EP2627752A1 - Produit et procede d'elimination des biofilms - Google Patents

Produit et procede d'elimination des biofilms

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Publication number
EP2627752A1
EP2627752A1 EP10765641.5A EP10765641A EP2627752A1 EP 2627752 A1 EP2627752 A1 EP 2627752A1 EP 10765641 A EP10765641 A EP 10765641A EP 2627752 A1 EP2627752 A1 EP 2627752A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
solution
composition
component
composition according
proportion
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
EP10765641.5A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Gauthier Boels
Gordon Blackman
Sébastien FASTREZ
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Realco SA
Original Assignee
Realco SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Realco SA filed Critical Realco SA
Publication of EP2627752A1 publication Critical patent/EP2627752A1/fr
Withdrawn legal-status Critical Current

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Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38618—Protease or amylase in liquid compositions only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D1/00—Detergent compositions based essentially on surface-active compounds; Use of these compounds as a detergent
    • C11D1/66—Non-ionic compounds
    • C11D1/662—Carbohydrates or derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38654—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase containing oxidase or reductase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/48—Medical, disinfecting agents, disinfecting, antibacterial, germicidal or antimicrobial compositions

Definitions

  • the invention relates to the field of biofilm removal. More particularly, the invention relates to a composition and a method for removing biofilms.
  • Hygiene is of increasing importance in the food industry, in hospitals, and particularly in the surgical sphere, in water purification and desalination plants, in the treatment of process water, and in particular in wastewater treatment plants.
  • microorganisms circulating freely in the water can adhere to the surface.
  • These microorganisms can then develop an adhesive extracellular matrix composed of polymeric substances.
  • a community of microorganisms adhered to a surface and encompassed in such a matrix is called a biofilm. Generally these biofilms are composed of bacteria.
  • this matrix is very resistant, and may constitute a barrier for agents that act against microorganisms.
  • Conventional treatments based on soda and / or with different biocides do not act sufficiently effectively because they do not penetrate the entire thickness of the biofilm or are inhibited by certain molecules making up this matrix. The treatment is then only partially effective on the upper surface of the biofilm. In addition, the latter can also trap other microorganisms, including pathogens, than the one that was initially installed.
  • a process for the enzymatic treatment of a biological film is known from WO98 / 26807.
  • the biofilm with a cleaning composition comprising one or more hydrolases for removing or releasing the biofilm layer from the surface.
  • the biofilm is brought into contact with a bactericidal disinfecting composition to destroy the bacterial cells present in the film.
  • a bactericidal disinfecting composition to destroy the bacterial cells present in the film.
  • the simultaneous use of these two compositions is at the origin of a degree of inactivation of certain enzymes in the final mixture. The speed and effectiveness of the cleaning can therefore be improved by using a composition in which the inactivation of the enzymes is absent.
  • the thickening agent is an agent for modifying the viscosity and the thixotropy of the solution used in order to allow better adhesion of the solution and / or the foam on the surfaces to be treated of the tanks.
  • These solutions are not suitable for cleaning different plants of tanks or tanks (including for example many tubings) and are not suitable for the removal of other types of microorganisms. and therefore not for a wide range of biofilms.
  • WO 92/13807 discloses the use of a composition for the removal of biomass and biofilm from substrates in aqueous systems, i.e. in which water is circulated or stored. This type of system suffers from the presence of alkaline or acidic biomass and biofilms due to the type of organism generally present in this type of installation.
  • the document WO 92/13807 provides for the use of polysaccharidases and / or proteases and anionic surfactants such as SDS or DBS (respectively sodium dodecyl sulphate and dodecylbenzene sulphonic acid) for the elimination of biomass and biofilms.
  • anionic surfactants such as SDS or DBS (respectively sodium dodecyl sulphate and dodecylbenzene sulphonic acid) for the elimination of biomass and biofilms.
  • compositions are always targeted for a targeted type of biofilm or microorganism and / or for a particular application.
  • the present invention provides a composition for the removal of biofilms present on a substrate characterized in that it comprises:
  • At least one detergent component comprising a sequestering agent and a simultaneously wetting and dispersing agent, at least one enzymatic component containing at least one protease, at least one laccase and at least one polysaccharidase.
  • composition comprising a detergent component and an enzymatic component containing at least one protease, at least one laccase and at least one polysaccharidase makes it possible, surprisingly, to significantly improve the speed and the effectiveness of the elimination of a biofilm while being able to attack various types of biofilms.
  • This composition makes it possible to eliminate all or almost all of the biofilm and can act on even mature biofilms or having an earlier development cycle and developed by multiple species or different microorganisms.
  • the present invention makes it possible to provide a perfectly polyvalent detergent composition that makes it possible to eliminate a wide spectrum of biofilms, in various types of installation and that does not require any particular precautions to be taken. employment.
  • the detergent removes a superficial portion of the biofilm and wets and swells the organic structures of the biofilm through the dispersancy and wetting of the simultaneously wetting and dispersing agent present in the detergent component. This therefore promotes the accessibility of the enzymatic component which weakens and degrades the matrix of the biofilm.
  • This combined action of the three types of enzyme and detergent component promotes accessibility to the composition of deeper layers and allows optimal detachment of any type of biofilm while preserving the substrate.
  • This type of simultaneously wetting and dispersing agent further reduces the supply of external compounds in the installations during the cleaning step and thus simplifies the validation procedures of the cleaning steps.
  • the composition is an aqueous cleaning solution having a pH of between approximately 8 and 1 1, preferably approximately between 9.5 and 10.5 and more preferably between approximately 9.5. and 10.
  • the pH value of said composition significantly influences its effectiveness vis-à-vis the biofilm.
  • a solution of said composition whose pH is approximately between 8 and 1 1 therefore makes it possible to eliminate surprisingly all or almost all of the biofilm.
  • said composition may be in solid form and then dissolved in a solvent before use to obtain, by dilution in an aqueous phase, a cleaning solution whose pH is approximately between 8 and 11.
  • the composition is a liquid solution which is then diluted in an aqueous phase to obtain an aqueous cleaning solution having a pH of between 6.5 and 7.5, more particularly around 7.
  • the pH of the composition is particularly suitable for the action of the enzymatic component, in particular laccase.
  • said composition can be in solid form and then dissolved in a solvent before use before being diluted in an aqueous phase to obtain a cleaning solution whose pH is between approximately 6.5 and 7.5.
  • said at least one enzymatic component comprises a proportion of protease (s) of between 10 and 50%, a proportion of laccase (s) of between 5 and 35% and a proportion of polysaccharidase (s) of between 5 and 20%. % by weight relative to the weight of the enzymatic component, a conventional excipient or solvent being optionally added to reach 100% by weight of the enzymatic component, for example an alcohol.
  • the enzymatic component may contain between 1 and 10 proteases, preferably between 1 and 5 proteases, more preferably contain 2, 3, 4 or 5 proteases.
  • Nonlimiting examples of protease enzymes belonging to class EC 3.4 and capable of being used in the invention are amino peptidases (EC 3.4.1 1), dipeptidases (EC 3.4.13), dipeptidyl peptidases and tripeptidyl peptidases (EC 3.4.14), peptidyl dipeptidases (EC 3.4.15), serine carboxypeptidases (EC 3.4.16), metallo carboxypeptidases (EC 3.4.17), cysteine carboxypeptidases (EC 3.4.18).
  • omega peptidases EC 3.4.19
  • serine endopeptidases EC 3.4.21
  • cysteine endopeptidases EC 3.4.22
  • aspartic endopeptidases EC 3.4.23
  • metalloendopeptidases EC 3.4.24)
  • threonine endopeptidases (EC 3.4.25), and endopeptidases belonging to class EC 3.4.99.
  • the proteases belong to the class EC 3.4.21.
  • Proteases are available commercially and in various forms including powders, granules, suspensions, liquid solutions.
  • laccases used in the invention belong to the class EC 1 .10.3.2.
  • Laccases are copper-containing enzymes whose function is to oxidize a substrate in the presence of oxygen. More specifically, laccases are oxidoreductases that work with molecular oxygen as an electron acceptor.
  • the at least one polysaccharidase used in the invention is an enzyme whose function is to break bonds within the polysaccharides.
  • the at least one polysaccharidase may be an alpha-amylase, cellulase, hemi-cellulase, glucosidase, beta-glucanase or pectinase.
  • the at least one polysaccharidase may be an alpha-amylase belonging to the class EC 3.2.1.1, whose function is to break (1 -4) -alpha-glycosidic bonds in polysaccharides containing three or more units alpha - (1 -4) -D-glucose.
  • the enzymatic component may comprise a proportion of laccase (s) of approximately 30%, a proportion of protease (s) of approximately 30%, a proportion of alpha-amylase (s) of approximately 10% by weight. relative to the weight of the enzymatic component, a conventional excipient or solvent being optionally added to achieve 100% by weight of the enzymatic component.
  • the proportion of laccase (s) can be approximately 30%, the total proportion of proteases approximately 30%, the proportion of alpha-amylase ( s) of approximately 10% by weight relative to the weight of the enzymatic component, a conventional excipient or solvent being optionally added to reach 100% by weight of the enzymatic component.
  • the proportion of laccase may be 30%, the total proportion of proteases 30%, the proportion of alpha-amylase 10% by weight relative to the weight of the enzymatic component, a conventional excipient or solvent being optionally added to reach 100% by weight of the enzymatic component.
  • the ratio between each protease may be between 1: 2 and 2: 1, preferably the ratio between each protease may be 1: 1.
  • the enzymes present in the enzymatic component have a complementary action on the biofilm.
  • laccase is highly effective on soils not attacked by alpha-amylase or proteases.
  • the enzymatic component may be a solution or in solid form.
  • the enzymatic component is a solution whose pH may be between 8 and 10.
  • the enzymatic component is an aqueous solution whose pH may be between 8.5 and 9.5; more preferably the pH may be approximately 9.0.
  • the enzymatic component may be in solid form such as, for example, in the form of a lyophilizate, powders, granules or in any other form permitting the solubilization of said component in a solvent, then it will be subsequently dissolved in a solvent.
  • the solvent may be water or an aqueous, acidic, alcoholic, basic, buffered or neutral solution.
  • the solubilized enzymatic component can then in this case be further diluted in an aqueous solution optionally containing one or more compounds such as for example detergents to form the cleaning solution.
  • said at least one detergent component comprises a proportion of sequestering agent of between 1 and 10% by weight relative to the total weight of the detergent component, which represents an optimum between efficiency, stability and cost.
  • the sequestering agent is a chemical substance having the ability to form complexes with mineral ions which it fixes in a form preventing their precipitation by the usual reactions.
  • the sequestering agent may be ethylene-diamine tetraacetic acid, glucono-delta-lactone, sodium gluconate, potassium gluconate, calcium gluconate, citric acid, phosphoric acid, tartaric acid, sodium acetate, sorbitol, a compound having a phosphorus atom.
  • the sequestering agent may be a phosphorus oxide such as a phosphonate, a phosphinate or a phosphate or a mixture thereof, or a salt thereof, a amine or an amine oxide carrying at least, in its structure, a functional group phosphine, phosphine oxide, phophinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate or phosphate, alone or in combination, or a salt thereof.
  • a phosphorus oxide such as a phosphonate, a phosphinate or a phosphate or a mixture thereof, or a salt thereof
  • a amine or an amine oxide carrying at least, in its structure, a functional group phosphine, phosphine oxide, phophinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate or phosphate, alone or in combination, or a salt thereof.
  • the sequestering agent may be a phosphonate or a salt thereof, an amine or an amine oxide having at least, in its structure, a functional group phosphine, phosphine oxide, phosphinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate or phosphate, alone or in combination or a salt thereof.
  • the amine or the amine oxide may comprise one, two or three substituents of general formula CR 4 R 5 W in which R 4 and R 5 independently represent one of the other a hydrogen, alkyl, substituted alkyl, substituted or unsubstituted alkylamino, substituted or unsubstituted aminoalkyl, aryl or substituted aryl group, and W represents a phosphonate, phosphinate or phosphate group.
  • the sequestering agent may be in the form of a salt of sodium, calcium, lithium, magnesium or potassium; preferably, the sequestering agent may be in the form of a salt of sodium, calcium, or potassium.
  • the proportion of agent simultaneously wetting and dispersing between 15 and 50% by weight relative to the total weight of the detergent component, preferably from 20 to 30%, which represents a compromise between efficiency, stability and price.
  • a simultaneously wetting and dispersing agent is an amphiphilic chemical substance which modifies the surface tension between two surfaces which has the advantage of promoting the spread of a liquid on a solid (anionic, cationic, nonionic or zwitterionic) while having a dispersing nature, that is to say having the ability to improve the separating the particles from a suspension to prevent agglutination, aggregation and / or settling.
  • said simultaneously wetting and dispersing agent is chosen from the group consisting of non-hot foaming wetting agents and preferably comprises a C 6 to C 12, preferably C 8 , alkylglucoside derived from renewable raw materials and optionally an ethoxylated alcohol.
  • the wetting and dispersing agent is preferably a preparation comprising an ethoxylated alcohol and an alkylpolyglucoside (in particular an octyl glucoside) derived from renewable raw materials.
  • this simultaneously wetting and dispersing agent allows particularly high surfactant and emulsifying performance without destabilizing the enzymes present in the composition according to the invention since this simultaneously wetting and dispersing agent is an anionic agent which has a low overall net charge. so as not to interfere with the ion exchange between the enzymes and substrates of the latter.
  • Simultaneously wetting and dispersing agents derived from renewable raw materials are particularly suitable and act synergistically with the enzymes by not destabilizing them compared to current surfactants of petroleum origin (longer carbon chain).
  • the simultaneously wetting and dispersing agent may be anionic, cationic or nonionic, but in any case it will have a low overall ionic charge to be compatible and not destabilize the enzymes.
  • the simultaneously wetting and dispersing agent according to the invention comprising an ethoxylated alcohol and an alkylpolyglucoside is particularly versatile in that it is compatible with a wide pH range, with the presence of many acids or bases and builders, while being non-foaming hot.
  • the simultaneously wetting and dispersing agent is a wetting agent, not hot foaming allows versatile use, whether in tanks and surfaces or in facilities with many pipes and tubes, thereby avoiding the formation of without altering, on the contrary, the surfactant and / or emulsifying performance of the composition according to the invention.
  • the presence of a simultaneously dispersing and wetting agent limits the supply of polymeric substance in the installations, for example, in circulation or water treatment installations. It is understood that the provision of an effective detergent solution without foam generation limits the rinsing steps, which is particularly desirable, especially in multiple pipe or pipe installations.
  • the subject of the invention is also a method for eliminating biofilms present on a substrate, characterized in that it comprises the following steps of:
  • a detergent component comprising a sequestering agent as well as a wetting agent and a dispersing agent and an enzymatic component containing at least one protease, at least one laccase, and at least one polysaccharidase
  • step c) or c ') applying the solution of said composition formed in step c) or c ') on the substrate for a predetermined period of time, in particular between 15 minutes and 4 hours.
  • solution is used to dissolve a solid compound in a liquid phase or to dilute a liquid compound in a liquid phase in which the liquid compound is miscible.
  • steps b) and c), or b ') and c' can be performed simultaneously to form a solution of said composition according to the invention.
  • the method comprises the following steps of:
  • step c) dissolving the enzymatic component in the solution formed in step b) to form the solution of said composition according to the invention, d) applying the solution of said composition formed in step c) on the substrate for a predetermined period of time, preferably between 15 minutes and 4 hours.
  • the pH of the solution of said composition formed in step c) or c ') is between 8 and 1 1, preferably approximately between 9.5 and 10.5 and more preferably between 9.5 and 10. .
  • the pH of the solution formed during step b) is approximately between 1, 0 and 14.0, preferably between approximately 12.0 and 14.0 and more preferably between 12.8 and 13.8.
  • the pH of the solution of said composition formed in step c) or c ') is between 6.5 and 7.5 and a basic solution is added after said application d) of the solution of said composition on said substrate during said predetermined period of time, so as to effect a pH jump of up to about 8 to 9.
  • the composition according to the invention when the composition according to the invention is applied to the substrate, the prevailing pH is between 6.5 and 7.5, which allows the laccase to be in optimal conditions of activity. Then, making a pH jump of up to about 8 to 9 allows the other enzymes to have their optimal efficiency. In this way, they will in turn have optimal activity conditions, which results in the biofilm being removed in a particularly advantageous manner since each enzyme present will have optimal conditions to perform its action and the biofilm will be detached and eliminated. completely.
  • the basic components are generally used in installations in which a biofilm can be formed, there is no addition of exogenous component that could be problematic to validate the cleaning step. For example, to sanitize an installation, it is common to apply soda and therefore, the supply of substance of different nature is limited in the context of the present invention.
  • the temperature of the solution of the detergent component formed in step b) or c ') may be between approximately 35 ° C and 50 ° C.
  • the composition according to the invention is applied to a substrate covered with a biofilm for approximately 30 to 50 minutes, which represents a relatively short application time for such efficiency.
  • the detergent component comprises a sequestering ratio of between 1 and 10%, a proportion of simultaneously wetting dispersant of between 15 and 50%, a conventional excipient such as water is optionally added to reach the 100% by weight of the component. detergent.
  • the enzymatic component comprises a proportion of protease (s) of between 10 and 50%, a proportion of laccase (s) of between 5 and 35% and a proportion of polysaccharidase (s) of between 5 and 20%. More preferably, the at least one polysaccharidase may be an alpha-amylase.
  • a conventional excipient or solvent is optionally added to achieve 100% by weight of the enzymatic component, such as an alcohol.
  • the present method effectively eliminates all or almost all of the biofilm, leaving then on the substrate only isolated cells without protection of the matrix.
  • the posterior action of a biocide destroys the microbial strain.
  • a subsequent disinfection phase will therefore be much more effective following the application of a solution of the composition according to the invention than following the application of a conventional cleaning phase does not allow this total elimination of the matrix.
  • the method further comprises a subsequent step of applying a biocide.
  • the biocides may be, without limitation, of the oxidizing type such as peracetic acid, hydrogen peroxide, potassium monopersulfate, sodium hypochlorite.
  • the application of a biocide must be subsequent to the application of the composition according to the invention to avoid the deactivation of the enzymes present in said composition by the biocides.
  • the invention also relates to a use of a composition according to the invention for the removal of biofilms present on a substrate, in particular for cleaning floors and surfaces, for cleaning in place or soaking.
  • the composition can be used in closed or soaking facilities. Soaking cleaning is used in particular to clean surgical equipment, contact lenses.
  • the composition according to the invention can be used for the cleaning of technical and process water circuits, air conditioning exchanger systems or in the food industry.
  • At least one sample of detergent component in solution or in solid form containing a sequestering agent, a simultaneously wetting and dispersing agent, and
  • the at least one polysaccharidase may be an alpha-amylase.
  • the sample of the enzymatic component may contain between 1 and 10 proteases, preferably between 1 and 5 proteases, more preferably may contain 2, 3, 4 or 5 proteases.
  • the sample of the enzymatic component contained in the kit may comprise 2 proteases.
  • the proportion in laccase can be approximately 30%
  • the total proportion of proteases may be approximately 30%
  • the proportion of alpha-amylase may be approximately 10% by weight relative to the total weight of the sample of the enzymatic component, a conventional excipient or sovlant being added to reach 100% by weight of the enzymatic component.
  • the proportion of laccase (s) may be 30%, the total proportion of proteases may be 30%, the proportion of alpha-amylase (s) may be 10%. %.
  • the ratio between each protease can be between 1: 2 and 2: 1, preferably the ratio between each protease can be 1: 1.
  • the pH thereof may be between 8 and 10, preferably the pH may be between 8.5 and 9.5, more preferably the pH may be to be approximately 9.0.
  • the sample of the detergent component comprises a sequestering ratio of approximately between 1 and 10%, a proportion of simultaneously wetting and dispersing agent of 15 to 50% by weight relative to the total weight of the detergent component, the 100% being possibly reached using a conventional excipient, such as water.
  • the sequestering agent may be ethylene diamine tetraacetic acid, glucono-delta-lactone, sodium gluconate, potassium gluconate, calcium gluconate, citric acid, phosphoric acid, tartaric acid, sodium acetate, sorbitol, a compound having a phosphorus atom.
  • the sequestering agent may be a phosphorus oxide such as phosphonate, phosphinate or phosphate, or a salt thereof, an amine or an amine oxide, or a salt thereof bearing at least, in its structure, a functional group phosphine, phosphine oxide, phophinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate or phosphate.
  • a phosphorus oxide such as phosphonate, phosphinate or phosphate, or a salt thereof, an amine or an amine oxide, or a salt thereof bearing at least, in its structure, a functional group phosphine, phosphine oxide, phophinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate or phosphate.
  • the sequestering agent may be a phosphonate or a salt thereof, an amine or an amine oxide, or a salt thereof, comprising at least, in its structure, a functional group phosphine, oxide phosphine, phosphinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate or phosphate.
  • the amine or the amine oxide may comprise one, two or three substituents of general formula CR 4 R 5 W in which R 4 and R 5 are independently selected from the group hydrogen, alkyl, substituted alkyl, substituted or unsubstituted alkylamino, substituted or unsubstituted aminoalkyl, aryl or substituted aryl, and W is selected from the phosphonate, phosphinate or phosphate group.
  • the sequestering agent may be in the form of a salt of sodium, calcium, lithium, magnesium or potassium; preferably, the sequestering agent may be in the form of a salt of sodium, calcium, or potassium.
  • said simultaneously wetting and dispersing agent is selected from the group consisting of non-hot foaming wetting agents and preferably comprises an alkylglucoside C 6 to C, preferably C 8 , derived from renewable raw materials and optionally an ethoxylated alcohol.
  • the wetting and dispersing agent is preferably a preparation comprising an ethoxylated alcohol and an alkylpolyglucoside (in particular an octyl glucoside) derived from renewable raw materials.
  • this simultaneously wetting and dispersing agent allows particularly high surfactant and emulsifying performance without destabilizing the enzymes present in the composition according to the invention since this simultaneously wetting and dispersing agent is an anionic agent which has a low overall net charge. so as not to interfere with the ion exchange between the enzymes and substrates of the latter.
  • Simultaneously wetting and dispersing agents derived from renewable raw materials are particularly suitable and act synergistically with the enzymes by not destabilizing them compared to current surfactants of petroleum origin (longer carbon chain).
  • the simultaneously wetting and dispersing agent may be anionic, cationic or nonionic, but in any case it will have a low overall ionic charge to be compatible and not destabilize the enzymes.
  • the simultaneously wetting and dispersing agent according to the invention comprising an ethoxylated alcohol and an alkylpolyglucoside is particularly polyvalent in that it is compatible with a wide pH range, with the presence of numerous acids or bases and builders, while being non-foaming hot.
  • the sample of the enzymatic component is an aqueous solution whose pH is between 8 and 10.
  • the pH thereof is between 8.5 and 14.0.
  • the cleaning solution formed by dilution in an aqueous phase of the detergent component and the enzymatic component should have a pH between 6.5 and 7.5
  • the detergent component if in the form of a solution, will have a pH between 9 and 10.
  • the dissolution in the aqueous phase of the two compounds by For example, the presence of buffers in one or the other component or the dilution effect will have the effect of reducing the pH of the cleaning solution so that it is optimal for the operation of laccases.
  • the detergent component if it is in the form of a solution will have a pH preferably between 12.0 and 14.0, more preferably between 12.8 and 13.8. Dissolving the two compounds in the aqueous phase will bring the pH of the cleaning solution to about 9.5 to 10.5.
  • the components may further contain alkaline compounds for this purpose.
  • the kit according to the invention further comprises a biocide.
  • FIG. 1 illustrates the results of tests comparing the effectiveness of the composition according to the invention with sodium hydroxide
  • FIG. 2 illustrates the results of tests comparing the effectiveness of the composition according to the invention with other detergent compositions
  • FIG. 3 illustrates the results of tests comparing the effectiveness of the composition according to the invention with other detergent compositions by carrying out a pH jump.
  • Biofilms are developed on reverse osmosis membranes used in desalination plants.
  • a bacterial inoculum (Pseudomonas aeruginosa) is prepared by culture for 16 hours in a 10% TSB (tryptone soy broth) medium. This preculture is diluted to obtain an optical density (OD) of 0.05 to 600 nm and 500 ⁇ of this solution were spread on each membrane.
  • the coupons are incubated for 48 hours in petri dishes kept moist and placed in an oven at 30 ° C. After 2 hours, the bacterial solution is replaced by 500 ⁇ l of fresh medium, TSB 10%. After 24 hours, this culture medium is renewed.
  • the coupons are then cleaned and placed in the cleaning solutions.
  • the membranes are allowed to soak in the above cleaning solutions for a total of 120 minutes at 200 rpm at 35 ° C.
  • FIG. 1 illustrates, from left to right, the membrane after treatment with water, Liquid NaOH and the composition according to the invention at pH 7.
  • composition according to the invention allows a substantial elimination of the biofilm.
  • Example 2 An experiment comparing the effectiveness of the composition according to the invention with other detergent compositions was carried out. The procedure is identical to that of Example 1 with the exception of the cleaning solutions which are as follows:
  • composition containing 3 different agents namely a sequestering agent, a wetting agent, and a dispersing agent and an enzymatic component containing at least one laccase, a protease and a polysaccharidase.
  • composition containing two different agents namely a sequestering agent and a simultaneously wetting and dispersing agent and an enzymatic component similar to point 1 at pH 7
  • composition containing two different agents namely a sequestering agent and a simultaneously wetting and dispersing agent and an enzymatic component similar to item 1 at pH 10.
  • composition according to the invention at pH 7 or 10 allows substantial removal of the biofilm.
  • Biofilms are developed on stainless steel coupons previously washed and sterilized.
  • a bacterial inoculum (Pseudomonas aeruginosa) is prepared by culturing for 16 hours in 10% TSB (tryptone soy broth) medium. This preculture is diluted to obtain an optical density (OD) of 0.05 to 600 nm and 500 ⁇ of this solution were spread on each coupon.
  • the coupons are incubated for 48 hours in petri dishes kept moist and placed in an oven at 30 ° C. After 2 hours, the bacterial solution is replaced by 500 ⁇ l of fresh medium, TSB 10%. After 24 hours, this culture medium is renewed.
  • test tubes containing 10 ml of a TSB + 0.5% Tween 80 solution for counting the bacteria.
  • the test tubes were incubated for 5 minutes on the table before being sonicated for 2 minutes and vortexed for 30 seconds. The incubation, sonication and vortex steps were repeated.
  • the coupons were then recovered and the medium comprising the TSB solution + 0.5% tween was subjected to serial dilutions using peptone water (peptone water without indole: prepare 10 ml of a solution at 15g / l, then dilute 1 ml of this solution in 1 liter of sterile water) and was then spread on a petri dish and incubated at 30 ° C overnight prior to counting.
  • peptone water without indole prepare 10 ml of a solution at 15g / l, then dilute 1 ml of this solution in 1 liter of sterile water
  • the biofilm was also stained as follows: the coupons were drained and immersed in the staining solution for 10 minutes selective for the biofilm matrix proteins. Then, the coupons are immersed in the various cleaning solutions 1 and 2 mentioned below for two times 10 minutes (the cleaning solutions are replaced between the two cleaning brackets). before drying in the open air.
  • composition containing 3 different agents namely a sequestering agent, a wetting agent, and a dispersing agent and an enzymatic component containing at least one laccase, a protease and a polysaccharidase.
  • composition containing two different agents namely a sequestering agent and a simultaneously wetting and dispersing agent and an enzymatic component similar to point 1 at pH 7 and then at pH 10
  • FIG. 3A illustrates the indicators before cleaning while FIG. B illustrates the steel coupons after cleaning with the solution 1 at different pHs and FIG. C illustrates the steel coupons after cleaning with the composition according to the invention.
  • the coupons after cleaning with the composition according to the invention have a cleaner appearance than those cleaned with the composition No. 1, and not have no bacteria attached to their surfaces while biofilm is detected for 1/3 of the coupons cleaned with the composition No. 1.

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Abstract

Composition pour l'élimination des biofilms présents sur un substrat caractérisée en ce qu'elle comporte au moins un composant détergent comprenant au moins un agent séquestrant et un agent simultanément mouillant et dispersant,et au moins un composant enzymatique contenant au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase, son procédé d'élimination des biofilms et son utilisation.

Description

"PRODUIT ET PROCEDE D'ELIMINATION DES BIOFILMS"
L'invention se rapporte au domaine de l'élimination des biofilms. Plus particulièrement, l'invention se rapporte à une composition et un procédé pour éliminer des biofilms.
L'hygiène prend une importance croissante dans l'industrie alimentaire, dans les hôpitaux, et en particulier dans la sphère chirurgicale, dans les installations de potabilisation et de désalinisation d'eau, dans le traitement des eaux de procédé, et en particulier dans les eaux utilisées dans les tours de refroidissement et dans les nécessités de la vie courante, par exemple les lentilles de contact. On observe fréquemment que, lors de la circulation d'eau sur un support, des microorganismes circulant librement dans l'eau peuvent adhérer à la surface. Ces microorganismes peuvent alors développer une matrice extracellulaire adhésive composée de substances polymères. Une communauté de microorganismes adhérés à une surface et englobée dans une telle matrice est appelée un biofilm. Généralement ces biofilms sont composés de bactéries.
On observe malheureusement que cette matrice est très résistante, et peut constituer une barrière pour des agents qui agiraient contre les microorganismes. Les traitements classiques à base de soude et/ou comportant différents biocides n'agissent pas de manière suffisamment efficace car ils ne pénètrent pas le biofilm sur toute son épaisseur ou sont inhibés par certaines molécules composant cette matrice. Le traitement n'est alors que partiellement efficace sur la surface supérieure du biofilm. En outre, ce dernier peut également piéger d'autres microorganismes, pathogènes notamment, que celui qui s'est installé initialement.
On connaît par WO98/26807 un procédé de traitement enzymatique d'un film biologique. Dans ce procédé, on met en contact le biofilm avec une composition de nettoyage comportant une ou plusieurs hydrolases pour éliminer ou libérer la couche de biofilm de la surface. Dans une seconde étape le biofilm est mis en contact avec une composition désinfectante bactéricide pour détruire les cellules bactériennes présentes dans le film. Cependant, l'utilisation simultanée de ces deux compositions est à l'origine d'un degré d'inactivation de certaines enzymes dans le mélange final. La rapidité et l'efficacité du nettoyage peuvent donc être améliorées en utilisant une composition où l'inactivation des enzymes est absente.
On connaît également du document US2003/0205247 une utilisation de solutions aqueuses contenant des enzymes pour le nettoyage de cuves de stockage ou de fermentation, contenant une ou plusieurs enzymes choisies parmi les suivantes : laccases, peroxydases, oxydoréductases, transférases, isomérases, lyases ou ligases et un agent épaississant avec un amplificateur de mousse. Le domaine d'action des solutions précitées est relativement étroit, propre à la brasserie, puisque les enzymes choisies et illustrées sont particulièrement connues pour être actives sur des polyphénols qui constituent principalement les résidus de fermentation, tannins et analogues. L'agent épaississant est un agent modifiant la viscosité et la thixotropie de la solution utilisée dans le but de permettre une meilleure adhérence de la solution et/ou de la mousse, sur les surfaces à traiter des cuves. Ces solutions ne conviennent pas pour le nettoyage d'installations différentes de cuves ou réservoirs (comprenant par exemple de nombreuses tubulures) et ne conviennent pas pour l'élimination d'autres types de microorganismes. et donc pas pour une large gamme de biofilms.
Le document WO 92/13807 divulgue l'utilisation d'une composition permettant l'élimination de la biomasse et de biofilm sur des substrats dans des systèmes aqueux, c'est-à-dire dans des systèmes dans lesquels de l'eau est mise en circulation ou entreposée. Ce type de système souffre de la présence de biomasse et de biofilms alcalins ou acides dus au type d'organisme généralement présent dans ce type d'installation.
Pour résoudre ce problème, le document WO 92/13807 prévoit l'utilisation de polysaccharidases et/ou de protéases et de tensioactifs anioniques tels que du SDS ou DBS (respectivement du dodécylsulfate de sodium et de l'acide dodécylbenzènesulfonique) pour l'élimination de la biomasse et des biofilms.
Malheureusement, ce type de composition ne sera pas efficace pour une large gamme de biofilms provoqués par divers microorganismes et présentera une efficacité limitée pour l'élimination de biofilms.
Comme on peut le constater de ce qui précède, ces compositions sont toujours ciblées pour un type de biofilm ou un microorganisme ciblé et/ou pour une application particulière.
Il existe donc un besoin pour une composition et un procédé capable d'éliminer des biofilms, qui soient efficaces dans un délai raisonnable, agissent sur une large classe de biofilms produits par une large classe de microorganismes ou de groupes de microorganismes, qui ne soient pas nuisibles pour le support du biofilm, et agissent tant pour prévenir le développement de biofilms que sur des biofilms constitués depuis longtemps, et ayant atteint un stade de cohésion et de résistance important.
Pour résoudre ce problème, la présente invention procure une composition pour l'élimination des biofilms présents sur un substrat caractérisée en ce qu'elle comprend :
au moins un composant détergent comprenant un agent séquestrant ainsi qu'un agent simultanément mouillant et dispersant, au moins un composant enzymatique contenant au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
La constitution d'une composition comprenant un composant détergent et un composant enzymatique contenant au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase permet, de manière surprenante, d'améliorer significativement la rapidité et l'efficacité de l'élimination d'un biofilm tout en pouvant attaquer divers types de biofilms. Cette composition permet d'éliminer la totalité ou la quasi-totalité du biofilm et peut agir sur des biofilms même matures ou ayant un cycle de développement plus précoce et développés par de multiples espèces ou microorganismes différents.
A ce jour, il faut savoir qu'aucune composition efficace ne permet d'assurer l'élimination complète des biofilms présents dans les installations. Par exemple, dans le domaine de l'industrie alimentaire, les biofilms se forment de manière inévitable (au vu de la richesse du milieu environnant). Les biofilms présentent une activité de croissance cyclique comprenant une phase de croissance durant laquelle se produit l'accumulation des microorganismes et une phase de détachement durant laquelle des morceaux entiers de biofilms se détachent par érosion et sous l'effet de leur propre poids. Lorsqu'un industriel est confronté à ce phénomène, il devrait en réalité arrêter sa chaîne de production et effectuer différents cycles de lavages alternés à la soude, et avec de nombreux détergents et ou nettoyants chimiques et/ou enzymatiques puisqu'il n'existe pas de composition polyvalente. Or ceci représente de nombreuses heures de travail et de perte de rendement de l'installation.
Par conséquent, en pratique, la production n'est pas arrêtée et lorsque le biofilm est en phase de rupture, les lots produits sont contaminés et écartés jusqu'à ce que le niveau de contamination par les microorganismes des aliments produits soient à nouveau acceptable au vu des normes en vigueur. En outre, il n'est pas envisageable pour les industriels d'avoir en stock une solution détergente ou enzymatique particulière pour chaque microorganisme susceptible de contaminer sa chaîne de production.
C'est donc de manière très surprenante que la présente invention permet la mise à disposition d'une composition détergente parfaitement polyvalente qui permet d'éliminer un large spectre de biofilms, dans divers types d'installation et ne nécessitant pas de précaution particulières d'emploi. Le détergent élimine une partie superficielle du biofilm et mouille et gonfle les structures organiques du biofilm grâce au caractère dispersant et au caractère mouillant de l'agent simultanément mouillant et dispersant présent dans le composant détergent. Ceci favorise donc l'accessibilité du composant enzymatique qui fragilise et dégrade la matrice du biofilm. Cette action combinée des trois types d'enzyme et du composant détergent favorise l'accessibilité à la composition des couches plus profondes et permet un détachement optimal de tout type de biofilm tout en préservant le substrat.
Ce type d'agent simultanément mouillant et dispersant réduit en outre l'apport de composés extérieurs dans les installations lors de l'étape de nettoyage et simplifie donc les procédures de validation des étapes de nettoyage.
Dans un forme de réalisation particulière selon l'invention, la composition est une solution de nettoyage aqueuse présentant un pH compris entre approximativement 8 et 1 1 , préférentiellement compris approximativement entre 9,5 et 10,5 et plus préférentiellement compris approximativement entre 9,5 et 10. La valeur du pH de ladite composition influence de manière importante son efficacité vis-à-vis du biofilm. Une solution de ladite composition dont le pH est compris approximativement entre 8 et 1 1 permet donc d'éliminer de manière surprenante la totalité ou la quasi-totalité du biofilm.
Alternativement, ladite composition peut être sous forme solide puis être dissoute dans un solvant avant utilisation afin d'obtenir par dilution dans une phase aqueuse, une solution de nettoyage dont le pH est compris approximativement entre 8 et 1 1 .
Dans une variante avantageuse selon l'invention, la composition est une solution liquide qui être ensuite diluée dans une phase aqueuse pour obtenir une solution de nettoyage aqueuse présentant un pH compris entre 6,5 et 7,5, plus particulièrement autour de 7. De cette façon, le pH de la composition est particulièrement approprié à l'action du composant enzymatique, en particulier de la laccase. En outre, il est prévu selon l'invention d'augmenter le pH dans une phase ultérieure d'application de la composition selon l'invention de manière à obtenir un pH alcalin particulièrement approprié à l'élimination du biofilm comme mentionné ci-dessus tout en gardant l'optimum d'efficacité du composant enzymatique.
Alternativement, ladite composition peut être sous forme solide puis être dissoute dans un solvant avant utilisation avant d'être diluée dans une phase aqueuse afin d'obtenir une solution de nettoyage dont le pH est compris approximativement entre 6,5 et 7,5.
De préférence, ledit au moins un composant enzymatique comprend une proportion en protéase(s) comprise entre 10 et 50%, une proportion en laccase(s) comprise entre 5 et 35% et une proportion de polysaccharidase(s) comprise entre 5 et 20% en poids par rapport au poids du composant enzymatique, un excipient ou solvant conventionnel étant éventuellement ajouté pour atteindre 100% en poids du composant enzymatique, par exemple un alcool.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, le composant enzymatique peut contenir entre 1 et 10 protéases, préférentiellement entre 1 et 5 protéases, plus préférentiellement peut contenir 2, 3, 4 ou 5 protéases.
Des exemples non limitatifs d'enzymes protéases appartenant à la classe EC 3.4 et susceptibles d'être utilisées dans l'invention sont les amino-peptidases (EC 3.4.1 1 ), les dipeptidases (EC 3.4.13), les dipeptidyl-peptidases et tripeptidyl-peptidases (EC 3.4.14), les peptidyl-dipeptidases (EC 3.4.15), les sérine carboxypeptidases (EC 3.4.16), les métallo carboxypeptidases (EC 3.4.17), les cystéine carboxypeptidases (EC 3.4.18), les oméga peptidases (EC 3.4.19), les sérine endopeptidases (EC 3.4.21 ), les cystéine endopeptidases (EC 3.4.22), les aspartique endopeptidases (EC 3.4.23), les métallo endopeptidases (EC 3.4.24), les thréonine endopeptidases ((EC 3.4.25), et les endopeptidases appartenant à la classe EC 3.4.99.
Préférentiellement, les protéases appartiennent à la classe EC 3.4.21 . Les protéases sont disponibles commercialement et sous différentes formes incluant les poudres, les granulés, les suspensions, les solutions liquides.
Les laccases utilisées dans l'invention appartiennent à la classe EC 1 .10.3.2. Les laccases sont des enzymes contenant du cuivre et ont pour fonction d'oxyder un substrat en présence d'oxygène. Plus spécifiquement, les laccases sont des oxydoréductases qui fonctionnent avec l'oxygène moléculaire comme accepteur d'électrons.
La au moins une polysaccharidase utilisée dans l'invention est une enzyme ayant pour fonction de briser des liaisons au sein des polysaccharides. Préférentiellement, la au moins une polysaccharidase peut être une alpha-amylase, cellulase, hemi-cellulase, glucosidase, beta-glucanase ou pectinase.
Plus préférentiellement, la au moins une polysaccharidase peut être une alpha-amylase appartenant à la classe EC 3.2.1 .1 , ayant pour fonction de briser des liens (1 -4)-alpha-glycosidiques dans des polysaccharides contenant trois unités ou plus alpha-(1 -4)-D-glucose. Préférentiellement, le composant enzymatique peut comprendre une proportion de laccase(s) d'approximativement de 30%, une proportion de protéase(s) d'approximativement 30%, une proportion en alpha-amylase(s) d'approximativement 10% en poids par rapport au poids du composant enzymatique, un excipient ou un solvant conventionnel étant éventuellement ajouté pour atteindre 100% en poids du composant enzymatique.
Selon un autre mode de réalisation préféré, si le composant enzymatique comprend 2 protéases, la proportion de laccase(s) peut être d'approximativement 30%, la proportion totale de protéases d'approximativement 30%, la proportion d'alpha-amylase(s) d'approximativement 10% en poids par rapport au poids du composant enzymatique, un excipient ou solvant conventionnel étant éventuellement ajouté pour atteindre 100% en poids du composant enzymatique.
Selon un autre mode de réalisation préféré, si le composant enzymatique comprend 2 protéases, la proportion en laccase peut être de 30%, la proportion totale en protéases de 30%, la proportion en alpha-amylase de 10% en poids par rapport au poids du composant enzymatique, un excipient ou solvant conventionnel étant éventuellement ajouté pour atteindre 100% en poids du composant enzymatique.
Par exemple, le rapport entre chaque protéases peut être compris entre 1 :2 et 2:1 , préférentiellement le rapport entre chaque protéases peut être de 1 :1 . Les enzymes présentes dans le composant enzymatique ont une action complémentaire sur le biofilm. Par exemple, la laccase présente une grande efficacité sur les souillures non attaquées par l'alpha-amylase ou les protéases.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, le composant enzymatique peut être une solution ou sous forme solide. Préférentiellement, le composant enzymatique est une solution dont le pH peut être compris entre 8 et 10. Préférentiellement, le composant enzymatique est une solution aqueuse dont le pH peut être compris entre 8,5 et 9,5 ; plus préférentiellement le pH peut être approximativement de 9,0.
Alternativement, le composant enzymatique peut être sous forme solide tel que par exemple sous forme d'un lyophilisât, de poudres, de granulés ou sous tout autre forme permettant la solubilisation dudit composant dans un solvant, puis il sera ultérieurement dissous dans un solvant. Le solvant peut être de l'eau ou une solution aqueuse, acide, alcoolique, basique, tamponnée ou neutre. Le composant enzymatique solubilisé pourra alors dans ce cas être ultérieurement dilué dans une solution aqueuse contenant éventuellement un ou plusieurs composés tels que par exemple des détergents pour former la solution de nettoyage.
Dans une forme de réalisation avantageuse selon l'invention, ledit au moins un composant détergent comprend une proportion d'agent séquestrant comprise entre 1 et 10% en poids par rapport au poids total du composant détergent, ce qui représente un optimum entre efficacité, stabilité et coût.
L'agent séquestrant est une substance chimique ayant la capacité à former des complexes avec des ions minéraux qu'il fixe sous une forme empêchant leur précipitation par les réactions habituelles. A titre d'exemple, l'agent séquestrant peut être l'acide éthylène-diamine- tétraacétique, le glucono-delta-lactone, le gluconate de sodium, le gluconate de potassium, le gluconate de calcium, l'acide citrique, l'acide phosphorique, l'acide tartrique, l'acétate de sodium, le sorbitol, un composé comportant un atome de phosphore. Préférentiellement, l'agent séquestrant peut être un oxyde de phosphore tel qu'un phosphonate, un phosphinate ou un phosphate ou leur mélange, ou un sel de celui-ci, une amine ou un oxyde d'amine portant au moins, dans sa structure, un groupement fonctionnel phosphine, oxyde de phosphine, phophinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate ou phosphate, seul ou en combinaison, ou un sel de ceux-ci.
Plus préférentiel lement l'agent séquestrant peut être un phosphonate ou un sel de celui-ci, une amine ou un oxyde d'amine comportant au moins, dans sa structure, un groupement fonctionnel phosphine, oxyde de phosphine, phosphinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate ou phosphate, seul ou en combinaison ou un sel de ceux-ci. A titre d'exemple non limitatif, le phosphonate peut être de formule générale R1(R2O)(R3O)P=O dans lequel R1, R2 et R3 représentent indépendamment un groupe hydrogène, alkyle, alkyle substitué, alkyle-amino substitué ou non, aminoalkyl substitué ou non, aryle ou aryle substitué. A titre d'exemple non limitatif, l'aminé ou l'oxyde d'amine peuvent comporter un, deux ou trois substituant(s) de formule générale CR4R5W dans laquelle R4 et R5 représentent indépendamment l'un de l'autre un groupe hydrogène, alkyle, alkyle substitué, alkyle- amino substitué ou non, aminoalkyl substitué ou non, aryle ou aryle substitué, et W représente un groupe phosphonate, phosphinate ou phosphate. L'agent séquestrant peut être sous la forme d'un sel de sodium, calcium, lithium, magnésium ou potassium ; préférentiellement, l'agent séquestrant peut être sous la forme d'un sel de sodium, calcium, ou potassium.
Dans une forme de réalisation avantageuse selon l'invention, la proportion d'agent simultanément mouillant et dispersant comprise entre 15 et 50% en poids par rapport au poids total du composant détergent, de préférence de 20 à 30 %, ce qui représente un compromis entre efficacité, stabilité et prix.
Un agent simultanément mouillant et dispersant est une substance chimique amphiphile, qui modifie la tension superficielle entre deux surfaces qui a pour avantage de favoriser l'étalement d'un liquide sur un solide (anionique, cationique, non-ionique ou zwitterionique) tout en présentant un caractère dispersant, c'est-à-dire ayant la capacité d'améliorer la séparation des particules d'une suspension afin de prévenir l'agglutination, l'agrégation et/ou la décantation.
Avantageusement, ledit agent simultanément mouillant et dispersant est choisi dans le groupe constitué des agents mouillants non moussants à chaud et comprend de préférence un alkylglucoside en C6 à do, de préférence en C8, issu de matière premières renouvelables et éventuellement un alcool éthoxylé.
L'agent mouillant et dispersant est de préférence une préparation comportant un alcool éthoxylé et un alkylpolyglucoside (en particulier un octyl glucoside) issu de matières premières renouvelables. Comme on peut le constater, cet agent simultanément mouillant et dispersant permet des performances tensioactives et émulsionnantes particulièrement élevées sans déstabiliser les enzymes présentes dans la composition selon l'invention puisque cet agent simultanément mouillant et dispersant est un agent anionique qui présente une charge globale nette faible de façon à ne pas interférer avec les échanges d'ions entre les enzymes et substrats de ces dernières. Les agents simultanément mouillants et dispersants issus des matières premières renouvelables sont particulièrement appropriés et agissent synergiquement avec les enzymes en ne les déstabilisant pas par rapport aux tensioactifs courant d'origine pétrolière (à plus longue chaîne carbonnée). En outre, selon la présente invention, l'agent simultanément mouillant et dispersant peut être anionique, cationique ou non ionique, mais dans tous les cas, il présentera une charge globale ionique faible pour être compatible et ne pas déstabiliser les enzymes.
De plus, l'agent simultanément mouillant et dispersant selon l'invention comprenant un alcool éthoxylé et un alkylpolyglucoside est particulièrement polyvalent en ce qu'il est compatible avec une large gamme de pH, avec la présence de nombreux acides ou bases et de builders, tout en étant non moussant à chaud.
Le fait que l'agent simultanément mouillant et dispersant soit un agent mouillant, non moussant à chaud permet une utilisation polyvalente, que ce soit dans des cuves et surfaces ou dans les installations comportant de nombreuses tubulures et tuyaux, évitant de cette façon la formation de mousse, sans altérer, bien au contraire les performances tensioactives et/ou émulsionnantes de la composition selon l'invention. En outre, comme on l'a déjà mentionné ci-avant, la présence d'un agent simultanément dispersant et mouillant limite l'apport de substance polymère dans les installations, par exemple, dans les installations de circulation ou traitement d'eau. Il est bien entendu que l'apport d'une solution détergente efficace sans génération de mousse limite les étapes de rinçage, ce qui est particulièrement souhaitable, surtout dans les installations à tubulures ou tuyaux multiples.
D'autres formes de réalisation de la composition selon l'invention sont mentionnées dans les revendications annexées.
L'invention a aussi pour objet un procédé pour l'élimination des biofilms présents sur un substrat caractérisée en ce qu'elle comporte les étapes suivantes de :
- a) mise à disposition d'un composant détergent comprenant un agent séquestrant ainsi qu'un agent mouillant et un agent dispersant et d'un composant enzymatique contenant au moins une protéase, au moins une laccase, et au moins une polysaccharidase,
- b) mise en solution du composant détergent dans une phase aqueuse,
- c) mise en solution du composant enzymatique dans la solution formée à l'étape b) pour former la solution de ladite composition selon l'invention ou b') mise en solution du composant enzymatique dans une phase aqueuse, - c') mise en solution du composant détergent dans la solution formée à l'étape b') pour former la solution de ladite composition selon l'invention
- d) application de la solution de ladite la composition formée à l'étape c) ou c') sur le substrat pendant une période de temps prédéterminées, en particulier comprise entre 15 minutes et 4 heures.
Par les termes mise en solution, on entend au sens de la présente invention soit une mise en solution d'un composé solide dans une phase liquide, soit une dilution d'un composé liquide dans une phase liquide dans lequel le composé liquide est miscible.
Alternativement, les étapes b) et c), ou b') et c'), peuvent être effectuées de manière simultanée pour former une solution de ladite composition selon l'invention.
Préférentiellement, la méthode comporte les étapes suivantes de :
a) mise à disposition d'un composant détergent contenant un agent séquestrant ainsi qu'un agent mouillant et un agent dispersant; et d'un composant enzymatique contenant au moins une protéase, au moins une laccase, et au moins une polysaccharidase,
b) mise en solution du composant détergent dans l'eau,
c) mise en solution du composant enzymatique dans la solution formée à l'étape b) pour former la solution de ladite composition selon l'invention, d) application de la solution de ladite la composition formée à l'étape c) sur le substrat pendant une période de temps prédéterminée, de préférence comprise entre 15 minutes et 4 heures.
Avantageusement, le pH de la solution de ladite composition formée à l'étape c) ou c') est compris entre 8 et 1 1 , préférentiellement compris approximativement entre 9,5 et 10,5 et plus préférentiellement compris entre 9,5 et 10.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, le pH de la solution formée lors de l'étape b) est compris approximativement entre 1 1 ,0 et 14,0, préférentiel lement compris approximativement entre 12,0 et 14,0 et plus préférentiel lement compris entre 12,8 et 13,8.
Dans une variante selon l'invention, le pH de la solution de ladite composition formée à l'étape c) ou c') est compris entre 6,5 et 7,5 et une solution basique est ajoutée après ladite application d) de la solution de ladite composition sur ledit substrat pendant ladite période de temps prédéterminée, de façon à effectuer un saut de pH jusqu'à environ 8 à 9.
De cette façon, lorsque la composition selon l'invention est appliquée sur le substrat, le pH régnant est compris entre 6,5 et 7,5, ce qui permet à la laccase d'être dans des conditions optimales d'activité. Ensuite, le fait d'effectuer un saut de pH jusqu'à environ 8 à 9 permet aux autres enzymes d'avoir à leur tour leur efficacité optimale. De cette façon, elles auront aussi à leur tour des conditions d'activité optimales, ce qui a pour résultat que le biofilm sera éliminé de manière particulièrement avantageuse puisque chaque enzyme présente aura des conditions optimales pour effectuer son action et le biofilm sera détaché et éliminé complètement. En outre, puisque les composants basiques sont généralement utilisés dans les installations dans lesquelles un biofilm peut se former, il n'y a pas d'ajout de composant exogène qui pourrait être problématique pour valider l'étape de nettoyage. Par exemple, pour sanitiser une installation, il est courant d'appliquer de la soude et donc, l'apport de substance de nature différente est limité dans le cadre de la présente invention.
De préférence, la température de la solution du composant détergent formée lors de l'étape b) ou c') peut être comprise entre approximativement 35°C et 50°C.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, la composition selon l'invention est appliquée sur un substrat couvert d'un biofilm pendant approximativement 30 à 50 minutes, ce qui représente un temps d'application relativement court pour une telle efficacité. Préférentiellement, le composant détergent comprend une proportion de séquestrant comprise entre 1 et 10%, une proportion de dispersant simultanément mouillant comprise entre 15 et 50%, un excipient conventionnel comme de l'eau est éventuellement ajouté pour atteindre les 100% en poids du composant détergent.
Préférentiellement, le composant enzymatique comprend une proportion en protéase(s) comprise entre 10 et 50%, une proportion de laccase(s) comprise entre 5 et 35% et une proportion de polysaccharidase(s) comprise entre 5 et 20%. Plus préférentiellement, la au moins une polysaccharidase peut être une alpha-amylase. Un excipient ou solvant conventionnel est éventuellement ajouté pour atteindre 100% en poids du composant enzymatique, comme par exemple un alcool.
La présente méthode permet d'éliminer efficacement la totalité ou la quasi-totalité du biofilm, ne laissant alors sur le substrat que des cellules isolées sans protection de la matrice. L'action postérieure d'un biocide permet de détruire la souche microbienne. Une phase de désinfection ultérieure sera donc beaucoup plus efficace suite à l'application d'une solution de la composition selon l'invention que suite à l'application d'une phase de nettoyage conventionnelle ne permettant pas cette élimination totale de la matrice.
Ainsi, selon un mode de réalisation préféré de l'invention, la méthode comprend en outre une étape ultérieure d'application d'un biocide. Par exemple, les biocides peuvent être, de manière non limitative, de type oxydant tel que l'acide peracétique, le peroxyde d'hydrogène, le monopersulfate de potassium, l'hypochlorite de soude. Selon l'invention, l'application d'un biocide doit être postérieure à l'application de la composition selon l'invention pour éviter la désactivation des enzymes présentes dans ladite composition par les biocides.
D'autres formes de réalisation du procédé selon l'invention sont mentionnées dans les revendications annexées. L'invention se rapporte aussi à une utilisation d'une composition selon l'invention pour l'élimination de biofilms présents sur un substrat, en particulier pour le nettoyage des sols et des surfaces, pour le nettoyage en place ou le trempage. La composition peut s'utiliser dans des installations fermées ou par trempage. Le nettoyage par trempage est notamment utilisé pour nettoyer du matériel chirurgical, les lentilles de contact. La composition selon l'invention peut être utilisée pour le nettoyage de circuit d'eau technique et de process, les systèmes d'échangeurs de conditionnement d'air ou dans l'industrie alimentaire.
D'autres formes d'utilisation selon l'invention sont mentionnées dans les revendications annexées.
La présente invention se rapporte également à une trousse pour l'élimination de biofilms présents sur un substrat caractérisée en ce qu'elle comprend
- au moins un échantillon de composant détergent en solution ou sous forme solide, contenant un agent séquestrant, un agent simultanément mouillant et dispersant, et
- au moins un échantillon de composant enzymatique en solution ou sous forme solide contenant au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
Préférentiellement, la au moins une polysaccharidase peut être une alpha-amylase.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, l'échantillon du composant enzymatique peut contenir entre 1 et 10 protéases, préférentiellement entre 1 et 5 protéases, plus préférentiellement peut contenir 2, 3, 4 ou 5 protéases.
Selon un autre mode de réalisation préféré, l'échantillon du composant enzymatique contenu dans la trousse peut comprendre 2 protéases. Préférentiellement, si l'échantillon du composant enzymatique comprend 2 protéases, la proportion en laccase peut être approximativement de 30%, la proportion totale en protéases peut être approximativement de 30%, la proportion en alpha-amylase peut être approximativement de 10% en poids par rapport au poids total de l'échantillon du composant enzymatique, un excipient ou sovlant conventionnel étant ajouté pour atteindre 100% en poids du composant enzymatique.
Préférentiellement, si l'échantillon du composant enzymatique comprend 2 protéases, la proportion en laccase(s) peut être de 30%, la proportion totale en protéases peut être de 30%, la proportion en alpha-amylase(s) peut être de 10%. Par exemple, le rapport entre chaque protéase peut être compris entre 1 :2 et 2:1 , préférentiellement le rapport entre chaque protéase peut être de 1 :1 .
Si l'échantillon du composant enzymatique contenu dans la trousse est une solution, le pH de celle-ci peut être compris entre 8 et 10, préférentiellement, le pH peut être compris entre 8,5 et 9,5, plus préférentiellement le pH peut être approximativement de 9,0.
Préférentiellement, l'échantillon du composant détergent comprend une proportion de séquestrant comprise approximativement entre 1 et 10%, une proportion d'agent simultanément mouillant et dispersant de 15 à 50% en poids par rapport au poids total du composant détergent, les 100% étant éventuellement atteint à l'aide d'un excipient conventionnel, comme par exemple de l'eau.
A titre d'exemple, l'agent séquestrant peut être l'acide éthylène-diamine-tétraacétique, le glucono-delta-lactone, le gluconate de sodium, le gluconate de potassium, le gluconate de calcium, l'acide citrique, l'acide phosphorique, l'acide tartrique, l'acétate de sodium, le sorbitol, un composé comportant un atome de phosphore. Préférentiellement, l'agent séquestrant peut être un oxyde de phosphore tel que phosphonate, phosphinate ou phosphate, ou un sel de celui-ci, une aminé ou un oxyde d'amine, ou un sel de ceux-ci portant au moins, dans sa structure, un groupement fonctionnel phosphine, oxyde de phosphine, phophinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate ou phosphate.
Plus préférentiellement, l'agent séquestrant peut être un phosphonate ou un sel de celui-ci, une amine ou un oxyde d'amine, ou un sel de ceux-ci, comportant au moins, dans sa structure, un groupement fonctionnel phosphine, oxyde de phosphine, phosphinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate ou phosphate. A titre d'exemple non limitatif, le phosphonate peut être de formule générale R1(R2O)(R3O)P=O dans lequel R1, R2 et R3 sont indépendamment sélectionnés parmi le groupe hydrogène, alkyle, alkyle substitué, alkyle- amino substitué ou non, aminoalkyl substitué ou non, aryle ou aryle substitué. A titre d'exemple non limitatif, l'aminé ou l'oxyde d'amine peuvent comporter un, deux ou trois substituant(s) de formule générale CR4R5W dans laquelle R4 et R5 sont indépendamment sélectionnés parmi le groupe hydrogène, alkyle, alkyle substitué, alkyle-amino substitué ou non, aminoalkyl substitué ou non, aryle ou aryle substitué, et W est sélectionné parmi le groupe phosphonate, phosphinate ou phosphate. L'agent séquestrant peut être sous la forme d'un sel de sodium, calcium, lithium, magnésium ou potassium ; préférentiellement, l'agent séquestrant peut être sous la forme d'un sel de sodium, calcium, ou potassium.
Avantageusement, ledit agent simultanément mouillant et dispersant est choisi dans le groupe constitué des agents mouillants non moussants à chaud et comprend de préférence un alkylglucoside C6 à do, de préférence en C8, issu de matière premières renouvelables et éventuellement un alcool éthoxylé.
L'agent mouillant et dispersant est de préférence une préparation comportant un alcool éthoxylé et un alkylpolyglucoside (en particulier un octyl glucoside) issu de matières premières renouvelables. Comme on peut le constater, cet agent simultanément mouillant et dispersant permet des performances tensioactives et émulsionnantes particulièrement élevées sans déstabiliser les enzymes présentes dans la composition selon l'invention puisque cet agent simultanément mouillant et dispersant est un agent anionique qui présente une charge globale nette faible de façon à ne pas interférer avec les échanges d'ions entre les enzymes et substrats de ces dernières. Les agents simultanément mouillants et dispersants issus des matières premières renouvelables sont particulièrement appropriés et agissent synergiquement avec les enzymes en ne les déstabilisant pas par rapport aux tensioactifs courant d'origine pétrolière (à plus longue chaîne carbonnée). En outre, selon la présente invention, l'agent simultanément mouillant et dispersant peut être anionique, cationique ou non ionique, mais dans tous les cas, il présentera une charge globale ionique faible pour être compatible et ne pas déstabiliser les enzymes.
De plus, l'agent simultanément mouillant et dispersant selon l'invention comprenant un alcool éthoxylé et un alkylpolyglucoside est particulièrement polyvalent en ce qu'il est compatible avec une large gamme de pH, avec la présence de nombreux acides ou bases et de builders, tout en étant non moussant à chaud.
Avantageusement, dans la trousse selon l'invention l'échantillon du composant enzymatique est une solution aqueuse dont le pH est compris entre 8 et 10.
Si l'échantillon du composant détergent est une solution, le pH de celle-ci est compris entre 8,5 et 14,0.
Si la solution de nettoyage formée par dilution dans une phase aqueuse du composant détergent et du composant enzymatique doit avoir un pH entre 6,5 et 7,5, alors le composant détergent, s'il est sous la forme d'une solution présentera un pH compris entre 9 et 10. La mise en solution dans la phase aqueuse des deux composés, par exemple grâce à la présence de tampons dans l'un ou l'autre composant ou à l'effet de dilution aura pour effet de diminuer le pH de la solution de nettoyage pour qu'il soit optimal au fonctionnement des laccases.
Si la solution de nettoyage formée par dilution dans une phase aqueuse du composant détergent et du composant enzymatique doit avoir un pH d'environ 10, alors le composant détergent, s'il est sous la forme d'une solution présentera un pH préférentiellement compris entre 12,0 et 14,0, plus préférentiellement entre 12,8 et 13,8. La mise en solution dans la phase aqueuse des deux composésaura pour effet d'amener le pH de la solution de nettoyage à environ 9,5 à 10,5. Par exemple, les composant peuvent contenir en outre des composés alcalin à cet effet.
De préférence, la trousse selon l'invention comprend en outre un biocide.
D'autres formes de réalisation de la trousse selon l'invention sont mentionnées dans les revendications annexées.
D'autres caractéristiques, détails et avantages de l'invention ressortiront de la description donnée ci-après, à titre non limitatif et en faisant référence aux dessins annexés et aux exemples.
La figure 1 illustre les résultats de tests comparant l'efficacité de la composition suivant l'invention avec de la soude
La figure 2 illustre les résultats de tests comparant l'efficacité de la composition suivant l'invention avec d'autres compositions détergentes
La figure 3 illustre les résultats de tests comparant l'efficacité de la composition suivant l'invention avec d'autres compositions détergentes en effectuant un saut de pH.
Exemple 1.-
Un essai permettant de comparer l'efficacité de la composition suivant l'invention à un rinçage à l'eau et au NaOH a été effectué.
Des biofilms sont développés sur des membranes à osmose inverse utilisée dans des installations de dessalement.. Un inoculum bactérien (Pseudomonas aeruginosa) est préparé par culture durant 16h dans un milieu TSB 10% (tryptone soy broth). Cette préculture est diluée pour obtenir une densité optique (DO) de 0,05 à 600nm et 500 μΙ de cette solution ont été étalés sur chaque membrane. Les coupons sont incubés durant 48h dans des boîtes de pétri maintenues humides et placées en étuve à 30°C. Après 2 heures, la solution bactérienne est remplacée par 500 μΙ de milieu frais, TSB 10%. Après 24h, ce milieu de culture est renouvelé.
Les coupons sont ensuite nettoyés et sont placés dans les solutions de nettoyage. Les membranes sont laissées à tremper dans les solutions de nettoyage susdites pendant un temps total de 120 minutes à 200 rpm, à 35°C.
Les solutions de nettoyages sont les suivantes :
1 . Eau
2. NaOH liquide à 0,5 %
3. Composition suivant l'invention à pH 7.
Les résultats de cet essai sont présentés au tableau 1 .- Tableau 1.-
Ces résultats sont également présentés à la figure 1 qui illustre de gauche à droite la membrane après traitement à l'eau, au NaOH liquide et à la composition suivant l'invention à pH 7.
Comme on peut le voir, seule la composition suivant l'invention permet une élimination substantielle du biofilm.
Exemple 2.- Un essai permettant de comparer l'efficacité de la composition suivant l'invention à d'autres composition détergentes a été effectué. La procédure est identique à celle de l'exemple 1 à l'exception des solutions de nettoyage qui sont les suivantes:
1 . Composition contenant 3 agents différents, à savoir un agent séquestrant, un agent mouillant, et un agent dispersant et un composant enzymatique contenant au moins une laccase, une protéase et une polysaccharidase.
2. Composition contenant deux agents différents à savoir un agent séquestrant et un agent simultanément mouillant et dispersant et un composant enzymatique similaire au point 1 à pH 7
3. Composition contenant deux agents différents à savoir un agent séquestrant et un agent simultanément mouillant et dispersant et un composant enzymatique similaire au point 1 à pH 10.
Les résultats sont présentés au tableau 2 et à la figure 2.
Tableau 2.-
Ces résultats sont également présentés à la figure 2 qui illustre de gauche à droite la membrane après traitement par la solution 1 , la solution 3 et la solution 2.
Comme on peut le voir, seule la composition suivant l'invention à pH 7 ou 10 permet une élimination substantielle du biofilm.
Exemple 3.-
Des coupons en acier ont été traité par une composition semblable à la composition 1 de l'exemple 2 et par une composition suivant l'invention initialement à pH 7 avec un saut de pH à 10 après 15 minutes suivnat le protocole ci-dessous.
Les biofilms sont développés sur des coupons en inox préalablement lavés et stérélisés. Un inoculum bactérien (Pseudomonas aeruginosa) est préparé par culture durant 16h dans un milieu TSB 10% (tryptone soy broth). Cette préculture est diluée pour obtenir une densité optique (DO) de 0,05 à 600nm et 500 μΙ de cette solution ont été étalés sur chaque coupon. Les coupons sont incubés durant 48h dans des boîtes de pétri maintenues humides et placées en étuve à 30°C. Après 2 heures, la solution bactérienne est remplacée par 500 μΙ de milieu frais, TSB 10%. Après 24h, ce milieu de culture est renouvelé.
Les coupons ont ensuite été placés dans des tubes à essai contenant 10 ml d'une solution TSB + 0,5% Tween 80 pour le comptage des bactéries. Les tubes à essai ont été incubés pendant 5 minutes sur la table avant d'être soniqués pendant 2 minutes trente et vortexés pendant 30 secondes. Les étapes d'incubation, sonication et vortex ont été répétées.
Les coupons ont ensuite été récupérés et le milieu comprenant la solution TSB + 0,5 % de tween a fait l'objet de dilutions sérielles en utilisant de l'eau peptonée (Eau peptonée exempte d'indole: préparer 10 ml d'une dissolution à 15g/l. Puis diluer 1 ml de cette solution dans 1 litre d'eau stérile) et a ensuite été étalé sur boîte de pétri et incubé à 30 °C pendant une nuit avant comptage. Le biofilm a également été coloré de la manière suivante: les coupons sont égouttés et plongés dans la solution de coloration durant 10 minutes sélectif pour les protéines de la matrice du biofilm. Ensuite, les coupons sont plongés dans les différentes solutions de nettoyage 1 et 2 mentionnées ci-dessous pendant deux fois 10 minutes (les solutions de nettoyage sont remplacées entre les deux étrapes de nettoyage). avant de sécher à l'air libre.
Composition de nettoyage:
1 . Composition contenant 3 agents différents, à savoir un agent séquestrant, un agent mouillant, et un agent dispersant et un composant enzymatique contenant au moins une laccase, une protéase et une polysaccharidase.
2. Composition contenant deux agents différents à savoir un agent séquestrant et un agent simultanément mouillant et dispersant et un composant enzymatique similaire au point 1 à pH 7 et ensuite à pH 10
Résultats :
Dans 1/3 des boîtes de Pétri (4 sur 12) correspondant aux coupons nettoyés avec la composition n°1 , des bactéries ont poussé (moyenne > 109 CFU). Les bactéries ne se sont pas développées sur les boîtes de Pétri correspondant aux coupons nettoyés avec la composition selon l'invention.
La figure 3 illustre les résultats des colorations des biofilms. La figure 3 A illustre les témoins avant nettoyage tandis que la figure B illustre les coupons d'acier après nettoyage par la solutions 1 à différents pH et la figure C illustre les coupons d'acier après nettoyage par la composition suivant l'invention.. Comme on peut le voir, les coupons après le nettoyage avec la composition suivant l'invention présentent un aspect plus propre que ceux nettoyés avec la composition n°1 , et ne présentent pas de bactéries accrochées à leur surfaces alors que du biofilm est détecté pour 1/3 des coupons nettoyés avec la composition n°1 .
D'autres caractéristiques, détails et avantages de l'invention ressortiront de la description donnée ci-après, à titre non limitatif et en faisant référence aux dessins annexés et aux exemples.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composition pour l'élimination des biofilms présents sur un substrat caractérisée en ce qu'elle comporte :
- au moins un composant détergent comprenant au moins un agent séquestrant et un agent simultanément mouillant et dispersant,
- au moins un composant enzymatique contenant au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
2. Composition selon la revendication 1 , caractérisée en ce que la composition est une solution présentant un pH compris entre approximativement 8 et 1 1 .
3. Composition selon la revendication 1 , caractérisée en ce que la composition est une solution présentant un pH compris entre 6,5 et 7,5, plus particulièrement autour de 7.
4. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle ledit au moins un composant enzymatique comprend une proportion en protéase(s) comprise entre 10 et 50%, une proportion en laccase(s) comprise entre 5 et 35% et une proportion de polysaccharidase(s) comprise entre 5 et 20% en poids par rapport au poids du composant enzymatique, un excipient ou solvant conventionnel étant éventuellement ajouté pour atteindre 100%.
5. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que ladite au moins une polysaccharidase comprend une alpha-amylase.
6. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 5,, caractérisée en ce que ledit au moins un composant détergent comprend une proportion d'agent séquestrant comprise entre 1 et 10% en poids par rapport au poids total du composant détergent.
7. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, comprenant une proportion d'agent simultanément mouillant et dispersant comprise entre 15 et 50% en poids, par rapport au poids total du composant détergent
8. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, dans laquelle ledit agent simultanément mouillant et dispersant est choisi dans le groupe constitué des agents mouillants non moussants à chaud et comprend de préférence un alkylglucoside C6 à do, de préférence en C8, issu de matière premières renouvelables et éventuellement un alcool éthoxylé.
9. Méthode pour l'élimination des biofilms présents sur un substrat caractérisée en ce qu'elle comporte les étapes suivantes de :
a) mise à disposition d'un composant détergent contenant au moins un agent séquestrant ainsi qu'un agent simultanément mouillant et dispersant et d'un composant enzymatique contenant au moins une protéase, au moins une laccase, et au moins une polysaccharidase, b) mise en solution du composant détergent dans une phase aqueuse,
c) mise en solution du composant enzymatique dans la solution formée à l'étape b) pour former la solution de ladite composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, ou b') mise en solution du composant enzymatique dans une phase aqueuse,
c') mise en solution du composant détergent dans la solution formée à l'étape b') pour former la solution de ladite composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, d) application de la solution de ladite la composition formée à l'étape c) ou c') sur le substrat pendant une période de temps prédéterminées, en particulier comprise entre 15 minutes et 4 heures
10. Méthode selon la revendication 9, caractérisée en ce que la méthode comprend en outre une étape ultérieure d'application d'un biocide sur le substrat.
11. Méthode selon la revendication 9 ou 10, caractérisée en ce que le pH de la solution de ladite composition est compris entre 8 et 1 1 .
12. Méthode selon la revendication 9 ou 10, dans lequel, le pH de la solution de ladite composition est compris entre 6,5 et 7,5 et dans lequel une solution basique est ajoutée après ladite application d) de la solution de ladite composition sur ledit substrat pendant ladite période de temps prédéterminée, de façon à effectuer un saut de pH jusqu'à environ 8 à 9.
13. Utilisation d'une composition selon les revendications 1 à 8 pour l'élimination de biofilms présents sur un substrat.
14. Utilisation selon la revendication 13, d'une composition selon les revendications 1 à 8 pour le nettoyage des sols et des surfaces, pour le nettoyage en place ou le trempage.
15. Trousse pour l'élimination de biofilms sur un substrat caractérisée en ce qu'elle comprend
- au moins un échantillon de composant détergent en solution ou sous forme solide comprenant au moins un premier agent séquestrant et au moins un agent simultanément mouillant et dispersant ,
- au moins un échantillon de composant enzymatique en solution ou sous forme solide contenant au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
16. Trousse selon la revendication 15, caractérisée en ce que l'échantillon du composant enzymatique est une solution aqueuse dont le pH est compris entre 8 et 10.
17. Trousse selon la revendication 15 ou 16, caractérisée en ce que l'échantillon du composant détergent est une solution aqueuse dont le pH est compris entre 8,5 et 14.
18. Trousse selon l'une quelconque des revendications 15 à 18, comprenant en outre un biocide.
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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20150296800A1 (en) 2012-11-26 2015-10-22 Realco S.A. Method for eliminating biofilms for cleaning medical instruments, in particular for combating nosocomial infections
EP2789682A1 (fr) 2013-04-12 2014-10-15 Realco Procédé d'élimination de biofilms pour le nettoyage d'instruments médicaux, en particulier pour lutter contre les maladies nosocomiales
BE1021388B1 (fr) * 2013-05-22 2015-11-13 Realco Procede d'aumentation de la duree de vie de denrees perissables.
DE102014003484A1 (de) * 2014-03-14 2015-09-17 Bode Chemie Gmbh Reinigungsmittel für unbelebte Oberflächen mit spezieller Wirksamkeit gegen Schleim, Sekrete, Blut und Biofilme
BE1023894B1 (fr) * 2016-06-29 2017-09-06 Realco Composition comprenant au moins un composant détergent et au moins un composant enzymatique pour l'élimination de biofilms
BE1027322B1 (fr) * 2019-05-29 2021-01-12 Realco Composition nettoyante et dégraissante pour le traitement de surfaces dures

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2818150A1 (fr) * 2000-12-15 2002-06-21 Anios Lab Sarl Composition pour le traitement d'objets destines a etre desinfectes
WO2007095999A1 (fr) * 2006-02-23 2007-08-30 Realco S.A. Composition détergente liquide contenant une enzyme
GB2482164A (en) * 2010-07-22 2012-01-25 Fujifilm Europ Nv Cleaning composition

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH05507441A (ja) 1991-02-12 1993-10-28 バックマン・ラボラトリーズ・インターナショナル・インコーポレーテッド 産業水系中の表面からバイオフイルムを除去するかまたは同表面上のバイオフイルムの堆積を防止するための組成物および方法
US6100080A (en) * 1996-12-18 2000-08-08 Novo Nordisk A/S Method for enzymatic treatment of biofilm
DE19731398A1 (de) 1997-07-22 1999-01-28 Henkel Ecolab Gmbh & Co Ohg Verwendung enzymhaltiger Lösungen zum Reinigen von Gär- und Lagertanks
CN103181400B (zh) * 2004-09-10 2016-08-10 诺维信北美公司 防止、去除、减少或破坏生物膜的方法
BRPI0820818A2 (pt) * 2007-12-20 2015-06-16 Danisco Us Inc Controle e prevenção enzimática de biofilme
PL2243821T3 (pl) * 2009-04-20 2015-04-30 Realco Sa Produkt i sposób usuwania biofilmów

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2818150A1 (fr) * 2000-12-15 2002-06-21 Anios Lab Sarl Composition pour le traitement d'objets destines a etre desinfectes
WO2007095999A1 (fr) * 2006-02-23 2007-08-30 Realco S.A. Composition détergente liquide contenant une enzyme
GB2482164A (en) * 2010-07-22 2012-01-25 Fujifilm Europ Nv Cleaning composition

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SANTOS L, RODRIGUES D, LIRA M, OLIVEIRA R, REAL OLIVEIRA ME, VILAR EY, AZEREDO J.: "The effect of octylglucoside and sodium cholate in Staphylococcus epidermidis and Pseudomonas aeruginosa adhesion to soft contact lenses", OPTOMETRY AND VISION SCIENCE : OFFICIAL PUBLICATION OF THE AMERICAN ACADEMY OF OPTOMETRY, vol. 84, no. 5, May 2007 (2007-05-01), pages 429 - 434, ISSN: 1040-5488, Retrieved from the Internet <URL:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17502827> [retrieved on 20140401], DOI: 10.1097/OPX.0b013e318058a0cc *
See also references of WO2012048757A1 *

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