ES2232287B1 - Nanoparticulas de derivados polioxietilenados. - Google Patents
Nanoparticulas de derivados polioxietilenados.Info
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Abstract
Nanopartículas de derivados polioxietilenados, de tamaño inferior a 1 micra, para la administración de ingredientes farmacéuticamente o cosméticamente activos, que comprenden un polímero biodegradable, un copolímero en bloque derivado del polioxietileno y al menos un ingrediente farmacéutica o cosméticamente activo, un procedimiento de obtención de dichas nanopartículas y composiciones que las contienen.
Description
Nanopartículas de derivados
polioxietilenados.
La presente invención se refiere a nanopartículas
(tamaño inferior a 1 \mum) con una nueva composición, que son
adecuadas para la administración de moléculas activas. La nueva
composición comprende dos polímeros: un polímero biodegradable y un
copolímero bloque derivado del polioxietileno.
Las nanopartículas poliméricas están siendo
objeto de especial atención debido a su interés para mejorar la
estabilidad y promover el transporte y liberación controlada de
fármacos a determinadas regiones del organismo. Los polímeros
biodegradables más utilizados para su formación son los derivados
del ácido poliláctico (PLA) y sus copolímeros con el ácido
glicólico (PLGA) debido a su biodegradabilidad, biocompatibilidad e
inocuidad (Johansen et al., Eur. J. Pharm. Biopharm., 2000,
50, 129-146). Otros polímeros biodegradables que
también ofrecen un futuro prometedor en esta línea son poliésteres
como la poly(\varepsilon-caprolactona)
(Losa et al., Pharm. Res., 1993, 10,1, 80-87)
y los polianhidridos (Mathiowitz et al., Nature, 1997, 386,
410-414).
Las micro y nanopartículas de PLA y PLGA han sido
extensivamente 1 estudiadas para la encapsulación y liberación de
un amplio número de moléculas terapéuticas
(Quintanar-Guerrero et al., Drug Dev. Ind.
Pharm., 1998, 24 (12),1113-1128, Sánchez et
al., Int.J. Pharm., 1993, 99, 263-273,
Sturesson et al., J. Control. Rel., 1999, 59, :
377-389, Hsu et al., J. Drug Targ., 7 (4),
313-323). Una característica destacable de estas
partículas reside en el hecho de que su capacidad para controlar la
liberación de moléculas activas depende de su perfil de
degradación. De este modo, un control en la velocidad de degradación
del polímero tiene una repercusión directa en el control de la
liberación de la molécula activa asociada al mismo. Es sabido que
la degradación de los poliésteres conduce a la formación de
oligómeros ácidos que pueden acumularse en el interior de las
partículas causando así, una acidificación del entramado polimérico
y con ello una reducción importante del pH interno de las partículas
(Belbella et al., Int. J. Pharm., 1996, 129,
95-102). Este microclima ácido causado por la
acumulación de productos de degradación del polímero en el seno de
las partículas tiene un efecto muy negativo en la estabilidad de la
molécula activa incorporada en las mismas y representa una
limitación en la utilización de estos sistemas poliméricos para la
liberación controlada de macromoléculas como proteínas y plásmidos
ADN (Zhu et al., Nature Biotech., 18,
52-57).
Los poloxameros son copolímeros tribloque tipo
polioxietilenopolioxipropileno-polioxietileno
(PEO-PPO-PEO) que, dependiendo de su
relación PEO:PPO varían en sus características de peso molecular,
hidrofobicidad, etc.. Las poloxaminas son copolímeros formados por
4 cadenas de PEO-PPO unidas por un puente de
etilendiamina. Análogamente a los poloxameros, sus características
pueden variar al cambiar la relación PEO-PPO.
Una de las aplicaciones que recientemente se ha
propuesto para esta familia de o copolímeros derivados del
polioxietileno es la de ser promotores del transporte de fármacos a
través de la barrera hematoencefálica (BBB) (Kabanov et al.,
Adv. Drug. Deliv. Rev., 2003, 55, 151-164).
Asimismo, estudios recientes han puesto de manifiesto el interés de
los mismos en estudios de transfección de plásmidos ADN (Lemieux
et al., Gene Ther., 2000, 7, 986-991).
Por otro lado, los copolímeros bloque PEO:PPO han
sido ampliamente estudiados como agentes de recubrimiento que
permiten modificar la biodistribución de nanopartículas utilizadas
como transportadores de fármacos. Así, son numerosos los trabajos
que han puesto de manifiesto que el recubrimiento de nanopartículas
con poloxameros y poloxaminas afecta a su biodistribución y, por
tanto, a su capacidad para transportar fármacos a diferentes
regiones del organismo (Moghimi et al., FEBS Letters,1994,
344, 25-30, Hawley et al., FEBS Letters,
1997, 400, 319-323).
Existen diversos documentos en los que se
reivindica la utilización de los derivados PEO-PPO
como agentes de recubrimiento de nanopartículas (WO96/20698 y
US4904479). El objetivo ha sido el de prolongar el tiempo de
circulación de las mismas tras su inyección intravenosa y modificar
su perfil de biodistribucción. En dichas composiciones el
poloxamero/poloxamina no forma parte de la matriz polimérica
constitutiva de las partículas sino que se encuentra adsorbido a
nivel superficial. Por tanto, la cantidad de poloxamero/poloxamina
adsorbida es limitada y su presencia no tiene implicaciones en la
encapsulación o liberación controlada de la molécula activa
encapsulada en las partículas, sino que su papel se limita a la
modificación del perfil de biodistribución de las partículas.
Por otro lado, en otro documento, US5578325, se
ha propuesto la idea de unir químicamente los citados copolímeros a
poliésteres, formando así copolímeros multibloque. En estos casos
el derivado polioxietilenado se encuentra unido covalentemente al
poliéster, conduciendo así a la formación de un nuevo copolímero.
Estos copolímeros permiten igualmente obtener nanopartículas
recubiertas de PEO-PPO que ofrecen una larga
permanencia en el torrente circulatorio tras su administración
intravenosa.
Otra de las aplicaciones de que han sido objeto
los copolímeros bloque PEOPPO ha sido la estabilización de
proteínas encapsuladas en partículas de PLGA y la modificación de su
liberación a partir de las mismas. Así, en estudios previos
llevados a cabo en nuestro laboratorio, hemos podido comprobar que
la incorporación de copolímeros bloque PEO-PPO, más
concretamente poloxameros, en micro y nanopartículas de poliácido
láctico/ácido glicólico (PLGA) permite mejorar la estabilidad de
las proteínas nanoencapsuladas en dichas partículas. En este
estudio inicial, para la incorporación de poloxamero en las
partículas hemos optado por el método de doble emulsión
(agualdisolvente orgánico/agua), según el cual, el poloxamero
hidrofilico se disuelve en la fase interna acuosa de la emulsión
(Blanco et al., Eur. J. Pharm. Biopharm., 1997, 43, 287 -
294, Blanco et al. Eur. J. Pharm. Biopharm., 1998, 45,
285-294). Este método permite la incorporación de
cantidades muy pequeñas de poloxamero en relación a las cantidades
de PLGA (normalmente la relación es 10:1 PLGA:poloxamer). Ello se
debe a dos razones fundamentales: por un lado, el volumen de la
fase interna acuosa en la que se disuelve el poloxamero es muy
inferior al volumen de disolvente orgánico en el que se disuelve el
polímero hidrofóbico (PLGA); por otro lado, el poloxamero tiende a
difundir, durante el proceso de emulsificación, desde la fase
interna acuosa hacia la fase externa acuosa, dificultando así la
formación de las partículas. Esta dificultad ha podido solventarse
haciendo uso de un método de microencapsulación anhidro,
consistente en la formación de una emulsión de un disolvente
orgánico (en el que se ha de disolver el PLGA y el poloxamero) en
una fase externa oleosa en la que se disuelve un agente
tensoactivo. Gracias a este método han podido incorporarse
cantidades elevadas de poloxameros a micropartículas de PLGA (hasta
del 50%) formando matrices mixtas PLGA: poloxamero. Este sistema
microparticular mixto formado por una mezcla íntima de poloxamero y
PLGA ha permitido la liberación controlada de proteínas (Tobío
et al., Pharm. Res., 1999, 16, 5, 682-688).
Sin embargo, el inconveniente más notable de este método reside en
la dificultad para obtener partículas nanométricas, siendo el tamaño
medio de esas poblaciones de partículas superiores a 1 micra (1000
nanómetros). Además, dada la necesidad de utilizar aceites como
fase externa de la emulsión, el aislamiento de las microsferas se
hace muy laborioso y es necesaria la utilización de importantes
cantidades de disolventes orgánicos para conseguir la eliminación
del aceite. Por tanto, hasta el momento actual no ha sido descrito
ningún procedimiento que permita la incorporación de elevadas
cantidades de poloxamero en nanopartículas mixtas de
poloxamero:
PLGA.
PLGA.
La primera referencia encontrada relativa a la
utilización de poloxameros en la formación de matrices mixtas con
poliésteres basadas en la unión física de ambos polímeros aparece
descrita en la publicación US5330768. En dicho documento, se propone
la utilización de dichas mezclas a fin de lograr una modificación
en la liberación de la molécula activa incorporada en estos
sistemas. En él se hace referencia a la formación de películas
mediante codisolución de ambos polímeros en un disolvente orgánico
común y posterior evaporación del disolvente o mediante la fusión
conjunta de ambos polímeros y también a la formación de
micropartículas mediante el método de doble emulsión
(agua/disolvente orgánico/agua); sin embargo, no se menciona la
formación de nanopartículas. Ha de destacarse el hecho de que el
citado procedimiento de formación de partículas en fase externa
acuosa, permite únicamente la incorporación de cantidades limitadas
de poloxameros hidrofilicos debido a su lógica tendencia a difundir
a la fase externa acuosa; este hecho ha podido ser constatado en
nuestros estudios anteriores (Blanco et al., Eur. J. Pharm.
Biopharm., 1997, 43, 287-294, Blanco et al.
Eur. J. Pharm. Biopharm., 1998, 45, 285-294).
Asimismo, el documento US5330768 no menciona la utilización de
poloxameros lipofilicos ni de poloxaminas en la formación de las
citadas mezclas.
El primer documento encontrado que hace
referencia a la formación de un sistema microparticular mixto
formado por una mezcla íntima de poloxamero y PLGA destinado a
mejorar la estabilidad de proteínas microencapsuladas, permitiendo
además su liberación controlada, es el publicado por Tobío et
al. (Pharm. Res., 1999, 16, 5, 682-688). Más
recientemente, el documento US6465425 describe igualmente la
formación de micropartículas biodegradables conteniendo poloxamero
con la misma finalidad. Asimismo, en dicha composición se
incorporan, con la misma finalidad, un excipiente de tipo ácido y al
menos un polisacárido. Según dicho documento, la cantidad de
poloxamero que se puede incluir en esta composición puede variar
entre un 1 - 40% con respecto al peso total de la composición. La
forma de presentación de esta composición es la de films, obtenidos
por simple evaporación del disolvente, o bien, de micropartículas
obtenidas por atomización. Sin embargo, no se hace referencia
alguna a la formación de nanopartículas, lo cual se entiende si
tenemos en cuenta que la técnica de atomización no permite obtener
partículas de un tamaño tan reducido como las nanopartículas.
En la misma línea, con al finalidad de mejorar la
estabilidad de proteínas destaca el documento presentado por
Schwendeman et al (US2002/0009493), el cual describe la
utilización de poloxameros hidroflicos de peso molecular entre 500 y
30,000 Da, como agentes formadores de poros en sistemas elaborados
a partir de poliésteres. En dicho documento se reivindica la
presentación de estas composiciones en forma de cilindros o de
micropartículas, con un tamaño comprendido entre
10-100 µm. Estas partículas se obtienen mediante la
técnica de doble emulsión en fase externa acuosa, la cual permite
únicamente la incorporación de cantidades pequeñas de poloxameros
hidrofílicos, como se señaló en estudios anteriores (Blanco et
al., Eur. J. Pharm. Biopharm., 1997, 43,
287-294; Blanco et al. Eur. J. Pharm.
Biopharm., 1998, 45, 285-294), o alternativamente,
mediante la técnica de emulsificación de disolvente
orgánico/aceite, la cual, como se ha indicado anteriormente (Tobío
et al. Pharm. Res., 1999, 16, 5, 682-688), no
permite la obtención de nanopartículas.
En relación con los documentos que hacen
referencia explícita a la formación de nanopartículas que contienen
poloxameros cabe citar el documento US5962566. No obstante, este
documento señala la incorporación de colesterol como ingrediente
indispensable para la formación de las nanopartículas. El método de
formación indica además la necesidad de fundir el conjunto de los
materiales y su posterior dispersión en una fase acuosa.
Igualmente cabe citar un documento que describe
la formación de nanopartículas que incorporan en su estructura
poloxameros y poloxaminas, además de un agente lipídico
estabilizante (US20030059465). Estas nanopartículas van dirigidas a
la liberación del agente citostático camptotecina y se obtienen
mediante un procedimiento de hidratación de lípidos previamente
liofilizados. Aunque en dicho documento se reivindica la posible
incorporación de poliésteres tales como el PLGA, lo cierto es que
la técnica descrita no es aplicable a este tipo de polímeros. En
cualquier caso, la incorporación de lípidos en la estructura se
muestra como un elemento esencial de la composición
nanoparticular.
Como consecuencia de la revisión de los
documentos anteriores, cabe destacar que a pesar del importante
número de documentos que hacen referencia a la formación de
partículas de PLGA y poloxamero, lo cierto es que ninguno de los
documentos citados describe la formación de matrices mixtas que
contengan elevadas cantidades de poloxameros y poloxaminas, con
diferentes características de hidrofilia/lipofilia y que se
presenten bajo la forma nanoparticular. Este último aspecto es de
importancia crítica ya que las técnicas de microencapsulación
destinadas a la formación de micropartículas difieren generalmente
de las nanotecnologías aplicadas a la formación de nanopartículas.
Asimismo, conviene destacar el hecho de que los documentos
publicados relacionados con la obtención de nanopartículas,
utilizan únicamente poloxameros hidrofilicos incorporados en muy
bajas proporciones en el sistema nanoparticular.
La presente invención se refiere a nanopartículas
que comprenden un polímero biodegradable, preferentemente un
poliéster y un copolímero bloque derivado del polioxietileno,
preferentemente poloxamero y poloxamina. Asimismo, la presente
invención se refiere a un método de preparación que permite la
incorporación de porcentajes altos de poloxameros y poloxaminas en
nanopartículas, siendo la relación polímero biodegradable: derivado
polioxietilenado entre 1:0,1 y 1:3.
Por lo tanto, según un primer aspecto, la
invención se refiere a un procedimiento de preparación de
nanopartículas de tamaño inferior a 1 \mum, para la administración
de ingredientes activos, que comprende las etapas de:
a) disolver un polímero biodegradable junto con
un copolímero bloque derivado del polioxietileno en un disolvente
orgánico, estando la relación en peso polímero
biodegradable:copolímero bloque entre 1:0,1 y 1:3;
b) añadir, bajo agitación, la disolución obtenida
a una fase polar, en la cual el polímero biodegradable presenta una
baja solubilidad, precipitando los polímeros y formándose las
nanopartículas;
c) eliminar el disolvente orgánico; d) aislar las
partículas. El ingrediente activo puede disolverse directamente en
el disolvente orgánico no polar (moléculas lipofílicas) o puede
disolverse previamente en un volumen pequeño de fase acuosa
(moléculas hidrosolubles) y luego dispersarse en el disolvente
orgánico, antes o después de la etapa a).
De forma preferida, el disolvente orgánico en a)
será un disolvente no polar.
Según una forma de realización preferida, la
preparación de las formulaciones de nanopartículas de mezcla íntima
puede incluir adicionalmente una etapa de liofilización. En forma
liofilizada, las nanopartículas pueden ser almacenadas durante
largos períodos de tiempo y ser fácilmente regeneradas, simplemente
añadiendo un volumen de agua óptimo. La liofilización de las
nanopartículas ha sido optimizada con la incorporación de un
excipiente crioprotector (glucosa o trehalosa) en el medio de
suspensión de las formulaciones.
Según otra forma de realización preferida, en el
procedimiento anterior el polímero biodegradable es un poliéster,
el cual se selecciona del grupo de poliésteres como el ácido
poliláctico, ácido
poliláctico-co-glicólico y sus
copolímeros, policaprolactona o del grupo de los polianhídridos.
Para la preparación de las nanopartículas de mezcla íntima se ha
utilizado el polímero ácido
poliláctico-co-glicólico 50:50
Resomer® RG 503 Mw: 35000 (Boehringer Ingelheim).
Según otras formas de realización preferida, el
copolímero bloque se selecciona de poloxameros y poloxaminas.
Los poloxameros son copolímeros tribloque tipo
polioxietilenopolioxipropileno-polioxietileno
(PEO-PPO-PEO) que, dependiendo de su
relación PEO:PPO varían en sus características de peso molecular,
hidrofobicidad, etc. De forma preferida, los poloxameros empleados
tendrán un peso molecular comprendido entre 1.000 y 25.000 Daltons.
Estos polímeros pueden ser obtenidos de BASF Corporation bajo el
nombre comercial Pluronic.TM. Para la preparación de las
nanopartículas de mezcla íntima hemos utilizado los siguientes
poloxameros: Pluronic.TM F68 con peso molecular 8350 y HLB=29,
Pluronic.TM con peso molecular 4400 y HLB=1.
Las poloxaminas son copolímeros formados por 4
cadenas de PEO-PPO unidas por un puente de
etilendiamina. Análogamente a los poloxameros, sus características
pueden variar al cambiar la relación PEO-PPO. De
forma preferida, la poloxaminas empleadas presentarán un peso
molecular comprendido entre 1.000 y 25.000 Daltons. Estos polímeros
pueden ser obtenidos de BASF Corporation bajo el nombre comercial
Tetronic.TM. Para la preparación de las nanopartículas de mezcla
íntima hemos utilizado las siguientes poloxaminas: Tetronic.TM 908
con peso molecular 25000 y HLB=30,5, Tetronic.TM 904 con peso
molecular 6700 y HLB=14,5, Tetronic.TM 901 con peso molecular 4700 y
HLB=2,5.
Según otra forma de realización preferida, la
proporción en peso de polímero biodegradable está entre 1:1 y
1:3.
Según un segundo aspecto de la presente
invención, ésta se refiere a nanopartículas obtenidas según el
procedimiento anteriormente descrito, tanto liofilizadas como no
liofilizadas.
Estas nanopartículas ofrecen características
innovadoras y distintivas dada su capacidad para la encapsulación y
liberación controlada de moléculas activas muy delicadas, como son
las proteínas y los plásmidos ADN. Además, debido a la presencia de
importantes cantidades de poloxameros y poloxaminas en su
composición, dichas nanopartículas pueden presentar un perfil de
biodistribución diferenciado, en comparación a las partículas
clásicas constituidas a partir de poliésteres.
Debido a su tamaño nanoparticular estos nuevos
sistemas van a poder ser administrados al organismo humano por
cualquier vía de administración, incluyendo la vía intravenosa,
mientras que las micropartículas no pueden ser administradas por
esta vía debido a la obstrucción que causarían en los capilares
sanguíneos. Asimismo, existe abundante documentación que muestra
que las nanopartículas son capaces de superar barreras biológicas
(mucosas, epitelios) mientras que las micropartículas no lo son.
Las propiedades físico-químicas
de las formulaciones de distinta composición y de diferente
relación de polímeros han sido caracterizadas empleando las técnicas
de espectroscopia de correlación de fotónica (PCS) y anemometría
láser-Doppler. La morfología de las nanopartículas
se estudió mediante microscopía electrónica de transmisión (TEM) y
RMN de 1H. Estos estudios confirmaron la formación del sistema de
mezcla íntima anteriormente descrita.
Con el fin de comprobar la aplicabilidad de estas
nanopartículas de mezcla íntima para la liberación de
macromoléculas delicadas, hemos encapsulado el plásmido
pEGFP-C1 (codificante una proteína fluorescente
verde) en las diferentes formulaciones. Los resultados de estos
estudios de liberación "in vitro" han evidenciado el
potencial de las formulaciones como vehículos de liberación
controlada durante tiempos extendidos.
La citotoxicidad de las nanopartículas de
distintas composiciones, a diferentes concentraciones, ha
sido
ensayado en cultivos celulares con la prueba colorimétrica del MTS ((3-(4,5-dimethylthiazol-2-y1)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulphophenyl)-2H- tetrazolium) en la línea celular MCF-7 crecida en Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) suplementado con 10% de suero bovino fetal (FBS). Se puede concluir que ninguna de las formulaciones produce efectos tóxicos en las células.
ensayado en cultivos celulares con la prueba colorimétrica del MTS ((3-(4,5-dimethylthiazol-2-y1)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulphophenyl)-2H- tetrazolium) en la línea celular MCF-7 crecida en Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) suplementado con 10% de suero bovino fetal (FBS). Se puede concluir que ninguna de las formulaciones produce efectos tóxicos en las células.
Según un tercer aspecto, la presente invención se
refiere a composiciones, especialmente farmacéuticas y cosméticas,
que incorporan las nanopartículas según la presente invención.
A continuación se explica más detalladamente la
invención en base a una serie de ejemplos, sin carácter limitativo
para el alcance de la invención.
Fig 1: espectros de RMN de 1H de las
formulaciones de nanopartículas PLGA/Pluronic.TM F68 con diferentes
relaciones de polímero
Fig 2: imágenes TEM de las formulación de
nanopartículas PLGA/Pluronic.TM F68 con relación de polímero
1:1
Fig 3: espectros de RMN de 1H de las
formulaciones de nanopartículas PLGA/Tetronic.TM 908 con diferentes
relaciones de polímero
Fig 4: imágenes TEM de formulaciones de
nanopartículas PLGA/Tetronic.TM 908 con relación de polímero
1:1
Fig 5: tamaño de nanopartículas PLGA/poloxamero y
PLGA/poloxamina en función de la relación PLGA/polímero y del tipo
de poloxamero o poloxamina
Fig 6: carga superficial de las nanopartículas
PLGA/poloxamero y PLGA/poloxamina en función de la relación
PLGA/polímero y del tipo de poloxamero o poloxamina
Fig 7: efecto de los agentes crioprotectores en
el tamaño de las nanopartículas PLGA/poloxamero liofilizadas
Fig 8: efecto de los agentes crioprotectores en
el tamaño de las nanopartículas PLGA/poloxamero liofilizadas
Fig 9: perfil de liberación "in
vitro" de ADN plasmídico encapsulado en las nanopartículas
PLGA/F68,
PLGA/L121, PLGA/T908 y PLGA/T904 con relación de polímeros 1:1
PLGA/L121, PLGA/T908 y PLGA/T904 con relación de polímeros 1:1
Fig 10: resultados del ensayo de citotoxicidad de
las nanopartículas PLGA/F68, PLGA/L121, PLGA/T908 y
PLGA/T904 con relación de polímeros 1:1 en el cultivo celular MCF-7
PLGA/T904 con relación de polímeros 1:1 en el cultivo celular MCF-7
Se prepararon nanopartículas de mezcla íntima con
la técnica modificada de difusión del solvente anteriormente
descrita. Más específicamente: se disolvieron 50 mg del ácido
poliláctico-co-glicólico y 25, 50 ó
75 mg del poloxamero Pluronic.TM F68 (HLB=29) en 2 m1 de
diclorometano y esta solución orgánica se mezcló durante 30 s
mediante vortex (2400 min^{-1}, Heidolph) con un pequeño volumen
de fase acuosa. La emulsión así obtenida se añadió a 25 ml de
etanol bajo agitación magnética moderada. La formulación se diluyó
con 25 ml de agua y la agitación se mantuvo durante 10 min. más.
Después de la evaporación del solvente a 30°C y en vacío
(Rotavapor, Büchi R-114), las nanopartículas se
recogieron y se concentraron en medio acuoso. Opcionalmente, para
su posterior análisis las nanopartículas se centrifugaron (1 h,
8000xg, 15°C, Avanti 30, Beckman) y se liofilizaron (48 horas a
-34°C, Labconco Corp).
El tamaño y la polidispersión de las
nanopartículas se midieron con espectroscopia de correlación
fotónica (PCS) y la carga superficial se determinó mediante
anemometría láser - Doppler (Zetasizer 3000 HS, Malvern
Instruments) (Tabla 1).
La composición de las matrices se analizó
empleando espectroscopia de RMN de 1H ((Bruker
AMX-300) a partir de muestras liofilizadas y
disueltas en cloroformo deuterado. Estos estudios confirmaron la
presencia del poloxamer/poloxamina en la matriz de las
nanopartículas. De las intensidades de los picos correspondientes
también se puede concluir que la cantidad del copolímero bloque
polioxietileno-polioxipropileno se puede cambiar
ajustando los parámetros de la preparación. (Figura 1.)
El análisis morfológico de las nanoestructuras se
realizó mediante microscopía electrónica de transmisión (CM 12
Philips) utilizando muestras teñidas con una solución de 2% ácido
fosfotúngstico. (Figura 2).
\vskip1.000000\baselineskip
| Pluronic.TM F68 | |||
| PLGA:poloxamer | ------------------------------------------------------------------------------------------------------ | ||
| tamaño (nm) | P.I. | pot. \zeta (mV) | |
| 1 : 0 | 191.5\pm7.1 | 0.046 | -60.1\pm7.4 |
| 1 : 0,5 | 162.8\pm4.4 | 0.079 | -50.2\pm0.8 |
| 1 : 1 | 163.2\pm5.1 | 0.135 | -43.1\pm6.4 |
| 1 : 1,5 | 159.8\pm6.5 | 0.163 | -38.5\pm0.6 |
Se prepararon nanopartículas de mezcla íntima con
la técnica modificada de difusión del solvente anteriormente
descrita, pero cambiando el tipo del copolímero
polioxietileno-polioxipropileno. El PLGA y las
distintas cantidades del poloxamero Pluronic.TM L121 (HLB=1) se
disolvieron en diclorometano y esta solución orgánica se mezcló
mediante vortex con un pequeño volumen de fase acuosa. La emulsión
así obtenida se añadió bajo agitación a etanol. Las formulaciones
se diluyeron con agua y la agitación se mantuvo durante 10 minutos
más. Después de la evaporación del solvente las nanopartículas se
concentraron en medio acuoso. Opcionalmente, para su posterior
análisis las nanopartículas se centrifugaron y se liofilizaron. El
tamaño y la polidispersión de las nanopartículas se midieron
mediante PCS y la carga superficial se determinó con anemometría
laser-Doppler (Tabla 2). La morfología y la
composición de las matrices se estudiaron empleando espectroscopia
RMN de 1H y microscopía TEM.
| Pluronic.TM L121 | |||
| PLGA:poloxamer | ------------------------------------------------------------------------------------------------------ | ||
| tamaño (nm) | P.I. | pot. \zeta (mV) | |
| 1 : 0 | 191.5\pm7.1 | 0.046 | -60.1\pm7.4 |
| 1 : 0,5 | 164.5\pm6.3 | 0.156 | -27.3\pm7.1 |
| 1 : 1 | 185.5\pm6.0 | 0.195 | -30.0\pm8.0 |
| 1 : 1,5 | 257.3\pm10.0 | 0.179 | -24.5\pm5.5 |
Se prepararon nanopartículas de mezcla íntima con
la técnica modificada de difusión del solvente anteriormente
descrita, pero cambiando el tipo del copolímero
polioxietileno-polioxipropileno: el PLGA y las
distintas cantidades de la poloxamina Tetronic.TM 908 (HLB=30,5) se
disolvieron en diclorometano y esta solución orgánica se mezcló
mediante vortex con un pequeño volumen de fase acuosa. La emulsión
así obtenida se añadió bajo agitación a etanol. Las formulaciones
se diluyeron con agua y la agitación se mantuvo durante 10 minutos
más. Después de la evaporación del solvente las nanopartículas se
concentraron en medio acuoso.
Opcionalmente, para su posterior análisis las
nanopartículas se centrifugaron y se liofilizaron. El tamaño y la
polidispersión de las nanopartículas se midieron mediante PCS y la
carga superficial se determinó con anemometría
laser-Doppler (Tabla 3). La morfología y la
composición de las matrices se estudiaron empleando espectroscopia
RMN de 1H y microscopía TEM (Figura 3 y 4).
| Tetronic.TM 908 | |||
| PLGA:poloxamina | ------------------------------------------------------------------------------------------------------ | ||
| tamaño (nm) | P.I. | pot.\zeta (mV) | |
| 1 : 0 | 191.5 \pm 7.1 | 0.046 | -60.1 \pm 7.4 |
| 1 : 0,5 | 189.2 \pm 4.6 | 0.202 | -30.9 \pm 3.9 |
| 1 : 1 | 174.0 \pm 5.4 | 0.271 | -26.9 \pm 1.2 |
| 1 : 1,5 | 171.2 \pm 3.2 | 0.235 | -24.1 \pm 1.0 |
Se prepararon nanopartículas de mezcla íntima con
la técnica modificada de difusión del solvente anteriormente
descrita, pero cambiando el tipo del copolímero
polioxietileno-polioxipropileno: el PLGA y las
distintas cantidades de la poloxamina Tetronic.TM 904 (HLB=14,5) se
disolvieron en diclorometano y esta solución orgánica se mezcló
mediante vortex con un pequeño volumen de fase acuosa. La emulsión
así obtenida se añadió bajo agitación a etanol. Las formulaciones
se diluyeron con agua y la agitación se mantuvo durante 10 minutos
más. Después de la evaporación del solvente las nanopartículas se
concentraron en medio acuoso.
Opcionalmente, para su posterior análisis las
nanopartículas se centrifugaron y se liofilizaron. El tamaño y la
polidispersión de las nanopartículas se midieron mediante PCS y la
carga superficial se determinó con anemometría
laser-Doppler (Tabla 4). La morfología y la
composición de las matrices se estudiaron empleando espectroscopia
RMN de 1H y microscopía TEM (Figura 3 y 4).
| Tetronic.TM 904 | |||
| PLGA:poloxamina | ------------------------------------------------------------------------------------------------------ | ||
| tamaño (nm) | P.I. | pot.\zeta (mV) | |
| 1 : 0 | 191.5 \pm 7.1 | 0.046 | -60.1 \pm 7.4 |
| 1 : 0,5 | 160.2 \pm 5.6 | 0.188 | -40.0 \pm 4.6 |
| 1 : 1 | 168.7 \pm 9.4 | 0.179 | -38.4 \pm 3.3 |
| 1 : 1,5 | 168.8 \pm 2.5 | 0.160 | -39.6 \pm 2.0 |
Se prepararon nanopartículas de mezcla íntima con
la técnica modificada de difusión del solvente anteriormente
descrita, pero cambiando el tipo del copolímero
polioxietileno-polioxipropileno: el PLGA y las
distintas cantidades de la poloxamina Tetronic.TM 901 (HLB=14,5) se
disolvieron en diclorometano y esta solución orgánica se mezcló
mediante vortex con un pequeño volumen de fase acuosa. La emulsión
así obtenida se añadió bajo agitación a etanol. Las formulaciones
se diluyeron con agua y la agitación se mantuvo durante 10 minutos
más. Después de la evaporación del solvente las nanopartículas se
concentraron en medio acuoso.
Opcionalmente, para su posterior análisis las
nanopartículas se centrifugaron y se liofilizaron. El tamaño y la
polidispersión de las nanopartículas se midieron mediante PCS y la
carga superficial se determinó con anemometría
laser-Doppler (Tabla 5). La morfología y la
composición de las matrices se estudiaron empleando espectroscopia
RMN de 1H y microscopía TEM.
| Tetronic.TM 901 | |||
| PLGA:poloxamina | ------------------------------------------------------------------------------------------------------ | ||
| tamaño (nm) | P.I. | pot.\zeta (mV) | |
| 1 : 0 | 191.5 \pm 7.1 | 0.046 | -60.1 \pm 7.4 |
| 1 : 0,5 | 205.3 \pm 54.5 | 0.162 | -25.4 \pm 5.0 |
| 1 : 1 | 277.4 \pm 102.9 | 0.308 | -28.9 \pm 5.4 |
| 1 : 1,5 | 333.7 \pm 82.1 | 0.275 | -38.2 \pm 8.3 |
Las nanopartículas de mezcla íntima de
PLGA/Pluronic.TM F68, PLGA/Pluronic.TM L121, PLGA/Tetronic.TM 908
y PLGA/Tetronic 904 con relación de polímero 1:1 se prepararon como
ha sido descrito en los Ejemplos 1, 2, 3 y 4. Se incorporaron dos
agentes crioprotectores (glucosa y trehalosa) en el medio de
suspensión de las nanopartículas. Las formulaciones, a diferentes
concentraciones (1, 2.5, 5 mg/ml), se liofilizaron en la presencia
de 5% o 10% del crioprotector. El tamaño y la polidispersión de las
nanopartículas de midieron después del proceso de
liofilización-resuspensión y se compararon con los
valores iniciales. Los efectos de la concentración de las
nanopartículas, el tipo y la concentración del crioprotector han
sido evaluadas. Se puede concluir que en presencia de 5% de
crioprotector, todas las formulaciones se pueden liofilizar a
concentraciones relativamente elevadas (2,5 mg/ml) sin agregación
significativa (Figura 7 y 8).
| cryoprotector | dilución de | relación de tamaños resuspendido/original | |||
| NPs | F68 | L121 | T908 | T904 | |
| mg/ml | |||||
| 5% glucosa | 1 | 1,21\pm0,04 | 1,25\pm0,21 | 1,17\pm0,04 | 1,18\pm0,01 |
| 2,5 | 1,15\pm0,06 | 1,65\pm0,29 | 1,12\pm0,09 | 1,59\pm0,35 | |
| 5 | 1,11\pm0,09 | 2,62\pm0,73 | 1,03\pm0,05 | 3,77\pm0,39 | |
| 10% glucosa | 1 | 1,28\pm0,04 | 1,32\pm0,39 | 2,60 | 1,04 |
| 2,5 | 1,39\pm0,15 | 1,69\pm0,67 | 1,59 | 1,18 | |
| 5 | 1,30\pm0,10 | 2,25\pm0,15 | 1,20 | 1,33 | |
| 5% trehalosa | 1 | 1,22\pm0,17 | 3,58\pm2,47 | 1,13\pm0,04 | 1,29\pm0,17 |
| 2,5 | 1,93\pm0,55 | 4,66\pm2,9 | 1,21\pm0,03 | 2,27\pm0,90 | |
| 5 | 1,57\pm0,27 | 5,23\pm0,21 | 1,23\pm0,04 | 5,66\pm4,48 | |
| 10% | 1 | 1,21\pm0,12 | 2,32\pm1,09 | 1,25\pm0,10 | 1,64 |
| trehalosa | 2,5 | 1,30\pm0,07 | 5,46\pm0,99 | 1,46\pm0,06 | 2,33 |
| 5 | 1,82\pm0,51 | 5,35\pm0,52 | 1,46\pm0,20 | 2,74 |
Las nanopartículas de mezcla íntima de
PLGA/Pluronic.TM F68, PLGA/Pluronic.TM L121, PLGA/Tetronic.TM 908 y
PLGA/Tetronic 904 con relación de polímero 1:1 se prepararon como
ha sido descrito en los Ejemplos 1, 2, 3 y 4. El plásmido modelo
pEGFP-C 1 (codificante de una proteína fluorescente
verde) se incorporó en la fase acuosa interna de las formulaciones
con una carga teórica de 0,4%. El tamaño, la polidispersión y la
carga superficial de las formulaciones cargadas con ADN se midieron
empleando espectroscopia de correlación fotónica y anemometría
laser-Doppler (Tabla 7). La eficacia de
encapsulación y los perfiles de liberación "in vitro"
se determinaron a partir de las muestras de sobrenadantes de
diferentes tiempos con ensayos fluorimétricos utilizando PicoGreen
Quantitation Kit (Molecular Probes) en tampón T.E. a pH = 7,5
(Figura 9).
| tipo de | tamaño | P.I. | potencial-Z | eficacia de |
| poloxamer/poloxamina | (nm) | (mV) | encapsulación % | |
| Pluronic.TM F68 | 182,6 \pm 6,0 | 0,114 | -50,8 \pm 3,6 | 35,2 \pm 8,9 |
| Pluronic.TM L121 | 216,8 \pm 5,3 | 0,154 | -23,5 \pm 1,4 | 31,3 \pm 3,8 |
| Tetronic.TM T908 | 268,7\pm11,6 | 0,437 | -35,0 \pm 0,9 | 32,0 \pm 3,7 |
| Tetronic.TM T904 | 161,5 \pm 7,6 | 0,154 | -54,1 \pm 2,0 | 44,1 \pm 4,3 |
Las nanopartículas de mezcla íntima de
PLGA/Pluronic.TM F68, PLGA/Pluronic.TM L121, PLGA/Tetronic.TM 908 y
PLGA/Tetronic 904 con relación de polímero 1:1 se prepararon como
ha sido descrito en los Ejemplos 1, 2, 3 y 4. La citotoxicidad de
las formulaciones se estudió en el cultivo celular
MCF-7 en DMEM suplementado con 10% FBS. Las células
de incubaron con distintas concentraciones de nanopartículas (de 1
a 5 mg/ml) durante 24 horas. La viabilidad celular se midió con el
reactivo MTS después de un periodo de recuperación de 24 horas. Los
resultados demuestran que, a pesar de las concentraciones altas y el
tiempo de incubación extendido, ninguna de las formulaciones
produce efectos tóxicos en las células.
Claims (15)
1. Procedimiento de preparación de nanopartículas
de tamaño inferior a 1 \mum para la administración de
ingredientes activos, caracterizado porque comprende las
etapas de:
- a)
- disolver un polímero biodegradable junto con un copolímero bloque derivado del polioxietileno en un disolvente orgánico, estando la relación en peso de ambos polímeros entre 1:0,1 y 1:3.
- b)
- añadir, bajo agitación, la disolución obtenida a una fase polar, en la cual el polímero biodegradable presenta una baja solubilidad, precipitando el polímero y formándose las nanopartículas.
- c)
- eliminar el disolvente orgánico;
- d)
- aislar las partículas,
donde el ingrediente activo es
disuelto en el disolvente orgánico empleado en a), antes o después
de la etapa a), o es disuelto en un volumen pequeño de fase acuosa,
el cual subsiguientemente es dispersado en el solvente orgánico
empleado en a), antes o después de la etapa
a).
2. Procedimiento según la reivindicación 1,
caracterizado porque comprende una etapa adicional después
de e) de liofilizar las nanopartículas obtenidas.
3. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 y 2, caracterizado porque el polímero
biodegradable es un poliéster.
4. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 y 2, caracterizado porque el polímero
biodegradable es un polianhidrido.
5. Procedimiento según la reivindicación 3,
caracterizado porque el poliéster se selecciona entre la
policaprolactona, el ácido poliláctico, el ácido
poliláctico-coglicólico y sus mezclas.
6. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque el copolímero
bloque es poloxamero.
7. Procedimiento según la reivindicación 6,
caracterizado porque el poloxamero tiene un peso molecular
comprendido entre 1.000-25.000 Daltons.
8. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque el copolímero
bloque es poloxamina.
9. Procedimiento según la reivindicación 8,
caracterizado porque la poloxamina tiene un peso molecular
comprendido entre 1.000-25.000 Daltons.
10. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque el ingrediente
activo se selecciona de moléculas con propiedades terapéuticas,
vacunas e ingredientes cosméticos.
11. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 10, caracterizado porque la relación en
peso de ambos polímeros está entre 1:1 y 1:3.
12. Nanopartículas para la administración de
ingredientes farmacéuticamente o cosméticamente activos, de tamaño
inferior a 1 \mum, obtenibles mediante el procedimiento según
cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3 a 10.
13. Nanopartículas liofilizadas para la
administración de ingredientes farmacéuticamente o cosméticamente
activos, de tamaño inferior a 1 \mum, obtenibles mediante el
procedimiento según la reivindicación 2.
14. Composiciones caracterizadas porque
comprenden nanopartículas según cualquiera de las reivindicaciones
12 y 13.
15. Composiciones farmacéuticas o cosméticas
caracterizadas porque comprenden nanopartículas según
cualquiera de las reivindicaciones 12 y 13.
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Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2044934A1 (en) | 2007-10-01 | 2009-04-08 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Dispersion of poloxamer-protein particles, methods of manufacturing and uses thereof |
| WO2009052493A1 (en) * | 2007-10-19 | 2009-04-23 | Bisco, Inc. | Time-controlled intraoral film former system for intraoral use |
| ES2358403B2 (es) * | 2009-10-26 | 2011-12-13 | Universidad De Santiago De Compostela | Sistema para la administración de sustancias biológicamente activas que comprende poli-epsilón-caprolactona, poloxamina y una o varias sustancias activas. |
| WO2012059936A1 (en) | 2010-11-03 | 2012-05-10 | Padma Venkitachalam Devarajan | Pharmaceutical compositions for colloidal drug delivery |
| CN102008731B (zh) * | 2010-12-14 | 2012-06-27 | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 | 以嵌段共聚物为载体的氟碳化合物纳米载药制剂的制备方法 |
| ES2385995B2 (es) * | 2011-01-10 | 2013-05-21 | Universidade De Santiago De Compostela | Nanocápsulas con cubierta polimérica |
| EP2706989A1 (en) * | 2011-05-09 | 2014-03-19 | Instituto Químico De Sarrià | Polymeric nanoparticles for drug delivery |
| KR101367365B1 (ko) * | 2012-01-18 | 2014-02-27 | 고려대학교 산학협력단 | 생체적합성 입자 및 이의 제조방법 |
| CN104382866B (zh) * | 2014-11-12 | 2017-08-01 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一种包载两种表面活性剂的抗肿瘤耐药的纳米递释系统及其制备方法 |
| WO2021158627A1 (en) * | 2020-02-03 | 2021-08-12 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Compositions comprising nanoparticles and methods thereof |
| WO2023168387A1 (en) * | 2022-03-04 | 2023-09-07 | West Pharmaceutical Services, Inc. | Systems, compositions and methods for low temperature preservation of cells, bioinks, hydrogels, and tissue engineered medicinal products (temps) |
Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4582865A (en) * | 1984-12-06 | 1986-04-15 | Biomatrix, Inc. | Cross-linked gels of hyaluronic acid and products containing such gels |
| GB8601100D0 (en) * | 1986-01-17 | 1986-02-19 | Cosmas Damian Ltd | Drug delivery system |
| FR2608988B1 (fr) * | 1986-12-31 | 1991-01-11 | Centre Nat Rech Scient | Procede de preparation de systemes colloidaux dispersibles d'une substance, sous forme de nanoparticules |
| IT1247472B (it) * | 1991-05-31 | 1994-12-17 | Fidia Spa | Processo per la preparazione di microsfere contenenti componenti biologicamente attivi. |
| US5565215A (en) * | 1993-07-23 | 1996-10-15 | Massachusettes Institute Of Technology | Biodegradable injectable particles for imaging |
| US5543158A (en) * | 1993-07-23 | 1996-08-06 | Massachusetts Institute Of Technology | Biodegradable injectable nanoparticles |
| US20010053359A1 (en) * | 1994-07-26 | 2001-12-20 | Peter Watts | Drug delivery composition for the nasal administration of antiviral agents |
| ATE252894T1 (de) * | 1995-01-05 | 2003-11-15 | Univ Michigan | Oberflächen-modifizierte nanopartikel und verfahren für ihre herstellung und verwendung |
| PT814778E (pt) * | 1995-03-10 | 2001-11-30 | Roche Diagnostics Gmbh | Formas de administracao farmaceuticas contendo polipeptidos sob a forma de microparticulas e processo para a sua preparacao |
| ES2177592T3 (es) * | 1995-07-05 | 2002-12-16 | Europ Economic Community | Nanoparticulas biocompatibles y biodegradables para la absorcion y administracion de medicamentos proteinicos. |
| US7276251B2 (en) * | 1997-04-01 | 2007-10-02 | Lg Life Sciences, Ltd., Inc. | Sustained-release composition of drugs encapsulated in microparticles of hyaluronic acid |
| FR2777193B1 (fr) * | 1998-04-14 | 2001-06-08 | Coletica | Particule a groupement hydroxamique chelatante d'ions metalliques et leur utilisation en cosmetique ou en pharmacie |
| FR2777895A1 (fr) * | 1998-04-28 | 1999-10-29 | Debio Rech Pharma Sa | Polymere sequence non-reticule,procede pour sa preparation, et ses utilisations |
| US20030059465A1 (en) * | 1998-05-11 | 2003-03-27 | Unger Evan C. | Stabilized nanoparticle formulations of camptotheca derivatives |
| IN191203B (es) * | 1999-02-17 | 2003-10-04 | Amarnath Prof Maitra | |
| AU4476600A (en) * | 1999-04-22 | 2000-11-10 | Vanderbilt University | Polymeric encapsulation system promoting angiogenesis |
| US6743446B2 (en) * | 1999-12-15 | 2004-06-01 | The Ohio State University Research Foundation | Methods for stabilizing biologically active agents encapsulated in biodegradable controlled-release polymers |
| US6465425B1 (en) * | 2000-02-10 | 2002-10-15 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Microencapsulation and sustained release of biologically active acid-stable or free sulfhydryl-containing proteins |
| US20030026844A1 (en) * | 2000-04-18 | 2003-02-06 | Hee-Yong Lee | Injectable sustained release pharmaceutical composition and processes for preparing the same |
| AU2003304108B2 (en) * | 2002-10-30 | 2007-03-22 | Spherics, Inc. | Nanoparticulate bioactive agents |
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Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| LOURENCO, C. et al. Steric stabilization of nanoparticles: size and surface properties. Int. J. Pharmaceutics, 138, (1996), 1-12. * |
| SÁNCHEZ, A. et al. Biodegradable micro- and nanoparticles as long-term delivery vehicles for interferon-alpha. Eur. J. Pharma. Sciences, 18, (3-4), marzo 2003, 221-229. * |
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