ES2254028B1 - Procedimiento para la obtencion de pravastatina sodica purificada. - Google Patents
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Abstract
Procedimiento para la obtención de pravastatina sódica purificada. Procedimiento sencillo, rápido, económico y de fácil escalado industrial, para la obtención de pravastatina sódica purificada a partir de un caldo de fermentación, que comprende la formación de una solución acuosa enriquecida de pravastatina, la obtención y aislamiento de pravastatina sódica cruda o de pravastatina cálcica y la conversión a pravastatina sódica purificada mediante suspensión en agua, ajuste a pH ácido, extracción con disolvente orgánico como acetato de etilo o metil isobutil cetona, adición de una solución de sal sódica de ácido carboxílico en alcohol de bajo peso molecular, como es octanoato sódico en metanol y aislamiento de la pravastatina sódica purificada por filtración, permitiendo obtener un producto final de calidad farmacéutica aplicando opcionalmente un proceso de recristalización a la pravastatina sódica purificada obtenida.
Description
Procedimiento para la obtención de pravastatina
sódica purificada.
La presente invención se refiere a un nuevo
método para el aislamiento y purificación de pravastatina sódica, a
partir de un caldo de fermentación.
El objeto de la invención es proporcionar un
procedimiento que permita la obtención de pravastatina sódica, a
partir de un caldo de fermentación, de un modo sencillo, rápido y a
la vez económico, obteniéndose con todo ello un producto foral de
alta calidad. Procedimiento que es de fácil escalado industrial y
muy limpio desde el punto de vista medioambiental.
La presente invención se encuadra dentro del
ámbito de la industria farmacéutica.
La pravastatina es un compuesto bien conocido,
perteneciente a la familia de las llamadas estatinas, que son
compuestos inhibidores del enzima HMG-CoA
reductasa. Este enzima actúa como un catalizador de la reacción de
formación de ácido mevalónico, que es la etapa limitante de la
biosíntesis de colesterol.
La pravastatina, denominada químicamente con el
nombre de ácido
3,5-dihidroxi-7-[6-hidroxi-2-metil-8-(2-metilbutiriloxi)-1,2,6,7,8,8a-hexahidro-1-naftil]heptanoico,
se utiliza como agente antihipercolesterémico en forma de sal
sódica, y presenta la siguiente fórmula:
La pravastatina fue aislada inicialmente de la
orina canina como metabolito de la compactina en el transcurso de
un estudio del metabolismo de compactina (Tanaka y cols.;
resultados no publicados), y posteriormente elucidada
estructuralmente. (Haruyama. H y cols.; Chemical &
Pharmaceutical Bulletin (1986), 34(4), 1459).
Este compuesto también puede obtenerse por
hidroxilación enzimática de la compactina, mediante el empleo de
cepas de varios microorganismos, tal como muestra la patente US
4346227 de la compañía Sankyo, en la que además, se describen sus
propiedades como inhibidor del enzima HMG-CoA
reductasa.
Han sido publicados varios procedimientos de
obtención de pravastatina sódica a partir de un caldo de
fermentación. Así, en la patente US 4346227, la pravastatina se
extrae del caldo de fermentación a pH ácido con acetato de etilo,
separando previamente la biomasa por filtración. Al extracto de
pravastatina obtenido se le adiciona una cantidad catalítica de
ácido trifluoroacético, se neutraliza con bicarbonato sódico y se
concentra para obtener un residuo de pravastatina en su forma de
lactona, que se purifica por HPLC.
En la patente US 5202029 se describe un proceso
de purificación de un crudo de inhibidores de
HMG-CoA reductasa mediante HPLC. Una vez que el
inhibidor de HMG-CoA reductasa es eluido en la
columna, se elimina parcialmente el eluyente y por adición de agua,
se consigue su cristalización.
En otra patente US 6306629, una vez separada la
biomasa, la pravastatina se absorbe del caldo de fermentación por
medio de una resina absorbente polimérica, y posteriormente se lava
y se eluye con acetona o metanol. Una vez concentrado el eluyente,
se obtiene un residuo que se purifica por HPLC en fase reversa.
Un procedimiento de purificación de un crudo de
inhibidores de HMG-CoA reductasa mediante
cromatografia de desplazamiento, se describe en la patente US
6695969. El inhibidor de HMG-CoA reductasa se
disuelve en una fase móvil y se siembra en una columna. Dicha
columna se lava con una segunda fase móvil que desplaza al
inhibidor de HMG-CoA reductasa a través de la
columna. Se recogen fracciones que se analizan por HPLC y el
inhibidor de HMG-CoA reductasa se obtiene por
liofilización o recristalización.
Por otra parte, con la patente US 5616595 se
proporciona un proceso para el aislamiento de distintos compuestos
insolubles en agua, y que están presentes en un caldo de
fermentación, mediante filtración tangencial.
El método anterior es aplicable a una gran
variedad de compuestos, entre los que se encuentra la pravastatina.
El caldo de fermentación se hace pasar a través de un filtro de
forma cíclica, de modo que va perdiendo agua, hasta conseguir la
concentración deseada. A continuación, el compuesto deseado se
aisla del filtrado mediante extracción con un solvente,
sometiéndolo posteriormente a un proceso de purificación.
En la patente US 6583295 se describe la
preparación de una serie de sales de amina de inhibidores de
HMG-CoA reductasa, entre ellos pravastatina, y su
posterior conversión a sus sales farmaceúticamente aceptables o a
sus formas de lactona. En los ejemplos de la patente, la
pravastatina sódica se obtiene a partir de la sal de
terc-butilamina, por disolución de dicha sal en
solución etanólica de hidróxido sódico o en solución acuosa de
carbonato sódico.
Existen, por otro lado, varios métodos de
aislamiento de pravastatina a partir de un caldo de fermentación de
la cepa de Mortierella maculata, que aparecen descritos en
la patente US 6682913. El caldo de fermentación, una vez que ha
sido filtrado, se carga en una resina de intercambio aniónico de
tipo básico fuerte. Tras su elución en la columna, la pravastatina
se extrae a pH ácido con acetato de etilo o acetato de isobutilo.
Posteriormente, se produce la lactonización por adición de una
cantidad catalítica de ácido trifluoroacético. Tras
recristalización de la forma lactona de pravastatina, se forma la
sal sódica por adición de hidróxido sódico y se purifica en una
columna de cromatografia de exclusión molecular
HP-20. Tras eluirse de la columna con una mezcla de
acetona y agua, finalmente se aisla pravastatina sódica por
liofilización.
Alternativamente, tras la extracción del caldo a
pH ácido, la pravastatina puede convertirse en su correspondiente
sal de amina secundaria por adición de una amina adecuada. Tras
recristalizarse, esta sal de amina de pravastatina es transformada
en sal sódica por adición de etóxido sódico. Mediante
recristalización o liofilización se obtiene pravastatina sódica.
Otra opción para la obtención de la pravastatina
sódica, tras la extracción del caldo a pH ácido, consiste en
re-extraer la pravastatina contenida en la fase
orgánica de acetato de etilo o acetato de butilo, en forma de sal
sódica por contacto con una solución acuosa alcalina. Una posterior
purificación por cromatografia en resina absorbente de tipo no
fónico permite que la pravastatina sódica obtenida sea de elevada
pureza.
En la patente EP 1190087 se describen métodos de
aislamiento de pravastatina similares a los de la patente anterior,
con la diferencia de que se refieren a caldos de fermentación de la
cepa de Micromonospora. La pravastatina se separa del caldo
de fermentación por adsorción en una resina aniónica o bien por
extracción con un solvente orgánico inmiscible en agua, seguida de
su conversión en su forma de lactona o en una sal de amina
secundaria o bien por purificación del extracto alcalino acuoso
obtenido a partir del extracto orgánico procedente del caldo de
fermentación, mediante cromatografia en una resina no iónica.
Otro proceso de aislamiento de pravastatina
sódica a partir de un caldo de fermentación, se describe en la
patente US 6444452. Dicho proceso consiste en obtener una solución
acuosa u orgánica enriquecida de pravastatina y por adición de
hidróxido amónico o amoniaco respectivamente, obtener sal de amonio
de pravastatina, que se purifica por recristalización. Esta sal
amónica de pravastatina se disuelve posteriormente en agua, se
extrae pravastatina con acetato de isobutilo a pH ácido, y se
convierte en pravastatina sódica por re-extracción
con una solución acuosa de hidróxido sódico. El exceso de iones
sodio se elimina por tratamiento de la solución acuosa de
pravastatina sódica con una resina de intercambio catiónico
insoluble en agua, por ejemplo, con una resina catiónica ácida
débil, Amberlita IRC-50. Finalmente, el aislamiento
de pravastatina sódica se produce por liofilización o por
recristaliza-
ción.
ción.
La solicitud de patente WO 0232847 describe un
método de purificación de una solución acuosa de pravastatina
sódica, denominado "salting out". El caldo de fermentación se
extrae a pH ácido con acetato de etilo y se
re-extrae por contacto con una solución acuosa de
hidróxido sódico. A la solución acuosa de pravastatina sódica así
obtenida, se le añaden diversas sales inorgánicas, por ejemplo,
sulfato, nitrato, o acetato amónico o bien cloruro sódico y se
calienta la mezcla resultante a 20-60°C. Tras dejar
enfriar a 0°C se logra la precipitación de pravastatina sódica con
una pureza de alrededor del 90%.
Por su parte, la solicitud de patente WO 0232848
proporciona otro método de aislamiento y purificación de
pravastatina sódica a partir de un caldo de fermentación. El
procedimiento consiste en separar el micelio y adicionar al caldo
filtrado una base inorgánica, por ejemplo hidróxido sódico, y
calentar a reflujo a pH básico. A continuación, se lleva a cabo una
extracción de pravastatina a pH ácido utilizando acetato de propilo
o acetato de butilo. La fase orgánica enriquecida se
re-extrae con una solución acuosa de hidróxido
sódico a pH 8-9. A esta fase acuosa de pravastatina
sódica se le añade un ácido inorgánico y se calienta a una
temperatura de entre 20 y 50°C y a pH entre 2 y 5. Mediante
cristalización posterior se aisla pravastatina sódica de alta
pureza.
Los procedimientos de obtención de pravastatina
descritos en las distintas patentes anteriormente expuestas son
difíciles de implantar a nivel industrial, dado que suponen el
empleo de columnas cromatográficas de HPLC y, a menudo, de
volúmenes elevados de solvente, lo que supone un alto coste
económico.
También surgen problemas con el caldo de
fermentación de partida, ya que como es bien sabido en el campo de
trabajo a que pertenece la invención, los caldos de fermentación
contienen una gran cantidad de sustancias, necesarias para el
proceso de fermentación, que, sin embargo, constituyen potenciales
impurezas de los principios activos. Además, los caldos de
fermentación, generalmente presentan concentraciones muy bajas del
principio activo, lo que obliga al tratamiento de grandes volúmenes
de caldo y dificulta el posterior aislamiento de los principios
activos.
Parte del problema se resuelve mediante la
aplicación de sucesivas operaciones de extracción y
re-extracción, para obtener soluciones orgánicas o
acuosas enriquecidas de los principios activos, lográndose a la vez
la eliminación parcial de impurezas contenidas en el caldo de
fermentación. Sin embargo, habitualmente se requieren operaciones
posteriores de purificación mediante métodos cromatográficos o
aislamiento de productos intermedios para la obtención de un
principio activo de la calidad requerida en la industria
farmacéutica.
El procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada a partir de un caldo de fermentación
que la invención propone, resuelve de forma plenamente
satisfactoria la problemática anteriormente expuesta, en los
diferentes aspectos comentados. Se trata de un método sencillo, que
puede ser fácilmente adaptado a escala industrial y que no ocasiona
problemas de tipo medioambiental.
Concretamente, el procedimiento objeto de la
presente invención, comprende la formación de una solución acuosa
enriquecida de pravastatina a partir de un caldo de fermentación,
la obtención y aislamiento de pravastatina sódica cruda o de
pravastatina cálcica, y su conversión en pravastatina sódica
purificada, como se puede apreciar en el siguiente esquema:
El procedimiento que la invención proporciona
comienza con la formación de una solución acuosa enriquecida de
pravastatina a partir de un caldo de fermentación. Para ello, se
ajusta el caldo de fermentación de pravastatina a pH básico,
preferentemente entre 8,5 y 9,5, mediante el empleo de una
disolución acuosa de una base inorgánica, por ejemplo hidróxido
sódico. Una vez ajustado el pH, se procede a la adición de un
coagulante de tipo poliamina, preferentemente catiónico y de un
floculante de tipo poliacrilamida catiónico o amónico. La adición
del coagulante es opcional y puede realizarse también con
anterioridad al ajuste de pH del caldo de fermentación.
Tras la adición de un coagulante y de un
floculante, y después de un breve período de agitación, se logra la
separación del caldo de fermentación, mediante centrifugación. Se
obtiene un efluente libre de partículas sólidas y se logra la
separación del micelio del caldo con un rendimiento de recuperación
de pravastatina superior al 97%, lográndose además la eliminación
de impurezas poco polares inmiscibles en medio acuoso.
La clarificación del caldo de fermentación
mediante el uso de coagulantes y floculantes y la consiguiente
centrifugación presenta importantes ventajas competitivas con
respecto a otros métodos de separación del micelio, tales como la
filtración convencional, por ejemplo, mediante un filtro prensa.
Dichas ventajas son: reducción en los tiempos de separación
sólido-líquido, con un caudal de caldo de 10.000
l/h, mayores rendimientos en la separación, superiores al 97%, y
obtención de un caldo filtrado más limpio, lo que favorece la
extracción posterior del caldo con un disolvente orgánico, ya que
se evita la formación de emulsiones en la interfase
líquido-líquido.
Una vez realizada la operación de separación del
micelio, se procede a ajustar el caldo a pH ácido, preferentemente
entre 3,5 y 5,5, mediante el empleo de ácidos inorgánicos u
orgánicos, preferentemente inorgánicos, y más preferentemente ácido
clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido fosfórico. La pravastatina se
extrae del caldo acidificado mediante un disolvente con un alto
rendimiento, de modo que se obtiene una solución orgánica del
compuesto. El disolvente empleado es un disolvente orgánico
inmiscible en agua, tal como ésteres alquílicos de ácido
carboxílico, hidrocarburos halogenados y cetonas, tales como
acetato de etilo, acetato de propilo, acetato de butilo, cloruro de
metileno y metil isobutil cetona. Los disolventes preferidos son
acetato de etilo y metil isobutil cetona.
La siguiente operación para conseguir la
formación de la solución acuosa enriquecida de pravastatina, es la
re-extracción de la solución orgánica por contacto
con una solución acuosa básica, en forma de sal alcalina o amónica.
La base empleada es un hidróxido alcalino o hidróxido amónico,
preferentemente hidróxido sódico. El pH de la solución acuosa básica
ha de estar comprendido entre 8 y 13, preferentemente entre 9 y 11.
La pravastatina se extrae preferentemente en forma de sal sódica,
lográndose a la vez, la eliminación de potenciales impurezas
orgánicas no polares.
Por último, el extracto acuoso se concentra
hasta obtener una solución acuosa enriquecida de pravastatina. Esta
concentración del extracto acuoso se realiza por destilación
parcial a vacío de agua, de modo que se consigue también la
eliminación de un volumen residual de disolvente orgánico.
El procedimiento propuesto por la invención,
continúa con una etapa para la obtención y aislamiento de
pravastatina sódica cruda o de pravastatina cálcica a partir de la
solución acuosa enriquecida de pravastatina anteriormente
obtenida.
Generalmente, en compuestos que contienen un
grupo ácido carboxílico capaz de formar sales, tal como la
pravastatina, el proceso para el aislamiento de una sal determinada
de dicho compuesto, con una buena pureza, es dificultoso.
Particularmente complicado es el aislamiento del principio activo
en medio acuoso, dado que, por lo general las sales de metales
alcalinos y amónicas son solubles en agua. Por ello la formación y
el aislamiento de sales amónicas o sales de amina, utilizadas
habitualmente para purificar pravastatina, se realiza a partir de
una fase orgánica enriquecida del compuesto.
El extracto acuoso enriquecido de pravastatina
de la presente invención, obtenido a partir de un caldo de
fermentación, puede extraerse con un disolvente orgánico inmiscible
en agua, para obtener una solución orgánica enriquecida de
pravastatina. Los disolventes empleados para la extracción son
ésteres alquílicos de ácido carboxílico, hidrocarburos halogenados
y cetonas, tales como acetato de etilo, acetato de propilo, acetato
de butilo, cloruro de metileno y metil isobutil cetona. Los
disolventes preferidos son acetato de etilo y metil isobutil
cetona. La extracción se realiza tras un ajuste a pH ácido,
preferentemente entre 3,5 y 5,5, mediante el empleo de ácidos
inorgánicos u orgánicos, preferentemente inorgánicos, y más
preferentemente ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido
fosfórico.
Se ha comprobado que a partir de la solución
orgánica enriquecida, puede obtenerse pravastatina sódica cruda de
buena pureza por adición de una solución de sal sódica de ácido
carboxílico en alcohol de bajo peso molecular, preferentemente una
solución de octanoato sódico en metanol. Después de varias horas de
maduración a baja temperatura, preferentemente, entre 0°C y 10°C,
se obtiene pravastatina sódica cruda por filtración, mediante un
filtro prensa, por ejemplo.
Alternativamente a la obtención de pravastatina
sódica cruda, puede obtenerse y aislarse pravastatina cálcica
directamente a partir de la solución acuosa enriquecida de
pravastatina. Mediante adición de una solución acuosa de cloruro
cálcico a la solución acuosa enriquecida de pravastatina, logra
aislarse pravastatina cálcica de buena pureza. El modo de obtención
de la sal cálcica de pravastatina es sencillo, dado que precipita en
medio acuoso y se aisla fácilmente por filtración, por ejemplo
mediante un filtro prensa. La sal cálcica de pravastatina puede ser
utilizada como intermedio para la obtención de pravastatina sódica
de pureza adecuada.
El procedimiento descrito en la invención
finaliza con la obtención de pravastatina sódica purificada a
partir de la pravastatina sódica cruda o de la pravastatina cálcica
obtenidas.
Para ello la pravastatina sódica cruda o la
pravastatina cálcica se suspenden en agua y, tras ajustar la
disolución a pH ácido, la pravastatina se extrae con un disolvente
orgánico inmiscible en agua, preferentemente con acetato de etilo o
metil isobutil cetona. El ajuste de la disolución a pH ácido,
preferentemente entre 3,5 y 5,5, se realiza mediante el empleo de
ácidos inorgánicos u orgánicos, preferentemente inorgánicos, y más
preferentemente ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido
fosfórico.
El extracto orgánico de pravastatina puede,
opcionalmente decolorarse con carbón activo y lavarse con una
disolución acuosa salina, preferentemente con cloruro sódico. Se
continúa el proceso con la adición de una solución de sal sódica de
ácido carboxílico en alcohol de bajo peso molecular,
preferentemente una solución de octanoato sódico en metanol,
observándose la precipitación de pravastatina sódica. Después de
varias horas de maduración, preferentemente entre 3 y 8 horas, a
baja temperatura, preferentemente, entre 0°C y 10°C, finalmente se
aísla la pravastatina sódica purificada por filtración.
La pravastatina sódica purificada de la presente
invención puede ser recristalizada para obtener pravastatina sódica
de calidad farmacéutica, mediante alguno de los métodos conocidos
en el arte, como por ejemplo, recristalización en una mezcla de
etanol y acetato de etilo, o recristalización por adición de
acetato de etilo a una disolución de pravastatina sódica en etanol
y agua.
Para complementar la descripción que se está
realizando y con objeto de ayudar a una mejor comprensión de las
características del invento, de acuerdo con un ejemplo preferente
de realización práctica del mismo, se acompaña como parte
integrante de dicha descripción, una hoja única de planos en la que
con carácter ilustrativo y no limitativo y en su única figura,
aparece una representación de un espectro de difracción de Rayos X
de pravastatina sódica purificada obtenida según un ejemplo de
realización de la presente invención.
Los ejemplos siguientes ilustran las
realizaciones preferentes de la presente invención y no pretenden
en absoluto limitar el alcance de la misma.
A partir de un volumen inicial de 7 m^{3} de
caldo de fermentación de pravastatina se diluye con 4 m^{3} de
agua y se le añaden 105 l de coagulante. El caldo es ajustado a pH
9,5 por adición de hidróxido sódico al 10%, y a continuación se
añade una solución de floculante y se elimina la biomasa por
centrifugación, obteniéndose 14 m^{3} de caldo.
El caldo se ajusta a pH 3,5 con ácido
clorhídrico al 10% y se extrae con 3500 l de metil isobutil cetona.
El extracto orgánico de pravastatina es re-extraído
por contacto con 1050 l de una solución acuosa de hidróxido sódico
a pH 9,5. El extracto acuoso se destila a vacío hasta obtener una
solución acuosa enriquecida de pravastatina.
A continuación, la solución acuosa enriquecida
se ajusta a pH 4 con ácido clorhídrico y se extrae con 600 l de
metil isobutil cetona. La fase orgánica se lava con una solución
saturada de cloruro sódico y se decanta. Sobre la fase orgánica se
añade una solución de 11,5 Kg de octanoato sódico disueltos en 100
l de metanol y se completa la mezcla con la adición de 500 l de
metil isobutil cetona. La mezcla se enfría a 5°C y se mantiene en
maduración durante 5 horas. Tras este período, se filtra la mezcla y
el producto obtenido se lava con 50 l de metil isobutil cetona.
Tras secarse a vacío a 50°C, se obtienen 21,5 Kg de pravastatina
sódica cruda.
Se parte de un volumen inicial de 5.000 ml de
caldo de fermentación de pravastatina, que es ajustado a pH 9,5 por
adición de hidróxido sódico. A continuación, se adiciona un
coagulante de tipo poliamina y un floculante de tipo poliacrilamina
y se elimina la biomasa por centrifugación.
Seguidamente, el caldo obtenido se ajusta a pH 4
con ácido clorhídrico y se extrae con 2.000 ml de acetato de etilo.
El extracto orgánico de pravastatina es re-extraído
por contacto con 350 ml de solución acuosa de hidróxido sódico a pH
9,5. El extracto acuoso se destila a vacío hasta obtener una
solución enriquecida de pravastatina.
A la solución acuosa enriquecida de pravastatina
se le añaden 10 g de cloruro cálcico. Tras 4 horas de agitación a
15°C, se obtiene un sólido que se filtra y se seca a vacío a 50°C.
Se obtienen 17 g de pravastatina cálcica.
Este proceso comienza a partir de 50 g de
pravastatina cálcica obtenida anteriormente. Se le añaden 1000 ml
de acetato de etilo y 250 ml de agua y se ajusta el pH de la mezcla
a 3,5 con ácido fosfórico. Tras una hora de agitación, se separa
por decantación la fase orgánica, que contiene pravastatina.
La solución de pravastatina en acetato de etilo
preparada anteriormente, se lava con 200 ml de una solución
saturada de cloruro sódico, se decolora con carbón activo y se
filtra. A continuación, se añaden sobre la fase orgánica 19,5 g de
octanoato sódico disueltos en 200 ml de metanol y se completa con
la adición de 1000 ml más de acetato de etilo.
La mezcla se deja enfriar a 5°C y se mantiene en
maduración durante un periodo de 4 horas aproximadamente.
Transcurrido este tiempo, se filtra el sólido obtenido y se seca a
vacío. Finalmente se obtienen 40 g de pravastatina sódica
purificada.
El proceso comienza con ajustar un volumen
inicial de 5.000 ml de caldo de fermentación de pravastatina a pH
9,5 por adición de hidróxido sódico. A continuación, se adiciona un
coagulante de tipo poliamina y un floculante de tipo poliacrilamina
y se elimina la biomasa por centrifugación.
El caldo obtenido se filtra, se ajusta a pH 4
con ácido fosfórico y se extrae con 2.000 ml de acetato de etilo.
Este extracto orgánico de pravastatina es
re-extraído por contacto con 350 ml de solución
acuosa de hidróxido sódico a pH 9,5. El nuevo extracto acuoso se
destila a vacío hasta obtener una solución enriquecida de
pravastatina.
A la solución acuosa enriquecida se le añaden
350 ml de acetato de etilo y se ajusta a pH 4 con ácido
clorhídrico. A continuación se separa la fase orgánica, se decolora
con carbón activo y se filtra. Sobre esta solución se añaden 8 g de
octanoato sódico disueltos en 80 ml de metanol y se completa la
mezcla con la adición de 500 ml de acetato de etilo. La mezcla se
enfría a 5°C y se mantiene en maduración durante 4 horas. Tras este
período, se filtra el sólido obtenido y se seca a vacío. Se
obtienen 16 g de pravastatina sódica cruda.
Se toma una muestra de 150 g de pravastatina
sódica cruda a la que se le añaden 2250 ml de acetato de etilo y
450 ml de agua, posteriormente se ajusta el pH de la disolución a
3,4 con ácido clorhídrico. Tras 15 minutos de agitación, se separa
por decantación la fase orgánica, que contiene pravastatina.
La solución de pravastatina en acetato de etilo
obtenida se decolora con 15 g de carbón activo, se filtra y se lava
con 375 ml de cloruro sódico al 25%. A continuación, se añaden
sobre la fase orgánica 67,5 g de octanaoato sódico disueltos en 675
ml de metanol y se diluye la solución con la adición de 4500 ml más
de acetato de etilo.
La mezcla se deja enfriar a 10°C y se mantiene
en maduración durante un tiempo de aproximadamente 8 horas. Tras
este período, se filtra el sólido obtenido y se seca a vacío. Se
obtienen de este modo 100 g de pravastatina sódica purificada.
Una vez obtenida la pravastatina sódica
purificada, según el ejemplo anterior, se disuelven 10 g de la
misma en 20 ml de etanol y 10 ml de agua, y la disolución
resultante se decolora con carbón activo, posteriormente se lava
con 5 ml de una mezcla de etanol y agua, y se filtra.
A continuación, se calienta la disolución
clarificada a 50°C y se le añaden 420 ml de acetato de etilo,
manteniendo la mezcla en agitación durante un periodo de una hora
aproximadamente.
Transcurrido este tiempo, se enfría la
disolución manteniéndola a una temperatura de 10°C y se somete a un
periodo de maduración durante 2 horas. Seguidamente, se filtra el
sólido obtenido y finalmente se seca a vacío a 50°C. Como resultado
final se obtienen 6,7 g de pravastatina sódica de calidad
farmacéutica.
A la pravastatina sódica obtenida se la somete a
un análisis espectroscópico, cuyo espectro de difracción de Rayos X
queda representado en la figura que acompaña a esta
descripción.
Claims (17)
1. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, a partir de un caldo de
fermentación, caracterizado porque comprende una primera
etapa de formación de una solución acuosa enriquecida de
pravastatina, seguida de un proceso de obtención y aislamiento de
pravastatina sódica cruda o de pravastatina cálcica, y finalmente
una etapa de conversión de la pravastatina sódica cruda o de
pravastatina cálcica en pravastatina sódica purificada.
2. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 1ª,
caracterizado porque la etapa de formación de la solución
acuosa enriquecida comprende las siguientes etapas:
- -
- ajuste del caldo de fermentación a pH básico, comprendido entre 8,5 y 9,5;
- -
- adición al caldo de fermentación de un coagulante y un floculante;
- -
- separación del caldo por centrifugación;
- -
- ajuste del caldo a pH ácido, comprendido entre 3,5 y 5,5;
- -
- extracción de pravastatina del caldo de fermentación con disolvente orgánico inmiscible en agua;
- -
- re-extracción de pravastatina de la solución orgánica por contacto con una disolución acuosa básica;
- -
- concentración del extracto acuoso para la obtención de la solución acuosa enriquecida, por destilación a vacío.
3. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 2ª,
caracterizado porque el ajuste del caldo de fermentación a
pH básico se lleva a cabo mediante la adición de una disolución
acuosa de una base inorgánica, preferentemente de hidróxido
sódico.
4. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 2ª,
caracterizado porque el coagulante añadido al caldo de
fermentación es tipo poliamina, preferentemente catiónico, y el
floculante tipo poliacrilamida, catiónico o aniónico.
5. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 2ª,
caracterizado porque el ajuste del caldo de fermentación a
pH ácido se realiza mediante el empleo de ácidos inorgánicos u
orgánicos, preferentemente inorgánicos, y más preferentemente ácido
clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido fosfórico.
6. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 2ª,
caracterizado porque el disolvente orgánico empleado para la
extracción de pravastatina del caldo de fermentación se selecciona
entre acetato de etilo o metil isobutil cetona.
7. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 2ª,
caracterizado porque la disolución acuosa básica utilizada
para la re-extracción de pravastatina se encuentra
en forma de sal alcalina o amónica.
8. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 1ª,
caracterizado porque el proceso de obtención y aislamiento
de pravastatina sódica cruda a partir de la solución acuosa
enriquecida, comprende las siguientes etapas:
- -
- ajuste de la solución acuosa enriquecida a pH ácido, comprendido entre 3,5 y 5,5;
- -
- extracción de pravastatina con un disolvente orgánico immiscible en agua;
- -
- adición de una solución de sal sódica de ácido carboxílico en alcohol de bajo peso molecular;
- -
- maduración de la disolución a temperatura comprendida entre 0 y 10°C;
- -
- obtención de pravastatina cruda por filtración.
9. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 8ª,
caracterizada porque el ajuste de la disolución acuosa
enriquecida a pH ácido se realiza mediante el empleo de ácidos
inorgánicos u orgánicos, preferentemente inorgánicos, y más
preferentemente ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido
fosfórico.
10. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 8ª,
caracterizado porque el disolvente orgánico seleccionado
para la extracción de pravastatina se selecciona entre acetato de
etilo o metil isobutil cetona.
11 . Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 8ª,
caracterizado porque la solución de sal sódica de ácido
carboxílico en alcohol de bajo peso molecular, es una solución de
octanoato sódico en metanol.
12. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 1ª,
caracterizado porque la obtención y aislamiento de
pravastatina cálcica a partir de la solución acuosa enriquecida se
produce por adición de cloruro cálcico.
13. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 1ª,
caracterizado porque la conversión de pravastatina sódica
cruda o de pravastatina cálcica en pravastatina sádica purificada
comprende las siguientes etapas:
- -
- suspensión de pravstatina sódica cruda o de pravastatina cálcica en agua;
- -
- ajuste de la disolución a pH ácido, comprendido entre 3,5 y 5,5;
- -
- extracción de la pravastatina con un disolvente orgánico inmiscible en agua;
- -
- adición de una solución de sal sódica de ácido carboxílico en alcohol de bajo peso molecular;
- -
- maduración de la solución a una temperatura comprendida entre 0 y 10°C;
- -
- aislamiento de la pravastatina sódica purificada por filtración.
14. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sádica purificada, según reivindicación 13ª,
caracterizado porque el ajuste de la disolución a pH ácido
se realiza mediante el empleo de ácidos inorgánicos u orgánicos,
preferentemente inorgánicos, y más preferentemente ácido
clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido fosfórico.
15. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 13ª,
caracterizado porque el disolvente orgánico empleado en la
extracción de la pravastatina se selecciona entre acetato de etilo
o metil isobutil cetona.
16. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sádica purificada, según reivindicación 13ª,
caracterizado porque la solución de sal sódica de ácido
carboxílico en alcohol de bajo peso molecular, es una solución de
octanoato sódico en metanol.
17. Procedimiento para la obtención de
pravastatina sódica purificada, según reivindicación 1ª,
caracterizado porque la pravastatina sódica purificada se
somete, opcionalmente, a un proceso de recristalización para
obtener pravastatina sódica de calidad farmacéutica.
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ES200402866A ES2254028B1 (es) | 2004-11-29 | 2004-11-29 | Procedimiento para la obtencion de pravastatina sodica purificada. |
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EP1452519A1 (en) * | 2003-02-25 | 2004-09-01 | Balkanpharma-Razgrad AD | Method for the isolation and purification of pravastatin sodium |
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