ES2279946T3 - Quinoles esteroideos como profarmacos de antioxidantes. - Google Patents
Quinoles esteroideos como profarmacos de antioxidantes. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2279946T3 ES2279946T3 ES03721508T ES03721508T ES2279946T3 ES 2279946 T3 ES2279946 T3 ES 2279946T3 ES 03721508 T ES03721508 T ES 03721508T ES 03721508 T ES03721508 T ES 03721508T ES 2279946 T3 ES2279946 T3 ES 2279946T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- quinol
- estrogen
- steroid
- estrone
- present
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/58—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids containing heterocyclic rings, e.g. danazol, stanozolol, pancuronium or digitogenin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J1/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, androstane
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Abstract
Un quinol que tiene la estructura general en la que R se selecciona del grupo constituido por H, alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, heteroarilo, alquilamino, hidroxialquilo, alcoxialquilo y alquilarilo; X se selecciona del grupo constituido por hidrógeno, isopropilo, alquilo, alquenilo, alquinilo, carbociclo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, heteroarilo, alquilamino, hidroxialquilo, alcoxialquilo, y un hidrocarburo lineal o ramificado de 1-15 átomos de carbono de longitud, que puede opcionalmente incluir uno o más heteroátomos en la cadena; Y se selecciona del grupo constituido por isopropilo, alquilo, alquenilo, alquinilo, carbociclo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, heteroarilo, alquilamino, hidroxialquilo, alcoxialquilo, y un hidrocarburo lineal o ramificado de 1-15 átomos de carbono de longitud, que puede opcionalmente incluir uno o más heteroátomos en la cadena; y Z se selecciona del grupo constituido por hidrógeno, isopropilo, alquilo, alquenilo, alquinilo, carbociclo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, heteroarilo, alquilamino, hidroxialquilo, alcoxialquilo, y un hidrocarburo lineal o ramificado de 1-15 átomos de carbono de longitud, que puede opcionalmente incluir uno o más heteroátomos en la cadena.
Description
Quinoles esteroideos como profármacos de
antioxidantes.
La presente invención se refiere a profármacos
para tratamiento antioxidante. En particular, la presente invención
se refiere a quinoles esteroides relacionados con estrógeno y su uso
como profármacos para estrógenos de anillo A fenólico y análogos de
estrógeno.
Las células de los mamíferos están continuamente
expuestas a especies reactivas de oxígeno (ROS) tales como peroxilo
de lípidos, oxoperoxinitrato, superóxido (O_{2}·^{-}), peróxido
de hidrógeno (H_{2}O_{2}), radical hidroxilo (OH·), y oxígeno
singlete (^{1}O_{2}). In vivo, las células generan estos
intermediarios reactivos de oxígeno en respuesta al metabolismo
aeróbico, catabolismo de fármacos y otros xenobióticos, radiación
ultravioleta y de rayos x, y en respuesta a la explosión
respiratoria de las células fagocíticas (tales como leucocitos
sanguíneos) para matar bacterias invasoras tales como aquellas
introducidas a través de heridas. El peróxido de hidrógeno, por
ejemplo, se produce durante la respiración de la mayoría de los
organismos vivientes especialmente por parte de las células dañadas
y sometidas a estrés.
Cuando las ROS están presentes en exceso pueden
ser dañinas para las células. Si el equilibrio celular del nivel de
especies oxidativas (es decir, especies reactivas de oxígeno y
especies reactivas de nitrógeno) no se restablece, se provocan
varios procesos patológicos, que incluyen daño del ADN, peroxidación
de lípidos, pérdida de la homeostasis intracelular de calcio, y
alteración en las señales celulares y vías metabólicas. El estrés
oxidativo causa daño celular, que da como resultado la alteración
del estado redox (es decir, depleción de coenzimas de nucleótidos y
trastornos de las enzimas que contienen sulfhidrilo), y saturación y
destrucción de la defensa antioxidante y del sistema de reparación
de ADN.
Por ejemplo, el exceso de peróxido de hidrógeno
puede reaccionar con ADN causando ruptura del esqueleto, produciendo
mutaciones y alterando y liberando bases. Tal daño bioquímico
oxidativo puede dar como resultado la pérdida de integridad de la
membrana celular, disminución de la actividad enzimática, cambios en
la cinética de transporte, cambios en el contenido lipídico de
membrana y pérdida de iones potasio, aminoácidos y otro material
celular.
Otro ejemplo de la capacidad de las ROS para
dañar células es la peroxidación de lípidos, que incluye la
degradación oxidativa de lípidos insaturados. La peroxidación de
lípidos es altamente dañina para la estructura y función de
membrana y puede causar numerosos efectos citopatológicos. Los
investigadores proponen que la aterosclerosis y sus mortales
efectos de ataque cardiaco e ictus se desarrollan en relación con la
modificación de oxidación de lipoproteínas de baja densidad (LDL)
que transportan colesterol en la sangre. Se ha sugerido la hipótesis
de que los radicales libres generados por las propias células
inmunes del cuerpo oxidan las LDL, que son captadas por las células
de la capa íntima vascular iniciando la lesión aterosclerótica.
Por ello, se ha asociado al estrés oxidativo con
una diversidad de enfermedades y trastornos, que incluyen
envejecimiento y muerte de células neuronales (Jenner, P.,
"Oxidative damage in neurodegenerative disease", Lancet,344,
796-798 (1994)). Por ejemplo, el estrés oxidativo
está asociado con la patología de numerosas enfermedades y
afecciones neurodegenerativas que incluyen, pero no se limitan a la
enfermedad de Alzheimer, neuropatía periférica diabética,
esclerosis múltiple, esclerosis amiotrófica lateral, enfermedad de
Huntington y enfermedad de Parkinson.
El cerebro es un órgano especializado que
concentra metales necesarios para las funciones neurológicas
normales. Sin embargo, se sabe que el trauma, la isquemia y muchas
otras agresiones de origen neuropatológico liberan iones metálicos
unidos a proteínas tales como el hierro de las células dañadas. La
liberación de iones metálicos aumenta el estrés oxidativo en el
sistema nervioso central (SNC) al promover la generación de ROS.
Se ha demostrado que los antioxidantes inhiben
el daño asociado con ROS. Por ejemplo, se ha publicado que el
piruvato y otros alfacetoácidos reaccionan rápidamente y de manera
estequiométrica con peróxido de hidrógeno para proteger a las
células de los efectos citolíticos (O'Donnell-Tormey
y col., "Secretion of pyruvate. An antioxidant defense of
mammalian cells", J Exp. Med., 165, 500-514
(1987)). Se ha observado que el selegiline, que puede actuar como
un antioxidante dado que inhibe la desaminación oxidativa, retarda
el establecimiento de la enfermedad de Parkinson (Youdim, M. B. H.,
y Riederer, P., "Understanding Parkinson's disease", Scientific
AmericanEnero, 52-59 (1997)). Se ha demostrado que
el tratamiento antioxidante retrasa la velocidad del deterioro
motor de manera temprana en el curso de la enfermedad de Huntington
(Peyser C. E., y col., "Trial of
d-alpha-tocopherol in Huntington's
disease", Am J. Psychiatry, 152, 1771-1775
(1995)). El PROBUCOL
(4,4'-[(1-metiletiliden)bis(tio)]bis[2,6-bis(1,1-dimetiletil)]
(Lorelco, Marion Merrell Dow), un antioxidante, es eficaz
reduciendo la tasa de reestenosis tras la angioplastia coronaria
con balón (Tardif, J. C. y col., "Probucol and multivitamins in
the prevention of restenosis after coronary angioplasty.
Multivitamins and Probucol Study Group", New Engl. J. Med.337,
365-372 (1997)).
Desafortunadamente, muchos antioxidantes son
liposolubles y su uso está restringido por la baja solubilidad en
agua. Aquellos antioxidantes solubles en agua y con un uso menos
restringido, tales como la vitamina C, pueden actuar como un
prooxidante, es decir, un promotor de la oxidación en presencia de
un ión metálico, y tienen el inconveniente de promover la
peroxidación de lípidos bajo ciertas condiciones. El ácido úrico
también es soluble en agua, pero cuando se acumula in vivo,
puede generar efectos secundarios indeseables tales como gota o
cálculos renales. PROBUCOL ha demostrado tener baja
biodisponibilidad.
Los estrógenos han sido reconocidos como
antioxidantes y potentes agentes neuroprotectores. Se cree que su
acción antioxidante se debe a su capacidad para barrer radicales
libres que causan muerte celular neuronal. Los estrógenos, como el
altamente potente antioxidante endógeno vitamina E
(\alpha-Tocoferol), tienen un resto fenólico
considerado una característica fundamental para lograr la protección
contra el estrés oxidativo. Sin embargo, hay estudios que llegaron
a la conclusión de que la potencia del estrógeno estradiol como
antioxidante fenólico para inhibir la peroxidación de lípidos
inducida por hierro es mayor que la de la vitamina E a pesar de las
concentraciones totales extremadamente más bajas de estrógenos
comparadas con las de vitamina E. Además, la energía de disociación
del enlace -OH (BDE) del estradiol es mayor que la de la vitamina E,
lo que podría implicar que la vitamina E es un desactivador de
oxirradicales más fuerte que el estrógeno. La potencia antioxidante
se determina generalmente no sólo por la reactividad química hacia
ROS, sino también por la movilidad y/o distribución de la molécula
en el microambiente y el destino de los radicales derivados de
antioxidante (es decir, la dinámica de la acción antioxidante). Por
consiguiente, los estrógenos lipófilos pueden actuar in vivo
como antioxidantes altamente localizados a pesar de sus bajos
niveles de carga debido a la afinidad de unión a membrana y altas
concentraciones cerca del sitio de actividad.
El tratamiento de reemplazo de estrógenos (ERT)
ha sido asociado con numerosos beneficios para la salud, que
incluyen el alivio de los síntomas de la menopausia, protección ósea
y cardiovascular, reducción de incidencia de enfermedad de
Alzheimer, y mejora en las funciones cognitivas, enfermedad de
Parkinson, y resolución de ictus.
Estas diversas actividades de los estrógenos
pueden estar relacionadas con sus efectos citoprotectores y
capacidad antioxidante. Los efectos neuroprotectores de los
estrógenos contra numerosas agresiones tóxicas que incluyen el
estrés oxidativo han sido extensamente investigados in vivo e
in vitro en varios tipos de células neuronales. Existe una
evidencia creciente de que los estrógenos ejercen su efecto
neuroprotector contra el estrés oxidativo suprimiendo el estímulo
neurotóxico por medio de su actividad directa en el barrido de
radicales.
Los estrógenos se degradan en el tracto
intestinal y se metabolizan rápidamente en el hígado.
Específicamente, los estrógenos sufren recirculación enterohepática
vía conjugación de sulfato y glucurónido en el hígado, secreción
biliar de los conjugados en el intestino, e hidrólisis intestinal
seguida por reabsorción. La concentración de estrógenos encontrada
por el hígado es generalmente cuatro a cinco veces mayor que los
niveles de estrógeno en sangre periférica (el "efecto de primer
paso"). La administración de estrógenos orales presenta altos
niveles al hígado y puede llevar a un aumento indeseable en la
producción de ciertos factores de coagulación y sustratos de renina
por parte del hígado. Sin embargo, existe una necesidad de agentes
terapéuticos farmacéuticamente eficaces en aquellas regiones donde
se los necesita.
Se ha demostrado que altas dosis de estrógeno
lograron un efecto antioxidante in vitro. Se ha demostrado
que el estrógeno biológicamente más activo,
17\beta-estradiol, es un potente antioxidante y
tiene actividad neuroprotectora; sin embargo, el mecanismo de
acción aún no está aclarado. Tales dosis, aunque eficaces en
células in vivo, podrían haber limitado la utilidad en el
tratamiento de afecciones asociadas con el estrés oxidativo debido
a problemas asociados con toxicidad, aumento de la incidencia de
algunas formas de cáncer, y efectos feminizantes en varones. Por
ello, la utilidad de tal procedimiento de tratamiento es muy
limitada.
Numazawa y col. (Oxygenation of
2,4-Dibromoestrogens with Nitric Acid: A New
Synthesis of 19-Nor Steroids, Chem Pharm Bull, Vol.
37; (8) 1989, pág. 2058-2062) describen
procedimientos para sintetizar 19-nor esteroides a
partir de 2,4-dibromoestrógenos. De acuerdo con
Numazawa y col.,
4-bromo-10\beta,17\beta-dihidroxi-1,4-estradien-3-ona
(7a) es un subproducto obtenido cuando se hidrodesbroma
2,4-dibromo-10\beta-acetoxi-1,4-estradien-3,17-diona
(2b) usando ácido fórmico, paladio en carbón vegetal, y
trietilamina (ver pág. 2059, 1º columna). Numazawa y col. describen
brevemente al pasar que no está claro por qué 7a se sintetiza a
partir de 2b cuando se usa ácido fórmico; aparte de eso, no hay más
análisis con respecto a 7a porque aparentemente los
19-nor esteroides no pueden producirse a partir de
7a. Numazawa y col. no describen el uso de 7a como un profármaco
para la administración de compuestos de estrógenos biológicamente
activos para capturar especies reactivas de oxígeno de radicales
libres.
Galdecki y col. (Structure of
2,4-Dibromo-10beta,
17beta-dihidroxi-1,4-estradien-3-one,
Acta Cryst, Vol. c43, 1987, pág. 967-968) describen
procedimientos para síntesis de
2,4-dibromo-10\beta,17\beta-dihidroxi-1,4-estradien-3-one
(compuesto I) así como características estructurales específicas
del compuesto I. Como se indicó anteriormente, la reivindicación 1
no nombra la sustitución de Y o Z con un halógeno. Galdecki y col.
no describen un uso de tales quinoles como profármacos para la
administración de compuestos de estrógenos biológicamente activos
para barrer átomos de oxígeno.
Kupfer y col. (Comparisons of hydroperoxide
isomerase and monooxygenase activities of cytochrome P450 for
conversions of allylic hydroperoxides and alcohols to epoxyalcohols
and diols: probing substrate reorientation in the active site.
Biochemistry. 25 de Septiembre de 2001;
40(38):11490-11501) describen procedimientos
para identificar la regio- y estereoquímica de la actividad de
citocromo P450 isomerasa sobre
6\beta,10\beta,17\beta-trihidroxi-1,4-estradien-3-ona
(también llamado
6\beta-hidroxi-E2OH por Kupfer y
col.). Kupfer y col. describieron además E2OH, conocido también
como
10\beta,17\beta-dihidroxi-1,4-estradien-3-ona,
como un subproducto de estradiol cuando reacciona con PIFA o
[bis-(trifluoroacetoxi)yodo]benceno; la posterior
oxidación de E2OH con citocromo P450 isomerasa da como resultado
cantidades iguales de 6\beta-hidroxilación y
1,2-epoxidación (como entenderán los expertos en la
técnica, esta reacción no involucra un mecanismo de escisión de
O-O).
Ohe y col. (Novel metabolic pathway of estrone
and 17beta-estradiol catalyzed by cytochrome
P-450. Drug Metab Dispos. Febrero de 2000;
28(2):110-112) describen la síntesis de
10\beta,17\beta-dihidroxi-1,4-estradien-3-ona
a partir de estradiol por sistemas enzimáticos (citocromo P450).
Ohe y col. no describen ni sugieren los quinoles y usos de los
mismos como se reivindican. Ohe y col. tampoco enseñan ni sugieren
ningún mecanismo de escisión de O-O.
Por consiguiente, existe una necesidad de
composiciones y procedimientos para administrar barredores de
radicales libres o antioxidantes relacionados con estrógenos a
tejidos que muestran alteraciones en condiciones oxidativas. En
particular, existe una necesidad de composiciones y procedimientos
que puedan proveer beneficios terapéuticos a sujetos que sufren
enfermedades neurodegenerativas asociadas con estrés oxidativo.
Además, existe una necesidad de un compuesto de estrógeno
terapéuticamente eficaz que mantenga su actividad terapéutica sin
efectos secundarios asociados relacionados con el sexo.
La presente invención provee composiciones y
procedimientos para la administración controlada de compuestos
antioxidantes a mamíferos. En una forma de realización de
preferencia, la presente invención provee quinoles esteroides
relacionados con estrógeno y su uso como profármacos para
tratamiento antioxidante para tratar y/o prevenir diversas
afecciones y enfermedades asociadas con radicales libres y daño
oxidativo.
En un aspecto de la invención, se administran
quinoles esteroides relacionados con estrógeno para tratar
enfermedades neurológicas que incluyen estrés oxidativo, tales como
la enfermedad de Alzheimer o la enfermedad de Parkinson. En otros
aspectos de la invención, se administran quinoles esteroides
relacionados con estrógeno para aliviar los efectos adversos
asociados con el envejecimiento, ictus y trauma.
En una forma de realización de preferencia, la
presente invención provee compuestos inactivos que se convierten
in vivo en compuestos terapéuticos, biológicamente activos
por transformación química o enzimática. Los quinoles relacionados
con esteroides de la presente invención son ventajosos porque
solucionan problemas asociados con estabilidad, toxicidad, falta de
especificidad y biodisponibilidad limitada, que pueden existir con
la forma activa del esteroide. Los quinoles de acuerdo con la
presente invención son particularmente ventajosos como barredores
oxidativos.
La presente invención aprovecha la
identificación de un mecanismo por el que los estrógenos sirven como
potentes barredores de radicales hidroxilo a través de la captura
de especies reactivas de oxígeno dañinas. Específicamente, en una
forma de realización de preferencia, la presente invención provee un
quinol relacionado con estrógeno que se convierte rápidamente en un
compuesto de estrógeno biológicamente activo a través de la
reducción catalizada por enzimas que usa un agente reductor
endógeno. El agente reductor endógeno puede ser, por ejemplo, las
formas reducidas de nicotinamida adenina dinucleótido (NADH) o
nicotinamida adenina dinucleótido fosfato (NADPH). Una ventaja de
la reacción de conversión química es que el consiguiente ciclo redox
no genera especies de oxígeno reactivas.
En una forma de realización específica la
presente invención provee un quinol esteroide relacionado con
estrógeno que está relacionado con una estructura de
10\beta-hidroxiestra-1,4-dien-3-ona.
Tales quinoles son ventajosos porque pueden convertirse in
vivo en un estrógeno de anillo A fenólico precursor, o un
compuesto análogo de estrógeno, tras la exposición a un agente
reductor que incluye, por ejemplo NADPH endógeno.
Ventajosamente, la captura de un radical libre
tras la reducción in vivo a la estructura fenólica precursora
activa regenera los quinoles esteroides relacionados con estrógeno
de la presente invención. Esto es ventajoso porque usualmente otros
profármacos no se regeneran tras su activación in vivo. Al
tener la capacidad de regenerarse, los efectos terapéuticos
beneficiosos de los quinoles son prolongados.
La presente invención también se refiere a
quinoles que tienen propiedades fisicoquímicas mejoradas comparadas
con los fenoles lipófilos tales como estrógenos y análogos de
estrógenos. Ventajosamente, los quinoles de la invención demuestran
lipofilia disminuída. Para compuestos de preferencia de la presente
invención hay una disminución de 10 a 50 veces en el coeficiente de
reparto (P) en n-octanol/agua equivalente con
\DeltalogP de 1,0 a 1,7.
Además, la presente invención provee quinoles
que tienen distribución mejorada en el sistema nervioso central
(SNC) comparada con los fenoles lipófilos tales como estrógenos y
análogos de estrógenos. Además, los quinoles de la invención
demuestran mayor penetración a través de la barrera
hematoencefálica.
La presente invención también se refiere a
composiciones farmacéuticas que comprenden una cantidad
terapéuticamente eficaz de uno o más quinoles relacionados con
esteroides en una forma de dosificación farmacéutica para tratar
y/o prevenir enfermedades y trastornos asociados con el estrés
oxidativo. El uso de los quinoles relacionados con esteroides da
como resultado la reducción de picos y valles característicos de
dosificaciones con agentes precursores farmacéuticamente activos.
Las administraciones mejoradas de dosis da como resultado la
reducción de toxicidad comparada con la administración de
compuestos de estrógeno activos. Además, las composiciones
farmacéuticas de la presente invención tienen un índice terapéutico
aumentado comparado con el esteroide activo precursor.
En otro aspecto, la presente invención se
refiere a procedimientos terapéuticos para la administración
controlada de una cantidad eficaz de al menos uno o más quinoles
relacionados con esteroides descritos en este documento a un
mamífero para proveer tratamiento antioxidante.
La Figura 1 ilustra el mecanismo de activación
de los quinoles esteroides relacionados con estrógeno de la
presente invención.
Las Figuras 2A, 2B y 2C ilustran análisis
LC/APCI-MS, MS/MS, y MS^{3} que demuestran a
10\beta-hidroxiestra-1,4-dien-3,17-diona
(estrona-quinol) como el producto de la Reacción de
Fenton a partir de estrona.
La Figura 3 ilustra esquemas preliminares para
la síntesis de formas de profármacos sustituidos en posición 4 o
sustituidos en posición 2 de compuestos de la presente
invención.
La Figura 4 ilustra esquemas preliminares para
la síntesis de formas de profármacos disustituidos en posiciones 2
y 4 de compuestos de la presente invención.
La Figura 5 ilustra esquemas preliminares para
la síntesis de formas de profármacos trisustituidos en posiciones
1, 2 y 4 de compuestos de la presente invención.
La Figura 6 ilustra los trazados
cromatográficos de los analitos, estrona-quinol y
estrona, y el patrón interno (etinil-estradiol) en
el experimento de control.
Las Figuras 7A y 7B ilustran los trazados
cromatográficos de los analitos, estrona-quinol y
estrona, y el patrón interno (etinil-estradiol) en
NADPH, y análisis LC/APCI-MS/MS que demuestran la
reducción de estrona-quinol a estrona por NADPH,
respectivamente.
Las Figuras 8A y 8B ilustran los análisis
LC/APCI-MS/MS del extracto de acetato de etilo del
microdializado cerebral in vivo obtenido tras la perfusión
de sonda a 1 \mul/minuto con 10-picomol/\mul de
estrona-quinol de líquido cefalorraquídeo
artificial.
La Figura 9 ilustra la viabilidad celular tras
la exposición a estrés oxidativo inducido por glutamato y
tratamiento con una forma de realización de la presente invención
comparada con el compuesto precursor fenólico activo.
La Figura 10 ilustra el efecto de un quinol de
la presente invención en el daño isquémico asociado con
reperfusión.
De acuerdo con la presente invención, se
administran ciertos compuestos quinoles esteroides relacionados con
estrógeno para el tratamiento y/o prevención de afecciones
patológicas asociadas con especies de oxígeno reactivas (ROS). Los
procedimientos y composiciones de la presente invención aprovechan
la identificación de un mecanismo por el que los estrógenos sirven
como potentes barredores de hidroxilos. Debido a la capacidad de los
presentes compuestos para convertirse en compuestos esteroides
activos relacionados con estrógeno a través de una reducción
catalizada por enzimas, su administración como profármacos es muy
ventajosa.
Ventajosamente, la presente invención provee
formas de profármacos de estrógeno y análogos de estrógeno que
proveen efectos farmacéuticos beneficiosos prolongados, propiedades
fisicoquímicas mejoradas, distribución tisular mejorada, mayor
biodisponibilidad, resistencia a la inactivación metabólica y
toxicidad reducida en comparación con los estrógenos fenólicos y
análogos de estrógenos, lipófilos. Los compuestos profármacos de
acuerdo con la presente invención son barredores de radicales únicos
y ventajosos debido a su capacidad para regenerar una estructura
esteroidal fenólica activa tras la activación por reducción in
vivo.
A diferencia de la estructura de catecol de los
productos de estrógenos fenólicos bien conocidos, los presentes
quinoles esteroides confieren una naturaleza no aromática al anillo
A esteroide. Por ello, la bioquímica de los quinoles esteroides de
acuerdo con la presente invención es sustancialmente diferente de la
de los estrógenos de catecol para proveer mejores propiedades
beneficiosas. En una forma de realización particular, los quinoles
esteroides relacionados con estrógeno no son aromáticos hasta la
introducción en un proceso de aromatización reductora química o
enzimática para proveer un resto fenólico y neuroprotección. Por
ello, el compuesto quinol esteroide sirve como un profármaco para
estrógenos activos neuroprotectores.
\newpage
En una forma de realización de preferencia, la
presente invención provee compuestos quinoles esteroides
relacionados con estrógeno de la fórmula:
en la
que
R es H, alquilo, cicloalquilo, arilo,
heterociclo, heteroarilo, alquilamino, hidroxialquilo, alcoxialquilo
o alquilarilo;
X es hidrógeno, isopropilo, alquilo, alquenilo,
alquinilo, carbociclo, cicloalquilo, arilo, heterociclo,
heteroarilo, alquilamino, hidroxialquilo, alcoxialquilo, o un
hidrocarburo lineal o ramificado de 1-15 átomos de
carbono de longitud, que puede opcionalmente incluir uno o más
heteroátomos en la cadena;
Y es isopropilo, alquilo, alquenilo, alquinilo,
carbociclo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, heteroarilo,
alquilamino, hidroxialquilo, alcoxialquilo, o un hidrocarburo lineal
o ramificado de 1-15 átomos de carbono de longitud,
que puede opcionalmente incluir uno o más heteroátomos en la cadena;
y
Z es isopropilo, alquilo, alquenilo, alquinilo,
carbociclo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, heteroarilo,
alquilamino, hidroxialquilo, alcoxialquilo, o un hidrocarburo lineal
o ramificado de 1-15 átomos de carbono de longitud,
que puede opcionalmente incluir uno o más heteroátomos en la
cadena.
En una forma de realización, R es una cadena de
alquilo C_{1-20} lineal o ramificada y X es
hidrógeno.
La expresión "compuesto de estrógeno", como
se usa en este documento, se refiere a estrógeno; metabolitos de
estrógeno; análogos, antagonistas o moduladores de estrógeno; y
compuestos con atributos que están clasificados como similares o
análogos a estrógeno, metabolitos de estrógeno o análogos,
antagonistas o moduladores de estrógeno.
El término "paciente", como se usa en este
documento, describe a un animal, incluyendo mamíferos, a los que se
provee el tratamiento con las composiciones de acuerdo con la
presente invención. Las especies de mamíferos que se benefician de
los procedimientos de tratamiento descritos incluyen, y no se
limitan a, simios, chimpancés, orangutanes, seres humanos, monos; y
animales domésticos (por ejemplo, mascotas) tales como perros,
gatos, cobayas y hámsters.
Como se usa en este documento, el término
"profármaco" significa una molécula que es incapaz de ejercer
la actividad farmacológica del compuesto activo. El compuesto
activo ejercerá sus efectos terapéuticos tras su bioactivación por
un agente reductor.
Se conoce una diversidad de agentes reductores
endógenos y pueden usarse para lograr la bioactivación preferencial
del compuesto activo dentro del cuerpo. Los agentes reductores
candidatos que podrían usarse para activar profármacos de acuerdo
con la presente invención incluyen NADH o NADPH. Como resultado de
la bioactivación, los profármacos quinoles se convierten en un
estrógeno fenólico o análogo de estrógeno activo. Los quinoles
esteroides relacionados con estrógeno de la presente invención son
ventajosos como profármacos porque, una vez reducidos a un
compuesto activo por un agente reductor, el compuesto activo se
reoxida otra vez fácilmente dando el quinol esteroide relacionado
con estrógeno por un oxidante, tal como un radical hidroxilo. Este
procedimiento se muestra en la Figura 1. Ventajosamente, la
capacidad para regenerar los compuestos profármaco de la invención
tras la bioactivación facilita la prolongación de los efectos
farmacológicos beneficiosos.
Los compuestos de la invención pueden usarse con
vehículos, aditivos o excipientes farmacéuticamente aceptables,
cuyas proporciones se determinan por la solubilidad y naturaleza
química del compuesto, vía de administración elegida y práctica
médica convencional. En una forma de realización de la presente
invención, las composiciones farmacéuticas incluyen una cantidad
terapéuticamente eficaz de uno o más de los compuestos de la
invención en una forma de dosificación farmacéutica para tratar y/o
prevenir enfermedades y afecciones asociadas con el estrés
oxidativo. La cantidad terapéuticamente eficaz variará con la
afección a tratar, su gravedad, el régimen de tratamiento a usar,
la farmacocinética del agente usado, así como con el paciente a
tratar.
Los compuestos profármacos de la presente
invención pueden formularse de acuerdo con procedimientos conocidos
para preparar composiciones farmacéuticamente útiles. Las
formulaciones están descritas en varias fuentes, bien conocidas y
fácilmente disponibles para aquellos expertos en la técnica. Por
ejemplo, Remington's Pharmaceutical Science(Martin E W
[1995] Easton Pa., Mack Publishing Company, 19º ed.) describe
formulaciones que pueden usarse con relación a la presente
invención. Las formulaciones adecuadas para administración
parenteral incluyen, por ejemplo, soluciones acuosas estériles para
inyección, que pueden contener antioxidantes, tampones,
bacteriostáticos y solutos, que aportan a la formulación isotonía
con la sangre del receptor; y suspensiones estériles acuosas y no
acuosas, que pueden incluir agentes de suspensión y agentes
espesantes. Las formulaciones pueden estar presentadas en envases
de dosis unitarias o dosis múltiples, por ejemplo ampollas selladas
y viales, y pueden almacenarse liofilizadas requiriendo sólo del
vehículo líquido estéril, por ejemplo, agua para inyecciones,
previo al uso. Las soluciones y suspensiones extemporáneas para
inyección pueden prepararse a partir de polvo estéril, gránulos,
comprimidos, etc. Debería entenderse que además de los ingredientes
particularmente mencionados anteriormente, las formulaciones de la
presente invención pueden incluir otros agentes convencionales en la
técnica con relación al tipo de formulación en cuestión.
Los tejidos protegidos por el uso de compuestos
quinoles esteroides relacionados con estrógeno como profármacos
pueden ser de niños, adultos o fetos e incluyen, pero no se limitan
a, células madre, sangre y todos sus componentes, que incluyen
eritrocitos, leucocitos, plaquetas y suero, tejido nervioso central,
que incluye tejido de cerebro y tejido de médula espinal, neuronas
y glia; tejido nervioso periférico, que incluye ganglios, glándula
pituitaria posterior, medula adrenal y pineal; tejido conectivo,
piel, ligamentos, tendones, y fibroblastos; tejido muscular, que
incluye esquelético, liso y tejidos cardiacos o las células de los
mismos; tejido endocrino, que incluye glándula pituitaria anterior,
glándula tiroides, glándula paratiroides, corteza adrenal, páncreas
y sus subpartes, testículos, ovarios, placenta, y las células
endocrinas que son parte de cada uno de estos tejidos; vasos
sanguíneos, que incluyen arterias, venas, capilares y las células de
estos vasos: tejido pulmonar; tejido cardiaco y el órgano completo;
válvulas cardiacas; hígado; riñón, intestinos; hueso, que incluye
osteocitos, osteoblastos y osteoclastos; tejido inmune, que incluye
células sanguíneas, médula ósea y bazo; ojos y sus partes; tejidos
del tracto reproductor; o tejido del tracto urinario.
Los ejemplos de enfermedades, afecciones y
trastornos degenerativos que pueden tratarse con los compuestos
quinoles esteroides relacionados con estrógeno de la presente
invención incluyen: enfermedades y afecciones neurológicas y
neurodegenerativas tales como la enfermedad de Alzheimer, enfermedad
de Parkinson, esclerosis amiotrófica lateral (ALS), esclerosis
múltiple, neuropatía periférica, herpes, ictus, daño traumático, y
diversas consecuencias neurológicas y otras degenerativas de
cirugías neurológicas y de tórax, esquizofrenia, epilepsia,
Síndrome de Down, y Síndrome de Turner; afecciones degenerativas
asociadas con SIDA; diversos trastornos óseos que incluyen
osteoporosis, osteomielitis, enfermedad isquémica ósea, displasia
fibrosa, raquitismo, Síndrome de Cushing y osteoartritis; otros
tipos de artritis y afecciones del tejido conectivo y degeneración
del cartílago que incluyen artritis reumatoide, soriática e
infecciosa; diversas enfermedades infecciosas; trastornos de
consumo muscular tales como distrofia muscular; trastornos de la
piel tales como dermatitis, eccema, soriasis y envejecimiento de la
piel; trastornos degenerativos del ojo que incluyen degeneración
macular y degeneración retiniana; trastornos del oído tales como
otosclerosis; cicatrización afectada de heridas; diversas
enfermedades y afecciones cardiovasculares que incluyen ictus,
isquemia cardiaca, infarto de miocardio, fallo cardiaco crónico o
agudo, disritmias cardiacas, fibrilación auricular, taquicardia
paroxística, fibrilación ventricular y fallo cardiaco congestivo;
trastornos circulatorios que incluyen aterosclerosis, esclerosis
arterial y enfermedad vascular periférica, diabetes (Tipo I o Tipo
II); diversas enfermedades del pulmón, enfermedades y trastornos
que incluyen cáncer de pulmón, neumonía, enfermedad pulmonar
obstructiva crónica (bronquitis, enfisema, asma); trastornos del
tracto gastrointestinal tales como úlceras y hernia; afecciones
dentarias tales como periodontitis; enfermedades del hígado que
incluyen hepatitis y cirrosis; dolencias pancreáticas que incluyen
pancreatitis aguda; enfermedades del riñón tales como fallo renal
agudo y glomerulonefritis; y diversos trastornos de la sangre tales
como amiloidosis vascular, aneurismas, anemia, hemorragia, anemia de
células falciformes, enfermedad autoinmune, síndrome de
fragmentación de hematíes, neutropenia, leucopenia, afasia de médula
ósea, pancitopenia, trombocitopenia y hemofilia. La anterior lista
de enfermedades y afecciones que son tratables de acuerdo con la
presente invención no pretende ser exhaustiva o limitante pero
presenta ejemplos de tales enfermedades y afecciones
degenerativas.
degenerativas.
Las composiciones farmacéuticas basadas en estos
compuestos quinoles esteroides relacionados con estrógeno pueden
formularse para una diversidad de vías de administración, que
incluyen, por ejemplo, formas de administración oral como
comprimidos, cápsulas o similares, o por vía parenteral,
intravenosa, intramuscular, transdérmica, bucal, subcutánea, por
medio de supositorios u otra vía. En ciertas formas de dosificación
farmacéutica, algunos de los compuestos presentes pueden ser más
adecuados que otros compuestos, dependiendo de la vía de
administración y el sitio diana dentro del paciente.
Los procedimientos terapéuticos como se
describen en la presente invención incluyen la administración
controlada a un paciente de una cantidad eficaz de al menos uno o
más de los compuestos que se establecieron anteriormente para
proveer tratamiento antioxidante. La administración a un paciente
puede variar de continua (goteo intravenoso) a intramuscular, hasta
varias administraciones orales por día (por ejemplo Q.I.D.) y puede
incluir administración parenteral, (que incluyen intravenosa e
intramuscular), oral, tópica, subcutánea, transdérmica (que puede
incluir un agente de penetración), bucal y por supositorios, entre
otras vías de administración.
Para preparar las composiciones farmacéuticas de
acuerdo con la presente invención, se mezcla de preferencia una
cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más de los compuestos de
acuerdo con la presente invención con un vehículo opcional
farmacéuticamente aceptable de acuerdo con las técnicas
convencionales de preparación de compuestos farmacéuticos para
producir una dosis. Un vehículo puede tomar una diversidad de formas
dependiendo de la forma de preparación deseada para administración,
por ejemplo, oral o parenteral.
Para formulaciones parenterales, el vehículo
puede comprender agua estéril o solución acuosa de cloruro de sodio
estéril en combinación con otros ingredientes para ayudar a la
dispersión, tales como etanol y otros disolventes farmacéuticamente
aceptables. Por supuesto, cuando las soluciones deben usarse y
mantenerse estériles, las composiciones y vehículos también deben
esterilizarse. Pueden también prepararse suspensiones inyectables,
en cuyo caso pueden usarse vehículos líquidos adecuados, agentes de
suspensión y similares.
Para preparar composiciones farmacéuticas en
forma de dosificación oral de acuerdo con la presente invención,
puede usarse uno o más medios farmacéuticos usuales. Por
consiguiente, para preparaciones orales líquidas tales como
suspensiones, elixires y soluciones, puede usarse vehículos y
aditivos adecuados que incluyen agua, glicoles, aceites, alcoholes,
agentes aromatizantes, conservantes, agentes colorantes y similares.
Para preparaciones orales sólidas tales como polvos, comprimidos,
cápsulas y para preparaciones sólidas tales como supositorios,
pueden usarse vehículos y aditivos adecuados que incluyen almidones,
vehículos azúcares, tales como dextrosa, manitol, lactosa y
vehículos relacionados, diluyentes, agentes de granulado,
lubricantes, ligantes, agentes desagregantes y similares. Si se
desea, los comprimidos o cápsulas pueden recubrirse con un
recubrimiento entérico o de liberación prolongada por técnicas
convencionales.
Los quinoles esteroides relacionados con
estrógeno de la presente invención pueden prepararse usando
reactivos y reacciones conocidos, que incluyen por ejemplo,
oxidación de estradiol o estrona con talio, trifluoroacetato,
tetraacetato de plomo, ácido
para-nitroperoxibenzoico, fotooxigenación y
similares. A continuación se proveen los siguientes Ejemplos
1-10 a modo ilustrativo y no pretenden ser
limitantes.
Los Ejemplos 1-6 son esquemas
preliminares para compuestos profármacos de acuerdo con la presente
invención.
Como comprenderán los técnicos expertos, puede
sintetizarse 10\beta-hidroxiestra-
1,4-dien-3,17-diona
(estrona-quinol) usando una transformación de fenol
a quinol "en un recipiente". El procedimiento de síntesis usa
ácido meta-cloroperbenzoico
(m-CPBA) como oxidante, peróxido de
d[i]ebenzoílo [(PheCO)_{2}O_{2}] como
iniciador de radical y radiación de luz visible que, en disolvente
aprótico a reflujo, produce excelente rendimiento de los quinoles de
la presente invención.
A manera de ejemplo, Milic y col., Tetrahedron
Letters, 37:21, 3765-3768 (1996) describen un
procedimiento "en un recipiente" para sintetizar
estrona-quinol. La oxidación de estrona para
sintetizar
10\beta-hidroxiestra-1,4-dien-3,17-diona
se lleva a cabo calentando una solución en agitación de estrona
(10,00 g, 37,0 mmol), ácido meta-cloroperoxibenzoico
(m-CPBA) (22,53 g, 111,0 mmol; 85% Jansen Chimica),
y (PheCO)_{2}O_{2} (900 mg, 3,70 mmol) en 2 litros de
mezcla de CCl_{4}/Me_{2}CO (4/1) hasta reflujo durante 3 horas
mientras se irradia con una lámpara de tungsteno de 60 Vatios. Tras
evaporar el disolvente, se realiza la extracción con CHCl_{3} (3
veces 200 ml), se lava con NaHCO_{3} (2 veces 100 ml) y H_{2}O
(100 ml), y se seca sobre Na_{2}SO_{4} anhidro. Posteriormente
se somete el residuo a cromatografía en columna de SiO_{2}. La
elución puede llevarse a cabo con PhMe/EtOAc (1/1 y 7/3,
respectivamente) y la cristalización desde benceno produce 5,19 g
(49%) de estrona quinol como agujas incoloras.
Los datos referidos a los estrona quinoles
resultantes, como señalan Milic y col. son los siguientes: pf =
219-221ºC (benceno); Bibl^{4} =
215-217ºC; [\alpha]24,0 546 = +62,
[\alpha]24,0 578 = +68 (c=1,32, chl); UV: \lambdaMeOH
máx = 229 nm (15500); IR(KBr): 3359x, 2941 m, 1736s, 1664s,
1622s, 1601m cm^{-1}; ^{1}H RMN (250 MHz,
DMSO-d_{6}): 7,13 (d,j=10,4 Hz,
H-C(1)), 6,07 (dd, J=10,4, 2,4 Hz,
H-C(2)), 5,92 (irreg. T, J_{4,2,}= 2,4,
J_{4,6\beta} = 1,2 Hz, H-C(4)), 5,67 (s,
H-O, cambiable con D_{2}O), 2,67 (tdd, J=15,2,
6,4, 1,2 Hz, H_{\beta}-C(6)),
1,97-1,83 (m,
H_{\beta}-C(8) y
H_{\beta}-C(11) - de NOE DIFF. Spectrum),
1,30-1,18 (m, H_{\alpha-}C(11)), 0,97 (s,
H_{3}C-C(13)); ^{13}C RMN (62,9 MHz,
DMSO-d_{6}): 220,33 (C(17)), 185,53
(C(3)), 165,09 (C(5)), 150,25 (C(1)), 128,30
(C(2)), 123,09 (C(4)), 70,10 (C(10)),
51,18(C(()), 50,10 (C(14)), 47,75 (C(13)),
35,62 (C(16)), 34,58 (C(8)), 32,19 (C(7)),
31,80(C(6)), 31,03 (C(11)), 22,00
(C(12)), 21,90 (C(15)), 13,73 (C(18)); MS (EI,
m/z): 286(M^{+}, 84),
268(M^{+}-H_{2}O, 39), 150(68),
145(100), 124(75), 107(50), 91(50),
79(54), 55(60); Análisis Calculado para
C_{18}H_{22}O_{3} (286,37): C, 75,50; H, 7,74; Hallado: C =
75,41, H = 7,76.
Los puntos de fusión se determinaron en un
aparato Boetius PMHD y no se corrigieron. Las rotaciones específicas
se midieron en polarímetros Perkin-Elmer 141 MC y
Karl Zeiss Polamat A a las temperaturas deseadas. Los espectros de
IR se registraron en un espectrofotómetro
Perkin-Elmer FT-IR 1725X. Los
espectros UV se registraron en un espectrofotómetro Beckman
DU-420. Los espectros ^{1}H RMN se registraron en
espectrómetros Bruker AM-600, Bruker
AM-250 y Varian Gemini-200 (a 600,
250, y 200 MHz, respectivamente). Los espectros 2D y ^{13}C RMN
se registraron en un espectrómetro Bruker AC-250 (a
62,9 y 250 MHz) en el disolvente indicado usando TMS como patrón
interno. Los desplazamientos químicos se expresan en valores de ppm
(\delta) y las constantes de acoplamiento (J) en Hz. Los
espectros de masa se tomaron en un espectrómetro
Finnigan-MAT 8230. La mención de instrumentos
específicos, configuraciones de instrumentos y medios
cromatográficos tienen una finalidad de servir de ejemplos y no
pretenden ser limitantes.
10\beta-Hidroxiestra-1,4-dien-3,17-diona
(estrona-quinol) puede sintetizarse también a partir
de estrona usando el modelo de Reacción de Fenton. Como saben los
expertos en la técnica, en la reacción de Fenton, la velocidad para
obtener los productos hidroxilados de estrona, incluyendo un
10\beta-hidroxiestra-1,4-dien-3,17-diona
quinol de la presente invención, puede influenciarse por varios
parámetros que incluyen las concentraciones de sustrato,
Fe(II) y H_{2}O_{2}, y el pH del medio. Se incubaron un
ml de solución de ácido sulfúrico, pH 3,0 que contenía 300 \muM
de Fe(II), 1,3 mM de H_{2}O_{2}, y 100 \muM de estrona
a 37ºC durante 10 minutos, y a continuación se extrajo con
diclorometano.
Para evaluar los productos de reacción de
estrona bajo las condiciones anteriormente aplicadas, se realizaron
análisis HPLC y LC/MS, incluyendo los espectros de fragmentación de
MS/MS y MS/MS/MS (MS^{3}). Se lavó la fase orgánica extraída
libre de ácido con agua destilada, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y
se evaporó el disolvente bajo vapor de nitrógeno. La separación por
LC se realizó usando una columna de fase inversa de 5 cm x 2,1 mm
de d.i. Discovery HS C-18 (SUPELCO) con 0,25 ml/min
de agua:metanol:2-propanol:ácido
acético:diclorometano (53:35:5:5:2, v/v) como fase móvil. Se retiró
el residuo de la muestra para análisis y se disolvió en 1 ml de la
fase móvil, a continuación se inyectaron 5 \mul de solución para
análisis. Los espectros de masas se registraron en un instrumento
de cuadrupolo de trampa iónica (LCQ, Finnigan MAT) usando modo de
adquisición de datos dependiente, y APCI en modo de ionización
positivo para registrar los espectros de masa de exploración
completa, espectros de fragmentación MS/MS y MS^{3} tras la
disociación inducida por colisión (CID) con helio como gas
diana.
Aunque no pudieron detectarse catecol estronas
(2-OH-E1 y
4-OH-E1), los análisis por HPLC,
LC/MS y los espectros de fragmentación de MS/MS y MS^{3}
revelaron que el principal producto de la reacción fue
estrona-quinol, como se muestra en las Figuras 2A,
2B y 2C. En particular, la coelución de los resultados para el
control de iones seleccionados (SIM; m/z 287 extraídos de los
espectros de masas de exploración completa registrados
exitosamente), el espectro de masas APCI completo para el pico
cromatográfico (tiempo de retención (t_{R}) = 1,3 minutos), los
espectros de fragmentación MS/MS (pico con m/z 287 aislado como el
ión precursor), y los espectros de fragmentación MS^{3} (pico con
m/z 269) con un compuesto de estrona-quinol de
referencia sintético demostraron inequívocamente que el producto de
reacción era
10\beta-hidroxiestra-1,4-dien-3,17-diona
(estrona-quinol).
Los estudios cinéticos además demostraron que la
oxidación de estrona para dar estrona-quinol se
produce rápidamente bajo las condiciones anteriormente aplicadas.
Los estudios cinéticos revelaron que la constante de velocidad de
segundo orden (k) de la reacción fue de aproximadamente 20
M^{-1}s^{-1} y la semivida de estrona y la velocidad inicial
eran aproximadamente 2,5 minutos y 1 \muM/s, respectivamente.
Otros estudios de los productos de la reacción de Fenton formados a
partir de estrona verificaron que el producto
estrona-quinol no sufrió otra oxidación (es decir,
a un epóxido) y que las catecol estronas detectables permanecieron
relativamente estables bajo las condiciones de Fenton.
Para alquilar el grupo 17-OH de
los presentes quinoles esteroides, se sintetiza inicialmente un
quinol esteroide usando una transformación fenol a quinol "en un
recipiente" o el Modelo de Reacción de Fenton. El
3-OH del compuesto quinol esteroide resultante se
protege como bencil (Bz) éter. El grupo 17-OH del
compuesto 3-bencilquinol esteroide se alquila con
un haluro de alquilo en presencia de hidruro de sodio en
N,N-dimetilformamida (DMF). La posterior
eliminación del grupo protector 3-bencilo puede
realizarse usando procedimientos conocidos por los técnicos
expertos. Por ejemplo, puede eliminarse el grupo protector
3-bencilo usando un hidrogenador Parr con Paladio
en carbón vegetal (Pd/C) como catalizador en ácido acético
glacial.
La Figura 3 ilustra la síntesis de quinoles
relacionados con estrógeno de acuerdo con la presente invención
sustituidos en posición 4 o en posición 2. Como con estrona quinol,
la primera etapa en la síntesis de quinol esteroide relacionado con
estrógeno sustituido en posición 2 o sustituido en posición 4
incluye una transformación de fenol a quinol "en un
recipiente". A modo de ejemplo, la etapa inicial en la síntesis
de
10\beta-hidroxi-4\beta,5\beta-epoxiestr-1-en-3,17-diona
incluye agitar una solución de estrona, m-CPBA, y
(BzO)_{2} en una mezcla de CH_{2}Cl_{2}/Me_{2}CO
(4/1) que se calienta a reflujo durante 24 horas mientras se irradia
con una lámpara de tungsteno de 60 Vatios (no mostrada). A
continuación se somete el compuesto quinol esteroide relacionado con
estrógeno resultante a un compuesto modelo de hidroperóxido de
lípido tal como hidroperóxido de terc-butilo
(tBuOOH) y acetilacetonato de vanadilo
[VO(acac)_{2}].
Se agrega un nucleófilo (por ejemplo bromuro de sodio o metilato de litio) del sustituyente 2- o 4- a los compuestos epóxidos resultantes. El agregado del nucleófilo da como resultado la eliminación espontánea de H_{2}O para proveer un quinol esteroide sustituido en posición 2 o sustituido en posición 4 de acuerdo con la presente invención.
Se agrega un nucleófilo (por ejemplo bromuro de sodio o metilato de litio) del sustituyente 2- o 4- a los compuestos epóxidos resultantes. El agregado del nucleófilo da como resultado la eliminación espontánea de H_{2}O para proveer un quinol esteroide sustituido en posición 2 o sustituido en posición 4 de acuerdo con la presente invención.
La síntesis de quinoles esteroides relacionados
con estrógeno disustituidos en posiciones 2 y 4 se ilustra en la
Figura 4. Como con la síntesis de los sustituidos en posición 2 o en
posición 4, la primera etapa en la síntesis de un compuesto quinol
esteroide relacionado con estrógeno sustituido en posiciones 2 y 4
incluye una transformación de fenol a quinol "en un
recipiente". El quinol esteroide relacionado con estrógeno se
somete posteriormente a un compuesto modelo de hidroperóxido de
lípido tal como hidroperóxido de terc-butilo
(tBuOOH) y acetilacetonato de vanadilo
[VO(acac)_{2}]. Se introduce un nucleófilo (por
ejemplo bromuro de sodio o metilato de litio) a los compuestos
epóxido resultantes para proveer un sustituyente 2- o 4-. El
agregado del nucleófilo da como resultado la eliminación espontánea
de H_{2}O para proveer un quinol esteroide sustituido en posición
2 o sustituido en posición 4 de acuerdo con la presente invención. A
continuación se somete el quinol esteroide sustituido en posición
2- o en posición 4- a cinc en ácido acético para producir los
compuestos fenólicos. Posteriormente se someten los compuestos
fenólicos a una transformación de fenol a quinol "en un
recipiente". A modo de analogía, el compuesto esteroide
relacionado con estrógeno fenólico sustituido en posición 2- o en
posición 4- se somete a un compuesto modelo hidroperóxido de lípido
tal como hidroperóxido de terc-butilo (tBuOOH) y
acetilacetonato de vanadilo [VO(acac)_{2}]. Se
introduce un nucleófilo (por ejemplo bromuro de sodio o metilato de
litio) a los compuestos epóxido resultantes para proveer un
sustituyente 2- o 4-. El agregado del nucleófilo da como resultado
la eliminación espontánea de H_{2}O para proveer un compuesto
esteroide fenólico disustituido en posiciones 2 y 4. El compuesto
esteroide disustituido en posiciones 2 y 4 se agita posteriormente
con m-CPBA y (PhCO)_{2}O_{2} en
CCl_{4}/Me_{2}CO a reflujo mientras se irradia con una lámpara
de tungsteno de 60 Vatios para proveer un quinol esteroide
disustituido en posiciones 2 y 4 de acuerdo con la presente
invención.
La síntesis de quinoles esteroides
trisustituidos en posiciones 1, 2 y 4 se ilustra en la Figura 5.
Como con la síntesis de los sustituidos en posición 2 y 4, la
primera etapa en la síntesis de un compuesto quinol esteroide
relacionado con estrógeno sustituido en posiciones 2 y 4 incluye una
transformación de fenol a quinol "en un recipiente" de un
compuesto de estrógeno sustituido en posición 1. El quinol esteroide
relacionado con estrógeno sustituido en posición 1 resultante se
somete posteriormente a un compuesto modelo de hidroperóxido de
lípido tal como hidroperóxido de terc-butilo
(tBuOOH) y acetilacetonato de vanadilo
[VO(acac)_{2}]. Se introduce un nucleófilo (por
ejemplo bromuro de sodio o metilato de litio) a los compuestos
epóxido resultantes para proveer un sustituyente 2- o 4-. El
agregado del nucleófilo da como resultado la eliminación espontánea
de H_{2}O para proveer un quinol esteroide disustituido en
posiciones 1 y 2 o disustituido en posiciones 1 y 4 de acuerdo con
la presente invención. A continuación se somete el quinol esteroide
disustituido en posiciones 1 y 2 o en posiciones 1 y 4 a cinc en
ácido acético para producir los compuestos fenólicos. Posteriormente
se someten los compuestos fenólicos a una transformación de fenol a
quinol "en un recipiente". A modo de analogía, el compuesto de
estrógeno fenólico disustituido en posiciones 1 y 2 o en posiciones
1 y 4 se somete a un compuesto modelo hidroperóxido de lípido tal
como hidroperóxido de terc-butilo (tBuOOH) y
acetilacetonato de vanadilo [VO(acac)_{2}]. Se
introduce un nucleófilo (por ejemplo bromuro de sodio o metilato de
litio) a los compuestos epóxido resultantes para proveer un
sustituyente 2- o 4-. El agregado del nucleófilo da como resultado
la eliminación espontánea de H_{2}O para proveer un compuesto
esteroide fenólico trisustituido en posiciones 1, 2 y 4. El
compuesto esteroide trisustituido en posiciones 1, 2 y 4 se agita
posteriormente con m-CPBA y
(PhCO)_{2}O_{2} en CCl_{4}/Me_{2}CO a reflujo
mientras se irradia con una lámpara de tungsteno de 60 Vatios para
proveer un quinol esteroide trisustituido en posiciones 1, 2 y 4 de
acuerdo con la presente invención.
Otros numerosos quinoles para estrógenos o
análogos de estrógenos fenólicos de acuerdo con la presente
invención, así como compuestos equivalentes, relacionados, pueden
sintetizarse fácilmente por analogía simplemente modificando las
vías sintéticas descritas anteriormente, usando procedimientos
conocidos por los expertos en la técnica.
Los siguientes Ejemplos 7-9
describen experimentos que demuestran la capacidad de los compuestos
de la presente invención para reducirse para dar una estructura
esteroide fenólica activa y regenerarse capturando radicales
hidroxilo.
Se incubó estrona-quinol (0,1
mM) a 37ºC en tampón fosfato 0,1M, pH 7,5 en presencia de 1 mM de
NADH, NADPH, ascorbato de sodio y glutatión (GSH). Se tomaron
alícuotas (500 \mul) tras 60 minutos de incubación y se
extrajeron con acetato de etilo. Tras eliminar el disolvente, se
analizó en el residuo de los extractos orgánicos combinados el
contenido de estrona por LC/MS/MS usando
etinil-estradiol como patrón interno. Se realizaron
incubaciones de control (0,1 mM de estrona-quinol
en tampón fosfato 0,1 M a pH 7,5 y 37ºC sin agregado de agente
reductor, como se muestra en la Figura 6, así como la incubación con
GSH resultaron libres de estrona incluso tras 12 horas de
incubación. Pudieron detectarse trazas de estrona cuando la
incubación se realizó en presencia de NADH y, especialmente, NADPH,
como se muestra en las Figuras 7A y 7B.
Se incubó estrona-quinol (100
\muM, 286 \mug/ml) a 37ºC en tampón fosfato 0,1 M (pH 7,5) en
presencia de NADPH (1 mM) y microsomas de hígado de rata macho
(concentración proteica final, 1 mg/ml). Se tomaron alícuotas (500
\mul) tras 5 minutos de incubación con microsomas de hígado de
rata. Se vió que el estrona quinol sufrió reducción para formar
estrona. Además, la concentración de estrona alcanzada tras 5
minutos de incubación microsomal fue aproximadamente 12 veces mayor
(15,1 \mug/ml) que el valor de 1,2 \mug/ml medido sin el
agregado de microsomas en el experimento de control relevante (NADPH
presente pero sin agregado de microsomas).
Se realizaron experimentos de microdiálisis
cerebral para establecer que estrona-quinol sufre
reducción a estrona en células neuronales in vivo.
Se anestesiaron ratas Sprague, macho (300 - 400
g), se colocaron en un instrumento estereotáxico, y se les implantó
una cánula guía (cánula guía CMA/12) en el hipocampo ventral bajo
condiciones asépticas. Se fijó la cánula guía al cráneo, junto con
tornillos de acero inoxidable unidos a dos agujeros adicionales, con
acrílico dental. Previo a comenzar el experimento (usualmente
5-7 días tras la implantación de la cánula guía) se
colocaron las ratas en una unidad de contención (BAS, Inc.) durante
al menos 30 minutos. A continuación se insertó una sonda de
microdiálisis (CMA/12, diámetro de membrana de policarbonato: 0,5
mm; longitud de la membrana: 4 mm; corte molecular: 5.000 Da) en el
hipocampo ventral a través de la cánula guía. Tras la inserción, se
perfundió la sonda con un líquido cefalorraquídeo artificial (LCRa)
a un caudal de 1 \mul/min mantenido con una bomba de
microperfusión (BAS BeeStinger) fijada a la sonda por medio de un
entubado de polietileno y un circulador de líquido. Tras equilibrar
durante 50 minutos, se usó un recolector de fracciones automático
refrigerado (BAS HoneyComb) para tomar muestras continuamente del
líquido efluente de la sonda durante 24 horas en fracciones de 60
minutos recogidas en viales de vidrio de 300 \mul (control). A
continuación se reemplazó el líquido cefalorraquídeo artificial por
una solución de perfusión que contenía 10 picomol/\mul de
estrona-quinol en LCRa (Midiendo la disminución en
la concentración de compuesto de la solución perfundida,
estrona-quinol entró al cerebro con un flujo de
aproximadamente 2 picomol/minuto). La recogida de muestras continuó
durante otras 24 horas. Para los análisis
LC/APCI-MS/MS, se combinaron 50 \mul de cada una
de las 20 fracciones (volumen total: 1 ml) de los experimentos de
microdiálisis de control con estrona-quinol,
respectivamente, y se extrajeron con acetato de etilo tras el
agregado de un patrón interno.
Aunque no se detectó estrona en los
microdializados de control, estaba presente en una cantidad
detectable en las muestras recogidas durante la perfusión de las
sondas con la solución LCRa que contenía
estrona-quinol, como se muestra en las Figuras 8A y
8B. Los trazados cromatográficos mostraron el SRM (material de
referencia estándar) m/z 287\rightarrowm/z 269 SRM para
estrona-quinol y m/z 271 m/z 253 para estrona. Se
identificó inequívocamente el pico en t_{R} = 4,5 minutos, basado
en la coelución con un compuesto de referencia auténtico y
espectros de APCI, MS/MS (dados junto con el origen de los
fragmentos principales observados) y MS^{3} idénticos, que la
estrona.
Los siguientes Ejemplos 10 y 11 describen
experimentos que demuestran la equivalencia de bioactividad y
eficacia de los quinoles de la presente invención comparados con el
compuesto de estrógeno fenólico.
Se cultivaron células HT-22 en
medio de Eagle Modificado por Dulbecco suplementado con 10% de suero
fetal de bovino. Los experimentos se realizaron en placas de
cultivo de 96 pocillos conteniendo aproximadamente 5.000
células/pocillo determinado por medio de un hemocitómetro de
Neubauer. Se incubaron las células durante 24 horas. Se disolvieron
10\beta-hidroxi-17\beta-butoxiestra-1,4-dien-3-ona
y la estructura precursora esteroide fenólica
3-hidroxi-17\beta-butoxiestra-1,3,5-trieno
cada uno en etanol absoluto y se diluyeron con el medio de cultivo,
las placas se incubaron durante 24 horas tras el agregado de
glutamato de sodio (20 mM). La viabilidad celular se cuantificó por
medio del ensayo de Calcein AM en una solución de tampón
fosfato.
A concentraciones de
10\beta-hidroxi-17\beta-butoxiestra-1,4-dien-3-ona
de 1 \muM y 10 \muM, resultó demostrable la actividad
neuroprotectora contra estrés oxidativo inducido por glutamato en
células neuronales HT22, como se muestra en la Figura 9. Aunque el
compuesto
10\beta-hidroxi-17\beta-butoxiestra-1,4-dien-3-ona
no tiene un anillo A fenólico considerado como un componente
esencial para la actividad barredora de radicales, el requerimiento
estructural para la actividad barredora de radicales, tal como un
resto fenólico, se provee por medio de la activación por reducción.
Esencialmente, el quinol
10\beta-hidroxi-17\beta-butoxiestra-1,4-dien-3-ona
de la presente invención sirve como un profármaco para la
estructura esteroide activa
3-hidroxi-17\beta-butoxiestra-1,3,5-trieno.
La restauración aguda del flujo sanguíneo tras
la isquemia lleva a la producción de ROS (Forman, L. G. y col.,
"Augmentation of nitric oxide, superoxide, and peroxynitrite
production during cerebral ischemia and reperfusion in the rat",
Neurochem. Res., 23:141-148 (1998); Peters, O. y
col., "Increased formation of reactive oxygen species after
permanent and reversible middle cerebral artery occlusion in the
rat", J. Cereb. Blood Flow Metab., 18:196-205
(1998); y Mason, R. B. y col., "Production of reactive oxygen
species after reperfusion in vitro and in vivo:
protective effect of nitric oxide", J. Neurosurg.,
93:99-107 (2000)) que son directamente tóxicas para
las neuronas. El barrido terapéutico, no enzimático de radicales
libres puede ser una estrategia viable para la reducción del daño
tisular cerebral isquémico.
Se aclimataron ratas
Sprague-Dawley hembra (con un peso de 200 - 250 g,
Charles River, Wilmington, MA) durante tres días previo a la
cirugía. Se realizó ovariectomía bilateral 2 semanas antes de la
oclusión de la arteria cerebral media (MCAO). Se anestesiaron los
animales por inyección intraperitoneal de ketamina (60 mg/kg) y
xilazina (10 mg/kg). La temperatura rectal se mantuvo en 37,5 \pm
0,5ºC durante el procedimiento. Se ocluyó la arteria cerebral media
durante una hora y posteriormente se retiró la sutura para permitir
la reperfusión. Se disolvieron estrona y un quinol de la presente
invención (E1-quinol) en aceite de maíz y se
administraron en una dosis de 200 \mug/kg por vía subcutánea (sc)
2 horas previo al comienzo de la MCAO de 1 hora.
Se decapitó a los animales 24 horas tras la
reperfusión. Se recogieron los cerebros y se colocaron en una
matriz cerebral para realizar cortes (Harvard Apparatus, Holliston,
MA). Se realizaron siete cortes a 3, 5, 7, 9, 11, 13 y 15 mm
posteriores al bulbo olfativo. Se incubaron los cortes durante 30
minutos en solución de cloruro de
2,3,5-trifeniltetrazolio al 2% a 37ºC, y a
continuación se fijaron en formalina al 10%. Se fotografiaron los
cortes teñidos y posteriormente se midió el volumen de lesión
isquémica (Image-Pro Plus 4.1, Media Cybernetics,
Silver Spring, MD).
Cuando se administró previo a la isquemia, el
estrógeno (estrona) redujo significativamente el volumen de infarto
en un 53% (P<0,05) comparado con el control tras MCAO transitoria
seguida por reperfusión de 24 horas en ratas ovariectomizadas.
Además, el E1-quinol de la presente invención tuvo
la misma potencia que el estrógeno precursor (estrona) para reducir
la lesión, como se ilustra en la Figura 10. Los datos de la Figura
10 están expresados como media \pm EEM. Se hicieron evaluaciones
estadísticas con análisis ANOVA de una vía seguido por pruebas de
Dunnett post hoc (comparación con un único grupo control) o
de Student-Newman-Keuls
(comparaciones múltiples).
Este Ejemplo y los estudios previos demuestran
que los estrógenos naturales empleados en concentraciones
suprafisiológicas (Yang, S. H. y col., “Estradiol exerts
neuroprotective effects when administered after ischemic insult”,
Stroke, 31:745-749 (2000) y Shi, J. y col.,
Estrogens decrease reperfusion-associated cortical
ischemic damage: an MRI analysis in a transient focal ischemia
model, Stroke, 32:987-992 (2001)) y análogos de
estrógeno sin afinidad con receptores de estrógeno (Liu, R. y col.,
“Neuroprotective effects of a novel
non-receptor-binding estrogen
analogue: in vitro and in vivo analysis”, Stroke,
33:2485-2491 (2002)) son neuroprotectores. Por
consiguiente, el efecto observado tanto con estrona como con
E1-quinol de la presente invención pueden deberse en
parte a un mecanismo antioxidante en este Ejemplo. El
E1-quinol de la presente invención mostró una
disminución del daño isquémico asociado con reperfusión equivalente
a la obtenida con el estrógeno precursor (estrona) en el paradigma
in vivo, lo que indica la conversión del quinol en el
compuesto de estrógeno de anillo A fenólico biológicamente activo,
neuroprotector. Además, los quinoles de la presente invención son
farmacéuticamente más aceptables (es decir, como profármacos)
debido a su capacidad in vivo de ser menos lipófilos, más
resistentes al metabolismo oxidativo, más seguros, menos tóxicos y
con menos probabilidad de causar efectos hormonales no deseados que
los compuestos estrógeno/fenólicos precursores.
Claims (12)
1. Un quinol que tiene la estructura general
en la
que
R se selecciona del grupo constituido por H,
alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, heteroarilo, alquilamino,
hidroxialquilo, alcoxialquilo y alquilarilo;
X se selecciona del grupo constituido por
hidrógeno, isopropilo, alquilo, alquenilo, alquinilo, carbociclo,
cicloalquilo, arilo, heterociclo, heteroarilo, alquilamino,
hidroxialquilo, alcoxialquilo, y un hidrocarburo lineal o
ramificado de 1-15 átomos de carbono de longitud,
que puede opcionalmente incluir uno o más heteroátomos en la
cadena;
Y se selecciona del grupo constituido por
isopropilo, alquilo, alquenilo, alquinilo, carbociclo, cicloalquilo,
arilo, heterociclo, heteroarilo, alquilamino, hidroxialquilo,
alcoxialquilo, y un hidrocarburo lineal o ramificado de
1-15 átomos de carbono de longitud, que puede
opcionalmente incluir uno o más heteroátomos en la cadena; y
Z se selecciona del grupo constituido por
hidrógeno, isopropilo, alquilo, alquenilo, alquinilo, carbociclo,
cicloalquilo, arilo, heterociclo, heteroarilo, alquilamino,
hidroxialquilo, alcoxialquilo, y un hidrocarburo lineal o
ramificado de 1-15 átomos de carbono de longitud,
que puede opcionalmente incluir uno o más heteroátomos en la
cadena.
2. El quinol de acuerdo con la reivindicación 1,
en el que R es una cadena de alquiloC_{1-20}
lineal o ramificada y X es hidrógeno.
3. Un procedimiento in vitro para
producir un compuesto de estrógeno biológicamente activo, que
comprende proveer un quinol de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2,
y convertir dicho quinol en un compuesto de estrógeno
biológicamente activo por medio de reducción catalizada por
enzimas.
4. Un procedimiento in vitro para
producir un quinol regenerado, que comprende el procedimiento de
acuerdo con la reivindicación 3, y regenerar dicho quinol a través
de la captura de una especie reactiva de oxígeno de radicales
libres por medio de dichos compuestos de estrógeno biológicamente
activos.
5. Una composición farmacéutica que comprende un
quinol que se convierte en un compuesto de estrógeno biológicamente
activo a través de la reducción catalizada por enzimas de acuerdo
con cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, en la que dicha
composición además comprende un vehículo farmacéuticamente
aceptable.
6. La composición farmacéutica de acuerdo con la
reivindicación 5, en la que la reducción catalizada por enzimas se
produce con NADH o NADPH como un agente reductor.
7. El uso de un quinol que se convierte en un
compuesto de estrógeno biológicamente activo a través de la
reducción catalizada por enzimas de acuerdo con cualquiera de las
reivindicaciones 1 ó 2, para la producción de un medicamento para
el tratamiento o prevención de una afección patológica asociada con
especies reactivas de oxígeno de radicales libres.
8. El uso de acuerdo con la reivindicación 7,
que además comprende administrar el quinol por una vía seleccionada
del grupo constituido por vía oral, bucal, intramuscular,
transdérmica, intravenosa y subcutánea.
9. El uso de acuerdo con la reivindicación 7, en
el que el quinol se regenera cuando los compuestos de estrógeno
biológicamente activos capturan una especie reactiva de oxígeno de
radicales libres.
10. El uso de acuerdo con la reivindicación 7,
en el que la reducción catalizada por enzimas se produce con NADH o
NADPH como un agente reductor.
11. El uso de acuerdo con la reivindicación 7,
en el que la afección patológica asociada con especies reactivas de
oxígeno de radicales libres es una enfermedad neurodegenerativa.
12. El uso de acuerdo con la reivindicación 7,
en el que los compuestos de estrógeno biológicamente activos se
proveen al mamífero para el tratamiento o prevención de afecciones
cardiacas o el tratamiento o prevención de afecciones asociadas con
los huesos.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US36958902P | 2002-04-01 | 2002-04-01 | |
| US369589P | 2002-04-01 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2279946T3 true ES2279946T3 (es) | 2007-09-01 |
Family
ID=28791966
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES03721508T Expired - Lifetime ES2279946T3 (es) | 2002-04-01 | 2003-04-01 | Quinoles esteroideos como profarmacos de antioxidantes. |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7026306B2 (es) |
| EP (1) | EP1490392B1 (es) |
| AT (1) | ATE353907T1 (es) |
| AU (1) | AU2003224816A1 (es) |
| DE (1) | DE60311779T2 (es) |
| ES (1) | ES2279946T3 (es) |
| PT (1) | PT1490392E (es) |
| WO (1) | WO2003084978A1 (es) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2287184T3 (es) * | 2000-11-03 | 2007-12-16 | Washington University | Estructuras aromaticas modificadas con sustituyentes hidroxi-, que tienen actividad citoprotectora. |
| US7186707B2 (en) | 2002-04-01 | 2007-03-06 | University Of Florida | Prodrugs for use as ophthalmic agents |
| US20070213310A1 (en) | 2002-04-01 | 2007-09-13 | Laszlo Prokai | Prodrugs for Use as Ophthalmic Agents |
| US7300926B2 (en) | 2002-04-01 | 2007-11-27 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Steroidal quinols and their use for estrogen replacement therapy |
| ATE353907T1 (de) | 2002-04-01 | 2007-03-15 | Univ Florida | Steroidische chinole als antioxidantien-vorstufen |
| WO2004069248A1 (en) * | 2002-12-09 | 2004-08-19 | University Of Florida | Prodrugs for use a ophthalmic agents |
| AU2004226876A1 (en) * | 2003-04-03 | 2004-10-14 | Prana Biotechnology Ltd | Treatment of neurological conditions |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2910486A (en) * | 1957-12-20 | 1959-10-27 | Searle & Co | 10-hydroxyestra-1, 4-diene-3, 17-dione and acetate |
| US2950291A (en) * | 1958-12-22 | 1960-08-23 | Searle & Co | 17-oxygenated estra-1, 3, 5(10)-triene-1, 4-diols, their esters, and a corresponding quinone |
| FR2644789B1 (fr) * | 1989-03-22 | 1995-02-03 | Roussel Uclaf | Nouveaux steroides 19-nor, 3-ceto comportant une chaine en 17 aminosubstituee, leur procede de preparation et les intermediaires de ce procede, leur application comme medicaments et les compositions pharmaceutiques les contenant |
| US6319914B1 (en) * | 1993-11-05 | 2001-11-20 | Apollo Biopharmaceuticals, Inc. | Cytoprotective effect of polycyclic phenolic compounds |
| US5554601A (en) * | 1993-11-05 | 1996-09-10 | University Of Florida | Methods for neuroprotection |
| US6197833B1 (en) * | 1995-07-24 | 2001-03-06 | Apollo Biopharmaceutics, Inc. | Neuroprotective effects of polycyclic phenolic compounds |
| US5859001A (en) * | 1996-01-11 | 1999-01-12 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Neuroprotective effects of polycyclic phenolic compounds |
| US5395831A (en) * | 1994-04-08 | 1995-03-07 | American Home Products Corporation | Treating cardiac disorders with Δ9(11)-dehydro-8-isoestrone |
| EP0841929B1 (en) * | 1995-08-02 | 2003-05-07 | Darwin Discovery Limited | Quinolones and their therapeutic use |
| US7488723B2 (en) * | 2001-09-05 | 2009-02-10 | Alcon, Inc. | Use of non-feminizing estrogens as treatment for retinal vascular diseases |
| US20040214806A1 (en) * | 2002-09-03 | 2004-10-28 | Iok-Hou Pang | Use of non-feminizing estrogens as retinoprotective agents for the treatment of glaucoma |
| CA2468342A1 (en) * | 2001-12-05 | 2003-06-12 | Mitokor, Inc. | Use of polycyclic phenolic compounds for the treatment of opthalmic diseases |
| ATE353907T1 (de) | 2002-04-01 | 2007-03-15 | Univ Florida | Steroidische chinole als antioxidantien-vorstufen |
-
2003
- 2003-04-01 AT AT03721508T patent/ATE353907T1/de not_active IP Right Cessation
- 2003-04-01 EP EP03721508A patent/EP1490392B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-04-01 WO PCT/US2003/009983 patent/WO2003084978A1/en active IP Right Grant
- 2003-04-01 US US10/405,413 patent/US7026306B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-04-01 ES ES03721508T patent/ES2279946T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-04-01 DE DE60311779T patent/DE60311779T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2003-04-01 PT PT03721508T patent/PT1490392E/pt unknown
- 2003-04-01 AU AU2003224816A patent/AU2003224816A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PT1490392E (pt) | 2007-04-30 |
| ATE353907T1 (de) | 2007-03-15 |
| EP1490392A1 (en) | 2004-12-29 |
| US20030229060A1 (en) | 2003-12-11 |
| AU2003224816A1 (en) | 2003-10-20 |
| DE60311779D1 (de) | 2007-03-29 |
| US7026306B2 (en) | 2006-04-11 |
| DE60311779T2 (de) | 2007-11-22 |
| EP1490392B1 (en) | 2007-02-14 |
| WO2003084978A1 (en) | 2003-10-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Halilbasic et al. | Side chain structure determines unique physiologic and therapeutic properties of norursodeoxycholic acid in Mdr2−/− mice | |
| US7012069B2 (en) | Liver X receptor agonists | |
| JP4630195B2 (ja) | ウルソデオキシコール酸の硫酸コンジュゲートと、炎症性障害及び他の用途におけるそれらの有利な使用 | |
| US7300926B2 (en) | Steroidal quinols and their use for estrogen replacement therapy | |
| JP3333210B2 (ja) | 新規プレドニソロン誘導体および該化合物を含有する薬剤 | |
| US20070155711A1 (en) | Prodrugs for use as ophthalmic agents | |
| ES2279946T3 (es) | Quinoles esteroideos como profarmacos de antioxidantes. | |
| EP0676410B1 (en) | Bile acids derivatives useful in the therapy of the biliary calculosis from cholesterol and of the pathologies caused by cholestasis | |
| JPH0692989A (ja) | Δ２２−コレスタ−５，７，２２−トリエン−１α，３β，２４−トリオール化合物 | |
| CA2414583C (en) | Neuroprotective 7-beta-hydroxysteroids | |
| Robben et al. | Effects of intestinal microbial bile salt sulfatase activity on bile salt kinetics in gnotobiotic rats | |
| Pellicciari et al. | Bile acids with a cyclopropyl-containing side chain. 1. Preparation and properties of 3. alpha., 7. beta.-dihydroxy-22, 23-methylene-5. beta.-cholan-24-oic acid | |
| AU703814B2 (en) | Antioxidant | |
| WO2020128514A1 (en) | 2-fluorinated bile acids for the treatment of neurodegenerative diseases | |
| LU84061A1 (fr) | Mercapto-acyl-carnitines,leur procede de preparation et compositions pharmaceutiques en contenant | |
| Fernández et al. | Cyclosporin A-induced cholestasis in the rat: beneficial effects of S-adenosyl-L-methionine | |
| AU744098B2 (en) | Use of 17beta-dihydroequilenin as an antioxidant | |
| US7022688B1 (en) | Use of 17β-dihydroequilenin as an antioxidant | |
| US20020035100A1 (en) | Alkyl ether modified polycyclic compounds having a terminal phenol and uses for protection of cells | |
| Leonards et al. | Comparative studies on the antioxidant properties of CGP 2881 and probucol in V/LDL isolated from cholic acidfed rats | |
| Hasinoff | Protection against doxorubicin-induced cardiotoxicity by ICRF-187 (Dexrazoxane) | |
| Feldman et al. | CGP 2881 inhibits the oxidation of low density lipoproteins | |
| NZ336341A (en) | 17alpha-dihydroequilenin or salts of 17alpha-dihydroequilenin-3-sulfate ester for use as a medical antioxidant | |
| JPS6132319B2 (es) |