EP3386970A1 - Configurational stereoisomer of difethialone, composition and rodenticide bait comprising same, and method for controlling target rodent pests - Google Patents
Configurational stereoisomer of difethialone, composition and rodenticide bait comprising same, and method for controlling target rodent pestsInfo
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- EP3386970A1 EP3386970A1 EP16809708.7A EP16809708A EP3386970A1 EP 3386970 A1 EP3386970 A1 EP 3386970A1 EP 16809708 A EP16809708 A EP 16809708A EP 3386970 A1 EP3386970 A1 EP 3386970A1
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Definitions
- the invention relates to a configuration stereoisomer of difethialone as an isolated compound, a composition and a rodenticide bait comprising such a configuration stereoisomer and a method for controlling deleterious target rodents.
- the invention thus relates to the technical field of the fight against target rodent pest populations.
- rodenticide baits As a poison for harmful target rodents. It is known from EP 2,090,164 that difethialone is a second-generation anticoagulant acting at a single dose. US 2005/181003 discloses a rodenticide bait in gel form comprising difethialone in a mass proportion of 25 ppm.
- the baits of EP 2,090,164 and US 2005/181003 are susceptible to being consumed by animals other than harmful target rodents when they are made available to harmful target rodents. They can be consumed directly (primary consumption) by pets or pets. They can also be accidentally consumed by humans. Such consumption may produce poisoning in these pets, pets, or humans that can be lethal.
- a fraction of the difethialone of these rodenticide baits may be ingested (secondary consumption) by animals - in particular by weaker rodent-killing predatory birds that have consumed such a rodenticide bait or by dead rodent-killing scavenging animals. have consumed such rodenticide bait.
- This secondary consumption is likely to eventually lead to the death of these predatory animals or scavengers that may be animals - especially birds - belonging to protected species.
- the aim of the invention is thus to overcome these drawbacks by proposing a configuration stereoisomer of difethialone, a composition and a rodenticide bait comprising such a configuration stereo-isomer and a method of controlling harmful rodent rodents that are at the same time effective in controlling target rodent pest populations and that also limit the risk of animal poisoning.
- non-targets particularly domestic or farm animals, pets or humans - accidentally consuming such a rodenticide bait, but also the risk of secondary poisoning of animals - for example foxes or wild-bird predators of weakened target rodents that have consumed rodenticide bait or wild animals scavengers of poisonous dead target rodents.
- the invention also aims at providing a configuration stereoisomer of difethialone, a composition and a rodenticide bait comprising such a configuration stereoisomer and a method for controlling harmful target rodents whose implementation complies with the rules of the invention. protection of the environment -especially with respect to the protection of birds, especially raptors-.
- the invention also aims at providing a configuration stereoisomer of difethialone, a composition and a rodenticide bait comprising such a configurational stereoisomer and a method for controlling harmful target rodents that do not require, to control a population harmful rodent rodents, use massive doses of a rodenticide and that are environmentally friendly, human health and non-target animals - especially birds-.
- the invention also aims at providing a configuration stereoisomer of difethialone, a composition and a rodenticide bait comprising such a configuration stereo-isomer and a method for controlling harmful target rodents that can be used to fight against harmful target rodents resistant to known baits for the control of harmful target rodents.
- the invention therefore also aims to provide an alternative to known rodenticide baits.
- the invention relates to a levorotatory enantiomer of a configuration stereoisomer of difethialone, called a ho-mono-isomer, of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -1 (4 -hydroxythiocoumarin-3-yl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalene, wherein the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group are of the same absolute configuration.
- diazolethialone refers to the compound 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -1- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalene or 3- [3- [4] - (4-bromophenyl) phenyl] -1-tetralinyl] -2-hydroxy-4-thiochromenone or 3- [3- (4'-bromo [1,1'-biphenyl] -4-yl) -1,2 3,4-tetrahydro-1-naphthalenyl] -4-hydroxy-2H-1-benzothiopyran-2-one of formula I) below:
- stereoisomers refers to isomers of the same semi-expanded formula, but whose relative position of atoms differs in space.
- configuration stereo-isomers refers to stereoisomers whose conversion of these configuration stereoisomers into one another requires a break / reformation of an interatomic covalent bond.
- configuration stereo-isomers refers to stereoisomers which are not conformational isomers (or "rotamers”, whose conversion of the one to the other of the conformational isomers is accompanied only by a rotation of a part of the molecule along the axis of a bond ⁇ (sigma) formed by axial overlap of orbitals);
- homo-stereoisomer of difethialone refers to the configuration stereoisomer of the difethialone of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -1- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) - 1, 2,3,4- tetrahydronaphthalene, in which the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group are of the same absolute configuration (1S-3S or 1R-3R), said absolute configurations being determined according to the sequential priority rules and the nomenclature of Cahn, Ingold and Prelog (CIP);
- hetero-stereoisomer of difethialone refers to the configuration stereoisomer of the difethialone of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -1- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) - 1, 2,3,4-tetrahydronaphthalene, wherein the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group are of distinct absolute configurations (1S-3R or 1R-3S), said absolute configurations being determined according to the rules sequential prioritization and nomenclature of Cahn, Ingold and Prelog (CIP);
- the term "quantity" means a molar amount, a mass quantity or a volume quantity. The proportions are therefore proportions of a molar amount relative to a molar amount, of a mass quantity relative to a mass quantity, or of a volume quantity referred to a volume quantity;
- HPLC high pressure liquid chromatography
- HPLC high performance liquid chromatography
- retention time designates the duration, measured at the peak of the chromatogram peak, during which a compound is retained on a chromatography column.
- the invention therefore relates to the laevorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone in the isolated state. It concerns the enantiomer levorotatory of said difethialone homo-stereoisomer separated from the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone and of the dextrorotatory and laevorotatory enantiomers of a difethialone configuration stereoisomer, referred to as hetero-isomer; stereoisomer, in which the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group are of distinct absolute configurations.
- the inventors have discovered that it is possible to separate the levorotatory and dextrorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer from difethialone and from said hetero-stereoisomer of difethialone by high-pressure liquid chromatography in isocratic mode and under particular conditions. using a chromatography column comprising a chiral stationary phase. It was not known at the time of the invention to be able to separate the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer from difethialone and the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
- the inventors have succeeded in achieving this separation by selecting a column LUX ® HPLC particular chromatography Cellulose-3 (Phenomenex, Le Pecq, France) of dimension 150 x 2 mm and comprising a chiral stationary phase consisting of cellulose porous particles tris (4 -methylbenzoate), of a particle size of 3 ⁇ and a porosity of 1000 A. They used, as mobile phase, an eluent formed of a mixture of acetonitrile (A) and water comprising formic acid in a volume proportion of 0.1% in water (B) with an A / B volume ratio of 80/20.
- the flow rate of the mobile phase in the column is maintained at a value of 0.25 ml / min and the separation is carried out at room temperature.
- the composition to be analyzed is at a concentration of 1 ⁇ g of difethialone per milliliter in acetonitrile and the volume injected onto the column is 1 ⁇ l ⁇ .
- Detection can be performed by tandem mass spectrometry (MS / MS). Detection can also be performed photometrically or spectrophotometrically by adjusting the difethialone concentration and injection volume to obtain a optimal detection and by measuring the value of the area under the peak of each enantiomer.
- the value of the retention time (ti) of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer according to the invention may vary according to the operating conditions - in particular according to the temperature conditions of the column - and be between 7.8 min and 8.2 min.
- the value of the retention time (t 4 ) of the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer may vary according to the operating conditions - in particular according to the temperature conditions of the column - and be between 14.0 min and 14.4 min, so that the dextrorotatory and laevorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer can be separated by high pressure liquid chromatography on a chiral column.
- the value of the retention time (t 3 ) of the dextrorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer of difethialone may vary according to the operating conditions - in particular according to the temperature conditions of the column - and be understood between 11.3 min and 11.8 min.
- the value of the retention time (t 2 ) of the laevorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer of difethialone may vary according to the operating conditions -particularly according to the temperature conditions of the column-and be between 9.0 min and 9.5 min.
- the elution order of the configuration stereoisomers of the difethialone is such that ti ⁇ t 2 ⁇ t 3 ⁇ t 4 .
- the values of the retention times t 15 t 2 , t 3 and t are likely to vary, in particular with the temperature of the chromatography column.
- the order of elution of the configuration stereoisomers of the difethialone remains unchanged.
- the invention therefore relates to the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in the isolated state and having the property of being elutable, under the chromatography conditions described above, the first of the four stereoisomers. configuration of difethialone.
- the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone isolated in the pure state according to the invention, in solution in chloroform (CHCt 3 ) has a specific rotational power [a] C 589 nm measured at 25 ° C. and on the sodium D line (589 nm) of a value of -14.8 °.
- the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone isolated in the pure state according to the invention has in magnetic resonance spectroscopy (1H-NMR) of the 500 MHz proton in CDCt 3 a multiplet exhibiting a chemical shift ( ⁇ ) between 4.9 ppm and 5.1 ppm corresponding to the proton carried by carbon 1 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group of said homo-stereoisomer of difethialone.
- hetero-stereoisomers are distinguished from difethialone and said homo-stereoisomer of difethialone by their proton NMR spectra.
- the chemical shift of the proton carried by carbon 1 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group of said hetero-stereoisomer of difethialone is between 5.2 ppm and 5 ppm. , 4 ppm, in particular of the order of 5.3 ppm.
- the invention also relates to a composition
- a composition comprising the levorotatory enantiomer according to the invention, excluding a racemic mixture of levorotatory and dextrorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone, that is to say except for a composition in which the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone is in an optically inactive mixture with the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
- the invention therefore also relates to a composition
- a composition comprising the levogyre enantiomer of the configuration stereoisomer of the homo-stereoisomer difethialone, of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -l- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalene, wherein the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group are of the same absolute configuration, with the exception of a mixture in which the laevorotatory enantiomer and the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone are in equal amounts.
- the invention thus relates to such a composition wherein the levorotatory enantiomer and the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone are in distinct amounts.
- said homo-stereoisomer is predominantly in the form of levorotatory enantiomer.
- a composition according to the invention comprises said homo-isomer of difethialone predominantly in the form of levorotatory enantiomer.
- the expression "said homo-stereoisomer is predominantly in the form of levorotatory enantiomer” means that the quantity (mass, molar or volume) of laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone is predominant greater than 50% - in the total amount of said homo-stereoisomer of the difethialone present in the composition (in all its enantiomeric forms, dextrorotatory and laevorotatory).
- the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of said homo-isomer of difethialone in the composition is greater than at 50% -in particular greater than 60%, in particular greater than 70%, more particularly greater than 80%, preferably greater than 90%, more preferably greater than 95%, particularly preferably greater than 98%, even more preferably greater than 99% or the order of 100% -.
- the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of said homo-stereoisomer of the difethialone in the composition is greater than 75%, of preferably between 85% and 100%, more preferably between 90% and 99%.
- the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of said ho-stereoisomer of difethialone is from 96% to 100%.
- composition according to the invention In a composition according to the invention:
- the quantity of laevorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone relative to the sum of the amounts of each of the enantiomers (levorotatory and dextrorotatory) of said ho-stereo-isomer of difethialone is greater than 0.5 (greater than at 50%);
- the laevorotatory enantiomer concentration of said homo-isomer of difethialone relative to the sum of the concentrations of each of the enantiomers (levorotatory and dextrorotatory) of said homo-stereoisomer of difethialone is greater than 0.5 (greater than 50); ), and;
- the proportion of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone in the composition is greater than the proportion of the other enantiomer (dextrorotatory) of said homo-stereoisomer of difethialone.
- the proportion of laevorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone in the composition is more than 50% relative to said homo-isomer of difethialone.
- the composition may comprise a proportion of dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone, said proportion being less than 50%, in particular less than 25, preferably between 0% and 25, in particular less than 10%. relative to the amount of said homo-stereoisomer of difethialone.
- the difethialone is predominantly in the form of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
- the composition comprises the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone with a proportion greater than each of the proportions of each of the other enantiomers of the difethialone relative to the difethialone.
- the ratio of the amount of laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone to the sum of the amounts of each of the enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone and said hetero-stereoisomer of difethialone is greater than 0.25 (greater than 25%);
- the ratio of the laevorotatory enantiomer concentration of said homo-isomer of difethialone to the sum of the concentrations of each of the enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone and said hetero-stereoisomer of difethialone is greater than 0.25 (greater than 25%), and;
- the proportion of laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone in the composition is greater than the proportion of each of the enantiomers of said homo-stereoisomer of the difethialone and of said hetero-stereoisomer of the difethialone.
- the proportion of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone in the composition is more than 25% relative to the difethialone.
- the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of difethialone is greater than 25%, especially greater than 50%, in particular greater than 70%, more particularly greater than 80%, preferably greater than 90%, particularly preferably greater than 95%, more preferably greater than 98%, still more preferably greater than 99% or of the order of 100%.
- a composition according to the invention therefore comprises difethialone predominantly in the form of a laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
- the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of difethialone is greater than 70%, preferably between 80% and 100%, more preferably between 90% and 100% - relative to the amount of difethialone.
- the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone, such as the ratio of this amount on the amount of difethialone is between 95% and 99%.
- the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of difethialone is between 96% and 100%.
- the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of difethialone is substantially of the order of 100%.
- the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of difethialone is greater than 95%.
- a composition according to the invention may be substantially free of dextrorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone, that is to say that the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone may be present in the composition but only in the form of traces. It may also be substantially free of said hetero-stereoisomer of difethialone, that is to say that said hetero-stereoisomer of difethialone may be present in the composition but only in the form of traces.
- the composition is in the liquid state and comprises a liquid solvent of difethialone.
- a liquid solvent of difethialone may be a solution of difethialone in a solvent of difethialone, excluding a racemic mixture of said levogyre and dextrorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone.
- It may also be a solution comprising difethialone in a solvent of difethialone and wherein said homo-stereoisomer of difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer.
- It may also be a solution comprising difethialone in a solvent of difethialone and in which the difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone. It can also be a suspension or an emulsion of difethialone in a liquid medium.
- the composition is the solid state. It may also be a solid comprising difethialone, excluding a racemic mixture of dextrorotatory and levorotatory enantiomers of said ho-stereoisomer of difethialone. It may also be a solid comprising difethialone and in which said ho-stereo-isomer of difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer.
- It may also be a solid comprising difethialone and in which the difethialone is predominantly in the form of a laevorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone.
- the invention therefore also relates to a composition comprising difethialone, the difethialone of the composition being optically active.
- the difethialone of the composition according to the invention is optically inactive.
- the invention also relates to the use of a composition according to the invention for the preparation of a rodenticide bait for harmful target rodents.
- the invention also relates to a rodenticide bait comprising a composition according to the invention, and at least one edible excipient for harmful target rodents.
- a rodenticide bait according to the invention comprises:
- the laevorotatory enantiomer of the configuration stereoisomer of difethialone called a ho-mono-isomer, of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -1- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene, in which the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group of said homo-stereoisomer are of the same absolute configuration, excluding a racemic mixture of laevorotatory and dextrorotatory enantiomers of said ho - stereoisomer of difethialone.
- the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone and the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone are in distinct amounts.
- a rodenticide bait according to the invention comprises an edible excipient for harmful target rodents, and said homo-stereoisomer of difethialone predominantly in the form of levorotatory enantiomer.
- the inventors who succeeded in separating the laevorotatory enantiomer and the dextrorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone and the enantiomers of said hetero-stereoisomer of difethialone and in obtaining the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer isolated difethialone, have found that said difethialone homo-isomer is in fact the configuration stereoisomer of difethialone which is of lower hepatic persistence in harmful target rodents.
- the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone is the enantiomer of the two enantiomers (levorotatory and dextrorotatory) of said homo-stereoisomer of difethialone, which is the most remanent in the liver. harmful target rodents.
- this levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone has a persistence in the liver of harmful target rodents higher than that of said homo-stereoisomer of difethialone.
- the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone makes it possible in fact to effectively fight against harmful target rodents and in particular with reduced doses of difethialone.
- the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone is an alternative of choice for the production of a rodenticide bait having a rodenticide efficacy - particularly at low dose - and acceptable ecotoxicity. It is also an alternative for the production of rodenticide baits for the control of rodents that are susceptible to resistance to known rodenticide baits.
- the rodenticide bait comprises a mass quantity of difethialone such that the ratio (mass proportion) of this mass quantity of difethialone to the mass quantity of rodenticide bait is less than 200 ppm-that is less than 200 mg of difethialone per kilogram of rodenticide bait.
- the mass proportion of the difethialone in the rodenticide bait is included between 1 ppm and 100 ppm (1 mg to 100 mg of difethialone per kilogram of rodenticide bait), in particular between 5 ppm and 100 ppm (5 mg to 100 mg of difethialone per kilogram of rodenticide bait), preferably between 5 ppm and 50 ppm (5 mg to 50 mg of difethialone per kilogram of rodenticide bait), more preferably between 10 ppm and 50 ppm (10 mg to 50 mg of difethialone per kilogram of rodenticide bait), more preferably still included between 15 ppm and 50 ppm (15 mg to 50 mg of difethialone per kilogram of rodenticide bait).
- the edible excipient for harmful rodent targets is chosen to allow consumption of the bait by harmful target rodents.
- each edible excipient is non-lethal for harmful target rodents.
- the edible carrier is not a rodenticide in itself.
- the edible excipient comprises at least one food selected from the group consisting of cereal seeds-notably dehulled cereal seeds-cereal seed mills, cereal seed flours, flakes cereal seeds, cereal bran and non-cereal seeds, eg alfalfa seeds - in particular in the form of husks, in the form of milling, in the form of flour, in the form of flakes or of ses-.
- the edible carrier may include any carrier that may be consumed by harmful target rodents.
- the edible carrier comprises at least one food selected from the group consisting of plant foods and foods of animal origin.
- the edible carrier comprises at least one food chosen to stimulate the appetite of harmful target rodents.
- this food is selected from the group consisting of seeds of one or more cereals, seeds of one or more grains, seeds of one or more grains, seed flakes of one or more cereals, the sound of one or more cereals, and the grain meal of one or more cereals.
- the food is selected from the group consisting of sweet foods.
- these may be foods comprising at least one sugar selected from the group consisting of sucrose, lactose, fructose and glucose.
- It may be a sugar syrup-for example, a sugar syrup obtained by hydrolysis of the starch-or a sugar syrup obtained by hydrolysis of sucrose (invert sugar syrup), or beet sugar syrup, or maple syrup or sugar cane syrup, or syrup obtained from a plant of the genus stevia.
- the food is chosen from the group consisting of flakes and coconut albumen flour (copra).
- the food is selected from the group consisting of nuts, hazelnuts and almonds-shredded and / or powdered.
- the food is selected from the group consisting of vegetable fats, vegetable oils (for example rapeseed oil, soy fat, sunflower oil, cocoa butter, peanut oil, peanut butter, corn oil palm oil), animal fats and animal oils (butter, lard, fish oil).
- vegetable oils for example rapeseed oil, soy fat, sunflower oil, cocoa butter, peanut oil, peanut butter, corn oil palm oil
- animal fats and animal oils (butter, lard, fish oil).
- the food is selected from the group consisting of proteins of plant origin and proteins of animal origin.
- proteins of plant origin and proteins of animal origin.
- the rodenticide bait is chosen from the group consisting of solid baits comprising difethialone and a solid edible excipient.
- the rodenticide bait is a solid in the divided state, for example in the form of pellets or granules.
- the rodenticide bait can be a solid in the form of a block or paste that can be consumed by the target harmful rodents or a solid material that can be eaten by the target harmful rodents.
- the solid rodenticide bait according to the invention can be in the form of a rigid block, a semi-rigid block, a foam, a powder or a gel.
- the rodenticide bait in the form of a powder, in the form of a foam or in the form of a gel is adapted to be able to soil the fur of the target rodent (s) harmful (s) ) and to be ingested by him (them) during his (their) grooming.
- the rodenticide bait is chosen from the group consisting of liquid baits comprising difethialone and a liquid edible excipient.
- the rodenticide bait is then a drink for harmful target rodents.
- the rodenticide bait is chosen from the group consisting of liquid baits comprising difethialone and a liquid edible excipient.
- the rodenticide bait is then a drink for harmful target rodents. It may be a solution of difethialone in a solvent of difethialone, excluding a racemic mixture of dextrorotatory and levorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone.
- the invention thus also relates to a rodenticide bait in which the difethialone is optically active. However, it is not excluded that the difethialone of the rodenticide bait according to the invention is optically inactive.
- the rodenticide bait comprises at least one dye.
- a dye makes it possible in particular to give said rodenticide bait a color easily detectable and identifiable by a person handling the rodenticide bait.
- the rodenticide bait comprises at least one preservative able to ensure its conservation during storage.
- the rodenticide bait includes at least one bittering type compound denatonium benzoate, also known as the "Bitrex ®" designed to reduce the risk of accidental consumption by non-target organisms.
- the composition and the rodenticide bait according to the invention comprise exclusively difethialone as a rodenticide substance.
- the composition and the rodenticide bait according to the invention are free of any other anticoagulant substance for rodenticide use.
- the composition and rodenticide bait may include any harmful substance other than a rodenticide, such as an insecticide and / or acaricide.
- composition and the rodenticidal bait according to the invention comprise difethialone excluding a racemic mixture of levogyre and dextrorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer and at least one other substance. distinct from difethialone as a rodenticide.
- This other rodenticide substance, distinct from difethialone may be another anticoagulant, particularly anti-vitamin K or non-anticonagulant, or another non-anticoagulant rodenticide.
- the invention also relates to a method for controlling harmful target rodents in which a quantity of bait is dispersed.
- rodenticide comprising:
- At least one edible carrier for harmful target rodents at least one edible carrier for harmful target rodents
- the invention also relates to a method for controlling harmful target rodents in which a quantity of rodenticide bait according to the invention is dispersed, said quantity of bait being sufficient to be rodenticide.
- a quantity of rodenticide bait comprising said homo-stereoisomer of difethialone is mainly disseminated in the form of a laevorotatory enantiomer, having an acceptable rodenticidal efficacy even at a low dose of difethialone.
- the method according to the invention thus makes it possible to limit the secondary poisoning of non-rodent mammals and of birds capable of feeding with dead or poisoned live rodents, but comprising a reduced amount, and in particular a non-lethal quantity, of difethialone.
- the method according to the invention also makes it possible to limit such secondary poisoning of non-rodent mammals and birds likely to preferentially consume the viscera, in particular the liver, of said dead or alive poisoned rodents.
- said homo-stereoisomer of difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer.
- the difethialone is predominantly in the form of a laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
- a rodenticide bait according to this variant of the invention is a deadly bait in a single catch or "one-shot" in English.
- the mass proportion of difethialone in the bait is between 5 ppm and 200 ppm, in particular between 5 ppm and 100 ppm, preferably between 5 ppm and 50 ppm, more preferably between between 15 ppm and 50 ppm.
- harmful target rodents consume a quantity of difethialone; o non-lethal for harmful target rodents, i.e., generally non-lethal to harmful target rodents, consuming said bait for a period of 24 consecutive hours, and;
- This other variant of the invention therefore relates to a method for controlling harmful target rodents in which a quantity of lethal rodenticide bait is dispersed for the target rodent pests consuming this rodenticide and non-lethal bait permanently for rodents or non-target animals accidentally consuming this rodenticide bait.
- This is called a "multi-dose” or "multi-feeding" control method.
- the consumption of rodenticide bait by a target rodent harmful for a period of 24 hours is insufficient to cause the death of said rodent, while repeated consumption of rodenticide bait for at least two days resulting in the death of the target rodent.
- accidental consumption of rodenticide bait by an animal or a non-target human for a period of 24 hours is most often insufficient to cause the death of said animal or a human.
- the invention therefore relates to a method for controlling harmful target rodents in which harmful target rodents are provided with a quantity of rodenticide bait capable of being ingested by the target harmful rodents, said quantity of rodenticide bait being sufficient to kill harmful target rodents consuming the rodenticide bait for several days.
- the quantity of disseminated rodenticide bait, the mass proportion of difethialone relative to the rodenticide bait and the proportion of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone relative to the difethialone are adapted so that the consumption of rodenticide bait is lethal to harmful target rodents consuming daily bait for at least two 24-hour periods
- a quantity of rodenticide bait is dispersed so that harmful target rodents consume a quantity of difethialone sufficient to be lethal to said harmful target rodents consuming said bait for several periods of 24 hours. said periods being consecutive.
- the amount of laevorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone is such that the ratio of this amount to the amount of difethialone being greater than 95% - in particular of the order of 100% -, the mass proportion of difethialone relative to the rodenticide bait is between 5 ppm and 50 ppm -in particular between 10 ppm and 15 ppm-.
- harmful target rodents are provided with a quantity of rodenticide bait sufficient to satisfy daily the appetite of the target harmful rodents, said rodenticide bait comprising a major proportion of levorotatory enantiomer of said homo-steroid. isomer of difethialone.
- the amount of disseminated rodenticide bait, the proportion of the laevorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone relative to difethialone and the mass proportion of difethialone relative to the rodenticide bait to allow rodenticide bait consumption for several days by harmful target rodents, while limiting:
- the invention also relates to a chromatographic process for obtaining a laevorotatory enantiomer of a configuration stereoisomer of the homo-stereo-isomer difethialone of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) 1- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalene, wherein carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene moiety of said homo-stereoisomer are of the same configuration absolute, a process in which:
- a mixture of acetonitrile (A) and water comprising 0.1% by volume of formic acid (B) is chosen as liquid mobile phase, with an A / B volume ratio of 80/20; and with a flow rate of the liquid mobile phase in the chromatography column of 0.25 mL / min;
- a liquid composition comprising said laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone is introduced at the top of the chromatography column, and then;
- the liquid composition is entrained with the mobile phase in the column for chromatography under conditions suitable for separating the configuration stereoisomers from the difethialone, and; collecting a fraction of the mobile phase comprising said laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone with a retention time ti of value such that ti ⁇ t 2 ⁇ t 3 ⁇ t 4 ; t 2 , t 3 and t 4 represent the retention times of each of the configuration stereoisomers of the difethialone distinct from the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone, separately from a dextrorotatory enantiomer of said homo-stereo difethialone isomer of retention time t and separately from the levorotatory and dextrorotatory enantiomers of a difethialone configuration stereoisomer, called a
- the liquid mobile phase of said fraction is removed so as to obtain said laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
- the invention also relates to a configuration stereoisomer of difethialone, a process for obtaining such a configuration stereo-isomer, a composition comprising such a configuration stereo-isomer, a rodenticide bait and a method of controlling harmful target rodents characterized in combination by all or some of the characteristics mentioned above or hereafter.
- FIG. 1 is a chromatogram of analysis by high pressure liquid chromatography on a chiral column of difethialone (top) and of the levorotatory enantiomer of said homo-isomer of purified difethialone (bottom);
- FIG. 2 is a 300 MHz proton NMR spectrum of said homo-isomer of difethialone
- FIG. 3 is a 300 MHz proton NMR spectrum of said hetero-stereoisomer of difethialone
- FIG. 4 is a 500 MHz proton NMR spectrum of the levorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone;
- FIG. 5 is a 13 C-carbon NMR spectrum at 500 MHz of the levorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone;
- FIG. 6 is a 500 MHz proton NMR correlation spectroscopy analysis (1H-NMR) of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone;
- FIG. 7 is a circular dichroism spectrum of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone
- FIG. 8 is a graphical representation of the temporal evolution of the hepatic concentration in rats (male and female) of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone ( ⁇ ) and said homo-stereoisomer of difethialone (O), and;
- FIG. 9 is a graphical representation of the temporal evolution of the hepatic concentration in rats (males and females) of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone ( ⁇ ) and of total difethialone ( ⁇ ) .
- the homo-stereoisomer of difethialone is identified by magnetic resonance spectroscopy (1 H NMR) of the proton.
- the homo-stereoisomer of the difethialone in solution in CDCl 3 has a multiplet with a chemical shift ( ⁇ ) of between 4.9 ppm and 5.1 ppm and corresponding to the proton carried by the carbon 1 of the group 1,2 3,4-tetrahydronaphthalene of difethialone as illustrated in FIG.
- the hetero-stereoisomer of difethialone and the homo-stereoisomer of difethialone are distinguished by their proton NMR spectra.
- the chemical shift of the proton carried by carbon 1 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group of said hetero-stereoisomer of difethialone (FIG. 3) is between 5, 2 ppm and 5.4 ppm.
- the inventors have solved the complex and unresolved problem of separating the levorotatory and dextrorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer from difethialone from a commercial difethialone preparation.
- the flow rate of the mobile phase in the column is 0.25 ml / min and the separation is carried out at a temperature of 23.2 ° C.
- the solution containing the sample to be analyzed is at a concentration of 1 ⁇ g of difethialone per milliliter in acetonitrile and is filtered on a membrane of regenerated cellulose with a cut-off of 0.2 ⁇ .
- the volume of solution containing the sample to be analyzed injected on the column is 1 ⁇ L ⁇ .
- the value of the retention time (ti) of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer according to the invention is of the order of 8.1 min as described in FIG. 1.
- the value of the retention time (t 4 ) of said dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer according to the invention is of the order of 14.4 min, so that the dextrorotatory and laevorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer can be effectively separated by high pressure liquid chromatography on a chiral column.
- the value of the retention time (t 3 ) of the dextrorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer of difethialone is of the order of 11.7 min and the value of the retention time (t 2 ) of the levorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer of difethialone is of the order of 9.4 min.
- the order of elution of the enantiomers of the difethialone is such that ⁇ t 2 ⁇ t 3 ⁇ t.
- the UV spectrum of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in solution in chloroform (CHCt 3 ) has peaks of absorbance at 238.2 nm and 259.5 nm.
- the inventors have characterized the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone in the isolated state by its rotatory power (also called optical activity or circular birefringence), that is to say by its property to deflect the plane.
- rotatory power also called optical activity or circular birefringence
- polarization of a polarized light A deflection of the plane of polarization of the polarized light in the clockwise direction of rotation in facing the polarized light beam characterizes a solution and an optically active and dextrorotatory compound, and a deflection of the polarization plane of the polarized light in the counterclockwise direction of rotation facing the polarized light beam characterizes a solution and an optically active and levorotatory.
- the rotatory power of a laevorotatory enantiomer solution of said homo-stereoisomer of difethialone in chloroform (CHCt 3 ) is measured at a concentration of 11.05 g / L.
- the rotary power of this solution is measured by means of a P 2000 digital polarimeter (JASCO, Bouguenais, France) operating with excitation light with a wavelength of 589 nm.
- the mean rotatory power obtained over 2 series of 10 measurements is -1.635 °.
- the specific rotation power at 25 ° C [ ⁇ ] ⁇ c 58 nm of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in solution in chloroform, measured on the sodium D line (589 nm) is -14 , 8 °.
- FIGS. 2 and 3 respectively represent a nuclear magnetic resonance spectrum of the proton (1 H NMR) at 300 MHz of the homo-stereoisomer of difethialone in CDCC 3 (FIG. 2) and a nuclear magnetic resonance spectrum of the proton at 300 MHz in CDCC 3 of the hetero-stereoisomer of difethialone in CDCC 3 ( Figure 3).
- Said homo-stereoisomer of difethialone has (FIG. 2) a multiplet whose chemical shift ( ⁇ ) is between 4.9 ppm and 5.1 ppm corresponding to carbon 1 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group.
- said homo-stereoisomer of difethialone has (Figure 3) a multiplet whose chemical shift ( ⁇ ) is between 5.2 ppm and 5.4 ppm.
- Figure 4 shows a 500 MHz proton NMR spectrum of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in CDCC 3 .
- the proton NMR spectra of the dextrorotatory and levorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone are indistinguishable from each other.
- FIG. 5 is a 13 C NMR spectrum of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in solution in CDCt 3 at a concentration of 40 mg / ml produced on a Bruker AVANCE III HD (500 MHz) spectrometer equipped of a PRODIGY motorized multi-core direct cryoprobe. It allows an identification of the 31 carbon atoms of the difethialone.
- the 13 C-NMR spectrum of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone is not distinguishable from the 13 C-NMR spectrum of the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
- Said homo-stereoisomer of difethialone has a signal between 34 ppm and 38 ppm characteristic and distinctive of said hetero-stereoisomer of difethialone.
- FIG. 6 is a two-dimensional (1H-NMR) two-dimensional proton NMR spectrum obtained by correlation spectroscopy of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in solution in CDCt 3 at a concentration of 40 mg / mL performed on a Bruker AVANCE III spectrometer HD (500 MHz) equipped with a PRODIGY motorized multi-core direct cryoprobe. It makes it possible to identify the coupling of the proton carried by the carbon 1 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group of said homo-stereoisomer of the difethialone with the protons carried by the carbon 2 of the 1,2,3,4 group. tetrahydronaphthalene at 2.27 ppm.
- 0.525 g ( ⁇ 0.025 g) of rat liver are weighed accurately and placed in a 50 ml polypropylene tube. 10 mL of acetone was added and the suspension is subjected to homogenization using a homogenizer / disperser ® Ultra-Turrax for a period of about 30 sec. The rod of the homogenizer / disperser is rinsed with hot water and then twice with 20 ml of acetone in a polypropylene tube. The homogenate is centrifuged for 5 minutes at a centrifugation rate of 3000 rpm (rotation per minute). The supernatant is collected and decanted into a test tube. The sample is evaporated under a stream of nitrogen (N 2 ) at a temperature of 40 ° C to form a dry extract.
- N 2 nitrogen
- the cartridge is dried by vacuum suction connected at the bottom of the cartridge.
- 1 mL of elution solution consisting of dichloromethane (CH 2 Cl 2 ) and of methanol (CH 3 OH) in a volume proportion of 90/10 is then deposited at the top of the cartridge and an eluate comprising difethialone is collected at the bottom of the cartridge.
- the eluate solvent was evaporated under a stream of nitrogen (N 2 ) at a temperature of 40 ° C.
- the sample is taken up in 0.5 ml of acetonitrile (NC-CH 3 ) and the acetonitrile solution containing the difethialone is filtered on a 0.2 ⁇ filter.
- the value of the retention time () of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone according to the invention is between 7.8 min and 8.4 min (the maximum value of the peak corresponding to the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer being of the order of 8.1 min, as described in FIG.
- the value of the retention time (t 4 ) of the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer is between 13.3 min and 15.1 min (the maximum value of the peak corresponding to the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereo-isomer). isomer being of the order of 14.4 min), depending on the operating conditions -especially according to the temperature conditions of the column-.
- the value of the retention time (t 3 ) of the dextrorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer of difethialone is between 11.2 min and 12.3 min (the maximum value of the peak corresponding to the dextrorotatory enantiomer of said hetero - stereoisomer being of the order of 11.7 min), depending on the operating conditions -especially according to the temperature conditions of the column-.
- the value of the retention time (t 2 ) of the laevorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer of difethialone is between 9.0 min and 9.8 min (the maximum value of the peak corresponding to the laevorotatory enantiomer of said hetero - stereo-isomer being of the order of 9.4 min), depending on the operating conditions -partement depending on the temperature conditions of the column-.
- the composition of the sample is analyzed by high pressure liquid chromatography as described in point A2) above.
- Gents are administered to male and female coumafen-sensitive rats (Rattus norvegicus), a solution of a mixture of said ho-stereo-isomer and said hetero-stereoisomer of difethialone in a mixture. of vegetable oil and 5% DMSO.
- the molar ratio of the amount of said homo-stereoisomer to the amount of said hetero-stereoisomer is 4/6.
- Each diastereoisomer of difethialone is formed from a racemic mixture of the two enantiomers of the corresponding diastereoisomer.
- the gavage solution is administered (on day 0) so that the amount of difethialone ingested by each rat is of the order of 3.4 mg per kilogram of rat.
- fed rats are treated daily by subcutaneous administration of a dose of vitamin K1 (as an antidote to bleeding) at the rate of 0.1U per 200g of rat's weight.
- the measured difethialone concentrations (average of the values measured in 6 rats and expressed in nanogram of enantiomer per gram of liver (ng / g) in the liver of the gavaged rats are given as a function of time ( in hours) after gavage
- the concentration of the laevorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer according to the invention in the liver is represented by solid circles ( ⁇ ) on the left scale and the concentration of said homo-stereoisomer of difethialone in the liver is represented by open circles (O) on the right scale.
- the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer according to the invention exhibits inexplicably high liver remanence compared with the homogeneity of the homo-stereoisomer of difethialone.
- the concentration of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer according to the invention in the liver is represented by solid circles ( ⁇ ) on the left scale and the concentration of total difethialone in the liver is represented by open triangles ( ⁇ ) on the right scale.
- the corresponding values are given in Table 1 below.
- the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer according to the invention has a high hepatic remanence with respect to the persistence of the difethialone.
- a pasty rodenticide bait according to the invention is produced by dispersing a quantity of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in an edible excipent comprising vegetable fat and cereal flour.
- the measured proportion of difethialone relative to the bait is 13.7 ppm and the proportion of laevorotatory enantiomer of said homo-isomer relative to the difethialone is 95.4% (13.1 mg of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone per kilogram of bait).
- the bait further comprises a mass proportion of 3.3% of dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone relative to difethialone and a mass proportion of 1.4% dextrorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomeric isomer of difethialone relative to difethialone.
- Bait with a low dose of 13.7 ppm difethialone achieves a 100% mortality rate while minimizing the risk of animal intoxication - in particular, susceptible, predatory birds or scavengers of weak rodent pests. having consumed a rodenticide bait according to the invention.
- a composition, a rodenticide bait and a method for controlling harmful target rodents are subject to infinity of variants both in the formulation of the bait and in the methods of implementation of the method.
Abstract
The invention relates to a levorotatory enantiomer of the configurational stereoisomer of difethialone, referred to as a homo-stereoisomer, of formula 3-(4'-bromobiphenyl-4-yl)-1-(4-hydroxythiocoumarin-3-yl)-1,2,3,4-tetrahydronaphthalene, in which the carbon atoms 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group have the same absolute configuration.
Description
STÉRÉO-ISOMÈRE DE CONFIGURATION DE LA DIFETHIALONE, COMPOSITION ET APPÂT RODONTICIDE LE COMPRENANT ET PROCÉDÉ DE LUTTE CONTRE DES RONGEURS CIBLES NUISIBLES DIFETHIALONE CONFIGURATION STEREO-ISOMER, COMPOSITION AND RODONTICIDE BAIT COMPRISING SAME, AND METHOD FOR CONTROLLING HARMFUL TARGET RODENTS
L'invention concerne un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone comme composé isolé, une composition et un appât rodonticide comprenant un tel stéréo-isomère de configuration et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles. L'invention concerne donc le domaine technique de la lutte contre des populations de rongeurs cibles nuisibles. The invention relates to a configuration stereoisomer of difethialone as an isolated compound, a composition and a rodenticide bait comprising such a configuration stereoisomer and a method for controlling deleterious target rodents. The invention thus relates to the technical field of the fight against target rodent pest populations.
Il est connu d'utiliser des appâts rodonticides faisant office de poison pour des rongeurs cibles nuisibles. On sait de EP 2 090 164 que la diféthialone est un anticoagulant de deuxième génération agissant à simple dose. US 2005/181003 décrit un appât rodonticide sous forme de gel comprenant de la diféthialone en proportion massique de 25 ppm. It is known to use rodenticide baits as a poison for harmful target rodents. It is known from EP 2,090,164 that difethialone is a second-generation anticoagulant acting at a single dose. US 2005/181003 discloses a rodenticide bait in gel form comprising difethialone in a mass proportion of 25 ppm.
Les appâts de EP 2 090 164 et de US 2005/181003 sont susceptibles d'être consommés par des animaux autres que des rongeurs cibles nuisibles lorsqu'ils sont mis à la disposition de rongeurs cibles nuisibles. Ils peuvent être consommés directement (consommation primaire) par des animaux domestiques ou des animaux de compagnie. Ils peuvent aussi être consommés accidentellement par des humains. Une telle consommation peut produire chez ces animaux domestiques, chez ces animaux de compagnie ou chez des humains un empoisonnement qui peut être létal. The baits of EP 2,090,164 and US 2005/181003 are susceptible to being consumed by animals other than harmful target rodents when they are made available to harmful target rodents. They can be consumed directly (primary consumption) by pets or pets. They can also be accidentally consumed by humans. Such consumption may produce poisoning in these pets, pets, or humans that can be lethal.
En outre, une fraction de la diféthialone de ces appâts rodonticides peut être ingérée (consommation secondaire) par des animaux -notamment par des oiseaux- prédateurs de rongeurs nuisibles affaiblis ayant consommé un tel appât rodonticide ou par des animaux charognards de rongeurs nuisibles morts d'avoir consommé un tel appât rodonticide. Cette consommation secondaire est susceptible d'entraîner à terme la mort de ces animaux prédateurs ou charognards qui peuvent être des animaux -notamment des oiseaux- appartenant à des espèces protégées. In addition, a fraction of the difethialone of these rodenticide baits may be ingested (secondary consumption) by animals - in particular by weaker rodent-killing predatory birds that have consumed such a rodenticide bait or by dead rodent-killing scavenging animals. have consumed such rodenticide bait. This secondary consumption is likely to eventually lead to the death of these predatory animals or scavengers that may be animals - especially birds - belonging to protected species.
L'invention vise donc à pallier ces inconvénients en proposant un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, une composition
et un appât rodonticide comprenant un tel stéréo-isomère de configuration et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles qui sont en même temps efficaces pour contrôler les populations de rongeurs cibles nuisibles et qui permettent aussi de limiter les risques d'empoisonnement d'animaux non-cibles - notamment des animaux domestiques ou d'élevage, des animaux de compagnie ou des humains- consommant accidentellement un tel appât rodonticide, mais aussi les risques d'empoisonnement, dit secondaire, d'animaux -par exemple de renards ou d'oiseaux- sauvages prédateurs de rongeurs cibles nuisibles affaiblis ayant consommé de l'appât rodonticide ou d'animaux sauvages charognards de rongeurs cibles nuisibles morts empoisonnés. The aim of the invention is thus to overcome these drawbacks by proposing a configuration stereoisomer of difethialone, a composition and a rodenticide bait comprising such a configuration stereo-isomer and a method of controlling harmful rodent rodents that are at the same time effective in controlling target rodent pest populations and that also limit the risk of animal poisoning. non-targets - particularly domestic or farm animals, pets or humans - accidentally consuming such a rodenticide bait, but also the risk of secondary poisoning of animals - for example foxes or wild-bird predators of weakened target rodents that have consumed rodenticide bait or wild animals scavengers of poisonous dead target rodents.
L'invention vise aussi à proposer un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, une composition et un appât rodonticide comprenant un tel stéréo-isomère de configuration et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles dont la mise en œuvre respecte les règles de protection de l'environnement -notamment vis à vis de la protection des oiseaux, et en particulier des rapaces-. The invention also aims at providing a configuration stereoisomer of difethialone, a composition and a rodenticide bait comprising such a configuration stereoisomer and a method for controlling harmful target rodents whose implementation complies with the rules of the invention. protection of the environment -especially with respect to the protection of birds, especially raptors-.
L'invention vise aussi à proposer un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, une composition et un appât rodonticide comprenant un tel stéréo-isomère de configuration et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles qui ne nécessitent pas, pour contrôler une population de rongeur cibles nuisibles, d'utiliser des doses massives d'un agent rodonticide et qui sont respectueux de l'environnement, de la santé humaine et des animaux non cibles -notamment des oiseaux-. The invention also aims at providing a configuration stereoisomer of difethialone, a composition and a rodenticide bait comprising such a configurational stereoisomer and a method for controlling harmful target rodents that do not require, to control a population harmful rodent rodents, use massive doses of a rodenticide and that are environmentally friendly, human health and non-target animals - especially birds-.
L'invention vise aussi à proposer un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, une composition et un appât rodonticide comprenant un tel stéréo-isomère de configuration et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles susceptibles de pouvoir être utilisés pour lutter contre des rongeurs cibles nuisibles résistants à des appâts connus de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles. The invention also aims at providing a configuration stereoisomer of difethialone, a composition and a rodenticide bait comprising such a configuration stereo-isomer and a method for controlling harmful target rodents that can be used to fight against harmful target rodents resistant to known baits for the control of harmful target rodents.
L'invention vise donc aussi à proposer une alternative à des appâts rodonticides connus.
Pour ce faire, l'invention concerne un énantiomère lévogyre d'un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, dit ho mo- stéréo-isomère, de formule 3-(4'-bromobiphenyl-4-yl)-l-(4-hydroxythiocoumarin-3-yl)- 1,2,3,4- tétrahydronaphtalène, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphtalène sont de même configuration absolue. The invention therefore also aims to provide an alternative to known rodenticide baits. To this end, the invention relates to a levorotatory enantiomer of a configuration stereoisomer of difethialone, called a ho-mono-isomer, of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -1 (4 -hydroxythiocoumarin-3-yl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalene, wherein the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group are of the same absolute configuration.
Dans tout le texte : Throughout the text:
- le terme « diféthialone » désigne le composé 3-(4'bromobiphenyl- 4-yl)- 1 -(4-hydroxythiocoumarin-3-yl)- 1 ,2,3,4-tétrahydronaphtalène ou 3- [3- [4- (4-bromophényl)phenyl]-l-tétralinyl]-2-hydroxy-4-thiochroménone ou 3-[3-(4'- bromo[ 1 , 1 '-biphényl]-4-yl)- 1 ,2,3,4-tétrahydro- l-naphthalényl]-4-hydroxy-2H- 1- benzothiopyran-2-one de formule I) ci-après : the term "difethialone" refers to the compound 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -1- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalene or 3- [3- [4] - (4-bromophenyl) phenyl] -1-tetralinyl] -2-hydroxy-4-thiochromenone or 3- [3- (4'-bromo [1,1'-biphenyl] -4-yl) -1,2 3,4-tetrahydro-1-naphthalenyl] -4-hydroxy-2H-1-benzothiopyran-2-one of formula I) below:
dans laquelle sont présentés les numéros des carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène ; in which the numbers of carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group are presented;
- le terme « stéréo-isomères » désigne des isomères de même formule semi-dé veloppée, mais dont la position relative des atomes diffère dans l'espace. L'expression « stéréo-isomères de configuration » désigne les stéréo- isomères dont la conversion de l'un en l'autre de ces stéréo-isomères de configuration nécessite une rupture/reformation d'une liaison covalente interatomique. Ainsi, l'expression « stéréo-isomères de configuration » désigne les stéréo-isomères qui ne sont pas des isomères de conformation (ou "rotamères", dont la conversion de l'un en l'autre des isomères de conformation s'accompagne uniquement d'une rotation d'une partie de la molécule selon l'axe d'une liaison σ (sigma) formée par recouvrement axial d'orbitales) ; the term "stereoisomers" refers to isomers of the same semi-expanded formula, but whose relative position of atoms differs in space. The term "configuration stereo-isomers" refers to stereoisomers whose conversion of these configuration stereoisomers into one another requires a break / reformation of an interatomic covalent bond. Thus, the term "configuration stereo-isomers" refers to stereoisomers which are not conformational isomers (or "rotamers", whose conversion of the one to the other of the conformational isomers is accompanied only by a rotation of a part of the molecule along the axis of a bond σ (sigma) formed by axial overlap of orbitals);
- le terme « homo- stéréo-isomère » de la diféthialone désigne le stéréo-isomère de configuration de la diféthialone de formule 3-(4'- bromobiphenyl-4-yl)- 1 -(4-hydroxythiocoumarin-3-yl)- 1 ,2,3,4-
tétrahydronaphtalène, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphtalène sont de même configuration absolue (1S-3S ou 1R-3R), lesdites configurations absolues étant déterminées selon les règles séquentielles de priorité et la nomenclature de Cahn, Ingold et Prelog (CIP) ; the term "homo-stereoisomer" of difethialone refers to the configuration stereoisomer of the difethialone of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -1- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) - 1, 2,3,4- tetrahydronaphthalene, in which the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group are of the same absolute configuration (1S-3S or 1R-3R), said absolute configurations being determined according to the sequential priority rules and the nomenclature of Cahn, Ingold and Prelog (CIP);
- le terme « hétéro- stéréo-isomère » de la diféthialone désigne le stéréo-isomère de configuration de la diféthialone de formule 3-(4'- bromobiphenyl-4-yl)- 1 -(4-hydroxythiocoumarin-3-yl)- 1 ,2,3,4- tétrahydronaphtalène, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphtalène sont de configurations absolues distinctes (1S-3R ou 1R- 3S) lesdites configurations absolues étant déterminées selon les règles séquentielles de priorité et la nomenclature de Cahn, Ingold et Prelog (CIP) ; the term "hetero-stereoisomer" of difethialone refers to the configuration stereoisomer of the difethialone of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -1- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) - 1, 2,3,4-tetrahydronaphthalene, wherein the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group are of distinct absolute configurations (1S-3R or 1R-3S), said absolute configurations being determined according to the rules sequential prioritization and nomenclature of Cahn, Ingold and Prelog (CIP);
- le terme « quantité » s'entend d'une quantité molaire, d'une quantité massique ou d'une quantité volumique. Les proportions sont donc des proportions d'une quantité molaire rapportée à une quantité molaire, d'une quantité massique rapportée à une quantité massique, ou d'une quantité volumique rapportée à une quantité volumique ; the term "quantity" means a molar amount, a mass quantity or a volume quantity. The proportions are therefore proportions of a molar amount relative to a molar amount, of a mass quantity relative to a mass quantity, or of a volume quantity referred to a volume quantity;
- le terme « sensiblement » indique, de façon habituelle, qu'une caractéristique structurelle ou fonctionnelle ne doit pas être prise comme marquant une discontinuité abrupte, qui n'aurait pas de sens physique, mais couvre non seulement cette structure ou cette fonction, mais également des variations légères de cette structure ou de cette fonction qui produisent, dans le contexte technique considéré, un effet de même nature, sinon de même degré ; - the term "substantially" indicates, in the usual way, that a structural or functional characteristic should not be taken as marking an abrupt discontinuity, which would have no physical meaning, but covers not only that structure or function, but also slight variations of this structure or function which produce, in the technical context considered, an effect of the same nature, if not of the same degree;
- les expressions « chromatographie liquide à haute pression » ou « chromatographie liquide à haute performance » (« CLHP ») désignent la chromatographie « HPLC » ou « High Performance Liquid Chromatography », et ; the terms "high pressure liquid chromatography" or "high performance liquid chromatography" ("HPLC") refer to "HPLC" or "High Performance Liquid Chromatography" chromatography, and;
- l'expression « temps de rétention » désigne la durée, mesurée au sommet du pic de chromatogramme, pendant laquelle un composé est retenu sur une colonne de chromatographie. the expression "retention time" designates the duration, measured at the peak of the chromatogram peak, during which a compound is retained on a chromatography column.
L'invention concerne donc l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone à l'état isolé. Elle concerne l'énantiomère
lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone à l'état séparé de l'énantiomère dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone et des énantiomères dextrogyre et lévogyre d'un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, dit hétéro- stéréo-isomère, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène sont de configurations absolues distinctes. The invention therefore relates to the laevorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone in the isolated state. It concerns the enantiomer levorotatory of said difethialone homo-stereoisomer separated from the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone and of the dextrorotatory and laevorotatory enantiomers of a difethialone configuration stereoisomer, referred to as hetero-isomer; stereoisomer, in which the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group are of distinct absolute configurations.
Les inventeurs ont découvert qu'il est possible de séparer les énantiomères lévogyre et dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone et dudit hétéro- stéréo-isomère de la diféthialone par chromatographie liquide à haute pression en mode isocratique et dans des conditions particulières en utilisant une colonne de chromatographie comprenant une phase stationnaire chirale. Il n'était en effet pas connu au jour de l'invention de pouvoir séparer l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone et l'énantiomère dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. The inventors have discovered that it is possible to separate the levorotatory and dextrorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer from difethialone and from said hetero-stereoisomer of difethialone by high-pressure liquid chromatography in isocratic mode and under particular conditions. using a chromatography column comprising a chiral stationary phase. It was not known at the time of the invention to be able to separate the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer from difethialone and the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
Les inventeurs ont réussi à réaliser cette séparation en choisissant une colonne pour chromatographie particulière HPLC LUX® Cellulose-3 (phenomenex, Le Pecq, France) de dimension 150 x 2 mm et comprenant une phase stationnaire chirale constituée de particules poreuses de cellulose tris(4-méthylbenzoate), d'une granulométrie de 3 μπι et d'une porosité de 1000 A. Ils ont utilisé, à titre de phase mobile, un éluant formé d'un mélange d'acétonitrile (A) et d'eau comprenant de l'acide formique en proportion volumique de 0,1% dans l'eau (B) avec un rapport volumique A/B de 80/20. Le débit de la phase mobile dans la colonne est maintenu à une valeur de 0,25 mL/min et la séparation est réalisée à température ambiante. La composition à analyser est à une concentration de 1 μg de diféthialone par millilitre dans l'acétonitrile et le volume injecté sur la colonne est de 1 μL·. La détection peut être effectuée par spectrométrie de masse en tandem (MS/MS). La détection peut aussi être effectuée par photométrie ou par spectrophotométrie en ajustant la concentration en diféthialone et le volume d'injection aux fins d'obtenir une
détection optimale et en mesurant la valeur de l'aire sous le pic de chaque énantiomère. The inventors have succeeded in achieving this separation by selecting a column LUX ® HPLC particular chromatography Cellulose-3 (Phenomenex, Le Pecq, France) of dimension 150 x 2 mm and comprising a chiral stationary phase consisting of cellulose porous particles tris (4 -methylbenzoate), of a particle size of 3 μπι and a porosity of 1000 A. They used, as mobile phase, an eluent formed of a mixture of acetonitrile (A) and water comprising formic acid in a volume proportion of 0.1% in water (B) with an A / B volume ratio of 80/20. The flow rate of the mobile phase in the column is maintained at a value of 0.25 ml / min and the separation is carried out at room temperature. The composition to be analyzed is at a concentration of 1 μg of difethialone per milliliter in acetonitrile and the volume injected onto the column is 1 μl ·. Detection can be performed by tandem mass spectrometry (MS / MS). Detection can also be performed photometrically or spectrophotometrically by adjusting the difethialone concentration and injection volume to obtain a optimal detection and by measuring the value of the area under the peak of each enantiomer.
Dans ces conditions expérimentales, la valeur du temps de rétention (ti) de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère selon l'invention peut varier selon les conditions opératoires -notamment selon les conditions de température de la colonne- et être comprise entre 7,8 min et 8,2 min. La valeur du temps de rétention (t4) de l'énantiomère dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère peut varier selon les conditions opératoires -notamment selon les conditions de température de la colonne- et être comprise entre 14,0 min et 14,4 min, de sorte que les énantio mères dextrogyre et lévogyre dudit homo-stéréo-isomère peuvent être séparés par chromatographie liquide à haute pression sur une colonne chirale. Under these experimental conditions, the value of the retention time (ti) of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer according to the invention may vary according to the operating conditions - in particular according to the temperature conditions of the column - and be between 7.8 min and 8.2 min. The value of the retention time (t 4 ) of the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer may vary according to the operating conditions - in particular according to the temperature conditions of the column - and be between 14.0 min and 14.4 min, so that the dextrorotatory and laevorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer can be separated by high pressure liquid chromatography on a chiral column.
Dans ces mêmes conditions expérimentales, la valeur du temps de rétention (t3) de l'énantiomère dextrogyre dudit hétéro- stéréo-isomère de la diféthialone peut varier selon les conditions opératoires -notamment selon les conditions de température de la colonne- et être comprise entre 11,3 min et 11,8 min. La valeur du temps de rétention (t2) de l'énantiomère lévogyre dudit hétéro-stéréo-isomère de la diféthialone peut varier selon les conditions opératoires -notamment selon les conditions de température de la colonne- et être comprise entre 9,0 min et 9,5 min. Under these same experimental conditions, the value of the retention time (t 3 ) of the dextrorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer of difethialone may vary according to the operating conditions - in particular according to the temperature conditions of the column - and be understood between 11.3 min and 11.8 min. The value of the retention time (t 2 ) of the laevorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer of difethialone may vary according to the operating conditions -particularly according to the temperature conditions of the column-and be between 9.0 min and 9.5 min.
Ainsi, dans ces conditions expérimentales, l'ordre d'élution des stéréo-isomères de configuration de la diféthialone est tel que ti < t2 < t3 < t4. Les valeurs des temps de rétention tl5 t2, t3 et t sont susceptibles de varier, notamment avec la température de la colonne de chromatographie. Cependant, dans ces conditions chromatographiques, l'ordre d'élution des stéréo-isomères de configuration de la diféthialone reste inchangé. Thus, under these experimental conditions, the elution order of the configuration stereoisomers of the difethialone is such that ti <t 2 <t 3 <t 4 . The values of the retention times t 15 t 2 , t 3 and t are likely to vary, in particular with the temperature of the chromatography column. However, in these chromatographic conditions, the order of elution of the configuration stereoisomers of the difethialone remains unchanged.
L'invention concerne donc l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone à l'état isolé et présentant la propriété de pouvoir être élué, dans les conditions de chromatographie décrites ci-dessus, le premier parmi les quatre stéréo-isomères de configuration de la diféthialone.
L'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone isolé à l'état pur selon l'invention, mis en solution dans du méthanol à une concentration de 0,81 g/L et placé dans une cuve en quartz pour spectrophotomètre, présente un spectre de dichroïsme circulaire réalisé à 25°C de valeurs de dichroïsme circulaire négatives entre 210 nm et 320 nm. The invention therefore relates to the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in the isolated state and having the property of being elutable, under the chromatography conditions described above, the first of the four stereoisomers. configuration of difethialone. The laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone isolated in pure form according to the invention, dissolved in methanol at a concentration of 0.81 g / l and placed in a quartz tank for spectrophotometer, presents a circular dichroism spectrum produced at 25 ° C of negative circular dichroism values between 210 nm and 320 nm.
L'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone isolé à l'état pur selon l'invention, en solution dans le chloroforme (CHCt3) présente un pouvoir rotatoire spécifique [a]25 C589nm mesuré à 25°C et sur la raie D du sodium (589 nm) d'une valeur de -14,8°. The laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone isolated in the pure state according to the invention, in solution in chloroform (CHCt 3 ) has a specific rotational power [a] C 589 nm measured at 25 ° C. and on the sodium D line (589 nm) of a value of -14.8 °.
L'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone isolé à l'état pur selon l'invention présente en spectroscopie par résonnance magnétique (1H-RMN) du proton à 500 MHz dans CDCt3 un multiplet présentant un déplacement chimique (δ) compris entre 4,9 ppm et 5,1 ppm correspondant au proton porté par le carbone 1 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphtalène dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. The laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone isolated in the pure state according to the invention has in magnetic resonance spectroscopy (1H-NMR) of the 500 MHz proton in CDCt 3 a multiplet exhibiting a chemical shift (δ ) between 4.9 ppm and 5.1 ppm corresponding to the proton carried by carbon 1 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group of said homo-stereoisomer of difethialone.
On distingue ledit hétéro- stéréo-isomère de la diféthialone et ledit homo-stéréo-isomère de la diféthialone par leurs spectres RMN du proton. Sur le spectre RMN du proton réalisé dans CDCt3, le déplacement chimique du proton porté par le carbone 1 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphtalène dudit hétéro- stéréo-isomère de la diféthialone est compris entre 5,2 ppm et 5,4 ppm, notamment de l'ordre de 5,3 ppm. These hetero-stereoisomers are distinguished from difethialone and said homo-stereoisomer of difethialone by their proton NMR spectra. On the proton NMR spectrum carried out in CDCt 3 , the chemical shift of the proton carried by carbon 1 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group of said hetero-stereoisomer of difethialone is between 5.2 ppm and 5 ppm. , 4 ppm, in particular of the order of 5.3 ppm.
L'invention concerne aussi une composition comprenant de l'énantiomère lévogyre selon l'invention, à l'exclusion d'un mélange racémique d'énantiomères lévogyre et dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone, c'est-à-dire à l'exclusion d'une composition dans laquelle l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone est en mélange optiquement inactif avec l'énantiomère dextrogyre dudit homo-stéréo- isomère de la diféthialone. The invention also relates to a composition comprising the levorotatory enantiomer according to the invention, excluding a racemic mixture of levorotatory and dextrorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone, that is to say except for a composition in which the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone is in an optically inactive mixture with the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
L'invention concerne donc aussi une composition comprenant de l'énantiomère lévogyre du stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, dit homo-stéréo-isomère, de formule 3-(4'-bromobiphenyl-4-yl)-l-
(4-hydroxythiocoumarin-3-yl)-l,2,3,4-tétrahydronaphtalène, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène sont de même configuration absolue, à l'exclusion d'un mélange dans lequel l'énantiomère lévogyre et l'énantiomère dextrogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone sont en quantités égales. L'invention concerne donc une telle composition dans laquelle l'énantiomère lévogyre et l'énantiomère dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone sont en quantités distinctes. The invention therefore also relates to a composition comprising the levogyre enantiomer of the configuration stereoisomer of the homo-stereoisomer difethialone, of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -l- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalene, wherein the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group are of the same absolute configuration, with the exception of a mixture in which the laevorotatory enantiomer and the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone are in equal amounts. The invention thus relates to such a composition wherein the levorotatory enantiomer and the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone are in distinct amounts.
Avantageusement et selon l'invention, ledit homo-stéréo- isomère est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre. Avantageusement, une composition selon l'invention comprend dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre. Advantageously and according to the invention, said homo-stereoisomer is predominantly in the form of levorotatory enantiomer. Advantageously, a composition according to the invention comprises said homo-isomer of difethialone predominantly in the form of levorotatory enantiomer.
Dans tout le texte, l'expression « ledit homo-stéréo-isomère est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre » signifie que la quantité (massique, molaire ou volumique) d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo- isomère de la diféthialone est majoritaire -supérieure à 50 %- dans la quantité totale dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone présent dans la composition (sous toutes ses formes énantiomères, dextrogyre et lévogyre). Throughout the text, the expression "said homo-stereoisomer is predominantly in the form of levorotatory enantiomer" means that the quantity (mass, molar or volume) of laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone is predominant greater than 50% - in the total amount of said homo-stereoisomer of the difethialone present in the composition (in all its enantiomeric forms, dextrorotatory and laevorotatory).
Avantageusement et selon l'invention, la composition comprend une quantité de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone telle que le rapport de cette quantité sur la quantité dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone dans la composition est supérieur à 50% -notamment supérieur à 60%, en particulier supérieur à 70%, plus particulièrement supérieur à 80%, de préférence supérieur à 90%, plus préférentiellement supérieur à 95%, particulièrement préférentiellement supérieur à 98%, encore plus préférentiellement supérieur à 99% ou de l'ordre de 100%-. Avantageusement, la composition comprend une quantité de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone telle que le rapport de cette quantité sur la quantité dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone dans la composition est supérieur à 75 %, de préférence compris entre 85 % et 100 %, plus préférentiellement compris entre 90 % et 99 %. Avantageusement, la
composition comprend une quantité de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone telle que le rapport de cette quantité sur la quantité dudit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone est compris entre 96 % et 100 %. Advantageously and according to the invention, the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of said homo-isomer of difethialone in the composition is greater than at 50% -in particular greater than 60%, in particular greater than 70%, more particularly greater than 80%, preferably greater than 90%, more preferably greater than 95%, particularly preferably greater than 98%, even more preferably greater than 99% or the order of 100% -. Advantageously, the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of said homo-stereoisomer of the difethialone in the composition is greater than 75%, of preferably between 85% and 100%, more preferably between 90% and 99%. Advantageously, the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of said ho-stereoisomer of difethialone is from 96% to 100%.
Dans une composition selon l'invention : In a composition according to the invention:
- la quantité d'énantiomère lévogyre dudit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone rapportée à la somme des quantités de chacun des énantiomères (lévogyre et dextrogyre) dudit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone est supérieure à 0,5 (supérieur à 50 %) ; the quantity of laevorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone relative to the sum of the amounts of each of the enantiomers (levorotatory and dextrorotatory) of said ho-stereo-isomer of difethialone is greater than 0.5 (greater than at 50%);
- la concentration d'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone rapportée à la somme des concentrations de chacun des énantiomères (lévogyre et dextrogyre) dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone est supérieure à 0,5 (supérieur à 50 ), et ; the laevorotatory enantiomer concentration of said homo-isomer of difethialone relative to the sum of the concentrations of each of the enantiomers (levorotatory and dextrorotatory) of said homo-stereoisomer of difethialone is greater than 0.5 (greater than 50); ), and;
- la proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone dans la composition est supérieure à la proportion de l'autre énantiomère (dextrogyre) dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. Dans une composition selon l'invention, la proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone dans la composition est de plus de 50 % par rapport audit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. the proportion of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone in the composition is greater than the proportion of the other enantiomer (dextrorotatory) of said homo-stereoisomer of difethialone. In a composition according to the invention, the proportion of laevorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone in the composition is more than 50% relative to said homo-isomer of difethialone.
Avantageusement, la composition peut comprendre une proportion d'énantiomère dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone, ladite proportion étant inférieure à 50 % -notamment inférieure à 25 , préférentiellement comprise entre 0 % et 25 , en particulier inférieure à 10 %- par rapport à la quantité dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. Advantageously, the composition may comprise a proportion of dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone, said proportion being less than 50%, in particular less than 25, preferably between 0% and 25, in particular less than 10%. relative to the amount of said homo-stereoisomer of difethialone.
Avantageusement et selon l'invention, la diféthialone est majoritairement sous forme de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo- isomère de la diféthialone. La composition comprend de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone avec une proportion supérieure à chacune des proportions de chacun des autres énantiomères de la diféthialone par rapport à la diféthialone. Advantageously and according to the invention, the difethialone is predominantly in the form of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone. The composition comprises the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone with a proportion greater than each of the proportions of each of the other enantiomers of the difethialone relative to the difethialone.
Avantageusement, dans une composition selon l'invention :
- le rapport de la quantité d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo- isomère de la diféthialone sur la somme des quantités de chacun des énantiomères dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone et dudit hétéro- stéréo- isomère de la diféthialone est supérieure à 0,25 (supérieur à 25 %) ; Advantageously, in a composition according to the invention: the ratio of the amount of laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone to the sum of the amounts of each of the enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone and said hetero-stereoisomer of difethialone is greater than 0.25 (greater than 25%);
- le rapport de la concentration d'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone sur la somme des concentrations de chacun des énantiomères dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone et dudit hétéro- stéréo- isomère de la diféthialone est supérieure à 0,25 (supérieur à 25 %), et ; the ratio of the laevorotatory enantiomer concentration of said homo-isomer of difethialone to the sum of the concentrations of each of the enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone and said hetero-stereoisomer of difethialone is greater than 0.25 (greater than 25%), and;
- la proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone dans la composition est supérieure à la proportion de chacun des énantiomères dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone et dudit hétéro- stéréo- isomère de la diféthialone. Dans une composition selon l'invention, la proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone dans la composition est de plus de 25 % par rapport à la diféthialone. the proportion of laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone in the composition is greater than the proportion of each of the enantiomers of said homo-stereoisomer of the difethialone and of said hetero-stereoisomer of the difethialone. In a composition according to the invention, the proportion of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone in the composition is more than 25% relative to the difethialone.
Avantageusement et selon l'invention, la composition comprend une quantité de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone telle que le rapport de cette quantité sur la quantité de diféthialone est supérieur à 25% -notamment supérieur à 50%, en particulier supérieur à 70%, plus particulièrement supérieur à 80%, de préférence supérieur à 90%, particulièrement préférentiellement supérieur à 95%, plus préférentiellement supérieur à 98%, encore plus préférentiellement supérieur à 99% ou de l'ordre de 100%-. Une composition selon l'invention, comprend donc de la diféthialone majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. Advantageously and according to the invention, the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of difethialone is greater than 25%, especially greater than 50%, in particular greater than 70%, more particularly greater than 80%, preferably greater than 90%, particularly preferably greater than 95%, more preferably greater than 98%, still more preferably greater than 99% or of the order of 100%. -. A composition according to the invention therefore comprises difethialone predominantly in the form of a laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
Avantageusement, la composition comprend une quantité de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone telle que le rapport de cette quantité sur la quantité de diféthialone est supérieur à 70 %, de préférence compris entre 80 % et 100 %, plus préférentiellement compris entre 90 % et 100 %- par rapport à la quantité de diféthialone. Avantageusement, la composition comprend une quantité de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone telle que le rapport de cette quantité sur la
quantité de diféthialone est compris entre 95 % et 99 %. Avantageusement, la composition comprend une quantité de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone telle que le rapport de cette quantité sur la quantité de diféthialone est compris entre 96% et 100 %. Avantageusement, la composition comprend une quantité de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone telle que le rapport de cette quantité sur la quantité de diféthialone est sensiblement de l'ordre de 100 %. Advantageously, the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of difethialone is greater than 70%, preferably between 80% and 100%, more preferably between 90% and 100% - relative to the amount of difethialone. Advantageously, the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone, such as the ratio of this amount on the amount of difethialone is between 95% and 99%. Advantageously, the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of difethialone is between 96% and 100%. Advantageously, the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of difethialone is substantially of the order of 100%.
Avantageusement et selon l'invention, la composition comprend une quantité de l'énantiomère lévogyre dudit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone telle que le rapport de cette quantité sur la quantité de diféthialone est supérieur à 95%. Advantageously and according to the invention, the composition comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of difethialone is greater than 95%.
Une composition selon l'invention peut être sensiblement exempte d'énantiomère dextrogyre dudit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone, c'est à dire que l'énantiomère dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone peut être présent dans la composition mais uniquement à l'état de traces. Elle peut aussi être sensiblement exempte dudit hétéro-stéréo-isomère de la diféthialone c'est à dire que ledit hétéro- stéréo-isomère de la diféthialone peut être présent dans la composition mais uniquement à l'état de traces. A composition according to the invention may be substantially free of dextrorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone, that is to say that the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone may be present in the composition but only in the form of traces. It may also be substantially free of said hetero-stereoisomer of difethialone, that is to say that said hetero-stereoisomer of difethialone may be present in the composition but only in the form of traces.
Avantageusement et selon l'invention, la composition est à l'état liquide et comprend un solvant liquide de la diféthialone. Il peut s'agir d'une solution de diféthialone dans un solvant de la diféthialone, à l'exclusion d'un mélange racémique desdits énantiomères lévogyre et dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. Il peut aussi s'agir d'une solution comprenant de la diféthialone dans un solvant de la diféthialone et dans laquelle ledit homo-stéréo-isomère de la diféthialone est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre. Il peut aussi s'agir d'une solution comprenant de la diféthialone dans un solvant de la diféthialone et dans laquelle la diféthialone est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. Il peut aussi s'agir d'une suspension ou d'une émulsion de diféthialone dans un milieu liquide. Advantageously and according to the invention, the composition is in the liquid state and comprises a liquid solvent of difethialone. It may be a solution of difethialone in a solvent of difethialone, excluding a racemic mixture of said levogyre and dextrorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone. It may also be a solution comprising difethialone in a solvent of difethialone and wherein said homo-stereoisomer of difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer. It may also be a solution comprising difethialone in a solvent of difethialone and in which the difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone. It can also be a suspension or an emulsion of difethialone in a liquid medium.
Avantageusement et selon l'invention, la composition est à
l'état solide. Il peut aussi s'agir d'un solide comprenant de la diféthialone, à l'exclusion d'un mélange racémique des énantiomères dextrogyre et lévogyre dudit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone. Il peut aussi s'agir d'un solide comprenant de la diféthialone et dans lequel ledit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre. Il peut aussi s'agir d'un solide comprenant de la diféthialone et dans lequel la diféthialone est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre dudit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone. Advantageously and according to the invention, the composition is the solid state. It may also be a solid comprising difethialone, excluding a racemic mixture of dextrorotatory and levorotatory enantiomers of said ho-stereoisomer of difethialone. It may also be a solid comprising difethialone and in which said ho-stereo-isomer of difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer. It may also be a solid comprising difethialone and in which the difethialone is predominantly in the form of a laevorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone.
L'invention concerne donc aussi une composition comprenant de la diféthialone, la diféthialone de la composition étant optiquement active. Il n'est cependant pas exclu que la diféthialone de la composition selon l'invention soit optiquement inactive. The invention therefore also relates to a composition comprising difethialone, the difethialone of the composition being optically active. However, it is not excluded that the difethialone of the composition according to the invention is optically inactive.
L'invention concerne aussi l'utilisation d'une composition selon l'invention pour la préparation d'un appât rodonticide pour des rongeurs cibles nuisibles. The invention also relates to the use of a composition according to the invention for the preparation of a rodenticide bait for harmful target rodents.
L'invention concerne aussi un appât rodonticide comprenant une composition selon l'invention, et au moins un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles. The invention also relates to a rodenticide bait comprising a composition according to the invention, and at least one edible excipient for harmful target rodents.
Un appât rodonticide selon l'invention comprend : A rodenticide bait according to the invention comprises:
- au moins un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, at least one edible excipient for harmful target rodents,
- de l'énantiomère lévogyre du stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, dit ho mo- stéréo-isomère, de formule 3-(4'-bromobiphenyl-4-yl)-l- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl)-l,2,3,4-tétrahydronaphtalène, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène dudit homo-stéréo- isomère sont de même configuration absolue, à l'exclusion d'un mélange racémique d' énantiomères lévogyre et dextrogyre dudit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone. Dans un appât selon l'invention, l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone et l'énantiomère dextrogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone sont en quantités distinctes. the laevorotatory enantiomer of the configuration stereoisomer of difethialone, called a ho-mono-isomer, of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -1- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene, in which the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group of said homo-stereoisomer are of the same absolute configuration, excluding a racemic mixture of laevorotatory and dextrorotatory enantiomers of said ho - stereoisomer of difethialone. In a bait according to the invention, the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone and the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone are in distinct amounts.
Avantageusement, un appât rodonticide selon l'invention comprend un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, et dudit
homo- stéréo-isomère de la diféthialone majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre. Advantageously, a rodenticide bait according to the invention comprises an edible excipient for harmful target rodents, and said homo-stereoisomer of difethialone predominantly in the form of levorotatory enantiomer.
Les inventeurs qui sont parvenus à séparer l'énantiomère lévogyre et l'énantiomère dextrogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone et les énantiomères dudit hétéro- stéréo-isomère de la diféthialone et à obtenir l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone à l'état isolé, ont découvert que ledit homo- stéréo-isomère de la diféthialone est en fait le stéréo-isomère de configuration de la diféthialone qui est de plus faible rémanence hépatique chez des rongeurs cibles nuisibles. Ils ont aussi observé que l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone est l'énantiomère -parmi les deux énantiomères (lévogyre et dextrogyre) dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone- qui est le plus rémanent dans le foie de rongeurs cibles nuisibles. Mais ils ont aussi découvert que cet énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone présente une rémanence dans le foie de rongeurs cibles nuisibles plus élevée que celle dudit homo-stéréo- isomère de la diféthialone. The inventors who succeeded in separating the laevorotatory enantiomer and the dextrorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone and the enantiomers of said hetero-stereoisomer of difethialone and in obtaining the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer isolated difethialone, have found that said difethialone homo-isomer is in fact the configuration stereoisomer of difethialone which is of lower hepatic persistence in harmful target rodents. They also observed that the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone is the enantiomer of the two enantiomers (levorotatory and dextrorotatory) of said homo-stereoisomer of difethialone, which is the most remanent in the liver. harmful target rodents. But they have also discovered that this levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone has a persistence in the liver of harmful target rodents higher than that of said homo-stereoisomer of difethialone.
L'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone permet en fait de lutter efficacement contre des rongeurs cibles nuisibles et en particulier avec des doses réduites de diféthialone. L'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone constitue une alternative de choix pour la réalisation d'un appât rodonticide présentant une efficacité rodonticide -notamment à faible dose- et une écotoxicité acceptables. Il constitue aussi une alternative pour la réalisation d'appâts rodonticides en vue de pouvoir lutter contre des rongeurs cibles nuisibles susceptibles d'être résistants à des appâts rodonticides connus. The laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone makes it possible in fact to effectively fight against harmful target rodents and in particular with reduced doses of difethialone. The laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone is an alternative of choice for the production of a rodenticide bait having a rodenticide efficacy - particularly at low dose - and acceptable ecotoxicity. It is also an alternative for the production of rodenticide baits for the control of rodents that are susceptible to resistance to known rodenticide baits.
Avantageusement et selon l'invention, l'appât rodonticide comprend une quantité massique de diféthialone telle que le rapport (proportion massique) de cette quantité massique de diféthialone sur la quantité massique d'appât rodonticide est inférieur à 200 ppm -c'est-à-dire inférieur à 200 mg de diféthialone par kilogramme d'appât rodonticide-. Avantageusement, la proportion massique de la diféthialone dans l'appât rodonticide est comprise
entre 1 ppm et 100 ppm (1 mg à 100 mg de diféthialone par kilogramme d'appât rodonticide), notamment comprise entre 5 ppm et 100 ppm (5 mg à 100 mg de diféthialone par kilogramme d'appât rodonticide), de préférence comprise entre 5 ppm et 50 ppm (5 mg à 50 mg de diféthialone par kilogramme d'appât rodonticide), plus préférentiellement comprise entre 10 ppm et 50 ppm (10 mg à 50 mg de diféthialone par kilogramme d'appât rodonticide), encore plus préférentiellement comprise entre 15 ppm et 50 ppm (15 mg à 50 mg de diféthialone par kilogramme d'appât rodonticide). Advantageously and according to the invention, the rodenticide bait comprises a mass quantity of difethialone such that the ratio (mass proportion) of this mass quantity of difethialone to the mass quantity of rodenticide bait is less than 200 ppm-that is less than 200 mg of difethialone per kilogram of rodenticide bait. Advantageously, the mass proportion of the difethialone in the rodenticide bait is included between 1 ppm and 100 ppm (1 mg to 100 mg of difethialone per kilogram of rodenticide bait), in particular between 5 ppm and 100 ppm (5 mg to 100 mg of difethialone per kilogram of rodenticide bait), preferably between 5 ppm and 50 ppm (5 mg to 50 mg of difethialone per kilogram of rodenticide bait), more preferably between 10 ppm and 50 ppm (10 mg to 50 mg of difethialone per kilogram of rodenticide bait), more preferably still included between 15 ppm and 50 ppm (15 mg to 50 mg of difethialone per kilogram of rodenticide bait).
Avantageusement et selon l'invention, l'excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles est choisi pour permettre une consommation de l'appât par des rongeurs cibles nuisibles. Avantageusement et selon l'invention, chaque excipient comestible est non létal pour des rongeurs cibles nuisibles. L'excipient comestible n'est pas rodonticide en lui-même. Advantageously and according to the invention, the edible excipient for harmful rodent targets is chosen to allow consumption of the bait by harmful target rodents. Advantageously and according to the invention, each edible excipient is non-lethal for harmful target rodents. The edible carrier is not a rodenticide in itself.
Avantageusement et selon l'invention, l'excipient comestible comprend au moins un aliment choisi dans le groupe formé des graines de céréale -notamment des graines de céréale décortiquées-, des moutures de graines de céréale, des farines de graines de céréale, des flocons de graines de céréale, du son de céréales et des graines non céréalières, par exemple des graines de luzerne -notamment sous forme décortiquée, sous forme de mouture, sous forme de farine, sous forme de flocons ou de son-. L'excipient comestible peut comprendre tout support susceptible d'être consommé par des rongeurs cibles nuisibles. Advantageously and according to the invention, the edible excipient comprises at least one food selected from the group consisting of cereal seeds-notably dehulled cereal seeds-cereal seed mills, cereal seed flours, flakes cereal seeds, cereal bran and non-cereal seeds, eg alfalfa seeds - in particular in the form of husks, in the form of milling, in the form of flour, in the form of flakes or of ses-. The edible carrier may include any carrier that may be consumed by harmful target rodents.
Avantageusement, l'excipient comestible comprend au moins un aliment choisi dans le groupe formé des aliments d'origine végétale et des aliments d'origine animale. Avantageusement, l'excipient comestible comprend au moins un aliment choisi pour stimuler l'appétit des rongeurs cibles nuisibles. En particulier, cet aliment est choisi dans le groupe formé de graines d'une ou de plusieurs céréales, de graines décortiquées d'une ou de plusieurs céréales, des moutures de graines d'une ou de plusieurs céréales, des flocons de graines d'une ou de plusieurs céréales, du son d'une ou de plusieurs céréales et des farines de graines d'une ou de plusieurs céréales. À titre d'exemple, on
choisit les céréales dans le groupe formé de l'avoine, du blé, de l'orge, du maïs, du soja et du riz. Advantageously, the edible carrier comprises at least one food selected from the group consisting of plant foods and foods of animal origin. Advantageously, the edible carrier comprises at least one food chosen to stimulate the appetite of harmful target rodents. In particular, this food is selected from the group consisting of seeds of one or more cereals, seeds of one or more grains, seeds of one or more grains, seed flakes of one or more cereals, the sound of one or more cereals, and the grain meal of one or more cereals. For example, choose cereals from the group consisting of oats, wheat, barley, corn, soybeans and rice.
Avantageusement, l'aliment est choisi dans le groupe formé des aliments sucrés. Par exemple, il peut s'agir d'aliments comprenant au moins un sucre choisi dans le groupe formé du saccharose, du lactose, du fructose et du glucose. Il peut s'agir d'un sirop de sucre -par exemple, d'un sirop de sucre obtenu par hydrolyse de l'amidon- ou d'un sirop de sucre obtenu par hydrolyse de saccharose (sirop de sucre inverti), ou d'un sirop de sucre de betterave, ou d'un sirop d'érable ou d'un sirop de canne à sucre, ou d'un sirop obtenu à partir d'une plante du genre stevia. Advantageously, the food is selected from the group consisting of sweet foods. For example, these may be foods comprising at least one sugar selected from the group consisting of sucrose, lactose, fructose and glucose. It may be a sugar syrup-for example, a sugar syrup obtained by hydrolysis of the starch-or a sugar syrup obtained by hydrolysis of sucrose (invert sugar syrup), or beet sugar syrup, or maple syrup or sugar cane syrup, or syrup obtained from a plant of the genus stevia.
Avantageusement, l'aliment est choisi dans le groupe formé des flocons et de la farine de l'albumen de noix de coco (coprah). Avantageusement, l'aliment est choisi dans le groupe formé des noix, des noisettes et des amandes -râpées et/ou en poudre-. Advantageously, the food is chosen from the group consisting of flakes and coconut albumen flour (copra). Advantageously, the food is selected from the group consisting of nuts, hazelnuts and almonds-shredded and / or powdered.
Avantageusement, l'aliment est choisi dans le groupe formé des graisses végétales, des huiles végétales (par exemple huile de colza, graisse de soja, huile de tournesol, beurre de cacao, huile d'arachides, beurre d'arachides, huile de maïs, huile de palme), des graisses animales et des huiles animales (beurre, saindoux, huile de poisson). Advantageously, the food is selected from the group consisting of vegetable fats, vegetable oils (for example rapeseed oil, soy fat, sunflower oil, cocoa butter, peanut oil, peanut butter, corn oil palm oil), animal fats and animal oils (butter, lard, fish oil).
Avantageusement, l'aliment est choisi dans le groupe formé des protéines d'origine végétale et des protéines d'origine animale. À titre d'exemple, on peut citer par exemple le lait en poudre -notamment le lait écrémé en poudre-, les œufs -notamment les œufs en poudre-, les hydrolysats de protéines d'origine animale et les hydrolysats de protéines d'origine végétale. Advantageously, the food is selected from the group consisting of proteins of plant origin and proteins of animal origin. By way of example, mention may be made, for example, of powdered milk, particularly powdered skimmed milk, eggs, in particular powdered eggs, protein hydrolysates of animal origin and protein hydrolysates of origin. vegetable.
Avantageusement et selon l'invention, l'appât rodonticide est choisi dans le groupe formé des appâts solides comprenant de la diféthialone et un excipient comestible solide. Avantageusement, l'appât rodonticide est un solide à l'état divisé, par exemple sous forme de boulettes ou de granulés. Avantageusement, l'appât rodonticide peut être un solide sous forme de bloc ou de pâte susceptibles d'être consommés par les rongeurs cibles nuisibles ou d'un matériau solide susceptible d'être rongé par les rongeurs cibles nuisibles.
Avantageusement, l'appât rodonticide solide selon l'invention peut se présenter sous forme d'un bloc rigide, d'un bloc semi-rigide, d'une mousse, d'une poudre ou d'un gel. Advantageously and according to the invention, the rodenticide bait is chosen from the group consisting of solid baits comprising difethialone and a solid edible excipient. Advantageously, the rodenticide bait is a solid in the divided state, for example in the form of pellets or granules. Advantageously, the rodenticide bait can be a solid in the form of a block or paste that can be consumed by the target harmful rodents or a solid material that can be eaten by the target harmful rodents. Advantageously, the solid rodenticide bait according to the invention can be in the form of a rigid block, a semi-rigid block, a foam, a powder or a gel.
Avantageusement, l'appât rodonticide se présentant sous forme d'une poudre, sous forme d'une mousse ou sous forme d'un gel est adapté pour pouvoir souiller la fourrure du(de) rongeur(s) cible(s) nuisible(s) et pour pouvoir être ingérée par celui(ceux)-ci lors de son(leur) toilettage. Advantageously, the rodenticide bait in the form of a powder, in the form of a foam or in the form of a gel is adapted to be able to soil the fur of the target rodent (s) harmful (s) ) and to be ingested by him (them) during his (their) grooming.
Il peut s'agir d'un appât rodonticide solide comprenant de la diféthialone, à l'exclusion d'un mélange racémique d'énantiomères dextrogyre et lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. Il peut aussi s'agir d'un appât rodonticide solide comprenant de la diféthialone et dans lequel ledit homo- stéréo-isomère de la diféthialone est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre. Il peut aussi s'agir d'un appât rodonticide solide comprenant de la diféthialone dans lequel la diféthialone est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. It may be a solid rodenticide bait comprising difethialone, excluding a racemic mixture of dextrorotatory and levorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone. It can also be a solid rodenticide bait comprising difethialone and wherein said homo-stereoisomer of difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer. It may also be a solid rodenticide bait comprising difethialone wherein the difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
Avantageusement et selon l'invention, l'appât rodonticide est choisi dans le groupe formé des appâts liquides comprenant de la diféthialone et un excipient comestible liquide. L'appât rodonticide est alors une boisson pour des rongeurs cibles nuisibles. Advantageously and according to the invention, the rodenticide bait is chosen from the group consisting of liquid baits comprising difethialone and a liquid edible excipient. The rodenticide bait is then a drink for harmful target rodents.
Avantageusement et selon l'invention, l'appât rodonticide est choisi dans le groupe formé des appâts liquides comprenant de la diféthialone et un excipient comestible liquide. L'appât rodonticide est alors une boisson pour des rongeurs cibles nuisibles. Il peut s'agir d'une solution de diféthialone dans un solvant de la diféthialone, à l'exclusion d'un mélange racémique d'énantiomères dextrogyre et lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. Il peut aussi s'agir d'une solution de diféthialone dans un solvant de la diféthialone et dans laquelle ledit homo-stéréo-isomère de la diféthialone est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre. Il peut aussi s'agir d'une solution de diféthialone dans un solvant de la diféthialone et dans laquelle la diféthialone est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone.
L'invention concerne donc aussi un appât rodonticide dans lequel la diféthialone est optiquement active. Il n'est cependant pas exclu que la diféthialone de l'appât rodonticide selon l'invention soit optiquement inactive. Advantageously and according to the invention, the rodenticide bait is chosen from the group consisting of liquid baits comprising difethialone and a liquid edible excipient. The rodenticide bait is then a drink for harmful target rodents. It may be a solution of difethialone in a solvent of difethialone, excluding a racemic mixture of dextrorotatory and levorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone. It may also be a solution of difethialone in a solvent of difethialone and wherein said homo-stereoisomer of difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer. It may also be a solution of difethialone in a solvent of difethialone and in which the difethialone is predominantly in the form of laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone. The invention thus also relates to a rodenticide bait in which the difethialone is optically active. However, it is not excluded that the difethialone of the rodenticide bait according to the invention is optically inactive.
Avantageusement, l'appât rodonticide comprend au moins un colorant. Un tel colorant permet en particulier de donner audit appât rodonticide une couleur aisément détectable et identifiable par une personne manipulant l'appât rodonticide. Advantageously, the rodenticide bait comprises at least one dye. Such a dye makes it possible in particular to give said rodenticide bait a color easily detectable and identifiable by a person handling the rodenticide bait.
Avantageusement, l'appât rodonticide comprend au moins un conservateur apte à assurer sa conservation lors de son stockage. Avantageusement, l'appât rodonticide comprend au moins un composé amérisant de type benzoate de dénatonium, aussi connu sous le nom de « Bitrex® » destiné à réduire les risques de consommation accidentelle par des organismes non cibles. Advantageously, the rodenticide bait comprises at least one preservative able to ensure its conservation during storage. Advantageously, the rodenticide bait includes at least one bittering type compound denatonium benzoate, also known as the "Bitrex ®" designed to reduce the risk of accidental consumption by non-target organisms.
Avantageusement, dans une variante particulière, la composition et l'appât rodonticide selon l'invention comprennent exclusivement de la diféthialone à titre de substance rodonticide. En particulier, la composition et l'appât rodonticide selon l'invention sont exempts de toute autre substance anticoagulante à usage rodonticide. Cependant, dans cette variante selon l'invention, la composition et l'appât rodonticide peuvent comprendre toute substance anti-nuisible autre qu'un rodonticide, telle qu'une substance insecticide et/ou acaricide. Advantageously, in a particular variant, the composition and the rodenticide bait according to the invention comprise exclusively difethialone as a rodenticide substance. In particular, the composition and the rodenticide bait according to the invention are free of any other anticoagulant substance for rodenticide use. However, in this variant according to the invention, the composition and rodenticide bait may include any harmful substance other than a rodenticide, such as an insecticide and / or acaricide.
Avantageusement, dans une autre variante particulière, la composition et l'appât rodonticide selon l'invention comprennent de la diféthialone à l'exclusion d'un mélange racémique d'énantiomères lévogyre et dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère et au moins une autre substance distincte de la diféthialone à titre de substance rodonticide. Cette autre substance rodonticide distincte de la diféthialone peut être une autre substance anticoagulante -notamment du type anti-vitamine K ou non- ou une autre substance rodonticide non anticoagulante. Advantageously, in another particular variant, the composition and the rodenticidal bait according to the invention comprise difethialone excluding a racemic mixture of levogyre and dextrorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer and at least one other substance. distinct from difethialone as a rodenticide. This other rodenticide substance, distinct from difethialone, may be another anticoagulant, particularly anti-vitamin K or non-anticonagulant, or another non-anticoagulant rodenticide.
L'invention concerne aussi un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles dans lequel on dissémine une quantité d'appât
rodonticide comprenant : The invention also relates to a method for controlling harmful target rodents in which a quantity of bait is dispersed. rodenticide comprising:
- au moins un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, et ; at least one edible carrier for harmful target rodents, and
- de l'énantiomère lévogyre du stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, dit ho mo- stéréo-isomère, de formule 3-(4'-bromobiphenyl-4-yl)-l- the laevorotatory enantiomer of the configuration stereoisomer of difethialone, called a ho-stereo-isomer, of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -l-
(4-hydroxythiocoumarin-3-yl)-l,2,3,4-tétrahydronaphtalène, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène sont de même configuration absolue ; (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalene, wherein carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene moiety are of the same absolute configuration;
à l'exclusion d'un mélange racémique d'énantio mères lévogyre et dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. excluding a racemic mixture of enantiomeric levorotatory and dextrorotatory mothers of said homo-stereoisomer of difethialone.
L'invention concerne aussi un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles dans lequel on dissémine une quantité d'appât rodonticide selon l'invention, ladite quantité d'appât étant suffisante pour être rodonticide. The invention also relates to a method for controlling harmful target rodents in which a quantity of rodenticide bait according to the invention is dispersed, said quantity of bait being sufficient to be rodenticide.
On dissémine donc une quantité d'appât rodonticide comprenant dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre, présentant une efficacité rodonticide acceptable même à faible dose de diféthialone. Le procédé selon l'invention permet donc de limiter l'empoisonnement secondaire de mammifères non-rongeurs et d'oiseaux susceptibles de s'alimenter avec des rongeurs morts ou vifs empoisonnés mais comprenant une quantité réduite -et notamment une quantité non létale- de diféthialone. Le procédé selon l'invention permet aussi de limiter un tel empoisonnement secondaire de mammifères non-rongeurs et d'oiseaux susceptibles de consommer préférentiellement les viscères -en particulier le foie- desdits rongeurs empoisonnés morts ou vifs. Thus, a quantity of rodenticide bait comprising said homo-stereoisomer of difethialone is mainly disseminated in the form of a laevorotatory enantiomer, having an acceptable rodenticidal efficacy even at a low dose of difethialone. The method according to the invention thus makes it possible to limit the secondary poisoning of non-rodent mammals and of birds capable of feeding with dead or poisoned live rodents, but comprising a reduced amount, and in particular a non-lethal quantity, of difethialone. . The method according to the invention also makes it possible to limit such secondary poisoning of non-rodent mammals and birds likely to preferentially consume the viscera, in particular the liver, of said dead or alive poisoned rodents.
Avantageusement, dans un procédé selon l'invention, ledit homo-stéréo-isomère de la diféthialone est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre. Avantageusement, la diféthialone est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. Advantageously, in a process according to the invention, said homo-stereoisomer of difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer. Advantageously, the difethialone is predominantly in the form of a laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
Avantageusement et en variante selon l'invention, on choisit en combinaison :
- l'excipient comestible ; Advantageously and alternatively according to the invention, one chooses in combination: - the edible excipient;
- une proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone par rapport audit homo- stéréo-isomère de la diféthialone ; a proportion of laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone relative to said homo-stereoisomer of difethialone;
- une proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone par rapport à la diféthialone ; a proportion of levorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone relative to difethialone;
- une proportion massique de diféthialone par rapport à l'appât rodonticide, et ; - a mass proportion of difethialone compared to the rodenticide bait, and;
- une quantité d'appât disséminé ; - a quantity of disseminated bait;
de façon que des rongeurs cibles nuisibles consomment une quantité de diféthialone suffisante pour être létale pour lesdits rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât au cours d'une période unique de 24 heures consécutives. so that harmful target rodents consume a quantity of difethialone sufficient to be lethal to said harmful target rodents consuming said bait during a single 24-hour period.
Un appât rodonticide selon cette variante de l'invention est un appât mortel en une seule prise ou « one-shot » en anglais. Avantageusement et selon cette variante de l'invention, la proportion massique de diféthialone dans l'appât est comprise entre 5 ppm et 200 ppm, notamment comprise entre 5 ppm et 100 ppm, de préférence comprise entre 5 ppm et 50 ppm, plus préférentiellement comprise entre 15 ppm et 50 ppm. A rodenticide bait according to this variant of the invention is a deadly bait in a single catch or "one-shot" in English. Advantageously and according to this variant of the invention, the mass proportion of difethialone in the bait is between 5 ppm and 200 ppm, in particular between 5 ppm and 100 ppm, preferably between 5 ppm and 50 ppm, more preferably between between 15 ppm and 50 ppm.
Avantageusement et dans une autre variante selon l'invention, on choisit en combinaison : Advantageously and in another variant according to the invention, one chooses in combination:
- l'excipient comestible ; - the edible excipient;
- une proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone par rapport audit homo- stéréo-isomère de la diféthialone ; a proportion of laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone relative to said homo-stereoisomer of difethialone;
- une proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone par rapport à la diféthialone ; a proportion of levorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone relative to difethialone;
- une proportion massique de diféthialone par rapport à l'appât rodonticide, et ; - a mass proportion of difethialone compared to the rodenticide bait, and;
- une quantité d'appât disséminé ; - a quantity of disseminated bait;
de façon que des rongeurs cibles nuisibles consomment une quantité de diféthialone ;
o non létale pour des rongeurs cibles nuisibles, c'est-à-dire généralement non létale pour les rongeurs cibles nuisibles, consommant dudit appât pendant une période de 24 heures consécutives, et ; so that harmful target rodents consume a quantity of difethialone; o non-lethal for harmful target rodents, i.e., generally non-lethal to harmful target rodents, consuming said bait for a period of 24 consecutive hours, and;
o suffisante pour être létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant plusieurs périodes de 24 heures, lesdites périodes étant consécutives. o sufficient to be lethal to harmful target rodents consuming said bait for several 24-hour periods, said periods being consecutive.
Cette autre variante de l'invention vise donc un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles dans lequel on dissémine une quantité d'appât rodonticide létale pour les rongeurs cibles nuisibles consommant durablement cet appât rodonticide et non létale pour des rongeurs ou des animaux non cibles consommant accidentellement cet appât rodonticide. On parle alors d'un procédé de lutte « multi-doses » ou, en anglais, « multi-feeding ». Dans un tel procédé selon l'invention, la consommation d'appât rodonticide par un rongeur cible nuisible pendant une durée de 24 heures est insuffisante pour entraîner la mort dudit rongeur, alors qu'une consommation répétée d'appât rodonticide pendant au moins deux jours consécutifs permet d'entraîner la mort du rongeur cible nuisible. En outre, la consommation accidentelle d'appât rodonticide par un animal ou un humain non cible pendant une durée de 24 heures est le plus souvent insuffisante pour entraîner la mort dudit animal ou d'un humain. This other variant of the invention therefore relates to a method for controlling harmful target rodents in which a quantity of lethal rodenticide bait is dispersed for the target rodent pests consuming this rodenticide and non-lethal bait permanently for rodents or non-target animals accidentally consuming this rodenticide bait. This is called a "multi-dose" or "multi-feeding" control method. In such a method according to the invention, the consumption of rodenticide bait by a target rodent harmful for a period of 24 hours is insufficient to cause the death of said rodent, while repeated consumption of rodenticide bait for at least two days resulting in the death of the target rodent. In addition, accidental consumption of rodenticide bait by an animal or a non-target human for a period of 24 hours is most often insufficient to cause the death of said animal or a human.
L'invention vise donc un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles dans lequel on met à disposition des rongeurs cibles nuisibles une quantité d'appât rodonticide susceptible d'être ingérée par les rongeurs cibles nuisibles, ladite quantité d'appât rodonticide étant suffisante pour tuer des rongeurs cibles nuisibles consommant ledit appât rodonticide pendant plusieurs jours. The invention therefore relates to a method for controlling harmful target rodents in which harmful target rodents are provided with a quantity of rodenticide bait capable of being ingested by the target harmful rodents, said quantity of rodenticide bait being sufficient to kill harmful target rodents consuming the rodenticide bait for several days.
Avantageusement, on adapte la quantité d'appât rodonticide disséminé, la proportion massique de diféthialone par rapport à l'appât rodonticide et la proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo- isomère de la diféthialone par rapport à la diféthialone pour que la consommation de l'appât rodonticide soit létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant
quotidiennement de l'appât pendant au moins deux périodes de 24 heuresAdvantageously, the quantity of disseminated rodenticide bait, the mass proportion of difethialone relative to the rodenticide bait and the proportion of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone relative to the difethialone are adapted so that the consumption of rodenticide bait is lethal to harmful target rodents consuming daily bait for at least two 24-hour periods
-notamment de 3 à 7 périodes-. especially 3 to 7 periods.
Avantageusement, dans cette autre variante de l'invention, on dissémine une quantité d'appât rodonticide de façon que des rongeurs cibles nuisibles consomment une quantité de diféthialone suffisante pour être létale pour lesdits rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant plusieurs périodes de 24 heures, lesdites périodes étant consécutives. Advantageously, in this other variant of the invention, a quantity of rodenticide bait is dispersed so that harmful target rodents consume a quantity of difethialone sufficient to be lethal to said harmful target rodents consuming said bait for several periods of 24 hours. said periods being consecutive.
Avantageusement, dans cette autre variante d'un procédé selon l'invention, la quantité d'énantiomère lévogyre dudit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone est telle que le rapport de cette quantité sur la quantité de diféthialone étant supérieur à 95% -notamment de l'ordre de 100%-, la proportion massique de diféthialone par rapport à l'appât rodonticide est comprise entre 5 ppm et 50 ppm -notamment comprise entre 10 ppm et 15 ppm-. Advantageously, in this other variant of a process according to the invention, the amount of laevorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone is such that the ratio of this amount to the amount of difethialone being greater than 95% - in particular of the order of 100% -, the mass proportion of difethialone relative to the rodenticide bait is between 5 ppm and 50 ppm -in particular between 10 ppm and 15 ppm-.
Dans un procédé selon l'invention, on met à disposition des rongeurs cibles nuisibles une quantité d'appât rodonticide suffisante pour satisfaire quotidiennement l'appétit des rongeurs cibles nuisibles, ledit appât rodonticide comprenant une proportion majoritaire d'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone. In a method according to the invention, harmful target rodents are provided with a quantity of rodenticide bait sufficient to satisfy daily the appetite of the target harmful rodents, said rodenticide bait comprising a major proportion of levorotatory enantiomer of said homo-steroid. isomer of difethialone.
Dans un procédé selon l'invention, on adapte la quantité d'appât rodonticide disséminé, la proportion de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone par rapport à la diféthialone et la proportion massique de diféthialone par rapport à l'appât rodonticide de façon à permettre une consommation d'appât rodonticide pendant plusieurs jours par des rongeurs cibles nuisibles, tout en limitant : In a method according to the invention, the amount of disseminated rodenticide bait, the proportion of the laevorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone relative to difethialone and the mass proportion of difethialone relative to the rodenticide bait to allow rodenticide bait consumption for several days by harmful target rodents, while limiting:
- les risques d'intoxication primaire de mammifères et oiseaux non cibles susceptibles de ne consommer qu'occasionnellement et accidentellement un tel appât rodonticide ; - the risk of primary intoxication of mammals and non-target birds likely to consume only occasionally and accidentally such rodenticide bait;
- les risques d'intoxication secondaire, par exemple des prédateurs des rongeurs cibles, susceptibles de consommer des rongeurs -morts ou vifs- cibles ayant ingéré une quantité dudit appât.
Avantageusement et selon l'invention, on adapte la quantité d'appât disséminé, le rapport de la masse de diféthialone sur la masse de l'appât rodonticide, le rapport de la quantité de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone sur la quantité dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone et le rapport de la quantité de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone sur la quantité de la diféthialone pour minimiser la quantité de diféthialone (totale) dans le foie des rongeurs cibles nuisibles. the risks of secondary intoxication, for example predators of target rodents, likely to consume rodents-dead or alive-targets having ingested a quantity of said bait. Advantageously and according to the invention, the amount of disseminated bait, the ratio of the mass of difethialone to the mass of the rodenticide bait, the ratio of the amount of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone on the amount of said homo-stereoisomer of difethialone and the ratio of the amount of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone to the amount of difethialone to minimize the amount of difethialone (total) in the liver rodent harmful targets.
L'invention concerne aussi un procédé chromatographique d'obtention d'un énantiomère lévogyre d'un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, dit homo-stéréo-isomère, de formule 3-(4'-bromobiphenyl-4-yl)- l-(4-hydroxythiocoumarin-3-yl)-l,2,3,4-tétrahydronaphtalène, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène dudit homo-stéréo- isomère sont de même configuration absolue, procédé dans lequel : The invention also relates to a chromatographic process for obtaining a laevorotatory enantiomer of a configuration stereoisomer of the homo-stereo-isomer difethialone of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) 1- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalene, wherein carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene moiety of said homo-stereoisomer are of the same configuration absolute, a process in which:
- on choisit une colonne pour chromatographie liquide à haute pression de dimensions 150 x 2 mm, et comprenant une phase stationnaire chirale constituée de particules de cellulose tris(4-méthylbenzoate), lesdites particules étant d'une taille moyenne de 3 μπι et présentant une taille moyenne de pores de 1000 À ; a column for high pressure liquid chromatography of dimensions 150 × 2 mm, and comprising a chiral stationary phase consisting of tris (4-methylbenzoate) cellulose particles, said particles having an average size of 3 μπι and presenting a average pore size of 1000 Å;
- on choisit, à titre de phase mobile liquide, un mélange formé d'acétonitrile (A) et d'eau comprenant 0,1% en volume d'acide formique (B), avec un rapport volumique A/B de 80/20 et avec un débit de la phase mobile liquide dans la colonne de chromatographie de 0,25 mL/min ; a mixture of acetonitrile (A) and water comprising 0.1% by volume of formic acid (B) is chosen as liquid mobile phase, with an A / B volume ratio of 80/20; and with a flow rate of the liquid mobile phase in the chromatography column of 0.25 mL / min;
- on réalise une séparation des stéréo-isomères de configuration de la diféthialone à température ambiante lors de laquelle ; a separation of the configuration stereoisomers of the difethialone at room temperature during which;
- on introduit en tête de la colonne pour chromatographie une composition liquide comprenant dudit énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone, puis ; a liquid composition comprising said laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone is introduced at the top of the chromatography column, and then;
- on entraîne la composition liquide avec la phase mobile dans la colonne pour chromatographie dans des conditions propres à séparer les stéréo-isomères de configuration de la diféthialone, et ;
- on collecte une fraction de la phase mobile comprenant ledit énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone avec un temps de rétention ti de valeur telle que ti < t2 < t3 < t4 ; t2, t3 et t4 représentant les temps de rétention de chacun des stéréo-isomères de configuration de la diféthialone distincts de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone, séparément d'un énantiomère dextrogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone de temps de rétention t et séparément des énantiomères lévogyre et dextrogyre d'un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, dit hétéro- stéréo-isomère, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphtalène dudit hétéro- stéréo-isomère sont de configurations absolues distinctes, et de temps de rétention t2 et t3, puis ; the liquid composition is entrained with the mobile phase in the column for chromatography under conditions suitable for separating the configuration stereoisomers from the difethialone, and; collecting a fraction of the mobile phase comprising said laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone with a retention time ti of value such that ti <t 2 <t 3 <t 4 ; t 2 , t 3 and t 4 represent the retention times of each of the configuration stereoisomers of the difethialone distinct from the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone, separately from a dextrorotatory enantiomer of said homo-stereo difethialone isomer of retention time t and separately from the levorotatory and dextrorotatory enantiomers of a difethialone configuration stereoisomer, called a hetero-stereoisomer, in which the group 1 and 3 carbons 1,2,3 , 4-tetrahydronaphthalene of said hetero-stereoisomer are of distinct absolute configurations, and retention time t 2 and t 3 , then;
- on élimine la phase mobile liquide de ladite fraction de façon à obtenir ledit énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone. the liquid mobile phase of said fraction is removed so as to obtain said laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
L'invention concerne également un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, un procédé d'obtention d'un tel stéréo-isomère de configuration, une composition comprenant un tel stéréo-isomère de configuration, un appât rodonticide et un procédé de lutte contre les rongeurs cibles nuisibles caractérisés en combinaison par tout ou partie des caractéristiques mentionnées ci-dessus ou ci-après. The invention also relates to a configuration stereoisomer of difethialone, a process for obtaining such a configuration stereo-isomer, a composition comprising such a configuration stereo-isomer, a rodenticide bait and a method of controlling harmful target rodents characterized in combination by all or some of the characteristics mentioned above or hereafter.
D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description suivante et des exemples donnés à titre uniquement non limitatif et qui se réfèrent aux figures annexées, dans lesquelles : Other objects, features and advantages of the invention will appear on reading the following description and examples given solely by way of non-limiting example and which refer to the appended figures, in which:
- la figure 1 est un chromatogramme d'analyse par chromatographie liquide à haute pression sur une colonne chirale de la diféthialone (haut) et de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone purifié (bas) ; FIG. 1 is a chromatogram of analysis by high pressure liquid chromatography on a chiral column of difethialone (top) and of the levorotatory enantiomer of said homo-isomer of purified difethialone (bottom);
- la figure 2 est un spectre de RMN du proton à 300 MHz dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone ; FIG. 2 is a 300 MHz proton NMR spectrum of said homo-isomer of difethialone;
- la figure 3 est un spectre de RMN du proton à 300 MHz dudit hétéro-stéréo-isomère de la diféthialone ; FIG. 3 is a 300 MHz proton NMR spectrum of said hetero-stereoisomer of difethialone;
- la figure 4 est un spectre de RMN du proton à 500 MHz de
l'énantiomère lévogyre dudit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone ; FIG. 4 is a 500 MHz proton NMR spectrum of the levorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone;
- la figure 5 est un spectre de RMN du carbone 13C à 500 MHz de l'énantiomère lévogyre dudit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone ; FIG. 5 is a 13 C-carbon NMR spectrum at 500 MHz of the levorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer of difethialone;
- la figure 6 est une analyse par spectroscopie de corrélation en RMN du proton (1H-RMN) à 500 MHz de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo- isomère de la diféthialone ; FIG. 6 is a 500 MHz proton NMR correlation spectroscopy analysis (1H-NMR) of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone;
- la figure 7 est un spectre de dichroïsme circulaire de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone ; FIG. 7 is a circular dichroism spectrum of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone;
- la figure 8 est une représentation graphique de l'évolution temporelle de la concentration hépatique chez des rats (mâles et femelles) de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone (·) et dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone (O), et ; FIG. 8 is a graphical representation of the temporal evolution of the hepatic concentration in rats (male and female) of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone (·) and said homo-stereoisomer of difethialone (O), and;
- la figure 9 est une représentation graphique de l'évolution temporelle de la concentration hépatique chez des rats (mâles et femelles) de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone (·) et de la diféthialone totale (Δ). FIG. 9 is a graphical representation of the temporal evolution of the hepatic concentration in rats (males and females) of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone (·) and of total difethialone (Δ) .
A. Purification de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone isolé A. Purification of the levorotatory enantiomer of said homo-isomer of isolated difethialone
A.l. Identification dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone A. L. Identification of said homo-stereoisomer of difethialone
On identifie Γ homo- stéréo-isomère de la diféthialone par spectroscopie par résonnance magnétique (1H-RMN) du proton. L'homo-stéréo- isomère de la diféthialone en solution dans CDCt3 présente un multiplet à un déplacement chimique (δ) compris entre 4,9 ppm et 5,1 ppm et correspondant au proton porté par le carbone 1 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène de la diféthialone comme illustré en figure 2. The homo-stereoisomer of difethialone is identified by magnetic resonance spectroscopy (1 H NMR) of the proton. The homo-stereoisomer of the difethialone in solution in CDCl 3 has a multiplet with a chemical shift (δ) of between 4.9 ppm and 5.1 ppm and corresponding to the proton carried by the carbon 1 of the group 1,2 3,4-tetrahydronaphthalene of difethialone as illustrated in FIG.
On distingue l'hétéro-stéréo-isomère de la diféthialone et Γ homo- stéréo-isomère de la diféthialone par leurs spectres RMN du proton. Sur le spectre RMN du proton réalisé dans CDCt3, le déplacement chimique du proton porté par le carbone 1 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène dudit hétéro-stéréo-isomère de la diféthialone (figure 3) est compris entre 5,2 ppm et 5,4 ppm.
A.2. Séparation des énantiomères lévogyre et dextrogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone par chromato graphie liquide à haute pression The hetero-stereoisomer of difethialone and the homo-stereoisomer of difethialone are distinguished by their proton NMR spectra. On the proton NMR spectrum produced in CDCt 3 , the chemical shift of the proton carried by carbon 1 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group of said hetero-stereoisomer of difethialone (FIG. 3) is between 5, 2 ppm and 5.4 ppm. A.2. Separation of the levorotatory and dextrorotatory enantiomers of said homo-isomer of difethialone by high pressure liquid chromato graphy
Les inventeurs ont résolu le problème complexe et non résolu à ce jour de la séparation des énantiomères lévogyre et dextrogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone à partir d'une préparation commerciale de diféthialone. Ils sont parvenus à réaliser une séparation analytique des énantiomères dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone par chromatographie liquide à haute pression (haute performance) sur une colonne chirale LUX® Cellulose-3 (Phenomenex, Le Pecq, France) de dimension 150 x 2 mm et comprenant une phase stationnaire chirale constituée de particules poreuses de cellulose tris(4-méthylbenzoate), d'une granulométrie de 3 μπι et d'une porosité de 1000 A et en utilisant, à titre de phase mobile, un éluant formé d'un mélange d'acétonitrile (A) et d'eau comprenant de l'acide formique en proportion volumique de 0,1% dans l'eau (B) avec un rapport volumique A/B de 80/20. Le débit de la phase mobile dans la colonne est de 0,25 mL/min et la séparation est réalisée à la température de 23,2°C. La solution contenant l'échantillon à analyser est à une concentration de 1 μg de diféthialone par millilitre dans l'acétonitrile et est filtrée sur une membrane de cellulose régénérée de seuil de coupure de 0,2 μπι. Le volume de solution contenant l'échantillon à analyser injecté sur la colonne est de 1 μL·. The inventors have solved the complex and unresolved problem of separating the levorotatory and dextrorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer from difethialone from a commercial difethialone preparation. They have succeeded in carrying out an analytical separation of the enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone by high performance liquid chromatography (high performance) on a chiral column LUX ® Cellulose-3 (Phenomenex, Le Pecq, France) of dimension 150 x 2 mm and comprising a chiral stationary phase consisting of porous cellulose particles tris (4-methylbenzoate), a particle size of 3 μπι and a porosity of 1000 A and using, as a mobile phase, an eluent formed of a mixture of acetonitrile (A) and water comprising formic acid in a volume proportion of 0.1% in water (B) with a volume ratio A / B of 80/20. The flow rate of the mobile phase in the column is 0.25 ml / min and the separation is carried out at a temperature of 23.2 ° C. The solution containing the sample to be analyzed is at a concentration of 1 μg of difethialone per milliliter in acetonitrile and is filtered on a membrane of regenerated cellulose with a cut-off of 0.2 μπι. The volume of solution containing the sample to be analyzed injected on the column is 1 μL ·.
Dans un procédé de séparation des énantiomères dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone, il est possible de détecter lesdits énantiomères en sortie de colonne par spectrométrie de masse en tandem (MS/MS) en mode d'ionisation négative par électronébulisation (ESI, « ElectroSpray Ionization »). La température du gaz porteur est de 350°C et son débit est de 8 L/min. La pression du nébuliseur est portée à 2700 hPa. En particulier, on analyse les transitions MRM (« Multiple Reaction Monitoring » m/z 537,1 → 151,0 et m/z 537,1 → 78,9 correspondants aux signaux de la diféthialone. La figure 1 représente les chromatogrammes de la diféthialone (haut) et de l'énantiomère lévogyre de Γ homo- stéréo-isomère de la diféthialone (bas) isolé.
Dans ces conditions expérimentales, la valeur du temps de rétention (ti) de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère selon l'invention est de l'ordre de 8, 1 min comme décrit figure 1. À titre de comparaison, la valeur du temps de rétention (t4) dudit énantiomère dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère selon l'invention est de l'ordre de 14,4 min, de sorte que les énantio mères dextrogyre et lévogyre dudit homo-stéréo-isomère peuvent être efficacement séparés par chromatographie liquide à haute pression sur une colonne chirale. In a process for separating the enantiomers of said homo-stereoisomer from difethialone, it is possible to detect said enantiomers at the column outlet by tandem mass spectrometry (MS / MS) in the electrospray negative ionization (ESI) mode, "ElectroSpray Ionization"). The temperature of the carrier gas is 350 ° C. and its flow rate is 8 L / min. The nebulizer pressure is raised to 2700 hPa. In particular, the MRM transitions m / z 537.1 → 151.0 and m / z 537.1 → 78.9 corresponding to the signals of the difethialone are analyzed, and FIG. difethialone (top) and laevorotatory enantiomer of homo-stereoisomer of difethialone (bottom) isolated. Under these experimental conditions, the value of the retention time (ti) of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer according to the invention is of the order of 8.1 min as described in FIG. 1. By way of comparison, the value of the retention time (t 4 ) of said dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer according to the invention is of the order of 14.4 min, so that the dextrorotatory and laevorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer can be effectively separated by high pressure liquid chromatography on a chiral column.
La valeur du temps de rétention (t3) de l'énantiomère dextrogyre dudit hétéro- stéréo-isomère de la diféthialone est de l'ordre de 11,7 min et la valeur du temps de rétention (t2) de l'énantiomère lévogyre dudit hétéro-stéréo-isomère de la diféthialone est de l'ordre de 9,4 min. Ainsi, dans ces conditions expérimentales, l'ordre d'élution des énantio mères de la diféthialone est tel que < t2 < t3 < t . The value of the retention time (t 3 ) of the dextrorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer of difethialone is of the order of 11.7 min and the value of the retention time (t 2 ) of the levorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer of difethialone is of the order of 9.4 min. Thus, under these experimental conditions, the order of elution of the enantiomers of the difethialone is such that <t 2 <t 3 <t.
II est possible de réaliser dans ces conditions expérimentales (phase stationnaire, phase mobile, température) une séparation préparative des énantiomères lévogyre et dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone en utilisant une phase stationnaire similaire et de granulométrie supérieure à 3 μπι, et une colonne chromatographique de plus grandes dimensions, notamment d'un diamètre de 20 mm. It is possible to carry out under these experimental conditions (stationary phase, mobile phase, temperature) a preparative separation of the levorotatory and dextrorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone by using a similar stationary phase and with a particle size greater than 3 μπι, and a chromatographic column of larger dimensions, in particular with a diameter of 20 mm.
B. Caractérisation structurelle B. Structural characterization
B. l . Spectroscopie UV B. l. UV spectroscopy
Le spectre UV de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone en solution dans le chloroforme (CHCt3) présente des pics d'absorbance à 238,2 nm et 259,5 nm. The UV spectrum of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in solution in chloroform (CHCt 3 ) has peaks of absorbance at 238.2 nm and 259.5 nm.
B.2. Pouvoir rotatoire B.2. Rotating power
Les inventeurs ont caractérisé l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone à l'état isolé par son pouvoir rotatoire (aussi appelé activité optique ou biréfringence circulaire), c'est-à-dire par sa propriété à dévier le plan de polarisation d'une lumière polarisée. Une déviation du plan de polarisation de la lumière polarisée dans le sens horaire de rotation en
faisant face au faisceau de lumière polarisée caractérise une solution et un composé optiquement actif et dextrogyre, et une déviation du plan de polarisation de la lumière polarisée dans le sens antihoraire de rotation en faisant face au faisceau de lumière polarisée caractérise une solution et un composé optiquement actif et lévogyre. The inventors have characterized the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone in the isolated state by its rotatory power (also called optical activity or circular birefringence), that is to say by its property to deflect the plane. polarization of a polarized light. A deflection of the plane of polarization of the polarized light in the clockwise direction of rotation in facing the polarized light beam characterizes a solution and an optically active and dextrorotatory compound, and a deflection of the polarization plane of the polarized light in the counterclockwise direction of rotation facing the polarized light beam characterizes a solution and an optically active and levorotatory.
On mesure le pouvoir rotatoire d'une solution d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone dans le chloroforme (CHCt3) à une concentration de 11,05 g/L. On mesure le pouvoir rotatoire de cette solution au moyen d'un polarimètre digital P 2000 (JASCO, Bouguenais, France) opérant avec une lumière excitatrice de longueur d'onde de 589 nm. Le pouvoir rotatoire a moyen obtenu sur 2 séries de 10 mesures est de -1,635°. Le pouvoir rotatoire spécifique à 25°C [oc]25 c 589nm de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone en solution dans le chloroforme, mesuré sur la raie D du sodium (589 nm) est de -14,8°. The rotatory power of a laevorotatory enantiomer solution of said homo-stereoisomer of difethialone in chloroform (CHCt 3 ) is measured at a concentration of 11.05 g / L. The rotary power of this solution is measured by means of a P 2000 digital polarimeter (JASCO, Bouguenais, France) operating with excitation light with a wavelength of 589 nm. The mean rotatory power obtained over 2 series of 10 measurements is -1.635 °. The specific rotation power at 25 ° C [α] δ c 58 nm of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in solution in chloroform, measured on the sodium D line (589 nm) is -14 , 8 °.
B.3. Dichroïsme circulaire B.3. Circular Dichroism
Le spectre de dichroïsme circulaire de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone isolé traduit la différence d'absorbance (AA=AG-AD) des deux ondes de polarisation circulaire gauche (PCG) d'intensité AG et de polarisation circulaire droite (PCD) d'intensité AD. Il permet de distinguer les énantiomères dextrogyre et lévogyre dudit homo-stéréo- isomère de la diféthialone. On mesure cette différence d'absorbance des deux ondes de polarisation circulaire dans un spectromètre de dichroïsme circulaire J- 815 (JASCO, Bouguenais, France). On prépare 2 mL de solution d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone dans du méthanol (CH3- OH) à une concentration de 0,81 mg/mL. On transfère la solution dans une cuve en quartz pour spectrophotomètre. On mesure à 25°C le spectre de dichroïsme circulaire de la solution entre 200 nm et 400 nm. Le spectre de dichroïsme circulaire de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone mesuré dans ces conditions est représenté en figure 7. La valeur de dichroïsme circulaire est négative entre les longueurs d'onde comprises entre 220 nm et 300 nm.
B.4. Résonnance Magnétique Nucléaire The circular dichroism spectrum of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the isolated difethialone expresses the difference in absorbance (AA = A G -A D ) of the two left circular polarization waves (PCG) of intensity A G and right circular polarization (PCD) of intensity A D. It makes it possible to distinguish the dextrorotatory and laevorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer from difethialone. This difference in absorbance of the two circular polarization waves is measured in a J-815 circular dichroism spectrometer (JASCO, Bouguenais, France). 2 mL of levorotatory enantiomer solution of said homo-stereoisomer of difethialone in methanol (CH 3 -OH) at a concentration of 0.81 mg / mL are prepared. The solution is transferred to a quartz tank for spectrophotometer. The circular dichroism spectrum of the solution between 200 nm and 400 nm is measured at 25 ° C. The circular dichroism spectrum of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone measured under these conditions is shown in FIG. 7. The circular dichroism value is negative between the wavelengths between 220 nm and 300 nm. B.4. Nuclear Magnetic Resonance
Les figures 2 et 3 représentent respectivement un spectre de résonnance magnétique nucléaire du proton (1H-RMN) à 300 MHz de l'homo- stéréo-isomère de la diféthialone dans CDCC3 (figure 2) et un spectre de résonnance magnétique nucléaire du proton à 300 MHz dans CDCC3 de l'hétéro- stéréo-isomère de la diféthialone dans CDCC3 (figure 3). Ledit homo-stéréo- isomère de la diféthialone présente (figure 2) un multiplet dont le déplacement chimique (δ) est compris entre 4,9 ppm et 5,1 ppm correspondant au carbone 1 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. Ledit hétéro- stéréo-isomère de la diféthialone présente (figure 3) un multiplet dont le déplacement chimique (δ) est compris entre 5,2 ppm et 5,4 ppm. FIGS. 2 and 3 respectively represent a nuclear magnetic resonance spectrum of the proton (1 H NMR) at 300 MHz of the homo-stereoisomer of difethialone in CDCC 3 (FIG. 2) and a nuclear magnetic resonance spectrum of the proton at 300 MHz in CDCC 3 of the hetero-stereoisomer of difethialone in CDCC 3 (Figure 3). Said homo-stereoisomer of difethialone has (FIG. 2) a multiplet whose chemical shift (δ) is between 4.9 ppm and 5.1 ppm corresponding to carbon 1 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group. said homo-stereoisomer of difethialone. Said hetero-stereoisomer of difethialone has (Figure 3) a multiplet whose chemical shift (δ) is between 5.2 ppm and 5.4 ppm.
La figure 4 représente un spectre de RMN du proton à 500 MHz de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone dans CDCC3. Les spectres RMN du proton des énantiomères dextrogyre et lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone ne sont pas distinguables l'un de l'autre. Figure 4 shows a 500 MHz proton NMR spectrum of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in CDCC 3 . The proton NMR spectra of the dextrorotatory and levorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone are indistinguishable from each other.
La figure 5 est un spectre RMN du 13C de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone en solution dans CDCt3 à une concentration de 40 mg/mL réalisé sur un spectromètre Bruker AVANCE III HD (500 MHz) équipé d'une cryosonde directe multi-noyaux motorisée PRODIGY. Il permet une identification des 31 atomes de carbone de la diféthialone. Le spectre en 13C-RMN de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone ne se distingue pas du spectre en 13C-RMN de l'énantiomère dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. Ledit homo-stéréo-isomère de la diféthialone présente un signal compris entre 34 ppm et 38 ppm caractéristique et distinctif dudit hétéro-stéréo-isomère de la diféthialone. FIG. 5 is a 13 C NMR spectrum of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in solution in CDCt 3 at a concentration of 40 mg / ml produced on a Bruker AVANCE III HD (500 MHz) spectrometer equipped of a PRODIGY motorized multi-core direct cryoprobe. It allows an identification of the 31 carbon atoms of the difethialone. The 13 C-NMR spectrum of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone is not distinguishable from the 13 C-NMR spectrum of the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone. Said homo-stereoisomer of difethialone has a signal between 34 ppm and 38 ppm characteristic and distinctive of said hetero-stereoisomer of difethialone.
La figure 6 est un spectre (1H-RMN 2D) RMN du proton en deux dimensions obtenu par spectroscopie de corrélation de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone en solution dans CDCt3 à une concentration de 40 mg/mL réalisé sur un spectromètre Bruker AVANCE III
HD (500 MHz) équipé d'une cryosonde directe multi-noyaux motorisée PRODIGY. Il permet une identification du couplage du proton porté par le carbone 1 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène dudit homo-stéréo- isomère de la diféthialone avec les protons portés par le carbone 2 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène à 2,27 ppm. FIG. 6 is a two-dimensional (1H-NMR) two-dimensional proton NMR spectrum obtained by correlation spectroscopy of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in solution in CDCt 3 at a concentration of 40 mg / mL performed on a Bruker AVANCE III spectrometer HD (500 MHz) equipped with a PRODIGY motorized multi-core direct cryoprobe. It makes it possible to identify the coupling of the proton carried by the carbon 1 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group of said homo-stereoisomer of the difethialone with the protons carried by the carbon 2 of the 1,2,3,4 group. tetrahydronaphthalene at 2.27 ppm.
C. Extraction de la diféthialone de foies de rats traités à la diféthialone en vue de l'analyse des différents énantiomères de la diféthialone C. Extraction of difethialone from difethialone-treated rat liver for analysis of different enantiomers of difethialone
Cl. Homogénéisation de l'échantillon de foie Cl. Homogenization of the liver sample
On pèse avec précision de l'ordre de 0,525 g (±0,025 g) de foie de rat que l'on place dans un tube en polypropylène de 50 mL. On ajoute 10 mL d'acétone et on soumet la suspension à une homogénéisation au moyen d'un homogénéisateur/disperseur Ultra- Turrax® pendant une durée de l'ordre de 30 sec. On rince la tige de l'homogénéisateur/disperseur à l'eau chaude puis 2 fois avec 20 mL d'acétone dans un tube en polypropylène. On centrifuge l'homogénat pendant 5 min à une vitesse de centrifugation de 3000 rpm (rotation par minute). On collecte et on transvase le surnageant dans un tube à essai. On soumet l'échantillon à une évaporation sous un flux d'azote (N2) à la température de 40° C de façon à former un extrait sec. 0.525 g (± 0.025 g) of rat liver are weighed accurately and placed in a 50 ml polypropylene tube. 10 mL of acetone was added and the suspension is subjected to homogenization using a homogenizer / disperser ® Ultra-Turrax for a period of about 30 sec. The rod of the homogenizer / disperser is rinsed with hot water and then twice with 20 ml of acetone in a polypropylene tube. The homogenate is centrifuged for 5 minutes at a centrifugation rate of 3000 rpm (rotation per minute). The supernatant is collected and decanted into a test tube. The sample is evaporated under a stream of nitrogen (N 2 ) at a temperature of 40 ° C to form a dry extract.
C.2. Élimination des lipides C.2. Elimination of lipids
Dans le tube contenant l'extrait sec, on ajoute 1 mL d'acétonitrile de façon à solubiliser l'extrait sec. On lave la solution d'acétonitrile 2 fois successivement avec 1 mL d'hexane. L'extrait débarrassé des lipides est séché sous un flux d'azote (N2) à la température de 40°C, puis repris avec 0,5 mL de méthanol et solubilisé par agitation sous vortex. On ajoute ensuite 0,5 mL d'eau ultra-pure (Milli-Q). L'échantillon est homogénéisé sous vortex. In the tube containing the dry extract, 1 mL of acetonitrile is added so as to solubilize the dry extract. The acetonitrile solution is washed twice in succession with 1 mL of hexane. The lipid-freed extract is dried under a flow of nitrogen (N 2 ) at a temperature of 40 ° C., then taken up with 0.5 ml of methanol and solubilized by vortexing. 0.5 ml of ultrapure water (Milli-Q) is then added. The sample is homogenized under a vortex.
C.3. Extraction de la diféthialone sur phase solide (« SPE, Solid Phase Extraction ») C.3. Extraction of Solid Phase Extraction (SPE)
On fait passer 1 mL de dichlorométhane (CH2C 2), puis 1 mL de méthanol (CH3OH), puis 1 mL d'eau ultra-pure (Milli-Q) sur une cartouche Oasis HLB lcc (WAT094225, Waters). On dépose ensuite l'extrait de
foie débarrassé des lipides (lmL MeOH/H2O Milli-Q) et contenant la diféthialone en tête de la cartouche préalablement conditionnée. L'extrait de foie pénètre dans la cartouche par gravité au contact de la phase solide de la cartouche. On dépose en tête de cartouche 1 mL de solution de lavage formée de méthanol (CH3OH) et d'eau ultra-pure (H2O) en proportion volumique de 90/10. On sèche la cartouche par aspiration sous vide connectée en partie basse de la cartouche. On dépose ensuite en tête de cartouche 1 mL de solution d'élution formée de dichlorométhane (CH2Ct2) et de méthanol (CH3OH) en proportion volumique de 90/10 et on collecte en bas de cartouche un éluat comprenant la diféthialone. On évapore le solvant de Γ éluat sous un flux d'azote (N2) à la température de 40°C. On reprend l'échantillon dans 0,5 mL d'acétonitrile (NC- CH3) et on filtre la solution d'acétonitrile contenant la diféthialone sur filtre 0,2 μιη. 1 ml of dichloromethane (CH 2 C 2 ), then 1 ml of methanol (CH 3 OH) and then 1 ml of ultrapure water (Milli-Q) are passed through an Oasis HLB lcc cartridge (WAT094225, Waters). . Then the extract of lipid-free liver (lmL MeOH / H 2 O Milli-Q) and containing the difethialone at the top of the cartridge previously packaged. The liver extract enters the cartridge by gravity in contact with the solid phase of the cartridge. 1 mL of washing solution consisting of methanol (CH 3 OH) and ultrapure water (H 2 O) in a volume proportion of 90/10 is deposited at the top of the cartridge. The cartridge is dried by vacuum suction connected at the bottom of the cartridge. 1 mL of elution solution consisting of dichloromethane (CH 2 Cl 2 ) and of methanol (CH 3 OH) in a volume proportion of 90/10 is then deposited at the top of the cartridge and an eluate comprising difethialone is collected at the bottom of the cartridge. . The eluate solvent was evaporated under a stream of nitrogen (N 2 ) at a temperature of 40 ° C. The sample is taken up in 0.5 ml of acetonitrile (NC-CH 3 ) and the acetonitrile solution containing the difethialone is filtered on a 0.2 μιη filter.
C.4. Analyse C.4. Analysis
On analyse la solution d'acétonitrile contenant la diféthialone par chromatographie liquide à haute pression sur une colonne chirale (150 x 2 mm, granulométrie de 3 μπι) LUX® Cellulose-3 (phenomenex, Le Pecq, France) comme décrit au point A2) ci-dessus. La valeur du temps de rétention ( ) de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone selon l'invention est comprise entre 7,8 min et 8,4 min (la valeur maximale du pic correspondant à l'énantiomère dextrogyre dudit homo- stéréo-isomère étant de l'ordre de 8,1 min, comme décrit en figure 1), selon les conditions opératoires -notamment selon les conditions de température de la colonne-. La valeur du temps de rétention (t4) de l'énantiomère dextrogyre dudit homo- stéréo-isomère est comprise entre 13,3 min et 15,1 min (la valeur maximale du pic correspondant à l'énantiomère dextrogyre dudit homo- stéréo-isomère étant de l'ordre de 14,4 min), selon les conditions opératoires -notamment selon les conditions de température de la colonne-. La valeur du temps de rétention (t3) de l'énantiomère dextrogyre dudit hétéro- stéréo-isomère de la diféthialone est comprise entre 11,2 min et 12,3 min (la valeur maximale du pic correspondant à l'énantiomère dextrogyre dudit hétéro- stéréo-isomère étant de l'ordre de 11,7
min), selon les conditions opératoires -notamment selon les conditions de température de la colonne-. La valeur du temps de rétention (t2) de l'énantiomère lévogyre dudit hétéro- stéréo-isomère de la diféthialone est comprise entre 9,0 min et 9,8 min (la valeur maximale du pic correspondant à l'énantiomère lévogyre dudit hétéro- stéréo-isomère étant de l'ordre de 9,4 min), selon les conditions opératoires -notamment selon les conditions de température de la colonne-. On analyse la composition de l'échantillon par chromatographie liquide à haute pression comme décrit au point A2) ci-dessus. Analyzing the acetonitrile solution containing difethialone by high pressure liquid chromatography on a chiral column (150 x 2 mm, particle size 3 μπι) LUX ® Cellulose-3 (Phenomenex, Le Pecq, France) as described in Step A2) above. The value of the retention time () of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone according to the invention is between 7.8 min and 8.4 min (the maximum value of the peak corresponding to the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer being of the order of 8.1 min, as described in FIG. 1), according to the operating conditions, in particular according to the temperature conditions of the column. The value of the retention time (t 4 ) of the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer is between 13.3 min and 15.1 min (the maximum value of the peak corresponding to the dextrorotatory enantiomer of said homo-stereo-isomer). isomer being of the order of 14.4 min), depending on the operating conditions -especially according to the temperature conditions of the column-. The value of the retention time (t 3 ) of the dextrorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer of difethialone is between 11.2 min and 12.3 min (the maximum value of the peak corresponding to the dextrorotatory enantiomer of said hetero - stereoisomer being of the order of 11.7 min), depending on the operating conditions -especially according to the temperature conditions of the column-. The value of the retention time (t 2 ) of the laevorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer of difethialone is between 9.0 min and 9.8 min (the maximum value of the peak corresponding to the laevorotatory enantiomer of said hetero - stereo-isomer being of the order of 9.4 min), depending on the operating conditions -partement depending on the temperature conditions of the column-. The composition of the sample is analyzed by high pressure liquid chromatography as described in point A2) above.
D. Étude de la rémanence hépatique des stéréo-isomères de configuration de la diféthialone chez le rat D. Study of Hepatic Persistence of Difethialone Configuration Stereoisomers in Rats
On administre par gavage ("per os") à des rats (Rattus norvegicus) mâles et femelles sensibles au coumafène, une solution d'un mélange dudit ho mo- stéréo-isomère et dudit hétéro- stéréo-isomère de la diféthialone dans un mélange d'huile végétale et de DMSO à 5 . Le rapport molaire de la quantité dudit homo-stéréo-isomère sur la quantité dudit hétéro- stéréo-isomère est de 4/6. Chaque diastéréoisomère de la diféthialone est formé d'un mélange racémique des deux énantiomères du diastéréoisomère correspondant. Gents ("per os") are administered to male and female coumafen-sensitive rats (Rattus norvegicus), a solution of a mixture of said ho-stereo-isomer and said hetero-stereoisomer of difethialone in a mixture. of vegetable oil and 5% DMSO. The molar ratio of the amount of said homo-stereoisomer to the amount of said hetero-stereoisomer is 4/6. Each diastereoisomer of difethialone is formed from a racemic mixture of the two enantiomers of the corresponding diastereoisomer.
On administre (à J0) la solution de gavage de façon que la quantité de diféthialone ingérée par chaque rat soit de l'ordre de 3,4 mg par kilogramme de rat. The gavage solution is administered (on day 0) so that the amount of difethialone ingested by each rat is of the order of 3.4 mg per kilogram of rat.
Pour éviter l'hémorragie, les rats gavés sont traités quotidiennement par administration par voie sous cutanée d'une dose de vitamine Kl (à titre d'antidote vis-à-vis de l'hémorragie) à raison de 0,1U pour 200g de poids de rat vif. To avoid hemorrhage, fed rats are treated daily by subcutaneous administration of a dose of vitamin K1 (as an antidote to bleeding) at the rate of 0.1U per 200g of rat's weight.
À 4 heures (H+4), 9 heures (H+9), 24 heures (H+24), 120 heures (H+120), 168 heures (H+168) et 216 heures (H+216) après le gavage, on euthanasie 3 rats mâles et 3 rats femelles préalablement anesthésiés à l'isoflurane, on prélève le foie des rats euthanasiés puis on extrait la diféthialone du foie et on dose la quantité de chacun des stéréo-isomères de configuration de la diféthialone par analyse par chromatographie liquide à haute pression sur une
colonne chirale selon le procédé décrit ci-dessus, mesure de l'aire sous les pics du chromatogramme obtenu et quantification de chaque énantiomère par comparaison avec une courbe d'étalonnage. On dose : At 4 hours (H + 4), 9 hours (H + 9), 24 hours (H + 24), 120 hours (H + 120), 168 hours (H + 168) and 216 hours (H + 216) after the feeding, euthanasia 3 male rats and 3 female rats previously anesthetized with isoflurane, the liver is taken from the euthanized rats and then the difethialone is extracted from the liver and the amount of each of the configuration stereoisomers of the difethialone is analyzed by analysis. by high pressure liquid chromatography on a chiral column according to the method described above, measuring the area under the peaks of the chromatogram obtained and quantifying each enantiomer by comparison with a calibration curve. We dose:
l'énantiomère dextrogyre dudit ho mo- stéréo-isomère ; the dextrorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer;
- l'énantiomère lévogyre dudit ho mo- stéréo-isomère selon l'invention ; the laevorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer according to the invention;
l'énantiomère dextrogyre dudit hétéro-stéréo-isomère ; the dextrorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer;
l'énantiomère lévogyre dudit hétéro- stéréo-isomère ; présents dans le foie des rats gavés. the laevorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomer; present in the liver of gaved rats.
En figures 8 et 9, les concentrations de diféthialone relevées (moyenne des valeurs mesurées sur 6 rats et exprimées en nano-gramme d'énantiomère par gramme de foie (ng/g) dans le foie des rats gavés sont données en fonction du temps (en heures) après le gavage. En figure 8, la concentration de l'énantiomère lévogyre dudit ho mo- stéréo-isomère selon l'invention dans le foie est représentée par des cercles pleins (·) sur l'échelle de gauche et la concentration dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone dans le foie est représentée par des cercles ouverts (O) sur l'échelle de droite. In FIGS. 8 and 9, the measured difethialone concentrations (average of the values measured in 6 rats and expressed in nanogram of enantiomer per gram of liver (ng / g) in the liver of the gavaged rats are given as a function of time ( in hours) after gavage In FIG. 8, the concentration of the laevorotatory enantiomer of said ho-stereo-isomer according to the invention in the liver is represented by solid circles (·) on the left scale and the concentration of said homo-stereoisomer of difethialone in the liver is represented by open circles (O) on the right scale.
L'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère selon l'invention présente une rémanence hépatique inexplicablement élevée par rapport à la rémanence de Γ homo-stéréo-isomère de la diféthialone. The laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer according to the invention exhibits inexplicably high liver remanence compared with the homogeneity of the homo-stereoisomer of difethialone.
En figure 9, la concentration de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère selon l'invention dans le foie est représentée par des cercles pleins (·) sur l'échelle de gauche et la concentration de la diféthialone totale dans le foie est représentée par des triangles ouverts (Δ) sur l'échelle de droite. Les valeurs correspondantes sont données au tableau 1 suivant.
Teneur hépatique, ng/g In FIG. 9, the concentration of the laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer according to the invention in the liver is represented by solid circles (·) on the left scale and the concentration of total difethialone in the liver is represented by open triangles (Δ) on the right scale. The corresponding values are given in Table 1 below. Hepatic content, ng / g
Délai Time limit
Diféthialone totale Total difethialone
après after
Homo- stéréo-isomère Hétéro- stéréo-isomère gavage, Homo-stereo-isomer Hetero-stereo-isomer gavage,
DFN-Homo- DFN-Homo- DFN-Hétéro- DFN-Hétéro- heures DFN-Homo- DFN-Homo- DFN-Hetero- DFN-Hetero-hours
dextro lévo dextro lévo dextro levo dextro levo
4 4566 5692,5 10589,5 5380,5 4 4566 5692.5 10589.5 5380.5
9 4692,5 7141 12155,5 5869,59 4692.5 7141 12155.5 5869.5
24 1243,5 4403,5 8102 3613,524 1243.5 4403.5 8102 3613.5
48 720,5 3874 7974,5 280448,720.5 3874 7974.5 2804
120 192,5 2087 5431,5 1211120 192.5 2087 5431.5 1211
168 129 878,5 3011 392,5168 129 878.5 3011 392.5
216 77,5 1224 4030,5 545 216 77.5 1224 4030.5 545
Tableau 1 Table 1
L'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère selon l'invention présente une rémanence hépatique élevée par rapport à la rémanence de la diféthialone. The laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer according to the invention has a high hepatic remanence with respect to the persistence of the difethialone.
Appât rodonticide comprenant une proportion de 13,7 ppm de diféthialone Rodenticide bait with 13.7 ppm difethialone
On réalise un appât rodonticide pâteux selon l'invention par dispersion d'une quantité d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone dans un excipent comestible comprenant de la graisse végétale et de la farine de céréale. La proportion mesurée de diféthialone par rapport à l'appât est de 13,7 ppm et la proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère par rapport à la diféthialone est de 95,4% (13,1 mg d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone par kilogramme d'appât). L'appât comprend en outre une proportion massique de 3,3 % d'énantiomère dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone par rapport à la diféthialone et une proportion massique de 1,4 % d'énantiomère dextrogyre dudit hétéro-stéréo-isomère de la diféthialone par rapport à la diféthialone. A pasty rodenticide bait according to the invention is produced by dispersing a quantity of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone in an edible excipent comprising vegetable fat and cereal flour. The measured proportion of difethialone relative to the bait is 13.7 ppm and the proportion of laevorotatory enantiomer of said homo-isomer relative to the difethialone is 95.4% (13.1 mg of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone per kilogram of bait). The bait further comprises a mass proportion of 3.3% of dextrorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone relative to difethialone and a mass proportion of 1.4% dextrorotatory enantiomer of said hetero-stereoisomeric isomer of difethialone relative to difethialone.
À J0, on place 10 rats Sprague Dawley (SD), 5 rats mâles et 5 rats femelles) sensibles au coumafène dans des cages individuelles avec une
alimentation de référence exempte de rodonticide. À J3, on réalise une pesée de chaque rat puis on place à disposition de chaque rat 50 g d'appât rodonticide tel que décrit ci-dessus. On renouvelle quotidiennement cette mise à disposition de 50 g d'appât rodonticide. L'appât consommé par les rats est complété à 50 g d'appât à J4, J5 et J6. On mesure également quotidiennement la prise de poids de chacun des rats. À compter de J7, on élimine les appâts rodonticides résiduels et on fournit une alimentation exempte de rodonticide à tous les rats. On prévoit une surveillance des rats pendant 3 semaines. On D0, 10 male-female Sprague Dawley (SD), 5 male and 5 female rats) were placed in individual cages with coumafen reference feed free of rodenticide. On D3, each rat is weighed and then 50 g of rodenticide bait as described above are made available to each rat. This supply of 50 g of rodenticide bait is renewed daily. The bait consumed by the rats is supplemented with 50 g of bait on D4, D5 and D6. The weight gain of each of the rats is also measured daily. As of J7, residual rodenticide baits are discarded and a rodenticide free diet is provided to all rats. The rats are monitored for 3 weeks.
Les quantités moyennes d'appât consommé quotidiennement par un rat à J4, J5, J6 et J7 exprimées en gramme par jour sont données au tableau 2 ci-après. The average amounts of bait consumed daily by a rat on day 4, day 5, day 6 and day 7 expressed in grams per day are given in table 2 below.
Tableau 2 Table 2
Il est à noter qu'aucun rat n'a consommé une quantité quotidienne d'appât inférieure à 1 g/jour. Tous les rats (100%) meurent entre J9 et J 10. La mortalité est de 100% à J 10. It should be noted that no rat consumed a daily amount of bait less than 1 g / day. All rats (100%) die between D9 and D10. The mortality is 100% at D 10.
L'appât faiblement dosé à 13,7 ppm de diféthialone permet l'obtention d'un taux de mortalité de 100% tout en minimisant les risques d'intoxication d'animaux -notamment d'oiseaux- prédateurs ou charognards de rongeurs cibles nuisibles affaiblis ayant consommé un appât rodonticide selon l'invention. Bait with a low dose of 13.7 ppm difethialone achieves a 100% mortality rate while minimizing the risk of animal intoxication - in particular, susceptible, predatory birds or scavengers of weak rodent pests. having consumed a rodenticide bait according to the invention.
Il va de soi que l'invention peut faire l'objet de nombreuses variantes de réalisation et applications. En particulier, une composition, un appât rodonticide et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles sont sujets à des infinités de variantes tant dans la formulation de l'appât que dans les modes de mise en œuvre du procédé.
It goes without saying that the invention can be the subject of many variants and applications. In particular, a composition, a rodenticide bait and a method for controlling harmful target rodents are subject to infinity of variants both in the formulation of the bait and in the methods of implementation of the method.
Claims
REVENDICATIONS
1/ - Énantiomère lévogyre d'un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, dit homo-stéréo-isomère, de formule 3-(4'- bromobiphenyl-4-yl)- 1 -(4-hydroxythiocoumarin-3-yl)- 1 ,2,3,4- tétrahydronaphtalène, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphtalène sont de même configuration absolue. 1 / - Levogyric enantiomer of a configuration stereoisomer of the homo-stereo-isomer difethialone of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -1- (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) - 1, 2,3,4-tetrahydronaphthalene, in which the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group are of the same absolute configuration.
21 - Composition comprenant de Γ énantiomère lévogyre selon la revendication 1, à l'exclusion d'un mélange racémique d'énantio mères lévogyre et dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. 21. A composition comprising a laevorotatory enantiomer according to claim 1, excluding a racemic mixture of levorotatory and dextrorotatory enantiomers of said homo-stereoisomer of difethialone.
3/ - Composition selon la revendication 2, caractérisée en ce que ledit homo-stéréo-isomère est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre. 3 / - Composition according to claim 2, characterized in that said homo-stereoisomer is predominantly in the form of levorotatory enantiomer.
4/ - Composition selon l'une des revendications 2 ou 3, caractérisée en ce que la diféthialone est majoritairement sous forme de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. 4 / - Composition according to one of claims 2 or 3, characterized in that the diféthialone is predominantly in the form of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
5/ - Composition selon l'une des revendications 2 à 4, caractérisée en ce qu'elle comprend une quantité de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone telle que le rapport de cette quantité sur la quantité de diféthialone est supérieur à 25%. 5 / - Composition according to one of claims 2 to 4, characterized in that it comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone such that the ratio of this amount to the amount of difethialone is greater than 25%.
6/ - Composition selon l'une des revendications 2 à 5, caractérisée en ce qu'elle comprend une quantité de l'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone telle que le rapport de cette quantité sur la quantité de la diféthialone est supérieur à 95%. 6 / - Composition according to one of claims 2 to 5, characterized in that it comprises an amount of the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone such as the ratio of this amount to the amount of difethialone is greater than 95%.
Il - Appât rodonticide comprenant une composition selon l'une des revendications 2 à 6, et au moins un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles. Il - Rodenticide bait comprising a composition according to one of claims 2 to 6, and at least one edible carrier for harmful rodent targets.
8/ - Appât selon la revendication 7, caractérisé en ce que l'excipient comestible comprend au moins un aliment choisi dans le groupe formé des graines de céréale, des moutures de graines de céréale, des farines de graines de céréale, des flocons de graines de céréale, du son de céréales et des graines non céréalières.
91 - Appât selon l'une des revendications 7 ou 8, caractérisé en ce qu'il comprend une quantité massique de diféthialone telle que le rapport de cette quantité massique de diféthialone sur la quantité massique d'appât rodonticide est inférieur à 200 ppm. 8 / - Bait according to claim 7, characterized in that the edible carrier comprises at least one food selected from the group consisting of cereal seeds, cereal grain mills, cereal seed meal, seed flakes cereal, cereal bran and non-cereal seeds. 91 - bait according to one of claims 7 or 8, characterized in that it comprises a mass quantity of difethialone such that the ratio of this mass quantity of difethialone on the mass quantity of rodenticide bait is less than 200 ppm.
10/ - Procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles, dans lequel on dissémine une quantité d'appât rodonticide comprenant : 10 / - A method of controlling harmful target rodents, wherein a quantity of rodenticide bait is dispersed comprising:
- au moins un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, et ; at least one edible carrier for harmful target rodents, and
- un énantiomère lévogyre du stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, dit ho mo- stéréo-isomère, de formule 3-(4'-bromobiphenyl-4-yl)-l- a laevorotatory enantiomer of the configuration stereoisomer of difethialone, called a ho-mono-isomer, of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -l-
(4-hydroxythiocoumarin-3-yl)-l,2,3,4-tétrahydronaphtalène, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène sont de même configuration absolue ; (4-hydroxythiocoumarin-3-yl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalene, wherein carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene moiety are of the same absolute configuration;
à l'exclusion d'un mélange racémique d'énantio mères lévogyre et dextrogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. excluding a racemic mixture of enantiomeric levorotatory and dextrorotatory mothers of said homo-stereoisomer of difethialone.
11/ - Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que ledit homo-stéréo-isomère de la diféthialone est majoritairement sous forme d' énantiomère lévogyre. 11 / - Method according to claim 10, characterized in that said homo-stereoisomer of difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer.
12/ - Procédé selon l'une des revendications 10 ou 11, caractérisé en ce que la diféthialone est majoritairement sous forme d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone. 12 / - Method according to one of claims 10 or 11, characterized in that the difethialone is predominantly in the form of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
13/ - Procédé selon l'une des revendications 10 à 12, caractérisé en ce qu'on choisit en combinaison : 13 / - Method according to one of claims 10 to 12, characterized in that chosen in combination:
- l'excipient comestible ; - the edible excipient;
- une proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone par rapport audit homo-stéréo-isomère de la diféthialone ; a proportion of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone relative to said homo-stereoisomer of difethialone;
- une proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo-stéréo-isomère de la diféthialone par rapport à la diféthialone ; a proportion of levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone relative to difethialone;
- une proportion massique de diféthialone par rapport à l'appât rodonticide, et ; - a mass proportion of difethialone compared to the rodenticide bait, and;
- une quantité d'appât disséminé ;
de façon que des rongeurs cibles nuisibles consomment une quantité de diféthialone suffisante pour être létale pour lesdits rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât au cours d'une période unique de 24 heures consécutives. - a quantity of disseminated bait; so that harmful target rodents consume a quantity of difethialone sufficient to be lethal to said harmful target rodents consuming said bait during a single 24-hour period.
14/ - Procédé selon l'une des revendications 10 à 12, caractérisé en ce qu'on choisit en combinaison : 14 / - Method according to one of claims 10 to 12, characterized in that in combination:
- l'excipient comestible ; - the edible excipient;
- une proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone par rapport audit homo- stéréo-isomère de la diféthialone ; a proportion of laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone relative to said homo-stereoisomer of difethialone;
- une proportion d'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone par rapport à la diféthialone ; a proportion of levorotatory enantiomer of said homo-isomer of difethialone relative to difethialone;
- une proportion massique de diféthialone par rapport à l'appât rodonticide, et ; - a mass proportion of difethialone compared to the rodenticide bait, and;
- une quantité d'appât disséminé ; - a quantity of disseminated bait;
de façon que des rongeurs cibles nuisibles consomment une quantité de diféthialone ; so that harmful target rodents consume a quantity of difethialone;
o non létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant une période de 24 heures consécutives, et ; o non-lethal for harmful target rodents consuming said bait for a period of 24 consecutive hours, and;
o suffisante pour être létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant plusieurs périodes de 24 heures, lesdites périodes étant consécutives. o sufficient to be lethal to harmful target rodents consuming said bait for several 24-hour periods, said periods being consecutive.
15/ - Procédé chromatographique d'obtention d'un énantiomère lévogyre d'un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, dit homo- stéréo-isomère, de formule 3-(4'-bromobiphenyl-4-yl)-l-(4- hydroxythiocoumarin-3-yl)-l,2,3,4-tétrahydronaphtalène, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène dudit homo-stéréo- isomère sont de même configuration absolue, procédé dans lequel : 15 / - Chromatographic process for obtaining a levorotatory enantiomer of a configuration stereoisomer of difethialone, said homo-isomer, of formula 3- (4'-bromobiphenyl-4-yl) -1- ( 4-hydroxythiocoumarin-3-yl) -1,2,3,4-tetrahydronaphthalene, in which the carbons 1 and 3 of the 1,2,3,4-tetrahydronaphthalene group of said homo-isomer are of the same absolute configuration, in which :
- on choisit une colonne pour chromatographie liquide à haute pression de dimensions 150 x 2 mm, et comprenant une phase stationnaire chirale constituée de particules de cellulose tris(4-méthylbenzoate), lesdites particules
étant d'une taille moyenne de 3 μπι et présentant une taille moyenne de pores de 1000 À ; a column for high pressure liquid chromatography of dimensions 150 × 2 mm, and comprising a chiral stationary phase consisting of tris (4-methylbenzoate) cellulose particles, said particles being of average size of 3 μπι and having an average pore size of 1000 Å;
- on choisit, à titre de phase mobile liquide, un mélange formé d'acétonitrile (A) et d'eau comprenant 0,1% en volume d'acide formique (B), avec un rapport volumique A/B de 80/20 et avec un débit de la phase mobile liquide dans la colonne de chromatographie de 0,25 mL/min ; a mixture of acetonitrile (A) and water comprising 0.1% by volume of formic acid (B) is chosen as liquid mobile phase, with an A / B volume ratio of 80/20; and with a flow rate of the liquid mobile phase in the chromatography column of 0.25 mL / min;
- on réalise une séparation des stéréo-isomères de configuration de la diféthialone à température ambiante lors de laquelle ; a separation of the configuration stereoisomers of the difethialone at room temperature during which;
- on introduit en tête de la colonne pour chromatographie une composition liquide comprenant dudit énantiomère lévogyre dudit ho mo- stéréo-isomère de la diféthialone, puis ; a liquid composition comprising said laevorotatory enantiomer of said ho-mono-isomer of difethialone is introduced at the top of the chromatography column, then;
- on entraîne la composition liquide avec la phase mobile dans la colonne pour chromatographie dans des conditions propres à séparer les stéréo-isomères de configuration de la diféthialone, et ; the liquid composition is entrained with the mobile phase in the column for chromatography under conditions suitable for separating the configuration stereoisomers from the difethialone, and;
- on collecte une fraction de la phase mobile comprenant ledit énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone avec un temps de rétention ti de valeur telle que ti < t2 < t3 < t4 ; t2, t3 et t4 représentant les temps de rétention de chacun des stéréo-isomères de configuration de la diféthialone distincts de l'énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone, séparément d'un énantiomère dextrogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone de temps de rétention t et séparément des énantiomères lévogyre et dextrogyre d'un stéréo-isomère de configuration de la diféthialone, dit hétéro- stéréo-isomère, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphtalène dudit hétéro- stéréo-isomère sont de configurations absolues distinctes, et de temps de rétention t2 et t3, puis ; collecting a fraction of the mobile phase comprising said laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone with a retention time ti of value such that ti <t 2 <t 3 <t 4 ; t 2 , t 3 and t 4 represent the retention times of each of the configuration stereoisomers of the difethialone distinct from the levorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of the difethialone, separately from a dextrorotatory enantiomer of said homo-stereo difethialone isomer of retention time t and separately from the levorotatory and dextrorotatory enantiomers of a difethialone configuration stereoisomer, called a hetero-stereoisomer, in which the group 1 and 3 carbons 1,2,3 , 4-tetrahydronaphthalene of said hetero-stereoisomer are of distinct absolute configurations, and retention time t 2 and t 3 , then;
- on élimine la phase mobile liquide de ladite fraction de façon à obtenir ledit énantiomère lévogyre dudit homo- stéréo-isomère de la diféthialone.
the liquid mobile phase of said fraction is removed so as to obtain said laevorotatory enantiomer of said homo-stereoisomer of difethialone.
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