EP4561356A1 - Composition antifongique pulverisable utilisable en agriculture- procede et utilisation associes - Google Patents

Composition antifongique pulverisable utilisable en agriculture- procede et utilisation associes

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EP4561356A1
EP4561356A1 EP23752007.7A EP23752007A EP4561356A1 EP 4561356 A1 EP4561356 A1 EP 4561356A1 EP 23752007 A EP23752007 A EP 23752007A EP 4561356 A1 EP4561356 A1 EP 4561356A1
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EP
European Patent Office
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equal
composition
composition according
mass percentage
resveratrol
Prior art date
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Pending
Application number
EP23752007.7A
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German (de)
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Inventor
Aude BERNARDON MERY
Francis BUCAILLE
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Gaiago
Original Assignee
Gaiago
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Publication date
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Pending legal-status Critical Current

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    • A01N31/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic oxygen or sulfur compounds
    • A01N31/08—Oxygen or sulfur directly attached to an aromatic ring system
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    • A01N43/90—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having two or more relevant hetero rings, condensed among themselves or with a common carbocyclic ring system
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    • A01N65/40—Liliopsida [monocotyledons]
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    • A01N65/42—Aloeaceae [Aloe family] or Liliaceae [Lily family], e.g. aloe, veratrum, onion, garlic or chives

Definitions

  • the present invention relates to an antifungal composition usable in agriculture which comprises compounds of natural origin as active agents.
  • Pesticides are a major source of environmental pollution because they accumulate in the soil and diffuse into groundwater.
  • a large quantity of pesticides is used to treat particular crops such as vines, fruit trees, vegetables or other plants grown in intensive agriculture. This is also the case for industrial crops like potatoes and cereals like wheat, for example.
  • a good approach to reducing the quantity of plant protection products is, on the one hand, to target plant diseases for which the greatest quantities of plant protection products are used.
  • WO 2007/139382 Al describes a composition for controlling foliar fungal pathologies of apple trees such as those caused by Venturia inaequalis and Podosphaera leucotricha.
  • This document states that yucca extract and potassium bicarbonate have been shown to be active (separately) on leaves at certain concentrations. The combination of yucca extract with sulfur was not found to be more active. Copper in the form of copper hydroxide is the most active agent on leaves and fruits.
  • RU 2204 248 Cl describes a treatment for damage to fruit and trees. This damage includes sunburn, injury, grafting.
  • the product described contains tripoli stone and a fungicide.
  • the fungicide can be copper sulfate, iron sulfate or copper oxychloride (Cu(OH)2).
  • the product is intended for bark.
  • Tripoli stone contains oxides such as iron oxide, aluminum oxide, calcium oxide, magnesium oxide, sodium oxide and potassium oxide. The product is not applied to the leaves. Additionally, this publication does not cite any fungal pathogens.
  • composition of plants varies greatly depending on where they grow, the season and the stage at which they are harvested for use. Using a given plant to make an extract or infusion does not consistently produce a product that contains the active ingredients at their effective dose.
  • a composition can be effective against a given pathogen on tomatoes but be ineffective against the same pathogen in another plant.
  • pathogens whose life cycle passes through the soil are more difficult to control on plants with low foliage (vegetables for example) than plants with tall vegetation (trees and shrubs) because of contamination by the “splash effect”. » (splashing from mud during rain, for example).
  • a technical problem that the present invention proposes to solve is to provide an antifungal composition containing active ingredients of natural origin which can be easily produced according to reproducible and standardized processes to result in a composition whose active contents are identified, standardized and consistent agronomic results.
  • Another technical problem that the present invention aims to solve is to provide an antifungal composition which is harmless to animals and in particular to mammals including humans.
  • Another technical problem that the present invention aims to solve is to provide an antifungal composition which is not phytotoxic.
  • Another technical problem that the present invention proposes to solve is to provide an antifungal composition in particular as mentioned above which is effective against at least one pathogen chosen from: Alternaria solani, Plasmopara viticola, Septoria tritici, Fusarium graminearum, Erysiphe necator. Pythium ultimum, Tilletia caries, Zymoseptoria tritici and Rhizoctonia solani.
  • Another technical problem that the present invention proposes to solve is to provide an antifungal composition in particular as mentioned above, which is effective for preventive and/or curative treatment on a plant chosen in particular from the plants of the following families: Brassicaceae including rapeseed , Fabaceae including soya, Vitaceae including vines, Poaceae including wheat, corn, Rosaceae including apple and pear trees, Solanaceae including potato, tomato, eggplant, Alliaceae including onion, garlic, shallot and leeks, Apiaceae including carrots, Asteraceae including lettuce, artichoke, and sunflower, and Chenopodiaceae including beets.
  • Another technical problem that the present invention proposes to solve is to provide an antifungal composition which is effective against at least one fungal pathogen and preferably effective against several pathogens, chosen from: Altemaria solani, Septoria tritici, Plasmopara viticola, Fusarium graminearum and Erysiphe necator, Pythium ultimum, Tilletia caries, Zymoseptoria tritici and Rhizoctonia solani and in particular against A. solani in tomatoes and Plasmopara viticola in vines.
  • pathogens chosen from: Altemaria solani, Septoria tritici, Plasmopara viticola, Fusarium graminearum and Erysiphe necator, Pythium ultimum, Tilletia caries, Zymoseptoria tritici and Rhizoctonia solani and in particular against A. solani in tomatoes and Plasmopara viticola in vines.
  • Another technical problem that the present invention proposes to solve is to provide an antifungal composition which is harmless to the environment and easily degradable.
  • Another technical problem that the invention proposes to solve is to provide an antifungal composition usable in agriculture which is versatile, that is to say effective against at least two fungal pathogens of the soil and/or foliar.
  • Another problem that the present invention aims to solve is to provide a composition which can be diluted before its use and which, depending on its dilution, can be particularly effective against at least one given pathogen on at least two different plants.
  • the present invention relates to an antifungal composition usable in agriculture, which contains molybdenum ions, in particular molybdate, and as active ingredient, a combination of at least one compound chosen from resveratrol, smilagenin and hecogenin and preferably three aforementioned compounds with molybdenum/molybdate ions and at least one trace element chosen from iron, potassium, magnesium, copper, manganese ions and in particular a mixture of these 5 ions.
  • the composition contains resveratrol, more particularly trans resveratrol.
  • the composition contains resveratrol, smilagenin and hecogenin. These compounds are preferably contained in yucca juice.
  • composition may also contain resveratrol and hecogenin or resveratrol and smilagenin.
  • Yucca extracts which were known as antifungal agents contain numerous compounds including saponins which were considered active. However, many saponins can be harmful to human health. Smilagenin and hecogenin, which are steroidal saponins, are present only in small quantities in the aqueous extract of yucca. It was therefore not clear whether these particular saponins could have an antifungal effect at very low doses.
  • resveratrol, smilagenin and hecogenin are known to be harmless to human health.
  • Resveratrol is known for its anti-inflammatory and antioxidant effects.
  • Smilagenin is the subject of studies for its use in the treatment of orphan diseases, particularly neurological ones.
  • Hecogenin is used to alleviate colitis or to treat atopic dermatitis and bronchial hyperreactivity.
  • composition of the invention therefore proves effective as an antifungal and harmless to mammals, including humans.
  • Smilagenin, hecogenin and resveratrol can be extracted and purified from the juice extracted from plants.
  • resveratrol is present in fruit juices, particularly grape juices. Saponins are present in tea, chickpeas, climbing ivy leaves, soapwort, quinoa, fenugreek leaves, licorice root, ginseng roots, horse chestnut cotyledons, leaves of white broth and dioscora tubers, for example. It is therefore possible to use juices, infusions, extracts or decoctions of these plants possibly in a mixture to obtain the composition of the invention.
  • Smilagenin, hecogenin and resveratrol can also be synthesized. It is thus easy to produce a standardized composition.
  • the aforementioned ions can be introduced in the form of salts, in particular sulfate, chloride, iodide, ammonide, hydrochloride, oxychloride, hydroxide, sulfonate, carbonate, formate, acetate, gluconate, lactate, citrate and sodium and ammonium salts.
  • the antifungal composition of the invention may also comprise one or more chelating agents chosen from EDTA, HEEDTA, DTPA, EDDHA, EDDHMA, EDDCHA, EDDHSA, IDHA, HBED, and/or at least one complexing agent chosen from lignosulfonic acid. and ethanolamine. These agents increase the solubility of metal ions and thus stabilize the composition of the invention when it contains a solvent.
  • manganese, iron, magnesium and copper can preferably be introduced in the form of sulfates.
  • the molybdate can preferably be introduced in the form of sodium molybdate.
  • Potassium is preferably introduced in the form of potassium chloride.
  • composition of the invention can be liquid or viscous or in powder form.
  • it can consist of the aforementioned ingredients and in particular consist of a mixture of resveratrol, smilagenin, hecogenin and salts of the six aforementioned ions. It can also be in the form of a suspension.
  • the vehicle contains a vehicle.
  • the vehicle is not limited according to the invention.
  • R is preferably water.
  • the composition of the invention is preferably sprayable and/or capable of coating a solid.
  • the composition may be a solution, a biphasic mixture, an emulsion or a micellar solution. It is advantageously an aqueous solution.
  • the composition contains a mass percentage of trans resveratrol greater than or equal to 0.01 and/or a mass percentage of hecogenin greater than or equal to 0.00032 and/or a mass percentage of smilagenin greater than or equal to 0.004.
  • the composition may contain resveratrol and hecogenin or resveratrol and smilagenin. It may also contain all three compounds.
  • the composition contains the aforementioned ions with the exception of the copper ion and/or the manganese ion.
  • the composition contains, as a trace element, molybdenum in the form of molybdate, magnesium and potassium.
  • some of the active compounds are contained in yucca trunk juice and the composition therefore contains yucca trunk juice, which contains the three aforementioned compounds.
  • the composition of the invention contains a mass percentage of yucca trunk juice greater than or equal to 0.0012.
  • table 19 groups together the main preferred degrees of hydration of the salts.
  • composition of the invention can be presented in two forms, a diluted form which can be used as is or a concentrated form to be diluted or dissolved before use.
  • the composition of the invention may contain a mass percentage of yucca juice greater than or equal to: 1; 2; 2.5; 3; 3.5; 4; 4.5;5; 5.5; 6; 6.5 or 10.
  • the mass percentage of yucca juice can, whatever the embodiment of the invention, can be equal to: 0.025; 0.03; 0.05; 0.06; 0.075; 0.09; 0.1; 0.15; 0.18; 0.2; 0.25; 0.3; 0.6; 1 (diluted form); 1.5; 2; 2.5, 3; 3.5; 4; 4.5;5; 5.5; 6; 6.5; or 10 (concentrated form).
  • the mass percentage of yucca juice can be less than 30 or 20.
  • the composition of the invention may contain a mass percentage of iron greater than or equal to 0.1 and less than or equal to 4 or 5 and/or a mass percentage of copper greater than or equal to 0, 1 and less than or equal to 4 or 5 and/or a mass percentage of potassium greater than or equal to 0.05 and less than or equal to 0.5 and/or a mass percentage of molybdenum greater than or equal to 0.01 and less than or equal to 0.05 and/or a mass percentage of manganese greater than or equal to 0.1 and less than or equal to 5 and/or a mass percentage of magnesium greater than or equal to 0.01 and less than or equal to 1.
  • the composition of the invention may contain more particularly a mass percentage of iron greater than or equal to 0.6 and less than or equal to 0.9 and in particular equal to 0.77 and/or a percentage mass of copper greater than or equal to 0.3 and less than or equal to 0.45 and in particular equal to 0.375 and/or a mass percentage of magnesium greater than or equal to 0.12 and less than or equal to 0.19 and in particular equal to 0 .15, and/or a mass percentage of potassium greater than or equal to 0.09 and less than or equal to 0.13 and in particular equal to 0.109 and/or a mass percentage of molybdenum greater than or equal to 0.0035 and less than or equal to 0.005 and in particular equal to 0.004 and/or a mass percentage of manganese greater than or equal to 0.9 and less than or equal to 2.7 and in particular equal to 1.18 or 2.24.
  • composition of the invention may, in addition, contain at least one ingredient chosen from humic acids, boron salts, zinc salts, acetic acid, citric acid, fructose, yeasts in particular Saccharomyces cerevisiae, iodine salts, lignosulfates, selenate salts, tungstate salts and liquid coffee extract.
  • humic acids boron salts, zinc salts, acetic acid, citric acid, fructose, yeasts in particular Saccharomyces cerevisiae, iodine salts, lignosulfates, selenate salts, tungstate salts and liquid coffee extract.
  • it contains acetic acid, citric acid, fructose, iodine salts in particular potassium iodide, lignosulfates, in particular calcium lignosulfates, salts tungstate, in particular sodium tungstate, selenate salts, in particular sodium selenate, liquid coffee extract, and yeast extract in particular Saccharomyces cerevisiae.
  • the composition of the invention in its concentrated or diluted form contains the 6 ions in combination, each present in particular in the aforementioned ranges.
  • the composition contains iron, magnesium, potassium and molybdenum.
  • the composition also contains, as active ingredient, humic acids and/or boron and/or zinc.
  • Boron can be in the form of boron ethanolamine, for example.
  • each of the embodiments contains as a trace element zinc and/or iron and/or manganese and/or copper.
  • the mass percentage of boron is equal to or greater than 0.01 and less than or equal to 1 and more particularly greater than or equal to 0.04 and equal to or less than 0.06 and in particular equal to 0.05.
  • the mass percentage of humic acids is equal to or greater than 0.01 and less than or equal to 10 and more particularly greater than or equal to 0.17 and equal to or less than 0.26 and in particular equal to 0.21.
  • Zinc can be in the form of zinc sulfate.
  • the present invention also relates to a sprayable antifungal composition, usable in agriculture which contains the composition of the invention diluted in a solvent and in particular water; more particularly the sprayable composition may contain from 0.05% to 10% by weight of the composition of the invention and in particular 0.05%, 0.2%, 0.4%, 0.5%, 1%, 2%, 3%, 6% or 10% by mass of the aforementioned composition, diluted in a solvent and in particular water.
  • the sprayable composition has an acidic pH greater than or equal to 3.2. At these pH values, the sprayable composition appears, at effective doses, to be non-phytotoxic.
  • the present invention also relates to the use of a composition or a sprayable composition according to the invention as an antifungal against at least one pathogen chosen from Alternaria solani, Septoria tritici, Plasmopara viticola, Fusarium graminearum and Erysiphe necator, Pythium ultimum and Rhizoctonia solani.
  • pathogen chosen from Alternaria solani, Septoria tritici, Plasmopara viticola, Fusarium graminearum and Erysiphe necator, Pythium ultimum and Rhizoctonia solani.
  • the present invention also relates to a method of treating a plant in particular chosen from plants of the following families: Brassicaceae including rapeseed, Fabaceae including soya, Vitaceae including vines, Poaceae including wheat, corn, Rosaceae including apple pear trees, Solanaceae including potato, tomato, eggplant, Alliaceae including onion, garlic, shallot or leeks, Apiaceae including carrots, Asteraceae including lettuce, artichoke or sunflower and Chenopodiaceae including beet.
  • the sprayable composition is applied to the leaves of said plant or the composition or said sprayable composition according to the invention is applied to the seeds of said plant.
  • the present invention also relates to the use of resveratrol and/or smilagenin and/or hecogenin and in particular a mixture of trans resveratrol and smilagenin and/or hecogenin as an antifungal and in particular as an antifungal against a foliar fungal pathogen or a soil fungal pathogen chosen in particular from Fusarium graminearum, Pythium ultimum and Rhizoctonia solani.
  • the present invention also relates to the use of a yucca juice for the treatment of a plant chosen in particular from vines, nightshades including potatoes, tomatoes and eggplants, cereals including wheat and corn. against at least one fungal pathogen living in the soil and in particular chosen from Alternaria solani, Septoria tritici, plasmopara viticola, Fusarium graminearum and Erysiphe necator, Pythium ultimum and Rhizoctonia solani.
  • the present invention also relates to an antifungal composition which contains as active ingredients at least one compound chosen from resveratrol, smilagenin and hecogenin and preferably which contains these three compounds and humic acids and/or boron.
  • This composition can be declined according to the same embodiments as the aforementioned composition, with regard to the concentrations of active agents, the vehicles or solvents and the pH, in particular. It can also be diluted in water according to the same dilutions as for the aforementioned sprayable composition. It can also be sprayed on the same plants as those described with reference to the composition described in the present application and containing at least one ion. Boron can be found in the form of boron ethanolamine.
  • the present invention also relates to an antifungal composition which contains as active ingredients at least one compound chosen from resveratrol, smilagenin and hecogenin and preferably which contains these three compounds and zinc, in particular zinc sulfate, for example example.
  • This composition can be declined according to the same embodiments as the aforementioned composition with regard to the concentrations of active agent, the vehicles or solvent and the pH, in particular. It can also be diluted in water according to the same dilutions as for the aforementioned sprayable composition. It can also be sprayed on the same plants as those described with reference to the composition described in the application and containing at least one ion.
  • trans-resveratrol refers to 5-[(E)-2-(4-hydroxyphenyl)-ethenyl] benzene-1,3-diol.
  • Similarin refers to (25R)-5beta-Spirostan-3beta-ol.
  • hecogenin refers to (3p,5a,25)-3-Hydroxyspirostan-12-one
  • mass percentage of A designate the mass fraction of A in a mixture of at least two constituents.
  • volume percentage of A designate the volume fraction of A in a mixture of at least two constituents.
  • yucca trunk juice designate an aqueous composition containing in particular resveratrol, saponins including smilagenin, trans-3,3',5,5'-tetrahydroxy-4'-methoxystilbene, larixinol and phenol derivatives. designated by the terms yuccaols A, B, C, D and E of yuccaone A and hecogenin.... Steroidal saponins represent only 6.8% by mass of saponins. Yucca trunk juice may also contain juice from yucca leaves but preferably only contains the juice from the trunk.
  • yucca refers to all plants of the yucca genus and preferably yucca schidigera or yucca gloriosa.
  • the juice may be a mixture of juices from different types of yucca.
  • the yucca trunk juice is preferably heated to a temperature between 80°C and 120°C for a period equal to or greater than 1 min and equal to or less than 10 min and preferably heated to 100°C for 3 min.
  • boron ethanolamine refers to the complex formed by the combination of ethanolamine and boric acid.
  • humic acids refers to high molecular weight, negatively charged polymers, black to dark brown in color, resulting from a process of oxidative condensation of phenolic compounds and linked to amino acids, peptides and polysaccharides. They are present in humus.
  • Fig. 1 represents the percentage of sporulating leaf surface depending on the treatments
  • the reference GA342 designates the preferred mixture which makes it possible to obtain by dilution the composition of the invention, the volume percentage is indicated next to it, the control is pure water .
  • the yucca juice used is obtained by crushing and pressing Yucca schidigera trunks. The liquid obtained was heated to 100°C for 3 min so as to be sterilized. This juice is used in all the experiments documented in the application.
  • Yucca juice is a complex mixture. It contains a large number of saponins, including steroidal saponins. It also contains resveratrol, especially in its trans form.
  • the inventors have identified compounds in yucca juice that are effective as antifungal agents: these are resveratrol, smilagenin and hecogenin.
  • Aqueous solutions containing a given concentration of resveratrol or smilagenin were tested on a calibrated suspension of Alternaria solani spores.
  • the % indicated in the tables with reference to the compositions tested are % by mass; the inhibition produced by the compositions tested is indicated in % in the tables.
  • trans-3,4',5-trihydroxystilbene (resveratrol trans form) of the stilbene family at a concentration of 100 ppm in water is capable of reducing by 54.7%%. growth of A. solani.
  • smilagenin which is a steroidal saponin, reduces the growth of A. solani by 30% at a concentration of 40 ppm in water.
  • Hecogenin has no antifungal action on the pathogen studied. It is likely that the antifungal action of yucca juice comes mainly from the combined presence of resveratrol and smilagenin in yucca juice.
  • the reduced antifungal action of yucca juice is due to the lower concentration of resveratrol and smilagenin in yucca juice. Indeed, in the table above resveratrol and smilagenin are used diluted in water. As the concentration of smilagenin and resveratrol in yucca juice is lower than in the tested compositions of smilagenin and resveratrol, the antifungal activity of yucca juice is lower at a dose of 2.5%. By increasing the concentration of yucca, the quantities of resveratrol and smilagenin increase in the same proportions and the effectiveness of Yucca juice becomes notable at 10%. Synergy of active compounds with trace elements
  • compositions described below have a density equal to or greater than 1.15 and equal to or less than 1.2.
  • the pH of each solution is acidic. It is for example adjusted by adding citric acid and/or acetic acid.
  • compositions were prepared:
  • Composition VI contains the ingredients indicated in the following Table 3. Table 3
  • the salts are sulfates except for potassium which is introduced in the form of potassium chloride Molybdate is introduced in the form of sodium molybdate.
  • Composition V6 contains the ingredients indicated in Table 4 below.
  • the salts are sulfates except for potassium which is introduced in the form of potassium chloride.
  • Molybdate is in the form of sodium molybdate.
  • the salts used are the same as those used in composition V6.
  • Table 6 below groups together the ECso and EC95 values of the different mixtures tested on A. solani.
  • compositions VI and V6 diluted in water are effective against A. solani, which is not the case for the composition containing only yucca juice at 2 .5% or only yucca juice and one of the trace elements.
  • composition V 1 is effective as soon as it is at a mass percentage of 0.05% while composition V6 is effective against R. solani from 1% or 2%.
  • yucca juices 1 and 2 which are yucca schidigera juices from different producers do not have the same effectiveness on R. Solani.
  • Yucca juice 1 has an effectiveness of 0 while “Yucca juice 2” records a performance of 95.2%.
  • This difference in effectiveness clearly shows that it is not possible to produce a standard effective composition in a reproducible manner by directly using products derived from plants.
  • compositions VI and V6 are manufactured from the aforementioned yucca juice 1.
  • Evaluations were made with a 96-well microtiter assay to evaluate the in vitro fungicidal activity of each solution. A range of concentrations (up to 8) of each solution was tested against a calibrated suspension of Fusarium graminearum spores and against a calibrated suspension of Zymoseptoria tritici.
  • Fusarium graminearum belongs to the species Gibberella zeae, ascomycete fungi of the Nectriaceae family. This fungus is the pathogenic agent of fusarium wilt in cereals and corn, causing heavy yield losses. It causes contamination of harvested grains with mycotoxins (fusariotoxins) which are dangerous for human and animal health. This disease develops both on seeds in the soil and on foliage during the season.
  • mycotoxins mycotoxins
  • Septoria tritici is an ascomycete fungus responsible for wheat septoria. Its average harmfulness is estimated at 17 q/ha (up to 50 q/ha in the most exposed situations). By its frequency and the extent of the potential damage, 5. tritici is the most important disease of soft wheat.
  • Tables 10 and 11 The same experiments as mentioned above were carried out. The results are grouped in Tables 10 and 11 below. The percentages indicated are mass percentages. Table 10
  • composition VI shows total effectiveness at a concentration of 6% by mass of composition VL. At this concentration, the water + yucca juice mixture shows 100% effectiveness.
  • the diluted V6 composition has a effectiveness as soon as it is present at 0.5% or 1% by mass. It turns out to be more effective than composition VI.
  • the addition of trace elements increases the antifungal character of yucca juice and therefore the antifungal character of at least one of the identified active compounds which are resveratrol, smilagenin and hecogenin.
  • the antifungal nature of the active compounds was tested on S. tritici. The results are grouped in Table 12 below. The numbers show the % inhibition of pathogen growth.
  • Resveratrol and hecogenin show effectiveness against Septoria tritici at very low concentrations, 100 ppm and 20 ppm respectively.
  • c) Test on P. ultimum The same experiments as mentioned above were carried out. The results are grouped in Tables 13 and 14 below. The percentages indicated are mass percentages except for the % inhibition.
  • composition VI provides 100% effectiveness at low concentrations, from 0.05% (Table 13).
  • the combination of the active molecules resveratrol and hecogenin combined with trace elements makes it possible to achieve complete effectiveness at the lowest concentrations, from 0.05%. d) Test on Rhiz. octonia solani
  • composition VI is more active than composition V6 probably due to the presence of humic acids and/or boron salt.
  • the objective is to evaluate the direct in vitro effect of the composition of the invention on the mobility of zoospores of grape downy mildew (Plasmopara viticola) suspended in water.
  • Downy mildew (Plasmopara viticola) is a population strain originating from Burgundy vineyards, maintained by weekly transplanting on plants.
  • the experiment is carried out in vitro: sporangia of Plasmopara viticola are collected from a sporulating vine leaf (inoculated 7 days previously) and cultured in suspension in ultrapure water at a concentration of at least 106 sporangia/ml. The sporangia release mobile zoospores within an hour. This mobility is checked at the end of the experiment on the control suspension.
  • Dilutions from sporangia solutions are prepared extemporaneously in ultrapure water to obtain a final zoospore concentration of 0.33% by mass.
  • the diluted composition VI blocks the mobility of the zoospores of Plasmopara viticola at the reference concentration of 0.033% (v/v). Even diluted to 0.0033%, the mixture blocks or disrupts the mobility of the pathogen's zoospores.
  • the density of the product being equal to or greater than 1.15 and equal to or less than 1.2
  • the mass percentage of composition VI equivalent to the dilution of 0.0033 is equal to 0.004% which is equivalent to a mass percentage of juice of yucca equal to 0.00012%.
  • Yucca juice alone at a dose of 0.33% has an action against the mobility of zoospores at a concentration 100 times higher (0.33%).
  • the plant material consists of 2-month-old herbaceous cuttings of the Marselan variety (Grenache x Cabemet-Sauvignon) multiplied in INRAE greenhouses, grown in 0.5 L pots (2/3 potting soil - 1/3 perlite) . At 2 months, the cuttings have 5-6 spreading leaves.
  • the downy mildew inoculum (Plasmopara viticola) is a population strain originating from the Burgundian vineyard, maintained by weekly transplanting on plants. A minimum of five plants are used per modality.
  • composition of the invention to be tested is sprayed on the cuttings with a manual sprayer below the runoff point, on both sides of the leaves.
  • the droplets are allowed to dry for 2 to 3 hours before placing the plants back in the greenhouse.
  • the plants are inoculated 48 hours post-treatment, by spraying a suspension of Plasmopara viticola sporangia (104 sporangia/ml) prepared extemporaneously, on the underside of the leaves. After inoculation, the plants are placed in a humid tent for at least 3 hours to allow the zoospores to encyst, then they are placed back in a greenhouse. In vines, very young leaves (approximately 1/3 of their final size) and older leaves are resistant to the disease (ontogenic resistance). For this reason, the observation of the disease generally takes place on 2 sensitive leaves designated row 1 leaf and row 2 leaf. Row 1 corresponds to a leaf which has reached approximately 2/3 of its final surface, the Row 2 leaf, located immediately below that of row 1, is an adult-sized leaf, still susceptible to mildew.
  • the first test was carried out with the initially recommended doses of IL, 2L and 3L/ha diluted in 150 L/ha, i.e. 6.67 ml/L, 13.33 ml/L and 20 ml/L.
  • the following 2 experiments were carried out with lower doses: 1.67 ml/L, 3.33 ml/L and 6.67 ml/L.
  • the reference GA342 designates composition V 1 in FIG. 1. The dilution is shown next to it.
  • the means were compared with Tuckey's T-test (comparison of the solution containing composition V 1 with the water control).
  • composition VI The average effectiveness of composition VI at a dose of 0.33% over 5 tests is 98.7%.
  • effectiveness of composition VI against vine downy mildew is almost total from a dose of 1.7 mL/L or 0.17% by volume. Inhibition in in vitro conditions correlates well with that in in vivo conditions.
  • the density of the composition being equal to or greater than 1.15 and equal to or less than 1.2.
  • V6 composition it proved effective in vivo on the vine against Plasmopara viticola at a concentration of 0.50% or 2% by weight of a mother tincture containing 10% by weight of the V6 composition diluted in the water.
  • the salts are sulfates except for potassium which is used in the form of potassium chloride.
  • composition according to the invention used in the light and on a plant remains effective as an antifungal.
  • composition VI Field tests (composition VI)
  • the composition V 1 makes it possible to significantly reduce the first mildew infestations on the leaves and bunches compared to a control.
  • the dose of 31/ha improves efficiency compared to the lower doses 1 and 2 1/ha.
  • the efficiency level reaches 60% on leaves and bunches.
  • the percentage (%) is a volume percentage.
  • 0.17% indicates that 1.7mL of composition VI was dissolved in 998.3 rnL of water.
  • the solution tested contains 0.20% of composition VI.
  • compositions obtained from composition V 1 had different pHs, as indicated in Table 18 below.
  • the percentages (%) indicated are volume percentages.
  • compositions V9, VIO, GAST 1 and GAST 2 were also tested.
  • the values of EC50 and EC95 on the different pathogens were determined in vitro as previously indicated. The results are grouped in the following table 20.
  • the EC correspond to the mass percentage of VIO composition diluted in water to obtain respectively a 50% or 95% reduction in the growth of the pathogen.
  • Plasmopara It has proven effective against Plasmopara viticola and grape powdery mildew (Erysiphe necator) in vivo at dilutions in water at 0.05% or 2% by weight of a stock solution containing 10% by weight of the composition V9 shown in Table 19.
  • the GAST 1 and GAST 2 compositions are grouped in the following table 21.
  • the mass percentage refers to the compositions described in Table 19, which are diluted in water. For the mass percentage of composition indicated, an effectiveness of 100% in vitro is obtained.
  • the GAST 1 and GAST2 compositions are preferably used to treat seeds.
  • Mo designates sodium molybdate
  • Bo designates boron ethanolamine
  • Plasmopara viticola at concentrations higher than that in which they are found in the composition of the invention.
  • the AUDCP trapezoidal area
  • the method used is that of Campbell and Madden published in 990.
  • DSI stands for Disease Symptom Intensity, the intensity of disease symptoms.
  • DPI corresponds to Day Post Inoculation, the number of days following inoculation.
  • Table 25 The results in Table 25 show that compositions VI and V9 used at 2% by weight in water are very effective on vines in vivo against vine powdery mildew (Erysiphe necator).

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Abstract

La présente invention concerne une composition antifongique utilisable en agriculture, contenant des ions molybdène, notamment molybdate. De manière caractéristique, selon l'invention, elle contient, en tant qu'ingrédient actif une combinaison : - d'au moins un composé choisi parmi le resvératrol, la smilagénine et l'hécogénine et de préférence les trois composés précités avec - les ions molybdène/molybdate et - au moins un ion choisi parmi les ions fer, potassium, magnésium cuivre et manganèse et de préférence les cinq ions précités.

Description

COMPOSITION ANTIFONGIQUE PULVERISABLE UTILISABLE EN AGRICULTURE- PROCEDE ET UTILISATION ASSOCIES
Domaine technique
La présente invention concerne une composition antifongique utilisable en agriculture qui comprend comme agents actifs des composés d’origine naturelle.
Art antérieur
Les pesticides sont une importante source de pollution environnementale car ils s’accumulent dans les sols et se diffusent dans les nappes phréatiques. Une grande quantité de pesticides est utilisée pour traiter des cultures particulières comme la vigne, les arbres fruitiers, les légumes ou d’autres végétaux cultivés en agriculture intensive. C’est également le cas des cultures industrielles comme la pomme de terre et des céréales comme le blé, par exemple.
Une bonne approche pour réduire la quantité de produits phytopharmaceutiques est, d’une part de cibler les maladies des végétaux pour lesquelles les plus grandes quantités de produits phytopharmaceutiques sont utilisées.
D’autre part, il est préconisé d’utiliser des produits phytopharmaceutiques qui contiennent des ingrédients actifs d’origine naturelle afin de réduire la pollution due aux pesticides de synthèse dont les effets sur les organismes vivants et notamment l’humain sont parfois peu connus.
Des recherches ont débuté dans ce sens dont la publication intitulée « comparative studies on the effects of a yucca extract and acibenzolar-S -methyl (ASM) on inhibition of Venturia inaequalis in apple leaves » publiée dans la revue European journal of plant pathology, Kluwer academic publishers, vol. 124, n° 2 (2008-12-07) pages 187-198 décrit l’utilisation d’extrait de yucca contre Venturia inaqualis sur les feuilles du pommier.
Le document WO 2007/139382 Al décrit une composition pour le contrôle de pathologies fongiques foliaires du pommier telles que celles causées par Venturia inaequalis et Podosphaera leucotricha. Ce document indique que l’extrait de yucca et le bicarbonate de potassium se sont révélés actifs (séparément) sur les feuilles à certaines concentrations. La combinaison de l’extrait de yucca avec le soufre ne s’est pas révélée plus active. Le cuivre sous forme d’hydroxyde de cuivre est l’agent le plus actif sur les feuilles et les fruits.
Le document WO 2020/188225 Al décrit un fongicide de contact qui comprend de l’hydroxyde de magnésium sous forme de particules de taille donnée et contenant au moins 86% d’hydroxyde de magnésium. Etant donné qu’il s’agit d’un fongicide de contact, c’est le contact direct entre le produit fongicide et le fungus qui engendre la mort de ce dernier du fait du caractère très alcalin de l’hydroxyde de magnésium. L’hydroxyde de magnésium est insoluble dans l’eau. De ce fait, il doit être utilisé sous forme de suspension et nécessite souvent l’ajout d’un tensioactif pour obtenir une suspension stable.
La publication intitulée « Effect of potassium and manganese phosphites in the control of Pythium damping-off in soybean : a feasible alternative to fungicide seed treatments” de M. A. Carmona publiée dans la revue en ligne Society of Chemical Industry le 9 octobre 2017 traite de l’utilisation de phosphites. L’ion phosphite HPO32’ est actif contrairement au cation métallique.
Le document RU 2204 248 Cl décrit un traitement pour les dommages causés aux fruits et aux arbres. Ces dommages incluent les coups de soleil, les blessures, le greffage. Le produit décrit contient de la pierre de tripoli et un fongicide. Le fongicide peut être du sulfate de cuivre, du sulfate de fer ou de l’oxychlorure de cuivre (Cu(OH)2). Le produit est destiné à l’écorce. La pierre de Tripoli contient des oxydes tels que l’oxyde de fer, l’oxyde d’aluminium, l’oxyde de calcium, l’oxyde de magnésium, l’oxyde de sodium et l’oxyde de potassium. Le produit n’est pas appliqué sur les feuilles. De plus, cette publication ne cite aucun pathogène fongique.
La publication intitulée « Control of post-harvest decay of apples by pre-harvest application of ammonium molybdate” de C. Nunes publiée dans la revue Pest management science en 2001 (pages 1093-1099) (D7) décrit l’efficacité du molybdate d’ammonium contre P. expansum, Botrytis cinerea et Rhizopus stolonifer sur les pommes. Ce document indique que d’autres sels du molybdène ont été testés comme inhibiteurs de germination des spores (à savoir le molybdate de potassium et le molybdate de sodium) mais que seul le molybdate d’ammonium est efficace. Nous en déduisons donc l’ion ammonium qui est actif et non l’ion issu du molybdène.
La publication intitulée « investigations on fungicides IX the fungitoxicity, phytotoxicity and systemic fungicidal activity of some inorganic salts” de G. A. Carter publiée en 1964 dans la revue Annales of Applied biology (page 291-309) s’intéresse à l’action fongique contre Botrytis fabae. C’est la germination des spores du pathogène qui est étudiée. Le chromate de potassium est écotoxique et ne présente pas d’activité sur A. solani sur la tomate. Le molybdate de sodium a une meilleure activité que le dichromate de sodium et on peut en déduire que le molybdate est faiblement actif sur le développement de A. solani sur les graines. Le chlorure de manganèse n’est pas actif, il est même phytotoxique sur la tomate. Dans cette publication, les plants de tomates étudiés ont été arrosés avec des solutions. Ce document indique également que l’extrait de yucca (pure extract of Y. schidigera) a été utilisé à 5% en volume dans de l’eau distillée sur des feuilles de pommier contre Venturia inaequalis. L’extrait de yucca agit comme fongicide en prévenant la pénétration de ce pathogène chez le pommier ou en la stoppant.
R est également clairement établi que l’utilisation de produits issus des plantes pose un problème de reproductibilité des compositions. En effet, la composition des plantes varie beaucoup en fonction du lieu où elles poussent, de la saison et du stade où elles sont récoltées pour être utilisées. L’utilisation d’une plante donnée pour fabriquer un extrait ou une infusion ne permet pas d’obtenir régulièrement un produit qui contient les ingrédients actifs à leur dose efficace.
Par ailleurs, l’efficacité d’un produit dépend du pathogène mais également de la plante traitée. Ainsi une composition peut être efficace contre un pathogène donné sur la tomate mais être inefficace sur le même pathogène chez une autre plante.
On constate de plus que les pathogènes dont le cycle de vie passe par le sol sont plus difficilement maîtrisés sur les plantes à feuillage bas (légumes par exemple) que les plantes à végétation haute (arbre et arbustes) à cause des contaminations par « effet splash » (éclaboussement par la boue lors des pluies, par exemple).
Problème technique à résoudre
Un problème technique que se propose de résoudre la présente invention est de fournir une composition antifongique contenant des ingrédients actifs d’origine naturelle qui peut être produite facilement selon des process reproductibles et standardisés pour aboutir à une composition dont les teneurs en actifs sont identifiées, standardisées et des résultats agronomiques constants.
Un autre problème technique que se propose de résoudre la présente invention est de fournir une composition antifongique qui soit inoffensive pour les animaux et en particulier pour les mammifères dont l’Homme.
Un autre problème technique que se propose de résoudre la présente invention est de fournir une composition antifongique qui ne soit pas phytotoxique.
Un autre problème technique que se propose de résoudre la présente invention est de fournir une composition antifongique notamment telle que précitée qui soit efficace contre au moins un pathogène choisi parmi : Alternaria solani, Plasmopara viticola, Septoria tritici, Fusarium graminearum, Erysiphe necator. Pythium ultimum, Tilletia caries, Zymoseptoria tritici et Rhizoctonia solani. Un autre problème technique que se propose de résoudre la présente invention est de fournir une composition antifongique notamment telle que précitée, qui soit efficace pour le traitement préventif et/ou curatif sur une plante choisie notamment parmi les plantes des familles suivantes : Brassicaceae dont le colza, Fabaceae dont le soja, Vitaceae dont la vigne, Poaceae dont le blé, maïs, Rosaceae dont pommiers poiriers, Solanaceae dont la pomme de terre, la tomate, l’aubergine, Alliacées dont l’oignon, l’ail, l’échalote et les poireaux, Apiacées dont les carottes, Astéracées dont la laitue, l’artichaut, et le tournesol, et Chénopodiacées dont la betterave.
Un autre problème technique que se propose de résoudre la présente invention est de fournir une composition antifongique qui soit efficace contre au moins un pathogène fongique et de préférence efficace contre plusieurs pathogènes, choisis parmi : Altemaria solani, Septoria tritici, Plasmopara viticola, Fusarium graminearum et Erysiphe necator, Pythium ultimum, Tilletia caries, Zymoseptoria tritici et Rhizoctonia solani et notamment contre A. solani chez la tomate et Plasmopara viticola chez la vigne.
Un autre problème technique que se propose de résoudre la présente invention est de fournir une composition antifongique qui soit inoffensive pour l’environnement et facilement dégradable.
Un autre problème technique que se propose de résoudre l’invention est de fournir une composition antifongique utilisable en agriculture qui soit polyvalente c’est-à-dire efficace contre au moins deux pathogènes fongiques du sol et/ou foliaires.
Un autre problème que se propose de résoudre la présente invention est de fournir une composition qui peut être diluée avant son utilisation et qui en fonction de sa dilution peut être particulièrement efficace contre au moins un pathogène donné sur au moins deux plantes différentes.
Résumé de l’invention
La présente invention concerne une composition antifongique utilisable en agriculture, qui contient des ions molybdène en particulier molybdate et en tant qu’ ingrédient actif, une combinaison d’au moins un composé choisi parmi le resvératrol, la smilagénine et l’hécogénine et de préférence les trois composés précités avec les ions molybdène/molybdate et au moins un oligoélément choisi parmi les ions fer, potassium, magnésium, cuivre, manganèse et notamment un mélange de ces 5 ions.
Avantageusement, quel que soit le mode de réalisation, la composition contient du resvératrol, plus particulièrement du trans resvératrol. De préférence, la composition contient du resvératrol, de la smilagénine et de l’hécogénine. Ces composés sont de préférence contenus dans un jus de yucca.
La composition peut également contenir du resvératrol et de l’hécogénine ou du resvératrol et de la smilagénine.
C’est en effet le mérite des inventeurs que d’avoir mis en évidence que ces trois composés sont efficaces, ensemble ou non, en tant qu’agents antifongiques et que leur action antifongique pouvait être augmentée par l’utilisation d’au moins un des ions précités. Des extraits de yucca qui étaient connus comme agents antifongiques contiennent de nombreux composés dont des saponines qui étaient considérées comme actives. Or, bon nombre de saponines peuvent être nocives pour la santé humaine. La smilagénine et l’hécogénine qui sont des saponines stéroïdiennes sont présentes seulement en petite quantité dans l’extrait aqueux de yucca. Il n’était donc pas évident que ces saponines particulières puissent avoir un effet antifongique à de très faibles doses.
La publication de E. G. Wulff intitulée “Yucca shidigera extract : a potential biofungicide againts seedbome pathogens of sorghum” et publiée dans la revue Plant Pathology le 3 août 2011 montre bien qu’un mélange synthétique de saponines contenant de 8 à 25% en masse de saponine s’avère être moins efficace qu’une solution aqueuse contenant 10% en masse d’extrait de yucca sur les pathogènes des graines de sorgho. Toutes les saponines ne sont donc pas efficaces comme antifongique.
Par ailleurs, le resvératrol, la smilagénine et l’hécogénine sont connus pour être inoffensifs pour la santé humaine. Le resvératrol est connu pour ses effets anti-inflammatoires et antioxydants. La smilagénine fait l’objet d’études pour son utilisation dans le traitement de maladies orphelines notamment neurologiques. L’hécogénine est utilisée pour atténuer la colite ou pour traiter la dermatite atopique et l’ hyperréactivité des bronches.
La composition de l’invention s’avère donc efficace en tant qu’antifongique et inoffensive pour les mammifères, dont l’Humain.
Description détaillée
La smilagénine, l’hécogénine et le resvératrol peuvent être extraits et purifiés à partir du jus extrait de végétaux. Ainsi, le resvératrol est présent dans les jus de fruits, notamment de raisin. Les saponines sont présentes dans le thé, les pois chiches, les feuilles de lierre grimpant, la saponaire, le quinoa, les feuilles de fenugrec, la racine de réglisse, les racines de ginseng, les cotylédons du marron d’inde, les feuilles du bouillon blanc et les tubercules de dioscorée, par exemple. Il est donc possible d’utiliser des jus, infusions, extraits ou décoctions de ces plantes éventuellement en mélange pour obtenir la composition de l’invention. La smilagénine, l’hécogénine et le resvératrol peuvent également être synthétisés. Il est ainsi aisé de produire une composition standardisée.
Les ions précités peuvent être introduits sous forme de sels, notamment de sulfate, chlorure, iodure, ammoniure, hydrochlorure, oxychlorure, hydroxyde, sulfonate, carbonate, formiate, acétate, gluconate, lactate, citrate et sels de sodium et ammonium.
La composition antifongique de l’invention peut également comprendre un ou plusieurs agents chélatant choisi parmi l’EDTA, HEEDTA, DTPA, EDDHA, EDDHMA, EDDCHA, EDDHSA, IDHA, HBED, et/ou au moins un complexant choisi parmi l’acide lignosulfonique et l’éthanolamine. Ces agents augmentent la solubilité des ions métalliques et stabilisent ainsi la composition de l’invention quand elle contient un solvant.
Ainsi, le manganèse, le fer, le magnésium, le cuivre peuvent être introduits de préférence sous la forme de sulfates. Le molybdate peut être introduit de préférence sous la forme de molybdate de sodium. Le potassium est de préférence introduit sous la forme de chlorure de potassium.
La composition de l’invention peut être liquide ou visqueuse ou sous forme de poudre. Elle peut dans ce cas être constituée des ingrédients précités et notamment être constituée d’un mélange de resvératrol, de smilagénine, d’hécogénine et de sels des six ions précités. Elle peut également se présenter sous la forme d’une suspension.
Avantageusement, elle contient un véhicule. Le véhicule n’est pas limité selon l’invention. R est de préférence de l’eau. La composition de l’invention est de préférence pulvérisable et/ou apte à enrober un solide. La composition peut être une solution, un mélange biphasique, une émulsion ou une solution micellaire. Elle est avantageusement une solution aqueuse.
Avantageusement, la composition contient un pourcentage massique de trans resvératrol supérieur ou égal à 0,01 et/ou un pourcentage massique d’hécogénine supérieur ou égal à 0,00032 et/ou un pourcentage massique de smilagénine supérieur ou égal à 0,004.
La composition peut contenir du resvératrol et de l’hécogénine ou du resvératrol et de la smilagénine. Elle peut également contenir les trois composés.
Selon un mode de réalisation combinable avec chacun des autres modes de réalisation, la composition contient les ions précités à l’exception de l’ion cuivre et/ou de l’ion manganèse. Selon un mode de réalisation particulier combinable avec chacun des autres modes de réalisation, la composition contient en tant qu’ oligoélément du molybdène sous forme de molybdate, du magnésium et du potassium. Selon une variante particulière, certains des composés actifs (la smilagénine, l’hécogénine et le resvératrol) sont contenus dans du jus de tronc de yucca et la composition contient donc du jus de tronc de yucca, lequel contient les trois composés précités.
Selon une variante combinable avec chacun des modes de réalisation ou variantes précitées, sous sa forme diluée, la composition de l’invention contient un pourcentage massique de jus de tronc de yucca supérieur ou égal à 0,0012.
S’agissant de l’hydratation des sels utilisés, le tableau 19 regroupe les principaux degrés d’hydratation préférés des sels.
La composition de l’invention peut se présenter sous deux formes, une forme diluée utilisable en l’état ou une forme concentrée à diluer ou à dissoudre avant utilisation.
Dans sa forme concentrée, selon des modes de réalisation particuliers, combinables avec chacun des modes de réalisation précités, la composition de l’invention peut contenir un pourcentage massique de jus de yucca supérieur ou égal à : 1 ; 2 ; 2,5 ; 3 ; 3,5 ; 4 ; 4,5 ;5 ; 5,5 ; 6 ; 6,5 ou 10.
Ainsi, le pourcentage massique de jus de yucca peut, quel que soit le mode de réalisation de l’invention, peut être égal à : 0,025 ; 0,03 ; 0,05 ; 0,06 ; 0,075 ; 0,09 ; 0,1 ; 0,15 ; 0,18 ; 0,2 ; 0,25 ; 0,3 ; 0,6 ; 1 (forme diluée) ; 1,5 ; 2 ; 2,5, 3 ; 3,5 ; 4 ; 4,5 ;5 ; 5,5 ; 6 ; 6,5 ; ou 10 (forme concentrée).
Quel que soit le mode de réalisation, le pourcentage massique du jus de yucca peut être inférieur à 30 ou 20.
Quel que soit le mode de réalisation, la composition de l’invention peut contenir un pourcentage massique de fer supérieur ou égal à 0,1 et inférieur ou égal à 4 ou 5 et/ou un pourcentage massique de cuivre supérieur ou égal à 0,1 et inférieur ou égal à 4 ou 5 et/ou un pourcentage massique de potassium supérieur ou égal à 0,05 et inférieur ou égal à 0,5 et/ou un pourcentage massique de molybdène supérieur ou égal à 0,01 et inférieur ou égal à 0,05 et/ou un pourcentage massique de manganèse supérieur ou égal à 0,1 et inférieur ou égal à 5 et/ou un pourcentage massique de magnésium supérieur ou égal à 0,01 et inférieur ou égal à 1.
Quel que soit le mode de réalisation, la composition de l’invention peut contenir plus particulièrement un pourcentage massique de fer supérieur ou égal à 0,6 et inférieur ou égal à 0,9 et notamment égal à 0,77 et/ou un pourcentage massique de cuivre supérieur ou égal à 0,3 et inférieur ou égal 0,45 et notamment égal à 0,375 et/ou un pourcentage massique de magnésium supérieur ou égal à 0,12 et inférieur ou égal à 0,19 et notamment égal à 0,15, et/ou un pourcentage massique de potassium supérieur ou égal à 0,09 et inférieur ou égal à 0,13 et notamment égal à 0,109 et/ou un pourcentage massique de molybdène supérieur ou égal à 0,0035 et inférieur ou égal à 0,005 et notamment égal à 0,004 et/ou un pourcentage massique de manganèse supérieur ou égal à 0,9 et inférieur ou égal à 2,7 et notamment égal à 1,18 ou 2,24.
Quel que soit le mode de réalisation la composition de l’invention peut, en outre, contenir au moins un ingrédient choisi parmi les acides humiques, les sels de bore, les sels de zinc, l’acide acétique, l’acide citrique, le fructose, des levures notamment Saccharomyces cerevisiae, des sels d’iode, des lignosulfates, des sels de sélénate, des sels de tungstate et de l’extrait de café liquide.
Selon un mode de réalisation particulier, elle contient de l’acide acétique, de l’acide citrique, du fructose, des sels d’iode en particulier de l’iodure de potassium, des lignosulfates, en particulier des lignosulfates de calcium, des sels de tungstate, en particulier du tungstate de sodium, des sels de sélénate, en particulier du sélénate de sodium, de l’extrait de café liquide, et de l’extrait de levure en particulier Saccharomyces cerevisiae.
De préférence, la composition de l’invention sous sa forme concentrée ou diluée contient les 6 ions en combinaison, présents chacun notamment dans les gammes précitées.
De préférence, la composition contient du fer, du magnésium, du potassium et du molybdène. De préférence, selon un mode de réalisation combinable avec chacun des modes de réalisation précités, la composition contient en outre, en tant qu’ingrédient actif, des acides humiques et/ou du bore et/ou du zinc.
Le bore peut être sous la forme d’éthanolamine de bore, par exemple.
Selon un autre mode de réalisation, combinable avec chacun des modes de réalisation, elle contient en tant qu’ oligoélément du zinc et/ou du fer et/ou du manganèse et/ou du cuivre. Avantageusement, le pourcentage massique de bore est égal ou supérieur à 0,01 et inférieur ou égal à 1 et plus particulièrement supérieur ou égal à 0,04 et égal ou inférieur à 0,06 et notamment égal à 0,05. Le pourcentage massique d’acides humiques est égal ou supérieur à 0,01 et inférieur ou égal à 10 et plus particulièrement supérieur ou égal à 0,17 et égal ou inférieur à 0,26 et notamment égal à 0,21.
Le zinc peut se présenter sous la forme de sulfate de zinc.
Selon un mode de réalisation combinable avec chacun des modes de réalisation précités, elle contient un pourcentage massique de zinc supérieur ou égal à 0,1 et inférieur ou égal à 10 et plus particulièrement supérieur ou égal à 1,54 et inférieur ou égal à 1,84 et notamment égal à 1,54. La présente invention concerne également une composition antifongique pulvérisable, utilisable en agriculture qui contient la composition de l’invention diluée dans un solvant et notamment de l’eau ; plus particulièrement la composition pulvérisable peut contenir de 0,05% à 10% en masse de la composition de l’invention et en particulier 0,05%, 0,2%, 0,4%, 0,5%, 1%, 2%, 3%, 6% ou 10% en masse de la composition précitée, diluée dans un solvant et en particulier de l’eau.
Avantageusement, la composition pulvérisable présente un pH acide et supérieur ou égal à 3,2. A ces valeurs de pH, la composition pulvérisable s’avère, aux doses d’efficacité, non phytotoxique.
La présente invention concerne également l’utilisation d’une composition ou d’une composition pulvérisable selon l’invention comme antifongique contre au moins un pathogène choisi parmi Alternaria solani, Septoria tritici, Plasmopara viticola, Fusarium graminearum et Erysiphe necator, Pythium ultimum et Rhizoctonia solani.
La présente invention concerne également une méthode de traitement d’une plante notamment choisie parmi les plantes des familles suivantes : Brassicaceae dont le colza, Fabaceae dont le soja, Vitaceae dont la vigne, Poaceae dont le blé, maïs, Rosaceae dont pommiers poiriers, Solanaceae dont la pomme de terre, la tomate, l’aubergine, Alliacées dont l’oignon, l’ail, l’échalote ou les poireaux, Apiacées dont les carottes, Astéracées dont la laitue, l’artichaut ou le tournesol et Chénopodiacées dont la betterave.
Selon l’invention, selon lequel on applique sur les feuilles de ladite plante la composition pulvérisable ou on applique sur les semences de ladite plante la composition ou ladite composition pulvérisable selon l’invention.
La présente invention concerne également l’utilisation du resvératrol et/ou de la smilagénine et/ou de l’hécogénine et en particulier d’un mélange de trans resvératrol et de smilagénine et/ou de l’hécogénine comme antifongique et notamment comme antifongique contre un pathogène fongique foliaire ou un pathogène fongique du sol choisi notamment parmi Fusarium graminearum, Pythium ultimum et Rhizoctonia solani.
La présente invention concerne également l’utilisation d’un jus de yucca pour le traitement d’une plante notamment choisie parmi la vigne, les solanacées dont la pomme de terre, la tomate et l’aubergine, les céréales dont le blé et le maïs contre au moins un pathogène fongique vivant dans le sol et notamment choisi parmi Alternaria solani, Septoria tritici, plasmopara viticola, Fusarium graminearum et Erysiphe necator, Pythium ultimum et Rhizoctonia solani. La présente invention concerne également une composition antifongique qui contient en tant qu’ ingrédients actifs au moins un composé choisi parmi le resvératrol, la smilagénine et l’hécogénine et de préférence qui contient ces trois composés et des acides humiques et/ou de du bore. Cette composition peut se décliner selon les mêmes modes de réalisation que la composition précitée, en ce qui concerne les concentrations en agent actifs, les véhicules ou solvants et le pH, notamment. Elle peut également être diluée dans de l’eau selon les mêmes dilutions que pour la composition pulvérisable précitée. Elle peut également être pulvérisée sur les mêmes plantes que celles décrites en référence à la composition décrite dans la présente demande et contenant au moins un ion. Le bore peut se trouver sous la forme d’éthanolamine de bore.
La présente invention concerne également une composition antifongique qui contient en tant qu’ ingrédients actifs au moins un composé choisi parmi le resvératrol, la smilagénine et l’hécogénine et de préférence qui contient ces trois composés et du zinc, notamment du sulfate de zinc, par exemple. Cette composition peut se décliner selon les mêmes modes de réalisation que la composition précitée en ce qui concerne les concentrations en agent actifs, les véhicules ou solvant et le pH, notamment. Elle peut également être diluée dans de l’eau selon les mêmes dilutions que pour la composition pulvérisable précitée. Elle peut également être pulvérisée sur les mêmes plantes que celles décrites en référence à la composition décrite dans la demande et contenant au moins un ion.
DEFINITIONS
Le terme « trans-resvératrol » fait référence au 5-[(E)-2-(4-hydroxyphényl)-éthényl] benzène- 1,3-diol.
Le terme « smilagénine » désigne le (25R)-5beta-Spirostan-3beta-ol.
Le terme « hécogénine » désigne le (3p,5a,25 )-3-Hydroxyspirostan-12-one
Les termes « pourcentage massique de A » désignent la fraction massique de A dans un mélange d’au moins deux constituants.
Les termes « pourcentage volumique de A » désignent la fraction volumique de A dans un mélange d’au moins deux constituants.
Les termes « jus de tronc de yucca » désignent une composition aqueuse contenant notamment du resvératrol, des saponines dont la smilagénine, du trans-3,3’,5,5’- tetrahydroxy-4’-méthoxystilbene, du larixinol et des dérivés phénolés désignés par les termes yuccaols A, B, C, D et E de la yuccaone A et l’hécogénine.... Les saponines stéroïdiennes ne représentent que 6,8% en masse des saponines. Le jus de tronc de yucca peut également contenir du jus de feuilles de yucca mais de préférence, il ne contient que le jus provenant du tronc.
Le terme « yucca » désigne toutes les plantes du genre yucca et de préférence le yucca schidigera ou le yucca gloriosa. Le jus peut être un mélange de jus provenant de yucca de genres différents.
Le jus de tronc de yucca est de préférence chauffé à une température comprise entre 80°C et 120°C pendant une durée égale ou supérieure à 1 min et égale ou inférieure à 10min et de préférence chauffé à 100 °C pendant 3 min.
Le terme « éthanolamine de bore » désigne le complexe formé par la combinaison d’éthanolamine et d’acide borique.
Le terme « acides humiques » désigne des polymères à haut poids moléculaire, chargés négativement, de couleur noire à brun foncé, résultant d'un processus de condensation oxydative des composés phénoliques et liés à des acides aminés, des peptides et des polysaccharides. Ils sont présents dans l’humus.
Dans toute la demande, lorsque des pourcentages massiques sont donnés en référence à plusieurs ingrédients, il faut comprendre que les pourcentages massiques de ces ingrédients sont indépendants.
Figures
La Fig. 1 représente le pourcentage de surface foliaire sporulante en fonction des traitements, la référence GA342 désigne le mélange préféré qui permet d’obtenir par dilution la composition de l’invention, le pourcentage volumique est indiqué à côté, le témoin est de l’eau pure.
EXEMPLES EXPERIMENTAUX
Jus de yucca
Le jus de yucca utilisé est obtenu par broyage et pressage de troncs de Yucca schidigera. Le liquide obtenu a été chauffé à 100°C pendant 3 min de manière à être stérilisé. Ce jus est utilisé dans toutes les expérimentations documentées dans la demande.
Essais directs contre Alternaria Solani
Identification des composés actifs Le jus de yucca est un mélange complexe. Il contient un grand nombre de saponines, dont des saponines stéroïdiennes. Il contient également du resvératrol, notamment sous sa forme trans.
Les Inventeurs ont identifié des composés du jus de yucca efficaces comme agents antifongiques : il s’agit du resvératrol, de la smilagénine et de l’hécogénine.
Des solutions aqueuses contenant une concentration donnée en resvératrol ou smilagénine ont été testées sur une suspension calibrée de spores d’ Alternaria solani.
Les évaluations in vitro ont été faites avec un test de micro-titrage à 96 puits. Une gamme de concentrations de chaque composé a été testée contre une suspension calibrée de spores Alternaria solani. Trois répétitions (puits) ont été réalisées. La valeur CE50 de chaque concentration envers A. solani a été déterminée à partir de son impact sur la réduction de la croissance fongique mesurée à l'aide de la densité optique. . La valeur EC50 ou CE50 désigne la concentration pour atteindre 50% d’efficacité d’un produit et la valeur EC95 ou CE95 désigne la concentration du produit pour atteindre 95% d’efficacité. Les résultats sont présentés dans le tableau 1 suivant qui montre le % de diminution de la croissance de A. solani au contact d’une solution contenant une concentration donnée en resvératrol ou smilagénine.
Dans toute la demande, les % indiqués dans les tableaux en référence aux compositions testées sont des % massiques ; l’inhibition produite par les compositions testées est indiquée en % dans les tableaux.
Tableau 1
Par ailleurs, l’inhibition sur le pathogène précité de diverses compositions de jus de yucca dilué dans de l’eau ont été testées. Les résultats sont regroupés dans le Tableau 2 ci-dessous.
Tableau 2
R ressort des résultats du Tableau 1 que le trans-3,4',5-trihydroxystilbene (resvératrol forme trans) de la famille des stilbènes à la concentration de 100 ppm dans de l’eau est capable de réduire de 54,7% % la croissance de A. solani. Il ressort également que la smilagénine qui est une saponine stéroïdienne permet de réduire de 30% la croissance de A. solani à une concentration de 40 ppm dans l’eau. L’hécogénine en revanche n’apas d’action antifongique sur le pathogène étudié. Il est vraisemblable que l’action antifongique du jus de yucca provienne principalement de la présence combinée du resvératrol et de la smilagénine dans le jus de yucca. L’action antifongique moindre du jus de yucca est due à la moindre concentration du resvératrol et de la smilagénine dans le jus de yucca. En effet, dans le tableau ci-dessus le resvératrol et la smilagénine sont utilisés dilués dans de l’eau. Comme la concentration en smilagénine et resvératrol dans le jus de yucca est plus faible que dans les compositions testées de smilagénine et de resvératrol, l’activité antifongique du jus de yucca est plus faible à la dose de 2,5%. En augmentant la concentration du yucca, les quantités de resvératrol et de smilagénine augmentent dans les mêmes proportions et l’efficacité du jus de Yucca devient notable à 10%. Synergie des composés actifs avec des oligoéléments
Toutes les compositions décrites ci-dessous présentent une densité égale ou supérieur à 1,15 et égale ou inférieure à 1,2. Le pH de chacune des solutions est acide. Il est par exemple ajusté par ajout d’acide citrique et/ou d’acide acétique.
Les compositions suivantes ont été préparées :
Composition VI
La composition VI contient les ingrédients indiqués dans le Tableau 3 suivant. Tableau 3
Les sels sont des sulfates sauf pour le potassium qui est introduit sous la forme de chlorure de potassium Le molybdate est introduit sous forme de molybdate de sodium.
Composition V6
La composition V6 contient les ingrédients indiqués dans le Tableau 4 suivant.
Tableau 4
Les sels sont des sulfates sauf pour le potassium qui est introduit sous la forme de chlorure de potassium. Le molybdate est sous forme de molybdate de sodium.
Des dilutions de certaines des compositions précitées ont été réalisées comme indiqué dans le tableau 5 ci-dessous.
Les solutions obtenues ont été testées directement sur le pathogène A. solani comme indiqué précédemment. Les résultats sont regroupés dans le Tableau 5. Les pourcentages en référence aux compositions testées sont des pourcentages massiques. Tableau 5
Les sels utilisés sont les mêmes que ceux utilisés dans la composition V6.
Le Tableau 6 ci-dessous regroupe les valeurs des ECso et EC95 des différents mélanges testés sur A. solani.
Tableau 6
Au vu des résultats des tableau 5 et 6, on constate que les compositions VI et V6 diluées dans de l’eau sont efficaces contre A. solani, ce qui n’est pas le cas de la composition contenant uniquement le jus de yucca à 2,5 % ou uniquement le jus de yucca et un des oligoéléments.
La présence du mélange d’ oligo-éléments et notamment du cuivre diminue la valeur EC50. Effet in vitro sur R. solani
Des dilutions de certaines des compositions précitées ont été réalisées comme indiqué dans le tableau 7 ci-dessous.
Les solutions obtenues ont été testées directement sur le pathogène R. solani comme indiqué précédemment. Les résultats sont regroupés dans le Tableau 7. Les pourcentages sont des pourcentages massiques.
Tableau 7
On constate au vu des résultats du tableau précité que la composition V 1 est efficace dès qu’elle se trouve au pourcentage massique de 0,05% alors que la composition V6 est efficace contre R. solani à partir de 1% ou 2%. On constate également que les jus de yucca 1 et 2 qui sont des jus de yucca schidigera provenant de producteurs différents n’ont pas la même efficacité sur R. Solani. A la dose de 0,5% le «jus de Yucca 1 » a une efficacité de 0 alors que le « Jus de Yucca 2 » enregistre une performance de 95,2%. Cette différence d’efficacité montre bien qu’il n’est pas possible de produire une composition efficace standard de manière reproductible en utilisant directement des produits issus des plantes. Dans toute la demande, les compositions VI et V6 sont fabriquées à partir du jus de yucca 1 précité.
Essais in vitro- tests directs contre Plasmopara viticola - Septoria tritici - Fusarium graminearum - Erysiphe necator
Les évaluations ont été faites avec un test de micro-titrage à 96 puits pour évaluer l'activité fongicide in vitro de chaque solution. Une gamme de concentrations (jusqu'à 8) de chaque solution a été testée contre une suspension calibrée de spores de Fusarium graminearum et contre une suspension calibrée de Zymoseptoria tritici.
Trois répétitions (puits) ont été réalisées. La valeur de la concentration qui permet d’inhiber à 50% la croissance de chaque pathogène (ECso) a été déterminée à partir de la mesure de la densité optique. a) Fusarium graminearum
Fusarium graminearum appartient à l’espèce Gibberella zeae, champignons ascomycètes de la famille des Nectriaceae. Ce champignon est l’agent pathogène des fusarioses des céréales et du maïs causant de lourdes pertes de rendement. Il provoque des contaminations des grains récoltés par des mycotoxines (fusariotoxines) dangereuses pour la santé humaine et animale. Cette maladie se développe aussi bien sur les semences dans le sol qu’au niveau foliaire en saison. Les résultats expérimentaux obtenus selon le même protocole que décrit ci-dessus sont représentés dans le Tableau 8 ci-dessous. Les pourcentages sont des pourcentages massiques.
Tableau 8
On constate au vu des résultats du Tableau 8 que T ajout des oligoéléments permet d’ abaisser de près de 3 fois la quantité de jus de yucca à ajouter dans de l’eau pour obtenir une efficacité de 100%. L’effet des composés actifs a été testé sur Fusarium graminearum.
Les résultats sont présentés dans le Tableau 9 ci-dessous.
Tableau 9 Le resvératrol (trans) à 100 ppm permet de diminuer de plus de 50% l’infestation de Fusarium graminearum. b) Septoria tritici
Septoria tritici est un champignon ascomycète responsable de la septoriose du blé. Sa nuisibilité moyenne est estimée à 17 q/ha (jusqu’à 50 q/ha en situations les plus exposées). Par sa fréquence et l'importance des dégâts potentiels, 5. tritici est la plus importante des maladies du blé tendre. Les mêmes expérimentations que précitées ont été réalisées. Les résultats sont regroupés dans les Tableaux 10 et 11 ci-dessous. Les pourcentages indiqués sont des pourcentages massiques. Tableau 10
Tableau 11 On constate que la solution contenant la composition VI montre une efficacité totale à une concentration de 6% en masse de la composition VL A cette concentration, le mélange eau + jus de yucca montre une efficacité de 100%. La composition V6 diluée présente une efficacité dès qu’elle est présente à 0,5% ou 1% massique. Elle s’avère plus efficace que la composition VI. On constate donc que l’ajout des oligoéléments augmente le caractère antifongique du jus de yucca et donc le caractère antifongique d’au moins un des composés actifs identifiés que sont le resvératrol, la smilagénine et l’hécogénine. Le caractère antifongique des composés actifs a été testé sur S. tritici. Les résultats sont regroupés dans le Tableau 12 ci-dessous. Les chiffres montrent l’inhibition en % de la croissance du pathogène.
Tableau 12
Le resvératrol et l’hécogénine montrent des efficacités contre Septoria tritici à des concentrations très faibles, respectivement 100 ppm et 20 ppm. c) Test sur P. ultimum Les mêmes expérimentations que précitées ont été réalisées. Les résultats sont regroupés dans les Tableaux 13 et 14 ci-dessous. Les pourcentages indiqués sont des pourcentages massiques sauf pour le % d’inhibition.
Tableau 13
Tableau 14
On constate que le resvératrol et l’hécogénine sont efficaces respectivement à 100% et 85% à la dose de 100 ppm. On constate que la composition VI apporte 100% d’efficacité à des concentrations faibles, dès 0.05% (Tableau 13). L’association des molécules actives resvératrol et hécogénine associée à des oligoéléments permet d’atteindre une efficacité complète aux concentrations les plus faibles, dès 0,05%. d) Test sur Rhiz.octonia solani
Les mêmes expérimentations que précitées ont été réalisées. Les résultats sont regroupés dans le Tableau 15 ci-dessous. Les pourcentages indiqués sont des pourcentages massiques.
Tableau 15
On constate que la composition VI est plus active que la composition V6 probablement du fait de la présence d’acides humiques et/ou du sel de bore.
Test sur les zoospores de Plasmopara viticola
L’objectif est d’évaluer l’effet direct in vitro de la composition de l’invention sur la mobilité de zoospores du mildiou de la vigne (Plasmopara viticola)_en suspension dans l’eau. Le mildiou (Plasmopara viticola) est une souche-population originaire du vignoble bourguignon, entretenue par repiquage hebdomadaire sur plante. L'expérimentation est réalisée in vitro : des sporanges de Plasmopara viticola sont récoltés sur une feuille sporulante de vigne (inoculée 7 jours auparavant) et mis en culture en suspension dans l’eau ultrapure à une concentration d’au moins 106 sporanges/ml. Les sporanges libèrent sous un délai d’une heure des zoospores mobiles. Cette mobilité est vérifiée en fin d’expérimentation sur la suspension témoin.
Des dilutions à partir de solutions de sporanges sont préparées extemporanément dans de l’eau ultrapure pour obtenir une concentration finale en zoospores de 0,33% en masse.
L’effet sur la mobilité des zoospores est observé dans un délai de 5 minutes, à l’aide d’une cellule de Malassez, sous microscope. Un gradient de réponse est observé dans ce délai et noté selon le barème suivant :
Haute efficacité ou 100% : l’ensemble des zoospores est immobile (voire détruites),
Les résultats sont représentés dans le Tableau 16 ci-dessous. Les pourcentages sont des pourcentages massiques. Tableau 16
On constate au vu des résultats du Tableau 16 que la composition VI diluée bloque la mobilité des zoospores de Plasmopara viticola à la concentration de référence de 0,033% (v/v). Même dilué à hauteur de 0,0033%, le mélange bloque ou perturbe la mobilité des zoospores du pathogène. La densité du produit étant égale ou supérieure à 1,15 et égale ou inférieure à 1,2, le pourcentage massique de composition VI équivalent à la dilution de 0,0033 est égal à 0,004% ce qui équivaut à un pourcentage massique de jus de yucca égal à 0,00012%. Là encore, on constate que la présence des ions augmente l’activité antifongique du resvératrol et de la smilagénine contenus dans le jus de yucca. Le jus de Yucca seul à la dose de 0,33% présente une action contre la mobilité des zoospores à une concentration 100 fois plus élevée (0,33%).
TEST SUR LES PLANTES EN CONDITIONS CONTROLEES
Les tests sur les plantes en conditions contrôlées permettent de se rapprocher des conditions réelles de l’utilisation des produits phytopharmaceutiques.
Dans ces tests, le produit à tester n’est plus mis directement in vitro au contact du pathogène mais pulvérisé sur les feuilles de la plante. Cette dernière est cultivée en serre et donc à la lumière. On vérifie ainsi l’efficacité du produit en conditions presque réelles. Essais en conditions contrôlées - Plasmopara viticola sur la vigne
Le matériel végétal est constitué de boutures herbacées de 2 mois de la variété Marselan (Grenache x Cabemet-Sauvignon) multipliées dans les serres de l’INRAE, cultivées en pot de 0,5 L (2/3 terreau- 1/3 perlite). A 2 mois, les boutures comptent 5-6 feuilles étalées. L’inoculum de mildiou (Plasmopara viticola) est une souche-population originaire du vignoble bourguignon, entretenue par repiquage hebdomadaire sur plante. Cinq plantes au minimum sont utilisées par modalité.
La composition de l’invention à tester est pulvérisée sur les boutures avec un pulvérisateur manuel en deçà du point de ruissellement, sur les 2 faces des feuilles. On laisse les gouttelettes sécher 2 à 3 h avant de replacer les plantes sous serre.
Les plantes sont inoculées 48h post-traitement, par pulvérisation d’une suspension de sporanges de Plasmopara viticola (104 sporanges/ml) préparée extemporanément, à la face inférieure des feuilles. Après inoculation, on place les plantes dans une tente humide au minimum 3 heures pour permettre l’enkystement des zoospores puis on les replace sous serre. Chez la vigne, les très jeunes feuilles (environ à 1/3 de leur taille définitive) et les feuilles âgées sont résistantes à la maladie (résistance ontogénique). Pour cette raison, l’observation de la maladie a lieu en général sur 2 feuilles sensibles désignées feuille de rang 1 et feuille de rang 2. Le rang 1 correspond à une feuille qui a atteint environ les 2/3 de sa surface définitive, la feuille de rang 2, située immédiatement sous celle de rang 1, est une feuille de taille adulte, encore sensible au mildiou.
Cinq jours après inoculation, on prélève à l’emporte-pièce au minimum 6 disques de 1,3 cm de diamètre par feuille et par rang, disposés aussitôt face adaxiale sur un papier humide, en boîte plexiglas. Cette dernière est laissée 2 jours dans une chambre de culture (jour lOh 20°C / nuit 14h 18°C) pour permettre la sporulation. Les résultats correspondent au pourcentage de surface de disque couverte par les sporangiophores, déterminé par analyse d’image. Les valeurs de pourcentage d’infection indiquées dans les graphes pour chaque traitement correspondent à la moyenne des valeurs obtenues pour 30 disques de « rang 1» ou 30 disques de «rang 2». L'observation du taux de sporulation est réalisée par analyse d'image pour une notation sur les feuilles de rangs 1 et 2. Un taux de 5 % correspond à une infection déjà marquée de visu, un taux supérieur à 10 % rend compte d’une forte infection (le disque est presque entièrement couvert de sporanges).
Le 1er essai a été réalisé avec les doses initialement préconisées de IL, 2L et 3L/ha diluées dans de 150 L/ha, soit 6.67 ml/L, 13.33 ml/L et 20 ml/L. Les 2 expérimentations suivantes ont été réalisées avec des doses inférieures : 1,67 ml/L, 3.33 ml/L et 6.67 ml/L. La référence GA342 désigne la composition V 1 sur la Fig. 1. La dilution figure à côté.
Les moyennes ont été comparées avec le T-test de Tuckey (comparaison de la solution contenant la composition V 1 avec le témoin eau).
L’efficacité moyenne de la composition VI à la dose de 0,33% sur 5 essais est de 98,7%. L’efficacité de la composition VI contre le mildiou de la vigne est quasi totale dès la dose de 1,7 mL/L soit 0,17% en volume. L’inhibition en conditions in vitro est bien corrélée avec celle en conditions in vivo. La densité de la composition étant égale ou supérieure à 1,15 et égale ou inférieure à 1,2.
S’agissant de la composition V6, elle s’est avérée efficace in vivo sur la vigne contre Plasmopara viticola à une concentration de 0,50% ou 2% massique d’une teinture mère contenant 10% massique de la composition V6 diluée dans de l’eau.
Par ailleurs, d’autres mélanges contenant de l’eau, du jus de yucca ont été testés contre plasmopara viticola sur la vigne selon le même protocole que précité (3 répétitions de 2 ou 3 pulvérisations foliaires à 1 semaine d’intervalle). Les résultats sont regroupés dans le Tableau 17 ci-dessous.
Tableau 17
Les sels sont des sulfates sauf pour le potassium qui est utilisé sous la forme de chlorure de potassium.
On constate au vu des résultats du Tableau 17 que l’ajout du mélange d’oligoéléments augmente l’activité antifongique de la composition de l’invention.
En conclusion, on constate que la composition selon l’invention utilisée à la lumière et sur une plante reste efficace en tant qu’antifongique.
Essais aux champs (composition VI) Dans des essais au champ, on constate sur la Fig. 1 que la composition V 1 permet de réduire de façon significative les premières infestations en mildiou sur les feuilles et les grappes par rapport à un témoin. La dose de 31/ha améliore l’efficacité par rapport aux doses plus faibles 1 et 2 1/ha. Le niveau d’efficacité atteint 60% sur feuilles et grappes. Sur la Fig. 1, le pourcentage (%) est un pourcentage volumique. Ainsi, sur cette figure, 0,17% indique que l,7mL de la composition VI a été dissout dans 998,3 rnL d’eau. En pourcentage massique, la solution testée contient 0,20% de la composition VI.
Effet du pH sur l’efficacité et la phyto toxicité Dans l’exemple précité, les compositions obtenues à partir de la composition V 1 avaient des pH différents, comme indiqué dans le Tableau 18 ci-dessous. Les pourcentages (%) indiqués sont des pourcentages volumiques. Tableau 18
De légères nécroses ont été observées avec la concentration de 0,67%, identiques à celles du premier essai à la même concentration ; les deux concentrations les plus faibles sont moins agressives. On constate donc que la dilution de la composition V 1 permet d’augmenter son pH et donc de réduire sa phytotoxicité sans diminuer son efficacité.
Autres compositions selon l’invention testées
Les composition suivantes V9, VIO, GAST 1 et GAST 2 (ingrédients regroupés dans le tableau 19 suivant) ont également été testées.
Tableau 19
Les valeurs des EC50 et EC95 sur les différents pathogènes ont été déterminées in vitro comme précédemment indiqué. Les résultats sont regroupés dans le tableau 20 suivant. Les EC correspondent au pourcentage massique de composition VIO diluée dans de l’eau pour obtenir respectivement une diminution de 50% ou de 95% de la croissance du pathogène.
Tableau 20
S’agissant du mildiou de la vigne (Plasmopara viticola), l’efficacité moyenne in vitro de la composition VIO diluée à 50% massique dans de Teau est de 99,29% pour l’émission des spores et de 99,54 sur la mobilité des spores). Par ailleurs, des tests sur plantes ont également été effectués. La composition V10 diluée (0,5% massique de V10 dans 95% d’eau) s’est avérée efficace contre Plasmopara viticola. L’efficacité moyenne de la composition V10 à la dose de 0,5% sur 7 essais est de 85,9% selon la mode opératoire déjà expliqué sur plante en serre. S’agissant de la composition V9, elle s’est avérée efficace in vitro contre 5. tritici, F. graminearum, Pythium u. R. solani, Alternaria s. et Plasmopara. Elle s’est avérée efficace contre Plasmopara viticola et l’oïdium de la vigne (Erysiphe necator) in vivo à des dilutions dans l’eau à 0,05% ou 2% massique d’une solution mère contenant 10% massique de la composition V9 indiquée dans le tableau 19.
S’agissant des compositions GAST 1 et GAST 2, les résultats des tests in vitro (même protocole que précité) sont regroupés dans le tableau 21 suivant. Le pourcentage massique fait référence aux compositions décrites dans le tableau 19, lesquelles sont diluées dans de l’eau. Pour le pourcentage massique de composition indiqué on obtient une efficacité de 100% in vitro. Les compositions GAST 1 et GAST2 sont de préférence utilisées pour traiter les semences.
Tableau 21
Résultats in vitro montrant la synergie du jus de yucca avec les autres composants de la composition selon l’invention sur A. solani, Z. tritici, et Plasmopara viticola.
Les tableaux suivants montrent in vitro la synergie antifongique entre le jus de yucca et les autres composés de la composition de l’invention sur divers pathogènes. Les concentrations indiquées sont en % massique. Les solutions testées sont des solutions aqueuses.
Mo désigne le molybdate de sodium, Bo désigne l’éthanolamine de bore.
Tableau 22
On constate que pour les autre composés seuls en solution dans l’eau, on obtient des valeurs d’ECso supérieures à celles des compositions de l’invention en ce qui concerne l’action antifongique sur A. solani.
Tableau 23
On constate que pour les autres composés seuls en solution dans l’eau, on obtient des valeurs d’ECso supérieures à celles des compositions de l’invention en ce qui concerne l’action antifongique sur Z. tritici. A la dose de 0.5%, seul le sulfate de fer et le jus de Yucca apportent une efficacité qui est néanmoins faible, de l'ordre respectivement de 37 % et 42%. Néanmoins, le produit formulé V9 apporte une efficacité de 58% contre la septoriose supérieure aux ingrédients seuls. Ces comparaisons prouvent donc les effets complémentaires du jus de yucca et des ions. Le jus de Yucca concentré à hauteur de 10% présente une efficacité remarquable proche de 92% dès une dose d'emploi de 1%. Les mêmes sels que ceux contenus dans la composition de l’invention ont été utilisés afin de pouvoir comparer les efficacités. Tableau 24
On constate que pour les autre composés seuls en solution dans l’eau, ils sont actifs contre
Plasmopara viticola à des concentrations supérieures à celle dans laquelle ils se trouvent dans la composition de l’invention.
Résultats de l’efficacité in vivo sur la vigne contre l’oïdium de la vigne
Le tableau suivant regroupe l’activité antifongique des diverses compositions selon l’invention.
La méthode AUDCP (aire trapézoïdale) a été utilisée. La méthode utilisée est celle de Campbell et Madden publiéel990. DSI signifie Disease Symptôme Intensity, l’intensité des symptômes de maladie. DPI correspond Day Post Inoculation soit le nombre de jours suivant l’inoculation.
Tableau 25 Les résultats du tableau 25 montrent que les compositions VI et V9 utilisées à 2% massique dans de l’eau sont très efficace sur la vigne in vivo contre l’oïdium de la vigne (Erysiphe necator).

Claims

Revendications
1. Composition antifongique utilisable en agriculture, contenant des ions molybdène et en particulier des ions molybdate, caractérisée en ce qu’elle contient, en tant qu’ingrédient actif une combinaison :
- d’au moins un composé choisi parmi le resvératrol, la smilagénine et l’hécogénine et de préférence les trois composés précités avec
- les ions molybdène/molybdate et
- au moins un ion choisi parmi les ions fer, potassium, magnésium cuivre et manganèse et de préférence les cinq ions précités.
2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu’elle contient en outre un véhicule/solvant et notamment de l’eau en tant que véhicule/solvant.
3. Composition selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ledit resvératrol est majoritairement du trans-resvératrol.
4. Composition selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce qu’elle contient un pourcentage massique de trans resvératrol supérieur ou égal à 0,01 et/ou un pourcentage massique d’hécogénine supérieur ou égal à 0.00032 et/ou un pourcentage massique de smilagénine supérieur ou égal à 0,004.
5. Composition selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu’elle contient du trans-resvératrol, de l’hécogénine et de la smilagénine et en ce que lesdits composés sont contenus dans un jus de yucca.
6. Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce qu’elle contient un pourcentage massique de jus de yucca supérieur ou égal à 1 ; 2 ; 2,5 ; 3 ; 3,5 ; 4 ; 4,5 ;5 ; 5,5 ; 6 ; 6,5 ou 10.
7. Composition selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu’elle contient un pourcentage massique de fer supérieur ou égal à 0,1 et inférieur ou égal à 4 ou 5 et/ou un pourcentage massique de cuivre supérieur ou égal à 0,1 et inférieur ou égal à 4 ou 5 et/ou un pourcentage massique de potassium supérieur ou égal à 0,05 et inférieur ou égal à 0,5 et/ou un pourcentage massique de molybdène supérieur ou égal à 0,01 et inférieur ou égal à 0,05 et/ou un pourcentage massique de manganèse supérieur ou égal à 0,1 et inférieur ou égal à 5 et/ou un pourcentage massique de magnésium supérieur ou égal à 0,01 et inférieur ou égal à 1.
8. Composition selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu’elle contient en outre au moins un ingrédient choisi parmi les acides humiques, les sels de bore, les sels de zinc, l’acide acétique, l’acide citrique, le fructose, des levures notamment Saccharomyces cerevisiae, des sels d’iode, des ligno sulfates, des sels de sélénate, des seis de tungstate et robusta
9. Composition selon la revendication 8, caractérisée en ce qu’elle contient de l’acide acétique, de l’acide citrique, du fructose, des sels d’iode en particulier de l’iodure de potassium, des lignosulfates, en particulier des lignosulfates de calcium, des sels de tungstate, en particulier du tungstate de sodium, des sels de sélénate, en particulier du sélénate de sodium, de l’extrait de café liquide et de l’extrait de levure en particulier Saccharomyces cerevisiae.
10. Composition antifongique pulvérisable utilisable en agriculture, caractérisée en ce qu’elle contient notamment de 0,05% à 10% de la composition selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, diluée dans un solvant et en particulier de l’eau et en particulier 0,05, 0,2%, 0,4%, 0,5% 1%, 2%, 3%, 6% ou 10% en masse de la composition selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, diluée dans un solvant et en particulier de l’eau.
11. Composition pulvérisable selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu’elle présente un pH acide et supérieur ou égal à 3,2.
12. Méthode de traitement antifongique d’une plante choisie notamment parmi les plantes des familles suivantes : Brassicaceae dont le colza, Fabaceae dont le soja, Vitaceae dont la vigne, Poaceae dont le blé, maïs, Rosaceae dont pommiers poiriers, Solanaceae dont la pomme de terre, la tomate, l’aubergine Alliacées dont l’oignon, l’ail, l’échalote ou les poireaux, Apiacées dont les carottes, Astéracées dont la laitue, l’artichaut, le tournesol, Chénopodiacées dont la betterave, contre notamment au moins un pathogène choisi parmi Alternaria solani, Septaria tritici, Plasmopara viticola, Fusarium graminearum et Erysiphe necator, Pythium ultimum, Tilletia caries, Zymoseptoria tritici et Rhizoctonia solani, caractérisé en ce que l’on applique sur les feuilles de ladite plante la composition pulvérisable selon l’une quelconque des revendications 1 à 11 ou en ce que l’on applique sur les semences de ladite plante la composition selon l’une quelconque des revendications précédentes.
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