ES2305037T3 - Indicador biologico para procesos de esterilizacion con sistema de doble tampon. - Google Patents
Indicador biologico para procesos de esterilizacion con sistema de doble tampon. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2305037T3 ES2305037T3 ES01309111T ES01309111T ES2305037T3 ES 2305037 T3 ES2305037 T3 ES 2305037T3 ES 01309111 T ES01309111 T ES 01309111T ES 01309111 T ES01309111 T ES 01309111T ES 2305037 T3 ES2305037 T3 ES 2305037T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- range
- buffer
- microorganisms
- support
- indicator
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/22—Testing for sterility conditions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
- A61L2/26—Accessories or devices or components used for biocidal treatment
- A61L2/28—Devices for testing the effectiveness or completeness of sterilisation, e.g. indicators which change colour
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N31/00—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods
- G01N31/22—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods using chemical indicators
- G01N31/226—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods using chemical indicators for investigating the degree of sterilisation
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Apparatus For Disinfection Or Sterilisation (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
Un método para determinar la eficacia de un proceso de desinfección o esterilización, comprendiendo dicho método; (a) proporcionar un soporte con microorganismos sobre el soporte; (b) exponer dicho soporte al proceso de desinfección o esterilización; (c) incubar dicho soporte en un medio de crecimiento que comprende tampón fosfato que tiene un primer pKa de 7, tampón acetato que tiene un segundo pKa de 4-5 y colorante que cambia de color con un cambio en el pH del primer intervalo de pH a un segundo intervalo de pH, y en el que dicha incubación es después de dicha exposición; y (d) determinar si dichos microorganismos crecen en dicho medio de crecimiento durante dicha incubación, en el que el crecimiento de dichos microorganismos y dicho medio de crecimiento genera ácido, cambiando de esta manera el pH en dicho medio de crecimiento de un primer pH dentro de dicho primer intervalo de pH a un segundo pH dentro de dicho segundo intervalo de pH, en el que dicho primer pKa y dicho segundo pKa están dentro de dicho primer intervalo de pH y dicho de segundo intervalo de pH, respectivamente.
Description
Indicador biológico para procesos de
esterilización con sistema de doble tampón.
Esta invención se refiere a un sistema de doble
tampón para evitar la inversión de color de un colorante indicador
del pH que se usa para detectar el crecimiento bacteriano en un
indicador biológico para controlar la eficacia de un proceso de
esterilización.
Se usa una gran variedad de sistemas de
esterilización para esterilizar dispositivos médicos en hospitales
y otras instalaciones médicas. Vapor, calor, óxido de etileno y
peróxido de hidrógeno se usan habitualmente como esterilizantes. El
sistema de esterilización STERRAD®, disponible en Advanced
Sterilization Products of Irvine, California, es un sistema de
esterilización ejemplar que utiliza una combinación de peróxido de
hidrógeno y plasma para esterilizar el equipo médico.
En todos estos procesos de esterilización,
habitualmente se usan indicadores biológicos para confirmar la
eficacia del proceso de esterilización. Los indicadores biológicos
generalmente incluyen un soporte que se ha inoculado con esporas y
otros microorganismos. La eficacia de la esterilización se evalúa
determinando si someter el indicador biológico al ciclo de
esterilización destruye o no todos los microorganismos en el
soporte.
El indicador biológico se sitúa en el
esterilizador junto con el equipo a esterilizar. Una vez completado
el proceso de esterilización, el indicador biológico se retira del
esterilizador y el soporte se sumerge en el medio de cultivo
estéril. El medio de cultivo y el soporte se incuban durante un
tiempo predeterminado a una temperatura apropiada. Al final del
periodo de incubación, se usa un indicador para determinar si ha
sobrevivido cualquier microorganismo. Si no ocurre crecimiento de
los microorganismos, se supone que los artículos en el
esterilizador se han esterilizado apropia-
damente. Si ha ocurrido crecimiento de microorganismos, los artículos en el esterilizador puede que no sean estériles.
damente. Si ha ocurrido crecimiento de microorganismos, los artículos en el esterilizador puede que no sean estériles.
Un compuesto químico indicador del pH que cambia
de color con un cambio en el pH puede usarse como indicador porque
los subproductos ácidos se forman cuando los microorganismos
metabolizan el medio de crecimiento. Un cambio ácido en el pH del
medio de crecimiento en el indicador biológico indica por lo tanto
el crecimiento bacteriano. Como alternativa, el indicador puede ser
por ejemplo turbidez en el medio de cultivo que es el resultado de
las colonias celulares producidas por el crecimiento bacteriano.
En algunos indicadores biológicos, los
microorganismos, el medio de cultivo y el indicador se envasan de
una manera que permite que los microorganismos el medio de cultivo
y el indicador se combinen sin exponer el indicador biológico a los
alrededores no estériles. Este tipo de indicador biológico es un
"indicador biológico autocontenido" o SCBI. El uso de un SCBI
simplifica el proceso de ensayo y minimiza la oportunidad de que la
contaminación externa pueda afectar a los resultados del
ensayo.
McCormick et al. (Patente de Estados
Unidos Nº 4.743.537), por ejemplo, describe un SCBI que tiene un
compartimento con una abertura permeable que permite la transmisión
de gas esterilante o vapor evitando el paso de microorganismos
hacia o desde el compartimento. El compartimento contiene una
ampolla que puede romperse con un medio de cultivo. Los
microorganismos indicadores se sitúan en un extremo de una mecha y
la mecha se sitúa en el compartimento con el extremo de la mecha
que contiene los microorganismos lejos de la ampolla que contiene el
medio y adyacente a la abertura permeable. Después del proceso de
esterilización, el dispositivo se retira del esterilizador y la
ampolla se rompe liberando el medio de cultivo al compartimento. El
dispositivo se incuba y se examina para determinar si ha ocurrido o
no crecimiento de microorganismos.
El aparato y el método de la presente invención
abordan la causa anteriormente no reconocida de un problema cuando
se usan indicadores biológicos que contienen colorantes indicadores
para detectar el crecimiento microbiano para determinar la eficacia
de un proceso de esterilización.
Un aspecto de la invención implica un método
para determinar la eficacia de un proceso de desinfección o
esterilización. El método incluye proporcionar un soporte con
microorganismos en el soporte exponiendo el soporte a procesos de
desinfección esterilización incubando el soporte en un medio de
crecimiento para determinar si los microorganismos crecen en el
medio de crecimiento. El medio de crecimiento contiene un primer
tampón de fósforo con un primer pK de 7, un segundo tampón acetato
con un segundo pK de 4-5 y un colorante sensible a
pH. El soporte se incuba en el medio de crecimiento después de la
exposición al proceso de desinfección o esterilización. El
crecimiento de los microorganismos en el medio de crecimiento
genera ácido, cambiando el pH en el medio de crecimiento desde el
primer pH en un primer intervalo de pH a un segundo pH en un segundo
intervalo de pH. El primer pK_{a} y dicho segundo pK_{a} están
dentro del primer intervalo de pH y el segundo intervalo de pH,
respectivamente.
Ventajosamente, determinar si los
microorganismos han crecido implica determinar si el pH cambia en el
medio de crecimiento. Preferiblemente, el colorante sensible a pH
tiene un primer color en el primer intervalo de pH y un segundo
color en el segundo intervalo de pH. La determinación de si los
microorganismos han crecido incluye determinar si el colorante
cambia de un primer color al segundo color.
Preferiblemente, hay una menor concentración de
tampón que tiene un pK_{a} en el primer intervalo de pH que
tampón que tiene un pK_{a} en el segundo intervalo de pH.
Ventajosamente, el medio de crecimiento está contenido en un
recinto que puede abrirse y el soporte se incuba en el medio de
crecimiento abriendo el recinto y sumergiendo el soporte en el
medio de crecimiento. En una realización, el soporte y el medio de
crecimiento se localizan en un recipiente cubierto con un gas o
vapor permeable pero que actúa como barrera impermeable a los
microorganismos. Durante el proceso de desinfección o
esterilización, un gas o vapor germicida se difunde desde el
exterior del recipiente hacia el recipiente a través de la
barrera.
Ventajosamente, el microorganismo es un
microorganismo indicador biológico para el proceso de desinfección
o esterilización. Preferiblemente, el proceso de desinfección o
esterilización usa vapor, calor, óxido de etileno, peróxido de
hidrógeno, ozono, dióxido de cloro, ácido peracético, ácido
perfómico, formaldehído, glutaraldehído,
orto-ftalaldehído o sales hipoclorito como el agente
desinfectante o esterilizante.
Otro aspecto de la invención implica un
indicador biológico autocontenido que incluye un soporte dentro de
un recipiente. El soporte incluye microorganismos viables. Al menos
parte del recipiente es transparente y el recipiente tiene una
abertura que está cubierta con un gas o vapor permeable aunque actúa
como barrera impermeable para los microorganismos. Al menos un
recinto que puede abrirse se localiza dentro del recipiente. El
recinto contiene un medio de cultivo que es capaz de soportar el
crecimiento de los microorganismos viables y un colorante que
cambia de color con un cambio en el pH de un primer intervalo de pH
a un segundo intervalo de pH. El recinto contiene también un
sistema de doble tampón constituido por un primer tampón fosfato que
tiene un primer pK_{a} de 7 y un segundo tampón acetato que tiene
un segundo pK_{a} de 4-5. El primer pK_{a} y
dicho segundo pK_{a} están dentro del primer intervalo de pH y el
segundo intervalo de pH, respectivamente.
El soporte puede ser un sustrato poroso, un
sustrato no poroso, un sustrato absorbente o un sustrato no
absorbente Ventajosamente, el gas o vapor que es permeable aunque
actúa como una barrera impermeable para los microorganismos, es una
poliolefina no tejida. Preferiblemente, el microorganismo viable es
un microorganismo indicador biológico para un proceso de
desinfección o esterilización. En una realización, el recipiente que
puede abrirse es una ampolla de vidrio que puede romperse.
Ventajosamente, el colorante es púrpura de bromcresol.
Preferiblemente, el primer tampón incluye al menos una sal fosfato.
En una realización, el segundo tampón incluye al menos una sal
acetato. Preferiblemente, la sal acetato es acetato sódico.
Ventajosamente, el sistema de doble tampón
contiene una concentración menor de tampón que tiene un pK_{a} en
el primer intervalo de pH que el tampón que tiene un pK_{a} en el
segundo intervalo de pH. Preferiblemente, el indicador biológico
autocontenido tiene también una tapa con al menos una abertura por
encima de la barrera de manera que el gas o vapor pueden difundirse
hacia dicho recipiente a través del orificio y la barrera. En una
realización, el indicador biológico autocontenido tiene también un
indicador químico para indicar la exposición del indicador
biológico autocontenido a un proceso de desinfección o
esterilización.
Otro aspecto de la invención implica un medio de
cultivo que es capaz de soportar el crecimiento de microorganismos
viables. El medio de cultivo incluye un caldo de nutriente, un
colorante que cambia de color con un cambio en el pH de un primer
intervalo de pH a un segundo intervalo de pH y un sistema de doble
tampón. El sistema de doble tampón contiene un primer tampón
fosfato que tiene un primer pK_{a} de 7 y un segundo tampón
acetato que tiene un segundo pK_{a} de 4-5, donde
el primer pK_{a} y el segundo pK_{a} están dentro del primer
intervalo de pH y el segundo intervalo de pH, respectivamente.
Ventajosamente, el colorante en el medio de
cultivo es púrpura de bromcresol. Preferiblemente, el primer tampón
incluye al menos una sal fosfato. En una realización, el segundo
tampón incluye al menos una sal acetato. En una realización
ejemplar, la sal acetato es acetato sódico. Ventajosamente, el
sistema de doble tampón incluye una menor concentración de tampón
que tiene un pK_{a} en el primer intervalo de pH que el primer
tampón que tiene un pK_{a} en el segundo intervalo de pH.
La Figura 1 es una vista de sección transversal
de un indicador biológico autocontenido para usar con las
realizaciones del método de la presente invención;
La Figura 2 es una vista en perspectiva del
indicador biológico autocontenido de la Figura 1; y
La Figura 3 es un gráfico que muestra el
crecimiento bacteriano (eje izquierdo) y pH (eje derecho) frente al
tiempo en un medio de cultivo en un indicador biológico con un
sistema de doble tampón de acuerdo con las realizaciones del método
de la presente invención.
La presencia de microorganismos viables en un
indicador biológico una vez completado un ciclo de esterilización
se determina a menudo con un indicador de pH debido a que se forman
subproductos ácidos cuando los microorganismos metabolizan el medio
de crecimiento. Un cambio ácido en el pH en el medio de crecimiento
es por lo tanto una indicación de una esterilización incompleta.
Sin embargo, se ha descubierto que los contaminantes que elevan el
pH (básicos) pueden entrar en el medio de crecimiento después de que
el colorante sensible a pH haya cambiado de color debido a la
generación de ácido por el crecimiento bacteriano. Los contaminantes
básicos pueden cambiar involuntariamente el pH del medio de
crecimiento cambiando el color del colorante indicador de nuevo a su
color original de manera que el indicador de color no es estable
durante más tiempo. Se ha descubierto que los contaminantes básicos
en ocasiones pueden entrar en el medio de crecimiento por ejemplo
por lixiviado o difusión fuera del material plástico del que están
hechos la mayoría de indicadores biológicos autocontenidos.
La inversión de color del colorante indicaría de
forma falsa que no ha ocurrido crecimiento de microorganismos. Si
un observador simplemente mira al indicador biológico al final del
periodo de incubación, el observador creería que no ha habido
crecimiento bacteriano, porque el colorante habría vuelto a su color
original. Adicionalmente, si el observador controla el color del
indicador biológico en una base regular vería que el color del
colorante cambia del color original al color del colorante en una
solución básica y después de nuevo al color original. El observador
quedaría confuso por los múltiples cambios de color y creería que el
indicador biológico es defectuoso. El reconocimiento de la causa no
reconocida anteriormente del problema de inversión del colorante
por lixiviado o difusión de contaminantes básicos en el medio de
crecimiento es un aspecto del método y aparato de la presente
invención.
Las realizaciones del aparato y el método de la
presente invención abordan la causa no reconocida previamente del
problema de inversión del colorante mediante el uso de un sistema de
doble tampón. Aunque los sistemas de tampón único se han usado
anteriormente en indicadores biológicos, la necesidad de un sistema
de doble tampón no se reconoció anteriormente. La presente
invención por lo tanto incluye tanto el reconocimiento de una causa
del problema así como la solución para el problema.
Aunque el sistema de doble tampón
fosfato/acetato de la presente invención se describe en el contexto
de un sistema de doble tampón para indicadores biológicos donde el
sistema de doble tampón incluye una pequeña cantidad de un tampón
de alto pH y una gran cantidad de un tampón de bajo pH, debe
entenderse que el sistema de doble tampón tiene una amplia
aplicación y que el concepto del sistema de doble tampón no se
pretende limitar a la realización de indicadores biológicos. La
aplicación más amplia de los sistemas de doble tampón se describirá
con más detalle después de la descripción más específica a
indicadores biológicos.
El sistema de tampón único usado anteriormente
proporcionaba alguna estabilidad al indicador biológico para
minimizar el número de falsos positivos debido a pequeñas cantidades
de impurezas ácidas. Por ejemplo, si una pequeña cantidad de ácido
estaba presente en la atmósfera en el sistema de esterilización al
comienzo del proceso de esterilización, el ácido quedaría retenido
por el sistema de tampón en el indicador biológico con solo un
cambio de pH mínimo. El pH no cambiaría suficientemente para
provocar un cambio de color en el colorante indicador en el sistema
indicador biológico.
El sistema de tampón único estabiliza el pH en
el sistema desde ambas condiciones ácidas y básicas. Eligiendo un
tampón único con un pK_{a} de aproximadamente 7 se estabiliza un
sistema a un pH de aproximadamente 7. Un pH de aproximadamente 7 es
adecuado para el crecimiento de microorganismos.
Con el sistema de doble tampón fosfato/acetato
de acuerdo con las realizaciones del método y el aparato de la
presente invención, un sistema de tampón fosfato tiene un intervalo
de pH suficiente para permitir que el colorante indicador cambie de
color si se genera ácido a partir del metabolismo del medio de
crecimiento por las bacterias. El segundo tampón acetato controla
el pH después de que el colorante haya cambiado de color de manera
que el pH del sistema no cambie significativamente por las impurezas
básicas, provocando que el colorante indicador vuelva a su color
original. El sistema de doble tampón supera la causa no reconocida
anteriormente del problema de inversión de color del colorante
indicador.
La Figura 1 representa una vista de sección
transversal de un indicador de esterilidad y es adecuado para usar
con un sistema de doble tampón de acuerdo con el aparato y método de
la presente invención. La estructura del indicador de esterilidad
10 de la Figura 1 es en parte similar al SCBI descrito en la Patente
de Estados Unidos Nº 5.552.320 excepto que el indicador de
esterilidad de la Figura 1 tiene solo un recipiente interno en
lugar de los dos recipientes internos del SCBI de la Patente de
Estados Unidos Nº 5.552.320. Una amplia variedad de indicadores
biológicos e indicadores biológicos autocontenidos (SCBI) son
adecuados para usar en el método y el aparato de las realizaciones
de la invención y el ejemplo del indicador de esterilidad 10 de la
Figura 1 no pretende ser limitante de las realizaciones de
cualquiera del método o el aparato de la presente invención.
Volviendo a la Figura 1, el vial transparente 12
tiene paredes impermeables a líquido 14 y un extremo abierto 16.
Una ampolla con medio 20 en el interior del vial transparente 12
contiene un medio de cultivo líquido 22. La ampolla con medio 20 se
sella y el interior de la ampolla con medio 20 no está en
comunicación fluida con el interior del vial transparente 12 hasta
que la ampolla con medio 20 se abre. Un soporte 24 se localiza en
una parte inferior del vial transparente 12 en un extremo del vial
transparente 12 opuesto al extremo abierto 16. El soporte 24 está
constituido por un material tal como TYVEK^{TM}, acero inoxidable,
fibra de vidrio y similares. El soporte 24 puede ser un sustrato
poroso, un sustrato no poroso, un sustrato absorbente o un sustrato
no absorbente. El soporte puede ser un disco o una tira o tener otra
forma adecuada. Si el soporte 24 retiene o absorbe desinfectante o
esterilante, puede necesitarse otro compuesto químico en el
indicador de esterilidad 10 para neutralizar o descomponer el
esterilante o desinfectante.
El soporte 24 está inoculado con una
concentración predeterminada de esporas viables de otros
microorganismos. Un microorganismo adecuado es esporas de
Bacillus stearothermophilus, aunque otros microorganismos
adecuados pueden usarse también con el aparato y método de las
realizaciones de la presente invención. Bacillus
stearothermophilus se usa normalmente como microorganismo
indicador biológico con procesos de esterilización por vapor. Se usa
Bacillus subtilis var. niger como microorganismo
indicador biológico con óxido de etileno y procesos de
esterilización con calor seco. Cualquiera de Bacillus
stearothermophilus o Bacillus subtilis var. niger
puede usarse como microorganismo indicador biológico en el proceso
STERRAD® dependiendo del soporte y cómo de fácilmente pueda
difundirse el esterilante en el indicador biológico. El proceso
STERRAD® utiliza una combinación de peróxido de hidrógeno y plasma.
Otros microorganismos son adecuados para usar con el método y el
aparato de las realizaciones de la invención y los microorganismos
descritos anteriormente no pretenden ser limitantes.
El extremo abierto 16 del vial transparente 12
se cubre con una lámina de cierre 26 permeable a gas o vapor pero
impermeable a microorganismos. La lámina de cierre 26 puede estar
hecha de una tela no tejida tal como TYVEK^{TM}, un envoltorio
CSR u otro material adecuado. El envoltorio CSR es polipropileno no
tejido. TYVEK^{TM} es un nombre comercial para polietileno
enlazado por hilado. En una realización ejemplar, la lámina de
cierre 26 está constituida por una poliolefina no tejida. Como
alternativa, la lámina de cierre 26 puede ser cualquier clase de
filtro hidrófobo que sea permeable a gas o vapor pero impermeable a
microorganismos. La lámina de cierre 26 se mantiene en su sitio
mediante una tapa 28. La tapa 28 se ajusta por presión sobre el
extremo abierto 16 del vial transparente 12 y se mantiene en su
sitio por fricción. Un indicador químico 30 se localiza
preferiblemente en una parte superior de la tapa 28 y se mantiene en
su sitio en el extremo de la tapa 28 mediante una pluralidad de
lengüetas flexibles 32. Al menos un orificio 34 se localiza en la
tapa 28. El orificio 34 permite que el germicida entre en la tapa
28.
El medio de cultivo 22 en la ampolla con medio
20 contiene colorante que experimenta un cambio visible con cambio
de pH en el medio de cultivo 22. El cambio visible en el colorante
con un cambio de pH puede detectarse a través de las paredes 14 del
vial transparente 12. Como se usa en la presente memoria descriptiva
y reivindicaciones, "transparente" es la cualidad de las
paredes 14 que permite detectar cambios visibles en el color del
colorante en el medio de cultivo 22 desde el exterior. Las paredes
14 del vial transparente 12 por lo tanto pueden ser translúcidas en
lugar de transparentes. Adicionalmente, en algunas realizaciones las
paredes 14 del vial transparente 12 son opacas y hay una ventanilla
transparente o translúcida en el vial transparente 12 para permitir
la observación del cambio de color del colorante. Como alternativa,
toda o una parte de la tapa 28 puede ser transparente o
translúcida.
El vial transparente 12 está hecho
preferiblemente de un plástico flexible que es resistente a peróxido
de hidrógeno. El polipropileno es un plástico ejemplar para usar en
la fabricación del vial transparente 12. Aunque no es necesario que
la tapa 28 sea transparente o translúcida, en una realización
ejemplar, la tapa 28 es transparente o translúcida y está hecha del
mismo plástico que el vial transparente 12. En otras realizaciones,
la tapa 28 está hecha de un material que es diferente que el
material del que está hecho el vial transparente 12.
La ampolla con medio 20 está hecha de un
material frágil tal como vidrio. En una realización, las paredes 14
del vial transparente 12 son deformables, de manera que la ampolla
con medio 20 puede abrirse (por ejemplo, por estrujado) sin romper
las paredes 14 del vial transparente 12.
El indicador químico 30 es cualquier indicador
que indica exposición a un esterilante. Un indicador químico
adecuado 30 para esterilantes oxidativos tales como peróxido de
hidrógeno es un disco de aleación de aluminio recubierto con
cromato recubierto con colorante rojo de Burdeos como se describe en
detalle en la Patente de Estados Unidos Nº 5.942.438. El colorante
rojo de Burdeos tiene el nombre comercial Aluminum Bordeaux RL.
Otros indicadores químicos 30 son adecuados para usar con el aparato
y el método de las realizaciones de la presente invención. El
indicador químico 30 de la Patente de Estados Unidos Nº 5.942.438
cambia de color de rojo a color amarillo/dorado cuando se expone a
un esterilante de tipo oxidación. El indicador químico 30 de la
Patente de Estados Unidos Nº 5.942.438 por lo tanto puede usarse
como un medio para determinar si el indicador de esterilidad 10 se
ha expuesto o no a un esterilante oxidativo. Otras formas de
indicadores químicos 30 pueden usarse para indicar exposición a
esterilantes tales como vapor, calor u óxido de etileno. El
indicador químico 30 es opcional y no es necesario para las
realizaciones del aparato o el método de la presente invención.
La Figura 2 muestra una vista en perspectiva del
indicador de esterilidad 10 de la Figura 1 que muestra con más
detalle cómo la tapa 28 se ajusta en el vial transparente 12. La
Figura 2 muestra también más claramente las lengüetas 32 que
mantienen el indicador químico 30 en su sitio en la parte superior
de la tapa 28. La Figura 2 muestra también el orificio 34 en la
tapa 28. El orificio 34 permite que el esterilante o germicida
entre en el interior del indicador de esterilidad 10.
La ampolla con medio 20 de la Figura 1 contiene
un medio de cultivo 22 y un colorante. Un medio de cultivo adecuado
22 es caldo de cultivo de soja tríptica (disponible en SGM Biotech,
Bozeman, Montana). El colorante tiene un primer color a un alto pH
y un segundo color a un bajo pH de manera que el color en el medio
de cultivo cambia si el pH cambia de un intervalo de pH alto a un
intervalo de pH bajo durante la incubación del indicador de
esterilidad 10 debido a la generación de subproductos ácidos a
partir del metabolismo del medio de cultivo 22 por los
microorganismos supervivientes. En otras realizaciones, el colorante
está en el vial transparente 12 fuera de la ampolla con medio 20.
El colorante se pone después en contacto con el medio de cultivo 22
cuando la ampolla con medio 20 se abre.
El indicador de esterilidad 10 se pone en el
esterilizador con el equipo a esterilizar. El equipo a esterilizar
y el indicador de esterilidad 10 se someten después a un ciclo de
esterilización. El ciclo de esterilización puede ser cualquier
ciclo de esterilización adecuado incluyendo aunque sin limitación
ciclos de esterilización con un agente desinfectante o
esterilizante tal como calor, vapor, óxido de etileno, plasma,
peróxido de hidrógeno, una combinación de peróxido de hidrógeno y
plasma, dióxido de cloro, ozono, ácido peracético, formaldehído o
cualquier otro proceso de esterilización adecuado. Durante el ciclo
de esterilización el vapor o gas o vapor germicida pueden entrar en
el indicador de esterilidad 10 a través del orificio 34 en la tapa
28. El gas o vapor germicida puede ser un desinfectante o un
esterilante. En el contexto de esta solicitud, un desinfectante
debe entenderse como un germicida que mata microorganismos en estado
vegetativo pero que no necesariamente mata a las esporas. Un
esterilante debe entenderse como un germicida que mata todos los
microorganismos incluyendo las esporas. Debido a que la lámina de
cierre 26 en el extremo abierto 16 del vial transparente 12 es
permeable a vapor o permeable a gas, el gas o vapor germicida puede
penetrar en la lámina de cierre 26. Los microorganismos en el
soporte 24 por lo tanto se exponen a la atmósfera esterilizante
durante el ciclo de esterilización. Si se usa calor como ciclo de
esterilización, el indicador de esterilidad 10 se somete a las
mismas condiciones de calor que el equipo a esterilizar.
Una vez completado el ciclo de esterilización,
el indicador de esterilidad 10 se retira del esterilizador y la
ampolla con medio se abre para exponer los microorganismos en el
soporte 24 al medio de cultivo 22. La ampolla con medio 20 puede
abrirse de cualquier manera adecuada. Un método para abrir la
ampolla con medio 20 es deformar las paredes 14 del vial
transparente 12, puede usarse el estrujado de la ampolla con medio
20 por cualquier método adecuado de apertura de la ampolla con medio
20. El indicador de esterilidad 10 se pone después en un incubador
convencional a una temperatura y durante un tiempo adecuado para que
el microorganismo crezca en el medio de cultivo. Por ejemplo, con
esporas de Bacillus stearothermophilus la incubación de 48
horas o más a una temperatura de 58ºC es adecuada para el
crecimiento del microorganismo.
Si el microorganismo crece durante el ciclo de
incubación, el metabolismo del medio de cultivo 22 por el
microorganismo produce subproductos ácidos, disminuyendo el pH del
medio de cultivo 22. El cambio de pH provoca un cambio en el color
del colorante en el medio de cultivo 22. Un cambio en el color del
colorante durante la incubación del indicador de esterilidad 10
indica que la esterilización no se había completado. La ausencia de
cambio de color confirma que el ciclo de esterilización era eficaz.
En realizaciones alternativas, el cambio de pH puede detectarse con
un peachímetro, papel de pH o por cualquier método de medida de pH
adecuado.
La Figura 3 muestra gráficos de la curva de
crecimiento de las bacterias frente al tiempo (escala izquierda) y
la curva de pH frente al tiempo (escala derecha) para un indicador
de esterilidad típico 10. Como se muestra en la Figura 3, el pH en
el medio de crecimiento 22 cambia de un intervalo de pH alto a un
intervalo de pH bajo durante el transcurso de la incubación debido
a la generación de subproductos ácidos de a partir del metabolismo
del medio de cultivo 22 por las bacterias. Si se usa el colorante
púrpura de bromcresol como colorante indicador, el colorante
púrpura de bromcresol cambia de púrpura por encima de un pH de
aproximadamente 6,8 a amarillo por debajo de un pH de
aproximadamente 5,2. Un cambio de color de púrpura a amarillo con un
indicador de esterilidad 10 que contiene colorante púrpura de
bromcresol en el medio de cultivo 22 indica por lo tanto el
crecimiento bacteriano. El ejemplo de púrpura de bromcresol se usa
para ilustrar el método y las realizaciones del aparato y el método
de la presente invención no se limitan al colorante púrpura de
bromcresol. (El colorante púrpura de bromcresol se conoce también
como colorante púrpura de bromocresol).
Al inicio del periodo de incubación, incluso una
pequeña cantidad de contaminación ácida debido a la presencia de
dióxido de carbono u otras impurezas ácidas podría cambiar el pH
suficientemente para cambiar el color del colorante. Por ejemplo,
en un sistema con púrpura de bromcresol, un cambio en el pH de 7 a
aproximadamente 6,0 sería suficiente para provocar que el indicador
púrpura de bromcresol empezara a cambiar desde el color púrpura.
Por lo tanto, habitualmente se añade un tampón al medio de cultivo
22 para reducir la sensibilidad a falsos positivos como resultado
de pequeñas cantidades de contaminantes ácidos. Para hacer al
sistema tan sensible como sea posible y hacer que la respuesta del
sistema sea tan rápida como sea posible, solo se usa una pequeña
cantidad de tampón.
Si tuviera que introducirse base en el medio de
cultivo 22 después de que el pH en el medio de cultivo 22 hubiera
disminuido suficientemente para que el colorante cambiara de color,
el pH en el medio de cultivo 22 aumentaría suficientemente para
cambiar el color del colorante de nuevo al color original. En el
ejemplo de púrpura de bromcresol, un cambio en el pH de
aproximadamente 5,2 a por encima de aproximadamente 6 cambiaría el
color del colorante púrpura de bromcresol de amarillo a un pH bajo a
púrpura a un pH alto, indicando de forma falsa que no había
ocurrido crecimiento bacteriano.
Aunque la inversión de colorante no sería una
cuestión fundamental si el indicador de esterilidad 10 se controlara
regularmente, los indicadores de esterilidad 10 en ocasiones no se
controlan hasta el final del séptimo día del periodo de incubación,
lo suficientemente largo para que la inversión de colorante haya
tenido lugar. En dicho caso de inversión de colorante, incluso
aunque sea una lectura positiva o haya ocurrido durante el séptimo
día del periodo de incubación, una lectura posterior mostraría que
el color original habría vuelto, indicando un cambio en el pH hacia
el valor de pH original. La lectura es por lo tanto no fiable porque
puede conducir a confusión y falta de certeza en algunos casos
conduciendo a que el crecimiento bacteriano se observe como
ausencia de crecimiento.
Se ha descubierto que un contaminante básico
lixivia o se difunde fuera de ciertos lotes de vial transparente 12
provocando un cambio en el pH a por encima de 6,0 con un cambio de
color resultante del colorante púrpura de bromcresol de nuevo a
púrpura durante el séptimo día del periodo de incubación, una
inversión de color. La inversión de color indicaría de forma falsa
que no ha habido crecimiento bacteriano. La inversión de color, por
supuesto, no se limita al colorante púrpura de bromcresol y el
ejemplo de colorante púrpura de bromcresol es ilustrativo
únicamente. El reconocimiento de las razones para la inversión de
color para el lixiviado o difusión de contaminantes básicos es un
reconocimiento de una causa no reconocida anteriormente de un
problema y es una parte de la presente invención.
Se ha desarrollado un sistema de doble tampón
fosfato/acetato para indicadores de esterilidad 10 que elimina el
problema de inversión de color mientras que retiene la velocidad y
sensibilidad de la determinación de la eficacia del proceso de
esterilización. Volviendo a la Figura 3, el medio de crecimiento 22
contiene una pequeña cantidad de un tampón fosfato. El tampón
estabiliza el pH un tanto contra pequeñas adiciones de iones que
cambian en pH de la solución lo que cambiaría el cambio de color del
indicador. El fosfato potásico, dibásico (K_{2}HPO_{4}) es un
tampón ejemplar. Un fosfato potásico dibásico mantiene el nivel de
pH de partida a aproximadamente 7,0, un pH que es adecuado para el
crecimiento bacteriano.
Durante el crecimiento bacteriano, los ácidos
metabólicos y subproductos actúan para reducir el pH. Cuando se
supera la capacidad tamponante del tampón fosfato en el medio de
crecimiento 22, el valor de pH cae. Si se usa el colorante púrpura
de bromcresol como colorante indicador, el colorante indicador
cambia de color a un nivel de pH de aproximadamente 5,0 o menor,
dando una indicación visible del crecimiento. El periodo de
incubación y lectura es 2-7 días. Si el cambio de
color se observa durante la incubación en cualquier momento antes
del final del segundo día, el resultado se registra como crecimiento
positivo del indicador biológico. Si el usuario es incapaz de leer
el indicador de esterilidad 10 después del segundo día, los
indicadores de esterilidad pueden mantenerse hasta 7 días hasta que
se leen.
Para evitar la inversión, un enfoque sería
asegurar que el nivel de contaminante en los viales transparentes
de polipropileno 12 se mantiene muy bajo. Sin embargo, la cantidad
de contaminantes básicos necesarios para cambiar el pH y provocar
la inversión en el presente sistema es pequeña debido a la pequeña
cantidad de tampón en el presente sistema. El sistema de un tampón
no es eficaz para tamponar el medio a un intervalo de pH menor. Si
un lote ocasional de viales de polipropileno contuviera un
contaminante básico que podría lixiviarse del polipropileno, la
inversión del colorante podría ocurrir y el lote de viales
contaminado podría desecharse.
Sin embargo, si se introduce contaminación
básica tal como lixiviado o difusión de iones desde el material del
vial transparente 12, el pH puede cambiar de nuevo hacia neutro. Si
el pH sube suficientemente, el colorante indicador comienza a
volver al color original provocando la confusión o incluso dando una
lectura negativa falsa. Aunque la cantidad de tampón en el medio de
cultivo 22 podría aumentarse para disminuir la posibilidad de esta
inversión de color, aumentar la cantidad de tampón disminuiría la
sensibilidad y velocidad del método.
De acuerdo con una realización del método de la
invención, añadir un segundo tampón acetato con un intervalo de
tamponación cerca del punto final del indicador actúa para
estabilizar el pH en la región del punto final. Si se usa púrpura
de bromcresol como colorante indicador, el punto final del sistema
está en el intervalo de pH 4-5 donde el colorante
es amarillo. En lugar de añadir más tampón que tiene un pK_{a} de
aproximadamente 7, que disminuiría la sensibilidad del sistema, se
añade al sistema un segundo tampón acetato con un pK_{a} de
4-5 cerca del punto final. El segundo tampón acetato
con pK_{a} de 4-5 tiende a mantener el pH
estacionario en el intervalo de pH 4-5. El segundo
tampón acetato que tiene un pK_{a} en el intervalo
4-5 estabiliza el sistema en el intervalo de pH
4-5 cuando el ácido bacteriano disminuye el pH a
este intervalo. Debido a que el segundo tampón estabiliza el
sistema en el intervalo de pH 4-5, los contaminantes
básicos que lixivian o se difunden hacia el sistema se neutralizan
por el segundo tampón acetato, y el pH permanece en el intervalo de
pH 4-5. Debido a que solo se usa una pequeña
cantidad del primer tampón fosfato en el intervalo de pH 7, el
sistema retiene la velocidad y sensibilidad de la lectura del
indicador. La mayor cantidad de tampón que tiene un pK_{a} cerca
del pH del punto final estabiliza el sistema después de que se
alcance el punto final, minimizando la posibilidad de inversión de
colorante, sin disminuir la sensibilidad del sistema.
Las ventajas del sistema de doble tampón son
que:
- 1.
- conserva la velocidad y sensibilidad de la lectura mientras que
- 2.
- aumenta la estabilidad y fiabilidad de la lectura.
El sistema de doble tampón fosfato/acetato
elimina de esta manera la relación entre sensibilidad y fiabilidad
como en el sistema de tampón único.
Si se usa púrpura de bromcresol como colorante
indicador, el colorante cambia de color de púrpura a amarillo en el
intervalo de pH de aproximadamente 6,8 a aproximadamente 5,2. Un
sistema de doble tampón adecuado para el sistema con púrpura de
bromcresol incluye una cantidad relativamente pequeña de tampón con
un pK_{a} en el intervalo de aproximadamente 7 y una cantidad
relativamente grande de tampón con un pK_{a} en el intervalo de
aproximadamente 4-5.
La mayor cantidad de tampón con un pK_{a} en
el intervalo de 4-5 no afecta a la sensibilidad del
sistema porque el cambio de color que indica actividad bacteriana
ocurre en el intervalo de pH de aproximadamente
5-6, fuera del intervalo de tamponación del tampón
con un pK_{a} de 4-5. La pequeña cantidad de
tampón con un pK_{a} de aproximadamente 7 protege por lo tanto
contra falsos positivos mientras que la mayor cantidad de tampón
con un pK_{a} de aproximadamente 4-5 protege
contra cambios en el pH debido a lixiviado o difusión de la base
eliminando la inversión de color del colorante.
Hay una gran variedad de sistemas de doble
tampón y colorantes que son adecuados para el indicador de
esterilidad 10 que funcionan en el intervalo de pH de 7 en el
comienzo y de aproximadamente 4-5 al final. El
tampón fosfato (KH_{2}PO_{4} y K_{2}HPO_{4}) con un
pK_{a} de 7,0 es un tampón adecuado para controlar el pH en el
comienzo del periodo de incubación a un pH de aproximadamente 7,0.
El pH de aproximadamente 7 es adecuado para el crecimiento
bacteriano. El tampón fosfato está preferible a una concentración de
aproximadamente 2,0 gramos/litro (aproximadamente 1 mmolar).
La Tabla 1 muestra un sistema de tampón acetato
adecuado con un pK_{a} en el intervalo de 4-5. El
sistema de tampón acetato con un pK_{a} en el intervalo
4-5 es adecuado para evitar la inversión de
colorante.
Como se observa en la Tabla 1, el tampón que
tiene un pK_{a} en el intervalo 4-5 está presente
en una concentración de aproximadamente 0,01-0,1 M,
comparado con aproximadamente 1 milimolar para el tampón con un
pK_{a} de aproximadamente 7. El tampón con un pK_{a} de 7 está
presente por lo tanto en una concentración de aproximadamente 1/10
a 1/100 de la concentración del tampón con un pK_{a} en el
intervalo 4-5. Usando una pequeña cantidad de
tampón con un pK_{a} de 7, se retiene la sensibilidad del
método.
La Tabla 2 muestra una serie de colorantes que
son adecuados para usar en el sistema mostrado en la Figura 3.
Todos los colorantes tienen un intervalo de pH de aproximadamente
4-7.
Las realizaciones del método de la presente
invención para minimizar o eliminar la inversión del colorante
usando un sistema de doble tampón no se limitan a indicadores
biológicos autocontenidos como se muestra en la Figura 1. Por
ejemplo, las realizaciones del método son aplicables a un amplio
intervalo de indicadores biológicos. En particular, el sistema de
doble tampón fosfato/acetato puede usarse con soportes de indicador
biológico convencionales. Puede aplicarse también a soportes de
indicador biológico usados para desinfectantes o esterilantes
líquidos tales como glutaraldehído, ácido perfórmico, ácido
peracético, peróxido de hidrógeno, formaldehído,
orto-ftalaldehído o sales hipoclorito tales como
hipoclorito sódico. Cuando el método se aplica a estos indicadores
biológicos, el soporte después del tratamiento con líquido, gas o
vapor desinfectante o esterilante se pone en un medio de cultivo 22
que contiene un sistema de doble tampón. El sistema de doble tampón
de acuerdo con las realizaciones del método de la presente invención
eliminará o al menos minimizará la posibilidad de inversión de
colorante cuando se incuban tiras de indicador biológico
convencionales en el medio de cultivo que contiene el sistema de
doble tampón de acuerdo con las realizaciones de la presente
invención.
El sistema de doble tampón puede aplicarse
también a una amplia variedad de indicadores biológicos
autocontenidos (SCBI) tales como el SCBI de las Figuras 1 y 2 así
como una amplia variedad de otros SCBI. En realizaciones del método
de la presente invención, el medio de cultivo convencional 22 que se
utiliza en muchos SCBI se aumenta o complementa con un sistema de
doble tampón de acuerdo con las realizaciones de la presente
invención.
Un medio de cultivo 22 de acuerdo con las
realizaciones de la invención contiene un caldo de nutriente, el
sistema de doble tampón y un colorante sensible a pH. En algunas
realizaciones, el sistema de doble tampón y/o el colorante sensible
a pH se separan del caldo de nutriente. El caldo de nutriente, el
sistema de doble tampón, y el colorante sensible a pH se ponen en
contacto entre sí cuando se abre la ampolla con medio 20.
Aunque el sistema de doble tampón se ha descrito
con respecto a un sistema de esterilización de peróxido de
hidrógeno/plasma, el sistema de doble tampón puede aplicarse a
cualquier sistema donde ocurra un cambio de pH. En particular, el
sistema de doble tampón puede aplicarse a indicadores para la
esterilización con óxido de etileno, calor, vapor, peróxido de
hidrógeno, plasma, una combinación de peróxido de hidrógeno y
plasma, glutaraldehído, ácido peracético, ácido perfórmico,
formaldehído, orto-ftaldehído, sales hipoclorito
tales como hipoclorito sódico, ozono, dióxido de cloro o diversos
germicidas.
Claims (21)
1. Un método para determinar la eficacia de un
proceso de desinfección o esterilización, comprendiendo dicho
método;
(a) proporcionar un soporte con microorganismos
sobre el soporte;
(b) exponer dicho soporte al proceso de
desinfección o esterilización;
(c) incubar dicho soporte en un medio de
crecimiento que comprende tampón fosfato que tiene un primer
pK_{a} de 7, tampón acetato que tiene un segundo pK_{a} de
4-5 y colorante que cambia de color con un cambio en
el pH del primer intervalo de pH a un segundo intervalo de pH, y en
el que dicha incubación es después de dicha exposición; y
(d) determinar si dichos microorganismos crecen
en dicho medio de crecimiento durante dicha incubación, en el que
el crecimiento de dichos microorganismos y dicho medio de
crecimiento genera ácido, cambiando de esta manera el pH en dicho
medio de crecimiento de un primer pH dentro de dicho primer
intervalo de pH a un segundo pH dentro de dicho segundo intervalo
de pH, en el que dicho primer pK_{a} y dicho segundo pK_{a}
están dentro de dicho primer intervalo de pH y dicho de segundo
intervalo de pH, respectivamente.
2. El método de la reivindicación 1, en el que
dicha determinación de si dichos microorganismos han crecido
comprende determinar si el pH cambia en dicho medio de crecimiento
de dicho primer pH a dicho segundo pH.
3. El método de la reivindicación 1 o la
reivindicación 2, en el que dicha determinación de si dichos
microorganismos han crecido comprende determinar si el colorante
cambia de color de dicho primer color a dicho segundo color.
4. El método de cualquiera de las
reivindicaciones anteriores en el que dicho sistema comprende una
menor concentración de tampón que tiene un pK_{a} en dicho primer
intervalo de pH que dicho tampón que tiene un pK_{a} en dicho
segundo intervalo de pH.
5. El método de cualquiera de las
reivindicaciones anteriores en el que dicho medio de crecimiento
está contenido en un recinto que puede abrirse y en el que incubar
dicho soporte en un medio de crecimiento comprende adicionalmente
abrir el recinto y sumergir dicho soporte en dicho medio de
crecimiento.
6. El método de cualquiera de las
reivindicaciones anteriores en el que dicho soporte y dicho medio de
crecimiento se localizan en el un recipiente cubierto con una
barrera permeable a gas o vapor pero impermeable a microorganismos
y en el que exponer dicho soporte comprende adicionalmente difundir
un gas o vapor germicida desde el exterior de dicho recipiente a
dicho recipiente a través de dicha barrera.
7. El método de cualquiera de las
reivindicaciones anteriores en el que dicho microorganismo comprende
un microorganismo indicador biológico para dicho proceso de
desinfección o esterilización.
8. El método de cualquiera de las
reivindicaciones anteriores en el que dicho proceso de desinfección
o esterilización comprende un proceso con un agente desinfectante o
esterilizante seleccionado entre el grupo compuesto por calor,
vapor, óxido de etileno, peróxido de hidrógeno, ozono, dióxido de
cloro, ácido peracético, ácido perfórmico, formaldehído,
glutaraldehído, orto-ftalaldehído y sales de
hipoclorito.
9. Un indicador biológico autocontenido que
comprende;
(a) un soporte con microorganismos viables sobre
el soporte;
(b) un recipiente que contiene dicho soporte en
su interior, en el que al menos una parte de dicho recipiente es
transparente y en el que dicho recipiente comprende una abertura que
está cubierta con una barrera permeable a gas o vapor pero
impermeable a microorganismos;
(c) al menos un reciento que puede abrirse
dentro de dicho recipiente, en el que dicho recinto contiene un
medio de cultivo que es capaz de soportar el crecimiento de los
microorganismos viables
(d) un colorante que cambia de color con un
cambio en el pH de un primer intervalo de pH a un segundo intervalo
de pH y
(e) un sistema de doble tampón en el que dicho
sistema de doble tampón comprende un tampón fosfato que tiene un
primer pK_{a} de 7 y un tampón acetato que tiene un segundo
pK_{a} de 4-5 y en el que dicho primer pK_{a} y
dicho segundo pK_{a} están dentro de dicho primer intervalo de pH
y dicho segundo intervalo de pH, respectivamente.
10. El indicador biológico autocontenido de la
reivindicación 9 en el que dicho soporte se selecciona entre el
grupo compuesto por un sustrato poroso, un sustrato no poroso, un
sustrato absorbente y un sustrato no absorbente.
11. El indicador biológico autocontenido de la
reivindicación 9 o la reivindicación 10 en el que dicha barrera
permeable a gas o vapor pero impermeable a microorganismos es una
poliolefina no tejida.
12. El indicador biológico autocontenido de una
cualquiera de las reivindicaciones 9 a 11 en el que dicho
microorganismo viable comprende un microorganismo indicador
biológico para un proceso de desinfección o esterilización.
13. El indicador biológico autocontenido de una
cualquiera de las reivindicaciones 9 a 12, en el que dicho
recipiente que puede abrirse comprende una ampolla de vidrio que
puede romperse.
14. El indicador biológico autocontenido de una
cualquiera de las reivindicaciones 9 a 13, en el que dicho
colorante comprende púrpura de bromcresol.
15. El indicador biológico autocontenido de una
cualquiera de las reivindicaciones 9 a 14 en el que el tampón
acetato es acetato sódico.
16. El indicador biológico autocontenido de una
cualquiera de las reivindicaciones 9 a 15 en el que dicho sistema
comprende una concentración menor de tampón que tiene un pK_{a} en
dicho primer intervalo de pH que dicho tampón que tiene un pK_{a}
en dicho segundo intervalo de pH.
17. El indicador biológico autocontenido de una
cualquiera de las reivindicaciones 9 a 16 que comprende
adicionalmente una tapa con al menos una abertura por encima de
dicha barrera con lo que el gas o vapor pueden difundirse hacia
dicho recipiente a través de dicho orificio y dicha barrera.
18. El indicador biológico autocontenido de una
cualquiera de las reivindicaciones 8 a 15 que comprende
adicionalmente un indicador químico para indicar la exposición de
dicho indicador biológico autocontenido a un proceso de
desinfección o esterilización.
19. Un medio de cultivo que es capaz de soportar
el crecimiento de microorganismos viables que comprende:
(a) un caldo de nutriente;
(b) un colorante que cambia de color con un
cambio de pH de un primer intervalo de pH a un segundo intervalo de
pH; y
(c) un sistema de doble tampón en el que dicho
sistema de doble tampón comprende un tampón fosfato que tiene un
primer pK_{a} de 7 y un tampón acetato que tiene un segundo
pK_{a} de 4-5 en el que dicho primer pK_{a} y
dicho segundo pK_{a} están dentro de dicho primer intervalo de pH
y dicho segundo intervalo de pH, respectivamente.
20. El medio de cultivo de la reivindicación 19,
en el que dicho colorante comprende púrpura de bromcresol.
21. El medio de cultivo de la reivindicación 19
o la reivindicación 20, en el que el tampón acetato es acetato
sódico.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US699728 | 2000-10-27 | ||
| US09/699,728 US6436659B1 (en) | 2000-10-27 | 2000-10-27 | Biological indicator for sterilization processes with double buffer system |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2305037T3 true ES2305037T3 (es) | 2008-11-01 |
Family
ID=24810632
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES01309111T Expired - Lifetime ES2305037T3 (es) | 2000-10-27 | 2001-10-26 | Indicador biologico para procesos de esterilizacion con sistema de doble tampon. |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US6436659B1 (es) |
| EP (1) | EP1201255B1 (es) |
| JP (1) | JP4055929B2 (es) |
| KR (1) | KR100880902B1 (es) |
| AU (1) | AU784665B2 (es) |
| CA (1) | CA2359715C (es) |
| DE (1) | DE60134375D1 (es) |
| ES (1) | ES2305037T3 (es) |
| TW (1) | TWI293886B (es) |
Families Citing this family (53)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6495100B1 (en) * | 1996-04-04 | 2002-12-17 | Ethicon, Inc. | Method for sterilizing devices in a container |
| US7300637B2 (en) * | 2002-09-30 | 2007-11-27 | Ethicon, Inc. | Sterilization container kit |
| US20050042130A1 (en) * | 2003-08-22 | 2005-02-24 | Szu-Min Lin | Mist sterilization system |
| GB0320802D0 (en) * | 2003-09-05 | 2003-10-08 | Mcgill George | Dry rot detector or sensor |
| US20050136086A1 (en) * | 2003-12-19 | 2005-06-23 | Rafael Herruzo | Efficacy enhancers for germicides |
| US20050238732A1 (en) * | 2003-12-19 | 2005-10-27 | Kaitao Lu | Carbonated germicide with pressure control |
| US20050136118A1 (en) * | 2003-12-19 | 2005-06-23 | Wu Su-Syin S. | Distribution and preparation of germicidal compositions |
| US7476767B2 (en) | 2004-01-30 | 2009-01-13 | Ethicon, Inc. | Alpha-hydroxy sulfonate aldehydes, germicidal compositions containing the alpha-hydroxy sulfonate aldehydes, or mixtures of alpha-hydroxy sulfonate aldehydes and phthalaldehydes, and methods of using the compounds or compositions for disinfection or sterilization |
| US20050171215A1 (en) * | 2004-01-30 | 2005-08-04 | Ethicon, Inc. | Germicidal compositions containing halogenated phthalaldehyes, and methods of using such compositions for disinfection or sterilization |
| US6891069B1 (en) | 2004-01-30 | 2005-05-10 | Ethicon, Inc. | Synthesis of 4-substituted phthalaldehyde |
| US20050171216A1 (en) * | 2004-01-30 | 2005-08-04 | Zhu Peter C. | Germicidal compositions containing phthalaldehyde mixtures and methods of using such compositions for disinfection or sterilization |
| US7390837B2 (en) * | 2004-01-30 | 2008-06-24 | Ethicon, Inc. | Germicidal compositions containing phenylmalonaldehyde-type compounds, or mixtures of phenylmalonaldehyde-type compounds and phthalaldehydes, and methods of using such compositions for disinfection or sterilization |
| CA2563347C (en) | 2004-04-20 | 2014-01-14 | Genzyme Corporation | Surgical mesh-like implant |
| US20060263258A1 (en) * | 2005-02-10 | 2006-11-23 | Matthew Harris | Automated biological indicator incubator |
| US20060228801A1 (en) * | 2005-03-30 | 2006-10-12 | Ben Fryer | Integator system and method for rapidly determining effectiveness of a germicidal treatment |
| AU2006238895B2 (en) | 2005-04-25 | 2011-08-11 | Sgm Biotech, Inc. | Evaluating bacterial lethality of containerized food production |
| US20060293205A1 (en) * | 2005-06-27 | 2006-12-28 | Jessica Chung | Cleaning substrate with a visual cue |
| US7291649B2 (en) * | 2005-06-29 | 2007-11-06 | Ethicon, Inc. | Forming germicidal aromatic dialdehydes with acetals |
| US7642067B2 (en) * | 2005-06-30 | 2010-01-05 | Ethicon, Inc. | Device and method for rapidly determining the effectiveness of sterilization or disinfection processes |
| EP1941053A2 (en) * | 2005-10-05 | 2008-07-09 | SGM Biotech, Inc. | Methods and apparatus for automated spore-culturing and monitoring |
| US8895239B2 (en) | 2006-09-20 | 2014-11-25 | American Sterilizer Company | Genetically engineered biological indicator |
| US9134285B2 (en) | 2006-11-30 | 2015-09-15 | Sensor International, Llc | Apparatus with timed color change indication |
| US20080129960A1 (en) | 2006-11-30 | 2008-06-05 | Gregory Lee Heacock | Disposable ophthalmic/medical apparatus with timed color change indication |
| US8012761B2 (en) * | 2006-12-14 | 2011-09-06 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Detection of formaldehyde in urine samples |
| FR2910328A1 (fr) * | 2006-12-22 | 2008-06-27 | Satelec Soc | Indicateur de sterilisation. |
| US20100178662A1 (en) * | 2007-03-20 | 2010-07-15 | David Urman | Non-invasive human-health-measurement system and method |
| WO2010054095A1 (en) * | 2008-11-06 | 2010-05-14 | 3M Innovative Properties Company | Process challenge device and method |
| US20120101063A1 (en) * | 2009-09-09 | 2012-04-26 | Howard Martin | Biocidal aldehyde composition |
| CA2816459A1 (en) * | 2010-11-01 | 2012-05-10 | 3M Innovative Properties Company | Method of detecting a biological activity |
| CN105675800A (zh) * | 2010-12-22 | 2016-06-15 | 3M创新有限公司 | 包括中和剂的灭菌指示器以及方法 |
| US8663998B2 (en) | 2011-12-09 | 2014-03-04 | Gregory L. Heacock | Color changeable dyes for indicating exposure, methods of making and using such dyes, and apparatuses incorporating such dyes |
| WO2013177622A1 (en) * | 2012-05-31 | 2013-12-05 | Australian Biotechnologies Pty. Limited | Method validation unit |
| US20150335777A1 (en) * | 2013-01-04 | 2015-11-26 | Noxilizer, Inc. | Process challenge device for gas sterilization |
| BR112015020576A2 (pt) * | 2013-02-26 | 2017-07-18 | 3M Innovative Properties Co | indicador biológico para monitoramento de um processo de esterilização em baixa temperatura |
| US9746421B2 (en) * | 2013-09-26 | 2017-08-29 | Sensor International, Llc | Apparatuses, indicators, methods and kits with timed color change indication |
| KR101406387B1 (ko) | 2014-03-13 | 2014-06-13 | 고려대학교 산학협력단 | 기체의 항균력 측정장치 및 기체의 항균력 측정방법 |
| US11467422B2 (en) | 2014-05-30 | 2022-10-11 | Sensor International, Llc | Carbon dioxide sensing color changeable dyes for indicating exposure, methods of making and using such dyes, and apparatuses incorporating such dye |
| WO2017106758A1 (en) | 2015-12-17 | 2017-06-22 | Mesa Laboratories, Inc. | Self-contained biological indicator |
| US10907126B2 (en) | 2016-03-01 | 2021-02-02 | Asp Global Manufacturing Gmbh | Self-contained biological indicator |
| CN106267277B (zh) * | 2016-09-28 | 2022-09-09 | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 | 用于监测管腔类器械灭菌效果的生物指示剂检测装置 |
| US11242505B2 (en) | 2017-01-03 | 2022-02-08 | Asp Global Manufacturing Gmbh | Self-contained biological indicator |
| US11053534B2 (en) | 2017-06-30 | 2021-07-06 | Asp Global Manufacturing Gmbh | Systems and methods for confirming activation of biological indicators |
| US10823715B2 (en) | 2017-07-19 | 2020-11-03 | American Sterilizer Company | Chemical indicator for monitoring hydrogen peroxide sterilization and disinfection processes |
| US11248250B2 (en) | 2017-12-01 | 2022-02-15 | Asp Global Manufacturing Gmb | Self-contained biological indicator |
| US10759976B2 (en) | 2018-03-23 | 2020-09-01 | Sensor International, Llc | Color changeable adhesives and methods of making such adhesives |
| US11147897B2 (en) | 2018-04-06 | 2021-10-19 | American Sterilizer Company | Sterilization process challenge device |
| US11346786B2 (en) | 2018-10-09 | 2022-05-31 | Sensor International, Llc | High pressure sensitive color changeable indicators and methods of making such indicators |
| KR102235806B1 (ko) * | 2018-12-31 | 2021-04-06 | 주식회사 엔셀 | 과초산 분해 방법 및 이를 이용한 미생물의 배양방법 |
| CN109652293A (zh) * | 2019-01-29 | 2019-04-19 | 衡水诺盾生物科技有限公司 | 一种快速生物指示剂 |
| US20230110772A1 (en) * | 2020-03-17 | 2023-04-13 | 3M Innovative Properties Company | Immobilized pH Indicator for Biological Indicator Growth Indication |
| EP4182473A1 (en) * | 2020-07-20 | 2023-05-24 | Stratix Labs Corporation | Devices and methods for inoculating a target |
| EP4243885A1 (en) | 2020-11-10 | 2023-09-20 | Advanced Sterilization Products, Inc. | Ampoule breaker for a biological indicator |
| US11603551B2 (en) | 2020-12-02 | 2023-03-14 | Steritec Products Mfg. Co., Inc. | Biological indicators, and systems and methods for determining efficacy of sterilization |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4291122A (en) | 1980-08-14 | 1981-09-22 | American Sterilizer Company | Biological indicator for sterilization processes |
| JPS62104594A (ja) * | 1985-10-31 | 1987-05-15 | Terumo Corp | クエン酸塩利用能検査用培地組成物 |
| US4743537A (en) | 1986-01-21 | 1988-05-10 | Castle Company | Biological indicator for sterilization processes |
| US4914034A (en) | 1987-05-15 | 1990-04-03 | American Sterilizer Company | Disposable biological indicator test pack for monitoring steam and ethylene oxide sterilization cycles |
| US5968807A (en) | 1987-06-29 | 1999-10-19 | Getinge/Castle, Inc. | Culture media containing glycerol that are pH and color stable when heat sterilized |
| US5073488A (en) | 1988-11-29 | 1991-12-17 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Rapid method for determining efficacy of a sterilization cycle and rapid read-out biological indicator |
| AU687819B2 (en) | 1993-08-09 | 1998-03-05 | Johnson & Johnson Medical, Inc. | Self-contained biological indicator |
| US5601998A (en) | 1994-08-18 | 1997-02-11 | Minnesota Mining & Mfg | Culture medium and device for detection and enumeration of enterobacteriaceae |
| US5866356A (en) * | 1997-10-20 | 1999-02-02 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Protective housing for biological indicator for testing the effectiveness of a sterilization procedure |
| US5942438A (en) * | 1997-11-07 | 1999-08-24 | Johnson & Johnson Medical, Inc. | Chemical indicator for oxidation-type sterilization processes using bleachable dyes |
-
2000
- 2000-10-27 US US09/699,728 patent/US6436659B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-10-23 CA CA2359715A patent/CA2359715C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-10-24 AU AU83605/01A patent/AU784665B2/en not_active Ceased
- 2001-10-26 JP JP2001329578A patent/JP4055929B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-10-26 DE DE60134375T patent/DE60134375D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-26 ES ES01309111T patent/ES2305037T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-26 EP EP01309111A patent/EP1201255B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-26 KR KR1020010066348A patent/KR100880902B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2001-10-26 TW TW090126470A patent/TWI293886B/zh not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-02-27 US US10/090,057 patent/US6458554B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-27 US US10/090,039 patent/US20020150962A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2359715C (en) | 2011-04-26 |
| AU8360501A (en) | 2002-05-02 |
| US20020150962A1 (en) | 2002-10-17 |
| JP4055929B2 (ja) | 2008-03-05 |
| CA2359715A1 (en) | 2002-04-27 |
| EP1201255A3 (en) | 2004-01-14 |
| KR100880902B1 (ko) | 2009-02-03 |
| DE60134375D1 (de) | 2008-07-24 |
| EP1201255A2 (en) | 2002-05-02 |
| JP2002228590A (ja) | 2002-08-14 |
| KR20020033080A (ko) | 2002-05-04 |
| EP1201255B1 (en) | 2008-06-11 |
| US6458554B1 (en) | 2002-10-01 |
| TWI293886B (en) | 2008-03-01 |
| US20020137123A1 (en) | 2002-09-26 |
| US6436659B1 (en) | 2002-08-20 |
| AU784665B2 (en) | 2006-05-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2305037T3 (es) | Indicador biologico para procesos de esterilizacion con sistema de doble tampon. | |
| EP0638650B1 (en) | Self-contained biological indicator | |
| US6193931B1 (en) | Container monitoring system | |
| US5801010A (en) | Self-contained biological indicator for non traditional sterilization methods | |
| US4528268A (en) | Apparatus and method for testing the sufficiency of sterilization | |
| CN105073146B (zh) | 用于监测低温灭菌过程的生物指示器 | |
| US5872004A (en) | Test pack for assessing the efficiency of a sterilization process | |
| ES2424331T3 (es) | Artículos biológicos y métodos para monitorizar procesos de esterilización | |
| JPS62228147A (ja) | 殺菌工程用生物学的インジケ−タ | |
| BR112021012636A2 (pt) | Indicator de tratamento, um método de produção do mesmo e um método para uso do mesmo | |
| TW201920940A (zh) | 用於確認生物指示劑之啟動的系統及方法 | |
| US20240033385A1 (en) | Liquid-Chemical Sterilization System With Biological Indicator | |
| AU2003271354A1 (en) | Biological indicator for sterilization processes with double buffer system | |
| Barnes et al. | Action of physical and chemical agents on microorganisms | |
| Mazzola et al. | Choice of sterilizing/disinfecting agent: determination of the Decimal ReductionTime (D-Value) | |
| Ames et al. | SELF-STUDY SERIES |