ES2300783T3 - Procedimiento de extraccion vegetal y extracto. - Google Patents

Abstract

Procedimiento para preparar un extracto vegetal mediante las etapas siguientes: (A) tratar un material vegetal sólido con un agente de extracción, para obtener un líquido de extracción que contiene dicho extracto disuelto en dicho agente de extracción; (B) separar dicho líquido de extracción de dicho material vegetal sólido; y (C) concentrar dicho líquido de extracción eliminando parcialmente por lo menos dicho agente de extracción, para obtener un extracto concentrado; en el que dicha etapa (C) de concentración de dicho líquido de extracción se lleva a cabo en presencia de una cantidad efectiva de un mediador de la solución farmacológicamente aceptable y fisiológicamente inerte, de modo que evite substancialmente la pérdida de constituyentes de dicho extracto líquido después de concentrarlo mediante una eliminación, por lo menos parcial, de dicho agente de extracción, siendo dicho mediador de la solución la polivinilpirrolidona.

Description

Procedimiento de extracción vegetal y extracto.

La presente invención se refiere generalmente a la técnica para preparar extractos a partir de plantas medicinales, y, específicamente, a la preparación de extractos a partir de plantas medicinales que contengan una parte substancial, por lo menos, de glicósidos triterpénicos y/o saponinas triterpénicas como principios activos.

Ejemplos importantes de este tipo de plantas medicinales son las especies de Cimicifuga, por ejemplo Cimicifuga racemosa (denominada asimismo Actaea racemosa L; cohosh negro; cohosh bugbane; snakeroot; bugbane) ya que se sabe que los extractos de varias partes de esta especie vegetal son efectivos como analgésicos para el tratamiento del dolor en los músculos y articulaciones, así como para tratar enfermedades neurálgicas, artritis reumática, malestar menstrual, y dolores post-natales.

Por ejemplo, dichos extractos se han dado a conocer en el documento WO 99/47149 como un medicamento de tipo estrógeno órgano-selectivo para el tratamiento selectivo y/o la profilaxis de enfermedades cardiovasculares y malestar climatérico, Sin embargo, no se han observado efectos uterotrópicos.

Además, la patente US nº 6.267.994 da a conocer la utilización de un extracto de Cimicifuga racemosa particularmente para la terapia antitumoral en las composiciones que no muestran la toxicidad de altas dosis de compuestos anti-estrogénicos.

Finalmente, el documento WO 01/05415 da a conocer una composición farmacéutica que contiene componentes del extracto de Cimicifuga racemosa o sus derivados que muestran un efecto de tipo estrógeno.

Los procedimientos convencionales para preparar dichos extractos se basan en el tratamiento del material vegetal con un agente de extracción alcanólica acuosa, de forma que se obtenga un material en bruto o extracto primario, el cual después de un tratamiento opcional para la eliminación de granulados, por ejemplo, mediante sedimentación o filtración, contiene el agente de extracción y los constituyentes vegetales que son solubles en el agente de extracción.

Típicamente, el extracto primario se concentra entonces mediante evaporación parcial del agente de extracción, de forma que se eliminen sus componentes más volátiles, generalmente los constituyentes alcanólicos más algo de agua, y formar lo que se denomina un extracto concentrado, que contiene típicamente entre el 5 y el 50% en volumen, del disolvente residual, es decir, agua. Después de una posterior eliminación del disolvente, se obtiene un material sólido, pastoso, o líquido que está substancialmente libre del disolvente utilizado para la extracción del material vegetal. Este producto (también denominado "extracto" puede utilizarse entonces como tal o ser procesado para dar lugar a formas específicas de aplicación, por ejemplo, píldoras, lociones, soluciones, polvos, etc., añadiendo opcionalmente cualquier adyuvante, aditivo, componente de revestimiento, y similares, necesario para el producto medicinal
final.

La investigación por el solicitante que conduce a la presente invención ha mostrado que los procedimientos de producción convencional de extracción de plantas medicinales que contienen una parte substancial, por lo menos, de glicósidos triterpénicos y/o saponinas triterpénicas, tienden a sufrir una pérdida de principios activos y/o producir un producto no homogéneo, debiéndose esto a una precipitación no intencionada después de la eliminación del disolvente. Las especies de Cimicifuga constituyen un importante ejemplo de dichas plantas medicinales, pero no el único.

Los principios activos de Cimicifuga racemosa incluyen un glicósido triterpénico de tipo cicloartano del cual se conocen, por lo menos, 20 especies. Principios activos principales son la acteína, la 23-epi-26-desoxiacteína, la 27-desoxiactina y el cimiracemósido A. La acteína es un xilósido del acetil acteol con una cadena lateral 16,23:23,26:24,25-triepoxi. La 27-Desoxiactina se utiliza como un estándar para la determinación cuantitativa de los compuestos que se acaban de mencionar. Otro grupo conocido de principios activos son ácidos aromáticos tales como el ácido ferúlico, el ácido hesperatínico y el ácido acil cafeínico. Además de los extractos etanólicos acuosos de Cimicifuga racemosa se han aislado los siguientes ésteres del ácido hidroxicinámico: ácido fucinólico y los ácidos cimicifugaicos A, B, E y F. Asimismo, se ha informado de flavonoides, biochanina A, formononetina y camforol. Otros ingredientes son taninos, resinas y ácidos grasos (ácido oleico, ácido linólico, ácido linolénico y ácido palmítico).

Con tal gran número de constituyentes se entiende fácilmente que las condiciones de extracción tendrán un impacto substancial sobre la composición de los extractos resultantes y que no se desea ningún cambio no intencionado de la composición proporcional.

De acuerdo con esto, constituye un primer objeto de la presente invención proporcionar un nuevo procedimiento de extracción de dichas plantas medicinales que contienen una parte substancial, por lo menos, de glicósidos triterpénicos y/o saponinas triterpénicas, procedimiento que puede evitar dicha pérdida de principios activos después de la eliminación del disolvente, de forma que se produzcan nuevos extractos con una mejora en su composición.

Otro objeto de la invención es un extracto de una especie de Cimicifuga tal como Cimicifuga racemosa, que tiene una composición que difiere de los extractos de la técnica anterior.

Otro objeto de la invención es proporcionar medicamentos que comprenden dichos extractos, así como (medicamentos) para tratamientos médicos en pacientes animales incluyendo los humanos que utilicen dichos extractos.

Los documentos WO 03/000074 y EP 1 407 679 dan a conocer un procedimiento para preparar un extracto vegetal líquido, por ejemplo, de Hydrangea dulcis folium, concentrando un extracto líquido en presencia de un polvo vegetal realizado, por ejemplo, a partir de Hydrangea dulcis folium.

El documento WO 03/037096 da a conocer la preparación de extractos de materiales botánicos en la que, por lo menos, antes de la concentración, se añaden un ácido y un antioxidante, por ejemplo, ácido cítrico y ácido ascórbico.

Según el documento WO 02/67962 en la preparación y concentración del extracto de Anemone raddeana, se añade gelatina.

El documento WO 02/30436 da a conocer la extracción de Phyllanthus y la concentración del extracto después de añadir goma de tragacanto y maltodextrina.

La patente EP 0 324 197 sugiere utilizar, para preparar el extracto de ginko, la concentración en presencia de kieselguhr.

De acuerdo con esto, la técnica puede resumirse en que cuando se preparan extractos vegetales, se han sugerido y utilizado varios aditivos, solubles o insolubles, en el líquido de extracción, para mejorar el procedimiento de concentración.

Se ha encontrado, según la invención, que nuevos extractos, que incluyen pero no se limitan a los que pueden obtenerse a partir de varias partes de las especies vegetales de Cimicifuga, y que difieren en composición de los extractos de la técnica anterior, pueden obtenerse si se evita dicha precipitación no deseada, y que dicha prevención (de la precipitación) puede realizarse si la eliminación del disolvente extractor se lleva a cabo en presencia de polivinilpirrolidona (PVP) como mediador de la solución.

Ahora, según una primera forma de realización general, la invención proporciona un procedimiento para preparar un extracto vegetal, a través de las etapas siguientes:

(A)

tratar un material (por ejemplo, hojas, raíces, tallos, ramas, semillas) de una planta (con aplicación) médica, preferentemente una especie de Cimicifuga con un agente de extracción, para obtener un extracto primario;

(B)

separar dicho extracto primario de dicho material sólido; y

(C)

concentrar dicho extracto primario eliminando una parte, por lo menos, de dicho agente de extracción, para obtener un concentrado esencialmente homogéneo;

en el que dicha etapa (C) de concentración de dicho extracto primario se lleva a cabo en presencia de una cantidad efectiva de PVP como un mediador de la solución farmacológicamente aceptable y fisiológicamente inerte, de modo que evite substancialmente la pérdida de constituyentes de dicho extracto primario.

Según una forma de realización preferida del procedimiento de la invención, el producto obtenido en la etapa (C) se somete a un tratamiento ulterior para eliminar substancialmente todo el agente de extracción, preferentemente mediante secado por pulverización, para obtener un producto esencialmente seco.

Las plantas (de utilización) médica distintas que las especies de Cimicifuga para ser utilizadas en la preparación de extractos según el procedimiento de la invención, incluyen Hedera, Liquorice, Symphytum, Centella asoatica, Ginseng y Solidago. Generalmente, todos los extractos de plantas (de utilización) médica pueden beneficiarse de la enseñanza de la invención de añadir un mediador de la solución antes de la concentración, siempre que la PVP no forme un precipitado con constituyentes del extracto, por ejemplo, ácidos tánicos.

Generalmente, el término "extracto" tal como se utiliza en la presente memoria sin una especificación ulterior, tiene la intención de referirse generalmente a cualquier forma del producto de extracción menos el agente de extracción y a pesar de la forma física (es decir, viscosa, pastosa o sólida).

Las PVP, como mediadores de la solución para utilizar en la invención, son substancias macromoleculares o polímeros que son conocidas porque pueden utilizarse en medicamentos y ser fisiológicamente inertes, así como solubles en el agente de extracción y en agua. El término "soluble" tal como se utiliza en la presente invención, no indica necesariamente una solubilidad completa, sino asimismo una solubilidad parcial en el agente de extracción, como se evidencia generalmente por el hecho de que la PVP puede disolverse en el agente de extracción a temperaturas entre 0 y 100ºC a presión ambiente, de tal manera que se forme una solución "normal" (clara) o "coloidal" (turbia), también denominada dispersión coloidal o molecular. Preferentemente, la PVP podrá formar una solución acuosa, que, a temperatura ambiente, contiene por lo menos, aproximadamente el 30% en peso de PVP.

\newpage

El peso molecular de dicha PVP está comprendido, generalmente, entre aproximadamente 1.000 y aproximadamente 1.300.000 Dalton. Para muchos propósitos de la invención, se prefiere un peso molecular mínimo de una PVP apropiada de aproximadamente 5.000 Dalton.

Las PVP son admitidas bajo las disposiciones medicamentosas y alimentarias para utilización farmacéutica o alimentaria y están comercialmente disponibles a partir de varios orígenes.

Tal como se ha mostrado en muchos estudios, cuando la PVP se ingiere por parte del hombre no tiene efectos negativos y no es digerido o metabolizado. Cuando se toma oralmente, su porción predominante se excreta a las 11 horas, no habiéndose observado enriquecimiento de PVP.

La adición de una PVP, no sólo previene la aglomeración y subsiguiente precipitación de los componentes menos solubles del extracto primario después de la concentración, en forma de un coloide protector, sino que es capaz además de conservar el contenido completo del extracto vegetal después de la eliminación completa del agente de extracción, sin pérdida de los componentes extraídos de la planta.

Una cantidad efectiva de PVP está comprendida, generalmente, entre el 5% en peso aproximadamente y el 50% en peso aproximadamente, en base al peso del extracto final. Para muchos propósitos, se prefiere un intervalo comprendido entre el 15% en peso y el 35% en peso, aproximadamente.

Preferentemente, el agente de extracción es una substancia polar, tal como normalmente un alcohol líquido, por ejemplo, metanol, etanol, propanol, butanol, así como mezclas de dichos alcoholes C_{1-4} con otros y/o con agua. Para muchos propósitos, se prefieren mezclas desde el 40% al 80% aproximadamente, en peso, de dicho alcanol, preferentemente etanol, con entre el 60 al 20% aproximadamente, en peso, de agua. Siempre que en la presente memoria se utiliza el calificativo "aproximadamente", se pretende incluir una variación de \pm30%, preferentemente de un \pm10%, del valor asociado con este calificativo.

Preferentemente, la PVP se añade más bien al extracto primario que al agente de extracción. El procedimiento de extracción puede llevarse a cabo en dispositivos convencionales. En cualquier caso, el mediador de la solución se añade antes de realizar cualquier remoción significativa del agente de extracción. Dicha eliminación o concentración puede llevarse a cabo de una forma conocida, por ejemplo, mediante destilación a una temperatura elevada y/o presión reducida, teniendo cuidado en evitar condiciones que puedan afectar a los componentes del extracto. La concentración puede realizarse con condiciones constantes o variables de temperatura y/o presión.

Una forma de realización preferida del procedimiento de la invención se lleva a cabo mediante extracción del material vegetal seco con una mezcla de etanol-agua que contiene aproximadamente 50-60%, en volumen, de etanol, y aproximadamente 50-40% en volumen, de agua. Después de la concentración, los constituyentes alcanólicos más cualquier agua de una mezcla azeotrópica se eliminan hasta que se alcanza una concentración de sólidos de aproximadamente 25-50%, en peso. El extracto concentrado obtenido puede entonces procesarse de cualquier forma convencional, por ejemplo, mediante secado por pulverización para formar un producto seco. Durante dicha etapa final de concentración, por ejemplo, después de secar por pulverización, el mediador PVP de la solución actúa además como un adyuvante del secado por pulverización. Generalmente, la PVP produce el efecto de mantener, en todos los estadios del proceso de concentración, una consistencia homogénea del extracto.

Los extractos de Cimicifuga racemosa obtenidos tal como se ha expuesto en la presente memoria, pueden utilizarse según la invención para la preparación de un medicamento apropiado para el tratamiento del malestar climatérico y post menopáusico. Dicha preparación puede llevarse a cabo de forma convencional, excepto en el caso de que el extracto haya sido obtenido en presencia de PVP según la invención.

Dicho medicamento es apropiado como substitutivo o complemento de una terapia de reemplazamiento hormonal, y puede aliviar síntomas climatéricos y menopaúsicos, y por lo tanto, puede aplicarse generalmente para tratar el malestar climatérico y post menopaúsico en una paciente humana.

Un medicamento según la invención contiene normalmente el nuevo extracto como parte dominante, por lo menos, en combinación con otros componentes convencionales y bien conocidos de medicamentos que, a su vez, pueden pero no necesitan ser farmacéuticamente activos. Por otra parte, un medicamento según la invención puede estar formado substancialmente por el nuevo extracto, por ejemplo, en un diluyente sólido o líquido.

Según la invención, se ha encontrado que la efectividad fisiológica del nuevo extracto puede determinarse mediante un procedimiento de medición relativamente simple, midiendo particularmente la frecuencia del pulso (ciliar epitelial) de una muestra epitelial tomada a partir del oviducto, tal como se conoce en la técnica para determinar la efectividad del tratamiento hormonal (por ejemplo, Mahmood, T., et al. "The effect of ovarian steroids on epithelial ciliary beat frequency in human fallopian tube" (1998), Human Reproduction, 13 (11); 2991-2994).

El extracto según la invención puede utilizarse para preparar medicamentos con un efecto similar al de la progesterona, efectivo para el tratamiento del malestar climatérico o postmenstrual en pacientes humanas. Para conseguir este fin, el extracto según la invención puede procesarse, de una forma conocida per se a partir de la práctica farmacológica estándar, para obtener formas convencionales de aplicación y que se apliquen para el tratamiento médico a las dosis conocidas para la utilización de extractos convencionales de Cimicifuga racemosa, por ejemplo en el intervalo de amplio espectro comprendido entre aproximadamente 0,1 y aproximadamente 100 mg/kg del peso corporal. Los ensayos clínicos en el tratamiento de pacientes humanas con el síndrome menopáusico (por ejemplo, Ejemplo 5 a continuación) dieron resultados favorables cuando se utilizaron a una dosis de 6,5 y 13 mg/día.

La invención se explicará ahora con más detalle, haciendo referencia a los dibujos adjuntos, en los que:

la Figura 1 es un diagrama de un análisis LC de un extracto de Cimicifuga racemosa preparado convencionalmente;

la Figura 2 de un análisis LC obtenido bajo las mismas condiciones generales que en la Figura 1, obtenido según la invención, sin embargo, mediante concentración con un extracto de Cimicifuga racemosa, en presencia de un mediador de la solución; y

la Figura 3 es un diagrama que muestra los resultados del ensayo clínico.

En los ejemplos siguientes, que se proporcionan a título ilustrativo pero no limitativo, las indicaciones en porcentaje o en partes se basan en el peso, a menos que, de otro modo, se mencione específicamente.

Ejemplo 1

Preparación del extracto

Se procesó material de raíces secas de Cimicifuga racemosa (rizoma) mediante molienda para obtener un polvo, combinándose cargas del material de distintas cosechas para obtener homogeneidad.

La extracción se llevó a cabo basándose en una proporción de 2.500 partes del agente de extracción por 500 partes de Cimicifuga racemosa. El agente de extracción, a su vez, se preparó mezclando 1.330 partes de etanol (96% en volumen) y 1.170 partes de agua ionizada.

El agua y el etanol a temperatura ambiente se mezclaron en un contenedor provisto de un agitador mecánico y un puerto de retirada en el fondo del contenedor. Entonces, el polvo de Cimicifuga racemosa se añadió agitando continuamente, continuándose la agitación durante 300 minutos. Entonces, se detuvo el agitador y se dejó que los sólidos se asentaran, lo que tuvo lugar normalmente en aproximadamente 180 minutos y, en cualquier caso, se continuó hasta la formación de un sobrenadante transparente por encima del sedimento.

El sobrenadante transparente se eliminó mediante una bomba y se recuperó en un contenedor separado. El sedimento se condujo a una prensa de filtro para recuperar el líquido de extracción adicional, que se combinó con el sobrenadante, conduciéndose la mezcla resultante a través de un filtro a un contenedor mezclador, provisto de un agitador y una balanza. Después del inicio, se añadió la polivinilpirrolidona (que en la presente memoria se denomina PVP, un producto comercial que se vende bajo la marca registrada Plasdone® K.W. 29-32) en una cantidad de 33 partes por 100 partes del liquido de extracción, continuándose la agitación hasta que la PVP se disolviera, obteniéndose un líquido transparente de color castaño como primer producto.

Este producto se condujo a un concentrador vegetal de dos fases de tipo estándar, tipo KV102 EX producido y vendido por Unipektin AG, Eschenz, Suiza, en el cual el líquido de extracción, incluyendo la PVP, se concentra mediante evaporación del agente de extracción para producir un concentrado de color castaño oscuro que tiene una concentración de sólidos de por lo menos aproximadamente el 9%, que se concentra ulteriormente para formar un extracto espeso que contenía sólidos entre el 18 y el 26%. Entonces, el concentrado se dirigió a un secador por pulverización convencional para producir un extracto seco en forma de un polvo con un contenido de humedad de no más de aproximadamente el 5% en peso.

Tanto el extracto spissum de líquido concentrado como el extracto pulverulento seco pueden estandarizarse como se necesite, y utilizarse como o en medicamentos según la invención, por ejemplo, preparando comprimidos que contengan de 5 a 50 mg del extracto y los habituales diluyentes sólidos, aditivos, y adyuvantes para la preparación de comprimidos con un peso final de aproximadamente 100-200 mg.

Ejemplo 2

Se ensayaron varias substancias con respecto a su efectividad como mediadores de solución o coloides protectores durante la concentración. A este fin, se utilizó el criterio de "borde", es decir, la formación de un "borde" diferenciado (depósito solidificante en la periferia del líquido de prueba en un contenedor generalmente redondo).

Dicho "borde" se produce normalmente cuando se concentra una solución que contiene un sólido resinoso o amorfo, e indica el comienzo de la solidificación después de la concentración por evaporación del disolvente.

La investigación que conduce a la invención ha mostrado que la concentración de una solución del extracto de plantas, particularmente de Cimicifuga racemosa, en el líquido de extracción, por evaporación, conduce a la formación de un "borde" después de que progrese la concentración de la solución, y que dicho "borde" tiende a contener una parte substancial de los principios activos del extracto. El resultado de la formación del "borde" es que los sólidos de éste tienden a descartarse, porque va a conseguirse un producto homogéneo. Consecuentemente, ninguno de los extractos finales obtenidos mediante la evaporación convencional tiene ya la misma composición proporcional que los extractos primarios antes de la llevar a cabo la concentración.

Por otra parte, se ha encontrado, según la invención, que la formación del "borde" puede evitarse o minimizarse hasta convertirse en insignificante, si la solución contiene PVP como un mediador de la solución en la presente memoria, y a una concentración que sea suficiente para evitar la formación del "borde".

De este modo, la efectividad de una PVP como un mediador de la solución para ser utilizada según la invención, puede determinarse mediante algunos experimentos sencillos, observando la cantidad del "borde" y su dependencia de la cantidad relativa de PVP para un proceso dado de concentración.

En dichos experimentos se encuentra que la PVP, también conocida como Povidona, excluye la formación del "borde" cuando se concentran los extractos de Cimicifuga racemosa, y por tanto, constituye el mediador de la solución, según la invención, para procesar los extractos de Cimicifuga racemosa mediante la evaporación del disolvente de extracción. Una PVP preferida para cumplir muchos propósitos de la invención se puede obtener comercialmente bajo la marca registrada Plasdone® K-29/32. Esta PVP tiene un peso molecular de aproximadamente 58.000 unidades Dalton y una viscosidad típica de 2,5 mPas cuando se mide con condiciones estándar. Este tipo de PVP es altamente soluble en agua así como menos soluble en alcanol, cloruro de metileno, cloroformo y en otros disolventes orgánicos convencionales.

Otra ventaja de la PVP es que constituye un aditivo ventajoso para el procesamiento de extractos sólidos, tales como el de Cimicifuga racemosa, porque -ya que puede permitirse permanecer en los productos del extracto final, a causa de su actividad fisiológica-, facilitará los procedimientos para proporcionar una forma del tipo utilizado en la preparación de los comprimidos farmacéuticos. El ensayo con PVP indica que puede utilizarse de modo efectivo en una cantidad comprendida entre el 5 y el 50% en peso, aproximadamente, basándose en el peso del extracto o producto final. Se ha encontrado que es particularmente efectivo un intervalo del 15 al 35% aproximadamente basándose en lo mismo.

Otras substancias que se ensayaron, pero se encontraron menos efectivas para los extractos de Cimicifuga racemosa fueron la hidroxietil celulosa (opcionalmente mezclada con lecitina), la maltodextrina, la hidroxipropil celulosa, la hidroxipropilmetil celulosa, fructosa, ácido tartárico (opcionalmente en forma de una sal, por ejemplo, una sal de sodio).

Ejemplo 3

Análisis del Extracto

El extracto seco obtenido según el ejemplo 1 es un polvo fino ligeramente castaño que tiene un olor característico. Contiene varios glicósidos triterpénicos así como ácidos orgánicos.

Los resultados analíticos de tres lotes preparados según el ejemplo 1 dieron los siguientes valores de glicósidos triterpénicos: 8,34%, 8,84% y 10,04% o un medio del 9,07% que corresponde a por lo menos el 6% si se calcula como 27-desoxi aceteína, la substancia utilizada convencionalmente para la estandarización de los extractos de Cimicifuga racemosa.

Estos valores indican una alta concentración más deseable, notablemente cuando se considera el hecho de que el producto final contiene aproximadamente el 25% de PVP. Los extractos convencionales de Cimicifuga racemosa presentan un contenido substancialmente más bajo de glicósidos triterpénicos y parecen ser menos efectivos a dosis equivalentes. El alto y aparentemente distintivo contenido de los glicósidos triterpénicos en un extracto según la invención, no se debe a un procedimiento de enriquecimiento, sino meramente a la aplicación después del procedimiento según la invención que proporciona una recuperación de los principios activos vegetales sin que se pierdan.

El ensayo in vitro del extracto de Cimicifuga racemosa que se obtiene según la invención, indica la unión a receptores somáticos distinguibles, así como a receptores en el sistema nervioso central, de forma que dichos extractos candidatos resultan valiosos para el alivio climatérico y los síntomas menopaúsicos.

Ejemplo 4

Análisis comparativos

Se repitió una vez la operación del ejemplo 1, sin embargo, según la técnica anterior, es decir, sin utilizar un mediador de la solución durante la concentración (Muestra A), y añadiendo una vez PVP tal como se describe en el ejemplo 1 (Muestra B).

Para el análisis, se extrajeron 0,6 g de cada muestra con 25 ml durante 15 minutos en un mezclador ultrasónico. Cada una de las alícuotas de la solución A del ensayo obtenida de la muestra A, y de la solución B del ensayo obtenida de la muestra B, se transfirió mediante un filtro de jeringa a un vial de HPLC, inyectándose 20 \mul en el dispositivo de HPLC. La columna utilizada fue una RP C-18 de fase inversa, de 3,0 x 120 mm, 3 \mum. La fase móvil estaba constituida por un gradiente metanol-agua con acetonitrilo, con una velocidad de flujo de 1 ml/min. La detección se llevó a cabo mediante un dispositivo ELSD para la detección mediante la dispersión lumínica de la evaporación a una temperatura de ésta de 50ºC y una presión de evaporación de 3,5 bar. Las muestras se cuantificaron externamente con respecto a una 27-desoxiacteína estándar para determinar los glicósidos triterpénicos (TTG).

Los resultados se dan en la Figura 1 para la Muestra A (procedimiento de extracción de la técnica anterior) y en la Figura 2 para la muestra B (según la invención, la concentración del extracto en presencia del mediador de la solución). Como resulta evidente a partir de una comparación de la Fig 1 y 2, el procedimiento de la invención proporciona un extracto con una composición proporcional claramente distinta que se cree causal para los resultados ventajosos del ensayo clínico.

Ejemplo 5

Ensayos clínicos

El objetivo del ensayo clínico fue evaluar la eficacia y seguridad de Cimicifuga racemosa en forma de comprimidos preparados a partir del extracto obtenido según el ejemplo 1 en el tratamiento de pacientes con el síndrome menopaúsico.

El ensayo se diseñó como una comparación grupal en perspectiva, al azar, doble ciego, controlada por un placebo, y en paralelo.

El establecimiento del ensayo fue multicéntrico en cuatro clínicas médicas generales para pacientes externos. Se escogieron al azar 180 pacientes como individuos y se evaluaron con el propósito de atender a su análisis (60 pacientes en tres grupos:placebo, 6,5 mg de extracto de Cimicifuga racemosa, extracto de 13 mg de Cimicifuga racemosa). Se utilizaron criterios de diagnóstico establecidos con respecto al síndrome menopáusico y escalas validadas de evaluación.

Intervenciones: comprimidos de extracto de Cimicifuga racemosa, 13 mg; 6,5 mg OR; comprimidos OR del placebo, de emparejamiento, una vez al día, durante 12 semanas seguidas.

Principales mediciones de los resultados: Todas las variables se buscaron prospectivamente en un Protocolo. El análisis estadístico se realizó sobre la base de intentar atender a su tratamiento. La principal variable de eficacia fue el cambio entre el valor basal y el final (al final de la semana 12) en los síntomas menopaúsicos, utilizando el Índice Kuppermann (Índice K) (Kuppermann H.S., ("Comparative clinical evaluation of estrogen preparations by the menopausal and amenorrhoeal indices" J. Clin. Endocr 1953; 13:88). Las variables secundarias de la eficacia fueron: (a) autoevaluación de la Calidad de Vida de los pacientes; y (b) Tasas de individuos que responden ("respondedores"). La seguridad se evaluó mediante control del laboratorio clínico y de los efectos adversos.

Resultados: Los cambios en los síntomas menopáusicos a partir de los valores basales hasta el final del tratamiento (punto final principal) fueron significativamente superiores para los pacientes que recibieron extracto de Cimicifuga racemosa con respecto a los que recibieron el placebo (p< 0,0001 para 13 mg; p< 0,001 para 6,5 mg). Los resultados de las tasas de los individuos "respondedores" y la autoevaluación de la Calidad de Vida de los pacientes fueron similares a los del punto final principal. La evaluación de los síntomas menopáusicos y de la Calidad de Vida mostró una alta correlación (r=-0,84) entre los dos instrumentos de evaluación. Los efectos secundarios que se informaron no alcanzaron una preocupación por la seguridad y los niveles hormonales no fueron afectados por la Cimicifuga racemosa.

Las conclusiones de este ensayo clínico pueden resumirse de la forma siguiente: Como la indicación para el reemplazamiento hormonal cambia gradualmente de la prevención de la enfermedad crónica a un alivio a un plazo más corto, Cimicifuga racemosa constituye una alternativa no hormonal efectiva para el tratamiento hormonal en las mujeres con síntomas menopáusicos.

Los resultados del ensayo se resumen en la Figura 3, que representa la correlación de la Calidad de Vida (en ordenadas, en términos de una escala análoga visual) con respecto al Índice de Kuppermann (en abscisas).

Aunque los ejemplos se han descrito anteriormente, se debe entender que estos ejemplos se proporcionan a título ilustrativo pero no limitativo, y que varias modificaciones resultarán evidentes para los expertos en la técnica de preparación de extractos a partir de plantas de utilización médica.

Claims (9)

1. Procedimiento para preparar un extracto vegetal mediante las etapas siguientes:

(A)

tratar un material vegetal sólido con un agente de extracción, para obtener un líquido de extracción que contiene dicho extracto disuelto en dicho agente de extracción;

(B)

separar dicho líquido de extracción de dicho material vegetal sólido; y

(C)

concentrar dicho líquido de extracción eliminando parcialmente por lo menos dicho agente de extracción, para obtener un extracto concentrado;

en el que dicha etapa (C) de concentración de dicho líquido de extracción se lleva a cabo en presencia de una cantidad efectiva de un mediador de la solución farmacológicamente aceptable y fisiológicamente inerte, de modo que evite substancialmente la pérdida de constituyentes de dicho extracto líquido después de concentrarlo mediante una eliminación, por lo menos parcial, de dicho agente de extracción, siendo dicho mediador de la solución la polivinilpirrolidona.

2. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que dicho agente de extracción es una substancia polar y preferentemente, un alcanol C_{1-4} o una mezcla de dicho alcanol con agua.

3. Procedimiento según la reivindicación 1 ó 2, en el que dicho mediador de la solución es un polímero orgánico dispersable soluble o coloidalmente en dicho agente de extracción.

4. Procedimiento según la reivindicación 3, en el que dicho polímero orgánico que se utiliza como dicho mediador de la solución, posee un peso molecular medio de por lo menos aproximadamente 1.000 unidades Dalton.

5. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicha planta vegetal es Cimicifuga racemosa.

6. Extracto obtenido mediante la concentración de un extracto líquido obtenido extrayéndolo de Cimicifuga racemosa con un agente de extracción, y la concentración de dicho extracto líquido en presencia de una cantidad efectiva de un mediador de la solución, tal como se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.

7. Utilización de un extracto según la reivindicación 6, para la preparación de un medicamento capaz de unirse a receptores somáticos y del sistema nervioso central, de forma que sea apropiado para tratar el malestar climatérico y post menopaúsico.

8. Utilización de un extracto según la reivindicación 6, para la preparación de un medicamento apropiado como substituto o complemento de una terapia de reemplazamiento hormonal.

9. Medicamento capaz de substituir o complementar la terapia de reemplazamiento hormonal, consistiendo dicho medicamento, por lo menos en parte en un extracto obtenido mediante la concentración de un extracto líquido a partir de Cimicifuga racemosa en presencia de una cantidad efectiva de PVP como mediador de disolvente.