplo, cromoglicato sódico, nedocromilo sódico), inhibidores de PDE-4, antagonistas de leucotrieno, inhibidores de la lipooxigenasa, antagonistas de quimiocinas (por ejemplo, CCR3, CCR1, CCR2, CCR4, CCR8, CXCR1, CXCR2), antagonistas de IKK, inhibidores de la iNOS, inhibidores de triptasa y elastasa, antagonistas de integrina beta-2 y agonistas de adenosina 2a; o agentes beta-adrenérgicos (por ejemplo, salmeterol, salbutamol, formoterol, fenoterol, terbutalina y los agonistas beta descritos en los documentos WO 02/66422, WO 02/270490, WO02/076933, WO03/024439 y WO03/072539 y sales de los mismos); o agentes antiinfecciosos, por ejemplo, agentes antibióticos (tales como retapamulina) y agentes antivirales.

Será evidente para un experto en la materia que, cuando sea apropiado, el otro agente o agentes terapéuticos pueden usarse en forma de sales (por ejemplo, como sales de metales alcalinos o de aminas o como sales de adición de ácido), o profármacos, o como ésteres (por ejemplo, ésteres de alquilo inferior), o como solvatos (por ejemplo, hidratos) para optimizar la actividad y/o estabilidad y/o las características físicas (por ejemplo, solubilidad) del agente terapéutico. También será evidente que, cuando sea apropiado, los agentes terapéuticos pueden usarse en forma ópticamente
pura.

Se proporciona, en otro aspecto, una combinación que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo junto con otro o más (tal como uno o dos, por ejemplo uno) agentes terapéuticamente activos, opcionalmente con uno o más vehículos y/o excipientes farmacéuticamente aceptables.

Otros antagonistas de receptores de histamina que pueden usarse en solitario o en combinación con un antagonista doble de receptor H1/H3 incluyen antagonistas (y/o agonistas inversos) del receptor H4, por ejemplo, los compuestos descritos en Jablonowski y col., J. Med. Chem. 46: 3957-3960 (2003).

En otro aspecto, se proporciona una combinación que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un agonista de receptor \beta_{2}-adrenérgico.

Los ejemplos de agonistas de receptor \beta_{2}-adrenérgico incluyen salmeterol (que puede ser un racemato o un solo enantiómero, tal como el enantiómero R), salbutamol (que puede ser un racemato o un solo enantiómero, tal como el enantiómero R), formoterol (que puede ser un racemato o un solo diastereómero tal como el R,R-diastereómero), salmefamol, fenoterol, carmoterol, etanterol, naminterol, clenbuterol, pirbuterol, flerbuterol, reproterol, bambuterol, indacaterol, terbutalina y sales de los mismos, por ejemplo, la sal xinafoato (1-hidroxi-2-naftalenocarboxilato) de salmeterol, la sal sulfato o la base libre de salbutamol o la sal fumarato de formoterol. En una realización, las combinaciones que contienen un compuesto de fórmula (I) pueden incluir agonistas de receptores \beta_{2}-adrenérgicos de acción más prolongada, por ejemplo, compuestos que proporcionan una broncodilatación eficaz durante aproximadamente 12 h o más.

Otros agonistas de receptor \beta_{2}-adrenérgico incluyen los descritos en los documentos WO 02/066422,
WO 02/070490, WO 02/076933, WO 03/024439, WO 03/072539, WO 03/091204, WO 04/016578, WO 2004/022547, WO 2004/037807, WO 2004/037773, WO 2004/037768, WO 2004/039762, WO 2004/039766, WO01/42193 y
WO03/042160.

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Los ejemplos de agonistas de receptor \beta_{2}-adrenérgico incluyen:

\quad

3-(4-{[6-({(2R)-2-hidroxi-2-[4-hidroxi-3-(hidroximetil)fenil]etil}amino)hexil]oxi}butil)bencenosulfonamida;

\quad

3-(3-{[7-({(2R)-2-hidroxi-2-[4-hidroxi-3-hidroximetil)fenil]etil}-amino)heptil]oxi}propil)bencenosulfona- mida;

\quad

4-{(1R)-2-[(6-{2-[(2,8-diclorobencil)oxi]etoxi}hexil)amino]-1-hidroxietil}-2-(hidroxilmetil)fenol;

\quad

4-{(1R)-2-[(6-{4-[3-(ciclopentilsulfonil)fenil]butoxi}hexil)amino]-1-hidroxietil}-2-(hidroxilmetil)fenol;

\quad

N-[2-hidroxil-5-[(1R)-1-hidroxi-2-[[2-4-[[(2R)-2-hidroxi-2-feniletil]amino]fenil]etil]amino]etil]fenil]forma- mida:

\quad

N-2{2-[4-(3-fenil-4-metoxifenil)aminofenil]etil}-2-hidroxi-2-(8-hidroxi-2(1H)-quinolinon-5-il)etilamina; y

\quad

5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-1H-qui- nolin-2-ona.

El agonista de receptor \beta_{2}-adrenérgico puede estar en forma de una sal formada con una ácido farmacéuticamente aceptable seleccionado de ácido sulfúrico, clorhídrico, fumárico, hidroxinaftoico (por ejemplo 1- o 3-hidroxi-2-naftoico), cinámico, cinámico sustituido, trifenilacético, sulfámico, sulfanílico, naftalenoacrílico, benzoico, 4-metoxibenzoico, 2- o 4-hidroxibenzoico, 4-clorobenzoico y 4-fenilbenzoico.

En otro aspecto, se proporciona una combinación que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un agente antiinflamatorio.

Los agentes antiinflamatorios incluyen corticosteroides. Los corticosteroides adecuados que pueden usarse en combinación con los compuestos de fórmula (I) son los corticosteroides orales e inhalados y sus profármacos que tienen actividad antiinflamatoria. Los ejemplos incluyen metilprednisolona, prednisolona, dexametasona, propionato de fluticasona, éster S-fluorometílico del ácido 6\alpha,9\alpha-difluoro-11\beta-hidroxi-16\alpha-metil-17\alpha[(4-metil-1,3-tiazol-5-carbonil)oxi]-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17\beta-carbotioico, éster S-fluorometílico del ácido 6\alpha,9\alpha-difluoro-17\alpha-[(2-furanilcarbonil)oxi]-11\beta-hidroxi-16\alpha-metil-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17\beta-carbotioico (furoato de fluticasona), éster S-(2-oxo-tetrahidro-furan-3S-il) del ácido 6\alpha,9\alpha-difluoro-11\beta-hidroxi-16\alpha-metil-3-oxo-17\alpha-propioniloxi-androsta-1,4-dieno-17\beta-carbotioico, éster S-cianometílico del ácido 6\alpha,9\alpha-difluoro-11\beta-hidroxi-16\alpha-metil-3-oxo-17\alpha-(2,2,3,3-tetrameticiclopropilcarbonil)oxi-androsta-1,4-dieno-17\beta-carbotioico y éster S-fluorometílico del ácido 8\alpha,9\alpha-difluoro-11\beta-hidroxi-16\alpha-metil-17\alpha-(1-meticiclopropilcarbonil)oxi-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17\beta-carbotioico, ésteres de beclometasona (por ejemplo, el éster de 17-propionato o el éster de 17,21-dipropionato), budesonida, flunisolida, ésteres de mometasona (por ejemplo furoato de mometasona), acetónido de triamcinolona, rofleponida, ciclesonida (16\alpha,17-[[(R)-ciclohexilmetilen]bis(oxi)]-11\beta,21-dihidroxi-pregna-1,4-dien-3,20-diona), propionato de butixocort, RPR-106541 y ST-126. Los corticosteroides de interés particular pueden incluir propionato de fluticasona, éster S-fluorometílico del ácido 6\alpha,9\alpha-difluoro-11\beta-hidroxi-16\alpha-metil-17\alpha-[(4-metil-1,3-tiazol-5-carbonil)oxi]3-oxo-androsta-1,4-dieno-17\beta-carbotioico, éster S-fluorometílico del ácido 6\alpha,9\alpha-difluoro-17\alpha[(2-furanilcarbonil)oxi]-11\beta-hidroxi-16\alpha-metil-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17\beta-carbotioico, éster S-cianometílico del ácido 6\alpha,9\alpha-difluoro-11\beta-hidroxi-16\alpha-metil-3-oxo-17\alpha-(2,2,3,3-tetrameticiclopropilcarbonil)oxi-androsta-1,4-dieno-17\beta-carbotioico, éster S-fluorometílico del ácido 6\alpha,9\alpha-difluoro-11\beta-hidroxi-16\alpha-metil-17\alpha-(1-meticiclopropilcarbonil)oxi-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17\beta-carbotioico y furoato de mometasona. En una realización el corticosteroide es éster S-fluorometílico del ácido 6\alpha,9\alpha-difluoro-17\alpha-[(2-furanilcarbonil)oxi]-11\beta-hidroxi-16\alpha-metil-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17b-carbotioico (furoato de fluticasona) o furoato de mometasona.

Se proporciona, en otro aspecto, una combinación que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un corticosteroide tal como propionato de fluticasona o éster S-fluorometílico del ácido 6\alpha,9\alpha-difluoro-17\alpha-[(2-furanilcarbonil)oxi]-11\beta-hidroxi-16\alpha-metil-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17\beta-carbotioico (furoato de fluticasona) o furoato de mometasona. Dichas combinaciones pueden ser de interés particular para su administración intranasal.

En otro aspecto, se proporciona una combinación que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un agonista de glucocorticoide.

Los compuestos no esteroideos que tienen agonismo glucocorticoide que pueden poseer selectividad por la transrepresión sobre la transactivación y que pueden ser útiles en la terapia de combinación incluyen los abarcados en las siguientes patentes y solicitudes de patentes: WO03/082827, WO98154159, WO04/005229, WO04/009017,
WO04/018429, WO03/104195, WO03/082787, WO03/082280, WO031059899, WO03/101932, WO02/02565,
WO01/16128, WO00/66590, WO03/086294, WO041026248, WO031061651, WO03/08277, WO06/000401,
WO06/000398 y WO06/015870.

Los agentes antiinflamatorios también incluyen fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINE).

Los AINE incluyen cromoglicato sódico, nedocromilo sódico, inhibidores de fosfodiesterasa (PDE) (por ejemplo, teofilina, inhibidores de PDE4 o inhibidores mixtos de PDE3/PDE4), antagonistas de leucotrieno, inhibidores de la síntesis de leucotrieno (por ejemplo, montelukast), inhibidores de la iNOS (óxido nítrico sintasa inducible) (por ejemplo, inhibidores orales de la iNOS), antagonistas de IKK, inhibidores de triptasa y elastasa, antagonistas de integrina beta-2 y agonistas o antagonistas del receptor de adenosina (por ejemplo, agonistas de adenosina 2a), antagonistas de citocinas (por ejemplo, antagonistas de quimiocinas tales como antagonistas de CCR1, CCR2, CCR3, CCR4 o CCR8) o inhibidores de la síntesis de citocinas o inhibidores de la 5-lipooxigenasa. Los inhibidores la iNOS incluyen los descritos en los documentos WO93113055, WO98/30537, WO02/50021, WO95/34534 y W099162875.

En otro aspecto, se proporciona una combinación que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un inhibidor de la fosfodiesterasa 4 (PDE4). El inhibidor específico de PDE4 útil en esta realización puede ser cualquier compuesto que se sepa que inhibe la enzima PDE4 o que se descubra que actúa como un inhibidor de PDE4, y que sean sólo inhibidores de PDE4, no compuestos que inhiban otros miembros de la familia de PDE tales como PDE3 y PDE5, además de PDE4.

Los compuestos que pueden ser de interés incluyen ácido cis-4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)ciclohexano-1-carboxílico, 2-carbometoxi-4-ciano-4-(3-ciclopropilmetoxi-4-difluorometoxifenil)ciclohexan-1-ona y cis-[4-ciano-4-(3-ciclopropilmetoxi-4-difluorometoxifenil)ciclohexan-1-ol]. Además, el ácido cis-4-ciano-4-[3-(ciclopentiloxi-4-metoxifenil]ciclohexano-1-carboxílico (también conocido como cilomilast) y sus sales, ésteres, profármacos o formas físicas, que se describen en la patente de Estados Unidos 5.552.438 expedida el 3 de septiembre de 1996.

Otros inhibidores de PDE4 incluyen AWD-12-281 de Elbion (Hofgen, N. y col., 15th EFMC Int. Symp. Med. Chem., (6-10 Sept., Edimburgo) 1998, Abst. P. 98; Nº referencia CAS 247584020-9); un derivado de 9-benciladenina denominado NCS-613 (INSERM); D-4418 de Chiroscience y Schering-Plough; un inhibidor de PDE4 de benzodiazepina identificado como Cl-1018 (PD-168787) y atribuido a Pfizer; un derivado de benzodioxol descrito por Kyowa Hakko en el documento WO99/16765; K-34 de Kyowa Hakko; V-11294A de Napp (Landells, L. J. y col., Eur. Resp. J. [Ann. Cong. Eur. Resp. Soc. (19-23 Sept., Ginebra) 1998] 1998, 12 (Supl. 28): Abst P2393); roflumilast (Nº referencia CAS 162401-32-3) y una ftalazinona (documento WO99/47505) de Byk-Gulden; Pumafentrina, (-)-p-[(4aR*,10bS*)-9-etoxi-1,2,3,4,4a,10b-hexahidro-8-metoxi-2-metilbenzo[c][1,6]naftiridin-6-il]-N,N-diisopropilbenzamida, que es un inhibidor mixto de PDE3/PDE4 que se ha preparado y publicado por Byk-Gulden, actualmente Altana; arofilina, en desarrollo por Almirall-Prodesfarma; VM554/UM565 de Vemalis; o T-440 (Tanabe Seiyaku; Fuji, K. y col., J. Pharmacol. Exp. Ther., 284 (1): 162, (1998)) y T2585.

Se describen compuestos adicionales que pueden ser de interés en las solicitudes de patente internacional publicadas WO04/024728 (Glaxo Group Ltd), documento WO04/056823 (Glaxo Group Ltd) y documento WO041103998 (Glaxo Group Ltd).

En otro aspecto, se proporciona una composición que comprende un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un agente anticolinérgico.

Son agentes anticolinérgicos los compuestos que actúan como antagonistas en los receptores muscarínicos, en particular los compuestos que son antagonistas de los receptores M_{1} o M_{3}, antagonistas dobles de los receptores M_{1}/M_{3} o M_{2}/M_{3} o pan-antagonistas de los receptores M_{1}/M_{2}/M_{3}. Los compuestos ejemplares para su administración por inhalación incluyen ipratropio (por ejemplo, como el bromuro, CAS 22254-24-6, comercializado con el nombre de Atrovent), oxitropio (por ejemplo, como el bromuro, CAS 30286-75-0) y tiotropio (por ejemplo, como el bromuro, CAS 136310-93-5, comercializado con el nombre de Spiriva). También es de interés el revatropato (por ejemplo, como el bromhidrato, CAS 262586-79-8) y LAS-34273, que se describe en el documento WO01/04118. Los compuestos ejemplares para su administración oral incluyen pirenzepina (por ejemplo, CAS 28797-61-7), darifenacina (por ejemplo, CAS 133099-04-4 o CAS 133099-07-7 para el bromhidrato comercializado con el nombre de Enablex), oxibutinina (por ejemplo, CAS 5633-20-5, comercializado con el nombre de Ditropan), terodilina (por ejemplo, CAS 15793-40-5), tolterodina (por ejemplo, CAS 124937-51-5 o CAS 124937-52-6 para el tartrato, comercializado con el nombre de Detrol), otilonio (por ejemplo, como el bromuro, CAS 26095-59-0, comercializado con el nombre de Spasmomen), cloruro de trospio (por ejemplo, CAS 10405-02-4) y solifenacina (por ejemplo, CAS 242478-37-1 o CAS 242478-38-2, o el succinato también conocido como YM-905 y comercializado con el nombre de Vesicare). Otros agentes anticolinérgicos incluyen compuestos de fórmula (XXI), que se describen en la solicitud de patente de Estados Unidos 60/487981:

13

en la que una orientación particular de la cadena alquilo unida al anillo de tropano es endo; R^{31} y R^{32} se seleccionan, independientemente, entre el grupo constituido por grupos alquilo inferior de cadena lineal o ramificada que tienen, por ejemplo de 1 a 6 átomos de carbono, grupos cicloalquilo que tienen de 5 a 6 átomos de carbono, cicloalquil-alquilo que tiene de 6 a 10 átomos de carbono, 2-tienilo, 2-piridilo, fenilo, fenilo sustituido con un grupo alquilo que no tiene más de 4 átomos de carbono y fenilo sustituido con un grupo alcoxi que no tiene más de 4 átomos de carbono;

X' representa un anión asociado con la carga positiva del átomo de N. X^{-} puede ser, pero sin limitación, cloruro, bromuro, yoduro, sulfato, benceno sulfonato y tolueno sulfonato, incluyendo, por ejemplo:

\quad

bromuro de (3-endo)-3-(2,2-di-2-tieniletenil)-8,8-dimetil-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano;

\quad

bromuro de (3-endo)-3-(2,2-difeniletenil)-8,8-dimetil-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano;

\quad

4-metil bencenosulfonato de (3-endo)-3-(2,2-difeniletenil)-8,8-dimetil-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano;

\quad

bromuro de (3-endo)-8,8-dimetil-3-[2-fenil-2-(2-tienil)etenil]-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano; y/o

\quad

bromuro de (3-endo)-8,8-dimetil-3-[2-fenil-2-(2-piridinil)etenil]-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano.

Otros agentes anticolinérgicos incluyen compuestos de fórmula (XXII) o (XXIII), que se desvelan en la solicitud de patente de Estados Unidos 601511009:

\vskip1.000000\baselineskip

14

\vskip1.000000\baselineskip

en la que:

el átomo de H indicado está en la posición exo;

R^{41-} representa un anión asociado con la carga positiva del átomo de N. R1^{-} puede ser, pero sin limitación, cloruro, bromuro, yoduro, sulfato, bencenosulfonato y toluenosulfonato;

R^{42} y R^{43} se seleccionan independientemente entre el grupo constituido por grupos alquilo inferior de cadena lineal o ramificada (que tienen, por ejemplo, de 1 a 6 átomos de carbono), grupos cicloalquilo (que tienen de 5 a 6 átomos de carbono), cicloalquil-alquilo (que tiene de 6 a 10 átomos de carbono), heterocicloalquilo (que tiene de 5 a 6 átomos de carbono) y N u O como el heteroátomo, heterocicloalquil-alquilo (que tiene de 6 a 10 átomos de carbono) y N u O como el heteroátomo, arilo, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo y heteroarilo opcionalmente sustituido;

R^{44} se selecciona entre el grupo constituido por alquilo (C_{1}-C_{8}), cicloalquilo (C_{3}-C_{12}), heterocicloalquilo (C_{3}-C_{7}), alquilo (C_{1}-C_{6}) cicloalquilo (C_{3}-C_{12}), alquil (C_{1}-C_{6})- heterocicloalquilo (C_{3}-C_{7}), arilo, heteroarilo, alquil (C_{1}-C_{6})-arilo. alquil (C_{1}-C_{6})-heteroarilo, -OR^{45}, -CH_{2}OR^{45}, -CH_{2}OH, -CN, -CF_{3}, -CH_{2}O(CO)R^{48}, -CO_{2}R^{47}, -CH_{2}NH_{2}, -CH_{2}N(R^{47})SO_{2}R^{45}, -SO_{2}N(R^{47})(R^{48}), -CON(R^{47})(R^{48}), -CH_{2}N(R^{48})CO(R^{46}), -CH_{2}N(R^{48})SO_{2}(R^{46}), -CH_{2}N(R^{48}CO_{2}(R^{45}), -CH_{2}N(R^{48})CONH(R^{47});

R^{45} se selecciona entre el grupo constituido por alquilo (C_{1}-C_{6}), alquil (C_{1}-C_{6})-cicloalquilo(C_{3}-C_{12}), alquil (C_{1}-C_{6})-heterocicloalquilo(C_{3}-C_{7}), alquil (C_{1}-C_{6})-arilo, alquil (C_{1}-C_{6})-heteroarilo;

R^{46} se selecciona entre el grupo constituido por alquilo (C_{1}-C_{6}), cicloalquilo (C_{3}-C_{12}), heterocicloalquilo (C_{3}-C_{7}), alquilo (C_{1}-C_{6})-cicloalquilo (C_{3}-C_{12}), alquil (C_{1}-C_{6})-heterocicloalquilo (C_{3}-C_{7}), arilo, heteroarilo, alquil (C_{1}-C_{6})-arilo, alquil (C_{1}-C_{6})-heteroarilo;

R^{47} y R^{48} se seleccionan, independientemente, entre el grupo constituido por H, alquilo (C_{1}-C_{6}), cicloalquilo (C_{3}-C_{12}), heterocicloalquilo (C_{3}-C_{7}), alquil(C_{1}-C_{6})-cicloalquilo (C_{3}-C_{12}), alquil(C_{1}-C_{6})-heterocicloalquilo (C_{3}-C_{7}), alquil (C_{1}-C_{6})-arilo y alquil (C_{1}-C_{6})-heteroarilo, incluyendo, por ejemplo: yoduro de (endo)-3-(2-metoxi-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propionitrilo; (endo)-8-metil-3-(2,2,2-trifenil-etil)-8-aza-biciclo[3.2.1]octano; 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-
2,2-difenil-propionamida; ácido 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propiónico; yoduro de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; bromuro de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propan-1-ol; N-bencil-3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propionamida; yoduro de (endo)-3-(2-carbamoil-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; 1-bencil-3-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]
oct-3-il)-2,2-difenil-propil]-urea; 1-etil-3-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propil]-urea; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propil]acetamida; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo
[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propil]-benzamida; 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-di-tiofen-2-il-propionitrilo; yoduro de (endo)-3-(2-ciano-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; N-[3-
((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propil]-benceno sulfonamida; [3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propil]-urea; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propil]-metano sulfonamida; y/o bromuro de (endo)-3-{2,2-difenil-3-[(1-fenil-metanoil)-amino]-propil}-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano.

Los compuestos anticolinérgicos particulares que pueden usarse incluyen:

\quad

yoduro de (endo)-3-(2-metoxi-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano;

\quad

yoduro de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano;

\quad

bromuro de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano;

\quad

yoduro de (endo)-3-(2-carbamoil-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano;

\quad

yoduro de (endo)-3-(2-ciano-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; y/o

\quad

bromuro de (endo)-3-{2,2-difenil-3-[(1-fenil-metanoil)-amino]-propil}-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano.

Las combinaciones indicadas anteriormente pueden estar presentes convenientemente para usarlas en forma de una composición farmacéutica y por lo tanto como composiciones farmacéuticas que comprenden una combinación como se ha definido anteriormente opcionalmente junto con vehículos y/o excipientes farmacéuticamente aceptables.

Los compuestos individuales de estas combinaciones pueden administrarse secuencialmente en composiciones farmacéuticas separadas así como simultáneamente en composiciones farmacéuticas combinadas. Los ingredientes terapéuticamente activos adicionales pueden suspenderse en la composición junto con un compuesto de fórmula (I). Las dosis apropiadas de agentes terapéuticos conocidos se apreciarán fácilmente por los expertos en la materia.

Los compuestos de la invención pueden prepararse por los procedimientos que se describen a continuación o por procedimientos similares. Por lo tanto, los siguientes Intermedios y Ejemplos sirven para ilustrar la preparación de los compuestos de la invención, y no deben considerarse como limitantes del ámbito de la invención de ningún modo.

\vskip1.000000\baselineskip

Experimentos generales

A lo largo de los ejemplos, se usan las siguientes abreviaturas:

DCM:

diclorometano

DMF:

N,N-dimetilformamida

EtOAc:

acetato de etilo

DMSO:

dimetilsulfóxido

MeOH:

metanol

THF:

tetrahidrofurano

MgSO_{4}:

sulfato de magnesio

Et_{3}N:

trietilamina

B-Bencil-9-BBN:

B-Bencil-9-borabiciclononano

CLEM:

Cromatografía Líquida Espectrometría de Masas

MDAP:

HPLC Auto-Preparativa Dirigida a Masas

HPLC:

Cromatografía Líquida de Alta Resolución

TR:

tiempo de retención

h:

hora(s)

min:

minuto(s)

Gel de sílice ultrarrápida se refiere a Merck Art Nº 9385; gel de sílice se refiere a Merck Art Nº 7734.

\newpage

\global\parskip1.000000\baselineskip

Los cartuchos SCX son columnas de Intercambio Iónico SPE en las que la fase estacionaria es ácido benceno sulfónico polimérico. Éstas se usan para aislar aminas.

Los cartuchos SCX2 son columnas de Intercambio Iónico SPE en las que fase estacionaria es ácido propilsulfónico polimérico. Éstas se usan para aislar aminas.

Las soluciones orgánicas se secaron sobre sulfato magnésico o sódico.

La CLEM se realizó sobre una columna Supelcosil LCABZ+PLUS (3,3 cm x 4,6 mm de DI) eluyendo con HCO_{2}H al 0,1% y acetato amónico 0,01 M en agua (disolvente A) y HCO_{2}H al 0,05% y agua al 5% en acetonitrilo (disolvente B), usando el siguiente gradiente de elución 0,0-7 min 0% de B. 0,7-4,2 min 100% de B, 4,2-5,3 min 0% de B, 5,3-5,5 min 0% de B a un caudal de 3 ml/min. Los espectros de masas se registraron en un espectrómetro Fisons VG Platform usando modo de electronebulización positivo y negativo (ES+vo y ES-vo).

El Flashmaster II es un sistema de cromatografía ultrarrápida multi-usuario automatizada, disponible en Argonaut Technologies Ltd, que utiliza cartuchos SPE desechables de fase normal (de 2 g a 100 g). Proporciona mezcla de disolvente en línea cuaternaria para permitir la realización de procedimientos en gradiente. Las muestras se ponen en cola usando el programa informático de acceso abierto multifuncional, que manipula disolventes, caudales, perfiles de gradientes y condiciones de recolección. El sistema está equipado con un detector de uv de longitud de onda variable Knauer y dos recolectores de fracciones Gilson FC204 que permiten un corte, recolección y rastreo de picos automáticos.

La HPLC autopreparativa dirigida a masas (MDAP) se realizó en un sistema Waters FractionLynx compuesto por una bomba Waters 600 con cabezas de bomba extendidas, automuestreador Waters 2700, serie de diodos Waters 996 y recolector de fracciones Gilson 202 en una columna ABZ+ de 10 cm x 2,54 cm de diámetro interno, eluyendo con ácido fórmico al 0,1% en agua (disolvente A) y ácido fórmico al 0,1% en MeCN (disolvente B), usando cuando era apropiado el gradiente de elución durante 15 min a un caudal de 20 ml\cdotmin^{-1} y detectando a 200 - 320 nm a temperatura ambiente. Los espectros de masas se registraron en un espectrómetro de masas Micromass ZMD usando modo de electronebulización positivo y negativo, exploraciones alternas. El programa informático usado fue MassLynx 3.5 con opciones OpenLynx y FractionLynx.

Las reacciones se controlaron de forma rutinaria por procedimientos bien conocidos por los expertos en la materia, tales como TLC, CLEM y/o HPLC. Estos procedimientos se usan para valorar si una reacción se ha completado, y los tiempos de reacción pueden variar en consecuencia.

Los intermedios y compuestos se nombraron usando el programa informático de nombrado químico ACD/Name PRO 6.02 de Advanced Chemistry Developments Inc.; Toronto, Ontario, M5H2L3, Canadá.

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Intermedios

Intermedio 1

6-Bromo-8-fluoro-2-metilquinolina

Se añadieron tolueno (40 ml) y crotonaldehído (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (4,95 ml) a una solución en agitación de 4-bromo-2-fluoroanilina (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (5,7 g) en ácido clorhídrico 5 M (135 ml) y la mezcla resultante se calentó a 100ºC durante 3 h. La mezcla se dejó enfriar y las fases se separaron. La fase acuosa se basificó con una solución 5 M de hidróxido sódico provocando la precipitación de un sólido de color púrpura. Este sólido se recogió por filtración, se lavó con agua, se disolvió en DCM y se cargó sobre un cartucho Flashmaster II de 100 g de sílice. El cartucho se eluyó con un gradiente de EtOAc al 0-100% en ciclohexano durante 60 min. La evaporación del disolvente a partir de las fracciones apropiadas dio el compuesto del título (3,64 g). TR de CLEM = 2,96 min, ES+vo m/z 240/242 [M+H]^{+}.

El disolvente se evaporó de un conjunto adicional de fracciones, dando un residuo que se purificó por Flashmaster II sobre un cartucho de 50 g de sílice usando un gradiente de EtOAc al 0-50% en ciclohexano durante 40 min. La evaporación del disolvente a partir de las fracciones apropiadas dio el compuesto del título (428 mg). TR de CLEM = 2,96 min, ES+vo m/z 240/242 [M+H]^{+}.

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Intermedio 2

6-Bromo-2-metil-8-(1-piperazinil)quinolina

Una mezcla de 6-bromo-e-fluoro-2-metilquinolina (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 1) (1,43 g) y piperazina (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (5,134 g) se calentó a 150ºC por irradiación con microondas en un horno microondas Smith Creator durante 30 min. La mezcla enfriada se repartió entre DCM (50 ml) y agua (50 ml) y la fase orgánica se secó sobre sulfato sódico. La evaporación del disolvente dio el compuesto del título (2,055 g). TR de CLEM = 2,08 min, ES+vo m/z 306/308 [M+H]^{+}.

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Intermedio 3

4-(6-Bromo-2-metil-8-quinolinil)-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

A una mezcla en agitación de 6-bromo-2-metil-8-(1-piperazinil)quinolina (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 2) (2 g), 4-dimetilaminopiridina (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (80 mg) y Et_{3}N (2,73 ml) en acetonitrilo (26 ml) a 0ºC se le añadió una solución de dicarbonato de di-terc-butilo (2,14 g) en acetonitrilo (4 ml). La mezcla se agitó a 0ºC durante 15 min y después a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporó y el residuo se repartió entre DCM (100 ml) y agua (100 ml). La fase orgánica se secó sobre MgSO_{4} y el disolvente se evaporó. El residuo se purificó por Flashmaster II sobre un cartucho de 100 g de sílice usando EtOAc al 0-100% en DCM durante 40 min. La evaporación del disolvente a partir de las fracciones apropiadas dio el compuesto del título (2,1708 g). TR de CLEM = 3,78 min, ES+vo m/z 406/408 [M+H]^{+}.

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Intermedio 4

4-(6-Bromo-2-formil-8-quinolinil)-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

A una solución en agitación de dióxido de selenio (494 mg) en 1,4-dioxano (20 ml) a 55ºC en una atmósfera de nitrógeno se le añadió gota a gota durante 2 h una solución de 4-(6-bromo-2-metil-8-quinolinil)-1-piperazina-carboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 3) (1 g) en 1,4-dioxano (7,5 ml). La mezcla resultante se agitó a 80ºC durante una noche, se filtró y se evaporó, dando un residuo que se disolvió en DCM y se cargó sobre un cartucho SPE de 20 g de sílice. El cartucho se eluyó con DCM y el disolvente se evaporó de las fracciones apropiadas, dando el compuesto del título (1,02 g). TR de CLEM = 3,74 min, ES+vo m/z 420/422 [M+H]^{+}.

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Intermedio 5

4-{6-Bromo-2-[(1E-3-(metiloxi)-3-oxo-1-propen-1-il]-8-quinolinil}-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

Una mezcla de 4-(6-bromo-2-formil-8-quinolinil)-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 4) (1 g) y (trifenilfosforanilideno)acetato de metilo (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (875 mg) en THF anhidro (15 ml) se agitó a 65ºC en una atmósfera de nitrógeno durante 18 h. Se añadió una cantidad adicional de iluro (850 mg) y la mezcla se calentó durante 22 h más. La mezcla de reacción se diluyó con tolueno (20 ml) y se cargó sobre un cartucho SPE de 20 g de sílice. El cartucho se eluyó con tolueno y el disolvente se evaporó de las fracciones apropiadas. El residuo se purificó adicionalmente por Flashmaster II sobre un cartucho de 70 g de sílice usando un gradiente de EtOAc al 0-100% en ciclohexano. La evaporación del disolvente a partir de las fracciones apropiadas dio el compuesto del título (802 mg). TR de CLEM = 3,95 min, ES+vo m/z 476/478 [M+H]^{+}.

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Intermedio 6

4-[2-[(1E)-3-(metiloxi)-3-oxo-1-propen-1-il]-6-(fenilmetil)-8-quinolinil]-1-piperazina-carboxilato de 1,1-dimetiletilo

Una mezcla de 4-{6-bromo-2-[(1E)-3-(metiloxi)-3-oxo-1-propen-1-il]-8-quinolinil}-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 5) (200 mg), carbonato potásico (116,1 mg) y cloruro de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) (15,4 mg, 5% en moles) en DMF (1,3 ml) se trató con B-Bencil-9-BBN (1,68 ml de una solución 0,5 M en THF). La mezcla se calentó a 65ºC en un Reactivial^{TM} cerrado herméticamente durante 3 h. Se añadieron cantidades adicionales de cloruro de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]]paladio (II) (15 mg) y B-Bencil-9BBN (1,68 ml de una solución 0,5 M en THF) y la mezcla se agitó durante 92 h más. El disolvente se evaporó de la mezcla de reacción, dando el compuesto del título que se usó sin purificación adicional. TR de CLEM = 4,01 min, ES+vo m/z 488 (M+H)^{+}.

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Intermedio 7

(2E)-3-[6-(Fenilmetil)-8-(1-piperazinil)-2-quinolinil]-2-propenoato de metilo

Una solución de 4-[2-(1E)-3-(metiloxi)-3-oxo-1-propen-1-il]-6-(fenilmetil)-8-quinolinil]-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 6) en DCM (10 ml) se trató con ácido trifluoroacético (3 ml) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 20 min. La mezcla se evaporó, dando un residuo que se trató con tolueno y se evaporó de nuevo. El residuo se disolvió en una cantidad mínima de MeOH y se cargó sobre un cartucho de intercambio iónico SCX acondicionado con MeOH (20 g). El cartucho se eluyó con MeOH (3 volúmenes de columna) y después con amoniaco 2 M en MeOH (3 volúmenes de columna). La evaporación del disolvente de las fracciones que contenían amoniaco dio una muestra en bruto del compuesto del título que se usó sin purificación adicional. TR de CLEM = 2,65 min, ES+vo m/z 388 [M+H]^{+}.

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Intermedio 8

3-[6-(Fenilmetil)-8-(1-piperazinil)-2-quinolinil]propanoato de metilo

Una mezcla de (2E)-3-[6-(fenilmetil)-8-(1-piperazinil)-2-quinolinil]-2-propenoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 7), ácido acético (1 ml) y paladio al 10% sobre carbón (200 mg) en EtOAc (25 ml) se hidrogenó a presión atmosférica durante 2 h. La mezcla de reacción se filtró a través de celite y el disolvente se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida Biotage sobre un cartucho 12M KP-Sil eluyendo con 5% de (amoniaco 2 M en MeOH) en DCM. La evaporación del disolvente a partir de las fracciones apropiadas dio una muestra en bruto del compuesto del título (55 mg). TR de CLEM = 2,57 min, ES+vo m/z 390
[M+H]^{+}.

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Intermedio 9

3-[8-{4-[2-({[3-(Hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-6-(fenilmetil)-2-quinolinil]propanoato de metilo

Una mezcla de 3-[6-(fenilmetil)-8-(1-piperazinil)-2-quinolinil]propanoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 8) (55 mg), bicarbonato sódico (25 mg) y metanosulfonato de 2-(4-{[3-(hexahidro-1H azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 15) (50 mg) en acetonitrilo (1,5 ml) se calentó a 80ºC en una atmósfera de nitrógeno durante 65 h. La mezcla de reacción se filtró y se evaporó. El residuo se disolvió en MeOH - DMSO (1:1, 2 ml) y se purificó por MDAP. La evaporación del disolvente a partir de las fracciones apropiadas dio el compuesto del título (33 mg). TR de CLEM = 2,51 min, ES+vo m/z 649
[M+H]^{+}.

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Intermedio 10

4-{6-Etil-2-[(1E)-3-(metiloxi)-3-oxo-1-propen-1-il]-8-quinolinil}-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

Una mezcla de 4-{6-bromo-2-[(1E)-3-(metiloxi)-3-oxo-1-propen-1-il}-8-quinolinil)-1-piperazincarboxilato de
1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 5) (200 mg), carbonato potásico (116,1 mg) y cloruro de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) (15,4 mg, al 5% en moles) en DMF (1,3 ml) se trató con trietilborano (0,84 ml de una solución 1,0 M en THF). La mezcla se calentó a 65ºC en un Reactivial^{TM} cerrado herméticamente durante 3 h. Se añadieron cantidades adicionales de cloruro de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]]paladio (II) (15 mg) y trietilborano (0,84 ml de una solución 1,0 M en THF) y la mezcla se agitó durante 92 h más. El disolvente se evaporó de la mezcla de reacción y el residuo se disolvió en DCM y se cargó sobre un cartucho de sílice Flashmaster (20 g). El cartucho se eluyó con un gradiente de EtOAc al 0-100% en ciclohexano durante 40 min. Las fracciones apropiadas se combinaron y el disolvente se evaporó, dando el compuesto del título (98 mg). TR de CLEM = 3,91 min, ES+vo m/z 426 [M+H]^{+}.

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Intermedio 11

3-[6-Etil-8-(1-piperazinil)-2-quinolinil]propanoato de metilo

Una solución de 4-{8-etil-2-[(1E)-3-(metiloxi)-3-oxo-1-propen-1-il}-8-quinolinil}-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 10) (97 mg) en DCM (10 ml) se trató con ácido trifluoroacético (2 ml) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 1 h. La mezcla se evaporó, dando un residuo que se trató con tolueno y se evaporó de nuevo. El residuo se disolvió en una mezcla de EtOAc (20 ml) y ácido acético (1 ml) y se hidrogenó a presión atmosférica en presencia de paladio al 10% sobre carbón (100 mg) durante 1 h. La mezcla de reacción se filtró a través de un cartucho de sílice y el filtrado se evaporó. El residuo se disolvió en MeOH y se cargó sobre un cartucho de intercambio iónico SCX acondicionado con MeOH (10 g). El cartucho se eluyó con MeOH y después con amoniaco 2 M en MeOH. La evaporación del disolvente de las fracciones que contenían amoniaco dio el compuesto del título (73 mg). TR de CLEM = 2,22 min, ES+vo m/z 328 [M+H]^{+}.

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Intermedio 12

3-(6-Etil-8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)propanoato de metilo

Una mezcla de 3-[6-(etil)-8-(1-piperazinil)-2-quinolinil]propanoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 11) (72,9 mg), bicarbonato sódico (50 mg) y metanosulfonato de 2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 15) (80 mg) en acetonitrilo (2 ml) se calentó con agitación a 80ºC durante 20 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (10 ml) y se añadió resina de MP-isocianato (200 mg, carga = 1,58 mmol/g). La mezcla se agitó durante 4 h, se filtró y se evaporó para dar una muestra en bruto del compuesto del título que se usó sin purificación adicional.

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Intermedio 13

2-{4-[(3-Cloropropil)oxi]fenil}etanol

Se disolvió 4-(2-hidroxietil)fenol) (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (10 g, 72 mmol) en 2-butanona (250 ml), después se añadió carbonato potásico (19,9 g, 0,144 mol), luego se añadió 1-bromo-3-cloropropano (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (8,54 ml, 0,144 mol) y la mezcla de reacción se calentó a 80ºC durante 18 h. La mezcla de reacción enfriada se diluyó con agua (500 ml), las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 200 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO_{4}), se evaporaron al vacío y se purificaron por Flashmaster (3 x cartuchos de 100 g de sílice) eluyendo con EtOAc al 0-100%-ciclohexano durante 40 min, dando el compuesto del título (14,12 g). TR de CLEM = 2,84 min ES+vo m/z 232
(M+NH_{4})^{+}.

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Intermedio 14

2-(4-{[3-(Hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etanol

Una solución de 2-{4-[(3-cloropropil)oxi]fenil}etanol (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 13) (14 g, 0,065 mol) en 2-butanona (200 ml) se trató con carbonato potásico (17,96 g, 0,13 mol), yoduro potásico (1,24 g, 7,5 mmol) y hexahidro-1H-azepina (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (14,71 ml, 0,1308 mol) y se calentó a 80ºC en una atmósfera de nitrógeno durante 18 h. La mezcla de reacción enfriada se diluyó con agua (300 ml), las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 200 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron al vacío, dando un aceite de color amarillo (23 g). Una porción de éste (10 g) se purificó por Flashmaster (cartucho de 100 g de sílice), eluyendo con EtOAc al 0-100%-ciclohexano durante 15 min, después con EtOAc al 100% durante 10 min, después con 0-10% de (amoniaco ac. al 10%-MeOH)-DCM durante 15 min y después con 10% de (amoniaco ac. al 10%-MeOH) - DCM durante 10 min, dando el compuesto del título (5,3 g). TR de CLEM =1,9 min, ES+vo m/z 278 (M+H)^{+}.

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Intermedio 15

Metanosulfonato de 2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etilo

Una solución de 2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etanol (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 14) (80 mg, 0,29 mmol) en DCM (2 ml) y diisopropiletilamina (0,06 ml, 0,34 mmol) se trató con cloruro de metanosulfonilo (0,026 ml, 0,34 mmol) a 20ºC y la mezcla se agitó durante 2 h. La solución se diluyó con DCM (10 ml) y una solución saturada de bicarbonato sódico (10 ml) y las fases se separaron usando una frita hidrófoba. La fase orgánica se concentró a presión reducida, dando el compuesto del título (0,101 g, 100%). TR de CLEM = 2,18 min, ES+vo m/z 356 (M+H)^{+}.

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Intermedio 16

4-[2-(4-{[(1,1-Dimetiletil)(dimetil)silil]oxi}fenil)etil]-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

Una solución de N-terc-butoxicarbonilpiperazina (disponible en el mercado, por ejemplo, en Lancaster) (75,74 g, 407 mmol) en acetonitrilo (500 ml) se trató con bicarbonato sódico (45,57 g, 542 mmol) y la mezcla se agitó durante 15 min. A la mezcla se le añadió una solución de metanosulfonato de 2-(4-{[(1,1-dimetiletil)(dimetil)silil]oxi}fenil)etilo (desvelado en el documento WO 2003091204; véase la página 61, Ejemplo 28 parte (ii)) (103,32 g, 313 mmol) en acetonitrilo (600 ml) durante 20 min y se calentó a reflujo en una atmósfera de nitrógeno durante 23 h. El análisis por HPLC indicó la presencia de 9% de material de partida y la mezcla se calentó a reflujo durante 19 h más. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente y el acetonitrilo se retiró a presión reducida. El residuo se repartió entre EtOAc (500 ml) y agua (500 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (100 ml) y las soluciones orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (4 x 50 ml), se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía sobre sílice eluyendo con EtOAc-ciclohexano (de 1:4 a 1:1), dando el compuesto del título (101,7 g) RMN \delta (CDCl_{3}) 7,05 (2H, d), 6,76 (2H, d), 3,48-3,44 (4H, m), 2,76-2,71 (2H, m), 2,60-2,54 (2H, m), 2,49-2,43 (4H, m), 1,47 (9H, s), 0,98 (9H, s), 0,19 (6H, s) y un lote menos puro (5,5 g).

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Intermedio 17

4-[2-(4-Hidroxifenil)etil]-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

Una solución de 4-[2-(4-{[(1,1-dimetiletil)(dimetil)silil]oxi}fenil)etil]-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 16) (101,7 g, 242 mmol) en THF (1 l) se trató con una solución de fluoruro de tetrabutilamonio en THF (1 M, 266 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h en una atmósfera de nitrógeno. El disolvente se retiró a presión reducida y el residuo se repartió entre agua (300 ml) y EtOAc (300 ml). La cristalización se produjo en el embudo de decantación y los cristales se recogieron por filtración y se lavaron con EtOAc, dando el compuesto del título (29,16 g). El filtrado se repartió entre agua y EtOAc. La fase acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron. El residuo se diluyó con éter dietílico y el sólido resultante se recogió por filtración, dando el compuesto del título (36,39 g) ^{1}H RMN \delta (CDCl_{3}) 7,05 (2H, d, J 8 Hz), 6,75 (2H, d, J 8 Hz) 5,08 (1H, a), 3,48 (4H, m), 2,77-2,71 (2H, m), 2,61-2,55 (2H, m), 2,50-2,45 (4H, m), 1,47 (9H, s).

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Intermedio 18

4-(2-{4-[(3-Cloropropil)oxi]fenil}etil)-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

Una solución de 4-[2-(4-hidroxifenil)etil]-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 17) (36,39 g, 119 mmol) en metil etil cetona (300 ml) se trató con carbonato potásico (18,05 g, 131 mmol) y la mezcla se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Se añadió 1-bromo-3-cloropropano (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (18,1 ml, 183 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante una noche y después se calentó a reflujo durante 24 h más. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente, se diluyó con EtOAc (200 ml) y se lavó cuatro veces con una solución de hidróxido sódico (2 M, 50 ml) y después con salmuera. La solución se secó sobre MgSO_{4} y se evaporó. El residuo (49,12 g) se purificó por cromatografía en columna sobre sílice eluyendo con EtOAc-ciclohexano (1:1), dando el compuesto del título (25,78 g) ^{1}H RMN \delta (CDCl_{3}) 7,12 (2H, d, J 8 Hz), 6,84 (2H, d, J 8 Hz), 4,10 (2H, t, J 6 Hz), 3,75 (2H, t, J 6 Hz), 3,47 (4H, m), 2,78-2,71 (2H, m), 2,60-2,54 (2H, m), 2,46 (4H, m), 2,23 (2H, m), 1,47
(9H, s).

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Intermedio 19

4-[2-(4-{[3-(Hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

Una mezcla de 4-(2-{4-[(3-cloropropil)oxi]fenil}etil)-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 18) (11,5 g, 30 mmol), homopiperazina (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (5,07 ml, 45 mmol), yoduro potásico (0,1 g) y carbonato potásico (8,3 g, 60 mmol) en 2-butanona (100 ml) se calentó a reflujo durante 16 h y después se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se repartió entre DCM y agua. La fase orgánica se secó (frita hidrófoba) y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre un cartucho biotage eluyendo con EtOAc y después con un gradiente de MeOH del 0 al 10% (que contenía Et_{3}N al 1%) en DCM, dando el compuesto del título (11,6 g) TR de CLEM = 1,92 min, ES+vo m/z 446
(M+H)^{+}.

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Intermedio 20

1-[3-({4-[2-(1-Piperazinil)etil]fenil}oxi)propil]hexahidro-1H-azepina

Una solución de 4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazina-carboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 19) (11,6 g, 26,06 mmol) en DCM (100 ml) se trató con ácido trifluoroacético (20 ml) y la mezcla se agitó durante 3 h. Se añadió más cantidad de ácido trifluoroacético (30 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 h más. La mezcla de reacción se concentró al vacío y después se aplicó a un cartucho SCX, se lavó con MeOH y después se eluyó con amoniaco 2 M en MeOH. Las fracciones básicas se concentraron a presión reducida, dando el compuesto del título (9 g). TR de CLEM = 1,1 min, m/z 346
(M+H)^{+}.

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Intermedio 21

(2E)-3-(8-Hidroxi-2-quinolinil)-2-propenoato de etilo

Una solución de bromuro de (etoxicarbonilmetil)trifenilfosfonio (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (5,3 g, 12,3 mmol) en THF anhidro (50 ml) se enfrió a 0ºC en una atmósfera de nitrógeno, después se añadió hidruro sódico (dispersión al 60% en aceite, 0,51 g, 12,7 mmol) y la mezcla se agitó durante 30 min. A la solución anterior se le añadió gota a gota una solución de 8-hidroxiquinolin-2-carboxaldehído (disponible en el mercado, por ejemplo, en Acros) (2,0 g, 11,5 mmol) en THF (50 ml) y la mezcla se agitó durante 1 h. La mezcla se diluyó con agua y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía (Flashmaster) eluyendo con MeOH del 0 al 20% en DCM, dando el compuesto del título (2,19 g) TR de CLEM = 2,82 min y 3,19 min, (1:4, isómeros Z y E), ES+vo m/z 244 (M+H)^{+}.

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Intermedio 22

(2E)-3-(8-{[(Trifluorometil)sulfonil]oxi}-2-quinolinil)-2-propenoato de etilo

Una solución de (2E/Z)-3-(8-hidroxi-2-quinolinil)-2-propenoato de etilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 21) (1 g, 4,11 mmol) en piridina anhidra (5 ml) se enfrió a 0ºC en una atmósfera de nitrógeno. Se añadió anhídrido tríflico (1,04 ml, 6,18 mmol) y la mezcla se agitó a 0ºC durante 45 min. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente, se agitó durante una noche y después se vertió sobre hielo. La mezcla se extrajo con DCM (3 x) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc del 0 al 3% en DCM, dando el compuesto del título (1,86 g) TR de CLEM = 3,57 min ES+vo m/z 376 (M+H)^{+}.

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Intermedio 23

(2E)-3-(8-{4-[2-(4-{[3-(Hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxil}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)-2-propenoato de metilo y (2E)-3-(8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)-2-propenoato de etilo

Una mezcla de 1-[3-({4-[2-(1-piperazinil)etil]fenil}oxi)propil]hexahidro-1H-azepina (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 20) (1,68 g, 4,87 mmol), carbonato de cesio (4,33 g, 13,3 mmol), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (0) (39 mg, 0,097 mmol) y 2-(diciclohexilfosfino)-2'-(N,N-dimetilamino)bifenilo (77 mg, 0,195 mmol) se trató con una solución de (2E)-3-(8-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}-2-quinolinil)-2-propenoato de etilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 22) (1,66 g, 4,43 mmol) en THF anhidro (25 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante una noche en una atmósfera de nitrógeno. El disolvente se retiró a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc, seguido de MeOH del 0 al 10% (que contenía Et_{3}N al 1%)-DCM, dando una mezcla de los compuestos del título (1,68 g). TR de CLEM = 2,13 min ES+vo m/z 557 (M+H)^{+} y TR = 2,22 min ES+vo m/z 571 (M+H)^{+}.

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Intermedio 24

3-(8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)propanoato de metilo y 3-(8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil) propanoato de etilo

Una solución de una mezcla de (2E)-3-(8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-pipera-
zinil}-2-quinolinil)-2-propenoato de metilo y (2E)-3-(8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)-2-propenoato de etilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 23) (400 mg, 0,72 mmol) en EtOAc (15 ml) se hidrogenó sobre paladio al 10% sobre carbono (80 mg) durante una noche. El catalizador se retiró por filtración y el filtrado se evaporó, dando los compuestos del título (370 mg) TR de CLEM = 2,07 min ES+vo m/z 559 (M+H)^{+} y TR = 2,16 min ES+vo m/z 573 (M+H)^{+}.

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Intermedio 26

(2E)-3-(8-Hidroxi-2-quinolinil)-2-propenoato de metilo y (2Z)-3-(8-hidroxi-2-quinolinil)-2-propenoato de metilo

Una solución de 8-hidroxi-2-quinolincarbaldehído (disponible en el mercado, por ejemplo, en Fluka y/o Acros) (3,81 g) en tolueno anhidro (40 ml) se trató en porciones con (carbometoximetileno)trifenilfosforano (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich y/o Alfa Alsar) (7,36 g) y la mezcla resultante se calentó a 50ºC durante 1 h. El disolvente se evaporó y el residuo se disolvió en MeOH y se purificó sobre un cartucho de intercambio iónico SCX-2 de 70 g, dando una mezcla de los compuestos del título (4,98 g). TR de CLEM = 3,09 min, ES+vo m/z 230 [M+H]^{+} y TR = 2,64 min, ES+vo m/z 230 [M+H]^{+}.

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Intermedio 26

3-(8-Hidroxi-2-quinolinil)propanoato de metilo

Una solución de una mezcla de (2E)-3-(8-hidroxi-2-quinolinil)-2-propenoato de metilo y (2Z)-3-(8-hidroxi-2-quinolinil)-2-propenoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 25) (4,98 g) en EtOAc (100 ml) se hidrogenó en presencia de paladio al 10% p/p sobre carbono (3,8 g) durante 1 h. La mezcla de reacción se filtró a través de celite y el disolvente se evaporó, dando el compuesto del título (4,72 g). TR de CLEM = 2,40 min, ES+vo m/z 232 [M+H]^{+}.

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Intermedio 27

3-(8-{[(Trifluorometil)sulfonil]oxi}-2-quinolinil)propanoato de metilo

Una solución de 3-(8-hidroxi-2-quinolinil)propanoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 26) (4,72 g) en DMF (50 ml) se trató con N-fenil bis(trifluorometanosulfonimida) (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (8,75 g) y Et_{3}N (3 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se añadieron cantidades adicionales de N-fenilo, bis(trifluorometanosulfonimida) (3,65 g) y Et_{3}N (1,42 ml) y la mezcla se agitó durante 6 h más. La mezcla de reacción se repartió entre agua y tolueno y la fase orgánica se lavó con salmuera saturada, se secó sobre sulfato sódico anhidro y se evaporó. Una muestra de 4 g del residuo resultante se purificó por Flashmaster II sobre un cartucho de 100 g de sílice usando un gradiente al 0-100% de DCM - ciclohexano. El disolvente se evaporó de las fracciones apropiadas, dando el compuesto del título (1,76 g). TR de CLEM = 3,44 min, ES+vo m/z 364 [M+H]^{+}. Una muestra adicional de 5,5 g del material en bruto se purificó por Flashmaster II sobre un cartucho de 100 g de sílice usando un gradiente de EtOAc al 0-100%-ciclohexano. El disolvente se evaporó de las fracciones apropiadas, dando el compuesto del título (1,70 g). TR de CLEM = 3,43 min, ES+vo m/z 364 [M+H]^{+}. Las fracciones impuras de las dos purificaciones anteriores se combinaron y se purificaron de nuevo por Flashmaster II sobre un cartucho de 100 g de sílice usando un gradiente de EtOAc al 0-50% en ciclohexano. El disolvente se evaporó de las fracciones apropiadas, dando el compuesto del título (2,67 g). TR de CLEM = 3,43 min, ES+vo m/z 364
[M+H]^{+}.

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Intermedio 28

4-{2-[3-(Metiloxi)-3-oxopropil]-8-quinolinil}-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

Una mezcla de 3-(8-{[(trifluorometil)sulfonil]oxi}2-quinolinil)propanoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 27) (417 mg), 1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (235 mg), carbonato de cesio (1,124 g), tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (0) (23 mg) y [2-(diciclohexilfosfino)-2'-(N,N-dimetilamino)]bifenilo (20 mg) en THF (6 ml) se calentó durante una noche a 80ºC en un ReactiVial^{TM}. La reacción se interrumpió mediante la adición de ácido clorhídrico 2 M y después se neutralizó con una solución de bicarbonato sódico. La mezcla se extrajo con DCM y los extractos se lavaron con salmuera saturada, se secaron sobre sulfato sódico anhidro y se evaporaron, dando el compuesto del título (510 mg). TR de CLEM = 3,36 min, ES+vo m/z 400 [M+H]^{+}.

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Intermedio 29

3-[8-(1-Piperazinil)-2-quinolinil]propanoato de metilo

Una solución de 4-{2-[3-(metiloxi)-3-oxopropil]-8-quinolinil}-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (por
ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 28) (510 mg) en DCM (30 ml) se trató con ácido trifluoroacético (5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. El disolvente se evaporó, dando un residuo que se disolvió en MeOH y se purificó sobre un cartucho de intercambio iónico SCX de 10 g, dando el compuesto del título (330 mg). TR de CLEM = 1,99 min, ES+vo m/z 300 [M+H]^{+}.

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Intermedio 30

3-(8-{4-[2-(4-{[3-(Hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil-1-piperazinil}-2-quinolinil)propanoato de metilo

Se añadieron 3-[8-(1-piperazinil)-2-quinolinil]propanoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 29) (93 mg) y bicarbonato sódico (52 mg) a una solución de metanosulfonato de 2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 15) (111 mg) en acetonitrilo (2 ml) y la mezcla resultante se agitó a 80ºC durante una noche. La mezcla se filtró (Varian Bond Elut Reservoir) y se purificó por MDAP, dando el compuesto del título (34 mg). TR de CLEM = 2,20 min, ES+vo m/z 559 [M+H]^{+}.

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Intermedio 31

4-{6-Bromo-2-[3-(metiloxi)-3-oxopropil]-8-quinolinil}-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

A una solución agitada de 4-{6-bromo-2-[(1E)-3-(metiloxi)-3-oxo-1-propen-1-il]-8-quinolinil}-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 5) (2,38 g) en THF (50 ml) se le añadió agua (1,8 ml), seguido de hexámero de hidruro(trifenilfosfina)cobre (I) (2,35 g). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 45 min, después se añadió una cantidad adicional de hexámero de hidruro(trifenilfosfina)cobre (I) (1,18 g) y la agitación se continuó durante 1 h. La mezcla se filtró a través de una capa de celite y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por Flashmaster 11 sobre un cartucho de 100 g de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-50% en ciclohexano durante 40 min. La evaporación del disolvente a partir de las fracciones apropiadas dio el compuesto del título (2,29 g). TR de CLEM = 3,75 min, ES+vo m/z 478/480 [M+H]^{+}.

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Intermedio 32

4-(6-Butil-2-[3-(metiloxi)-3-oxopropil]-8-quinolinil)-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

A una solución agitada de 4-{6-bromo-2-[3-(metiloxi)-3-oxopropil}-8-quinolinil}-1-piperazina-carboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el intermedio 31) (2,06 g) en THF anhidro (25 ml), en una atmósfera de nitrógeno se le añadieron carbonato potásico (1,19 g), cloruro de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) (0,35 g) y tributilborano (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (solución 1 M en THF, 6,5 ml). La mezcla se calentó a 70ºC durante 5 h, después se enfrió a temperatura ambiente, se filtró a través de una capa de celite y se evaporó. El residuo se purificó por Flashmaster 11 sobre un cartucho de 100 g de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-50% - ciclohexano durante 40 min. La evaporación del disolvente a partir de las fracciones apropiadas dio el compuesto del título (1,79 g). TR de CLEM = 3,89 min, ES+vo m/z 456 [M+H]^{+}.

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Intermedio 33

3-[6-Butil-8-(1-piperazinil)-2-quinolinil]propanoato de metilo

A una solución agitada de 4-{6-butil-2-[3-(metiloxi)-3-oxopropil]-8-quinolinil}-1-piperazina-carboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el intermedio 32) (1,77 g) en DCM (30 ml) se le añadió ácido trifluoroacético (15 ml). Después de 30 min la mezcla se evaporó y el residuo se disolvió de nuevo en DCM (100 ml), se lavó con una solución saturada de carbonato ácido sódico (100 ml), se secó sobre sulfato sódico y se evaporó. El residuo se aplicó a un cartucho de intercambio iónico SCX-2 de 20 g preacondicionado con MeOH y el cartucho se eluyó con MeOH y después con amoniaco 2 M en MeOH. La evaporación del disolvente de las fracciones que contenían amoniaco dio el compuesto del título (1,28 g). TR de CLEM = 2,51 min, ES+vo m/z 356 [M+H]^{+}.

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Intermedio 34

3-(6-Butil-8-{4-[(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)acetil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)propanoato de metilo

A una suspensión agitada de sal clorhidrato del ácido 2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)acético (por ejemplo, como se ha preparado para el intermedio 41) (656 mg) en acetonitrilo (15 ml), en una atmósfera de nitrógeno se le añadieron clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (384 mg), 1-hidroxibenzotriazol hidrato (306 mg) y Et_{3}N (0,55 ml). Después de 20 min, se añadió una solución de 3-[6-butil-8-(1-piperazinil)-2-quinolinil]propanoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el intermedio 33) (500 mg) en acetonitrilo (5 ml). La agitación se continuó a temperatura ambiente durante 4 h y después la mezcla se evaporó. El residuo se repartió entre una solución saturada de carbonato ácido sódico (50 ml) y EtOAc (50 ml). Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (50 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (50 ml) y cloruro sódico acuoso saturado (30 ml), se secaron sobre sulfato sódico y se evaporaron. El residuo se evaporó de nuevo en DCM, dando el compuesto del título (874 mg). TR de CLEM = 2,91 min, ES+vo m/z 629
[M+H]^{+}.

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Intermedio 35

3-Yodo-8-(1-piperazinil)quinolina

Una mezcla de 8-fluoro-3-yodoquinolina (como se ha desvelado en la Solicitud de Patente Internacional
WO2007039220A1, véase la página 16, Descripción 1) (1,36 g, 5 mmol) carbonato potásico (0,69 g, 5 mmol) y piperazina (3,44 g, 40 mmol) se trató con DMSO (7 ml) y la suspensión se calentó a 100ºC durante 22,5 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se diluyó con DCM (50 ml) y agua. La solución orgánica se lavó con agua (2 x 50 ml). La fase orgánica se extrajo con una solución 4 M de cloruro de hidrógeno (50 ml). La fase acuosa se lavó con DCM (10 ml) y después se añadió a carbonato potásico sólido (30 g, 217 mmol). Se añadieron agua (50 ml) y DCM (50 ml) y la fase orgánica se separó. La fase acuosa se extrajo una vez más con DCM (20 ml) y las fases orgánicas combinadas se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a presión reducida, dando el compuesto del título (1,3 g, 77%). TR de CLEM = 2,10 min, ES+vo m/z 340 (M+H)^{+}.

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Intermedio 36

4-(3-Yodo-8-quinolinil)-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

Una solución de 3-yodo-8-(1-piperazinil)quinolina (por ejemplo, como se ha preparado para el intermedio 35) (1,3 g, 3,8 mmol) en DCM (6 ml) y NEt_{3} (1,07 ml, 7,66 mmol) se trató con dicarbonato de di-terc-butilo (1,04 g, 4,75 mmol) y la mezcla se dejó a temperatura ambiente durante 3 días. La mezcla de reacción se diluyó con DCM, se lavó con una solución 2 M de cloruro de hidrógeno y con una solución de bicarbonato sódico, se secó (MgSO_{4}) y se evaporó a presión reducida. El residuo se diluyó con DCM, se aplicó a un cartucho de sílice (70 g) y se purificó por cromatografía sobre Flashmaster 2, eluyendo con EtOAc del 0 al 100%-ciclohexano durante 60 min. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron a presión reducida, dando el compuesto del título (1,45 g, 87%). TR de CLEM = 3,71 min, ES+vo m/z 440 (M+H)^{+}.

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Intermedio 37

4-{3-[(1E)-3-(Metiloxi)-3-oxo-1-propen-1-il]-8-quinonil}-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

Una mezcla de 4-(3-yodo-8-quinolinil)-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 36) (555 mg, 1,26 mmol), acrilato de metilo (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (0,345 ml, 3,8 mmol), NEt_{3} (1,14 ml, 8,2 mmol), trifenilfosfina (33 mg, 0,12 mmol) y acetato de paladio (II) (18 mg, 0,12 mmol) en DMF (15 ml) se calentó a 100ºC durante una noche. La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se cargó sobre un cartucho SCX (20 g) eluyendo con MeOH. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron a presión reducida, dando el compuesto del título (90 mg) TR de CLEM = 3,49 min, ES+vo m/z 398 (M+H)^{+}.

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Intermedio 38

4-{3-[3-(Metiloxi)-3-oxopropil]-8-quinolinil}-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo

Una solución de 4-{3-[(1E)-3-(metiloxi)-3-oxo-1-propen-1-il]-8-quinolinil}-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 37) (350 mg, 0,88 mmol) en EtOAc (15 ml) se hidrogenó sobre paladio al 10% sobre carbono (100 mg) durante 1,5 h a temperatura ambiente. Se añadió más cantidad de catalizador (50 mg) y la mezcla se hidrogenó durante 4 h más. El catalizador se retiró por filtración a través de un cartucho de sílice y el filtrado se concentró a presión reducida, dando el compuesto del título (293 mg) TR de CLEM = 3,14 min, ES+vo m/z 400 (M+H)^{+}.

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Intermedio 39

3-[8-(1-Piperazinil)-3-quinolinil]propanoato de metilo

Una solución de 4-{3-[3-(metiloxi)-3-oxopropil]-8-quinolinil}-1-piperazincarboxilato de 1,1-dimetiletilo (por
ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 38) (293 mg, 0,73 mmol) en DCM (10 ml) se trató con ácido trifluoroacético (3 ml) y la mezcla se agitó en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo se disolvió en tolueno y se evaporó de nuevo (2 x 30 ml). El residuo (330 mg) se aplicó a un cartucho SCX (10 g) eluyendo con MeOH, seguido de amoniaco 2 N en MeOH. Las fracciones apropiadas se combinaron, se evaporaron y se aplicaron de nuevo a un cartucho SCX eluyendo como antes, dando el compuesto del título (203 mg) TR de CLEM = 1,93 min, ES+vo m/z 300 (M+H)^{+}.

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Intermedio 40

(4-{[3-(Hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)acetato de metilo

Una mezcla de azodicarboxilato de di-terc-butilo (2,55 g, 11,1 mmol) y trifenilfosfina (2,91 g, 11,1 mmol) en THF (20 ml) se enfrió de -20ºC a -25ºC en una atmósfera de nitrógeno. Mientras tanto, una mezcla de 3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)-1-propanol (por ejemplo, como se ha preparado por E. L. Strogryn, J. Med. Chem. 1970, 13, 864-6, y/o está disponible en el mercado, por ejemplo, en ChemBridge) (1,80 g, 11,4 mmol) y 4-hidroxifenilacetato de metilo (disponible en el mercado, por ejemplo, en Aldrich) (1,67 g, 10,0 mmol) se suspendió en THF (30 ml) y después se añadió a la primera solución después de 10 min. La mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante una noche en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se repartió entre éter dietílico y salmuera. La fase acuosa se extrajo con éter dos veces y las soluciones orgánicas combinadas se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El residuo se aplicó a un cartucho SCX-2 (70 g) eluyendo con MeOH, seguido de amoniaco 0,88 acuoso al 10% en MeOH. Las soluciones de amoniaco se combinaron y se evaporaron. El residuo (2,59 g) se purificó por cromatografía Flashmaster 2 sobre un cartucho de sílice (100 g) eluyendo con MeOH del 0 al 30% (que contenía Et_{3}N al 1%) - DCM durante 60 min. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron a presión reducida, dando el compuesto del título (1,77 g, 57%) TR de CLEM = 2,08 min, ES+vo m/z 306
(M+H)^{+}.

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Intermedio 41

Ácido (4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)acético, sal clorhidrato

Una solución de (4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)acetato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 40) (1,379 g, 4,51 mmol) en MeOH (12 ml) se trató con una solución 2 M de hidróxido sódico (6 ml) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporó, dando un residuo que se repartió entre ácido clorhídrico diluido (9 ml de una solución 2 M diluida a 25 ml con agua) y 3:1 de cloroformo-iso-propanol (25 ml). La fase acuosa se extrajo adicionalmente con la mezcla de cloroformo-iso-propanol (4 x 25 ml). Los extractos combinados se secaron sobre sulfato sódico anhidro y el disolvente se evaporó, dando el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (1,4646 g). TR de CLEM = 1,96 min, ES+vo m/z 292 [M+H]^{+}.

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Ejemplos

Ejemplo 1

Ácido 3-[8-{4-[2-(4{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-6-(fenilmetil)-2-quinolinil] propanoico, sal formiato

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15

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Una solución de 3-[8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}6-(fenilmetil)-2-quinolinil]propanoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 9) (32 mg) en MeOH (5 ml) se trató con una solución 2 N de hidróxido sódico (1 ml) y la mezcla resultante se calentó a 65ºC durante 1 h. La mezcla de reacción se trató con ácido clorhídrico 2 N (1 ml) y el disolvente se evaporó. El residuo se disolvió en MeOH-DMSO (1:1, 1 ml) y se purificó por MDAP. La evaporación del disolvente a partir de las fracciones apropiadas dio el compuesto del título (11,5 mg). TR de CLEM = 2,39 min, ES+vo m/z 635 [M+H]^{+}. ^{1}H RMN \delta (400 MHz, MeOD) 1,71 (s, 4 H), 1,89 (s, 4 H), 2,15 - 2,22 (m, 2 H), 2,80 (t, J = 7,03 Hz, 2 H), 2,90 - 2,97 (m, 2 H), 3,02 - 3,09 (m, 2 H), 3,18 - 3,23 (m, 4 H), 3,23 - 3,28 (m, J = 7,03 Hz, 2 H), 3,27 - 3,29 (m, 2 H), 3,31 - 3,34 (m, 4 H), 3,48 (s, 4 H), 4,02 - 4,08 (m, 4 H), 6,89 (d, J = 8,53 Hz, 2 H), 7,03 (d, J = 2,00 Hz, 1 H), 7,16 - 7,27 (m, 7 H), 7,28 - 7,30 (m, 1 H), 7,35 (d, J = 8,53 Hz, 1 H), 8,02 (d, J = 8,53 Hz, 1 H), 8,52 (s, 1 H).

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Ejemplo 2

Ácido 3-(6-etil-8-{4-[2-(4-([3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)propa- noico, sal formiato

16

Una solución de 3-(6-etil-8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)propanoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 12) en MeOH (5 ml) se trató con una solución 2 N de hidróxido sódico (1 ml) y la mezcla resultante se calentó a 65ºC con agitación durante 2 h. La mezcla de reacción se trató con ácido clorhídrico 2 N (1 ml) y el disolvente se evaporó, dando un residuo que se suspendió en MeOH-DMSO (1:1, 2 ml). La suspensión se filtró y el filtrado se purificó por MDAP. La evaporación del disolvente a partir de las fracciones apropiadas dio el compuesto del título (35 mg). TR de CLEM = 2,10 min, ES+vo m/z 573 [M^{+}H]^{+}, 287 (M/2+H)^{+}.

Ejemplo 3

Ácido 3-(8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil)-2-quinolinil)propanoico, ácido fórmico (1:2)

17

(a)

Una mezcla de 3-(8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil}-1-piperazinil}-2-quinolinil)propanoato de metilo y 3-(8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil}-1-piperazi- nil}-2-quinolinil)propanoato de etilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 24) (370 mg) en THF (10 ml) se trató con una solución de hidróxido sódico (2 M, 10 ml) y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. Se añadió ácido acético (10 ml) y la mezcla se concentró. El residuo se aplicó a un cartucho SCX-2 (10 g), se lavó con MeOH y se eluyó con amoniaco metanólico. El producto se encontró en todas las fracciones así que se combinaron y se evaporaron. El producto en bruto se disolvió de nuevo en MeOH (5 ml) y se trató de nuevo con una solución de hidróxido sódico (2 ml) y se agitó durante 4 h. Se añadió ácido acético (2 ml) y la mezcla se concentró. El residuo se aplicó a un cartucho SCX-2 (20 g) eluyendo primero con MeOH y después con amoniaco en MeOH. Las fracciones básicas se combinaron y se evaporaron, dando la base libre del compuesto del título (347 mg). TR de CLEM = 2,00 min, ES+vo m/z 545 (M+H)^{+}, 273 (M/2+H)^{+}. Una porción de la base libre se purificó adicionalmente por MDAP, dando el compuesto del título TR de CLEM = 1,87 min, ES+vo m/z 545 (M+H)^{+}, 273/274 (M/2+H)^{+}.

(b)

Ácido 3-(8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)pro- panoico, sal del ácido fórmico.

\quad

Se disolvió 3-(8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)propanoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 30) (34 mg) en MeOH (8 ml) y se añadió una solución 2 M de hidróxido sódico (1 ml). La mezcla se agitó a 70ºC durante 4 h, momento en el que se añadió ácido clorhídrico 2 M (1 ml). La mezcla se filtró y el filtrado se purificó por MDAP, dando el compuesto del título (23 mg). TR de CLEM = 2,06 min, ES+vo m/z 545 [M+H]^{+}.

Ejemplo 4

Ácido (2E)-3-(8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)-2-prope- noico-ácido fórmico (1:1)

18

Se disolvió 3-(8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)-2-propenoato de metilo - ácido fórmico (1:1) (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 23) (15,2 mg, 0,0252 mmol) en THF anhidro (1 ml) y se trató con NaOH 2 N (1 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante dos días. La reacción se interrumpió con ácido acético (0,5 ml) y se cargó sobre un cartucho SCX-2 de 2 g que se eluyó con MeOH, seguido de amoniaco 2 M metanólico. Parte del producto eluyó en la fracción de MeOH. Por lo tanto, las fracciones de MeOH y MeOH/amoniaco se combinaron y se evaporaron. El material en bruto se purificó por MDAP. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron, dando el compuesto del título (2,9 mg). TR de CLEM = 2,15 min, ES+vo m/z 272 (M/2+H)^{+}. 543 (M+H)^{+}.

Ejemplo 5

Ácido 3-(8-{4-[2-{[4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil)oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-3-quinolinil)propanoico, sal del ácido fórmico

19

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El compuesto del Ejemplo 5 se preparó por un procedimiento similar al descrito para el compuesto del Ejemplo 1. La reacción de metanosulfonato de 2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 15) con 3-[8-(1-piperazinil)-3-quinolinil]propanoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el Intermedio 39) se realizó como se ha descrito para el Intermedio 9, seguido de hidrólisis del éster del producto, realizada de acuerdo con el procedimiento descrito para el Ejemplo 1.

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Ejemplo 6

Ácido 3-(6-butil-8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-2-quinolinil)propanoico, sal formiato

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20

\vskip1.000000\baselineskip

A una solución agitada de 3-(6-butil-8-{4-[(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)acetil]-1-piperazi-
nil}-2-quinolinil)propanoato de metilo (por ejemplo, como se ha preparado para el intermedio 34) (867 mg) en THF anhidro (15 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadieron carbonilhidrurotris(trifenilfosfina)rodio (1) (63 mg) y difenilsilano (0,54 ml). Después de agitar durante 1 h, se añadieron cantidades adicionales de carbonilhidrurotris(trifenilfosfina)rodio (1) (25 mg) y difenilsilano (0,22 ml). La mezcla se agitó durante 30 min y después se diluyó con éter (30 ml) y se extrajo con ácido clorhídrico 1 M (40 ml). La fase acuosa se basificó mediante la adición de carbonato sódico acuoso saturado y después se extrajo con EtOAc (2 x 30 ml). Los extractos de EtOAc combinados se secaron sobre sulfato sódico y se evaporaron. El residuo se evaporó de nuevo en DCM y después se disolvió en MeOH (8 ml) y se trató con hidróxido sódico 2 M (2 ml). La mezcla se calentó a 70ºC durante 1 h y después se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla se ajustó a pH 8 mediante la adición de ácido clorhídrico 2 M, se diluyó con agua (40 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato sódico y se evaporaron. El residuo se evaporó de nuevo en DCM y después se disolvió en MeOH - DMSO (1:1) y se purificó por MDAP. La evaporación del disolvente a partir de las fracciones apropiadas dio el compuesto del título (336 mg). TR de CLEM = 2,38 min, ES+vo m/z 601 [M+H]^{+}.

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Datos Biológicos

Los compuestos de la invención pueden ensayarse para determinar su actividad biológica in vitro, por ejemplo, de acuerdo con los ensayos siguientes o ensayos similares.

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Generación de línea celular con receptor H1 y protocolo de ensayo FLIPR 1. Generación de línea celular de histamina H1

El receptor H1 humano se clona usando procedimientos conocidos descritos en la bibliografía [Biochem. Biophys. Res. Commun., 201 (2): 894 (1994)]. Se generan células de ovario de hámster chino (CHO) que expresan el receptor H1 humano de acuerdo con procedimientos conocidos descritos en la bibliografía [Br. J. Pharmacol., 117 (6): 1071 (1996)].

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Ensayo de antagonista funcional de histamina H1: Determinación de valores de pKi funcionales

La línea celular de histamina H1 se siembra en placas de cultivo de tejidos de 384 pocillos de fondo transparente y paredes negras no recubiertas en medio esencial mínimo alfa (Gibco/Invitrogen, nº cat. 22561-021), complementado con suero fetal de ternera dializado al 10% (Gibco/Invitrogen nº cat. 12480-021) y L-glutamina 2 mM (Gibco/Invitrogen nº cat. 25030-024) y se mantiene durante una noche a CO_{2} al 5%, 37ºC.

Se retira el exceso de medio de cada pocillo para dejar 10 \mul. Se añaden 30 \mul de colorante de carga (Negro Brillante 250 \muM, Fluo-4 2 pM diluido en tampón Tyrodes + probenecid (NaCl 145 mM, KCl 2,5 mM, HEPES 10 mM, D-glucosa 10 mM, MgCl_{2} 1,2 mM, CaCl_{2} 1,5 mM, probenecid 2,5 mM, pH ajustado a 7,40 con NaOH 1,0 M)) a cada pocillo y las placas se incuban durante 60 min a CO_{2} al 5%, 37ºC.

Se añaden 10 \mul de compuesto de ensayo diluido a la concentración necesaria en tampón Tyrodes + probenecid (o 10 \mul de tampón Tyrodes + probenecid como control) a cada pocillo y la placa se incuba durante 30 min a 37ºC, CO_{2} al 5%. Después, las placas se colocan en un FLIPR^{TM} (Molecular Devices, RU) para controlar la fluorescencia celular (\lambda_{ex} = 488 nm, \lambda_{EM} = 540 nm) de la forma descrita en Sullivan y col., (En: Lambert DG (ed.), Calcium Signaling Protocols, Nueva Jersey: Humana Press, 1999, 125-136) antes y después de la adición de 10 \mul de histamina a una concentración que da como resultado que la concentración de ensayo final de la histamina sea la CE_{80}.

El antagonismo funcional se indica por una supresión del aumento de fluorescencia inducido por histamina según se mide por el sistema FLIPR^{TM} (Molecular Devices). Por medio de curvas de concentración-efecto, se determinan las afinidades funcionales usando un análisis matemático farmacológico convencional.

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Ensayo de antagonista funcional de histamina H1: Determinación de la pA2 y de la duración del antagonista

Las células CHO que expresan receptor de histamina H1 se siembran en placas de cultivo de tejidos de 96 pocillos de fondo transparente y paredes negras no recubiertas como se ha descrito anteriormente.

Después del cultivo durante una noche, se retira el medio de cultivo de cada pocillo, se lavan con 200 \mul de solución salina tamponada con fosfato (PBS) y se sustituye con 50 \mul de colorante de carga (Negro Brillante 250 \muM, Flux-4 1 \muM diluido en tampón Tyrodes + probenecid (NaCl 145 mM, KCl 2,5 mM, HEPES 10 mM, D-glucosa 10 Mm, MgCl_{2} 1,2 mM, CaCl_{2}, 1,5 mM, probenecid 2,5 mM, pH ajustado a 7,40 con NaOH 1,0 M)). Las células se incuban durante 45 min a 37ºC. El tampón de carga se retira y las células se lavan como anteriormente y se añaden 90 \mul de tampón Tyrodes + probenecid a cada pocillo. Se añaden 10 \mul del compuesto de ensayo diluido a la concentración necesaria en tampón Tyrodes + probenecid (o 10 \mul de tampón Tyrodes + probenecid como control) a cada pocillo y la placa se incuba durante 30 min a 37ºC, CO_{2} al 5%.

Después, las placas se colocan en un FLlPR^{TM} (Molecular Devices, RU) para controlar la fluorescencia celular (\lambda_{ex} = 488 nm, \lambda_{EM} = 540 nm) de la forma descrita en Sullivan y col., (En: Lambert DG (ed.), Calcium Signaling Protocols, Nueva Jersey: Humana Press, 1999, 125-136) antes y después de la adición de 50 \mul de histamina sobre un intervalo de concentración de 1 mM-0,1 nM. Las curvas de concentración-respuesta resultantes se analizan mediante una regresión no lineal usando una ecuación logística de cuatro parámetros convencional para determinar la CE_{50} de la histamina, la concentración de histamina necesaria para producir una respuesta del 50% de la respuesta máxima a la histamina. La pA2 del antagonista se calcula usando la siguiente ecuación convencional: pA2 = log(DR - 1) - log[B] donde DR = proporción de dosis, definida como la CE_{50} con tratamiento con antagonista/CE_{50} de control y [B] = concentración de antagonista.

Para determinar la duración del antagonista, las células se cultivan durante una noche en placas de cultivo de tejidos de 96 pocillos de fondo transparente y paredes negras no recubiertas, se lavan con PBS y se incuban con una concentración de antagonista seleccionada para dar una DR aproximada en el intervalo de 30-300. Después del periodo de incubación con antagonista de 30 min, las células se lavan de dos a tres veces con 200 \mul de PBS y después se añaden 100 \mul de tampón Tyrodes a cada pocillo para iniciar la disociación del antagonista. Después de la incubación durante tiempos predeterminados, típicamente de 30-270 min a 37ºC, las células se lavan entonces de nuevo con 200 \mul de PBS y se incuban con 100 \mul de tampón Tyrodes que contiene Negro Brillante, probenecid y Fluo-4 durante 45 min a 37ºC, como se ha descrito anteriormente. Después de este periodo, las células se exponen a histamina en el FLIPR^{TM} como se ha descrito anteriormente. La proporción de dosis en cada punto temporal se usa para determinar la ocupación fraccional de receptor H1 mediante la siguiente ecuación: ocupación fraccional de receptor = (DR - 1)/DR. La disminución en la ocupación de receptor con el tiempo se aproxima una línea recta y se analiza mediante una regresión lineal. La pendiente de este ajuste de línea recta se usa como un índice de la velocidad de disociación del antagonista. Las proporciones de dosis para células tratadas con antagonista y para células tratadas con antagonista y lavadas en cada punto temporal se usan para calcular una proporción de dosis relativa (DR rel) que también se usa como índice de la duración del antagonista. Los antagonistas con una duración de acción prolongada producen valores de DR rel próximos a 1, y los antagonistas con una duración de acción corta producen valores de DR rel que se aproximan al valor de proporción de dosis obtenido para el tratamiento con antagonista en
solitario.

2. Generación de línea celular con receptor H3, preparación de membrana y protocolos de ensayo de GTP_{\gamma}S funcional Generación de línea celular de histamina H3

El ADNc de histamina H3 se aísla de su vector de soporte, pCDNA3.1TOPO (InVitrogen), mediante digestión de restricción de ADN plasmídico con las enzimas BamH1 y Not-1 y se liga en el vector de expresión inducible pGene (InVitrogen) digerido con las mismas enzimas. El sistema GeneSwitch^{TM} (un sistema en el que la expresión transgénica se inactiva en ausencia de un inductor y se activa en presencia de un inductor) se realiza como se describe en las Patentes de Estados Unidos: 5.364.791; 5.874.534; y 5.935.934. El ADN ligado se usa para transformar células bacterianas huésped de E. coli DH5\alpha competentes y se siembran en placas sobre agar de Caldo de Luria (LB) que contiene Zeocin^{TM} (un antibiótico que permite la selección de células que expresan el gen sh ble que está presente en pGene y pSwitch) a 50 \mugml^{-1}. Las colonias que contienen el plásmido religado se identifican por análisis de restricción. El ADN para su transfección en células de mamífero se prepara a partir de cultivos de 250 ml de la bacteria huésped que contienen el plásmido pGeneH3 y se aísla usando un kit de preparación de ADN (Qiagen Midi-Prep) de acuerdo con las directrices de los fabricantes (Qiagen).

Las células CHO K1 previamente transfectadas con el plásmido regulador pSwitch (InVitrogen) se siembran a 2 x 10^{6} células por matraz T75 en Medio Completo, que contiene medio Hams F12 (GIBCOBRL, Life Technologies) complementado con suero bovino fetal dializado al 10% v/v, L-glutamina e higromicina (100 \mugml^{-1}), 24 h antes del uso. El ADN plasmídico se usa para transfectar las células usando Lipofectamine plus, de acuerdo con las directrices del fabricante (InVitrogen). 48 h después de la transfección, las células se colocan en medio completo complementado con Zeocin^{TM} 500 \mugml^{-1}.

10-14 días después de la selección, se añade Mifepristona 10 nM (InVitrogen) al medio de cultivo para inducir la expresión del receptor. 18 h después de la inducción, las células se desprenden del matraz usando ácido etilendiaminotetraacético (EDTA; 1:5000; InVitrogen), seguido de varios lavados con PBS, pH 7,4, y se resuspenden en Medio de Separación que contiene Medio Esencial Mínimo (MEM) sin rojo fenol y se complementa con sales de Earle y suero fetal Clon II al 3% (Hyclone). Se examinan aproximadamente 1 x 10^{7} células para determinar la expresión de receptor por tinción con un anticuerpo policlonal de conejo, 4a, generado contra el dominio N-terminal del receptor de histamina H3, se incuban en hielo durante 60 min, seguido de dos lavados en medio de separación. El anticuerpo unido a receptor se detecta por incubación de las células durante 60 min en hielo con un anticuerpo de cabra anti-conejo conjugado con marcador de fluorescencia Alexa 488 (Molecular Probes). Después de dos lavados adicionales con Medio de Separación, las células se filtran a través de un Filcon^{TM} de 50 \mum (BD Biosciences) y después se analizan en un citómetro de flujo FACS Vantage SE equipado con una Unidad de Deposición de Células Automática. Las células de control son células no inducidas tratadas de una forma similar. Las células teñidas positivamente se separan como células individuales en placas de 96 pocillos que contienen Medio Completo que contiene Zeocin^{TM} 500 \mugml^{-1} y se deja que se expandan antes de un nuevo análisis para determinar la expresión de receptor por medio de estudios de anticuerpo y de unión a ligando. Se selecciona un clon, 3H3, para la preparación de membrana.

Preparación de membrana de células cultivadas

Todas las etapas del protocolo se realizan a 4ºC y con reactivos previamente enfriados. El sedimento celular se resuspende en 10 volúmenes de tampón de homogeneización (ácido N-2-hidroxietilpiperazin-N-2-etanosulfónico 50 mM (HEPES), ácido etilendiaminotetraacético 1 mM (EDTA), pH 7,4 con KOH, complementado con leupeptina 10^{-8} M (acetil-leucil-leucil-arginal; Sigma L2884), bacitracina 25 \mugm^{-1} (Sigma B0125), fluoruro de fenilmetilsulfonilo 1 mM (PMSF) y pepstatina A 2 x 10^{-6} M (Sigma)). Después las células se homogeneizan mediante 2 x ráfagas de 15 segundos en una mezcladora Waring de vidrio de 1 litro, seguido de centrifugación a 500 g durante 20 min. Después, el sobrenadante se centrifuga a 48.000 g durante 30 min. El sedimento se resuspende en tampón de homogeneización (4x el volumen del sedimento celular original) por agitación vorticial durante 5 s, seguido de homogeneización en un homogeneizador Dounce (10-15 golpes). En este punto la preparación se divide en alícuotas en tubos de polipropileno y se almacena a -80ºC.

Ensayo de antagonista funcional de histamina H3

Para cada compuesto que se ensaya, se añade en una placa de 384 pocillos blanco sólido:

(a)

0,5 \mul de compuesto de ensayo diluido a la concentración necesaria en DMSO (o 0,5 \mul de DMSO como control);

(b)

30 \mul de mezcla de perlas/membrana/GDP que se preparan por mezcla de perlas de ensayo de proximidad de escintilación (SPA) de Poliestireno con Aglutinina de Germen de Trigo LeadSeeker® (WGA PS LS) con membrana (preparada de acuerdo con la metodología descrita anteriormente) y dilución en tampón de ensayo (ácido N-2-hidroxietilpiperazin-N'-2-etanosulfónico 20 mM (HEPES) + NaCl 100 mM + MgCl_{2}10 mM, pH 7,4 NaOH), para dar un volumen final de 30 \mul que contiene 5 \mug de proteína, 0,25 mg de perlas por pocillo y una concentración de ensayo final 10 \muM de 5'-difosfato de guanosina (GDP) (Sigma, diluido en tampón de ensayo) incubando a temperatura ambiente durante 60 min en una rueda giratoria;

(c)

15 \mul de [^{35}S]-GTP\gammaS 0,38 nM (Amersham; Concentración de radiactividad = 37 MBqml^{-1}; Actividad específica = 1160 Cimmol^{-1}), histamina (a una concentración que da como resultado que la concentración de ensayo final de la histamina sea la CE_{80}).

Después de 2-6 h, la placa se centrifuga durante 5 min a 1500 rpm y se cuenta en un contador Viewlux usando un filtro de 613/55 durante 5 minplaca^{-1}. Los datos se analizan usando una ecuación logística de 4 parámetros. La actividad basal se usa como mínimo, es decir, sin histamina añadida al pocillo.

Penetración en el SNC mediante administración en embolada

Los compuestos se administran por vía intravenosa a un nivel de dosis nominal de 1 mg/kg a ratas macho Sprague Dawley CD. Los compuestos se formulan en DMSO al 5%/PEG200 al 45%/agua al 50%. Se toman muestras de sangre bajo anestesia terminal con isofluorano a los 5 min después de la dosis y también se extirpan los cerebros para la evaluación de la penetración cerebral. Las muestras de sangre se toman directamente en tubos heparinizados. Las muestras de sangre se preparan para su análisis usando precipitación de proteínas y se preparan muestras de cerebro usando extracción de fármaco del cerebro por homogeneización y posterior precipitación de proteína. La concentración de fármaco precursor en sangre y extractos cerebrales se determina mediante análisis cuantitativo de CL-EM/EM usando transiciones de masas específicas de compuesto.

Resultados

Los compuestos de los Ejemplos 1 a 6 se ensayaron en los ensayos/procedimientos anteriores o ensayos/procedi-
mientos similares y mostraron:

(i)

un promedio de pK, (pK_{b}) superior a 7,0.

(ii)

un promedio de pK_{i} (pK_{b}) en H3 de más de 8,0.

(iii)

el Ejemplo 5 tenía un promedio de valor pA2 de más de aproximadamente 7,0. Los Ejemplos 1, 2, 3a y 6 tenían valores promedio de pA2 de más de aproximadamente 8,0.

(iv)

los Ejemplos 1, 2 y 3 demostraron baja penetración en el SNC. Se espera que otros compuestos tengan baja penetración en el SCN.

Claims (13)

1. Un compuesto de fórmula (I)

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21

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en la que

el anillo de quinolinilo está sustituido en la posición 2 ó 3 con R^{1} y está opcionalmente sustituido en la posición 5, 6 ó 7 con R^{2};

R^{1} representa -CH_{2}CH_{2}COOH, -CH=C(CH_{3})COOH o -CH=CHCOOH;

R^{2} representa alquilo C_{1-6}, arilo o alquilarilo C_{1-6};

n representa 0 ó 1; y

una sal del mismo.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal del mismo, en el que el anillo de quinolinilo está sustituido en la posición 2 con R^{1}.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, o una sal del mismo, en el que R^{1} representa -CH_{2}CH_{2}COOH.

4. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal del mismo, en el que R^{2} representa alquilo C_{1-4}, fenilo o -alquilfenilo C_{1-4}.

5. Un compuesto como en la reivindicación 1 que es ácido 3-[8-{4-[2-(4-{[3-(hexahidro-1H-azepin-1-il)propil]oxi}fenil)etil]-1-piperazinil}-6-(fenilmetil)-2-quinolinil]propanoico, o una sal del mismo.

6. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

7. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en terapia.

8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 7, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias y/o alérgicas.

9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 7, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento de rinitis alérgica.

10. Una composición que comprende un compuesto como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y uno o más vehículos y/o excipientes farmacéuticamente aceptables.

11. Una combinación que comprende un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 y uno o más compuestos terapéuticos distintos.

12. El uso de un compuesto como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la preparación de un medicamento para el tratamiento o profilaxis de enfermedades inflamatorias y/o alérgicas.

13. El uso de acuerdo con la reivindicación 12, en el que la enfermedad es rinitis alérgica.