ES2233685T3 - Inhibidores selectivos de pde 2 como medicamentos para mejorar la percepcion. - Google Patents
Inhibidores selectivos de pde 2 como medicamentos para mejorar la percepcion.Info
- Publication number
- ES2233685T3 ES2233685T3 ES01969511T ES01969511T ES2233685T3 ES 2233685 T3 ES2233685 T3 ES 2233685T3 ES 01969511 T ES01969511 T ES 01969511T ES 01969511 T ES01969511 T ES 01969511T ES 2233685 T3 ES2233685 T3 ES 2233685T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- use according
- pde
- consequence
- disorder
- ability
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
- A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/24—Antidepressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Psychology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Uso de inhibidores selectivos de PDE 2, para la preparación de medicamentos para mejorar la percepción, capacidad de concentración, capacidad de aprendizaje y/o capacidad de la memoria.
Description
Inhibidores selectivos de PDE 2 como medicamentos
para mejorar la percepción.
La invención se refiere al uso de inhibidores
selectivos de la fosfo-diesterasa 2 (PDE 2) para la
preparación de medicamentos para mejorar la percepción, capacidad de
concentración, capacidad de aprendizaje y/o capacidad de la
memoria.
La activación celular de adenilato- o
guanilato-ciclasas origina la ciclación de ATP o
GTP, resultando adenosina monofosfato
5'-3'-cíclico (cAMP) o guanosina
monofosfato 5', 3'-cíclico (cGMP). Estos nucleótidos
cíclicos (cAMP y cGMP) son importantes segundos mensajeros y por
ello, desempeñan un papel central en las cascadas celulares de
transducción de señales. Ambos, a su vez, entre otras cosas, pero no
exclusivamente, activan respectivamente proteína quinasas. La
proteíncinasa activada por cAMP se denomina proteíncinasa A (PKA),
la proteíncinasa activada por cGMP se denomina proteíncinasaG (PKG)
(para ver una sinopsis: véase Stryer, L., Biochemistry, 4ª edición,
Freeman, Nueva York, 1995). PKA o PKG activadas, a su vez pueden
fosforilar una serie de proteínas efectoras celulares (por ejemplo,
canales iónicos, receptores acoplados con proteína G, proteínas
estructurales). De esta manera, los segundos mensajeros cAMP y cGMP
pueden controlar los más diversos procesos fisiológicos en los más
diversos órganos. Pero los nucleótidos cíclicos también pueden
actuar directamente sobre moléculas efectoras. Así, por ejemplo, se
sabe que el cGMP puede actuar directamente sobre canales iónicos y
de esta manera puede influir sobre la concentración iónica celular
(para ver una sinopsis, véase Kandel y col., en "Principles of
Neural Science", 1991, 3ª edición, Elsevier, capítulo 28, págs.
403-408). Las fosfo-diesterasas
(PDE) son un mecanismo de control para controlar la actividad de
cAMP y cGMP y de esta manera a su vez a estos procesos fisiológicos.
Las PDE hidrolizan los monofosfatos cíclicos, dando los monofosfatos
inactivos AMP y GMP. Ya se han descrito al menos 21 genes de PDE
(Exp. Opin. Investig. Drugs 2000, 9,
1354-3784). Estos 21 genes de PDE pueden dividirse
en 11 familias de PDE, debido a su homología de secuencias
(proposición de nomenclatura, véase: www.hs.washington.edu). Dentro
de una familia, se distinguen genes individuales de PDE mediante
letras (por ejemplo, PDE1A y PDE1B). En el caso de que además
hubiera variantes diferentes de ayuste dentro de un gen, esto se
indica mediante una numeración adicional después de la letra (por
ejemplo, PDE1A1). La enzima originalmente denominada "PDE
estimulada por cGMP" y luego denominada PDE2, fue aislada y
purificada por primera vez en 1982, a partir de corazones bovinos y
cápsula suprarrenal bovina (Martins y col., J. Biol. Chem.
1982, 257, 1973-1979). La
característica especial de esta fosfo-diesterasa
consiste en su cinética cooperativa positiva en cuanto al sustrato
cGMP. Se postuló que bajas cantidades de cGMP se enlazan al llamado
dominio enlazante de cGMP y, de esta manera, originan una activación
de la enzima. Por esto también aumenta la afinidad del dominio
catalítico frente a cGMP y cAMP (Martins y col., J. Biol.
Chem. 1982, 257, 1973-1979). Por
ello, la PDE2 por bajas cantidades de cGMP puede hidrolizar ambos
sistemas de segundos mensajeros y así también controlarlos.
También se han descrito PDE estimuladas por cGMP
en otros tejidos diferentes. Así, entre otros, pero no
exclusivamente, en el hígado (Yamamoto y col., J. Biol. Chem.
1983, 258, 12526-12533) y en
trombocitos (Grant y col., Thromb. Res. 1990,
59, 105-119). Una forma de la PDE estimulada
por cGMP, enlazada a una membrana, fue aislada del cerebro del
conejo (Whalin y col., Biochim. Biophys. Acta 1988,
972, 79-94). Se clonó por primera vez el ADN
complementario de PDE2 a partir de bovinos y de ratas (Sonnenburg y
col., J. Biol. Chem. 1991, 266,
17655-17661.; Tanaka y col., Second Messengers
Phosphoproteins, 1991, 13, 87-98).
Sonnenburg y col. también mostraron la fuerte expresión del ARN
mensajero de PDE2 en la corteza cerebral (cortex), en los ganglios
basales, así como en el hipocampo. La secuencia de la isoforma
humana PDE2A3 (acceso en el Banco de genes Nº U67733) fue informada
por Rosman y col., Gene. 1997, 191,
89-95. En los tejidos examinados aquí se comprobó la
expresión fuerte de PDE2A en el cerebro y en el corazón, y más débil
en el hígado, músculo esquelético, riñón y páncreas.
Como inhibidor específico de PDE2, hasta ahora
sólo se ha descrito la
eritro-9-(2-hidroxi-3-nonil)-adenina
(EHNA: CI_{50} = 1 \muM). Por cierto, la EHNA también es un
inhibidor muy potente de la adenosíndeaminasa (CI_{50} = 3 nM),
por lo que no pueden interpretarse unívocamente efectos biológicos
celulares y efectos farmacológicos in vivo, generados por
EHNA.
Los documentos
EP-A-0771799, WO 98/40384 y WO
00/12504 describen derivados de purinona, allopurinol o
triazol-pirimidinona, su efecto inhibidor de PDE y
su idoneidad para el tratamiento de determinadas enfermedades
vasculares.
Sorprendentemente, ahora se halló que inhibidores
selectivos de PDE 2 son adecuados para la preparación de
medicamentos para mejorar la percepción, la capacidad de
concentración, la capacidad de aprendizaje o la capacidad de la
memoria.
Un inhibidor de PDE 2, en el sentido de la
invención, es un compuesto que inhibe la PDE 2 humana en las
condiciones indicadas más adelante, con una CI_{50} menor de 10
\muM, preferentemente, menor de 1 \muM, muy preferentemente,
menor de 0,1 \muM.
Un inhibidor selectivo de PDE 2, en el
sentido de la invención, es un compuesto que en las condiciones
indicadas más adelante inhibe la PDE 2 humana en forma más fuerte
que las cAMP-PDE 3B, 4B y 7B. Preferentemente, la
relación CI_{50} (PDE 2)/CI_{50} (PDE 3B, 4B o 7B) es menor de
0,1.
Los inhibidores selectivos de PDE 2 son
particularmente adecuados para mejorar la percepción, la capacidad
de concentración, la capacidad de aprendizaje o la capacidad de la
memoria, después de trastornos cognitivos, como las que se producen
especialmente en situaciones/enfermedades/síndromes como
"deterioro cognitivo moderado", trastornos del aprendizaje y de
la memoria, asociados a la edad, pérdidas de memoria asociadas a la
edad, demencia vascular, traumatismo craneoencefálico, apoplejía,
demencia que se presenta después de apoplejías ("demencia
post-apoplejía"), trauma craneoencefálico
post-traumático, trastornos generales de la
concentración, trastornos de la concentración en niños con problemas
de aprendizaje y de la memoria, enfermedad de Alzheimer, demencia
con corpúsculos de Lewy, demencia con degeneración de los lóbulos
frontales, incluyendo el síndrome de Pick, enfermedad de Parkinson,
parálisis nuclear progresiva, demencia con degeneración
corticobasal, esclerosis lateral amiotrófica (ALS), enfermedad de
Huntington, esclerosis múltiple, degeneración talámica, demencia de
Creutzfeld-Jacob, demencia por VIH, esquizofrenia
con demencia o psicosis de Korsakoff.
La invención preferentemente se refiere al uso
conforme a la invención de inhibidores de PDE 2, de fórmula general
(I),
en la
que
- A = D
- representa N=N, N=CH o CR^{5}=N, en el que R^{5} significa hidrógeno, metilo, etilo o metoxi,
- R^{1} y R^{2},
- junto con el átomo de carbono contiguo, representan hidroximetileno o carbonilo, y
- R^{3} y R^{4},
- independientemente entre sí, representan metilo, etilo, metoxi, etoxi o un resto de fórmula SO_{2}NR^{6}R^{7},
- \quad
- en la que
- R^{6} y R^{7},
- independientemente entre sí, significan hidrógeno, alquilo(C_{1}-C_{6}), cicloalquilo (C_{3}-C_{7}), o
- R^{6} y R^{7},
- junto con el átomo de nitrógeno vecinal, forman un resto azetidin-1-ilo, pirrol-1-ilo, piperid-1-ilo, azepin-1-ilo, 4-metil-piperazin-1-ilo, o morfolin-1-ilo,
o una de sus
sales.
Alquilo-(C_{1}-C_{6}),
dentro del marco de la invención, representa un resto alquilo de
cadena lineal o ramificado, con 1 a 6 átomos de carbono. Se prefiere
un resto alquilo de cadena lineal o ramificado, con 1 a 4 átomos de
carbono. Por ejemplo, citemos: metilo, etilo,
n-propilo, isopropilo, t-butilo,
n-pentilo y n-hexilo.
Cicloalquilo-(C_{3}-C_{7}),
dentro del marco de la invención, representa un grupo cicloalquilo,
con 3 a 7 átomos de carbono. Preferentemente, citemos: ciclopropilo,
ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo.
Los compuestos conforme a la invención, de
fórmula general (I), también pueden encontrarse en forma de sales.
Dentro del marco de la invención, se prefieren sales inocuas, desde
el punto de vista fisiológico.
Sales inocuas, desde el punto de vista
fisiológico, pueden ser sales de los compuestos conforme a la
invención con ácidos inorgánicos u orgánicos. Se prefieren sales con
ácidos inorgánicos como, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido
bromhídrico, ácido fosfórico o ácido sulfúrico, o sales con ácidos
orgánicos carboxílicos o sulfónicos como, por ejemplo, ácido
acético, ácido maleico, ácido fumárico, ácido málico, ácido cítrico,
ácido tartárico, ácido láctico, ácido benzoico o ácido
metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido
toluenosulfónico o ácido naftalenosulfónico.
Sales inocuas, desde el punto de vista
fisiológico, también pueden ser sales metálicas o amónicas de los
compuestos conforme a la invención. Particularmente, se prefieren
sales de metales alcalinos (por ejemplo, sales de sodio o de
potasio), sales de metales alcalinotérreos (por ejemplo, sales de
magnesio o de calcio), así como sales de amonio que derivan de
amoníaco o de aminas orgánicas como, por ejemplo, etilamina, di- o
tri-etilamina, di- o trietanolamina,
diciclohexilamina, dimetilaminoetanol, arginina, lisina,
etilendiamina, o 2-feniletilamina.
Los compuestos de fórmula general (I) son
conocidos por los documentos
EP-A-0771799, WO 98/40384 y WO
00/12504, o pueden prepararse mediante procedimientos allí
descritos. Se hace expresa referencia a la publicación de los
documentos EP-A-0771799, WO 98/40384
y WO 00/12504.
El principio activo puede actuar sistémica y/o
localmente. Para este fin, puede administrarse de forma apropiada
como, por ejemplo, por vía oral, parenteral, pulmonar, nasal,
sublingual, lingual, bucal, rectal, transdérmica, conjuntival,
ótica, o como implante.
Para estas vías de administración, el principio
activo puede administrarse en formas farmacéuticas apropiadas.
Para la administración oral, son apropiadas
formas farmacéuticas en sí conocidas, que suministran el principio
activo de forma rápida y/o modificada como, por ejemplo, comprimidos
(tanto comprimidos no recubiertos, como recubiertos, por ejemplo,
por cubiertas resistentes al jugo gástrico), cápsulas, grageas,
granulados, gránulos, polvos, emulsiones, suspensiones y
soluciones.
La administración parenteral puede realizarse
evitando un paso de reabsorción (en forma endovenosa, intrarterial,
intracardíaca, intraespinal o intralumbar) o intercalando una
reabsorción (en forma intramuscular, subcutánea, intracutánea,
percutánea, o intraperitoneal). Para la administración parenteral,
entre otras, son apropiadas formas farmacéuticas en forma de
preparaciones inyectables y para infusión, en forma de soluciones,
suspensiones, emulsiones, liofilizados y polvos estériles.
Para las otras vías de administración, son
apropiadas, por ejemplo, formas medicamentosas para inhalar (entre
otros, inhaladores de polvo, nebulizadores), gotas
nasales/soluciones nasales, aerosoles; comprimidos de administración
lingual, sublingual o bucal, o cápsulas, supositorios, preparados
óticos y oftálmicos, cápsulas vaginales, suspensiones acuosas
(lociones, mezclas para agitar), suspensiones lipófilas, pomadas,
cremas, leche, pastas, polvos esparcibles o implantes.
Los principios activos pueden transferirse de
manera conocida a las formas farmacéuticas nombradas. Esto se
realiza usando coadyuvantes farmacéuticos apropiados inertes no
tóxicos. A éstos, entre otros, pertenecen vehículos (por ejemplo,
celulosa micro-cristalina), disolventes (por
ejemplo, polietilenglicoles líquidos), emulsionantes (por ejemplo,
dodecilsulfato de sodio), agentes dispersantes (por ejemplo,
polivinilpirrolidona), bio-polímeros sintéticos y
naturales (por ejemplo, albúmina), estabilizantes (por ejemplo,
antioxidantes como ácido ascórbico), colorantes (por ejemplo,
pigmentos inorgánicos como óxidos de hierro) o correctores del sabor
y/o del olor.
En general, en la aplicación parenteral demostró
ser ventajoso administrar cantidades de aproximadamente 0,001 a 30
mg/kg, de preferencia, de aproximadamente 0,01 a 10 mg/kg de peso
corporal, para lograr resultados eficaces. En la administración
oral, la cantidad asciende a aproximadamente 0,01 a 100 mg/kg, de
preferencia, a aproximadamente 0,1 a 30 mg/kg de peso corporal.
Sin embargo, dado el caso, puede ser necesario
apartarse de las cantidades mencionadas, dependiendo del peso
corporal, de la vía de administración, del comportamiento individual
frente al principio activo, del tipo de preparación y del momento o
intervalo, en el que se efectúa la administración.
La PDE 2 estimulable por cGMP se aísla de
miocardio bovino. La PDE 1, estimulable por
Ca^{2+}-calmodulina, se aísla de aorta porcina,
cerebro porcino o, preferentemente, de aorta bovina. La PDE 5,
específica de cGMP, se obtiene a partir de intestino delgado
porcino, aorta porcina, plaquetas sanguíneas humanas y,
preferentemente, de aorta bovina. Se efectúa la purificación por
cromatografía de intercambio aniónico en MonoQ® Pharmacia,
esencialmente mediante el procedimiento de Hoey, M.; Houslay, M. D.,
Biochem. Pharmacol. 1990, 40,
193-202 y Lugman y col., Biochem. Pharmacol.
1986, 35, 1743-1751.
Se efectúa la determinación de la actividad
enzimática en una preparación de ensayo de 100 \mul en tampón
tris/ClH 20 mM, pH 7,5, que contiene MgCl_{2} 5 mM, 0,1 mg/ml de
sero-albúmina bovina y, o bien, 800 Bq
[^{3}H]-cAMP, o bien
[^{3}H]-cGMP. La concentración final de los
nucleótidos correspondientes es de 10^{-6} mol/l. Se inicia la
reacción mediante la adición de la enzima. Se dimensiona la cantidad
de enzima de tal manera que durante el tiempo de incubación de 30
min, reaccione aproximadamente el 50% del sustrato. Para analizar la
PDE 2 estimulable por cGMP, se usa [^{3}H]-cAMP
como sustrato y se adiciona a la preparación 10^{-6} mol/l de cGMP
no marcado. Para analizar la PDE 1, dependiente de la
Ca-calmodulina, se adicionan además a la preparación
CaCl_{2} 1 \muM y calmodulina 0,1 \muM. Se detiene la reacción
mediante la adición de 100 \mul de acetonitrilo, que contiene cAMP
1 mM y AMP 1 mM. Se separan 100 \mul de la preparación de reacción
mediante HPLC y se determinan cuantitativamente en línea los
productos de escisión, mediante un contador de centelleo de paso de
flujo. Se mide la concentración de sustancia, a la que la velocidad
de reacción se reduce el 50%. Adicionalmente, para el ensayo se
usaron "Ensayo de la enzima fosfodiesterasa
[^{3}H]-cAMP-SPA" y "Ensayo
de la enzima fosfodiesterasa
[^{3}H]-cGMP-SPA" de la empresa
Amersham Life Science. El ensayo fue efectuado siguiendo el
protocolo de ensayo indicado por el fabricante.
La PDE 2 (Rosman y col., Gene 1997
191, 89-95), PDE3B (Miki y col.,
Genomics 1996 36, 476-485),
PDE4B (Bolger y col., Mol. Cell. Biol. 1993 13,
6558-6571) y PDE7B (Hetman y col., Proc. Natl.
Acad. Sci. U. S. A. 2000 97,
472-476) recombinantes humanas se expresan en
células Sf9, con la ayuda del sistema de expresión pFASTBAC de
Baculovirus (GibcoBRL).
La determinación de la actividad de las
sustancias en ensayo con PDE2, PDE3B, PDE4B y PDE7B recombinantes
humanas se realiza mediante el equipo de centelleo de proximidad
(SPA) con [^{3}H]cAMP (TRKQ 7090) de Amersham International
(Little Chalfont, Inglaterra) o mediante PDE1 y PDE5 con el equipo
de centelleo de proximidad (SPA) con [^{3}H]-cGMP
(TRKQ7100) de Amersham International (Little Chalfont,
Inglaterra).
Se disuelven las sustancias de ensayo en DMSO al
100% (10 mM) y se sigue diluyendo esta solución con H_{2}O
(concentración final máxima en el ensayo: 10 \muM. Para la
estimulación previa de la PDE2, se adiciona cGMP (concentración
final en el ensayo: 10^{-6} M). Se diluye la enzima en tampón de
PDE (tris/ClH 20 mM, MgCl_{2} 5 mM, 0,1 mg/ml de albúmina, pH
7,5). En una placa de 96 pocillos (Wallac, 1450-401)
se colocan por pocillo con pipeta los siguientes volúmenes: 10
\mul de solución de sustancia (para el valor de 100%: 10 \mul de
H_{2}O), 10 \mul de cGMP (10^{-5} M), 70 \mul de mezcla de
ensayo de [^{3}H]-cAMP (véase el equipo), 10
\mul de enzima (para el valor 0, no hay enzima, en lugar de ésta,
se adicionan 10 \mul de H_{2}O) para iniciar la reacción.
Después de incubar durante 15 min a 30ºC, se detiene la reacción con
50 \mul de solución en perlas de SPA (véase el equipo), se cierra
la placa con una lámina y se agita durante 30 segundos. Después de
retirar las perlas (aproximadamente a los 15 min) se mide la placa
en un contador beta.
Para la medición de la PDE1, se adicionan
calmodulina 10^{-7} M y CaCl_{2} 1 \muM a la preparación de
reacción. La PDE5 se determina mediante el ensayo SPA con
[^{3}H]-cGMP. Las PDE3B, PDE4B y PDE7B se
determinan mediante el ensayo de centelleo de proximidad con
[^{3}H]-cAMP.
El ejemplo de realización 1 usado,
6-(3,4-dimetoxi-bencil)-1-[1-(1-hidroxi-etil)-4-fenil-butil]-3-metil-1,5-dihidro-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona,
corresponde al ejemplo 36 en el documento WO 98/40384 y fue
preparado mediante el procedimiento allí descrito.
Inhibición de isoenzimas de PDE mediante el
ejemplo 1
| Isoenzima | Especie | CI_{50} [nM] |
| PDE1 | bovino | 200 |
| PDE2 | bovino | 7 |
| PDE2 | humano | 6 |
| PDE3B | humano | > 4000 |
| PDE4B | humano | 2900 |
| PDE5 | humano | 300 |
| PDE7B | humano | 1600 |
Los inhibidores de PDE 2 aumentan la
concentración intracelular neuronal de cGMP, después de la
estimulación previa de la guanilatociclasa con nitroprusiato de
sodio (SNP) 10^{-4} M, en cultivos primarios de células cerebrales
de ratones.
Se decapitaron embriones de ratones, se
transfirieron las cabezas a placas de preparación. Se retiraron la
piel de la cabeza y la tapa del cráneo y se transfirieron los
cerebros descubiertos a otra placa de Petri. Con la ayuda de un
binocular y dos pinzas, se aisló el cerebro mayor (corteza) y se
enfrió con hielo hasta 4ºC. Esta preparación y el despcapacidad de
las neuronas corticales fueron efectuados según un protocolo
estándar con el sistema de disociación con papaína (Worthington
Biochemical Corporation, Lakewood, Nueva Jersey 08701, EE. UU.)
(Huettner y col. J. Neurosci. 1986, 6,
3044-3060). Las neuronas desprendidas mecánicamente
fueron cultivadas en condiciones estándar (37ºC, 5% de CO_{2}), de
150000 células/pocillo en 200 \mul de medio neurobasal/pocillo
(Neurobasal; Gibco/BRL; L-glutamina 2 mM; en
presencia de penicilina/estreptomicina), durante 7 días, en placas
de 96 pocillos (tratadas previamente con 100 \mug/ml de
poli-D-lisina, durante 20 min).
Después de 7 días, se retiró el medio y se lavaron las células con
tampón HBS (Gibco/BRL). A continuación, se adicionaron
respectivamente 100 \mul de solución de SNP y 100 \mul del
ejemplo 1 (disuelto previamente en DMSO al 100%: 10 mM) en HBS a las
células, de tal manera que la concentración final de SNP ascendía a
100 mM y la del ejemplo 1 se encontraba como está indicado en la
figura 1, y se incubó a 37ºC durante 20 min. Luego se lisaron las
células en 200 \mul de tampón de lisis (equipo de cGMP, código RPN
226; de Amersham Pharmacia Biotech.) y se midió la concentración de
cGMP, siguiendo las indicaciones del fabricante. Se efectuaron todas
las mediciones por triplicado. Se efectuó la evaluación estadística
con Prism Software Versión 2.0 (GraphPad Software Inc., San Diego,
CA, EE.UU.).
En una incubación paralela de neuronas con SNP
(un estimulante de la guanilatociclasa) y con el ejemplo 1, ya a una
concentración de 100 nM se presentó un notable aumento del nivel
intracelular de cGMP (figura 1).
Figura 1: concentración intracelular de cGMP en
cultivos primarios de corteza cerebral (E18) de ratón (ordenada)
después del tratamiento con SNP y con el ejemplo 1 (abscisa).
Se trataron células con SNP 100 mM (0) o con SNP
100 mM y el ejemplo 1 (1 x 10^{-8} M; 5 x 10^{-8} M; 1 x
10^{-7} M; 5 x 10^{-7} M; 1 x 10^{-6} M) durante 20 min. Luego
se midió el nivel intracelular de cGMP.
El ensayo del reconocimiento de un objeto es un
ensayo de la memoria. Mide la capacidad de ratas (y ratones) para
distinguir entre objetos conocidos y desconocidos.
Se llevó a cabo el ensayo como está descrito
(Blokland y col. NeuroReport 1998, 9,
4205-4208; Ennaceur, A., Delacour, J:, Behav.
Brain Res. 1988, 31, 47-59;
Ennaceur, A., Meliani, K., Psychopharmacology 1992,
109, 321-330; Prickaerts, y col., Eur. J.
Pharmacol. 1997, 337,
125-136).
En un primer paso, se confronta a una rata con
dos objetos idénticos en un área mayor de observación, por lo demás
vacía. La rata examinará a fondo ambos objetos, es decir, los
olfateará y los tocará. En un segundo paso, después de un intervalo
de 24 horas, se coloca nuevamente a la rata en el área de
observación. Ahora, uno de los objetos conocidos está reemplazado
por un objeto nuevo, desconocido. Cuando una rata reconoce el objeto
conocido, principalmente examinará el objeto desconocido. Sin
embargo, después de 24 horas, una rata normalmente ha olvidado qué
objeto examinó en el primer paso y, por ello, inspeccionará ambos
objetos de forma igualmente detallada. La administración de una
sustancia con efecto mejorador del aprendizaje y de la memoria,
conducirá a que una rata recuerde como conocido el objeto visto ya
en el primer paso, 24 horas antes. Examinará más a fondo el objeto
nuevo, desconocido, que el que ya conoce. Esta capacidad de la
memoria se expresa por medio de un índice de discriminación. Un
índice de discriminación de cero significa que la rata examina ambos
objetos, el antiguo y el nuevo, durante un tiempo igualmente largo;
es decir, no ha reconocido el objeto antiguo y reacciona ante ambos
objetos como si fueran desconocidos y nuevos. Un índice de
discriminación mayor de cero significa que la rata inspecciona el
objeto nuevo durante un tiempo más largo que el antiguo; es decir,
la rata ha reconocido el objeto antiguo.
Se examinaron los efectos del ejemplo 1 sobre el
reconocimiento de los objetos por las ratas, a las 24 horas del
primer paso. Los animales recibieron por vía oral tilosa sola o, en
el caso del ejemplo 1 en dosis de 0,3, 1,0 ó 3,0 mg/kg de peso
corporal, suspendido en tilosa, inmediatamente a continuación del
primer paso, con dos objetos idénticos. Respectivamente, después de
24 horas, se efectuó el segundo paso. Después de un período de
lavado de 2 ó 3 días, en las mismas ratas se ensayó una nueva dosis
del ejemplo 1, hasta que la capacidad de memoria de todas las ratas
se hubo ensayado dos veces con todas las dosis. Es decir, todos los
animales sirvieron como control propio. Los resultados de este
estudio están reproducidos en la figura 2. Sorprendentemente, se
mejoró la capacidad de la memoria en el segundo paso, después del
tratamiento con 0,3 y 1,0 mg/kg del ejemplo 1, en comparación con la
condición de control (tratamiento con tilosa sola). El índice de
discriminación fue mayor de cero y se desvió del índice de
discriminación logrado en la condición de control.
Los resultados de este ensayo están representados
en la figura 2:
Figura 2: Efecto del ejemplo 1 sobre el índice de
discriminación (d2) en el ensayo del reconocimiento de un objeto
(valores promedio + S.E.M.). Se realizó el tratamiento con vehículo
con tilosa al 1%. Los animales tratados con sustancia fueron
tratados con 0,3 mg/kg, 1 mg/kg o 3 mg/kg. Evaluación estadística:
**P < 0,01.
Claims (9)
1. Uso de inhibidores selectivos de PDE 2, para
la preparación de medicamentos para mejorar la percepción, capacidad
de concentración, capacidad de aprendizaje y/o capacidad de la
memoria.
2. Uso según la reivindicación 1 para la
profilaxis y/o el tratamiento de trastornos de la percepción,
capacidad de concentración, capacidad de aprendizaje y/o capacidad
de la memoria.
3. Uso según la reivindicación 2, en el que el
trastorno es una consecuencia de demencia.
4. Uso según la reivindicación 2, en el que el
trastorno es una consecuencia de apoplejía o de traumatismo
craneoencefálico.
5. Uso según la reivindicación 2, en el que el
trastorno es una consecuencia de la enfermedad de Alzheimer.
6. Uso según la reivindicación 2, en el que el
trastorno es una consecuencia de la enfermedad de Parkinson.
7. Uso según la reivindicación 2, en el que el
trastorno es una consecuencia de depresión.
8. Uso según la reivindicación 2, en el que el
trastorno es una consecuencia de demencia con degeneración de los
lóbulos frontales.
9. Uso según una de las reivindicaciones 1 a 8,
en el que el inhibidor selectivo de PDE 2 es un compuesto de fórmula
general (I),
en la
que
- A=D
- representa N=N, N=CH o CR^{5}=N, en el que R^{5} significa hidrógeno, metilo, etilo o metoxi,
- R^{1} y R^{2},
- junto con el átomo de carbono contiguo, representan hidroximetileno o carbonilo, y
- R^{3} y R^{4},
- independientemente entre sí, representan metilo, etilo, metoxi, etoxi o un resto de fórmula SO_{2}NR^{6}R^{7},
- \quad
- en la que
- R^{6} y R^{7},
- independientemente entre sí, significan hidrógeno, alquilo-(C_{1}-C_{6}), cicloalquilo-(C_{3}-C_{7}), o
- R^{6} y R^{7}
- junto con el átomo de nitrógeno vecinal, forman un resto azetidin-1-ilo, pirrol-1-ilo, piperid-1-ilo, azepin-1-ilo, 4-metil-piperazin-1-ilo o morfolin-1-ilo,
o una de sus
sales.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE10037411 | 2000-08-01 | ||
| DE10037411 | 2000-08-01 | ||
| DE10122893 | 2001-05-11 | ||
| DE10122893A DE10122893A1 (de) | 2000-08-01 | 2001-05-11 | Selektive PDE 2-Inhibitoren als Arzneimittel zur Verbesserung der Wahrnehmung |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2233685T3 true ES2233685T3 (es) | 2005-06-16 |
Family
ID=26006577
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES01969511T Expired - Lifetime ES2233685T3 (es) | 2000-08-01 | 2001-07-19 | Inhibidores selectivos de pde 2 como medicamentos para mejorar la percepcion. |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7022709B2 (es) |
| EP (1) | EP1307201B1 (es) |
| JP (1) | JP2004505054A (es) |
| AU (1) | AU2001289751A1 (es) |
| CA (1) | CA2417631A1 (es) |
| ES (1) | ES2233685T3 (es) |
| WO (1) | WO2002009713A2 (es) |
Families Citing this family (43)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE348618T1 (de) * | 2001-05-09 | 2007-01-15 | Bayer Healthcare Ag | Neue verwendung von 2-(2-ethoxy-5-(4-methyl- piperazin-1-sulfonyl)-phenyl)-5-methyl-7-propyl 3h-imidazo(5,1-f)(1,2,4)triazin-4-on |
| KR20050036911A (ko) | 2002-05-09 | 2005-04-20 | 싸이토키네틱스, 인코포레이티드 | 화합물들, 방법 및 조성물 |
| DE10232113A1 (de) | 2002-07-16 | 2004-01-29 | Bayer Ag | Vardenafil Hydrochlorid Trihydrat enthaltende Arzneimittel |
| DE10238724A1 (de) | 2002-08-23 | 2004-03-04 | Bayer Ag | Alkyl-substituierte Pyrazolpyrimidine |
| DE10238723A1 (de) * | 2002-08-23 | 2004-03-11 | Bayer Ag | Phenyl-substituierte Pyrazolyprimidine |
| DE10238722A1 (de) | 2002-08-23 | 2004-03-11 | Bayer Ag | Selektive Phosphodiesterase 9A-Inhibitoren als Arzneimittel zur Verbesserung kognitiver Prozesse |
| AU2004235915B2 (en) * | 2003-05-09 | 2010-08-05 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | 6-cyclylmethyl- and 6-alkylmethyl-substituted pyrazolopyrimidines |
| DE10320785A1 (de) | 2003-05-09 | 2004-11-25 | Bayer Healthcare Ag | 6-Arylmethyl-substituierte Pyrazolopyrimidine |
| US8044060B2 (en) | 2003-05-09 | 2011-10-25 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | 6-cyclylmethyl- and 6-alkylmethyl pyrazolo[3,4-D]pyrimidines, methods for their preparation and methods for their use to treat impairments of perception, concentration learning and/or memory |
| DE102004004142A1 (de) * | 2003-05-09 | 2004-11-25 | Bayer Healthcare Ag | 6-Cyclylmethyl- und 6-Alkylmethyl-substituierte Pyrazolopyrimidine |
| DE10328479A1 (de) | 2003-06-25 | 2005-01-13 | Bayer Ag | 6-Arylamino-5-cyano-4-pyrimidinone |
| EP1660132A1 (en) * | 2003-08-28 | 2006-05-31 | ALTANA Pharma AG | Composition comprising a pulmonary surfactant and a pde2 inhibitor |
| DE102004001873A1 (de) | 2004-01-14 | 2005-09-29 | Bayer Healthcare Ag | Cyanopyrimidinone |
| EP2258358A3 (en) | 2005-08-26 | 2011-09-07 | Braincells, Inc. | Neurogenesis with acetylcholinesterase inhibitor |
| AU2006282896A1 (en) | 2005-08-26 | 2007-03-01 | Braincells, Inc. | Neurogenesis by muscarinic receptor modulation |
| EP1940389A2 (en) | 2005-10-21 | 2008-07-09 | Braincells, Inc. | Modulation of neurogenesis by pde inhibition |
| CA2625210A1 (en) | 2005-10-31 | 2007-05-10 | Braincells, Inc. | Gaba receptor mediated modulation of neurogenesis |
| US20100216734A1 (en) | 2006-03-08 | 2010-08-26 | Braincells, Inc. | Modulation of neurogenesis by nootropic agents |
| US7678808B2 (en) | 2006-05-09 | 2010-03-16 | Braincells, Inc. | 5 HT receptor mediated neurogenesis |
| EP2382975A3 (en) | 2006-05-09 | 2012-02-29 | Braincells, Inc. | Neurogenesis by modulating angiotensin |
| JP2010502722A (ja) | 2006-09-08 | 2010-01-28 | ブレインセルス，インコーポレイティド | ４−アシルアミノピリジン誘導体を含む組み合わせ |
| US20100184806A1 (en) | 2006-09-19 | 2010-07-22 | Braincells, Inc. | Modulation of neurogenesis by ppar agents |
| WO2009068617A1 (en) | 2007-11-30 | 2009-06-04 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | 1, 5-dihydro-pyrazolo (3, 4-d) pyrimidin-4-one derivatives and their use as pde9a modulators for the teatment of cns disorders |
| UA105362C2 (en) | 2008-04-02 | 2014-05-12 | Бьорингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх | 1-heterocyclyl-1, 5-dihydro-pyrazolo [3, 4-d] pyrimidin-4-one derivatives and their use as pde9a modulators |
| NZ590788A (en) | 2008-09-08 | 2012-11-30 | Boehringer Ingelheim Int | Pyrazolopyrimidines and their use for the treatment of cns disorders |
| WO2010099217A1 (en) | 2009-02-25 | 2010-09-02 | Braincells, Inc. | Modulation of neurogenesis using d-cycloserine combinations |
| WO2010112437A1 (en) | 2009-03-31 | 2010-10-07 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | 1-heterocyclyl-1, 5-dihydro-pyrazolo [3, 4-d] pyrimidin-4-one derivatives and their use as pde9a modulators |
| TW201118099A (en) * | 2009-08-12 | 2011-06-01 | Boehringer Ingelheim Int | New compounds for the treatment of CNS disorders |
| KR101918909B1 (ko) | 2010-08-12 | 2018-11-15 | 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 | ６사이클로알킬１，５디하이드로피라졸로［３，４ｄ］피리미딘４온 유도체 및 이의 ｐｄｅ９ａ 억제제로서의 용도 |
| US8809345B2 (en) | 2011-02-15 | 2014-08-19 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | 6-cycloalkyl-pyrazolopyrimidinones for the treatment of CNS disorders |
| WO2013106547A1 (en) | 2012-01-10 | 2013-07-18 | President And Fellows Of Harvard College | Beta-cell replication promoting compounds and methods of their use |
| CA2869730A1 (en) | 2012-04-25 | 2013-10-31 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Nitrogenated heterocyclic compound |
| US9527841B2 (en) | 2012-07-13 | 2016-12-27 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Substituted pyrido[2,3-b]pyrazines as phosphodiesterase 2A inhibitors |
| WO2014142255A1 (ja) | 2013-03-14 | 2014-09-18 | 武田薬品工業株式会社 | 複素環化合物 |
| JP6411342B2 (ja) | 2013-07-03 | 2018-10-24 | 武田薬品工業株式会社 | アミド化合物 |
| WO2015002231A1 (ja) | 2013-07-03 | 2015-01-08 | 武田薬品工業株式会社 | 複素環化合物 |
| JP6696904B2 (ja) | 2014-01-08 | 2020-05-20 | イントラ−セルラー・セラピーズ・インコーポレイテッドＩｎｔｒａ−Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ， Ｉｎｃ． | 製剤および医薬組成物 |
| CN107205999B (zh) | 2014-12-06 | 2021-08-03 | 细胞内治疗公司 | 有机化合物 |
| WO2016090382A1 (en) | 2014-12-06 | 2016-06-09 | Intra-Cellular Therapies, Inc. | Organic compounds |
| WO2017000276A1 (en) * | 2015-07-01 | 2017-01-05 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Bicyclic heterocyclic compounds as pde2 inhibitors |
| AU2017388054B2 (en) | 2016-12-28 | 2022-03-24 | Dart Neuroscience, Llc | Substituted pyrazolopyrimidinone compounds as PDE2 inhibitors |
| MX2019014597A (es) | 2017-06-08 | 2020-02-05 | Merck Sharp & Dohme | Inhibidores de pirazolopirimidina de pde9. |
| AU2018373258B2 (en) | 2017-11-27 | 2023-03-02 | Dart Neuroscience, Llc | Substituted furanopyrimidine compounds as PDE1 inhibitors |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3816995A1 (de) * | 1988-05-19 | 1989-11-23 | Hoechst Ag | Verwendung von pyrimido-(6,1-a)-isochinolin-4-on-derivaten und medizinische zubereitungen auf basis dieser verbindungen |
| DE19541264A1 (de) * | 1995-11-06 | 1997-05-07 | Bayer Ag | Purin-6-on-derivate |
| DE19709877A1 (de) * | 1997-03-11 | 1998-09-17 | Bayer Ag | 1,5-Dihydro-pyrazolo[3,4-d]-pyrimidinon-derivate |
| DE19838705A1 (de) * | 1998-08-26 | 2000-03-02 | Bayer Ag | Neue Dihydro-(1,2,3)-triazolo-[4,5-d]pyrimidin-7-one |
| WO2000024745A1 (en) * | 1998-10-23 | 2000-05-04 | Pfizer Limited | PYRAZOLOPYRIMIDINONE cGMP PDE5 INHIBITORS FOR THE TREATMENT OF SEXUAL DYSFUNCTION |
| AU2365001A (en) * | 1999-12-24 | 2001-07-09 | Bayer Aktiengesellschaft | Isoxazolo pyrimidinones and the use thereof |
| DE50008549D1 (de) * | 1999-12-24 | 2004-12-09 | Bayer Healthcare Ag | Triazolotriazinone und ihre verwendung |
| CA2395548A1 (en) * | 1999-12-24 | 2001-07-05 | Bayer Aktiengesellschaft | Imidazo 1,3,5 triazinones and the use thereof |
-
2001
- 2001-07-19 AU AU2001289751A patent/AU2001289751A1/en not_active Abandoned
- 2001-07-19 CA CA002417631A patent/CA2417631A1/en not_active Abandoned
- 2001-07-19 JP JP2002515266A patent/JP2004505054A/ja active Pending
- 2001-07-19 ES ES01969511T patent/ES2233685T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-19 EP EP01969511A patent/EP1307201B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-19 WO PCT/EP2001/008609 patent/WO2002009713A2/de active IP Right Grant
- 2001-07-23 US US09/911,277 patent/US7022709B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2001289751A1 (en) | 2002-02-13 |
| CA2417631A1 (en) | 2003-01-29 |
| US20020132754A1 (en) | 2002-09-19 |
| WO2002009713A3 (de) | 2002-07-18 |
| US7022709B2 (en) | 2006-04-04 |
| JP2004505054A (ja) | 2004-02-19 |
| EP1307201A2 (de) | 2003-05-07 |
| WO2002009713A2 (de) | 2002-02-07 |
| EP1307201B1 (de) | 2004-11-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2233685T3 (es) | Inhibidores selectivos de pde 2 como medicamentos para mejorar la percepcion. | |
| ES2256797T3 (es) | Pirazolopirimidinas sustituidas con alquilo. | |
| ES2373381T3 (es) | Inhibidores selectivos de la fosfodiesterasa 9a como fármacos para mejorar los procesos cognitivos. | |
| ES2263057T3 (es) | Pirazolopirimidinas sustituidas con fenilo. | |
| US5321030A (en) | Creatine analogs having antiviral activity | |
| Maggs et al. | In vitro efficacy of ganciclovir, cidofovir, penciclovir, foscarnet, idoxuridine, and acyclovir against feline herpesvirus type-1 | |
| US20060194821A1 (en) | Compounds inhibiting the aggregation of superoxide dismutase-1 | |
| ES2278927T3 (es) | Nuevo uso de imidazotriazinonas de 2-(2-etoxi-5-(4-metil-piperazin-1-sulfonil)-fenil)-5-metil-7-propil-3h-imidazo(5,1-f)(1,2,4)triazin-4-ona. | |
| US20130123344A1 (en) | Method of preventing or treating viral infection | |
| US20100179179A1 (en) | Inhibitors of the mutant form of kit | |
| ES2906107T3 (es) | Usos novedosos | |
| NO308884B1 (no) | Anvendelse av 5-halo-2-pyrimidin-deoksyribose eller 5-halo- pyrimidinon for fremstilling av et medikament for behandling av kreft | |
| WO2001007027A2 (en) | Pyrimidine derivatives for the treatment of viral diseases | |
| EP1313478A2 (en) | Method for treatment of migraine using pde5 inhibitors | |
| JP2764656B2 (ja) | 薬学的治療 | |
| CA2575907A1 (en) | Novel uses of 2-phenyl-substituted imidazotriazinone derivatives | |
| ZA200101920B (en) | Antiviral combinations. | |
| EP1225904A2 (en) | Combinations of lamivudine and entecavir for treatment of hepatitis b virus infection | |
| Holliday et al. | Inhibition of herpes simplex virus types 1 and 2 replication in vitro by mercurithio analogs of deoxyuridine | |
| Wong et al. | Differential effects of histamine H2 receptor antagonists on amantadine uptake in the rat renal cortical slice, isolated proximal tubule and distal tubule. | |
| KR20010075202A (ko) | 라미부딘 및 아바카비르를 포함하는 항바이러스 약학 제제 | |
| PT1392314E (pt) | Nova utilização de imidazotriazinonas substituídas por 2- fenilo | |
| DE10122893A1 (de) | Selektive PDE 2-Inhibitoren als Arzneimittel zur Verbesserung der Wahrnehmung | |
| Cameron | Zhi Hong earned his BS degree in Biochemistry in 1985 from Fudan Uni-versity in China. He began his doctoral studies at the State Uni-versity of New York at Buffalo in 1987 and his post-doctoral training in antifungal and antibacterial research at the Schering |