ES2308182T3

ES2308182T3 - Derivadosde (3-((quinazolin-4-il)amino)-1h-pirazol-1-il)acetamida y compuestos relacionados como inhibidores de quinasas aurora para el tratamiento de enfermedades proliferativas tales como el cancer.

Info

Publication number: ES2308182T3
Application number: ES04735028T
Authority: ES
Inventors: Andrew Austen Mortlock; Nicola Murdoch Heron; Frederic Henri AstraZeneca Pharma JUNG; Georges Rene AstraZeneca Pharma PASQUET
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 2003-06-02
Filing date: 2004-05-27
Publication date: 2008-12-01
Anticipated expiration: 2024-05-27
Also published as: US20060135541A1; DE602004015108D1; JP2006526599A; EP1635837A1; WO2004105764A1; ATE401080T1; EP1635837B1

Abstract

Un compuesto de fórmula (I) (Ver fórmula) o su sal o su éster; en el que: X es O o NR 6 ; R 6 es hidrógeno o alquilo C1 - 4; R 1 es hidrógeno, halo, o -X 1 R 11 ; X 1 es un enlace lineal, -O-, -NH- o -N(alquil C1 - 6)-; R 11 es hidrógeno, heterociclilo o un grupo seleccionado a partir de alquilo C1 - 6, alquenilo C2 - 6, alquinilo C2 - 6, cicloalquilo C3 - 6 y cicloalquenilo C3 - 6 cuyo grupo está opcionalmente sustituido con heterociclilo, halo, hidroxi, alcoxi C1 - 4 o -NR 9 R 10 ; R 2 es hidrógeno, halo, nitro, ciano o -X 2 R 12 ; X 2 es un enlace lineal, -O-, -NH- o -N(alquil C1 - 6)-; R 12 es hidrógeno, heterociclilo o un grupo seleccionado a partir de arilo, alquilo C1 - 6, alquenilo C2 - 6, alquinilo C2 - 6, cicloalquilo C3 - 6 y cicloalquenilo C3 - 6 cuyo grupo está opcionalmente sustituido con arilo, heterociclilo, halo, hidroxi o -NR 15 R 16 ; R 3 es hidrógeno, halo o -X 3 R 13 ; X 3 es un enlace lineal, -CH2=CH2-, -O-, -NH- o -N(alquil C1 - 6)-; R 13 es...

Description

Derivados de (3-((quinazolin-4-il)amino)-1H-pirazol-1-il)acetamida y compuestos relacionados como inhibidores de quinasas aurora para el tratamiento de enfermedades proliferativas tales como el cáncer.

La presente invención se refiere a derivados de quinazolina para uso en el tratamiento de enfermedades, en particular enfermedades proliferativas tales como el cáncer y en la preparación de medicamentos para uso en el tratamiento de enfermedades proliferativas, y a procedimientos para su preparación, así como a composiciones farmacéuticas que los contienen como ingrediente activo.

El cáncer (y otras enfermedades hiperproliferativas) se caracteriza por la proliferación celular incontrolada. Esta pérdida de la regulación normal de la proliferación celular parece tener lugar con frecuencia como resultado del daño genético en rutas celulares que controlan el progreso a través del ciclo celular.

En eucariotas, se piensa que una cascada ordenada de fosforilación de proteínas controla al ciclo celular. Ahora se han identificado diversas familias de proteínas quinasa que juegan papeles críticos en esta cascada. La actividad de muchas de estas quinasas aumenta en tumores humanos cuando se compara con tejido normal. Esto puede tener lugar bien por niveles aumentados de expresión de la proteína (como resultado de multiplicación génica por ejemplo) o por cambios en la expresión de coactivadores o proteínas inhibidoras.

Los primeros identificados y más extensamente estudiados de estos reguladores del ciclo celular han sido las quinasas dependientes de ciclina (o las CDK, por sus siglas en inglés). La actividad de CDK específicas en tiempos específicos es esencial tanto para el progreso de iniciación como el coordinado a través del ciclo celular. Por ejemplo, la proteína CDK4 parece controlar la entrada al ciclo celular (la transición G0-G1-S) por fosforilación del producto génico de retinoblastoma pRb. Esto estimula la liberación del factor de transcripción E2F de pRb, que actúa entonces aumentando la transcripción de los genes necesarios para entrar en la fase S. La actividad catalítica de CDK4 se estimula por unión a una proteína asociada, Ciclina D. Una de las primeras demostraciones de un vínculo directo entre el cáncer y el ciclo celular se hizo con la observación de que se multiplicaba el gen Ciclina D1 y aumentaban los niveles de la proteína ciclina D (y por lo tanto aumentaba la actividad de CDK4) en muchos tumores humanos (Revisado en Sherr, 1.996, Science 274: 1.672-1.677; Pines, 1.995, Seminars in cancer Biology 6: 63-72). Otros estudios (Loda et al., 1.997, Nature Medicine 3 (2): 231-234; Gemma et al., 1.996, International Journal of cáncer 68 (5): 605-11; Elledge et al. 1.996, Trends in Cell Biology 6; 388-392) han demostrado que los reguladores negativos de la función de CDK con frecuencia se regulan por disminución o se eliminan en tumores humanos conduciendo de nuevo a la activación inapropiada de estas quinasas.

Más recientemente, se han identificado proteínas quinasa que son estructuralmente distintas de la familia CDK que juegan papeles críticos en la regulación del ciclo celular y que también parecen ser importantes en la oncogénesis. Éstas incluyen los homólogos humanos de las proteínas aurora de Drosophila y Ipl1 de S. cerevisiae. Los tres homólogos humanos de estos genes Aurora-A, Aurora-B y Aurora-C (también conocidos como aurora2, aurora1 y aurora3 respectivamente) codifican proteína quinasas de serina-treonina reguladas por el ciclo celular (resumido en Adams et al., 2001, Trends in Cell Biology. 11 (2): 49-54). Éstos muestran un pico de expresión y actividad con quinasas a través de G2 y la mitosis. Algunas observaciones se refieren a la implicación de proteínas aurora humanas en el cáncer. Esta prueba es importante en Aurora-A. El gen de Aurora-A se corresponde con el cromosoma 20q13, una región que se amplifica frecuentemente en tumores de seres humanos incluyendo tanto a tumores de pecho como de colon. Aurora-A puede ser el principal gen objetivo de esta multiplicación, puesto que se multiplica el ADN de Aurora-A y el ARNm está sobreexpresado en más del 50% de los tumores malignos colorrectales humanos primarios. En estos tumores los niveles de proteínas aurora-A parecen enormemente elevados comparado con el tejido normal adyacente. Además, la transfección de fibroblastos de roedores con Aurora-A humana conduce a la transformación, confiriendo la capacidad para crecer en agar blando y formar tumores en ratones desnudos (Bischoff et al., 1.998, The EMBO Journal 17 (11): 3.052-3.065). Otro trabajo (Zhou et al., 1.998, Nature Genetics. 20 (2): 189-93) ha demostrado que la sobrexpresión artificial de Aurora-A conduce a un aumento en el número de centrosomas y a un aumento en la aneuploidía, un acontecimiento conocido en el desarrollo del cáncer. Otros trabajos han demostrado un aumento en la expresión de Aurora-B (Adams et al., 2001, Chromsoma. 110(2):65-74) y Aurora-C (Kimura et al., 1999, Journal of Biological Chemistry, 274(11): 7334-40) en células tumorales cuando se compara con células normales.

En gran medida, también se ha demostrado que la abrogación de la expresión de aurora-A y la función por tratamiento de oligonucleótidos antisentido de líneas celulares de tumores humanos (patente internacional WO 97/22702 y patente internacional WO 99/37788) conduce a la detención del ciclo celular y ejerce un efecto antiproliferativo en estas líneas celulares de tumores. Además, se ha demostrado que los inhibidores de pequeñas moléculas de Aurora-A y Aurora-B tienen un efecto antiproliferativo en células tumorales humanas (Keen et al. 2001, Poster #2455, Encuentro anual de la Asociación Americana del Cáncer), ya que tienen abrogación selectiva de la expresión de Aurora-B sola por tratamiento con siRNA (Ditchfield et al., 2003, Journal of Cell Biology, 161(2):267-280). Esto indica que la inhibición de la función de Aurora-A y/o Aurora-B tendrá un efecto antiproliferativo que puede ser útil en el tratamiento de tumores humanos y otras enfermedades hiperproliferativas. Además, la inhibición de Aurora quinasas como enfoque terapéutico frente a estas enfermedades puede tener ventajas significativas en las rutas de señalización de reconocimiento corriente arriba del ciclo celular (por ejemplo, las activadas por el receptor tirosina quinasas del factor de crecimiento tales como el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) u otros receptores). Ya que el ciclo celular está en último lugar corriente abajo de todos estos diversos acontecimientos de señalización, sería predecible que las terapias dirigidas por el ciclo celular, tales como la inhibición de Aurora quinasas, fueran activas a través de todas las células tumorales proliferantes, mientras que los enfoques dirigidos a moléculas de señalización específicas (por ejemplo, EGFR) sería predecible que fueran activas sólo en el subgrupo de células tumorales que expresan a aquellos receptores. También se piensa que existe un significativo "diálogo cruzado" entre estas rutas de señalización lo que significa que la inhibición de un componente puede ser compensada por otro.

Se han propuesto hasta ahora una serie de derivados de quinazolina para uso en la inhibición de diversas Aurora quinasas. Por ejemplo, los documentos WO 01/21594, WO 01/21595 y WO 01/215968 describen el uso de ciertos compuestos de fenil-quinazolina como inhibidores de Aurora-A quinasa, que pueden ser útiles en el tratamiento de enfermedades proliferativas y el documento WO 01/21597 describe otros derivados de quinazolina como inhibidores de Aurora-A quinasa. Además, el documento WO 02/00649 describe derivados de quinazolina que tienen un anillo heteroaromático de 5 miembros en los que el anillo está, en particular, sustituido por tiazol o sustituido por tiofeno. Sin embargo, a pesar los compuestos del documento WO 02/00649 existe una necesidad de otros compuestos que tengan propiedades inhibitorias con Aurora quinasa.

Los solicitantes han tenido éxito al encontrar una nueva serie de compuestos que inhiben los efectos de las Aurora quinasas y, en particular Aurora-A quinasa y/o Aurora-B quinasa, que son así de uso en el tratamiento de enfermedades proliferativas tales como el cáncer. En particular, los compuestos pueden usarse para tratar tanto tumores sólidos como hematológicos, más particularmente cáncer colorectal, de mama, pulmón, próstata, vejiga, renal o pancreático o leucemia o linfoma. Además, ciertos aspectos de la invención la hacen útil en la formulación de medicamentos para el tratamiento de enfermedades.

Según un aspecto de la invención se proporciona un compuesto de fórmula (I)

1

o su sal o su éster;

en el que:

X es O o NR^{6};

R^{6} es hidrógeno o alquilo C_{1-4};

R^{1} es hidrógeno, halo, o -X^{1}R^{11};

X^{1} es un enlace lineal, -O-, -NH- o -N(alquil C_{1-6})-;

R^{11} es hidrógeno, heterociclilo o un grupo seleccionado a partir de alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-6} y cicloalquenilo C_{3-6} cuyo grupo está opcionalmente sustituido con heterociclilo, halo, hidroxi, alcoxi C_{1-4} o -NR^{9}R^{10};

R^{2} es hidrógeno, halo, nitro, ciano o -X^{2}R^{12};

X^{2} es un enlace lineal, -O-, -NH- o -N(alquil C_{1-6})-;

R^{12} es hidrógeno, heterociclilo o un grupo seleccionado a partir de arilo, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-6} y cicloalquenilo C_{3-6} cuyo grupo está opcionalmente sustituido con arilo, heterociclilo, halo, hidroxi o -NR^{15}R^{16};

R^{3} es hidrógeno, halo o -X^{3}R^{13};

X^{3} es un enlace lineal, -CH_{2}=CH_{2}-, -O-, -NH- o -N(alquil C_{1-6})-;

R^{13} es hidrógeno, heterociclilo o un grupo seleccionado a partir de alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-6} y cicloalquenilo C_{3-6} cuyo grupo está opcionalmente sustituido con -NR^{7}R^{8}, heterociclilo, halo, hidroxi o alcoxi C_{1-4};

R^{7} y R^{8} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, heterociclilo, alquilo C_{1-6}, hidroxi-alquilo C_{1-6}, alcoxi C_{1-3}-alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-6}, cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, hidroxi-cicloalquilo C_{3-6}, hidroxi-alquil C_{1-4}-cicloalquilo C_{3-6}, hidroxi-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, alcoxi C_{1-3}-cicloalquilo C_{3-6}, alcoxi C_{1-3}-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, halo-alquilo C_{1-6}, halo-cicloalquilo C_{3-6}, halo-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, ciano-alquilo C_{1-4}, amino-alquilo C_{1-6}, alquil C_{1-3-}aminoalquilo C_{1-6} y bis(alquil C_{1-3})amino-alquilo C_{1-6};

o R^{7} y R^{8} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico, cuyo anillo comprende de 4 a 7 átomos de anillo de los cuales uno es nitrógeno y de los cuales el otro se selecciona opcionalmente a partir de N, NH, O, S, SO y SO_{2}, y cuyo anillo se sustituye opcionalmente sobre carbono o nitrógeno mediante 1 ó 2 grupos seleccionados independientemente a partir de alquilo C_{1-4}, hidroxi, alcoxi C_{1-4}, hidroxi-alquilo C_{1-4}, hidroxi-alcoxi C_{1-4}-alquilo C_{1-4} y alcoxi C_{1-4}-alcoxi C_{1-4}, y en el que un -CH_{2}- de anillo se reemplaza opcionalmente con -C(O)-;

R^{4} se selecciona a partir de hidrógeno, halo o -X^{4}R^{14};

X^{4} es un enlace lineal, -O-, -NH- o -N(alquil C_{1-6})-;

R^{14} se selecciona a partir de hidrógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6} y alquinilo C_{2-6};

R^{5} es arilo o heteroarilo opcionalmente sustituido con 1, 2 ó 3 sustituyentes independientemente seleccionados a partir de halo, hidroxi, ciano, nitro, amino, alquil C_{1-4}-amino, bis(alquil C_{1-4})amino, alquilo C_{1-4}, alquenilo C_{2-4}, alquinilo C_{2-4}, alcoxi C_{1-4}, C(O)NHR^{17}, NHC(O)R^{18} y S(O)_{p}R^{19} donde p es 0, 1 ó 2;

R^{9}, R^{10}, R^{15} y R^{16} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-6}, cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, hidroxi-alquilo C_{1-6}, halo-alquilo C_{1-6}, amino-alquilo C_{1-6}, alquil C_{1-6}-amino-alquilo C_{1-6} y bis(alquil C_{1-6})amino-alquilo C_{1-6};

R^{17}, R^{18} y R^{19} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, alquilo C_{1-4}, cicloalquilo C_{3-6}, alquenilo C_{2-4} y alquinilo C_{2-4}.

Como un aspecto más se proporciona un compuesto de fórmula (I) o su sal farmacéuticamente aceptable.

En otro aspecto la invención proporciona un compuesto de fórmula (IA)

2

o su sal o su éster

en el que X, X^{1}, X^{2}, X^{3}, R^{4} y R^{5} son como se definen en relación con la fórmula (I) y

R^{1'} es hidrógeno, halo, o -X^{1}R^{11'};

R^{11'} es hidrógeno, fosfonooxi, heterociclilo o un grupo seleccionado a partir de alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-6} y cicloalquenilo C_{3-6} cuyo grupo está opcionalmente sustituido con fosfonooxi, heterociclilo, halo, hidroxi, alcoxi C_{1-4} o -NR^{9'}R^{10'};

R^{2'} es hidrógeno, halo, nitro, ciano o -X^{2}R^{12'};

R^{12'} es hidrógeno, fosfonooxi, heterociclilo o un grupo seleccionado a partir de arilo, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-6} y cicloalquenilo C_{3-6} cuyo grupo está opcionalmente sustituido con fosfonooxi, arilo, heterociclilo, halo, hidroxi o -NR^{15'}R^{16'};

R^{3'} es hidrógeno, halo o -x^{3}R^{13'};

R^{13'} es fosfonooxi o un grupo seleccionado a partir de alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-6} y cicloalquenilo C_{3-6} cuyo grupo está opcionalmente sustituido con-NR^{7'}R^{8'}, heterociclilo, halo, hidroxi o alcoxi C_{1-4};

R^{7'} y R^{8'} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, heterociclilo, alquilo C_{1-6}, hidroxi-alquilo C_{1-6}, fosfonooxi-alquilo C_{1-6}, alcoxi C_{1-3}-alquilo C_{1-6}, fosfonooxi-alcoxi C_{1-4-}alquilo C_{1-4}, cicloalquilo C_{3-6}, cicloalquil C_{3-6-}alquilo C_{1-3}, hidroxi-cicloalquilo C_{3-6}, fosfonooxi-cicloalquilo C_{3-6}, hidroxi-alquil C_{1-4}cicloalquilo C_{3-6}, fosfonooxi-alquil C_{1-4}-cicloalquilo C_{3-6}, hidroxi-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, fosfonooxi-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, alcoxi C_{1-3}-cicloalquilo C_{3-6}, alcoxi C_{1-3}-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, halo-alquilo C_{1-6}, halo-cicloalquilo C_{3-6}, halo-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, ciano-alquilo C_{1-4}, amino-alquilo C_{1-6}, alquil C_{1-3}-amino-alquilo C_{1-6} y bis(alquil C_{1-3})amino-alquilo C_{1-6};

o R^{7}' y R^{8}' junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico, cuyo anillo comprende de 4 a 7 átomos de anillo de los cuales uno es nitrógeno y de los cuales el otro se selecciona opcionalmente a partir de N, NH, O, S, SO y SO_{2}, y cuyo anillo se sustituye sobre carbono o nitrógeno mediante 1 ó 2 grupos seleccionados independientemente a partir de alquilo C_{1-4}, hidroxi, fosfonooxi, alcoxi C_{1-4}, hidroxi-alquilo C_{1-4}, fosfonooxi-alquilo C_{1-4}, hidroxi-alcoxi C_{1-4}-alquilo C_{1-4}, fosfonooxi-alcoxi C_{1-4}-alquilo C_{1-4} y alcoxi C_{1-4}-alcoxi C_{1-4}, y en el que un -CH_{2}- de anillo se reemplaza opcionalmente con un -C(O)-;

R^{9'}, R^{10'}, R^{15'} y R^{16'} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-6}, cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, hidroxi-alquilo C_{1-6}, fosfonooxi-alquilo C_{1-6}, halo-alquilo C_{1-6}, amino-alquilo C_{1-6}, alquil C_{1-6}-amino-alquilo C_{1-6} y bis(alquil C_{1-6})amino-alquilo C_{1-6};

a condición de que un compuesto de fórmula (IA) contenga al menos un grupo fosfonooxi.

En una realización preferida un compuesto de fórmula (IA) contiene sólo al menos un grupo fosfonooxi.

Como un aspecto más se proporciona un compuesto de fórmula (IA) o su sal farmacéuticamente aceptable.

En esta memoria descriptiva, el término alquilo, cuando se usa solo o como un sufijo o prefijo o de otra forma, incluye estructuras de cadena lineal y de cadena ramificada saturadas que comprenden átomos de carbono e hidrógeno. Las referencias a grupos alquilo individuales tales como "propilo" son específicas solamente para la versión de cadena lineal y las referencias a grupos alquilo individuales de cadena ramificada tales como terc-butilo son específicas solamente para la versión de cadena ramificada. Una convención análoga se aplica a otros términos genéricos tales como alquenilo y alquinilo.

Cicloalquilo es un grupo alquilo monocíclico, y cicloalquenilo y cicloalquinilo son grupos alquenilo y alquinilo monocíclicos, respectivamente.

El sufijo C_{m-n} en alquilo C_{m-n} y otros términos (en los que m y n son números enteros) indica el intervalo de átomos de carbono que están presentes en el grupo, por ejemplo alquilo C_{1-3} incluye alquilo C_{1} (metilo), alquilo C_{2} (etilo) y alquilo C_{3} (propilo o isopropilo).

El término alcoxi C_{m-n} comprende grupos -O-alquilo C_{m-n}.

El término halo incluye fluoro, cloro, bromo y yodo.

Los grupos arilo son grupos carbocíclicos aromáticos que pueden ser monocíclicos o bicíclicos.

A menos que se establezca de otro modo, los grupos heteroarilo son anillos aromáticos monocíclicos o bicíclicos que contienen de 5 a 10 átomos de anillo de los cuales 1, 2, 3 ó 4 átomos de anillo son elegidos a partir de nitrógeno, azufre u oxígeno, donde puede ser oxidado un nitrógeno o azufre de anillo.

Heterociclilo es un anillo monocíclico o bicíclico, saturado, insaturado o parcialmente saturado que contiene de 4 a 7 átomos de anillo, de los cuales 1, 2 ó 3 átomos de anillo son seleccionados a partir de nitrógeno, azufre u oxígeno, cuyo anillo puede ser unido a carbono o nitrógeno, en el que un grupo -CH_{2}- puede ser opcionalmente reemplazado por un grupo -C(O)-; en el que un átomo de nitrógeno o azufre de anillo se oxida opcionalmente para formar el N-óxido o S-óxido(s); y en el que un -NH- de anillo se sustituye opcionalmente por acetilo, formilo, metilo o mesilo. Cuando se usa el término heterociclilo dentro de la definición de grupos de la fórmula (I), este anillo heterociclilo se sustituye opcionalmente por 1 ó 2 grupos seleccionados a partir de alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, hidroxi-alquilo C_{1-4}, hidroxi y halo-alquilo C_{1-4}, y preferiblemente el anillo se sustituye así. Cuando se usa el término heterociclilo dentro de la definición de grupos de la fórmula (IA), este anillo heterociclilo se sustituye opcionalmente por 1 ó 2 grupos seleccionados a partir de alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, hidroxi-alquilo C_{1-4}, fosfonooxi-alquilo C_{1-4}, hidroxi, fosfonooxi y halo-alquilo C_{1-4}, y preferiblemente el anillo se sustituye así. Cuando se usa el término heterociclilo en la definición de R^{3} en la fórmula (I), en un aspecto de la invención es un anillo monocíclico saturado que contiene de 4 a 7 átomos de anillo de los cuales 1 ó 2 son nitrógeno y cuyo anillo se sustituye opcionalmente por alquilo C_{1-4}, hidroxi-alquilo C_{1-4} e hidroxi. Cuando se usa el término heterociclilo en la definición de R^{3'} en la fórmula (IA), en un aspecto de la invención es un anillo monocíclico saturado que contiene de 4 a 7 átomos de anillo de los cuales 1 ó 2 son nitrógeno y cuyo anillo se sustituye opcionalmente por alquilo C_{1-4}, hidroxi-alquilo C_{1-4}, fosfonooxi-alquilo C_{1-4}, hidroxi y fosfonooxi.

El fosfonooxi es, en un aspecto, un grupo de fórmula -OP(O)(OH)_{2}. Sin embargo, el término fosfonooxi también incluye sales tales como las formadas con iones de metal alcalino tales como iones de sodio o potasio o iones de metal alcalino-térreo, por ejemplo iones de calcio o magnesio.

Esta memoria descriptiva también hace uso de varios términos compuestos para describir grupos que comprenden más de una funcionalidad. Tales términos deben ser interpretados como se interpretan en la técnica. Por ejemplo, cicloalquil C_{m-n}-alquilo C_{m-n} comprende alquilo C_{m-n} sustituido con cicloalquilo C_{m-n} y alcoxi C_{m-n}-cicloalquil C_{m-n-}alquilo C_{m-n} comprende alquilo C_{m-n} sustituido con cicloalquilo C_{m-n}, cuyo cicloalquilo C_{m-n} es sustituido con alcoxi C_{m-n}.

Halo-alquilo C_{m-n} es un grupo alquilo C_{m-n} que está sustituido con 1, 2 ó 3 sustituyentes halo. De forma similar, otros términos genéricos que contienen halo tales como grupos halo-cicloalquilo C_{m-n} y halo-cicloalquil C_{m-n}-alquilo C_{m-n} pueden contener 1, 2 ó 3 sustituyentes halo.

Hidroxi-alquilo C_{m-n} es un grupo alquilo C_{m-n} que está sustituido con 1, 2 ó 3 sustituyentes hidroxi. De forma similar, otros términos genéricos que contienen hidroxi tales como los grupos hidroxi-cicloalquilo C_{m-n}, hidroxi-alquil C_{m-n}-cicloalquilo C_{m-n}, hidroxi-cicloalquil C_{m-n-}alquilo C_{m-n} e hidroxi-alcoxi C_{m-n}-alquilo C_{m-n} pueden contener 1, 2 ó 3 sustituyentes hidroxi.

Alcoxi C_{m-n}-alquilo C_{m-n} es un grupo alquilo C_{m-n} que está sustituido con 1, 2 ó 3 sustituyentes alcoxi C_{m-n}. De forma similar, otros términos genéricos que contienen alcoxi C_{m-n} tales como los grupos alcoxi C_{m-n}-alcoxi C_{m-n}, alcoxi C_{m-n}-cicloalquilo C_{m-n} y alcoxi C_{m-n}-cicloalquil C_{m-n}-alquilo C_{m-n} pueden contener 1, 2 ó 3 sustituyentes alcoxi C_{m-n}.

Cuando se eligen sustituyentes opcionales a partir de, por ejemplo 1 ó 2 o a partir de 1, 2 ó 3 grupos o sustituyentes debe entenderse que esta definición incluye a todos los sustituyentes que se eligen a partir de uno de los grupos especificados, es decir, todos los sustituyentes que son iguales o los sustituyentes que se eligen a partir de dos o más de los grupos especificados, es decir, los sustituyentes que no son iguales.

A menos que se especifique de otra forma, el átomo de unión de un grupo puede ser cualquier átomo de tal grupo, de tal modo que, por ejemplo, el propilo incluya al prop-1-ilo y al prop-2-ilo.

Los compuestos de la presente invención han sido denominados con la ayuda de un software informático (ACD/
versión Name 6.6 o versión ACD Name Batch 6.0).

Los valores adecuados para cualquier grupo R o cualquier parte o sustituyente para tales grupos incluyen:

para alquilo C_{1-4}:: metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo y terc-butilo;

para alquilo C_{1-6}:: alquilo C_{1-4}, pentilo, neopentilo, dimetilbutilo y hexilo;

para alquenilo C_{2-4}:: vinilo, alilo y but-2-enilo;

para alquenilo C_{2-6}:: alquenilo C_{2-4}, 3-metilbut-2-enilo y 3-metilpent-2-enilo;

para alquinilo C_{2-4}:: etinilo, propargilo y prop-1-inilo;

para alquinilo C_{2-6}:: alquinilo C_{2-4}, pent-4-inilo y 2-metilpent-4-inilo;

para cicloalquilo C_{3-6}:: ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo;

para cicloalquenilo C_{3-6}:: ciclobutenilo, ciclopentenilo, ciclohexenilo y ciclohex-1,4-dienilo;

para cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}:: ciclopropilmetilo, ciclobutilmetilo, ciclopentilmetilo, 2-ciclopropiletilo y 2-ciclobutiletilo;

para alcoxi C_{1-4}:: metoxi, etoxi, propoxi, butoxi y terc-butoxi;

para alcoxi C_{1-3}-alquilo C_{1-4}:: metoximetilo, 2-metoxietilo, 2-metoxipropilo y 2-etoxietilo;

para alcoxi C_{1-3}-alquilo C_{1-6}:: alcoxi C_{1-3}-alquilo C_{1-4}, 4-metoxibutilo, 3-etoxibutilo y 4,4-dietoxibutilo;

para alcoxi C_{1-3}-cicloalquilo C_{3-6}:: 2-metoxiciclobutilo, 3-metoxiciclopentilo y 3-etoxiciclopentilo;

para alcoxi C_{1-3}-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}:: 2-metoxiciclobutilmetilo y 2-metoxiciclopentilmetilo;

para alcoxi C_{1-4}-alcoxi C_{1-4}:: metoximetoxi, 2-metoxietoxi y 2-etoxietoxi;

para hidroxi-alquilo C_{1-4}:: hidroximetilo, 2-hidroxietilo, 2,2-dihidroxietilo y 3-hidroxipropilo;

para hidroxi-alquilo C_{1-6}:: hidroxi-alquilo C_{1-4}, 3-hidroxipentilo y 6-hidroxihexilo;

para hidroxi-cicloalquilo C_{3-6}:: 2-hidroxiciclopropilo, 2-hidroxiciclobutilo y 2-hidroxiciclopentilo;

para hidroxi-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}:: 2-hidroxiciclopropilmetilo y 2-hidroxiciclobutilmetilo;

para hidroxi-alquil C_{1-4}-cicloalquilo C_{3-6}:: 1-(hidroximetil)ciclopentilo;

para hidroxi-alcoxi C_{1-4}-alquilo C_{1-4}:: 2-(2-hidroxietoxi)etilo;

para halo-alquilo C_{1-6}:: clorometilo, trifluorometilo y 3,3,3-trifluoropropilo;

para halo-cicloalquilo C_{3-6}:: 2-clorociclopropilo y 2-clorociclobutilo;

para halo-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}:: 2-clorociclopropilmetilo y 2-clorociclobutilmetilo;

para ciano-alquilo C_{1-4}:: cianometilo y 2-cianoetilo;

para amino-alquilo C_{1-6}:: aminometilo, 2-aminoetilo, 2-aminopropilo y 4-aminobutilo;

para alquil C_{1-3}amino-alquilo C_{1-6}:: 2-(metilamino)etilo y 3-(etilamino)propilo;

para bis(alquil C_{1-3})amino-alquilo C_{1-6}:: 2-(dimetilamino)etilo, 2-[metil(etil)amino]etilo y 2-(dietilamino)etilo;

para alquil C_{1-4}-amino:: metilamino, etilamino, propilamino e isopropilamino;

para bis(alquil C_{1-4})amino:: dimetilamina, metil(etil)amino y dietilamino;

alquil C_{1-6}-amino-alquilo C_{1-6}:: 3-(metilamino)propilo, 4-[metilamino]butilo y 2-(etilamino)etilo;

bis(alquil C_{1-6})amino-alquilo C_{1-6}:: 3-(dimetilamino)propilo, 4-[metil(etil)amino]butilo y 2-(dietila- mino)etilo;

para arilo:: fenilo y naftilo

para heteroarilo:: furilo, tienilo, pirrolilo, pirazolilo, piridilo, pirazinilo, piridazinilo, pirimidinilo, quinazolinilo y quinolinilo

para heterociclilo:: azetidinilo, pirrolidinilo, imidazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, azepanilo, diazepanilo, piridilo, imidazolilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, furanilo, piranilo, tetrahidrotienilo, tienilo, tetrahidro-2H-piranilo y morfolinilo.

para fosfonooxi-alquilo C_{1-4}:: fosfonooximetilo y 2-fosfonooxietilo;

para fosfonooxi-alquilo C_{1-6}:: fosfonooxi-alquilo C_{1-4} y 3-fosfonooxipentilo;

para fosfonooxi-cicloalquilo C_{3-6}:: 2-fosfonooxiciclopropilo y 2-fosfonooxiciclobutilo;

para fosfonooxi-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}:: 2-fosfonooxiciclopropilmetilo y 2-fosfonooxiciclobutilmetilo;

para fosfonooxi-alquil C_{1-4}-cicloalquilo C_{3-6}:: 1-(fosfonooximetil)ciclopentilo;

para fosfonooxi-alcoxi C_{1-4}-alquilo C_{1-4}:: 2-(2-fosfonooxietoxi)etilo.

\newpage

En el ámbito de la presente invención, se debe entender que, en la medida en que ciertos compuestos de la fórmula (I) o la fórmula (IA) definidos en este documento puedan existir en formas ópticamente activas o racémicas en virtud de uno o más átomos de carbono asimétricos o azufre, la invención incluye en su definición cualquier tal forma ópticamente activa o racémica, que posea actividad inhibidora de aurora quinasa y en particular actividad inhibidora de Aurora-A y/o Aurora-B quinasa. La síntesis de formas ópticamente activas se puede llevar a cabo mediante técnicas estándar de química orgánica bien conocidas en la técnica, por ejemplo por síntesis a partir de materiales de partida ópticamente activos o por resolución de una forma racémica. De forma similar, la actividad mencionada anteriormente puede ser evaluada usando las técnicas de laboratorio estándar referidas de aquí en adelante.

En el ámbito de la presente invención, se debe entender que un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (IA) puede exhibir el fenómeno del tautomerismo y que las fórmulas representadas dentro de esta memoria descriptiva pueden representar sólo una de las posibles formas tautoméricas. Se sobrentiende que la invención abarca a cualquier forma tautomérica que tiene actividad inhibidora de Aurora quinasa y en particular actividad inhibidora de Aurora-A y/o Aurora-B quinasa y no está limitada meramente a cualquier forma tautomérica utilizada dentro de las representaciones de las fórmulas.

También debe entenderse que determinados compuestos de la fórmula (I) o la fórmula (IA) pueden existir en formas solvatadas así como no solvatadas tales como, por ejemplo, formas hidratadas. Debe entenderse que la invención abarca a todas tales formas solvatadas que tienen actividad inhibidora de Aurora quinasa y en particular actividad inhibidora de Aurora-A y/o Aurora-B quinasa.

La presente invención se refiere a los compuestos de la fórmula (I) o la fórmula (IA) como se definen en este documento así como a sus sales. Las sales para uso en composiciones farmacéuticas serán sales farmacéuticamente aceptables, aunque puedan ser útiles otras sales en la producción de los compuestos de la fórmula (I) o la fórmula (IA) y sus sales farmacéuticamente aceptables. Las sales farmacéuticamente aceptables de la invención pueden, por ejemplo, incluir sales de adición de ácido de compuestos de fórmula (I) o fórmula (IA) como se definen en este documento que sean suficientemente básicas para formar tales sales. Tales sales de adición de ácido incluyen, aunque no están limitadas, a sales de fumarato, metanosulfonato, hidrocloruro, hidrobromuro, citrato y maleato y sales formadas con ácido fosfórico y sulfúrico. Además cuando los compuestos de fórmula (I) o fórmula (IA) son suficientemente ácidos, las sales son sales básicas y los ejemplos incluyen, aunque no están limitados, a una sal de metal alcalino, por ejemplo sal de sodio o potasio, un metal alcalino-térreo, por ejemplo calcio o magnesio, o sal de amina orgánica, por ejemplo trietilamina, etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, morfolina, N-metilpiperidina, N-etilpiperidina, dibencilamina o amino ácidos tales como lisina.

Los compuestos de fórmula (I) o fórmula (IA) también pueden ser proporcionados como ésteres hidrolizables in vivo. Un éster hidrolizable in vivo de un compuesto de fórmula (I) o fórmula (IA) que contiene un grupo carboxi o hidroxi es, por ejemplo, un éster aceptable farmacéuticamente que se hidroliza en el cuerpo humano o animal para producir el ácido o alcohol parental. Tales ésteres pueden ser identificados administrando, por ejemplo, intravenosamente a un animal de ensayo, el compuesto bajo ensayo y posteriormente examinando los fluidos corporales del animal de ensayo.

Los ésteres farmacéuticamente aceptables adecuados para carboxi incluyen ésteres de alcoxi C_{1-6}-metilo, por ejemplo metoximetilo, ésteres de alcanoil C_{1-6}-oximetilo, por ejemplo pivaloiloximetilo, ésteres de ftalidilo, ésteres de cicloalcoxi C_{3-8}-carboniloxi-alquilo C_{1-6}, por ejemplo 1-ciclohexilcarboniloxietilo; ésteres de 1,3-dioxolen-2-onilmetilo, por ejemplo 5-metil-1,3-dioxolen-2-onilmetilo; y ésteres de alcoxi C_{1-6}-carboniloxietilo, por ejemplo 1-metoxicarboniloxietilo, y se pueden formar en cualquier grupo carboxi en los compuestos de esta invención.

Los ésteres farmacéuticamente aceptables adecuados para hidroxi incluyen ésteres inorgánicos tales como ésteres de fosfato (incluyendo ésteres cíclicos fosforamídicos) y éteres de \alpha-aciloxialquilo y compuestos relacionados que como resultado de la hidrólisis in vivo de la rotura del éster dan el/los grupo/s hidroxi relacionado/s. Los ejemplos de éteres de \alpha-aciloxialquilo incluyen acetoximetoxi y 2,2-dimetilpropioniloximetoxi. Una selección del éster hidrolizable in vivo que forme grupos para hidroxi incluyen alcanoilo C_{1-10}, por ejemplo formilo, acetilo; benzoilo; fenilacetilo; benzoilo sustituido y fenilacetilo, alcoxi C_{1-10}-carbonilo (para dar ésteres de carbonato de alquilo), por ejemplo etoxicarbonilo; di-alquil C_{1-4}-carbamoílo y N-(di-alquil C_{1-4}-aminoetil)-N-alquil C_{1-4}-carbamoílo (para dar carbamatos); di-alquil C_{1-4}-aminoacetilo y carboxiacetilo. Los ejemplos de sustituyentes de anillo en fenilacetilo y benzoilo incluyen aminometilo, alquil C_{1-4}-aminometilo y di-(alquil C_{1-4})aminometilo, y morfolino o piperazino unido a partir de un átomo de nitrógeno de anillo mediante un grupo enlazante metileno a la posición 3 ó 4 del anillo de benzoilo. Otros ésteres hidrolizables in vivo interesantes incluyen, por ejemplo, R^{A}C(O)Oalquil C_{1-6}-CO-, en el que R^{A} es, por ejemplo, benziloxi-alquilo C_{1-4}, o fenilo). Los sustituyentes adecuados en un grupo fenilo en tales ésteres incluyen, por ejemplo, 4-piperazino C_{1-4}-alquilo C_{1-4}, piperazino-alquilo C_{1-4} y morfolino-alquilo C_{1-4}.

Los compuestos de la fórmula (I) pueden administrarse en la forma de un profármaco que se degrada en el cuerpo humano o animal para proporcionar un compuesto de la fórmula (I). Ejemplos de profármacos incluyen ésteres hidrolizables in vivo de un compuesto de la fórmula (I). Se conocen varias formas de profármacos en la técnica. Para ejemplos de tales derivados de profármaco, véase:

a): Design of Prodrugs, editado por H. Bundgaard, (Elsevier, 1985) y Methods in Enzymology, Vol. 42, p. 309-396, editado por K. Widder, et al. (Academic Press, 1985);

b): A Textbook of Drug Design and Development, editado por Krogsgaard-Larsen y H. Bundgaard, Capítulo 5 "Design and Application of Prodrugs", por H. Bundgaard p. 113-191 (1991);

c): H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);

d): H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988); y

e): N. Kakeya, et al., Chem Pharm Bull, 32, 692 (1984).

Los valores particulares de X, R^{1}, R^{1'}, R^{2}, R^{2'}, R^{3}, R^{3'}, R^{4} y R^{5} para los compuestos de fórmula (I) y fórmula (IA) son como sigue. Tales valores pueden ser usados cuando sea apropiado con cualquiera de las definiciones, reivindicaciones o realizaciones definidas en este documento.

En un aspecto de la invención X es NR^{6}. En otro aspecto X es NH.

En un aspecto de la invención R^{6} es hidrógeno o metilo. En otro aspecto R^{6} es hidrógeno.

En un aspecto de la invención R^{1} es hidrógeno o -OR^{11}. En otro aspecto R^{1} es hidrógeno.

En un aspecto de la invención X^{1} es un enlace lineal o -O-. En otro aspecto X^{1} es un enlace lineal.

En un aspecto de la invención R^{11} es hidrógeno, heterociclilo seleccionado a partir de piperidinilo y pirrolidinilo o alquilo C_{1-4} (opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi C_{1-4}, amino, alquil C_{1-4}-amino o bis(alquil C_{1-4})amino). En otro aspecto R^{11} es hidrógeno, alquilo C_{1-4} o alcoxi C_{1-4}. En otro aspecto R^{11} es hidrógeno.

En un aspecto de la invención R^{2} es hidrógeno o -OR^{12}. En otro aspecto R^{2} es hidrógeno o metoxi. En un aspecto adicional R^{2} es hidrógeno. En todavía un aspecto más R^{2} es metoxi.

En un aspecto de la invención X^{2} es un enlace lineal o -O-.

En un aspecto de la invención R^{12} es hidrógeno, alquilo C_{1-4} (opcionalmente sustituido con heterociclilo) o heterociclilo. En otro aspecto R^{12} es hidrógeno o alquilo C_{1-4}. En otro aspecto de la invención R^{12} es hidrógeno. En un aspecto más de la invención R^{12} es metilo.

En un aspecto de la invención R^{3} es -X^{3}R^{13}. En un aspecto más R^{3} es 3-(2-hidroximetilpirrolidin-1-il)propoxi o 3-[(2-hidroxietil)(propil)amino]propoxi.

En un aspecto de la invención X^{3} es -CH_{2}=CH_{2}-, -O- o -NH-. En otro aspecto X^{3} es -O-.

En un aspecto de la invención R^{13} es alquilo C_{1-6} sustituido con -NR^{7}R^{8}, heterociclilo o halo. En un aspecto más de la invención R^{13} es etilo o propilo, ambos de los cuales son sustituidos con -Nk^{7}R^{8}, heterociclilo o halo. En todavía un aspecto más de la invención R^{13} es propilo sustituido con cloro, -NR^{7}R^{8} o un heterociclilo seleccionado a partir de pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, diazepanilo y azetidinilo cuyo heterociclilo se sustituye opcionalmente con hidroxi, metilo, hidroximetilo o 2-hidroxietilo. En otro aspecto R^{13} es propilo sustituido con cloro o -NR^{7}R^{8}. En un aspecto más R^{13} es propilo sustituido con -NR^{7}R^{8}.

En un aspecto de la invención R^{7} y R^{8} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, heterociclilo, alquilo C_{1-6}, hidroxi-alquilo C_{1-6}, hidroxialquil C_{1-4}-cicloalquilo C_{3-6}, alcoxi C_{1-3}-alquilo C_{1-4}, cicloalquilo C_{3-6}, cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, halo-alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, ciano-alquilo C_{1-4} y bis(alquil C_{1-3})amino-alquilo C_{1-6}; o R^{7} y R^{8} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico, cuyo anillo comprende de 4 a 7 átomos de anillo de los cuales uno es nitrógeno y de los cuales el otro es opcionalmente NH y cuyo anillo se sustituye opcionalmente sobre carbono o nitrógeno mediante un grupo seleccionado a partir de alquilo C_{1-4}, hidroxi, hidroxi-alquilo C_{1-4} e hidroxi-alcoxi C_{1-4}-alquilo C_{1-4}, y en el que un -CH_{2}- de anillo se reemplaza opcionalmente con -C(O)-. En un aspecto más R^{7} y R^{8} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, terc-butilo, pentilo, neopentilo, hidroximetilo, 2-hidroxietilo, 3-hidroxi-1,1-dimetilpropilo, metoximetilo, 2-metoxietilo, 2-etoxietilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopropilmetilo, ciclobutilmetilo, ciclopentilmetilo, trifluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 3,3,3-trifluoropropilo, alilo, propargilo, 2-(dimetilamino)etilo y 2-(dietilamino)etilo; o R^{7} y R^{8} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico seleccionado a partir de pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, diazepanilo y azetidinilo en el que el anillo se sustituye opcionalmente con hidroxi, metilo, hidroximetilo o 2-hidroxietilo. En todavía un aspecto más R^{7} y R^{8} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, metilo, etilo, propilo, hidroximetilo, 2-hidroxietilo o 3-hidroxipropilo; o R^{7} y R^{8} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico seleccionado a partir de pirrolidinilo, piperidinilo y piperazinilo, en el que el anillo se sustituye opcionalmente con hidroximetilo o 2-hidroxietilo.

En un aspecto de la invención R^{4} es hidrógeno.

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En un aspecto de la invención R^{5} es arilo opcionalmente sustituido con 1 ó 2 halo. En otro aspecto R^{5} es fenilo opcionalmente sustituido con 1 ó 2 fluoro o cloro. En un aspecto más R^{5} es fenilo opcionalmente sustituido con 1 ó 2 fluoro. En todavía un aspecto más R^{5} es 2,3-difluorofenilo o 3-fluorofenilo.

En un aspecto de la invención R^{1'} es hidrógeno u -OR^{11'}. En otro aspecto R^{1'} es hidrógeno.

En un aspecto de la invención R^{11'} es hidrógeno, heterociclilo seleccionado a partir de piperidinilo o pirrolidinilo o alquilo C_{1-4} (opcionalmente sustituido con hidroxi, fosfonooxi, alcoxi C_{1-4}, amino, alquil C_{1-4}-amino o bis(alquil C_{1-4})amino). En otro aspecto R^{11'} es hidrógeno, alquilo C_{1-4} o alcoxi C_{1-4}. En otro aspecto R^{11'} es hidrógeno.

En un aspecto de la invención R^{2'} es hidrógeno u -OR^{12'}. En otro aspecto R^{2'} es hidrógeno o metoxi. En un aspecto más R^{2'} es hidrógeno. En todavía un aspecto más R^{2'} es metoxi.

En un aspecto de la invención R^{12'} es hidrógeno, alquilo C_{1-4} (opcionalmente sustituido con heterociclilo) o heterociclilo. En otro aspecto R^{12'} es hidrógeno o alquilo C_{1-4}. En otro aspecto de la invención R^{12'} es hidrógeno. En un aspecto más de la invención R^{12}' es metilo.

En un aspecto de la invención R^{3'} es -X^{3}R^{13'}.

En un aspecto de la invención R^{13'} es alquilo C_{1-6} sustituido con -NR^{7'}R^{8'}. En un aspecto más de la invención R^{13'} es propilo sustituido con -NR^{7'}R^{8'}.

En un aspecto de la invención R^{7'} se selecciona a partir de hidrógeno, heterociclilo, alquilo C_{1-6}, alcoxi C_{1-3}-alquilo C_{1-6}, ciano-alquilo C_{1-4} y cicloalquilo C_{3-6}. En otro aspecto R^{7'} es etilo, propilo, ciclobutilo o 2-metoxietilo.

En un aspecto de la invención R^{8'} es fosfonooxi-alquilo C_{1-4} o fosfonooxi-alquil C_{1-4-}cicloalquilo C_{3-6}. En otro aspecto R^{8'} es 2-fosfonooxietilo o 1,1-dimetil-3-fosfonooxipropilo.

En un aspecto de la invención R^{7'} y R^{8'} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico seleccionado a partir de pirrolidinilo, piperidinilo y piperazinilo cuyo anillo se sustituye sobre carbono o nitrógeno con un grupo seleccionado a partir de fosfonooxi, fosfonooximetilo y 2-fosfonooxietilo. En un aspecto más R^{7'} y R^{8'} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo de pirrolidinilo cuyo anillo se sustituye sobre carbono con fosfonooximetilo.

Una clase particular de compuestos es de la fórmula (I) en los que:

: X es NR^{6};

: R^{6} es hidrógeno o metilo;

: R^{1} es hidrógeno o -OR^{11};

: X^{1} es un enlace lineal o -O-;

: R^{11} es hidrógeno, heterociclilo seleccionado a partir de piperidinilo y pirrolidinilo, o alquilo C_{1-4} opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi C_{1-4}, amino, alquil C_{1-4}-amino o bis(alquil C_{1-4})amino; R^{2} es hidrógeno o -OR^{12};

: R^{12} es hidrógeno, alquilo C_{1-4} (opcionalmente sustituido con heterociclilo) o heterociclilo;

: R^{3} es -X^{3}R^{13};

: X^{3} es -CH_{2}=CH_{2}-, -O- o -NH-;

: R^{13} es alquilo C_{1-6} sustituido con -NR^{7}R^{8}, heterociclilo o halo;

: R^{7} y R^{8} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, heterociclilo, alquilo C_{1-6}, hidroxi-alquilo C_{1-6}, hidroxialquil C_{1-4}-cicloalquilo C_{3-6}, alcoxi C_{1-3}-alquilo C_{1-4}, cicloalquilo C_{3-6}, cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, halo-alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, ciano-alquilo C_{1-4} y bis(alquil C_{1-3})amino-alquilo C_{1-6}; o R^{7} y R^{8} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico, cuyo anillo comprende de 4 a 7 átomos de anillo de los cuales uno es nitrógeno y de los cuales el otro es opcionalmente NH y cuyo anillo se sustituye opcionalmente sobre carbono o nitrógeno con un grupo seleccionado a partir de alquilo C_{1-4}, hidroxi, hidroxi-alquilo C_{1-4} e hidroxi-alcoxi C_{1-4}-alquilo C_{1-4}, y en el que un -CH_{2}- de anillo se reemplaza opcionalmente con -C(O)-;

: R^{4} es hidrógeno; y

: R^{5} es arilo opcionalmente sustituido con 1 ó 2 halo;

o es su sal, éster o profármaco

\global\parskip1.000000\baselineskip

Una clase particular de compuestos es de la fórmula (I) en los que:

: X es NH;

: R^{1} es hidrógeno;

: R^{2} es hidrógeno o metoxi;

: R^{3} es -X^{3}R^{13};

: X^{3} es -O-;

: R^{13} es propilo sustituido con cloro o -NR^{7}R^{8};

: R^{7} y R^{8} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, terc-butilo, pentilo, neopentilo, hidroximetilo, 2-hidroxietilo, 3-hidroxi-1,1-dimetilpropilo, metoximetilo, 2-metoxietilo, 2-etoxietilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopropilmetilo, ciclobutilmetilo, ciclopentilmetilo, trifluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 3,3,3-trifluoropropilo, alilo, propargilo, 2-(dimetilamino)etilo y 2-(dietilamino)etilo; o R^{7} y R^{8} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico seleccionado a partir de pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, diazepanilo y azetidinilo en el que el anillo se sustituye opcionalmente con hidroxi, metilo, hidroximetilo o 2-hidroxi- etilo;

: R^{4} es hidrógeno; y

: R^{5} es 2,3-difluorofenilo o 3-fluorofenilo;

o es su sal, éster o profármaco.

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Una clase particular de compuestos es de la fórmula (IA) en los que:

: X es NR^{6};

: R^{6} es hidrógeno o metilo;

: R^{1'} es hidrógeno o -OR^{11'};

: R^{11'} es hidrógeno, heterociclilo seleccionado a partir de piperidinilo o pirrolidinilo, alquilo C_{1-4} opcionalmente sustituido con hidroxi, fosfonooxi, alcoxi C_{1-4}, amino, alquil C_{1-4}-amino o bis(alquil C_{1-4})amino;

: R^{2'} es hidrógeno o -OR^{12'};

: R^{12'} es hidrógeno, alquilo C_{1-4} (opcionalmente sustituido con heterociclilo) o heterociclilo;

: R^{3} es -X^{3}R^{13'};

: X^{3} es -CH_{2}=CH_{2}-, -O- o -NH-;

: R^{13'} es alquilo C_{1-6} sustituido con -NR^{7'} R^{8'};

: R^{7'} se selecciona a partir de hidrógeno, heterociclilo, alquilo C_{1-6}, alcoxi C_{1-3}-alquilo C_{1-6}, ciano-alquilo C_{1-4} y cicloalquilo C_{3-6};

: R^{8'} es fosfonooxi-alquilo C_{1-4} o fosfonooxi-alquil C_{1-4}-cicloalquilo C_{3-6};

: o R^{7'} y R^{8'} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico seleccionado a partir de pirrolidinilo, piperidinilo y piperazinilo cuyo anillo se sustituye sobre carbono o nitrógeno con un grupo seleccionado a partir de fosfonooxi, fosfonooximetilo y 2-fosfonooxietilo;

: R^{4} es hidrógeno; y

: R^{5} es arilo opcionalmente sustituido con 1 ó 2 halo;

o es su sal o éster.

\newpage

Una clase más particular de compuestos es de la fórmula (IA) en los que:

: X es NH;

: R^{1'} es hidrógeno;

: R^{2'} es hidrógeno o metoxi;

: R^{3'} es -X^{3}R^{13'};

: X^{3} es -O-;

: R^{13'} es propilo sustituido con -NR^{7'}R^{8'};

: R^{7'} es etilo, propilo, ciclobutilo o 2-metoxietilo;

: R^{8'} es 2-fosfonooxietilo o 1,1-dimetil-3-fosfonooxipropilo;

: R^{4} es hidrógeno; y

: R^{5} es 2,3-difluorofenilo o 3-fluorofenilo;

o es su sal o éster.

\vskip1.000000\baselineskip

Compuestos particulares de la invención son cualquiera de los siguientes:

N-(3-fluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]propoxi}quinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida;

N-(3-fluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2-hidroxietil)(propil)amino]propoxi}quinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida;

N-(2,3-difluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]propoxi}quinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida;

N-(2,3-difluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2-hidroxietil)(propil)amino]propoxi}quinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida;

N-(3-fluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]propoxi}-6-metoxiquinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida;

N-(3-fluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2-hidroxietil)(propil)amino]propoxi}-6-metoxiquinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida;

N-(2,3-difluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]propoxi}-6-metoxiquinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida; y

N-(2,3-difluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2-hidroxietil)(propil)amino]propoxi}-6-metoxiquinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida;

o su sal, éster o profármaco y más particularmente su sal farmacéuticamente aceptable.

\vskip1.000000\baselineskip

Otros compuestos particulares de la invención son cualquiera de los siguientes:

dihidrógeno fosfato de {(2R)-1-[3-({4-[(1-{2-[(3-fluorofenil)amino]-2-oxoetil}-1H-pirazol-4-il)amino]quinazolin-7-il}oxi)propil]pirrolidin-2-il}metilo;

dihidrógeno fosfato de {(2R)-1-[3-({4-[(1-(2-[(2,3-difluorofenil)amino]-2-oxoetil}-1H-pirazol-3-il)amino]quinazolin-7-il}oxi)propil]pirrolidin-2-il}metilo;

dihidrógeno fosfato de {(2R)-1-[3-({4-[(1-{2-[(3-fluorofenil)amino]-2-oxoetil}-1H-pirazol-3-il)amino]-6-metoxiquinazolin-7-il}oxi)propil]pirrolidin-2-il}metilo; y

dihidrógeno fosfato de {(2R)-1-[3-({4-[(1-{2-[(2,3-difluorofenil)amino]-2-oxoetil}-1H-pirazol-3-il)amino]-6-metoxiquinazolin-7-il}oxi)propil]pirrolidin-2-il}metilo;

o su sal o su éster y más particularmente su sal farmacéuticamente aceptable.

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La presente invención también proporciona un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (I) o su sal o su éster, cuyo procedimiento comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (II)

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donde L es un grupo saliente adecuado tal como cloro, bromo, SMe etc.

con un compuesto de fórmula (III)

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en presencia de ácido clorhídrico en dioxano,

y posteriormente, si es necesario:

i): convertir un compuesto de fórmula (I) en otro compuesto de fórmula (I); y/o

ii): eliminar cualquier grupo protector; y/o

iii): formar su sal o éster.

La reacción es realizada adecuadamente en un disolvente orgánico tal como dimetil-acetamida o isopropanol a elevadas temperaturas desde 50ºC a 120ºC durante 30 minutos a 2 horas.

El procedimiento puede comprender además un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (II) a partir de un compuesto de fórmula (IV)

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haciéndolo reaccionar con un reactivo tal como acetato de formamidina en un disolvente tal como 2-metoxietanol con reflujo para proporcionar un compuesto de fórmula (V)

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que entonces puede hacerse reaccionar con un reactivo tal como cloruro de tionilo en un disolvente tal como dimetil-formamida a elevadas temperaturas para proporcionar un compuesto de fórmula (II) donde L es, por ejemplo, cloro.

Los compuestos de fórmula (IV) o bien son conocidos en la técnica o bien pueden ser derivados a partir de otros compuestos conocidos en la técnica mediante métodos convencionales que son evidentes a partir de la bibliografía.

El procedimiento puede comprender además un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (III) cuyo procedimiento comprende la reacción de un compuesto de fórmula (VI)

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con un compuesto de fórmula (VII)

(VII)R^{5}-NH_{2}

La reacción es adecuadamente efectuada en un disolvente orgánico tal como tetrahidrofurano (THF) o diclorometano (DCM) a temperaturas desde 0ºC a 25ºC en presencia de una base tal como hidróxido de sodio o piridina en una atmósfera inerte durante 1 a 5 horas.

Además se proporciona un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (IA) o su sal o su éster, cuyo procedimiento comprende la fosforilación de un compuesto adecuado de fórmula (I) haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (I) y tetrazol con dietilfosforamidita de di-terc-butilo en un disolvente orgánico apropiado tal como dimetilformamida o dimetilacetamida en una atmósfera inerte, seguido de (después de 1 a 5 horas) la adición de peróxido de hidrógeno y metabisulfito de sodio. La desprotección del grupo fosfato proporciona entonces un compuesto de fórmula (IA). La desprotección se efectúa adecuadamente con ácido clorhídrico en dioxano o diclorometano (DCM) a temperatura ambiente durante 6 a 30 horas.

Las condiciones de reacción adecuadas son ilustradas en este documento.

Se apreciará que ciertos de los diversos sustituyentes del anillo en los compuestos de la presente invención se pueden introducir por reacciones de sustitución aromática estándar o generar por modificaciones de grupos funcionales convencionales, bien antes o bien inmediatamente después de los procedimientos mencionados anteriormente, y como tales están incluidos en el aspecto de los procedimientos de la invención. Dichas reacciones y modificaciones incluyen, por ejemplo, la introducción de un sustituyente mediante una reacción de sustitución aromática, reducción de sustituyentes, alquilación de sustituyentes y oxidación de sustituyentes. Los reactivos y condiciones de reacción para tales procedimientos son bien conocidos en la técnica química. Los ejemplos particulares de reacciones de sustitución aromática incluyen la introducción de un grupo nitro usando ácido nítrico concentrado, la introducción de un grupo acilo usando, por ejemplo, un haluro de acilo y ácido de Lewis (tal como tricloruro de aluminio) bajo condiciones de Friedel Crafts; la introducción de un grupo alquilo usando un haluro de alquilo y un ácido de Lewis (tal como tricloruro de aluminio) bajo condiciones de Friedel Crafts; y la introducción de un grupo halógeno. Ejemplos específicos de modificaciones incluyen la reducción de un grupo nitro a un grupo amino, por ejemplo, por hidrogenación catalítica con un catalizador de níquel o el tratamiento con hierro en presencia de ácido clorhídrico con calentamiento; la oxidación de alquiltio a alquilsulfinilo o alquilsulfonilo.

También debe ser apreciado que en algunas de las reacciones mencionadas en este documento puede ser necesario/deseable proteger a cualquier grupo sensible en los compuestos. Los casos en los que la protección es necesaria o deseable y los métodos adecuados para la protección son conocidos por los expertos en la materia. Pueden utilizarse grupos protectores convencionales de acuerdo con la práctica habitual (para una ilustración véase T.W. Green, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, 1991). Por lo tanto, si los reactivos incluyen grupos tales como amino, carboxi o hidroxi puede ser deseable proteger el grupo en alguna de las reacciones mencionadas en la presente memoria.

Un grupo protector adecuado para un grupo amino o alquilamino es, por ejemplo, un grupo acilo, por ejemplo, un grupo alcanoilo tal como acetilo, un grupo alcoxicarbonilo, por ejemplo un grupo metoxicarbonilo, etoxicarbonilo o terc-butoxicarbonilo, un grupo arilmetoxicarbonilo, por ejemplo benciloxicarbonilo, o un grupo aroilo, por ejemplo benzoilo. Las condiciones de desprotección para los grupos protectores anteriores varían necesariamente con la elección del grupo protector. Así, por ejemplo, un grupo acilo tal como un grupo alcanoilo o alcoxicarbonilo o un grupo aroilo puede eliminarse, por ejemplo, mediante hidrólisis con una base adecuada tal como un hidróxido de metal alcalino, por ejemplo, hidróxido de litio o de sodio. De forma alternativa un grupo acilo tal como un grupo terc-butoxicarbonilo puede ser eliminado, por ejemplo, por tratamiento con un ácido adecuado como ácido clorhídrico, sulfúrico o fosfórico o ácido trifluoroacético y puede ser eliminado un grupo arilmetoxicarbonilo tal como un grupo benciloxicarbonilo, por ejemplo, mediante hidrogenación en un catalizador tal como paladio-sobre-carbono, o mediante tratamiento con un ácido de Lewis, por ejemplo, tris(trifluoroacetato) de boro. Un grupo protector adecuado alternativo para un grupo amino primario es, por ejemplo, un grupo ftaloilo que puede eliminarse por tratamiento con una alquilamina, por ejemplo, dimetilaminopropilamina o con hidrazina.

Un grupo protector adecuado para un grupo hidroxi es, por ejemplo, un grupo acilo, por ejemplo, un grupo alcanoilo tal como acetilo, un grupo aroilo, por ejemplo, benzoilo o un grupo arilmetilo, por ejemplo, bencilo. Las condiciones de desprotección para los grupos protectores anteriores variará necesariamente con la elección del grupo protector. Así, por ejemplo, un grupo acilo tal como un grupo alcanoilo o aroilo puede eliminarse, por ejemplo, mediante hidrólisis con una base adecuada tal como un hidróxido de metal alcalino, por ejemplo, hidróxido de litio o de sodio. Alternativamente, puede eliminarse un grupo arilmetilo tal como un grupo bencilo, por ejemplo, por hidrogenación sobre un catalizador tal como paladio-sobre-carbono.

Un grupo protector adecuado para un grupo carboxi es, por ejemplo, un grupo esterificante, por ejemplo, un grupo metilo o etilo que puede ser eliminado, por ejemplo, mediante la hidrólisis con una base tal como hidróxido de sodio, o por ejemplo un grupo terc-butilo que puede ser eliminado, por ejemplo, mediante tratamiento con un ácido, por ejemplo, un ácido orgánico tal como el ácido trifluoroacético, o por ejemplo un grupo bencilo que puede ser eliminado, por ejemplo, mediante hidrogenación en un catalizador tal como paladio-sobre-carbono.

Los grupos protectores pueden eliminarse en cualquier etapa conveniente en la síntesis utilizando técnicas convencionales muy conocidas en la técnica química.

De acuerdo con un aspecto más de la invención se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, como se define en este documento en asociación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

También se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (IA), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, como se define en este documento en asociación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

Las composiciones de la invención pueden estar en una forma adecuada para uso oral (por ejemplo como comprimidos, pastillas para chupar, cápsulas duras o blandas, suspensiones acuosas u oleosas, emulsiones, polvos o gránulos dispersables, jarabes o elixires), para uso tópico (por ejemplo como cremas, pomadas, geles, o soluciones o suspensiones acuosas u oleosas), para administración por inhalación (por ejemplo como un polvo finamente dividido o un aerosol líquido), para administración por insuflación (por ejemplo como un polvo finamente dividido) para administración parenteral (por ejemplo como una disolución acuosa u oleosa estéril para dosificación intravenosa, subcutánea, intramuscular o como un supositorio para dosificación rectal).

Las composiciones de la invención pueden obtenerse por procedimientos convencionales utilizando excipientes farmacéuticos convencionales, bien conocidos en la materia. Así, las composiciones destinadas para uso oral pueden contener, por ejemplo, uno o más agentes colorantes, edulcorantes, saporíferos y/o conservantes.

Los excipientes adecuados aceptables farmacéuticamente para una formulación de comprimidos incluyen, por ejemplo, diluyentes inertes tales como lactosa, carbonato de sodio, fosfato de calcio o carbonato de calcio, agentes de granulación y disgregantes tales como almidón de maíz o ácido algénico; agentes aglutinantes tales como almidón; agentes lubricantes tales como estearato de magnesio, ácido esteárico o talco; agentes conservantes tales como p-hidroxibenzoato de etilo o propilo y antioxidantes, tales como ácido ascórbico. Las formulaciones de comprimidos pueden estar no recubiertas o recubiertas bien para modificar su disgregación y la posterior absorción del ingrediente activo dentro del tubo digestivo o para mejorar su estabilidad y/o aspecto, en cualquier caso, usando agentes de recubrimiento convencionales y procedimientos bien conocidos en la técnica.

Las composiciones para uso oral pueden estar en la forma de cápsulas de gelatina duras en las cuales el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blandas en las cuales el ingrediente activo se mezcla con agua o un aceite tal como aceite de cacahuete, parafina líquida, aceite de semilla de soja, aceite de coco o preferiblemente aceite de oliva, o cualquier otro vehículo aceptable.

Las suspensiones acuosas contienen en general el ingrediente activo en forma de polvo finamente dividido junto con uno o más agentes de suspensión, tales como carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma arábiga; agentes de dispersión o agentes humectantes tales como lecitina o productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos (por ejemplo poli(estearato de oxietileno) o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo heptadecaetilenoxicetanol o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales procedentes de ácidos grasos y un hexitol tal como monooleato de polioxietileno sorbitol o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo heptadecaetilenoxicetanol o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales procedentes de ácidos grasos y un hexitol tal como monooleato de polioxietileno sorbitol o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales procedentes de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de polietileno sorbitán. Las suspensiones acuosas también pueden contener uno o más conservantes (tales como p-hidroxibenzoato de etilo o propilo, antioxidantes (tales como ácido ascórbico), agentes colorantes, agentes saporíferos y/o agentes edulcorantes (tales como sacarosa, sacarina o aspartamo).

Se pueden formular suspensiones oleosas suspendiendo el ingrediente activo en un aceite vegetal (tales como aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco) o en un aceite mineral (tal como parafina líquida). Las suspensiones oleosas también pueden contener un agente espesante tal como cera de abejas, parafina sólida o alcohol cetílico. Se pueden añadir agentes edulcorantes tales como los indicados anteriormente y agentes saporíferos para proporcionar una preparación oral apetitosa. Se pueden conservar estas composiciones por la adición de un antioxidante tal como ácido ascórbico.

Los polvos dispersables o liofilizables y gránulos adecuados para la preparación de una suspensión acuosa o solución por la adición de agua generalmente contienen el ingrediente activo junto con un agente dispersante o humectante, agente de suspensión y uno o más conservantes. Se ejemplifican agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados, por los mencionados ya anteriormente. También pueden estar presentes excipientes adicionales tales como agentes edulcorantes, saporíferos y colorantes.

Las composiciones farmacéuticas de la invención también pueden estar en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, tal como aceite de oliva o aceite de cacahuete o un aceite mineral, tal como por ejemplo parafina líquida o una mezcla de cualquiera de éstos. Los agentes emulsionantes adecuados pueden ser, por ejemplo, gomas que se encuentran en la naturaleza tales como goma arábiga o goma de tragacanto, fosfatidas que se encuentran en la naturaleza tales como soja, lecitina, ésteres o ésteres parciales procedentes de ácidos grasos y anhídridos de hexitol (por ejemplo monooleato de sorbitán) y productos de condensación de dichos ésteres parciales con óxido de etileno tales como monooleato de polioxietileno sorbitán. Las emulsiones también pueden contener agentes edulcorantes, saporíferos y conservantes.

Se pueden formular jarabes y elixires con agentes edulcorantes tales como glicerol, propilenglicol, sorbitol, aspartamo o sacarosa y también pueden contener un agente demulcente, conservante, saporífero y/o colorante.

Las composiciones farmacéuticas también pueden estar en la forma de una suspensión estéril inyectable acuosa o aceitosa, soluciones, emulsiones o sistemas particulares, que pueden ser formulados de acuerdo con procedimientos conocidos usando uno o más de los agentes de dispersión o humectación apropiados y agentes de suspensión, que han sido previamente mencionados. Una preparación inyectable estéril también puede ser una disolución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo, una disolución en polietilenglicol.

Se pueden preparar formulaciones de supositorios mezclando el ingrediente activo con un excipiente no irritante adecuado que sea sólido a temperaturas ordinarias pero líquido a la temperatura rectal y se funda por lo tanto en el recto para liberar el fármaco. Los excipientes adecuados incluyen, por ejemplo, manteca de cacao y polietilenglicoles.

Las formulaciones tópicas, tales como cremas, ungüentos, geles y disoluciones o suspensiones acuosas u oleosas, se pueden obtener en general formulando un ingrediente activo con un vehículo o diluyente tópicamente aceptable, convencional, usando procedimientos convencionales bien conocidos en la técnica.

Las composiciones para la administración mediante insuflación pueden estar en la forma de un polvo finamente dividido que contiene partículas de diámetro promedio de, por ejemplo, 30 \mum o mucho menos, preferiblemente 5 \mum o menos y más preferiblemente entre 5 \mum y 1 \mum, comprendiendo el propio polvo tanto el ingrediente activo sólo como diluido con uno o más vehículos fisiológicamente aceptables tales como lactosa. El polvo para insuflación es retenido entonces convenientemente en una cápsula que contiene, por ejemplo, de 1 a 50 mg de ingrediente activo para uso con un dispositivo turbo-inhalador, tal como se usa para insuflación del agente conocido cromoglicato de sodio.

Las composiciones para administración por inhalación pueden estar en forma de aerosol presurizado convencional dispuesto para dispensar el ingrediente activo bien como aerosol que contiene gotitas sólidas finamente divididas o líquidas. Se pueden usar propelentes de aerosol convencionales tales como hidrocarburos fluorados o hidrocarburos volátiles y el dispositivo para aerosol se dispone convenientemente para dispensar una cantidad medida de ingrediente activo.

Para más información sobre formulación se remite al lector al Capítulo 25.2 en el Volumen 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1.990.

Por lo tanto en un aspecto más de la invención se proporciona un compuesto de fórmula (I), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, para uso en terapia. Además se proporciona un compuesto de fórmula (IA), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, para uso en terapia.

Además se proporciona un compuesto de fórmula (I), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, para uso como un medicamento y también se proporciona un compuesto de fórmula (IA), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, para uso como un medicamento. Otro aspecto de la invención proporciona un compuesto de fórmula (I), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, para uso como un medicamento para el tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa tal como el cáncer y en particular cáncer colorectal, de mama, pulmón, próstata, vejiga, renal o pancreático o leucemia o linfoma. También se proporciona un compuesto de fórmula (IA), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, para uso como un medicamento para el tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa tal como el cáncer y en particular cáncer colorectal, de mama, pulmón, próstata, vejiga, renal o pancreático o leucemia o linfoma.

Además se proporciona un compuesto de fórmula (I), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster para uso en un método de tratamiento de un animal de sangre caliente tal como un ser humano mediante terapia. Un compuesto de fórmula (IA), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, también se proporciona para uso en un método de tratamiento de un animal de sangre caliente tal como un ser humano mediante terapia. Otro aspecto de la invención proporciona un compuesto de fórmula (I), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, para uso en un método de tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa tal como el cáncer, y en particular cáncer colorectal, de mama, pulmón, próstata, vejiga, renal o pancreático o leucemia o linfoma. También se proporciona un compuesto de fórmula (IA), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, para uso en un método de tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa tal como el
cáncer, y en particular cáncer colorectal, de mama, pulmón, próstata, vejiga, renal o pancreático o leucemia o linfoma.

En otro aspecto de la invención, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, en la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad en la que la inhibición de una o más Aurora quinasa(s) es beneficiosa. También se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (IA), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, en la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad en la que la inhibición de una o más Aurora quinasa(s) es beneficioso. En particular se prevé que la inhibición de Aurora-A quinasa y/o Aurora-B quinasa pueda ser beneficiosa. Preferiblemente la inhibición de Aurora-B quinasa es beneficiosa.

En otro aspecto de la invención, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, en la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa tal como el cáncer, y en particular cáncer colorectal, de mama, pulmón, próstata, vejiga, renal o pancreático o leucemia o linfoma. También se proporciona el uso de un compuesto de fórmula (IA) o su sal farmacéuticamente aceptable o éster en la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa tal como el cáncer, y en particular cáncer colorectal, de mama, pulmón, próstata, vejiga, renal o pancreático o leucemia o linfoma.

De acuerdo con otro aspecto más, se proporciona un compuesto de fórmula (I), o su sal farmacéuticamente aceptable o éster, para uso en el método de tratar un ser humano que padece una enfermedad en la cual la inhibición de una o más Aurora quinasas es beneficiosa, que comprende las etapas de administrar a una persona en necesidad de ello una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) o su sal farmacéuticamente aceptable o su éster. Además se proporciona un compuesto de fórmula (IA) o su sal farmacéuticamente aceptable para uso en el método de tratar a un ser humano que padece una enfermedad en la cual la inhibición de una o más Aurora quinasas es beneficiosa, que comprende las etapas de administrar a una persona en necesidad de ello una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (IA) o su sal farmacéuticamente aceptable. En particular se prevé que la inhibición de Aurora-A quinasa y/o Aurora-B quinasa pueda ser beneficiosa. Preferiblemente la inhibición de Aurora-B quinasa es beneficiosa. Además se proporciona un compuesto de fórmula (I) o su sal farmacéuticamente aceptable o éster para uso en el método de tratar un ser humano que padece una enfermedad hiperproliferativa tal como el cáncer, y en particular cáncer colorectal, de mama, pulmón, próstata, vejiga, renal o pancreático o leucemia o linfoma, que comprende las etapas de administrar a una persona en necesidad de ello una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) o su sal farmacéuticamente aceptable, éster o profármaco. Un compuesto de fórmula (IA) también se proporciona para uso en el método de tratar un ser humano que padece una enfermedad hiperproliferativa tal como el cáncer y en particular cáncer colorectal, de mama, pulmón, próstata, vejiga, renal o pancreático o leucemia o linfoma, que comprende las etapas de administrar a una persona en necesidad de ello una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (IA) o su sal farmacéuticamente aceptable o éster. El uso de un compuesto de fórmula (I) o su sal farmacéuticamente aceptable o éster en cualquiera de los métodos de tratar un ser humano descritos anteriormente también forma aspectos de esta invención.

Para los usos terapéuticos anteriormente mencionados, la dosis administrada variará con el compuesto empleado, el modo de administración, el tratamiento deseado, el trastorno indicado y la edad y el sexo del animal o paciente. La cantidad de la dosis será así calculada de acuerdo con principios bien conocidos de medicina.

En el uso de un compuesto de fórmula (I) o fórmula (IA) para fines terapéuticos o profilácticos será generalmente administrado de modo que una dosis diaria que se reciba estará en el intervalo de, por ejemplo, 0,05 mg/kg a 50 mg/kg de peso corporal, dado si es requerido en dosis divididas. En general, se administrarán dosis más bajas cuando se emplee una ruta parenteral. Así, por ejemplo, para la administración intravenosa, se usará generalmente una dosis en el intervalo de, por ejemplo, 0,05 mg/kg a 25 mg/kg de peso corporal. De manera similar, para la administración por inhalación, se usará una dosis en el intervalo de, por ejemplo, 0,05 mg/kg a 25 mg/kg de peso corporal.

El tratamiento definido en este documento puede ser aplicado como una terapia simple o puede implicar, además del compuesto de la invención, una cirugía convencional o radioterapia o quimioterapia. Tal quimioterapia puede incluir una o más de las siguientes categorías de agentes antitumorales:

(i): fármacos antiproliferativos/antineoplásicos y combinaciones de los mismos, usados en oncología médica, tales como agentes de alquilación (por ejemplo cis-platino, carboplatino, ciclofosfamida, mostaza de nitrógeno, melfalan, clorambucilo, busulfan y nitrosoureas); antimetabolitos (por ejemplo antifolatos tales como fluoropirimidinas como 5-fluorouracilo y tegafur, raltitrexed, metotrexato, arabinósido de citosina e hidroxiurea; antibióticos antitumorales (por ejemplo antraciclinas como adriamicina, bleomicina, doxorubicina, daunomicina, epirubicina, idarubicina, mitomicina-C, dactinomicina y mitramicina); agentes antimitóticos (por ejemplo alcaloides de la vinca como vincristina, vinblastina, vindesina y vinorelbina y taxoides como taxol y taxotere); e inhibidores de topoisomerasa (por ejemplo, epipodofillotoxinas como etoposido y teniposido, arnsacrina, topotecan y camptotecina);

(ii): agentes citostáticos tales como antioestrógenos (por ejemplo, tamoxifen, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno y iodoxifeno), reguladores a la baja del receptor de oestrógenos (por ejemplo fulvestratrant), antiandrógenos (por ejemplo bicalutamida, flutamida, nilutamida y ciproterona acetato), antagonistas de LHRH o agonistas de LHRH (por ejemplo goserelin, leuprorelin y buserelin), progestógenos (por ejemplo acetato de megestrol), inhibidores de aromatasa (por ejemplo como anastrozol, letrozol, vorazol y exemestano) e inhibidores de 5\alpha-reductasa tales como finasterida;

(iii): agentes que inhiban la invasión de células del cáncer (por ejemplo inhibidores de metaloproteinasas como marimastat e inhibidores de la función del receptor del activador del plasminógeno de uroquinasa);

(iv): inhibidores de la función del factor de crecimiento, por ejemplo tales inhibidores incluyen anticuerpos del factor de crecimiento, anticuerpos del receptor del factor de crecimiento (por ejemplo el anticuerpo anti-erbb2 trastuzumab [Herceptin^{TM}] y el anticuerpo anti-erbb1 cetuximab [C225]), inhibidores de farnesilo transferasa, inhibidores de tirosina quinasa e inhibidores de serina-treonina quinasa, por ejemplo inhibidores de la familia del factor de crecimiento epidérmico (por ejemplo inhibidores de tirosina quinasa de la familia EGFR tales como N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-metoxi-6-(3-morfolinopropoxi)quinazolin-4-amina (gefitinib, AZD1839), N-(3-etinilfenil)-6,7-bis(2-metoxietoxi)quinazolin-4-amina (erlotinib, OSI-774) y 6-acrilamido-N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolinopropoxi)quinazolin-4-amina (CI 1033)), por ejemplo inhibidores de la familia del factor de crecimiento derivado de plaquetas y por ejemplo inhibidores de la familia del factor de crecimiento de hepatocitos;

(v): agentes antiangiogénicos tales como los que inhiben los efectos del factor de crecimiento vascular endotelial, (por ejemplo el anticuerpo del factor de crecimiento de células endoteliales anti-vascular bevacizumab [Avastin^{TM}], compuestos tales como los descritos en las solicitudes de patente internacional WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 y WO 98/13354) y compuestos que funcionan con otros mecanismos (por ejemplo linomida, inhibidores de integrina (función \alphav\beta3 y angiostatina);

(vi): agentes que causan daño vascular, tales como Combretastatina A4 y los compuestos descritos en las solicitudes de patente internacional WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 y WO 02/08213;

(vii): terapias antisentido, por ejemplo las que están dirigidas a las dianas enumeradas anteriormente, tales como ISIS 2503, y antisentido anti-ras;

(viii): métodos de terapia genética, que incluyen por ejemplo métodos para sustituir genes aberrantes tales como p53 aberrante o BRCA1 ó BRCA2 aberrantes, métodos GDEPT (terapia de profármacos enzimáticos dirigidos a genes) tales como los que usan citosina desaminasa, timidina quinasa o una enzima nitrorreductasa bacteriana, y métodos para incrementar la tolerancia del paciente a la quimioterapia o radioterapia, tales como terapia genética de multirresistencia a fármacos; y

(ix): enfoques inmunoterapéuticos, incluyendo por ejemplo enfoques ex vivo e in vivo para aumentar la inmunogenicidad de las células tumorales del paciente, tales como la transfección con citoquinas tales como interleuquina 2, interleuquina 4 o el factor estimulante de colonia de granulocitos-macrófagos, enfoques para disminuir la anergia de células T, enfoques que usan células inmune transfectadas tales como células dendríticas transfectadas con citoquina, enfoques que usan líneas celulares tumorales transfectadas con citoquina y enfoques que usan anticuerpos anti-idiotípicos.

Además de un compuesto de la invención o su sal farmacéuticamente aceptable, éster o profármaco, puede usarse en combinación uno o más inhibidores del ciclo celular. En particular, con los inhibidores del ciclo celular que inhiben bub1, bubR1 o CDK.

Dicho tratamiento conjunto puede conseguirse a modo de dosificación simultánea, sucesiva o independiente de los componentes individuales del tratamiento. Tales productos de combinación emplean los compuestos de esta invención dentro del intervalo de dosificación descrito en este documento y el otro agente farmacéuticamente activo dentro de su intervalo de dosificación aprobado.

Además de sus usos en medicina terapéutica, un compuesto de fórmula (I) y su sal farmacéuticamente aceptable, éster o profármaco son también útiles como herramientas farmacológicas en el desarrollo y estandarización de sistemas de análisis in vitro y in vivo para la evaluación de los efectos de inhibidores de la actividad del ciclo celular en animales de laboratorio tales como gatos, perros, conejos, monos, ratas y ratones, como parte de la búsqueda de nuevos agentes terapéuticos.

En la otra composición farmacéutica anterior, el procedimiento, el método, uso y propiedades de fabricación del medicamento, las realizaciones alternativas y preferidas de los compuestos de la invención descritos en esta invención también se aplican.

Los compuestos de la invención inhiben la actividad de serina-treonina quinasa de las Aurora quinasas, en particular Aurora-A quinasa y/o Aurora-B quinasa y por eso inhiben el ciclo celular y la proliferación celular. Se pueden valorar estas propiedades, por ejemplo, usando uno o más de los procedimientos señalados a continuación.

(a) Ensayo de inhibición de Aurora-A quinasa in vitro

Este ensayo determina la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir la actividad de serina-treonina quinasa. Se puede obtener ADN que codifica Aurora-A por síntesis génica total o por clonación. Este ADN se puede expresar después en un sistema de expresión adecuado para obtener el polipéptido con actividad de serina-treonina quinasa. En el caso de Aurora-A, se aisló la secuencia codificadora de ADNc por reacción en cadena de la polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés) y se clonó en los sitios de la endonucleasa de restricción de BamH1 y Not1 del vector de expresión del baculovirus pFastBac HTc (GibcoBRL/Life technologies). El cebador de 5' PCR contenía una secuencia de reconocimiento para la endonucleasa de restricción BamH1 5' a la secuencia codificadora de Aurora-A. Esto permitió la inserción del gen de Aurora-A en la estructura con los 6 restos de histidina, región espaciadora y sitio de escisión de la proteasa rTEV codificada por el vector pFastBac HTc. El cebador de 3' PCR reemplazó el codón de terminación de Aurora-A con secuencia codificadora adicional, seguido por un codón de terminación y una secuencia de reconocimiento para la endonucleasa de restricción Not1. Esta secuencia codificadora adicional (5' TAC CCA TAC GAT GTT CCA GAT TAC GCT TCT TAA 3') codificaba para la secuencia polipeptídica YPYDVPDYAS. Esta secuencia, procedente de la proteína hemaglutina de la influenza, se usa frecuentemente como una secuencia epítopo marcadora que se puede identificar usando anticuerpos monoclonales específicos. El vector recombinante pFastBac por lo tanto codificaba para una proteína Aurora-A marcada de epítopo de hemaglutina de influenza N-terminal 6 his marcada, C terminal. Los detalles de los métodos para el montaje de moléculas de ADN recombinantes se pueden encontrar en textos clásicos, por ejemplo Sambrook et al. 1.989, Molecular Cloning - A Laboratory Manual, 2^{a} Edición, Cold Spring Harbor Laboratory press y Ausubel et al. 1.999, Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley and Sons Inc.

La producción de virus recombinantes se puede llevar a cabo siguiendo el protocolo del fabricante de GibcoBRL. Brevemente, el vector pFastBac-1 que llevaba el gen de Aurora-A fue transformado en células DH10Bac de E. coli que contenían el genoma del baculovirus (ADN bácmido) y vía un acontecimiento de transposición en las células, una región del vector pFastBac que contenía el gen de la resistencia a la gentamicina y el gen de Aurora-A incluyendo el promoter de polihedrina de baculovirus fue transpuesto directamente en el ADN bácmido. Por selección con gentamicina, canamicina, tetraciclina y X-gal, las colonias blancas resultantes deberían contener ADN bácmido recombinante codificante de Aurora-A. Se extrajo ADN bácmido de un cultivo a pequeña escala de diversas colonias blancas BH10Bac y se transinfectaron en células Spodoptera frugiperda Sf21 cultivadas en medio TC100 (GibcoBRL) que contenía suero al 10% usando reactivo CellFECTIN (GibcoBRL) siguiendo las instrucciones del fabricante. Se recogieron partículas de virus recogiendo medio de cultivo celular 72 h post-transinfección. Se usaron 0,5 ml de medio para infectar 100 ml de cultivo de suspensión de Sf21s conteniendo 1 x 10^{7} células/ml. Se recogió medio de cultivo celular 48 h postinfección y se determinó el título de los virus usando un procedimiento de análisis en placa clásico. Fueron usadas poblaciones de virus para infectar células Sf9 y "High 5" en una multiplicidad de infección (MOI) de 3 para determinar la expresión de la proteína Aurora-A recombinante.

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Para la expresión a gran escala de la actividad de Aurora-A quinasa, se cultivaron células de insecto Sf21 a 28ºC en medio TC100 enriquecido con suero de ternera fetal al 10% (Viralex) y F68 Pluronic (Sigma) al 0,2% en un equipo de rodillos Wheaton a 0,3 rad/s (3 r.p.m.). Cuando la densidad celular alcanzó 1,2x10^{6} células ml^{-1} se infectaron con virus recombinante Aurora-A puros en placa a una multiplicidad de 1 y se recogieron 48 horas más tarde. Todas las etapas de purificación posteriores se realizaron a 4ºC. Fueron descongelados peletes de células de insecto congelados que contenían un total de 2,0 x 10^{8} células y fueron descongelados y diluidos con tampón de lisis (HEPES 25 mM (ácido N-[2-hidroxietil]piperazin-N'-[2-etanosulfónico]) pH 7,4 a 4ºC, KCl 100 mM, NaF 25 mM, Na_{3}VO_{4} 1 mM, PMSF (fluoruro de fenilmetilsulfonilo) 1 mM, 2-mercaptoetanol 2 mM, imidazol 2 mM, 1 \mug/ml de aprotinina, 1 \mug/ml de pepstatina, 1 \mug/ml de leupeptina), usando 1,0 ml por 3 x 10^{7} células. La lisis fue lograda usando a homogeneizador Dounce, después de lo cual el lisado fue centrifugado a 41.000g durante 35 minutos. Se bombeó sobrenadante aspirado en una columna cromatográfica de 5 mm de diámetro, conteniendo 500 \mul de Ni NTA (ácido nitrilo-tri-acético) agarosa (Qiagen, producto nº 30250) que se había equilibrado en tampón de lisis. Se consiguió un nivel de los valores de referencia de la absorbancia UV para el eluyente después de lavar la columna con 12 ml de tampón de lisis seguido por 7 ml de tampón de lavado (HEPES 25 mM pH 7,4 a 4ºC, KCl 100 mM, imidazol 20 mM, 2-mercaptoetanol 2 mM). La proteína Aurora-A unida fue eluída desde la columna usando tampón de elución (HEPES 25 mM, pH7,4 a 4ºC, KCl 100 mM, imidazol 400 mM, 2-mercaptoetanol 2 mM). Se recogió una fracción de elución (2,5 ml) correspondiente al valor máximo de la absorbancia UV. La fracción de elución, que contenía Aurora-A quinasa activa, se dializó exhaustivamente contra tampón de diálisis (HEPES 25 mM pH 7,4 a 4ºC, glicerol al 45% (v/v), KCl 100 mM; Nonidet P40 al 0,25% (v/v), ditiotreitol 1 mM).

Cada nuevo lote de enzima de Aurora-A se valoró en el análisis por dilución con diluyente enzimático (Tris-HCl 25 mM pH 7,5; KCl 12,5 mM; DTT 0,6 mM). Para un lote típico, se diluyó enzima madre 1 en 666 con diluyente enzimático y se usaron 20 \mul de enzima diluida para cada pozo de análisis. Los compuestos de ensayo (a 10 mM en dimetilsulfóxido (DMSO) se diluyeron con agua y se transfirieron 10 \mul de compuesto diluido a pozos en las placas para análisis. Los pozos de control "total" y "muestra para ensayo en blanco" contenían DMSO al 2,5% en vez de compuesto. Se añadieron veinte microlitros de enzima recién diluida a todos los pozos, aparte de los pozos de "muestra para ensayo en blanco". Se añadieron veinte microlitros de diluyente enzimático a los pozos de "muestra para ensayo en blanco". Después se añadieron veinte microlitros de mezcla de reacción (Tris-HCl 25 mM, KCl 78,4 mM, NaF 2,5 mM, ditiotreitol 0,6 mM, MnCl_{2} 6,25 mM, ATP 6,25 mM, substrato peptídico 7,5 \muM [biotin-LRRWSLGLRRWSLGLRRWSLGLRRWSLG]) conteniendo 0,2 \muCi [\gamma^{33}P]ATP (Amersham Pharmacia, actividad específica \geq2.500 Ci/mmol) a todos los pozos de ensayo para empezar la reacción. Se incubaron las placas a temperatura ambiente durante 60 minutos. Para detener la reacción se añadieron 100 \mul de ácido ortofosfórico al 20% v/v a todos los pozos. Se capturó el substrato peptídico en nitrocelulosa cargada positivamente P30 filtermat (Whatman) usando un recolector de placas de 96 pozos (TomTek) y se analizó después la incorporación de ^{33}P con un contador de placas Beta. Se usaron valores de control de la "muestra para ensayo en blanco" (no enzimas) y "total" (no compuesto) para determinar el intervalo de dilución del compuesto de ensayo que dio una inhibición del 50% de la actividad enzimática. En este ensayo, los compuestos de la invención generalmente proporcionan una inhibición del 50% de la actividad enzimática a concentraciones de 1 nM a 1000 nM y en particular el compuesto 5 en la Tabla 1 proporcionó una inhibición del 50% de la actividad enzimática a una concentración de 5 \muM y el compuesto 8 en la Tabla 1 proporcionó una inhibición del 50% de la actividad enzimática a una concentración de 6 \muM.

(b) Ensayo de inhibición de Aurora-B quinasa in vitro

Este ensayo determina la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir la actividad de serina-treonina quinasa. El ADN que codifica Aurora-B puede ser obtenido por la síntesis génica total o por clonación. Este ADN puede entonces ser expresado en un sistema de expresión adecuado para obtener el polipéptido con actividad de serina-treonina quinasa. En el caso de Aurora-B, la secuencia codificante fue aislada a partir del cADN por la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y clonada en el sistema pFastBac de una forma similar a la descrita anteriormente para Aurora-A (es decir, para dirigir la expresión de una proteína Aurora-B marcada con 6-histidina).

Para la expresión a gran escala de la actividad de Aurora-B quinasa, fueron cultivadas células de insecto Sf21 a 28ºC en medio TC100 suplementado con 10% de suero de becerro fetal (Viralex) y 0,2% de F68 Pluronic (Sigma) en un equipo de rodillos Wheaton a 3 r.p.m. Cuando la densidad celular alcanzó las 1,2x10^{6} células ml^{-1} fueron infectadas con el virus recombinante de Aurora-B de placa pura con una multiplicidad de infección de 1 y se recolectaron 48 horas después. Todas las etapas de purificación posteriores se realizaron a 4ºC. Los peletes de células de insecto congelados que contenían un total de 2,0 x 10^{8} células fueron descongelados y diluidos con tampón de lisis (HEPES 50 mM (ácido N-[2-hidroxietil]piperazin-N'-[2-etanosulfónico]) pH 7,5 a 4ºC, Na_{3}VO_{4} 1 mM, PMSF (fluoruro de fenilmetilsulfonilo) 1 mM, ditiotreitol 1 mM, 1 \mug/ml de aprotinina, 1 \mug/ml de pepstatina, 1 \mug/ml de leupeptina), usando 1,0 ml por 2 x 10^{7} células. La lisis fue lograda usando un homogeneizador de sonicación, después de lo cual el lisado fue centrifugado a 41.000g durante 35 minutos. Se bombeó sobrenadante aspirado en una columna cromatográfica de 5 mm de diámetro que contenía 1,0 ml de CM sepharose Fast Flow (Amersham Pharmacia Biotech) que había sido equilibrada en tampón de lisis. Se consiguió un nivel de los valores de referencia de la absorbancia UV para el eluyente después de lavar la columna con 12 ml de tampón de lisis seguido por 7 ml de tampón de lavado (HEPES 50 mM pH7,4 a 4ºC, ditiotreitol 1 mM). La proteína B de Aurora-B unida fue eluída desde la columna usando un gradiente de tampón de elución (HEPES 50 mM pH7,4 a 4ºC, NaCl 0,6 M, ditiotreitol 1 mM, corriendo desde tampón de elución del 0% a tampón de elución del 100% durante 15 minutos con un caudal de 0,5 ml/min).Las fracciones de elución (1,0 ml) correspondientes al pico en absorbancia UV fueron recuperadas. Las fracciones de elución fueron dializadas exhaustivamente contra tampón de diálisis (HEPES 25 mM pH 7,4 a 4ºC, glicerol al 45% (v/v), KCl 100 mM, 0,05% (v/v) IGEPAL CA630 (Sigma Aldrich), ditiotreitol 1 mM). Las fracciones dializadas fueron analizadas según la actividad de Aurora-B quinasa.

Cada nuevo lote de enzima Aurora-B fue titulado en el ensayo por dilución con diluyente enzimático (Tris-HCl 25 mM, pH 7,5, KCl 12,5 mM, DTT 0,6 mM).Para un lote típico, se diluyó enzima madre 1 en 40 con diluyente enzimático y se usaron 20 \mul de enzima diluida para cada pozo de análisis. Los compuestos de ensayo (a 10 mM en dimetilsulfóxido (DMSO) se diluyeron con agua y se transfirieron 10 \mul de compuesto diluido a pozos en las placas para análisis. Los pozos de control "total" y "muestra para ensayo en blanco" contenían DMSO al 2,5% en vez de compuesto. Se añadieron veinte microlitros de enzima recién diluida a todos los pozos, aparte de los pozos de "muestra para ensayo en blanco". Se añadieron veinte microlitros de diluyente enzimático a los pozos de "muestra para ensayo en blanco". Después se añadieron veinte microlitros de mezcla de reacción (Tris-HCl 25 mM, KCl 78,4 mM, NaF 2,5 mM, ditiotreitol 0,6 mM, MnCl_{2} 6,25 mM, ATP 37,5 mM, substrato peptídico 25 \muM [biotin-LRRWSLGLRRWSLGLRRWSLGLRRWSLG]) conteniendo 0,2 \muCi [\gamma^{33}P]ATP (Amersham Pharmacia, actividad específica \geq2.500 Ci/mmol) a todos los pozos de ensayo para empezar la reacción. Se incubaron las placas a temperatura ambiente durante 60 minutos. Para detener la reacción se añadieron 100 \mul de ácido ortofosfórico al 20% v/v a todos los pozos. Se capturó el substrato peptídico en nitrocelulosa cargada positivamente P30 filtermat (Whatman) usando un recolector de placas de 96 pozos (TomTek) y se analizó después la incorporación de ^{33}P con un contador de placas Beta. Se usaron valores de control de la "muestra para ensayo en blanco" (no enzimas) y "total" (no compuesto) para determinar el intervalo de dilución del compuesto de ensayo que dio una inhibición del 50% de la actividad enzimática. En este ensayo, los compuestos de la invención proporcionaron de forma general una inhibición del 50% de actividad enzimática a concentraciones de 1 nM a 1000 nM y en particular el compuesto 5 en la Tabla 1 proporcionó una inhibición del 50% de actividad enzimática a una concentración de 2 \muM y el compuesto 8 en la Tabla 1 proporcionó una inhibición del 50% de actividad enzimática a una concentración de 1 \muM.

(c) Ensayo de proliferación celular in vitro

Estos y otros ensayos pueden ser usados para determinar la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir el crecimiento de lineas celulares de mamíferos adherentes, por ejemplo la linea celular tumoral humana SW620 (ATCC CCL-227). Este ensayo determina la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir la incorporación del análogo de timidina, 5'-bromo-2'-desoxi-uridina (BrdU) en el ADN celular. SW620 u otras células adherentes fueron típicamente sembradas a 1x10^{5} células por pocillo en medio L-15 (GIBCO) más 5% de suero de becerro fetal, 1% de L-glutamina (100 \mul/pocillo) en placas de 96 pocillos tratadas con tejido de 96 pocillos (Costar) y se dejó adherirse toda la noche. Al día siguiente, a las células les fue dosificado el compuesto (diluido a partir de una disolución madre 10 mM en DMSO usando L-15 (con 5% de FCS, 1% de L-glutamina). Los pocillos de control no tratados y los pocillos que contenían un compuesto conocido para dar una inhibición del 100% de incorporación de BrdU fueron incluidos en cada placa. Después de 48 horas en presencia/ausencia del compuesto de ensayo fue determinada la capacidad de las células de incorporar BrdU en un periodo de marcación de 2 horas usando un kit ELISA de BrdU de proliferación celular de Boehringer (Roche) (Nº. de cat. 1 647 229) de acuerdo con las instrucciones de los fabricantes. Brevemente, 15 \mul de reactivo de marcación de BrdU (diluido 1:100 en medio - L-15, 5% de FCS, 1% de L-glutamina) fueron añadidos a cada pocillo y la placa se devolvió a un incubador humidificado (+5% de CO_{2}) a 37ºC durante 2 horas. Después de 2 horas el reactivo de marcación fue retirado decantando y tapando la placa en una toalla de papel. La solución FixDenat (50 \mul por pocillo) fue añadida y las placas fueron incubadas a temperatura ambiente durante 45 min con agitación. La solución FixDenat fue eliminada decantando y tapando la placa invertida en una toalla de papel. La placa fue entonces lavada una vez con solución salina tamponada de fosfato (PBS) y fueron añadidos 100 \mul/pocillo de solución de anticuerpo Anti-BrdU-POD (diluido 1:100 en tampón de dilución de anticuerpo). La placa fue después incubada a temperatura ambiente con agitación durante 90 min. El anticuerpo Anti-BrdU-POD no unido fue eliminando decantando y lavando la placa 4 veces con PBS antes de ser transferido en seco. La solución de sustrato de TMB fue añadida (100 \mul/pocillo) y fue incubada durante aproximadamente 10 minutos a temperatura ambiente con agitación hasta que fue evidente un cambio de color. La densidad óptica de los pocillos fue entonces determinada a una longitud de onda de 690 nm usando un lector de placas Titertek Multiscan. Los valores del compuesto tratado, no tratado y los controles de 100% de inhibición fueron usados para determinar el intervalo de dilución de un compuesto de ensayo que dió un 50% de inhibición de incorporación de BrdU. Los compuestos de la invención son generalmente activos desde 1 nM a 100 \muM en este ensayo.

(d) Ensayo de análisis del ciclo celular in vitro

Este análisis determina la capacidad de un compuesto de ensayo para detener a las células en fases específicas del ciclo celular. Se podían usar muchas líneas celulares de mamíferos diferentes en este análisis y se incluyen células SW620 en la presente memoria como ejemplo. Células SW620 fueron sembradas a 7 x 10^{5} células por matraz T25 (Costar) en 5 ml de L-15 (5% de FCS, 1% de L-glutamina). Después se incubaron los matraces durante la noche en una incubadora humidificada a 37ºC con CO_{2} al 5%. Al día siguiente, fueron añadidos al matraz 5 \mul de L-15 (5% de FCS, 1% de L-glutamina) que llevaba la concentración apropriada del compuesto de ensayo solubilizado en DMSO. También se incluyó un tratamiento de control sin compuesto (DMSO al 0,5%). Las células fueron entonces incubadas durante un tiempo definido (24 horas) con el compuesto. Después de este tiempo se aspiró el medio de las células y se lavaron con 5 ml de PBSA estéril precalentado (37ºC), después se eliminaron del matraz por breve incubación con tripsina y seguido por la resuspensión en 5 ml de Albúmina de Suero Bovino al 1% (BSA, Sigma-Aldrich Co.) en PBSA estéril. Las muestras fueron entonces centrifugadas a 2200 rpm durante 10 min. El sobrenadante fue aspirado para dejar 200 \mul de la solución de PBS/BSA. El pelete fue resuspendido en estos 200 \mul de solución pipeteando 10 veces para crear una suspensión de células simples. Un ml de etanol al 80% enfriado con hielo fue añadido despacio a cada suspensión celular y las muestras fueron almacenadas a -20ºC toda la noche o hasta que se requirió para la tinción. Las células fueron hechas un pelete por centrifugación, fue aspirado el etanol y los peletes fueron resuspendidos en 200 \mul de PBS que contenía 100 \mug/ml de ARNsa (Sigma Aldrich) y 10 \mug/ml de yoduro de propidio (Sigma Aldrich). Las suspensiones celulares fueron incubados a 37ºC durante 30 min, fueron añadidos también 200 \mul de PBS y las muestras fueron almacenadas en la oscuridad a 4ºC toda la noche.

Después cada muestra fue aspirada con una jeringuilla 10 veces usando una aguja de calibre 21. Después se transfirieron las muestras a tubos LPS y se analizó el contenido en ADN por célula por separación celular activada por fluorescencia (FACS, por sus siglas en inglés) usando un citómetro de flujo FACScan (Becton Dickinson). Típicamente fueron contados 30.000 acontecimientos y fueron registrados usando el software CellQuest v1.1 (Verity Software). La distribución del ciclo celular de la populación fue calculada usando el software Modfit (Verity Software) y fue expresada como porcentaje de células con contenido de ADN 2N (G0/G1), 2N-4N (S phase) y con 4N (G2/M).

Los compuestos de la invención son activos generalmente en este ensayo de 1 nM a 10 \muM.

La invención será ilustrada en los siguientes ejemplos, en los cuales las técnicas estándar conocidas para el químico experto y técnicas análogas a éstas descritas en estos ejemplos pueden ser usadas cuando sea apropiado, y en las que, a menos que se establezca de otra forma:

(i): las evaporaciones fueron llevadas a cabo mediante evaporación rotatoria in vacuo y los procedimientos diagnósticos fueron llevados a cabo después de la eliminación de sólidos residuales tales como los agentes de secado por filtración;

(ii): las operaciones fueron llevadas a cabo a temperatura ambiente, típicamente en el intervalo de 18-25ºC y en aire a menos que se diga otra cosa, o a menos que la persona experta opere de otra manera en una atmósfera de un gas inerte tal como argón;

(iii): la cromatografía de columna (por el procedimiento flash) y la cromatografía líquida de reolución media (MPLC) fueron realizadas en sílice de Merck Kieselgel (Art. 9385);

(iv): los rendimientos se proporcionan sólo para ilustrar y no son necesariamente los máximos que se pueden conseguir;

(v): las estructuras de los productos finales de la fórmula (I) fueron confirmadas de forma general por resonancia magnética nuclear (generalmente de protón) (RMN) y técnicas de espectroscopia de masas; los valores del desplazamiento químico de la resonancia magnética de protón fueron medidos en dimetil-sulfóxido deuterado (DMSO d_{6}) (a menos que se especifique otra cosa) en la escala delta (ppm campo abajo desde el tetrametilsilano) usando uno de los siguientes cuatro instrumentos:

-: \vtcortauna espectrómetro Gemini 2000 de Varian que operaba a una fuerza de campo de 300 MHz

-: \vtcortauna espectrómetro DPX300 de Bruker que operaba a una fuerza de campo de 300 MHz

-: \vtcortauna espectrómetro EX 400 de JEOL que operaba a una fuerza de campo de 400 MHz

-: \vtcortauna espectrómetro Avance 500 de Bruker que operaba a una fuerza de campo de 500 MHz

Las multiplicidades de pico son como se muestra a continuación: s, singlete; d, doblete; dd, doblete doble; t, triplete; q, cuartete; qu, quintete; m, multiplete; s a, singlete ancho;

(vi): la síntesis robótica fue llevada a cabo usando un robot XP de Zymate, con adiciones de solución vía una Master Laboratory Station de Zymate y fue agitada vía una RS5000 Reacto-Station de Stem a 25ºC;

(vii): el tratamiento final y la purificación de las mezclas de reacción desde la síntesis robótica fue llevada a cabo como sigue: las evaporaciones fueron llevadas a cabo in vacuo usando un HT 4 de Genevac; la cromatografía en columna se realizó bien usando un sistema Anachem Sympur MPLC sobre sílice, bien usando columnas de 27 mm de diámetro rellenas con sílice Merck (60 \mum, 25 g); las estructuras de los productos finales fueron confirmadas por LCMS en un sistema de micromasas 2890/ZMD de Waters usando lo siguiente y son estimadas según los tiempos de retención (TR) en minutos:

Columna:: simetría C18 de Waters, 3,5 \mum 4,6x50 mm

Disolvente A:: H_{2}O

Disolvente B:: CH_{3}CN

Disolvente C:: MeOH + 5% HCOOH

Caudal:: 2,5 ml/min

Tiempo de ejecución:: 5 minutos con un gradiente de 4,5 minutos desde 0-100% C

Longitud de onda:: 254 nm, ancho de banda 10 nm

Detector de masas:: micromasa ZMD

Volumen de inyección:: 0,005 ml

(viii): El LCMS analítico para compuestos que no habían sido preparado mediante síntesis robótica fue realizado en un sistema Alliance HT de Waters usando lo siguiente y se estiman según el tiempo de retención (RT) en minutos:

Columna:: 2,0 mm x 5 cm Phenomenex Max-RP 80A

Disolvente A:: Agua

Disolvente B:: Acetonitrilo

Disolvente C:: Metanol/1% ácido fórmico o Agua/1% ácido fórmico

Caudal:: 1,1 ml/min

Tiempo de ejecución:: 5 minutos con un gradiente de 4,5 minutos desde disolvente 0-95% B + 5% C constante

Detector de masas:: 254 nm, ancho de banda 10 nm

Volumen de inyección: 0,005 ml

Detector de masas:: Micromasa ZMD

(ix): La cromatografía líquida de alta resolución preparativa (HPLC) fue realizada tanto en

-: \vtcortauna instrumento LCMS preparativo de Waters, con el tiempo de retención (RT) medido en minutos:

Columna:: \beta-básica Hypercil (21x100 mm) 5 \mum

Disolvente A:: Agua/0,1% carbonato de amonio

Disolvente B:: Acetonitrilo

Caudal:: 25 ml/min

Tiempo de ejecución:: 10 minutos con un gradiente de 7,5 minutos desde 0-100% B

Longitud de onda:: 254 nm, ancho de banda 10 nm

Volumen de inyección: 1-1,5 ml

Detector de masas:: Micromasa ZMD

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-: \vtcortauna Instrumento HPLC preparativo de Gilson, con el tiempo de retención (RT) medido en minutos:

Columna:: 21 mm x 15 cm Phenomenex Luna2 C18

Disolvente A:: Agua +0,1% ácido trifluoracético,

Disolvente B:: Acetonitrilo + 0,1% ácido trifluoracético

Caudal:: 21 ml/min

Tiempo de ejecución:: 20 minutos con gradientes de 10 minutos desde 5-100% B

Longitud de onda:: 254 nm, ancho de banda 10 nm

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Volumen de inyección: 0,1-4,0 ml

(x): los intermedios no fueron caracterizados de forma general y la pureza fue evaluda mediante cromatografía de capa fina (TLC), análisis HPLC, infra-rojos (IR), MS o RMN.

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TABLA 1

8

TABLA 2

9

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Ejemplo 1 -Preparación del Compuesto 1 en la Tabla 1-

N-(3-fluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]propoxi}quinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida

Fueron calentados yoduro de potasio (100 mg, 0,6 mmol), hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)quinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(3-fluorofenil)acetamida (147 mg, 0,30 mmol) y D-prolinol (152 mg, 1,5 mmol) en dimetilacetamida (1 ml) durante 2,5 horas a 90ºC. La reacción fue enfriada temperatura ambiente, fue diluída con diclorometano (10 ml) y purificada mediante cromatografía flash en gel de sílicel, eluyendo con diclorometano: metanol: amonico acuoso de (100:5:0,5) a (100:25:2). La evaporación de las fracciones in vacuo proporcionó un aceite claro que fue cristalizado por trituración con acetonitrilo: diclorometano: isohexano para proporcionar el compuesto 1 en la Tabla 1 (83 mg, rendimiento 53%) como un sólido de color crema:

^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 10,50 (s ancho, 1H), 10,27 (s, 1H), 8,53 (m, 2H), 7,75 (s, 1H), 7,59 (m, 1H), 7,34 (m, 2H), 7,14 (m, 2H), 6,92 (m, 1H), 6,86 (s, 1H), 4,98 (s, 2H), 4,30 (s ancho, 1H), 4,17 (t, 2H), 3,38 (m, 1H), 3,19 (m, 1H), 3,06 (m, 1H), 2,96 (m, 1H), 2,42 (m, 2H), 2,17 (m, 1H), 1,92 (m, 2H), 1,80 (m, 1H), 1,64 (m, 2H), 1,54 (m, 1H):

MS (+ve ESI): 520 (M+H)^{+},

MS (-ve ESI): 518 (M-H)^{-}.

Hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)quinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(3-fluorofenil)acetamida, usado como el material de partida, fue obtenido como sigue:

a): Fue disuelto ácido 2-amino-4-fluorobenzoico (15 g, 96 mmol) en 2-metoxietanol (97 ml). Se añadió acetato de formamidina (20,13 g, 193,4 mmol) y se calentó la mezcla hasta reflujo durante 18 horas. La reacción fue enfriada, concentrada y el residuo fue agitado en hidróxido de amonio acuoso (0,01 N, 250 ml) durante 1 hora. The suspension fue filtrada, lavada con agua y secada con pentóxido de fósforo para proporcionar 7-fluoroquinazolin-4(3H)-ona como un sólido blanquecino (10,35 g, rendimiento 65%):

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 12,32 (s ancho, 1H), 8,19 (dd, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,45 (dd, 1H), 7,39 (m, 1H):

\quad: MS (-ve ESI): 163 (M-H)^{-},

\quad: MS (+ve ESI): 165 (M+H)+.

b): Fue añadido hidruro de sodio (14,6 g, 365 mmol) a 0ºC a una solución de 1,3-propanodiol (27,8 g, 365 mmol) en dimetilformamida (70 ml). Fue añadida en porciones 7-fluoroquinazolin-4(3H)-ona (10 g, 60,9 mmol) y la mezcla de reacción fue calentada a 60ºC, luego a 110ºC durante 3 horas. La reacción fue enfriada a 0ºC, inactivada con agua (280 ml) y ajustada a pH 5,9. La suspensión resultante fue filtrada, lavada con agua después dietil-éter y fue secada con pentóxido de fósforo para proporcionar 7-(3-hidroxipropoxi)quinazolin-4(3H)-ona como un polvo blanco (12,41 g, rendimiento 92%):

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 11,90 (s ancho, 1H), 8,04 (s, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,10 (m, 2H), 4,17 (t, 2H), 3,58 (t, 2H), 1,92 (m, 2H):

\quad: MS (+ve ESI): 221 (M+H)+.

c): Fueron combinados 7-(3-hidroxipropoxi)quinazolin-4(3H)-ona (10,5 g, 47,7 mmol) y cloruro de tionilo (100 ml, 137 mmol). Fue añadida dimetilformamida (1 ml) y la mezcla de reacción fue calentada a 85ºC durante 1 hora. La mezcla fue enfriada a temperatura ambiente, fue diluida con tolueno y evaporada hasta sequedad. Esto fue repetido hasta que fue eliminado todo el cloruro de tionilo. El residuo fue disuelto en diclorometano y lavado con una solución saturada de bicarbonato de sodio. La capa acuosa fue extraída con diclorometano. Las capas orgánicas fueron combinadas, secadas (sulfato de magnesio) y concentradas para proporcionar in sólido amarillo. La trituración con éter eliminó una impureza menos soluble y el filtrado de éter fue concentrado para proporcionar 4-cloro-7-(3-cloropropoxi)quinazolina como un sólido blanquecino (8,5 g, 70% rendimiento):

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 13,25 (s ancho, 1H), 8,34 (s, 1H), 8,06 (d, 1H), 7,17 (m, 2H), 4,21 (t, 2H), 3,83 (t, 2H), 2,23 (m, 2H):

\quad: MS (+ve ESI): 257, 259 (M+H)^{+}.

d): Fue añadido gota a gota ácido clorhídrico 4,0 N en dioxano (0,46 ml, 1,85 mmol) a una solución agitada de 4-cloro-7-(3-cloropropoxi)quinazolina (475 mg, 1,85 mmol) y 2-(3-amino-1H-pirazol-1-il)-N-(3-fluorofenil)acetamida (430 mg, 1,85 mmol) en dimetilacetamida (5 ml) a 50ºC. La reacción fue calentada a 70ºC durante 1 hora, se dejó enfriar a temperatura ambiente y luego se agitó con dietil-éter (5 ml) a temperatura ambiente durante 1 hora. La reolección del sólido que precipitó por filtración con succión, seguido del lavado con dietil-éter y acetonitrilo y secado prolongado in vacuo, proporcionó hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)quinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(3-fluorofenil)acetamida (919 mg, rendimiento 99%) como un sólido amarillo palo:

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 11,93 (s ancho, 1H), 10,96 (s ancho, 1H), 8,96 (s, 1H), 8,79 (d, 1H), 7,90 (d, 1H), 7,62 (m, 1H), 7,45 (m, 1H), 7,38 (m, 3H), 6,90 (m, 1H), 6,85 (d, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,31 (t, 2H), 3,84 (t, 2H), 2,26 (m, 2H):

\quad: MS (+ve ESI): 455 (M+H)^{+},

\quad: MS (-ve ESI): 453 (M-H)^{-}.

\quad: 2-(3-amino-1H-pirazol-1-il)-N-(3-fluorofenil)acetamida, usada como el material de partida en la reacción 1d), fue obtenida como sigue:

e): Fue añadida una solución de hidróxido de sodio acuosa 1,0 N (54 ml, 54 mmol) a una solución agitada de 3-fluoroanilina (11,1 g, 100 mmol) en dietil-éter (100 ml) y la reacción fue enfriada aºC. Una solución de bromuro de bromoacetilo (10,2 ml, 117 mmol) en dietil-éter (100 ml) fue añadida con agitación fuerte en 20 minutos manteniendo la temperatura por debajo de 0ºC. La reacción fue dejada calentarse a temperatura ambiente en 10 minutos antes de que se separara la capa de dietil-éter, se secó con sulfato de magnesio y evaporó in vacuo. El producto fue purificado mediante cromatografía flash en una pequeña almohadilla de gel de sílice, eluyendo con diclorometano: dietil-éter (95:5). La adición de isohexano a las fracciones desde la columna, seguido de la concentración in vacuo causó la precipitación de un sólido blanco que fue recuperado por filtración con succión y secado in vacuo para proporcionar 2-bromo-N-(3-fluorofenil)-acetamida (21,7 g, rendimiento 94%) como un sólido cristalino blanco:

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 7,58 (m, 1H), 7,35 (m, 1H), 7,28 (m, 1H), 6,90 (m, 1H), 4,05 (s, 2H): MS (-ve ESI): 230, 232 (M-H)^{-}.

f): Una solución de 2-bromo-N-(3-fluorofenil)-acetamida (2,78 g, 12,0 mmol) en diclorometano fue añadida gota a gota durante 5 minutos a una suspensión agitada de hidróxido de sodio acuoso 1,0N (28,8 ml, 28,8 mmol), 3-nitro-1H-pirazol (1,50 g, 13,2 mmol) y sulfato de tetra-n-butilamonio (4,88 g, 14,4 mmol) en diclorometano (10 ml) a 2ºC. La reacción fue dejada calentarse a temperatura ambiente durante 4 horas después de cuyo tiempo la capa orgánica fue separada y pasada a través de un tapón corto de gel de sílice (lavado con dietil-éter). La evaporación de las capas organicas combinadas in vacuo proporcionó N-(3-fluorofenil)-2-(3-nitro-1H-pirazol-1-il)acetamida (1,41 g, 45% rendimiento) como un sólido blanco:

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 10,62 (s, 1H), 8,08 (d, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,38 (m, 1H), 7,31 (m, 1H), 7,10 (d, 1H), 6,93 (m, 1H), 5,23 (s, 2H):

\quad: MS (-ve ESI): 263 (M-H)^{-}.

g): Una solución de N-(3-fluorofenil)-2-(3-nitro-1H-pirazol-1-il)acetamida (1,33 g, 50,5 mmol) en acetato de etilo (50 ml) y etanol (12,5 ml) fue hidrogenada en una atmósfera de hidrógeno en presencia de paladio sobre carbono al 10% (130 mg) durante 4 horas. El catalizador fue eliminado por filtración a través de Celite y la evaporación de los disolventes in vacuo proporcionó 2-(3-amino-1H-pirazol-1-il)-N-(3-fluorofenil)acetamida (898 mg, rendimiento 76%) como un sólido cristalino blanco:

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 10,36 (s ancho, 1H), 7,58 (m, 1H), 7,38 (m, 2H), 7,32 (m, 1H), 5,45 (d, 1H), 4,69 (s, 2H), 4,57 (s ancho, 2H):

\quad: MS (+ve ESI): 235 (M+H)^{+},

\quad: MS (-ve ESI): 233 (M-H)^{-}.

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Ejemplo 2 -Preparación del Compuesto 2 en la Tabla 1-

N-(3-fluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2-hidroxietil)(propil)amino]propoxi}quinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}ace- tamida

Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1, pero comenzando con hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)quinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-il)-N-(3-fluorofenil)acetamida (147 mg, 0,30 mmol) y 2-(n-propilamino)etanol (155 mg, 1,5 mmol) proporcionó el compuesto 2 en la Tabla 1 (96 mg, 61% rendimiento) como un sólido amarillo palo:

^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 10,50 (s, 1H), 10,27 (s, 1H), 8,53 (m, 2H), 7,75 (m, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,34 (m, 2H), 7,14 (m, 2H), 6,91 (m, 1H), 6,87 (s, 1H), 4,99 (s, 2H), 4,32 (s ancho, 1H), 4,18 (t, 2H), 3,46 (m, 2H), 2,62 (m, 2H), 2,53 (m, 2H), 2,32 (m, 2H), 1,91 (m, 2H), 1,42 (m, 2H), 0,84 (t, 3H):

MS (+ve ESI): 522 (M+H)^{+},

MS (-ve ESI): 520 (M-H)^{-}.

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Ejemplo 3 -Preparación del Compuesto 3 en la Tabla 1-

N-(2,3-difluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]propoxi}quinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida

Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1, pero comenzando con hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)quinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(2,3-difluorofenil)acetamida (153 mg, 0,30 mmol) y D-prolinol (152 mg, 1,5 mmol) proporcionó el compuesto 3 en la Tabla 1 (123 mg, rendimiento 76%) como un sólido amarillo palo:

^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 10,29 (s ancho, 2H), 8,52 (m, 2H), 7,74 (m, 2H), 7,18 (m, 4H), 6,87 (s, 1H), 5,09 (s, 2H), 4,28 (s ancho, 1H), 4,18 (t, 2H), 3,39 (m, 1H), 3,19 (m, 1H), 3,06 (m, 1H), 2,97 (m, 1H), 2,44 (m, 2H), 2,17 (m, 1H), 1,91 (m, 2H), 1,80 (m, 1H), 1,64 (m, 2H), 1,52 (m, 1H):

MS (+ve ESI): 538 (M+H)^{+},

MS (-ve ESI): 536 (M-H)^{-}.

Hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)quinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(2,3-difluorofenil)acetamida, usado como el material de partida, fue obtenido como sigue:

a): Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1e), pero comenzando con 2,3-difluoroanilina (12,9 g, 100 mmol) proporcionó 2-bromo-N-(2,3-difluorofenil)acetamida (23,9 g, rendimiento 96%) como un sólido blanco:

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 7,68 (m, 1H), 7,20 (m, 2H), 4,17 (s, 2H):

\quad: MS (-ve ESI): 248, 250 (M-H)^{-}.

b): Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1f), pero comenzando con 2-bromo-N-(2,3-difluorofenil)acetamida (2,00 g, 8,00 mmol) y 3-nitro-1H-pirazol (1,00 g, 8,85 mmol) proporcionó N-(2,3-difluorofenil)-2-(3-nitro-1H-pirazol-1-il)acetamida (1,15 g, 51% rendimiento) como un sólido cristalino blanco:

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 8,05 (d, 1H), 7,69 (m, 1H), 7,18 (m, 2H), 7,08 (d, 1H), 5,31 (s, 2H):

\quad: MS (-ve ESI): 281 (M-H)^{-}.

c): Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1g), pero comenzando con N-(2,3-difluorofenil)-2-(3-nitro-1H-pirazol-1-il)acetamida (1,13 g, 4,00 mmol) proporcionó 2-(3-amino-1H-pirazol-1-il)-N-(2,3-difluorofenil)acetamida (934 mg, 93% rendimiento) como un sólido cristalino blanco:

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 10,08 (s ancho, 1H), 7,73 (m, 1H), 7,38 (m, 1H), 7,17 (m, 2H), 5,45 (s, 1H), 4,79 (s, 2H), 4,62 (s ancho, 2H):

\quad: MS (+ve ESI): 253 (M+H)^{+},

\quad: MS (-ve ESI): 251 (M-H)^{-}.

d): Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1d), pero comenzando con 4-cloro-7-(3-cloroxipropoxi)quinazolina (450 mg, 1,75 mmol) y 2-(3-amino-1H-pirazol-1-il)-N-(2,3-difluorofenil)acetamida (440 mg, 1,75 mmol) proporcionó hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)quinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(2,3-difluorofenil)acetamida (800 mg, 90% rendimiento) como un sólido blanco:

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 11,94 (s ancho, 1H), 10,50 (s ancho, 1H), 8,95 (s, 1H), 8,80 (d, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,68 (m, 1H), 7,34 (m, 2H), 7,21 (m, 2H), 6,96 (s, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,32 (t, 2H), 3,94 (t, 2H), 2,26 (m, 2H):

\quad: MS (+ve ESI): 473 (M+H)^{+},

\quad: MS (-ve ESI): 471 (M-H)^{-}.

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Ejemplo 4 -Preparación del Compuesto 4 en la Tabla 1-

N-(2,3-difluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2-hidroxietil)(propil)amino]propoxi}quinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida

Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1, pero comenzando con hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)quinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(2,3-difluorofenil)acetamida (153 mg, 0,30 mmol) y 2-(n-propilamino)etanol (155 mg, 1,5 mmol) proporcionó el compuesto 4 en la Tabla 1 (112 mg, 69% rendimiento) como un sólido amarillo palo:

^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 10,29 (s ancho, 2H), 8,54 (m, 2H), 7,74 (m, 2H), 7,20 (m, 4H), 6,88 (s, 1H), 5,09 (s, 2H), 4,25 (s ancho, 1H), 4,18 (t, 2H), 3,46 (m, 2H), 2,56 (m, 6H), 1,91 (m, 2H), 1,40 (m, 2H), 0,83 (t, 3H):

MS (+ve ESI): 540 (M+H)^{+},

MS (-ve ESI): 538 (M-H)^{-}.

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Ejemplo 5 -Preparación del Compuesto 5 en la Tabla 1-

N-(3-fluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]propoxi}-6-metoxiquinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida

Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1, pero comenzando con hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)-6-metoxiquinazolin-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(3-fluorofenil)acetamida (156 mg, 0,30 mmol) y D-prolinol (152 mg, 1,5 mmol) proporcionó el compuesto 5 en la Tabla 1 (129 mg, 78% rendimiento) como un sólido amarillo palo:

^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 10,50 (s ancho, 1H), 10,19 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,74 (m, 2H), 7,59 (m, 1H), 7,35 (m, 2H), 7,16 (s, 1H), 6,90 (m, 2H), 4,98 (s, 2H), 4,32 (s ancho, 1H), 4,18 (t, 2H), 3,91 (s, 3H), 3,40 (m, 1H), 3,23 (m, 1H), 3,10 (m, 1H), 3,00 (m, 1H), 2,46 (m, 2H), 2,20 (m, 1H), 1,96 (m, 2H), 1,81 (m, 1H), 1,67 (m, 2H), 1,56 (m, 1H):

MS (+ve ESI): 550 (M+H)^{+},

MS (-ve ESI): 548 (M-H)^{-}.

2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)-6-metoxiquinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(3-fluorofenil)acetamida, usado como el material de partida, fue obtenido como sigue:

a): Una mezcla de 2-amino-4-benziloxi-5-metoxibenzamida (10 g, 0,04 mol), (preparado de acuerdo con J. Med. Chem. 1977, 20, 146-149), y el reactivo de Gold (7,4 g, 0,05 mol) en dioxano (100 ml) fue agitada y calentada en reflujo durante 24 horas. Fueron añadidos acetato de sodio (3,02 g, 0,037 mol) y ácido acético (1,65 ml, 0,029 mol) a la mezcla de reacción y fue calentado durante 3 horas más. Los volátiles fueron eliminados por evaporación, fue añadida agua al residuo, el sólido fue recuperado por filtración, lavado con agua y secado. La recristalización con ácido acético proporcionó 7-(benziloxi)-6-metoxiquinazolin-4(3H)-ona (8,7 g, rendimiento 84%) como un sólido blanco.

b): Fue añadido gota a gota pivalato de clorometilo (225 ml, 1,56 mol) a una mezcla agitada de 7-(benziloxi)-6-metoxiquinazolin-4(3H)-ona (400 g, 1,42 mol) y carbonato de potasio (783 g, 5,67 mol) en dimetilacetamida (5500 ml). La reacción fue calentada a 90ºC durante 4 horas. La reacción fue enfriada y filtrada para eliminar las sales inorgánicas. El filtrado fue concentrado in vacuo para proporcionar, 2-[7-(benziloxi)-6-metoxi-4-oxo-3(4H)-quinazolinil]acetato de terc-butilo crudo (562 g, rendimiento 100%):

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO-d_{6}): 8,33 (s, 1H), 7,30-7,50 (m, 6H), 7,25 (s, 1H), 5,90 (s, 2H), 5,25 (s, 2H), 3,88 (s,3H), 1,10 (s, 9H):

\quad: MS (+ve ESI): 397 (M+H)^{+}

c): Fue añadido paladio sobre carbono al 10% (56 g, 53 mmol) a una solución de 2-[7-(benziloxi)-6-metoxi-4-oxo-3(4H)-quinazolinil]acetato de terc-butilo (562 g, 1,42 mmol) en dimetilacetamida (3500 ml) a temperatura ambiente y fue agitado durante 3 horas en una atmósfera de hidrógeno (1 bar). La reacción fue filtrada a través de una almohadilla de celite y el disolvente fue evaporado in vacuo. El sólido residual fue disuelto en metanol al 20% en diclorometano y fue pasado a través de una almohadilla de gel de sílice. La evaporación del disolvente in vacuo seguido de la trituración con metanol proporcionó 2-[7-hidroxi-6-metoxi-4-oxo-3(4H)-quinazolinil]acetato de terc-butilo (188 g, rendimiento 43%):

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO-d_{6}): 8,25 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,85 (s, 2H), 4,04 (s, 1H), 3,87 (s, 3H), 1,10 (s, 9H):

\quad: MS (+ve ESI): 307 (M+H)^{+}

d): Una mezcla de 2-[7-hidroxi-6-metoxi-4-oxo-3(4H)-quinazolinil]-acetato de terc-butilo (100g, 0,327 mol), 3-bromopropanol (49,3 g, 0,355 mol) y carbonato de potasio (133g, 0,967 mol) en dimetilformamida (500 ml) fue agitada a 80ºC durante 20 horas. La reacción fue enfriada y concentrada a una cuarto del volumen in vacuo. El residuo fue vertido en hielo/agua (1500 ml) y el sólido resultante fue recuperado por filtración con succión. La purificación por cristalización con etanol, proporcionó 2-[7-(3-hidroxipropoxi)-6-metoxi-4-oxo-3(4H)-quinazolinil]acetato de terc-butilo crudo (33,8 g, rendimiento 41%) como un solido beige:

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO-d_{6}): 7,95 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,1 (s, 1H), 4,16 (t, 2H), 3,86 (m, 5H), 2,08 (t, 2H), 1,12 (s, 9H):

\quad: MS (+ve ESI): 365 (M+H)^{+}

e): Fue añadida una solución de hidróxido de sodio acuosa (100 ml, 0,2 mol) a una solución of 2-[7-(3-hidroxipropoxi)-6-metoxi-4-oxo-3 (4H)-quinazolinil]acetato de terc-butilo (33,8 g, 93 mmol) en metanol (300 ml) y la solución fue calentada hasta reflujo durante 1 hora. El metanol fue evaporado in vacuo y el residuo acuoso fue acidificado con ácido clorhídrico acuoso y luego fue añadido bicarbonato de sodio. La recuperación del sólido por filtración con succión, el lavado con agua y el secado dió 7-(3-hidroxipropoxi)-6-metoxi-4-quinazolona (26 g, rendimiento 95%):

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO-d_{6}): 7,96 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,07 (s, 1H), 4,14 (t, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,55 (t, 2H), 1,90 (t, 2H):

\quad: MS (+ve ESI): 251 (M+H)^{+}

f): Fue añadida despacio 7-(3-hidroxipropoxi)-6-metoxi-4-quinazolona (25 g, 100 mmol) a una solución de dimetilformamida (1 ml) en cloruro de tionilo (250 ml). La mezcla fue calentada hasta reflujo durante 4 horas luego enfriada y los disolventes fueron evaporados in vacuo. El residuo fue disuelto en diclorometano y lavado con bicarbonato de sodio acuoso, salmuera, fue secado con sulfato de magnesio y evaporado. La trituración y recuperación del sólido por filtración con succión proporcionó 4-cloro-6-metoxi-7-(3-cloroxipropoxi)quinazolina (19,5 g, rendimiento 68%) como un sólido amarillo:

\quad: ^{1}H-RMN (CDCl_{3}): 8,85 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 4,38 (t, 2H), 4,03 (s, 3H), 3,8 (t, 2H), 2,40 (m, 2H):

\quad: MS (+ve ESI): 287 (M+H)^{+}

g): Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1d), pero comenzando con 4-cloro-6-metoxi-7-(3-cloroxipropoxi)quinazolina (531 mg, 1,85 mmol) y 2-(3-amino-1H-pirazol-1-il)-N-(3-fluorofenil)acetamida (430 mg, 1,85 mmol) proporcionó hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)-6-metoxiquinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(3-fluorofenil)acetamida (841 mg, rendimiento 86%) como un sólido blanco:

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 11,80 (s ancho, 1H), 10,94 (s ancho, 1H), 8,92 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,61 (m, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,38 (m, 2H), 6,90 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,30 (t, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,82 (t, 2H), 2,30 (m, 2H):

\quad: MS (+ve ESI): 485 (M+H)^{+},

\quad: MS (-ve ESI): 483 (M-H)^{-}.

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Ejemplo 6 -Preparación del Compuesto 6 en la Tabla 1-

N-(3-fluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2-hidroxietil)(propil)amino]propoxi}-6-metoxiquinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida

Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1, pero comenzando con hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)-6-metoxiquinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(3-fluorofenil)acetamida (156 mg, 0,30 mmol) y 2-(n-propilamino)etanol (155 mg, 1,5 mmol) proporcionó el compuesto 6 en la Tabla 1 (111 mg, rendimiento 67%) como un sólido amarillo palo:

^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 10,50 (s,1H), 10,19 (s, 1H), 8,47 (s,1H), 7,97 (s,1H), 7,74 (s,1H), 7,57 (m, 1H), 7,35 (m, 2H), 7,14 (s, 1H), 6,91 (m, 2H), 4,99 (s, 2H), 4,26 (m, 1H), 4,18 (t, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,44 (m, 2H), 2,58 (t, 2H), 2,49 (m, 2H), 2,39 (t, 2H), 1,89 (m, 2H), 1,29 (m, 2H), 0,81 (t, 3H):

MS (+ve ESI): 552 (M+H)^{+},

MS (-ve ESI): 550 (M-H)^{-}.

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Ejemplo 7 -Preparación del Compuesto 7 en la Tabla 1-

N-(2,3-difluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]propoxi}-6-metoxiquinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida

Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1, pero comenzando con hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)-6-metoxiquinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(2,3-difluorofenil)acetamida (162 mg, 0,30 mmol) y D-prolinol (152 mg, 1,5 mmol) proporcionó el compuesto 7 en la Tabla 1 (132 mg, 78% rendimiento) como un sólido amarillo palo:

^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 10,29 (s ancho, 1H), 10,21 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,72 (m, 2H), 7,19 (m, 3H), 6,90 (s, 1H), 5,09 (s, 2H), 4,29 (s ancho, 1H), 4,16 (t, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,40 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 3,08 (m, 1H), 2,96 (m, 1H), 2,42 (m, 2H), 2,16 (m, 1H), 1,95 (m, 2H), 1,80 (m, 1H), 1,64 (m, 2H), 1,55 (m, 1H):

MS (+ve ESI): 568 (M+H)^{+},

MS (-ve ESI): 566 (M-H)^{-}.

Hidrocloruro de 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)-6-metoxiquinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(2,3-difluorofenil)acetamida, usado como el material de partida, fue obtenido como sigue:

a): Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1d), pero comenzando con 4-cloro-6-metoxi-7-(3-cloroxipropoxi)quinazolina (502 mg, 1,75 mmol) y 2-(3-amino-1H-pirazol-1-il)-N-(2,3-difluorofenil)acetamida (440 mg, 1,75 mmol) proporcionó 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)-6-metoxiquinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(2,3-difluorofenil)acetamida (650 mg, rendimiento 69%) como un sólido blanco:

\newpage

\quad: ^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 11,80 (s ancho, 1H), 10,50 (s ancho, 1H), 8,91 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,59 (m, 1H), 7,47 (s, 1M, 7,20 (m, 2H), 6,90 (s, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,29 (t, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,84 (t, 2H), 2,31 (m, 2H):

\quad: MS (+ve ESI): 503 (M+H)^{+},

\quad: MS (-ve ESI): 501 (M-H)^{-}.

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Ejemplo 8 -Preparación del Compuesto 8 en la Tabla 1-

N-(2,3-difluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2-hidroxietil)(propil)amino]propoxi}-6-metoxiquinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida

Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 1, pero comenzando con 2-(3-{[7-(3-cloropropoxi)-6-metoxiquinazolin-4-il]amino}-1H-pirazol-1-il)-N-(2,3-difluorofenil)acetamida (162 mg, 0,30 mmol) y 2-(n-propilamino)etanol (155 mg, 1,5 mmol) proporcionó el compuesto 8 en la Tabla 1 (127 mg, 75% rendimiento) como un sólido amarillo palo:

^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 10,28 (s ancho, 1H), 10,21 (s ancho, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,74 (m, 2H), 7,20 (m, 2H), 7,15 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,09 (s, 2H), 4,27 (t, 1H), 4,17 (t, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,44 (m, 2H), 2,59 (m, 2H), 2,50 (m, 2H), 2,39 (t, 2H), 1,89 (m, 2H), 1,39 (m, 2H), 0,82 (t, 3H):

MS (+ve ESI): 570 (M+H)^{+},

MS (-ve ESI): 568 (M-H)^{-}.

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Ejemplo 9 -Preparación del compuesto 9 en la Tabla 2-

Dihidrógeno fosfato de {(2R)-1-[3-({4-[(1-{2-[(3-fluorofenil)amino]-2-oxoetil}-1H-pirazol-4-il)amino]quinazolin-7-il)oxi)propil]pirrolidin-2-il}metilo

Fue añadido despacio dietilfosforamidito de di-terc-butilo (483 mg, 1,94 mmol) a una solución de N-(3-fluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]propoxi}quinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida (252 mg, 0,486 mmol) y tetrazol (102 mg, 1,46 mmol) en dimetilacetamida (1,5 ml) con nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 1 hora. Fue añadido despacio peróxido de hidrógeno (248 \mul de una solución al 30% en agua, 2,19 mmol) a 0ºC y la mezcla de reacción fue agitada durante 1,5 horas a temperatura ambiente. La mezcla fue enfriada a 0ºC y fue añadida despacio una solución saturada de metabisulfito de sodio (1,0 ml de una solución acuosa 5,0N, 5 mmol) con agitación fuerte. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 20 minutos, fue diluída con agua y el pH fue ajustado a 7 con una disolución acuosa de hidrógenocarbonato de potasio. La mezcla de reacción fue extraída con diclorometano (2 x 5 ml) y las capas orgánicas combinadas fueron secadas y concentradas in vacuo. La purificación mediante cromatografía de gel de sílice, eluyendo con diclorometano seguido de una polaridad aumentada a diclorometano: metanol: amoniaco (20:1:0,1 a 20: 3: 0,2) dió fosfato de di(terc-butil){(2R)-1-[3-({4-[(1-{2-[(3-fluorofenil)amino]-2-oxoetil}-1H-pirazol-4-il)amino]-quinazolin-7-il}oxi)propil]pirrolidin-2-il}metilo como un aceite amarillo palo. Este intermedio fue disuelto en dioxano (3 ml) y fue añadida una solución de ácido clorhídrico 4,0 N en dioxano (0,73 \mul, 2,92 mmol). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. El sólido fue filtrado, lavado con diclorometano y dietil-éter y secado in vacuo durante 18 horas (50ºC, 0,1 mmHg) para proporcionar el compuesto 9 en la Tabla 2 (213 mg, rendimiento 62%):

^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 8,96 (s, 1H), 8,80 (d, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,61 (m, 1H), 7,40 (m, 4H), 6,92 (m, 1H), 6,86 (s, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,32 (t, 2H), 4,21 (m, 2H), 3,77 (m, 1H), 3,64 (m, 2H), 3,29 (m, 1H), 3,19 (m, 1H), 2,32 (m, 2H), 2,19 (m, 1H), 1,97 (m, 2H), 1,81 (m, 1H):

MS (+ve ESI): 600 (M+H)^{+},

MS (-ve ESI): 598 (M-H)^{-}

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Ejemplo 10 -Preparación del compuesto 10 en la Tabla 2-

Dihidrógeno fosfato de {(2R)-1-[3-({4-[(1-{2-[(2,3-difluorofenil)amino]-2-oxoetil}-1H-pirazol-3-il)amino]quinazolin-7-il}oxi)propil]pirrolidin-2-il}metilo

Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 9, pero comenzando con N-(2,3-difluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]propoxi}quinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida (243 mg, 0,452 mmol), proporcionó el compuesto 10 en la Tabla 2 (239 mg, rendimiento 74%):

^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 8,94 (s, 1H), 8,80 (d, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,68 (m, 1H), 7,45 (m, 2H), 7,21 (m, 2H), 6,86 (m, 2H), 5,20 (s, 2H), 4,33 (t, 2H), 4,21 (m, 2H), 3,77 (m, 1H), 3,62 (m, 2H), 3,30 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 2,33 (m, 2H), 2,18 (m, 1H), 1,98 (m, 2H), 1,81 (m, 1H):

MS (+ve ESI): 618 (M+H)^{+},

MS (-ve ESI): 616 (M-H)^{-}

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Ejemplo 11 -Preparación del compuesto 11 en la Tabla 2-

Dihidrógeno fosfato de {(2R)-1-[3-({4-[(1-{2-[(3-fluorofenil)amino]-2-oxoetil}-1H-pirazol-3-il)amino]-6-metoxiquinazolin-7-il}oxi)propil]pirrolidin-2-il}metilo

Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 9 pero comenzando con N-(3-fluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]propoxi}-6-metoxiquinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida (278 mg, 0,506 mmol), proporcionó el compuesto 11 en la Tabla 2 (295 mg, rendimiento 79%):

^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 8,92 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,62 (m, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,38 (m, 2H), 6,91 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,31 (t, 2H), 4,22 (m, 2H), 3,98 (s, 3H), 3,78 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 3,27 (m, 1H), 3,20 (m, 1H), 2,34 (m, 2H), 2,19 (m, 1H), 2,03 (m, 1H), 1,96 (m, 1H), 1,82 (m, 1H):

MS (+ve ESI): 630 (M+H)^{+},

MS (-ve ESI): 628 (M-H)^{-}

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Ejemplo 12 -Preparación del compuesto 12 en la Tabla 2-

Dihidrógeno fosfato de {(2R)-1-[3-({4-[(1-{2-[(2,3-difluorofenil)amino]-2-oxoetil}-1H-pirazol-3-il)amino]-6-metoxiquinazolin-7-il}oxi)propil]pirrolidin-2-il}metilo

Una reacción análoga a la descrita en el Ejemplo 9 pero comenzando con N-(2,3-difluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-1-il]propoxi}-6-metoxiquinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida (241 mg, 0,439 mmol), proporcionó el compuesto 12 en la Tabla 2 (161 mg, rendimiento 49%):

^{1}H-RMN (DMSO d_{6}): 8,93 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,68 (m, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,20 (m, 2H), 6,90 (s, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,31 (t, 2H), 4,20 (m, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,78 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,59 (m, 1H), 3,27 (m, 1H), 3,20 (m, 1H), 2,34 (m, 2H), 2,19 (m, 1H), 2,02 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,82 (m, 1H):

MS (+ve ESI): 648 (M+H)^{+},

MS (-ve ESI): 646 (M-H)^{-}.

Claims

1. Un compuesto de fórmula (I)

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10

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o su sal o su éster;

en el que:

X es O o NR^{6};

R^{6} es hidrógeno o alquilo C_{1-4};

R^{1} es hidrógeno, halo, o -X^{1}R^{11};

X^{1} es un enlace lineal, -O-, -NH- o -N(alquil C_{1-6})-;

R^{2} es hidrógeno, halo, nitro, ciano o -X^{2}R^{12};

X^{2} es un enlace lineal, -O-, -NH- o -N(alquil C_{1-6})-;

R^{3} es hidrógeno, halo o -X^{3}R^{13};

X^{3} es un enlace lineal, -CH_{2}=CH_{2}-, -O-, -NH- o -N(alquil C_{1-6})-;

R^{7} y R^{8} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, heterociclilo, alquilo C_{1-6}, hidroxi-alquilo C_{1-6}, alcoxiC_{1-3}-alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-6}, cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, hidroxi-cicloalquilo C_{3-6}, hidroxi-alquil C_{1-4}-cicloalquilo C_{3-6}, hidroxi-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, alcoxi C_{1-3}-cicloalquilo C_{3-6}, alcoxi C_{1-3}-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, halo-alquilo C_{1-6}, halo-cicloalquilo C_{3-6}, halo-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, ciano-alquilo C_{1-4}, amino-alquilo C_{1-6}, alquil C_{1-3}-amino-alquilo C_{1-6} y bis(alquil C_{1-3})amino-alquilo C_{1-6};

o R^{7} y R^{8} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico, cuyo anillo comprende de 4 a 7 átomos de anillo de los cuales uno es nitrógeno y de los cuales el otro se selecciona opcionalmente a partir de N, NH, O, S, SO y SO_{2}, y cuyo anillo se sustituye opcionalmente sobre carbono o nitrógeno mediante 1 ó 2 grupos seleccionados independientemente a partir de alquilo C_{1-4}, hidroxi, alcoxi C_{1-4}, hidroxi-alquilo C_{1-4}, hidroxi-alcoxi C_{1-4}-alquilo C_{1-4} y alcoxi C_{1-4}-alcoxi C_{1-4}, y en el que un -CH_{2}- de anillo se reemplaza opcionalmente con -C(O)-; R^{4} se selecciona a partir de hidrógeno, halo o -X^{4}R^{14};

X^{4} es un enlace lineal, -O-, -NH- o -N(alquil C_{1-6})-;

R^{5} es arilo o heteroarilo opcionalmente sustituido con 1, 2 ó 3 sustituyentes independientemente seleccionados a partir de halo, hidroxi, ciano, nitro, amino, alquil C_{1-4}-amino, bis(alquil C_{1-4})amino, alquilo C_{1-4}, alquenilo C_{2-4}, alquinilo C_{2-4}, alcoxi C_{1-4}, C(O)NHR^{17}, NHC(O)R^{18} y S(O)_{p}R^{19} en el que p es 0, 1 ó 2;

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o su sal o su éster, en el que R^{5} es arilo opcionalmente sustituido con 1 ó 2 halo.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, o su sal o su éster, en el que R^{5} es 2,3-difluorofenilo o 3-fluorofenilo.

4. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o su sal o su éster, en el que X es NH.

5. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o su sal o su éster, en el que R^{1} es hidrógeno o -OR^{11} y R^{11} es hidrógeno, heterociclilo seleccionado a partir de piperidinilo y pirrolidinilo o alquilo C_{1-4} (opcionalmente sustituido con hidroxi, alcoxi C_{1-4}, amino, alquil C_{1-4}-amino o bis(alquil C_{1-4})amino).

6. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o su sal o su éster, en el que R^{4} es hidrógeno.

7. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5, o su sal o su éster en el que R^{1} es hidrógeno y R^{4} es hidrógeno.

8. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o su sal o su éster, en el que R^{2} es hidrógeno o -OR^{12} y R^{12} es hidrógeno, alquilo C_{1-4} (opcionalmente sustituido con heterociclilo) o heterociclilo.

9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 8, o su sal o su éster, en el que R^{2} es hidrógeno o metoxi.

10. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o su sal o su éster, en el que R^{3} es -X^{3}R^{13}, X^{3} es -CH_{2}=CH_{2}-, -O- o -NH- y R^{13} es alquilo C_{1-6} sustituido con NR^{7}R^{8}, heterociclilo o halo.

11. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 10, o su sal o su éster, en el que X^{3} es - O- y R^{13} es propilo sustituido con cloro o -NR^{7}R^{8}.

12. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o su sal o su éster, en el que R^{7} y R^{8} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, heterociclilo, alquilo C_{1-6}, hidroxi-alquilo C_{1-6}, hidroxi-alquil C_{1-4}-cicloalquilo C_{3-6}, alcoxi C_{1-3}-alquilo C_{1-4}, cicloalquilo C_{3-6}, cicloalquil C_{3-6-}alquilo C_{1-3}, halo-alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, ciano-alquilo C_{1-4} y bis(alquil C_{1-3})amino-alquilo C_{1-6}; o R^{7} y R^{8} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico, cuyo anillo comprende de 4 a 7 átomos de anillo de los cuales uno es nitrógeno y de los cuales el otro es opcionalmente NH y cuyo anillo se sustituye opcionalmente en carbono o nitrógeno con un grupo seleccionado a partir de alquilo C_{1-4}, hidroxi, hidroxi-alquilo C_{1-4} e hidroxi-alcoxi C_{1-4}-alquilo C_{1-4}, y en el que un-CH_{2}- de anillo se reemplaza opcionalmente con -C(O)-.

13. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 12, o su sal o su éster en el que R^{7} y R^{8} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, metilo, etilo, propilo, hidroximetilo, 2-hidroxietilo o 3-hidroxipropilo; o R^{7} y R^{8} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico seleccionado a partir de pirrolidinilo, piperidinilo y piperazinilo, en el que el anillo se sustituye opcionalmente por hidroximetilo o 2-hidroxietilo.

14. Un compuesto de fórmula (IA):

11

o su sal o su éster;

en el que X, X^{1}, X^{2}, X^{3}, R^{4} y R^{5} son como se define en la reivindicación 1 y R^{1'} es hidrógeno, halo, o -X^{1}R^{11'};

R^{11'} es hidrógeno, fosfonooxi, heterociclilo o un grupo seleccionado a partir de alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-6} y cicloalquenilo C_{3-6} cuyo grupo está opcionalmente sustituido con fosfonooxi, heterociclilo, halo, hidroxi, alcoxi C_{1-4} o -NR^{9'}R^{10'}; R^{2'} es hidrógeno, halo, nitro, ciano o -X^{2}R^{12'};

R^{3'} es hidrógeno, halo o -X^{3}R^{13'};

R^{13'} es fosfonooxi o un grupo seleccionado a partir de alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-6} y cicloalquenilo C_{3-6} cuyo grupo es sustituido con -NR^{7'}R^{8'},

heterociclilo, halo, hidroxi, fosfonooxi o alcoxi C_{1-4};

R^{7'} y R^{8'} son seleccionados independientemente a partir de hidrógeno, heterociclilo, alquilo C_{1-6}, hidroxi-alquilo C_{1-6}, fosfonooxi-alquilo C_{1-6}, alcoxi C_{1-3}-alquilo C_{1-6}, fosfonooxi-alcoxi C_{1-4}-alquilo C_{1-4}, cicloalquilo C_{3-6}, cicloalquil C_{3-6-}alquilo C_{1-3}, hidroxi-cicloalquilo C_{3-6}, fosfonooxi-cicloalquilo C_{3-6}, hidroxi-alquil C_{1-4}-cicloalquilo C_{3-6}, fosfonooxi-alquil C_{1-4}-cicloalquilo C_{3-6}, hidroxi-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, fosfonooxi-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, alcoxi C_{1-3}-cicloalquilo C_{3-6}, alcoxi C_{1-3}-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, halo-alquilo C_{1-6}, halo-cicloalquilo C_{3-6}, halo-cicloalquil C_{3-6}-alquilo C_{1-3}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, ciano-alquilo C_{1-4}, amino-alquilo C_{1-6}, alquil C_{1-3}-amino-alquilo C_{1-6} y bis(alquil C_{1-3})amino-alquilo C_{1-6};

o R^{7'} y R^{8'} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico, cuyo anillo comprende de 4 a 7 átomos de anillo de los cuales uno es nitrógeno y de los cuales el otro se selecciona opcionalmente a partir de N, NH, O, S, SO y SO_{2}, y cuyo anillo se sustituye sobre carbono o nitrógeno por 1 ó 2 grupos independientemente seleccionados a partir de alquilo C_{1-4}, hidroxi, fosfonooxi, alcoxi C_{1-4}, hidroxi-alquilo C_{1-4}, fosfonooxi-alquilo C_{1-4}, hidroxi-alcoxi C_{1-4}-alquilo C_{1-4}, fosfonooxi-alcoxi C_{1-4}-alquilo C_{1-4} y alcoxi C_{1-4}-alcoxi C_{1-4}, y en el que un -CH_{2}- de anillo se reemplaza opcionalmente con un -C(O)-;

15. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 14 o su sal o su éster en el que el compuesto comprende sólo un grupo fosfonooxi.

16. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 14 o la reivindicación 15 o su sal o su éster en el que R^{5} es arilo opcionalmente sustituido con 1 ó 2 halo.

17. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 16 o su sal o su éster en el que R^{5} es 2,3-difluorofenilo o 3-fluorofenilo.

18. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 17 o su sal o éster en el que X es NH.

19. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 18 o su sal o su éster en el que R^{1'} es hidrógeno o -OR^{11'} y R^{11'} es hidrógeno, heterociclilo seleccionado a partir de piperidinilo o pirrolidinilo o alquilo C_{1-4} (opcionalmente sustituido con hidroxi, fosfonooxi, alcoxi C_{1-4}, amino, alquil C_{1-4}-amino o bis(alquil C_{1-4})amino).

20. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 19 o su sal o su éster en el que R^{4} es hidrógeno.

21. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 19 o su sal o su éster en el que R^{1'} es hidrógeno y R^{4} es hidrógeno.

22. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 21 o su sal o su éster en el que R^{2'} es hidrógeno o -OR^{12'} y R^{12'} es hidrógeno, alquilo C_{1-4} (opcionalmente sustituido con heterociclilo) o heterociclilo.

23. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 22 o su sal o éster en el que R^{2'} es hidrógeno o metoxi.

24. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 23 o su sal o éster en el que R^{3'} es -X^{3}R^{13'}, X^{3} es -CH_{2}=CH_{2}-, -O- o -NH- y R^{13'} es alquilo C_{1-6} sustituido con -NR^{7'}R^{8'}, heterociclilo o halo.

25. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 14 a 24 o su sal o su éster en el que R^{7'} se selecciona a partir de hidrógeno, heterociclilo, alquilo C_{1-6}, alcoxi C_{1-3}-alquilo C_{1-6}, ciano-alquilo C_{1-4} y cicloalquilo C_{3-6}; R^{8'} es fosfonooxi-alquilo C_{1-4} o fosfonooxi-alquil C_{1-4}-cicloalquilo C_{3-6}; o R^{7'} y R^{8'} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico seleccionado a partir de pirrolidina, piperidina y piperazina cuyo anillo se sustituye sobre carbono o nitrógeno con un grupo seleccionado a partir de fosfonooxi, fosfonooximetilo y 2-fosfonooxietilo.

26. Un compuesto seleccionado a partir de:

N-(2,3-difluorofenil)-2-{3-[(7-{3-[(2-hidroxietil)(propil)amino]propoxi}quinazolin4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida;

N-(3-fluorofenil)-2-(3-[(7-{3-[(2-hidroxietil)(propil)amino]propoxi}-6-metoxiquinazolin-4-il)amino]-1H-pirazol-1-il}acetamida;

dihidrógeno fosfato de {(2R)-1-[3-({4-[(1-{2-[(3-fluorofenil)amino]-2-oxoetil}-1H-pirazol-4-il)amino]quinazolin-7-il}oxi)propil]pinolidin-2-il}metilo;

dihidrógeno fosfato de {(2R)-1-[3-({4-[(1-{2-[(2,3-difluorofenil)amino]-2-oxoetil}-1H-pirazol-3-il)amino]quinazolin-7-il}oxi)propil]pirrolidin-2-il}metilo;

dihidrógeno fosfato de {(2R)-1-[3-({4-[(1-{2-[(3-fluorofenil)amino]-2-oxoetil}-1H-pirazol-3-il)amino]-6-metoxiquinazolin-7-il}oxi)propil]pirrolidin-2-il)metilo; y

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

27. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 o su sal farmacéuticamente aceptable o éster; un compuesto de fórmula (IA) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 14 a 25 o su sal farmacéuticamente aceptable o éster; o un compuesto como se define en la reivindicación 26 o su sal farmacéuticamente aceptable; junto con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

28. Un compuesto de fórmula (I) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 o su sal farmacéuticamente aceptable o éster; un compuesto de fórmula (IA) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 14 a 25 o su sal farmacéuticamente aceptable o éster; o un compuesto como se define en la reivindicación 26 o su sal farmacéuticamente aceptable; para uso en terapia.

29. El uso de un compuesto de fórmula (I) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 o su sal farmacéuticamente aceptable o éster; un compuesto de fórmula (IA) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 14 a 25 o su sal farmacéuticamente aceptable o éster; o un compuesto como se define en la reivindicación 26 o su sal farmacéuticamente aceptable; en la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa tal como el cáncer.

30. El uso como se define en la reivindicación 29 en el que el cáncer es un cáncer colorectal, de mama, pulmón, próstata, vejiga, renal o pancreático o leucemia o linfoma.

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31. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (I) como se define en la reivindicación 1 o su sal o su éster, cuyo procedimiento comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (II)

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en el que L es un grupo saliente adecuado tal como cloro, bromo, SMe etc.

con un compuesto de fórmula (III)

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en presencia de ácido clorhídrico en dioxano,

y posteriormente, si es necesario:

ii): eliminar cualquier grupo protector; y/o

iii): formar su sal o éster.

32. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula (IA) como se define en la reivindicación 14 o su sal o su éster, cuyo procedimiento comprende la fosforilación de un compuesto adecuado de fórmula (I) seguido de la desprotección del grupo fosfato.