ES2263948T3 - Dispositivo para la realizacion de una preparacion citologica sobre un portaobjetos. - Google Patents

Dispositivo para la realizacion de una preparacion citologica sobre un portaobjetos.

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ES2263948T3 ES03700798T ES03700798T ES2263948T3 ES 2263948 T3 ES2263948 T3 ES 2263948T3 ES 03700798 T ES03700798 T ES 03700798T ES 03700798 T ES03700798 T ES 03700798T ES 2263948 T3 ES2263948 T3 ES 2263948T3
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Abstract

Dispositivo (1) para la realización de una preparación citológica sobre un portaobjetos (2) a partir de una muestra que se encuentra en forma de suspensión de células, comprendiendo dicho dispositivo un recipiente (3) destinado a contener una suspensión de células, estando conectado el fondo (4) de dicho recipiente a un sistema de aspiración/filtración que comprende una membrana filtrante (5), un soporte (6) para dicha membrana y unos medios de aspiración, caracterizado porque comprende unos medios para aspirar/filtrar a través de la membrana una fracción predefinida de una suspensión de células contenida en el recipiente, correspondiendo dicha fracción a la cantidad destinada a ser preparada.

Description

Dispositivo para la realización de una preparación citológica sobre un portaobjetos.
Campo de la invención
La presente invención se refiere a un dispositivo para la realización de una preparación citológica sobre un portaobjetos a partir de una muestra que se encuentra en forma de suspensión de células. El dispositivo comprende un recipiente destinado a contener una suspensión de células, estando conectado el fondo de dicho recipiente a un sistema de aspiración/filtración que comprende una membrana filtrante, un soporte para dicha membrana y unos medios de aspiración.
Estado de la técnica
Un dispositivo del tipo citado anteriormente sirve para automatizar la realización de una preparación citológica sobre un portaobjetos a partir de una muestra que se encuentra en forma de suspensión de células a la vez que se mejora su calidad. En efecto, tal preparación no tiene valor para la observación al microscopio más que si las células están dispuestas sobre la platina de forma adecuada, es decir que éstas estén separadas unas de otras en número suficiente, pero no excesivo, y no resulten dañadas.
Las suspensiones de partida presentan una gran variación en la concentración de células (células/ml), siendo útil contar con un dispositivo que se adapte a esta concentración para proporcionar preparaciones de calidad.
La patente US nº 4.395.493 de Coulter Electronics, Inc. presenta un dispositivo para la realización de una preparación citológica sobre un portaobjetos a partir de una muestra que se encuentra en forma de suspensión de células.
El dispositivo comprende una fuente de presión que está destinada a inducir un flujo de la suspensión de un primer recipiente en dirección a un segundo recipiente, estando provisto el trayecto de un contador de células. Cuando el segundo recipiente recibe dicha suspensión de células, se le dispone en contacto con una fracción de un rodillo de membrana filtrante. Durante este tiempo, se aplica un vacío a través del filtro para no retener más que el filtrado sobre este último. Una vez filtrada la suspensión, la fracción del rodillo cargada de filtrado se desplaza en dirección a una prensa que transfiere dicho filtrado del rodillo de membrana filtrante hacia un portaobjetos.
Este complejo dispositivo adolece del inconveniente de tener varios elementos que conducen la suspensión entre el primer recipiente y la membrana filtrante que recibe el filtrado. Esto tiene como consecuencia una contaminación de todos estos elementos durante una preparación citológica. Por tanto, la limpieza entre cada preparación citológica debe ser muy importante, lo que necesita tiempo y grandes medios.
La patente US nº 5.143.627 de Cytyc Corporation presenta un dispositivo para la realización de una preparación citológica sobre un portaobjetos a partir de una muestra que se encuentra en forma de suspensión de células. El dispositivo comprende un dispositivo de filtración que se sumerge en la suspensión de células.
Al estar este dispositivo, por una parte, obligado a sufrir una limpieza importante entre cada preparación, siendo esto debido a la complicación del funcionamiento de dicho dispositivo, éste, por otra parte, está previsto para los laboratorios de análisis, que tienen regularmente un gran número de muestras a preparar. En efecto, al ser este dispositivo relativamente complejo, tiene un precio elevado.
La solicitud de patente europea EP 743 524 de Costar Italia S.r.l. presenta igualmente un dispositivo para la realización de una preparación citológica sobre un portaobjetos a partir de una muestra que se encuentra en forma de suspensión de células.
A pesar de que este dispositivo se asemeja en general por su simplicidad y su disposición al dispositivo de la presente invención, no está, por su parte, lo bastante elaborado para la realización de portaobjetos constantes y de calidad. En efecto, no permite, por ejemplo, la filtración de una fracción predefinida de una suspensión de células, lo que obliga al operador a pipetear la cantidad exacta que desea utilizar para la preparación. Por otra parte, este dispositivo no revela ningún sistema de transferencia del filtrado de la membrana hacia el portaobjetos, haciéndose la transferencia sustancialmente de manera manual, lo que no es una garantía de calidad y de constancia.
Sumario de la invención
La presente invención tiene el mérito de remediar particularmente los problemas citados anteriormente ofreciendo un dispositivo simple que permite la puesta a disposición a precio moderado de un dispositivo funcional para laboratorios de pequeña a mediana envergadura.
Más precisamente, la invención se refiere a un dispositivo según la reivindicación 1 para la realización de una preparación citológica sobre un portaobjetos a partir de una muestra que se encuentra en forma de suspensión de células.
El operador encargado de la realización de una preparación citológica observa la muestra recibida en forma de suspensión de células. Según el grado de opacidad de la suspensión, que corresponde a la concentración celular de la muestra, define la fracción de la suspensión destinada a prepararse. Así, por ejemplo, si la suspensión es normal (clara o ligeramente turbia), define una fracción de 6 ml. Si la suspensión es muy opaca (densidad celular demasiado importante), define una fracción de 3 ml.
El dispositivo según la invención puede comprender un sistema pivotante constituido de manera que permita un pivotamiento del recipiente y/o de la membrana filtrante.
El pivotamiento del recipiente, junto con la membrana filtrante, sirve para recuperar el excedente de suspensión después de la aspiración/filtración de la fracción predefinida de suspensión. La suspensión puede recuperarse en el frasco original que contenía la muestra a analizar; por tanto, pueden efectuarse otros análisis sobre la misma muestra. Pueden preverse otros medios de recuperación de la suspensión por basculación del recipiente.
El sistema pivotante puede permitir además la transferencia del filtrado contenido en la membrana filtrante hacia el portaobjetos. Estos medios suplementarios permiten la realización de preparaciones constantes y de calidad, considerando que la transferencia manual del filtrado sobre un portaobjetos depende fuertemente del trabajo del operador. Así, por ejemplo, ciertas células se dañarán si el operador efectúa un movimiento lateral cuando la membrana filtrante toque el portaobjetos.
El dispositivo según la invención puede comprender un soporte del portaobjetos dispuesto de manera que la membrana se coloque arriba tras su basculación.
El dispositivo según la invención puede disponer, además, de medios de inyección de aire para despegar la membrana de su soporte y/o adherirla sobre una platina que se encuentra en el soporte del portaobjetos una vez que la membrana está situada sobre el soporte del portaobjetos.
Puede preverse una masa para prensar el filtrado de la suspensión sobre una platina dispuesta en el soporte del portaobjetos. Este elemento permite una mejor adhesión del filtrado a la platina. Igualmente, pueden preverse unos medios para aplicar esta masa sobre la platina según una duración predefinida y para retirar la masa automáticamente una vez que dicha duración ha terminado.
Estos medios son útiles para descargar al operador, que no debe así estar presente para cronometrar la duración necesaria y retirar la masa. La duración preestablecida ventajosamente se sitúa en aproximadamente 20 segundos.
La masa puede comprender una parte separable para poder utilizar, cuando proceda, una masa más pequeña. En efecto, se ha constatado que la masa para la elaboración de una preparación óptima se sitúa en el entorno de 150 g para las preparaciones ginecológicas y en el entorno de 50 g para las otras preparaciones.
El recipiente, elemento de la invención, es de preferencia de forma troncocónica, disminuyendo su sección en dirección al fondo, comprendiendo el fondo una abertura bordeada en su cara externa por una abolladura destinada a asegurar un contacto estanco entre el recipiente y el sistema de aspiración.
En efecto, se ha constatado que una forma ligeramente troncocónica permite un mejor flujo de la suspensión en dirección a la abertura presente en el fondo del recipiente.
Por otra parte, dicha abolladura destinada a asegurar un contacto estanco entre el recipiente y el sistema de aspiración presenta una mejora con respecto al recipiente de la solicitud de patente europea EP 743 524 de COSTAR ITALIA S.r.l.
En el presente dispositivo puede estar previsto un sistema de canalización de producto fijador hacia el recipiente. Así, la preparación citológica obtenida está lista para utilizarse después de que haya tenido lugar la transferencia del filtrado hacia el portaobjetos.
El conjunto de dispositivos puede disponerse sobre un mismo aparato.
El dispositivo o conjunto puede estar comprendido dentro de una caja provista de una tapa.
La realización de una preparación citológica sobre un portaobjetos a partir de una muestra que se encuentra en forma de suspensión de células se obtiene por el procedimiento según la reivindicación 13, que comprende una etapa durante la cual se vierte una suspensión en un recipiente y después se aspira/filtra ésta a través de una membrana filtrante dispuesta sobre un soporte a través de una abertura dispuesta en el fondo del recipiente, caracterizándose dicho procedimiento porque se aspira/filtra una fracción predefinida de la suspensión de células contenida en el recipiente.
Previamente a la aspiración/filtración, puede introducirse un producto fijador en la suspensión contenida dentro del recipiente.
Después de la aspiración/filtración, el recipiente puede hacerse pivotar y su contenido puede recuperarse en unos medios de recuperación.
Después de haber retirado el recipiente, la membrana puede hacerse pivotar de manera que se coloque sobre un portaobjetos que se encuentra en su soporte.
Para despegar la membrana de su soporte y/o adherir la membrana a la platina, se puede proceder a la inyección de aire.
A continuación, puede aplicarse una masa sobre la membrana durante un tiempo predefinido a fin de mejorar su adherencia a la platina; la masa puede retirarse automáticamente una vez terminado el tiempo predefinido.
Por otro lado, la activación de la masa puede desencadenar la limpieza del soporte de la membrana.
A continuación se describe con mayor detalle una forma de realización preferida para una mejor comprensión/ilustración de la invención. Sin embargo, esta forma de realización no limita de ningún modo el alcance de la invención.
Breve descripción de las figuras
A continuación, se describe una forma de realización no limitativa de la invención por medio de las figuras siguientes:
Las figuras 1, 2, 3 y 4 ilustran una vista en perspectiva del dispositivo según la invención en diferentes etapas de su funcionamiento.
Las figuras 5, 6 y 7 ilustran una vista frontal de unos medios para aplicar la masa sobre el portaobjetos.
Las figuras 8 y 9 ilustran una vista en perspectiva del recipiente destinado a contener una suspensión de células. La figura 8 ilustra una vista desde arriba, mientras que la figura 9 ilustra una vista desde abajo que muestra el fondo del recipiente.
Cada elemento común a cada figura lleva la misma referencia numérica.
La figura 1 ilustra el dispositivo (1) según la invención que comprende un portaobjetos (2) colocada sobre un soporte de portaobjetos (9). Unos medios de recuperación de la suspensión (8) están fijados a una cara de dicho soporte (9). El dispositivo comprende además una masa (10) y unos medios (11) para aplicar la masa sobre el portaobjetos (2). Un sistema pivotante (7) permite el pivotamiento del recipiente (3) y/o de la membrana filtrante (no visible en esta figura). El dispositivo está dotado de un sistema de transporte de producto fijador (15). Esta figura ilustra la etapa durante la cual puede verterse una suspensión de células dentro del recipiente (3) para que sea aspirada/filtrada a través de una membrana filtrante (no visible en esta figura).
La figura 2 ilustra el dispositivo (1) según la invención durante la etapa de pivotamiento del recipiente (3) después de la aspiración/filtración de la suspensión. Esta etapa tiene por objeto la recuperación del contenido del recipiente en los medios de recuperación (8).
La figura 3 ilustra el dispositivo (1) según la invención en la etapa siguiente, durante la cual se ha retirado el recipiente (3) vacío y se ha llevado el sistema pivotante (7) a la horizontal. La membrana filtrante (5) y su soporte (6) son ahora visibles.
La figura 4 ilustra el dispositivo (1) según la invención en la etapa siguiente, durante la cual se ha hecho pivotar a la membrana filtrante (no visible en esta figura) con ayuda del sistema pivotante (7), de manera que se posicione sobre el soporte del portaobjetos
(9).
En esta fase, se inyecta aire para despegar la membrana de su soporte y/o adherir la membrana sobre la platina.
Las figuras 5 a 7 ilustran la etapa siguiente, que consiste en la aplicación durante un tiempo definido de una masa (10) sobre la membrana (5). La figura 5 representa la posición antes de la aplicación de la masa, la figura 6 durante la aplicación de la masa y la figura 7 después de la retirada automática de la masa. La masa puede estar dotada de una parte desprendible (2).
La figura 8 ilustra el recipiente (3) troncocónico según la invención.
La figura 9 ilustra el recipiente (3) según la invención comprendiendo un fondo (4) dotado de una abertura (13) bordeada en su superficie externa por una abolladura (14).

Claims (19)

1. Dispositivo (1) para la realización de una preparación citológica sobre un portaobjetos (2) a partir de una muestra que se encuentra en forma de suspensión de células, comprendiendo dicho dispositivo un recipiente (3) destinado a contener una suspensión de células, estando conectado el fondo (4) de dicho recipiente a un sistema de aspiración/filtración que comprende una membrana filtrante (5), un soporte (6) para dicha membrana y unos medios de aspiración, caracterizado porque comprende unos medios para aspirar/filtrar a través de la membrana una fracción predefinida de una suspensión de células contenida en el recipiente, correspondiendo dicha fracción a la cantidad destinada a ser preparada.
2. Dispositivo según la reivindicación 1, que comprende un sistema pivotante (7) constituido de manera que permita un pivotamiento del recipiente y/o de la membrana filtrante.
3. Dispositivo según la reivindicación anterior, que comprende unos medios de recuperación (8) de la suspensión, que están dispuestos de manera que se recupere la suspensión contenida en el recipiente durante la basculación de éste.
4. Dispositivo según la reivindicación 2 ó 3, que comprende un soporte (9) del portaobjetos dispuesto de tal manera que la membrana está dispuesta por encima después de su basculación.
5. Dispositivo según la reivindicación anterior, que comprende unos medios de inyección de aire para despegar la membrana de su soporte y/o adherirla sobre una platina que se encuentra sobre el soporte del portaobjetos, una vez que la membrana está dispuesta sobre el soporte del portaobjetos.
6. Dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 4 y 5, que comprende una masa (10) para prensar el filtrado de la suspensión sobre una platina dispuesta en el soporte del portaobjetos.
7. Dispositivo según la reivindicación anterior, que comprende unos medios (11) para aplicar la masa sobre la platina según una duración predefinida y para retirar la masa automáticamente una vez que ha terminado dicha duración.
8. Dispositivo según la reivindicación 6 ó 7, caracterizado porque la masa comprende una parte separable (12) de manera que se pueda utilizar, cuando proceda, una masa más pequeña.
9. Dispositivo según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el recipiente (3) tiene forma troncocónica, disminuyendo su sección en dirección al fondo (4), comprendiendo el fondo una abertura (13) bordeada en su cara externa por una abolladura (14) destinada a asegurar un contacto estanco entre el recipiente y el sistema de aspiración.
10. Dispositivo según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende un sistema de canalización de producto fijador (15) hacia el recipiente.
11. Conjunto de dispositivos según cualquiera de las reivindicaciones anteriores dispuestos en un mismo aparato.
12. Dispositivo o conjunto según cualquiera de las reivindicaciones anteriores comprendido dentro de una caja provista de una tapa.
13. Procedimiento para la elaboración de una preparación citológica sobre un portaobjetos (2) a partir de una muestra que se encuentra en forma de suspensión de células, comprendiendo el procedimiento una etapa durante la cual se vierte una suspensión dentro de un recipiente (3), y después se aspira/filtra ésta a través de una membrana filtrante (5) dispuesta sobre un soporte (6) a través de una abertura (13) dispuesta en el fondo (4) del recipiente, estando caracterizado dicho procedimiento porque se aspira/filtra una fracción predefinida de la suspensión de células contenida en el recipiente, correspondiendo dicha fracción a la cantidad destinada a ser preparada.
14. Procedimiento según la reivindicación anterior, caracterizado porque, después de la etapa de aspiración/filtración, se hace pivotar al recipiente (3) y se recupera su contenido en unos medios de recuperación (8).
15. Procedimiento según la reivindicación anterior, caracterizado porque se hace pivotar la membrana filtrante (5) de manera que se dispone sobre un soporte (9) del portaobjetos.
16. Procedimiento según la reivindicación anterior, caracterizado porque se inyecta aire para despegar la membrana (5) de su soporte (6) y/o adherir la membrana sobre una platina (2) que se encuentra en el soporte (9) del portaobjetos.
17. Procedimiento según la reivindicación anterior, caracterizado porque, durante una duración predefinida, se aplica una masa (10) sobre la membrana (5) a fin de mejorar su adherencia sobre la platina (2) y, una vez terminado el tiempo predefinido, se retira la masa automáticamente.
18. Procedimiento según la reivindicación anterior, caracterizado porque la activación de la masa desencadena la limpieza del soporte de la membrana (6).
19. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 13 a 18, caracterizado porque, previamente a la etapa de aspiración/filtración, se introduce un producto fijador en la suspensión contenida en el recipiente.
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