ES2206907T3 - Compuestos anti-picornavirus, composiciones que contienen estos compuestos y sus procedimientos de utilizacion. - Google Patents
Compuestos anti-picornavirus, composiciones que contienen estos compuestos y sus procedimientos de utilizacion.Info
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Abstract
El inhibidor de la proteasa picornaviral 3C, obtenido por síntesis química, inhibe o bloquea la actividad biológica de la proteasa picornaviral 3C. Estos compuestos de fórmula (I) en la que M es O ó S, así como las composiciones farmacéuticas que contienen estos compuestos son adecuados para tratar pacientes anfitriones infectados con 1 o más picornavirus.
Description
Compuestos anti-picornavirus,
composiciones que contienen estos compuestos y sus procedimientos
de utilización.
La invención atañe al descubrimiento y el uso de
nuevos compuestos que inhiben la actividad enzimática de las
proteasas 3C picornavíricas, específicamente de las proteasas de los
rinovirus (RVP, abreviadamente en inglés "rhinovirus
proteases"), así como que retardan el crecimiento vírico en
cultivo celular.
Los picornavirus son una familia de pequeños
virus sin envoltura que contienen ARN de cadena positiva y que
infectan a los seres humanos y a otros animales. Estos virus
incluyen a los rinovirus humanos, virus de la poliomielitis humana,
virus Coxsackie humanos, virus ECHO (abreviadamente en inglés
"enteric cytopathic human orphan virus") humanos, enterovirus
humanos y bovinos, virus de la encefalomiocarditis, meningovirus,
virus de los pies y de la boca y virus de la hepatitis A. Los
rinovirus humanos son la principal causa del resfriado común. Hasta
la fecha, no hay terapias eficaces para curar el resfriado común,
sólo tratamientos que alivian los síntomas.
Las infecciones picornavíricas pueden tratarse
mediante la inhibición de las enzimas proteolíticas 3C. Estas
enzimas son requeridas en la maduración natural de los picornavirus.
Son responsables de la ruptura autocatalítica de la poliproteína
grande genómica en las proteínas víricas esenciales. Miembros de la
familia de proteasas 3C son cisteína proteasas, en las que el grupo
sulfhidrilo corta más frecuentemente el enlace amido
glutamina-glicina. Se cree que la inhibición de las
proteasas 3C bloquea la ruptura proteolítica de la poliproteína, lo
que puede retardar una tras otra la maduración y la replicación de
los virus, interfiriendo con la producción de las partículas
víricas.
Wipf y col., J. Org. Chem., 1994,
59, 4875-4886, describen reacciones
2'-S_{N} de aziridinas peptídicas para obtener
isoésteres dipeptídicos (E)-alquénicos.
El objeto de la presente invención es
proporcionar pequeñas moléculas selectivas que inhiben el
procesamiento de las cisteína proteasas y son específicamente
reconocidas, para tratar y curar las infecciones picornavíricas y,
en particular, el resfriado común.
La presente invención se centra en los compuestos
que funcionan como inhibidores de la proteasa 3C picornavírica,
particularmente aquellos que tienen actividad antivírica.
Adicionalmente se centra en el uso de tales inhibidores de la
proteasa 3C. Los autores de la invención demuestran que los
compuestos de la presente invención se unen a las proteasas 3C de
los rinovirus y tienen preferentemente actividad antivírica en
cultivo celular. Los análisis de inhibición enzimática usados
revelan que estos compuestos pueden unirse irreversiblemente y los
análisis en cultivo celular demuestran que estos compuestos pueden
poseer actividad antivírica.
Dicho objeto se consigue mediante un compuesto de
fórmula (I):
en la
que:
M es O o S;
R_{1} es H, F, un grupo alquilo, OH, SH o un
grupo O-alquilo;
R_{2} y R_{5} se seleccionan
independientemente de H,
o un grupo alquilo, en el que dicho grupo alquilo
es diferente
de
con la condición de que al menos uno de R_{2} o
R_{5} debe
ser
y en la que, cuando R_{2} o R_{5}
es
X es =CH o =CF e Y_{1} es =CH o =CF,
o X e Y_{1} junto con Q' forman un anillo de
tres miembros en el que Q' es -C(R_{10})(R_{11})- o -O-,
X es -CH- o -CF-, e Y_{1} es -CH-, -CF- o -C(alquilo)-,
siendo R_{10} y R_{11} independientemente H, un halógeno o un
grupo alquilo o formando, junto con el átomo de carbono al que están
unidos, un grupo cicloalquilo o un grupo heterocicloalquilo,
o X es -CH_{2}-, -CF_{2}-, -CHF- o -S- e
Y_{1} es -O-, -S-, -NR_{12}-, -C(R_{13})(R_{14})-,
-C(O)-, -C(S)- o -C(CR_{13}R_{14})-,
en los que R_{12} es H o un alquilo y R_{13}
y R_{14} son independientemente H, F o un grupo alquilo o, junto
con los átomos a los que están unidos, forman un grupo cicloalquilo
o un grupo heterocicloalquilo;
A_{1} es C, CH, CF, S, P, Se, N, NR_{15},
S(O), Se (O), P-OR_{15} o
P-NR_{15}R_{16},
en los que R_{15} y R_{16} son
independientemente un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo
heterocicloalquilo, un grupo arilo o un grupo heteroarilo o, junto
con el átomo al que están unidos, forman un grupo
heterocicloalquilo;
D_{1} es un grupo con un par de electrones
desapareados capaces de formar un enlace de hidrógeno; y
B_{1} es H, F, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo, -OR_{17}, -SR_{17}, -NR_{17}R_{18},
-NR_{19}NR_{17}R_{18} o -NR_{17}OR_{18},
en los que R_{17}, R_{18} y R_{19} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo;
y con las condiciones de que cuando D_{1} es el
grupo \equivN con un par de electrones desapareados capaces de
formar un enlace de hidrógeno, B_{1} no existe; y cuando A_{1}
es un carbono sp^{3}, B_{1} no es -NR_{17}R_{18} cuando
D_{1} es un grupo -NR_{25}R_{26} con un par de electrones
desapareados capaces de formar un enlace de hidrógeno, en el que
R_{25} y R_{26} son independientemente H, un grupo alquilo, un
grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un
grupo heteroarilo;
y formando
D1-A1-B1 opcionalmente un grupo
nitro donde A_{1} es N;
y en la que adicionalmente, cuando R_{2} o
R_{5} es
X es =CH o =CF e Y_{2} es =C, =CH o =CF,
o X e Y_{2} junto con Q' forman un anillo de
tres miembros en el que Q' es -C(R_{10})(R_{11})- o -O-,
X es -CH- o -CF e Y_{2} es -CH-, -CF- o -C(alquilo),
siendo R_{10} y R_{11} independientemente H, un halógeno o un
grupo alquilo o formando, junto con el átomo de carbono al que están
unidos, un grupo cicloalquilo o un grupo heterocicloalquilo,
o X es -CH_{2}-, -CF_{2}-, -CHF- o -S- e
Y_{2} es -O-. -S-, -N(R'_{12})-, -C(O)-,
-C(R'_{13})(R'_{14})-, -C(S)- o
-C(CR'_{13}R'_{14})-
en los que R'_{12} es H, un grupo alquilo, un
grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un
grupo heteroarilo, -OR'_{13}, -NR'_{13}R'_{14},
-C(O)-R'_{13}, -SO_{2}R'_{13} o
-C(S)R'_{13} y R'_{13} y R'_{14} son
independientemente H, F o un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo,
un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un grupo heteroarilo
o, junto con el átomo al que están unidos, forman un grupo
cicloalquilo o un grupo heterocicloalquilo;
A_{2} es C, CH, CF, S, P, Se, N, NR_{15},
S(O), Se(O), P-OR_{15} o
P-NR_{15}R_{16},
en los que R_{15} y R_{16} son
independientemente un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo
heterocicloalquilo, un grupo arilo o un grupo heteroarilo o, junto
con el átomo al que están unidos, forman un grupo
heterocicloalquilo;
D_{2} es un grupo con un par de electrones
desapareados capaces de formar un enlace de hidrógeno; y
B_{2} es H, F, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo, -OR_{17}, -SR_{17}, -NR_{17}R_{18},
-NR_{19}NR_{17}R_{18} o -NR_{17}OR_{18},
en los que R_{17}, R_{18} y R_{19} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo;
y en la que adicionalmente cualquier combinación
de Y_{2}, A_{2}, B_{2} y D_{2} puede formar opcionalmente
un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o
un grupo heteroarilo;
R_{3} y R_{6} son independientemente H, F, un
grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo,
un grupo arilo, un grupo heteroarilo, -C(O)R_{17},
-OR_{17}, -SR_{17}, -NR_{19}NR_{17}R_{18} o
-NR_{17}OR_{18},
en los que R_{17}, R_{18} y R_{19} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo;
o, R_{3} y R_{6}, junto con el átomo de
carbono al que están unidos, forman un grupo cicloalquilo o un
grupo heterocicloalquilo;
R_{7} es H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo, -OR_{17}, -SR_{17}, -NR_{17}R_{18},
-NR_{19}NR_{17}R_{18} o -NR_{17}OR_{18},
en los que R_{17}, R_{18} y R_{19} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo;
o R_{7}, junto con R_{3} o R_{6} y los
átomos a los que están unidos, forma un grupo
heterocicloalquilo;
R_{20} es H, o un grupo hidroxi, un grupo
alquilo, un grupo oxo, un grupo cicloalquilo, un grupo
heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo, un grupo
acilo, un grupo sulfonilo, un grupo mercapto, un grupo alquiltio, un
grupo alcoxi, un grupo carboxi, un grupo amino, un grupo
alquilamino, un grupo dialquilamino, un grupo carbamoílo, un grupo
ariltio, un grupo heteroariltio, -OR_{17}, -SR_{17},
-NR_{17}R_{18}, -NR_{19}NR_{17}R_{18} o
-NR_{17}OR_{18},
en los que R_{17}, R_{18} y R_{19} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo; y
Z y Z_{1} son independientemente H, F, un grupo
alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un
grupo arilo, un grupo heteroarilo, -C(O)R_{21},
-CO_{2}R_{21}, -CN, -C(O)NR_{21}R_{22},
-C(O)NR_{21}OR_{22}, -C(S)R_{21},
-C(S)NR_{21}R_{22}, -NO_{2},
\hbox{-SOR _{21} ,} -SO_{2}R_{21},
-SO_{2}NR_{21}R_{22}, -SO(NR_{21})(OR_{22}),
-SONR_{21}, -SO_{3}R_{21},
-PO(OR_{21})_{2}, -PO(R_{21})(R_{22}),
-PO(NR_{21}R_{22})(OR_{23}), -PO(NR_{21}R_{22})(NR_{23}R_{24}), -C(O)NR_{21}NR_{22}R_{23} o -C(S)NR_{21}NR_{22}R_{23},
en los que R_{21}, R_{22}, R_{23} y
R_{24} son independientemente H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo, un grupo acilo o un grupo tioacilo o en los que dos
cualquiera de R_{21}, R_{22}, R_{23} y R_{24}, junto con el
átomo o átomos a los que están unidos, forman un grupo
heterocicloalquilo;
o Z_{1}, como se define anteriormente, junto
con R_{1}, como se define anteriormente, y los átomos a los que
Z_{1} y R_{1} están unidos, forman un grupo cicloalquilo o
heterocicloalquilo,
o Z y Z_{1}, ambos como se definen
anteriormente, junto con los átomos a los que están unidos, forman
un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo;
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
Se prefiere que R_{1} sea H o F, o un
profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que R_{20} sea H, un grupo
alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un
grupo arilo, un grupo heteroarilo, -OR_{17}, -SR_{17},
-NR_{17}R_{18}, -NR_{19}NR_{17}R_{18} o
-NR_{17}OR_{18}, en los que R_{17}, R_{18} y R_{19} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo, o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato del
mismo farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que R_{20} sea el grupo
alquilo -C(R_{41})(R_{42})NR_{43}R_{44}, en el
que:
R_{41} y R_{42} son independientemente H, un
grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo,
un grupo arilo o un grupo heteroarilo; y
R_{43} y R_{44} son independientemente H, un
grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo,
un grupo arilo, un grupo heteroarilo,
-NR_{45}R_{46}, -C(O)R_{45},
-C(S)R_{45}, -C(O)NR_{45}R_{46},
-C(S)NR_{45}R_{46},
-C(O)NR_{45}OR_{46},
-C(S)NR_{45}OR_{46}, -C(O)SR_{45},
-C(O)OR_{45}, -C(S)OR_{45},
-C(S)SR_{45}, -OR_{45}, -SR_{45},
-C(O)NR_{45}NR_{46}R_{47},
-C(S)NR_{45}NR_{46}R_{47}, -SOR_{45},
-SO_{2}R_{45}, -S(O)NR_{45}R_{46},
-S(O)NR_{45}(OR_{46}),
-SO_{2}NR_{45}R_{46}, -SO_{2}NR_{45}(OR_{46}) o
-SO_{3}R_{45},
en los que R_{45}, R_{46} y R_{47} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un grupo heteroarilo,
o en los que cualquier combinación posible de
R_{41}, R_{42}, R_{43} y R_{44} juntos forman un grupo
cicloalquilo o un grupo heterocicloalquilo;
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que al menos uno de R_{43}
o R_{44} sea -C(O)SR_{45} o
-C(O)OR_{45}, o un profármaco, sal, metabolito
activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que R_{45} sea un grupo
alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heterocicloalquilo o un grupo heteroarilo, o un profármaco, sal,
metabolito activo o solvato del mismo farmacéuticamente
aceptables.
También se prefiere que R_{45} sea un grupo
alquilo C_{1}-C_{10} o un grupo cicloalquilo o
un profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que al menos uno de R_{2} o
R_{5} sea
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente
aceptables.
También se prefiere que D_{1} sea -OR_{25},
=O, =S, \equivN, =NR_{25} o -NR_{25}R_{26}, en los que
R_{25} y R_{26} son independientemente H, un grupo alquilo, un
grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un
grupo heteroarilo o, junto con el átomo de nitrógeno al que están
unidos, forman un grupo heterocicloalquilo; o un profármaco, sal,
metabolito activo o solvato del mismo farmacéuticamente
aceptables.
También se prefiere que D_{1} sea =O; o un
profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que A_{1} sea C, CH, S o
S(O); o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato del
mismo farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que A_{1} sea C; o un
profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que B_{1} sea
NR_{17}R_{18}, en el que R_{17} y R_{18} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo; o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato del
mismo farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que al menos uno de R_{2} o
R_{5} sea
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente
aceptables.
También se prefiere que D_{2} sea -OR_{25},
=O, =S, \equivN, =NR_{25} o -NR_{25}R_{26}, en los que
R_{25} y R_{26} son independientemente H, un grupo alquilo, un
grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o
un grupo heteroarilo o, junto con el átomo o átomos a los que están
unidos, forman un grupo heterocicloalquilo; o un profármaco, sal,
metabolito activo o solvato del mismo farmacéuticamente
aceptables.
También se prefiere que D_{2} sea =O; o un
profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que A_{2} sea C, CH, S o
S(O); o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato del
mismo farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que A_{2} sea C; o un
profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que B_{2} sea
-NR_{17}R_{18}, en el que R_{17} y R_{18} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo; o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato del
mismo farmacéuticamente aceptables.
También se prefiere que A_{1} sea C, CH, S o
S(O) o en el que A_{2} sea C, CH, S o S(O); o un
profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables.
Adicionalmente se prefiere que Z y Z_{1} sean
independientemente H, un grupo arilo o un grupo heteroarilo,
-C(O)R_{21}, -CO_{2}R_{21}, -CN,
-C(O)NR_{21}R_{22},
-C(O)NR_{21}OR_{22}, -C(S)R_{21},
-C(S)NR_{21}R_{22}, -NO_{2}, -SOR_{21},
-SO_{2}R_{21}, -SO_{2}NR_{21}R_{22},
-SO(NR_{21})(OR_{22}), -SONR_{21}, -SO_{3}R_{21},
-C(O)NR_{21}NR_{22}R_{23} o
-C(S)NR_{21}NR_{22}R_{23};
en los que R_{21}, R_{22} y R_{23} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo, un
grupo acilo o un grupo tioacilo, o en los que dos cualquiera de
R_{21}, R_{22} y R_{23}, junto con el átomo o átomos a los
que están unidos, forman un grupo heterocicloalquilo;
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
Se prefiere más que M sea O.
Dicho objeto también se puede conseguir mediante
un compuesto que tiene la fórmula X:
en la
que:
R_{61} es H, F o un grupo alquilo;
R_{62} se selecciona de uno de los siguientes
grupos:
en los
que:
R_{35} es H, un grupo alquilo, un grupo arilo,
-OR_{38} o -NR_{38}R_{39},
siendo R_{38} y R_{39} independientemente H,
un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo
heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un grupo
acilo; y
R_{36} es H o un grupo alquilo,
o R_{35} y R_{36}, junto con el átomo de
nitrógeno al que están unidos, forman un grupo heterocicloalquilo o
un grupo heteroarilo;
R_{37} es un grupo alquilo, un grupo arilo o
-NR_{38}R_{39}, siendo R_{38} y R_{39} como se definen
anteriormente;
R_{50} es H, un grupo alquilo, un grupo arilo,
-OR_{38}, -SR_{39}, -NR_{38}R_{39},
-NR_{40}NR_{38}R_{39} o -NR_{38}OR_{39}, o R_{50} y
R_{36}, junto con los átomos a los que están unidos, forman un
grupo heterocicloalquilo;
siendo R_{38} y R_{39} como se definen
anteriormente y siendo R_{40} H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo o un grupo acilo; y
n es 0, 1 ó 2;
R_{63} es H o un grupo alquilo;
R_{64} es H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un
grupo heteroarilo;
R_{65} es H o un grupo alquilo;
R_{66} es H, un grupo acilo, un grupo alquilo,
un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo,
un grupo sulfonilo o un grupo heteroarilo;
R_{67} es H o un grupo alquilo; y
Z y Z_{1} son independientemente H, F, un grupo
alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un
grupo arilo, un grupo heteroarilo, -C(O)R_{21},
-CO_{2}R_{21}, -CN, -C(O)NR_{21}R_{22},
-C(O)NR_{21}OR_{22}, -C(S)R_{21},
-C(S)NR_{21}R_{22}, -NO_{2},
\hbox{-SOR _{21} ,} -SO_{2}R_{21},
-SO_{2}NR_{21}R_{22}, -SO(NR_{21})(OR_{22}),
-SONR_{21}, -SO_{3}R_{21},
-PO(OR_{21})_{2}, -PO(R_{21})(R_{22}),
-PO(NR_{21}R_{22})(OR_{23}), -PO(NR_{21}R_{22})(NR_{23}R_{24}), -C(O)NR_{21}NR_{22}R_{23} o -C(S)NR_{21}NR_{22}R_{23},
siendo R_{21}, R_{22}, R_{23} y R_{24}
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo, un
grupo acilo o un grupo tioacilo o formando dos cualquiera de
R_{21}, R_{22}, R_{23} y R_{24}, junto con el átomo o
átomos a los que están unidos, un grupo heterocicloalquilo,
o Z y Z_{1}, ambos como se definen
anteriormente, junto con los átomos a los que están unidos, forman
un grupo heterocicloalquilo;
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
Se prefiere que R_{66} sea el grupo acilo
-C(O)OR_{68} o el grupo acilo
-C(O)SR_{68}, en los que R_{68} es un grupo
alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heterocicloalquilo o un grupo heteroarilo, o un profármaco, sal,
metabolito activo o solvato del mismo farmacéuticamente
aceptables.
Se prefiere el compuesto que tiene la fórmula
II:
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{42}, R_{43} y Z son H, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2}, y R_{3}, R_{41},
Z_{1} y R_{44} se seleccionan de uno de los siguientes
grupos:
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 14
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 15
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
16 y R_{44} es 17
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 18
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 19
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 20
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 21
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 22
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
R_{41} es CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 23
y
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
R_{41} es CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 24
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
Se prefiere el compuesto que tiene la fórmula
III:
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{42}, R_{43} y Z son H, R_{3} es CH_{2}Ph, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es
26
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
Dicho objeto también se consigue mediante un
compuesto de fórmula IV:
en la
que:
R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7} y R_{42} son
H, R_{2} es CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2} y R_{3},
Z, Z_{1}, R_{41} y R_{44} se seleccionan de uno de los
siguientes grupos:
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
Z es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es CH_{2}Ph
y R_{44} es 28
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
29
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
30
R_{3} es CH_{2}(p-CF_{3})Ph,
Z es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
31
R_{3} es CH_{2}(p-CF_{3})Ph,
Z es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
32
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
Z y Z_{1} juntos forman 33 (en el
que * indica el punto de unión y el grupo carbonilo está en cis con
respecto al grupo R_{1}), R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
34
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es CH_{2}Ph y
R_{44} es 35
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
36
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
Z es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
37
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
Z es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
38
R_{3} es CH_{2}Ph, Z es H, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
C(CH_{3})_{3} y R_{44} es 39
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
Z es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
40
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es ciclohexilo y
R_{44} es 41
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
42
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
43
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
44
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es 45 R_{41}
es CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
46
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es 47
R_{41} es CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
48
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es 49
R_{41} es CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
50
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
51
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es 52 R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
53
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{2}OH, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
54
y
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
55
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
Dicho objeto también se consigue mediante una
composición que comprende al menos un compuesto de fórmula II:
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{42}, R_{43} y Z son H, R_{3} es CH_{2}Ph, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es
57
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables, y al menos un compuesto de
fórmula III:
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{42}, R_{43} y Z son H, R_{3} es CH_{2}Ph, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es
59
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables,
Dicho objeto también se consigue mediante una
composición farmacéutica que comprende:
- a)
- una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto como se define anteriormente o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables; y
- b)
- una carga, diluyente, vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptables.
Dicho objeto se consigue adicionalmente mediante
el uso del compuesto descrito anteriormente o un profármaco, sal,
metabolito activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables
para la preparación de un medicamento para el tratamiento de
enfermedades de mamíferos mediadas por la actividad de la proteasa
picornavírica.
Dicho objeto también se consigue mediante el uso
del compuesto descrito anteriormente o un profármaco, sal metabolito
activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables para la
preparación de un medicamento para inhibir la actividad de una
proteasa 3C picornavírica.
Dicho objeto también se consigue mediante un
método para inhibir in vitro la actividad de una proteasa 3C
picornavírica, que comprende: poner en contacto la proteasa 3C
picornavírica con una cantidad eficaz de al menos un compuesto como
se describió anteriormente o un profármaco, sal, metabolito activo
o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
Dicho objeto también se consigue mediante el uso
del compuesto descrito anteriormente o un profármaco, sal,
metabolito activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables
para la preparación de un medicamento para inhibir la actividad de
una proteasa rinovírica.
Dicho objeto también se consigue mediante un
método para inhibir in vitro la actividad de una proteasa
rinovírica, que comprende: poner en contacto la proteasa rinovírica
con una cantidad eficaz de al menos un compuesto como se describió
anteriormente o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato del
mismo farmacéuticamente aceptables.
Dicho objeto se consigue adicionalmente mediante
un compuesto descrito anteriormente o un profármaco, sal, metabolito
activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables, siendo
dicha actividad antipicornavírica una actividad antirrinovírica.
Dicho objeto se consigue además mediante un
compuesto descrito anteriormente o un profármaco, sal, metabolito
activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables, siendo
dicha actividad antipicornavírica una actividad antivírica
Coxsackie.
La presente invención se refiere a compuestos de
fórmula I:
en la que R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{5},
R_{6}, R_{7}, R_{20}, M, Z y Z_{1} son como se definen
anteriormente, y a profármacos, sales, metabolitos activos y
solvatos de los mismos farmacéuticamente aceptables; teniendo dichos
compuestos, profármacos, sales, metabolitos activos y solvatos
farmacéuticamente aceptables, preferentemente, una actividad
antipicornavírica con una EC_{50} menor o igual a 10 \muM en un
análisis en cultivo de células HI-HeLa y más
preferentemente una actividad antirrinovírica con una EC_{50}
menor o igual a 10 \muM en un análisis en cultivo de células
HI-HeLa y/o una actividad antivírica Coxsackie con
una EC_{50} menor o igual a 10 \muM en un análisis en cultivo
de células
HI-HeLa.
La presente invención se refiere preferentemente
a compuestos de fórmula X:
en la
que:
R_{61} es H, F o un grupo alquilo;
R_{62} se selecciona de uno de los siguientes
grupos:
en los
que:
R_{35} es H, un grupo alquilo, un grupo arilo,
-OR_{38} o -NR_{38}R_{39},
siendo R_{38} y R_{39} independientemente H,
un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo
heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un grupo
acilo; y
R_{36} es H o un grupo alquilo,
o R_{35} y R_{36}, junto con el átomo de
nitrógeno al que están unidos, forman un grupo heterocicloalquilo o
un grupo heteroarilo;
R_{37} es un grupo alquilo, un grupo arilo o
-NR_{38}R_{39}, siendo RR_{38} y R_{39} como s definen
anteriormente;
R_{50} es H, un grupo alquilo, un grupo arilo,
-OR_{38}, -SR_{39}, -NR_{38}R_{39},
-NR_{40}NR_{38}R_{39} o -NR_{38}OR_{39}, o R_{50} y
R_{36}, junto con los átomos a los que están unidos, forman un
grupo heterocicloalquilo;
siendo R_{38} y R_{39} como se definen
anteriormente y siendo R_{40} H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo o un grupo acilo; y
n es 0, 1 ó 2;
R_{63} es H o un grupo alquilo;
R_{64} es H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un
grupo heteroarilo;
R_{65} es H o un grupo alquilo;
R_{66} es H, un grupo acilo, un grupo alquilo,
un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo,
un grupo sulfonilo o un grupo heteroarilo;
R_{67} es H o un grupo alquilo; y
Z y Z_{1} son independientemente H, F, un grupo
alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un
grupo arilo, un grupo heteroarilo, -C(O)R_{21},
-CO_{2}R_{21}, -CN, -C(O)NR_{21}R_{22},
-C(O)NR_{21}OR_{22}, -C(S)R_{21},
-C(S)NR_{21}R_{22}, -NO_{2},
\hbox{-SOR _{21} ,} -SO_{2}R_{21},
-SO_{2}NR_{21}R_{22}, -SO(NR_{21})(OR_{22}),
-SONR_{21}, -SO_{3}R_{21},
-PO(OR_{21})_{2}, -PO(R_{21})(R_{22}),
-PO(NR_{21}R_{22})(OR_{23}), -PO(NR_{21}R_{22})(NR_{23}R_{24}), -C(O)NR_{21}NR_{22}R_{23} o -C(S)NR_{21}NR_{22}R_{23},
siendo R_{21}, R_{22}, R_{23} y R_{24}
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo, un
grupo acilo o un grupo tioacilo o formando dos cualquiera de
R_{21}, R_{22}, R_{23} y R_{24}, junto con el átomo o
átomos a los que están unidos, un grupo heterocicloalquilo,
o Z y Z_{1}, ambos como se definen
anteriormente, junto con los átomos a los que están unidos, forman
un grupo heterocicloalquilo;
y profármacos, sales, metabolitos activos y
solvatos farmacéuticamente aceptables del mismo.
Tal como se usa en la presente solicitud, se
emplean las siguientes definiciones:
Un "grupo alquilo" tiene la intención de
referirse a un radical monovalente de cadena lineal o ramificada de
átomos de carbono y átomos de hidrógeno saturados y/o insaturados,
tal como el metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo,
t-butilo, etenilo, pentenilo, butenilo, propenilo,
etinilo, butinilo, propinilo, pentinilo, hexinilo, que puede estar
no sustituido (es decir, conteniendo solo carbono e hidrógeno) o
sustituido por uno o más sustituyentes adecuados como se define más
adelante.
Un "grupo cicloalquilo" tiene la intención
de referirse a un radical no aromático, monovalente y monocíclico,
bicíclico o tricíclico que contiene 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11,
12, 13 ó 14 átomos de carbono en anillo, cada uno de los cuales
puede estar saturado o insaturado y que puede estar no sustituido o
sustituido por uno o más sustituyentes adecuados como se define más
adelante, y al que puede fusionarse uno o más grupos
heterocicloalquilo, grupos arilo o grupos heteroarilo, los cuales a
su vez pueden estar no sustituidos o sustituidos por uno o más
sustituyentes adecuados.
Los ejemplos ilustrativos de grupos cicloalquilo
incluyen, pero no están limitados a, los siguientes grupos:
Un "grupo heterocicloalquilo" tiene la
intención de referirse a un radical no aromático, monovalente y
monocíclico, bicíclico o tricíclico, saturado o insaturado, que
contiene 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 ó 18
átomos en anillo y que incluye 1, 2, 3, 4 ó 5 heteroátomos
seleccionados del nitrógeno, oxígeno y azufre, estando el radical no
sustituido o sustituido por uno o más sustituyentes adecuados como
se define más adelante, y al que pueden estar fusionados uno o más
grupos cicloalquilo, grupos arilo o grupos heteroarilo, los cuales a
su vez pueden estar no sustituidos o sustituidos por uno o más
sustituyentes adecuados.
Los ejemplos ilustrativos de grupos
heterocicloalquilo incluyen, pero no están limitados a, los
siguientes grupos:
Un "grupo arilo" tiene la intención de
referirse a un radical aromático, monovalente y monocíclico,
bicíclico o tricíclico que contiene 6, 10, 14, 18 átomos de carbono
en anillo, que puede estar no sustituido o sustituido por uno o más
sustituyentes adecuados como se define más adelante, y al que pueden
estar fusionados uno o más grupos cicloalquilo, grupos
heterocicloalquilo o grupos heteroarilo, los cuales a su vez pueden
estar no sustituidos o sustituidos por uno o más sustituyentes
adecuados.
Los ejemplos ilustrativos de grupos arilo
incluyen, pero no están limitados a, los siguientes grupos:
Un "grupo heteroarilo" tiene la intención de
referirse a un radical aromático, monovalente y monocíclico,
bicíclico o tricíclico que contiene 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12,
13, 14, 15, 16, 17 ó 18 átomos en anillo, incluyendo 1, 2, 3, 4 ó 5
heteroátomos seleccionados del nitrógeno, oxígeno y azufre, que
puede estar lo sustituido o sustituido por uno o más sustituyentes
adecuados como se define más adelante, y al que pueden estar
fusionados uno o más grupos cicloalquilo, grupos heterocicloalquilo
o grupos arilo, los cuales a su vez pueden estar no sustituidos o
sustituidos por uno o más sustituyentes adecuados.
Los ejemplos ilustrativos de grupos heteroarilo
incluyen, pero no están limitados a, los siguientes grupos:
Un "grupo acilo" tiene la intención de
referirse al radical -C(O)-R, en el que R es
cualquier sustituyente adecuado como se define más adelante.
Un "grupo tioacilo" tiene la intención de
referirse al radical -C(S)-R, en el que R es
cualquier sustituyente adecuado como se define más adelante.
Un "grupo sulfonilo" tiene la intención de
referirse al radical -SO_{2}R, en el que R es cualquier
sustituyente adecuado como se define más adelante.
El término "sustituyente adecuado" tiene la
intención de referirse a cualquiera de los sustituyentes
reconocibles por los expertos en la técnica, mediante ensayos de
rutina, que no afecten adversamente la actividad inhibidora de los
compuestos de la invención. Los ejemplos ilustrativos de los
sustituyentes adecuados incluyen, pero no están limitados a, grupos
hidroxi, grupos oxo, grupos alquilo, grupos acilo, grupos
sulfonilo, grupos mercapto, grupos alquiltio, grupos alcoxi, grupos
cicloalquilo, grupos heterocicloalquilo, grupos arilo, grupos
heteroarilo, grupos carboxi, grupos amino, grupos alquilamino, grupo
dialquilamino, grupos carbamoílo, grupos ariloxi, grupos
heteroariloxi, grupos ariltio y grupos heteroariltio.
El término "grupo orgánico adecuado" tiene
la intención de referirse a cualquier grupo orgánico reconocible por
los expertos en la técnica, mediante ensayos de rutina, que no
afecten adversamente la actividad inhibidora de los compuestos de la
invención. Los ejemplos ilustrativos de los grupos orgánicos
adecuados incluyen, pero no están limitados a, grupos hidroxi,
grupos alquilo, grupos oxo, grupos cicloalquilo, grupos
heterocicloalquilo, grupos arilo, grupos heteroarilo, grupos acilo,
grupos sulfonilo, grupos mercapto, grupos alquiltio, grupos alcoxi,
grupos carboxi, grupos amino, grupos alquilamino, grupos
dialquilamino, grupos carbamoílo, grupos ariltio y grupos
heteroariltio.
Un "grupo hidroxi" tiene la intención de
referirse al radical -OH.
Un "grupo amino" tiene la intención de
referirse al radical -NH_{2}.
Un "grupo alquilamino" tiene la intención de
referirse al radical -NHR, en el que R es un grupo alquilo cómo se
definió anteriormente.
Un "grupo dialquilamino" tiene la intención
de referirse al radical -NR_{a}R_{b}, en el que R_{a} y
R_{b} son, cada uno independientemente, un grupo alquilo cómo se
definió anteriormente.
Un "grupo alcoxi" tiene la intención de
referirse al radical -OR, en el que R es un grupo alquilo cómo se
definió anteriormente, por ejemplo, metoxi, etoxi y propoxi.
Un "grupo alcoxicarbonilo" tiene la
intención de referirse al radical -C(O)OR, en el que
R es un grupo alquilo cómo se definió anteriormente.
Un "grupo alquilsulfonilo" tienen la
intención de referirse al radical -SO_{2}R, en el que R es un
grupo alquilo cómo se definió anteriormente.
Un "grupo alquilaminocarbonilo" tiene la
intención de referirse al radical -C(O)NHR, en el que
R es un grupo alquilo cómo se definió anteriormente.
Un "grupo dialquilaminocarbonilo" tiene la
intención de referirse al radical
-C(O)NR_{a}R_{b}, en el que R_{a} y R_{b} son,
cada uno independientemente, un grupo alquilo cómo se definió
anteriormente.
Un "grupo mercapto" tiene la intención de
referirse al radical -SH:
Un "grupo alquiltio" tiene la intención de
referirse al radical -SR, en el que R es un grupo alquilo cómo se
definió anteriormente.
Un "grupo carboxi" tiene la intención de
referirse al radical -C(O)OH.
Un "grupo carbamoílo" tiene la intención de
referirse al radical -C(O)NH_{2}.
Un "grupo ariloxi" tiene la intención de
referirse al radical -OR_{c}, en el que R_{c} es un grupo arilo
como se define anteriormente.
Un "grupo heteroariloxi" tiene la intención
de referirse al radical -OR_{d}, en el que R_{d} es un grupo
heteroarilo como se define anteriormente.
Un "grupo ariltio" tiene la intención de
referirse al radical -SR_{c}, en el que R_{c} es un grupo arilo
como se define anteriormente.
Un "grupo heteroariltio" tiene la intención
de referirse al radical -SR_{d}, en el que R_{d} es un grupo
heteroarilo como se define anteriormente.
Un "profármaco farmacéuticamente aceptable"
tiene la intención de referirse a un compuesto que puede convertirse
en condiciones fisiológicas o mediante solubilización en un
compuesto de fórmula I o fórmula X.
Un "metabolito activo farmacéuticamente
aceptable" tiene la intención de referirse a un producto activo
farmacológicamente producido en el metabolismo del cuerpo a partir
de un compuesto de fórmula I o fórmula X.
Un "solvato farmacéuticamente aceptable"
tiene la intención de referirse a un solvato que retiene la eficacia
biológica y las propiedades de los compuestos activos biológicamente
de los compuestos de fórmulas I y X. Los ejemplos de solvatos
farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no están limitados a,
compuestos de fórmula I o X en combinación con agua, isopropanol,
etanol, metanol, DMSO, etilacetato, ácido acético o etanolamina.
Una "sal farmacéuticamente aceptable" tiene
la intención de referirse a una sal que retiene la eficacia
biológica y las propiedades de los ácidos y bases libres de los
compuestos de las fórmulas I y X, y que no es biológicamente o de
otro modo indeseable. Los ejemplos de las sales farmacéuticamente
aceptables incluyen, pero no están limitados a, sulfatos,
pirosulfatos, bisulfatos, sulfitos, bisulfitos, fosfatos,
monohidrogenofosfatos, dihidrogenofosfatos, metafosfatos,
pirofosfatos, cloruros, bromuros, yoduros, acetatos, propionatos,
decanoatos, caprilatos, acrilatos, formatos, isobutiratos,
caproatos, heptanoatos, propiolatos, oxalatos, malonatos,
succinatos, suberatos, sebacatos, fumaratos, maleatos,
butino-1,4-dioatos,
hexino-1,6-dioatos, benzoatos,
clorobenzoatos, metilbenzoatos, dinitrobenzoatos, hidroxibenzoatos,
metoxibenzoatos, ftalatos, sulfonatos, xylensulfonatos,
fenilacetatos, fenilpropionatos, fenilbutiratos, citratos,
lactatos, \gamma-hidroxibutiratos, glicolatos,
tartratos, metansulfonatos, propansulfonatos,
naftalen-1-sulfonatos,
naftalen-2-sulfonatos y
mandelatos.
Si el compuesto de la invención es una base, la
sal deseada puede prepararse mediante cualquier método adecuado
conocido en la técnica, incluyendo el tratamiento de la base libre
con un ácido inorgánico, tal como el ácido clorhídrico, ácido
bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico o con
un ácido orgánico, tal como el ácido acético, ácido maleico, ácido
succínico, ácido mandélico, ácido fumárico, ácido malónico, ácido
pirúvico, ácido oxálico, ácido glicólico, ácido salicílico, ácidos
urónicos tales como el ácido glucurónico y el ácido galacturónico,
\alpha-hidroxiácidos tales como el ácido cítrico y
el ácido tartárico, aminoácidos tales como el ácido aspártico y el
ácido glutámico, ácido aromáticos tales como el ácido benzoico y el
ácido cinnámico y ácidos sulfónicos tales como el ácido
p-toluensulfónico o el ácido etansulfónico.
Si el compuesto de la invención es un ácido, la
sal deseada puede prepararse mediante cualquier método adecuado
conocido en la técnica, incluyendo el tratamiento del ácido libre
con una base inorgánica u orgánica, tal como una amina (primaria,
secundaria o terciaria) o un hidróxido de un metal alcalino o un
metal alcalinotérreo. Los ejemplos ilustrativos de las sales
adecuados incluyen sales orgánicas derivadas de aminoácidos tales
como glicina y arginina, amoníaco, aminas primarias, secundarias y
terciarias y aminas cíclicas tales como piperidina, morfolina y
piperazina, y sales inorgánicas derivadas de sodio, calcio, potasio,
magnesio, manganeso, hierro, cobre, cinc, aluminio y litio.
En el caso de compuestos, sales o solvatos que
son sólidos, se entiende por los expertos en la técnica que los
compuestos de la invención, sales y solvatos pueden existir en
diferentes formas cristalinas, todas las cuales tienen la intención
de estar dentro del alcance de la presente invención.
Los compuestos de la invención pueden existir
como estereoisómeros únicos, racematos y/o mezclas de enantiómeros
y/o diastereoisómeros. Todos los estereoisómeros únicos, racematos y
mezclas de los mismos tienen la intención de estar dentro del
alcance de la presente invención. Preferentemente, los compuestos de
la invención se usan en forma ópticamente pura.
Como generalmente se entiende por los expertos en
la técnica, un compuesto ópticamente puro es uno que es puro
enantioméricamente. Tal como se usa aquí, el término "ópticamente
puro" tiene la intención de referirse a un compuesto que
comprende al menos una cantidad suficiente de un enantiómero único
para producir un compuesto que tiene la actividad farmacológica
deseada. Preferentemente, "ópticamente puro" tiene la intención
de referirse a un compuesto que comprende al menos el 90% de un
isómero único (un exceso enantiomérico-e.e.- del
80%), preferentemente al menos el 95% (90% e.e.), más
preferentemente al menos 97,5% (95% e.e.) y lo más preferentemente
al menos 99% (98% e.e.).
Preferentemente en las fórmulas I y X anteriores,
R_{1} y R_{61} son H o F. En los compuestos de fórmula I,
preferentemente M es O.
En la fórmula I, preferentemente R_{20} es H,
un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo
heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo,
-OR_{17}, -SR_{17}, -NR_{17}R_{18},
-NR_{19}NR_{17}R_{18} o -NR_{17}OR_{18}, en los que
R_{17}, R_{18} y R_{19} son independientemente H, un grupo
alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un
grupo arilo, un grupo heteroarilo o un grupo acilo. Más
preferentemente R_{20} es el grupo alquilo
-C(R_{41})(R_{42})NR_{43}R_{44}, en el que
R_{41} y R_{42} son independientemente H, un grupo alquilo, un
grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un
grupo heteroarilo y R_{43} y R_{44} son independientemente H,
un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo
heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo,
-NR_{45}R_{46}, -C(O)R_{45},
-C(S)R_{45}, -C(O)NR_{45}R_{46},
-C(S)NR_{45}R_{46},
-C(O)NR_{45}OR_{46},
-C(S)NR_{45}OR_{46},
-C(O)SR_{45}, -C(O)OR_{45},
-C(S)OR_{45}, -C(S)SR_{45},
-OR_{45}, -SR_{45},
-C(O)NR_{45}NR_{46}R_{47},
-C(S)NR_{45}NR_{46}R_{47}, -SOR_{45},
-SO_{2}R_{45}, -S(O)NR_{45}R_{46},
-S(O)NR_{45}(OR_{46}),
-SO_{2}NR_{45}R_{46}, -SO_{2}NR_{45}(OR_{46}) o
-SO_{3}R_{45}, en los que R_{45}, R_{46} y R_{47} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo, o en
los que cualquier combinación posible de R_{41}, R_{42},
R_{43} y R_{44} junto con los átomos a los que están unidos,
forman un grupo cicloalquilo o un grupo heterocicloalquilo.
Preferentemente, al menos uno de R_{43} y R_{44} es
-C(O)SR_{45} o -C(O)OR_{45}.
Preferentemente R_{45} es un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, grupo arilo, grupo heterocicloalquilo o un grupo
heteroarilo y más preferentemente un grupo alquilo
C_{1}-C_{10}.
En los compuestos de fórmula I, preferentemente
D_{1} y D_{2} son -OR_{25}, =O, =S, \equivN, =NR_{25} o
-NR_{25}R_{26}, en los que R_{25} y R_{26} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un grupo heteroarilo o,
junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un
grupo heterocicloalquilo, y más preferentemente D_{1} y D_{2}
son =O. Preferentemente, en los compuestos de fórmula I, A_{1} y
A_{2} son C, CH, S o S(O), y más preferentemente A_{1}
y A_{2} son C.
Preferentemente, los compuestos de fórmula I,
B_{1} y B_{2} son NR_{17}R_{18}, en el que R_{17} y
R_{18} son independientemente H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo o un grupo acilo.
En los compuestos de fórmula I y X,
preferentemente Z y Z_{1} son independientemente H, un grupo arilo
o un grupo heteroarilo, -C(O)R_{21},
-CO_{2}R_{21}, -CN, -C(O)NR_{21}R_{22},
-C(O)NR_{21}OR_{22}, -C(S)R_{21},
-C(S)NR_{21}R_{22}, -NO_{2}, -SOR_{21},
-SO_{2}R_{21}, -SO_{2}NR_{21}R_{22},
-SO(NR_{21})(OR_{22}), -SONR_{21}, -SO_{3}R_{21},
-C(O)NR_{21}NR_{22}R_{23} o
-C(S)NR_{21}NR_{22}R_{23}, en los que R_{21},
R_{22} y R_{23} son independientemente H, un grupo alquilo, un
grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un
grupo heteroarilo, un grupo acilo o un grupo tioacilo, o en los que
dos cualquiera de R_{21}, R_{22} y R_{23}, junto con el átomo
o átomos a los que están unidos, forman un grupo heterocicloalquilo
o Z y Z_{1}, ambos como se definen anteriormente, junto con los
átomos a los que están unidos, forman un grupo
heterocicloalquilo.
En los compuestos de fórmula X, preferentemente
R_{66} es -C(O)OR_{68} o
-C(O)SR_{68}, en los que R_{68} es un grupo
alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heterocicloalquilo o un grupo heteroarilo.
Las realizaciones particularmente preferidas de
la presente invención incluyen los siguientes compuestos
(1-8, 10 y 11) de fórmula II:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{42}, R_{43} y Z son H, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2}, y R_{3}, R_{41},
Z_{1} y R_{44} se seleccionan de uno de los siguientes
grupos:
(1) R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 70
(2) R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 71
(3) R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
72 y R_{44} es 73
(4) R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 74
(5) R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 75
(6) R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 76
(7) R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 77
(8) R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 78
(10) R_{3} es
CH_{2}(p-CH_{3})Ph, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 79
y
(11) R_{3} es
CH_{2}(p-CH_{3})Ph, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 80
y profármacos, sales, metabolitos activos y
solvatos del mismo farmacéuticamente aceptables.
Otra realización preferida de la invención
incluye un compuesto (9) de fórmula III:
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{42}, R_{43} y Z son H, R_{3} es CH_{2}Ph, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es
82
y profármacos, sales, metabolitos activos y
solvatos del mismo farmacéuticamente aceptables.
La presente invención se centra además
adicionalmente en composiciones que comprenden al menos un compuesto
de fórmula II:
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{42}, R_{43} y Z son H, R_{3} es CH_{2}Ph, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es
84
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables, y al menos un compuesto de
fórmula III:
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{42}, R_{43} y Z son H, R_{3} es CH_{2}Ph, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es
86
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
Las composiciones preferidas adicionales de
acuerdo con la presente invención incluyen los siguientes compuestos
(12 a 34) de fórmula IV:
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7} y
R_{42} son H, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2} y R_{3}, Z, Z_{1},
R_{41} y R_{44} se seleccionan de uno de los siguientes
grupos:
(12) R_{3} es
CH_{2}(p-CH_{3})Ph, Z es H, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es CH_{2}Ph y R_{44} es
88
(13) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
89
(14) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
90
(15) R_{3} es
CH_{2}(p-CF_{3})Ph, Z es H, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
91
(16) R_{3} es
CH_{2}(p-CF_{3})Ph, Z es H, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
92
(17) R_{3} es
CH_{2}(p-CH_{3})Ph, Z y Z_{1} juntos forman
93 (en el que * indica el punto de
unión y el grupo carbonilo está en cis con respecto al grupo
R_{1}), R_{41} es CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
94
(18) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es CH_{2}Ph y
R_{44} es 95
(19) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
96
(20) R_{3} es
CH_{2}(p-CH_{3})Ph, Z es H, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
97
(21) R_{3} es
CH_{2}(p-CH_{3})Ph, Z es H, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
98
(22) R_{3} es CH_{2}Ph, Z es H, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
C(CH_{3})_{3} y R_{44} es 99
(23) R_{3} es
CH_{2}(p-CH_{3})Ph, Z es H, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
100
(24) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es ciclohexilo
y R_{44} es 101
(25) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
102
(26) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
103
(27) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
104
(28) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es 105
R_{41} es CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
106
(29) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es 107
R_{41} es CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
108
(30) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es 109
R_{41} es CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
110
(31) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
111
(32) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es 112
R_{41} es CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
113
(33) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{2}OH, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
114
y
(34) R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z
es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
115
y profármacos, sales, metabolitos activos o
solvatos del mismo farmacéuticamente aceptables.
La presente invención se centra adicionalmente
incluso en los métodos de inhibición de la actividad de la proteasa
3C picornavírica, que comprenden poner en contacto la proteasa con
una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I o X o un
profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables. Por ejemplo, se puede inhibir la
actividad de la proteasa 3C picornavírica en tejidos de mamíferos
mediante la administración de un compuesto de fórmula I o X o un
profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables. Más particularmente, la presente
invención se centra en los métodos de inhibición de la actividad de
la proteasa rinovírica.
La actividad de los compuestos de la invención
como inhibidores de la actividad de la proteasa 3C picornavírica
puede medirse mediante cualesquiera de los métodos disponibles para
los expertos en la técnica, incluyendo los análisis in vivo
e in vitro. Un ejemplo de un análisis disponible para la
medida de la actividad es el análisis antivírico en cultivo de
células HI-HeLa, descrito en la presente
memoria.
La administración de los compuestos de fórmula I
o X, o de sus profármacos, sales, metabolitos activos y solvatos
farmacéuticamente aceptables, se puede realizar de acuerdo con
cualesquiera de los modos aceptados de administración disponibles
para los expertos en la técnica. Los ejemplos ilustrativos de modos
disponibles de administración incluyen, pero no están limitados a,
la vía oral, nasal, parenteral, tópica, transdérmica y rectal.
Los compuestos de la invención de fórmulas I y X
y sus profármacos, sales, metabolitos activos y solvatos
farmacéuticamente aceptables, pueden administrarse como una
composición farmacéutica en cualquier forma farmacéutica adecuada
reconocible por los expertos en la técnica. Las formas farmacéuticas
adecuadas incluyen, pero no están limitadas a, formulaciones
sólidas, semisólidas, líquidas o formulaciones liofilizadas, tales
como comprimidos, polvos, cápsulas, supositorios, suspensiones y
aerosoles. La composición farmacéutica también puede incluir
excipientes, diluyentes, vehículos y cargas adecuados, así como
otros agentes activos farmacéuticamente, dependiendo del uso
intencionado.
Los métodos aceptables para preparar las formas
farmacéuticas adecuadas de las composiciones farmacéuticas se
conocen por los expertos en la técnica. Por ejemplo, las
preparaciones farmacéuticas pueden prepararse siguiendo técnicas
convencionales de la química farmacéutica que implican etapas tales
como el mezclamiento, granulación y compresión cuando se necesiten
para las formas en comprimidos, o el mezclamiento, el relleno y la
disolución de ingredientes como se requiera, para proporcionar los
productos deseados para la administración oral, parenteral, tópica,
intravaginal, intranasal, intrabronquial, intraocular, intraótica
y/o rectal.
Se pueden emplear en las composiciones
farmacéuticas cargas, diluyentes, vehículos o excipientes sólidos o
líquidos farmacéuticamente aceptables. Las cargas sólidas
ilustrativas incluyen almidón, lactosa, sulfato cálcico
dihidratado, terra alba, sacarosa, polvos de talco, gelatina,
pectina, goma arábiga, estearato magnésico y ácido esteárico. Las
cargas líquidas ilustrativas pueden incluir jarabe, aceite de
cacahuate, aceite de oliva, solución salina y agua. La carga o
diluyente puede incluir una sustancia adecuada de liberación
prolongada, tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de
glicerilo, solo o con una cera. Cuando se usa una carga líquida, la
preparación puede estar en la forma de un jarabe, elixir, emulsión,
cápsula de gelatina blanda, líquido estéril inyectable (por
ejemplo, en solución) o una suspensión líquida acuosa o no
acuosa.
Una dosis de la composición farmacéutica contiene
al menos una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto activo
(es decir, un compuesto de fórmula I o X o un profármaco, sal,
metabolito activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables)
y que reúne preferentemente una o más unidades de dosificación
farmacéutica. La dosis seleccionada puede administrarse a un
mamífero, por ejemplo, un paciente humano, en necesidad de un
tratamiento mediado mediante la inhibición de la actividad de la
proteasa 3C, mediante cualquier método conocido de administración de
la dosis que incluye la vía tópica, por ejemplo, en forma de una
pomada o crema; oralmente; rectalmente, por ejemplo, en forma de un
supositorio; parenteralmente mediante inyección o continuamente
mediante infusión intravaginal, intranasal, intrabronquial,
intraótica o intraocular.
Una "cantidad terapéuticamente eficaz" tiene
la intención de referirse a la cantidad de un compuesto de fórmula
I o X que, cuando se administra a un mamífero en necesidad del
mismo, es suficiente para llevarse a cabo el tratamiento de las
dolencias de la enfermedad, aliviado mediante la inhibición de la
actividad de una o más proteasas 3C picornavíricas, tales como las
de los rinovirus humanos, virus de la poliomielitis humana, virus
Coxsackie humanos, virus de la encefalomiocarditis, meningovirus y
virus de la hepatitis A. La cantidad de un compuesto dado de
fórmula I o X que corresponderá a una "cantidad terapéuticamente
eficaz" variará dependiendo de factores tales como el compuesto
en particular, la dolencia de la enfermedad y la gravedad de la
misma y la identidad del mamífero en necesidad del mismo, pero no
obstante, puede determinarse fácilmente por un experto en la
técnica.
"Tratamiento" tiene la intención de
referirse al menos a la mitigación de la dolencia de una enfermedad
en un mamífero, tal como un ser humano, que se alivia mediante la
inhibición de la actividad de una o más proteasas 3C picornavíricas,
tales como las de los rinovirus humanos, virus de la poliomielitis
humana, virus Coxsackie humanos, virus de la encefalomiocarditis,
meningovirus y virus de la hepatitis A, e incluye:
- (a)
- el tratamiento profiláctico de un mamífero, particularmente cuando se encuentra que el mamífero tiene predisposición a tener la dolencia de enfermedad pero que aún no se la han diagnosticado;
- (b)
- la inhibición de la dolencia de la enfermedad; y/o
- (c)
- el alivio, total o en parte, de la dolencia de la enfermedad.
Los compuestos de la invención y sus sales,
solvatos, metabolitos activos y profármacos, pueden prepararse
mediante el empleo de técnicas disponibles en la técnica usando
sustancias de partida que están disponibles fácilmente. Se describen
más adelante ciertos métodos nuevos y ejemplos para preparar los
compuestos de la invención.
Preferentemente, los compuestos de la invención
de fórmula I se preparan mediante los métodos de la presente
invención, que incluyen los métodos generales que se muestran más
adelante. En cada uno de estos métodos generales, R_{1}, R_{2},
R_{3}, R_{5}, R_{6}, R_{7}, R_{20}, R_{41}, R_{42}, Z
y Z_{1} son como se definen anteriormente (para las fórmulas I,
II, III, IV y X).
Método general
I
En el método general I, el aminoácido A, en el
que P_{1} es un grupo protector apropiado del nitrógeno, se
convierte en el derivado carbonílico B, en el que "Lv" es un
grupo saliente. El compuesto B se somete a una reacción en la que
"Lv" se reemplaza por R_{1} para proporcionar el derivado C.
Seguidamente, el derivado C se transforma en el producto insaturado
D. El compuesto insaturado D se desprotege para proporcionar la
amina libre (o sal de la misma) E, o se modifica una o más veces en
R_{2}, R_{5}, Z y/o Z_{1} para proporcionar uno o más
compuestos modificados D. Seguidamente, el compuesto modificado D se
desprotege para proporcionar la amina (o sal de la misma) E.
Subsecuentemente, la amina E se somete a una
reacción de formación de amida con el ácido carboxílico F (ejemplos
representativos de cuya preparación se describen más adelante) para
proporcionar el producto final G. Si se usaran grupos de protección
en cualquier grupo R (R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{5}, R_{6},
R_{7}, y/o R_{20}), en Z y/o en Z_{1}, el producto G se
desprotege y/o se modifica adicionalmente para producir el "G
desprotegido o modificado".
Método general
II
En el método general II, la amina E, que puede
prepararse como se describió en el método general I, se somete a una
reacción de formación de amida con el ácido carboxílico H, en el que
P_{2} es un grupo protector apropiado de nitrógeno y en el que al
menos uno de R_{3} y R_{6} es H, para proporcionar el producto
final I. El ácido carboxílico H puede prepararse en forma de una
mezcla de diastereoisómeros tal como se describió en Harbeson, S.L.,
Rich, D.H., J. Med. Chem. 1989, 32, 1378. El grupo protector
P_{2}, junto con cualesquiera grupos protectores adicionales que
se usaran en cualquier grupo R (R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{5},
R_{6}, R_{7}, y/o R_{41}), en Z y/o en Z_{1}, se desprotegen
subsecuentemente y/o se modifican adicionalmente para proporcionar
el "I desprotegido o modificado".
\newpage
Método general
III
En el método general III, la lactona J
ópticamente activa, en la que P_{2} es un grupo protector
apropiado del nitrógeno, se transforma mediante un procedimiento en
dos etapas (hidrólisis alcalina y subsecuente oxidación) en el ácido
carboxílico K. La lactona J puede prepararse mediante el método
descrito más adelante en el método general IV y mediante muchos
métodos de la bibliografía que incluyen, pero no están limitados a,
aquellos descritos en las siguientes citas: (a) Herold, P.;
Duthaler, R; Rihs, G.; Angst, C., J. Org. Chem. 1989,
54, 1178; (b) Bradbury, R.H.; Revill, J.M.; Rivett, J.E.; Waterson,
D., Tetrahedron Lett. 1989, 30, 3845; (c) Bradbury,
R.H.; Major, J.S.; Oldham, A.A.; Rivett, J.E.; Roberts, D.A.;
Slater, A.M.; Timms, D.; Waterson, D., J. Med. Chem.
1990, 33, 2335; (d) Wuts, P.G.; Rivett, A.R.; Pruitt,
L.E., J. Org. Chem. 1992, 57, 6696; (e) Jones, D.M.;
Nilsson, B.; Szelke, M., J. Org. Chem. 1993, 58,
2286; (f) Pégorier, L.; Larchevéque, M., Tetrahedron Lett.
1995, 36, 2753; (g) Dondoni, A.; Perrone, D.; Semola,
M.T., J. Org. Chem. 1995, 60, 7927. El ácido
carboxílico K no se aísla en forma pura, pero se somete a una
reacción de formación de amida con la amina E, que puede prepararse
como se describió en el método general I, para proporcionar el
producto final L. El grupo protector P2, junto con cualesquiera
grupos protectores adicionales que se usaran en cualquier grupo R
(R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{5}, R_{7}, y/o R_{41}), en Z
y/o en Z_{1}, se desprotegen subsecuentemente y/o se modifican
adicionalmente para proporcionar el "L desprotegido o
modificado".
Método general
IV
La lactona J puede prepararse en forma
ópticamente activa mediante el método general IV (véase: (a) Herold,
P.; Duthaler, R; Rihs, G.; Angst, C., J. Org. Chem.
1989, 54, 1178; (b) Bradbury, R.H.; Revill, J.M.; Rivett,
J.E.; Waterson, D., Tetrahedron Lett. 1989, 30, 3845;
(c) Bradbury, R.H.; Major, J.S.; Oldham, A.A.; Rivett, J.E.;
Roberts, D.A.; Slater, A.M.; Timms, D.; Waterson, D., J. Med.
Chem. 1990, 33, 2335). El ácido carboxílico \gamma,
\delta-insaturado M, que incorpora el R_{41}, se
transforma en el correspondiente cloruro de ácido (no mostrado).
Este cloruro de ácido se somete a una reacción de formación de amida
con una amina quiral o una oxazolidona quiral para proporcionar el
derivado N (en el que X_{1} es una amina quiral o una oxazolidona
quiral). Subsecuentemente, el compuesto N se desprotona y el enolato
resultante es alquilado de una manera selectiva de diastereoisómero
con un electrófilo correspondiente a R_{3} para proporcionar el
compuesto O. Seguidamente, esta sustancia se somete a una reacción
de halolactonización para proporcionar la
halo-lactona P, en la que H_{1} es Br o I.
Subsecuentemente, la halo-lactona P se transforma en
la azida Q y seguidamente, esta sustancia se convierte en la lactona
J, en la que P_{2} es un grupo protector apropiado del
nitrógeno.
Método general
V
El ácido carboxílico \gamma,
\delta-insaturado M puede prepararse mediante el
método general V (véase: Herold, P.; Duthaler, R.; Rihs, G.; Angst,
C., J. Org. Chem. 1989, 54, 1178). Un aldehído R, que
incorpora R_{41}, se acopla con bromuro de vinilmagnesio para
proporcionar el alcohol S. A continuación, el alcohol S se
transforma el ácido carboxílico \gamma,
\delta-insaturado M mediante un procedimiento en
tres etapas como sigue: (i) tratar con dietilmalonato y el
catalizador Ti(OEt)_{4} a 160ºC durante 1 hora, (ii)
calentar a 190ºC durante 4 horas y (iii) hidrolizar con KOH
etanólico a reflujo.
Método general
VI
El ácido carboxílico K también puede prepararse
mediante el método general VI (véase: Hoffman, R.V., Tao, J.,
Tetrahedron, 1997, 53, 7119). Un aminoácido T, que
incorpora R_{41} y en el que P_{2} es un grupo protector
apropiado del nitrógeno, se transforma en el
\beta-cetoéster U. el compuesto U es desprotonado
y el anión resultante se condensa con el triflato V, que incorpora
R_{3}. El producto de acoplamiento obtenido de este modo se trata
con ácido trifluoroacético para proporcionar el cetoéster W y,
subsecuentemente, esta sustancia se hidroliza para proporcionar el
ácido carboxílico K. Si la hidrólisis alcalina da lugar a una
epimerización, el cetoéster W puede transesterificarse [alcohol
alílico, Ti(Oi-Pr)_{4}] y, subsecuentemente,
desprotonarse en condiciones neutras
[Pd(PPh_{3})_{4}, morfolina] para proporcionar el
ácido carboxílico K. El triflato V, a su vez, pueden prepararse a
partir del correspondiente alcohol mediante tratamiento con
anhídrido trifluorometansulfónico y
2,6-lutidina.
\newpage
Método general
VII
La lactona J también puede prepararse mediante el
método general VII (véase: (a) Askin, D., Wallace, M.A., Vacca,
J.P., Reamer, R.A., Volante, R.P., Shinkai, I., J. Org. Chem.
1992, 57, 2771; (b) McWilliams, J.C., Armstrong, J.D.,
Zheng, N., Bhupathy, M., Volante, R.P., Reider, P.J., J. Am.
Chem. Soc. 1996, 118, 11970). Un aminoácido T, que
incorporan R_{41} y en el que P_{2} es un grupo protector
apropiado del nitrógeno, se transforma en el epóxido X
(diastereoisómero único) mediante el método descrito en: Luly, J.R.,
Dellaria, J.F., Plattner, J.J., Soderquist, J.L., Yi, N., J.
Org. Chem., 1987, 52, 1487. Alternativamente, X puede
prepararse a partir de T en forma de una mezcla de
diastereoisómeros como se describe en la sección de "Ejemplos"
de este documento. El epóxido X se condensa con el anión derivado
del compuesto Y, que incorpora R_{3} y en el que X_{2} es un
centro quiral auxiliar [que incluye acetónida de (1S,
2R)-1-aminoindan-2-ol]
para proporcionar el producto de acoplamiento Z. Si X se utilizó en
forma de una mezcla de diastereoisómeros, el diastereoisómero de Z
representado más adelante se purificó de otros isómeros de Z (si
existieran) producidos en la reacción de acoplamiento.
Subsecuentemente, esta sustancia se somete a ciclación en
condiciones ácidas para proporcionar la lactona J. El compuesto Y
puede prepararse a partir del ácido carboxílico correspondiente (no
mostrado) mediante el método expuesto en: Askin, D., Wallace, M.A.,
Vacca, J.P., Reamer, R.A., Volante, R.P., Shinkai, I., J. Org.
Chem., 1992, 57, 2771.
Los grupos protectores adecuados de nitrógeno son
reconocibles por los expertos en la técnica e incluyen, pero no
están limitados a, benciloxicarbonilo,
t-butoxicarbonilo,
9-fluorenilmetoxicarbonilo,
p-metoxibenciloxicarbonilo, trifluoroacetamida y
p-toluensulfonilo. Los grupos protectores adecuados
del oxígeno son reconocibles por los expertos en la técnica e
incluyen, pero no están limitados a, -CH_{3}, -CH_{2}CH_{3},
tBu, -CH_{2}Ph, -CH_{2}CH=CH_{2},
-CH_{2}OCH_{2}CH_{2}Si(CH_{3})_{3} y
-CH_{2}CCl_{3}. otros ejemplos de grupos protectores adecuados
para el nitrógeno o el oxígeno pueden encontrarse en T. Green &
P. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis (2ª edición,
1991).
Los grupos salientes adecuados también son
reconocibles por los expertos en la técnica e incluyen, pero no
están limitados a, Cl, Br, I, sulfonatos, grupos
O-alquilo,
Otros ejemplos de grupos salientes adecuados se
describen en J. March, Advanced Organic Chemistry. Reactions,
Mechanisms and Structure (4ª edición, 1992) en las páginas 205,
351-56, 642-43, 647,
652-53, 666, 501, 520-21, 569,
579-80, 992-94,
999-1000, 1005 y 1008.
Los ejemplos de los procedimientos usados para
hacer varios de los compuestos de fórmula I se indican más adelante.
Estos ejemplos tienen la intención de ilustrar la presente invención
sin limitarla. Las estructuras de los compuestos de los siguientes
ejemplos se confirmaron mediante una técnica o más de las
siguientes: espectroscopia de resonancia magnética protónica,
espectroscopia infrarroja, microanálisis elemental, espectrometría
de masas, cromatografía en capa fina, punto de fusión y punto de
ebullición.
Los espectros de resonancia magnética protónica
(RMN-^{1}H) se determinaron usando un
espectrómetro Varian UNITYplus 300 operando con una fuerza de
campo de 300 MHz. Los desplazamientos químicos se dan en partes por
millón (ppm. \delta) hacia debajo del campo de un patrón interno
de tetrametilsilano. Alternativamente, los espectros
RMN-^{1}H toman como referencia las señales
residuales del disolvente prótico como sigue: CHCl_{3}= 7,26 ppm;
DMSO= 2,49 ppm; C_{6}HD_{5}= 7,15 ppm. La multiplicidad de los
picos se designa como sigue: s, singlete; d, doblete; dd, doblete
de dobletes; t, triplete; q, cuarteto; br, resonancia amplia; m,
multiplete. Las constantes de acoplamiento (J) se dan en
hercios (Hz). Los espectros de absorción infrarroja (IR) se
obtuvieron usando un espectrómetro Perkin-Elmer 1600
de la serie FTIR. Los microanálisis elementales se realizaron en
Atlantic Microlab Inc., Norcross, GA y los resultados obtenidos de
los elementos se expresaron dentro del \pm0,4% de los valores
teóricos.
La cromatografía ultra rápida en columna se
realizó usando gel de sílice 60 (Merck Art 9385). La cromatografía
analítica en capa fina (TLC) se realizó usando hojas revestidas de
sílice 60 F_{254} (Merck Art 5719). Los puntos de fusión se
determinaron en un aparato Mel-Temp y están sin
corregir. Todas las reacciones se realizaron en matraces de tabiques
sellados a presión de argón ligeramente positiva a no ser que se
indique lo contrario. Todos los reactivos comerciales se usaron tal
como se recibieron de sus respectivos proveedores con las siguientes
excepciones. El tetrahidrofurano (THF) se separó por destilación del
cetilbenzofenona sódica antes de usar. El diclorometano
(CH_{2}Cl_{2}) se separó por destilación del hidruro cálcico
antes de usar. El cloruro de litio anhidro se preparó por
calentamiento toda la noche a 110ºC al vacío. Et_{2}O hace
referencia al éter dietílico. DMF hace referencia a la
N,N-dimetilformamida. DMSO hace referencia al
dimetilsulfóxido. Otras abreviaturas incluyen: CH3OH (metanol), EtOH
(etanol), EtOAc (etilacetato), DME (dimetoxietano), Ac (acetilo),
Me (metilo), Et (etilo), Ph (fenilo), Bn (bencilo), CyPentyl
(ciclopentilo), Tr (trifenilmetilo), CBZ (benciloxicarbonilo), BOC
(tert-butoxicarbonilo), Gln (glutamina), Leu (leucina), Phe
(Fenilalanina), Val (valina). Adicionalmente, "L" representa a
los aminoácidos que se presentan naturalmente, "D" representa
a los aminoácidos no naturales y "DL" representa una mezcla
racémica de los dos.
Se usó un sistema simplificado de nomenclatura
que emplea abreviaturas de los aminoácidos para identificar algunos
de los productos intermedios y finales. Cuando se nombran los
compuestos, las abreviaturas en cursiva de los aminoácidos
representan modificaciones en el extremo C-terminal
de ese residuo en los que se aplica lo siguiente:
- 1.
- los ésteres de ácido acrílico se describen como "E" (trans) propenoatos;
- 2.
- las acrilamidas se describen como "E" (trans) propenamidas; y
- 3.
- las N-acetil-pirrolidin-2-onas se describen como "E" (trans) 1-acetil-3-metilenpirrolidin-2-onas.
Además, el término
"AA_{1}\Psi[COCH_{2}]-AA_{2}"
indica que, para cualquier secuencia peptídica, dos aminoácidos
(AA_{1} y AA_{2}) unidos mediante un enlace amido se reemplazan
por un grupo dipeptídico isostérico de cetometilo.
Se añadió cloroformato de isobutilo (4,77 ml,
36,8 mmoles, 1,0 equivalente) a una solución de
[BOC-L-(Tr-Gln)]-OH
(18,7 g, 36,7 mmoles, 1 equivalente) y
4-metilmorfolina (8,08 ml, 73,5 mmoles, 2,0
equivalentes) en CH_{2}Cl_{2} (250 ml) a 0ºC. La mezcla de
reacción se agitó a 0ºC durante 20 minutos y, seguidamente, se
añadió hidrocloruro de N,O-dimetilhidroxilamina (3,60
g, 36,7 mmoles, 1,0 equivalente). La solución resultante se agitó a
0ºC durante 20 minutos y a 23ºC durante 2 horas y, seguidamente, se
sometió a reparto entre agua (150 ml) y CH_{2}Cl_{2}(2 x
150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación del residuo
mediante cromatografía ultra rápida en columna (gradiente de
elución, hexanos 40% al 20% en EtOAc) proporcionó
[BOC-L-(Tr-Gln)]-N(OMe)Me
(16,1 g, 82%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,22 (EtOAc 50%
en hexanos); IR (cm^{-1}) 3411, 3329, 3062, 1701, 1659;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,42 (s, 9 H),
1,63-1,77 (m, 1 H), 2,06-2,17 (m, 1
H), 2,29-2,43 (m, 2 H), 3,17 (s, 3 H), 3,64 (s, 3
H), 4,73 (s, br, 1 H), 5,38-5,41 (m, 1 H),
7,20-7,31 (m, 15 H); Anal.
(C_{31}H_{37}N_{3}O_{5}) C, H, N.
Se añadió hidruro de diisobutilaluminio (50,5 ml
de una solución 1,5 M en tolueno, 75,8 mmoles, 2,5 equivalentes) a
una solución de
[BOC-L-(Tr-Gln)]-N(OMe)Me
(16,1 g, 30,3 mmoles, 1 equivalente) en THF a -78ºC y la mezcla de
reacción se agitó a -78ºC durante 4 horas. Se añadieron
secuencialmente metanol (4 ml) y HCl 1,0 M (10 ml) y la mezcla se
calentó hasta 23ºC. La suspensión resultante se diluyó con Et_{2}O
(150 ml) y se lavó con HCl 1,0 M (3 x 100 ml), NaHCO_{3} saturado
a la mitad (100 ml) y agua (100 ml). La fase orgánica se secó sobre
MgSO_{4}, se filtró y se concentró para proporcionar
[BOC-L-(Tr-Gln)]-H
bruto (13,8 g, 97%) en forma de un sólido blanco: Pf =
114-116ºC; Rf = 0,42 (EtOAc 50% en hexanos); IR
(cm^{-1}) 3313, 1697, 1494; RMN-^{1}H
(CDCl_{3}) \delta 1,44 (s, 9 H), 1,65-1,75 (m, 1
H), 2,17-2,23 (m, 1 H), 2,31-2,54
(m, 2 H), 4,11 (s, br, 1H), 5,38-5,40 (m, 1 H),
7,11 (s, 1 H), 7,16-7,36 (m, 15 H), 9,45 (s, 1
H).
Se añadió bis(trimetilsilil)amida
sódica (22,9 ml de una solución 1,0 M en THF, 22,9 mmoles, 1,0
equivalente) a una solución de fosfonoacetato de trietilo (5,59 g,
22,9 mmoles, 1,0 equivalente) en THF (200 ml) a -78ºC y la solución
resultante se agitó durante 20 minutos a esa temperatura. Se añadió
[BOC-L-(Tr-Gln)]-H
bruto (10,8 g, 22,9 mmoles, 1 equivalente) en THF (50 ml) por medio
de una cánula y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a
-78ºC, se calentó hasta 0ºC durante 10 minutos y se sometió a
reparto entre HCl 0,5 M (150 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos
(2 x 150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación del residuo
mediante cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 40% en
hexanos) proporcionó
etil-3-[BOC-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(10,9 g, 88%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,60 (EtOAc 50%
en hexanos); IR (cm^{-1}) 3321, 1710; RMN-^{1}H
(CDCl_{3}) \delta 1,27 (t, 3 H, J = 7,2), 1,42 (s, 9 H),
1,70-1,78 (m, 1 H), 1,80-1,96 (m, 1
H), 2,35 (t, 2 H, J = 7,0), 4,18 (q, 2 H, J = 7,2),
4,29 (s, br, 1 H), 4,82-4,84 (m, 1 H), 588 (dd, 1
H, J = 15,7, 1,6), 6,79 (dd, 1 H, J = 15,7, 5,3),
6,92 (s, 1 H), 7,19-7,34 (m, 15 H); Anal.
(C_{33}H_{38}N_{2}O_{5}) C, H, N.
Se añadió HCl (3 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,091 g, 0,17 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (3 ml) a 23ºC. La mezcla de reacción se
agitó a 23ºC durante 1,5 horas y, seguidamente, se concentró a
presión reducida para proporcionar
etil-3-[H_{2}N-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
en forma de un aceite viscoso. Esta sustancia se disolvió en
CH_{2}Cl_{2} (6 ml) y se añadieron secuencialmente
CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-OH
(0,068 g, 0,17 mmoles, 1 equivalente) [preparado como se describió
en: Harbeson, S.L., Rich, D.H., J. Med. Chem. 1989, 32,
1378], hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (0,030 g,
0,22 mmoles, 1,3 equivalentes), 4-metilmorfolina
(0,055 ml, 0,50 mmoles, 3,0 equivalentes) e hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
(0,042 g, 0,22 mmoles, 1,3 equivalentes). La mezcla de reacción se
agitó durante 21 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto
entre agua (100 ml) y EtOAc (2 x 100 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La
purificación del residuo mediante cromatografía ultra rápida en
columna (EtOAc 50% en hexanos) proporcionó
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,440 g, 28%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,44 (EtOAc 50%
en hexanos); IR (cm^{-1}) 3317, 1712, 1667;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}, aproximadamente mezcla 1:1
de diastereoisómeros) \delta 0,84-0,91 (m),
1,20-1,31 (m), 1,51-1,58 (m),
1,73-1,96 (m), 2,29-2,39 (m),
2,51-2,72 (m), 2,94-3,07 (m),
4,11-4,30 (m), 4,47-4,50 (m), 4,84
(d, J = 7,8 Hz), 4,94-5,08 (m), 5,09 (s),
5,30 (d, J = 7,2 Hz), 5,48 (d, J = 14,3 Hz),
5,72-5,95 (m), 6,55-7,01 (m),
7,14-7,61 (m), 8,02-8,05 (m); Anal.
(C_{52}H_{57}N_{3}O_{7}\cdot0,75H_{2}O) C, H, N.
Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano
(0,10 ml) y ácido trifluoroacético (3 ml) a una solución de
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,035 g, 0,042 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (4 ml) produciéndose
una solución de color amarillo brillante. La mezcla de reacción se
agitó durante 30 minutos a 23ºC y, seguidamente, se añadió
tetracloruro de carbono (4 ml) y la mezcla se concentró a presión
reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultra rápida
en columna (CH_{3}OH 5% en CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar
etil-3-(CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,014 g, 56%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,39 (CH_{3}OH
10% en CH_{2}Cl_{2}); IR (cm^{-1}) 3306, 1712, 1661;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}, aproximadamente mezcla 1:1
de diastereoisómeros) \delta 0,87-0,93 (m),
1,24-,1,33 (m), 1,39-1,96 (m),
2,17-2,21 (m), 2,58-2,79 (m),
2,87-3,09 (m), 4,10-4,27 (m), 4,44
(s, br), 4,55 (s, br), 5,01-5,10 (m),
5,14-5,69 (m), 5,79 (s), 5,82-5,91
(m), 6,13 (d, J = 7,5 Hz), 6,42 (s, br), 6,59 (dd, J =
16,0, 7,5 Hz), 6,74 (dd, J = 15,6, 4,7 Hz),
7,16-7,39 (m); Anal.
(C_{33}H_{43}N_{3}O_{7}) C, H, N.
Se añadió gota a gota una solución de
isovaleraldehído (8,61 g, 100 mmoles, 1 equivalente) en THF (30 ml)
por medio de un embudo de adición a una solución del bromuro de
vinilmagnesio (100 ml de una solución; 1,0 M en THF, 100 mmoles, 1
equivalente) en THF (150 ml) a 0ºC. Después de que se completara la
adición, la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a 0ºC y,
seguidamente, se sometió a reparto entre NH_{4}Cl saturado (150
ml) y Et_{2}O (2 x 150 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron para proporcionar
un aceite amarillo. Esta sustancia se combinó (pura) con
dietilmalonato (16,7 ml, 110 mmoles, 1,1 equivalentes) y
Ti(OEt)_{4} (2,10 ml, 10,0 mmoles, 0,10
equivalentes) y la combinación se calentó hasta 160ºC durante 1
hora (separando por destilación el EtOH según se formaba).
Seguidamente, la mezcla de reacción se mantuvo a 190ºC durante 4
horas y después se enfrió hasta 60ºC. Se añadieron secuencialmente
EtOH (50 ml) y KOH 6,0 M (50 ml) y la mezcla de reacción marrón se
puso a reflujo durante 4 horas. Después de enfriarla hasta 23ºC, la
mezcla de reacción se filtró a través de material sinterizado de
tamaño de poro medio y el filtrado se sometió a reparto entre agua
(150 ml) y Et_{2}O (2 x 150 ml). Seguidamente, la fase acuosa se
acidificó hasta pH = 2 (como indicó el papel de pH) con HCl
concentrado y se extrajo con una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x
150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se destiló a presión
reducida para proporcionar ácido
trans-7-metil-oct-4-enoico
(4,62 g, 30%) en forma de un líquido incoloro: Pe:
115-120ºC (133,3 Pa); NMR-^{1}H
(CDCl_{3}) \delta 0,86 (d, 6 H, J = 5,5),
1,51-1,65 (m, 1 H), 1,87 (t, 2 H, J = 6,5),
2,22-2,38 (m, 2 H), 2,40-2,45 (m, 2
H), 5,34-5,52 (m, 2 H); Anal.
(C_{9}H_{16}O_{2}) C, H.
Se añadió cloruro de oxalilo (2,71 ml, 31,1
mmoles, 1,05 equivalentes) a una solución de ácido
trans-7-metil-oct-4-enoico
(4,62 g, 29,6 mmoles, 1 equivalente) y N,N-dimetilformamida
(0,03 ml, 0,39 mmoles, 0,012 equivalentes) en benceno (100 ml) a
23ºC. La mezcla de reacción se agitó a 23ºC durante 2 horas y,
seguidamente, se concentró a presión reducida. El aceite resultante
se disolvió en THF (20 ml) y se añadió a través de una cánula a una
solución de (1R,2R)-(-)-pseudoefedrina (4,45 g, 26,9
mmoles, 0,91 equivalentes) y trietilamina (4,50 ml, 32,3 mmoles, 1,1
equivalentes) en THF (200 ml) a 0ºC. La mezcla de reacción se agitó
a 0ºC durante 30 minutos y, seguidamente, se sometió a reparto entre
NH_{4}Cl saturado a la mitad (150 ml) y EtOAc (2 x 150 ml). Las
fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se
concentraron y el residuo se purificó mediante cromatografía ultra
rápida en columna (gradiente de elución, EtOAc 40% al 50% en
hexanos) para proporcionar
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-7-metil-oct-4-enamida
(7,55 g, 93%) en forma de un aceite viscoso: Rf = 0,27 (EtOAc 50%
en hexanos); IR (cm^{-1}) 3382, 1622; RMN-^{1}H
(CDCl_{3}, mezcla de rotámeros) \delta 0,87 (d, J = 6,5),
0,99 (d, J = 6,8), 1,11 (d, J = 7,2),
1,53-1,66 (m), 1,86 (t, J = 6,1),
2,26-2, 54 (m), 2,82 (s), 2,92 (s),
3,99-4,04 (m), 4,29 (s, br),
4,42-4,47 (m), 4,56-4,62 (m),
5,37-5,51 (m), 7,26-7,36 (m); Anal.
(C_{19}H_{29}NO_{2}) C, H, N.
Se añadió n-butilitio (52,6 ml de
una solución 1,6 M en hexanos, 84,2 mmoles, 2,1 equivalentes) a una
suspensión de cloruro de litio anhidro (11,9 g, 282 mmoles, 7,0
equivalentes) y diisopropilamina (12,7 ml, 90,3 mmoles, 2,25
equivalentes) en THF (300 ml) a -78ºC. La mezcla de reacción se
agitó durante 20 minutos a -78ºC y, seguidamente, se mantuvo a 0ºC
durante 5 minutos y, subsecuentemente, se enfrió de nuevo a -78ºC.
se añadió a través de una cánula
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-7-metil-oct-4-enamida
(12,2 g, 40,1 mmoles, 1 equivalente) en THF (40 ml) y la solución
resultante se agitó a -78ºC durante 1 hora, se mantuvo a 0ºC
durante 15 minutos, se agitó a 23ºC durante 5 minutos y,
seguidamente, se enfrió de nuevo a 0ºC. Se añadió bromuro de bencilo
(7,15 ml, 60,1 mmoles, 1,5 equivalentes) y la mezcla de reacción se
agitó a 0ºC durante 30 minutos y, seguidamente, se sometió a reparto
entre NH_{4}Cl saturado a la mitad (200 ml) y una mezcla 1:1 de
EtOAc y hexanos (2 x 200 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación
del residuo mediante cromatografía ultra rápida en columna
(gradiente de elución, EtOAc 20% al 40% en hexanos) proporcionó
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-2S-bencil-7-metil-oct-4-enamida
(12,0 g, 76%) en forma de un aceite viscoso: Rf = 0,54 (EtOAc 50%
en hexanos); IR (cm^{-1}) 3382, 1617; RMN-^{1}H
(CDCl_{3}, mezcla de rotámeros) \delta 0,81-0,90
(m), 1,42-1,61 (m), 1,80-1,95 (m),
2,17-2,25 (m), 2,33-2,54 (m), 2,55
(s), 2,73-2,99 (m), 3,05-3,16 (m),
3,93-4,00 (m), 4,31-4,51 (m),
5,25-5,56 (m), 7,14-7,37 (m); Anal.
(C_{26}H_{35}NO_{2}) C, H, N.
Se añadió N-bromosuccinimida
(5,97 g, 33,5 mmoles, 1,1 equivalentes) en pequeñas porciones a lo
largo de 5 minutos a una solución de
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-2S-bencil-7-metil-oct-4-enamida
(12,0 g, 30,5 mmoles, 1 equivalente) y ácido acético glacial (8,73
ml, 152 mmoles, 5,0 equivalentes) en una mezcla 4:1 de THF y
H_{2}O (250 ml) a 0ºC. La solución amarilla resultante se agitó
durante 15 minutos a 0ºC, seguidamente, se calentó hasta 23ºC y,
subsecuentemente, se puso a reflujo durante 1 hora. Después de
enfriarla hasta 23ºC, la mezcla de reacción se sometió a reparto
entre NaHCO_{3} saturado a la mitad (300 ml) y una mezcla 1:1 de
EtOAc y hexanos (2 x 200 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación
cromatográfica ultra rápida del residuo (EtOAc 5% en hexanos)
proporcionó
3R-bencil-5S-(1R-bromo-3-metil-butil)-dihidrofuran-2-ona
(7,09 g, 65%) en forma de un aceite amarillo pálido: Rf = 0,79
(EtOAc 30% en hexanos); IR (cm^{-1}) 1777;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,87 (d, 3 H,
J = 6,5), 0,94 (d, 3 H, J = 6,9),
1,53-1,72 (m, 2 H), 1,82-1,93 (m, 1
H), 2,10-2,20 (m, 1 H), 2,23-2,33
(m, 1 H), 2,83 (dd, 1 H, J = 13,5, 8,9),
3,04-3,12 (m, 1 H), 3,14-3,22 (m, 1
H), 4,05-4,12 (m, 1 H), 4,23-4,29
(m, 1 H), 7,20-7,36 (m, 5 H); Anal.
(C_{16}H_{21}BrO_{2}) C, H, N.
Se calentó una suspensión de azida sódica (2,83
g, 43,5 mmoles, 2,0 equivalentes) y
3R-bencil-5S-(1R-bromo-3-metil-butil)-dihidrofuran-2-ona
(7,09 g, 21,8 mmoles, 1 equivalente) en N,N-dimetilformamida
(50 ml) a 50ºC durante 20 horas. La mezcla de reacción se enfrió
hasta 23ºC y se sometió a reparto entre agua (200 ml) y una mezcla
1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 200 ml). Las fases orgánicas combinadas
se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se
purificó mediante cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 10%
en hexanos) para proporcionar
5S-(1S-azido-3-metil-butil)-3R-bencil-dihidrofuran-2-ona
(3,26 g, 52%) en forma de un aceite incoloro: Rf = 0,47 (EtOAc 20%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 2109, 1775;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,93 (d, 3 H,
J = 6,5), 0,94 (d, 3 H, J = 6,5),
1,32-1,41 (m, 1 H), 1,55-1,65 (m, 1
H), 1,70-1,85 (m, 1 H), 2,03-2,18
(m, 2H), 2,80 (dd, 1 H, J = 13,5, 8 9),
3,05-3,22 (m, 2 H), 3,27-3,33 (m, 1
H), 4,22-4,27 (m, 1 H), 7,18-7,36
(m, 5 H); Anal. (C_{16}H_{21}N_{3}O_{2}) C, H, N.
Se agitó una solución de
5S-(1S-azido-3-metil-butil)-3R-bencil-dihidrofuran-2-ona
(3,26 g, 11,3 mmoles, 1 equivalente) y Pd/C (10%, 0,40 g) en
CH_{3}OH (60 ml) en una atmósfera de hidrógeno (globo) durante 2
horas. La mezcla de reacción se filtró a través de celite, se
concentró y el residuo se disolvió en 1,4-dioxano
(80 ml). Se añadieron secuencialmente
N,N-diisopropiletilamina (3,94 ml, 22,6 mmoles, 2,0
equivalentes) y dicarbonato de di-tert-butilo (3,70 g, 17,0
mmoles, 1,5 equivalentes) y la solución resultante se agitó a 23ºC
durante 2 horas. Seguidamente, la mezcla de reacción se sometió a
reparto entre agua (150 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x
150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación del residuo
mediante cromatografía ultra rápida en columna (gradiente de
elución, EtOAc 10% al 15% en hexanos) proporcionó
[1S-(4R-bencil-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il)-3-metil-butil]-carbamato
de tert-butilo (2,53 g, 62%) en forma de un sólido blanco:
Pf = 84-86ºC; Rf = 0,66 (EtOAc 30% en hexanos); IR
(cm^{-1}) 3338, 1767, 1704; RMN-^{1}H
(CDCl_{3}) \delta 0,89 (d, 3 H, J = 6,5), 0,90 (d, 3 H,
J = 6,5), 1,18-1,32 (m, 1 H), 1,40 (s, 9 H),
1,43-1,56 (m, 1 H), 1,98-2,07 (m, 1
H), 2,20-2,29 (m, 1 H), 2,78 (dd, 1 H, J =
3,7, 9,0), 2,91-3,01 (m, 1 H), 3,15 (dd, 1 H,
J = 13,7, 4,4), 3,71-3,81 (m, 1 H),
4,23-4,28 (m, 1 H), 4,34 (d, 1 H, J = 9,7),
7,16-7,33 (m, 6 H); Anal. (C_{21}H_{31}NO_{4})
C, H, N.
Se añadió hidróxido de litio (7,2 ml de una
solución acuosa 1 M, 7,2 mmoles, 5,0 equivalentes) a una solución de
[1S-(4R-bencil-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il)-3-metil-butil]-carbamato
de tert-butilo (0,521 g, 1,44 mmoles, 1
equivalente)en DME (7 ml) a 23ºC. La suspensión resultante se
agitó a 23ºC durante 30 minutos y, seguidamente, se sometió a
reparto entre HCl 0,5 M (100 ml) y EtOAc (2 x 100 ml). Las fases
orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se
concentraron y el residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (30 ml).
Se añadieron secuencialmente N-óxido de
4-metilmorfolina (0,337 g, 2,88 mmoles, 2,0
equivalentes), tamices moleculares de 4 \ring{A} en polvo (0,55 g)
y perrutenato de tetrapropilamonio (0,050 g, 0,142 mmoles, 0,10
equivalentes). La mezcla de reacción oscura resultante se agitó
durante 2,5 horas a 23ºC y, seguidamente, se filtró a través de
celite. El filtrado se concentró a presión reducida para
proporcionar un aceite marrón que se disolvió en CH_{2}Cl_{2}
(30 ml). Se añadieron secuencialmente
etil-3-[H_{2}N-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
bruto (2,87 mmoles, 2,0 equivalentes, preparado como se describió
en el ejemplo 1 para la preparación de
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato),
hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (0,409 g, 3,03
mmoles, 2,1 equivalentes), 4-metilmorfolina (0,633
ml, 5,76 mmoles, 4,0 equivalentes) e hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
(0,58 g, 3,03 mmoles, 2,1 equivalentes) y la mezcla de reacción se
agitó durante 15 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto
entre agua (150 ml) y EtOAc (2 x 150 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La
purificación del residuo mediante cromatografía ultra rápida en
columna (gradiente de elución, EtOAc 30% al 40% en hexanos)
proporcionó
etil-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,502 g, 44%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,49 (EtOAc 50%
en hexanos); IR (cm^{-1}) 3314, 1707, 1667;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
0,84-0,91 (m, 6 H), 1,29 (t, 3 H, J = 7,2),
1,39 (s, 9 H), 1,42-1,61 (m, 4 H),
1,98-2,05 (m, 1 H), 2,35 (t, 2 H, J = 7,2),
2,54 (d, 1 H, J = 16,2), 2,70 (dd, 1 H, J = 11,5,
5,6), 2,78-2,99 (m, 3 H), 4,07-4,10
(m, 1 H), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2), 4,47 (s, br, 1 H), 4,58
(d, 1 H, J = 7,5), 5,46 (d, 1 H, J = 15,8), 5,87 (d, 1
H, J = 8,7), 6,58 (dd, 1 H, J = 15,8, 5,1),
7,12-7,31 (m, 21 H); Anal.
(C_{49}H_{59}N_{3}O_{7}) C, H, N.
Se añadió HCl (5 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,096 g, 0,120 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (5 ml). La mezcla de reacción se agitó
a 23ºC durante 30 minutos y, seguidamente, se concentró. El aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) y se añadieron
secuencialmente 4-metilmorfolina (0,033 ml, 0,300
mmoles, 2,5 equivalentes) y cloroformato de bencilo (0,025 ml,
0,175 mmoles, 1,4 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó
durante 30 minutos a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto
entre agua (100 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 100
ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se sometió
cromatografía en gel de sílice (EtOAc 40% en hexanos) para
proporcionar
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,050 g, 50%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,38 (EtOAc 50%
en hexanos); IR (cm^{-1}) 3318, 1712, 1664;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
0,85-0,87 (m, 6 H), 1,05-1,13 (m, 1
H), 1,29 (t, 3 H, J = 7,2), 1,35-1,42 (m, 2
H), 1,97 (s, br, 1 H), 2,29-2,31 (m, 2 H), 2,54 (d,
1 H, J = 16,5), 2,69-3,03 (m, 5 H), 4,17 (q,
2 H, J = 7,2), 4,47 (s, br, 1 H), 4,81 (d, 1 H, J =
7,5), 4,94-5,06 (m, 3 H), 5,48 (d, 1 H, J =
15,6), 5,87 (d, 1 H, J = 8,1), 6,58 (dd, 1 H, J =
15,6, 5,0), 7,12-7,32 (m, 26 H); Anal.
(C_{52}H_{57}N_{3}O_{7}\cdot0,25 H_{2}O) C, H, N.
Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano
(0,10 ml) y ácido trifluoroacético (5 ml) a una solución de
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,050 g, 0,060 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (6 ml) produciéndose
una solución de un color amarillo brillante. La mezcla de reacción
se agitó durante 30 minutos a 23ºC, seguidamente, se añadió
tetracloruro de carbono (4 ml) y la mezcla se concentró a presión
reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultra rápida
en columna (CH_{3}OH 5% en CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar
etil-3-(CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,026 g, 73%) en forma de un sólido blanco: Pf =
162-164ºC; Rf = 0,66 (CH_{3}OH 10% en
CH_{2}Cl_{2}); IR (cm^{-1}) 3412, 3292, 1718, 1689, 1650;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,92 (d, 6 H, J
= 6,5), 1,30 (t, 3 H, J = 7,2), 1,45-1,59
(m, 3 H), 1,97-2,05 (m, 1 H), 2,07 (d, 1 H, J =
15,9), 2,17 (s, br, 2 H), 2,70-2,79 (m, 1 H),
2,91-3,09 (m, 3 H), 4,18 (q, 2 H, J = 7,2),
4,23-4,27 (m, 1 H), 4,54 (s, br, 1 H), 5,03 (d, 1 H,
J = 12,1), 5,08 (d, 1 H, J = 12,1), 5,23 (d, 1 H,
J = 6,9), 5,38 (s, br, 1 H), 5,47 (d, 1 H, J = 15,6),
5,92 (d, 1H, J = 8,7), 6,43 (s, br, 1 H), 6,60 (dd, 1 H,
J = 15,6, 4,8), 7,16-7,39 (m, 11 H); Anal.
(C_{33}H_{43}N_{3}O_{7}) C, H, N.
Se añadió HCl (4 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,216 g, 0,269 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (6 ml). La mezcla de reacción se agitó
a 23ºC durante 1,5 horas y, seguidamente, se concentró. El aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (6 ml), se enfrió hasta
0ºC y se añadieron secuencialmente N,N-diisopropiletilamina
(0,094 ml, 0,540 mmoles, 2,0 equivalentes) y clorotiolformato de
etilo (0,034 ml, 0,326 mmoles, 1,2 equivalentes). La mezcla de
reacción se agitó durante 1 hora a 0ºC y, seguidamente, se sometió a
reparto entre agua (100 ml) y EtOAc (2 x 100 ml). Las fases
orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se
concentraron y el residuo se purificó mediante cromatografía ultra
rápida en columna (EtOAc 40% en hexanos) para proporcionar
etil-3-[EtSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,130 g, 61%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,45 (EtOAc 50%
en hexanos); IR (cm^{-1}) 3307, 1713, 1656;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,86 (d, 6 H, J
= 6,5), 1,05-1,19 (m, 1 H),
1,21-1,39 (m, 8 H), 1,41-1,58 (m, 2
H), 1,96-2,05 (m, 1 H), 2,28-2,35
(m, 2 H), 2,54 (d,1 H, J = 14,6), 2,70 (dd, 1 H, J =
11,7, 5,8), 2,79-3,00 (m, 4 H), 4,17 (q, 2 H,
J = 7,2), 4,41-4,45 (m, 2 H), 5,40 (d, 1 H,
J = 7,5), 5,49 (dd, 1 H, J = 15,8, 1,6), 5,93 (d, 1
H, J = 8,4), 6,59 (dd, 1 H, J = 15,8, 5,1),
7,10-7,31 (m, 21 H); Anal.
(C_{47}H_{55}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[EtSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,120 g, 0,152 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se añadieron
secuencialmente triisopropilsilano (0,10 ml) y ácido
trifluoroacético (5 ml) produciéndose una solución de un color
amarillo brillante. La mezcla de reacción se agitó durante 30
minutos a 23ºC, seguidamente, se añadió tetracloruro de carbono (6
ml) y la mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se
purificó mediante cromatografía ultra rápida en columna (CH_{3}OH
5% en CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar
etil-3-(EtSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,056 g, 68%) en forma de una espuma de color "beige": Rf =
0,55 (CH_{3}OH 10% en CH_{2}Cl_{2}); IR (cm^{-1}) 3385,
2293, 3199, 1717, 1653; RMN-^{1}H (CDCl_{3})
\delta 0,91 (d, 3 H, J = 6,2), 0,92 (d, 3 H, J =
6,5), 1,21-1,38 (m, 8 H),
1,46-1,65 (m, 2 H), 1,83-2,05 (m, 1
H), 2,61 (d, 1 H, J = 14,9), 2,74-3,09 (m, 7
H), 4,18 (q, 2 H, J = 7,2), 4,49-4,56 (m, 2
H), 5,49 (d, 1 H, J = 15,6), 5,59 (s, br, 1 H), 6,05 (d, 1
H, J = 8,7), 6,20 (d, 1 H, J = 6,9), 6,49 (s, br, 1
H), 6,62 (dd, 1 H, J = 15,6, 4,8), 7,16-7,32
(m, 6 H); Anal. (C_{28}H_{41}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió trietilamina (7,12 ml, 51,1 mmoles, 1,0
equivalente) a una solución a 0ºC de mercaptano de bencilo (6,0 ml,
51,1 mmoles, 1 equivalente) y trifosgeno (5,76 g, 19,4 mmoles, 0,38
equivalentes) en CH_{2}Cl_{2} (100 ml). La mezcla de reacción
se calentó hasta 23ºC, se agitó durante 2 horas y, seguidamente, se
concentró a presión reducida. La suspensión blanca resultante se
convirtió en pasta fluida con Et_{2}O (100 ml) y se filtró a
través de material sinterizado de tamaño de poro medio. El filtrado
se concentró a presión reducida y el líquido resultante se destiló
al vacío para proporcionar clorotiolformato de bencilo (6,95 g,
73%) en forma de un líquido incoloro: Pe = 95-100ºC
(1066,4 Pa); IR (cm^{-1}) 1755; RMN-^{1}H
(CDCl_{3}) \delta 4,19 (s, 2 H), 7,30-7,34 (m,
5 H).
Se añadió HCl (5 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,19 g, 0,237 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (5 ml). La mezcla de reacción se agitó
a 23ºC durante 1,5 horas y, seguidamente, se concentró. El aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (6 ml) y se añadieron
secuencialmente 4-metilmorfolina (0,078 ml, 0,709
mmoles, 3,0 equivalentes) y clorotiolformato de bencilo (0,050 ml,
0,331 mmoles, 1,4 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó
durante 1,5 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto
entre agua (100 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 100
ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se sometió la
cromatografía en gel de sílice (EtOAc 40% en hexanos) para
proporcionar
til-3-[BnSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,117 g, 58%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,44 (EtOAc 50%
en hexanos); IR (cm^{-1}) 3312, 1714, 1656;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
0,82-0,89 (m, 6 H), 1,28 (t, 3 H, J = 7,2),
1,43-1,57 (m, 2 H), 1,95-2,05 (m, 1
H), 2,31-2,36 (m, 2 H), 2,53 (d, 1 H, J =
14,6), 2,56-2,70 (m, 1 H),
2,72-3,04 (m, 5 H), 4,02-4,21 (m, 4
H), 4,44 (s, br, 2 H), 5,41 (d, 1 H, J = 7,5), 5,48 (dd, 1
H, J = 15,8, 1,6), 5,88 (d, 1 H, J = 8,1), 6,58 (dd,
1 H, J = 15,8, 5,1), 7,08-7,31 (m, 26 H);
Anal. (C_{52}H_{57}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[BnSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,117 g, 0,137 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se añadieron
secuencialmente triisopropilsilano (0,10 ml) y ácido
trifluoroacético (5 ml) produciéndose una solución de color amarillo
brillante. La mezcla de reacción se agitó durante 20 minutos a 23ºC,
seguidamente, se añadió tetracloruro de carbono (5 ml) y la mezcla
se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante
cromatografía ultra rápida en columna (CH_{3}OH 5% en
CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar
etil-3-(BnSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,068 g, 81%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,52 (CH_{3}OH
10% en CH_{2}Cl_{2}); IR (cm^{-1}) 3299, 1717, 1650;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,91 (d, 6 H, J
= 6,2), 1,29 (t, 3 H, J = 7,2),
1,36-1,63 (m, 3 H), 1,80 (s, br, 1 H),
1,94-2,05 (m, 1 H), 2,16-2,18 (m, 2
H), 2,60 (d, 1 H, J = 16,5), 2,69-2,78 (m, 1
H), 2,87-3,13 (m, 2 H), 4,05-4,21
(m, 4 H), 4,52 (s, br, 2 H), 5,47 (d, 1 H, J = 15,6), 5,57
(s, 1 H), 6,06 (d, 1 H, J = 8,7), 6,32 (d, 1 H, J =
7,2), 6,40 (s, 1 H), 6,60 (dd, 1 H, J = 15,6, 4,5),
7,15-7,29 (m, 10 H); Anal.
(C_{33}H_{43}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió trietilamina (10,4 ml, 74,6 mmoles, 1,0
equivalente) a una solución de mercaptano de ciclopentilo (8,0 ml,
74,8 mmoles, 1 equivalente) y trifosgeno (8,43 g, 28,4 mmoles, 0,38
equivalentes) en CH_{2}Cl_{2}. la mezcla de reacción se calentó
hasta 23ºC, se agitó durante 2 horas y, seguidamente, se concentró a
presión reducida. La suspensión blanca resultante se convirtió en
pasta fluida con Et_{2}O (100 ml) y se filtró a través de material
sinterizado de tamaño de poro medio. El filtrado se concentró a
presión reducida y el líquido resultante se destiló al vacío para
proporcionar clorotiolformato de ciclopentilo (10,4 g, 85%) en
forma de un líquido incoloro: Pe = 70-74ºC (133,3
Pa); IR (cm^{-1}) 1756, 830; RMN-^{1}H
(CDCl_{3}) \delta 1,01-1,23 (m, 6 H),
1,49-1,60 (m, 2 H), 3,20-3,29 (m, 1
H).
Se añadió HCl (5 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,205 g, 0,256 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (6 ml). La mezcla de reacción se agitó
a 23ºC durante 1,5 horas y, seguidamente, se concentró. El aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (8 ml), se enfrió hasta
0ºC y se añadieron secuencialmente 4-metilmorfolina
(0,070, 0,637 mmoles, 2,5 equivalentes) y clorotiolformato de
ciclopentilo (0,063 ml, 0,383 mmoles, 1,5 equivalentes). La mezcla
de reacción se agitó durante 30 minutos a 0ºC y, seguidamente, se
sometió a reparto entre agua (100 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y
hexanos (2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se sometió a
cromatografía en gel de sílice (EtOAc 40% en hexanos) para
proporcionar
etil-3-[CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,113 g, 53%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,44 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3310, 1713, 1654;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,85 (d, 6 H,
J = 6,5), 1,02-1,12 (m, 1 H), 1,29 (t, 3 H,
J = 7,2), 1,42-1,68 (m, 7 H),
1,98-2,08 (m, 4 H), 2,31-2,75 (m, 2
H), 2,55 (d, 1 H, J = 14,3), 2,70 (dd, 1 H, J = 11,8,
5,9), 2,79-3,09 (m, 4 H), 3,55-3,66
(m, 1 H), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2), 4,38 (s, br, 1 H),
4,48-4,49 (m, 1 H), 5,33 (d, 1 H, J = 7,5),
5,50 (dd, 1 H, J = 15,9, 1,6), 5,94 (d, 1 H, J =
8,4), 6,60 (dd, 1 H, J = 15,9, 5,0),
7,10-7,31 (m, 21 H); Anal.
(C_{50}H_{59}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,09 g, 0,108 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (6 ml) y se añadieron
secuencialmente triisopropilsilano (0,10 ml) y ácido
trifluoroacético (5 ml) produciéndose una solución de color amarillo
brillante. La mezcla de reacción se agitó durante 20 minutos 23ºC,
seguidamente, se añadió tetracloruro de carbono (4 ml) y la mezcla
se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante
cromatografía ultra rápida en columna (CH_{3}OH 5% en
CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar
etil-3-(CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,050 g, 79%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,58 (CH_{3}OH
10% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3385, 3298, 3199,
1717, 1652; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
0,89-0,93 (m, 6 H), 1,31 (t, 6 H, J = 7,2),
1,40-1,69 (m, 8 H), 1,86 (s, br, 1 H),
2,04-2,09 (m, 4 H), 2,21 (s, br, 2 H), 2,58 (d, 1 H,
J = 9,3), 2,64-2,79 (m, 1 H),
2,89-3,07 (m, 3 H), 3,07-3,69 (m, 1
H), 4,18 (q, 2 H, J = 7,2), 4,47 (s, br, 1 H), 4,56 (s, br,
1 H), 5,49 (d, 1 H, J = 15,2), 5,57 (s, br, 1 H), 6,07 (d, 1
H, J = 8,7), 6,15 (d, 1 H, J = 6,9), 6,54 (s, br, 1
H), 6,62 (dd, 1 H, J = 15,2, 4,8), 7,16-7,33
(m, 5 H); Anal. (C_{31}H_{45}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió gota a gota una solución de
isobutiraldehído (9,59 g, 133 mmoles, 1 equivalente) en THF (50 ml)
a través de un embudo de adición a una solución de bromuro de
vinilmagnesio (133 ml de una solución 1,0 M en THF, 133 mmoles, 1,0
equivalente) en THF (300 ml) a 0ºC. Después de la conclusión de la
adición, la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a 0ºC,
seguidamente, se añadió cloruro de etilmalonilo (17,0 ml, 133
mmoles, 1,0 equivalente). Después de agitar durante 1 hora a 0ºC, la
mezcla de reacción se sometió a reparto entre NH_{4}Cl saturado
(150 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 200 ml). Las
fases orgánicas combinadas explicaron sobre Na_{2}SO_{4} y se
concentraron. La purificación del residuo mediante filtración a
través de gel de sílice (elución con EtOAc 5% en hexanos)
proporcionó la sustancia intermedia éster de malonato (11,5 g,
rendimiento 40%). Esta sustancia no se caracterizó, pero se combinó
(pura) con Ti(OEt)_{4} (1,13 ml, 5,39 mmoles, 0,10
equivalentes), se calentó hasta 190ºC durante 4 horas y,
seguidamente, se enfrió hasta 60ºC. Se añadieron secuencialmente
EtOH (50 ml) y KOH 6,0 M (50 ml) y la mezcla de reacción marrón se
puso a reflujo durante 4 horas. Después de enfriarse a 23ºC, la
mezcla de reacción se filtró a través de material sinterizado de
tamaño de poro medio y el filtrado se sometió a reparto entre agua
(150 ml) y Et_{2}O (2 x 150 ml). Seguidamente, la fase acuosa se
acidificó hasta pH = 2 (como indicó el papel de pH) con HCl
concentrado y se extrajo con una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x
150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se destiló a presión
reducida para proporcionar ácido
trans-6-metil-hept-4-enoico
(3,58 g, 47%) en forma de un líquido incoloro: Pe:
107-112ºC (133,3 Pa); IR(cm^{-1}) 2960,
1711; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,96 (d, 6
H, J = 6,5), 2,18-2,45 (m, 5 H),
5,31-5,50 (m, 2 H); Anal. (C_{8}H_{14}O_{2})
C, H.
Se añadió cloruro de oxalilo (2,25 ml, 25,8
mmoles, 1,05 equivalentes) a una solución de ácido
trans-6-metil-hept-4-enoico
(3,50 g, 24,6 mmoles, 1 equivalente) y N,N-dimetilformamida
(0,03 ml, 0,39 mmoles, 0,016 equivalentes) en benceno (60 ml) a
23ºC. La mezcla de reacción se agitó a 23ºC durante 2 horas y,
seguidamente, se concentró a presión reducida. El aceite resultante
se disolvió en THF (20 ml) y se añadió a través de una cánula a una
solución de 1R, 2R-(-)-pseudoefedrina (3,87 g, 23,4
mmoles, 1,0 equivalente) y trietilamina (3,92 ml, 28,1 mmoles, 1,2
equivalentes) en THF (150 ml) a 0ºC. La mezcla de reacción se agitó
a 0ºC durante 30 minutos y, seguidamente, se sometió a reparto entre
NH_{4}Cl saturado a la mitad (150 ml) y EtOAc (2 x 150 ml). Las
fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se
concentraron y el residuo se purificó mediante cromatografía ultra
rápida en columna (gradiente de elución EtOAc 40% al 50% en hexanos)
para proporcionar
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-6-metil-hept-4-enamida
(6,31 g, 93%) en forma de un aceite viscoso: Rf = 0,35 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3382, 1622;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}, mezcla de rotámeros)
\delta 0,96 (d, J = 6,8), 0,97 (d, J = 6,5), 1,11
(d, J = 6,9), 2,18-2,59 (m), 2,82 (s), 2,92
(s), 3,99-4,04 (m), 4,32-4,42 (m),
4,44-4,49 (m), 4,55-4,62 (m),
5,32-5,49 (m), 7,24-7,42 (m); Anal.
(C_{18}H_{27}NO_{2}) C, H, N.
Se añadió n-butilitio (28,6 ml de una
solución 1,6 M en hexanos, 45,8 mmoles, 2,1 equivalentes) a una
suspensión de cloruro de litio anhidro (6,47 g, 153 mmoles, 7,0
equivalentes) y diisopropilamina (6,88 ml, 49,1 mmoles, 2,25
equivalentes) en THF (250 ml) a -78ºC. La mezcla de reacción se
agitó durante 20 minutos a -78ºC y, seguidamente, se mantuvo a 0ºC
durante 5 minutos y, subsecuentemente, se enfrió de nuevo a -78ºC.
Se añadió
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-6-metil-hept-4-enamida
(6,31 g, 21,8 mmoles, 1 equivalente) en THF (40 ml) a través de una
cánula y la solución resultante se agitó a -78ºC durante 1 hora, se
mantuvo a 0ºC durante 15 minutos, se agitó a 23ºC durante 5 minutos
y, seguidamente, se enfrió de nuevo a 0ºC. Se añadió bromuro de
bencilo (3,89 ml, 32,7 mmoles, 1,5 equivalentes), la mezcla de
reacción se agitó a 0ºC durante 30 minutos y, seguidamente, se
sometió a reparto entre NH_{4}Cl saturado a la mitad (200 ml) y
una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (3 x 200 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La
purificación del residuo mediante cromatografía ultra rápida en
columna (gradiente de elución EtOAc 20% al 40% en hexanos)
proporcionó
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-2S-bencil-6-metil-hept-4-enamida
(7,91 g, 96%) en forma de un aceite viscoso: Rf = 0,52 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3383, 1616;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}, mezcla de rotámeros)
\delta 0,82-0,91 (m), 0,96 (d, J = 6,5),
1,24-1,27 (m), 2,14-2,47 (m), 2,56
(s), 2,72-2,99 (m), 3,04-3,15 (m),
3,93-4,00 (m), 4,31-4,51 (m),
5,21-5,39 (m), 5,42-5,55 (m),
7,14-7,37 (m); Anal. (C_{25}H_{33}NO_{2}) C,
H, N.
Se añadió N-bromosuccinimida
(3,89 g, 21,9 mmoles, 1,05 equivalentes) en pequeñas porciones a lo
largo de 5 minutos a una solución de
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-2S-bencil-6-metil-hept-4-enamida
(7,90 g, 20,8 mmoles, 1 equivalente) y ácido acético glacial (5,96
ml, 104 mmoles, 5,0 equivalentes) en una mezcla 4:1 de THF y
H_{2}O (250 ml) a 0ºC. La solución amarilla resultante se agitó
durante 15 minutos a 0ºC, seguidamente, se calentó hasta 23ºC y,
subsecuentemente, se puso a reflujo durante 1 hora. Después de
enfriarse a 23ºC, la mezcla de reacción se sometió a reparto entre
NaHCO_{3} saturado a la mitad (300 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y
hexanos (2 x 200 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación
cromatográfica ultra rápida del residuo (EtOAc 5% en hexanos)
proporcionó
3R-bencil-5S-(1R-bromo-2-metil-propil)-dihidrofuran-2-ona
(5,09 g, 79%) en forma de un sólido blanco. Las impurezas menores
se eliminaron mediante recristalización a partir de hexanos
(recuperación, 2,51 g): Pf = 75-76ºC; Rf = 0,64
(EtOAc 30% en hexanos); IR(cm^{-1}) 1774;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,93 (d, 3 H, J
= 6,6), 0,99 (d, 3 H, J = 6,9),
2,05-2,18 (m, 1 H), 2,20-2,33 (m, 2
H), 2,83 (dd, 1 H, J = 13,6, 8,7), 2,95-3,05
(m, 1 H), 3,17 (dd, 1 H, J = 13,6, 4,5), 3,89 (dd, 1 H, J
= 9,0, 3,4), 4,32-4,39 (m, 1 H),
7,20-7,36 (m, 5 H); Anal.
(C_{15}H_{19}BrO_{2}) C, H.
Se trató una solución de
Aliquat-336 (0,163 g, 0,403 mmoles, 0,05
equivalentes) y
3R-bencil-5S-(1R-bromo-2-metil-propil)-dihidrofuran-2-ona
(2,51 g, 8,06 mmoles, 1 equivalente) en tolueno (60 ml) con una
solución de azida sódica (2,10 g, 32,3 mmoles, 4,0 equivalentes) en
H_{2}O (10 ml). La mezcla bifásica resultante se calentó hasta
70ºC y se mantuvo a esa temperatura durante 48 horas. La mezcla de
reacción se enfrió hasta 23ºC y se sometió a reparto entre agua (150
ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 150 ml). Las fases
orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se
concentraron y el residuo se purificó mediante cromatografía ultra
rápida en columna (gradiente de elución EtOAc 5% al 10% en hexanos)
para proporcionar
5S-(1S-azido-2-metil-propil)-3R-bencil-dihidrofuran-2-ona
(1,0 g, 45%) en forma de un aceite viscoso: Rf = 0,41 (EtOAc 20% en
hexanos); IR(cm^{-1}) 2105, 1772;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
0,86-1,04 (m, 7 H), 1,95-2,17 (m, 2
H), 2,83 (dd, 1 H, J = 13,2, 8,3), 2,92 (dd, 1 H, J =
6,4, 4 5), 3,05-3,21 (m, 2 H),
4,33-4,38 (m, 1 H), 7,19-7,35 (m, 5
H); Anal (C_{15}H_{19}N_{3}O_{2}) C, H, N.
Se agitó una suspensión de
5S-(1S-azido-2-metil-propil)-3R-bencil-dihidrofuran-2-ona
(1,00 g, 3,66 mmoles, 1 equivalente) y Pd/C (10%, 0,090 g) en
CH_{3}OH (60 ml) en una atmósfera de hidrógeno (globo) durante 1
hora. La mezcla de reacción se filtró a través de celite, se
concentró y el residuo se disolvió en 1,4-dioxano
(50 ml). Se añadieron secuencialmente
N,N-diisopropiletilamina (1,28 ml, 7,35 mmoles, 2,0
equivalentes) y dicarbonato de di-tert-butilo (1,20 g, 5,50
mmoles, 1,5 equivalentes) y la solución resultante se agitó a 23ºC
durante 18 horas. Seguidamente, la mezcla de reacción sucede
sometido a reparto entre agua (100 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y
hexanos (2 x 150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación el residuo
mediante cromatografía ultra rápida en columna (gradiente de
elución EtOAc 10% al 15% en hexanos) proporcionó
[1S-(4R-bencil-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il)-2-metil-propil]-carbamato
de tert-butilo (0,496 g, 39%) en forma de un aceite
incoloro: Rf = 0,44 (EtOAc 20% en hexanos); IR(cm^{-1})
3340, 1768, 1708; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
0,92 (d, 6 H, J = 6,9), 1,41 (s, 9 H),
1,70-1,80 (m, 1 H), 1,98-2,07 (m, 1
H), 2,14-2,24 (m, 1 H), 2,81 (dd, 1 H, J =
13,6, 8,9), 2,92-3,01 (m, 1 H), 3,13 (dd, 1 H,
J = 13,6, 4,4), 3,31-3,38 (m, 1 H),
4,39-4,47 (m, 2 H), 7,17-7,33 (m, 5
H); Anal. (C_{20}H_{29}NO_{4}) C, H, N.
Se añadió hidróxido de litio (7,14 ml de una
solución acuosa 1 M, 7,14 mmoles, 5,0 equivalentes) a una solución
de
[1S-(4R-bencil-5-oxo-
tetrahidrofuran-2S-il)-2-metil-propil]-carbamato
de tert-butilo (0,496 g, 1,43 mmoles, 1 equivalente) en DME
(7 ml) a 23ºC. La suspensión resultante se agitó a 23 ºC durante 30
minutos y, seguidamente, se sometió a reparto entre HCl 0,5 M (100
ml) y EtOAc (2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se disolvió en
CH_{2}Cl_{2} (20 ml). Se añadieron secuencialmente
N-óxido de 4-metilmorfolina (0,334 g, 2,85
mmoles, 2,0 equivalentes), tamices moleculares de 4 \ring{A} en
polvo (0,51 g) y perrutenato de tetrapropilamonio (0,050 g, 0, 142
mmoles, 0,10 equivalentes). La mezcla de reacción oscura resultante
se agitó durante 2,5 horas a 23ºC y, seguidamente, se filtró a
través de celite. El filtrado se concentró a presión reducida para
proporcionar un aceite marrón que se disolvió en CH_{2}Cl_{2}
(30 ml). Se añadieron secuencialmente
etil-3-[H_{2}N-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
bruto (1,86 mmoles, 1,3 equivalentes, preparado como se describió
en el ejemplo 1 para la preparación de
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato),
hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (0,289 g, 2,14
mmoles, 1,5 equivalentes), 4-metilmorfolina (0,629
ml, 5,72 mmoles, 4,0 equivalentes) e hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
(0,411 g, 2,14 mmoles, 1,5 equivalentes) y la mezcla de reacción se
agitó durante 8 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto
entre agua (150 ml) y EtOAc (2 x 150 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La
purificación del residuo mediante cromatografía ultra rápida en
columna (EtOAc 40% en hexanos) proporcionó
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,497 g, 44%) en forma de una espuma blanquecina: Rf = 0,40 (EtOAc
50% en hexanos); IR(cm^{-1}) 3314, 1709, 1663;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,65 (d, 3 H,
J = 6,9), 0,91 (d, 1 H, J = 6,9), 1,29 (t, 3 H, J
= 7,2), 1,40 (s, 9 H), 1,94-2,20 (m, 2 H),
2,30-2,35 (m, 2 H), 2,51 (d, 1 H, J = 17,1),
2,68 (dd, 1 H, J = 11,7, 5,8), 2,74-2,90 (m,
3 H), 3,04 (dd, 1 H, J = 17,3, 9,8),
4,05-4,09 (m, 1 H), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2),
4,38-4,45 (m, 1 H), 4,83 (d, 1 H, J = 8,1),
5,45 (d, 1 H, J = 15,7), 5,87 (d, 1 H, J = 8,1), 6,57
(dd, 1 H, J = 15,7, 5,0), 7,10-7,31 (m, 21
H); Anal (C_{48}H_{57}N_{3}O_{7}) C, H, N.
Se añadió HCl (5 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una resolución de
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,225 g, 0,286 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (6 ml). La mezcla de reacción se agitó a
23ºC durante 1,5 horas y, seguidamente, se concentró. El aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) y se añadió
secuencialmente N,N-diisopropiletilamina (0,125 ml, 0,718
mmoles, 2,5 equivalentes) y clorotiolformato de etilo (0,040 ml,
0,384 mmoles, 1,3 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó
durante 1 ahora a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre
agua (100 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 100 ml). Las
fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se
concentraron y el residuo se sometió a cromatografía en gel de
sílice (EtOAc 40% en hexanos) para proporcionar
etil-3-[EtSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,148 g, 66%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,37 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3314, 1714, 1653;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,68 (d, 3 H,
J = 6,9), 0,92 (d, 3 H, J = 6,5),
1,21-1,32 (m, 7 H), 1,92-2,03 (m, 2
H), 2,32-2,36 (m, 2 H), 2,51 (dd, 1 H, J =
17,4, 2,2), 2,67 (dd, 1 H, J = 11,8, 5,9),
2,73-2,90 (m, 4 H), 3,05 (dd, 1 H, J = 17,6,
9,8), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2), 4,39-4,44 (m, 2
H), 5,46 (dd, 1 H, J = 15,7, 1,7), 5,62 (d, 1 H, J =
8,1), 5,96 (d, 1 H, J = 8,4), 6,57 (dd, 1 H, J =
15,7, 5,1), 7 10-7,12 (m, 2 H),
7,15-7,31 (m, 19 H); Anal.
(C_{46}H_{53}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[EtSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,148 g, 0,191 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se añadieron
secuencialmente triisopropilsilano (0,10 ml) y ácido
trifluoroacético (5 ml) produciéndose una solución de color
amarillo brillante. La mezcla de reacción se agitó durante 20
minutos a 23ºC, seguidamente, se añadió tetracloruro de carbono (6
ml) y la mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se
purificó mediante cromatografía ultra rápida en columna (CH_{3}OH
5% en CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar
etil-3-(EtSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,078 g, 77%) en forma de un sólido blanco: Pf = 205ºC (dec); Rf =
0,45 (CH_{3}OH 10% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1})
3424,3304, 1715, 1658, 1640, 1624; RMN-^{1}H
(DMSO-d_{6}) \delta 0,75 (d, 3 H, J = 6,5), 0182
(d, 3 H, J = 6,9), 1,14 (t, 3 H, J = 7,2), 1,21 (t, 3
H, J = 7,2), 1,56-1,71 (m, 2 H),
1,99-2,11 (m, 2 H), 2,44-2,59 (m, 4
H), 2,70-2,85 (m,3 H), 2,93-2,95
(m, 1 H), 4,06-4,18 (m, 3 H), 4,31 (s, br, 1 H),
5,53 (d, 1 H, J = 15,6), 6,63 (dd, 1 H, J = 15,6,
5,1), 6,75 (s, 1 H), 7,14-7,26 (m, 6 H), 8,06 (d, 1
H, J = 8,1), 8,33 (d, 1 H, J = 8,1); Anal.
(C_{27}H_{39}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió HCl (8 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,272 g, 0,345 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (10 ml). La mezcla de reacción se agitó
a 23ºC durante 1,5 horas y, seguidamente, se concentró. El aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) y se añadieron
secuencialmente 4-metilmorfolina (0,095 ml, 0,864
mmoles, 2,5 equivalentes) y clorotiolformato de bencilo (0,068 ml,
0,45 mmoles, 1,3 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó
durante 1 hora a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre
agua (100 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 100 ml
tratantes. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se sometió a
cromatografía en el de sílice (EtOAc 40% en hexanos) para
proporcionar
etil-3-[BnSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,160 g, 55%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,41 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3316, 1716, 1658;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,66 (d, 3 H, J
= 6,9), 0,92 (d, 3 H, J = 6,5), 1,29 (t, 3 H, J =
7,2), 1,93-2,03 (m, 2 H), 2,32-2,36
(m, 2 H), 2,50 (dd, 1 H, J = 17,7, 2,5), 2,67 (dd, 1 H, J
= 11,5, 6,2), 2,73-2,89 (m, 3 H), 3,07 (dd, 1 H,
J = 17,7, 10,0), 4,09 (s, 2 H), 4,16 (q, 2 H, J =
7,2), 4,38-4,42 (m, 2 H), 5,46 (dd, 1 H, J =
15,8, 1,6), 5,65 (d, 1 H, J = 8,4), 5,95 (d, 1 H, J =
8,1), 6,57 (dd, 1 H, J = 15,8, 5,1), 7,03 (s, 1 H),
7,09-7,12 (m, 2 H), 7,15-7,31 (m, 23
H); Anal (C_{51}H_{55}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[BnSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,160 g, 0,191 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se añadieron
secuencialmente triisopropilsilano (0,10 ml) y ácido
trifluoroacético (5 ml) produciéndose una solución de color amarillo
brillante. La mezcla de reacción se agitó durante 20 minutos a 23ºC,
seguidamente, se añadió tetracloruro de carbono (5 ml) y la mezcla
se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante
cromatografía ultra rápida en columna (CH_{3}OH 5% en
CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar
etil-3-(BnSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,097 g, 85%) en forma de un sólido blanco: Pf =
185-189ºC; Rf = 0,55 (CH_{3}OH 10% en
CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3392, 3287, 1710, 1643;
RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 0,74 (d,
3 H, J = 6,9), 0,82 (d, 3 H, J = 6,5), 1,21 (t, 3 H,
J = 7,2), 1,62-1,70 (m, 2 H),
1,98-2,12 (m, 3 H), 2,44-2,59 (m, 2
H), 2,71-2,96 (m, 3 H), 4,03 (s, 2 H), 4,10 (q, 2 H,
J = 7,2), 4,19-4,23 (m, 1 H), 4,32 (s, br, 1
H), 5,54 (d, 1 H, J = 15,6), 6,64 (dd, 1 H, J =
15,6, 5,3), 6,75 (s, 1 H), 7,14-7,28 (m, 11 H), 8,06
(d, 1 H, J = 8,1), 8,42 (d, 1 H, J = 7,8); Anal.
(C_{32}H_{41}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió HCl (6 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
(0,248 g, 0,315 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (6 ml). La mezcla de reacción se agitó
a 23ºC durante 1,5 horas y, seguidamente, se concentró. El aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (15 ml), se enfrió hasta
0ºC y se añadieron secuencialmente 4 metilmorfolina (0,086 ml,
0,782 mmoles, los ,5 equivalentes) y clorotiolformato de
ciclopentilo (0,06 7 ml, 0,407 mmoles, 1,3 equivalentes). La mezcla
de reacción se agitó durante 30 minutos a 0ºC y, seguidamente, se
sometió a reparto entre agua (100 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y
hexanos (2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se sometió a
cromatografía en gel de sílice (EtOAc 40% en hexanos) para
proporcionar
etil-3-[CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-
Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,126 g, 49%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,42 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3314, 1711, 1654;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,67 (d, 3 H,
J = 6,9), 0,92 (d, 3 H, J = 6,9), 1,29 (t, 3 H, J
= 7,2), 1,45-1,68 (m, 6 H),
1,91-2,05 (m, 4 H), 2,31-2,34 (m, 2
H), 2,51 (d, 1 H, J = 17,4), 2,67 (dd, 1 H, J = 11,5,
6,2), 2,75-2,90 (m, 3 H), 3,03 (dd, 1 H, J =
17,3, 9,8), 3,60-3,64 (m, 1 H), 4,17 (q, 2 H, J
= 7,2), 4,36-4,44 (m, 2 H), 5,46 (dd, 1 H, J
= 15,8, 1,7), 5,57 (d, 1 H, J = 8,1), 5,95 (d, 1 H, J
= 8,4), 6,58 (dd, 1 H, J = 15,8, 5,0),
7,10-7,12 (m, 2 H), 7,19-7,31 (m, 19
H); Anal. (C_{49}H_{57}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,126 g, 0,154 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (6 ml) y se añadieron
secuencialmente triisopropilsilano (0,10 ml) y ácido
trifluoroacético (6 ml) produciéndose una solución de color amarillo
brillante. La mezcla de reacción se agitó durante 20 minutos 23ºC,
seguidamente, se añadió tetracloruro de carbono (6 ml) y la mezcla
se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante
cromatografía ultra rápida en columna (CH_{3}OH 5% en
CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar
etil-3-(CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-Gln)-E-
propenoato (0,046 g, 52%) en forma de un sólido blanco: Pf =
200-204ºC; Rf = 0,38 (CH_{3}OH 10% en
CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3431,3261, 1717, 1642;
RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 0,75 (d,
3 H, J = 6,5), 0,82 (d, 3 T, J = 6,5), 1,22 (t, 3 T,
J = 7,2), 1,40-1,74 (m, 7 H),
1,95-2,10 (m, 6 H), 2,43-2,59 (m, 6
H), 2,71-2,84 (m, 3 H), 2,93-2,95
(m, 1 H), 3,47-3,56 (m, 1 H),
4,06-4,16 (m, 3 H), 4,32 (s, br, 1 H), 5,54 (d, 1 H,
J = 15,9), 6,64 (dd, 1 H, J = 15,9, 5,3), 6,75 (s, 1
H), 7,15-7,27 (m, 6 H), 8,06 (d, 1 H, J =
7,8), 8,27 (d, 1 H, J = 8,1); Anal.
(C_{30}H_{43}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió cloruro de oxalilo (5,96 ml, 68,3
mmoles, 1,05 equivalentes) a una solución de ácido y
dietilfosfonoacético (13,8 g, 65,0 mmoles, 1 equivalente) y
N,N-dimetilformamida (0,03 ml, 0,39 mmoles, 0,006
equivalentes) en benceno (150 ml) a 23ºC. La mezcla de reacción se
agitó a 23ºC durante 1 hora y, seguidamente, se concentró a presión
reducida. El aceite resultante se disolvió en THF (30 ml) y se
añadió a través de una cánula a una solución de indolina (7,38 g,
61,9 mmoles, 0,95 equivalentes) y trietilamina (10,9 ml, 78,0
mmoles, uno, los equivalentes) en THF (200 ml) a 0ºC. La mezcla de
reacción se agitó a 0ºC durante 15 minutos y, seguidamente, se
sometió a reparto entre HCl 0,5 M (150 ml) y EtOAc (2 x 150 ml). Las
fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se
concentraron para proporcionar un sólido de color tostado. La
recristalización a partir de Et_{2}O proporcionó el
[2-(2,3-dihidroindol-1-il)-2-oxo-etil]-fosfonato
de dietilo (13,2 g, 63%) en forma de un sólido de color marrón
claro: Pf = 97 días 99ºC; Rf = 0,06 (EtOAc 50% en hexanos);
IR(cm^{-1}) 3460, 1657, 1597, 1482;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,35 (t, 6 H, J
= 7,2), 3,14 (d, 2 H, J = 22,4), 3,22 (d, 2 H, J
= 8,4), 4,15-4,30 (m, 6 H), 7,04 (t, 1 H, J
= 7,0), 7,17-7,28 (m, 2 H), 8,21 (d, 1 H, J
= 9,0); Anal. (C_{14}H_{20}NO_{4}P) C, H, N.
Se añadió bis(trimetilsilil)amida
sódica (11,9 ml de una solución 1,0 M en THF, 11,9 mmoles, 1,0
equivalente) a una solución del
[2-(2,3-dihidroindol-1-il)-2-oxo-etil]-fosfonato
de dietilo (3,54 g, 11,9 mmoles, 1,0 equivalente) en THF (150 ml)
a -78ºC y la solución resultante se agitó durante 20 minutos a esa
temperatura. Se añadió
[BOC-L-(Tr-Gln)]-H
bruto (5,63 g, 11,9 mmoles, 1 equivalente), preparado como se
describió en el ejemplo 1, en THF (40 ml) a través de una cánula y
la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a -78ºC, se calentó
hasta 0ºC durante 10 minutos y se sometió a reparto entre HCl 0,5 M
(150 ml) y EtOAc (2 x 150 ml). Las fases orgánicas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación del residuo
mediante cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 50% en
hexanos) proporcionó
(2,3-dihidroindol)-3-[BOC-L-(Tr-Gln)]-E-propenamida
(6,35 g, 87%) en forma de una espuma blanquecina: Rf = 0,28 (EtOAc
50% en hexanos); IR(cm^{-1}) 3401,3307, 1690, 1665;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,44 (s, 9 H),
1,76-2,05 (m, 2 H), 2,37-4,06 (m, 2
H), 3,11-3,22 (m, 2 H), 4,02-4,16
(m, 2 H), 4,27-4,40 (m, 1 H),
4,91-4,97 (m, 1 H), 6,29 (d, 1 H, J = 14,9),
6,77-6,96 (m, 2 H), 6,98-7,05 (m, 1
H), 7,14-7,37 (m, 17 H), 8,25 (d, 1 H, J =
7,5); Anal. (C_{39}H_{41}N_{3}O_{4}) C, H, N.
Se añadió hidróxido de litio (8,0 ml de una
solución acuosa 1 M, 8,0 mmoles, 5,0 equivalentes) a una solución de
[1S-(4R-bencil-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il)-3-metil-butil]-carbamato
de tert-butilo (0,576 g, 1,59 mmoles, 1 equivalente),
preparado como se describió en el ejemplo 1, en DME (8 ml) a 23ºC.
La suspensión resultante se agitó a 23ºC durante 45 minutos y,
seguidamente, se sometió a reparto entre HCl 0,5 M (100 ml) y EtOAc
(2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se disolvió en
CH_{2}Cl_{2} (30 ml). Se añadieron secuencialmente
N-óxido de 4-metilmorfolina (0,373 g, 3,18
mmoles, 2,0 equivalentes), tamices moleculares de 4\ring{A} en
polvo (0,60 g) y perrutenato de tetrapropilamonio (0,056 g, 0,159
mmoles, 0,10 equivalentes). La mezcla de reacción oscura resultante
se agitó durante 1 orará 23ºC y, seguidamente, se filtró a través de
celite. El filtrado se concentró a presión reducida para
proporcionar un aceite marrón que se disolvió en CH_{2}Cl_{2}
(20 ml). Se añadieron secuencialmente
(2,3-dihidroindol)-3-[H_{2}N-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
bruto (preparado a partir de
(2,3-dihidroindol)-3-[BOC-L-(Tr-Gln)]-E-propenamida
bruta de una manera análoga al método descrito en el ejemplo 1
para la preparación de
etil-3-[H_{2}N-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl)
(2,39 mmoles, 1,5 equivalentes), hidrato de
1-hidroxibenzotriazol (0,322 g, 2,38 mmoles, 1,5
equivalentes), 4-metilmorfolina (0,699 ml, 6,36
mmoles, 4,0 equivalentes) e hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
(0,322 g, 2,38 mmoles, 1,5 equivalentes) y la mezcla de reacción se
agitó durante 16 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto
entre agua (150 ml) y EtOAc (2 x 100 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La
purificación del residuo mediante cromatografía ultra rápida en
columna (hexanos 40% en EtOAc) proporcionó
(2,3-dihidroindol)-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenamida
(0,568 g, 40%) en forma de una espuma tostada: Rf = 0,64 (CH_{3}OH
10% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3304, 1700, 1665;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,86 (d, 6 H, J
= 6,5), 0,97-1,12 (m, 1 H), 1,39 (s, 9 H),
1,45-1,64 (m, 2 H), 2,39-2,43 (m, 2
H), 2,51 (d, 2 H, J = 15,6), 2,67 (dd, 1 H, J = 12,3,
7,0), 2,79-2,96 (m, 3 H), 3,16 (s, br, 2 H),
4,01-4,20 (m, 5 H), 4,52 (s, br, 2 H), 4,63 (d, 1
H, J = 7,8), 6,09 (d, 1 H, J = 14,7), 6,17 (d, 1 H,
J = 8,1), 6,65 (dd, 1 H, J = 14,7, 5,8),
6,99-7,04 (m, 1 H), 7,11-7,39 (m, 23
H), 8,26 (d, 1 H,
J = 7,5).
J = 7,5).
Se añadió HCl (6 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
(2,3-dihidroindol)-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenamida
(0,204 g, 0,233 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (8 ml). La mezcla de reacción se agitó a
23ºC durante 2,5 horas y, seguidamente, se concentró. El aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (8 ml) y se añadieron
secuencialmente N,N-diisopropiletilamina (0,081 ml, 0,465
mmoles, 2,0 equivalentes) y clorotiolformato de benzoílo (0,042 ml,
0,279 mmoles, 1,2 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó
durante 2 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre
agua (100 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 100 ml). Las
fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se
concentraron para proporcionar
(2,3-dihidroindol)-3-(BnSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-Gln)-E-propenamida
bruta en forma de una espuma blanquecina. Estas sustancias se
disolvió en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se añadieron secuencialmente
triisopropilsilano (0,075 ml) y ácido trifluoroacético (5 ml),
produciéndose una solución de color amarillo brillante. La mezcla de
reacción se agitó durante 30 minutos a 23ºC, seguidamente, se añadió
tetracloruro de carbono (4 ml) y la mezcla se concentró a presión
reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultra rápida
en columna (CH_{3}OH 5% en CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar
(2,3-dihidroindol)-3-(BnSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-Gln)-E-propenamida
(0,016 g, 10%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,51 (CH_{3}OH
10% en CH_{2}Cl_{2}); RMN-^{1}H (CDCl_{3})
\delta 0,92 (d, 6 H, J = 6,2), 1,11-1,25
(m, 1 H), 1,33-1,36 (m, 1 H),
1,49-2,17 (m, 4 H), 2,25 (s, br, 2 H), 2,58 (d, 1 H,
J = 17,1), 2,70-2,72 (m, 1 H),
2,94-3,17 (m, 4 H), 4,01-4,04 (m, 2
H), 4,11 (s, 2 H), 4,52-4,58 (m, 2 H), 5,47 (s, br,
1 H), 6,13 (d, 1 H, J = 13,4), 6,29 (s, br, 1 H), 6,41 (s,
br, 1 H), 6,66 (s, br, 1 H), 7,00-7,05 (m, 1 H),
7,17-7,29 (m, 13 H), 8,25 (d, 1 H, J =
7,2).
Se añadió n-butilitio (33,7 ml de una
solución 1,6 M en hexanos, 53,9 mmoles, 2,15 equivalentes) a una
suspensión de cloruro de litio anhidro (7,47 g, 176 mmoles, 7,0
equivalentes) y diisopropilamina (8,09 ml, 57,7 mmoles, 2,3
equivalentes) en THF (260 ml) a -78ºC. La mezcla de reacción se
agitó durante 30 minutos a -78ºC, se mantuvo a 0ºC durante 5 minutos
y, subsecuentemente, se enfrió de nuevo a -78ºC. Se añadió
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-6-metil-hept-4-enamida
(7,26 g, 25,1 mmoles, 1 equivalente) en THF (50 ml) a través de una
cánula y la solución resultante se agitó a -78ºC durante 1,75 horas,
se mantuvo a 0ºC durante 20 minutos, se agitó a 23ºC durante 5
minutos y, seguidamente, se enfrió de nuevo a 0 ºC. Se añadió una
solución de bromuro de 4-metilbencilo (6,96 g, 37,6
mmoles, 1,5 equivalentes) en THF (15 ml) y la mezcla de reacción se
agitó a 0ºC durante 30 minutos y, seguidamente, se sometió a reparto
entre NH_{4}Cl saturado a la mitad (230 ml) y una mezcla 1:1 de
EtOAc y hexanos (300 ml, 2 x 150 ml). Las fases orgánicas combinadas
se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La
purificación del residuo mediante cromatografía ultra rápida en
columna (gradiente de elución EtOAc 20% al 40% en hexanos)
proporcionó
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-6-metil-2S-(4-metil-bencil)-hept-4-enamida
(9,33 g, 95%) en forma de un ácido viscoso: Rf = 0,44 (EtOAc 40% en
hexanos); IR(cm^{-1}) 3378, 1619;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}, mezcla de rotámeros)
\delta 0,84-0,97 (m), 2,12-2,27
(m), 2,29 (s), 2,35-2,46 (m), 2,58 (s),
2,66-2,84 (m), 2,86-3,05 (m),
3,91-4,13 (m), 4,30-4,44 (m),
4,45-4,53 (m), 5,17-5,54 (m), 7,04
(s), 7,12-7,33 (m); Anal (C_{26}H_{35}NO_{2})
C, H, N.
Se añadió N-bromosuccinimida (4,37 g, 24,6
mmoles, 1,05 equivalentes) en pequeñas porciones a lo largo de 10
minutos a una solución de
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-6-metil-2S-(4-metil-bencil)-hept-4-enamida
(9,21 g, 23,4 mmoles, 1 equivalente) y ácido acético glacial (6,70
ml, 117 mmoles, 5,0 equivalentes) en una mezcla 4:1 de THF y
H_{2}O (250 ml) a 0ºC. La solución amarilla resultante se agitó
durante 15 minutos a 0ºC, seguidamente, se calentó hasta 23ºC y,
subsecuentemente, se puso a reflujo durante 45 minutos. Después de
enfriarse a 23ºC, la mezcla de reacción se sometió a reparto entre
NaHCO_{3} saturado a la mitad (200 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc
y hexanos (2 x 200 ml, 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación
cromatográfica ultra rápida del residuo (gradiente de elución EtOAc
4% al 6% en hexanos) proporcionó
5S-(1R-bromo-2-metil-propil)-3R-(4-metil-bencil)-dihidrofuran-2-ona
(6,45 g, 85%) en forma de un sólido blanco (que contenía
aproximadamente 5-10% de impurezas no identificadas
mediante RMN-^{1}H): Pf =
94-100ºC; Rf = 0,64 (EtOAc 25% en hexanos);
IR(cm^{-1}) 1772; RMN-^{1}H (CDCl_{3},
isómero principal) \delta 0,93 (d, 3 H, J = 6,5), 0,99 (d,
3 H, J = 6,5), 2,05-2,18 (m, 1 H),
2,21-2,28 (m, 2 H), 2,33 (s, 3 H), 2,79 (dd, 1 H,
J = 13,5, 9,0), 2,92-3,03 (m, 1 H), 3,12 (dd,
1 H, J = 13,5, 4,5), 3,89 (dd, 1 H, J = 9,0, 3,4),
4,32-4,41 (m, 1 H), 7,06-7,16 (m, 4
H); Anal. (C_{16}H_{21}BrO_{2})
C, H.
C, H.
Se calentó una suspensión de azida sódica (2,55
g, 39,2 mmoles, 2,0 equivalentes) y
5S-(1R-bromo-2-metil-propil)-3R-(4-metil-bencil)-dihidrofuran-2-ona
(6,37 g, 19,6 mmoles, 1 equivalente) en N,N-dimetilformamida
(63 ml) a 50ºC durante 48 horas. La mezcla de reacción se enfrió
hasta 23ºC y se sometió a reparto entre agua (370 ml) y una mezcla
1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 370 ml, 200 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el
residuo se purificó mediante cromatografía ultra rápida en columna
(gradiente de elución EtOAc 8% al 12% en hexanos) para proporcionar
5S-(1S-azido-2-metil-propil)-3R-(4-metil-bencil)-dihidrofuran-2-ona
(3,33 g, 59%) en forma de un aceite incoloro (que contenía
aproximadamente 5-10% de impurezas no identificadas
mediante RMN-^{1}H): Rf = 0,52 (EtOAc 25% en
hexanos); IR(cm^{-1}) 2097, 1772;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}, isómero principal)
\delta 0,97 (d, 3 H, J = 6,5), 1,01 (d, 3 H, J =
6,8), 1,94-2,06 (m, 1 H), 2,07-2,13
(m, 2 H), 2,33 (s, 3 H), 2,79 (dd, 1 H, J = 13,2, 8,2), 2,92
(dd, 1 H, J = 6,8, 4,4), 3,02-3,17 (m, 2 H),
4,32-4,40 (m, 1 H), 7,07-7,15 (m, 4
H); Anal. (C_{16}H_{21}N_{3}O_{2}) C, H, N.
Se agitó una suspensión de
5S-(1S-azido-2-metil-propil)-3R-(4-metil-bencil)-dihidrofuran-2-ona
(3,24 g, 11,3 mmoles, 1 equivalente) y Pd/C (10%, 0,25 g) en
CH_{3}OH (190 ml) en una atmósfera de hidrógeno (globo) durante 1
hora. La mezcla de reacción se filtró al vacío a través de papel
Whatman Nº 3, se concentró y el residuo se disolvió en
1,4-dioxano (100 ml). Se añadieron secuencialmente
N,N-diisopropiletilamina (3,93 ml, 22,6 mmoles, 2,0
equivalentes) y dicarbonato de di-tert-butilo (3,69 g, 16,9
mmoles, 1,5 equivalentes) y la solución resultante se agitó a 23ºC
durante 16 horas. Seguidamente, la mezcla de reacción se sometió a
reparto entre agua (200 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x
300 ml, 200 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación del residuo
mediante cromatografía ultra rápida en columna (gradiente de elución
EtOAc 11% al 17% en hexanos) proporcionó
{2-metil-1S-[4R-(4-metil-bencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il]-propil}-carbamato
de tert-butilo (1,71 g, 42%) en forma de un aceite viscoso:
Rf = 0,54 (EtOAc 25% en hexanos); IR(cm^{-1}) 3331, 1766,
1696; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,92 (d, 3
H, J = 6,5), 0,93 (d, 3 H, J = 6,5), 1,41 (s, 9 H),
1,72-1,83 (m, 1 H), 1,96-2,06 (m, 1
H), 2,11-2,22 (m, 1 H), 2,31 (s, 3 H), 2,77 (dd, 1
H, J = 13,5, 8,7), 2,88-2,99 (m, 1 H), 3,08
(dd, 1 H, J = 13,5, 4,5), 3,30-3,38 (m, 1
H), 4,38-4,44 (m, 1 H), 4,49 (d, 1 H, J =
10,0), 7,04-7,13 (m, 4 H); Anal.
(C_{21}H_{31}NO_{4}) C, H, N.
Se añadió hidróxido de litio (7,9 ml de una
solución acuosa 1 M, 7,9 mmoles, 5,0 equivalentes) a una solución
de
{2-metil-1S-[4R-(4-metil-bencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il]-propil}-carbamato
de tert-butilo (0,570 g, 1,58 mmoles, 1 equivalente) en DME
(15 ml) a 23ºC. La suspensión resultante se agitó a 23ºC durante 30
minutos y, seguidamente, se sometió a reparto entre KHSO_{4} 10%
(35 ml) y CH_{2}Cl_{2} (100 ml, 2 x 70 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el
residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (25 ml). Se añadieron
secuencialmente tamices moleculares de 4 \ring{A} en polvo (0,56
g), N-óxido de 4-metilmorfolina (0,369 g,
3,15 mmoles, 2,0 equivalentes) y perrutenato de tetrapropilamonio
(0,055 g, 0,16 mmoles, 0,10 equivalentes). La mezcla de reacción
oscura resultante se agitó durante 1,33 horas a 23ºC y,
seguidamente, la mezcla se filtró al vacío a través de papel Whatman
Nº 3 y, seguidamente, a través de papel Whatman Nº 5. El filtrado se
concentró a presión reducida para proporcionar un residuo oscuro que
se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (25 ml). Se añadieron
secuencialmente
etil-3-[H_{2}N-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
bruto (véase preparación de
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato,
1,90 mmoles, 1,2 equivalentes), 4-metilmorfolina
(0,693 ml, 6,30 mmoles, 4,0 equivalentes), hidrato de
1-hidroxibenzotriazol (0,320 g, 2,37 mmoles, 1,5
equivalentes) e hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
(0,453 g, 2,36 mmoles, 1,5 equivalentes) y la mezcla de reacción se
agitó durante 20 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto
entre agua (70 ml) y EtOAc (2 x 100 ml, 50 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La
purificación del residuo mediante cromatografía ultra rápida en
columna (EtOAc 38% en hexanos) proporcionó
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,677 g, 54%) en forma de una espuma blanquecina: Rf = 0,44 (EtOAc
50% en hexanos); IR(cm^{-1}) 3307, 1708, 1666;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,64 (d, 3 H,
J = 6,8), 0,91 (d, 3 H, J = 6,5), 1,28 (t, 3 H, J
= 7,2), 1,40 (s, 9 H), 1,55-1,67 (m, 1 H),
1,92-2,04 (m, 2 H), 2,31 (s, 3 H),
2,32-2,40 (m, 2 H), 2,45-2,54 (m, 1
H), 2,63 (dd, 1 H, J = 11,5, 5,9), 2,68-2,87
(m, 2 H), 3,03 (dd, 1 H, J = 17,4, 10,0),
4,04-4,51 (m, 1 H), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2),
4,41-4,52 (m, 1 H), 4,83 (d, 1 H, J = 8,4),
5,49 (d, 1 H, J = 15,7), 5,86 (d, 1 H, J = 8,4), 6,60
(dd, 1 H, J = 15,7, 5,0), 7,00 (d, 2 H, J = 8,0),
7,09 (d, 2 H, J = 8,0); Anal.
(C_{49}H_{59}N_{3}O_{7}) C, H, N.
Se añadió HCl (3 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,315 g, 0,393 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (3 ml). La mezcla de reacción se agitó
a 23ºC durante 2 horas y, seguidamente, se concentró el aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se añadieron
secuencialmente N,N-diisopropiletilamina (0,205 ml, 1,18
mmoles, 3,0 equivalentes) y clorotiolformato de etilo (0,061 ml,
0,59 mmoles, 1,5 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó
durante 2 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre
salmuera (30 ml) y CH_{2}Cl_{2} (3 x 30 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el
residuo se sometió a cromatografía en gel de sílice (EtOAc 40% en
hexanos) para proporcionar
etil-3-[EtSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
(0,220 g, 71%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,29 (EtOAc 40%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3307, 1713, 1655;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,67 (d, 3 H, J
= 6,8), 0,92 (d, 3 H, J = 6,8), 1,25 (t, 3 H, J
= 7,4), 1,28 (t, 3 H, J = 7,4), 1,55-1,67
(m, 1 H), 1,91-2,03 (m, 2 H), 2,31 (s, 3 H),
2,32-2,37 (m, 2 H), 2,49 (dd, 1 H, J = 17,7,
2,2), 2,62 (dd, 1 H, J = 11,7, 6,1), 2,69-2,
83 (m, 2 H), 2,84 (q, 2 H, J = 7,4), 3,04 (dd, 1 H, J
= 17,7, 10,0), 4,17 (q, 2 H, J = 7,4),
4,35-4,51 (m, 2 H), 5,50 (dd, 1 H, J = 15,6,
1,6), 5,62 (d, 1 H, J = 8,1), 5,95 (d, 1 H, J = 8,1),
6,60 (dd, 1 H, J = 15,6, 5,1), 6,99 (d, 2 H, J = 8,1),
7,09 (d, 2 H, J = 8,1), 7,18-7,31 (m, 16 H);
Anal (C_{47}H_{55}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[EtSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
(0,169 g, 0,214 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (6 ml) y se añadieron
secuencialmente triisopropilsilano (0,13 ml) y ácido
trifluoroacético (3 ml) produciéndose una solución de color amarillo
brillante. La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a 23ºC
y, seguidamente, se concentró a presión reducida. El residuo se
purificó mediante cromatografía ultra rápida en columna (CH_{3}OH
6% en CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar
etil-3-(EtSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,072 g, 63%) en forma de un sólido blanco: Pf = 220ºC (dec); Rf =
0,11 (CH_{3}OH 5% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1})
3425,3307, 1713, 1655; RMN-^{1}H
(DMSO-d_{6}) \delta 0,74 (d, 3 H, J = 6,8), 0,82
(d, 3 H, J = 6,8), 1,14 (t, 3 H, J = 7,3), 1,20 (t, 3
H, J = 7,2), 1,54-1,76 (m, 3 H),
1,98-2,13 (m, 3 H), 2,23 (s, 3 H),
2,40-2,54 (m, 3 H), 2,65-2,84 (m, 3
H), 2,73 (q, 3 H, J = 7,3), 2,86-2,96 (m, 1
H), 4,04-4,19 (m, 3 H), 4,26-4,37
(m, 1 H), 5,55 (dd, 1 H, J = 15,7, 1,6), 6,65 (dd, 1 H, J
= 15,7, 5,3), 6,73 (s, 1 H), 7,03 (s, 4 H), 7,14 (s, 1 H), 8,03
(d, 1 H, J = 8,1), 8,31 (d, 1 H, J = 7,8); Anal.
(C_{28}H_{41}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió HCl (3 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,304 g, 0,379 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (3 ml). La mezcla de reacción se agitó a
23ºC durante 2,3 horas y, seguidamente, se concentró. El aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se añadieron
secuencialmente N,N-diisopropiletilamina (0,198 ml, 1,14
mmoles, 3,0 equivalentes) y clorotiolformato de ciclopentilo (0,094
ml, 0,571 mmoles, 1,5 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó
durante 3 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre
salmuera (30 ml) y CH_{2}Cl_{2} (3 x 30 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el
residuo se sometió la cromatografía en gel de sílice (EtOAc 40% en
hexanos) para proporcionar
etil-3-[CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,198 g, 63%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,29 (EtOAc 40%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3307, 1713, 1655;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,67 (d, 3 H, J
= 6,8), 0,92 (d, 3 H, J = 6,8), 1,28 (t, 3 H, J =
7,2), 1,45-1,74 (m, 7 H), 1,90-2,11
(m, 4 H), 2,31 (s, 3 H), 2,32- 2,38 (m, 2 H), 2,50 (dd, 1 H, J
= 17,7, 2,5), 2,62 (dd, 1 H, J = 11,7, 5,8),
2,70-2,87 (m, 2 H), 3,02 (dd, 1 H, J = 17,7,
9,8), 3,57-3,67 (m, 1 H), 4,17 (q, 2 H, J =
7,2), 4,22-4,31 (m, 2 H), 5,50 (dd, 1 H, J =
15,8, 1,6), 5,58 (d, 1 H, J = 8,4), 5,93 (d, 1 H, J =
8,1), 6,60 (dd, 1 H, J = 15,8, 5,1), 6,99 (d, 2 H, J =
7,9), 7,09 (d, 2 H, J = 7,9), 7,18-7,31 (m,
16 H); Anal. (C_{50}H_{59}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,156 g, 0,188 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (6 ml) y se añadieron
secuencialmente triisopropilsilano (0,12 ml) y ácido
trifluoroacético (3 ml) produciéndose una solución de color amarillo
brillante. La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a 23ºC
y, seguidamente, se concentró a presión reducida. Se añadió
Et_{2}O (5 ml) al residuo produciéndose un precipitado blanco. El
precipitado se filtró, se lavó con Et_{2}O (3 x 3 ml) y se secó
para proporcionar
etil-3S-(CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,096 g, 87%) en forma de un sólido blanco: Pf =
208-210ºC (dec); Rf = 0,43 (CH_{3}OH 10% en
CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3425,3295, 1713, 1649;
RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 0,74 (d,
3 H, J = 6,5), 0,81 (d, 3 H, J = 6,5), 1,20 (t, 3 H,
J = 7,2), 1,37-1,76 (m, 8 H),
1,91-2,12 (m, 5 H), 2,23 (s, 3 H),
2,39-2,54 (m, 2 H), 2,65-2,83 (m, 2
H), 2,86-2,96 (m, 1 H), 3,46-3,57
(m, 1 H), 4,04-4,17 (m, 3 H),
4,26-4,37 (m, 1 H), 5,55 (dd, 1 H, J = 15,7,
1,4), 6,65 (dd, 1 H, J = 15,7, 5,4), 6,74 (s, 1 H), 7,03 (s,
4 H), 7,15 (s, 1 H), 8,03 (d, 1 H, J = 8,4), 8,25 (d, 1 H,
J = 8,1); Anal. (C_{31}H_{45}N_{3}O_{6}S) C, H,
N.
Se añadió DMSO (30 ml) a hidruro sódico (0,900 g
de una dispersión al 60% en aceite mineral, 22,5 mmoles, 2,1
equivalentes) y la suspensión resultante se calentó hasta 70ºC
durante 20 minutos. La solución clara obtenida de este modo se
enfrió hasta 23ºC y se añadió THF (40 ml). Seguidamente, la mezcla
de reacción se enfrió hasta 0ºC y se añadió una solución de yoduro
de trimetilsulfonio (4,59 g, 22,5 mmoles, 2,1 equivalentes) en DMSO
(30 ml) a través de una cánula a lo largo de 2 minutos. Después de
agitar durante 1 minuto a 0ºC, se añadió una solución de
BOC-L-Phe-H
(preparada de acuerdo con Luly, J.R.; Dellaria, J.F.; Plattner,
J.J.; Soderquist, J.L.; Yi, N., J. Org. Chem.
1987,52, 1487) (2,5 g, 10,7 mmoles, 1 equivalente) en THF (20
ml) a través de una cánula a lo largo de 5 minutos. La mezcla de
reacción se agitó a 0ºC durante 2 horas y, seguidamente, se sometió
a reparto entre HCl 0,5 M (150 ml) y una mezcla 1:1de EtOAc y
hexanos (2 x 150 ml). Las fases orgánicas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación del residuo
mediante cromatografía ultra rápida en columna (gradiente de
elución EtOAc 15% al 20% en hexanos) proporcionó
(1R/S-oxiranil-2S-fenil-etil)-carbamato
de tert-butilo (mezcla 1:1 de isómeros, 1,71 g, 60%) en
forma de un aceite incoloro: Rf = 0,29 (isómero 1), 0,35 (isómero
2) (EtOAc 20% en hexanos); IR(cm^{-1}) 3347, 2977, 1700;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,38 (s), 1,43
(s), 2,57-3,03 (m), 3,76 (s, br), 3,98 (s, br), 4,11
(s, br), 4,48 (s, br), 4,88 (s, br), 7,18-7,38 (m);
Anal. (C_{15}H_{21}NO_{3}) C, H, N.
Se añadió cloruro de oxalilo (3,07 ml, 75,2
mmoles, 1,05 equivalentes) a una solución de ácido
3-p-tolil-propiónico (5,50 g, 33,5 mmoles, 1
equivalente) y N,N-dimetilformamida (0,03 ml ,0,39 mmoles,
0,012 equivalentes) en benceno (150 ml) a 23ºC. La mezcla de
reacción se agitó a 23ºC durante 3 horas y, seguidamente, se
concentró. El aceite resultante se disolvió en THF (30 ml) y se
añadió a 0ºC a una solución de (1S,
2R)-cis-1-amino-2-indanol
(5,0 g, 33,5 mmoles, 1,0 equivalente) y Et_{3}N (5,14 ml, 36,9
mmoles, 1,1 equivalentes) en THF (250 ml). Después de agitar
durante 30 minutos a 0ºC, la mezcla de reacción se sometió a reparto
entre NH_{4}Cl saturado a la mitad (150 ml) y EtOAc (2 x 150 ml).
Las fases orgánicas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se
concentraron para proporcionar un sólido blanco. Estas sustancias
se disolvió en una mezcla 2:1 de CH_{2}Cl_{2} y
2-metoxipropeno (150 ml) y la solución resultante se
trató con ácido metansulfónico (1,0 ml). Después de agitar 1 hora a
23ºC, la mezcla de reacción se sometió a reparto entre NaHCO_{3}
saturado a la mitad (150 ml) y CH_{2}Cl_{2} (2 x 100 ml). Las
fases orgánicas combinadas se lavaron con H_{2}O (100 ml), se
secaron sobre MgSO_{4} y se filtraron por gravedad. El filtrado se
concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía ultra
rápida en columna (EtOAc 20% en hexanos) para proporcionar
cis-1S-amino-2R-indanol-acetonida-3-p-tolil-propionamida
(5,67 g, 51%) en forma de un aceite de color naranja pálido: Rf =
0,63 (EtOAc 50% en hexanos); IR(cm^{-1}) 2931, 1646;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,35 (s, 3 H),
1,61 (s, 3 H), 2,33 (s, 3 H), 2,90-2,95 (m, 3 H),
3,05-3,09 (m, 4 H), 4,66-4,69 (m, 1
H), 5,05 (d, 1 H, J = 4,7), 7,10-7,27 (m, 8
H); Anal. (C_{22}H_{25}NO_{2}) C, H, N.
Se añadió n-butilitio (8,12 ml de
una solución 1,6 M en hexanos, 13,0 mmoles, 2,0 equivalentes) a una
solución de
(1R/S-oxiranil-2S-fenil-etil)-carbamato
de tert-butilo (mezcla 1:1 de isómeros, 1,71 g, 6,49 mmoles,
1 equivalente) y
cis-1S-amino-2R-indanol-acetonida-3-p-tolil-propionamida
(2,18 g,6,50 mmoles, 1 equivalente) en THF (100 ml) a -78ºC. La
mezcla de reacción se agitó durante 10 minutos a -78ºC, se mantuvo
a 0ºC durante 1,5 horas y, seguidamente, se sometió a reparto entre
HCl 0,5 M (150 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 150 ml).
Las fases orgánicas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se
concentraron. La purificación mediante cromatografía ultra rápida
del residuo (gradiente de elución EtOAc 20% al 30% en hexanos)
proporcionó el producto de acoplamiento (1,02 g, isómero único, 26%)
en forma de un aceite naranja contaminado con algunas impurezas
menores. Esta sustancia se disolvió en una mezcla 5:1 de tolueno y
CH_{2}Cl_{2} (60 ml) y se trató con ácido
p-toluensulfónico monohidratado (0,324 g, 1,70 mmoles, 1,0
equivalente) a 23ºC. Después de agitar 12 horas a 23ºC, la mezcla
de reacción se filtró a través de material sinterizado de tamaño de
poro medio y el filtrado se sometió a reparto entre NaHCO_{3}
saturado a la mitad (150 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2
x 100 ml). Las fases orgánicas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y
se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía
ultra rápida en columna (EtOAc 15% en hexanos) para proporcionar
{1S-[4R-(4-metil-bencil)-5-oxo-tetrahidro-furan-2S-il]-2-fenil-etil}-carbamato
de tert-butilo (0,26 g, 37%) en forma de una espuma blanca:
Rf = 0,60 (EtOAc 30% en hexanos); IR(cm^{-1}) 3336, 1768,
1703; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,36 (s, 9
H), 1,90-1,99 (m, 1 H), 2,15-2,27
(m, 1 H), 2,30 (s, 3 H), 2,74 (dd, 1 H, J = 13,5, 8,6),
2,82-2,88 (m, 2 H), 2,91-3,00 (m, 1
H), 3,06 (dd, 1 H, J = 13,5, 4,5), 3,88-3,97
(m, 1 H), 4,18-4,23 (m, 1 H), 4,51 (d, 1 H, J
= 9,7), 7,01-7,08 (m, 4 H),
7,17-7,31 (m, 5 H); Anal.
(C_{25}H_{31}NO_{4}) C, H, N.
Se añadió hidróxido de litio (3,17 ml de una
solución acuosa 1 M, 3,17 mmoles, 5 equivalentes) a una solución de
{11S-[4R-(4-metil-bencil)-5-oxotetrahidro-furan-2S-il]-2-fenil-etil}-carbamato
de tert-butilo (0,260 g, 0,635 mmoles, 1 equivalente) en DME
(4 ml) a 23ºC. La suspensión resultante se agitó a 23ºC durante 30
minutos y, seguidamente, se sometió a reparto entre HCl 0,5 M (100
ml) y EtOAc (2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se disolvió en
una mezcla 1:1 de CH_{3}CN y CH_{2}Cl_{2} (60 ml). Se
añadieron secuencialmente N-óxido de
4-metilmorfolina (0,149 g, 1,27 mmoles, 2
equivalentes), tamices moleculares de 4 \ring{A} en polvo (0,50
g) y perrutenato de tetrapropilamonio (0,022 g, 0,063 mmoles, 0,1
equivalentes). La mezcla de reacción oscura resultante se agitó
durante 1 hora a 23ºC y, seguidamente, se filtró a través de celite.
El filtrador se concentró a presión reducida para proporcionar un
aceite marrón que se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (20 ml). Se
añadieron secuencialmente
etil-3-[H_{2}N-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
bruto (véase preparación de
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato,
0,762 mmoles, 1,2 equivalentes), hidrato de
1-hidroxibenzotriazol (0,112 g, 0,829 mmoles, 1,3
equivalentes), 4-metilmorfolina (0,280 ml, 2,55
mmoles, 4 equivalentes) e hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
(0,158 g, 0,824 mmoles, 1,3 equivalentes) y la mezcla de reacción
se agitó durante 18 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a
reparto entre agua (100 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x
100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación del residuo
mediante cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 40% en
hexanos) proporcionó
etil-3-[BOC-L-Phe\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,190 g, 35%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,43 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3314, 1710, 1665;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,28 (t, 3 H,
J = 7,2), 1,35 (s, 9 H), 1,63-1,65 (m, 1 H),
1,97-2,05 (m, 1 H), 2,33 (s, 3 H),
2,36-2,38 (m, 3 H), 2,48 (t, 1 H, J = 15,9),
2,57-2,64 (m, 2 H), 2,75-3,00 (m, 4
H), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2), 4,25-4,32 (m, 1
H), 4,52 (s, br, 1 H), 4,77 (d, 1 H, J = 6,9), 5,53 (dd, 1
H, J = 15,9, 1,6), 5,94 (d, 1 H, J = 8,4), 6,63 (dd, 1
H, J = 15,9, 5,0), 6,9-7,09 (m, 5 H),
7,11-7,32 (m, 20 H); Anal.
(C_{53}H_{59}N_{3}O_{7}) C, H, N.
Se añadió HCl (5 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Phe\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,190 g, 0,224 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (6 ml). La mezcla de reacción se agitó a
23ºC durante 1,5 horas y, seguidamente, se concentró. El aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (10 ml), se enfrió hasta
0ºC y se añadieron secuencialmente 4-metilmorfolina
(0,075 ml, 0,682 mmoles, 3,0 equivalentes) y clorotiolformato de
ciclopentilo (0,055 ml, 0,334 mmoles, 1,5 equivalentes). La mezcla
de reacción se agitó durante 1 hora a 0ºC y como seguidamente, se
sometió a reparto entre agua (100 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y
hexanos (2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se sometió a
cromatografía en gel de sílice (EtOAc 40% en hexanos) para
proporcionar
etil-3-[CyPentylSCO-L-Phe\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]E-propenoato
(0,102 g, 50%) en forma de una espuma blanquecina: Rf = 0,49 (EtOAc
50% en hexanos); IR(cm^{-1}) 3316, 1718, 1655;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,29 (t, 3 H, J
= 7,2), 1,45-1,67 (m, 7 H),
1,98-2,05 (m, 2 H), 2,33 (s, 3 H), 2,42 (d, 1 H,
J = 15,9), 2,55-2,98 (m, 3 H),
3,52-3,63 (m, 1 H), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2),
4,38-4,54 (m, 2 H), 5,52-5,58 (m, 2
H), 6,03 (d, 1 H, J = 8,4), 6,64 (dd, 1 H, J = 15,9,
5,0), 6,95-7,08 (m, 5 H), 7,11-7,32
(m, 21 H); Anal (C_{54}H_{59}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano
(0,10 ml) y ácido trifluoroacético (5 ml) a una solución de
etil-3-[CyPentylSCO-L-Phe\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]E-propenoato
(0,075 g, 0,085 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (6 ml) produciéndose
una solución de color amarillo brillante. La mezcla de reacción se
agitó durante 15 minutos a 23ºC, seguidamente, se añadió
tetracloruro de carbono (5 ml) y la mezcla se concentró a presión
reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultra
rápida en columna (CH_{3}OH 5% en CH_{2}Cl_{2}) para
proporcionar
etil-3-(CyPentylSCO-L-Phe\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,047 g, 87%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,62 (CH_{3}OH
10% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3286, 1718, 1637;
RMN-^{1}H (DMSO- d_{6}) \delta 1,20 (t,
3 H, J = 6,8), 1,33-1,70 (m, 10 H),
1,91-2,07 (m, 4 H), 2,24 (s, 3 H),
2,38-3,05 (m, 5 H), 3,42-3,47 (m, 1
H), 4,07-4,11 (m, 2 H), 4,34 (s, br, 2 H), 5,58 (d,
1 H, J = 15,7), 6,67 (dd, 1 H, J = 15,7, 4,4), 6,76
(s, br, 1 H), 7,02-7,25 (m, 10 H), 8,07 (d, 1 H,
J = 7,8), 8,44 (d, 1 H, J = 7,5); Anal.
(C_{35}H_{45}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió n-butilitio (32,5 ml de una
solución 1,6 M en hexanos, 52,0 mmoles, 3,1 equivalentes) a una
suspensión de cloruro de litio anhidro (7,18 g, 169 mmoles, 10
equivalentes) y diisopropilamina (7,80 ml, 55,7 mmoles, 3,3
equivalentes) en THF (250 ml) a -78ºC. La mezcla de reacción se
agitó durante 30 minutos a -78ºC, seguidamente, se mantuvo a 0ºC
durante cinco minutos y, subsecuentemente, se enfrió de nuevo a
-78ºC. Se añadió
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-6-metil-hept-4-enamida
(4,91 g, 17,0 mmoles, 1 equivalente) en THF (50 ml) a través de una
cánula y la solución resultante se agitó a -78ºC durante 1,75 horas,
se mantuvo a 0ºC durante 20 minutos, se agitó a 23ºC durante 5
minutos y, seguidamente, se enfrío de nuevo a 0ºC. se añadió una
solución de bromuro de 4-fluorobencilo (6,34 ml,
50,9 mmoles, 3 equivalentes) en THF (15 ml) y la mezcla de reacción
se agitó a 0ºC durante 30 minutos y, seguidamente, se sometió a
reparto entre NH_{4}Cl saturado a la mitad (230 ml) y una mezcla
1:1 de EtOAc y hexanos (200 ml, 2 x 150 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La
purificación del residuo mediante cromatografía ultra rápida en
columna (gradiente de elución EtOAc 20% al 40% en hexanos)
proporcionó (2R-
hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-6-metil-2S-(4-fluorobencil)-hept-4-enamida
(6,33 g, 94%) en forma de un aceite viscoso: Rf = 0,38 (EtOAc 40% en
hexanos); IR(cm^{-1}) 3378, 1614;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}, mezcla de rotámeros)
\delta 0,85-0,95 (m), 0,96 (d, J = 6,8),
2,10-2,32 (m), 2,34-2,46 (m), 2,58
(s), 2,67-2,79 (m), 2,82-2,94 (m),
3,00-3,18 (m), 3,94 (br), 4,37-4,52
(m), 5,24-5,42 (m), 5,44-5,56 (m),
6,89-7,01 (m), 7,08-7,14 (m),
7,19-7,38 (m); Anal. (C_{25}H_{32}FNO_{2}) C,
H, N.
Se añadió N-bromosuccinimida (2,93 g, 16,5
mmoles, 1,05 equivalentes) en pequeñas porciones a lo largo de 10
minutos a una solución de
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-6-metil-2S-(4-fluorobencil)-hept-4-enamida
(6,24 g, 15,7 mmoles, 1 equivalente) y ácido acético glacial (4,49
ml, 78,8 mmoles, 5 equivalente) en una mezcla 4:1 de THF y H_{2}O
(165 ml) a 0ºC. La solución amarilla resultante se agitó durante 15
minutos a 0ºC, seguidamente, se calentó 23ºC y, subsecuentemente, se
puso a reflujo durante 45 minutos. Después de enfriar a 23ºC, la
mezcla de reacción se sometió a reparto entre NaHCO_{3} saturado a
la mitad (200 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos
(2 x 200 ml, 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación el residuo mediante cromatografía ultra rápida (gradiente de elución EtOAc 4% al 6% al 10% en hexanos) proporcionó 5S-(1R-bromo-2-metil-propil)-3R-(4-fluorobencil)-dihidrofuran-2-ona (4,14 g, 80%) en forma de un aceite de color amarillo pálido (que contenía aproximadamente 5-10% de impurezas no identificadas mediante RMN-^{1}H): Rf = 0,56 (EtOAc 25% en hexanos); IR(cm^{-1}) 1772; RMN-^{1}H (CDCl_{3}, isómero principal) \delta 0,94 (d, 3 H, J = 6,5), 1,00 (d, 3 H, J = 6,8), 2,05-2,35 (m, 3 H), 2,83 (dd, 1 H, J = 13,6, 8,4), 2,92-3,03 (m, 1 H), 3,11 (dd, 1 H, J = 13,6, 4,7), 3,90 (dd, 1 H, J = 9,0, 3,7), 4,33-4,40 (m, 1 H), 6,98-7,06 (m, 2 H), 7,14-7,20 (m, 2 H); Anal. (C_{15}H_{18}BrFO_{2}) C, H.
(2 x 200 ml, 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación el residuo mediante cromatografía ultra rápida (gradiente de elución EtOAc 4% al 6% al 10% en hexanos) proporcionó 5S-(1R-bromo-2-metil-propil)-3R-(4-fluorobencil)-dihidrofuran-2-ona (4,14 g, 80%) en forma de un aceite de color amarillo pálido (que contenía aproximadamente 5-10% de impurezas no identificadas mediante RMN-^{1}H): Rf = 0,56 (EtOAc 25% en hexanos); IR(cm^{-1}) 1772; RMN-^{1}H (CDCl_{3}, isómero principal) \delta 0,94 (d, 3 H, J = 6,5), 1,00 (d, 3 H, J = 6,8), 2,05-2,35 (m, 3 H), 2,83 (dd, 1 H, J = 13,6, 8,4), 2,92-3,03 (m, 1 H), 3,11 (dd, 1 H, J = 13,6, 4,7), 3,90 (dd, 1 H, J = 9,0, 3,7), 4,33-4,40 (m, 1 H), 6,98-7,06 (m, 2 H), 7,14-7,20 (m, 2 H); Anal. (C_{15}H_{18}BrFO_{2}) C, H.
Se calentó una suspensión de azida sódica (1,90
g, 29,2 mmoles, 2,5 equivalentes) y
5S-(1R-bromo-2-metil-propil)-3R-(4-fluorobencil)-dihidrofuran-2-ona
(3,85 g, 11,7 mmoles, 1 equivalente) en N,N-dimetilformamida
(40 ml) a 50ºC durante 67 horas. La mezcla de reacción se enfrió
hasta 23ºC y se sometió a reparto entre NaCl saturado a la mitad
(200 ml) y una mezcla 1:1:1 de EtOAc, hexanos y acetona (2 x 200 ml,
100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se purificó mediante
cromatografía ultra rápida en columna (gradiente de elución EtOAc 9%
al 12% al 17% en hexanos) para proporcionar
5S-(1S-azido-2-metil-propil)-3R-(4-fluorobencil)-dihidrofuran-2-ona
(2,10 g, 62%) en forma de un sólido blanco (que contenía
aproximadamente 5-10% de impurezas no identificadas
mediante RMN- ^{1}H): Pf = 91-96ºC; Rf = 0,44
(EtOAc 25% en hexanos); IR(cm^{-1}) 2097, 1772;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}, isómero principal) \delta
0,99 (d, 3 H, J = 6,5), 1,02 (d, 3 H, J = 6,8),
1,95-2,20 (m, 3 H), 2,78-2,88 (m, 1
H), 2,94 (dd, 1 H, J = 7,0, 4,2), 3,03-3,17
(m, 2 H), 4,37-4,43 (m, 1 H),
6,97-7,09 (m, 2 H), 7,14-7,21 (m, 2
H).
Se agitó una suspensión de
5S-(1S-azido-2-metil-propil)-3R-(4-fluorobencil)-dihidrofuran-2-ona
(2,02 g, 6,93 mmoles, 1 equivalente), dicarbonato de
di-tert-butilo (2,12 g, 9,71 mmoles, 1,4 equivalentes) y Pd/C
(10%, 0,20 g) en CH_{3}OH (100 ml) en una atmósfera de hidrógeno
(globo) durante 16 horas. La mezcla de reacción se filtró al vacío a
través de papel Whatman Nº 3 y se concentró. La purificación del
residuo mediante cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 15% en
hexanos) proporcionó
{2-metil-1S-[4R-fluorobencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il]-propil}-carbamato
de tert-butilo (1,58 g, 62%) en forma de una espuma blanca:
Rf = 0,80 (5% MeOH en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3331,
1766, 1702; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,93
(d, 3 H, J = 6,8), 0,95 (d, 3 H, J = 6,5), 1,41 (s, 9
H), 1,71-1,83 (m, 1 H), 1,95-2,06
(m, 1 H), 2,16-2,27 (m, 1 H), 2,80 (dd, 1 H, J
= 13,5, 8,6), 2,88-2,99 (m, 1 H), 3,09 (dd, 1 H,
J = 13,5, 4,4), 3,32-3,40 (m, 1 H),
4,42-4,48 (m, 2 H), 6,95-7,03 (m, 2
H), 7,11-7,18 (m, 2 H); Anal.
(C_{20}H_{28}FNO_{4})
C, H, N.
C, H, N.
Se añadió hidróxido de litio (9,62 ml de una
solución acuosa 1 M, 9,62 mmoles, 5 equivalentes) a una solución de
{2-metil-1S-[4R-fluorobencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il]-propil}-carbamato
de tert-butilo (0,703 g, 1,92 mmoles, 1 equivalente) en DME
(25 ml) a 23ºC. La suspensión resultante se agitó a 23ºC durante 30
minutos y, seguidamente, se sometió a reparto entre KHSO_{4} 10%
(50 ml) y CH_{2}Cl_{2} (3 x 100 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el
residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (30 ml). Se añadieron
secuencialmente tamices moleculares de 4 \ring{A} en polvo (0,70
g), N-óxido de 4-metilmorfolina (0,451 g,
3,85 mmoles, 2,0 equivalentes) y perrutenato de tetrapropilamonio
(0,068 g, 0,19 mmoles, 0,10 equivalentes). La mezcla de reacción
oscura resultante se agitó durante 1,33 horas a 23ºC y,
seguidamente, se filtró al vacío a través de papel Whatman Nº 3 y,
seguidamente, a través de papel Whatman Nº 5. El filtrado se
concentró a presión reducida para proporcionar un residuo oscuro que
se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (30 ml). Se añadieron
secuencialmente
etil-3-[H_{2}N-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
bruto (2,30 mmoles, 1,2 equivalentes, preparado como se describió
en el ejemplo 1 para la preparación de
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato),
4-metilmorfolina (0,846 ml, 7,69 mmoles, 4,0
equivalentes), hidrato de 1-hidroxibenzotriazol
(0,390 g, 2,89 mmoles, 1,5 equivalentes) e hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
(0,553g, 2,88 mmoles, 1,5 equivalentes) y la mezcla de reacción se
agitó durante 19 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto
entre salmuera (100 ml) y CH_{2}Cl_{2} (3 x 100 ml). Las fases
orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se
concentraron. La purificación el residuo mediante cromatografía
ultra rápida en columna (gradiente de elución EtOAc 35% al 40% en
hexanos) proporcionó
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,820 g, 53%) en forma de una espuma tostada: Rf = 0,50 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3307, 1708, 1666;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,67 (d, 3 H, J
= 6,8), 0,92 (d, 3 H, J = 6,8), 1,28 (t, 3 H, J =
7,2), 1,40 (s, 9 H), 1,53-1,67 (m, 1 H),
1,91-2,04 (m, 3 H), 2,32-2,41 (m, 2
H), 2,46-2,55 (m, 1 H), 2,63 (dd, 1 H, J =
12,1, 5,9), 2,69- 2,80 (m, 1 H), 2,83 (dd, 1 H, J = 12,1,
8,2), 3,03 (dd, 1 H, J = 17,7, 10,0),
4,05-4,11 (m, 1 H), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2),
4,40-4,50 (m, 1 H), 4,84 (d, 1 H, J = 8,4),
5,38 (d, 1 H, J = 15,7), 6,01 (d, 1 H, J = 8,4), 6,60
(dd, 1 H, J = 15,7, 5,0), 6,92-6,99 (m, 2
H), 7,03-7,12 (m, 3 H), 7,17-7,30
(m, 15 H); Anal. (C_{48}H_{56}FN_{3}O_{7}) C, H, N.
Se añadió HCl (3 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,271 g, 0,336 mmoles) en 1,4-dioxano (3 ml). La
solución de reacción se agitó a 23ºC durante 2 horas y,
seguidamente, se concentró. El residuo se disolvió en
CH_{2}Cl_{2} seco (5 ml). Se añadieron secuencialmente
N,N-diisopropiletilamina (0,176 ml, 1,01 mmoles, 3
equivalentes) y clorotiolformato de etilo (0,060 ml, 0,58 mmoles,
1,7 equivalentes). La solución de reacción se agitó durante 2 horas
a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre salmuera (30 ml)
y CH_{2}Cl_{2} (3 x 30 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se
sometió a cromatografía en gel de sílice (gradiente de elución EtOAc
40% al 50% en hexanos) para proporcionar
etil-3-[EtSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,183 g, 69%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,43 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3307, 1708, 1655;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,70 (d, 3 H,
J = 6,8), 0,93 (d, 3 H, J = 6,5), 1,25 (d, 3 H, J
= 7,2), 1,29 (t, 3 H, J = 7,2), 1,55-1,66
(m, 1 H), 1,91-2,05 (m, 2 H),
2,30-2,39 (m, 2 H), 2,51 (dd, 1 H, J = 17,4,
2,5), 2,63 (dd, 1 H, J = 12,1, 5,9),
2,69-2,90 (m, 4 H), 3,02 (dd, 1 H, J = 17,4,
10,0), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2), 4,35-4,49 (m,
2 H), 5,39 (dd, 1 H, J = 15,6, 1,7), 5,66 (d, 1 H, J
= 8,1), 6,12 (d, 1 H, J = 8,1), 6,60 (dd, 1 H, J
= 15,6, 5,0), 6,91-6,99 (m, 2 H),
7,02-7,10 (m, 2 H), 7,17-7,32 (m, 16
H); Anal. (C_{46}H_{52}FN_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[EtSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,149 g, 0,188 mmoles, 1 equivalente) en CH_{2}Cl_{2} seco (6
ml). Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano (0,15 ml, 0,561
mmoles, 3 equivalentes) y ácido trifluoroacético (3 ml)
produciéndose una solución de color amarillo brillante. La solución
se agitó durante 30 minutos y, seguidamente, se concentró. El
residuo se agitó en Et_{2}O (6 ml) y el sólido se recogió
mediante filtración, se lavo con Et_{2}O (3 ml y, seguidamente, 2
ml) y, seguidamente, se secó al vacío para proporcionar
etil-3-(EtSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,090 g, 87%) en forma de un sólido blanco: Pf = 214ºC (dec); Rf =
0,49 (CH_{3}OH 10% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1})
3425, 3284, 1713, 1643; RMN-^{1}H
(DMSO-d_{6}) \delta 0,76 (d, 3 H, J = 6,5), 0,82
(d, 3 H, J = 6,8), 1,15 (t, 3 H, J = 7,2), 1,21 (t, 3
H, J = 7,2), 1,53-1,75 (m, 2 H),
1,99-2,14 (m, 3 H), 2,52-2,85 (m, 6
H), 2,88-2,99 (m, 1 H), 4,09 (q, 2 H, J =
7,2), 4,13-4,20 (m, 1 H), 4,25-4,36
(m, 1 H), 5,40 (dd, 1 H, J = 15,6, 1,4), 6,61 (dd, 1 H, J
= 15,6 ,5,3), 6,74 (s, 1 H), 6,99-7,24 (m, 5
H), 8,01 (d, 1 H, J = 8,1), 8,34 (d, 1 H, J = 8,1);
Anal. (C_{27}H_{38}FN_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió HCl (3 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,273 g, 0,339 mmoles) en 1,4-dioxano (3 ml). La
solución de reacción se agitó a 23ºC durante 2 horas y,
seguidamente, se concentró. El residuo se disolvió en
CH_{2}Cl_{2} seco (5 ml). Se añadieron secuencialmente
N,N-diisopropiletilamina (0,177 ml, 1,02 mmoles, 3
equivalentes) y clorotiolformato de ciclopentilo (0,095 ml, 1,7
equivalentes). La solución de reacción se agitó durante 2 horas a
23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre salmuera (30 ml) y
CH_{2}Cl_{2} (3 x 30 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se
sometió a cromatografía en gel de sílice (EtOAc 40% en hexanos) para
proporcionar
etil-3-[CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
(0,166 g, 59%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,24 (EtOAc 40%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3307, 1713, 1654;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,69 (d, 3 H,J
= 6,8), 0,93 (d, 3 H, J = 6,8), 1,29 (t, 3 H, J =
7,2), 1,47-1,75 (m, 7 H), 1,91-2,12
(m, 4 H), 2,30-2,41 (m, 2 H), 2,51 (dd, 1 H, J
= 17,2, 2,3), 2,63 (dd, 1 H, J = 12,3, 5,9),
2,69-2,80 (m, 1 H), 2,84 (dd, 1 H, J = 12,3,
8,4), 3,01 (dd, 1 H, J = 17,2, 10,0),
3,57-3,67 (m, 1 H), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2),
4,33-4,50 (m, 2 H), 5,39 (dd, 1 H, J = 15,7,
1,7), 5,61 (d, 1 H, J = 7,8), 6,11 (d, 1 H, J = 8,1),
6,60 (dd, 1 H, J = 15,7, 4,8), 6,92-7,00 (m,
2 H), 7,03-7,12 (m, 3 H), 7,18-7,32
(m, 15 H); Anal (C_{49}H_{56}FN_{3}O_{6}S\cdot0,5
H_{2}O) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
(0,132 g, 0,158 mmoles, 1 equivalente) en CH_{2}Cl_{2} seco (6
ml). Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano (0,097 ml, 0,47
mmoles, 3 equivalentes) y ácido trifluoroacético (3 ml)
produciéndose una solución de color amarillo brillante. Esta
solución se agitó durante 30 minutos y, seguidamente, se concentró.
El residuo se agitó en Et_{2}O (6 ml) y el sólido se recogió
mediante filtración, se lavó con Et_{2}O (3 ml y, seguidamente, 2
ml) y, seguidamente, se secó al vacío para proporcionar
etil-3-(CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,077 g, 82%) en forma de un sólido blanco: Pf = 215ºC (dec); Rf =
0,45 (CH_{3}OH 10% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1})
3413, 3296, 1715, 1649; RMN-^{1}H
(DMSO-d_{6}) \delta 0,75 (d, 3 H, J = 6,5), 0,82
(d, 3 H, J = 6,5), 1,21 (t, 3 H, J = 6,9),
1,36-1,75 (m, 8 H), 1,92-2,14 (m, 5
H), 2,52-2,85 (m, 4 H), 2,87-2,99
(m, 1 H), 3,47-3,58 (m, 1 H),
4,06-4,18 (m, 1 H), 4,09 (q, 2 H, J = 6,9),
4,25- 4,36 (m, 1 H), 5,41 (d, 1 H, J = 15,6), 6,61 (dd, 1 H,
J = 15,6, 5,1), 6,74 (s, 1 H), 6,98-7,23 (m,
5 H), 8,01 (d, 1 H, J = 8,4), 8,28 (d, 1 H, J = 8,1);
Anal. (C_{30}H_{42}FN_{3}O_{6}S\cdot0,25 H_{2}O) C, H,
N.
Se añadió n-butilitio (25,5 ml de una
solución 1,6 M en hexanos, 40,8 mmoles, 2,15 equivalentes) a una
suspensión de cloruro de litio anhidro (5,64 g, 133 mmoles, 7
equivalentes) y diisopropilamina (6,13 ml, 43,7 mmoles, 2,3
equivalentes) en THF (200 ml) a -78ºC. La mezcla de reacción se
agitó durante 30 minutos a -78ºC, seguidamente, se mantuvo a 0ºC
durante cinco minutos y, subsecuentemente, se enfrió de nuevo a
-78ºC. Se añadió
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-6-metil-hept-4-enamida
(5,5 g, 19,0 mmoles, 1 equivalente) en THF (40 ml) a través de una
cánula y la solución resultante se agitó a -78 grados centígrados
durante 1,75 horas, se mantuvo a 0 grados centígrados durante 20
minutos, se agitó a 23ºC durante cinco minutos y, seguidamente, se
enfrió de nuevo a 0ºC. Se añadió una solución de bromuro de
4-trifluorometilbencilo (6,81 g, 28,5 mmoles, 1,5
equivalentes) en THF (10 ml) y la mezcla de reacción se agitó a 0ºC
durante 30 minutos y, seguidamente, se sometió a reparto entre
NH_{4}Cl saturado a la mitad (230 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y
hexanos (200 ml, 2 x 150 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación
del residuo mediante cromatografía ultra rápida en columna
(gradiente de elución EtOAc 20% al 40% en hexanos) proporcionó
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-6-metil-2S-(4-trifluorometil-bencil)-hept-4-enamida
(7,64 g, 90%) en forma de un aceite viscoso: Rf = 0,47 (EtOAc 40%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3378, 1619;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}, mezcla de rotámeros)
\delta 0,85 (d, J = 6,5), 0,89 (d, J = 6,5), 0,91
(d, J = 6,5), 0,96 (d, J = 6,8),
2,07-2,34 (m), 2,36-2,47 (m), 2,59
(s), 2,76-2,86 (m), 2,88-3,01 (m),
3,07-3,22 (m), 3,96 (br), 3,99-4,09
(m), 4,37-4,52 (m), 5,19-5,57 (m),
7,19-7,40 (m), 7,47-7,57 (m).
Se añadió N-bromosuccinimida (3,17 g, 17,8
mmoles, 1,05 equivalentes) en pequeñas porciones a lo largo de 10
minutos a una solución de
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-6-metil-2S-(4-trifluorometil-bencil)-hept-4-enamida
(7,58 g, 16,9 mmoles, 1 equivalente) y ácido acético glacial (4,85
ml, 84,7 mmoles, 5 equivalente) en una mezcla 4:1 de THF y H_{2}O
(180 ml) a 0ºC. La solución amarilla resultante se agitó durante 15
minutos a 0ºC, seguidamente, se calentó hasta 23ºC y,
subsecuentemente, se puso a reflujo durante 45 minutos. Después de
enfriarla hasta 23ºC, la mezcla de reacción se sometió a reparto
entre NaHCO_{3} saturado a la mitad (200 ml) y una mezcla 1:1 de
EtOAc y hexanos (2 x 200 ml, 100 ml). Las fases orgánicas combinadas
se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación
del residuo mediante cromatografía ultra rápida (gradiente de
elución EtOAc 5% al 9% al 12% en hexanos) proporcionó
5S-(1R-bromo-2-metil-propil)-3R-(4-trifluorometil-bencil)-dihidrofuran-2-ona
(5,28 g, 82%) en forma de un sólido blanco (que contenía
aproximadamente 5-10% de impurezas no identificadas
mediante RMN-^{1}H): Pf =
83-85ºC; Rf = 0,60 (EtOAc 25% en hexanos);
IR(cm^{-1}) 1778; RMN-^{1}H (CDCl_{3},
isómero principal) \delta 0,95 (d, 3 H, J = 6,5), 1,01 (d,
3 H, J = 6,8), 2,05-2,25 (m, 2 H),
2,28-2,38 (m, 1 H), 2,89 (dd, 1 H, J = 13,5,
8,9), 2,98-3,09 (m, 1 H), 3,22 (dd, 1 H, J =
13,5, 4,5), 3,91 (dd, 1 H, J = 8,9, 3,6),
4,40-4,49 (m, 1 H), 7,34 (d, 2 H, J = 8,1),
7,59 (d, 2 H, J = 8,1); Anal.
(C_{16}H_{18}BrF_{3}O_{2}) C, H.
Se calentó una suspensión de azida sódica (2,22
g, 34,1 mmoles, 2,5 equivalentes) y
5S-(1R-bromo-2-metil-propil)-3R-(4-trifluorometil-bencil)-dihidrofuran-2-ona
(5,18 g, 13,7 mmoles, 1 equivalente) en N,N-dimetilformamida
(50 ml) a 50ºC durante 66 horas. La mezcla de reacción se enfrió
hasta 23ºC y se sometió a reparto entre NaCl saturado a la mitad
(200 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (3 x 200 ml). Las fases
orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se
concentraron y el residuo se purificó mediante cromatografía ultra
rápida en columna (gradiente de elución EtOAc 9% al 12% al 20% en
hexanos) para proporcionar
5S-(1S-azido-2-metil-propil)-3R-(4-trifluorometil-bencil)-dihidrofuran-2-ona
(2,77 g, 59%) en forma de un aceite viscoso (que contenía
aproximadamente 5-10% de impurezas no identificadas
mediante RMN-^{1}H): Rf = 0,42 (EtOAc 25% en
hexanos); IR(cm^{-1}) 2097, 1772;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}, isómero principal) \delta
1,01 (d, 3 H, J = 6,5), 1,02 (d, 3 H, J = 6,8),
1,96-2,23 (m, 3 H), 2,84-2,98 (m, 2
H), 3,09-3,20 (m, 1 H), 3,25 (dd, 1 H, J =
13,7, 4,7), 4,44-4,52 (m, 1 H), 7,34 (d, 2 H, J
= 8,1), 7,59 (d, 2 H, J = 8,1); Anal.
(C_{16}H_{18}F_{3}N_{3}O_{2}) C, H, N.
Se agitó una suspensión de
5S-(1S-azido-2-metil-propil)-3R-(4-trifluorometil-bencil)-dihidrofuran-2-ona
(2,71 g, 7,94 mmoles, 1 equivalente), dicarbonato de
di-tert-butilo (2,43 g, 11,1 mmoles, 1,4 equivalentes) y Pd/C
(10%, 0,225 g) en CH_{3}OH (110 ml) en una atmósfera de hidrógeno
(globo) durante 5 horas. La mezcla de reacción se filtró al vacío a
través de papel Whatman Nº 5 y se concentró. La purificación del
residuo mediante cromatografía ultra rápida en columna (gradiente
de elución EtOAc 12% al 20% en hexanos) proporcionó
{2-metil-1S-[4R-(4-trifluorometil-bencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il]-propil}-carbamato
de tert-butilo (1,87 g, 57%) en forma de una espuma blanca:
Rf = 0,84 (5% MeOH en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3331,
1766, 1708, 1690; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
0,94 (d, 3 H, J = 6,8), 0,96 (d, 3 H, J = 6,5), 1,40
(s, 9 H), 1,71-1,86 (m, 1 H),
1,95-2,06 (m, 1 H), 2,20-2,31 (m, 1
H), 2,86 (dd, 1 H, J = 13,5, 8,9), 2,93-3,04
(m, 1 H), 3,20 (dd, 1 H, J = 13,5, 4,2),
3,33-3,42 (m, 1 H), 4,41-4,56 (m, 2
H), 7,31 (d, 2 H, J = 8,1), 7,56 (d, 2 H, J = 8,1);
Anal. (C_{21}H_{28}F_{3}NO_{4}) C, H, N.
Se añadió hidróxido de litio (8,8 ml de una
solución acuosa 1 M, 8,8 mmoles, 5 equivalentes) a una solución de
{2-metil-1S-[4R-(4-trifluorometil-bencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il]-propil}-carbamato
de tert-butilo (0,731 g, 1,76 mmoles, 1 equivalente) en DME
(25 ml) a 23ºC. La suspensión resultante se agitó a 23ºC durante 30
minutos y como seguidamente, se sometió a reparto entre KHSO_{4}
10% (35 ml) y CH_{2}Cl_{2} (2 x 100 ml, 70 ml). Las fases
orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se
concentraron y el residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2} /
CH_{3}CN 10:1 (33 ml). Se añadieron secuencialmente tamices
moleculares de 4 \ring{A} en polvo (0,65 g), N-óxido de 4
metilmorfolina (0,412 g, 3,52 mmoles, 2 equivalentes) y perrutenato
de tetrapropilamonio (0,062 g, 0,18 mmoles, 0,10 equivalentes). La
mezcla de reacción oscura resultante se agitó durante 2 horas a 23ºC
y, seguidamente, se filtró al vacío a través de papel Whatman Nº 5.
Seguidamente, el filtrado se transfirió a un matraz que contenía
etil-3-[H_{2}N-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
bruto (2,12 mmoles, 1,2 equivalentes, preparado como se describió
en el ejemplo 1 para la preparación de
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato),
4-metilmorfolina (0,774 ml, 7,04 mmoles, 4
equivalentes), hidrato de 1-hidroxibenzotriazol
(0,357 g, 2,64 mmoles, 1,5 equivalentes) de hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
(0,506 g, 2,64 mmoles, 1,5 equivalentes), añadidos secuencialmente,
y la mezcla de reacción se agitó durante 17 horas a 23ºC.
Seguidamente, esta mezcla se sometió a reparto entre salmuera (100
ml) y EtOAc (3 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas a se
secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación el
residuo mediante cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 40% en
hexanos) proporcionó
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CF_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,839 g, 56%) en forma de una espuma tostada: Rf = 0,27 (EtOAc 40%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3308, 1711, 1666;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,67 (d, 3 H,
J = 6,5), 0,92 (d, 3 H, J = 6,5), 1,27 (t, 3 H, J
= 7,2), 1,39 (s, 9 H), 1,58-1,71 (m, 1 H),
1,90-2,06 (m, 2 H), 2,35-2,50 (m, 3
H), 2,65- 2,84 (m, 2 H), 2,89-3,07 (m, 2 H),
4,03-4,22 (m, 3 H), 4,38-4,45 (m, 1
H), 4,86 (d, 1 H, J = 8,1), 5,51 (d, 1 H, J = 15,6),
6,32 (d, 1 H, J = 8,1), 6,62 (dd, 1 H, J = 15,6, 5,0)
,7,10 (s, 1 H), 7,17-7,31 (m, 17 H), 7,53 (d, 2 H,
J = 7,8); Anal.
(C_{49}H_{56}F_{3}N_{3}O_{7}\cdot0,5 H_{2}O) C, H,
N.
Se añadió HCl (3 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CF_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,271 g, 0,317 mmoles) en 1,4-dioxano (3 ml). La
solución de reacción se agitó a 23ºC durante 2 horas y,
seguidamente, se concentró. El residuo se disolvió en
CH_{2}Cl_{2} seco (5 ml). Se añadieron secuencialmente
N,N-diisopropiletilamina (0,165 ml, 0,947 mmoles, 3
equivalentes) y clorotiolformato de etilo (0,056 ml, 0,54 mmoles,
1,7 equivalentes). La solución de reacción se agitó durante 2 horas
a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre salmuera (30 ml)
y CH_{2}Cl_{2} (3 x 30 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se
sometió a cromatografía en gel de sílice (EtOAc 40% en hexanos) para
proporcionar
etil-3-[EtSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CF_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,142 g, 53%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,25 (EtOAc 40%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3304, 1713, 1653;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,70 (d, 3 H,
J = 6,8), 0,94 (d, 3 H, J = 6,5), 1,24 (t, 3 H, J
= 7,5), 1,27 (t, 3 H, J = 7,2),
1,59-1,72 (m, 1 H), 1,91-2,04 (m, 3
H), 2,33-2,51 (m, 3 H), 2,65-3,08
(m, 6 H), 4,08-4,22 (m, 2 H),
4,34-4,48 (m, 2 H), 5,52 (dd, 1 H, J = 15,7,
1,7), 5,66 (d, 1 H, J = 8,1), 6,39 (d, 1 H, J = 7,8),
6,62 (dd, 1 H, J = 15,7, 5,1), 7,04 (s, 1 H),
7,17-7,30 (m, 17 H), 7,53 (d, 2 H, J =
7,8).
Se disolvió
etil-3-[EtSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CF_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,112 g, 0,133 mmoles, 1 equivalente) en CH_{2}Cl_{2} seco (6
ml). Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano (0,082 ml, 0,40
mmoles, 3 equivalentes) y ácido trifluoroacético (3 ml)
produciéndose una solución de color amarillo brillante. Esta
solución se agitó durante 40 minutos y, seguidamente, se concentró.
El residuo se agitó en Et_{2}O (6 ml) y el sólido se recogió
mediante filtración, se lavó con Et_{2}O (2 x 3 ml) y,
seguidamente, se secó al vacío para proporcionar
etil-3-(EtSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CF_{3})Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,068 g, 85%) en forma de un sólido blanco: Pf = 216ºC (dec); Rf =
0,43 (CH_{3}OH 10% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1})
3425, 3308, 1717, 1655; RMN-^{1}H
(DMSO-d_{6}) \delta 0,76 (d, 3 H, J = 6,5), 0,82
(d, 3 H, J = 6,5), 1,12-1,23 (m, 6 H),
1,53-1,75 (m,2 H), 1,99-2,14 (m, 3
H), 2,50-2,60 (m, 1 H), 2,64-2,87
(m, 5 H), 2,93-3,04 (m, 1 H),
3,98-4,21 (m, 3 H), 4,26-4,36 (m, 1
H), 5,50 (d, 1 H, J = 15,5), 6,62 (dd, 1 H, J = 15,5,
5,4), 6,74 (s, 1 H), 7,15 (s, 1 H), 7,37 (d, 2 H, J = 8,1),
7,59 (d, 2 H, J = 8,1), 8,06 (d, 1 H, J = 8,1), 8,35
(d, 1 H, J = 8,1); Anal.
(C_{28}H_{38}F_{3}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió HCl (3 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CF_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,268 g, 0,313 mmoles) en 1,4-dioxano (3 ml). La
solución de reacción se agitó a 23ºC durante 2 horas y,
seguidamente, se concentró. El residuo se disolvió en
CH_{2}Cl_{2} seco (5 ml). Se añadieron secuencialmente
N,N-diisopropiletilamina (0,164 ml, 0,941 mmoles, 3
equivalente) y clorotiolformato de ciclopentilo (0,088 ml, 1,7
equivalente). La solución de reacción se agitó durante 3 horas a
23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre salmuera (30 ml) y
CH_{2}Cl_{2} (3 x 30 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se
sometió a cromatografía en gel de sílice (EtOAc 40% en hexanos)
para proporcionar
etil-3-[CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CF_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,169 g, 61%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,25 (EtOAc 40%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3324, 1718, 1657;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,70 (d, 3 H, J
= 6,8), 0,93 (d, 3 H, J = 6,5), 1,27 (t, 3 H, J =
7,2), 1,46-1,73 (m, 7 H), 1,91-2,12
(m, 4 H), 2,30-2,52 (m, 3 H),
2,65-2,83 (m, 2 H), 2,90-3,06 (m, 2
H), 3,56-3,66 (m, 1 H), 4,08-4,22
(m, 2 H), 4,31-4,49 (m, 2 H), 5,51 (dd, 1 H, J
= 15,8, 1,6), 5,65 (d, 1 H, J = 7,8), 6,40 (d, 1 H, J
= 7,8), 6,62 (dd, 1 H, J = 15,8, 5,1), 7,08 (s, 1 H),
7,17-7,30 (m, 17 H), 7,53 (d, 2 H, J = 8,1);
Anal. (C_{50}H_{56}F_{3}N_{3}O_{6}S\cdot0,5 H_{2}O)
C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CF_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,148 g, 0,167 mmoles, 1 equivalente) en CH_{2}Cl_{2} seco (6
ml). Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano (0,103 ml,
0,503 mmoles, 3 equivalentes) y ácido trifluoroacético (3 ml)
produciéndose una solución de color amarillo brillante. La solución
se agitó durante 40 minutos y, seguidamente, se concentró. El
residuo se agitó en Et_{2}O (6 ml) y el sólido se recogió
mediante filtración, se lavó con Et_{2}O (2 x 3 ml) y,
seguidamente, se secó al vacío para proporcionar
etil-3-(CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CF_{3})Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,089 g, 83%) en forma de un sólido blanco: Pf = 225ºC (dec); Rf =
0,44 (CH_{3}OH 10% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1})
3425, 3303, 1717, 1654; RMN-^{1}H
(DMSO-d_{6}) \delta 0,76 (d, 3 H, J = 6,5), 0,82
(d, 3 H, J = 6,8), 1,21 (t, 3 H, J = 7,2),
1,37-1,74 (m, 8 H), 1,92-2,13 (m, 5
H), 2,50-2,59 (m, 1 H), 2,64-2,87
(m, 3 H), 2,93-3,04 (m, 1 H),
3,46-3,57 (m, 1 H), 4,02-4,18 (m, 3
H), 4,25-4,36 (m, 1 H), 5,51 (dd, 1 H, J =
15,8, 1,2), 6,62 (dd, 1 H, J = 15,8, 5,4), 6,74 (s, 1 H),
7,16 (s, 1 H), 7,37 (d, 2 H, J = 8,1), 7,59 (d, 2 H, J
= 8,1), 8,06 (d, 1 H, J = 8,4), 8,28 (d, 1 H, J =
7,8); Anal (C_{31}H_{42}F_{3}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió trifenilfosfina (0,646 g, 2,46 mmoles,
1,40 equivalentes) a una solución de
1-acetil-3-bromo-pirrolidin-2-ona
(preparada como se describió en Ikuta, H., Shirota, H., Kobayashi,
S., Yamagishi, Y., Yamada, K., Yamatsu, I., Katayama, K., J. Med.
Chem. 1987, 30, 1995) (0,378 g, 1,76 mmoles, 1,0
equivalente) en THF (10 ml). La mezcla de reacción se puso a reflujo
durante 5 horas y, seguidamente, el disolvente se evaporó para
proporcionar la sal bruta. Esta sustancia se disolvió en EtOH (10
ml) y se añadieron secuencialmente Et_{3}N (0,613 ml, 4,4 mmoles,
2,5 equivalentes) y
[BOC-L-(Tr-Gln)]-H
(0,832 g, 1,76 mmoles, 1 equivalente). La mezcla de reacción se
agitó a 60ºC durante 24 horas, seguidamente, se evaporaron los
volátiles y el residuo se sometió a reparto entre CH_{2}Cl_{2}
(50 ml) y salmuera (50 ml). La fase orgánica se secó sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se purificó mediante
cromatografía ultra rápida en gel de sílice (EtOAc 35% en hexanos)
para proporcionar
[1-(1-acetil-2-oxo-pirrolidin-3-ilidenmetil)-3-(S)-(tritil-carbamoil)-propil]-carbamato
de tert-butilo (0,38 g, 38%) en forma de una espuma amarilla
pálida: Rf = 0,30 (EtOAc 33% en hexanos); IR(cm^{-1}) 1687,
1510, 1366, 1274; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
1,42 (s, 9 H), 1,80-1,89 (m, 2 H),
2,35-2,44 (m, 2 H), 2,55 (s, 3 H),
2,57-2,64 (m, 1 H), 2,77-2,82 (m, 1
H), 3,72-3,77 (m, 2 H), 4,25 (m, 1 H), 4,80 (d, 1 H,
J = 8,1), 6,40-6,44 (m, 1 H), 6,82 (s, br, 1
H), 7,20-7,33 (m, 15 H); Anal.
(C_{35}H_{39}N_{3}O_{5}\cdot1,0 H_{2}O) C, H, N.
Se añadió HCl (5 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
[1-(1-acetil-2-oxo-pirrolidin-3-ilidenmetil)-3-(S)-(tritil-carbamoil)-propil]-carbamato
de tert-butilo (0,442 g, 0,76 mmoles) en
1,4-dioxano (5 ml). La solución de reacción se
agitó a 23ºC durante 2 horas. Seguidamente, se concentró y se dejó
en reserva.
Se añadió hidróxido de litio (3,46 ml de una
solución acuosa 1 M, 3,46 mmoles, 5 equivalentes) a una solución de
{2-metil-1S-[4R-(4-metil-bencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il]-propil}-carbamato
de tert-butilo (0,250 g, 0,692 mmoles, 1 equivalente) en DME
(10 ml) a 23ºC. La suspensión resultante se agitó a 23ºC durante 30
minutos y, seguidamente, se sometió a reparto entre KHSO_{4} 10%
(20 ml) y CH_{2}Cl_{2} (3 x 70 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el
residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (12 ml). Se añadieron
secuencialmente tamices moleculares de 4 \ring{A} en polvo (0,25
g), N-óxido de 4-metilmorfolina (0,162 g,
1,38 mmoles, 2 equivalentes) y perrutenato de tetrapropilamonio
(0,024 g, 0,068 mmoles, 0,10 equivalentes). La mezcla de reacción
oscura resultante se agitó durante 1,5 horas a 23ºC y, seguidamente,
se filtró al vacío a través de papel Whatman Nº 5. El filtrado se
añadió directamente a la sal de amina preparada anteriormente. Se
añadieron secuencialmente 4-metilmorfolina (0,304
ml, 2,77 mmoles, 4 equivalentes), hidrato de
1-hidroxibenzotriazol (0,140 g, 1,04 mmoles, 1,5
equivalentes) e hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
(0,199 g, 1,04 mmoles, 1,5 equivalentes) y la mezcla de reacción se
agitó durante 19 horas a 23ºC y, seguidamente, se cargó directamente
sobre una columna ultra rápida para someterlo a purificación
mediante cromatografía (EtOAc 50% en hexanos) proporcionándose
[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-1-acetil-3-metilen-pirrolidin-2-ona
(0,233 g, 40%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,25 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3336, 1687;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,60 (d, 3 H,
J = 6,8), 0,91 (d, 3 H, J = 6,8), 1,42 (s, 9 H),
1,55-1,68 (m, 2 H), 1,82-1,96 (m, 2
H), 2,30 (s, 3 H), 2,34-2,83 (m, 7 H), 2,55 (s, 3
H), 2,87-2,98 (m, 1 H), 3,64- 3,72 (m, 2 H),
4,03-4,08 (m, 1 H), 4,26-4,38 (m, 1
H), 4,78 (d, 1 H, J = 8,1), 5,79 (d, 1 H, J = 8,1),
6,10-6,16 (m, 1 H), 6,96 (d, 2 H, J = 7,9),
7,06 (d, 2 H, J = 7,9), 7,17-7,33 (m, 16
H),
Se añadió HCl (3 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-1-acetil-3-metilen-pirrolidin-2-ona
(0,217 g, 0,258 mmoles) en 1,4-dioxano (3 ml). La
solución de reacción se agitó a 23ºC durante 2 horas y,
seguidamente, se concentró. El residuo se disolvió en
CH_{2}Cl_{2} seco (5 ml). Se añadieron secuencialmente
N,N-diisopropiletilamina (0,135 ml, 0,775 mmoles, 3
equivalentes) y clorotiolformato de ciclopentilo (0,072 ml, 1,7
equivalentes). La solución de reacción se agitó durante 3 horas a
23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre salmuera (30 ml) y
CH_{2}Cl_{2} (3 x 30 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se
sometió a cromatografía en gel de sílice (EtOAc 50% en hexanos)
para proporcionar
[CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)-E-1-acetil-3-metilen-pirrolidin-2-ona
(0,14 g, 51%) en forma de vidrio incoloro: Rf = 0,26 (EtOAc 50% en
hexanos); IR(cm^{-1}) 3328, 1719, 1670;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,64 (d, 3 H, J
= 6,8), 0,92 (d, 3 H, J = 6,5),
1,47-1,78 (m, 8 H), 1,80-1,95 (m, 2
H), 1,99-2,17 (m, 2 H), 2,29-2,84
(m, 7 H), 2,30 (s, 3 H), 2,55 (s, 3 H), 2,94 (dd, 1 H, J =
17,4, 10,0), 3,59-3,73 (m, 3 H),
4,25-4,38 (m, 2 H), 5,57 (d, 1 H, J = 8,1),
5,89 (d, 1 H, J = 8,1), 6,11-16,17 (m, 1 H),
6,96 (d, 2 H, J = 7,9), 7,06 (d, 2 H, J = 7,9),
7,18-7,33 (m, 16 H); Anal.
(C_{52}H_{60}N_{4}O_{6}S) C, H, N.
Se disolvió
[CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)-E-1-acetil-3-metilen-pirrolidin-2-ona
(0,093 g, 0,107 mmoles, 1 equivalente) en CH_{2}Cl_{2} seco (6 ml). Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano (0,066 ml, cerro, 32 mmoles, 3 equivalentes) y ácido trifluoroacético (3 ml) produciéndose una solución de color amarillo brillante. Esta solución se agitó durante 40 minutos y, seguidamente, se concentró. El residuo se agitó en Et_{2}O (6 ml) y el sólido se recogió mediante filtración, se lavó con Et_{2}O (2 x 3 ml) y, seguidamente, se secó al vacío para proporcionar [CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-Gln]-E-1-acetil-3-metilen-pirrolidin-2-ona (0,049 g, 73%) en forma de un sólido blanco: Pf = 200ºC (dec); Rf = 0,47 (CH_{3}OH 10% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3425, 3337, 1719, 1670; RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 0,74 (d, 3 H, J = 6,5), 0,81 (d, 3 H, J = 6,5), 1,36-1,79 (m, 8 H), 1,89-2,13 (m, 5 H), 2,20 (s, 3 H), 2,39-2,90 (m, 7 H), 2,43 (s, 3 H), 3,46-3,64 (m, 3 H), 4,10-4,16 (m, 1 H), 4,24-4,36 (m, 1 H), 6,12-6,18 (m, 1 H), 6,74 (s, 1 H), 6,99 (s, 4 H), 7,15 (s, 1 H), 8,05 (d, 1 H, J = 7,8), 8,25 (d, 1 H, J = 7,8); Anal. (C_{33}H_{46}N_{4}O_{6}S\cdot0,5 H_{2}O) C, H, N.
(0,093 g, 0,107 mmoles, 1 equivalente) en CH_{2}Cl_{2} seco (6 ml). Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano (0,066 ml, cerro, 32 mmoles, 3 equivalentes) y ácido trifluoroacético (3 ml) produciéndose una solución de color amarillo brillante. Esta solución se agitó durante 40 minutos y, seguidamente, se concentró. El residuo se agitó en Et_{2}O (6 ml) y el sólido se recogió mediante filtración, se lavó con Et_{2}O (2 x 3 ml) y, seguidamente, se secó al vacío para proporcionar [CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-Gln]-E-1-acetil-3-metilen-pirrolidin-2-ona (0,049 g, 73%) en forma de un sólido blanco: Pf = 200ºC (dec); Rf = 0,47 (CH_{3}OH 10% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3425, 3337, 1719, 1670; RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 0,74 (d, 3 H, J = 6,5), 0,81 (d, 3 H, J = 6,5), 1,36-1,79 (m, 8 H), 1,89-2,13 (m, 5 H), 2,20 (s, 3 H), 2,39-2,90 (m, 7 H), 2,43 (s, 3 H), 3,46-3,64 (m, 3 H), 4,10-4,16 (m, 1 H), 4,24-4,36 (m, 1 H), 6,12-6,18 (m, 1 H), 6,74 (s, 1 H), 6,99 (s, 4 H), 7,15 (s, 1 H), 8,05 (d, 1 H, J = 7,8), 8,25 (d, 1 H, J = 7,8); Anal. (C_{33}H_{46}N_{4}O_{6}S\cdot0,5 H_{2}O) C, H, N.
Se añadió cloruro de oxalilo (6,14 ml, 70,4
mmoles, 1,05 equivalentes) a una solución de ácido
3-(4-fluoro-fenil)-propiónico
(11,3 g, 67, los mmoles, 1 equivalente) y
N,N-dimetilformamida (0,03 ml, 0,39 mmoles, 0,006
equivalentes) en benceno (150 ml) a 23ºC. La mezcla de reacción se
agitó a 23ºC durante 1,5 horas y, seguidamente, se concentró. El
aceite resultante se disolvió en THF (30 ml) y se añadió a una
solución de
(1S,2R)-cis-1-amino-2-indanol
a 0ºC (10,0 g, 67,0 mmoles, 1,0 equivalente) y Et_{3}N (10,3 ml,
73,9 mmoles, 1,1 equivalentes) en THF (350 ml). Después de agitar
durante 20 minutos a 0ºC, la mezcla de reacción se sometió a reparto
entre NH_{4}Cl saturado a la mitad (150 ml) y EtOAc (2 x 150 ml).
Las fases orgánicas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se
concentraron para proporcionar un sólido blanco. Esta sustancia se
disolvió en una mezcla de CH_{2}Cl_{2} (400 ml) y
2-metoxipropeno (30 ml) y la solución resultante se
trató con ácido metansulfónico (0,20 ml). Después de agitar 15
minutos a 3ºC, la mezcla de reacción se sometió a reparto entre
NaHCO_{3} saturado a la mitad (150 ml) y CH_{2}Cl_{2} (2 x 150
ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO_{4} y
se filtraron por gravedad. El filtrado se concentró y que el
residuo se purificó mediante cromatografía ultra rápida en columna
(gradiente de elución EtOAc 10% al 20% en hexanos) para proporcionar
cis-1S-amino-2R-indanol-acetonida-3-(4-fluoro-fenil)-propionamida
(18,2 g, 83%) en forma de un aceite amarillo pálido: Rf = 0,52
(EtOAc 50% en hexanos); IR(cm^{-1}) 2934, 1645;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,34 (s, 3 H),
1,60 (s, 3 H), 2,91-2,95 (m, 2 H),
3,04-3,13 (m, 4 H), 4,68-4,71 (m, 1
H), 5,06 (d, 1 H, J = 4,7), 6,94-7,00 (m, 2
H), 7,02-7,30 (m, 6 H); Anal.
(C_{21}H_{22}FNO_{2}) C, H, N.
Se añadió n-butilitio (13,5 ml de
una solución 1,6 M en hexanos, 21,6 mmoles, 2,0 equivalentes) a una
solución de
(1R-oxiranil-2S-fenil-etil)-carbamato
de tert-butilo (preparado de acuerdo con Luly, J.R.,
Dellaria, J.F., Plattner, J.J., Soderquist, J.L., Yi, N., J.
Org. Chem., 1987, 52, 1487) (2,85 g, 10,8 mmoles, 1
equivalente) y
cis-1S-amino-2R-indanol-acetonida-3-(4-fluoro-fenil)-propionamida
(3,67 g, 10,8 mmoles, 1,0 equivalente) en THF (150 ml) a -78ºC. La
mezcla de reacción se agitó durante cinco minutos a -78ºC, se
mantuvo a 0ºC durante 1 hora y, seguidamente, se sometió a reparto
entre HCl 0,5 M (150 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x
150 ml). Las fases orgánicas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se
concentraron. La purificación mediante cromatografía ultra rápida
del residuo (gradiente de elución EtOAc 25% al 40% en hexanos)
proporcionó el producto de acoplamiento (3,19 g, 49%) en forma de un
aceite amarillo contaminado con algunas impurezas menores. Esta
sustancia se disolvió en una mezcla 5:1 de tolueno y
CH_{2}Cl_{2} (180 ml) y se trató con ácido
p-toluensulfónico monohidratado (1,01 g, 5,31 mmoles, 1,0
equivalente) a 23ºC. Después de agitar durante 13 horas a 23ºC, la
mezcla de reacción se filtró a través de material sinterizado de
tamaño de poro medio y el filtrador se sometió a reparto entre
NaHCO_{3} saturado a la mitad (150 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc
y hexanos (2 x 150 ml). Las fases orgánicas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. El residuo se purificó mediante
cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 20% en hexanos) para
proporcionar
{1S-[4R-(4-fluoro-bencil)-5-
oxo-tetrahidrofuran-2S-il]-2-fenil-etil}-carbamato
de tert-butilo (1,28 g, 59%) en forma de una espuma blanca:
Rf = 0,46 (EtOAc 30% en hexanos); IR(cm^{-1}) 3332, 2976,
1767, 1702; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,36
(s, 9 H), 1,88-1,97 (m, 1 H),
2,19-2,29 (m, 1 H), 2,75-2,99 (m, 4
H), 3,05 (dd, 1 H, J = 13,5, 4,5), 3,93 (q, 2 H, J =
8,5), 4,13-4,18 (m, 1 H), 4,54 (d, 1 H, J =
9,7), 6,91-6,98 (m, 2 H), 7,08-7,32
(m, 7 H); Anal (C_{24}H_{28}FNO_{4}) C, H, N.
Se añadió hidróxido de litio (7,6 ml de una
solución acuosa 1 M, 7,6 mmoles, 5 equivalentes) a una solución de
{1S-[4R-(4-fluoro-bencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il]-2-fenil-etil}-carbamato
de tert-butilo (0,63 g, 1,52 mmoles, 1 equivalente) en DME
(8 ml) a 23ºC. La suspensión resultante se agitó a 23ºC durante 20
minutos y, seguidamente, se sometió a reparto entre HCl 0,5 M (100
ml) y EtOAc (2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se disolvió en
una mezcla 1:1 de CH_{2}Cl_{2} y CH_{3}CN (100 ml). Se
añadieron secuencialmente N-óxido de
4-metilmorfolina (0,357 g, 3,05 mmoles, 2
equivalentes), tamices moleculares de 4 \ring{A} en polvo (0,70
g) y perrutenato de tetrapropilamonio (0,054 g, 0,153 mmoles, 0,1
equivalentes). La mezcla de reacción oscura resultante se agitó
durante 3 horas a 23ºC y, seguidamente, se filtró a través de
celite. El filtrado se concentró a presión reducida para
proporcionar un aceite marrón que se disolvió en CH_{2}Cl_{2}
(40 ml). Se añadieron secuencialmente
etil-3-[H_{2}N-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
bruto (véase preparación de
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato,
1,27 mmoles, 1,2 equivalentes), hidrato de
1-hidroxibenzotriazol (0,268 g, 1,98 mmoles, 1,3
equivalentes), 4-metilmorfolina (0,670 ml, 6,09
mmoles, 4,0 equivalentes), e hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
(0,380 g, 1,98 mmoles, 1,3 equivalentes) y la mezcla de reacción se
agitó durante 22 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto
entre agua (150 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 150
ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación del residuo
mediante cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 40% en
hexanos) proporcionó
etil-3-[BOC-L-Phe\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,558 g, 43%) en forma de un sólido blanco: Pf =
89-100ºC; Rf = 0,44 (EtOAc 50% en hexanos);
IR(cm^{-1}) 3316, 2972, 1708, 1665;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,29 (t, 3 H, J
= 7,2), 1,35 (s, 9 H), 1,95-2,05 (m, 1 H),
2,34-2,39 (m, 2 H), 2,46 (d, 1 H, J = 16,8),
2,57-2,99 (m, 7 H), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2),
4,27-4,33 (m, 1 H), 4,48 (s, br, 1 H), 4,58 (d, 1 H,
J = 6,9), 5,42 (d, 1 H, J = 15,3), 6,08 (d, 1 H, J
= 8,4), 6,62 (dd, 1 H, J = 15,3, 4,8),
6,93-7,19 (m, 6 H), 7,21-7,29 (m,
19 H); Anal. (C_{52}H_{56}FN_{3}O_{7}) C, H, N.
Se añadió HCl (8 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Phe\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,302 g, 0,354 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (10 ml). La mezcla de reacción se agitó
a 23ºC durante 1,5 horas y, seguidamente, se concentró. El aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (15 ml), se enfrió hasta
0ºC y se añadieron secuencialmente 4 metilmorfolina (0,17 ml, 1,06
mmoles, 3,0 equivalentes) y clorotiolformato de ciclopentilo (0,087
ml, 0,528 mmoles, 1,5 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó
durante 30 minutos a 0ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre
agua (100 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 100 ml). Las
fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se
concentraron y el residuo se sometió a cromatografía en gel de
sílice (gradiente de elución EtOAc 30% al 40% en hexanos) para
proporcionar
etil-3-[CyPentylSCO-L-Phe\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,163 g, 52%) en forma de un sólido blanco: Pf =
75-85ºC; Rf = 0,48 (EtOAc 50% en hexanos);
IR(cm^{-1}) 3314, 1710, 1655; RMN-^{1}H
(CDCl_{3}) \delta 1,29 (t, 3 H, J = 7,2),
1,48-1,67 (m, 6 H), 1,97-2,03 (m, 2
H), 2,29-2,42 (m, 2 H), 2,54-2,97
(m, 8 H), 3,54-3,63 (m, 1 H), 4,18 (q, 2 H, J
= 7,2), 4,51-4,58 (m, 2 H), 5,44 (dd, 1 H, J
= 15,6, 1,7), 5,59 (d, 1 H, J = 6,9), 5,90 (d, 1 H, J
= 7,2), 6,16 (d, 1 H, J = 8,4), 6,64 (dd, 1 H, J
= 15,6, 5,0), 6,91-7,08 (m, 5 H),
7,14-7,29 (m, 20 H); Anal.
(C_{53}H_{56}FN_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano
(0,10 ml) y ácido trifluoroacético (6 ml) a una solución de
etil-3-[CyPentylSCO-L-Phe\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,16 g, 0,181 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) produciéndose una
solución de color amarillo brillante. La mezcla de reacción se agitó
durante 30 minutos a 23ºC, seguidamente, se añadió tetracloruro de
carbono (6 ml) y la mezcla se concentró a presión reducida. El
residuo se purificó mediante cromatografía ultra rápida en columna
(CH_{3}OH 5% en CCH_{2}Cl_{2}) para proporcionar
etil-3-(CyPentylSCO-L-Phe\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,082 g, 71%) en forma de un sólido blanco: Pf =
210-212ºC; Rf= 0,10 (CH_{3}OH 10% en
CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3284, 1717, 1637;
RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 1,21 (t,
3 H, J = 6,8), 1,33-1,72 (m, 8 H),
1,90-2,07 (m, 4 H), 2,49-3,07 (m, 7
H), 3,43-3,47 (m, 1 H), 4,09 (q, 2 H, J =
6,8), 4,33-4,35 (m, 2 H), 5,37-5,46
(m, 1 H), 6,59-6,67 (m, 1 H), 6,77 (s, br, 1 H),
7,00-7,28 (m, 9 H), 8,04 (d, 1 H, J = 7,8),
8,46 (d, 1 H, J = 7,5), 8,53 (d, 1 H, J = 7,5); Anal.
(C_{32}H_{42}FN_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió BH3\cdotTHF (163 ml de una solución
1,0 M en THF, 163 mmoles, 2,51 equivalentes) a una solución de
BOC-Leu-OH (15,09 g, 65 mmoles, 1
equivalente) en THF (150 ml) a 0ºC. La mezcla de reacción se agitó a
23ºC durante 3 horas y, seguidamente, se enfrió hasta 0ºC. Se
añadió cuidadosamente salmuera (100 ml) y la fase acuosa se extrajo
con EtOAc (2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. El residuo se purificó
mediante cromatografía ultra rápida en columna (gradiente de elución
EtOAc 25% a 35% en hexanos) para proporcionar
BOC-L-leucinol en forma de un aceite
incoloro (12,59 g, 89%): IR(cm^{-1}) 3434, 1699, 1256,
739; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,93 (dd, 6
H, J = 6,6, 1,5), 1,29-1,31 (m, 2 H), 1,45
(s, 9 H), 1,60-2,05 (m, 2 H),
3,47-3,53 (m, 1 H), 3,65-3,72 (m, 2
H), 4,56 (s, br, 1 H); Anal. (C_{11}H_{23}NO_{3}) C, H,
N.
Una solución de complejo trióxido de azufre
piridina (7,8 g, 49,1 mmoles, 3,0 equivalentes) en una mezcla 1:1 de
DMSO y CH_{2}Cl_{2} (100 ml) se añadió a una solución de
BOC-L-leucinol (3,56 g, 16,4 mmoles,
1 equivalente) y Et_{3}N (8 ml) en una mezcla 1:1 de DMSO y
CH_{2}Cl_{2} (100 ml) a 0ºC. La mezcla de reacción se agitó a
23ºC durante 30 minutos, seguidamente, se vertió en hielo (300 ml) y
se extrajo con Et_{2}O (2 x 200 ml). Las fases orgánicas
combinadas se lavaron con HCl 0,5 M (150 ml), NaHCO_{3} saturado
a la mitad (150 ml) y H_{2}O (2 x 150 ml), seguidamente, se
secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron para proporcionar
BOC-L-leucinal bruto en forma de un
aceite amarillo pálido (3,48 g, 99%). Esta sustancia se usó sin
purificación adicional. RMN-^{1}H (CDCl_{3})
\delta 0,92-0,94 (m, 6 H), 1,44 (s, 9 H),
1,59-1,64 (m, 1 H), 1,67-1,85 (m, 2
H), 4,21 (m, 1 H), 5,12 (s, br, 1 H), 9,57 (s, 1 H).
Se añadió gota a gota KN(TMS)_{2}
(67,9 ml de una solución 0,5 M en tolueno, 32,9 mmoles, 2,1
equivalentes) a una solución de bromuro de metiltrifenilfosfonio
(12,1 g, 33,9 mmoles, 2,1 equivalentes) en una mezcla 5:1 de THF y
DMSO (600 ml) a 0ºC. la mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 1
hora, seguidamente, se enfrió hasta -78ºC y se añadió una solución
de BOC-L-leucinal (3,48 g, 16,2
mmoles, 1 equivalente) en THF (60 ml). La mezcla de reacción se
agitó a -78ºC durante 10 minutos y, seguidamente, se calentó hasta
23ºC lentamente. La mezcla se sometió a reparto entre HCl 0,5 M (200
ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc en hexanos (2 x 150 ml). Las fases
orgánicas combinadas se lavaron con H_{2}O (150 ml), se secaron
sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. El residuo se purificó
mediante cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 10% en
hexanos) para proporcionar
[1S-isobutil-alil]-carbamato
de tert-butilo en forma de un sólido amarillo pálido (2,44 g,
70%): Rf = 0,78 (EtOAc 20% en hexanos); IR(cm^{-1}) 3343,
2958, 1594, 1520; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
0,92 (dd, 6 H, J = 6,6, 2,1), 1,30-1,38 (m, 2
H), 1,45 (s, 9 H), 1,61-1,74 (m, 1 H), 4,13 (m, 1
H), 4,38 (s, br, 1 H), 5,08 (dd, 1 H, J = 10,2, 1,5), 5,15
(dd, 1 H, J = 17,4, 1,5), 5,73 (dd, 1 H, J = 16,8,
10,2); Anal. (C_{11}H_{23}NO_{2}\cdotH_{2}O) C, H, N.
Se añadió ácido
3-cloroperoxibenzoico (\sim60%, 8,40 g, \sim29,2
mmoles, 1,8 equivalentes) a una solución de
[1S-isobutil-alil]-carbamato
de tert-butilo (3,48 g, 16,2 mmoles, 1 equivalente) en
CH_{2}Cl_{2} (100 ml). La mezcla de reacción se agitó a 23ºC
durante 6 horas, seguidamente, se vertió en una mezcla 1:1 de EtOAc
y hexanos (150 ml) y se lavó con Na_{2}S_{2}O_{5} 10% (150 ml)
y NaHCO_{3} saturado a la mitad (150 ml). El residuo se purificó
mediante cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 10% en
hexanos) para proporcionar
[3S-metil-1R-oxiranil-butil]-carbamato
de tert-butilo en forma de un aceite amarillo pálido (3,15
g, 85%): Rf = 0,55 (EtOAc 20% en hexanos); IR(cm^{-1})
1702, 1501, 1366, 1168; RMN-^{1}H (CDCl_{3})
\delta 0,96 (d, 6 H, J = 6,9), 1,43 (s, 9 H),
1,64-1,81 (m, 1 H), 2,60 (s, br, 1 H),
2,72-2,76 (m, 2 H), 2,84 (m, 1 H), 2,99 (s, br, 1
H), 3,60 (s, br, 1 H), 3,97-3,99 (m, 1 H), 4,29 (m,
1 H).
Se añadió n-butilitio (8,79 ml de una
solución 1,6 M en hexanos, 14,06 mmoles, 2,0 equivalentes) a una
solución de
[3S-metil-1R-oxiranil-butil]-carbamato
de tert-butilo (1,61 g, 7,03 mmoles, 1,0 equivalente) y
cis-1S-amino-2R-indanol-acetonida-3-(4-fluoro-fenil)-propionamida
(2,39 g, 7,03 mmoles, 1 equivalente) en THF (100 ml) a -78ºC. La
solución amarilla resultante se agitó a -78ºC durante 5 minutos y,
seguidamente, se calentó hasta 0ºC durante 1 hora. La reacción se
interrumpió con HCl 0,5 M (100 ml) y se extrajo con una mezcla 1:1
de EtOAc en hexanos (2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se
lavaron con salmuera (150 ml), se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y
se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía
ultra rápida en gel de sílice (EtOAc 20% en hexanos) para
proporcionar el producto de acoplamiento en forma de una espuma
blanca (2,28 g, 57%): Rf = 0,44 (EtOAc 25% en hexanos);
IR(cm^{-1}) 3431, 1637, 1510, 1223;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta (mezcla de
diastereoisómeros) 0,92 (dd, J = 6,6, 2,1),
1,26-1,46 (m), 1,60 (s), 1,65 (s),
1,68-1,89 (m), 2,65-2,69 (m),
2,75-2,81 (m), 2,91-2,96 (m),
3,06-3,13 (m), 3,24 (m), 3,34-3,48
(m), 3,66 (m), 4,60 (d, J = 7,5), 4,68-4,71
(m), 4,76-4,78 (m), 4,83 (s, br), 5,06 (d, J
= 4,8), 6,22 (d, J = 7,2), 6,91-7,31
(m).
Se añadió ácido p-toluensulfónico
monohidratado (0,739 g, 3,89 mmoles, 1,0 equivalente) a una solución
de esta sustancia (2,21 g, 3,89 mmoles, 1 equivalente) en una mezcla
5:1 de tolueno y CH_{2}Cl_{2} (120 ml) a 23ºC. La mezcla de
reacción se agitó a 23ºC durante 14 horas y, seguidamente, se
interrumpió con NaHCO_{3} saturado a la mitad (100 ml). La mezcla
resultante se extrajo con una mezcla 1:1 de EtOAc en hexanos (2 x
100 ml) y las fases orgánicas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se
concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel
de sílice (EtOAc 15% en hexanos) para proporcionar
{1S-[4R'-(4-fluoro-bencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S'-il-]-3-metilbutil}-carbamato
de tert-butilo en forma de una espuma blanca (0,426 g, 31%):
Rf = 0,75 (EtOAc 25% en hexanos); IR(cm^{-1}) 1765, 1702,
1510, 1186; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,89
(d, 3 H, J = 6,6), 0,91 (d, 3 H, J = 6,6),
1,23-1,33 (m, 2 H), 1,40 (s, 9 H),
1,45-1,52 (m, 1 H), 1,96-2,05 (m, 1
H), 2,22-2,32 (m, 1 H), 2,77 (dd, 1 H, J =
13,5, 8,7), 2,87-2,97 (m, 1 H), 3,10 (dd, 1 H, J
= 13,5, 4,2), 3,74-3,82 (m, 1 H), 4,25 (t, 1 H,
J = 6,9), 4,34 (d, 1 H, J = 6,9),
6,95-7,01 (m, 2 H), 7,11-7,16 (m, 2
H); Anal. (C_{21}H_{30}FNO_{4}) C, H, N.
Se añadió LiOH (una solución 1,0 M en H_{2}O,
5,28 ml, 5,28 mmoles, 5,0 equivalentes) a una solución de
{1S-[4R'-(4-fluoro-bencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S'-il-]-3-metilbutil}-carbamato
de tert-butilo (0,40 g, 1,06 mmoles, 1 equivalente) en
1,2-dimetoxietano (8 ml). La mezcla de reacción se
agitó a 23ºC durante 30 minutos, seguidamente, se interrumpió con
HCl 0,5 M (100 ml) y se extrajo con una mezcla 1:1 de EtOAc en
hexanos (2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. El residuo se disolvió en
una mezcla 1:1 de CH_{2}Cl_{2} y CH_{3}CN (100 ml) y se
añadieron secuencialmente tamices moleculares de 4 \ring{A} (0,70
g), N-óxido de 4-metilmorfolina (0,248 g,
2,12 mmoles, 2,0 equivalentes) y perrutenato de tetrapropilamonio
(0,037 g, 0,106 mmoles, 0,1 equivalentes). La mezcla de reacción se
agitó a 23ºC durante 1 gran y se filtró a través de celite. El
filtrado se concentró para proporcionar un aceite marrón que se
disolvió en CH_{2}Cl_{2} (15 ml). Se añadieron secuencialmente
etil-3-[H_{2}N-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
bruto (véase preparación de
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato,
1,27 mmoles, 1,2 equivalentes), hidrato de
1-hidroxibenzotriazol (0,186 g, 1,38 mmoles, 1,3
equivalentes), 4-metilmorfolina (0,466 ml, 4,24
mmoles, 4,0 equivalentes) e hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
(0,265 g, 1,38 mmoles, 1,3 equivalentes). La mezcla de reacción se
agitó toda una noche, seguidamente, se vertió en H_{2}O (50 ml) y
se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 50 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. El
residuo se purificó mediante cromatografía ultra rápida (EtOAc 40%
en hexanos) para proporcionar
etil-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-
propenoato en forma de una espuma blanca: Pf =
174-176ºC; Rf = 0,56 (EtOAc 50% en hexanos);
IR(cm^{-1}) 1706, 1662, 1509; RMN-^{1}H
(CDCl_{3}) \delta (mezcla de rotámeros) 0,87 (dd, J =
6,9, 2,4), 1,02-1,12 (m), 1,27 (t, J = 7,2),
1,39 (s), 1,96-2,02 (m), 2,37 (t, J = 7,2),
2,53 (d, J = 12,3), 2,65 (dd, J = 12,3, 5,7),
2,76-2,99 (m), 3,62-3,68 (m), 4,17
(q, J = 7,2), 4,47 (m), 4,60 (d, J = 7,5), 5,39 (dd,
J = 15,9, 1,5), 5,97 (d, J = 8,7), 6,61 (dd, J
= 15,3, 5,1), 6,96 (t, J = 8,4),
7,06-7,16 (m), 7,19-7,30 (m); Anal.
(C_{49}H_{58}FN_{5}O_{7}) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,415 g, 0,50 mmoles, 1 equivalente) en 1,4-dioxano
(6 ml). Se añadió gota a gota una solución de HCl en
1,4-dioxano (4,0 M, 6 ml). La mezcla de reacción se
agitó durante 2 horas a 23ºC y, seriamente, el disolvente se evaporó
para proporcionar la sal de amina en forma de una espuma blanca. La
sal de amina bruta se disolvió en CH_{2}Cl_{2} seco (10 ml) y se
enfrió hasta 0ºC. se añadieron secuencialmente
4-metilmorfolina (0,166 ml, 1,51 mmoles, 3,0
numérico equivalente) y clorotiolformato de ciclopentilo (0,123 ml,
0,75 mmoles, 1,5 equivalente). La mezcla de reacción se agitó a 0ºC
durante 30 minutos, se vertió en H_{2}O (50 ml) y se extrajo con
una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (3 x 50 ml). Las fases orgánicas
combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. El
residuo se purificó mediante cromatografía ultra rápida (EtOAc 50%
en hexanos) para proporcionar
etil-3-[CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
en forma de una espuma blanca (0,347 g, 83%): Rf = 0,43 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 1716, 1651, 1510;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta (mezcla de
rotámeros) 0,87 (d, J = 6,6), 1,06-1,16 (m),
1,29 (t, J = 7,2), 1,53-1,60 (m),
1,67-1,69 (m), 2,02-2,06 (m), 2,35
(t, J = 7,2), 2,54 (d, J = 15,3),
2,63-2,69 (m), 2,78-2,97 (m),
3,57-3,68 (m), 4,17 (q, J = 7,2),
4,38-4,49 (m), 4,42 (dd, J = 18,0, 14,1),
6,05 (d, J = 8,1), 6,62 (dd, J = 15,6, 4,8),
6,94-7,00 (m), 7,05-7,12 (m),
7,23-7,31 (m); Anal.
(C_{50}H_{58}FN_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
(0,285 g) en CH_{2}Cl_{2} (4 ml). Se añadieron secuencialmente
ácido trifluoroacético (4 ml) y triisopropilsilano (0,077 ml) para
proporcionar una solución de color amarillo brillante. Después de
agitar durante 30 minutos no quedó color amarillo. Los disolventes
se evaporaron para proporcionar un sólido blanco que se trituró con
Et_{2}O (8 ml) y se filtró para proporcionar
etil-3-(CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-Gln)-E-propenoato
en forma de un sólido blanco (0,134 g, 65%): Pf =
179-180ºC; IR(cm^{-1}) 1718, 1656, 1511;
RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 0,83 (d,
3 H, J = 6,0), 0,85 (d, 3 H, J = 6,0), 1,21 (t, 3 H,
J = 7,2), 1,30-1,44 (m, 4 H),
1,53-1,70 (m, 7 H), 1,97-2,05 (m, 4
H), 2,43-2,60 (m, 2 H), 2,67-2,80
(m, 2 H), 2,92-2,96 (m, 1 H),
3,02-3,56 (m, 2 H), 4,09 (q, 2 H, J = 7,2),
4,17-4,19 (m, 1 H), 4,31 (m, 1 H), 5,42 (d, 1 H,
J = 15,3), 6,62 (dd, 1 H, J = 15,3, 5,1), 6,75 (s,
br, 1 H), 7,00-7,06 (m, 2 H),
7,14-7,19 (m, 2 H), 8,01 (d, 1 H, J = 8,1),
8,37 (d, 1 H, J = 7,8); Anal.
(C_{31}H_{44}FN_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió HCl (3 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,311 g, 0,388 mmoles) en 1,4-dioxano (3 ml). La
solución de reacción se agitó a 23ºC durante 2 horas y,
seguidamente, se concentró. El residuo se disolvió en
CH_{2}Cl_{2} seco (6 ml). Se añadieron secuencialmente
N,N-diisopropiletilamina (0,203 ml, 1,17 mmoles, 3
equivalentes) y cloroformato de ciclopentilo (0,098 ml, 1,7
equivalentes). La solución de reacción se agitó durante 3 horas a
23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre salmuera (15 ml) y
CH_{2}Cl_{2} (3 x 30 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na2SO4, se concentraron yel residuo se sometió a
cromatografía en gel de sílice (EtOAc 40% en hexanos) para
proporcionar
etil-3-[CyPentylOCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,189 g, 60%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,22 (EtOAc 40%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3316, 1712, 1667;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,65 (d, 3 H,
J = 6,8), 0,92 (d, 3 H, J = 6,8), 1,28 (t, 3 H, J
= 7,2), 1,50-1,87 (m, 3 H),
1,91-2,05 (m, 2 H), 2,29-2,38 (m, 1
H), 2,31 (s, 3 H), 2,51 (d, 1 H, J = 16,8),
2,60-2,69 (m, 1 H), 2,72-2,89 (m, 2
H), 3,00 (dd, 1 H, J = 17,3, 9,8), 4,08-4,22
(m, 3 H), 4,42-4,53 (m, 1 H), 4,88 (d, 1 H, J
= 8,1), 4,95-5,02 (m, 1 H), 5,49 (dd, 1 H, J
= 15,8, 1,6), 5,88 (d, 1 H, J = 8,4), 6,60 (dd, 1 H, J
= 15,8, 5,1), 7,00 (d, 2 H, J = 7,9), 7,09 (d, 2 H, J
= 7,9), 7,17-7,31 (m, 16 H); Anal.
(C_{50}H_{59}N_{3}O_{7}) C, H, N.
Se añadió n-butilitio (8,43 ml de
una solución, 6 M en hexanos, 13,48 mmoles, 2,0 equivalentes) a una
solución de
(3S-metil-1R-oxiranil-butil)-carbamato
de tert-butilo (1,55 g, 6,74 mmoles, 1,0 equivalente) y
cis-1S-amino-2R-indanol-acetonida-3-p-tolil-propionamida
(2,39 g, 7,03 mmoles, 1 equivalente) en THF (100 ml) a -78ºC. La
solución amarilla resultante se agitó a -78ºC durante 5 minutos y,
seguidamente, se calentó hasta 0ºC durante 1 hora. La reacción se
interrumpió con HCl 0,5 M (100 ml) y se extrajo con una mezcla 1:1
de EtOAc y hexanos (2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se
lavaron con salmuera (150 ml), se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y
se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en
gel de sílice (EtOAc 20% en hexanos) para proporcionar el producto
de acoplamiento en forma de una espuma blanca (2,07 g, 54%): Rf =
0,30 (EtOAc 25% en hexanos); IR(cm^{-1}) 3415, 2955, 1687,
1612, 1355, 1166; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
(mezcla de diastereoisómeros) 0,91 (d, J = 6,3), 0,92 (d,
J = 6,9), 1,34 (s), 1,40 (s), 1,59 (s),
1,65-1,73 (m), 1,82-1,84 (m), 2,31
(s), 2,36 (s), 2,76 (dd, J = 12,9, 6,0), 3,06 (s), 3,20 (m),
3,34-3,47 (m), 3,68 (m), 4,58 (d, J = 9,3),
4,83 (s, br), 5,66 (m), 6,26 (d, J = 7,5),
6,85-6,90 (m), 7,09-7,24 (m).
Esta sustancia se disolvió en una mezcla 5:1 de
tolueno y CH_{2}Cl_{2} (120 ml) y se trató con ácido
p-toluensulfónico monohidratado (0,697 g, 3,67 mmoles, 1,0
equivalente). La mezcla de reacción se agitó a 23ºC durante 14 horas
y, seguidamente, se filtró a través de material sinterizado de
tamaño de poro medio. El filtrado claro se vertió en NaHCO_{3}
saturado a la mitad (100 ml) y se extrajo con una mezcla 1:1 de
EtOAc en hexanos (2 x 100 ml). Las fases orgánicas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. El residuo se purificó mediante
cromatografía ultra rápida en gel de sílice (EtOAc 10% en hexanos)
para proporcionar
{1S-[4R'-(4-metil-bencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S'-il]-3-
metilbutil}-carbamato de tert-butilo en forma de una espuma
blanca (0,572 g, 32%): IR(cm^{-1}) 1765, 1707, 1167;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,89 (d, 3 H,
J = 6,3), 0,90 (d, 3 H, J = 6,6),
1,19-1,33 (m, 2 H), 1,42 (s, 9 H),
1,43-1,54 (m, 1 H), 1,96-2,06 (m, 1
H), 2,18-2,27 (m, 1 H), 2,32 (s, 3 H), 2,75 (dd, 1
H, J = 13,5, 9,0), 2,88-2,98 (m, 1 H), 3,10
(dd, 1 H, J = 13,5, 4,2), 3,72-3,80 (m, 1 H),
4,24 (t, 1 H, J = 6,3), 4,34 (d, 1 H, J = 9,9),
7,04-7,12 (m, 4 H); Anal. (C_{22}H_{33}NO_{4})
C, H, N.
Esta sustancia se preparó a partir de
{1S-[4R'-(4-metil-bencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S'-il]-3-metilbutil}-carba-mato
de tert-butilo (0,572 g, 1,52 mmoles) como se describió
previamente para la formación de
etil-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(ejemplo 19) para proporcionar
etil-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
en forma de una espuma blanca (0,785 g, 63%): Rf = 0,70 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 1709, 1664, 1170;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta (mezcla de
rotámeros) 0,85 (d, J = 6,3), 0,98-1,08 (m),
1,28 (t, J = 7,2), 1,39 (s), 1,52-1,62 (m),
1,97-2,05 (m), 2,31 (s), 2,36 (t, J = 6,9),
2,52 (d, J = 16,5), 2,64-2,67 (m),
2,83-1,97 (m), 4,17 (q, J = 7,2), 4,48 (m),
4,58 (d, J = 7,2), 5,35 (dd, J = 15,9, 1,5), 5,87 (d,
J = 8,4), 6,61 (dd, J = 15,9, 5,1),
7,02-7,11 (m), 7,20-7,30 (m); Anal.
(C_{50}H_{61}N_{3}O_{7}\cdot0,1 H_{2}O) C, H, N.
El
etil-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
(0,523 g, 0,64 mmoles) se desprotegió y se acopló con
clorotiolformato de ciclopentilo (0,158 ml, 0,96 mmoles), se
describió previamente para la formación de
etil-3-[CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(ejemplo 19) para proporcionar
etil-3-[CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
en forma de una espuma blanca (0,301 g, 56%): IR(cm^{-1})
1716, 1651, 1518; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
(mezcla de rotámeros) 0,85 (d, J = 6,3),
1,02-1,12 (m), 1,29 (t, J = 7,2),
1,52-1,62 (m), 1,67-1,68 (m),
1,98-2,10 (m), 2,31-2,36 (m), 2,53
(d, J = 15,0), 2,63-2,68 (m),
2,76-2,95 (m), 3,57-3,66 (m), 4,16
(q, J = 7,2), 4,38 (m), 4,48-4,52 (m), 5,35
(d, J = 7,5), 5,53 (dd, J = 15,9, 1,5), 5,94 (d, J
= 8,2), 6,62 (dd, J = 15,9, 4,8),
6,99-7,12 (m), 7,21-7,31 (m); Anal.
(C_{51}H_{61}N_{3}O_{6}S\cdot0,25 H_{2}O) C, H, N.
El
etil-3-[CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
(0,272 g, 0,32 mmoles) se desprotegió usando el procedimiento
descrito para la formación de
etil-3-[CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)-Phe-L-Gln]-E-propenoato
(ejemplo 19) para proporcionar
etil-3-(CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-Gln)-E-propenoato
en forma de un sólido blanco (0,106 g, 55%): Pf =
173-174ºC; IR(cm^{-1}) 1719, 1655, 1522,
1198; RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta
0,83 (d, 3 H, J = 6,0), 0,85 (d, 3 H, J = 6,0), 1,21
(t, 3 H, J = 7,2), 1,30-1,44 (m, 4 H),
1,53-1,70 (m, 7 H), 1,97-2,05 (m, 4
H), 2,43-2,60 (m, 2 H), 2,67-2,80
(m, 2 H), 2,92-2,96 (m, 1 H),
3,02-3,56 (m, 2 H), 4,09 (q, 2 H, J = 7,2),
4,17-4,19 (m, 1 H), 4,31 (m, 1 H), 5,42 (d, 1 H,
J = 15,3), 6,62 (dd, 1 H, J = 15,3, 5,1), 6,75 (s,
br, 1 H), 7,00-7,06 (m, 2 H),
7,14-7,19 (m, 2 H), 8,01 (d, 1 H, J = 8,1),
8,37 (d, 1 H, J = 7,8); Anal.
(C_{31}H_{44}FN_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió cloroformato de bencilo (6,24 ml, 43,68
mmoles, 1,12 equivalentes) a una solución de L-tert-leucina
(5,12 g, 39 mmoles, 1 equivalente) en 1,4-dioxano
(80 ml) y NaOH 1 M (39 ml, 39 mmoles, 1 equivalente) a 0ºC. La
mezcla de reacción se agitó a 23ºC toda una noche, seguidamente, se
concentró, se vertió en HCl 1 M (80 ml) y se extrajo con
CH_{2}Cl_{2} (2 x 100 ml). Las fases orgánicas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron para proporcionar
CBZ-L-tert-Leucina (20,7 g) en forma de un
aceite claro: IR(cm^{-1}) 3336, 1715, 1521, 1232;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,02 (s, 9 H),
4,21 (d, 1 H, J = 9,9), 5,11 (s, 2 H), 5,35 (d, 1 H, J
= 9,0), 7,34-7,37 (m, 5 H).
Se añadió 1,1'-carbonildiimidazol
(13,81 g, 85,14 mmoles, 1,1 equivalentes) a una solución de
CBZ-L-tert-Leucina (20,53 g, 77,4 mmoles, 1
equivalente) en THF (150 ml) a 23ºC. La solución resultante se
agitó a 23ºC durante 1 hora. En un matraz aparte, se añadió
n-butilitio (101,59 ml de una solución 1,6 M en
hexanos, 162,54 mmoles, 2,1 equivalentes) a una solución de
diisopropilamina (22,78 ml, 162,54 mmoles, 2,1 equivalentes) en THF
(100 ml) a -78ºC. La mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos
a -78ºC, se calentó hasta 0ºC durante 5 minutos, seguidamente, se
enfrió de nuevo hasta -78ºC. Se añadió una solución de acetato de
tert-butilo (21,9 ml, 162,54 mmoles, 2,1 equivalentes) en THF
(10 ml) a través de una cánula y la mezcla resultante se agitó a
-78ºC durante 10 minutos. Seguidamente, se añadió gota a gota la
solución de imidazol anterior al enolato de litio a -78ºC. La mezcla
resultante se agitó a -78ºC durante 1 hora, se interrumpió con HCl 1
M (100 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 100 ml). Las fases orgánicas
combinadas se lavaron con salmuera (150 ml), se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. El residuo se purificó mediante
cromatografía ultra rápida en gel de sílice (EtOAc 10% en hexanos)
para proporcionar
4-benciloxicarbonilamino-5,5-dimetil-3-oxo-hexanoato
de tert-butilo en forma de un aceite amarillo pálido (12,06
g, 44%): IR(cm^{-1}) 1717, 1508, 1265, 739;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 1,09 (s, 9 H),
1,44 (s, 9 H), 3,50 (s, 2 H), 4,29 (d, 1 H, J = 9,3), 5,03
(s, 2 H), 5,35-5,42 (m, 1 H), 7,34 (s, 5 H).
Se añadieron despacio anhídrido
trifluorometansulfónico (2,50 ml, 14,8 mmoles, 3,3 equivalentes) y
2,6-lutidina (1,72 ml, 14,8 mmoles, 3,3
equivalentes) a una solución agitada de
(R)-2-hidroxi-3-fenil-propionato
de metilo (2,53 g, 14,06 mmoles, 3,1 equivalentes) en
CH_{2}Cl_{2} (30 ml) a 0ºC. la solución rosa resultante se
agitó a 0ºC durante 30 minutos, seguidamente, se vertió en HCl 0,5 M
(100 ml) y se extrajo con una mezcla 1:1 de EtOAc en hexanos (2 x
100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4}, se concentraron y se utilizaron en la siguiente
etapa más adelante.
Se añadió gota a gota una solución de
4-benciloxicarbonilamino-5,5-dimetil-3-oxo-hexanoato
de tert-butilo (1,64 g, 4,51 mmoles, 1 equivalente) en THF
(100 ml) a una suspensión agitada de NaH (0,190 g de una dispersión
al 60% en aceite mineral, 4,74 mmoles, 1,05 equivalente) en THF
(100 ml) a 0ºC. Después de agitar durante 10 minutos, se añadió
gota a gota
(R)-2-triflioxi-3-fenil-propionato
de metilo (preparado anteriormente) en CH_{2}Cl_{2} (10 ml). La
mezcla resultante se agitó a 23ºC durante 24 horas, seguidamente,
se interrumpió con HCl 1 M (50 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 50
ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100
ml), se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron para
proporcionar un aceite amarillo pálido. Sin purificación adicional,
el aceite anterior se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (10 ml), se
trató con ácido trifluoroacético (2 ml) y, seguidamente, se mantuvo
a 23ºC durante 24 horas. Después de la dilucióncon CH_{2}Cl_{2}
(50 ml), la solución resultante se lavó con NaHCO_{3} saturado
(50 ml) y salmuera (50 ml). La fase orgánica se secó sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se purificó mediante
cromatografía ultra rápida en gel de sílice (EtOAc 10% en hexanos)
para proporcionar
CBZ-L-tert-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-OMe
en forma de un aceite amarillo pálido (1,01 g, 54%): Rf = 0,41
(EtOAc 25% en hexanos); IR(cm^{-1}) 1711, 1514, 1233;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,97 (s, 9 H),
2,58-2,76 (m, 2 H), 2,96-3,17 (m, 3
H), 3,62 (s, 3 H), 4,17 (d, 1 H, J = 8,1),
5,06-5,10 (s, 2 H), 5,32 (d, 1 H, J = 8,6),
7,12-7,36 (m, 10 H); Anal.
(C_{25}H_{31}NO_{5}\cdot0,25 H_{2}O) C, H, N.
Se añadieron Pd 10% sobre C (0,110 g) a una
solución de
CBZ-L-tert-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-OMe
(0,513 g, 1,33 mmoles, 1 equivalente) y dicarbonato de
di-tert-butilo (0,378 g, 1,73 mmoles, 1,3 equivalentes) en
CH_{3}OH a 23ºC la mezcla de reacción se agitó a 23ºC en una
atmósfera de hidrógeno (globo) toda una noche. La mezcla se filtró a
través de celite y el filtrado se concentró. El residuo se purificó
mediante cromatografía ultra rápida en gel de sílice (EtOAc 10% en
hexanos) para proporcionar
BOC-L-tert-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-OMe
(0,366 g, 70%): Pf = 98-99ºC; Rf = 0,54 (EtOAc 25%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 1707, 1497, 1367, 1236, 1168;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,97 (s, 9 H),
1,40 (s, 9 H), 2,60-2,78 (m, 2 H),
2,95-3,19 (m, 3 H), 3,63 (s, 3 H),
4,07-4,11 (m, 2 H), 5,07 (d, 1 H, J = 9,3),
7,13-7,32 (m, 5 H); Anal. (C_{25}H_{31}NO_{5})
C, H, N.
Se añadió NaOH 2 M (3,35 ml, 6,7 mmoles, 8,0
equivalentes) a una solución de
BOC-L-tert-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-OMe
(0,328 g, 0,84 mmoles, 1 equivalente) en CH_{3}OH (6 ml) a 0ºC a
lo largo de 10 minutos. La mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante
2 horas, seguidamente, se vertió en KHSO_{4} 10% (80 ml) y se
extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 100 ml). Las fases orgánicas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron para proporcionar
CBZ-L-tert-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-OH
en forma de un sólido blanco (0,315 g, 99%) que se usó sin
purificación adicional: IR(cm^{-1}) 2960, 1710, 1498, 1368,
1167; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,94 (s, 9
H), 1,39 (s, 9 H), 2,60-2,80 (m, 2 H),
2,95-3,16 (m, 3 H), 4,08 (d, 2 H, J = 9,3),
5,09 (d, 1 H, J = 9,6), 7,12-7,31 (m, 5
H).
El
etil-3-[BOC-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,523 g, 0,64 mmoles) se desprotegió y se acopló con
BOC-L-tert-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-OH
(0,315 g, 0,84 mmoles) como se describió para la formación de
etil-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)-Phe-L-Gln]-E-propenoato
(ejemplo 19) para proporcionar
etil-3-[BOC-L-tert-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
en forma de una espuma blanca (0,474 g, 70%): Rf = 0,58 (EtOAc 50%
en hexanos); IR (cm^{-1}) 1702, 1669, 1494, 1169;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta (mezcla de
rotámeros) 0,85 (s), 1,30 (t, J = 7,2), 1,41 (s),
1,56-1,65 (m), 1,95-2,02 (m),
2,22-2,42 (m), 2,62-2,88 (m),
3,09-3,18 (m), 4,00 (d, J = 8,7), 4,17 (t,
J = 7,2), 4,46-4,51 (m), 4,93 (d, J =
8,7), 5,37 (d, J = 15,9), 5,69 (d, J = 9,3), 6,54 (dd,
J = 15,9, 4,8), 7,19-7,15 (m),
7,18-7,31 (m); Anal.
(C_{49}H_{59}N_{3}O_{7}) C, H, N.
El
etil-3-[BOC-L-tert-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,44 g, 0,55 mmoles) se desprotegió y se acopló con
clorotiolformato de ciclopentilo (0,135 ml, 0,82 mmoles) como se
describió previamente para la formación de
etil-3-[CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(ejemplo 19) para proporcionar
etil-3-[CyPentylSCO-L-tert-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
en forma de una espuma blanca (0,347 g, 76%): IR(cm^{-1})
1718, 1656, 1493, 1186; RMN-^{1}H (CDCl_{3})
\delta (mezcla de rotámeros) 0,86 (s), 1,27 (t, J = 7,2),
1,56-1,68 (m), 1,95-2,12 (m),
2,22-2,39 (m), 2,60-2,74 (m),
2,84-2,90 (m), 3,05-3,14 (m),
3,59-3,64 (m), 4,16 (q, J = 7,2), 4,31 (d,
J = 8,4), 4,48 (m), 5,41 (dd, J = 15,9, 1,8), 5,67
(d, J = 8,7), 5,82 (d, J = 9,0), 6,56 (dd, J =
15,6, 5,1), 7,19-7,31 (m); Anal.
(C_{50}H_{59}N_{3}O_{6}) C, H, N.
El
etil-3-[CyPentylSCO-L-tert-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato
(0,318 g, 0,38 mmoles) se desprotegió usando el procedimiento
descrito para la formación de
etil-3-[CyPentylSCO-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)-Phe-L-Gln]-E-propenoato
(ejemplo 19) para proporcionar
etil-3-(CyPentylSCO-L-tert-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-Gln)-E-propenoato
en forma de un sólido blanco (0,204 g, 91%): Pf =
65-68ºC; IR(cm^{-1}) 1715, 1652, 1520,
1193; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta (mezcla de
rotámeros) 0,96 (s), 1,31 (t, J = 7,2),
1,50-1,73 (m), 1,96-2,13 (m), 2,23
(t, J = 7,5), 2,68-2,79 (m),
2,84-2,95 (m), 3,11-3,21 (m),
3,59-3,69 (m), 4,18 (q, J = 7,2), 4,36 (t,
J = 8,1), 4,52-4,59 (m), 5,37 (s, br), 5,42
(dd, 1 H, J = 15,9, 1,5), 5,80 (d, J = 9,0), 5,90 (d,
J = 8,4), 6,46 (s, br), 6,61 (dd, 1 H, J = 15,9
,5,1), 7,18-7,30 (m); Anal.
(C_{31}H_{45}N_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[CyPentylOCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,160 g, 0,197
mmoles, 1 equivalente) en CH_{2}Cl_{2} seco (8 ml). Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano (0,121 ml, 0,591 mmoles, 3 equivalentes) y ácido trifluoroacético (4 ml) produciéndose una solución de color amarillo brillante. Esta solución se agitó durante 40 minutos y, seguidamente, se concentró. El residuo se agitó en Et_{2}O (8 ml) y el sólido se recogió mediante filtración, se lavó con Et_{2}O (2 x 4 ml) y, seguidamente, se secó al vacío para proporcionar etil-3-(CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-Gln)-E-propenoato (0,094 g, 84%) en forma de un sólido blanco: Pf = 206-207ºC (dec); Rf = 0,38 (CH_{3}OH 10% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3413, 3307, 3213, 1708, 1660; RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 0,72 (d, 3 H, J = 6,8), 0,81 (d, 3 H, J = 6,5), 1,20 (t, 3 H, J = 7,0), 1,46-1,82 (m, 10 H), 1,97-2,10 (m, 3 H), 2,23 (s, 3 H), 2,38-2,54 (m, 1 H), 2,65-2,84 (m, 2 H), 2,86-2,97 (m, 1 H), 3,81-3,88) m, 1 H), 4,03-4,18 (m, 2 H), 4,26-4,38 (m, 1 H), 4,85-4,94 (m, 1 H), 5,55 (d, 1 H, J = 15,9), 6,65 (dd, 1 H, J = 15,9, 5,3), 6,73 (s, 1 H), 7,03 (s, 4 H), 7,14 (s, 1 H), 7,27 (d, 1 H, J = 8,1), 8,02 (d, 1 H, J = 8,4); Anal. (C_{31}H_{45}N_{3}O_{7}) C, H, N.
mmoles, 1 equivalente) en CH_{2}Cl_{2} seco (8 ml). Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano (0,121 ml, 0,591 mmoles, 3 equivalentes) y ácido trifluoroacético (4 ml) produciéndose una solución de color amarillo brillante. Esta solución se agitó durante 40 minutos y, seguidamente, se concentró. El residuo se agitó en Et_{2}O (8 ml) y el sólido se recogió mediante filtración, se lavó con Et_{2}O (2 x 4 ml) y, seguidamente, se secó al vacío para proporcionar etil-3-(CyPentylSCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-Gln)-E-propenoato (0,094 g, 84%) en forma de un sólido blanco: Pf = 206-207ºC (dec); Rf = 0,38 (CH_{3}OH 10% en CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3413, 3307, 3213, 1708, 1660; RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 0,72 (d, 3 H, J = 6,8), 0,81 (d, 3 H, J = 6,5), 1,20 (t, 3 H, J = 7,0), 1,46-1,82 (m, 10 H), 1,97-2,10 (m, 3 H), 2,23 (s, 3 H), 2,38-2,54 (m, 1 H), 2,65-2,84 (m, 2 H), 2,86-2,97 (m, 1 H), 3,81-3,88) m, 1 H), 4,03-4,18 (m, 2 H), 4,26-4,38 (m, 1 H), 4,85-4,94 (m, 1 H), 5,55 (d, 1 H, J = 15,9), 6,65 (dd, 1 H, J = 15,9, 5,3), 6,73 (s, 1 H), 7,03 (s, 4 H), 7,14 (s, 1 H), 7,27 (d, 1 H, J = 8,1), 8,02 (d, 1 H, J = 8,4); Anal. (C_{31}H_{45}N_{3}O_{7}) C, H, N.
Se añadió HCl (3 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,315 g, 0,393 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (3 ml). La solución de reacción se agitó
a 23ºC durante 1,67 horas y, seguidamente, se concentró para
proporcionar
etil-3-[H_{2}N-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato\cdotHCl
que se dejó en reserva.
Se añadió diciclohexilcarbodiimida (0,162 g,
0,785 mmoles, 2 equivalentes) a una solución de ácido
ciclopentilacético (0,197 ml, 1,57 mmoles, 4 equivalentes) en
Et_{2}O (10 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 1,5 horas
y, seguidamente, el precipitado blanco se eliminó mediante
filtración. El filtrado se concentró, seguidamente, se disolvió en
CH_{2}Cl_{2} seco (5 ml) y se añadió a una solución de
etil-3-[H_{2}N-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)-E-propenoato\cdotHCl
(de anteriormente) y 4-metilmorfolina (0,086 ml,
0,782 mmoles, 2 equivalentes) en CH_{2}Cl_{2} seco (3 ml). La
mezcla de reacción se agitó durante 2,5 horas y se concentró. El
residuo se sometió a cromatografía en gel de sílice (gradiente de
elución EtOAc 40% al 50% en hexanos) para proporcionar
etil-3-[CyPentylCH_{2}CO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,201 g, 63%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,65 (CH_{3}OH
10% en CHCl_{3}); IR(cm^{-1}) 3296, 1716, 1650;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,71 (d, 3 H,
J = 6,8), 0,92 (d, 3 H, J = 6,8),
1,02-1,16 (m, 2 H), 1,29 (t, 3 H, J = 7,2),
1,47-1,82 (m, 8 H), 1,89-2,16 (m, 5
H), 2,30-2,36 (m, 1 H), 2,31 (s, 3 H),
2,46-2,69 (m, 2 H), 2,74-2,89 (m, 2
H), 2,95-3,08 (m, 1 H), 4,12-4,22
(m, 2 H), 4,41-4,53 (m, 2 H), 5,52 (dd, 1 H, J
= 15,6, 1,6), 5,73 (d, 1 H, J = 8,1), 6,00 (d, 1 H, J
= 8,1), 6,61 (dd, 1 H, J = 15,6, 5,1), 6,99 (d, 2 H,
J = 7,9), 7,08 (d, 2 H, J = 7,9),
7,17-7,30 (m, 16 H); Anal.
(C_{51}H_{61}N_{3}O_{6}\cdot0,5 H_{2}O) C, H, N.
Se disolvió
etil-3-[CyPentylCH_{2}CO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,167 g, 0,206 mmoles, 1 equivalente) en CH_{2}Cl_{2} seco (8
ml). Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano (0,126 ml,
0,615 mmoles, 3 equivalentes) y ácido trifluoroacético (4 ml)
produciéndose una solución del color amarillo brillante. Esta
solución se agitó durante 40 minutos y, seguidamente, se concentró.
El residuo se agitó en Et_{2}O (8 ml) y el sólido se recogió
mediante filtración, se lavó con Et_{2}O (2 x 4 ml) y,
seguidamente, se secó al vacío para proporcionar
etil-3-(CyPentylCH_{2}CO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-CH_{3})Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,092 g, 79%) en forma de un sólido blanco: Pf =
253-255ºC (dec); Rf = 0,42 (CH_{3}OH 10% en
CHCl_{3}); IR(cm^{-1}) 3401, 3284, 1713, 1649;
RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 0,74 (d,
3 H, J = 6,8), 0,81 (d, 3 H, J = 6,5),
1,03-1,19 (m, 2 H), 1,20 (t, 3 H, J = 7,0),
1,40-1,75 (m, 9 H), 2,00-2,15 (m, 6
H), 2,23 (s, 3 H), 2,42 (dd, 1 H, J = 18,4, 4,7),
2,66-2,84 (m, 2 H), 2,86-2,96 (m, 1
H), 4,06-4,17 (m, 3 H), 4,27-4,37
(m, 1 H), 5,57 (dd, 1 H, J = 15,7, 1,4), 6,66 (dd, 1 H, J
= 15,7, 5,4), 6,73 (s, 1 H), 7,03 (s, 4 H), 7,16 (s, 1 H), 7,92
(d, 1 H, J = 8,1), 8,01 (d, 1 H, J = 7,8); Anal.
(C_{32}H_{47}N_{3}O_{6}) C, H, N.
Se añadió gota a gota una solución de
ciclohexanocarbaldehído (11,22 g, 100 mmoles, 1 equivalente) en THF
(100 ml) a través de un embudo de adición a una solución de bromuro
de vinilmagnesio (100 ml de una solución 1,0 M en THF, 100 mmoles,
1,0 equivalente) en Et_{2}O (100 ml) a 0ºC. Después de que se
completara la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora
a 0ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre HCl 0,5 M (150 ml)
y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 150 ml). Las fases
orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se
concentraron para proporcionar un aceite amarillo. Estas sustancias
se combinó (pura) con dietilmalonato (16,7 ml, 110 mmoles, 1,1
equivalentes) y Ti(OEt)_{4} (2,10 ml, 10,0 mmoles,
0,10 equivalentes) y se calentó hasta 160ºC durante 1 hora
(separando por destilación el EtOH según se formaba). Seguidamente,
la mezcla de reacción se mantuvo a 190ºC durante 4 horas y,
seguidamente, se enfrió hasta 60ºC. Se añadieron secuencialmente
EtOH (50 ml) y KOH 6,0 M (50 ml) y la mezcla de reacción marrón se
puso a reflujo durante 3 horas. Después de enfriarla hasta 23ºC, la
mezcla de reacción se filtró a través de material sinterizado de
tamaño de poro medio y el filtrado se sometió a reparto entre agua
(150 ml) y Et_{2}O (2 x 150 ml). Seguidamente, la fase acuosa se
acidificó hasta pH = 2 (como indicó el papel de pH) con HCl
concentrado y se extrajo con una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x
150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se destiló a presión
reducida para proporcionar ácido
trans-5-ciclohexil-pent-4-enoico
(5,68 g, 31%) en forma de un líquido incoloro: Pe =
150-156ºC (133,3 Pa); IR(cm^{-1}) 3001
(br), 2923, 1711; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
0,96-1,32 (m, 5 H), 1,60-1,76 (m, 5
H), 1,85-1,94 (m, 1 H), 2,27-2,44
(m, 4 H), 5,31-5,48 (m, 2 H); Anal.
(C_{11}H_{18}O_{2}) C, H.
Se añadió cloruro de oxalilo (2,81 ml, 32,2
mmoles, 1,05 equivalentes) a una solución de ácido
trans-5-ciclohexil-pent-4-enoico
(5,60 g, 30,7 mmoles, 1 equivalente) y N,N-dimetilformamida
(0,03 ml, 0,39 mmoles, 0,013 equivalentes) en benceno (100 ml) a
23ºC. La mezcla de reacción se agitó a 23ºC durante 2 horas y,
seguidamente, se concentró a presión reducida. El aceite resultante
se disolvió en THF (20 ml) y se añadió a través de una cánula a una
solución de (1R,2R)-(-)-pseudoefedrina (4,61 g, 27,9
mmoles, 0,91 equivalentes) y trietilamina (5,06 ml, 36,3 mmoles, 1,1
equivalentes) en THF (300 ml) a 0ºC. La mezcla de reacción se agitó
a 0ºC durante 30 minutos y, seguidamente, se sometió a reparto entre
NH_{4}Cl saturado a la mitad (150 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y
hexanos (2 x 150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se purificó
mediante cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 50% en
hexanos) para proporcionar
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-5-ciclohexil-pent-4-enamida
(5,21 g, 57%) en forma de un sólido blanco: Pf =
89-91ºC; Rf = 0,33 (EtOAc 50% en hexanos);
IR(cm^{-1}) 3380, 1621; RMN-^{1}H
(CDCl_{3}, mezcla de rotámeros) \delta
0,97-1,32 (m), 1,54-1,74 (m),
1,86-1,93 (m), 2,24-2,58 (m), 2,81
(s), 2,91 (s), 3,98-4,06 (m),
4,35-4,48 (m), 4,55-4,61 (m),
5,32-5,47 (m), 7,24-7,41 (m); Anal.
(C_{21}H_{31}NO_{2}) C, H, N.
Se añadió n-butilitio (20,7 ml de
una solución 1,6 M en hexanos, 33,1 mmoles, 2,1 equivalentes) a una
suspensión de cloruro de litio anhidro (4,68 g, 110 mmoles, 7
equivalentes) y diisopropilamina (4,98 ml, 75,5 mmoles, 2,25
equivalentes) en THF (300 ml) a -78ºC. La mezcla de reacción se
agitó durante 20 minutos a -78ºC, seguidamente, se mantuvo a 0ºC
durante 5 minutos y, subsecuentemente, se enfrió de nuevo hasta
-78ºC. Se añadió una solución de
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-5-ciclohexil-pent-4-
enamida (5,20 g, 15,8 mmoles, 1 equivalente) en THF (30 ml) a través
de una cánula y la solución resultante se agitó a -78ºC durante 1
hora, se mantuvo a 0ºC durante 15 minutos, se agitó a 23ºC durante 5
minutos y, seguidamente, se enfrió de nuevo hasta 0ºC. Se añadió
bromuro de 4-fluorobencilo (2,95 ml, 23,7 mmoles,
1,5 equivalentes) y la mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 30
minutos y, seguidamente, se sometió a reparto entre NH_{4}Cl
saturado a la mitad (150 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2
x 150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación del residuo
mediante cromatografía ultra rápida en columna (gradiente de
elución EtOAc 30% al 40% en hexanos) proporcionó
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-5-ciclohexil-2S-(4-fluoro-bencil)-pent-4-enamida
(6,29 g, 91%) en forma de un aceite viscoso: Rf = 0,57 (EtOAc 50%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 3382, 1616;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}, mezcla de rotámeros)
\delta 0,83-1,27 (m), 1,51-1,70
(m), 1,86-1,95 (m), 2,12-2,21 (m),
2,28-2,44 (m), 2,58 (s), 2,64-2,77
(m), 2,82 (s), 2,85-2,92 (m),
4,00-4,05 (m), 4,37-4,52 (m),
5,22-5,52 (m), 6,88-7,01 (m),
7,07-7,20 (m), 7,20-7,38 (m); Anal.
(C_{28}H_{36}FNO_{2}\cdot0,25 H_{2}O) C, H, N.
Se añadió N-bromosuccinimida
(2,65 g, 14,9 mmoles, 1,1 equivalentes) en pequeñas porciones a lo
largo de 5 minutos a una solución de
(2R-hidroxi-1R-metil-2-fenil-etil)-metil)
trans-5-ciclohexil-2S-(4-fluoro-bencil)-pent-4-enamida
(6,20 g, 14,2 mmoles, 1 equivalente) y ácido acético glacial (3,87
ml, 70,8 mmoles, 5 equivalentes) en una mezcla 4:1 de THF y
H_{2}O (250 ml) a 0ºC. La solución amarilla resultante se agitó
durante 15 minutos a 0ºC, seguidamente, se calentó hasta 23ºC y,
subsecuentemente, se puso a reflujo durante 1 hora. Después de
enfriarla hasta 23ºC, la mezcla de reacción se sometió a un reparto
entre NaHCO_{3} saturado a la mitad (150 ml) y una mezcla 1:1 de
EtOAc y hexanos (2 x 150 ml). Las fases orgánicas combinadas se
secaron sobre Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación
mediante cromatografía ultra rápida del residuo (EtOAc 5% en
hexanos) proporcionó
5S-(R-bromo-ciclohexil-metil)-3R-(4-fluoro-bencil)-dihidrofuran-2-ona
(3,70 g, 71%) en forma de un sólido blanco: Pf =
72-75ºC; Rf = 0,62 (EtOAc 30% en hexanos);
IR(cm^{-1}) 1772; RMN-^{1}H (CDCl_{3})
\delta1,11-1,38 (m, 6 H),
1,52-1,77 (m, 5 H), 2,13-2,34 (m, 2
H), 2,82 (dd, 1 H, J = 13,7, 8,4), 2,95-3,05
(m, 1 H), 3,12 (dd, 1 H, J = 13,7, 4,7), 3,89 (dd, 1 H, J
= 8,4, 3,7), 4,43-4,51 (m, 1 H),
6,98-7,05 (m, 2 H), 7,15-7,26 (m, 2
H); Anal. (C_{18}H_{22}BrFO_{2}) C, H, N.
Se calentó una suspensión de azida sódica (1,30
g, 20,0 mmoles, 2 equivalentes) y
5S-(R-bromo-ciclohexil-metil)-3R-(4-fluoro-bencil)-dihidrofuran-2-ona
(3,70 g, 10,0 mmoles, 1 equivalente) en N,N-dimetilformamida
(30 ml) a 50ºC durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió
hasta 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto entre agua (150 ml)
y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 150 ml). Las fases
orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se
concentraron y el residuo se purificó mediante cromatografía ultra
rápida en columna (EtOAc 10% en hexanos) para proporcionar
5S-(S-azido-ciclohexil-metil)-3R-(4-fluoro-bencil)-dihidrofuran-2-ona
(1,76 g, 53%) en forma de un aceite incoloro: Rf = 0,33 (EtOAc 20%
en hexanos); IR(cm^{-1}) 2109, 1772;
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
1,06-1,29 (m, 6 H), 1,67-1,82 (m, 5
H), 2,02-2,21 (m, 2 H), 2,79-2,86
(m, 1 H), 2,92-2,95 (m, 1 H),
3,05-3,17 (m, 2 H), 4,45-4,50 (m, 1
H), 6,97-7,04 (m, 2 H), 7,15-7,26
(m, 2 H).
Se agitó una suspensión de
5S-(S-azido-ciclohexil-metil)-3R-(4-fluoro-bencil)-dihidrofuran-2-ona
(1,76 g, 5,31 mmoles, 1 equivalente) y Pd/C (10%, 0,15 g) en
CH_{3}OH (30 ml) en una atmósfera de hidrógeno (globo) durante 3
horas. La mezcla de reacción se filtró a través de celite, se
concentró y el residuo se disolvió en 1,4-dioxano
(30 ml). Se añadieron secuencialmente
N,N-diisopropiletilamina (1,85 ml, 10,6 mmoles, 2
equivalentes) y dicarbonato de di-tert-butilo (1,74 g, 7,97
mmoles, 1,5 equivalentes) y la solución resultante se agitó a 23ºC
durante 1,5 horas. Seguidamente, la mezcla de reacción se sometió a
reparto entre agua (150 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x
150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación del residuo
mediante cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 15% en
hexanos) proporcionó
{S-ciclohexil-[4R-(4-fluoro-bencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il]-metil}-carbamato
de tert-butilo (1,11 g, 52%) en forma de una espuma blanca:
Rf = 0,55 (EtOAc 30% en hexanos); IR(cm^{-1}) 3338, 1766,
1699; RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta
0,92-1,26 (m, 5 H), 1,40 (s, 9 H),
1,62-1,80 (m, 6 H), 1,95-2,05 (m, 1
H), 2,17-2,27 (m, 1 H), 2,79 (dd, 1 H, J =
13,5, 8,6), 2,88-2,98 (m, 1 H), 3,09 (dd, 1 H, J
= 13,5, 4,5), 3,37-3,43 (m, 1 H), 4,43 (d, 1 H,
J = 10,0), 4,48-4,52 (m, 1 H),
6,96-7,01 (m, 2 H), 7,12-7,27 (m, 2
H); Anal. (C_{21}H_{31}NO_{4}) C, H, N.
Se añadió hidroxilo de litio (7,0 ml de una
solución acuosa 1 M, 7,0 mmoles, 5 equivalentes) a una solución de
{S-ciclohexil-[4R-(4-fluoro-bencil)-5-oxo-tetrahidrofuran-2S-il]-metil}-carbamato
de tert-butilo (0,567 g, 1,40 mmoles, 1 equivalente) en DME
(10 ml) a 23ºC. La suspensión resultante se agitó a 23ºC durante 30
minutos y, seguidamente, se sometió a reparto entre HCl 0,5 M (100
ml) y EtOAc (2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se disolvió en
CH_{2}Cl_{2} (30 ml). Se añadieron secuencialmente N-óxido de 4
metilmorfolina (0,328 g, 2,80 mmoles, 2 equivalentes), tamices
moleculares de 4 \ring{A} el polvo (0,60 g) y perrutenato de
tetrapropilamonio (0,049 g, 0,139 mmoles, 0,1 equivalentes). La
mezcla de reacción oscura resultante se agitó durante 2 horas a 23ºC
y, seguidamente, se filtró a través de celite. El filtrado se
concentró a presión reducida para proporcionar un aceite marrón que
se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (40 ml). Se añadieron
secuencialmente
etil-3-[H_{2}N-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
bruto (véase preparación de
etil-3-[CBZ-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-D/L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato,
1,68 mmoles, 1,2 equivalentes), hidrato de
1-hidroxibenzotriazol (0,284 g, 2,10 mmoles, 1,5
equivalentes), 4-metilmorfolina (0,616 ml, 5,60
mmoles, 4,0 equivalentes) e hidrocloruro de
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida
(0,403 g, 2,10 mmoles, 1,5 equivalentes) y la mezcla de reacción se
agitó durante 20 horas a 23ºC y, seguidamente, se sometió a reparto
entre agua (150 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y hexanos (2 x 150
ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron. La purificación del residuo
mediante cromatografía ultra rápida en columna (EtOAc 40% en
hexanos) proporcionó
etil-3-[BOC-L-Cyhex\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,379 g, 32%) en forma de un sólido blanco: Pf =
192-195ºC; Rf = 0,50 (EtOAc 50% en hexanos);
IR(cm^{-1}) 3316, 1709, 1667; RMN-^{1}H
(CDCl_{3}) \delta 0,98-1,12 (m, 5 H), 1,29 (t,
3 H, J = 7,2), 1,40 (s, 9 H), 1,43-1,74 (m, 6
H), 1,96-2,02 (m, 1 H), 2,30-2,39
(m, 2 H), 2,53 (d, 1 H, J = 17,1), 2,61-2,88
(m, 4 H), 3,00 (dd, 1 H, J = 17,6, 10,1),
4,01-4,06 (m, 1 H), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2),
4,45 (s, br, 1 H), 4,80 (d, 1 H, J = 8,1), 5,35 (d, 1 H,
J = 15,7), 5,90 (d, 1 H, J = 8,4), 6,60 (dd, 1 H,
J = 15,7, 5,0), 6,93-7,10 (m, 4 H),
7,17-7,30 (m, 16 H); Anal.
(C_{51}H_{60}FN_{3}O_{7}) C, H, N.
Se añadió HCl (10 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Leu\Psi[COCH_{2}]-L-Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,379 g, 0,448 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (10 ml). La mezcla de reacción se agitó
a 23ºC durante 2 horas y, seguidamente, se concentró. El aceite
resultante se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (15 ml), se enfrió hasta
0ºC y se añadieron secuencialmente 4-metilmorfolina
(0,123 ml, 1,12 mmoles, 2,5 equivalente) y clorotiolformato de
ciclopentilo (0,096 ml, 0,583 mmoles, 1,3 equivalente). La mezcla de
reacción se agitó durante 30 minutos a 0ºC y, seguidamente, se
sometió a reparto entre agua (100 ml) y una mezcla 1:1 de EtOAc y
hexanos (2 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron
sobre Na_{2}SO_{4}, se concentraron y el residuo se sometió a
cromatografía en gel de sílice (EtOAc 30% en hexanos) para
proporcionar
etil-3-[CyPentylSCO-L-Cyhex\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,161 g, 41%) en forma de un sólido blanco: Pf =
90-95ºC; Rf = 0,51 (EtOAc 50% en hexanos);
IR(cm^{-1}) 3312, 1714, 1654; RMN-^{1}H
(CDCl_{3}) \delta 0,98-1,22 (m, 6 H), 1,29 (t, 3
H, J = 7,2), 1,56-1,70 (m, 11 H),
1,98-2,08 (m, 3 H), 2,29-2,37 (m, 3
H), 2,51-3,30 (m, 6 H), 3,58-3,65
(m, 1 H), 4,17 (q, 2 H, J = 7,2), 4,33 (s, br, 1 H), 4,45 (s,
br, 1 H), 5,37 (dd, 1 H, J = 15,7, 1,6), 5,55 (d, 1 H, J
= 8,1), 5,99 (d, 1 H, J = 8,4), 6,61 (dd, 1 H, J
= 15,7, 4,7), 6,93-7,10 (m, 4 H),
7,16-7,31 (m, 16 H); Anal.
(C_{52}H_{60}FN_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano
(0,10 ml) y ácido trifluoroacético (6 ml) a una solución de
etil-3-[CyPentylSCO-L-Cyhex\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,150 g 0,172 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (8 ml) produciéndose una
solución de color amarillo brillante. La mezcla de reacción se agitó
durante 20 minutos a 23ºC, seguidamente, se añadió tetracloruro de
carbono (4 ml) y la mezcla se concentró a presión reducida. El
residuo se purificó mediante cromatografía ultra rápida en columna
(CH_{3}OH 3% en CH_{2}Cl_{2}) para proporcionar
etil-3-(CyPentylSCO-L-Cyhex\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-
Gln)-E-propenoato (0,069 g,
63%) en forma de una espuma blanca: Rf = 0,56 (CH_{3}OH 10% en
CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3281, 1716, 1637;
RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta
0,93-1,14 (m, 6 H), 1,21 (t, 3 H, J = 7,2),
1,41-1,70 (m, 13 H), 1,96-2,03 (m, 4
H), 2,53-2,93 (m, 5 H), 3,46-3,56
(m, 1 H), 3,97-4,15 (m, 3 H), 4,30 (s, br, 1 H),
5,41 (d, 1 H, J = 15,7), 6,61 (dd, 1 H, J = 15,7,
5,0), 6,74 (s, 1 H), 7,00-7,19 (m, 5 H), 8,00 (d, 1
H, J = 8,4), 8,28 (d, 1 H, J = 7,8); Anal.
(C_{33}H_{46}FN_{3}O_{6}S) C, H, N.
Se añadió HCl (3 ml de una solución 4,0 M en
1,4-dioxano) a una solución de
etil-3-[BOC-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,220 g, 0,273 mmoles, 1 equivalente) en
1,4-dioxano (3 ml). La solución de reacción se agitó
a 23ºC durante 2,25 horas y, seguidamente, se concentró para
proporcionar
etil-3-[H_{2}N-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
bruto que se dejó en reserva.
Se disolvió ciclopentanol (0,431 ml, 4,75 mmoles,
17,4 equivalentes) en CH_{2}Cl_{2} seco (25 ml). Se añadieron
secuencialmente trietilamina (0,662 ml, 4,75 mmoles, 17,4
equivalentes) y trifosgeno (0,507 g, 1,71 mmoles, 6,26
equivalentes). La solución de reacción se agitó durante 2,5 obras
para proporcionar una solución madre de cloroformato de ciclopentilo
(0,19 M). Una porción de esta solución (2,87 ml, 0,545 mmoles, 2
equivalentes) se añadió a una solución de
etil-3-[H_{2}N-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato\cdotHCl
(de anteriormente) y 4 metilmorfolina (0,120 ml, 1,09 mmoles, 4
equivalentes) en CH_{2}Cl_{2} seco (4 ml). La mezcla de
reacción se agitó durante 1,75 horas, seguidamente, se vertió en
agua (30 ml) y se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 30 ml). Las
fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se
concentraron y el residuo se sometió a cromatografía en gel de
sílice (gradiente de elución EtOAc 40% al 50% en hexanos) para
proporcionar
etil-3-[CyPentylOCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,077 g, 35%) en forma de un vidrio incoloro:
RMN-^{1}H (CDCl_{3}) \delta 0,68 (d, 3 H,
J = 6,8), 0,93 (d, 3 H, J = 6,8), 1,29 (t, 3 H, J
= 7,2), 1,50-1,86 (m, 10 H),
1,93-2,04 (m, 2 H), 2,29-2,38 (m, 2
H), 2,52 (d, 1 H, J = 15,9), 2,64 (dd, 1 H, J = 12,1,
5,6), 2,73-2,90 (m, 2 H), 2,99 (dd, 1 H, J =
17,0, 9,8), 4,10-4,22 (m, 3 H),
4,40-4,51 (m, 1 H), 4,92 (d, 1 H, J = 8,1),
4,59-5,03 (m, 1 H), 5,38 (d, 1 H, J = 15,9),
6,06 (d, 1 H, J = 8,4), 6,60 (dd, 1 H, J = 15,9, 4,8),
6,92-7,00 (m, 2 H), 7,04-7,11 (m, 2
H), 7,16-7,32 (m, 15 H).
Se disolvió
etil-3-[CyPentylOCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-(Tr-Gln)]-E-propenoato
(0,076 g, 0,093 mmoles, 1 equivalente) en CH_{2}Cl_{2} seco (6
ml). Se añadieron secuencialmente triisopropilsilano (0,057 ml,
0,278 mmoles, 3 equivalentes a) y ácido trifluoroacético (3 ml)
produciéndose una solución de color amarillo brillante. Esta
solución se agitó durante 40 minutos y, seguidamente, se concentró.
El residuo se agitó en Et_{2}O (3 ml) y el sólido se recogió
mediante filtración, se lavó con Et_{2}O (3 x 3 ml) y,
seguidamente, se secó al vacío para proporcionar
etil-3-(CyPentylOCO-L-Val\Psi[COCH_{2}]-L-(p-F)Phe-L-Gln)-E-propenoato
(0,040 g, 75%) en forma de un sólido blanco: Pf =
220-222ºC (dec); Rf = 0,16 (CH_{3}OH 5% en
CH_{2}Cl_{2}); IR(cm^{-1}) 3413, 3317, 1708, 1658;
RMN-^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 0,74 (d,
3 H, J = 6,5), 0,82 (d, 3 H, J = 6,5), 1,20 (t, 3 H,
J = 7,2), 1,38-1,84 (d, 10 H),
1,96-2,12 (m, 3 H), 2,46-2,84 (m, 4
H), 2,88-2,97 (m, 1H), 3,82-3,89
(m, 1 H), 4,09 (q, 2 H, J = 7,2), 4,25-4,36
(m, 1 H), 4,84-4,94 (m, 1 H), 5,40 (d, 1 H, J
= 15,6), 6,61 (dd, 1 H, J = 15,6, 5,3), 6,73 (s, 1 H),
6,98-7,24 (m, 5 H), 7,30 (d, 1 H, J = 8,7),
7,99 (d, 1 H, J = 8,4); Anal.
(C_{30}H_{42}FN_{3}O_{7}\cdot0,5 H_{2}O) C, H, N.
Los compuestos 26 a 34, ilustrados anteriormente,
pueden producirse mediante técnicas de experimentación ordinarias
por los expertos en la técnica, de una manera análoga a los diversos
procedimientos descritos anteriormente para producir los compuestos
1 a 25.
Se prepararon soluciones madre (50 mM, en DMSO)
de diversos compuestos; las diluciones fueron en el mismo
disolvente. Se prepararon las proteasas 3C rinovíricas recombinantes
de los serotipos 14, 16 y 2 mediante los siguientes procedimientos
estándar cromatográficos: (1) intercambio iónico usando Sepharose Q
de flujo rápido de Pharmacia; (2) cromatografía de afinidad usando
Affi-Gel Blue de BioRad y (3) exclusión molecular
usando Sephadex G-100 de Pharmacia. Los análisis
contenían DMSO 2%, Tris 50 mM pH 7,6, EDTA 1 mM, un compuesto en las
concentraciones indicadas, el sustrato a 1 \muM aproximadamente y
proteasa 50-100 nM. En las determinaciones de la
K_{i}, el compuesto y la enzima se preincubaron durante 10 minutos
a 30ºC antes de la adición del sustrato (inicio con el sustrato).
Los valores de la K_{obs/I} se obtuvieron de reacciones iniciadas
mediante la adición de enzima en vez de sustrato. La actividad RVP
se midió mediante análisis fluorescente de transferencia de energía
por resonancia. El sustrato fue (N-terminal)
DABCYL-(Gly-Arg-Ala-Val-Phe-Gln-Gly-Pro-Val-Gly)-EDANS.
En el péptido sin cortar, la fluorescencia EDANS era interrumpida
por el resto DABCYL próximo. Cuando el péptido se corta, la
interrupción se libera y la actividad se mide como un incremento en
la señal fluorescente. Los datos se analizaron usando programas
estándar de ajuste no lineal (Enzfit) y se muestran en la tabla
1.
En la tabla anterior, todos los datos son de la
RVP serotipo 14 a no ser que se indique de otro modo entre
paréntesis. Todas las cepas de rinovirus humanos (HRV) se compraron
a la Colección americana de cultivos tipo (ATCC, abreviadamente en
inglés "American Type Culture Collection") excepto el serotipo
14, que se produjo a partir de un clon de ADNc infeccioso construido
y suministrado a los solicitantes por el Dr. Robert Rueckert del
"Institute for Molecular Virology", Universidad de Wisconsin,
Madison, Wisconsin. La columna designada como INHIB representa el
porcentaje de inhibición en el minuto 10 de preincubación con RVP 50
nM antes de la adición del sustrato. Los datos de la columna
designada como K_{obs/I} se midieron a partir de curvas de
progresión en experimentos de iniciación con enzima. La
denominación ND indica que el valor no se determinó para ese
compuesto.
En el análisis de protección celular, la
capacidad de los compuestos de proteger a las células contra la
infección por HRV se midió mediante el método de reducción del
colorante XTT. Este método se describió por Weislow, O.S., Kiser,
R., Fine, D.L., Bader, J., Shoemaker, R.H., Boyd, M.R., J. Natl.
Cancer Inst. 1989, 81, 577-586.
Las células HI-HeLa se infectaron
con HRV-14 a una multiplicidad de infección (m.o.i.,
abreviadamente en inglés "multiplicity of infection") de 0,13
(partículas víricas/célula) o fueron
pseudo-infectadas con medio solo. Las células
infectadas o pseudo-infectadas se resuspendieron a 8
x 10^{5} células por mililitro y se incubaron con las
concentraciones apropiadas de los compuestos de fórmula I. Dos días
más tarde, se añadió XTT/PMS para analizar las placas y la cantidad
de formazán producido se cuantificó espectrofotométricamente a
450/650 nm. La EC_{50} se calculó como la concentración de
compuesto que incrementaba el porcentaje de producción de formazán
en las células infectadas con virus y tratadas con el compuesto
hasta el 50% con respecto al producido en las células
pseudo-infectadas y sin compuesto. La dosis
citotóxica 50% (CC_{50}) se calculó como la concentración de
compuesto que disminuía el porcentaje de formazán producido en las
células pseudo-infectadas con virus y tratadas con
el compuesto hasta el 50% con respecto al producido en las células
pseudo-infectadas y sin compuesto. El índice
terapéutico (TI) se calculó dividiendo la CC_{50} entre la
EC_{50}.
Todas las cepas de rinovirus humanos (HRV) para
usar en este análisis se compraron a la Colección americana de
cultivos tipo (ATCC) excepto el HRV serotipo-14, que
se produjo a partir de un clon de ADNc infeccioso construido y
suministrado a los solicitantes por el Dr. Robert Rueckert del
"Institute for Molecular Virology", Universidad de Wisconsin,
Madison, Wisconsin. Las suspensiones madre de HRV se propagaron y
los análisis víricos se realizaron en células
HI-HeLa (ATCC). Las células se hicieron crecer en
medio mínimo esencial, suministrado por Life Technologies, con suero
bovino fetal al 10%.
Los compuestos se analizaron frente a los
compuestos control WIN 51711, WIN 52084 y WIN 54954, todos obtenidos
de Sterling-Winthrop Pharmaceuticals y el compuesto
control Pirodavir, obtenido de Janssen Pharmaceuticals. Los datos
antivíricos obtenidos de los compuestos de ensayo se muestran en la
tabla 2, en la que todos los datos son del HRV serotipo 14 a no ser
que se indique de otro modo entre paréntesis.
La cepa Coxsackie A-21
(CVA-21) se compró a la Colección americana de
cultivos tipo (ATCC). Las suspensiones madre de virus se propagaron
y los análisis antivíricos se realizaron en células
HI-HeLa (ATCC). Las células se hicieron crecer en
medio mínimo esencial con suelo bovino fetal al 10%.
La capacidad de los compuestos de proteger a las
células frente a la infección por CVA-21 se midió
mediante el método de reducción del colorante XTT. Este método se
describió por Weislow, O.S., Kiser, R., Fine, D.L., Bader, J.,
Shoemaker, R.H., Boyd, M.R., J. Natl. Cancer Inst.
1989, 81, 577-586. Las células
HI-HeLa se infectaron con CVA-21 a
una multiplicidad de infección (m.o.i.) de 0,05
(CVA-21) o fueron pseudo-infectadas
con medio solo. Las células infectadas o no infectadas se
resuspendieron a 4 x 10^{4} células por mililitro y se incubaron
con las concentraciones apropiadas del fármaco. Un día más tarde, se
añadió XTT/PMS para analizar las placas y la cantidad de formazán
producido se cuantificó espectrofotométricamente a 450/650 nm. La
EC_{50} se calculó como la concentración de fármaco que
incrementaba el porcentaje de producción de formazán en las células
infectadas con virus y tratadas con el fármaco hasta el 50% con
respecto al producido en las células no infectadas y sin fármaco. La
dosis citotóxica 50% (CC_{50}) se calculó como la concentración de
fármaco que disminuía el porcentaje de formazán producido en las
células no infectadas y tratadas con el fármaco hasta el 50% con
respecto al producido en las células no infectadas y sin fármaco. El
índice terapéutico (TI) se calculó dividiendo la CC_{50} entre la
EC_{50}.
\newpage
Los compuestos se analizaron frente al compuesto
control WIN 54954, obtenido de Sterling-Winthrop
Pharmaceuticals y frente al compuesto control Pirodavir, obtenido de
Janssen Pharmaceuticals. Los datos antivíricos obtenidos de los
compuestos de ensayo contra la cepa Coxsackie A-21
(CVA-21) se muestran en la tabla 3.
En la descripción de la invención, los autores de
la invención han expuesto algunas teorías y mecanismos en un
esfuerzo para describir como o porqué funciona la invención del modo
en que funciona. Estas teorías y mecanismos se exponen sólo con
fines informativos. Los solicitantes no tienen que relacionarse con
ningún producto químico específico o mecanismos físicos o teorías
del funcionamiento.
Claims (36)
1. Un compuesto de fórmula (I):
en la
que:
M es O o S;
R_{1} es H, F, un grupo alquilo, OH, SH o un
grupo O-alquilo;
R_{2} y R_{5} se seleccionan
independientemente de H,
o un grupo alquilo, en el que dicho grupo alquilo
es diferente
de
con la condición de que al menos uno de R_{2} o
R_{5} debe
ser
y en la que, cuando R_{2} o R_{5}
es
X es =CH o =CF e Y_{1} es =CH o =CF,
o X e Y_{1} junto con Q' forman un anillo de
tres miembros en el que Q' es -C(R_{10})(R_{11})- o -O-,
X es -CH- o -CF-, e Y_{1} es -CH-, -CF- o -C(alquilo)-,
siendo R_{10} y R_{11} independientemente H, un halógeno o un
grupo alquilo o formando, junto con el átomo de carbono al que están
unidos, un grupo cicloalquilo o un grupo heterocicloalquilo,
o X es -CH_{2}-, -CF_{2}-, -CHF- o -S- e
Y_{1} es -O-, -S-, -NR_{12}-, -C(R_{13})(R_{14})-,
-C(O)-, -C(S)- o -C(CR_{13}R_{14})-,
en los que R_{12} es H o un alquilo y R_{13}
y R_{14} son independientemente H, F o un grupo alquilo o, junto
con los átomos a los que están unidos, forman un grupo cicloalquilo
o un grupo heterocicloalquilo;
A_{1} es C, CH, CF, S, P, Se, N, NR_{15},
S(O), Se (O), P-OR_{15} o
P-NR_{15}R_{16},
en los que R_{15} y R_{16} son
independientemente un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un grupo heteroarilo o,
junto con el átomo al que están unidos, forman un grupo
heterocicloalquilo;
D_{1} es un grupo con un par de electrones
desapareados capaces de formar un enlace de hidrógeno; y
B_{1} es H, F, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo, -OR_{17}, -SR_{17}, -NR_{17}R_{18},
-NR_{19}NR_{17}R_{18} o -NR_{17}OR_{18},
en los que R_{17}, R_{18} y R_{19} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo;
y con las condiciones de que cuando D_{1} es el
grupo \equivN con un par de electrones desapareados capaces de
formar un enlace de hidrógeno, B_{1} no existe; y cuando A_{1}
es un carbono sp^{3}, B_{1} no es -NR_{17}R_{18} cuando
D_{1} es un grupo -NR_{25}R_{26} con un par de electrones
desapareados capaces de formar un enlace de hidrógeno, en el que
R_{25} y R_{26} son independientemente H, un grupo alquilo, un
grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un
grupo heteroarilo;
y formando
D1-A1-B1 opcionalmente un grupo
nitro donde A_{1} es N;
y en la que adicionalmente, cuando R_{2} o
R_{5} es
X es =CH o =CF e Y_{2} es =C, =CH o =CF,
o X e Y_{2} junto con Q' forman un anillo de
tres miembros en el que Q' es -C(R_{10})(R_{11})- o -O-,
X es -CH- o -CF e Y_{2} es -CH-, -CF- o -C(alquilo),
siendo R_{10} y R_{11} independientemente H, un halógeno o un
grupo alquilo o formando, junto con el átomo de carbono al que están
unidos, un grupo cicloalquilo o un grupo heterocicloalquilo,
o X es -CH_{2}-, -CF_{2}-, -CHF- o -S- e
Y_{2} es -O-, -S-, -N(R'_{12})-, -C(O)-,
-C(R'_{13})(R'_{14})-, -C(S)- o
C(CR'_{13}R'_{14})-
en los que R'_{12} es H, un grupo alquilo, un
grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un
grupo heteroarilo, -OR'_{13}, -NR'_{13}R'_{14},
-C(O)-R'_{13}, -SO_{2}R'_{13} o
-C(S)R'_{13} y R'_{13} y R'_{14} son
independientemente H, F o un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo,
un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un grupo heteroarilo
o, junto con el átomo al que están unidos, forman un grupo
cicloalquilo o un grupo heterocicloalquilo;
A_{2} es C, CH, CF, S, P, Se, N, NR_{15},
S(O), Se(O), P-OR_{15} o
P-NR_{15}R_{16},
en los que R_{15} y R_{16} son
independientemente un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un grupo heteroarilo o,
junto con el átomo al que están unidos, forman un grupo
heterocicloalquilo;
D_{2} es un grupo con un par de electrones
desapareados capaces de formar un enlace de hidrógeno; y
B_{2} es H, F, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo, -OR_{17}, -SR_{17}, -NR_{17}R_{18},
-NR_{19}NR_{17}R_{18} o -NR_{17}OR_{18},
en los que R_{17}, R_{18} y R_{19} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo;
y en la que adicionalmente cualquier combinación
de Y_{2}, A_{2}, B_{2} y D_{2} puede formar opcionalmente
un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o
un grupo heteroarilo;
R_{3} y R_{6} son independientemente H, F, un
grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo,
un grupo arilo, un grupo heteroarilo, -C(O)R_{17},
-OR_{17}, -SR_{17}, -NR_{19}NR_{17}R_{18} o
-NR_{17}OR_{18},
en los que R_{17}, R_{18} y R_{19} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo;
o, R_{3} y R_{6}, junto con el átomo de
carbono al que están unidos, forman un grupo cicloalquilo o un
grupo heterocicloalquilo;
R_{7} es H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo, -OR_{17}, -SR_{17}, -NR_{17}R_{18},
-NR_{19}NR_{17}R_{18} o -NR_{17}OR_{18},
en los que R_{17}, R_{18} y R_{19} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo;
o R_{7}, junto con R_{3} o R_{6} y los
átomos a los que están unidos, forma un grupo
heterocicloalquilo;
R_{20} es H, o un grupo hidroxi, un grupo
alquilo, un grupo oxo, un grupo cicloalquilo, un grupo
heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo, un grupo
acilo, un grupo sulfonilo, un grupo mercapto, un grupo alquiltio, un
grupo alcoxi, un grupo carboxi, un grupo amino, un grupo
alquilamino, un grupo dialquilamino, un grupo carbamoílo, un grupo
ariltio, un grupo heteroariltio, -OR_{17}, -SR_{17},
-NR_{17}R_{18}, -NR_{19}NR_{17}R_{18} o
-NR_{17}OR_{18},
en los que R_{17}, R_{18} y R_{19} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un
grupo acilo; y
Z y Z_{1} son independientemente H, F, un grupo
alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un
grupo arilo, un grupo heteroarilo, -C(O)R_{21},
-CO_{2}R_{21}, -CN, -C(O)NR_{21}R_{22},
-C(O)NR_{21}OR_{22}, -C(S)R_{21},
-C(S)NR_{21}R_{22},
-NO_{2}, -SOR_{21}, -SO_{2}R_{21}, -SO_{2}NR_{21}R_{22}, -SO(NR_{21})(OR_{22}), -SONR_{21}, -SO_{3}R_{21}, -PO(OR_{21})_{2}, -PO(R_{21})(R_{22}), -PO(NR_{21}
R_{22})(OR_{23}), -PO(NR_{21}R_{22})(NR_{23}R_{24}), -C(O)NR_{21}NR_{22}R_{23} o -C(S)NR_{21}NR_{22}R_{23},
-NO_{2}, -SOR_{21}, -SO_{2}R_{21}, -SO_{2}NR_{21}R_{22}, -SO(NR_{21})(OR_{22}), -SONR_{21}, -SO_{3}R_{21}, -PO(OR_{21})_{2}, -PO(R_{21})(R_{22}), -PO(NR_{21}
R_{22})(OR_{23}), -PO(NR_{21}R_{22})(NR_{23}R_{24}), -C(O)NR_{21}NR_{22}R_{23} o -C(S)NR_{21}NR_{22}R_{23},
en los que R_{21}, R_{22}, R_{23} y
R_{24} son independientemente H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo, un grupo acilo o un grupo tioacilo o en los que dos
cualquiera de R_{21}, R_{22}, R_{23} y R_{24}, junto con el
átomo o átomos a los que están unidos, forman un grupo
heterocicloalquilo;
o Z_{1}, como se define anteriormente, junto
con R_{1}, como se define anteriormente, y los átomos a los que
Z_{1} y R_{1} están unidos, forman un grupo cicloalquilo o
heterocicloalquilo,
o Z y Z_{1}, ambos como se definen
anteriormente, junto con los átomos a los que están unidos, forman
un grupo cicloalquilo o heterocicloalquilo;
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
2. Un compuesto de la reivindicación 1, en el que
R_{1} es H o F, o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
3. Un compuesto de la reivindicación 1, en el que
R_{20} es H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo
heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo,
-OR_{17}, -SR_{17}, -NR_{17}R_{18},
-NR_{19}NR_{17}R_{18} o -NR_{17}OR_{18}, siendo R_{17},
R_{18} y R_{19} independientemente H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo o un grupo acilo, o un profármaco, sal, metabolito
activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
4. Un compuesto de la reivindicación 3, en el que
R_{20} es el grupo alquilo
-C(R_{41})(R_{42})NR_{43}R_{44}, siendo:
R_{41} y R_{42} independientemente H, un
grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo,
un grupo arilo o un grupo heteroarilo; y siendo
R_{43} y R_{44} independientemente H, un
grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo,
un grupo arilo, un grupo heteroarilo, -NR_{45}R_{46},
-C(O)R_{45}, -C(S)R_{45},
-C(O)NR_{45}R_{46},
-C(S)NR_{45}R_{46},
-C(O)NR_{45}OR_{46},
-C(S)NR_{45}OR_{46}, -C(O)SR_{45},
-C(O)OR_{45}, -C(S)OR_{45},
-C(S)SR_{45}, -OR_{45}, -SR_{45},
-C(O)NR_{45}NR_{46}R_{47},
-C(S)NR_{45}NR_{46}R_{47},
-SOR_{45}, -SO_{2}R_{45}, -S(O)NR_{45}R_{46}, -S(O)NR_{45}(OR_{46}), -SO_{2}NR_{45}R_{46}, -SO_{2}NR_{45}(OR_{46}) o -SO_{3}R_{45},
-SOR_{45}, -SO_{2}R_{45}, -S(O)NR_{45}R_{46}, -S(O)NR_{45}(OR_{46}), -SO_{2}NR_{45}R_{46}, -SO_{2}NR_{45}(OR_{46}) o -SO_{3}R_{45},
en los que R_{45}, R_{46} y R_{47} son
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un grupo heteroarilo,
o en los que cualquier combinación posible de
R_{41}, R_{42}, R_{43} y R_{44} juntos forman un grupo
cicloalquilo o un grupo heterocicloalquilo;
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
5. Un compuesto de la reivindicación 4, en el que
al menos uno de R_{43} o R_{44} es -C(O)SR_{45}
o -C(O)OR_{45}, o un profármaco, sal, metabolito
activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
6. Un compuesto de la reivindicación 5, en el que
R_{45} es un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo
arilo, un grupo heterocicloalquilo o un grupo heteroarilo, o un
profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables.
7. Un compuesto de la reivindicación 6, en el que
R_{45} es un grupo alquilo C_{1}-C_{10} o un
grupo cicloalquilo, o un profármaco, sal, metabolito activo o
solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
8. Un compuesto de la reivindicación 1, en el que
al menos uno de R_{2} o R_{5} es
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente
aceptables.
9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
8, en el que D_{1} es -OR_{25}, =O, =S, \equivN, =NR_{25} o
-NR_{25}R_{26}, siendo R_{25} y R_{26} independientemente
H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo
heterocicloalquilo, un grupo arilo o un grupo heteroarilo o
formando, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, un
grupo heterocicloalquilo; o un profármaco, sal, metabolito activo o
solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
10. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
9, en el que D_{1} es =O; o un profármaco, sal, metabolito activo
o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
11. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
8, en el que A_{1} es C, CH, S o S(O); o un profármaco,
sal, metabolito activo o solvato del mismo farmacéuticamente
aceptables.
12. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
11, en el que A_{1} es C; o un profármaco, sal, metabolito activo
o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
13. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
8, en el que B_{1} es NR_{17}R_{18}, siendo R_{17} y
R_{18} independientemente H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo o un grupo acilo; o un profármaco, sal, metabolito
activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
14. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
1, en el que al menos uno de R_{2} o R_{5} es
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente
aceptables.
15. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
14, en el que D_{2} es -OR_{25}, =O, =S, \equivN, =NR_{25}
o -NR_{25}R_{26}, siendo R_{25} y R_{26} independientemente
H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo
heterocicloalquilo, un grupo arilo o un grupo heteroarilo o
formando, junto con el átomo o átomos a los que están unidos, un
grupo heterocicloalquilo; o un profármaco, sal, metabolito activo o
solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
16. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
15, en el que D_{2} es =O; o un profármaco, sal, metabolito
activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
17. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
14, en el que A_{2} es C, CH, S o S(O); o un profármaco,
sal, metabolito activo o solvato del mismo farmacéuticamente
aceptables.
18. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
17, en el que A_{2} es C; o un profármaco, sal, metabolito activo
o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
19. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
14, en el que B_{2} es -NR_{17}R_{18}, siendo R_{17} y
R_{18} independientemente H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo o un grupo acilo; o un profármaco, sal, metabolito
activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
20. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
1, en el que A_{1} es C, CH, S o S(O) o en el que A_{2}
es C, CH, S o S(O); o un profármaco, sal, metabolito activo
o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables.
21. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
1, en el que Z y Z_{1} son independientemente H, un grupo arilo o
un grupo heteroarilo, -C(O)R_{21},
-CO_{2}R_{21}, -CN, -C(O)NR_{21}R_{22},
-C(O)NR_{21}OR_{22}, -C(S)R_{21},
-C(S)NR_{21}R_{22}, -NO_{2}, -SOR_{21},
-SO_{2}R_{21}, -SO_{2}NR_{21}R_{22},
-SO(NR_{21})(OR_{22}), -SONR_{21}, -SO_{3}R_{21},
-C(O)NR_{21}NR_{22}R_{23} o
-C(S)NR_{21}NR_{22}R_{23};
siendo R_{21}, R_{22} y R_{23}
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo, un
grupo acilo o un grupo tioacilo, o formando dos cualquiera de
R_{21}, R_{22} y R_{23}, junto con el átomo o átomos a los
que están unidos, un grupo heterocicloalquilo;
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
22. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
1, en el que M es O.
23. Un compuesto que tiene la fórmula X:
en la
que:
R_{61} es H, F o un grupo alquilo;
R_{62} se selecciona de uno de los siguientes
grupos:
en los
que:
R_{35} es H, un grupo alquilo, un grupo arilo,
-OR_{38} o -NR_{38}R_{39},
siendo R_{38} y R_{39} independientemente H,
un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo
heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo o un grupo
acilo; y
R_{36} es H o un grupo alquilo,
o R_{35} y R_{36}, junto con el átomo de
nitrógeno al que están unidos, forman un grupo heterocicloalquilo o
un grupo heteroarilo;
R_{37} es un grupo alquilo, un grupo arilo o
-NR_{38}R_{39}, siendo R_{38} y R_{39} como se definen
anteriormente;
R_{50} es H, un grupo alquilo, un grupo arilo,
-OR_{38}, -SR_{39}, -NR_{38}R_{39},
-NR_{40}NR_{38}R_{39} o -NR_{38}OR_{39}, o R_{50} y
R_{36}, junto con los átomos a los que están unidos, forman un
grupo heterocicloalquilo;
siendo R_{38} y R_{39} como se definen
anteriormente y siendo R_{40} H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo
heteroarilo o un grupo acilo; y
n es 0, 1 ó 2;
R_{63} es H o un grupo alquilo;
R_{64} es H, un grupo alquilo, un grupo
cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo o un
grupo heteroarilo;
R_{65} es H o un grupo alquilo;
R_{66} es H, un grupo acilo, un grupo alquilo,
un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo,
un grupo sulfonilo o un grupo heteroarilo;
R_{67} es H o un grupo alquilo; y
Z y Z_{1} son independientemente H, F, un grupo
alquilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo, un
grupo arilo, un grupo heteroarilo, -C(O)R_{21},
-CO_{2}R_{21}, -CN, -C(O)NR_{21}R_{22},
-C(O)NR_{21}OR_{22}, -C(S)R_{21},
-C(S)NR_{21}R_{22}, -NO_{2},
-SOR_{21}, -SO_{2}R_{21}, -SO_{2}NR_{21}R_{22}, -SO(NR_{21})(OR_{22}), -SONR_{21}, -SO_{3}R_{21}, -PO(OR_{21})_{2}, -PO(R_{21})(R_{22}), -PO(NR_{21}R_{22})
(OR_{23}), -PO(NR_{21}R_{22})(NR_{23}R_{24}), -C(O)NR_{21}NR_{22}R_{23} o -C(S)NR_{21}NR_{22}R_{23},
-SOR_{21}, -SO_{2}R_{21}, -SO_{2}NR_{21}R_{22}, -SO(NR_{21})(OR_{22}), -SONR_{21}, -SO_{3}R_{21}, -PO(OR_{21})_{2}, -PO(R_{21})(R_{22}), -PO(NR_{21}R_{22})
(OR_{23}), -PO(NR_{21}R_{22})(NR_{23}R_{24}), -C(O)NR_{21}NR_{22}R_{23} o -C(S)NR_{21}NR_{22}R_{23},
siendo R_{21}, R_{22}, R_{23} y R_{24}
independientemente H, un grupo alquilo, un grupo cicloalquilo, un
grupo heterocicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heteroarilo, un
grupo acilo o un grupo tioacilo o formando dos cualquiera de
R_{21}, R_{22}, R_{23} y R_{24}, junto con el átomo o
átomos a los que están unidos, un grupo heterocicloalquilo,
o Z y Z_{1}, ambos como se definen
anteriormente, junto con los átomos a los que están unidos, forman
un grupo heterocicloalquilo;
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
24. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
23, en el que R_{66} es el grupo acilo
-C(O)OR_{68} o el grupo acilo
-C(O)SR_{68}, siendo R_{68} un grupo alquilo, un
grupo cicloalquilo, un grupo arilo, un grupo heterocicloalquilo o un
grupo heteroarilo, o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
25. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
4, que tiene la fórmula II:
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{42}, R_{43} y Z son H, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2}, y R_{3}, R_{41},
Z_{1} y R_{44} se seleccionan de uno de los siguientes
grupos:
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 143
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 144
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
145 y R_{44} es 146
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 147
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 148
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 149
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 150
R_{3} es CH_{2}Ph, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 151
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
R_{41} es CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 152
y
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
R_{41} es CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es 153
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
26. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
4, que tiene la fórmula III:
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{42}, R_{43} y Z son H, R_{3} es CH_{2}Ph, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es
155
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
27. Un compuesto de fórmula IV:
en la
que:
R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7} y R_{42} son
H, R_{2} es CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2} y R_{3},
Z, Z_{1}, R_{41} y R_{44} se seleccionan de uno de los
siguientes grupos:
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
Z es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es CH_{2}Ph
y R_{44} es 157
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
158
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
159
R_{3} es CH_{2}(p-CF_{3})Ph,
Z es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
160
R_{3} es CH_{2}(p-CF_{3})Ph,
Z es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
161
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
Z y Z_{1} juntos forman 162 (en
el que * indica el punto de unión y el grupo carbonilo está en cis
con respecto al grupo R_{1}), R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
163
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es CH_{2}Ph y
R_{44} es 164
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
165
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
Z es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
166
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
Z es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
167
R_{3} es CH_{2}Ph, Z es H, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
C(CH_{3})_{3} y R_{44} es
168
R_{3} es CH_{2}(p-CH_{3})Ph,
Z es H, Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
169
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es ciclohexilo y
R_{44} es 170
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
171
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
172
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
173
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es 174
R_{41} es CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
175
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es 176
R_{41} es CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
177
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es 178
R_{41} es CH(CH_{3})_{2} y
R_{44} es 179
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
180
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es 181
R_{41} es CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
182
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{2}OH, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
183
y
R_{3} es CH_{2}(p-F)Ph, Z es H,
Z_{1} es CO_{2}CH_{2}CH_{3}, R_{41} es
CH(CH_{3})_{2} y R_{44} es
184
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
28. Una composición que comprende al menos un
compuesto de fórmula II:
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{42}, R_{43} y Z son H, R_{3} es CH_{2}Ph, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es
186
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables, y al menos un compuesto de
fórmula III:
en la que R_{1}, R_{5}, R_{6}, R_{7},
R_{42}, R_{43} y Z son H, R_{3} es CH_{2}Ph, R_{2} es
CH_{2}CH_{2}C(O)NH_{2}, R_{41} es
CH_{2}CH(CH_{3})_{2}, Z_{1} es
CO_{2}CH_{2}CH_{3} y R_{44} es
188
o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables.
29. Una composición farmacéutica que
comprende:
- a)
- una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto como se define en la reivindicación 1 o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo farmacéuticamente aceptables; y
- b)
- una carga, diluyente, vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptables.
30. Uso del compuesto de acuerdo con la
reivindicación 1 o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables para la preparación de un
medicamento para el tratamiento de un estado patológico de un
mamífero mediado por la actividad de la proteasa picornavírica.
31. Uso del compuesto de acuerdo con la
reivindicación 1 o un profármaco, sal metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables para la preparación de un
medicamento para inhibir la actividad de una proteasa 3C
picornavírica.
32. Un método para inhibir in vitro la
actividad de una proteasa 3C picornavírica, que comprende: poner en
contacto la proteasa 3C picornavírica con una cantidad eficaz de al
menos un compuesto como se define en la reivindicación 1 o un
profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables.
33. Uso del compuesto de acuerdo con la
reivindicación 1 o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato
del mismo farmacéuticamente aceptables para la preparación de un
medicamento para inhibir la actividad de una proteasa
rinovírica.
34. Un método para inhibir in vitro la
actividad de una proteasa rinovírica, que comprende: poner en
contacto la proteasa rinovírica con una cantidad eficaz de al menos
un compuesto como se define en la reivindicación 1 o un profármaco,
sal, metabolito activo o solvato del mismo farmacéuticamente
aceptables.
35. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
1 o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables, siendo dicha actividad
antipicornavírica una actividad antirrinovírica.
\newpage
36. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación
1 o un profármaco, sal, metabolito activo o solvato del mismo
farmacéuticamente aceptables, siendo dicha actividad
antipicornavírica una actividad antivírica Coxsackie.
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