EA045976B1 - Стабилизированные составы, содержащие антитела к il-33 - Google Patents
Стабилизированные составы, содержащие антитела к il-33 Download PDFInfo
- Publication number
- EA045976B1 EA045976B1 EA202192568 EA045976B1 EA 045976 B1 EA045976 B1 EA 045976B1 EA 202192568 EA202192568 EA 202192568 EA 045976 B1 EA045976 B1 EA 045976B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- antibody
- approximately
- months
- pharmaceutical composition
- storage
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 207
- 102000017761 Interleukin-33 Human genes 0.000 title claims description 21
- 108010067003 Interleukin-33 Proteins 0.000 title claims description 21
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 204
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 177
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 162
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 130
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 claims description 119
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 119
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 119
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 claims description 119
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 101
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 101
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 98
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 93
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 92
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 88
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 87
- 101000998137 Homo sapiens Interleukin-33 Proteins 0.000 claims description 63
- 102000045906 human IL33 Human genes 0.000 claims description 63
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 51
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 48
- 238000012008 microflow imaging Methods 0.000 claims description 47
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 claims description 44
- 229960003589 arginine hydrochloride Drugs 0.000 claims description 41
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 30
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 claims description 28
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 claims description 28
- 238000000533 capillary isoelectric focusing Methods 0.000 claims description 26
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 claims description 26
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 26
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 25
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 claims description 22
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 18
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 17
- WFKWXMTUELFFGS-UHFFFAOYSA-N tungsten Chemical compound [W] WFKWXMTUELFFGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 claims description 16
- 239000010937 tungsten Substances 0.000 claims description 16
- 230000035882 stress Effects 0.000 claims description 15
- 230000032683 aging Effects 0.000 claims description 13
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 claims description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 13
- 238000011953 bioanalysis Methods 0.000 claims description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 9
- 229940090047 auto-injector Drugs 0.000 claims description 8
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 5
- NBVXSUQYWXRMNV-UHFFFAOYSA-N fluoromethane Chemical compound FC NBVXSUQYWXRMNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000007774 longterm Effects 0.000 claims description 3
- 229940090048 pen injector Drugs 0.000 claims description 3
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 claims 11
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 4
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 claims 1
- 238000012395 formulation development Methods 0.000 claims 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 115
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 51
- KWTQSFXGGICVPE-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.OC(=O)C(N)CCCN=C(N)N KWTQSFXGGICVPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- KWTQSFXGGICVPE-WCCKRBBISA-N Arginine hydrochloride Chemical compound Cl.OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N KWTQSFXGGICVPE-WCCKRBBISA-N 0.000 description 39
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 32
- 238000011160 research Methods 0.000 description 31
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 28
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 28
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 28
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 28
- 241000555745 Sciuridae Species 0.000 description 25
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 25
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 25
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 25
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 25
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 25
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 25
- LIMFPAAAIVQRRD-BCGVJQADSA-N N-[2-[(3S,4R)-3-fluoro-4-methoxypiperidin-1-yl]pyrimidin-4-yl]-8-[(2R,3S)-2-methyl-3-(methylsulfonylmethyl)azetidin-1-yl]-5-propan-2-ylisoquinolin-3-amine Chemical compound F[C@H]1CN(CC[C@H]1OC)C1=NC=CC(=N1)NC=1N=CC2=C(C=CC(=C2C=1)C(C)C)N1[C@@H]([C@H](C1)CS(=O)(=O)C)C LIMFPAAAIVQRRD-BCGVJQADSA-N 0.000 description 24
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 description 24
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 23
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 23
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 21
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 21
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 20
- 230000008859 change Effects 0.000 description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 19
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 18
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 18
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 18
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 18
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 17
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 description 17
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 16
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 15
- -1 poly(ethylene oxide) Polymers 0.000 description 15
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 15
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 14
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 14
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 13
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 13
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 13
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 13
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 13
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 13
- 238000011161 development Methods 0.000 description 12
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 12
- 239000005388 borosilicate glass Substances 0.000 description 11
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 11
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 11
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 11
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 10
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 10
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 9
- 239000013618 particulate matter Substances 0.000 description 9
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 9
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 9
- 239000004034 viscosity adjusting agent Substances 0.000 description 9
- OJRUSAPKCPIVBY-KQYNXXCUSA-N C1=NC2=C(N=C(N=C2N1[C@H]3[C@@H]([C@@H]([C@H](O3)COP(=O)(CP(=O)(O)O)O)O)O)I)N Chemical compound C1=NC2=C(N=C(N=C2N1[C@H]3[C@@H]([C@@H]([C@H](O3)COP(=O)(CP(=O)(O)O)O)O)O)I)N OJRUSAPKCPIVBY-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 7
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 7
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 7
- 229940125758 compound 15 Drugs 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 7
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 6
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 6
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 6
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 5
- 229920005549 butyl rubber Polymers 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 5
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 5
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 4
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 4
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 238000012552 review Methods 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 4
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 4
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 3
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 230000001012 protector Effects 0.000 description 3
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- MPDDTAJMJCESGV-CTUHWIOQSA-M (3r,5r)-7-[2-(4-fluorophenyl)-5-[methyl-[(1r)-1-phenylethyl]carbamoyl]-4-propan-2-ylpyrazol-3-yl]-3,5-dihydroxyheptanoate Chemical compound C1([C@@H](C)N(C)C(=O)C2=NN(C(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)=C2C(C)C)C=2C=CC(F)=CC=2)=CC=CC=C1 MPDDTAJMJCESGV-CTUHWIOQSA-M 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 102000010168 Myeloid Differentiation Factor 88 Human genes 0.000 description 2
- 108010077432 Myeloid Differentiation Factor 88 Proteins 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 230000006652 catabolic pathway Effects 0.000 description 2
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 2
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 2
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005414 inactive ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 2
- ORMNNUPLFAPCFD-DVLYDCSHSA-M phenethicillin potassium Chemical compound [K+].N([C@@H]1C(N2[C@H](C(C)(C)S[C@@H]21)C([O-])=O)=O)C(=O)C(C)OC1=CC=CC=C1 ORMNNUPLFAPCFD-DVLYDCSHSA-M 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 239000004447 silicone coating Substances 0.000 description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ALSTYHKOOCGGFT-KTKRTIGZSA-N (9Z)-octadecen-1-ol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCO ALSTYHKOOCGGFT-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZIIFPSPUDAGJM-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-2-n,2-n-diethylpyrimidine-2,4-diamine Chemical compound CCN(CC)C1=NC(N)=CC(Cl)=N1 XZIIFPSPUDAGJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 101100022187 Caenorhabditis elegans mab-10 gene Proteins 0.000 description 1
- 244000117499 Colubrina elliptica Species 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- MNQZXJOMYWMBOU-VKHMYHEASA-N D-glyceraldehyde Chemical compound OC[C@@H](O)C=O MNQZXJOMYWMBOU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 101100075837 Drosophila melanogaster Mabi gene Proteins 0.000 description 1
- 101100234002 Drosophila melanogaster Shal gene Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241001658031 Eris Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide/propylene oxide copolymer Chemical compound CCCOC(C)COCCO CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000044594 Interleukin-1 Receptor Accessory Human genes 0.000 description 1
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 101710180389 Interleukin-1 receptor accessory protein Proteins 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 229920001219 Polysorbate 40 Polymers 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 229920002642 Polysorbate 65 Polymers 0.000 description 1
- 229920002651 Polysorbate 85 Polymers 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 244000166071 Shorea robusta Species 0.000 description 1
- 235000015076 Shorea robusta Nutrition 0.000 description 1
- 239000004376 Sucralose Substances 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003714 TNF receptor-associated factor 6 Human genes 0.000 description 1
- 108090000009 TNF receptor-associated factor 6 Proteins 0.000 description 1
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 230000006229 amino acid addition Effects 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 229940125644 antibody drug Drugs 0.000 description 1
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000011340 continuous therapy Methods 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- WOQQAWHSKSSAGF-WXFJLFHKSA-N decyl beta-D-maltopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OCCCCCCCCCC)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 WOQQAWHSKSSAGF-WXFJLFHKSA-N 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 229940015979 epipen Drugs 0.000 description 1
- HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diol;propane-1,2-diol Chemical compound OCCO.CC(O)CO HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 150000002191 fatty alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000009969 flowable effect Effects 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000013022 formulation composition Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 125000001976 hemiacetal group Chemical group 0.000 description 1
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 1
- 229940062714 humalog mix Drugs 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 238000013365 molecular weight analysis method Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N octyl beta-D-glucopyranoside Chemical compound CCCCCCCCO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N 0.000 description 1
- 229940055577 oleyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- XMLQWXUVTXCDDL-UHFFFAOYSA-N oleyl alcohol Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCCCCO XMLQWXUVTXCDDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000008024 pharmaceutical diluent Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 description 1
- 229920001992 poloxamer 407 Polymers 0.000 description 1
- 229940044476 poloxamer 407 Drugs 0.000 description 1
- 229920005589 poly(ferrocenylsilane) Polymers 0.000 description 1
- 235000010483 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000249 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 1
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001816 polyoxyethylene sorbitan tristearate Substances 0.000 description 1
- 235000010988 polyoxyethylene sorbitan tristearate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229940101027 polysorbate 40 Drugs 0.000 description 1
- 229940113124 polysorbate 60 Drugs 0.000 description 1
- 229940099511 polysorbate 65 Drugs 0.000 description 1
- 229940113171 polysorbate 85 Drugs 0.000 description 1
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 229940035044 sorbitan monolaurate Drugs 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- BAQAVOSOZGMPRM-QBMZZYIRSA-N sucralose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](Cl)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@]1(CCl)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CCl)O1 BAQAVOSOZGMPRM-QBMZZYIRSA-N 0.000 description 1
- 235000019408 sucralose Nutrition 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 238000003878 thermal aging Methods 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Description
Ссылка на перечень последовательностей
В эту заявку посредством ссылки включен Перечень последовательностей, поданный в машиночитаемой форме в виде файла 10516WO01-Sequence.txt, созданного 20 февраля 2020 года, размером
13659 байт.
Область техники
Настоящее изобретение относится к области составов на основе терапевтических антител. Более конкретно, настоящее изобретение относится к области фармацевтических составов, содержащих антитело человека, которое специфически связывает интерлейкин-33 человека.
Уровень техники
Интерлейкин-33 (IL-33) представляет собой лиганд ST2, члена суперсемейства toll-подобных рецепторов/рецепторов интерлейкина-1, который образует ассоциаты со вспомогательным белком, IL1RAcP (обзоры см., например, у Kakkar и Lee, Nature Reviews - Drug Discovery 7(10):827-840 (2008), в Schmitz et al., Immunity 23:479-490 (2005); Liew et al., Nature Reviews - Immunology 10:103-110 (2010); US 2010/0260770; US 2009/0041718). После активации ST2/IL-1RAcP под действием IL-33 запускается сигнальный каскад, опосредованный последующими молекулами каскада, такими как MyD88 (фактор миелоидной дифференцировки 88) и TRAF6 (фактор 6, ассоциированный с рецептором фактора некроза опухолей (ФНО)), что приводит к активации NFkB (ядерный фактор кВ), помимо прочего. Передача сигнала IL-33 задействована в качестве фактора разных заболеваний и нарушений. (Liew et al., Nature Reviews - Immunology 10:103-110 (2010)).
Терапевтические макромолекулы (например, антитела) необходимо включать в составы таким образом, чтобы молекулы не только подходили для введения пациентам, но также сохраняли стабильность при хранении. Например, терапевтические антитела в жидком растворе склонны к распаду, агрегации и/или нежелательным химическим модификациям, если раствор не получен надлежащим образом. Стабильность антитела в жидком составе зависит не только от используемых в указанном составе видов вспомогательных веществ, но также от количеств и относительного содержания вспомогательных веществ друг относительно друга. Кроме того, при получении жидкого состава на основе антител необходимо учитывать и другие факторы, помимо стабильности. Примеры таких дополнительных факторов включают вязкость раствора и концентрацию антитела, которая может быть обеспечена в данном составе. Таким образом, необходимо с большой осторожностью подходить к получению состава на основе терапевтического антитела, чтобы обеспечить состав, который сохраняет стабильность, содержит достаточную концентрацию антитела и имеет подходящую вязкость, а также другие свойства, которые позволяют надлежащим образом вводит состав пациентам.
Антитела к интерлейкину-33 человека (hIL-33) являются одним из примеров терапевтически значимых макромолекул, для которых требуется надлежащий состав.
Несмотря на то, что антитела к hIL-33 известны в данной области техники (см., например, WO 2014/164959), сохраняется необходимость в фармацевтических составах, содержащих антитела к hIL-33, которые обладают достаточной стабильностью и подходят для введения пациентам.
Краткое описание изобретения
Предложены стабильные жидкие фармацевтические составы, содержащие антитело к IL-33 и одно или более вспомогательных веществ, а также наборы, содержащие указанные составы, и их применения.
Согласно одному из аспектов предложен стабильный жидкий фармацевтический состав, содержащий: (i) антитело человека, которое специфически связывает интерлейкин-33 человека (hIL-33); (ii) буфер; (iii) аминокислоту; (iv) агент для сохранения термической стабильности; и (v) органический сорастворитель. В некоторых вариантах реализации буфер представляет собой ацетат или гистидин в концентрации от 1 мМ до 40 мМ. В некоторых вариантах реализации буфер представляет собой ацетат или гистидин в концентрации от 1 мМ до 20 мМ. В некоторых вариантах реализации аминокислота представляет собой аргинин или глутаминовую кислоту в концентрации от 30 мМ до 110 мМ. В некоторых вариантах реализации агент для сохранения термической стабильности представляет собой сахарозу в концентрации от 1% (мас./об.) до 20% (мас./об.). В некоторых случаях агент для сохранения термической стабильности представляет собой сахарозу в концентрации от 1% (мас./об.) до 10% (мас./об.). В некоторых случаях органический сорастворитель представляет собой поверхностно-активное вещество в концентрации от 0,01% (мас./об.) до 0,15% (мас./об.). В некоторых вариантах реализации поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 80. В некоторых вариантах реализации антитело присутствует в концентрации от 1 мг/мл до 200 мг/мл. В некоторых случаях антитело присутствует в концентрации от 15 мг/мл до 150 мг/мл.
В разных вариантах составов антитело содержит определяющие комплементарность области (HCDR1-HCDR2-HCDR3) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), содержащие аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и определяющие комплементарность области (LCDR1-LCDR2LCDR3) вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащие аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10. В некоторых случаях антитело содержит области HCDR1-HCDR2-HCDR3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4-6-8, соответственно, и области LCDR1-LCDR2LCDR3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 12-14-16, соответственно. В не- 1 045976 которых вариантах реализации антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и вариабельную область легкой цепи (LCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10. В некоторых вариантах реализации антитело содержит константную область тяжелой цепи IgG человека. В некоторых вариантах реализации константная область тяжелой цепи принадлежит изотипу IgG1. В некоторых вариантах реализации константная область тяжелой цепи принадлежит изотипу IgG4. В некоторых вариантах реализации антитело содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20.
В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл антитела человека, которое специфически связывает hIL-33; (ii) от приблизительно 5 мМ до приблизительно 15 мМ ацетата; (iii) от приблизительно 60 мМ до приблизительно 80 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) от приблизительно 3% (мас./об.) до приблизительно 7% (мас./об.) сахарозы; и (v) от приблизительно 0,06% (мас./об.) до приблизительно 0,1% (мас./об.) полисорбата 80. В некоторых случаях состав имеет pH от приблизительно 5 до приблизительно 5,6.
В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) приблизительно 15 мг/мл ± 1,5 мг/мл антитела; (ii) приблизительно 10 мМ ± 2 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 14 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 1% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,016% (мас./об.) полисорбата 80. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) приблизительно 75 мг/мл ± 5 мг/мл антитела; (ii) приблизительно 10 мМ ± 2 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 14 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 1% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,016% (мас./об.) полисорбата 80. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) приблизительно 150 мг/мл ± 15 мг/мл антитела; (ii) приблизительно 10 мМ ± 2 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 14 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 1% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,016% (мас./об.) полисорбата 80. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) приблизительно 15 мг/мл ± 1,5 мг/мл антитела; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) приблизительно 75 мг/мл ± 5 мг/мл антитела; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) приблизительно 150 мг/мл ± 15 мг/мл антитела; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80. В некоторых случаях pH состава составляет от 5,2 до 5,4. В некоторых вариантах реализации pH состава составляет приблизительно 5,3. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) приблизительно 15 мг/мл ± 1,5 мг/мл антитела; (ii) приблизительно 10 мМ ± 2 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 14 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 1% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,04% (мас./об.) полисорбата 80. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) приблизительно 75 мг/мл ± 8 мг/мл антитела; (ii) приблизительно 10 мМ ± 2 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 14 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 1% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,04% (мас./об.) полисорбата 80. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) приблизительно 150 мг/мл ± 15 мг/мл антитела; (ii) приблизительно 10 мМ ± 2 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 14 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 1% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,04% (мас./об.) полисорбата 80. В некоторых случаях pH состава составляет от 5,2 до 5,4. В некоторых вариантах реализации pH состава составляет приблизительно 5,3.
В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) антитело человека, которое специфически связывает интерлейкин-33 человека (hIL-33), в концентрации от 15 ± 1,5 мг/мл до 150 ± 15 мг/мл, где указанное антитело содержит HCVR, содержащую области HCDR1, HCDR2 и HCDR3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4, 6 и 8, соответственно, и области LCDR1, LCDR2 и LCDR3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 12, 14 и 16, соответственно; (ii) 10 мМ ± 2 мМ ацетата; (iii) 70 мМ ± 14 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) 5% (мас./об.) ± 1% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,016% (мас./об.) полисорбата 80, при этом состав имеет pH от 5,1 до 5,5. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) антитело человека, которое специфически связывает интерлейкин-33 человека (hIL-33), в концентрации от 15 ± 1,5 мг/мл до 150 ± 15 мг/мл, где указанное антитело содержит HCVR, содержащую области HCDR1, HCDR2 и HCDR3, содержащие аминокислотные последовательно
- 2 045976 сти SEQ ID NO: 4, 6 и 8, соответственно, и области LCDR1, LCDR2 и LCDR3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 12, 14 и 16, соответственно; (ii) 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, при этом состав имеет pH от 5,1 до 5,5. В некоторых случаях антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и вариабельную область легкой цепи (LCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10. В некоторых вариантах реализации антитело содержит константную область тяжелой цепи IgG человека. В некоторых вариантах реализации константная область тяжелой цепи принадлежит изотипу IgG1. В некоторых вариантах реализации константная область тяжелой цепи принадлежит изотипу IgG4.
В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) антитело человека, которое специфически связывает интерлейкин-33 человека (hIL-33), в концентрации от 15 ± 1,5 мг/мл до 150 ± 15 мг/мл, где указанное антитело содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; (ii) 10 мМ ± 2 мМ ацетата; (iii) 70 мМ ± 14 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) 5% (мас./об.) ± 1% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,016% (мас./об.) полисорбата 80, при этом состав имеет pH от 5,1 до 5,5. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит: (i) антитело человека, которое специфически связывает интерлейкин-33 человека (hIL-33), в концентрации от 15 ± 1,5 мг/мл до 150 ± 15 мг/мл, где указанное антитело содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20; (ii) 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) 5% ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, при этом состав имеет pH от 5,1 до 5,5.
В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит по меньшей мере 90% нативной формы антитела после двух месяцев хранения при 5°C при определении путем гельпроникающей-сверхэффективной жидкостной хроматографии (ГП-СВЭЖХ). В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 95% нативной формы антитела после двух месяцев хранения при 5°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 99% нативной формы антитела после двух месяцев хранения при 5°C при определении путем ГПСВЭЖХ.
В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 95% нативной формы антитела после девяти месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит по меньшей мере 97,5% нативной формы антитела после девяти месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 99% нативной формы антитела после девяти месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 95% нативной формы антитела после 12 месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит по меньшей мере 97,5% нативной формы антитела после 12 месяцев хранения при -20°C при определении путем ГПСВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 99% нативной формы антитела после 12 месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 95% нативной формы антитела после 18 месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит по меньшей мере 97,5% нативной формы антитела после 18 месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 99% нативной формы антитела после 18 месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ.
В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 95% нативной формы антитела после девяти месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит по меньшей мере 97,5% нативной формы антитела после девяти месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 99% нативной формы антитела после девяти месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 95% нативной формы антитела после 12 месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит по меньшей мере 97,5% нативной формы антитела после 12 месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГПСВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 99% нативной формы антитела после 12 месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 95% нативной формы антитела после 18 месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит по меньшей мере 97,5% нативной формы антитела после 18 месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит по меньшей мере 99% на- 3 045976 тивной формы антитела после 18 месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ.
В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит не более 2% высокомолекулярных (HMW) частиц после двух месяцев хранения при 5°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 1% HMW частиц после двух месяцев хранения при 5°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 0,6% HMW частиц после двух месяцев хранения при 5°C при определении путем ГП-СВЭЖХ.
В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит не более 2% HMW частиц после девяти месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 1% HMW частиц после девяти месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 0,5% HMW частиц после девяти месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит не более 2% HMW частиц после 12 месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 1% HMW частиц после 12 месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 0,5% HMW частиц после 12 месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит не более 2% HMW частиц после 18 месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 1% HMW частиц после 18 месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 0,5% HMW частиц после 18 месяцев хранения при -20°C при определении путем ГП-СВЭЖХ.
В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит не более 2% HMW частиц после девяти месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 1% HMW частиц после девяти месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 0,7% HMW частиц после девяти месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит не более 2% HMW частиц после 12 месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 1% HMW частиц после 12 месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 0,7% HMW частиц после 12 месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержит не более 2% HMW частиц после 18 месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 1% HMW частиц после 18 месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ. В некоторых случаях состав содержит не более 0,7% HMW частиц после 18 месяцев хранения при 2-8°C при определении путем ГП-СВЭЖХ.
В некоторых вариантах реализации фармацевтический состав имеет вязкость менее чем приблизительно 15 сП, менее чем приблизительно 12 сП или менее чем приблизительно 10 сП при измерении при 20°C.
В некоторых вариантах реализации стабильный жидкий фармацевтический состав содержится в стеклянной пробирке, шприце или устройстве большого объема, или устройстве для инъекции болюса. В некоторых вариантах реализации шприц содержит плунжер с фторуглеродным покрытием. В некоторых вариантах реализации шприц представляет собой шприц с низким содержанием вольфрама. В некоторых вариантах реализации шприц содержит не более 2500 ppb вольфрама. В некоторых вариантах реализации шприц содержит приблизительно 250-750 ppb вольфрама. В некоторых вариантах реализации шприц представляет собой предварительно наполненный шприц. В некоторых вариантах реализации шприц представляет собой предварительно наполненный шприц с несъемной иглой.
Согласно другому аспекту предложено устройство доставки в виде шприц-ручки или автоинъектора, содержащее стабильный жидкий фармацевтический состав согласно любому из вариантов реализации, описанных выше или далее в настоящем документе. В некоторых случаях устройство доставки представляет собой одноразовое устройство доставки в виде шприц-ручки. В некоторых случаях устройство доставки представляет собой устройство доставки в виде шприц-ручки для многократного применения.
Согласно другому аспекту предложен контейнер, содержащий стабильный жидкий фармацевтический состав согласно любому из вариантов реализации, описанных выше или далее в настоящем документе.
Согласно другому аспекту предложено устройство для доставки с защитной системой, содержащее стабильный жидкий фармацевтический состав согласно любому из вариантов реализации, описанных выше или далее в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации устройство для доставки с защитной системой включает защитный чехол, выполненный с возможностью ручного выдвижения. В некоторых вариантах реализации устройство для доставки с защитной системой включает защитный чехол, выполненный с возможностью автоматического выдвижения после инъекции стабильного жидкого фармацевтического состава.
Согласно другому аспекту предложен набор, содержащий (i) контейнер, содержащий стабильный жидкий фармацевтический состав, такой как описан выше или далее в настоящем документе, и (ii) этикетку с информацией о применении фармацевтического состава. В некоторых вариантах реализации на этикетке указана информация о подкожном введении фармацевтического состава. В некоторых вариан- 4 045976 тах реализации на этикетке указана информация о внутривенном введении фармацевтического состава.
Согласно другому аспекту в настоящем изобретении предложена стандартная лекарственная форма, содержащая стабильный жидкий фармацевтический состав, такой как описан выше или далее в настоящем документе, где антитело к IL-33 присутствует в количестве от 1 мг до 500 мг. В некоторых случаях антитело к IL-33 присутствует в количестве приблизительно 150 мг. В некоторых случаях антитело к IL33 присутствует в количестве приблизительно 300 мг. В некоторых вариантах стандартной лекарственной формы состав содержится в шприце. В некоторых случаях шприц представляет собой предварительно наполненный шприц.
В разных вариантах реализации изобретения любые отличительные признаки или компоненты вариантов реализации, описанных выше или далее в настоящем документе, могут быть объединены, и указанные комбинации включены в объем настоящего изобретения. Любое конкретное значение, указанное выше или далее в настоящем документе, может быть объединено с другим родственным значением, указанным выше или далее в настоящем документе, для определения диапазона, в котором указанные значения представляют собой верхний и нижний предел диапазона, и указанные диапазоны включены в объем настоящего изобретения. Каждое из значений, указанных выше или далее в настоящем документе, может быть указано с погрешностью 1%, 5%, 10% или 20%. Например, концентрация 10 мМ может быть указана как 10 мМ ± 0,1 мМ (погрешность 1%), 10 мМ ± 0,5 мМ (погрешность 5%), 10 мМ ± 1 мМ (погрешность 10%) или 10 мМ ± 2 мМ (погрешность 20%).
Другие варианты реализации изобретения станут понятными после изучения подробного описания.
Краткое описание графических материалов
На фиг. 1 показана зависимость вязкости от pH для 150 мг/мл антитела к IL-33 (mAb1).
На фиг. 2 показана вязкость 150 мг/мл антитела к IL-33 (mAb1) при разных концентрациях модификаторов вязкости.
На фиг. 3 показано влияние разных модификаторов вязкости на стабильность антитела к IL-33 (mAb1) после инкубации при 37°C в течение 34 дней. Для ясности, в правой части фиг. 3 точки указаны в порядке убывания: F13, F4, F12, F3, F2, F7, F1, F5, F8, F6 и F9.
На фиг. 4A проиллюстрировано влияние параметров состава на вязкость антитела к IL-33 (mAb1).
На фиг. 4B проиллюстрировано влияние параметров состава на образование высокомолекулярных (HMW) форм антитела к IL-33 (mAb1).
Подробное описание
Прежде чем обратиться к описанию настоящего изобретения следует понять, что настоящее изобретение не ограничено конкретными описанными способами и экспериментальными условиями, так как указанные способы и условия могут варьироваться. Также следует понимать, что используемая в настоящем документе терминология предназначена только для описания конкретных вариантов реализации и не является ограничивающей, так как объем настоящего изобретения ограничен только прилагаемой формулой изобретения.
Если отсутствуют иные определения, то все технические и научные термины в настоящем документе имеют значения, общепринятые специалистами в области техники, к которой относится настоящее изобретение. В настоящем документе термин приблизительно, если его используют для описания конкретной указанной числовой величины или диапазона величин, означает, что величина может отклоняться от указанного значения не более чем на 1%. Например, в настоящем документе выражение приблизительно 100 включает 99 и 101 и все значения между ними (например, 99,1, 99,2, 99,3, 99,4 и т.д.).
Несмотря на то, что любые способы и материалы, схожие с теми, что описаны в настоящем документе, или эквивалентные им, можно применять для реализации или исследования настоящего изобретения, примеры способов и материалов будут описаны далее. Содержание всех патентов, заявок и непатентных публикаций, упомянутых в настоящем описании, включено в настоящий документе во всей полноте посредством ссылок.
Фармацевтические составы
В настоящем документе выражение фармацевтический состав обозначает комбинацию по меньшей мере одного активного ингредиента (например, антитела к IL-33 и т.д., которое может обеспечивать биологический эффект у человека или животного, не являющегося человеком) и по меньшей мере одного неактивного ингредиента, которая после объединения активного ингредиента и/или одного или более дополнительных неактивных ингредиентов подходит для терапевтического введения человеку или животному, не являющемуся человеком. Термин состав в настоящем документе обозначает фармацевтический состав, если конкретно не указано иное. В настоящем изобретении предложены фармацевтические составы, содержащие по меньшей мере один терапевтический полипептид. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения терапевтический полипептид представляет собой антитело, которое специфически связывает интерлейкин-33 человека (hIL-33), или его антигенсвязывающий фрагмент. Более конкретно, настоящее изобретение включает фармацевтические составы, которые содержат: (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33; (ii) буфер; (iii) агент для сохранения термической стабильности; (iv) поверхностно-активное вещество (также называемое органическим
- 5 045976 сорастворителем или стабилизатором границы раздела фаз); и (v) модификатор вязкости. В составы согласно настоящему изобретению могут быть включены дополнительные компоненты, если указанные компоненты не ухудшают в значительной степени вязкость и стабильность состава. Конкретные примеры компонентов и составов, включенных в настоящее изобретение, подробно описаны ниже.
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению в определенных вариантах реализации могут представлять собой текучие составы. В настоящем документе выражение текучий состав обозначает смесь по меньшей мере двух компонентов, которая существует, главным образом, в текучем состоянии при температуре от приблизительно 2°C до приблизительно 45°C. Текучие составы включают, помимо прочего, жидкие составы. Текучие составы могут иметь низкую, среднюю или высокую вязкость в зависимости от конкретных компонентов.
Антитела, специфически связывающие IL-33 человека
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению могут содержать антитело человека или его антигенсвязывающий фрагмент, которое(-ый) специфически связывает hIL-33. В настоящем документе термин hIL-33 относится к белку IL-33 человека.
В целом, предполагается, что термин антитело в настоящем документе относится к молекулам иммуноглобулина, содержащим четыре полипептидные цепи, две тяжелые цепи (H) и две легкие цепи (L), соединенные друг с другом дисульфидными связями, а также к их мультимерам (например, IgM); тем не менее, молекулы иммуноглобулина, состоящие только из тяжелых цепей (т.е. в которых отсутствуют легкие цепи), также включены в определение термина антитело. Каждая тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи (сокращенно обозначаемую в настоящем документе как HCVR или VH) и константную область тяжелой цепи. Константная область тяжелой цепи содержит три домена, CH1, CH2 и CH3. Каждая легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи (сокращенно обозначаемую в настоящем документе как LCVR или VL) и константную область легкой цепи. Константная область легкой цепи содержит один домен (CL1). Области VH и VL могут быть дополнительно подразделены на области гипервариабельности, называемыми определяющими комплементарность областями (CDR), которые чередуются с более консервативными областями, называемыми каркасными областями (FR). Каждая VH и VL состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных от амино-конца к карбоксиконцу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
В определенных вариантах реализации изобретения антитела к IL-33 согласно изобретению представляют собой антитела человека. Предполагается, что термин антитело человека в настоящем документе включает антитела, содержащие вариабельные и константные области, выделенные из последовательностей иммуноглобулина зародышевой линии человека. Антитела человека согласно изобретению могут включать аминокислотные остатки, не кодируемые последовательностями иммуноглобулина зародышевой линии человека (например, мутации, встраиваемые в результате случайного или сайтспецифического мутагенеза in vitro или соматической мутации in vivo), например, в CDR, и, в частности, в CDR3. Тем не менее, предполагается, что термин антитело человека в настоящем документе не включает антитела, в которых последовательности CDR, выделенные из зародышевой линии других видов млекопитающих, таких как мыши, привиты к каркасным последовательностям человека. В разных вариантах реализации антитело к IL-33 представляет собой антитело IgG человека. В разных вариантах реализации антитело к IL-33 представляет собой антитело человека с изотипом IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4, или со смешанным изотипом. В некоторых вариантах реализации антитело к IL-33 представляет собой антитело IgG1 человека. В некоторых вариантах реализации антитело к IL-33 представляет собой антитело IgG4 человека. В любом из вариантов реализации, обсуждаемых выше или далее в настоящем документе, антитело к IL-33 может содержать легкую каппа-цепь человека. В любом из вариантов реализации, обсуждаемых выше или далее в настоящем документе, антитело к IL-33 может содержать легкую лямбда-цепь человека.
Антитела согласно изобретению могут в некоторых вариантах реализации представлять собой рекомбинантные антитела человека. Предполагается, что термин рекомбинантное антитело человека в настоящем документе включает все антитела человека, которые получены, экспрессированы, созданы или выделены рекомбинантными способами, такие как антитела, экспрессированные с использованием рекомбинантного вектора экспрессии, трансфицированного в клетку хозяина, антитела, выделенные из рекомбинантной комбинаторной библиотеки антител человека, антитела, выделенные у трансгенного животного (например, мыши), имеющего гены иммуноглобулина человека (см., например, Taylor et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295), или антитела, полученные, экспрессированные, созданные или выделенные любыми другими способами, которые включают сплайсинг генных последовательностей иммуноглобулина человека в другие последовательности ДНК. Указанные рекомбинантные антитела человека содержат вариабельные и константные области, выделенные из последовательностей иммуноглобулина зародышевой линии человека. В определенных вариантах реализации, тем не менее, указанные рекомбинантные антитела человека подвергают мутагенезу in vitro (или, в случае использования трансгенных животных, имеющих последовательности Ig человека, соматическому мутагенезу in vivo), и, таким образом, аминокислотные последовательности областей VH и VL в рекомбинантных антителах представляют собой последовательности, которые хотя и выделены из последовательностей VH и VL зародышевой
- 6 045976 линии человека и родственным им, в естественных условиях могут не существовать в репертуаре антител зародышевой линии человека in vivo.
Термины антигенсвязывающая область или антигенсвязывающий фрагмент антитела (или просто область антитела или фрагмент антитела) в настоящем документе относятся к одному или более фрагментам антитела, которые сохраняют способность специфического связывания hIL-33.
Предполагается, что выделенное антитело в настоящем документе относится к антителу, которое по существу не содержит другие антитела, имеющие отличающуюся антигенную специфичность (например, выделенное антитело, которое специфически связывает hIL-33, по существу не содержит антитела, которые специфически связывают антигены, отличные от hIL-33).
Термин специфически связывает и т.д. означает, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент образует комплекс с антигеном, который является относительно стабильным в физиологических условиях. Специфическое связывание может быть охарактеризовано константой диссоциации по меньшей мере приблизительно 1х 10-6 M или более. Способы определения возможного специфического связывания двух молекул хорошо известны в данной области техники и включают, например, равновесный диализ, поверхностный плазмонный резонанс и т.д. Выделенное антитело, которое специфически связывает hIL-33, тем не менее, может обладать перекрестной реактивностью в отношении других антигенов, таких как молекулы IL-33 других видов (ортологи). В контексте настоящего изобретения считается, что мультиспецифические (например, биспецифические) антитела, которые связывают hIL-33, а также один или более дополнительных антигенов, специфически связывают hIL-33. Кроме того, выделенное антитело может по существу не содержать другой клеточный материал и/или химические вещества.
Примеры антител к hIL-33, которые могут быть включены в фармацевтические составы согласно настоящему изобретению, приведены в публикации WO 2014/164959, содержание которой включено во всей полноте посредством ссылки.
Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитело к hIL-33 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи HCDR1-HCDR2-HCDR3, соответственно, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 4-6-8. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитело к hIL-33 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит определяющие комплементарность области легкой цепи LCDR1-LCDR2-LCDR3, соответственно, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 12-14-16.
В определенных вариантах реализации антитело к hIL-33 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2. В определенных вариантах реализации антитело к hIL-33 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи (LCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10. В определенных вариантах реализации антитело к hIL-33 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит пару аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR, содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 2/10. В некоторых вариантах реализации антитело к IL-33 содержит HCVR/LCVR, содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 2/10, соответственно, и константную область тяжелой цепи IgG1 человека. В некоторых вариантах реализации антитело к IL-33 содержит HCVR/LCVR, содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 2/10, соответственно, и константную область тяжелой цепи IgG4 человека. В некоторых вариантах реализации антитело к IL-33 содержит HCVR/LCVR, содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 2/10, соответственно, и константную область тяжелой цепи IgG человека. В некоторых вариантах реализации антитело к IL-33 содержит HCVR/LCVR, содержащую аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 2/10, соответственно, и константную область тяжелой цепи IgG1 или IgG4 человека. В некоторых вариантах реализации антитело к IL-33 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20. Антитело к IL-33 с HCVR, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, называют в настоящем документе mAb 1. Указанное антитело содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20.
Количество антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащегося в фармацевтических составах согласно настоящему изобретению, может варьироваться в зависимости от конкретных желаемых свойств составов, а также конкретных условий и задач, для которых предполагается применять составы. В определенных вариантах реализации фармацевтические составы могут содержать от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 500 мг/мл антитела; от приблизительно 5 мг/мл до приблизительно 400 мг/мл антитела; от приблизительно 5 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл антитела; от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 180 мг/мл антитела; от приблизительно 25 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл антитела; от приблизительно 50 мг/мл до приблизительно 100 мг/мл; от приблизительно 50 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; или от приблизительно 140 мг/мл до приблизительно 160 мг/мл антитела. Например, составы согласно настоя- 7 045976 щему изобретению могут представлять собой жидкие составы, которые содержат приблизительно мг/мл; приблизительно 2 мг/мл; приблизительно 5 мг/мл; приблизительно 10 мг/мл; приблизительно мг/мл; приблизительно 20 мг/мл; приблизительно 25 мг/мл; приблизительно 30 мг/мл; приблизительно мг/мл; приблизительно 40 мг/мл; приблизительно 45 мг/мл; приблизительно 50 мг/мл; приблизительно мг/мл; приблизительно 60 мг/мл; приблизительно 65 мг/мл; приблизительно 70 мг/мл; приблизительно мг/мл; приблизительно 80 мг/мл; приблизительно 85 мг/мл; приблизительно 90 мг/мл; приблизительно мг/мл; приблизительно 100 мг/мл; приблизительно 105 мг/мл; приблизительно 110 мг/мл; приблизительно 115 мг/мл; приблизительно 120 мг/мл; приблизительно 125 мг/мл; приблизительно 130 мг/мл; приблизительно 131 мг/мл; приблизительно 132 мг/мл; приблизительно 133 мг/мл; приблизительно 134 мг/мл; приблизительно 135 мг/мл; приблизительно 140 мг/мл; приблизительно 145 мг/мл; приблизительно 150 мг/мл; приблизительно 155 мг/мл; приблизительно 160 мг/мл; приблизительно 165 мг/мл; приблизительно 170 мг/мл; приблизительно 175 мг/мл; приблизительно 180 мг/мл; приблизительно 185 мг/мл; приблизительно 190 мг/мл; приблизительно 195 мг/мл; или приблизительно 200 мг/мл антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которое(-ый) специфически связывает hIL-33. В определенных вариантах реализации фармацевтические составы представляют собой жидкие составы, которые могут содержать от 5±0,75 мг/мл до 150±22,5 мг/мл антитела; от 7,5±1,125 мг/мл до 140±21 мг/мл антитела; от 10±1,5 мг/мл до 130±19,5 мг/мл антитела; от 12,5±1,875 мг/мл до 120±18 мг/мл антитела; от 15±2,25 мг/мл до 110±16,5 мг/мл антитела; от 17,5±2,625 мг/мл до 100±15 мг/мл антитела; от 20±3 мг/мл до 90±13,5 мг/мл антитела; от 22,5±3,375 мг/мл до 80±12 мг/мл антитела; от 25±3,75 мг/мл до 70±10,5 мг/мл антитела; от 27,5±4,125 мг/мл до 60±9 мг/мл антитела; от 30±4,5 мг/мл до 50±7,5 мг/мл антитела; 25±3,75 мг/мл антитела; или 50±7,5 мг/мл. В некоторых вариантах реализации фармацевтические составы содержат от 15 ± 0,15 мг/мл до 150 ± 1,5 мг/мл антитела к IL-33. В некоторых случаях фармацевтические составы содержат 75 мг/мл ± 3,75 мг/мл антитела к IL-33. В некоторых случаях фармацевтические составы содержат 150 мг/мл ± 7,5 мг/мл антитела к IL-33.
Биоэквиваленты
В настоящее изобретение включены антитела, содержащие аминокислотные последовательности, которые отличаются от предложенных молекул, описанных в настоящем документе, но сохраняют при этом способность связывать hIL-33. Указанные вариантные молекулы могут содержать одно или более присоединений, делеций или замен аминокислот по сравнению с исходной последовательностью, но обладают биологической активностью, которая по существу эквивалентна активности антител, описанных в настоящем документе.
В настоящее изобретение включены антигенсвязывающие молекулы, которые являются биоэквивалентами любых предложенных антител, приведенных в настоящем документе. Два антитела рассматривают в качестве биоэквивалентных, если, например, они являются фармацевтическими эквивалентами или фармацевтическими альтернативами, скорость и степень всасывания которых не отличаются в значительной степени при введении в одинаковой молярной дозе в схожих экспериментальных условиях, в случае как разовой дозы, так и многократных доз. Некоторые антитела рассматривают в качестве эквивалентов или фармацевтических альтернатив, если они имеют эквивалентную степень всасывания, но не скорость всасывания, и, несмотря на это, они могут считаться биоэквивалентными, так как указанные различия скорости всасывания используются намеренно и отражены в информации на этикетке, и не являются значимыми для достижения эффективной концентрации лекарственного средства в организме, например, при долгосрочном применении, и считаются незначительными для конкретного исследуемого лекарственного продукта с медицинской точки зрения.
В одном из вариантов реализации два антитела являются биоэквивалентными, если отсутствуют клинически значимые различия безопасности, чистоты и активности.
В одном из вариантов реализации два антитела являются биоэквивалентными, если у пациента один раз или более можно чередовать введение продукта сравнения и биологического продукта, не ожидая повышения риска нежелательных эффектов, включая клинически значимые изменения иммуногенности, или снижения эффективности по сравнению с непрерывной терапией без указанного чередования.
Биоэквивалентность может быть продемонстрирована способами in vivo и in vitro. Способы определения биоэквивалентности включают, например, (a) исследование in vivo человека или других млекопитающих, в котором измеряют зависимость концентрации антитела или его метаболитов в крови, плазме, сыворотке или другой физиологической жидкости от времени; (b) исследование in vitro, которое коррелирует с данными биодоступности у человека in vivo и позволяет обоснованно предсказывать их; (c) исследование in vivo человека или других млекопитающих, в котором измеряют зависимость соответствующего фармакологического эффекта антитела (или его мишени) острой фазы от времени; и (d) надлежащим образом контролируемое клиническое испытание, в котором устанавливают безопасность, эффективность или биодоступность, или биоэквивалентность антигенсвязывающего белка.
Вспомогательные вещества для состава и pH
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению содержат одно или более вспомогательных веществ. Термин вспомогательное вещество в настоящем документе обозначает любой нете- 8 045976 рапевтический агент, добавляемый в состав для обеспечения желаемой консистенции, вязкости или стабилизирующего эффекта.
В определенных вариантах реализации фармацевтический состав согласно изобретению содержит по меньшей мере одну аминокислоту (например, аргинин, гистидин или глутаминовую кислоту). В некоторых вариантах реализации аминокислота представляет собой аргинин. В некоторых вариантах реализации аргинин представлен в форме гидрохлорида аргинина. В некоторых вариантах реализации аминокислота представляет собой комбинацию аргинина и глутаминовой кислоты. В некоторых случаях аминокислота (например, аргинин) выступает в качестве модификатора вязкости в составах на основе антител к IL-33.
Количество аминокислоты, содержащейся в фармацевтических составах согласно настоящему изобретению, может варьироваться в зависимости от конкретных желаемых свойств составов, а также конкретных условий и задач, для которых предполагается применять составы. В определенных вариантах реализации составы могут содержать от приблизительно 1 мМ до приблизительно 200 мМ аминокислоты; от приблизительно 5 мМ до приблизительно 150 мМ; от приблизительно 25 мМ до приблизительно 125 мМ аминокислоты; от приблизительно 50 мМ до приблизительно 100 мМ аминокислоты; от приблизительно 50 мМ до приблизительно 90 мМ аминокислоты; от приблизительно 60 мМ до приблизительно 80 мМ аминокислоты; или от приблизительно 65 мМ до приблизительно 75 мМ аминокислоты. Например, фармацевтические составы согласно настоящему изобретению могут содержать приблизительно 1 мМ; приблизительно 5 мМ; приблизительно 10 мМ; приблизительно 15 мМ; приблизительно 20 мМ; приблизительно 25 мМ; приблизительно 30 мМ; приблизительно 35 мМ; приблизительно 40 мМ; приблизительно 45 мМ; приблизительно 50 мМ; приблизительно 55 мМ; приблизительно 60 мМ; приблизительно 65 мМ; приблизительно 70 мМ; приблизительно 75 мМ; приблизительно 80 мМ; приблизительно 85 мМ; приблизительно 90 мМ; приблизительно 95 мМ; приблизительно 100 мМ; приблизительно 105 мМ; приблизительно 110 мМ; приблизительно 115 мМ; приблизительно 120 мМ; или приблизительно 125 мМ аминокислоты (например, аргинина). В некоторых вариантах реализации составы содержат приблизительно 70 мМ аминокислоты (например, аргинина).
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению также могут содержать один или более углеводов, например, один или более сахаров. Сахар может представлять собой восстанавливающий сахар или невосстанавливающий сахар. Восстанавливающие сахара включают, например, сахара, включающие кетоновую или альдегидную группу, которые содержат реакционно-активную группу гемиацеталя, которая обеспечивает действие сахара в качестве восстановителя. Конкретные примеры восстанавливающих сахаров включают фруктозу, глюкозу, глицеральдегид, лактозу, арабинозу, маннозу, ксилозу, рибозу, рамнозу, галактозу и мальтозу. Невосстанавливающие сахара могут содержать аномерный атом углерода, который входит в состав ацеталя, и по существу не вступают во взаимодействие с аминокислотами или полипептидами для инициирования реакции Майяра. Конкретные примеры невосстанавливающих сахаров включают сахарозу, трегалозу, сорбозу, сукралозу, мелецитозу и раффинозу. Сахарные кислоты включают, например, сахаристые кислоты, глюконат и другие полигидроксисахара и их соли. В некоторых вариантах реализации сахар представляет собой сахарозу. В некоторых случаях сахар (например, сахароза) выступает в качестве агента для сохранения термической стабильности антитела к IL-33.
Количество сахара (например, сахарозы), содержащегося в фармацевтических составах согласно настоящему изобретению, может варьироваться в зависимости от конкретных условий и задач, для которых предполагается применять составы. В определенных вариантах реализации составы могут содержать от приблизительно 0,1% до приблизительно 20% сахара; от приблизительно 0,5% до приблизительно 20% сахара; от приблизительно 1% до приблизительно 20% сахара; от приблизительно 2% до приблизительно 15% сахара; от приблизительно 3% до приблизительно 10% сахара; от приблизительно 3% до приблизительно 7% сахара; или от приблизительно 4% до приблизительно 6% сахара. Например, фармацевтические составы согласно настоящему изобретению могут содержать приблизительно 0,5%; приблизительно 1,0%; приблизительно 1,5%; приблизительно 2,0%; приблизительно 2,5%; приблизительно 3,0%; приблизительно 3,5%; приблизительно 4,0%; приблизительно 4,5%; приблизительно 5,0%; приблизительно 5,5%; приблизительно 6,0%; приблизительно 6,5%; приблизительно 7,0%; приблизительно 7,5%; приблизительно 8,0%; приблизительно 8,5%; приблизительно 9,0%; приблизительно 9,5%; приблизительно 10,0%; приблизительно 15%; или приблизительно 20% сахара (например, сахарозы). В некоторых вариантах реализации составы содержат приблизительно 5% сахара (например, сахарозы).
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению также могут содержать один или более органических сорастворителей (или стабилизаторов границы раздела фаз), такого типа и в таком количестве, которые стабилизируют антитело к IL-33 в условиях интенсивной обработки или перемешивания, например, на орбитальном шейкере. В некоторых вариантах реализации органический сорастворитель представляет собой поверхностно-активное вещество. В настоящем документе термин поверхностно-активное вещество обозначает вещество, которое снижает поверхностное натяжение жидкости, в которой оно растворено, и/или снижает натяжение на границе раздела между маслом и водой. Поверхностно-активные вещества могут быть ионными или неионогенными. Примеры неионогенных поверхност- 9 045976 но-активных веществ, которые могут быть включены в составы согласно настоящему изобретению, включают, например, алкил-поли(этиленоксид), алкилполиглюкозиды (например, октилглюкозид и децилмальтозид), жирные спирты, такие как цетиловый спирт и олеиловый спирт, кокамид MEA, кокамид DEA и кокамид TEA. Конкретные неионогенные поверхностно-активные вещества, которые могут быть включены в составы согласно настоящему изобретению, включают, например, полисорбаты, такие как полисорбат 20, полисорбат 28, полисорбат 40, полисорбат 60, полисорбат 65, полисорбат 80, полисорбат 81 и полисорбат 85; полоксамеры, такие как полоксамер 188 (также называемый Плюроник F68), полоксамер 407; полиэтилен-полипропиленгликоль; или полиэтиленгликоль (ПЭГ). Полисорбат 20 также называют TWEEN 20, сорбитана монолауратом и полиоксиэтиленсорбитана монолауратом. В некоторых вариантах реализации поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 80.
Количество поверхностно-активного вещества, содержащегося в фармацевтических составах согласно настоящему изобретению, может варьироваться в зависимости от конкретных желаемых свойств составов, а также конкретных условий и задач, для которых предполагается применять составы. В определенных вариантах реализации составы могут содержать от приблизительно 0,05% до приблизительно 5% поверхностно-активного вещества; от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,15% поверхностно-активного вещества; от приблизительно 0,04% до приблизительно 0,12%; от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,11% поверхностно-активного вещества; от приблизительно 0,06% до приблизительно 0,1% поверхностно-активного вещества; или от приблизительно 0,07% до приблизительно 0,09% поверхностно-активного вещества. Например, составы согласно настоящему изобретению могут содержать приблизительно 0,05%; приблизительно 0,06%; приблизительно 0,07%; приблизительно 0,08%; приблизительно 0,09%; приблизительно 0,10%; приблизительно 0,11%; приблизительно 0,12%; приблизительно 0,13%; приблизительно 0,14%; приблизительно 0,15%; приблизительно 0,16%; приблизительно 0,17%; приблизительно 0,18%; приблизительно 0,19%; приблизительно 0,20%; приблизительно 0,21%; приблизительно 0,22%; приблизительно 0,23%; приблизительно 0,24%; приблизительно 0,25%; приблизительно 0,26%; приблизительно 0,27%; приблизительно 0,28%; приблизительно 0,29%; или приблизительно 0,30% поверхностно-активного вещества (например, полисорбата 80). В некоторых вариантах реализации составы содержат приблизительно 0,08% поверхностно-активного вещества (например, полисорбата 80). Каждое из процентных значений, указанных выше, соответствует процентному отношению масса/объем (мас./об.).
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению также могут содержать буфер или буферную систему, который(-ая) служит для поддержания стабильного pH и способствует стабилизации антитела к IL-33. В некоторых вариантах реализации буфер или буферная система содержит по меньшей мере один буфер, который имеет диапазон буферизации, который полностью или отчасти перекрывается с диапазоном pH от 4,9 до 5,7. В определенных вариантах реализации буфер содержит гистидиновый буфер. В определенных вариантах реализации буфер представляет собой ацетатный буфер. В определенных вариантах реализации буфер (например, ацетат) присутствует в концентрации от приблизительно 1 мМ до приблизительно 40 мМ, от приблизительно 1 мМ до приблизительно 30 мМ, от приблизительно 1 мМ до приблизительно 20 мМ; от приблизительно 3 мМ до приблизительно 18 мМ; от приблизительно 5 мМ до приблизительно 15 мМ; или от приблизительно 8 мМ до приблизительно 12 мМ. В некоторых вариантах реализации буфер (например, ацетат) присутствует в концентрации 5,3 мМ±0,3 мМ, 5,3 мМ ± 0,2 мМ или 5,3 мМ ± 0,1 мМ. В некоторых вариантах реализации буферы присутствуют в концентрации приблизительно 4,6 мМ; приблизительно 4,7 мМ; приблизительно 4,8 мМ; приблизительно 4,9 мМ; приблизительно 5,0 мМ; приблизительно 5,1 мМ; приблизительно 5,2 мМ; приблизительно 5,3 мМ; приблизительно 5,4 мМ; приблизительно 5,5 мМ; приблизительно 5,6 мМ; приблизительно 5,7 мМ; приблизительно 5,8 мМ; приблизительно 5,9 мМ; или приблизительно 6,0 мМ.
Примеры составов
Согласно одному из аспектов настоящего изобретения фармацевтический состав содержит: (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 (например, mAb1); (ii) буфер (например, ацетат); (iii) аминокислоту (например, аргинин); (iv) агент для сохранения термической стабильности (например, сахарозу); и (v) органический сорастворитель (например, полисорбат 80).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 (например, mAb1), в концентрации от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл; (ii) буфер (например, ацетат) в концентрации от приблизительно 1 мМ до приблизительно 20 мМ; (iii) аминокислоту (например, аргинин) в концентрации от приблизительно 30 мМ до приблизительно 110 мМ; (iv) агент для сохранения термической стабильности (например, сахарозу) в концентрации от приблизительно 1% (мас./об.) до приблизительно 10% (мас./об.); и (v) органический сорастворитель (например, полисорбат 80) в концентрации от приблизительно 0,01% (мас./об.) до приблизительно 0,15% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 (например, mAb1), в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; (ii) буфер (например, ацетат) в концентрации от приблизительно
- 10 045976 мМ до приблизительно 15 мМ; (iii) аминокислоту (например, аргинин) в концентрации от приблизительно 50 мМ до приблизительно 90 мМ; (iv) агент для сохранения термической стабильности (например, сахарозу) в концентрации от приблизительно 3% (мас./об.) до приблизительно 7% (мас./об.); и (v) органический сорастворитель (например, полисорбат 80) в концентрации от приблизительно 0,05% (мас./об.) до приблизительно 0,11% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; (ii) буфер (например, ацетат) в концентрации от приблизительно 5 мМ до приблизительно 15 мМ; (iii) аминокислоту (например, аргинин) в концентрации от приблизительно 50 мМ до приблизительно 90 мМ; (iv) агент для сохранения термической стабильности (например, сахарозу) в концентрации от приблизительно 3% (мас./об.) до приблизительно 7% (мас./об.); и (v) органический сорастворитель (например, полисорбат 80) в концентрации от приблизительно 0,05% (мас./об.) до приблизительно 0,11% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, где указанное антитело содержит константную область тяжелой цепи изотипа IgG1; (ii) буфер (например, ацетат) в концентрации от приблизительно 5 мМ до приблизительно 15 мМ; (iii) аминокислоту (например, аргинин) в концентрации от приблизительно 50 мМ до приблизительно 90 мМ; (iv) агент для сохранения термической стабильности (например, сахарозу) в концентрации от приблизительно 3% (мас./об.) до приблизительно 7% (мас./об.); и (v) органический сорастворитель (например, полисорбат 80) в концентрации от приблизительно 0,05% (мас./об.) до приблизительно 0,11% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, где указанное антитело содержит константную область тяжелой цепи изотипа IgG4; (ii) буфер (например, ацетат) в концентрации от приблизительно 5 мМ до приблизительно 15 мМ; (iii) аминокислоту (например, аргинин) в концентрации от приблизительно 50 мМ до приблизительно 90 мМ; (iv) агент для сохранения термической стабильности (например, сахарозу) в концентрации от приблизительно 3% (мас./об.) до приблизительно 7% (мас./об.); и (v) органический сорастворитель (например, полисорбат 80) в концентрации от приблизительно 0,05% (мас./об.) до приблизительно 0,11% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; (ii) буфер (например, ацетат) в концентрации от приблизительно 5 мМ до приблизительно 15 мМ; (iii) аминокислоту (например, аргинин) в концентрации от приблизительно 50 мМ до приблизительно 90 мМ; (iv) агент для сохранения термической стабильности (например, сахарозу) в концентрации от приблизительно 3% (мас./об.) до приблизительно 7% (мас./об.); и (v) органический сорастворитель (например, полисорбат 80) в концентрации от приблизительно 0,05% (мас./об.) до приблизительно 0,11% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; (ii) ацетат в концентрации от приблизительно 5 мМ до приблизительно 15 мМ; (iii) аргинин (например, гидрохлорид аргинина) в концентрации от приблизительно 50 мМ до приблизительно 90 мМ; (iv) сахарозу в концентрации от приблизительно 3% (мас./об.) до приблизительно 7% (мас./об.); и (v) полисорбат 80 в концентрации от приблизительно 0,05% (мас./об.) до приблизительно 0,11% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, где указанное антитело содержит константную область тяжелой цепи изотипа IgG1; (ii) ацетат в концентрации от приблизительно 5 мМ до приблизительно 15 мМ; (iii) аргинин (например, гидрохлорид аргинина) в концентрации от приблизительно 50 мМ до приблизительно 90 мМ; (iv) сахарозу в концентрации от приблизительно 3% (мас./об.) до приблизительно 7% (мас./об.); и (v) полисорбат 80 в концентрации от приблизительно 0,05% (мас./об.) до приблизительно 0,11% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последо- 11 045976 вательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, где указанное антитело содержит константную область тяжелой цепи изотипа IgG4; (ii) ацетат в концентрации от приблизительно 5 мМ до приблизительно 15 мМ; (iii) аргинин (например, гидрохлорид аргинина) в концентрации от приблизительно 50 мМ до приблизительно 90 мМ; (iv) сахарозу в концентрации от приблизительно 3% (мас./об.) до приблизительно 7% (мас./об.); и (v) полисорбат 80 в концентрации от приблизительно 0,05% (мас./об.) до приблизительно 0,11% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; (ii) ацетат в концентрации от приблизительно 5 мМ до приблизительно 15 мМ; (iii) аргинин (например, гидрохлорид аргинина) в концентрации от приблизительно 50 мМ до приблизительно 90 мМ; (iv) сахарозу в концентрации от приблизительно 3% (мас./об.) до приблизительно 7% (мас./об.); и (v) полисорбат 80 в концентрации от приблизительно 0,05% (мас./об.) до приблизительно 0,11% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; (ii) ацетат в концентрации от приблизительно 8 мМ до приблизительно 12 мМ; (iii) аргинин (например, гидрохлорид аргинина) в концентрации от приблизительно 65 мМ до приблизительно 75 мМ; (iv) сахарозу в концентрации от приблизительно 4% (мас./об.) до приблизительно 6% (мас./об.); и (v) полисорбат 80 в концентрации от приблизительно 0,07% (мас./об.) до приблизительно 0,09% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, где указанное антитело содержит константную область тяжелой цепи изотипа IgG1; (ii) ацетат в концентрации от приблизительно 8 мМ до приблизительно 12 мМ; (iii) аргинин (например, гидрохлорид аргинина) в концентрации от приблизительно 65 мМ до приблизительно 75 мМ; (iv) сахарозу в концентрации от приблизительно 4% (мас./об.) до приблизительно 6% (мас./об.); и (v) полисорбат 80 в концентрации от приблизительно 0,07% (мас./об.) до приблизительно 0,09% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, где указанное антитело содержит константную область тяжелой цепи изотипа IgG4; (ii) ацетат в концентрации от приблизительно 8 мМ до приблизительно 12 мМ; (iii) аргинин (например, гидрохлорид аргинина) в концентрации от приблизительно 65 мМ до приблизительно 75 мМ; (iv) сахарозу в концентрации от приблизительно 4% (мас./об.) до приблизительно 6% (мас./об.); и (v) полисорбат 80 в концентрации от приблизительно 0,07% (мас./об.) до приблизительно 0,09% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; (ii) ацетат в концентрации от приблизительно 8 мМ до приблизительно 12 мМ; (iii) аргинин (например, гидрохлорид аргинина) в концентрации от приблизительно 65 мМ до приблизительно 75 мМ; (iv) сахарозу в концентрации от приблизительно 4% (мас./об.) до приблизительно 6% (мас./об.); и (v) полисорбат 80 в концентрации от приблизительно 0,07% (мас./об.) до приблизительно 0,09% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; (ii) ацетат в концентрации приблизительно 10 мМ; (iii) аргинин (например, гидрохлорид аргинина) в концентрации приблизительно 70 мМ; (iv) сахарозу в концентрации приблизительно 5% (мас./об.); и (v) полисорбат 80 в концентрации приблизительно 0,08% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, где указанное антитело содержит константную область тяжелой цепи изотипа IgG1; (ii) ацетат в концентрации приблизительно 10 мМ; (iii) аргинин (например, гидрохлорид аргинина) в концентрации приблизительно 70 мМ; (iv) сахарозу в
- 12 045976 концентрации приблизительно 5% (мас./об.); и (v) полисорбат 80 в концентрации приблизительно
0,08% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл, где указанное антитело содержит константную область тяжелой цепи изотипа IgG4; (ii) ацетат в концентрации приблизительно 10 мМ; (iii) аргинин (например, гидрохлорид аргинина) в концентрации приблизительно 70 мМ; (iv) сахарозу в концентрации приблизительно 5% (мас./об.); и (v) полисорбат 80 в концентрации приблизительно 0,08% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; (ii) ацетат в концентрации приблизительно 10 мМ; (iii) аргинин (например, гидрохлорид аргинина) в концентрации приблизительно 70 мМ; (iv) сахарозу в концентрации приблизительно 5% (мас./об.); и (v) полисорбат 80 в концентрации приблизительно 0,08% (мас./об.).
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, где состав имеет pH 5,3 ± 0,1.
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации приблизительно 15 мг/мл ± 1,5 мг/мл; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, где состав имеет pH 5,3 ± 0,1.
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации приблизительно 75 мг/мл ± 5 мг/мл; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, где состав имеет pH 5,3 ± 0,1.
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, в концентрации приблизительно 150 мг/мл ± 15 мг/мл; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, где состав имеет pH 5,3 ± 0,1.
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и константную область тяжелой цепи IgG4 человека, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, где состав имеет pH 5,3 ± 0,1.
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и константную область тяжелой цепи IgG4 человека, в концентрации приблизительно 15 мг/мл ± 1,5 мг/мл; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, где состав имеет pH 5,3 ± 0,1.
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и
- 13 045976 константную область тяжелой цепи IgG4 человека, в концентрации приблизительно 75 мг/мл ± 5 мг/мл;
(ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, где состав имеет pH 5,3 ± 0,1.
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и константную область тяжелой цепи IgG4 человека, в концентрации приблизительно 150 мг/мл ± 15 мг/мл; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, где состав имеет pH 5,3 ± 0,1.
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20, в концентрации от приблизительно 15 мг/мл до приблизительно 150 мг/мл; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, где состав имеет pH 5,3 ± 0,1.
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20, в концентрации приблизительно 15 мг/мл ± 1,5 мг/мл; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, где состав имеет pH 5,3 ± 0,1.
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20, в концентрации приблизительно 75 мг/мл ± 5 мг/мл; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, где состав имеет pH 5,3 ± 0,1.
В некоторых случаях стабильный жидкий фармацевтический состав содержит (i) антитело человека, которое специфически связывает hIL-33 и содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20, в концентрации приблизительно 150 мг/мл ± 15 мг/мл; (ii) приблизительно 10 мМ ± 1 мМ ацетата; (iii) приблизительно 70 мМ ± 7 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) приблизительно 5% (мас./об.) ± 0,5% (мас./об.) сахарозы; и (iv) приблизительно 0,08% ± 0,008% (мас./об.) полисорбата 80, где состав имеет pH 5,3 ± 0,1.
Дополнительные неограничивающие примеры фармацевтических составов, включенных в настоящее изобретение, приведены в других разделах настоящего документа, включая рабочие примеры, представленные далее.
Стабильность и вязкость фармацевтических составов
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению обладают высоким уровнем стабильности. Термин стабильный, используемый в настоящем документе в отношении фармацевтических составов, означает, что антитела в фармацевтическом составе сохраняют на приемлемом уровне структуру и/или функцию, и/или биологическую активность после хранения в течение определенного периода времени. Состав может быть стабильным, даже если антитело, содержащееся в нем, не сохраняет на 100% структуру и/или функцию, и/или биологическую активность после хранения в течение определенного периода времени. В определенных условиях сохранение приблизительно 90%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98% или приблизительно 99% структуры и/или функции, и/или биологической активности антитела после хранения в течение определенного периода времени можно рассматривать как признак стабильности.
Стабильность может быть измерена, помимо прочего, путем определения доли нативного антитела, сохранившегося в составе после хранения в течение определенного периода времени при данной температуре. Доля нативного антитела может быть определена, помимо прочего, путем гельпроникающей хроматографии (например, гельпроникающей-высокоэффективной жидкостной хроматографии (ГПВЭЖХ)). Фраза приемлемый уровень стабильности в настоящем документе означает, что по меньшей мере 90% нативной формы антитела может быть обнаружено в составе после хранения в течение определенного периода времени при данной температуре. В определенных вариантах реализации по меньшей мере приблизительно 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% нативной формы антитела может быть обнаружено в составе после хранения в течение определенного периода времени при данной температуре. Определенный период времени, по прошествии которого измеряют стабиль- 14 045976 ность, может составлять по меньшей мере 1 месяц, по меньшей мере 2 месяца, по меньшей мере 3 месяца, по меньшей мере 4 месяца, по меньшей мере 5 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 7 месяцев, по меньшей мере 8 месяцев, по меньшей мере 9 месяцев, по меньшей мере 10 месяцев, по меньшей мере 11 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев, по меньшей мере 24 месяца, по меньшей мере 30 месяцев, по меньшей мере 36 месяцев или дольше. Температура, при которой можно хранить фармацевтический состав при оценке стабильности, может представлять собой любую температуру от приблизительно -80°C до приблизительно 45°C, например, температуру хранения приблизительно -80°C, приблизительно -30°C, приблизительно -20°C, приблизительно 0°C, приблизительно 4°-8°C, приблизительно 5°C, приблизительно 25°C, приблизительно 35°C, приблизительно 37°C или приблизительно 45°C. Например, фармацевтический состав может считаться стабильным, если после 3 месяцев хранения при 5°C в анализе ГП-ВЭЖХ обнаруживается более чем приблизительно 90%, 95%, 96% или 97% нативного антитела. Фармацевтический состав также может считаться стабильным, если после 6 месяцев хранения при 5°C в анализе ГП-ВЭЖХ обнаруживается более чем приблизительно 90%, 95%, 96% или 97% нативного антитела. Фармацевтический состав также может считаться стабильным, если после 9 месяцев хранения при 5°C в анализе ГП-ВЭЖХ обнаруживается более чем приблизительно 90%, 95%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 99% или 99,5% нативного антитела. Фармацевтический состав также может считаться стабильным, если после 3 месяцев хранения при 25°C в анализе ГП-ВЭЖХ обнаруживается более чем приблизительно 90%, 95%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 99% или 99,5% нативного антитела. Фармацевтический состав также может считаться стабильным, если после 6 месяцев хранения при 25°C в анализе ГП-ВЭЖХ обнаруживается более чем приблизительно 90%, 95%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 99% или 99,5% нативного антитела. Фармацевтический состав также может считаться стабильным, если после 9 месяцев хранения при 25°C в анализе ГП-ВЭЖХ обнаруживается более чем приблизительно 90%, 95%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 99% или 99,5% нативного антитела.
Для оценки стабильности составов согласно настоящему изобретению можно применять и другие способы, такие как, например, дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК) для определения термической стабильности, регулируемое перемешивание для определения механической стабильности и поглощение приблизительно при 350 нм или приблизительно при 405 на для определения мутности раствора. Например, состав согласно настоящему изобретению может считаться стабильным, если после 6 или более месяцев хранения при температуре от приблизительно 5°C до приблизительно 25°C изменение ОП405 состава составляет менее чем приблизительно 0,05 (например, 0,04, 0,03, 0,02, 0,01 или менее) относительно ОП405 состава в момент времени t=0.
Измерение аффинности связывания антитела с мишенью также можно использовать для оценки стабильности. Например, состав согласно настоящему изобретению может рассматриваться как стабильный, если после хранения, например, при -80°C, -30°C, -20°C, 5°C, 25°C, 37°C, 45°C и т.д., в течение определенного периода времени (например, от 14 дней до 9 месяцев) антитело к IL-33, содержащееся в составе, связывает hIL-33 с аффинностью, которая составляет по меньшей мере 80%, 85%, 90%, 95% или более от аффинности связывания антитела перед указанным хранением. Аффинность связывания может быть определена любым способом, таким как, например, ELISA или плазмонный резонанс. Биологическая активность может быть определена в исследовании активности IL-33, таком как приведение клетки, экспрессирующей IL-33, в контакт с составом, содержащим антитело к IL-33. Связывание антитела с указанной клеткой может быть измерено напрямую, например, в анализе FACS. В качестве может быть измерена активность последующих элементов системы IL-33 в присутствии антитела и проведено сравнение с активностью системы IL-33 в отсутствие антитела.
Стабильность может быть измерена, помимо прочего, путем определения относительного количества антитела, которое образует агрегаты в составе после хранения в течение определенного периода времени при определенной температуре, где стабильность обратно пропорциональна уровню образующихся агрегатов в процентах. Относительное количество агрегатов антитела может быть определено, помимо прочего, путем гельпроникающей хроматографии (например, гельпроникающейвысокоэффективной жидкостной хроматографии [ГП-ВЭЖХ] или гельпроникающей-сверхэффективной жидкостной хроматографии [ГП-СВЭЖХ]). Фраза приемлемый уровень стабильности в настоящем документе означает, что не более 6% антитела присутствует в форме агрегата, обнаруженной в составе после хранения в течение определенного периода времени при данной температуре. В определенных вариантах реализации приемлемый уровень стабильности означает, что не более чем приблизительно 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5% или 0,1% антитела может быть обнаружено в форме агрегата в составе после хранения в течение определенного периода времени при данной температуре. Определенный период времени, по прошествии которого измеряют стабильность, может составлять по меньшей мере 2 недели, по меньшей мере 28 дней, по меньшей мере 1 месяц, по меньшей мере 2 месяца, по меньшей мере 3 месяца, по меньшей мере 4 месяца, по меньшей мере 5 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 7 месяцев, по меньшей мере 8 месяцев, по меньшей мере 9 месяцев, по меньшей мере 10 месяцев, по меньшей мере 11 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев, по меньшей мере 24 месяца, по меньшей мере 30 месяцев, по меньшей мере 36 месяцев или дольше. Температура,
- 15 045976 при которой можно хранить фармацевтический состав при оценке стабильности, может представлять собой любую температуру от приблизительно -80°C до приблизительно 45°C, например, температуру хранения приблизительно -80°C, приблизительно -30°C, приблизительно -20°C, приблизительно 0°C, приблизительно 4°-8°C, приблизительно 5°C, приблизительно 25°C, приблизительно 35°C, приблизительно 37°C или приблизительно 45°C. Например, фармацевтический состав может считаться стабильным, если после девяти месяцев хранения при 5°C менее чем приблизительно 2%, 1,75%, 1,5%, 1,25%, 1%, 0,75%, 0,5%, 0,25% или 0,1% антитела обнаруживается в форме агрегата. Фармацевтический состав также может считаться стабильным, если после шести месяцев хранения при 25°C менее чем приблизительно 2%, 1,75%, 1,5%, 1,25%, 1%, 0,75%, 0,5%, 0,25% или 0,1% антитела обнаруживается в форме агрегата. Фармацевтический состав также может считаться стабильным, если после 28 дней хранения при 45°C менее чем приблизительно 4%, 3,5%, 3%, 2,5%, 2%, 1,5%, 1%, 0,5% или 0,1% антитела обнаруживается в форме агрегата. Фармацевтический состав также может считаться стабильным, если после трех месяцев хранения при -20°C, -30°C или -80°C менее чем приблизительно 2%, 1,9%, 1,8%, 1,7%, 1,6%, 1,5%, 1%, 0,5% или 0,1% антитела обнаруживается в форме агрегата.
Стабильность может быть измерена, помимо прочего, путем определения доли антитела, которая переходит в более кислую фракцию во время ионообмена (кислая форма), но не в базовую фракцию антитела (форма с базовым зарядом), где стабильность обратно пропорциональна количеству антитела в кислой форме. Не желая быть связанными теорией, полагают, что деамидирование антитела может приводить к приобретению большего отрицательного заряда антителом, которое, таким образом, становится более кислым по сравнению с неамидированным антителом (см., например, Robinson, N., Protein Deamidation, PNAS, April 16, 2002, 99(8):5283-5288). Уровень подкисленного антитела в процентах может быть определен путем ионообменной хроматографии (например, катионообменной высокоэффективной жидкостной хроматографии [CEX-ВЭЖХ] или катионообменной сверхэффективной жидкостной хроматографии [CEX-СВЭЖХ]). Фраза приемлемый уровень стабильности в настоящем документе означает, что не более 52% антитела присутствует более кислой форме, обнаруженной в составе после хранения в течение определенного периода времени при определенной температуре. В определенных вариантах реализации приемлемый уровень стабильности означает, что не более чем приблизительно 52%, 50%, 45%, 40%, 35%, 30%, 29%, 28%, 27%, 26%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5% или 0,1% антитела может быть обнаружено в кислой форме в составе после хранения в течение определенного периода времени при данной температуре. Определенный период времени, по прошествии которого измеряют стабильность, может составлять по меньшей мере 2 недели, по меньшей мере 28 дней, по меньшей мере 1 месяц, по меньшей мере 2 месяца, по меньшей мере 3 месяца, по меньшей мере 4 месяца, по меньшей мере 5 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 7 месяцев, по меньшей мере 8 месяцев, по меньшей мере 9 месяцев, по меньшей мере 10 месяцев, по меньшей мере 11 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев, по меньшей мере 24 месяца, по меньшей мере 30 месяцев, по меньшей мере 36 месяцев или дольше. Температура, при которой можно хранить фармацевтический состав при оценке стабильности, может представлять собой любую температуру от приблизительно -80°C до приблизительно 45°C, например, температуру хранения приблизительно -80°C, приблизительно -30°C, приблизительно -20°C, приблизительно 0°C, приблизительно 4°-8°C, приблизительно 5°C, приблизительно 25°C или приблизительно 45°C. Например, фармацевтический состав может считаться стабильным, если после трех месяцев хранения при -80°C, -30°C или -20°C менее чем приблизительно 29%, 28%, 27%, 26%, 25%, 24%, 23%, 22%, 21%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5% или 0,1% антитела присутствует в более кислой форме. Фармацевтический состав также может считаться стабильным, если после девяти месяцев хранения при 5°C менее чем приблизительно 28%, 27%, 26%, 25%, 24%, 23%, 22%, 21%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5% или 0,1% антитела присутствует в более кислой форме. Фармацевтический состав также может считаться стабильным, если после 28 дней хранения при 25°C менее чем приблизительно 30%, 29%, 28%, 27%, 26%, 25%, 24%, 23%, 22%, 21%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5% или 0,1% антитела присутствует в более кислой форме. Фармацевтический состав также может считаться стабильным, если после 28 дней хранения при 37°C менее чем приблизительно 37%, 36%, 35%, 34%, 33%, 32%, 31%, 30%, 29%, 28%, 27%, 26%, 25%, 24%, 23%, 22%, 21%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5% или 0,1% антитела присутствует в более кислой форме. Фармацевтический состав также может считаться стабильным, если после 28 дней хранения при 45°C менее чем приблизительно 52%, 51%, 50%, 49%, 48%, 47%, 46%, 45%, 44%, 43%, 42%, 41%, 40%, 39%, 38%, 37%, 36%, 35%, 34%, 33%, 32%, 31%, 30%, 29%, 28%, 27%, 26%, 25%, 24%, 23%, 22%, 21%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5% или 0,1% антитела может быть обнаружено в более кислой форме.
В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит не более 2%, не более 1,9%, не более 1,8%, не более 1,7%, не более 1,6% или не более 1,5% HMW частиц при измерении путем гельпроникающей-сверхэффективной жидкостной хроматографии (ГП-СВЭЖХ) после 24 месяцев хранения
- 16 045976 при -80°C, -30°C или -20°C. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит не более 1%, не более 0,9%, не более 0,8%, не более 0,7%, не более 0,6% или не более 0,5% HMW частиц при измерении путем ГП-СВЭЖХ после девяти месяцев хранения при -80°C, -30°C или -20°C. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит не более 1%, не более 0,9%, не более 0,8%, не более 0,7% или не более 0,6% HMW частиц при измерении путем ГП-СВЭЖХ после двух месяцев хранения при 5°C. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит не более 2%, не более 1,8%, не более 1,6%, не более 1,4%, не более 1,2% или не более 1,0% HMW частиц при измерении путем ГП-СВЭЖХ после двух месяцев хранения при 25°C и 60% относительной влажности. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит не более 6%, не более 5,5%, не более 5,4%, не более 5,3%, не более 5,2% или не более 5,1% HMW частиц при измерении путем ГП-СВЭЖХ после двух месяцев хранения при 40°C и 75% относительной влажности. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит не более 1%, не более 0,9%, не более 0,8% или не более 0,7% HMW частиц при измерении путем ГП-СВЭЖХ после девяти месяцев хранения при 2-8°C. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит не более 3%, не более 2,8%, не более 2,6%, не более 2,4%, не более 2,2% или не более 2,0% HMW частиц при измерении путем ГП-СВЭЖХ после 24 месяцев хранения при 2-8°C. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит не более 2%, не более 1,8%, не более 1,6%, не более 1,5%, не более 1,4% или не более 1,3% HMW частиц при измерении путем ГП-СВЭЖХ после шести месяцев хранения при 25°C и 60% относительной влажности. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит не более 1%, не более 0,9%, не более 0,8% или не более 0,7% HMW частиц при измерении путем ГП-СВЭЖХ после шести месяцев хранения при 2-8°C. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит не более 1%, не более 0,9%, не более 0,8%, не более 0,7%, не более 0,6% или не более 0,5% HMW частиц при измерении путем ГП-СВЭЖХ после трех месяцев хранения при 2-8°C.
В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 97,5% или по меньшей мере 97,9% нативной формы антитела при измерении путем гельпроникающей-сверхэффективной жидкостной хроматографии (ГП-СВЭЖХ) после 24 месяцев хранения при -80°C, -30°C или -20°C. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% нативной формы антитела при измерении путем гельпроникающей-сверхэффективной жидкостной хроматографии (ГП-СВЭЖХ) после девяти месяцев хранения при -80°C, -30°C или -20°C. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% нативной формы антитела при измерении путем гельпроникающейсверхэффективной жидкостной хроматографии (ГП-СВЭЖХ) после двух месяцев хранения при 5°C. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 98,5% или по меньшей мере 98,8% нативной формы антитела при измерении путем гельпроникающей-сверхэффективной жидкостной хроматографии (ГП-СВЭЖХ) после двух месяцев хранения при 25°C и 60% относительной влажности. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94% или по меньшей мере 94,1% нативной формы антитела при измерении путем гельпроникающейсверхэффективной жидкостной хроматографии (ГП-СВЭЖХ) после двух месяцев хранения при 40°C и 75% относительной влажности. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% нативной формы антитела при измерении путем гельпроникающейсверхэффективной жидкостной хроматографии (ГП-СВЭЖХ) после девяти месяцев хранения при 2-8°C. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или
- 17 045976 фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 97,5% или по меньшей мере 97,6% нативной формы антитела при измерении путем гельпроникающей-сверхэффективной жидкостной хроматографии (ГП-СВЭЖХ) после 24 месяцев хранения при 2-8°C. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 98,4% нативной формы антитела при измерении путем гельпроникающей-сверхэффективной жидкостной хроматографии (ГП-СВЭЖХ) после шести месяцев хранения при 25°C и 60% относительной влажности. В определенных вариантах реализации стабильная (стабильный) фармацевтическая композиция или фармацевтический состав согласно настоящему изобретению содержит по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% нативной формы антитела при измерении путем гельпроникающейсверхэффективной жидкостной хроматографии (ГП-СВЭЖХ) после трех или после шести месяцев хранения при 2-8°C.
Предполагается, что описание стабильности фармацевтических составов после конкретного периода времени означает, что измерение параметра стабильности (например, % нативной формы, % HMW частиц или % кислой формы) проводят по завершении или приблизительно по завершении конкретного периода времени, и не означает, что фармацевтический состав обязательно сохранит такой же уровень измеряемого параметра стабильности после этого. Например, описание конкретного параметра стабильности после 9 месяцев означает, что измерение параметра стабильности проводили через или приблизительно через 9 месяцев после начала исследования. Дополнительные способы оценки стабильности антитела в составе продемонстрированы в примерах, представленных далее.
В текучей форме фармацевтические составы согласно настоящему изобретению, в некоторых вариантах реализации, могут обладать вязкостью от низкой до умеренной. Вязкость в настоящем документе может представлять собой кинематическую вязкость или абсолютную вязкость. Кинематическая вязкость является мерой сопротивления потока текучей среды под действием силы тяжести. Если две текучие среды равного объема помещают в идентичные капиллярные вискозиметры и оставляют стекать под действием силы тяжести, то более вязкая текучая среда дольше стекает по капилляру по сравнению с менее вязкой текучей средой. Например, если одна текучая среда полностью стекает за 200 с, а другая текучая среда за 400 с, то вторая текучая среда является в два раза более вязкой по сравнению с первой по шкале кинематической вязкости. Абсолютная вязкость, иногда называемая динамической вязкостью или просто вязкостью, представляет собой произведение кинематической вязкости и плотности текучей среды (абсолютная вязкость=кинематическая вязкость х плотность). Кинематическая вязкость имеет размерность L2/T, где L представляет собой расстояние, и T представляет собой время. Обычно кинематическую вязкость выражают в сантистоксах (сСт). В системе СИ единицей измерения кинематической вязкости является мм2/с, что соответствует 1 сСт. Абсолютную вязкость выражают в сантипуазах (сП). В системе СИ единицей измерения абсолютной вязкости является миллипаскаль-секунда (мПа-с), где 1 сП=1 мПа-с.
В настоящем документе низкий уровень вязкости в отношении текучего состава согласно настоящему изобретению относится к абсолютной вязкости менее чем приблизительно 20 сантипуаз (сП) при 20°C. Например, считается, что текучий состав согласно изобретению имеет низкую вязкость, если при измерении стандартными способами определения вязкости состав имеет абсолютную вязкость приблизительно 19 сП, приблизительно 18 сП, приблизительно 17 сП, приблизительно 16 сП, приблизительно 15 сП, приблизительно 14 сП, приблизительно 13 сП, приблизительно 12 сП, приблизительно 11 сП, приблизительно 10 сП, приблизительно 9 сП, приблизительно 8 сП, приблизительно 7 сП, приблизительно 6 сП, приблизительно 5 сП, приблизительно 4 сП или менее. В настоящем документе умеренный уровень вязкости в отношении текучего состава согласно настоящему изобретению соответствует абсолютной вязкости от приблизительно 30 сП до приблизительно 20 сП. Например, считается, что текучий состав согласно изобретению имеет умеренную вязкость, если при измерении стандартными способами определения вязкости состав имеет абсолютную вязкость приблизительно 30 сП, приблизительно 29 сП, приблизительно 28 сП, приблизительно 27 сП, приблизительно 26 сП, приблизительно 25 сП, приблизительно 24 сП, приблизительно 23 сП, приблизительно 22 сП, приблизительно 21 сП или приблизительно 20 сП. Каждое из указанных значений относится к значению, измеренному при 20°C.
Как проиллюстрировано далее в примерах, настоящее изобретение основано, отчасти, на открытии того факта, что комбинация заявленных вспомогательных веществ и антитела к IL-33 обеспечивает состав, который является стабильным и имеет желаемую вязкость.
Контейнеры и способы введения
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению могут содержаться в любом контейнере, подходящем для хранения медицинских препаратов и других терапевтических композиций. Например, фармацевтические составы могут содержаться в герметичном и стерилизованном пластиковом или стеклянном контейнере, имеющем определенный объем, таком как пробирка, ампула, шприц, картридж, бутыль или пакет для внутривенного (ВВ) вливания. Можно применять разные типы пробирок
- 18 045976 для хранения составов согласно настоящему изобретению, включая, например, прозрачные и непрозрачные (например, из темного стекла) стеклянные или пластиковые пробирки. Аналогично, можно применять любой тип шприцев для хранения и/или введения фармацевтических составов согласно настоящему изобретению. В некоторых вариантах реализации фармацевтический состав содержится в предварительно наполненном шприце. В некоторых вариантах реализации фармацевтический состав содержится в предварительно наполненном шприце с несъемной иглой.
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению могут содержаться в шприцах с нормальным содержанием вольфрама или в шприцах с низким содержанием вольфрама. Как известно специалистам обычной квалификации в данной области техники, процесс изготовления стеклянных шприцев, как правило, включает применение нагретого вольфрамового стержня, функция которого заключается в прокалывании стекла и создания тем самым отверстия, через которое можно отбирать и извлекать жидкость из шприца. Этот процесс приводит к осаждению следовых количеств вольфрама на внутренней поверхности шприца. Для снижения количества вольфрама в шприце впоследствии можно использовать промывку и другие стадии обработки. В настоящем документе термин нормальное содержание вольфрама означает, что шприц содержит более 500 миллиардных долей (ppb) вольфрама. Термин низкое содержание вольфрама означает, что шприц содержит менее 500 ppb вольфрама. Например, шприц с низким содержанием вольфрама согласно настоящему изобретению может содержать менее чем приблизительно 490, 480, 470, 460, 450, 440, 430, 420, 410, 390, 350, 300, 250, 200, 150, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 ppb вольфрама или менее.
Резиновые плунжеры, используемые в шприцах, и резиновые пробки, используемые для закрытия пробирок, могут содержать покрытие для предотвращения загрязнения содержащегося в шприце или пробирке медицинского препарата и/или сохранения его стабильности. Таким образом, фармацевтические составы согласно настоящему изобретению, согласно определенным вариантам реализации могут содержаться в шприце, который содержит плунжер с покрытием, или в пробирке, которая закрыта резиновой пробкой с покрытием. Например, плунжер или пробка могут содержать покрытие, представляющее собой фторуглеродную пленку. Примеры пробок и/или плунжеров с покрытием, подходящих для применения в пробирках и шприцах, содержащих фармацевтические составы согласно настоящему изобретению, упоминаются, например, в патентах США №4997423; 5908686; 6286699; 6645635; и 7226554, содержание которых включено в настоящий документ во всей полноте посредством ссылок. Конкретные примеры резиновых пробок и плунжеров с покрытием, которые можно применять в контексте настоящего изобретения, коммерчески доступны под торговой маркой FluroTec® в West Pharmaceutical Services, Inc. (Lionville, PA). Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения фармацевтические составы могут содержаться в шприце с низким содержанием вольфрама, который содержит плунжер с фторуглеродным покрытием. В некоторых вариантах реализации контейнер представляет собой шприц, такой как шприц Ompi EZ-Fill™ или шприц BD Neopak™. В некоторых случаях шприц представляет собой 1 мл стеклянный шприц с длинным корпусом, с 1 мл поршнем iWest, тонкостенной иглой калибра 27G и защитным колпачком для иглы FM30 или защитным колпачком для иглы BD260. В некоторых случаях шприц представляет собой 2,25 мл стеклянный шприц с 1-3 мл поршнем West NovaPure™, тонкостенной иглой калибра 27G и защитным колпачком для иглы FM30 или защитным колпачком для иглы BD260. В разных вариантах реализации шприц представляет собой шприц (например, стеклянный шприц) объемом 0,5 мл, 0,6 мл, 0,7 мл, 0,8 мл, 0,9 мл, 1,0 мл, 1,1 мл, 1,2 мл, 1,3 мл, 1,4 мл, 1,5 мл, 1,6 мл, 1,7 мл, 1,8 мл, 1,9 мл, 2,0 мл, 2,1 мл, 2,2 мл, 2,3 мл, 2,4 мл, 2,5 мл, 2,6 мл, 2,7 мл, 2,8 мл, 2,9 мл, 3,0 мл, 3,5 мл, 4,0 мл, 4,5 мл, 5,0 мл, 5,5 мл, 6,0 мл, 6,5 мл, 7,0 мл, 7,5 мл, 8,0 мл, 8,5 мл, 9,0 мл, 9,5 мл или 10 мл.
Фармацевтические составы могут быть введены пациенту парентеральными способами, такими как инъекция (например, подкожная, внутривенная, внутримышечная, интраперитонеальная и т.д.), или чрескожным, чресслизистым, интраназальным, внутрилегочным и/или пероральным способами. Множество устройств доставки в виде шприц-ручек и/или автоинъекторов для многократного применения можно использовать для подкожной доставки фармацевтических составов согласно настоящему изобретению. Примеры включают, но не ограничиваются указанными, AUTOPEN™ (Owen Mumford, Inc., Вудсток, Соединенное Королевство), шприц-ручку DISETRONIC™ (Disetronic Medical Systems, Бургдорф, Швейцария), шприц-ручку HUMALOG MIX 75/25™, шприц-ручку HUMALOG™, шприц-ручку HUMALIN 70/30™ (Eli Lilly and Co., Индианаполис, Индиана), NOVOPEN™ I, II и III (Novo Nordisk, Копенгаген, Дания), NOVOPEN JUNIOR™ (Novo Nordisk, Копенгаген, Дания), шприц-ручку BD™ (Becton Dickinson, Франклин-Лейкс, Нью-Джерси), OPTIPEN™, OPTIPEN PRO™, OPTIPEN STARLET™ и OPTICLIK™ (Sanofi-Aventis, Франкфурт, Германия), помимо многих других. Примеры одноразовых устройств доставки в виде шприц-ручек и/или автоинъекторов, применяемых для подкожной доставки фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются указанными, шприц-ручку SOLOSTAR™ (Sanofi-Aventis), FLEXPEN™ (Novo Nordisk) и KWIKPEN™ (Eli Lilly), автоинъектор SURECLICK™ (Amgen, Таузенд-Оукс, Калифорния), PENLET™ (Haselmeier, Штутгард, Германия), EPIPEN (Dey, L.P.) и шприц-ручку HUMIRA™ (Abbott Labs, Abbott Park, Иллинойс), помимо многих других. В некоторых случаях фармацевтический состав содержится в шприце, специально пред- 19 045976 назначенном для использования совместно с автоинъектором. Подкожные инъекции могут быть осуществлены с использованием иглы 20-30 калибра или иглы 25-30 калибра. В некоторых случаях подкожные инъекции могут быть осуществлены с использованием иглы 25 калибра. В некоторых случаях подкожные инъекции могут быть осуществлены с использованием иглы 27 калибра. В некоторых случаях подкожные инъекции могут быть осуществлены с использованием иглы 29 калибра.
Другой тип устройства доставки может включать защитную систему. Указанные устройства могут быть относительно недорогими и функционируют посредством ручного или автоматического выдвижения защитного чехла вокруг иглы после завершения инъекции. Примеры защитных систем могут включать устройство ERIS производства West Pharmaceutical или устройство UltraSafe производства Becton Dickinson. Кроме того, в настоящем документе также рассматривается применение устройства большого объема (LVD) или устройства для инъекции болюса для доставки фармацевтических составов согласно настоящему изобретению. В некоторых случаях LVD или устройство для инъекции болюса могут быть выполнены с возможностью инъекции лекарственного препарата пациенту. Например, LVD или устройство для инъекции болюса могут быть выполнены с возможностью доставки большого объема лекарственного препарата (как правило, от приблизительно 2 мл до приблизительно 10 мл).
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению также могут содержаться в стандартной лекарственной форме. Термин стандартная лекарственная форма в настоящем документе относится к физически дискретной форме, которая подходит для введения стандартной дозировки пациенту, которого лечат, где каждая стандартная форма содержит предварительно определенное количество активного соединения, вычисленное таким образом, чтобы обеспечивать желаемый терапевтический эффект, совместно с требуемым фармацевтическим носителем, разбавителем или вспомогательным веществом. В разных вариантах реализации стандартная лекарственная форма содержится в контейнере, таком как описан в настоящем документе. Фактическая дозировка активного ингредиента (например, антитела к IL-33) в составах согласно настоящему изобретению может изменяться для получения количества активного ингредиента, которое эффективно обеспечивает желаемый терапевтический ответ у конкретного пациента, для конкретной композиции и способа введения в отсутствие нежелательных эффектов у пациента. Выбранная дозировка зависит от ряда фармакокинетических факторов, включая активность конкретных применяемых композиций согласно настоящему изобретению, способа введения, времени введения, скорости выведения конкретного применяемого соединения, продолжительности лечения, других лекарственных средств, соединений и/или материалов, применяемых в комбинации с конкретными используемыми композициями, возраста, пола, массы тела, состояния, общего состояния здоровья и анамнеза пациента, которого лечат, и прочих факторов, хорошо известных в области медицины. Термин разбавитель в настоящем документе относится к раствору, подходящего для изменения или достижения предложенной или надлежащей концентрации или концентраций, таких как описано в настоящем документе.
В разных вариантах реализации стандартная лекарственная форма содержит количество активного ингредиента (например, антитела к IL-33), предназначенное для разового применения. В разных вариантах реализации количество активного ингредиента в стандартной лекарственной форме составляет от приблизительно 0,1 мг до приблизительно 5000 мг, от приблизительно 100 мг до приблизительно 1000 мг и от приблизительно 100 мг до приблизительно 500 мг, от приблизительно 100 мг до приблизительно 400 мг, от приблизительно 100 мг до приблизительно 200 мг, от приблизительно 250 мг до приблизительно 350 мг, от приблизительно 125 мг до приблизительно 175 мг, от приблизительно 275 мг до приблизительно 325 мг или находится в диапазонах или интервалах между указанными значениями. Предполагается, что промежуточные диапазоны указанных выше количеств, например, от приблизительно 135 мг до приблизительно 165 мг или от 285 мг до 315 мг, также являются частью настоящего изобретения. Например, предполагается, что включены диапазоны значений, в которых комбинация любых из указанных выше значений (или значений, содержащихся в указанных выше диапазонах) используется в качестве верхнего и/или нижнего пределов. В конкретном варианте реализации состав часто поставляется в виде жидкости в стандартной лекарственной форме. В некоторых вариантах реализации стандартная лекарственная форма содержит приблизительно 150 мг. В некоторых вариантах реализации стандартная лекарственная форма содержит приблизительно 300 мг. В некоторых вариантах реализации стандартная лекарственная форма согласно настоящему изобретению подходит для подкожного введения пациенту.
В настоящее изобретение также включены способы получения стандартной лекарственной формы. В предложенном варианте реализации способ получения фармацевтической стандартной лекарственной формы включает объединение состава согласно любому из предшествующих вариантов реализации в подходящем контейнере (например, в контейнерах, описанных в настоящем документе).
Терапевтические применения фармацевтических составов
Фармацевтические составы согласно настоящему изобретению подходят, помимо прочего, для лечения, предотвращения и/или ослабления любого заболевания или нарушения, связанного с активностью IL-33. В частности, фармацевтические составы согласно изобретению подходят, помимо прочего, для лечения, предотвращения и/или ослабления любого заболевания или нарушения, связанного с или опосредованного экспрессией, передачей сигнала или активностью IL-33, или которое может быть излечено
- 20 045976 путем блокирования взаимодействия между IL-33 и лигандом IL-33 (например, ST2) или ингибирования активности и/или передачи сигнала IL-33 иным образом.
Способы лечения согласно настоящему изобретению включают введение субъекту любого состава, содержащего антитело к hIL-33, как описано в настоящем документе. Субъект, которому вводят фармацевтический состав, может представлять собой, например, любого человека или животное, не являющееся человеком, который(-ое) нуждается в указанном лечении, предотвращении и/или ослаблении, и на которого ингибирование или ослабление IL-33 и/или активности, опосредованной IL-33, может оказать иной полезный эффект. Например, субъект может представлять собой индивидуума, у которого диагностировано или предположительно имеется риск поражения любым из указанных выше заболеваний или нарушений. В настоящее изобретение дополнительно включено применение любых фармацевтических составов, описанных в настоящем документе, для получения лекарственного средства для лечения, предотвращения и/или ослабления любого заболевания или нарушения, связанного с активностью IL-33, включая любые упомянутые выше примеры заболеваний, нарушений и состояний.
В некоторых вариантах реализации в настоящем изобретении предложены наборы, содержащие фармацевтический состав (например, контейнер с составом или стандартной лекарственной формой), такой как описан в настоящем документе, и упаковку или этикетку (например, листок-вкладыш) с инструкциями по применению указанного фармацевтического состава для лечения заболевания или нарушения, такого как описано выше. В некоторых случаях в инструкциях предложено применение стандартной лекарственной формы, такой как описана в настоящем документе, для лечения заболевания или нарушения.
Последовательности, описанные в настоящем документе и показанные в прилагаемом перечне последовательностей, соответствуют mAb1, полноразмерному антителу человека с константной областью тяжелой цепи IgG4, которое применяют в следующих ниже примерах. Данные последовательностей показаны ниже.
Т аблица последовательностей (SEQ ID NO):_____________________________________
| HCVR | HCDR1 | HCDR2 | HCDR3 | Тяжелая цепь | |||||
| ДНК | Белок | ДНК | Белок | ДНК | Белок | ДНК | Белок | ДНК | Белок |
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 17 | 18 |
| LCVR | LCDR1 | LCDR2 | LCDR3 | Легкая цепь | |||||
| ДНК | Белок | ДНК | Белок | ДНК | Белок | ДНК | Белок | ДНК | Белок |
| 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 19 | 20 |
Примеры
Следующие примеры приведены для того, чтобы в полной мере раскрыть и описать для специалистов в данной области техники способы получения и применение способов и композиций согласно изобретению, и не ограничивают объем информации, которую авторы рассматривают в качестве изобретения. Были предприняты усилия для обеспечения точности используемых числовых параметров (например, количеств, температуры и т.д.), но следует учитывать возможность появления некоторых ошибок и погрешностей эксперимента. Если не указано иное, то доли соответствуют массовым долям, молекулярная масса представляет собой среднюю молекулярную массу, температура указана в градусах Цельсия, и давление равно или практически равно атмосферному.
Пример 1. Влияние буфера и pH на стабильность антитела к IL-33.
Изучали влияние буфера и pH на термическую стабильность mAb1 в жидких составах путем инкубации 5 мг/мл mAb1 при 45°C в течение 28 дней в разных буферных системах в разных диапазонах pH. Были исследованы следующие pH и буферные системы: ацетат (pH от 4,5 до 5,5), L-гистидин (pH от 5,5 до 6,5) и фосфат (pH от 6,0 до 7,0). Согласно результатам анализа ГП-СВЭЖХ максимальная стабильность белка наблюдалась при включении mAb1 в состав с pH от 6,0 до pH 6,5 в L-гистидиновом буфере. Согласно результатам анализа CEX-СВЭЖХ максимальная стабильность белка наблюдалась при включении mAb1 в состав с pH от 5,0 до pH 6,0 в L-гистидиновом или ацетатном буфере. В указанных анализах также было определено, что образование HMW частиц и форм с измененным зарядом являлись основными путями распада. Результаты показаны в табл. 1.
- 21 045976
Таблица 1
Влияние буфера и pH на стабильность 5 мг/мл mAbl после инкубации при 45°C в течение 28 дней
| Состав | 5 мг/мл mAbl, 20 мМ буфер | |||||||
| Наполняемый объем | 0,2 мл | |||||||
| Контейнер/средство укупорки | 96-луночный планшет CZ с крышкой С4 | |||||||
| рН/буфе Р | Мутность (увеличен ие ОП при 405 нм) | % общего белка, выделенно го путем ГПСВЭЖХ!) | Изменение чистоты согласно ГП-СВЭЖХ 2) | Изменение уровня форм с измененным зарядом согласно СЕХ-СВЭЖХа | ||||
| НМ W, % | Нативна я форма, % | LM W, % | Кисла я форма , % | Базова я форма, % | Основна я форма, % | |||
| pH 4,5, ацетат | 0,00 | 104 | 1,2 | -2,2 | 1,0 | 16,3 | -20,9 | 4,6 |
| pH 5,0, ацетат | 0,00 | 103 | 2,3 | -2,7 | 0,4 | 17,7 | -19,9 | 2,2 |
| pH 5,5, ацетат | 0,00 | 103 | 1,7 | -1,9 | 0,2 | 20,2 | -21,1 | 0,8 |
| pH 5,5, Lгистиди н | 0,00 | 103 | 2,0 | -2,6 | 0,6 | 18,7 | -20,3 | 2,8 |
| pH 6,0, Lгистиди н | 0,00 | 104 | 1,2 | -1,4 | 0,2 | 21,1 | -22,3 | 1,3 |
| pH 6,5, Lгистиди н | 0,00 | 103 | 1,2 | -1,3 | 0,1 | 26,8 | -22,1 | -4,7 |
| pH 6,0, фосфат | 0,00 | 104 | 3,3 | -3,5 | 0,2 | 25,1 | -20,9 | -4,3 |
| pH 6,5, фосфат | 0,01 | 101 | 3,6 | -3,8 | 0,2 | 32,6 | -32,2 | -0,4 |
| pH 7,0, фосфат | 0,11 | 101 | 2,6 | -3,0 | 0,5 | 45,2 | -42,2 | -3,0 |
a Выделение общего белка в % определяли как: общая площадь пика, определенная путем ГПСВЭЖХ в день 28/общая площадь пика, определенная путем ГП-СВЭЖХ в день 0 * 100%. a Указано как изменение чистоты относительно исходного вещества. Исходное вещество (без инкубации) содержало > 97,2% пика нативной формы согласно ГП-СВЭЖХ и > 56,5% пика базовой формы согласно CEX-СВЭЖХ для всех составов.
Изучали влияние pH и буфера на термическую стабильность mAb1 в жидких составах путем инкубации 150 мг/мл mAb1 при 37°C в течение 28 дней в разных L-гистидиновых и ацетатных буферах с pH 4,5, 5,0 и 6,0 в присутствии 5% сахарозы в качестве агента для сохранения термической стабильности. Согласно результатам анализа молекулярной массы частиц путем ГП-СВЭЖХ и уровня форм с измененным зарядом согласно CEX-СВЭЖХ образование агрегатов (т.е. образование HMW частиц) и форм с измененным зарядом являлись основными путями распада. Стабильность mAb1 при pH 5,0 и 6,0 в Lгистидиновом и при pH 5,0 в ацетатном буфере была сравнимой, как показано в табл. 2.
- 22 045976
Таблица 2
Влияние pH и буфера на стабильность 150 мг/мл mAbl после инкубации при 37°C в течение 28 дней
| Состав | 150 мг/мл mAbi, 10 мМ L-гистидин или 10 мМ ацетат, 5% сахарозы | ||||||
| Наполняемый объем | 0,3 мл | ||||||
| Контейнер/средс тво укупорки | 2 мл пробирка из боросиликатного стекла 1 типа с пробкой из бутилового каучука 4432/50 с покрытием FluroTec® | ||||||
| рН/буфер | % общего белка, выд елейно го путем ГПСВЭЖХ1) | Изменение чистоты согласно ГП-СВЭЖХ2) | Изменение уровня форм с измененным зарядом согласно СЕХ-СВЭЖХа | ||||
| HMW, % | Нативн ая форма, % | LMW, % | Кисла я форма , % | Базова я форма, % | Основна я форма, % | ||
| pH 6,0 L-гистидин | 100 | 1,4 | -1,8 | 0,4 | 7,8 | -8.2 | 0,4 |
| pH 5,0 L-гистидин | 97 | 1,5 | -2,0 | 0,5 | 5,3 | -8.0 | 2,7 |
| pH 5,0 Ацетат | 100 | 1,6 | -2,1 | 0,5 | 6,0 | -8.7 | 2,7 |
| pH 4,5 Ацетат | 95 | 4,3 | -5,8 | 1,5 | 8,4 | -12,5 | 4,0 |
a Выделение общего белка в % определяли как: общая площадь пика, определенная путем ГП-СВЭЖХ в день 28/общая площадь пика, определенная путем ГП-СВЭЖХ в день 0 * 100%.
a Указано как изменение чистоты относительно исходного вещества. Исходное вещество (без инкубации) содержало > 89,1% пика нативной формы согласно ГП-СВЭЖХ и > 64,8% пика базовой формы согласно CEX-СВЭЖХ для всех составов.
Пример 2. Влияние поверхностно-активных веществ и агентов для сохранения термической стабильности на стабильность антитела к IL-33.
Сначала изучали влияние двух поверхностно-активных веществ, 0,1% полисорбата 20 и 0,1% полисорбата 80, на термическую стабильность 5 мг/мл mAb1 в жидких составах с использованием предоставленной для исследования партии вещества. Результаты исследования термической стабильности приведены в таблице 3. При инкубации при 45°C добавление как полисорбата 20, так и полисорбата 80, отрицательно влияло на термическую стабильность mAb1 по сравнению с контрольным составом, в котором отсутствовали какие-либо поверхностно-активные вещества. Наблюдалось увеличение числа высокомолекулярных частиц и форм с измененным зарядом. Добавление 0,1% полисорбата 80 приводило к меньшему относительному увеличению числа HMW частиц и образованию форм с измененным зарядом по сравнению с добавлением 0,1% полисорбата 20.
Было проведено дополнительное исследование для изучения разных концентраций полисорбата 80 с использованием типовой предоставленной для исследования партии вещества при концентрации mAb1 50 мг/мл. В исследовании использовали следующие концентрации полисорбата 80: 0%, 0,01%, 0,02%, 0,04%, 0,06%, 0,08% и 0,1%. Результаты сведены в табл. 4 и 5. После перемешивания в течение 60 минут в образце, не содержащем полисорбат 80, наблюдали увеличение относительного числа HMW частиц на 0,8% (табл. 4). При изучении хроматограмм ГП-СВЭЖХ было показано, что данное увеличение было связано с образованием пика агрегата более высокого порядка, который отсутствовал в исходном веществе. Добавление >0,02% полисорбата 80 предотвращало образование указанных частиц агрегатов после перемешивания в течение 60 мин. При инкубации при 45°C в течение 28 дней полисорбат в исследуемых концентрациях не влиял на термическую стабильность mAb1 (табл. 5).
Для 5 мг/мл mAb1 в жидком составе продемонстрирована улучшенная стабильность при включении в состав 5% сахарозы и инкубации в условиях ускоренного состаривания, как показано в табл. 3. После инкубации при 45°C в течение 28 дней относительное число HMW частиц увеличилось на 0,7% в составе, содержащем 5% сахарозы, для сравнения в контрольном составе без сахарозы увеличение составило 1,2%.
- 23 045976
Таблица 3
Влияние поверхностно-активных веществ на стабильность 5 мг/мл mAbl после инкубации при 45°C в течение 28 дней
| Состав | 5 мг/мл mAbl, 20 мМ L-гистидин, pH 6,0 | ||||||||
| Наполняемый объем | 0,2 мл | ||||||||
| Контейнер/средство укупорки | 96-луночный планшет CZ с крышкой С 4 | ||||||||
| Сорастворите ль/ поверхностно -активное вещество | Мутность (увеличен ие ОП при 405 нм) | рн | % общего белка, выделенно го путем ГПСВЭЖХ | Изменение чистоты согласно ГП-СВЭЖХ1) | Изменение уровня форм с измененным зарядом согласно CEX-UPLCa,2) | ||||
| НМ W, % | Натив ная форм а, % | LM W, % | Кис лая фор ма, % | Базо вая форм а, % | Основ ная форма , % | ||||
| Без сорастворите ля/поверхност но-активного вещества | 0,00 | 6,0 | 104 | 1,2 | -1,4 | 0,2 | 2,6 | -3,9 | 1,4 |
| 5% (масс./об.) сахарозы, без сорастворите ля/поверхност но-активного вещества | 0,00 | 6,0 | 110 | 0,7 | -0,9 | 0,1 | 3,8 | -5,4 | 1,6 |
| 5% (масс./об.) сахарозы, 0,1% (масс./об.) полисорбата 20 | 0,01 | 5,9 | 107 | 16, 6 | -16,7 | 0,2 | 1,9 | -25,0 | 23,0 |
| 5% (масс./об.) сахарозы, 0,1% (масс./об.) полисорбата 80 | 0,01 | 5,9 | 109 | и, 5 | -11,9 | 0,4 | 5,6 | -11,8 | 6,2 |
a Указано как изменение чистоты относительно исходного вещества. Исходное вещество (без инкубации) содержало > 97,2% пика нативной формы согласно ГП-СВЭЖХ и > 57,6% пика базовой формы согласно CEX-СВЭЖХ для всех четырех составов.
a В данном исследовании проводили анализ данных для временной точки в 14 день, так как интегрирование хроматограмм CEX, полученных в 28 день, для составов, содержащих полисорбат 20 и полисорбат 80, было невозможно из-за серьезного разрушения каждого из образцов.
- 24 045976
Т аблица 4
Влияние концентрации полисорбата 80 на стабильность 50 мг/мл mAbl после перемешивания (120 мин на вортексе)
| Состав | 50 мг/мл mAbl, 10 мМ L-гистидин, pH 6,0, 5% (масс./об.) сахарозы | |||||||||
| Наполняемый объем | 0,4 мл | |||||||||
| Контейнер/средст во укупорки | 2 мл пробирка из боросиликатного стекла 1 типа с пробкой из бутилового каучука 4432/50 с покрытием FluroTec® | |||||||||
| Полисе рбат 80 | Исследо вание цвета и внешнег о вида | Мутность (увеличен ие ОП при 405 нм) | pH | % общего белка, выделе иного | Изменение чистоты согласно ГПСВЭЖХ!) | Изменение уровня форм с измененным зарядом согласно CEX-UPLCaa | ||||
| путем ОФсвэж X | НМ W, % | Нати вная форм а, % | LM W, % | Кис лая фор ма, % | Базе вая фор ма, % | Осно вная форм а, % | ||||
| Без полисо рбата 80 | Пройден о | 0,01 | 6,0 | 96 | 0,8 | -0,8 | 0,0 | -0,2 | 0,7 | -0,5 |
| 0,02% (масс./ об.) | Пройден о | 0,00 | 6,1 | 97 | 0,0 | 0,0 | 0,0 | -0,8 | 0,8 | 0,0 |
| 0,04% (масс./ об.) | Пройден о | 0,01 | 6,0 | 102 | 0,0 | 0,0 | 0,0 | 0,7 | -0,5 | -0,1 |
| 0,06% (масс./ об.) | Пройден о | 0,01 | 6,1 | 99 | 0,0 | 0,0 | 0,0 | -0,2 | 0,2 | 0,1 |
| 0,08% (масс./ об.) | Пройден о | 0,00 | 6,0 | 95 | 0,0 | 0,0 | 0,0 | 0,0 | 0,0 | 0,0 |
| 0,1% (масс./ об.) | Пройден о | 0,00 | 6,0 | 99 | 0,0 | 0,0 | 0,0 | 0,0 | 0,2 | -0,1 |
a Указано как изменение чистоты относительно исходного вещества. Исходное вещество (без инкубации) содержало 97,9% пика нативной формы согласно ГП-СВЭЖХ и > 68,7% пика базовой формы согласно CEX-СВЭЖХ для всех шести составов.
- 25 045976
Таблица 5
Влияние концентрации полисорбата 80 на стабильность 50 мг/мл mAbl после инкубации при 45°C в течение 28 дней
| Состав | 50 мг/мл mAbl, 10 мМ L-гистидин, pH 6,0, 5% (масс./об.) сахарозы | |||||||||
| Наполняемый объем | 0,4 мл | |||||||||
| Контейнер/средство укупорки | 2 мл пробирка из боросиликатного стекла 1 типа с пробкой из бутилового каучука 4432/50 с покрытием FluroTec® | |||||||||
| Полисо рбат 80 | Исследо вание цвета и внешне го вида | Мутное ТВ (увелич ение ОП при 405 нм) | рн | % общего белка, выделе иного путем ОФсвэж X | Изменение чистоты согласно ГП-СВЭЖХ1) | Изменение уровня форм с измененным зарядом согласно CEX-UPLCaa | ||||
| НМ W, % | Натив ная форма , % | LM W, % | Кисл ая ΦθΡ ма, % | Базов ая форм а, % | Основ ная форма , % | |||||
| Без PS80 | Пройде но | 0,01 | 6,1 | 96 | 3,4 | -4,9 | 1,5 | 31,7 | -32,3 | 0,6 |
| 0,02% (масс./о б·) | Пройде но | 0,01 | 6,1 | 96 | 3,5 | -5,0 | 1,5 | 31,1 | -31,6 | 0,5 |
| 0,04% (масс./о б·) | Пройде но | 0,01 | 6,1 | 101 | 3,5 | -5,0 | 1,5 | 32,4 | -32,9 | 0,5 |
| 0,06% (масс./о б·) | Пройде но | 0,01 | 6,1 | 99 | 3,4 | -5,1 | 1,6 | 31,6 | -32,3 | 0,8 |
| 0,08% (масс./о б·) | Пройде но | 0,01 | 6,1 | 96 | 3,4 | -5,0 | 1,7 | 30,1 | -31,2 | 1,0 |
| 0,1% (масс./о б·) | Пройде но | 0,01 | 6,1 | 98 | 3,6 | -5,2 | 1,6 | 30,4 | -31,0 | 0,6 |
a Указано как изменение чистоты относительно исходного вещества. Исходное вещество (без инкубации) содержало 97,9% пика нативной формы согласно ГП-СВЭЖХ и >68,7% пика базовой формы согласно CEX-СВЭЖХ для всех шести составов.
Пример 3. Влияние модификаторов вязкости на стабильность антитела к IL-33.
mAb1 может содержаться в предварительно наполненном шприце (PFS) и доставляться при помощи устройства доставки, такого как автоинъектор. Вязкость коррелирует с простотой введения инъекции из предварительно наполненного шприца (PFS). Поддержание достаточно низкой вязкости является предпочтительным при разработке устройства доставки, такого как автоинъектор.
Изучали влияние pH на вязкость 150 мг/мл mAb1 в 10 мМ L-гистидиновом буфере. Как показано на фиг. 1, вязкость mAb1 очень сильно зависит от pH в диапазоне pH от 4,8 до 6,7. Чем ниже pH, тем ниже вязкость mAb1. Также изучали влияние вспомогательных веществ на вязкость жидкого состава mAb1 при использовании следующих возможных модификаторов вязкости, ацетата натрия, гидрохлорида Lаргинина, L-глутамата натрия и хлорида магния в концентрациях вплоть до 200 мМ. Базовый состав содержал 150 мг/мл mAb1, 27 мМ ацетат и 5% сахарозы, при pH 5,3. Результаты показаны на фиг. 2. Все указанные вспомогательные вещества в концентрациях 25-150 мМ снижали вязкость 150 мг/мл mAb1 на 2-5 сП при pH 5,3.
Также было изучено влияние модификаторов вязкости на стабильность 150 мг/мл mAb1 после инкубации составов при 37°C в течение 34 дней. Образование HMW частиц являлось основным путем распада, результаты проиллюстрированы на фиг. 3. По сравнению с контрольным составом, которые не содержал модификаторы вязкости, добавление хлорида магния или ацетата натрия способствовало образованию HMW частиц после инкубации при 37°C. С другой стороны, гидрохлорид L-аргинина и Lглутамат натрия не оказывали отрицательное влияние на стабильность mAb1. Напротив, 75 мМ гидрохлорид L-аргинина улучшал стабильность mAb1 с точки зрения образования HMW частиц.
С учетом эффекта снижения вязкости и влияния на термическую стабильность гидрохлорид L
- 26 045976 аргинина был выбран в качестве модификатора вязкости для составов mAb 1.
Пример 4. Влияние параметров состава на вязкость и стабильность.
Для установления эффекта каждого компонента состава, а также pH и совокупности параметров на стабильность и вязкость mAb 1 была предложена специальная схема эксперимента. Параметры состава в данном исследовании включали концентрацию белка (135-165 мг/мл), концентрацию сахарозы (5-9%), концентрацию гидрохлорида L-аргинина (0-75 мМ) и pH. Концентрация поверхностно-активного вещества во всех составах в данном исследовании была постоянной и составляла 0,1%.
Вязкость составов оставалась неизменной до и после 28-дневной инкубации при 40°C/75% отн.вл.
Анализировали зависимость вязкости от основных параметров состава при помощи подстановочной модели в JMP 12 с использованием спецификации Стандартный метод наименьших квадратов и основного оцениваемого параметра Значимость эффекта. Основными факторами, влияющими на вязкость состава, являются концентрация mAb1, pH и концентрация гидрохлорида L-аргинина, что проиллюстрировано на фиг. 4A.
Также изучали стабильность составов после 28-дневной инкубации при 40°C/75% отн.вл. После инкубации при 40°C/75% отн.вл. в течение 28 дней для 14 составов не наблюдались значимые различия цвета и внешнего вида, мутности, изменения pH, уровня выделения белка или изменения уровня форм с измененным зарядом. Основным фактором, определяющим стабильность, являлось образованием HMW частиц.
Анализировали зависимость уровня образования HMW частиц от основных параметров состава при помощи подстановочной модели в JMP 12 с использованием спецификации Стандартный метод наименьших квадратов и основного оцениваемого параметра Значимость эффекта. Основными факторами, влияющими на образование HMW частиц, являлись pH, концентрация гидрохлорида L-аргинина и концентрации сахарозы, что проиллюстрировано на фиг. 4B.
Выбор композиции состава был сделан с учетом минимизации вязкости состава и уровня образования HMW частиц с использованием функции Желательность в JMP12. После проведения многопараметровых анализов была подобрана композиция, содержащая 5% сахарозы и 70 мМ гидрохлорида Lаргинина, с pH 5,3, в которой концентрация антитела (mAb1) составляла 150 мг/мл. В указанном составе была минимизирована вязкость, а также образование HMW частиц. В то же время, он был в меньшей степени восприимчив к изменениям вязкости и стабильности при изменении состава вспомогательных веществ.
Пример 5. Влияние концентрации поверхностно-активного вещества на стабильность антитела к IL-33.
Полисорбат 80 был идентифицирован в качестве поверхностно-активного вещества, обеспечивающего стабилизирующий эффект, в исследованиях, описанных выше в примере 2. Базовый состав для данного исследования содержал 150 мг/мл mAb1, 10 мМ ацетатный буфер, 5% (мас./об.) сахарозы и 70 мМ гидрохлорид L-аргинина. Для начальной оценки использовали следующие концентрации полисорбата 80: 0,01%, 0,02%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,08% и 0,1%. Результаты сведены в табл. 6. После 48 ч перемешивания на орбитальном шейкере при 250 об./мин наблюдали увеличение относительного числа HMW частиц в образцах, содержащих более низкое количество полисорбата 80. Добавление > 0,055% полисорбата 80 предотвращало образование указанных частиц агрегатов после 48-часового перемешивания на орбитальном шейкере.
- 27 045976
Т аблица 6
Влияние концентрации полисорбата 80 на стабильность 150 мг/мл mAbl после 48 ч перемешивания на орбитальном шейкере
| Состав | 150 мг/мл шАЫ, 10 мМ ацетатный буфер, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина | ||||
| Наполняемый объем | 2,5 мл | ||||
| Контейнер/средс тво укупорки | 5 мл пробирка из боросиликатного стекла 1 типа с пробкой из бутилового каучука 4432/50 с покрытием FluroTec® | ||||
| Исследование цвета и внешнего вида | % общего белка, выделенного путем SECсвэжх | Полисорбат 80, %, измеренный при помощи САЕ) (детектор заряженных аэрозолей) | Изменение чистоты согласно ГП-СВЭЖХ1) | ||
| НМ W, % | Нативная форма, % | LM W, % | |||
| Пройдено | 100 | 0,021 | 23,5 | -23,5 | 0,0 |
| Пройдено | 100 | 0,033 | 4,1 | -4,1 | 0,0 |
| Пройдено | 99 | 0,055 | 0,1 | -0,1 | 0,0 |
| Пройдено | 100 | 0,063 | 0,0 | 0,0 | 0,0 |
| Пройдено | 99 | 0,070 | 0,0 | 0,0 | 0,0 |
| Пройдено | 99 | 0,087 | 0,0 | 0,0 | 0,0 |
| Пройдено | 99 | 0,102 | 0,0 | 0,0 | 0,0 |
a Указано как изменение чистоты относительно исходного вещества. Исходное вещество (без инкубации) содержало 98,6% пика нативной формы согласно ГП-СВЭЖХ.
Приемлемый диапазон содержания полисорбата 80 в 150 мг/мл составе mAb1 был дополнительно изучен в исследовании стабильности при перемешивании, а также термической стабильности. В данном исследовании диапазона концентраций использовали такой же базовый состав, при этом концентрации полисорбата 80 составляли 0,02%, 0,05%, 0,08% и 0,12%. Перемешивали составы в течение 48 ч на орбитальном шейкере при 250 об./мин и подвергали термическому состариванию при 40°C/75% отн.вл. в течение одного месяца. Результаты, полученные после перемешивания на орбитальном шейкере, подтвердили, что полисорбат 80 в концентрации >0,05% предотвращал образование указанных частиц агрегатов после 48 ч перемешивания на орбитальном шейкере (см. табл. 7). Полисорбат в исследуемых концентрациях не влиял на термическую стабильность mAb1 (см. табл. 7). Полученные результаты показали, что полисорбат 80 в концентрации 0,05-0,12% обеспечивал достаточную стабилизацию для предотвращения образования агрегатов при перемешивании, не влияя нежелательным образом на стабильность состава. С учетом указанных результатов была выбрана целевая концентрация 0,08% полисорбата 80 в 150 мг/мл/мл составе mAb1.
- 28 045976
Таблица 7
Влияние концентрации полисорбата 80 на стабильность 150 мг/мл mAbl после 48 ч перемешивания на орбитальном шейкере
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетатный буфер, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина | ||||||
| Наполняемый объем | 2,5 мл | ||||||
| Контейнер/сре дство укупорки | 5 мл пробирка из боросиликатного стекла 1 типа с пробкой из бутилового каучука 4432/50 с покрытием FluroTec® | ||||||
| Полисорбат 80 | Исследова ние цвета и внешнего вида | Мутность (увеличен ие ОП при 405 нм) | pH | % общего белка, выделенно го путем SECСВЭЖХ | Изменение чистоты согласно ГП-СВЭЖХ1) | ||
| HMW , % | Натив ная форма, % | LMW , % | |||||
| Стресс-условия: 48 часов в орбитальном шейкере при 250 об./мин | |||||||
| 0,02% (масс./об.) | Пройдено | 0,01 | 5,4 | 100 | 6,4 | -6,4 | 0,0 |
| 0,05% (масс./об.) | Пройдено | 0,00 | 5,4 | 100 | 0,1 | -0,1 | 0,0 |
| 0,08% (масс./об.) | Пройдено | 0,00 | 5,4 | 100 | 0,0 | -0,1 | 0,1 |
| 0,12% (масс./об.) | Пройдено | 0,00 | 5,4 | 99 | 0,0 | 0,0 | 0,1 |
| Стресс-условия: 40°С/75% отн.вл. в течение одного месяца | |||||||
| 0,02% (масс./об.) | Пройдено | 0,01 | 5,4 | 99 | 2,9 | -3,5 | 0,6 |
| 0,05% (масс./об.) | Пройдено | 0,00 | 5,4 | 98 | 3,0 | -3,7 | 0,7 |
| 0,08% (масс./об.) | Пройдено | 0,01 | 5,4 | 98 | 2,9 | -3,6 | 0,7 |
| 0,12% (масс./об.) | Пройдено | 0,01 | 5,4 | 99 | 3,0 | -3,6 | 0,7 |
a Указано как изменение чистоты относительно исходного вещества. Исходное вещество (без инкубации) содержало 97,7% пика нативной формы согласно ГП-СВЭЖХ.
Пример 6. Стабильность лекарственного антитела к IL-33, включенного в жидкий состав.
На момент подачи заявки проводилось исследование долгосрочной стабильности при хранении для оценки стабильности составов mAb1 после 36 месяцев хранения при -80°C, -30°C и -20°C. Композиция, содержащая 150 мг/мл mAb1, была физически и химически стабильной при хранении при -80°C, -30°C и -20°C в течение 24 месяцев, как показано в табл. 9-10. Значимые изменения каких-либо отслеживаемых параметров физической или химической стабильности обнаружены не были. Кроме того, было показано, что композиция, содержащая 150 мг/мл mAb1, была стабильной при хранении при -80°C, -30°C и -20°C в течение по меньшей мере 9 месяцев (см. табл. 11-13). Наконец, было показано, что композиция, содержащая 15 мг/мл mAb1, была стабильной при хранении при -80°C, -30°C и - 20°C в течение по меньшей мере 9 месяцев (см. таблицы 16-18). Все результаты, полученные на момент подачи заявки, показаны ниже в таблицах 8-20.
- 29 045976
Таблица 8 Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного mAbl, включенного в состав, после хранения при -80°C
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 27 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,1% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||||
| Наполняемый объем | 0,6 мл | |||||||||
| Контейнер/сред ство укупорки | 5 мл поликарбонатная пробирка с завинчивающейся полипропиленовой крышкой с силиконовым покрытием | |||||||||
| Продолжительность хранения при -80°С (месяцы) | ||||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем SEC- свэжх | 100 | 102 | 103 | 102 | 104 | 105 | 105 | 103 | 101 | |
| Чистота согласи о ГПСВЭЖ X | НМ W, % | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 |
| Нати вная форм а, % | 98,0 | 98,1 | 98,0 | 98,0 | 97,9 | 98,1 | 98,0 | 98,0 | 98,1 | |
| LMW , % | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,6 | 0,4 | 0,5 | 0,5 | 0,4 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи о СЕХСВЭЖ X | Кисл ая форм а, % | 29,4 | 29,7 | 29,4 | 29,4 | 29,8 | 29,7 | 29,5 | 30,0 | 29,3 |
| Базов ая форм а, % | 66,1 | 65,6 | 65,8 | 65,8 | 65,6 | 65,7 | 64,6 | 65,1 | 65,9 | |
| Осно вная форм а, % | 4,5 | 4,7 | 4,8 | 4,8 | 4,7 | 4,6 | 5,9 | 4,9 | 4,8 |
- 30 045976
Таблица 9 Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного mAbl, включенного в состав, после хранения при -30°C
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 27 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,1% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||||
| Наполняемый объем | 0,6 мл | |||||||||
| Контейнер/сред ство укупорки | 5 мл поликарбонатная пробирка с завинчивающейся полипропиленовой крышкой с силиконовым покрытием | |||||||||
| Продолжительность хранения при -30°С (месяцы) | ||||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем SEC- свэжх | 100 | 103 | 104 | 104 | 103 | 106 | 107 | 104 | 104 | |
| Чистота согласи о ГПСВЭЖ X | НМ W, % | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,6 | 1,6 |
| Нати вная форм а, % | 98,0 | 98,1 | 98,0 | 98,0 | 97,9 | 98,1 | 98,0 | 98,0 | 98,0 | |
| LMW , % | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,4 | 0,5 | 0,5 | 0,4 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи о СЕХСВЭЖ X | Кисл ая форм а, % | 29,4 | 29,6 | 29,5 | 29,4 | 29,7 | 29,8 | 29,5 | 29,6 | 29,5 |
| Базов ая форм а, % | 66,1 | 65,8 | 65,8 | 65,8 | 65,6 | 65,6 | 64,7 | 65,6 | 65,7 | |
| Осно вная форм а, % | 4,5 | 4,7 | 4,7 | 4,8 | 4,7 | 4,6 | 5,9 | 4,9 | 4,8 |
- 31 045976
Т аблица10
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного mAbl, включенного в состав, после хранения при -20°C
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 27 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,1% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||||
| Наполняемый объем | 0,6 мл | |||||||||
| Контейнер/сред ство укупорки | 5 мл поликарбонатная пробирка с завинчивающейся полипропиленовой крышкой с силиконовым покрытием | |||||||||
| Продолжительность хранения при -20°С (месяцы) | ||||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | |
| рн | 5,2 | 5,2 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем SEC- свэжх | 100 | 103 | 104 | 105 | 107 | 108 | ПО | 108 | 107 | |
| Чистота согласи о ГПСВЭЖ X | НМ W, % | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,5 | 1,6 |
| Нати вная форм а, % | 98,0 | 98,1 | 98,0 | 98,0 | 97,9 | 98,1 | 98,0 | 98,0 | 98,0 | |
| LMW , % | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,6 | 0,4 | 0,5 | 0,5 | 0,4 | |
| Анализ форм с | Кисл ая | 29,4 | 29,5 | 29,5 | 29,7 | 29,8 | 29,4 | 29,3 | 29,8 | 29,7 |
| изменен ными зарядам и согласи о СЕХ- СВЭЖ X | форм а, % | |||||||||
| Базов ая форм а, % | 66,1 | 65,8 | 65,7 | 65,6 | 65,5 | 65,9 | 64,7 | 65,3 | 65,6 | |
| Осно вная форм а, % | 4,5 | 4,7 | 4,7 | 4,7 | 4,7 | 4,7 | 6,0 | 4,9 | 4,8 |
- 32 045976
Т аблица11
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного mAbl, включенного в состав, после хранения при -80°C
| Состав | 150 мг/мл шАЫ, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||||
| Наполняемый объем | 2,0 мл | |||||||||
| Контейнер/средс тво укупорки | 5 мл поликарбонатная пробирка с завинчивающейся полипропиленовой крышкой с силиконовым покрытием | |||||||||
| Продолжительность хранения при -80°С (месяцы) | ||||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройд ено | Пройд ено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |||
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,00 | |||
| рн | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | |||
| % белка, выделенного путем SEC- свэжх | 100 | 108 | 105 | 100 | 98 | 105 | 100 | |||
| Чистота согласно MCE в невосста навл. условиях | Чисто та, основн ой пик, % | 97,4 | НТ | 96,1 | 96,0 | НТ | 97,2 | нт | ||
| LMW частиц ы, % | 2,5 | нт | 3,8 | 3,9 | НТ | 2,7 | нт | |||
| HMW частиц ы, % | 0,1 | нт | о,1 | 0,1 | нт | 0,1 | нт |
- 33 045976
| Чистота согласно MCE в восстанав л. условиях | Чисто та, % | 94,2 | нт | 94,8 | 94,8 | нт | 94,2 | НТ | ||
| LMW частиц ы, % | 2,2 | нт | 1,7 | 2,1 | нт | 2,4 | нт | |||
| NGHC , % | 1,7 | нт | 1,8 | 1,6 | нт | 1,7 | нт | |||
| Чистота согласно ГПсвэжх | HMW, % | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | ||
| Натив ная форма, % | 99,2 | 99,2 | 99,3 | 99,3 | 99,3 | 99,3 | 99,3 | |||
| LMW, % | 0,4 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,3 | 0,2 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кисла я форма, % | 19,1 | 19,0 | 21,4 | 20,0 | 19,6 | 19,7 | 17,6 | ||
| Базова я форма, % | 66,8 | 66,6 | 66,0 | 67,8 | 67,8 | 67,1 | 70,1 | |||
| Основ ная форма, % | 14,1 | 14,4 | 12,6 | 12,2 | 12,6 | 13,2 | 12,3 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно iCIEF | Кисла я форма, % | 31,3 | НТ | 31,2 | 32,2 | НТ | 30,4 | нт | ||
| Базова я форма, % | 56,3 | нт | 56,0 | 55,8 | нт | 57,1 | нт | |||
| Основ ная форма, % | 12,4 | нт | 12,9 | 12,1 | нт | 12,6 | нт | |||
| Относительная активность, % (биоанализ) | 116 | нт | нт | НТ | нт | 101 | нт |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный; iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 34 045976
Т аблица12
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного mAbl, включенного в состав, после хранения при -30°C
| Состав | 150 мг/мл шАЫ, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||||
| Наполняемый объем | 2,0 мл | |||||||||
| Контейнер/средс тво укупорки | 5 мл поликарбонатная пробирка с завинчивающейся полипропиленовой крышкой с силиконовым покрытием | |||||||||
| Продолжительность хранения при -30°С (месяцы) | ||||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Прой дено | Прой дено | |||
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,00 | |||
| рн | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | |||
| % белка, выделенного путем SEC- свэжх | 100 | 108 | 107 | 101 | 99 | 106 | 99 | |||
| Чистота согласно MCE в невосста навл. условиях | Чисто та, основн ой пик, % | 97,4 | НТ | 96,0 | 95,9 | нт | 97,2 | нт | ||
| LMW частиц ы, % | 2,5 | нт | 4,0 | 4,0 | нт | 2,7 | НТ | |||
| HMW частиц ы, % | 0,1 | нт | 0,1 | 0,1 | нт | 0,1 | НТ | |||
| Чистота согласно MCE в восстанав л. | Чисто та, % | 94,2 | нт | 94,3 | 94,6 | нт | 94,1 | НТ | ||
| LMW частиц ы, % | 2,2 | нт | 2,1 | 1,9 | нт | 2,6 | нт |
- 35 045976
| условиях | NGHC , % | 1,7 | нт | 1,7 | 1,7 | нт | 1,7 | НТ | ||
| Чистота согласно ГПСВЭЖХ | HMW, % | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | ||
| Натив ная форма, % | 99,2 | 99,1 | 99,3 | 99,3 | 99,3 | 99,3 | 99,3 | |||
| LMW, % | 0,4 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,3 | 0,2 | |||
| Анализ форм с изменены ыми зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кисла я форма, % | 19,1 | 19,2 | 21,2 | 20,9 | 19,4 | 19,7 | 17,6 | ||
| Базова я форма, % | 66,8 | 66,3 | 66,2 | 66,9 | 68,0 | 67,1 | 69,9 | |||
| Основ ная форма, % | 14,1 | 14,5 | 12,6 | 12,3 | 12,6 | 13,2 | 12,5 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно iCIEF | Кисла я форма, % | 31,3 | НТ | 30,5 | 30,8 | НТ | 30,9 | НТ | ||
| Базова я форма, % | 56,3 | нт | 57,1 | 57,0 | нт | 57,0 | нт | |||
| Основ ная форма, % | 12,4 | нт | 12,4 | 12,3 | нт | 12,1 | нт | |||
| Относительная активность, % (биоанализ) | 116 | нт | НТ | НТ | нт | 149 | нт |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный; iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 36 045976
Таблица 13
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного mAbl, включенного в состав, после хранения при -20°C
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 |
| Наполняемый объем | 2,0 мл |
| Контейнер/средс тво укупорки | 5 мл поликарбонатная пробирка с завинчивающейся полипропиленовой крышкой с силиконовым покрытием |
| Продолжительность хранения при -20°С (месяцы) |
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Прой дено | Прой дено | |||
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,02 | 0,00 | |||
| рн | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | |||
| % белка, выделенного путем SEC- свэжх | 100 | 108 | 108 | 100 | 99 | 106 | 100 | |||
| MCE в невосста навл. условиях | Чисто та, основ ной пик, % | 97,4 | НТ | 96,0 | 96,1 | НТ | 97,2 | нт | ||
| LMW частиц ы, % | 2,5 | нт | 3,9 | 3,8 | НТ | 2,7 | нт | |||
| HMW частиц ы, % | 0,1 | нт | 0,0 | о,1 | НТ | 0,2 | нт | |||
| MCE в восстанав л. условиях | Чисто та, % | 94,2 | нт | 94,3 | 95,1 | НТ | 95,1 | нт | ||
| LMW частиц ы, % | 2,2 | нт | 2,3 | 1,9 | НТ | 2,0 | нт | |||
| NGHC , % | 1,7 | нт | 1,8 | 1,7 | НТ | 1,7 | нт | |||
| Чистота согласно | HMW, % | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
- 37 045976
| ГПСВЭЖХ | Натив ная форма , % | 99,2 | 99,2 | 99,2 | 99,3 | 99,3 | 99,3 | 99,3 | ||
| LMW, % | 0,4 | 0,3 | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кисла я форма , % | 19,1 | 19,2 | 21,0 | 20,0 | 19,4 | 19,6 | 17,6 | ||
| Базова я форма , % | 66,8 | 66,4 | 66,3 | 67,8 | 68,0 | 67,5 | 69,9 | |||
| Основ ная форма , % | 14,1 | 14,4 | 12,7 | 12,2 | 12,6 | 13,0 | 12,5 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно iCIEF | Кисла я форма , % | 31,3 | НТ | 31,7 | 31,8 | НТ | 30,8 | НТ | ||
| Базова я форма , % | 56,3 | нт | 56,1 | 56,1 | нт | 56,5 | нт | |||
| Основ ная форма ,% | 12,4 | нт | 12,1 | 12,2 | нт | 12,8 | нт | |||
| Относительная активность, % (биоанализ) | 116 | нт | НТ | НТ | нт | 125 | нт |
СЕХ=катионообмен; [^лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный; iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 38 045976
Таблица 14
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного mAb10, включенного в состав, - влияние условий ускоренного состаривания
| Состав | 150 мг/мл шАЫ, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||
| Наполняемый объем | 2,0 мл | |||||||
| Контейнер/средство | 5 мл | поликарбонатная | пробирка с завинчивающейся | |||||
| укупорки | полипропиленовой крышкой с силиконовым покрытием | |||||||
| Хранение при | Хранение при | |||||||
| Хранение при | 25°С/60% | 40°С/75% | ||||||
| 5°С (месяцы) | отн.вл. | отн.вл. | ||||||
| (месяцы) | (месяцы) | |||||||
| Исследуемый параметр | Т=0 | 1 | 2 | 1 | 2 | 1 | 2 | |
| Исследование цвета и | Пройд | Пройд | Пройд | Пройд | Пройд | Пройд | Пройд | |
| внешнего вида | ено | ено | ено | ено | ено | ено | ено | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | |
| % белка, выделенного путем ОФ-СВЭЖХ | 100 | 109 | 103 | ПО | 107 | 108 | 106 | |
| MCE в невосстанав л.условиях MCE в восстанавл. | Чистота, основной пик, % LMW частицы, % HMW частицы, % Чистота, % LMW частицы, % NGHC, % HMW, % Нативная | 97,4 2,5 0,1 94,2 2,2 1,7 0,5 99,2 | 96,3 3,7 0,1 94,2 2,3 1,7 0,5 99,1 | 96,4 3,5 0,1 94,8 2,0 1,7 0,6 99,2 | 96,1 3,6 0,4 94,5 2,1 1,8 0,8 98,8 | 95,7 3,8 0,5 94,5 2,2 1,6 1,о 98,8 | 93,8 5,2 1,0 94,1 2,4 1,7 2,4 96,6 | 92,7 5,7 1,6 92,1 3,8 1,8 5,1 94,1 |
| условиях Чистота согласно ГП-СВЭЖХ Анализ форм с измененны ми зарядами согласно СЕХСВЭЖХ Анализ | ||||||||
| форма, % LMW, % Кислая форма, % Базовая форма, % Основная форма, % Кислая | ||||||||
| 0,4 19,1 | 0,4 19,0 | 0,3 19,6 | 0,4 18,9 | 0,3 21,9 | 0,9 28,7 | 0,8 50,0 | ||
| 66,8 | 66,6 | 67,9 | 66,3 | 64,9 | 55,7 | 36,5 | ||
| 14,1 | 14,3 | 12,6 | 14,8 | 13,2 | 15,5 | 13,5 | ||
| 31,7 | 31,6 | 32,2 | 33,0 | 37,7 | 46,2 | |||
| 31,3 | ||||||||
| форм с | форма, % | |||||||
| измененны | Базовая | 56,3 | 55,5 | 56,3 | 54,6 | 53,5 | 46,3 | 35,6 |
| ми | форма, % | |||||||
| зарядами | Основная | |||||||
| согласно | 12,4 | 12,8 | 12,1 | 13,3 | 13,5 | 16,0 | 18,2 | |
| iCIEF | форма, % |
CEX=катионообмен; DS=лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный;
iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присут
- 39 045976 ствии додецилсульфата натрия; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; отн.вл. = относительная влажность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография;
СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
Таблица 15
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного mAb1, включенного в состав, - влияние стресс-условий
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||
| Наполняемый объем | 2,0 мл | |||||
| Контейнер/средство укупорки | 5 мл поликарбонатная пробирка с завинчивающейся полипропиленовой крышкой с силиконовым покрытием | |||||
| Без стрессусловий | Орбитальный шейкер (часы) | Замораживание/ размораживание (циклы) | ||||
| Исследуемый параметр | Т=0 | 24 | 48 | 4 | 8 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройдено | Пройдено | Пройдено | Пройдено | Пройден о | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем ОФ-СВЭЖХ | 100 | 101 | 102 | 99 | 114 | |
| MCE в невосстанавл .условиях | Чистота, основной пик, % | 97,4 | нт | 96,0 | НТ | 97,4 |
| LMW частицы, % | 2,5 | нт | 3,9 | НТ | 2,5 | |
| HMW частицы, % | 0,1 | нт | 0,1 | НТ | 0,1 | |
| MCE в восстанавл. условиях | Чистота, % | 94,2 | нт | 94,5 | НТ | 94,9 |
| LMW частицы, % | 2,2 | нт | 2,1 | нт | 2,2 | |
| NGHC, % | 1,7 | нт | 1,7 | нт | 1,5 | |
| Чистота | HMW, % | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| согласно ГПСВЭЖХ | Нативная форма, % | 99,2 | 99,2 | 99,1 | 99,3 | 99,2 |
| LMW, % | 0,4 | 0,3 | 0,4 | 0,3 | 0,3 | |
| Анализ форм с измененным и зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кислая форма, % | 19,1 | 19,4 | 19.2 | 19,7 | 19,6 |
| Базовая форма, % | 66,8 | 66,5 | 66.5 | 66,6 | 66,7 | |
| Основная форма, % | 14,1 | 14,1 | 14,3 | 13,7 | 13,8 | |
| Анализ форм с измененным и зарядами согласно iCIEF | Кислая форма, % | 31,3 | НТ | 31.2 | нт | 31,8 |
| Базовая форма, % | 56,3 | нт | 56.3 | нт | 56,0 | |
| Основная форма, % | 12,4 | нт | 12,6 | нт | 12,2 |
CEX=катионообмен; DS=лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный; iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 40 045976
Таблица 16
Исследование стабильности 15 мг/мл лекарственного mAbl, включенного в состав, после хранения при -80°C
| Состав | 15 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | ||||||||
| Наполняемый объем | 2,0 мл | ||||||||
| Контейнер/средс тво укупорки | 5 мл поликарбонатная пробирка с завинчивающейся полипропиленовой крышкой с силиконовым покрытием | ||||||||
| Продолжительность хранения при -80°С (месяцы) | |||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | ||
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | ||
| рн | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | ||
| % белка, выделенного | 100 | 106 | 100 | 99 | 100 | 101 | 97 |
- 41 045976
| путем SEC- свэжх | ||||||||||
| MCE в невосста навл. условиях | Чистот а, основн ой пик, % | 96,6 | НТ | 96,8 | 96,5 | нт | 97,7 | нт | ||
| LMW частиц ы, % | 3,4 | нт | 3,1 | 3,4 | нт | 2,2 | нт | |||
| HMW частиц ы, % | 0,0 | нт | 0,1 | о,1 | нт | 0,1 | нт | |||
| MCE в восстана вл. условиях | Чистот а, % | 94,5 | нт | 94,9 | 94,9 | нт | 95,0 | нт | ||
| LMW частиц ы, % | 2,0 | нт | 2,0 | 2,2 | нт | 2,0 | нт | |||
| NGHC, % | 1,7 | нт | 1,7 | 1,6 | нт | 1,6 | нт | |||
| Чистота согласно ГПСВЭЖХ | HMW, % | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | ||
| Нативн ая форма, % | 99,3 | 99,3 | 99,4 | 99,4 | 99,3 | 99,4 | 99,4 | |||
| LMW, % | 0,4 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,3 | 0,2 | 0,2 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кислая форма, % | 19,3 | 19,2 | 20,7 | 20,6 | 19,0 | 19,8 | 17,6 | ||
| Базова я форма, % | 66,8 | 66,6 | 66,8 | 67,2 | 68,7 | 67,1 | 70,1 | |||
| Основ ная форма, % | 13,9 | 14,1 | 12,5 | 12,2 | 12,3 | 13,1 | 12,3 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно | Кислая форма, % | 31,0 | НТ | 30,7 | 30,6 | НТ | 31,1 | НТ | ||
| Базова я форма, | 56,9 | нт | 57,4 | 57,0 | нт | 56,2 | нт | |||
| iCIEF | % | |||||||||
| Основ ная форма, % | 12,1 | нт | 12,0 | 12,4 | нт | 12,7 | нт | |||
| Относительная активность, % (биоанализ) | 82 | нт | НТ | НТ | нт | нд | нт |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный;
iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутст
- 42 045976 вии додецилсульфата натрия; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
Т аблица17
Исследование стабильности 15 мг/мл лекарственного mAb1, включенного в состав, после хранения при -30°C
| Состав | 15 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||||
| Наполняемый объем | 2,0 мл | |||||||||
| Контейнер/средс тво укупорки | 5 мл поликарбонатная пробирка с завинчивающейся полипропиленовой крышкой с силиконовым покрытием | |||||||||
| Продолжительность хранения при -30°С (месяцы) | ||||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |||
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | |||
| рн | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | |||
| % белка, выделенного путем SEC- свэжх | 100 | 106 | 100 | 100 | 99 | 102 | 97 | |||
| MCE в невосста навл. условиях | Чистот а, основн ой пик, % | 96,6 | нт | 96,8 | 96,7 | нт | 97,5 | НТ | ||
| LMW | 3,4 | нт | 3,1 | 3,3 | НТ | 2,4 | НТ |
- 43 045976
| частиц ы, % | ||||||||||
| HMW частиц ы, % | 0,0 | НТ | 0,1 | 0,1 | нт | 0,1 | НТ | |||
| MCE в восстана вл. условиях | Чистот а, % | 94,5 | нт | 95,3 | 95,1 | нт | 94,5 | нт | ||
| LMW частиц ы, % | 2,0 | нт | 1,8 | 1,9 | нт | 2,1 | нт | |||
| NGHC, % | 1,7 | нт | 1,6 | 1,6 | нт | 1,7 | нт | |||
| Чистота согласно ГПсвэжх | HMW, % | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | ||
| Нативн ая форма, % | 99,3 | 99,3 | 99,4 | 99,4 | 99,4 | 99,4 | 99,4 | |||
| LMW, % | 0,4 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,3 | 0,3 | 0,2 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кислая форма, % | 19,3 | 19,5 | 20,5 | 20,1 | 19,7 | 19,8 | 17,8 | ||
| Базова я форма, % | 66,8 | 66,3 | 67,0 | 67,9 | 67,8 | 67,1 | 70,0 | |||
| Основ ная форма, % | 13,9 | 14,2 | 12,5 | 12,0 | 12,5 | 13,1 | 12,3 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно iCIEF | Кислая форма, % | 31,0 | НТ | 30,3 | 30,5 | НТ | 31,2 | НТ | ||
| Базова я форма, % | 56,9 | нт | 57,6 | 56,9 | нт | 55,9 | нт | |||
| Основ ная форма, % | 12,1 | нт | 12,1 | 12,6 | нт | 12,9 | нт | |||
| Относительная активность, % (биоанализ) | 82 | нт | НТ | НТ | нт | нд | нт |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный; iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 44 045976
Таблица 18
Исследование стабильности 15 мг/мл лекарственного mAbl, включенного в состав, после хранения при -20°C
| Состав | 15 мг/мл mAbl, 10 мМ гидрохлорид L-аргинин 5,3 | |||
| Наполняемый объем | 2,0 мл | |||
| Контейнер/средс тво укупорки | 5 мл поликарбоната полипропиленовой крьи | |||
| Продолжительна | ||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройд ено | Пройд ено | Прой дено | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,3 | 5,3 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем SEC- свэжх | 100 | 107 | 100 | |
| MCE в невосста навл. условиях | Чистот а, основн ой пик, % | 96,6 | НТ | 96,5 |
| LMW частиц ы, % | 3,4 | нт | 3,3 | |
| HMW частиц ы, % | 0,0 | нт | 0,2 | |
| MCE в восстана вл. | Чистот а, % | 94,5 | нт | 94,9 |
| LMW | 2,0 | нт | 1,8 |
| ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ а, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH | |||||
| зая пробирка с завинчивающейся нкой с силиконовым покрытием | |||||
| эсть хранения при -20°С (месяцы) | |||||
| 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 |
| Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | ||
| 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | ||
| 5,3 | 5,4 | 5,3 | 5,4 | ||
| 100 | 99 | 102 | 98 | ||
| 96,5 | НТ | 97,8 | НТ | ||
| 3,5 | НТ | 2,2 | НТ | ||
| о,1 | НТ | 0,1 | нт | ||
| 94,8 | НТ | 94,7 | нт | ||
| 1,9 | НТ | 2,0 | нт |
- 45 045976
| условиях | частиц ы, % | |||||||||
| NGHC, % | 1,7 | НТ | 1,7 | 1,8 | нт | 1,7 | НТ | |||
| Чистота согласно ГПсвэжх | HMW, % | 0,4 | 0,3 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,3 | 0,4 | ||
| Нативн ая форма, % | 99,3 | 99,3 | 99,4 | 99,4 | 99,4 | 99,4 | 99,4 | |||
| LMW, % | 0,4 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,3 | 0,2 | 0,2 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кислая форма, % | 19,3 | 19,3 | 20,3 | 19,7 | 19,2 | 19,6 | 17,6 | ||
| Базова я форма, % | 66,8 | 66,5 | 67,2 | 68,1 | 68,1 | 67,2 | 69,9 | |||
| Основ ная форма, % | 13,9 | 14,1 | 12,6 | 12,2 | 12,7 | 13,2 | 12,5 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно iCIEF | Кислая форма, % | 31,0 | НТ | 30,3 | 30,9 | НТ | 30,9 | НТ | ||
| Базова я форма, % | 56,9 | нт | 56,9 | 57,1 | нт | 56,2 | НТ | |||
| Основ ная форма, % | 12,1 | нт | 12,8 | 12,0 | нт | 13,0 | нт | |||
| Относительная активность, % (биоанализ) | 82 | нт | НТ | НТ | нт | нд | нт |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный; iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 46 045976
Т аблица19
Исследование стабильности 15 мг/мл лекарственного mAbl, включенного в состав, - влияние условий ускоренного состаривания
| Состав | 15 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||
| Наполняемый объем | 2,0 мл | |||||||
| Контейнер/средство укупорки | 5 мл поликарбонатная пробирка с завинчивающейся полипропиленовой крышкой с силиконовым покрытием | |||||||
| Хранение при 5°C (месяцы) | Хранение при 25°С/60% отн.вл. (месяцы) | Хранение при 40°С/75% отн.вл. (месяцы) | ||||||
| Исследуемый параметр | Т=0 | 1 | 2 | 1 | 2 | 1 | 2 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройде но | Пройде но | Пройде но | Пройде но | Пройде но | Пройде но | Пройде но | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем ОФ-СВЭЖХ | 100 | 107 | 102 | 109 | 104 | ПО | 103 | |
| MCE в невосстана вл. условиях | Чистот основн ой пик, % | 96,6 | 96,8 | 96,8 | 96,6 | 96,6 | 95,4 | 94,6 |
| LMW частиц ы, % | 3,4 | 3,1 | 3,1 | 3,3 | 3,2 | 4,4 | 5,0 | |
| HMW частиц ы, % | 0,0 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,2 | 0,2 | 0,4 | |
| MCE в восстанавл .условиях | Чистот а, % | 94,5 | 94,4 | 94,6 | 95,3 | 94,7 | 93,4 | 93,5 |
| LMW частиц ы, % | 2,0 | 2,0 | 1,9 | 2,0 | 2,1 | 2,6 | 2,7 | |
| NGHC, % | 1,7 | 1,8 | 1,7 | 1,7 | 1,6 | 1,8 | 1,7 | |
| Чистота согласно ГПСВЭЖХ | HMW, % | 0,4 | 0,3 | 0,3 | 0,4 | 0,4 | 0,9 | 2,0 |
| Нативн ая форма, | 99,3 | 99,3 | 99,4 | 99,3 | 99,3 | 98,6 | 97,2 |
- 47 045976
| % | ||||||||
| LMW, % | 0,4 | 0,4 | 0,3 | 0,4 | 0,3 | 0,5 | 0,9 | |
| Анализ форм с изменении ми зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кислая форма, % | 19,3 | 19,3 | 19,4 | 20,2 | 21,6 | 27,3 | 46,8 |
| Базова я форма, % | 66,8 | 66,6 | 68,1 | 65,2 | 65,2 | 57,1 | 39,3 | |
| Основн ая форма, % | 13,9 | 14,2 | 12,5 | 14,7 | 13,2 | 15,6 | 14,0 | |
| Анализ форм с изменении ми зарядами согласно iCIEF | Кислая форма, % | 31,0 | 29,6 | 31,0 | 30,5 | 32,2 | 37,2 | 46,6 |
| Базова я форма, % | 56,9 | 58,2 | 56,6 | 56,3 | 53,7 | 48,2 | 39,1 | |
| Основн ая форма, % | 12,1 | 12,2 | 12,4 | 13,3 | 14,1 | 14,6 | 14,3 |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный; iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; отн.вл. = относительная влажность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография;
СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
Таблица 20
Исследование стабильности 15 мг/мл лекарственного mAb1, включенного в состав, - влияние стресс-условий
| Состав | 15 мг/мл шАЫ, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | ||||
| Наполняемый объем | 2,0 мл | ||||
| Контейнер/средство укупорки | 5 мл поликарбонатная пробирка с завинчивающейся полипропиленовой крышкой с силиконовым покрытием | ||||
| Без стрессусловий | Орбитальный шейкер (часы) | Замораживание/ размораживание (циклы) | |||
| Исследуемый параметр | Т=0 | 24 | 48 | 4 | 8 |
- 48 045976
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройдено | Пройдено | Пройдено | Пройден о | Пройден о | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем ОФ-СВЭЖХ | 100 | 99 | 99 | 98 | 115 | |
| MCE в невосстанавл .условиях | Чистота, основной пик, % | 96,6 | НТ | 96,7 | НТ | 97,7 |
| LMW частицы, % | 3,4 | НТ | 3,3 | НТ | 2,2 | |
| HMW частицы, % | 0,0 | НТ | 0,0 | нт | 0,1 | |
| MCE в восстанавл. условиях | Чистота, % | 94,5 | НТ | 95,1 | нт | 94,5 |
| LMW частицы, % | 2,0 | НТ | 1,8 | нт | 2,1 | |
| NGHC, % | 1,7 | НТ | 1,7 | нт | 1,7 | |
| Чистота согласно ГПСВЭЖХ | HMW, % | 0,4 | 0,3 | 0,3 | 0,4 | 0,4 |
| Нативная форма, % | 99,3 | 99,3 | 99,2 | 99,4 | 99,3 | |
| LMW, % | 0,4 | 0,4 | 0,5 | 0,2 | 0,3 | |
| Анализ форм с измененным и зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кислая форма, % | 19,3 | 19,2 | 19,4 | 20,0 | 20,1 |
| Базовая форма, % | 66,8 | 66,9 | 66,5 | 66,8 | 66,6 | |
| Основная форма, % | 13,9 | 14,0 | 14,1 | 13,2 | 13,3 | |
| Анализ форм с измененным и зарядами согласно iCIEF | Кислая форма, % | 31,0 | НТ | 30,8 | НТ | 31,0 |
| Базовая форма, % | 56,9 | нт | 56,7 | нт | 56,8 | |
| Основная форма, % | 12,1 | нт | 12,5 | нт | 12,3 |
СЕХ=катионообмен; [^лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный; iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
Пример 7. Стабильность лекарственного продукта, представляющего собой антитело к IL-33, включенное в жидкий состав.
На момент подачи заявки были доступны данные за девять месяцев исследования стабильности для 15 мг/мл и 150 мг/мл составов лекарственных продуктов mAbl в стеклянных пробирках. Антитело в обеих концентрациях сохраняло физическую и химическую стабильность при хранении при 2-8°C в течение 9 месяцев (см. табл. 21 и 22). По результатам наблюдений в дополнительном исследовании стабильности 150 мг/мл лекарственный продукт mAbl сохранял физическую и химическую стабильность при хранении при 2-8°C в течение 24 месяцев (см. табл. 23). Значимые изменения каких-либо отслеживаемых параметров физической или химической стабильности обнаружены не были.
Результаты анализа лекарственных продуктов в виде составов mAb1 с концентрацией 15 мг/мл и 150 мг/мл после инкубации в условиях ускоренного состаривания и стресс-условиях приведены в табл. 24 и 25, соответственно. Лекарственный продукт в виде состава mAb1 сохранял физическую и химическую стабильность при перемешивании (на орбитальном шейкере при 250 об./мин при температуре окружающей среды) в течение 48 ч. Значимые изменения каких-либо отслеживаемых параметров физической или химической стабильности обнаружены не были. Для обоих лекарственных продуктов в виде 15 мг/мл и 150 мг/мл составов после инкубации при 25°C в течение 1 месяца значимые изменения уровня HMW и LMW частиц не наблюдались, это указывает на то, что лекарственный продукт в виде состава
- 49 045976 mAbl можно хранить в течение коротких периодов времени при комнатной температуре. После инкубации в течение 2 месяцев при 40°C/75% отн.вл. было обнаружено образование значительного количества HMW частиц и форм с измененным зарядом (увеличение относительного числа кислых частиц). Результаты указанных условий ускоренного состаривания продемонстрировали, что увеличение числа HMW частиц и образование форм с измененным зарядом являлись основными путями распада составов лекарственного продукта.
Кроме того, на момент подачи заявки были доступны данные за шесть месяцев исследования стабильности 150 мг/мл состава лекарственного продукта в предварительно наполненном шприце (PFS). Исследовали стабильность в пяти PFS. Данные стабильности приведены в табл. 26-34. Доступны данные за три месяца исследования стабильности 75 мг/мл состава лекарственного продукта в стеклянных пробирках (см. табл. 36).
Таблица 21
Исследование стабильности 15 мг/мл лекарственного продукта mAb1 в стеклянных пробирках после хранения при 2-8°C
| Состав | 15 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 |
| Наполняемый объем | 2,5 мл |
| Контейнер/средс тво укупорки | 5 мл пробирки из боросиликатного стекла 1 типа с 20 мм пробками West S2-451 4432/50 GRY В2-40 с покрытием FluroTec® |
- 50 045976
| Продолжительность хранения при 2-8°С (месяцы) | ||||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Про йде но | |||
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | |||
| рн | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | |||
| % белка, выделенного путем SEC-СВЭЖХ | 100 | 103 | 100 | 99 | 100 | 103 | 98 | |||
| Анализ невидим ых частиц путем HIAC (число/м л) | > ю МКМ | 2 | 4 | 11 | 12 | нт | 13 | НТ | ||
| > 25 МКМ | 0 | 0 | 0 | 0 | нт | 0 | НТ | |||
| Анализ дисперсн ых частиц путем MFI (частицы /мл) | От 2 до 10 мкм | 285 | 2093 | 1215 | 787 | нт | 1062 | нт | ||
| > ю мкм | 23 | 25 | 7 | 13 | нт | 7 | нт | |||
| > 25 мкм | 7 | 2 | 0 | 3 | нт | 2 | нт | |||
| MCE в невосста навл. условиях | Чистот а, основн ой пик, % | 96,3 | 96,4 | 96,5 | 96,4 | нт | 97,2 | нт | ||
| LMW частиц ы, % | 3,6 | 3,6 | 3,5 | 3,6 | нт | 2,6 | нт | |||
| HMW частиц ы, % | 0,1 | 0,0 | о,1 | 0,0 | нт | 0,2 | нт | |||
| MCE в восстана вл. условиях | Чистот а, % | 94,5 | 94,2 | 94,9 | 94,1 | нт | 94,8 | нт | ||
| LMW частиц | 2,1 | 2,2 | 2,1 | 2,2 | нт | 1,9 | нт |
- 51 045976
| ы, % | ||||||||||
| NGHC, % | 1,7 | 1,7 | 1,7 | 1,9 | нт | 1,8 | НТ | |||
| Чистота согласно ГПсвэжх | HMW, % | 0,4 | 0,3 | 0,3 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | 0,4 | ||
| Нативн ая форма, % | 99,3 | 99,3 | 99,4 | 99,4 | 99,3 | 99,4 | 99,4 | |||
| LMW, % | 0,4 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,3 | 0,3 | 0,2 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кислая форма, % | 19,6 | 19,2 | 20,0 | 19,9 | 19,5 | 20,0 | 18,0 | ||
| Базовая форма, % | 66,5 | 66,7 | 67,4 | 67,7 | 67,8 | 66,6 | 69,4 | |||
| Основн ая форма, % | 13,9 | 14,1 | 12,6 | 12,4 | 12,7 | 13,4 | 12,6 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно iCIEF | Кислая форма, % | 30,2 | 30,2 | 30,1 | 30,4 | НТ | 31,0 | НТ | ||
| Базовая форма, % | 57,3 | 57,0 | 57,3 | 57,0 | нт | 55,8 | нт | |||
| Основн ая форма, % | 12,5 | 12,9 | 12,6 | 12,5 | нт | 13,1 | нт | |||
| Выделенный полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD (детектор заряженных аэрозолей) | 0,075 | 0,077 | 0,077 | 0,082 | нт | 0,088 | нт | |||
| Относительная активность, % (биоанализ) | 108 | НТ | НТ | НТ | нт | НТ | нт |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; FDG=rpynna по разработке состава; HMW=высокомолекyлярный; iCIEF=визyαлизация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW=низкомолекyлярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визyαлизация микропотока; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 52 045976
Т аблица 22
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAbl в стеклянных пробирках после хранения при 2-8°C
| Состав | 150 мг/мл шАЫ, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||||
| Наполняемый объем | 2,5 мл | |||||||||
| Контейнер/сред ство укупорки | 5 мл пробирки из боросиликатного стекла 1 типа с 20 мм пробками West S2-451 4432/50 GRY В2-40 с покрытием FluroTec® | |||||||||
| Продолжительность хранения при 2-8°С (месяцы) | ||||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Прой дено | Прой дено | Пройде но | Пройде но | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |||
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,00 | |||
| рн | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | |||
| % белка, выделенного путем SEC- свэжх | 100 | 103 | 101 | 99 | 98 | 100 | 100 | |||
| Анализ невидим ых частиц путем HIAC (число/м л) | > 10 мкм | 17 | 16 | и | 28 | НТ | 14 | нт | ||
| > 25 мкм | 1 | 0 | 0 | 1 | нт | 2 | нт | |||
| Анализ дисперсн ых частиц путем MFI (частицы/ | От 2 ДО 10 мкм | 231 | 348 | 652 | 1216 | нт | 1157 | нт | ||
| > ю мкм | 31 | 11 | 28 | 20 | нт | 16 | нт | |||
| > 25 | 8 | 2 | 3 | 2 | нт | 0 | нт |
- 53 045976
| мл) | МКМ | |||||||||
| MCE в невосста навл. условиях | Чист ота, осно вной пик, % | 95,6 | 95,6 | 95,6 | 96,0 | НТ | 96,8 | НТ | ||
| LM W част ицы, % | 4,3 | 4,4 | 4,1 | 3,7 | нт | 2,8 | нт | |||
| НМ W част ицы, % | 0,2 | 0,1 | 0,3 | 0,3 | нт | 0,4 | нт | |||
| MCE в восстанав л. условиях | Чист ота, % | 94,2 | 93,9 | 94,4 | 94,4 | нт | 94,8 | нт | ||
| LM W част ицы, % | 2,4 | 2,4 | 2,1 | 2,0 | нт | 1,9 | нт | |||
| NGH С, % | 1,8 | 1,9 | 1,7 | 1,8 | нт | 1,8 | нт | |||
| Чистота согласно ГПсвэжх | НМ W, % | 0,5 | 0,5 | 0,6 | 0,7 | 0,7 | 0,7 | 0,8 | ||
| Нати вная фор ма, % | 99,2 | 99,1 | 99,2 | 99,1 | 99,0 | 99,0 | 98,9 | |||
| LM W, % | 0,4 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно СЕХ- | Кисл ая ΦθΡ ма, % | 19,3 | 19,3 | 20,2 | 20,0 | 19,0 | 19,7 | 17,7 | ||
| Базо вая | 66,6 | 66,7 | 67,0 | 67,4 | 68,2 | 66,7 | 69,5 |
- 54 045976
| свэжх | ΦθΡ ма, % | |||||||||
| Осно вная фор ма, % | 14,1 | 14,0 | 12,8 | 12,6 | 12,9 | 13,5 | 12,9 | |||
| Анализ форм с изменены ыми зарядами согласно iCIEF | Кисл ая фор ма, % | 31,4 | 30,9 | 30,8 | 30,8 | нд | 30,7 | НТ | ||
| Базо вая фор ма, % | 56,4 | 56,4 | 56,4 | 56,5 | НД | 56,1 | нт | |||
| Осно вная фор ма, % | 12,2 | 12,8 | 12,8 | 12,7 | НД | 13,2 | нт | |||
| Выделенный полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD (детектор заряженных аэрозолей) | 0,084 | 0,087 | 0,084 | 0,092 | НТ | 0,090 | нт | |||
| Относительная активность, % (биоанализ) | 108 | НТ | НТ | 72 | нт | 115 | нт |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный; iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визуализация микропотока; НТ=не требуется;
ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография;
СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 55 045976
Таблица 23
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAb1 в стеклянных пробирках после хранения при 2-8°C
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,10% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||||
| Наполняемый объем | 0,5 мл | |||||||||
| Контейнер/сре дство укупорки | 2 мл пробирки из боросиликатного стекла 1 типа с 20 мм пробками West S2-451 4432/50 GRY В2-40 с покрытием FluroTec® | |||||||||
| Продолжительность хранения при 2-8°С (месяцы) | ||||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем ОФ- свэжх | 100 | 102 | 103 | 103 | 101 | 106 | 107 | 102 | 100 | |
| Чистота согласи о ГПСВЭЖ X | НМ W. % | 1,5 | 1,5 | 1,6 | 1,7 | 1,8 | 1,8 | 1,9 | 2,0 | 2,1 |
| Нати вная форм а, % | 98,0 | 98,0 | 97,9 | 97,8 | 97,7 | 97,8 | 97,6 | 97,6 | 97,4 | |
| LMW , % | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,6 | 0,4 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи о СЕХСВЭЖ X | Кисл ая форм а, % | 29,4 | 28,4 | 28,2 | 28,2 | 28,3 | 28,8 | 29,1 | 29,0 | 30,1 |
| Базов ая форм а, % | 66,1 | 67,0 | 67,2 | 67,0 | 66,9 | 66,1 | 64,1 | 65,7 | 64,2 | |
| Осно вная форм а, % | 4,5 | 4,5 | 4,6 | 4,7 | 4,9 | 5,1 | 6,8 | 5,3 | 5,7 |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный;
iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визуализация микропотока; НТ=не требуется;
ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография;
СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 56 045976
Таблица 24
Исследование стабильности 15 мг/мл лекарственного продукта mAbl в стеклянных пробирках после хранения в условиях ускоренного состаривания и стресс-условиях, и при перемешивании
| Состав | 15 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||||
| Наполняемый объем | 2,5 мл | |||||||||
| Контейнер/сре дство укупорки | 5 мл пробирки из боросиликатного стекла 1 типа с 13 мм пробками West S2-451 4432/50 GRY В2-40 с покрытием FluroTec® | |||||||||
| Хранение при 25°С/60% отн.вл. (месяцы) | Хранение при 40°С/75% отн.вл. (месяцы) | Орбитальный шейкер (ч) | ||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 0,5 | 1 | 2 | 24 | 48 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем ОФ- свэжх | 100 | 103 | 100 | 99 | 98 | 103 | 100 | 98 | 98 | |
| Анализ невидим ых частиц путем HIAC (число/ мл) | > 10 мкм | 2 | 10 | 8 | 29 | НТ | 13 | 13 | НТ | 7 |
| > 25 мкм | 0 | 0 | 0 | 0 | НТ | 0 | 1 | НТ | 0 | |
| Анализ дисперс ных частиц путем MFI (частиц ы/мл) | От 2 до 10 мкм | 285 | 387 | 906 | 1174 | нт | 2222 | 3474 | нт | 378 |
| > ю мкм | 23 | 13 | 10 | 11 | нт | 18 | 43 | нт | 10 | |
| > 25 мкм | 7 | 5 | 0 | 3 | нт | 2 | 3 | нт | 0 | |
| MCE в | Чист | 96,3 | 96,1 | 95,8 | 95,5 | нт | 95,2 | 94,5 | нт | 96,4 |
- 57 045976
| невосст анавл. условия X | ота, основ ной пик, % | |||||||||
| LMW части цы, % | 3,6 | 3,8 | 4,1 | 4,4 | НТ | 4,6 | 5,5 | НТ | 3,5 | |
| НМ W части цы, % | 0,1 | 0,1 | 0,1 | о,1 | нт | 0,2 | 0,1 | нт | о,1 | |
| MCE в восстан авл. условия X | Чист ота, % | 96,3 | 96,1 | 95,8 | 95,5 | нт | 95,2 | 94,5 | нт | 96,4 |
| LMW части цы, % | 3,6 | 3,8 | 4,1 | 4,4 | нт | 4,6 | 5,5 | нт | 3,5 | |
| NGH С, % | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | нт | 0,2 | 0,1 | нт | о,1 | |
| Чистота согласи о ГПСВЭЖХ | НМ W, % | 0,4 | 0,3 | 0,4 | 0,5 | 0,5 | 0,7 | 1,3 | 0,3 | 0,3 |
| Нати вная форм а, % | 99,3 | 99,3 | 99,3 | 99,2 | 99,2 | 98,9 | 97,8 | 99,3 | 99,4 | |
| LMW , % | 0,4 | 0,4 | 0,3 | 0,3 | 0,3 | 0,4 | 0,9 | 0,4 | 0,4 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи о СЕХСВЭЖХ | Кисл ая форм а, % | 19,6 | 19,6 | 22,9 | 27,5 | 22,1 | 27,6 | 46,9 | 19,5 | 19,3 |
| Базов ая форм а, % | 66,5 | 66,0 | 63,7 | 59,2 | 62,9 | 57,2 | 39,5 | 66,5 | 66,6 | |
| Осно вная форм а, % | 13,9 | 14,4 | 13,4 | 13,3 | 15,0 | 15,2 | 13,6 | 14,0 | 14,0 | |
| Анализ форм с | Кисл ая | 30,2 | 30,2 | 32,7 | 36,8 | НТ | 38,0 | 45,9 | НТ | 30,2 |
- 58 045976
| изменен ными зарядам и согласи oiCIEF | форм а, % | |||||||||
| Базов ая форм а, % | 57,3 | 55,8 | 53,5 | 49,2 | НТ | 47,8 | 40,4 | НТ | 57,4 | |
| Осно вная форм а, % | 12,5 | 14,0 | 13,9 | 14,0 | нт | 14,2 | 13,8 | НТ | 12,5 | |
| Полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD | 0,075 | 0,078 | 0,077 | 0,082 | нт | 0,078 | 0,075 | нт | 0,076 |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; FDG=rpynna по разработке состава; HMW=высокомолекyлярный; iCIEF=визyализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW=низкомолекyлярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визyализация микропотока; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; отн.вл. = относительная влажность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография Таблица 25
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAb1 в стеклянных пробирках после хранения в условиях ускоренного состаривания и стресс-условиях, и при перемешивании
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | ||||||||
| Наполняемый объем | 2,5 мл | ||||||||
| Контейнер/сред ство укупорки | 5 мл пробирки из боросиликатного стекла 1 типа с 13 мм пробками West S2-451 4432/50 GRY В2-40 с покрытием FhiroTec® | ||||||||
| Хранение при 25°С/60% отн.вл. (месяцы) | Хранение при 40°С/75% отн.вл. (месяцы) | Орбитальный шейкер (ч) | |||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 0,5 | 1 | 2 | 24 | 48 |
| Исследование цвета и внешнего вида | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,00 | 0,00 |
| рн | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | 5,3 |
- 59 045976
| % белка, выделенного путем ОФ- свэжх | 100 | 104 | 101 | 100 | 97 | 102 | 98 | 101 | 101 | |
| Анализ невидим ых частиц путем HIAC (число/ мл) | > ю мкм | 17 | 16 | 16 | 56 | НТ | 30 | 46 | НТ | 13 |
| > 25 мкм | 1 | 0 | 0 | 2 | нт | 1 | 1 | НТ | 0 | |
| Анализ дисперс ных частиц путем MFI (частиц ы/мл) | От 2 до 10 мкм | 231 | 903 | 2053 | 2700 | нт | 2919 | 1781 | НТ | 514 |
| > ю мкм | 31 | 25 | 13 | 61 | нт | 48 | 38 | НТ | 16 | |
| > 25 мкм | 8 | 3 | 1 | 8 | нт | 2 | 2 | НТ | 2 | |
| MCE в невосст анавл. условия X | Чист ота, основ ной пик, % | 95,6 | 95,5 | 94,2 | 94,1 | нт | 94,1 | 92,1 | нт | 95,6 |
| LMW части цы, % | 4,3 | 4,1 | 5,4 | 5,3 | нт | 5,3 | 6,5 | нт | 4,3 | |
| НМ W части цы, % | 0,2 | 0,4 | 0,5 | 0,6 | нт | 0,7 | 1,4 | нт | о,1 | |
| MCE в восстан авл. условия X | Чист ота, % | 94,2 | 94,5 | 94,0 | 93,4 | нт | 93,6 | 92,2 | нт | 94,7 |
| LMW части цы, % | 2,4 | 2,0 | 2,4 | 3,0 | нт | 2,7 | 3,5 | нт | 1,9 | |
| NGH С, % | 1,8 | 1,7 | 1,8 | 1,7 | нт | 1,8 | 1,7 | нт | 1,7 | |
| Чистота | НМ | 0,5 | 0,8 | 1,0 | 1,3 | 1,4 | 2,2 | 3,9 | 0,5 | 0,5 |
- 60 045976
| согласи о ГП- СВЭЖХ | W, % | |||||||||
| Нати вная форм а, % | 99,2 | 98,9 | 98,7 | 98,4 | 98,0 | 96,9 | 95,4 | 99,2 | 99,1 | |
| LMW , % | 0,4 | 0,4 | 0,3 | 0,3 | 0,6 | 0,9 | 0,8 | 0,4 | 0,4 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи о СЕХСВЭЖХ | Кисл ая форм а, % | 19,3 | 19,9 | 21,2 | 28,9 | 23,4 | 28,8 | 48,5 | 19,1 | 19,2 |
| Базов ая форм а, % | 66,6 | 14,6 | 13,3 | 57,7 | 61,4 | 56,1 | 38,0 | 66,7 | 66,7 | |
| Осно вная форм а, % | 14,1 | 19,9 | 21,2 | 13,4 | 15,1 | 15,2 | 13,5 | 14,2 | 14,1 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи oiCIEF | Кисл ая форм а, % | 31,4 | 30,9 | 33,5 | 38,0 | НТ | 38,7 | 46,2 | НТ | 30,4 |
| Базов ая форм а, % | 56,4 | 55,4 | 51,8 | 46,6 | нт | 45,1 | 38,4 | нт | 57,1 | |
| Осно вная форм а, % | 12,2 | 13,7 | 14,7 | 15,4 | нт | 16,1 | 15,4 | нт | 12,5 | |
| Полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD | 0,084 | 0,086 | 0,083 | 0,090 | нт | 0,084 | 0,081 | нт | 0,084 |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; HMW=высокомолекулярный; iCIEF=визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования;
LMW=низкомолекулярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визуализация микропотока; НТ=не требуется;
ОП=оптическая плотность; отн.вл. = относительная влажность; ОФ=обращенная фаза;
ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 61 045976
Таблица 26
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAbl в 1 мл шприцах gOmpi после хранения при 2-8°C
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||||
| Наполняемый объем | 1,05 мл | |||||||||
| Контейнер/средс тво укупорки | 1 мл стеклянный шприц Nuova Ompi EZ-Fill с длинным корпусом, с тонкостенной иглой калибра 27G и защитным колпачком для иглы FM30 | |||||||||
| Продолжительность хранения при 2-8°С (месяцы) | ||||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройд ено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |||
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | |||
| рн | 5,4 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | |||
| % белка, выделенного путем ГП-СВЭЖХ | 100 | 101 | 100 | 99 | 102 | 102 | 102 | |||
| Анализ невидим ых частиц путем HIAC (число/м л) | > ю мкм | 283 | 357 | 582 | 1128 | НТ | 1225 | НТ | ||
| > 25 мкм | 1 | 0 | 1 | 3 | нт | 6 | нт | |||
| Анализ дисперсн ых частиц путем MFI (частицы /мл) | От 2 до 10 мкм | 12982 | 10541 | 7137 | 7018 | нт | 5375 | нт | ||
| > ю мкм | 29 | 228 | 57 | 69 | нт | 67 | нт | |||
| > 25 мкм | 0 | 3 | 5 | 0 | нт | 2 | нт | |||
| MCE в невосста навл. условиях | Чистот а, основн ой пик, % | 97,0 | 96,8 | 96,7 | 96,7 | нт | 97,4 | нт | ||
| LMW | 2,9 | 2,9 | 3,2 | 3,2 | нт | 2,2 | нт |
- 62 045976
| частиц ы, % | ||||||||||
| HMW частиц ы, % | ОД | 0,3 | 0,1 | 0,1 | НТ | 0,4 | НТ | |||
| MCE в восстана вл. условиях | Чистот а, % | 94,8 | 94,9 | 94,4 | 94,9 | нт | 94,4 | НТ | ||
| LMW частиц ы, % | 2,3 | 1,8 | 2,2 | 2,1 | нт | 2,2 | НТ | |||
| NGHC, % | 1,2 | 1,5 | 1,8 | 1,2 | нт | 1,6 | НТ | |||
| Чистота согласно ГПСВЭЖХ | HMW, % | 0,5 | 0,5 | 0,6 | 0,7 | 0,7 | 0,7 | 0,8 | ||
| Нативн ая форма, % | 99,3 | 99,3 | 99,2 | 99,1 | 99,0 | 99,0 | 98,9 | |||
| LMW, % | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,3 | 0,3 | 0,3 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кислая форма, % | 20,3 | 19,4 | 20,0 | 20,0 | 19,8 | 18,3 | 19,0 | ||
| Базовая форма, % | 67,9 | 68,4 | 68,8 | 68,6 | 68,5 | 70,9 | 69,8 | |||
| Основн ая форма, % | 11,8 | 12,2 | 11,3 | 11,4 | 11,7 | 10,8 | И,1 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно iCIEF | Кислая форма, % | 31,2 | 31,0 | 31,3 | 30,2 | НТ | 31,9 | НТ | ||
| Базовая форма, % | 57,3 | 57,2 | 56,7 | 58,6 | нт | 56,1 | НТ | |||
| Основн ая форма, % | 11,6 | 11,9 | 12,0 | 11,2 | нт | 12,0 | нт | |||
| Полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD | 0,079 | 0,080 | 0,081 | 0,091 | нт | 0,091 | нт |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; FDG=rpynna по разработке состава; HMW=высокомолекyлярный; iCIEF=визyαлизация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW=низкомолекyлярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визyαлизация микропотока; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 63 045976
Таблица 27
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAbl в 1 мл шприцах gOmpi послехранения в условиях ускоренного состаривания и стресс-условиях, и при перемешивании
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||||
| Наполняемый объем | 1,05 мл | |||||||||
| Контейнер/ср едство укупорки | 1 мл стеклянный шприц Nuova Ompi EZ-Fill с длинным корпусом, с тонкостенной иглой калибра 27G и защитным колпачком для иглы FM30 | |||||||||
| Хранение при 25°С/60% отн.вл. (месяцы) | Хранение при 40°С/75% отн.вл. (месяцы) | Орбитальный шейкер (ч) | ||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 0,5 | 1 | 2 | 24 | 48 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Ирой дено | Ирой дено | Ирой дено | Ирой дено | Ирой дено | Ирой дено | Ирой дено | Прой дено | Прой дено | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,02 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,4 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем ОФ- свэжх | 100 | 100 | 101 | 99 | 99 | 100 | 101 | 101 | 99 | |
| Анализ невиди мых частиц путем HIAC (число/ мл) | > ю мкм | 283 | 613 | 814 | 975 | НТ | 1467 | 1584 | нт | 911 |
| > 25 мкм | 1 | 1 | 1 | 5 | НТ | 23 | 5 | нт | 2 | |
| Анализ дисперс ных частиц | От 2 до ю мкм | 12982 | 13554 | 12156 | 9523 | НТ | 15308 | 10205 | нт | 15559 |
| > ю | 29 | 253 | 74 | 69 | НТ | 376 | 79 | нт | 357 |
- 64 045976
| путем MFI (частиц ы/мл) | мкм | |||||||||
| > 25 мкм | 0 | 1 | 0 | 8 | НТ | 7 | 7 | НТ | 0 | |
| MCE в невосст анавл. условия X | Чисто та, основ ной пик, % | 97,0 | 96,5 | 96,1 | 95,1 | нт | 94,5 | 92,3 | НТ | 96,7 |
| LMW части цы, % | 2,9 | 3,2 | 3,5 | 4,1 | нт | 4,5 | 6,6 | нт | 3,0 | |
| HMW части цы, % | 0,1 | 0,4 | 0,4 | 0,8 | нт | 1,0 | 1,1 | нт | 0,3 | |
| MCE в восстан авл. условия X | Чисто та, % | 94,8 | 94,2 | 94,7 | 94,4 | нт | 93,7 | 91,0 | нт | 95,0 |
| LMW части цы, % | 2,3 | 2,7 | 2,3 | 2,6 | нт | 3,3 | 5,1 | нт | 1,9 | |
| NGH С, % | 1,2 | 1,4 | 1,1 | 1,6 | нт | 1,4 | 2,3 | нт | 1,2 | |
| Чистота согласи о ГПСВЭЖХ | HMW , % | 0,5 | 0,8 | 1,0 | 1,3 | 1,2 | 1,9 | 3,6 | 0,5 | 0,5 |
| Натив ная форма , % | 99,3 | 99,0 | 98,8 | 98,4 | 98,2 | 97,4 | 95,8 | 99,2 | 99,2 | |
| LMW, % | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,3 | 0,6 | 0,7 | 0,6 | 0,3 | 0,3 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи о СЕХСВЭЖХ | Кисла я форма , % | 20,3 | 20,3 | 23,9 | 28,6 | 26,1 | 32,0 | 54,5 | 20,2 | 19,9 |
| Базов ая форма , % | 67,9 | 67,0 | 63,9 | 59,1 | 60,5 | 54,0 | 33,6 | 67,7 | 67,9 | |
| Основ ная форма , % | 11,8 | 12,7 | 12,2 | 12,3 | 13,4 | 13,9 | 11,9 | 12,1 | 12,2 | |
| Анализ форм с | Кисла я | 31,2 | 31,4 | 33,1 | 41,2 | НТ | 39,8 | 57,6 | НТ | 30,3 |
- 65 045976
| изменен ными зарядам и согласи oiCIEF | форма , % | |||||||||
| Базов ая форма , % | 57,3 | 56,1 | 53,6 | 45,9 | НТ | 43,7 | 26,6 | НТ | 58,4 | |
| Основ ная форма , % | 11,6 | 12,5 | 13,4 | 13,0 | НТ | 16,5 | 15,7 | НТ | 11,4 | |
| Полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD | 0,079 | 0,081 | 0,081 | 0,089 | нт | 0,080 | 0,080 | НТ | 0,080 |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; FDG=rpynna по разработке состава; HMW=высокомолекyлярный; iCIEF=визyализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW=низкомолекyлярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визyализация микропотока; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; отн.вл. = относительная влажность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография Таблица 28
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAb1 в 1 мл шприцах BD Neopak после хранения при 2-8°C
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | ||||||||
| Наполняемый объем | 1,05 мл | ||||||||
| Контейнер/сред ство укупорки | 1 мл стеклянный шприц BD Neopak SCF с длинным корпусом, с тонкостенной иглой калибра 27G и защитным колпачком для иглы BD260 | ||||||||
| Продолжительность хранения при 2-8°С (месяцы) | |||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Пройд ено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | ||
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | ||
| рн | 5,4 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | 5,3 |
- 66 045976
| % белка, выделенного путем SEC-СВЭЖХ | 100 | 100 | 100 | 99 | 101 | 102 | 102 | |||
| Анализ невидим ых частиц путем HIAC (число/м л) | > ю МКМ | 34 | 271 | 108 | 41 | НТ | 184 | НТ | ||
| > 25 МКМ | 0 | 2 | 2 | 0 | нт | 2 | нт | |||
| Анализ дисперсн ых частиц путем MFI (частицы /мл) | От 2 до 10 мкм | 790 | 2673 | 3306 | 1096 | нт | 2602 | нт | ||
| > ю мкм | 2 | 49 | 5 | 3 | нт | 15 | нт | |||
| > 25 мкм | 0 | 3 | 0 | 0 | нт | 2 | нт | |||
| MCE в невосста навл. условиях | Чистот а, основн ой пик, % | 96,9 | 97,0 | 96,7 | 96,5 | нт | 97,4 | нт | ||
| LMW частиц ы, % | 3,0 | 3,0 | 3,2 | 3,3 | нт | 2,3 | нт | |||
| HMW частиц ы, % | 0,2 | 0,1 | 0,2 | 0,2 | нт | 0,4 | нт | |||
| MCE в восстана вл. условиях | Чистот а, % | 95,4 | 95,2 | 95,2 | 95,0 | нт | 94,2 | нт | ||
| LMW частиц ы, % | 1,7 | 1,9 | 1,7 | 1,9 | нт | 2,2 | нт | |||
| NGHC, % | 1,2 | 1,1 | 1,5 | 1,6 | нт | 1,9 | нт | |||
| Чистота согласно ГПсвэжх | HMW, % | 0,5 | 0,5 | 0,6 | 0,7 | 0,7 | 0,8 | 0,8 | ||
| Нативн ая форма, % | 99,3 | 99,3 | 99,2 | 99,1 | 99,0 | 99,0 | 98,9 |
- 67 045976
| LMW, % | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,3 | 0,3 | 0,3 | |||
| Анализ форм с измененн ими зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кислая форма, % | 20,1 | 19,6 | 19,9 | 19,9 | 19,7 | 18,1 | 19,3 | ||
| Базовая форма, % | 68,1 | 68,1 | 68,6 | 68,6 | 68,5 | 71,1 | 69,6 | |||
| Основн ая форма, % | 11,8 | 12,3 | 11,5 | 11,5 | 11,8 | 10,9 | 11,1 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно iCIEF | Кислая форма, % | 30,8 | 30,8 | 30,7 | 30,6 | НТ | 32,2 | НТ | ||
| Базовая форма, % | 57,5 | 57,9 | 58,2 | 57,7 | нт | 55,6 | НТ | |||
| Основн ая форма, % | 11,7 | 11,4 | 11,2 | 11,6 | нт | 12,2 | НТ | |||
| Полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD | 0,082 | 0,081 | 0,082 | 0,091 | нт | 0,091 | НТ | |||
| Относительная активность, % (биоанализ) | 107 | НТ | НТ | 134 | нт | НД | НТ |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; FDG=rpynna по разработке состава; HMW=высокомолекyлярный; iCIEF=визyαлизация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW=низкомолекyлярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визyαлизация микропотока; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
Таблица 29
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAb1 в 1 мл шприцах BD Neopak после хранения в условиях ускоренного состаривания и стресс-условиях, и при перемешивании
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 |
| Наполняемый объем Контейнер/сред | 1,05 мл 1 мл стеклянный шприц BD Neopak SCF с длинным корпусом, с |
- 68 045976
| ство укупорки | тонкостенной иглой калибра 27G и защитным колпачком для иглы BD260 | |||||||||
| Хранение при 25°С/60% отн.вл. (месяцы) | Хранение при 40°С/75% отн.вл. (месяцы) | Орбитальный шейкер (ч) | ||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 0,5 | 1 | 2 | 24 | 48 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,01 | 0,02 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,4 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем ОФ- свэжх | 100 | 100 | 100 | 98 | 99 | 100 | 100 | 100 | 99 | |
| Анализ невидим ых частиц путем HIAC (число/ мл) | > ю мкм | 34 | 132 | 140 | 179 | нт | 359 | 458 | нт | 404 |
| > 25 мкм | 0 | 2 | 1 | 3 | НТ | 4 | 2 | нт | 0 | |
| Анализ дисперс ных частиц путем MFI (частиц ы/мл) | От 2 до 10 мкм | 790 | 3455 | 2674 | 2872 | НТ | 5749 | 6190 | нт | 4523 |
| > ю мкм | 2 | 53 | 13 | 23 | НТ | 69 | 33 | нт | 116 | |
| > 25 мкм | 0 | 5 | 2 | 3 | НТ | 0 | 0 | нт | 0 | |
| MCE в невосст анавл. условия X | Чист ота, основ ной пик, % | 96,9 | 96,4 | 96,0 | 95,3 | НТ | 94,6 | 92,5 | нт | 97,0 |
| LMW части цы, % | 3,0 | 3,3 | 3,6 | 4,3 | НТ | 4,4 | 6,2 | нт | 3,0 | |
| НМ | 0,2 | 0,3 | 0,4 | 0,5 | нт | 1,0 | 1,3 | нт | 0,1 |
- 69 045976
| W части цы, % | ||||||||||
| MCE в восстан авл. условия X | Чист ота, % | 95,4 | 95,2 | 94,3 | 93,9 | НТ | 93,4 | 91,7 | НТ | 95,2 |
| LMW части цы, % | 1,7 | 2,0 | 2,5 | 2,8 | нт | 3,1 | 4,4 | НТ | 1,8 | |
| NGH С, % | 1,2 | 1,2 | 1,6 | 1,4 | нт | 1,7 | 2,0 | НТ | 1,1 | |
| Чистота согласи о ГПСВЭЖХ | НМ W, % | 0,5 | 0,8 | 1,о | 1,3 | 1,2 | 1,9 | 3,7 | 0,5 | 0,5 |
| Нати вная форм а, % | 99,3 | 99,0 | 98,8 | 98,4 | 98,2 | 97,4 | 95,7 | 99,3 | 99,3 | |
| LMW , % | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,3 | 0,6 | 0,7 | 0,6 | 0,3 | 0,3 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи о СЕХСВЭЖХ | Кисл ая форм а, % | 20,1 | 20,3 | 24,3 | 28,8 | 25,7 | 32,0 | 55,1 | 19,9 | 19,9 |
| Базов ая форм а, % | 68,1 | 67,0 | 63,5 | 58,9 | 60,7 | 54,1 | 33,3 | 68,0 | 67,7 | |
| Осно вная форм а, % | 11,8 | 12,6 | 12,2 | 12,3 | 13,6 | 13,9 | 11,6 | 12,1 | 12,4 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи о iCIEF | Кисл ая форм а, % | 30,8 | 31,7 | 32,9 | 37,3 | НТ | 40,1 | 56,7 | НТ | 30,6 |
| Базов ая форм а, % | 57,5 | 55,4 | 53,3 | 48,7 | нт | 43,1 | 25,8 | нт | 57,5 | |
| Осно вная форм а, % | 11,7 | 12,9 | 13,8 | 14,1 | нт | 16,8 | 17,5 | нт | 11,9 | |
| Полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD | 0,082 | 0,080 | 0,082 | 0,089 | нт | 0,080 | 0,081 | нт | 0,081 |
СЕХ=катионообмен; [^лекарственное вещество; FDG=rpynna по разработке состава;
HMW=высокомолекyлярный; iCIEF=визyализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW=низкомолекyлярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визyализация микропотока; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; отн.вл. = относительная влажность; ОФ=обращенная фаза;
ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 70 045976
Таблица 30
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAbl в 2,25 мл шприцах gOmpi после хранения при 2-8°C
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | ||||||||||
| Наполняемый объем | 2,14 мл | ||||||||||
| Контейнер/сред ство укупорки | 2,25 мл стеклянный шприц Nuova Ompi EZ-Fill с тонкостенной иглой калибра 27G и защитным колпачком для иглы FM30 | ||||||||||
| Исслед пара» Исследова и внешней Мутность (увеличенг при 405 и»/ рн % выделенно SEC-CB3> Анализ невидим ых частиц путем HIAC (число/м л) | уемый летр ние цве э вида ie 0 0 белк го путе КХ мкм мкм | та П а, ;м 10 25 | П[ 0 Пройд ено 0,00 5,4 100 3104 2 | ЮД0ЛЖ1 1 Прой дено 0,00 5,3 100 790 1 | ительно 3 Прой дено 0,00 5,3 100 2428 11 | сть храь 6 Прой дено 0,00 5,2 98 3381 35 | 1ения nj 9 Прой дено 0,01 5,2 100 нт нт | >и 2-8°С 12 Прой дено 0,00 5,3 103 2406 15 | (месяц! 18 Прой дено 0,00 5,3 102 нт нт | >0 24 | 36 |
| Анализ дисперсн | От 2 до 10 мкм | 18565 | 22777 | 16440 | 24709 | нт | 12492 | нт |
- 71 045976
| ых частиц | > ю мкм | 146 | 325 | 107 | 156 | нт | 107 | НТ | ||
| путем MFI (частицы /мл) | > 25 мкм | 0 | 1 | 0 | 3 | нт | 3 | НТ | ||
| Чистота | ||||||||||
| 9 основно | 97,1 | 97,0 | 97,3 | 97,3 | нт | 97,6 | НТ | |||
| MCE в | й пик, % | |||||||||
| невосста | LMW | — | ||||||||
| ИЛЬИ. условиях | частицы , % HMW | 2,9 | 2,9 | 2,6 | 2,6 | нт | 2,1 | НТ | ||
| частицы | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | нт | 0,3 | НТ | |||
| , % Чистота % | 94,5 | 95,3 | 95,4 | 94,7 | нт | 94,6 | НТ | |||
| MCE в восстана | LMW частицы | 2,1 | 2,1 | 1,5 | 1,9 | нт | 1,9 | нт | ||
| ВЛ. условиях | , % NGHC, % | 1,5 | 1,0 | 1,2 | 1,6 | нт | 1,8 | нт | ||
| HMW, % | 0,5 | 0,5 | 0,6 | 0,7 | 0,7 | 0,8 | 0,8 | |||
| Чистота | Нативна | |||||||||
| согласно ГП- | я форма, | 99,3 | 99,3 | 99,2 | 99,1 | 99,0 | 99,0 | 99,0 | ||
| СВЭЖХ | % LMW, % | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,3 | 0,3 | 0,3 | ||
| Анализ | Кислая | |||||||||
| форм с | форма, | 20,2 | 19,4 | 19,8 | 19,7 | 19,3 | 18,5 | 19,1 | ||
| измененн | % | |||||||||
| ыми | Базовая | |||||||||
| зарядами | форма, | 68,0 | 68,4 | 68,8 | 68,9 | 69,0 | 70,7 | 69,8 | ||
| согласно | % | |||||||||
| СЕХ- | Основн | |||||||||
| СВЭЖХ | ая форма, % | 11,9 | 12,2 | 11,4 | 11,4 | 11,7 | 10,9 | И,1 | ||
| Анализ | Кислая | |||||||||
| форм с | форма, | 31,1 | НТ | 30,6 | 30,8 | НТ | 31,2 | НТ | ||
| измененн | % | |||||||||
| ыми | Базовая | |||||||||
| зарядами | форма, | 57,3 | нт | 58,3 | 57,4 | нт | 56,8 | нт | ||
| согласно | % | |||||||||
| iCIEF | Основн ая форма, % | 11,6 | нт | 11,1 | 11,8 | нт | 12,0 | нт | ||
| Полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD | 0,080 | 0,081 | 0,082 | 0,091 | нт | 0,091 | нт |
- 72 045976
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; FDG=rpynna по разработке состава; HMW=высокомолекyлярный; iCIEF=визyαлизация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW=низкомолекyлярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визyαлизация микропотока; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
Т аблица 31
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAb1 в 2,25 мл шприцах gOmpi после хранения в условиях ускоренного состаривания и стресс-условиях, и при перемешивании
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | ||||||||
| Наполняемый объем | 2,14 мл | ||||||||
| Контейнер/ср едство укупорки | 2,25 мл стеклянный шприц Nuova Ompi EZ-Fill с тонкостенной иглой калибра 27G и защитным колпачком для иглы FM30 | ||||||||
| Хранение при 25°С/60% отн.вл. (месяцы) | Хранение при 40°С/75% отн.вл. (месяцы) | Орбитальный шейкер (ч) | |||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 0,5 | 1 | 2 | 24 | 48 |
| Исследование цвета и внешнего вида | Ирой дено | Ирой дено | Ирой дено | Ирой дено | Ирой дено | Ирой дено | Ирой дено | Ирой дено | Ирой дено |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,02 | 0,00 | 0,00 |
| рн | 5,4 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,2 |
| % белка, | 100 | 100 | 100 | 99 | 99 | 100 | 100 | 99 | 99 |
- 73 045976
| выделенного путем ОФ- свэжх | ||||||||||
| Анализ невиди мых частиц путем HIAC (число/ мл) | > ю мкм | 3104 | 1045 | 1956 | 2270 | НТ | 2339 | 1362 | НТ | 3139 |
| > 25 мкм | 2 | 1 | 2 | 11 | НТ | 0 | 1 | НТ | И | |
| Анализ дисперс ных частиц путем MFI (частиц ы/мл) | От 2 ДО 10 мкм | 18565 | 21342 | 12788 | 13835 | НТ | 13671 | 9727 | НТ | 28368 |
| > ю мкм | 146 | 394 | 120 | 79 | НТ | 1112 | 80 | НТ | 674 | |
| > 25 мкм | 0 | 0 | 7 | 3 | НТ | 8 | 2 | НТ | 0 | |
| MCE в невосст анавл. условия X | Чисто та, основ ной пик, % | 97,1 | 96,6 | 96,6 | 95,6 | НТ | 94,7 | 92,8 | НТ | 97,2 |
| LMW части цы, % | 2,9 | 3,2 | 3,1 | 3,8 | нт | 4,4 | 6,0 | НТ | 2,7 | |
| HMW части цы, % | 0,1 | 0,2 | 0,4 | 0,6 | нт | 0,9 | 1,2 | НТ | 0,1 | |
| MCE в восстан авл. условия X | Чисто та, % | 94,5 | 95,1 | 94,8 | 94,8 | нт | 93,4 | 91,8 | НТ | 94,8 |
| LMW части цы, % | 2,1 | 1,9 | 1,8 | 2,3 | нт | 3,3 | 4,9 | НТ | 2,1 | |
| NGH С, % | 1,5 | 1,1 | 1,8 | 1,3 | нт | 1,6 | 1,4 | нт | 1,4 | |
| Чистота согласи о ГПСВЭЖХ | HMW , % | 0,5 | 0,8 | 1,0 | 1,3 | 1,2 | 1,9 | 3,7 | 0,5 | 0,5 |
| Натив ная форма , % | 99,3 | 99,0 | 98,8 | 98,4 | 98,2 | 97,4 | 95,7 | 99,3 | 99,3 | |
| LMW, | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,3 | 0,6 | 0,7 | 0,6 | 0,3 | 0,3 |
- 74 045976
| % | ||||||||||
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи о СЕХСВЭЖХ | Кисла я форма , % | 20,2 | 20,8 | 23,9 | 28,7 | 25,8 | 32,1 | 54,7 | 20,2 | 19,8 |
| Базов ая форма , % | 68,0 | 66,4 | 64,0 | 59,0 | 60,6 | 54,3 | 33,6 | 67,8 | 67,9 | |
| Основ ная форма ,% | 11,9 | 12,8 | 12,1 | 12,3 | 13,6 | 13,6 | 11,7 | 12,0 | 12,4 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи oiCIEF | Кисла я форма , % | 31,1 | 31,1 | 37,0 | 37,6 | нт | 40,3 | 57,4 | НТ | 30,5 |
| Базов ая форма , % | 57,3 | 56,0 | 50,9 | 48,1 | нт | 44,5 | 26,8 | НТ | 57,5 | |
| Основ ная форма , % | 11,6 | 12,9 | 12,1 | 14,2 | нт | 15,3 | 15,8 | нт | 12,0 | |
| Полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD | 0,080 | 0,081 | 0,082 | 0,090 | нт | 0,080 | 0,081 | нт | 0,080 |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; FDG=rpynna по разработке состава; HMW=высокомолекyлярный; iCIEF=визyализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW=низкомолекyлярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визyализация микропотока; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; отн.вл. = относительная влажность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография Таблица 32
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAb1 в 2,25 мл шприцах BD Neopak после хранения при 2-8°C
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 |
| Наполняемый объем | 2,14 мл |
- 75 045976
| Контейнер/сред ство укупорки | 2,25 мл стеклянный шприц BD Neopak SCF с длинным корпусом, с тонкостенной иглой калибра 27G и защитным колпачком для иглы BD260 | |||||||||
| Продолжительность хранения при 2-8°С (месяцы) | ||||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройд ено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |||
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,00 | 0,00 | |||
| рн | 5,4 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,2 | 5,3 | |||
| % белка, выделенного путем SEC-СВЭЖХ | 100 | 101 | 100 | 99 | 100 | 102 | 103 | |||
| Анализ невидим ых частиц путем HIAC (число/м л) | > ю мкм | 296 | 363 | 513 | 560 | нт | 573 | нт | ||
| > 25 мкм | 0 | 1 | 1 | 6 | нт | 5 | нт | |||
| Анализ дисперсн ых частиц путем MFI (частицы /мл) | От 2 до 10 мкм | 3562 | 14700 | 6832 | 12464 | нт | 6453 | нт | ||
| > ю мкм | 25 | 176 | 18 | 20 | нт | 41 | нт | |||
| > 25 мкм | 2 | 1 | 2 | 2 | нт | 5 | нт | |||
| MCE в невосста навл. условиях | Чистота ·> основно й пик, % | 97,8 | 97,0 | 97,5 | 97,2 | нт | 97,3 | нт | ||
| LMW частицы , % | 2,2 | 2,9 | 2,3 | 2,5 | нт | 2,3 | нт | |||
| HMW частицы , % | 0,1 | 0,1 | 0,2 | 0,3 | нт | 0,4 | нт | |||
| MCE в восстана | Чистота , % | 94,9 | 95,0 | 94,1 | 94,4 | нт | 94,8 | нт |
- 76 045976
| в. условиях | LMW частицы , % | 1,7 | 2,0 | 2,2 | 2,0 | НТ | 2,0 | НТ | ||
| NGHC, % | 1,6 | 1,4 | 2,0 | 1,7 | нт | 1,6 | нт | |||
| Чистота согласно ГПСВЭЖХ | HMW, % | 0,5 | 0,5 | 0,6 | 0,6 | 0,7 | 0,8 | 0,8 | ||
| Нативна я форма, % | 99,3 | 99,3 | 99,2 | 99,1 | 99,1 | 99,0 | 98,9 | |||
| LMW, % | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,3 | 0,3 | 0,3 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кислая форма, % | 20,2 | 19,9 | 19,9 | 19,8 | 19,2 | 18,2 | 19,3 | ||
| Базовая форма, % | 67,9 | 67,9 | 68,8 | 68,8 | 69,1 | 70,9 | 69,9 | |||
| Основн ая форма, % | 12,0 | 12,2 | 11,3 | 11,4 | 11,7 | 10,9 | 10,9 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно iCIEF | Кислая форма, % | 31,2 | 30,7 | 30,4 | 30,6 | НТ | 32,5 | НТ | ||
| Базовая форма, % | 57,1 | 57,7 | 58,3 | 58,1 | нт | 55,1 | НТ | |||
| Основн ая форма, % | 11,7 | 11,6 | 11,3 | 11,3 | нт | 12,4 | НТ | |||
| Полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD | 0,80 | 0,081 | 0,082 | 0,091 | нт | 0,091 | НТ | |||
| Относительная активность, % (биоанализ) | 99 | НТ | НТ | 128 | нт | нд | НТ |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; FDG=rpynna по разработке состава; HMW=высокомолекyлярный; iCIEF=визyализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW=низкомолекyлярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визyализация микропотока; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 77 045976
Таблица 33
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAbl в 2,25 мл шприцах BD Neopak после хранения в условиях ускоренного состаривания и стресс-условиях, и при перемешивании
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||||||||
| Наполняемый объем | 2,14 мл | |||||||||
| Контейнер/сре дство укупорки | 2,25 мл стеклянный шприц BD Neopak SCF с длинным корпусом, с тонкостенной иглой калибра 27G и защитным колпачком для иглы BD260 | |||||||||
| Хранение при 25°С/60% отн.вл. (месяцы) | Хранение при 40°С/75% отн.вл. (месяцы) | Орбитальный шейкер (ч) | ||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 0,5 | 1 | 2 | 24 | 48 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,01 | 0,02 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,4 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем ОФ- СВЭЖХ | 100 | 100 | 100 | 100 | 99 | 100 | 101 | 100 | 99 | |
| Анализ невидим ых частиц путем HIAC (число/ мл) | > ю мкм | 296 | 479 | 698 | 357 | НТ | 468 | 609 | нт | 642 |
| > 25 мкм | 0 | 0 | 1 | 2 | НТ | 1 | 1 | нт | 1 | |
| Анализ дисперс ных частиц путем MFI (частиц ы/мл) | От 2 до 10 мкм | 3562 | 11550 | 7486 | 6464 | НТ | 12808 | 9128 | нт | 13532 |
| > 10 мкм | 25 | 154 | 38 | 36 | НТ | 179 | 48 | нт | 243 | |
| > 25 мкм | 2 | 1 | 2 | 5 | НТ | 5 | 0 | нт | 3 |
- 78 045976
| MCE в невосст анавл. условия X | Чист ота, основ ной пик, % | 97,8 | 96,9 | 96,5 | 95,9 | НТ | 95,4 | 93,2 | НТ | 97,2 |
| LMW части цы, % | 2,2 | 3,0 | 3,2 | 3,6 | НТ | 4,1 | 5,5 | нт | 2,7 | |
| НМ W части цы, % | 0,1 | 0,2 | 0,3 | 0,5 | НТ | 0,5 | 1,3 | нт | 0,1 | |
| MCE в восстан авл. условия X | Чист ота, % | 94,9 | 94,7 | 94,2 | 93,9 | нт | 93,7 | 92,0 | нт | 94,9 |
| LMW части цы, % | 1,7 | 2,0 | 2,2 | 2,5 | нт | 2,8 | 4,3 | нт | 1,8 | |
| NGH С, % | 1,6 | 1,5 | 1,8 | 2,0 | нт | 1,8 | 2,1 | нт | 1,7 | |
| Чистота согласи о ГПСВЭЖХ | НМ W, % | 0,5 | 0,8 | 1,0 | 1,3 | 1,2 | 1,9 | 3,6 | 0,5 | 0,5 |
| Нати вная форм а, % | 99,3 | 99,0 | 98,8 | 98,4 | 98,2 | 97,5 | 95,8 | 99,3 | 99,3 | |
| LMW , % | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,3 | 0,6 | 0,7 | 0,6 | 0,3 | 0,2 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи о СЕХСВЭЖХ | Кисл ая форм а, % | 20,2 | 19,8 | 23,9 | 28,6 | 26,0 | 31,8 | 54,9 | 19,9 | 19,9 |
| Базов ая форм а, % | 67,9 | 67,7 | 64,0 | 59,1 | 60,3 | 54,5 | 33,9 | 68,2 | 67,8 | |
| Осно вная форм а, % | 12,0 | 12,5 | 12,2 | 12,3 | 13,7 | 13,8 | 11,3 | 12,0 | 12,2 | |
| Анализ | Кисл | 31,2 | 31,7 | 33,6 | 38,0 | НТ | 40,1 | 56,4 | НТ | 30,7 |
- 79 045976
| форм с изменен ними зарядам и согласи oiCIEF | ая форм а, % | |||||||||
| Базов ая форм а, % | 57,1 | 55,3 | 52,7 | 47,9 | НТ | 43,1 | 26,4 | НТ | 57,9 | |
| Осно вная форм а, % | 11,7 | 13,0 | 13,7 | 14,1 | НТ | 16,9 | 17,2 | НТ | 11,5 | |
| Полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD | 0,80 | 0,081 | 0,082 | 0,090 | НТ | 0,080 | 0,081 | нт | 0,081 |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; FDG=rpynna по разработке состава; HMW=высокомолекyлярный; iCIEF=визyализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW=низкомолекyлярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визyализация микропотока; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; отн.вл. = относительная влажность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография Таблица 34
Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAbl в 1 мл шприцах SiOPlasma после хранения при 2-8°C
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | ||||||||
| Наполняемый объем | 1,05 мл | ||||||||
| Контейнер/сред ство укупорки | 1 мл шприц SiOPlasma с тонкостенной иглой 27 калибра | ||||||||
| Продолжительность хранения при 2-8°С (месяцы) | |||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 |
| Исследование цвета и внешнего вида | Пройд ено | Пройд ено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | ||
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | ||
| рн | 5,4 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,2 | 5,2 |
- 80 045976
| % белка, выделенного путем SEC-СВЭЖХ | 100 | 100 | 102 | 99 | 101 | 103 | 102 | |||
| Анализ невидим ых частиц путем HIAC (число/м л) | > ю мкм | 16 | 14 | 25 | 18 | НТ | 24 | НТ | ||
| > 25 мкм | 0 | 1 | 1 | 2 | НТ | 2 | НТ | |||
| Анализ дисперсн ых частиц путем MFI (частицы /мл) | От 2 до 10 мкм | 241 | 333 | 295 | 334 | НТ | 338 | нт | ||
| > ю мкм | 7 | 23 | 23 | 23 | НТ | 23 | нт | |||
| > 25 мкм | 2 | 5 | 0 | 2 | НТ | 5 | нт | |||
| MCE в невосста навл. условиях | Чистот а, основн ой пик, % | 97,4 | 97,6 | 97,4 | 97,3 | НТ | 97,7 | нт | ||
| LMW частиц ы, % | 2,5 | 2,3 | 2,5 | 2,6 | нт | 2,0 | нт | |||
| HMW частиц ы, % | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | нт | 0,3 | нт | |||
| MCE в восстана вл. условиях | Чистот а, % | 95,7 | 95,1 | 94,7 | 94,5 | нт | 94,1 | нт | ||
| LMW частиц ы, % | 1,5 | 1,9 | 2,1 | 2,1 | нт | 2,3 | нт | |||
| NGHC, % | 1,0 | 1,3 | 1,4 | 1,7 | нт | 1,8 | нт | |||
| Чистота согласно ГПсвэжх | HMW, % | 0,5 | 0,5 | 0,6 | 0,7 | 0,7 | 0,7 | 0,8 | ||
| Нативн ая форма, % | 99,3 | 99,3 | 99,2 | 99,1 | 99,1 | 99,0 | 98,9 |
- 81 045976
| LMW, % | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,3 | 0,3 | 0,3 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно СЕХСВЭЖХ | Кислая форма, % | 19,9 | 19,7 | 19,7 | 19,8 | 19,3 | 18,2 | 19,3 | ||
| Базовая форма, % | 68,1 | 68,1 | 68,8 | 68,7 | 69,0 | 70,9 | 69,6 | |||
| Основн ая форма, % | 11,9 | 12,2 | 11,5 | 11,5 | 11,7 | 10,9 | 11,1 | |||
| Анализ форм с измененн ыми зарядами согласно iCIEF | Кислая форма, % | 31,2 | 30,7 | 30,4 | 30,6 | НТ | 31,5 | НТ | ||
| Базовая форма, % | 57,1 | 57,7 | 58,3 | 58,1 | нт | 56,7 | НТ | |||
| Основн ая форма, % | 11,7 | 11,6 | 11,3 | 11,3 | нт | 11,9 | нт | |||
| Полисорбат 80, %, определенный при помощи CAD | 0,081 | 0,081 | 0,081 | 0,091 | нт | 0,092 | нт |
СЕХ=катионообмен; DS лекарственное вещество; FDG=rpynna по разработке состава; HMW=высокомолекyлярный; iCIEF=визyαлизация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW=низкомолекyлярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визyαлизация микропотока; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; ОФ=обращенная фаза; ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
Т аблица 3 5 Исследование стабильности 150 мг/мл лекарственного продукта mAb1 в 1 мл шприцах SiOPlasma после хранения в условиях ускоренного состаривания и стресс-условиях, и при перемешивании
| Состав | 150 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | |||
| Наполняемый объем | 1,05 мл | |||
| Контейнер/сред ство укупорки | 1 мл шприц SiOPlasma с тонкостенной иглой 27 калибра | |||
| Хранение при 25°С/60% отн.вл. | Хранение при 40°С/75% отн.вл. | Орбитальный шейкер (ч) |
- 82 045976
| (месяцы) | (месяцы) | |||||||||
| Исследуемый параметр | 0 | 1 | 3 | 6 | 0,5 | 1 | 2 | 24 | 48 | |
| Исследование цвета и внешнего вида | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | |
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,02 | 0,00 | 0,00 | |
| рн | 5,4 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | |
| % белка, выделенного путем ОФ- свэжх | 100 | 100 | 101 | 99 | 101 | 101 | 101 | 100 | 99 | |
| Анализ невидим ых частиц путем HIAC (число/ мл) | > ю мкм | 16 | 8 | и | 19 | нт | 14 | 32 | нт | 21 |
| > 25 мкм | 0 | 0 | 0 | 1 | нт | 0 | 1 | нт | 0 | |
| Анализ дисперс ных частиц путем MFI (частиц ы/мл) | От 2 до 10 мкм | 241 | 437 | 774 | 11 | нт | 509 | 495 | нт | 518 |
| > ю мкм | 7 | 31 | 457 | 23 | нт | 62 | 26 | нт | 8 | |
| > 25 мкм | 2 | 3 | 774 | 11 | нт | 7 | 2 | нт | 0 | |
| MCE в невосст анавл. условия X | Чист ота, основ ной пик, % | 97,4 | 97,0 | 96,6 | 95,6 | нт | 94,7 | 93,1 | нт | 97,2 |
| LMW части цы, % | 2,5 | 2,7 | 3,0 | 3,7 | нт | 4,2 | 5,4 | нт | 2,7 | |
| НМ W части цы, % | 0,1 | 0,3 | 0,5 | 0,7 | нт | 1,1 | 1,5 | нт | 0,1 |
- 83 045976
| MCE в восстан авл. условия X | Чист ота, % | 95,7 | 94,5 | 94,9 | 94,1 | НТ | 93,6 | 92,7 | НТ | 95,6 |
| LMW части цы, % | 1,5 | 2,0 | 2,0 | 2,2 | НТ | 3,0 | 4,2 | нт | 1,7 | |
| NGH С, % | 1,0 | 1,7 | 1,5 | 1,7 | нт | 1,6 | 1,5 | нт | 1,0 | |
| Чистота согласи о ГПСВЭЖХ | НМ W, % | 0,5 | 0,8 | 1,0 | 1,3 | 1,2 | 1,9 | 3,8 | 0,5 | 0,5 |
| Нати вная форм а, % | 99,3 | 99,0 | 98,8 | 98,4 | 98,2 | 97,4 | 95,6 | 99,2 | 99,3 | |
| LMW , % | 0,3 | 0,2 | 0,2 | 0,3 | 0,6 | 0,7 | 0,6 | 0,3 | 0,3 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи о СЕХСВЭЖХ | Кисл ая форм а, % | 19,9 | 21,0 | 24,1 | 63,6 | 26,0 | 32,0 | 54,7 | 20,0 | 19,8 |
| Базов ая форм а, % | 68,1 | 66,2 | 28,7 | 59,1 | 60,7 | 54,0 | 33,5 | 67,9 | 67,8 | |
| Осно вная форм а, % | 11,9 | 12,7 | 24,1 | 63,6 | 13,3 | 14,0 | 11,8 | 12,0 | 12,4 | |
| Анализ форм с изменен ными зарядам и согласи oiClEF | Кисл ая форм а, % | 31,2 | 31,7 | 33,6 | 38,0 | НТ | 40,1 | 56,4 | НТ | 30,7 |
| Базов ая форм а, % | 57,1 | 55,3 | 52,7 | 47,9 | нт | 43,1 | 26,4 | НТ | 57,9 | |
| Осно вная форм а, % | 11,7 | 13,0 | 13,7 | 14,1 | нт | 16,9 | 17,2 | НТ | 11,5 | |
| Полисорбат 80, %, определенный при помощи | 0,081 | 0,081 | 0,082 | 0,091 | нт | 0,081 | 0,082 | нт | 0,081 | |
| CAD |
СЕХ=катионообмен; [^лекарственное вещество; FDG=rpynna по разработке состава;
HMW=высокомолекyлярный; iCIEF=визyализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW=низкомолекyлярный; MCE-SDS=капиллярный электрофорез на микрочипах в присутствии додецилсульфата натрия; MFI=визyализация микропотока; НТ=не требуется; ОП=оптическая плотность; отн.вл. = относительная влажность; ОФ=обращенная фаза;
ГП=гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ=сверхэффективная жидкостная хроматография
- 84 045976
Таблица 36
Исследование стабильности 75 мг/мл лекарственного продукта mAbl в стеклянных пробирках после хранения при 2-8°C
| Состав | 75 мг/мл mAbl, 10 мМ ацетат, 5% (масс./об.) сахарозы, 70 мМ гидрохлорид L-аргинина, 0,08% (масс./об.) полисорбата 80, pH 5,3 | ||||||||||
| Наполняемый объем | 2,5 мл | ||||||||||
| Контейнер/ср едство укупорки | Пробирки из боросиликатного стекла ISO 6R 1 типа с 20 мм пробками West WPS-1343 4023/50 В2-40 с покрытием FluroTec® | ||||||||||
| Исследуемый параметр | Продолжительность хранения при 2-8°С (месяцы) | ||||||||||
| 0 | 1 | 2 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36 | ||
| Исследование цвета и внешнего вида | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | Прой дено | ||||
| Мутность (увеличение ОП при 405 нм) | 0,00 | 0,00 | 0,01 | 0,01 | 0,01 | 0,00 | 0,01 | ||||
| рн | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,3 | 5,2 | 5,3 | 5,3 | ||||
| Анализ невиди мых частиц путем HIAC (число/ мл) | > ю мкм | 4 | 7 | 6 | 7 | 3 | НТ | 3 | |||
| > 25 мкм | 0 | 1 | 1 | 2 | 1 | нт | 0 | ||||
| Анализ невиди мых частиц путем MFI (число/ | От 2 до 10 мкм | 238 | 373 | 398 | 578 | 677 | нт | 776 | |||
| > ю мкм | 7 | 13 | 10 | 7 | 21 | нт | 21 | ||||
| > 25 | 2 | 0 | 2 | 2 | 3 | нт | 3 |
- 85 045976
| мл) | мкм | ||||||||||
| % белка, выделенного путем ГПСВЭЖХ | 100 | 102 | 102 | 100 | 101 | 100 | 100 | ||||
| MCE в невосс танавл. услови ях | Чис тота , осно вной пик, % | 97,5 | 97,3 | 97,2 | 97,2 | 97,3 | НТ | 97,4 | |||
| LM W част ицы, % | 2,5 | 2,7 | 2,6 | 2,6 | 2,6 | НТ | 2,3 | ||||
| НМ W част ицы, % | 0,1 | 0,1 | 0,2 | 0,2 | 0,1 | НТ | 0,3 | ||||
| MCE в восста навл. услови ях | Чис тота , % | 94,4 | 93,7 | 94,3 | 94,6 | 94,3 | НТ | 94,1 | |||
| LM W част ицы, % | 1,8 | 2,0 | 2,0 | 1,9 | 2,1 | НТ | 2,4 | ||||
| NG НС, % | 2,0 | 1,9 | 1,9 | 1,9 | 1,9 | НТ | 1,9 | ||||
| Чистот а соглас но ГПСВЭЖ X | НМ W част ицы, % | 0,4 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,6 | |||
| Чис тота 9 осно вной пик, % | 99,3 | 99,3 | 99,3 | 99,3 | 99,2 | 99,1 | 99,2 |
-
Claims (19)
- LM W част ицы, % 0,2 0,2 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3Анализ форм с измене иными заряда ми соглас но СЕХСВЭЖ X Обл асть 1, % 20,9 20,8 21,2 20,9 20,7 19,6 19,6Обл асть 2, % 69,6 69,6 69,2 69,5 69,1 71,5 70,8Обл асть 3, % 9,5 9,6 9,7 9,7 10,2 8,9 9,6Анализ форм с измене иными заряда ми соглас но iCIEF Обл асть 1, % 35,6 35,4 34,6 34,9 33,7 нт 33,2Обл асть 2, % 55,3 55,5 56,3 56,4 56,4 нт 56,6Обл асть 3, % 9,2 9,2 9,1 8,8 9,9 нт 10,3Относительна я активность, %(биоанализ) 58 НТ нт нт 63 нт НДCEX, катионообмен; DS, лекарственное вещество; FDG, группа по разработке состава; HMW, высокомолекулярный; iCIEF, визуализация путем капиллярного изоэлектрического фокусирования; LMW, низкомолекулярный; MFI, визуализация микропотока; мономер, интактное антитело; НД, нет данных; НТ, не требуется; ОП, оптическая плотность; ОФ, обращенная фаза; ГП, гельпроникающая хроматография; СВЭЖХ, сверхэффективная жидкостная хроматографияРезультаты исследований долгосрочной стабильности при хранении, стабильности в условиях ускоренного состаривания и стресс-условиях указывают на то, что составы mAb1 были стабильными во время получения (получение состава, наполнение/окончательная обработка и нанесение этикетки) и могли выдерживать кратковременное хранение при комнатной температуре без нарушения физической или химической стабильности.Объем настоящего изобретения не ограничен конкретными вариантами реализации, описанными в настоящем документе. Напротив, разные модификации изобретения, помимо тех, что описаны в настоящем документе, станут очевидны специалистам в данной области техники после изучения приведенного выше описания. Предполагается, что указанные модификации включены в объем прилагаемой формулы изобретения.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Стабильный жидкий фармацевтический состав, содержащий:(i) антитело человека, которое специфически связывается с интерлейкином-33 человека (hIL-33) в концентрации от 1 до 200 мг/мл, причем антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и вариабельную область легкой цепи (LCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10;(ii) от 5 до 15 мМ ацетата;(iii) от 60 до 80 мМ гидрохлорида аргинина;(iv) от 3 до 7% мас./об. сахарозы; и (v) от 0,06 до 0,1% мас./об. полисорбата 80, причем состав имеет рН от 5 до 5,6.
- 2. Стабильный жидкий фармацевтический состав по п.1, в котором антитело присутствует в концентрации от 15 до 150 мг/мл.
- 3. Стабильный жидкий фармацевтический состав по п.1, содержащий: (i) от 15±1,5 мг/мл до- 87 045976150±15 мг/мл антитела; (ii) 10±2 мМ ацетата; (iii) 70±14 мМ гидрохлорида аргинина; (iv) 5±1% мас./об.сахарозы; (iv) 0,08±0,016% мас./об. полисорбата 80, причем состав имеет рН от 5,1 до 5,5.
- 4. Стабильный жидкий фармацевтический состав по п.3, содержащий 15±1,5 мг/мл антитела.
- 5. Стабильный жидкий фармацевтический состав по п.3, содержащий 75±5 мг/мл антитела.
- 6. Стабильный жидкий фармацевтический состав по п.3, содержащий 150±15 мг/мл антитела.
- 7. Стабильный жидкий фармацевтический состав по любому из пп.1-6, в котором антитело имеет константную область тяжелой цепи IgG человека.
- 8. Стабильный жидкий фармацевтический состав по п.7, в котором константная область тяжелой цепи относится к изотипу IgG1 или изотипу IgG4.
- 9. Стабильный жидкий фармацевтический состав по п.7, в котором антитело содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20.
- 10. Стабильный жидкий фармацевтический состав по любому из пп.1-9, в котором:(a) по меньшей мере 90% нативной формы антитела восстанавливается после двух месяцев хранения при 5°C, по меньшей мере 95% нативной формы антитела восстанавливается после двух месяцев хранения при 5°C или по меньшей мере 99% нативной формы антитела восстанавливается после двух месяцев хранения при 5°C, при определении с помощью SE-UPLC;(b) по меньшей мере 95% нативной формы антитела восстанавливается после девяти месяцев хранения при -20°C, по меньшей мере 97,5% нативной формы антитела восстанавливается после девяти месяцев хранения при -20°C или по меньшей мере 99% нативной формы антитела восстанавливается после девяти месяцев хранения при -20°C, при определении с помощью SE-UPLC;(c) по меньшей мере 95% нативной формы антитела восстанавливается после девяти месяцев хранения при 2-8°C, по меньшей мере 97,5% нативной формы антитела восстанавливается после девяти месяцев хранения при 2-8°C или по меньшей мере 99% нативной формы антитела восстанавливается после девяти месяцев хранения при 2-8°C, при определении с помощью SE-UPLC;(d) состав содержит не более 2 % высокомолекулярных соединений (ВМ) после двух месяцев хранения при 5°C, не более 1% ВМ после двух месяцев хранения при 5°C или не более 0,6% ВМ после двух месяцев хранения при 5°C, при определении с помощью SE-UPLC;(e) состав содержит не более 2 % высокомолекулярных соединений после девяти месяцев хранения при -20°C, не более 1 % высокомолекулярных соединений после девяти месяцев хранения при -20°C или не более 0,5% высокомолекулярных соединений после девяти месяцев хранения при -20°C, при определении с помощью SE-UPLC; и/или (f) состав содержит не более 2% высокомолекулярных соединений после девяти месяцев хранения при 2-8°C, не более 1% высокомолекулярных соединений после девяти месяцев хранения при 2-8°C или не более 0,7% высокомолекулярных соединений после девяти месяцев хранения при 2-8°C, при определении с помощью SE-UPLC.
- 11. Стабильный жидкий фармацевтический состав по любому из пп.1-10, где состав имеет вязкость менее 15 сП.
- 12. Стабильный жидкий фармацевтический состав по любому из пп.1-11, содержащийся в:(a) стеклянном флаконе;(b) шприце;(c) шприце, содержащем плунжер с фторуглеродным покрытием;(d) шприце с низким содержанием вольфрама;(e) предварительно заполненном шприце;(f) предварительно заполненном шприце с несъемной иглой; или (g) устройстве большого объема или устройстве для инъекции болюса.
- 13. Ручка или автоинъектор, содержащий стабильный жидкий фармацевтический состав по любому из пп.1-11.
- 14. Устройство доставки по п.13, представляющее собой одноразовое устройство доставки в виде шприц-ручки или устройство доставки в виде шприц-ручки для многократного применения.
- 15. Контейнер для хранения фармацевтического состава, причем контейнер содержит стабильный жидкий фармацевтический состав по любому из пп.1-11.
- 16. Набор для хранения фармацевтического состава и предоставления инструкций по применению, где набор включает (i) контейнер, содержащий стабильный жидкий фармацевтический состав по любому из пп.1-11, и (ii) этикетку с информацией по применению фармацевтического состава.
- 17. Набор по п.16, в котором на этикетке указано подкожное введение фармацевтического состава или на этикетке указано внутривенное введение фармацевтического состава.
- 18. Стандартная лекарственная форма, содержащая стабильный жидкий фармацевтический состав по любому из пп.1-11, в которой антитело к IL-33 присутствует в количестве от 1 до 500 мг.
- 19. Стандартная лекарственная форма по п.18, в которой антитело к IL-33 присутствует в количестве 150 мг или в количестве 300 мг.-
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/821,661 | 2019-03-21 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA045976B1 true EA045976B1 (ru) | 2024-01-24 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20210230283A1 (en) | Stabilized Formulations Containing Anti-Interleukin-6 Receptor (IL-6R) Antibodies | |
| US20230346929A1 (en) | Stabilized Formulations Containing Anti-IL-33 Antibodies | |
| JP2023533963A (ja) | 抗ｃｔｌａ－４抗体を含む安定化製剤 | |
| CN115003331A (zh) | 含有抗cd20×抗cd3双特异性抗体的稳定调配物 | |
| EA045976B1 (ru) | Стабилизированные составы, содержащие антитела к il-33 | |
| WO2023215267A1 (en) | Anti-interleukin-4 receptor (il-4r) antibody formulations | |
| JP2024513835A (ja) | 抗ｍｕｃ１６×抗ｃｄ３二重特異性抗体を含有する安定化製剤 | |
| OA19780A (en) | Stabilized formulations containing antiinterleukin-6 receptor (IL-6R) antibodies. | |
| EA042167B1 (ru) | Стабилизированные композиции, содержащие антитела к рецептору интерлейкина-4 (il-4r) | |
| OA16466A (en) | Stabilized formulations containing antiinterleukin-6 receptor (IL-6R) antibodies. |