EP1102770A1 - Paramagnetic 3-,8-substituted deuteroporphyrin derivatives, pharmaceutical preparations containing same, method for producing same and their use in magnetic resonance imaging of necrosis and infarction - Google Patents

Paramagnetic 3-,8-substituted deuteroporphyrin derivatives, pharmaceutical preparations containing same, method for producing same and their use in magnetic resonance imaging of necrosis and infarction

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EP1102770A1
EP1102770A1 EP99936616A EP99936616A EP1102770A1 EP 1102770 A1 EP1102770 A1 EP 1102770A1 EP 99936616 A EP99936616 A EP 99936616A EP 99936616 A EP99936616 A EP 99936616A EP 1102770 A1 EP1102770 A1 EP 1102770A1
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EP
European Patent Office
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hydrogen atom
cooh
mmol
general formula
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EP99936616A
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German (de)
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EP1102770B1 (en
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Johannes Platzek
Ulrich Niedballa
Bernd Radüchel
Hanns-Joachim Weinmann
Thomas Frenzel
Bernd Misselwitz
Wolfgang Ebert
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Bayer Pharma AG
Original Assignee
Schering AG
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/22—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations

Definitions

  • the invention relates to the subject characterized in the claims, that is paramagnetic 3-, 8-substituted deuteroporphyrin derivatives, pharmaceutical compositions containing them, processes for their preparation and their use for necrosis and infarct MR imaging
  • Myocardial infarction is not a stationary process, but a dynamic process that extends over a longer period of time - weeks to months.
  • the infarction runs in phases that are not sharply separated, but overlapping.
  • the first phase the development of myocardial infarction, comprises the 24 hours after the infarction, in which the destruction spreads like a wave from the subendocard to the myocardium.
  • the second phase the already existing infarction, involves the stabilization of the area in which fiber formation (fibrosis) takes place as a healing process.
  • the third phase, the healed infarction begins after all destroyed tissue has been replaced by fibrous scar tissue. Extensive restructuring takes place in this period.
  • necrosis While the infarct is curable to a certain extent, only the harmful consequences for the rest of the organism can be caused by necrosis, the locally limited tissue death prevented or at least mitigated. Necrosis can arise in many ways: from injuries, chemicals, oxygen deficiency or radiation.
  • TPPS 5,10,15,20-tetrakis (4-sulfonatophenyl) porphyrin
  • Mn-TPP Mn-tetraphenyl-porphyrin
  • Gd-MP Gd-mesoporphyrin
  • LD50 low acute tolerances
  • porphyrins - like e.g. Gd-mesoporphyrin - tend to deposit in the skin, which leads to photosensitization. This sensitization can last for days, even weeks. In scintigraphic processes, this effect would be of no consequence due to the low dose. However, a broad application of scintigraphic methods is argued that the resolution of a gamma camera is much lower than that which can be achieved with MR imaging.
  • the Gd complexes of DTPA were also found for MR imaging of the myocardial infarction (K. Bockhorst et al., Acta Neurochir. (1997) Suppl, 60: 347-349); De Roos et al., Radiology 1989; 172: 717-720) and their bis (methylamids) (M. Saeed et al., Radiology, 1992; 182: 675-683). It was shown that both contrast media only allow a differentiation between healthy and infarcted tissue within a narrow time window. Comparable results were also achieved with the manganese compound of DTPA (Immunomedics, WO 94/22490) and DPDP (Radiology 1989; 172: 59-64).
  • Rl for a hydrogen atom, for a straight-chain Ci-Cg-alkyl radical, a C7-C12-
  • Aralkyl radical or represents a group OR 'in which R' is a hydrogen atom or a C] -C3-alkyl radical,
  • R2 represents R ⁇ , a group -CO-Z or a group - (NH) 0 - (A) q-NH-D, in which Z is a group -OL, with L being an inorganic or organic cation or a C 4 -C 4 -alkyl radical,
  • A represents a phenyleneoxy group or a C 1 -C 12 -alkylene or C7-C12 aralkylene group interrupted by one or more oxygen atoms, o and q independently of one another represent the numbers 0 or 1 and
  • R 4 represents a group - (A) qH and
  • K is a complexing agent of the general formula (Ila), (Ilb), (IIc), (Ild) or
  • (Ile) means, where R ⁇ for the case that K is a complexing agent of the formula (Ila) has the same meaning as R 4 and R-> for the case that K is a complexing agent of the formula (Ilb), (IIc) , (Ild) or (Ile) is the same
  • R 6 for a hydrogen atom, a straight-chain or branched - C 7 - alkyl group, a phenyl or benzyl group, A 2 for a phenylene, -CH 2 -NHCO-CH 2 -CH (CH 2 COOH) -C 6 H 4 - ß-, -C 6 H 4 -O- (CH 2 ) 0 .
  • L 1 , L, L 3 and L 4 independently of one another represent a hydrogen atom or a metal ion equivalent of an element of the abovementioned atomic number, provided that at least two of these substituents are metal ion equivalents and that additional anions are present in the metallopo ⁇ hyrin to balance any charges present and in which free carboxylic acid groups not required for complexation can also be present as salts with physiologically tolerable inorganic and / or organic cations or as esters or as amides,
  • PDT photodynamic therapy
  • the polyphyrin complexes according to the invention contain iron (III) -, manganese (III) -, copper (II) -, cobalt (III), chromium (III) -, nickel (II) - or vanadyl (II ) Ion, the first three being preferred.
  • the complexes according to the invention show a significantly higher relaxivity than the previously known, structurally similar compounds. Since the relaxivity can be regarded as a measure of the contrast agent activity of a compound, when using the complexes according to the invention in the field of NMR diagnostics, a comparable, positive signal influence is achieved even at a low dose. This significantly increases the safety margin, for which the product of relaxivity and tolerance can be regarded as a guideline.
  • the excess charge (s) is (are) caused, for example, by anions of organic or inorganic acids, preferably balanced by acetate, chloride, sulfate, nitrate, tartrate, succinate and maleate ions or by negative charges present in R 2 and / or R 3 .
  • the carboxyl groups which are not required for the complexation of the metal ions can be present as esters, as amides or as salts of inorganic or organic bases.
  • Suitable ester residues are those with 1 to 6 carbon atoms, preferably the ethyl esters;
  • Suitable inorganic cations are, for example, the lithium and the potassium ion and in particular the sodium ion.
  • Suitable cations of organic bases are those of primary, secondary or tertiary amines, such as, for example, ethanolamine, diethanolamine, Mo ⁇ holin, glucamine, N, N-dimethylglucamine, in particular meglumine.
  • R 2 and R 3 preferably each represent the groups -CONHNHK, -CONH (CH 2 ) 2 NHK,
  • R 2 and R 3 are preferably the same Rest.
  • a 2 preferably represents an alkylene, -CH 2 -, - (CH 2 ) 2 -, -CH 2 OC 6 H 4 -ß, -CH 2 OCH 2 - - C 6 H 4 -, -CH 2 -NHCO -CH 2 -CH (CH 2 COOH) -C 6 H 4 -ß, -C 6 H 4 -OCH 2 -ß or -C 6 H 4 -
  • X preferably represents the CO group.
  • R6 preferably represents a hydrogen atom or a methyl group.
  • A preferably stands for
  • Derivatives of diethylenetriaminepentaacetic acid and 1, 4,7, 10-tetraazacyclododecane-1, 4,7-triacetic acid, which are linked via a linker to the respective propyrin, are preferably mentioned as complexing agent residues K.
  • the complex compounds of the general formula I are prepared by methods known from the literature (see e.g. DE 4232925 for II a and II b; see e.g. DE 19507822, DE 19580858 and DE 19507819 for III c; see e.g. US-5,053,503,
  • R2 and R3 represent CONHNHK groups are preferred.
  • the synthesis of the 3, 3 '- (7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoxyrin-2, 18-diyl) di (propanohydrazide) required as starting material is described in Z. Physiol Chem. 241, 209 ( 1936).
  • the introduction of the desired metals (eg Mn) into the Po ⁇ hyrins takes place according to methods known from the literature (eg The Po ⁇ hyrins, ed. D. Dolphin, Academic Press, New York 1980, Vol. V, p. 459; DE 4232925), whereby essentially to are: a) the substitution of the pyrrolic NH's (by heating the metal-free ligand with the corresponding metal salt, preferably the acetate, optionally with the addition of acid-buffering agents, such as sodium acetate, in a polar solvent) or b) the "re-complexing" a metal already complexed by the ligand is displaced by the desired metal.
  • the desired metals eg Mn
  • Polar solvents such as e.g. Suitable for methanol, glacial acetic acid, dimethylformamide, chloroform and water.
  • the paramagnetic metal M can be introduced into the polyphyrin system before or after the complexing agent residue K has been linked. This makes one special flexible procedure for the synthesis of the compounds of the invention.
  • the residue K is chelated in a manner known from the literature (see, for example, DE 34 01 052) by suspending the metal oxide or salt (for example the nitrate, acetate, carbonate, chloride or sulfate) of the desired metal in polar solvents such as water or aqueous alcohols or is dissolved and reacted with the appropriate amount of the complex-forming ligand.
  • polar solvents such as water or aqueous alcohols
  • acidic hydrogen atoms or acid groups present can be substituted by cations of inorganic and / or organic bases or amino acids.
  • the neutralization takes place with the help of inorganic bases such as Alkali or alkaline earth metal hydroxides, carbonates or bicarbonates and / or organic bases such as primary, secondary and tertiary amines, e.g. Ethanolamine, Mo ⁇ holin, glucamine, N-methyl and N, N-dimethylglucamine, as well as basic amino acids, e.g. Lysine, arginine and ornithine or amides of originally neutral or acidic amino acids.
  • inorganic bases such as Alkali or alkaline earth metal hydroxides, carbonates or bicarbonates and / or organic bases
  • primary, secondary and tertiary amines e.g. Ethanolamine, Mo ⁇ holin, glucamine, N-methyl and N, N-dimethylglucamine
  • basic amino acids e.g. Lysine, arginine and ornithine or amides of originally neutral or acidic amino acids.
  • the acidic complex salts in aqueous solution or suspension can be added with enough of the desired bases that the neutral point is reached.
  • the solution obtained can then be evaporated to dryness in vacuo.
  • water-miscible solvents such as lower alcohols (e.g. methanol, ethanol, isopropanol), lower ketones (e.g. acetone), polar ethers (e.g. tetrahydrofuran, dioxane, 1,2-
  • Dimethoxyethane to precipitate and to obtain crystals that are easy to isolate and easy to clean. It has proven to be particularly advantageous to add the desired base already during the complex formation of the reaction mixture and thereby to save one process step.
  • the acidic complex compounds contain several free acidic groups, it is often expedient to prepare neutral mixed salts which contain both inorganic and organic cations as counterions. This can be done, for example, by reacting the complex-forming ligand in aqueous suspension or solution with the oxide or salt of the element providing the central ion and half of the amount of an organic base required for neutralization, isolating the complex salt formed, purifying it if desired and then to complete it Neutralization with the required amount of inorganic base. The order of base addition can also be reversed.
  • Another possibility of obtaining neutral complex compounds is to convert all or part of the remaining acid groups in the complex into esters. This can be done by subsequent reaction on the finished complex (e.g. by exhaustive reaction of the free carboxy groups with dimethyl sulfate).
  • compositions according to the invention are likewise prepared in a manner known per se by suspending or dissolving the complex compounds according to the invention - if appropriate with addition of the additives customary in galenicals - in an aqueous medium and then optionally sterilizing the suspension or solution.
  • suitable additives are, for example, physiologically acceptable buffers (such as tromethamine), small additions of complexing agents (such as diethylenetriaminepentaacetic acid) or, if necessary, electrolytes such as e.g. Sodium chloride or, if necessary, antioxidants such as e.g. Ascorbic acid.
  • suspensions or solutions of the agents according to the invention in water or in physiological saline solution are desired for enteral administration or other purposes, they are mixed with one or more adjuvants (e.g.
  • Methyl cellulose, lactose, mannitol) and / or surfactant (s) e.g. lecithins, Tween®,
  • Myrj® and / or flavoring agents for flavor correction (e.g. essential oils) mixed.
  • the invention therefore also relates to processes for the preparation of the complex compounds and their salts.
  • the final security is cleaning the isolated complex salt.
  • compositions according to the invention preferably contain 20 ⁇ mol / L to 200 mmol / L of the complex salt and are generally dosed in amounts of 1 ⁇ mol to 2 mmol / kg body weight, both in their application for necrosis and infarct MR imaging and also for therapy control using MRI diagnostics. They are intended for enteral and parenteral application or are applied using the methods of interventional radiology.
  • the agents according to the invention meet the diverse requirements for suitability as agents for MRI contrast agents. Thus, they are excellently suited to improve the meaningfulness of the image obtained with the aid of the magnetic resonance tomograph after application by increasing the signal intensity. Furthermore, they show the high effectiveness that is necessary to burden the body with the smallest possible amount of foreign substances and the good tolerance that is necessary to maintain the non-invasive character of the examinations.
  • the compounds of the general formula I are also suitable for representing the intravascular space (blood pool).
  • the good water solubility of the agents according to the invention makes it possible to produce highly concentrated solutions, thus keeping the volume load of the circuit within reasonable limits and compensating for the dilution with body fluid. Furthermore, the agents according to the invention not only have a high stability in vitro, but also a surprisingly high stability in vivo, so that a release or an exchange of the - in themselves toxic - bound in the complexes - not toxic - Ions can be neglected within the time in which the contrast agents are completely excreted again.
  • DTPA monoethyl ester monoanhydride 3,6-diazaoctanedioic acid (DTPA monoethyl ester monoanhydride) are suspended in 250 ml of absolute dimethylformamide. It is covered with a layer of nitrogen, 1.0 g (10 mmol) of triethylamine and 706 mg (1 mmol) of the title compound from Example 2a are added, and the resulting reaction mixture is stirred for 3 days at room temperature. After the reaction is filtered, the solvent in
  • Example 3 a) Acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2,18-dipropionylhydrazinato (2-) - K N21, K N22, K N23, K N24] cobalt
  • Example 3a and the resulting reaction mixture is stirred for 3 days at room temperature.
  • the mixture is filtered, the solvent is stripped off in vacuo and the remaining oil is triturated with 500 ml of diethyl ether.
  • the precipitated solid is filtered off and washed with diethyl ether and n-hexane. Chromatograph on silica gel RP-18 for cleaning (eluent:
  • Gadolinium chloride and 2N aqueous sodium hydroxide solution are added so that the pH of the reaction mixture always fluctuates between 6.8 and 7.2.
  • the mixture is stirred overnight at room temperature.
  • the solvent was removed in vacuo and the residue was chromatographed on silica gel RP-18
  • DTPA monoethyl ester monoanhydride 3,6-diaza octanedioic acid (DTPA monoethyl ester monoanhydride) are suspended in 250 ml of absolute dimethylformamide. The mixture is covered with nitrogen, 1.01 g (10 mmol) of triethylamine and 656 mg (1 mmol) of the title compound from Example 4a are added, and the resulting reaction mixture is stirred for 3 days at room temperature. After the reaction is filtered, the solvent in
  • the signal intensity increases slightly in the non-perfused area or the size of the delimited (low-signal) area decreases (-> slow diffusion into the necrosis).
  • the middle and v. a. late phase there is a clear enhancement in the necrotic area of the myocardium (see Fig .: lc, d, e).
  • the delimitation of the necrotic area in the MRI experiment correlates very well with the results of the histological "vital" staining.
  • necrosis-selective enhancement was investigated in the MRI experiment after a single intravenous application of the substance from Example 2d to animals with an experimentally generated myocardial infarction.
  • the heart attacks were induced on anesthetized patients
  • the non-perfused portion of the myocardium presents itself as a hypointense area (see Fig .: 2b). From approx. 30 min p. i. the signal intensity increases slightly in the non-perfused area or the size of the delimited (low-signal) area decreases (-> slow diffusion into the necrosis). In the middle and v. a. late phase (from 2.5 to approx. 24 h p. i.) there is a clear enhancement in the necrotic area of the myocardium (see Fig. 2c, 2d). The delimitation of the necrotic area in the MRI experiment correlates very well with the results of the histological NBT ("vital”) staining.
  • necrosis-selective enhancement was examined in animals with experimentally generated myocardial infarction in the MRI experiment.
  • the heart attacks were induced on anesthetized patients
  • the non-perfused portion of the myocardium is shown as a hypointense area for substance application (see Fig. 3b). From approx. 30 min p. i. the signal intensity increases slightly in the non-perfused area or the size of the delimited (low-signal) area decreases (-> slow diffusion into the necrosis). In the middle and v. a. late phase (from 2.5 to approx. 24 h p. i.) there is a clear enhancement in the necrotic area of the myocardium (see Fig. 3c, 3d). The delimitation of the necrotic area in the MRI experiment correlates very well with the results of the histological NBT ("vital”) staining.
  • a culture of human colon carcinoma (HT-29 P9) is grown in culture bottles of 25 ml for 3 days at 37 ° C.
  • the cultures are divided into two groups and with solutions of the test substances (50 mmol polyphyrin unit (PE) / l, diluted with fetal calf serum) in increasing amounts (0; 1.5; 5; 8.5; 12; 15.5; 19 ⁇ mol PE / 1) added.
  • the samples are irradiated for three days with a xenon lamp (8.5 k lux, UV filter).
  • the first group receives 2 treatments of 30 minutes each, every 4 hours. The rest of the time she stays in the dark
  • Atomic emission spectrometry measured.
  • the proportion of the injected contrast medium compound 1 (Gd) and compound 2 (Dy, reference substance) remaining in the blood space can be compared by the different labeling in the same animal.
  • the ⁇ -t Vz and ß- 1 V ⁇ elimination half-lives, the volume of distribution and the total clearance for blood and plasma can be calculated from the blood or plasma concentrations using special software (Topfit program).
  • the long blood retention time of compound 1 indicates a very high level of plasma protein binding.
  • the connection described in the example thus has the requirements for a blood pool agent.

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Abstract

The invention relates to paramagnetic 3-,8-substituted deuteroporphyrin derivatives having different substituents in positions 13 and 17 of the porphyrin skeleton, diagnostic substances containing said compounds, their use in magnetic resonance imaging of necrosis and infarction and methods for producing said compounds and substances.

Description

Paramagnetische 3-, 8-substituierte Deuteroporphyrinderivate, diese enthaltende pharmazeutische Mittel, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung für das Nekrose- und Infarkt-MR-Imaging Paramagnetic 3-, 8-substituted deuteroporphyrin derivatives, pharmaceutical compositions containing them, processes for their preparation and their use for necrosis and infarct MR imaging
Die Erfindung betrifft den in den Patentansprüchen gekennzeichneten Gegenstand, das heißt paramagnetische 3-, 8-substituierte Deuteroporphyrinderivate, diese enthaltende pharmazeutische Mittel, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung für das Nekrose- und Infarkt-MR-ImagingThe invention relates to the subject characterized in the claims, that is paramagnetic 3-, 8-substituted deuteroporphyrin derivatives, pharmaceutical compositions containing them, processes for their preparation and their use for necrosis and infarct MR imaging
Detektion, Lokalisierung und Überwachung von Nekrosen oder Infarkten ist ein wichtiger Bereich in der Medizin. So ist der Myokardinfarkt nicht ein stationärer Vorgang, sondern ein dynamischer Prozess, der sich über einen längeren Zeitraum - Wochen bis Monaten - erstreckt. Der Infarkt verläuft in Phasen, die nicht scharf voneinander getrennt, sondern überlappend sind. Die erste Phase, die Entwicklung des Myokardinfarktes, umfaßt die 24 Stunden nach dem Infarkt, in denen die Zerstörung sich wie eine Welle vom Subendocard zum Myocard ausbreitet. Die zweite Phase, der bereits bestehende Infarkt, umfaßt die Stabilisierung des Bereiches, in dem Faserbildung (Fibröse) als Heilprozess erfolgt. Die dritte Phase, der ausgeheilte Infarkt, beginnt, nachdem alles zerstörte Gewebe durch fibröses Narbengewebe ersetzt ist. In dieser Periode findet eine umfangreiche Restrukturierung statt.Detection, localization and monitoring of necrosis or infarcts is an important area in medicine. Myocardial infarction is not a stationary process, but a dynamic process that extends over a longer period of time - weeks to months. The infarction runs in phases that are not sharply separated, but overlapping. The first phase, the development of myocardial infarction, comprises the 24 hours after the infarction, in which the destruction spreads like a wave from the subendocard to the myocardium. The second phase, the already existing infarction, involves the stabilization of the area in which fiber formation (fibrosis) takes place as a healing process. The third phase, the healed infarction, begins after all destroyed tissue has been replaced by fibrous scar tissue. Extensive restructuring takes place in this period.
Bis heute ist kein präzises und zuverlässiges Verfahren bekannt, das die aktuelle Phase eines Myokardinfarktes am lebenden Patienten bestimmbar macht. Für die Beurteilung eines Myocardinfarktes ist es von entscheidender Bedeutung zu wissen, wie groß der Anteil des bei dem Infarkt untergegangenen (verlorenen) Gewebes ist und an welcher Stelle der Verlust erfolgte, denn von dieser Kenntnis hängt die Art der Therapie ab. Infarkte erfolgen nicht nur im Myokard, sondern auch in anderen Geweben, besonders jedoch im Hirn.To date, no precise and reliable method is known that makes it possible to determine the current phase of a myocardial infarction in living patients. For the assessment of a myocardial infarction, it is of crucial importance to know how large the proportion of the (lost) tissue that has died during the infarction and at what point the loss occurred, because the type of therapy depends on this knowledge. Infarctions occur not only in the myocardium, but also in other tissues, but especially in the brain.
Während der Infarkt in gewissem Umfang heilbar ist, können bei einer Nekrose, dem lokal begrenzten Gewebetod, nur die schädlichen Folgen für den Restorganismus verhindert oder wenigstens gemildert werden. Nekrosen können auf vielfache Weise entstehen: durch Verletzungen, Chemikalien, Sauerstoffdefizit oder Strahlung.While the infarct is curable to a certain extent, only the harmful consequences for the rest of the organism can be caused by necrosis, the locally limited tissue death prevented or at least mitigated. Necrosis can arise in many ways: from injuries, chemicals, oxygen deficiency or radiation.
Wie beim Infarkt ist die Kenntnis von Umfang und Art einer Nekrose wichtig für das weitere ärztliche Vorgehen. Schon früh erfolgten daher Versuche, Detektion und Lokalisation von Infarkten und Nekrosen durch Einsatz von Kontrastmitteln bei nichtinvasiven Verfahren wie Szintigraphie oder MRI zu verbessern. In der Literatur nehmen die Versuche, Porphyrine für das Nekroseimaging einzusetzen, einen großen Raum ein. Die erzielten Resultate ergeben jedoch ein widersprüchliches Bild. So beschreiben Winkelman und Hayes in Nature, 200, 903 (1967), daß sich Mn-As with an infarction, knowledge of the extent and type of necrosis is important for the further medical procedure. Attempts were therefore made early on to improve the detection and localization of infarcts and necrosis by using contrast media in non-invasive procedures such as scintigraphy or MRI. Attempts to use porphyrins for necrosis imaging occupy a large space in the literature. However, the results obtained give a contradictory picture. Thus Winkelman and Hayes in Nature, 200, 903 (1967) describe that Mn-
5,10,15,20-Tetrakis (4-sulfonatophenyl)-porphyrin (TPPS) selektiv im nekrotischen Teil eines Tumors anreichert. Lyon et al., Magn. Res. Med. 4, 24 (1987) dagegen beobachteten, daß sich Mn-TPPS im Körper verteilt, und zwar in Niere, Leber, Tumor und nur zu einem geringen Teil in den Muskeln. Interessant ist dabei, daß die Konzentration im Tumor erst am 4. Tag ihr Maximum erreicht und das auch nur, nachdem die Autoren die Dosis auf 0,2 mmol/kg gesteigert hatten. Die Autoren sprechen daher auch von einer offenbar nichtspezifischen Aufnahme des TPPS in den Tumor.5,10,15,20-tetrakis (4-sulfonatophenyl) porphyrin (TPPS) selectively accumulates in the necrotic part of a tumor. On the other hand, Lyon et al., Magn. Res. Med. 4, 24 (1987) observed that Mn-TPPS is distributed in the body, namely in the kidney, liver, tumor and only to a small extent in the muscles. It is interesting that the concentration in the tumor only reaches its maximum on the 4th day and only after the authors have increased the dose to 0.2 mmol / kg. The authors therefore speak of an apparently non-specific uptake of TPPS into the tumor.
Bockhorst et al., wiederum berichten in Acta Neurochir. 1994 [Suppl.] 60, 347, daß MnTPPS selektiv an Tumorzellen bindet. Foster et al., J. Nucl. Med. 26, 756 (1985), ihrerseits fanden, daß sich In-111 5,10,15,20-Tetrakis (4-N-methyl-pyridinium)- porphyrin (TMPyP) nicht im nekrotischen Teil, sondern in den lebenden Randschichten anreichert.Bockhorst et al., In turn, report in Acta Neurochir. 1994 [Suppl.] 60, 347 that MnTPPS selectively binds to tumor cells. Foster et al., J. Nucl. Med. 26, 756 (1985), for their part, found that In-111 5,10,15,20-tetrakis (4-N-methyl-pyridinium) - porphyrin (TMPyP) was not in the necrotic part but in the living peripheral layers enriches.
Daraus zu folgern, daß eine Porphyrintyp - Gewebe abhängige Wechselwirkung besteht, ist nicht zwingend.It is not imperative to conclude that there is a porphyrin type - tissue dependent interaction.
In Circulation, Vol. 90, No. 4, 1994, Part 2, Page 1468, Abstr. No. 2512, berichten Ni et al., daß sie mit einem Mn-Tetraphenyl-porphyrin (Mn-TPP) und einem Gd- Mesoporphyrin (Gd-MP) Infarktbereiche gut darstellen können.In Circulation, Vol. 90, No. 4, 1994, Part 2, Page 1468, Abstr. No. 2512, Ni et al. Report that they can well visualize infarct areas with a Mn-tetraphenyl-porphyrin (Mn-TPP) and a Gd-mesoporphyrin (Gd-MP).
Beide Substanzen sind Gegenstand der Anmeldung WO 95/31219. Bei szintigraphischen Verfahren liegt die eingesetzte Dosis im Nanomolbereich. Die Verträglichkeit der Substanzen spielt daher nur eine untergeordnete Rolle. Beim MR- imaging liegt die Dosis jedoch im Milimolbereich. Hier spielt die Verträglichkeit eine ganz entscheidende Rolle.Both substances are the subject of the application WO 95/31219. In scintigraphic processes, the dose used is in the nanomolar range. The compatibility of the substances therefore only plays a minor role. With MR imaging, however, the dose is in the milimole range. Compatibility plays a very important role here.
Die für MnTPP bzw. MnTPPS bestimmten geringen akuten Verträglichkeiten (LD50) schließen ihre Verwendung am Menschen aus.The low acute tolerances (LD50) determined for MnTPP or MnTPPS preclude their use in humans.
Hinzu kommt, daß Porphyrine - wie auch z.B. Gd-Mesoporphyrin - dazu neigen, sich in der Haut abzulagern, was zu einer Photosensibhsierung führt. Diese Sensibilisierung kann Tage, ja sogar Wochen andauern. Bei szintigraphischen Verfahren würde dieser Effekt infolge der geringen Dosis ohne Bedeutung sein. Gegen eine breite Anwendung szintigraphischer Verfahren spricht jedoch, daß die Auflösung einer Gamma-Kamera sehr viel geringer als die ist, die beim MR-imaging zu erreichen ist.In addition, porphyrins - like e.g. Gd-mesoporphyrin - tend to deposit in the skin, which leads to photosensitization. This sensitization can last for days, even weeks. In scintigraphic processes, this effect would be of no consequence due to the low dose. However, a broad application of scintigraphic methods is argued that the resolution of a gamma camera is much lower than that which can be achieved with MR imaging.
Für das MR-imaging des Myocardinfarktes fanden auch die Gd-Komplexe der DTPA (K. Bockhorst et al., Acta Neurochir. (1997) Suppl, 60:347-349); De Roos et al., Radiology 1989; 172:717-720) und ihres Bis(methylamids) (M. Saeed et al., Radiology, 1992; 182:675-683) Verwendung. Es zeigte sich, daß beide Kontrastmittel nur in einem engen Zeitfenster eine Differenzierung zwischen gesundem und infarziertem Gewebe ermöglichen. Vergleichbare Resultate wurden auch mit der Manganverbindung der DTPA (Immunomedics, WO 94/22490) und der DPDP (Radiology 1989; 172:59-64) erreicht.The Gd complexes of DTPA were also found for MR imaging of the myocardial infarction (K. Bockhorst et al., Acta Neurochir. (1997) Suppl, 60: 347-349); De Roos et al., Radiology 1989; 172: 717-720) and their bis (methylamids) (M. Saeed et al., Radiology, 1992; 182: 675-683). It was shown that both contrast media only allow a differentiation between healthy and infarcted tissue within a narrow time window. Comparable results were also achieved with the manganese compound of DTPA (Immunomedics, WO 94/22490) and DPDP (Radiology 1989; 172: 59-64).
Eine deutliche Verbesserung erzielten Weissleder et al., Radiology 1992; 182:675-683, die Antimyosin an Eisenoxide (MION) koppelten. Aufgrund seiner spezifischen Struktur ist dieses Kontrastmittel nicht für das Nekroseimaging geeignet.Weissleder et al., Radiology 1992; 182: 675-683, which coupled antimyosin to iron oxides (MION). Due to its specific structure, this contrast medium is not suitable for necrosis imaging.
Es besteht daher der dringende Bedarf, Verbindungen für das MR-Infarkt- und Nekroseimaging zu haben die: sehr gut verträglich sind, nicht phototoxisch sind, chemisch stabil sind, vollständig ausgeschieden werden, sich in Nekrosen anreichern, sich nicht in der Haut anreichern, eine hohe Relaxivity besitzen, eine hohe Wasserlöslichkeit zeigen, ein weites Zeitfenster für die Messung liefern, eine gute Differenzierung zwischen gesundem und nekrotischem/infarziertem Gewebe ermöglichen.There is therefore an urgent need to have compounds for MR infarct and necrosis imaging which: are very well tolerated, are not phototoxic, are chemically stable, are completely eliminated, accumulate in necrosis, do not accumulate in the skin, have a high relaxivity, show a high solubility in water, provide a wide time window for the measurement, enable a good differentiation between healthy and necrotic / infected tissue.
Es wurde gefunden, daß überraschenderweise Poφhyrinkomplexe bestehend aus einem Liganden der allgemeinen Formel IIt has been found that, surprisingly, polyphyrin complexes consisting of a ligand of the general formula I
sowie mindestens einem Ion eines Elementes der Ordnungszahl 20-32, 37-39, 42-51 oder 57-83, worin M für ein paramagnetisches Ion,and at least one ion of an element of atomic number 20-32, 37-39, 42-51 or 57-83, where M is a paramagnetic ion,
Rl für ein Wasserstoffatom, für einen geradkettigen Ci-Cg-Alkylrest, einen C7-C12-Rl for a hydrogen atom, for a straight-chain Ci-Cg-alkyl radical, a C7-C12-
Aralkylrest oder für eine Gruppe OR' worin R' ein Wasserstoffatom oder ein C] -C3-Alkylrest ist, steht,Aralkyl radical or represents a group OR 'in which R' is a hydrogen atom or a C] -C3-alkyl radical,
R2 für R^, eine Gruppe -CO-Z oder eine Gruppe -(NH)0-(A)q-NH-D steht, worin Z eine Gruppe -OL ist, mit L in der Bedeutung eines anorganischen oder organischen Kations oder eines C \ -C4- Alkylrestes ist,R2 represents R ^, a group -CO-Z or a group - (NH) 0 - (A) q-NH-D, in which Z is a group -OL, with L being an inorganic or organic cation or a C 4 -C 4 -alkyl radical,
A eine Phenylenoxy- oder eine durch ein oder mehrere Sauerstoffatome unterbrochene C\ -C^-Alkylen- oder C7-C12 Aralkylengruppe bedeutet, o und q unabhängig voneinander die Ziffern 0 oder 1 bedeuten undA represents a phenyleneoxy group or a C 1 -C 12 -alkylene or C7-C12 aralkylene group interrupted by one or more oxygen atoms, o and q independently of one another represent the numbers 0 or 1 and
D ein Wasserstoffatom oder eine Gruppe -CO-A-(COOL)0-(H)m bedeutet, mit m gleich 0 oder 1 und unter der Maßgabe, daß die Summe aus m und o gleich 1 ist, eine Gruppe -(C=Q)(NR4)0-(A)q-(NR5)-K steht, worin Q für ein Sauerstoffatom oder für zwei Wasserstoffatome steht,D represents a hydrogen atom or a group -CO-A- (COOL) 0 - (H) m , with m equal to 0 or 1 and, provided that the sum of m and o is 1, a group - (C = Q) (NR 4 ) 0 - (A) q - (NR 5 ) -K, in which Q represents one oxygen atom or two hydrogen atoms,
R4 eine Gruppe -(A)q-H bedeutet undR 4 represents a group - (A) qH and
K einen Komplexbildner der allgemeinen Formel (Ila), (Ilb), (IIc), (Ild) oderK is a complexing agent of the general formula (Ila), (Ilb), (IIc), (Ild) or
(Ile) bedeutet, wobei R^ für den Fall, daß K ein Komplexbildner der Formel (Ila) ist die gleiche Bedeutung wie R4 hat und R-> für den Fall, daß K ein Komplexbildner der Formel (Ilb), (IIc), (Ild) oder (Ile) ist, die gleiche(Ile) means, where R ^ for the case that K is a complexing agent of the formula (Ila) has the same meaning as R 4 and R-> for the case that K is a complexing agent of the formula (Ilb), (IIc) , (Ild) or (Ile) is the same
Bedeutung wie D hat, mit der Maßgabe, daß eine direkte Sauerstoff-Stickstoff Bindung nicht zugelassen ist, und K für einen Komplexbildner der allgemeinen Formel (Ila), (Ilb), (IIc), (Ild), (Ile) oder (Di)Has the same meaning as D, with the proviso that a direct oxygen-nitrogen bond is not permitted, and K for a complexing agent of the general formula (Ila), (Ilb), (IIc), (Ild), (Ile) or (Di )
(Ila) (Ila)
(Ilb),(Ilb),
(Ild), (Ild),
(Ile),(Ile),
steht, worin q die oben angegebene Bedeutung hat, A1 die für A angegebene Bedeutung hat,where q has the meaning given above, A 1 has the meaning given for A,
R6 für ein Wasserstoffatom, eine geradkettige oder verzweigte - C7- Alkylgruppe, eine Phenyl- oder Benzylgruppe, A2 für eine Phenylen-, -CH2-NHCO-CH2-CH (CH2COOH) -C6H4-ß-, -C6H4-O- (CH2)0.5-ß, -C6H4-(OCH2CH2)0-, -N(CH2COOH)-CH2-ß oder eine gegebenenfalls durch ein oder mehrere Sauerstoffatome, 1 bis 3-NHCO-, 1 bis 3 -CONH-gruppen unterbrochene und/oder mit 1 bis 3-(CH2)0-5COOH-Gruppen substituierte Cj-Cι2-Alkylen- oder C7-Cι2- Alkylengruppe, wobei ß für die Bindungsstelle an X steht, X für eine -CO- oder NHCS-gruppe undR 6 for a hydrogen atom, a straight-chain or branched - C 7 - alkyl group, a phenyl or benzyl group, A 2 for a phenylene, -CH 2 -NHCO-CH 2 -CH (CH 2 COOH) -C 6 H 4 - ß-, -C 6 H 4 -O- (CH 2 ) 0 . 5 -ß, -C 6 H 4 - (OCH 2 CH 2 ) 0 -, -N (CH 2 COOH) -CH 2 -ß or an optionally by one or more oxygen atoms, 1 to 3-NHCO-, 1 to 3 -CONH- groups interrupted and / or with 1 to 3- (CH 2) 0-5 COOH groups, substituted Cj-Cι 2 alkylene or C 7 -C 2 alkylene group, where ß stands for the binding site on X, X for a -CO or NHCS group and
L1, L , L3 und L4 unabhängig voneinander für einWasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent eines Elements der oben genannten Ordnungszahl steht, unter den Maßgaben, daß mindestens zwei dieser Substituenten für Metallionenäquivalente stehen, und daß zum Ausgleich gegebenenfalls vorhandener Ladungen im Metallopoφhyrin weitere Anionen vorhanden sind und worin freie, nicht zur Komplexierung benötigte Carbonsäuregruppen auch als Salze mit physiologisch verträglich anorganischen und/oder organischen Kationen oder als Ester oder als Amide vorliegen können,L 1 , L, L 3 and L 4 independently of one another represent a hydrogen atom or a metal ion equivalent of an element of the abovementioned atomic number, provided that at least two of these substituents are metal ion equivalents and that additional anions are present in the metallopoφhyrin to balance any charges present and in which free carboxylic acid groups not required for complexation can also be present as salts with physiologically tolerable inorganic and / or organic cations or as esters or as amides,
überraschenderweise für das Nekrose- und Infarkt-MR-Imaging geeignet sind.are surprisingly suitable for necrosis and infarct MR imaging.
Sie erfüllen die an derartige Verbindungen zu stellenden Anforderungen (s.o.). Sie können auch zur Therapiekontrolle in der photodynamischen Therapie (PDT) verwendet werden.They meet the requirements for such connections (see above). They can also be used for therapy control in photodynamic therapy (PDT).
Die erfindungsgemäßen Poφhyrin-Komplexe enthalten als paramagnetisches Ion im Poφhyringerüst das Eisen(III)-, Mangan(III)-, Kupfer(II)-, Cobalt(III), Chrom(III)-, Nickel(II)- oder Vanadyl(II)-Ion, wobei die drei erstgenannten bevorzugt sind.The polyphyrin complexes according to the invention contain iron (III) -, manganese (III) -, copper (II) -, cobalt (III), chromium (III) -, nickel (II) - or vanadyl (II ) Ion, the first three being preferred.
Überraschenderweise zeigen die erfindungsgemäßen Komplexe gegenüber den bislang bekannten, strukturell ähnlichen Verbindungen eine deutlich höhere Relaxivität. Da die Relaxivität als ein Maß für die Kontrastmittelwirksamkeit einer Verbindung angesehen werden kann, gelingt bei Verwendung der erfindungsgemäßen Komplexe im Bereich der NMR-Diagnostik eine vergleichbare, positive Signalbeeinflussung schon bei einer niedrigen Dosis. Dadurch vergrößert sich der Sicherheitsabstand signifikant, für den als Richtwert das Produkt aus Relaxivität und Verträglichkeit angesehen werden kann.Surprisingly, the complexes according to the invention show a significantly higher relaxivity than the previously known, structurally similar compounds. Since the relaxivity can be regarded as a measure of the contrast agent activity of a compound, when using the complexes according to the invention in the field of NMR diagnostics, a comparable, positive signal influence is achieved even at a low dose. This significantly increases the safety margin, for which the product of relaxivity and tolerance can be regarded as a guideline.
Sofern eines der im Poφhyrin gebundenen Ionen in einer höheren Oxidationsstufe als +2 vorliegt, so wird (werden) die überschüssιge(n) Ladung(en) z.B. durch Anionen von organischen oder anorganischen Säuren, bevorzugt durch Acetat-, Chlorid-, Sulfat-, Nitrat-, Tartrat-, Succinat-, und Maleat-Ionen oder durch in R2 und/oder R3 vorhandenen negativen Ladungen ausgeglichen.If one of the ions bound in the polyphyrin is in a higher oxidation state than +2, the excess charge (s) is (are) caused, for example, by anions of organic or inorganic acids, preferably balanced by acetate, chloride, sulfate, nitrate, tartrate, succinate and maleate ions or by negative charges present in R 2 and / or R 3 .
Gewünschtenfalls können die Carboxylgruppen, die nicht für die Komplexierung der Metallionen benötigt werden, als Ester, als Amide oder als Salze anorganischer oder organischer Basen vorliegen. Geeignete Esterreste sind solche mit 1 bis 6 C-Atomen vorzugsweise die Ethylester; geeignete anorganische Kationen sind beispielsweise das Lithium- und das Kalium-Ion und insbesondere das Natrium-Ion. Geeignete Kationen organischer Basen sind solche von primären, sekundären oder tertiären Aminen, wie zum Beispiel Ethanolamin, Diethanolamin, Moφholin, Glucamin, N, N- Dimethylglucamin, insbesondere das Meglumin.If desired, the carboxyl groups which are not required for the complexation of the metal ions can be present as esters, as amides or as salts of inorganic or organic bases. Suitable ester residues are those with 1 to 6 carbon atoms, preferably the ethyl esters; Suitable inorganic cations are, for example, the lithium and the potassium ion and in particular the sodium ion. Suitable cations of organic bases are those of primary, secondary or tertiary amines, such as, for example, ethanolamine, diethanolamine, Moφholin, glucamine, N, N-dimethylglucamine, in particular meglumine.
Bevorzugt stehen R2 und R3 jeweils für die Gruppen -CONHNHK, -CONH(CH2)2NHK,R 2 and R 3 preferably each represent the groups -CONHNHK, -CONH (CH 2 ) 2 NHK,
-CONH(CH2)3NHK, -CONH(CH2)4NHK und -CONH(CH2)2O(CH2)2NHK, wobei die erste Gruppe bevorzugt ist, R2 und R3 stehen bevorzugt für den gleichen Rest.-CONH (CH 2 ) 3 NHK, -CONH (CH 2 ) 4 NHK and -CONH (CH 2 ) 2 O (CH 2 ) 2 NHK, the first group being preferred, R 2 and R 3 are preferably the same Rest.
A2 steht bevorzugt für eine Alkylen-, -CH2-, -(CH2)2-, -CH2OC6H4-ß, -CH2OCH2- - C6H4-, -CH2-NHCO-CH2-CH(CH2COOH)-C6H4-ß, -C6H4-OCH2-ß oder -C6H4-A 2 preferably represents an alkylene, -CH 2 -, - (CH 2 ) 2 -, -CH 2 OC 6 H 4 -ß, -CH 2 OCH 2 - - C 6 H 4 -, -CH 2 -NHCO -CH 2 -CH (CH 2 COOH) -C 6 H 4 -ß, -C 6 H 4 -OCH 2 -ß or -C 6 H 4 -
OCH2CH2-N(CH2COOH)CH2-ß Gruppe, wobei ß für die Bindungsstelle an X steht.OCH 2 CH 2 -N (CH 2 COOH) CH 2 -ß group, where ß stands for the binding site on X.
X steht bevorzugt für die CO-gruppe.X preferably represents the CO group.
R6 steht bevorzugt für ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe. R6 preferably represents a hydrogen atom or a methyl group.
Bevorzugt steht A fürA preferably stands for
-Cr -Cr --Cr -Cr -
-CΓ CΓL-CΓL--CΓ CΓL-CΓL-
-CΓLCΓ CΓ CΓ --CΓLCΓ CΓ CΓ -
-CΓLCΓ O-CΓ CΓ --CΓLCΓ O-CΓ CΓ -
-CH2CH2O-CH2CH2-O-CH2CH2--CH 2 CH 2 O-CH 2 CH 2 -O-CH 2 CH 2 -
(CH2)5-(CH 2 ) 5 -
•(CH2)6-• (CH 2 ) 6 -
"(CH2)10-"(CH 2 ) 10 -
-(Cr CrL- O)2-( -Η2Cπ2- -O-CH2CH2 - (Cr CrL- O) 2 - ( -Η 2 Cπ 2 - -O-CH 2 CH 2
q steht bevorzugt für die Ziffer 0.q preferably stands for the number 0.
Als besondere Verbindungen seien {mu-[{ 16, 16'-[Chloromangan(III)-7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18-diyl]-bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo- 3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]}(8-)]}-digadolinato(2-),-Dinatrium, {mu[{ 16, 16'-[Chloroeisen(III)-7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18-diyl]-bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]}(8-)]}- digadolinato(2-),-Dinatrium, {mu[{ 16, 16'-[Kupfer(II)-7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18-diyl]- bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]}(8- )] } -digadolinato(2-),-Dinatrium genannt.Special compounds are {mu - [{16, 16 '- [chloromangan (III) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2, 18-diyl] -bis [3, 6, 9 -tris (carboxymethyl) -ll, 14-dioxo- 3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8 -)]} - digadolinato (2 -), - disodium, {mu [{16, 16 ' - [Chloro-iron (III) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2, 18-diyl] -bis [3, 6, 9-tris (carboxymethyl) -ll, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8 -)]} - digadolinato (2 -), - disodium, {mu [{16, 16 ' - [copper (II) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2, 18-diyl] - bis [3, 6, 9-tris (carboxymethyl) -ll, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8-)]} -digadolinato (2 -), - disodium called.
Als Komplexbildnerrest K seien vorzugsweise Derivate der Diethylentriaminpentaessigsäure und der 1 ,4,7, 10-Tetraazacyclododecan- 1 ,4,7- triessigsäure genannt, die über einen linker an das jeweilige Prophyrin gebunden sind.Derivatives of diethylenetriaminepentaacetic acid and 1, 4,7, 10-tetraazacyclododecane-1, 4,7-triacetic acid, which are linked via a linker to the respective propyrin, are preferably mentioned as complexing agent residues K.
Die Herstellung der Komplexverbindungen der allgemeinen Formel I erfolgt nach literaturbekannten Methoden ( s. z.B. DE 4232925 für II a und II b; s. z.B. DE 19507822, DE 19580858 und DE 19507819 für III c; s. z.B. US-5,053,503,The complex compounds of the general formula I are prepared by methods known from the literature (see e.g. DE 4232925 for II a and II b; see e.g. DE 19507822, DE 19580858 and DE 19507819 for III c; see e.g. US-5,053,503,
WO 96/02669, WO 96/01655, EP 0430863, EP 255471, US-5,277,895, EP 0232751, US-4,885,363 für II d, II e und II f).WO 96/02669, WO 96/01655, EP 0430863, EP 255471, US-5,277,895, EP 0232751, US-4,885,363 for II d, II e and II f).
Die Verbindungen worin R2 und R3 für CONHNHK-gruppen stehen, sind bevorzugt. Die Synthese des hierfür als Edukt benötigten 3, 3 '-(7, 12-Diethyl-3, 8, 13, 17- tetramethylpoφhyrin-2, 18-diyl)di(propanohydrazid) wird in Z. Physiol Chem. 241, 209 (1936) beschrieben.The compounds in which R2 and R3 represent CONHNHK groups are preferred. The synthesis of the 3, 3 '- (7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoxyrin-2, 18-diyl) di (propanohydrazide) required as starting material is described in Z. Physiol Chem. 241, 209 ( 1936).
Die Einführung der gewünschten Metalle (z.B. Mn) in die Poφhyrine erfolgt nach literaturbekannten Methoden (z.B. The Poφhyrins, ed. D. Dolphin, Academic Press, New York 1980, Vol. V, p. 459; DE 4232925), wobei im wesentlichen zu nennen sind: a) die Substitution der pyrrolischen NH's (durch Erwärmen des metallfreien Liganden mit dem entsprechenden Metallsalz , vorzugsweise dem Acetat, gegebenenfalls unter Zusatz von säurepuffernden Mitteln, wie z.B. Natriumacetat , in einem polaren Lösungsmittel) oder b) die "Umkomplexierung", bei der ein bereits vom Liganden komplexiertes Metall durch das gewünschte Metall verdrängt wird.The introduction of the desired metals (eg Mn) into the Poφhyrins takes place according to methods known from the literature (eg The Poφhyrins, ed. D. Dolphin, Academic Press, New York 1980, Vol. V, p. 459; DE 4232925), whereby essentially to are: a) the substitution of the pyrrolic NH's (by heating the metal-free ligand with the corresponding metal salt, preferably the acetate, optionally with the addition of acid-buffering agents, such as sodium acetate, in a polar solvent) or b) the "re-complexing" a metal already complexed by the ligand is displaced by the desired metal.
Als Lösungsmittel sind vor allem polare Solventen, wie z.B. Methanol, Eisessig, Dimethylformamid, Chloroform und Wasser geeignet.Polar solvents, such as e.g. Suitable for methanol, glacial acetic acid, dimethylformamide, chloroform and water.
Die Einführung des paramagnetischen Metalls M in das Poφhyrinsystem kann vor oder nach Anknüpfung des Komplexbildner-Restes K erfolgen. Dadurch wird eine besonders flexible Vorgehensweise für die Synthese der erfindungsgemäßen Verbindungen ermöglicht.The paramagnetic metal M can be introduced into the polyphyrin system before or after the complexing agent residue K has been linked. This makes one special flexible procedure for the synthesis of the compounds of the invention.
Die Chelatisierung des Restes K erfolgt in literaturbekannter Weise (siehe z.B. DE 34 01 052) indem das Metalloxid oder -salz (z.B. das Nitrat, Acetat, Carbonat, Chlorid oder Sulfat) des jeweils gewünschten Metalls, in polaren Lösungsmitteln wie Wasser oder wäßrigen Alkoholen suspendiert oder gelöst wird und mit der entsprechenden Menge des komplexbildenden Liganden umgesetzt wird. Soweit gewünscht, können vorhandene acide Wasserstoffatome oder Säuregruppen durch Kationen anorganischer und/oder organischer Basen oder Aminosäuren substituiert werden.The residue K is chelated in a manner known from the literature (see, for example, DE 34 01 052) by suspending the metal oxide or salt (for example the nitrate, acetate, carbonate, chloride or sulfate) of the desired metal in polar solvents such as water or aqueous alcohols or is dissolved and reacted with the appropriate amount of the complex-forming ligand. If desired, acidic hydrogen atoms or acid groups present can be substituted by cations of inorganic and / or organic bases or amino acids.
Die Neutralisation erfolgt dabei mit Hilfe anorganischer Basen wie z.B. Alkali- oder Erdalkali-hydroxiden, -carbonaten oder -bicarbonaten und/oder organischer Basen wie unter anderem primärer, sekundärer und tertiärer Amine, wie z.B. Ethanolamin, Moφholin, Glucamin, N-Methyl- und N,N-Dimethylglucamin, sowie basischer Aminosäuren, wie z.B. Lysin, Arginin und Ornithin oder von Amiden ursprünglich neutraler oder saurer Aminosäuren.The neutralization takes place with the help of inorganic bases such as Alkali or alkaline earth metal hydroxides, carbonates or bicarbonates and / or organic bases such as primary, secondary and tertiary amines, e.g. Ethanolamine, Moφholin, glucamine, N-methyl and N, N-dimethylglucamine, as well as basic amino acids, e.g. Lysine, arginine and ornithine or amides of originally neutral or acidic amino acids.
Zur Herstellung der neutralen Komplexverbindungen kann man beispielsweise den sauren Komplexsalzen in wäßriger Lösung oder Suspension soviel der gewünschten Basen zusetzen, daß der Neutralpunkt erreicht wird. Die erhaltene Lösung kann anschließend im Vakuum zur Trockne eingeengt werden. Häufig ist es von Vorteil, die gebildeten Neutralsalze durch Zugabe von mit Wasser mischbaren Lösungsmitteln, wie zum Beispiel niederen Alkoholen (z.B. Methanol, Ethanol, Isopropanol), niederen Ketonen (z.B. Aceton), polaren Ethern (z.B. Tetrahydrofuran, Dioxan, 1,2-To produce the neutral complex compounds, for example, the acidic complex salts in aqueous solution or suspension can be added with enough of the desired bases that the neutral point is reached. The solution obtained can then be evaporated to dryness in vacuo. It is often advantageous to neutralize the formed salts by adding water-miscible solvents such as lower alcohols (e.g. methanol, ethanol, isopropanol), lower ketones (e.g. acetone), polar ethers (e.g. tetrahydrofuran, dioxane, 1,2-
Dimethoxyethan) auszufällen und so leicht zu isolierende und gut zu reinigende Kristallisate zu erhalten. Als besonders vorteilhaft hat es sich erwiesen, die gewünschte Base bereits während der Komplexbildung der Reaktionsmischung zuzusetzen und dadurch einen Verfahrensschritt einzusparen.Dimethoxyethane) to precipitate and to obtain crystals that are easy to isolate and easy to clean. It has proven to be particularly advantageous to add the desired base already during the complex formation of the reaction mixture and thereby to save one process step.
Enthalten die sauren Komplexverbindungen mehrere freie acide Gruppen, so ist es oft zweckmäßig, neutrale Mischsalze herzustellen, die sowohl anorganische als auch organische Kationen als Gegenionen enthalten. Dies kann beispielsweise geschehen, indem man den komplexbildenden Liganden in wäßriger Suspension oder Lösung mit dem Oxid oder Salz des das Zentralion liefernden Elements und der Hälfte des zur Neutralisation benötigten Menge einer organischen Base umsetzt, das gebildete Komplexsalz isoliert, es gewünschtenfalls reinigt und dann zur vollständigen Neutralisation mit der benötigten Menge anorganischer Base versetzt. Die Reihenfolge der Basenzugabe kann auch umgekehrt werden.If the acidic complex compounds contain several free acidic groups, it is often expedient to prepare neutral mixed salts which contain both inorganic and organic cations as counterions. This can be done, for example, by reacting the complex-forming ligand in aqueous suspension or solution with the oxide or salt of the element providing the central ion and half of the amount of an organic base required for neutralization, isolating the complex salt formed, purifying it if desired and then to complete it Neutralization with the required amount of inorganic base. The order of base addition can also be reversed.
Eine andere Möglichkeit, zu neutralen Komplexverbindungen zu kommen, besteht darin, die verbleibenden Säuregruppen im Komplex ganz oder teilweise in Ester zu überführen. Dies kann durch nachträgliche Reaktion am fertigen Komplex geschehen (z.B. durch erschöpfende Umsetzung der freien Carboxy-Gruppen mit Dimethylsulfat).Another possibility of obtaining neutral complex compounds is to convert all or part of the remaining acid groups in the complex into esters. This can be done by subsequent reaction on the finished complex (e.g. by exhaustive reaction of the free carboxy groups with dimethyl sulfate).
Die Herstellung der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Mittel erfolgt ebenfalls in an sich bekannter Weise, indem man die erfindungsgemäßen Komplexverbindungen - gegebenenfalls unter Zugabe der in der Galenik üblichen Zusätze - in wäßrigem Medium suspendiert oder löst und anschließend die Suspension oder Lösung gegebenenfalls sterilisiert. Geeignete Zusätze sind beispielsweise physiologisch unbedenkliche Puffer (wie z.B. Tromethamin), geringe Zusätze von Komplexbildnern (wie z.B. Diethylentriaminpentaessigsäure) oder, falls erforderlich, Elektrolyte wie z. B. Natriumchlorid oder, falls erforderlich, Antioxidantien wie z.B. Ascorbinsäure.The pharmaceutical compositions according to the invention are likewise prepared in a manner known per se by suspending or dissolving the complex compounds according to the invention - if appropriate with addition of the additives customary in galenicals - in an aqueous medium and then optionally sterilizing the suspension or solution. Suitable additives are, for example, physiologically acceptable buffers (such as tromethamine), small additions of complexing agents (such as diethylenetriaminepentaacetic acid) or, if necessary, electrolytes such as e.g. Sodium chloride or, if necessary, antioxidants such as e.g. Ascorbic acid.
Sind für die enterale Verabreichung oder andere Zwecke Suspensionen oder Lösungen der erfindungsgemäßen Mittel in Wasser oder in physiologischer Salzlösung erwünscht, werden sie mit einem oder mehreren in der Galenik üblichen Hilfsstoff(en) (z.B.If suspensions or solutions of the agents according to the invention in water or in physiological saline solution are desired for enteral administration or other purposes, they are mixed with one or more adjuvants (e.g.
Methylcellulose, Lactose, Mannit) und/oder Tensid(en) (z.B. Lecithine, Tween®,Methyl cellulose, lactose, mannitol) and / or surfactant (s) (e.g. lecithins, Tween®,
Myrj®) und/oder Aromastoffen zur Geschmackskorrektur (z.B. etherischen Ölen) gemischt.Myrj®) and / or flavoring agents for flavor correction (e.g. essential oils) mixed.
Prinzipiell ist es auch möglich, die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Mittel auch ohne Isolierung der Komplexsalze herzustellen. In jedem Fall muß besondere Sorgfalt darauf verwendet werden, die Chelatbildung so vorzunehmen, daß die erfindungsgemäßen Salze und Salzlösungen praktisch frei sind von nicht komplexierten toxisch wirkenden Metallionen.In principle, it is also possible to prepare the pharmaceutical compositions according to the invention without isolating the complex salts. In any case, special care must be taken to carry out the chelation in such a way that the Salts and salt solutions according to the invention are practically free of non-complexed toxic metal ions.
Dies kann beispielsweise mit Hilfe von Farbindikatoren wie Xylenolorange durch Kontrolltitrationen während des Herstellungsprozesses gewährleistet werden. DieThis can be ensured, for example, with the help of color indicators such as xylenol orange through control titrations during the manufacturing process. The
Erfindung betrifft daher auch Verfahren zur Herstellung der Komplexverbindungen und ihrer Salze. Als letzte Sicherheit bleibt eine Reinigung des isolierten Komplexsalzes.The invention therefore also relates to processes for the preparation of the complex compounds and their salts. The final security is cleaning the isolated complex salt.
Die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Mittel enthalten vorzugsweise 20 μmol/L bis 200 mmol/L des Komplexsalzes und werden in der Regel in Mengen von 1 μmol bis 2 mmol/kg Köφergewicht dosiert, sowohl in ihrer Anwendung für das Nekrose- und Infarkt-MR-Imaging als auch für die Therapiekontrolle mittels MRI-Diagnostik. Sie sind zur enteralen und parenteralen Applikation bestimmt oder werden mit den Methoden der interventioneilen Radiologie appliziert.The pharmaceutical compositions according to the invention preferably contain 20 μmol / L to 200 mmol / L of the complex salt and are generally dosed in amounts of 1 μmol to 2 mmol / kg body weight, both in their application for necrosis and infarct MR imaging and also for therapy control using MRI diagnostics. They are intended for enteral and parenteral application or are applied using the methods of interventional radiology.
Die erfindungsgemäßen Mittel erfüllen die vielfältigen Voraussetzungen für die Eignung als Mittel für MRI-Kontrastmittel. So sind sie hervorrragend dazu geeignet, nach Applikation durch Erhöhung der Signalintensität das mit Hilfe des Kernspintomographen erhaltene Bild in seiner Aussagekraft zu verbessern. Ferner zeigen sie die hohe Wirksamkeit, die notwendig ist, um den Köφer mit möglichst geringen Mengen an Fremdstoffen zu belasten und die gute Verträglichkeit, die notwendig ist, um den nichtinvasiven Charakter der Untersuchungen aufrechtzuerhalten.The agents according to the invention meet the diverse requirements for suitability as agents for MRI contrast agents. Thus, they are excellently suited to improve the meaningfulness of the image obtained with the aid of the magnetic resonance tomograph after application by increasing the signal intensity. Furthermore, they show the high effectiveness that is necessary to burden the body with the smallest possible amount of foreign substances and the good tolerance that is necessary to maintain the non-invasive character of the examinations.
Die Verbindungen der allgemeinen Formel I sind auch zur Darstellung des Intravasalraums (blood-pool) geeignet.The compounds of the general formula I are also suitable for representing the intravascular space (blood pool).
Die gute Wasserlöslichkeit der erfindungsgemäßen Mittel erlaubt es hochkonzentrierte Lösungen herzustellen, damit die Volumenbelastung des Kreislaufs in vertretbaren Grenzen zu halten und die Verdünnung durch Köφerflüssigkeit auszugleichen. Weiterhin weisen die erfindungsgemäßen Mittel nicht nur eine hohe Stabilität in vitro auf, sondern auch eine überraschend hohe Stabilität in vivo, so daß eine Freigabe oder ein Austausch der in den Komplexen nicht konvalent gebundenen - an sich giftigen - Ionen innerhalb der Zeit, in der die Kontrastmittel vollständig wieder ausgeschieden werden, zu vernachlässigen ist.The good water solubility of the agents according to the invention makes it possible to produce highly concentrated solutions, thus keeping the volume load of the circuit within reasonable limits and compensating for the dilution with body fluid. Furthermore, the agents according to the invention not only have a high stability in vitro, but also a surprisingly high stability in vivo, so that a release or an exchange of the - in themselves toxic - bound in the complexes - not toxic - Ions can be neglected within the time in which the contrast agents are completely excreted again.
Die Erfindung wird durch die nachfolgenden Beispiele erläutert. The invention is illustrated by the following examples.
Beispiel 1example 1
a) Acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18-dipropionylhydra- zinato(2-)-K N21, K N22, K N23, K N24]-Eisena) Acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2, 18-dipropionylhydrazinato (2-) - K N21, K N22, K N23, K N24] iron
1190 mg (2 mmol) 3,3'-(7, 12- Diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18- diyl)-di(propanohydrazid), hergestellt analog zu H. Fischer, E. Haarer und F. Stadler, Z. Physiol. Chem. 241, 209 (1936), und 706,36 mg (2 mmol) Eisen(III)- acetylacetonat werden in 150 ml Essigsäure/100 ml Chloroform 5 Stunden auf 70°C erhitzt. Dann wird im Vakuum eingedampft, der Rückstand in Wasser aufgeschlämmt, abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Das getrocknete Rohprodukt wird aus Pyridin/Diethylether umkristallisiert. Ausbeute: 1,25 g (89 % d. Th.) rotbraunes Pulver1190 mg (2 mmol) 3,3 '- (7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2, 18-diyl) -di (propanohydrazide), prepared analogously to H. Fischer, E. Haarer and F. Stadler, Z. Physiol. Chem. 241, 209 (1936), and 706.36 mg (2 mmol) iron (III) acetylacetonate are heated in 150 ml acetic acid / 100 ml chloroform at 70 ° C for 5 hours. Then it is evaporated in vacuo, the residue is slurried in water, filtered off and washed with water. The dried crude product is recrystallized from pyridine / diethyl ether. Yield: 1.25 g (89% of theory) of red-brown powder
Elementaranalyse: ber.: C 61,10 H 6,12 N 15,84 Fe 7,89 gefi: C 60,95 H 6,31 N 15,70 Fe 7,68Elemental analysis: calc .: C 61.10 H 6.12 N 15.84 Fe 7.89 found: C 60.95 H 6.31 N 15.70 Fe 7.68
b) Acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis {3, 6, 16-trioxo-8, 11, 14- tris(carboxymethyl) 17-oxa-4, 5, 8, 11, 14-pentaazanonadec-l-yl}poφhyinato (3-)]- Eisenb) acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis {3, 6, 16-trioxo-8, 11, 14-tris (carboxymethyl) 17-oxa-4, 5, 8, 11, 14-pentaazanonadec-l-yl} poφhyinato (3 -)] - iron
806,8 mg (2 mmol) 3-Ethoxy-carbonylmethyl-6-[2-(2,6-dioxomoφholino)ethyl]- 3,6-diazaoctandi-säure (DTPA-monoethylester-monoanhydrid) werden in 250 ml absolutem Dimethylformamid suspendiert. Man überschichtet mit Stickstoff, setzt 1,0 g (10 mmol) Triethylamin und 707 mg (1 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel la zu und rührt das resultierende Reaktionsgemisch 3 Tage bei806.8 mg (2 mmol) of 3-ethoxycarbonylmethyl-6- [2- (2,6-dioxomoφholino) ethyl] - 3,6-diazaoctanedioic acid (DTPA-monoethyl ester monoanhydride) are suspended in 250 ml of absolute dimethylformamide . It is overlaid with nitrogen, 1.0 g (10 mmol) of triethylamine and 707 mg (1 mmol) of the title compound from Example la are added and the resulting reaction mixture is stirred for 3 days
Raumtemperatur. Nach beendeter Reaktion wird filtriert, das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen und das verbleibende Öl mit 500 ml Diethylether verrieben. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und mit Diethylether und n-Hexan gewaschen. Zur Reinigung wird an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Eluens: H2O/Tetrahydrofuran: 0-30 %). Ausbeute: 1,62 g (93 % d. Th.) rotbraunes Pulver Wassergehalt: 5,2 %Room temperature. When the reaction is complete, the mixture is filtered, the solvent is stripped off in vacuo and the remaining oil is triturated with 500 ml of diethyl ether. The precipitated solid is filtered off and washed with diethyl ether and n-hexane. For purification, it is chromatographed on silica gel RP-18 (eluent: H 2 O / tetrahydrofuran: 0-30%). Yield: 1.62 g (93% of theory) red-brown powder water content: 5.2%
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 53,93 H 6,19 N 12,95 Fe 3,69 gefi: C 53,75 H 6,37 N 12,81 Fe 3,49Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 53.93 H 6.19 N 12.95 Fe 3.69 found: C 53.75 H 6.37 N 12.81 Fe 3.49
c) Chloro [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis{3, 6, 18-trioxo-8, 11 , 14- tris(carboxymethyl)-4, 5, 8, 1 1 , 14-pentaazahexadecanato}poφhinato(3-)]-Eisenc) Chloro [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis {3, 6, 18-trioxo-8, 11, 14-tris (carboxymethyl) -4, 5, 8 , 1 1, 14-pentaazahexadecanato} poφhinato (3 -)] - iron
1,59 g (0,660 mmol) des unter Beispiel lb hergestellten Liganden werden in 400 ml Wasser gelöst. Durch Zugabe von 10 molarer wäßriger Natronlauge wird pH 13 eingestellt und 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach vollzogener Verseifung der Estergruppen wird mit konzentrierter Salzsäure pH 3 eingestellt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird an Kieselgel RP 18 chromatographiert (Eluens: H2O/Tetrahydrofuran/Gradient). Ausbeute: 0,89 g (95 % d. Th.) rotbraunes Pulver1.59 g (0.660 mmol) of the ligand produced in Example Ib are dissolved in 400 ml of water. The pH is adjusted to 13 by adding 10 molar aqueous sodium hydroxide solution and the mixture is stirred at room temperature for 5 hours. After the ester groups have been saponified, the pH is adjusted to 3 using concentrated hydrochloric acid. It is evaporated to the dry state in a vacuum. The residue is chromatographed on silica gel RP 18 (eluent: H 2 O / tetrahydrofuran / gradient). Yield: 0.89 g (95% of theory) of red-brown powder
Wassergehalt: 6,1 %Water content: 6.1%
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 51,90 H 5,76 N 13,67 Fe 3,89 Cl 2,47 gefi: C 51 ,75 H 5,88 N 13,54 Fe 3,75 Cl 2,38Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 51.90 H 5.76 N 13.67 Fe 3.89 Cl 2.47 found: C 51, 75 H 5.88 N 13.54 Fe 3.75 Cl 2.38
d) {mu-[{ 16, 16'-[Chloroeisen(III) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18-diyl]-bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaaza- hexadecanoato] } (8-)] } -digadolinato(2-), Dinatriumd) {mu - [{16, 16 ' - [Chloroeisen (III) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18-diyl] -bis [3, 6, 9-tris (carboxymethyl) -ll, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaaza- hexadecanoato]} (8-)]} -digadolinato (2-), disodium
0,86 g (0,599 mmol) ) des unter Beispiel lc hergestellten Liganden werden in 400 ml Wasser gelöst und abwechselnd portionsweise 316,3 mg 1,2 mmol) Gadoliniumchlorid und 2n wäßrige Natronlauge zugesetzt, so daß der pH-Wert des Reaktionsgemisches stets zwischen 6,8 und 7,2 pendelt. Ist alles Gadoliniumchlorid zugesetzt, wird über Nacht bei Raumtemperatur nachgerührt. Zur Aufarbeitung wird das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen und der Rückstand an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Eluens: H2O/Tetrahydrofuran: 0-30 %).0.86 g (0.599 mmol)) of the ligand prepared in Example lc is dissolved in 400 ml of water and alternately portions of 316.3 mg 1.2 mmol) Gadolinium chloride and 2N aqueous sodium hydroxide solution are added so that the pH of the reaction mixture always fluctuates between 6.8 and 7.2. When all the gadolinium chloride has been added, the mixture is stirred overnight at room temperature. For working up, the solvent is removed in vacuo and the residue is chromatographed on silica gel RP-18 (eluent: H 2 O / tetrahydrofuran: 0-30%).
Ausbeute: 1,04 g (98 % d. Th.) rotbraunes Pulver Wassergehalt: 6,9 %Yield: 1.04 g (98% of theory) of red-brown powder water content: 6.9%
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 41,67 H 4,17 N 10,97 Gd 17,60 Fe 3,13 Cl 1,98 Na 2,61 gefi: C 41,48 H 4,32 N 10,80 Gd 17,43 Fe 3,07 Cl 1,78 Na 2,38Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 41.67 H 4.17 N 10.97 Gd 17.60 Fe 3.13 Cl 1.98 Na 2.61 found: C 41.48 H 4.32 N 10.80 Gd 17.43 Fe 3.07 Cl 1.78 Na 2.38
Beispiel 2Example 2
a) Acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18-dipropionyl- hydrazinato (2-)-K N21, K N22, K N23, K N24]-Mangana) Acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2, 18-dipropionylhydrazinato (2-) - K N21, K N22, K N23, K N24] manganese
1 190 mg (2 mmol) 3,3 '-(7, 12-Diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2,18-diyl)- di(propanohydrazid), hergestellt analog zu H. Fischer, E. Haarer und F. Stadler, Z.1,190 mg (2 mmol) 3,3 ' - (7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2,18-diyl) - di (propanohydrazide), prepared analogously to H. Fischer, E. Haarer and F. Stadler, Z.
Physiol. Chem. 241, 209; (1936), und 704,5 mg (2 mmol) Mangan(III)- acetylacetonat-Dihydrat werden in 150 ml Essigsäure/ 100 ml Chloroform 5 Stunden auf 80°C erhitzt. Dann wird im Vakuum eingedampft, der Rückstand in Wasser aufgeschlämmt, abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Das getrocknete Rohprodukt wird aus Pyridin/ Diethylether umkristallisiert.Physiol. Chem. 241, 209; (1936), and 704.5 mg (2 mmol) of manganese (III) acetylacetonate dihydrate are heated in 150 ml of acetic acid / 100 ml of chloroform at 80 ° C. for 5 hours. Then it is evaporated in vacuo, the residue is slurried in water, filtered off and washed with water. The dried crude product is recrystallized from pyridine / diethyl ether.
Ausbeute: 1,29 g (91 % d. Th.) rotbraunes PulverYield: 1.29 g (91% of theory) of red-brown powder
Elementaranalyse: ber.: C 61,18 H 6,13 N 15,86 Mn 7,77 gefi: C 61,03 H 6,29 N 15,75 Mn 7,58 b) Acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis {3, 6, 18-trioxo-8, 11, 14- tris(carboxymethyl) 17-oxa-4, 5, 8, 11, 14-pentaazanonadec-l-yl}poφhyrinato(3-)]- ManganElemental analysis: calc .: C 61.18 H 6.13 N 15.86 Mn 7.77 found: C 61.03 H 6.29 N 15.75 Mn 7.58 b) acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis {3, 6, 18-trioxo-8, 11, 14-tris (carboxymethyl) 17-oxa-4, 5, 8, 11, 14-pentaazanonadec-l-yl} poφhyrinato (3 -)] - manganese
806,8 mg (2 mmol) 3-Ethoxy-carbonylmethyl-6-[2-(2,6-dioxomoφholino)ethyl]-806.8 mg (2 mmol) 3-ethoxycarbonylmethyl-6- [2- (2,6-dioxomoφholino) ethyl] -
3,6-diazaoctandi-säure (DTPA-monoethylester-monoanhydrid) werden in 250 ml absolutem Dimethylformamid suspendiert. Man überschichtet mit Stickstoff, setzt 1,0 g (10 mmol) Triethylamin und 706 mg (1 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 2a zu und rührt das resultierende Reaktionsgemisch 3 Tage bei Raumtemperatur. Nach beendeter Reaktion wird filtriert, das Lösungsmittel im3,6-diazaoctanedioic acid (DTPA monoethyl ester monoanhydride) are suspended in 250 ml of absolute dimethylformamide. It is covered with a layer of nitrogen, 1.0 g (10 mmol) of triethylamine and 706 mg (1 mmol) of the title compound from Example 2a are added, and the resulting reaction mixture is stirred for 3 days at room temperature. After the reaction is filtered, the solvent in
Vakuum abgezogen und das verbleibende Öl mit 500 ml Diethylether verrieben. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und mit Diethylether und n-Hexan gewaschen. Zur Reinigung wird an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Eluens: H2O/Tetrahydrofuran: 0-30 %). Ausbeute: 1,35 g (89 % d. Th.) rotbraunes PulverVacuum removed and the remaining oil triturated with 500 ml of diethyl ether. The precipitated solid is filtered off and washed with diethyl ether and n-hexane. For purification, it is chromatographed on silica gel RP-18 (eluent: H 2 O / tetrahydrofuran: 0-30%). Yield: 1.35 g (89% of theory) of red-brown powder
Wassergehalt: 5,9 %Water content: 5.9%
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 53,96 H 6,19 N 12,96 Mn 3,63 gefi: C 53,83 H 6,34 N 12,81 Mn 3,49Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 53.96 H 6.19 N 12.96 Mn 3.63 found: C 53.83 H 6.34 N 12.81 Mn 3.49
c) Chloro [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis{3, 6, 18-trioxo-8, 11, 14- tris(carboxymethyl)-4, 5, 8, 11, 14-pentaazahexadecanoato}poφhinato(3-)]-Manganc) Chloro [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis {3, 6, 18-trioxo-8, 11, 14-tris (carboxymethyl) -4, 5, 8 , 11, 14-pentaazahexadecanoato} poφhinato (3 -)] - manganese
1 ,31 g (0,865 mmol) des unter Beispiel 2b hergestellten Liganden werden in 400 ml Wasser gelöst. Durch Zugabe von 10 molarer wäßriger Natronlauge wird pH 13 eingestellt und 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach vollzogener Verseifung der Estergruppen wird mit konzentrierter Salzsäure pH 3 eingestellt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird an Kieselgel RP 18 chromatographiert (Eluens: H2O/Tetrahydrofuran Gradient). Ausbeute: 1,15 g (93 % d. Th.) rotbraunes Pulver Wassergehalt: 7,2 % Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 51,93 H 5,76 N 13,68 Mn 3,83 Cl 2,47 gefi: C 51,81 H 5,93 N 13,49 Mn 3,70 Cl 2,321.31 g (0.865 mmol) of the ligand prepared in Example 2b are dissolved in 400 ml of water. The pH is adjusted to 13 by adding 10 molar aqueous sodium hydroxide solution and the mixture is stirred at room temperature for 5 hours. After the ester groups have been saponified, the pH is adjusted to 3 using concentrated hydrochloric acid. It is evaporated to the dry state in a vacuum. The residue is chromatographed on silica gel RP 18 (eluent: H 2 O / tetrahydrofuran gradient). Yield: 1.15 g (93% of theory) of red-brown powder water content: 7.2% Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 51.93 H 5.76 N 13.68 Mn 3.83 Cl 2.47 found: C 51.81 H 5.93 N 13.49 Mn 3.70 Cl 2.32
d) {mu-[{ 16, 16'-[Chloromangan(III)-7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin- 2, 18-diyl]-bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13- pentaazahexadecanoato] } (8-)] } -digadolinato(2-),-Dinatriumd) {mu - [{16, 16 '- [Chloromangan (III) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2, 18-diyl] -bis [3, 6, 9-tris (carboxymethyl) -ll, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8-)]} -digadolinato (2 -), - disodium
1,12 g (0,781 mmol) ) des unter Beispiel 2c hergestellten Liganden werden in 400 ml Wasser gelöst und abwechselnd portionsweise 41 1,8 mg (1,56 mmol) Gadoliniumchlorid und 2n wäßrige Natronlauge zugesetzt, so daß der pH-Wert des Reaktionsgemisches stets zwischen 6,8 und 7,2 pendelt. Ist alles Gadoliniumchlorid zugesetzt, wird über Nacht bei Raumtemperatur nachgerührt. Zur Aufarbeitung wird das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen und der Rückstand an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Eluens: H2O/Tetrahydrofuran: 0-30 %). Ausbeute: 1,35 g (97 % d. Th.) rotbraunes Pulver Wassergehalt: 6,5 %1.12 g (0.781 mmol)) of the ligand prepared in Example 2c are dissolved in 400 ml of water and 41.1.8 mg (1.56 mmol) of gadolinium chloride and 2N aqueous sodium hydroxide solution are added in portions, so that the pH of the reaction mixture always oscillates between 6.8 and 7.2. When all the gadolinium chloride has been added, the mixture is stirred overnight at room temperature. For working up, the solvent is removed in vacuo and the residue is chromatographed on silica gel RP-18 (eluent: H 2 O / tetrahydrofuran: 0-30%). Yield: 1.35 g (97% of theory) of red-brown powder water content: 6.5%
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 41,69 H 4,18 N 10,98 Gd 17,61 Mn 3,08 Cl 1,98 Na2,57 gefi: C 41,48 H 4,33 N 10,81 Gd 17,50 Mn 2,89 Cl 1,85 Na 2,34Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 41.69 H 4.18 N 10.98 Gd 17.61 Mn 3.08 Cl 1.98 Na2.57 found: C 41.48 H 4.33 N 10 , 81 Gd 17.50 Mn 2.89 Cl 1.85 Na 2.34
Beispiel 3 a) Acetato[7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2,18- dipropionylhydrazinato(2-)-K N21, K N22, K N23, K N24]-KobaltExample 3 a) Acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2,18-dipropionylhydrazinato (2-) - K N21, K N22, K N23, K N24] cobalt
1190 mg (2 mmol) 3,3 '-(7, 12-Diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2,18-diyl)- di(propanohydrazid), hergestellt analog zu H. Fischer, E. Haarer und F. Stadler, Z.1190 mg (2 mmol) 3,3 '- (7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2,18-diyl) - di (propanohydrazide), prepared analogously to H. Fischer, E. Haarer and F. Stadler, Z.
Physiol. Chem. 241, 209 (1936), und 712,52 mg (2 mmol) Kobalt(III)- acetylacetonat werden in 150 ml Essigsäure/ 100 ml Chloroform 5 Stunden auf 80°C erhitzt. Dann wird im Vakuum eingedampft, der Rückstand in Wasser aufgeschlämmt, abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Das getrocknete Rohprodukt wird aus Pyridin/ Diethylether umkristallisiert.Physiol. Chem. 241, 209 (1936), and 712.52 mg (2 mmol) of cobalt (III) acetylacetonate are heated in 150 ml of acetic acid / 100 ml of chloroform at 80 ° C. for 5 hours. Then it is evaporated in vacuo, the residue is slurried in water, filtered off and washed with water. The dried crude product is recrystallized from pyridine / diethyl ether.
Ausbeute: 1,31 g (92 % d. Th.) rotbraunes PulverYield: 1.31 g (92% of theory) of red-brown powder
Elementaranalyse: ber.: C 60,84 H 6,10 N 15,77 Co 8,29 gefi: C 60,71 H 6,29 N 15,58 Co 8,14Elemental analysis: calc .: C 60.84 H 6.10 N 15.77 Co 8.29 found: C 60.71 H 6.29 N 15.58 Co 8.14
b) Acetato[7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis{3, 6, 18-trioxo-8, 11, 14- tris(carboxymethyl)-17-oxa-4, 5, 8, 11, 14-pentaazanonadec-l-yl}poφhinato(3-)]- Kobaltb) Acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis {3, 6, 18-trioxo-8, 11, 14-tris (carboxymethyl) -17-oxa-4 , 5, 8, 11, 14-pentaazanonadec-l-yl} poφhinato (3 -)] - cobalt
806,8 mg (2 mmol) 3-Ethoxy-carbonylmethyl-6-[2-(2,6-dioxomoφholino)ethyl]- 3,6-diaza octandi-säure (DTPA-monoethylester-monoanhydrid) werden in 250 ml absolutem Dimethylformamid suspendiert. Man überschichtet mit Stickstoff, setzt 1,0 g (10 mmol) Triethylamin und 710 mg (1 mmol) der Titelverbindung aus806.8 mg (2 mmol) of 3-ethoxycarbonylmethyl-6- [2- (2,6-dioxomoφholino) ethyl] - 3,6-diaza octanedioic acid (DTPA-monoethyl ester monoanhydride) are in 250 ml of absolute dimethylformamide suspended. It is overlaid with nitrogen, 1.0 g (10 mmol) of triethylamine and 710 mg (1 mmol) of the title compound are exposed
Beispiel 3 a zu und rührt das resultierende Reaktionsgemisch 3 Tage bei Raumtemperatur. Nach beendeter Reaktion wird filtriert, das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen und das verbleibende Öl mit 500 ml Diethylether verrieben. Der ausgefallene Feststoff wird ab filtriert und mit Diethylether und n-Hexan gewaschen. Zur Reinigung wird an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Eluens:Example 3a and the resulting reaction mixture is stirred for 3 days at room temperature. When the reaction is complete, the mixture is filtered, the solvent is stripped off in vacuo and the remaining oil is triturated with 500 ml of diethyl ether. The precipitated solid is filtered off and washed with diethyl ether and n-hexane. Chromatograph on silica gel RP-18 for cleaning (eluent:
H2O/Tetrahydrofuran: 0-30 %). Ausbeute: 1,32 g (87 % d. Th.) rotbraunes Pulver Wassergehalt: 6,7 % Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 53,82 H 6,18 N 12,92 Co 3,88 gefi: C 53,72 H 6,35 N 12,81 Co 3,69H 2 O / tetrahydrofuran: 0-30%). Yield: 1.32 g (87% of theory) of red-brown powder water content: 6.7% Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 53.82 H 6.18 N 12.92 Co 3.88 found: C 53.72 H 6.35 N 12.81 Co 3.69
Chloro [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis{3, 6, 18-trioxo-8, 11, 14 tris(carboxymethyl)-4, 5, 8, 11, 14-pentaazahexadecanoato}poφhinato(3-)]-KobaltChloro [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis {3, 6, 18-trioxo-8, 11, 14 tris (carboxymethyl) -4, 5, 8, 11, 14-pentaazahexadecanoato} poφhinato (3 -)] - cobalt
1 ,28 g (0,844 mmol) des unter Beispiel 3b hergestellten Liganden werden in 400 ml1.28 g (0.844 mmol) of the ligand prepared in Example 3b are dissolved in 400 ml
Wasser gelöst. Durch Zugabe von 10 molarer wäßriger Natronlauge wird pH 13 eingestellt und 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach vollzogener Verseifung der Estergruppen wird mit konzentrierter Salzsäure pH 3 eingestellt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird an Kieselgel RP 18 chromatographiert (Eluens: H2O/Tetrahydrofuran/Gradient).Water dissolved. The pH is adjusted to 13 by adding 10 molar aqueous sodium hydroxide solution and the mixture is stirred at room temperature for 5 hours. After the ester groups have been saponified, the pH is adjusted to 3 using concentrated hydrochloric acid. It is evaporated to the dry state in a vacuum. The residue is chromatographed on silica gel RP 18 (eluent: H 2 O / tetrahydrofuran / gradient).
Ausbeute: 1,15 g (95 % d. Th.) rotbraunes Pulver Wassergehalt: 4,9 %Yield: 1.15 g (95% of theory) of red-brown powder water content: 4.9%
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 51,79 H 5,75 N 13,64 Co 4,10 Cl 2,47 gefi: C 51,60 H 5,89 N 13,51 Co 3,97 Cl 2,35Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 51.79 H 5.75 N 13.64 Co 4.10 Cl 2.47 found: C 51.60 H 5.89 N 13.51 Co 3.97 Cl 2.35
{mu-[{ 16, 16'-[Chlorokobolt(III)-7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin- 2,18-diyl]-bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13- pentaazahexadecanoato] } (8-)] } -digadolinato(2-), Dinatrium{mu - [{16, 16 '- [Chlorokobolt (III) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2,18-diyl] -bis [3, 6, 9-tris (carboxymethyl ) -ll, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8-)]} -digadolinato (2-), disodium
1,12 g (0,779 mmol) des unter Beispiel 3c hergestellten Liganden werden in 400 ml Wasser gelöst und abwechselnd portionsweise 410,6 mg (1,59 mmol)1.12 g (0.779 mmol) of the ligand prepared in Example 3c are dissolved in 400 ml of water and alternately portions of 410.6 mg (1.59 mmol)
Gadoliniumchlorid und 2n wäßrige Natronlauge zugesetzt, so daß der pH- Wert des Reaktionsgemisches stets zwischen 6,8 und 7,2 pendelt. Ist alles Gadoliniumchlorid zugesetzt, wird über Nacht bei Raumtemperatur nachgerührt. Zur Aufarbeitung wird das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen und der Rückstand an Kieselgel RP-18 chromatographiertGadolinium chloride and 2N aqueous sodium hydroxide solution are added so that the pH of the reaction mixture always fluctuates between 6.8 and 7.2. When all the gadolinium chloride has been added, the mixture is stirred overnight at room temperature. To work up the solvent was removed in vacuo and the residue was chromatographed on silica gel RP-18
(Eluens: H2O/Tetrahydrofuran: 0-30 %).(Eluent: H 2 O / tetrahydrofuran: 0-30%).
Ausbeute: 1,34 g (96 % d. Th.) rotbraunes PulverYield: 1.34 g (96% of theory) of red-brown powder
Wassergehalt: 7,8 %Water content: 7.8%
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 41,59 H 4,17 N 10,95 Gd 17,57 Co 3,29 Cl 1,98 Na 2,57 gefi: C 41,48 H 4,32 N 10,84 Gd 17,43 Co 3,14 Cl 1,81 Na 2,31Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 41.59 H 4.17 N 10.95 Gd 17.57 Co 3.29 Cl 1.98 Na 2.57 found: C 41.48 H 4.32 N 10.84 Gd 17.43 Co 3.14 Cl 1.81 Na 2.31
Beispiel 4Example 4
a) [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2,18-dipropionylhydrazinato (2-)-K N21 , K N22, K N23, K N24]-Kupfera) [7, 12-Diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2,18-dipropionylhydrazinato (2-) - K N21, K N22, K N23, K N24] copper
1190 mg (2 mmol) 3,3 '-(7, 12-Diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2,18-diyl)- di(propanohydrazid), hergestellt analog zu H. Fischer, E. Haarer und F. Stadler, Z.1190 mg (2 mmol) 3,3 ' - (7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2,18-diyl) - di (propanohydrazide), prepared analogously to H. Fischer, E. Haarer and F. Stadler, Z.
Physiol. Chem. 241, 209 (1936), und 523,5 mg (2 mmol) Kupfer(II)-acetylacetonat werden in 150 ml Essigsäure/ 100 ml Chloroform 5 Stunden auf 80°C erhitzt. Dann wird im Vakuum eingedampft, der Rückstand in Wasser aufgeschlämmt, abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Das getrocknete Rohprodukt wird aus Pyridin/ Diethyl- ether umkristallisiert.Physiol. Chem. 241, 209 (1936), and 523.5 mg (2 mmol) copper (II) acetylacetonate are heated in 150 ml acetic acid / 100 ml chloroform at 80 ° C for 5 hours. Then it is evaporated in vacuo, the residue is slurried in water, filtered off and washed with water. The dried crude product is recrystallized from pyridine / diethyl ether.
Ausbeute: 1,19 g (91 % d. Th.) rotbraunes PulverYield: 1.19 g (91% of theory) of red-brown powder
Elementaranalyse: ber.: C 62,22 H 6,14 N 17,07 Cu 9,68 gefi: C 62,10 H 6,33 N 16,92 Cu 9,51 b) [7, 12-Diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis{3, 6, 18-trioxo-8, 1 1, 14- tris(carboxymethyl)-17-oxa-4, 5, 8, 11, 14-pentaazanonadec-l-yl}-poφhinato (2-)]-KupferElemental analysis: calc .: C 62.22 H 6.14 N 17.07 Cu 9.68 found: C 62.10 H 6.33 N 16.92 Cu 9.51 b) [7, 12-Diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis {3, 6, 18-trioxo-8, 1 1, 14-tris (carboxymethyl) -17-oxa-4 , 5, 8, 11, 14-pentaazanonadec-l-yl} -poφhinato (2 -)] - copper
806,8 mg (2 mmol) 3-Ethoxy-carbonylmethyl-6-[2-(2,6-dioxomoφholino)ethyl]-806.8 mg (2 mmol) 3-ethoxycarbonylmethyl-6- [2- (2,6-dioxomoφholino) ethyl] -
3,6-diaza octandi-säure (DTPA-monoethylester-monoanhydrid) werden in 250 ml absolutem Dimethylformamid suspendiert. Man überschichtet mit Stickstoff, setzt 1 ,01 g (10 mmol) Triethylamin und 656 mg (1 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 4a zu und rührt das resultierende Reaktionsgemisch 3 Tage bei Raumtemperatur. Nach beendeter Reaktion wird filtriert, das Lösungsmittel im3,6-diaza octanedioic acid (DTPA monoethyl ester monoanhydride) are suspended in 250 ml of absolute dimethylformamide. The mixture is covered with nitrogen, 1.01 g (10 mmol) of triethylamine and 656 mg (1 mmol) of the title compound from Example 4a are added, and the resulting reaction mixture is stirred for 3 days at room temperature. After the reaction is filtered, the solvent in
Vakuum abgezogen und das verbleibende Öl mit 500 ml Diethylether verrieben. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und mit Diethylether und n-Hexan gewaschen. Zur Reinigung wird an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Eluens: H2O/Tetrahydrofuran: 0-30 %). Ausbeute: 1,27 g (87 % d. Th.) rotbraunes PulverVacuum removed and the remaining oil triturated with 500 ml of diethyl ether. The precipitated solid is filtered off and washed with diethyl ether and n-hexane. For purification, it is chromatographed on silica gel RP-18 (eluent: H 2 O / tetrahydrofuran: 0-30%). Yield: 1.27 g (87% of theory) of red-brown powder
Wassergehalt: 6,2 %Water content: 6.2%
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 54,18 H 6,20 N 13,40 Cu 4,34 gefi: C 54,02 H 6,31 N 13,29 Cu 4,18Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 54.18 H 6.20 N 13.40 Cu 4.34 found: C 54.02 H 6.31 N 13.29 Cu 4.18
c) [7, 12-Diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis{3, 6, 18-trioxo-8, 11, 14- tris(carboxymethyl)-4, 5, 8, 1 1 , 14-pentaazahexadecanoato}poφhinato (2-)]-Kupferc) [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis {3, 6, 18-trioxo-8, 11, 14-tris (carboxymethyl) -4, 5, 8, 1 1, 14-pentaazahexadecanoato} poφhinato (2 -)] - copper
1 ,24 g (0,848 mmol) des unter Beispiel 4b hergestellten Liganden werden in 400 ml Wasser gelöst. Durch Zugabe von 10 molarer wäßriger Natronlauge wird pH 13 eingestellt und 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach vollzogener Verseifung der Estergruppen wird mit konzentrierter Salzsäure pH 3 eingestellt.1.24 g (0.848 mmol) of the ligand prepared in Example 4b are dissolved in 400 ml of water. The pH is adjusted to 13 by adding 10 molar aqueous sodium hydroxide solution and the mixture is stirred at room temperature for 5 hours. After the ester groups have been saponified, the pH is adjusted to 3 using concentrated hydrochloric acid.
Man dampft im Vakuum zur Trockne ein. Der Rückstand wird an Kieselgel RP 18 chromatographiert (Eluens: H O/Tetrahydrofuran/Gradient). Ausbeute: 1 ,15 g (96 % d. Th.) rotbraunes Pulver Wassergehalt: 4,4 %It is evaporated to the dry state in a vacuum. The residue is chromatographed on silica gel RP 18 (eluent: HO / tetrahydrofuran / gradient). Yield: 1.15 g (96% of theory) of red-brown powder Water content: 4.4%
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 52,93 H 5,87 N 13,94 Cu 4,52 gefi: C 52,83 H 6,04 N 13,85 Cu 4,38Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 52.93 H 5.87 N 13.94 Cu 4.52 found: C 52.83 H 6.04 N 13.85 Cu 4.38
d) {mu-[{ 16, 16'-[Kupfer(II)-7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2,18- diyl]-bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexa- decanoato]}(8-)]}-digadolinato(2-), Dinatriumd) {mu - [{16, 16 '- [copper (II) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoxyrin-2,18-diyl] -bis [3, 6, 9-tris (carboxymethyl) -ll, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8 -)]} - digadolinato (2-), disodium
1,12 g (0,796 mmol) des unter Beispiel 4c hergestellten Liganden werden in 400 ml Wasser gelöst und abwechselnd portionsweise 420 mg (1,59 mmol) Gadoliniumchlorid und 2n wäßrige Natronlauge zugesetzt, so daß der pH-Wert des Reaktions- gemisches stets zwischen 6,8 und 7,2 pendelt. Ist alles Gadoliniumchlorid zugesetzt, wird über Nacht bei Raumtemperatur nachgerührt. Zur Aufarbeitung wird das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen und der Rückstand an Kieselgel RP-18 chromatographiert (Eluens: H2O/Tetrahydrofuran: 0-30 %). Ausbeute: 1 ,37 g (98 % d. Th.) rotbraunes Pulver1.12 g (0.796 mmol) of the ligand prepared in Example 4c are dissolved in 400 ml of water and 420 mg (1.59 mmol) of gadolinium chloride and 2N aqueous sodium hydroxide solution are added in portions, so that the pH of the reaction mixture is always between 6.8 and 7.2 commutes. When all the gadolinium chloride has been added, the mixture is stirred overnight at room temperature. For working up, the solvent is removed in vacuo and the residue is chromatographed on silica gel RP-18 (eluent: H 2 O / tetrahydrofuran: 0-30%). Yield: 1.37 g (98% of theory) of red-brown powder
Wassergehalt: 7,6 %Water content: 7.6%
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 42,32 H 4,24 N 1 1,15 Gd 17,88 Cu 3,61 Na 2,61 gefi: C 42,18 H 4,38 N 1 1,09 Gd 17,70 Cu 3,48 Na 2,47Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 42.32 H 4.24 N 1 1.15 Gd 17.88 Cu 3.61 Na 2.61 found: C 42.18 H 4.38 N 1 1, 09 Gd 17.70 Cu 3.48 Na 2.47
Beispiel 5Example 5
a) Acetato {7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis[15, 15-dimethyl-3, 6, 13- trioxo-8-(2-{N, N-bis[(t butoxycarbonyl)methyl]amino}-ethyl)-l l -[(t butoxy- carbonyl)-methyl]14-oxa-4, 5, 8, l l-tetraazahexadec-l-yl}-poφhyrinato(3-)a) Acetato {7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-2, 18-bis [15, 15-dimethyl-3, 6, 13-trioxo-8- (2- {N, N- bis [(t butoxycarbonyl) methyl] amino} -ethyl) -ll - [(t butoxycarbonyl) methyl] 14-oxa-4, 5, 8, l l-tetraazahexadec-l-yl} -poφhyrinato (3- )
Mangan 8,31 g (13,45 mmol) 3,9-Bis(t butoxycarbonyl)methyl]-6-carboxymethyl-3,6,9- triazaundecandisäure-di-t.butylester, und 2,09 g (15 mmol) 4-Nitrophenol werden in 60 ml Dimethylformamid gelöst und bei 0°C 5,16 g (25 mmol) N,N'-Dicyclo- hexylcarbodiimid zugegeben. Man rührt 3 Stunden bei 0°C, dann über Nacht bei Raumtemperatur. Zu der so hergestellten Aktivester-Lösung tropft man 2,37 g (3,36 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 2a, (gelöst in 50 ml Pyridin) zu und rührt über Nacht. Man gibt 100 ml einer 5 %igen aqu. Ammoniumchlorid-Lösung zu, dampft im Vakuum zur Trockne ein und chromatographiert den Rückstand an Kieselgel (Laufmittel: Dichlormethan 2-Propanol= 20:1). Ausbeute: 5,25 g (83 % d. Th.) eines dunkelbraunen Feststoffesmanganese 8.31 g (13.45 mmol) 3,9-bis (t-butoxycarbonyl) methyl] -6-carboxymethyl-3,6,9-triazaundecanedioic acid di-t.butyl ester, and 2.09 g (15 mmol) 4 Nitrophenol are dissolved in 60 ml of dimethylformamide and 5.16 g (25 mmol) of N, N'-dicyclohexylcarbodiimide are added at 0.degree. The mixture is stirred for 3 hours at 0 ° C., then overnight at room temperature. 2.37 g (3.36 mmol) of the title compound from Example 2a (dissolved in 50 ml of pyridine) are added dropwise to the active ester solution prepared in this way and the mixture is stirred overnight. 100 ml of a 5% aqu. Ammonium chloride solution, evaporate to dryness in vacuo and chromatograph the residue on silica gel (eluent: dichloromethane 2-propanol = 20: 1). Yield: 5.25 g (83% of theory) of a dark brown solid
Elementaranalyse: ber.: C 59,97 H 7,82 N 10,42 Mn 2,92 Cl 1,88 gefi: C 59,83 H 8,03 N 10,28 Mn 2,83 Cl 1,67Elemental analysis: calc .: C 59.97 H 7.82 N 10.42 Mn 2.92 Cl 1.88 found: C 59.83 H 8.03 N 10.28 Mn 2.83 Cl 1.67
{mu-[Acetatomangan(III)-{ 13, 13 '-[7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl- poφhyrin-2, 18-diyl]-bis{3-carboxymethyl-6-(2-{N, N-bis[(carboxy) methyl] amino}ethyl)-8, l l-dioxo-3, 6, 9, 10-tetraazatridecanoato]}(8-)]}digadolinato(2-),{mu- [acetatomangan (III) - {13, 13 '- [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-poφhyrin-2, 18-diyl] -bis {3-carboxymethyl-6- ( 2- {N, N-bis [(carboxy) methyl] amino} ethyl) -8, l l-dioxo-3, 6, 9, 10-tetraazatridecanoato]} (8 -)]} digadolinato (2-),
DinatriumDisodium
5,25 g (2,79 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 5a werden in 100 ml Trifluor- essigsäure gelöst und 8 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein. Der so erhaltene Ligand wird in 100 ml Wasser gelöst und5.25 g (2.79 mmol) of the title compound from Example 5a are dissolved in 100 ml of trifluoroacetic acid and stirred for 8 hours at room temperature. It is evaporated to the dry state in a vacuum. The ligand thus obtained is dissolved in 100 ml of water and
1,01 g (2,79 mmol) Gadoliniumoxid zugegeben. Man rührt bei 60 °C und hält durch Zugabe von 1 N aqu. Natronlauge den pH- Wert bei 5. Die Lösung wird filtriert und das Filtrat mit 1 N aqu. Natronlauge auf pH 7,2 gestellt. Anschließend wird an RP 18 chromatographiert (Laufmittel: Gradient aus Wasser/ Acetonitril). Ausbeute: 4,63 g (93 % d. Th.) eines braunen, amoφhen Feststoffes1.01 g (2.79 mmol) of gadolinium oxide was added. The mixture is stirred at 60.degree. C. and held by adding 1N aqu. Sodium hydroxide solution the pH at 5. The solution is filtered and the filtrate with 1 N aqu. Sodium hydroxide solution adjusted to pH 7.2. Then it is chromatographed on RP 18 (mobile phase: gradient from water / acetonitrile). Yield: 4.63 g (93% of theory) of a brown, amorphous solid
Wassergehalt: 9,2 %Water content: 9.2%
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 41,69 H 4,18 N 10,98 Mn 3,08 Cl 1,98 Gd 17,61 Na 2,57 gefi: C 41,54 H 4,35 N 10,82 Mn 2,91 Cl 1,85 Gd 17,45 Na 2,34Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 41.69 H 4.18 N 10.98 Mn 3.08 Cl 1.98 Gd 17.61 Na 2.57 found: C 41.54 H 4.35 N 10.82 Mn 2.91 Cl 1.85 Gd 17.45 Na 2.34
Beispiel 6Example 6
a) { 10, 10'-(my-Acetatomangan(III)-{ 10, 10'-(7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl- poφhyrin-2, 18-diyl)bis[(lRS)-l-methyl-2, 5, 8-trioxo-3, 6, 7-triaza-dec-l-yl]}) bis[l, 4, 7, 10-tetraazacyclododecan-l, 4, 7-triacetato(3-)]}digadoliniuma) {10, 10 '- (my-Acetatomangan (III) - {10, 10' - (7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethyl-poφhyrin-2, 18-diyl) bis [( lRS) -l-methyl-2, 5, 8-trioxo-3, 6, 7-triaza-dec-l-yl]}) to [l, 4, 7, 10-tetraazacyclododecan-l, 4, 7-triacetato (3 -)]} digadolinium
8,47 g (13,45 mmol) des Gd-Komplexes der 10-(4-Carboxy-2-oxo-3-aza-l-methyl- butyl)-l ,4,7,10-tetraazacyclododecan-l,4,7-triessigsäure, 0,64 g Lithiumchlorid (15 mmol) und 2,09 g (15 mmol) 4-Nitrophenol werden in 100 ml Dimethylsulfoxid bei 50°C gelöst. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur werden 5,16 g (25 mmol) N,N'Dicyclohexylcarbodiimid zugesetzt und 12 Stunden voraktiviert. Zu der so hergestellten Lösung gibt man 2,37 g (3,36 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 2a 0,71 g (7 mmol) Triethylamin und rührt über Nacht bei Raumtemperatur. Die erhaltene Suspension wird anschließend mit ausreichend Aceton bis zur vollständigen Fällung versetzt, der Niederschlag abgesaugt, getrocknet, in Wasser aufgenommen, von unlöslichem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und das Filtrat an8.47 g (13.45 mmol) of the Gd complex of 10- (4-carboxy-2-oxo-3-aza-1-methylbutyl) -l, 4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4 , 7-triacetic acid, 0.64 g of lithium chloride (15 mmol) and 2.09 g (15 mmol) of 4-nitrophenol are dissolved in 100 ml of dimethyl sulfoxide at 50 ° C. After cooling to room temperature, 5.16 g (25 mmol) of N, N'Dicyclohexylcarbodiimide are added and preactivated for 12 hours. 2.37 g (3.36 mmol) of the title compound from Example 2a, 0.71 g (7 mmol) of triethylamine are added to the solution thus prepared and the mixture is stirred overnight at room temperature. Sufficient acetone is then added to the suspension obtained until precipitation is complete, the precipitate is filtered off with suction, dried, taken up in water, filtered off from insoluble dicyclohexylurea and the filtrate is filtered off
RP 18 chromatographiert (Laufmittel: Gradient aus Tetrahydrofuran/W asser). Ausbeute: 5,06 g (79 % d. Th.) eines dunkelbraunen amoφhen Pulvers Wassergehalt: 8,3 %RP 18 chromatographed (eluent: gradient made of tetrahydrofuran / water). Yield: 5.06 g (79% of theory) of a dark brown amorphous powder. Water content: 8.3%.
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 45,36 H 5,08 N 13,22 Gd 16,50 Mn 2,88 Cl 1,86 gefi: C 45,24 H 5,21 N 13,13 Gd 16,38 Mn 2,71 Cl 1,72 Beispiel 7Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 45.36 H 5.08 N 13.22 Gd 16.50 Mn 2.88 Cl 1.86 found: C 45.24 H 5.21 N 13.13 Gd 16.38 Mn 2.71 Cl 1.72 Example 7
a) Konjugat aus Acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18- dipropionylhydrazinato (2-)- K N21, K N22, K N23, K N24]-Eisen und dem 10-[7- (4-Isothiocyanatophenyl)-2-hydroxy-5-oxo-7-(carboxymethyl)-4-aza-heptyl)]-l,4,7- tris(carboxylatomethyl)- 1 ,4,7-tris(carboxylatomethyl)- 1,4,7,10-tetraaza- cyclododecan, Gadoliniumkomplex, Natriumsalza) Conjugate of acetato [7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2, 18-dipropionylhydrazinato (2 -) - K N21, K N22, K N23, K N24] iron and the 10- [7- (4-isothiocyanatophenyl) -2-hydroxy-5-oxo-7- (carboxymethyl) -4-aza-heptyl)] - l, 4.7- tris (carboxylatomethyl) - 1, 4,7-tris (carboxylatomethyl) - 1,4,7,10-tetraaza- cyclododecane, gadolinium complex, sodium salt
{ 10,10'-{my-Chloroeisen(III){10,10'-[(7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpor- phyrin-2, 18-diyl)bis{(l-oxopropan-3, l-diyl)hydrazino-thiocarbonylamino-4, 1 - phenylen[(3RS)-3-carboxymethyl-l-oxopropan-3, l-diyl]amino(2-hydroxypropan-3, l-diyl)}]}bis[l, 4, 7, 10-tetraazacyclododecan-l, 4, 7-triacetato (4-)]}digadolinium, Dinatrium){10,10 ' - {my-chloro-iron (III) {10,10' - [(7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylporphyrin-2, 18-diyl) to {(l- oxopropane-3, l-diyl) hydrazino-thiocarbonylamino-4, 1 - phenylene [(3RS) -3-carboxymethyl-l-oxopropane-3, l-diyl] amino (2-hydroxypropan-3, l-diyl)}] } bis [l, 4, 7, 10-tetraazacyclododecan-l, 4, 7-triacetato (4 -)]} digadolinium, disodium)
Zu 708 mg (1 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel la und 1806 mg (2,2 mmol) in 50 ml Wasser gibt man 1,01 g (10 mmol) Triethylamin und rührt 12 Stunden bei1.01 g (10 mmol) of triethylamine are added to 708 mg (1 mmol) of the title compound from Example Ia and 1806 mg (2.2 mmol) in 50 ml of water, and the mixture is stirred for 12 hours
Raumtemperatur. Man dampft im Vakuum zur Trockne ein und chromatographiert an Kieselgel (Laufmittel: Methanol/W asser/Eisessig= 10/5/1). Die produkthaltigen Fraktionen werden zur Trockne eingedampft, der Rückstand in 100 ml Wasser gelöst und mit 2 N Natronlauge auf pH 7,2 gestellt. Anschließend wird gefriergetrocknet.Room temperature. It is evaporated to the dry state in a vacuum and chromatographed on silica gel (mobile solvent: methanol / water / glacial acetic acid = 10/5/1). The product-containing fractions are evaporated to dryness, the residue is dissolved in 100 ml of water and adjusted to pH 7.2 with 2 N sodium hydroxide solution. It is then freeze-dried.
Ausbeute: 2,11 g (92 % d. Th.) eines dunkelbraunen, amoφhen Pulvers Wassergehalt: 8,5 %Yield: 2.11 g (92% of theory) of a dark brown, amorphous powder. Water content: 8.5%.
Elementaranalyse (berechnet auf wasserfreie Substanz): ber.: C 44,95 H 5,09 N 12,19 Cl 1,54 Fe 2,43 S 2,79 Gd 13,69 Na 2,00 gefi: C 44,83 H 5,19 N 12,03 Cl 1,38 Fe 2,38 S 2,58 Gd 13,48 Na 1,78Elemental analysis (calculated on anhydrous substance): calc .: C 44.95 H 5.09 N 12.19 Cl 1.54 Fe 2.43 S 2.79 Gd 13.69 Na 2.00 found: C 44.83 H 5.19 N 12.03 Cl 1.38 Fe 2.38 S 2.58 Gd 13.48 Na 1.78
Beispiel 8Example 8
Herstellung einer Formulierung des {mu-[{ 16, 16'-[Chloroeisen (III)-7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18-diyl]-bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]}(8-)]}-digadolinato(2-), Dinatrium (Zusatz von Mannitol)Preparation of a formulation of the {mu - [{16, 16 '- [chloro-iron (III) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2, 18-diyl] -bis [3, 6, 9 -tris (carboxymethyl) -ll, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8 -)]} - digadolinato (2-), disodium (addition of mannitol)
50 mmol der Titelverbindung aus Beispiel ld, 10 mmol Tris-Puffer (Tris(hydroxy- methyl)aminomethan Salzsäure pH 7,4) und 120 mmol Mannitol werden in 500 ml bidestiUiertem Wasser gelöst und im Meßkolben mit Wasser auf 1 1 Volumen aufgefüllt. Die so erhaltene Lösung wird über eine 0,2 μm Membran filtriert und in Vials abgefüllt. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für die NMR-Diagnostik verwendet werden.50 mmol of the title compound from Example 1d, 10 mmol of Tris buffer (tris (hydroxymethyl) aminomethane hydrochloric acid pH 7.4) and 120 mmol of mannitol are dissolved in 500 ml of bidistilled water and made up to 1 1 volume in the volumetric flask. The solution thus obtained is filtered through a 0.2 μm membrane and filled into vials. A solution prepared in this way can be used directly for NMR diagnostics.
Beispiel 9Example 9
Herstellung einer Formulierung des {mu-[{ 16, 16'-[Chloromangan(III)-7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18-diyl]-bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo- 3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8-)] }-digadolinato(2-), -Dinatrium (Zusatz von Kochsalz)Preparation of a formulation of the {mu - [{16, 16 '- [Chloromangan (III) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpophyrin-2, 18-diyl] -bis [3, 6, 9 -tris (carboxymethyl) -ll, 14-dioxo- 3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8-)]} -digadolinato (2-), -disodium (addition of table salt)
10 mmol der Titelverbindung aus Beispiel 2d, 10 mmol Tris-Puffer (Tris(hydroxy- methyl)aminomethan Salzsäure pH 7,4) und 60 mmol Natriumchlorid werden in 500 ml bidestiUiertem Wasser gelöst und im Meßkolben mit Wasser auf 1 1 Volumen aufgefüllt. Die so erhaltene Lösung wird über eine 0,2 μm Membran filtriert und in Vials abgefüllt. Eine so hergestellte Lösung kann direkt für die NMR-Diagnostik verwendet werden.10 mmol of the title compound from Example 2d, 10 mmol of Tris buffer (tris (hydroxymethyl) aminomethane hydrochloric acid pH 7.4) and 60 mmol of sodium chloride are dissolved in 500 ml of bidistilled water and made up to a volume of 1 liter in the volumetric flask. The solution thus obtained is filtered through a 0.2 μm membrane and filled into vials. A solution prepared in this way can be used directly for NMR diagnostics.
Beispiel 10Example 10
MRI-Experimente an Tieren mit induziertem Myocardinfarkt Das nekroseselektive Enhancement wurde nach einmaliger intravenöser Applikation der Substanz aus Beispiel ld an Tieren mit experimentell erzeugtem Myocardinfarkt im MRI Experiment untersucht. Die Induktion der Herzinfarkte erfolgte an narkotisiertenMRI experiments on animals with induced myocardial infarction The necrosis-selective enhancement was examined after a single intravenous application of the substance from example ld to animals with an experimentally generated myocardial infarction in the MRI experiment. The heart attacks were induced on anesthetized patients
(Domitor®/Dormicum®, i.m.) Ratten (Han.Wistar, Schering SPF, ca.300 g KGW) durch Okklusion der linken Coronararterie. Die Kontrastmittelapplikation (Dosis: 100 μmol Gd / kg KGW) erfolgte ca. 24 h nach der Infarktinduktion. Die Tiere wurden vor und bis 24 h nach KM-Applikation MR-tomographisch (SISCO SIS 85, 2 Tesla; SE- Sequenz, EKG-getriggert, TR: ca. 400 ms, T£. 10 ms, nt=4, ni=256, FOV: 7*7 cm, SD «(Domitor® / Dormicum®, im) rats (Han.Wistar, Schering SPF, approx. 300 g KGW) by occlusion of the left coronary artery. Contrast agent application (dose: 100 μmol Gd / kg body weight) took place approx. 24 h after the infarction induction. The animals were MR-scanned before and up to 24 h after KM application (SISCO SIS 85, 2 Tesla; SE sequence, ECG-triggered, T R : approx. 400 ms, T £ . 10 ms, nt = 4, ni = 256, FOV: 7 * 7 cm, SD «
3 mm, je 1 Schicht axial) untersucht. Ca. 24 h p. i. wurden die Tiere - im MRT - durch eine Narkotikaüberdosis getötet und zusätzlich ein MRI-Experiment am „frischtoten" Tier (— > keine Bewegungsartefakte) durchgeführt. Zur Verifizierung des Infarktes (Größe und Lage) wurde das Herz präpariert, in Scheiben geschnitten und anschließend eine NBT ("Vital-") Färbung durchgeführt. Vor KM-Applikation ist das infarzierte Areal nicht vom „normalen" Myocard zu unterscheiden, da sich beide Areale isointens darstellen (s. Abb.: la). Direkt nach der Substanzapplikation stellt sich der nicht- perfundierte Anteil des Myocards als hypointenses Areal dar (s. Abb.: lb). Ab ca. 30 min p. i. steigt die Signalintensität im nicht-perfundierten Areal etwas an bzw. die Größe des abgegrenzten (Signalarmen) Areals nimmt ab (— > langsame Diffusion in die Nekrose). In der mittleren und v. a. späten Phase (ab 2.5 bis ca. 24 h p. i.) ist ein deutliches Enhancement im nekrotischen Areal des Myocards festzustellen (s. Abb.: lc, d, e). Die Abgrenzung des nekrotischen Areals im MRI-Experiment korreliert sehr gut mit den Ergebnissen der histologischen "Vital"-Färbung.3 mm, each 1 layer axially) examined. Approximately 24 h p. i. the animals were killed by an overdose of anesthetics and an MRI experiment was carried out on the "freshly dead" animal (-> no movement artifacts). To verify the infarction (size and location), the heart was prepared, sliced and then one NBT ("vital") staining carried out before infarction, the infarcted area is indistinguishable from the "normal" myocardium, since both areas are isointense (see Fig .: la). Immediately after the substance application, the non-perfused portion of the myocardium appears as a hypointense area (see Fig .: lb). From approx. 30 min p. i. the signal intensity increases slightly in the non-perfused area or the size of the delimited (low-signal) area decreases (-> slow diffusion into the necrosis). In the middle and v. a. late phase (from 2.5 to approx. 24 h p. i.) there is a clear enhancement in the necrotic area of the myocardium (see Fig .: lc, d, e). The delimitation of the necrotic area in the MRI experiment correlates very well with the results of the histological "vital" staining.
Beispiel 11Example 11
MRI-Experimente an Tieren mit induziertem MyocardinfarktMRI experiments on animals with induced myocardial infarction
Das nekroseselektive Enhancement wurde nach einmaliger intravenöser Applikation der Substanz aus Beispiel 2d an Tieren mit experimentell erzeugtem Myocardinfarkt im MRI Experiment untersucht. Die Induktion der Herzinfarkte erfolgte an narkotisiertenThe necrosis-selective enhancement was investigated in the MRI experiment after a single intravenous application of the substance from Example 2d to animals with an experimentally generated myocardial infarction. The heart attacks were induced on anesthetized patients
(Domitor®/Dormicum®, i.m.) Ratten (Han.Wistar, Schering SPF, ca.300 g KGW) durch Okklusion der linken Coronararterie. Die Kontrastmittelapplikation (Dosis: 100 μmol Gd / kg KGW ) erfolgte ca. 24 h nach der Infarktinduktion. Die Tiere wurden vor und bis 3 h (kontinuierlich) sowie 24 h nach KM-Applikation MR-tomographisch (SISCO SIS 85, 2 Tesla; SE-Sequenz, EKG-getriggert, TR: ca. 400 ms, TE: 10 ms, nt=4, ni=256, FOV: 7*7 cm, SD « 3 mm, je 1 Schicht axial) untersucht. Ca. 24 h p. i. wurden die Tiere - im MRT - durch eine Narkotikaüberdosis getötet und ein MRI-Experiment am „frischtoten" Tier (— > keine Bewegungsartefakte) durchgeführt. Zur Verifizierung des Infarktes (Größe und Lage) wurde das Herz präpariert, in Scheiben geschnitten und anschließend eine NBT (nitro blue tetrazolium chlorid) Färbung durchgeführt. Vor KM- Applikation ist das infarzierte Areal nicht vom „normalen" Myocard zu unterscheiden, da sich beide Areale isointens darstellen (s. Abb.: 2a). Direkt nach der(Domitor® / Dormicum®, im) rats (Han.Wistar, Schering SPF, approx. 300 g KGW) by occlusion of the left coronary artery. The contrast agent application (dose: 100 μmol Gd / kg body weight) took place approx. 24 h after the infarction induction. The animals were MR-imaged before and up to 3 h (continuously) and 24 h after KM application (SISCO SIS 85, 2 Tesla; SE sequence, ECG-triggered, T R : approx. 400 ms, T E : 10 ms , nt = 4, ni = 256, FOV: 7 * 7 cm, SD «3 mm, 1 layer each axially) examined. Approximately The animals were killed 24 hours a day by an overdose of anesthetics and an MRI experiment was carried out on the “freshly dead” animal (-> no movement artifacts). To verify the infarction (size and location), the heart was prepared, sliced and then NBT (nitro blue tetrazolium chloride) staining is carried out. The infarcted area cannot be distinguished from the "normal" myocardium before KM application, since both areas are isointense (see Fig .: 2a). Right after the
Substanzapplikation stellt sich der nicht-perfundierte Anteil des Myocards als hypointenses Areal dar (s. Abb.: 2b). Ab ca. 30 min p. i. steigt die Signalintensität im nicht-perfundierten Areal etwas an bzw. die Größe des abgegrenzten (Signalarmen) Areals nimmt ab (--> langsame Diffusion in die Nekrose). In der mittleren und v. a. späten Phase (ab 2.5 bis ca. 24 h p. i.) ist ein deutliches Enhancement im nekrotischen Areal des Myocards festzustellen (s. Abb.: 2c, 2d). Die Abgrenzung des nekrotischen Areals im MRI-Experiment korreliert sehr gut mit den Ergebnissen der histologischen NBT ("Vital"-) Färbung.For substance application, the non-perfused portion of the myocardium presents itself as a hypointense area (see Fig .: 2b). From approx. 30 min p. i. the signal intensity increases slightly in the non-perfused area or the size of the delimited (low-signal) area decreases (-> slow diffusion into the necrosis). In the middle and v. a. late phase (from 2.5 to approx. 24 h p. i.) there is a clear enhancement in the necrotic area of the myocardium (see Fig. 2c, 2d). The delimitation of the necrotic area in the MRI experiment correlates very well with the results of the histological NBT ("vital") staining.
Beispiel 12Example 12
MRI-Experimente an Tieren mit induziertem MyocardinfarktMRI experiments on animals with induced myocardial infarction
Das nekroseselektive Enhancement wurde nach einmaliger intravenöser Applikation der Substanz aus Beispiel 4d an Tieren mit experimentell erzeugtem Myocardinfarkt im MRI Experiment untersucht. Die Induktion der Herzinfarkte erfolgte an narkotisiertenAfter a single intravenous application of the substance from Example 4d, necrosis-selective enhancement was examined in animals with experimentally generated myocardial infarction in the MRI experiment. The heart attacks were induced on anesthetized patients
(Domitor®/Dormicum®, i. m.) Ratten (Han. Wistar, Schering SPF, ca. 300 g KGW) durch Okklusion der linken Coronararterie. Die Kontrastmittelapplikation (Dosis: 100 μmol Gd / kg KGW) erfolgte ca. 24 h nach der Infarktinduktion. Die Tiere wurden vor und bis 3 h (kontinuierlich) sowie 24 h nach KM-Applikation MR-tomographisch (SISCO SIS 85, 2 Tesla; SE-Sequenz, EKG-getriggert, TR: ca. 400 ms, T£: 10 ms, nt=4, ni=256, FOV: 7*7 cm, SD « 3 mm, je 1 Schicht axial) untersucht. Ca. 24 h p. i. wurden die Tiere - im MRT - durch eine Narkotikaüberdosis getötet und ein MRI-Experiment am „frischtoten" Tier (--> keine Bewegungsartefakte) durchgeführt. Zur Verifizierung des Infarktes (Größe und Lage) wurde das Herz präpariert, in Scheiben geschnitten und anschließend eine NBT (nitro blue tetrazolium chlorid) Färbung durchgeführt. Vor KM- Applikation ist das infarzierte Areal nicht vom „normalen" Myocard zu unterscheiden, da sich beide Areale isointens darstellen (s. Abb.: 3a). Direkt nach der(Domitor® / Dormicum®, in) rats (Han. Wistar, Schering SPF, approx. 300 g KGW) by occlusion of the left coronary artery. The contrast agent application (dose: 100 μmol Gd / kg body weight) took place approx. 24 h after the infarction induction. The animals were subjected to MR tomography before and up to 3 h (continuously) and 24 h after KM application (SISCO SIS 85, 2 Tesla; SE sequence, ECG-triggered, T R : approx. 400 ms, T £ : 10 ms , nt = 4, ni = 256, FOV: 7 * 7 cm, SD «3 mm, 1 layer each axially) examined. Approximately The animals were killed 24 hours a day by an overdose of anesthetics and an MRI experiment was carried out on the "freshly dead" animal (-> no movement artifacts). To verify the infarction (size and location), the heart was prepared and cut into slices and then an NBT (nitro blue tetrazolium chloride) staining. Before the KM application, the infarcted area cannot be distinguished from the "normal" myocardium, since both areas are iso-intense (see Fig. 3a). Right after the
Substanzapplikation stellt sich der nicht-perfundierte Anteil des Myocards als hypointenses Areal dar (s. Abb.: 3b). Ab ca. 30 min p. i. steigt die Signalintensität im nicht-perfundierten Areal etwas an bzw. die Größe des abgegrenzten (signalarmen) Areals nimmt ab (— > langsame Diffusion in die Nekrose). In der mittleren und v. a. späten Phase (ab 2.5 bis ca. 24 h p. i.) ist ein deutliches Enhancement im nekrotischen Areal des Myocards festzustellen (s. Abb.: 3c, 3d). Die Abgrenzung des nekrotischen Areals im MRI-Experiment korreliert sehr gut mit den Ergebnissen der histologischen NBT ("Vital"-) Färbung.The non-perfused portion of the myocardium is shown as a hypointense area for substance application (see Fig. 3b). From approx. 30 min p. i. the signal intensity increases slightly in the non-perfused area or the size of the delimited (low-signal) area decreases (-> slow diffusion into the necrosis). In the middle and v. a. late phase (from 2.5 to approx. 24 h p. i.) there is a clear enhancement in the necrotic area of the myocardium (see Fig. 3c, 3d). The delimitation of the necrotic area in the MRI experiment correlates very well with the results of the histological NBT ("vital") staining.
Beispiel 13Example 13
Einwirkung von Licht (ED50) auf eine Tumorzellkultur in Gegenwart von PoφhyrinenExposure to light (ED 50 ) on a tumor cell culture in the presence of polyphyrins
In Kulturflaschen von 25 ml Inhalt wird eine Zellkultur von humanem Coloncarcinom (HT-29 P9) 3 Tage bei 37°C vermehrt. Die Kulturen werden in zwei Grupen aufgeteilt und mit Lösungen der Prüfsubstanzen (50 mmol Poφhyrineinheit (PE) /l, verdünnt mit fötalem Kälberserum) in zunehmender Menge (0; 1,5; 5; 8,5; 12; 15,5; 19 μmol PE/1) versetzt. Die Proben werden drei Tage lang mit einer Xenon-Lampe (8,5 k Lux, UV- Filter) bestrahlt. Die erste Gruppe erhält täglich 2 Bestrahlungen von je 30 Minuten Dauer im Abstand von 4 Stunden. Die restliche Zeit bleibt sie im Dunkeln imA culture of human colon carcinoma (HT-29 P9) is grown in culture bottles of 25 ml for 3 days at 37 ° C. The cultures are divided into two groups and with solutions of the test substances (50 mmol polyphyrin unit (PE) / l, diluted with fetal calf serum) in increasing amounts (0; 1.5; 5; 8.5; 12; 15.5; 19 μmol PE / 1) added. The samples are irradiated for three days with a xenon lamp (8.5 k lux, UV filter). The first group receives 2 treatments of 30 minutes each, every 4 hours. The rest of the time she stays in the dark
Brutschrank. Die zweite Gruppe wird nicht belichtet und bleibt die gesamte Zeit im Dunkeln im Brutschrank. Am vierten Tag wird das Zellwachstum durch Lebend-Tot- Färbung und Zählung mit der Zählkammer bestimmt. In der Tabelle ist die Konzentration angegeben, bei der etwa die Hälfte der Zellen nicht mehr vital ist.Incubator. The second group is not exposed and remains in the incubator all the time in the dark. On the fourth day, cell growth is determined by living-dead staining and counting with the counting chamber. The table shows the concentration at which about half of the cells are no longer vital.
I Verbindung aus Beispiel ldI compound from example ld
II Verbindung aus Beispiel 2dII compound from Example 2d
III Verbindung aus Beispiel 4dIII Compound from Example 4d
IV Verbindung aus Beispiel lc, DE 423 2925IV compound from Example 1c, DE 423 2925
IV: des {mu-[{ 16, 16'-(7, 12-Diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18-diyl]- bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13- pentaazahexadecanoato] } (8-)] } -digadolinato(2-),-DinatriumIV: des {mu - [{16, 16 '- (7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoxyrin-2, 18-diyl] - to [3, 6, 9-tris (carboxymethyl) - ll, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8-)]} -digadolinato (2 -), - disodium
Beispiel 14Example 14
Bestimmung der Verträglichkeit der Titelverbindung aus Beispiel 2dDetermination of the compatibility of the title compound from Example 2d
Es soll die Akute Verträglichkeit der Titelverbindung aus Beispiel 2d nach einmaliger intravenöser Gabe an der Maus untersucht werden.The acute tolerance of the title compound from Example 2d after a single intravenous administration to the mouse is to be examined.
Versuch:Attempt:
Testmethode: Methode KM D 1 , 5. AuflageTest method: Method KM D 1, 5th edition
Tiermaterial: SPF-Mäuse (NMRI, Schering), 18-22 g, fim = 50:50Animal material: SPF mice (NMRI, Schering), 18-22 g, fim = 50:50
Injektionsgeschwindigkeit: 2 ml/min.Injection rate: 2 ml / min.
Kriterium der Wirksamkeit: exitus letalisEffectiveness criterion: exitus letalis
Beobachtungszeitraum: 7 Tage Die Lebern und Nieren aller überlebenden Tiere waren unauffällig. Es ist eine LD50 [mmol Gd/kg] von > 5 zu erwarten.Observation period: 7 days The livers and kidneys of all surviving animals were normal. An LD50 [mmol Gd / kg] of> 5 is expected.
Beispiel 15Example 15
Bestimmung der Relaxivity Rl [L-mmof -i -s „-"1 - ] Gerät: Minispec PC 20 Messung bei 40°C; 0,47 Tesla Tl-Sequenz: 180°-TI-90°, Inversion RecoveryDetermination of the relaxivity Rl [L-mmof -i -s "- " 1 -] Device: Minispec PC 20 measurement at 40 ° C; 0.47 Tesla Tl sequence: 180 ° -TI-90 °, inversion recovery
Beispiel 16Example 16
In-vivo-Vergleich, Titelverbindung aus Beispiel ld mit Dy-DTPA hinsichtlich der BlutkinetikIn vivo comparison, title compound from Example ld with Dy-DTPA with regard to blood kinetics
Als Versuchstiere dienten drei 250 g schwere, männliche (Schering-SPF-) Ratten. Je Tier wurden 0.5 ml eines Kontrastmittel-Gemisches aus der Verbindung aus Beispiel ld (45 mmol Gd/1), im folgenden Verbindung 1 genannt, und dem Dysprosium-Komplex der (Dy-DTPA, 57 mmol Dy/1), im folgenden Verbindung 2 genannt, intravenös appliziert. Die dadurch applizierte Dosis betrug 82 μmol Gd/kg (Verbindung 1), bzw. 103 μmol Dy/kg (Verbindung 2). Über einen Katheter in der Arteria carotis communis wurden Blutproben zu folgenden Zeitpunkten entnommen: 1, 3, 5, 10, 15, 20, 30, 45, 60, 90, 120 min p.i. In den gewonnenen Blutproben wurden jeweils parallel die Konzentrationen an Gadolinium (Gd) und Dysprosium (Dy) mittelsThree 250 g male (Schering-SPF) rats were used as test animals. For each animal, 0.5 ml of a contrast medium mixture of the compound from Example 1d (45 mmol Gd / 1), hereinafter referred to as compound 1, and the dysprosium complex of (Dy-DTPA, 57 mmol Dy / 1), hereinafter referred to as compound Called 2, intravenously applied. The dose applied in this way was 82 μmol Gd / kg (compound 1) or 103 μmol Dy / kg (compound 2). Blood samples were taken via a catheter in the common carotid artery at the following times: 1, 3, 5, 10, 15, 20, 30, 45, 60, 90, 120 min pi In each case, the concentrations of gadolinium ( Gd) and Dysprosium (Dy) by means of
Atomemissionsspektrometrie (ICP-AES) gemessen. Der im Blutraum verbliebene Anteil der injizierten Kontrastmittel Verbindung 1 (Gd) und Verbindung 2 (Dy, Vergleichssubstanz) kann durch die unterschiedliche Markierung im gleichen Tier verglichen werden. Aus den Blut- bzw. Plasmakonzentrationen kann mittels spezieller Software (Topfit-Programm) die α-t Vz und ß- 1 V≥ Eliminations-Halbwertzeiten, das Verteilungsvolumen sowie die total Clearance für Blut und Plasma errechnet werden. Damit liefern diese Daten Angaben über den Verbleib der Verbindungen im Intravasalraum, die Verteilungsverhältnisse im Organismus und die Eliminierung.Atomic emission spectrometry (ICP-AES) measured. The proportion of the injected contrast medium compound 1 (Gd) and compound 2 (Dy, reference substance) remaining in the blood space can be compared by the different labeling in the same animal. The α-t Vz and ß- 1 V≥ elimination half-lives, the volume of distribution and the total clearance for blood and plasma can be calculated from the blood or plasma concentrations using special software (Topfit program). These data thus provide information about the whereabouts of the compounds in the intravascular space, the distribution relationships in the organism and the elimination.
Ergebnisse: Die Bluteliminationskinetik von Verbindung 1 unterscheidet sich deutlich von der des extrazellulären Kontrastmittel (Verbindung 2) (siehe Abb. 4, Tab. 1). Die Blutkonzentrationen liegen nach drei Minuten noch bei 56-63 % der Dosis und nach 120 min bei 22-25 % der Dosis. Die Ausscheidung/Diffusion ins Gewebe ist deutlich verlangsamt ( -Halbwertzeit 173 min). Das Verteilungsvolumen und die TotalResults: The blood elimination kinetics of compound 1 differ significantly from that of the extracellular contrast medium (compound 2) (see Fig. 4, Tab. 1). Blood concentrations are still 56-63% of the dose after three minutes and 22-25% of the dose after 120 minutes. The excretion / diffusion into the tissue is significantly slowed down (half-life 173 min). The volume of distribution and the total
Clearance sind ebenfalls deutlich kleiner verglichen zum Dy-DTPA, d.h. Verbindung 1 verteilt sich nicht wie Verbindung 2 im Intravasalraum (Gefäße) und im Extrazellularraum, sondern größtenteils nur im Intravasalraum (Blood-Pool-Eigenschaften dieses Poφhyrins). Clearances are also significantly smaller compared to Dy-DTPA, ie compound 1 does not distribute like compound 2 in the intravascular space (vessels) and in the extracellular space, but mostly only in the intravascular space (blood pool properties of this phyrin).
Die lange Blutverweildauer von Verbindung 1 deutet auf eine sehr hohe Plasmaproteinbindung. Damit verfügt die im Beispiel beschriebene Verbindung über die Erfordernisse an ein blood-pool-agent.The long blood retention time of compound 1 indicates a very high level of plasma protein binding. The connection described in the example thus has the requirements for a blood pool agent.
Tab.1 : Pharmakokinetische Parameter (Plasma), sowie Eliminationshalbwertzeiten von Verbindung 1 im Vergleich zu Verbindung 2 in Ratten (n=3). Tab. 1: Pharmacokinetic parameters (plasma) and elimination half-lives of compound 1 compared to compound 2 in rats (n = 3).

Claims

Patentansprücheclaims
Verwendung von mindestens einem Poφhyrin-Komplex bestehend aus einemUse of at least one Poφhyrin complex consisting of one
Liganden der allgemeinen Formel ILigands of the general formula I
sowie mindestens einem Ion eines Elementes der Ordnungszahl 20-32, 37-39, 42-51 oder 57-83, worin M für ein paramagnetisches Ion,and at least one ion of an element of atomic number 20-32, 37-39, 42-51 or 57-83, where M is a paramagnetic ion,
Rl für ein Wasserstoffatom, für einen geradkettigen Ci-Cg-Alkylrest, einen C7-C12- Aralkylrest oder für eine Gruppe OR' worin R' ein Wasserstoffatom oder ein Cι-C3-Alkylrest ist, steht,Rl represents a hydrogen atom, a straight-chain Ci-Cg-alkyl radical, a C7-C12-aralkyl radical or a group OR 'in which R' is a hydrogen atom or a -C-C3-alkyl radical,
R2 für R^, eine Gruppe -CO-Z oder eine Gruppe -(NH)0-(A)q-NH-D steht, worinR2 represents R ^, a group -CO-Z or a group - (NH) 0 - (A) q-NH-D, in which
Z eine Gruppe -OL ist, mit L in der Bedeutung eines anorganischen oder organischen Kations oder eines Cj-C/i-Alkylrestes ist,Z is a group -OL, with L being an inorganic or organic cation or a Cj-C / i-alkyl radical,
A eine Phenylenoxy- oder eine durch ein oder mehrere Sauerstoffatome unterbrochene Cj-C^-Alkylen- oder C7-C12 Aralkylengruppe bedeutet, o und q unabhängig voneinander die Ziffern 0 oder 1 bedeuten undA represents a phenyleneoxy group or a C 1 -C 4 -alkylene or C 7 -C 12 aralkylene group which is interrupted by one or more oxygen atoms, o and q independently of one another represent the digits 0 or 1 and
D ein Wasserstoffatom oder eine Gruppe -CO-A-(COOL)0-(H)m bedeutet, mit m gleich 0 oder 1 und unter der Maßgabe, daß die Summe aus m und o gleich 1 ist, eine Gruppe -(C=Q)(NR4)0-(A)q-(NR5)-K steht, worin Q für ein Sauerstoff atom oder für zwei Wasserstoffatome steht,D represents a hydrogen atom or a group -CO-A- (COOL) 0 - (H) m , with m equal to 0 or 1 and, provided that the sum of m and o is 1, a group - (C = Q) (NR 4 ) 0 - (A) q - (NR 5 ) -K, in which Q represents one oxygen atom or two hydrogen atoms,
R4 eine Gruppe -(A)q-H bedeutet undR 4 represents a group - (A) qH and
K einen Komplexbildner der allgemeinen Formel (Ila), (Ilb), (IIc), (Ild) oderK is a complexing agent of the general formula (Ila), (Ilb), (IIc), (Ild) or
(Ile) bedeutet, wobei R^ für den Fall, daß K ein Komplexbildner der Formel (Ila) ist die gleiche Bedeutung wie R4 hat und R^ für den Fall, daß K ein(Ile) means, where R ^ for the case that K is a complexing agent of the formula (Ila) has the same meaning as R 4 and R ^ for the case that K is a
Komplexbildner der Formel (Ilb), (IIc), (Ild) oder (Ile) ist, die gleicheComplexing agent of formula (Ilb), (IIc), (Ild) or (Ile) is the same
Bedeutung wie D hat, mit der Maßgabe, daß eine direkte Sauerstoff-Stickstoff Bindung nicht zugelassen ist, und K für einen Komplexbildner der allgemeinen Formel (Ila), (Ilb), (IIc), (Ild),Has the same meaning as D, with the proviso that a direct oxygen-nitrogen bond is not permitted, and K for a complexing agent of the general formula (Ila), (Ilb), (IIc), (Ild),
(Ile) oder (Ilf)(Ile) or (Ilf)
(Ila)(Ila)
(Ild), (Ild),
(Ile),(Ile),
steht, worin q die oben angegebene Bedeutung hat,where q has the meaning given above,
A1 die für A angegebene Bedeutung hat,A 1 has the meaning given for A,
R6 für ein Wasserstoffatom, eine geradkettige oder verzweigte Ci- C -R 6 represents a hydrogen atom, a straight-chain or branched CiC -
Alkylgruppe, eine Phenyl- oder Benzylgruppe,Alkyl group, a phenyl or benzyl group,
A2 für eine Phenylen-, -CH2-NHCO-CH2-CH (CH2COOH) -C6H4-ß-, -C6H4-O-A 2 for a phenylene, -CH 2 -NHCO-CH 2 -CH (CH 2 COOH) -C 6 H 4 -ß-, -C 6 H 4 -O-
(CH2)o-5-ß, -C6H4-(OCH2CH2)0-, -N(CH2COOH)-CH2-ß oder eine gegebenenfalls durch ein oder mehrere Sauerstoffatome, 1 bis 3-NHCO-, 1 bis 3 -CONH-gruppen unterbrochene und/oder mit 1 bis 3-(CH2)0-5COOH-Gruppen substituierte Cj-Cι2-Alkylen- oder C7-Cj2- Alkylengruppe, wobei ß für die Bindungsstelle an X steht, X für eine -CO- oder NHCS-gruppe und(CH 2 ) o- 5 -ß, -C 6 H 4 - (OCH 2 CH 2 ) 0 -, -N (CH 2 COOH) -CH 2 -ß or one optionally by one or more oxygen atoms, 1 to 3- NHCO, 1 to 3 -CONH groups interrupted and / or with 1 to 3- (CH 2 ) 0 - 5 COOH groups substituted Cj-Cι 2 alkylene or C 7 -Cj 2 alkylene group, where ß stands for the binding site on X, X for a -CO or NHCS group and
L1, L , L^ und L4 unabhängig voneinander für ein Wasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent eines Elements der oben genannten Ordnungszahl steht, unter den Maßgaben, daß mindestens zwei dieser Substituenten für Metallionenäquivalente stehen, und daß zum Ausgleich gegebenenfalls vorhandener Ladungen im Metallopoφhyrin weitere Anionen vorhanden sind und worin freie, nicht zur Komplexierung benötigte Carbonsäuregruppen auch als Salze mit physiologisch verträglich anorganischen und/oder organischen Kationen oder als Ester oder als Amide vorliegen können, für die Herstellung von Mitteln für das Nekrose- und Infarkt-MR-Imaging.L 1 , L, L ^ and L 4 independently of one another represent a hydrogen atom or a metal ion equivalent of an element of the abovementioned atomic number, provided that at least two of these substituents are metal ion equivalents and that additional anions are used to balance any charges present in the metallopoφhyrin are present and in which free carboxylic acid groups not required for complexation can also be present as salts with physiologically tolerable inorganic and / or organic cations or as esters or as amides, for the preparation of agents for necrosis and infarct MR imaging.
2. Verwendung von Verbindungen gemäß Formel I von Anspruch 1 für die2. Use of compounds according to formula I of claim 1 for the
Herstellung von MRI-diagnostischen Mitteln für die Therapiekontrolle in der photodynamischen Therapie (PDT).Production of MRI diagnostic agents for therapy control in photodynamic therapy (PDT).
3. Verwendung von Verbindungen der allgemeinen Formel I gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß M für ein Fe3+, Mn3+, Cu2+, Co3+, VO2+, Cr3+ oder3. Use of compounds of general formula I according to claim 1, characterized in that M for an Fe 3+ , Mn 3+ , Cu 2+ , Co 3+ , VO 2+ , Cr 3+ or
Ni2+-Ion steht.Ni 2+ ion stands.
4. Verwendung von Poφhyrin-Komplex -Verbindungen der allgemeinen Formel I gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß R und R jeweils für eine -CONHNHK, -CONH(CH2)2NHK, -CONH(CH2)3NHK, -CONH(CH2)4NHK,4. Use of Poφhyrin complex compounds of general formula I according to claim 1, characterized in that R and R are each for a -CONHNHK, -CONH (CH 2 ) 2 NHK, -CONH (CH 2 ) 3 NHK, -CONH (CH 2 ) 4 NHK,
-CONH(CH2)2O(CH2)2NHK-Gruppe stehen. Poφhyrin-Komplex -Verbindungen, bestehend aus einem Liganden der allgemeinen Formel I-CONH (CH 2 ) 2 O (CH 2 ) 2 NHK group. Poφhyrin complex compounds consisting of a ligand of the general formula I
sowie mindestens einem Ion eines Elementes der Ordnungszahl 20-32, 37-39, 42- 51 oder 57-83, worin M für ein paramagnetisches Ion,and at least one ion of an element of atomic number 20-32, 37-39, 42- 51 or 57-83, where M is a paramagnetic ion,
Rl für ein Wasserstoffatom, für einen geradkettigen Ci -Cö-Alkylrest, einen C7-Rl for a hydrogen atom, for a straight-chain Ci -Cö alkyl radical, a C7-
C12-Aralkylrest oder für eine Gruppe OR' worinC12 aralkyl radical or for a group OR 'wherein
R' ein Wasserstoffatom oder ein Ci -C -Alkylrest ist, steht,R 'is a hydrogen atom or a C 1 -C 4 -alkyl radical,
R2 für R3, eine Gruppe -CO-Z oder eine Gruppe -(NH)0-(A)q-NH-D steht, woπnR 2 stands for R 3 , a group -CO-Z or a group - (NH) 0 - (A) q -NH-D, woπn
Z eine Gruppe -OL ist, mit L in der Bedeutung eines anorganischen oder organischen Kations oder eines C1 -Czj-Alkylrestes ist,Z is a group -OL, with L being an inorganic or organic cation or a C1-Czj-alkyl radical,
A eine Phenylenoxy- oder eine durch ein oder mehrere Sauerstoffatome unterbrochene C1 -Ci2-Alkylen- oder C7-C12 Aralkylengruppe bedeutet, o und q unabhängig voneinander die Ziffern 0 oder 1 bedeuten und D ein Wasserstoffatom oder eine Gruppe -CO-A-(COOL)0-(H)m bedeutet, mit m gleich 0 oder 1 und unter der Maßgabe, daß die Summe aus m und o gleich 1 ist, R3 für eine Gruppe -(C=Q)(NR4)0-(A)q-(NR5)-K steht, worin Q für ein Sauerstoffatom oder für zwei Wasserstoffatome steht,A represents a phenyleneoxy or a C1-Ci2-alkylene or C7-C12 aralkylene group interrupted by one or more oxygen atoms, o and q independently of one another represent the numbers 0 or 1 and D denotes a hydrogen atom or a group -CO-A- (COOL ) 0 - (H) m means with m equal to 0 or 1 and provided that the sum of m and o is 1, R 3 stands for a group - (C = Q) (NR 4 ) 0 - (A) q - (NR 5 ) -K, in which Q stands for one oxygen atom or for two hydrogen atoms,
R4 eine Gruppe -(A)q-H bedeutet undR 4 represents a group - (A) qH and
K einen Komplexbildner der allgemeinen Formel (IIc), (Ild) oder (Ile) bedeutet, wobei R^ die gleiche Bedeutung wie D hat, mit der Maßgabe, daß eine direkte Sauerstoff-Stickstoff Bindung nicht zugelassen ist, und K für einen Komplexbildner der allgemeinen Formel (IIc), (Ild), (Ile) oder (Ilf)K is a complexing agent of the general formula (IIc), (Ild) or (Ile), where R ^ has the same meaning as D, with the proviso that a direct oxygen-nitrogen bond is not permitted, and K for a complexing agent general formula (IIc), (Ild), (Ile) or (Ilf)
COOLCOOL
(Ild), (Ild),
(Ile),(Ile),
worin q die oben angegebene Bedeutung hat, where q has the meaning given above,
A1 die für A angegebene Bedeutung hat,A 1 has the meaning given for A,
R6 für ein Wasserstoffatom, eine geradkettige oder verzweigte Ci- C7-R 6 represents a hydrogen atom, a straight-chain or branched Ci -C 7 -
Alkylgruppe, eine Phenyl- oder Benzylgruppe,Alkyl group, a phenyl or benzyl group,
A2 für eine Phenylen-, -CH2-NHCO-CH2-CH (CH2COOH)-C6H4-ß-, -C6H4-O-A 2 for a phenylene, -CH 2 -NHCO-CH 2 -CH (CH 2 COOH) -C 6 H 4 -ß-, -C 6 H 4 -O-
(CH2)0-5-ß, -C6H4-(OCH2CH2)0-1 -N(CH2COOH)-CH2-ß oder eine gegebenenfalls durch ein oder mehrere Sauerstoffatome, 1 bis 3-NHCO-, 1 bis 3-CONH-gruppen unterbrochene und/oder mit 1 bis 3-(CH2)0-5COOH-Gruppen substituierte Cι-Ci2-Alkylen- oder C7-Cj2-Alkylengruppe, wobei ß für die Bindungsstelle an X steht,(CH 2 ) 0-5 -ß, -C 6 H 4 - (OCH 2 CH 2 ) 0-1 -N (CH 2 COOH) -CH 2 -ß or one optionally by one or more oxygen atoms, 1 to 3- NHCO-, 1 to 3-CONH groups interrupted and / or substituted with 1 to 3- (CH 2 ) 0-5 COOH groups -C-Ci 2 alkylene or C 7 -Cj 2 alkylene group, where ß for the Is at X
X für eine -CO- oder NHCS-gruppe und L1, L\ L3 und L4 unabhängig voneinander für ein Wasserstoffatom oder ein Metallionenäquivalent eines Elements der oben genannten Ordnungszahl steht, unter den Maßgaben, daß mindestens zwei dieser Substituenten für Metallionenäquivalente stehen, und daß zum Ausgleich gegebenenfalls vorhandener Ladungen im Metallopoφhyrin weitere Anionen vorhanden sind und worin freie, nicht zur Komplexierung benötigte Carbonsäuregruppen auch als Salze mit physiologisch verträglich anorganischen und/oder organischen Kationen oder als Ester oder als Amide vorliegen können.X for a -CO or NHCS group and L 1 , L \ L 3 and L 4 independently of one another represent a hydrogen atom or a metal ion equivalent of an element of the above-mentioned atomic number, provided that at least two of these substituents stand for metal ion equivalents and that additional anions are used to balance any charges present in the metallopophyrin are present and in which free carboxylic acid groups not required for complexation can also be present as salts with physiologically compatible inorganic and / or organic cations or as esters or as amides.
6. Komplexverbindungen gemäß Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß A2 für eine -CH2-, -(CH2)2-, -CH2OC6H4-ß, -CH2OCH2-, -C6H4-, -C6H4-OCH2-ß, -C6H4- OCH2CH2-N(CH2COOH)-CH2-ß, CH2-NHCO-CH2-CH(CH2COOH) -C6H4-ß- gruppe steht, wobei ß für die Bindungsstelle an X steht.6. Complex compounds according to claim 5, characterized in that A 2 for a -CH 2 -, - (CH 2 ) 2 -, -CH 2 OC 6 H 4 -ß, -CH 2 OCH 2 -, -C 6 H 4 -, -C 6 H 4 -OCH 2 -ß, -C 6 H 4 - OCH 2 CH 2 -N (CH 2 COOH) -CH 2 -ß, CH 2 -NHCO-CH 2 -CH (CH 2 COOH) -C 6 H 4 -ß- stands, where ß stands for the binding site at X.
7. Komplex- Verbindungen gemäß Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß X für eine CO-Gruppe steht.7. Complex compounds according to claim 5, characterized in that X represents a CO group.
8. Komplex-Verbindungen gemäß Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß R6 für ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe steht.8. Complex compounds according to claim 5, characterized in that R 6 represents a hydrogen atom or a methyl group.
9. Poφhyrin-Komplex- Verbindungen gemäß Formel I von Anspruch 1, nämlich {mu-[{ 16, 16'-[Chloromangan(III)-7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin- 2, 18-diyl]-bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13- pentaazahexadecanoato] } (8-)] } digadolinato(2-), -Dinatrium, {mu[{ 16, 16'-[Chloroeisen(III)-7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2,9. Poφhyrin complex compounds according to formula I of claim 1, namely {mu - [{16, 16 '- [Chloromangan (III) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin- 2, 18 -diyl] -bis [3, 6, 9-tris (carboxymethyl) -ll, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8-)]} digadolinato (2-), -disodium , {mu [{16, 16 '- [chloro-iron (III) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylphosphyrin-2,
18-diyl]-bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13- pentaazahexadecanoato] } (8-)] } -digadolinato(2-),-Dinatrium, {mu[{ 16, 16'-[Kupfer(II)-7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoφhyrin-2, 18- diyl]-bis[3, 6, 9-tris(carboxymethyl)-l l, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13- pentaazahexadecanoato] } (8-)] } -digadolinato(2-),-Dinatrium 18-diyl] -bis [3, 6, 9-tris (carboxymethyl) -ll, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8-)]} -digadolinato (2-), -Disodium, {mu [{16, 16 '- [copper (II) -7, 12-diethyl-3, 8, 13, 17-tetramethylpoxyrin-2, 18-diyl] -bis [3, 6, 9-tris (carboxymethyl) -ll, 14-dioxo-3, 6, 9, 12, 13-pentaazahexadecanoato]} (8-)]} -digadolinato (2 -), - disodium
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