CN115003331A - 含有抗cd20×抗cd3双特异性抗体的稳定调配物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了稳定的液体药物调配物，其包含特异性结合至人类CD20和人类CD3的人类双特异性抗体。在某些实施例中，所述调配物除所述双特异性抗体之外还含有缓冲剂、表面活性剂和糖。本发明的药物调配物在应力和储存时展现出相当程度的抗体稳定性。

Description

含有抗CD20×抗CD3双特异性抗体的稳定调配物
序列表的引用
本申请以引用的方式并入以计算机可读形式的文件10664WO01-Sequence.txt提交的序列表，所述文件创建于2020年11月20日且含有25,368个字节。
技术领域
本发明涉及治疗性抗体调配物的领域。更具体来说，本发明涉及包含特异性结合至人类CD20和人类CD3的人类双特异性抗体的药物调配物的领域。
背景技术
治疗性大分子(例如抗体)必须以不仅使分子适用于施用至患者并且还维持其在储存和后续使用期间的稳定性的方式来调配。举例来说，除非适当地调配溶液，否则液体溶液中的治疗性抗体易于发生降解、聚集和/或非所需的化学修饰。液体调配物中的抗体的稳定性不仅视调配物中所使用的赋形剂的种类而定，并且还视赋形剂相对于彼此的量和比例而定。此外，当制备液体抗体调配物时，除稳定性之外，还必须考虑其它因素。此类额外因素的实例包括给定调配物可容纳的抗体浓度和调配物的视觉质量或外观。因此，当调配治疗性抗体时，必须格外谨慎以获得保持稳定、含有足够浓度的抗体且具有使得调配物能够方便地施用至患者的其它特性的调配物。
CD20是在成熟B细胞的细胞膜上表达的非糖化磷蛋白。CD3是在与T细胞受体复合物(TCR)结合的T细胞上表达的均二聚抗原或异二聚抗原，且为T细胞活化所需。
针对人类CD20和人类CD3的双特异性抗体是需要适当调配的治疗相关大分子的一个实例。此类抗体在临床上适用于例如癌症的治疗(例如，B细胞癌，如滤泡性淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、边缘区淋巴瘤或其它非霍奇金氏淋巴瘤)。
尽管抗CD20×抗CD3双特异性抗体在本领域中是已知的(参见例如WO 2014/047231)，但仍需要足够稳定且适用于施用至患者的包含抗CD20×抗CD3双特异性抗体的药物调配物。
发明内容
提供包含双特异性抗CD20×抗CD3抗体和一种或多种赋形剂的稳定液体药物调配物，以及包含此类调配物的试剂盒和剂型和其用途。
在一个方面中，本发明提供了一种稳定的液体药物调配物，其包含：(a)双特异性抗体，其包含特异性结合至人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合至人类CD3的第二抗原结合域，其中第一抗原结合域包含重链可变区(HCVR)中所含的三个重链互补决定区(CDR)(A1-HCDR1、A1-HCDR2和A1-HCDR3)和轻链可变区(LCVR)中所含的三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述重链可变区包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列，且第二抗原结合域包含重链可变区(HCVR)中所含的三个重链CDR(A2-HCDR1、A2-HCDR2和A2-HCDR3)和轻链可变区(LCVR)中所含的三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，所述重链可变区包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列；(b)包含组氨酸的缓冲液；(c)包含聚山梨醇酯的有机共溶剂；和(d)包含糖的稳定剂；其中调配物的pH为5.8±0.3。
在一个方面中，本发明提供了一种稳定的液体药物调配物，其包含：(a)双特异性抗体，其包含特异性结合至人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合至人类CD3的第二抗原结合域，其中第一抗原结合域包含重链可变区(HCVR)中所含的三个重链互补决定区(CDR)(A1-HCDR1、A1-HCDR2和A1-HCDR3)和轻链可变区(LCVR)中所含的三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，且第二抗原结合域包含重链可变区(HCVR)中所含的三个重链CDR(A2-HCDR1、A2-HCDR2和A2-HCDR3)和轻链可变区(LCVR)中所含的三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，其中A1-HCDR1、A1-HCDR2和A1-HCDR3分别包含SEQ ID NO:7、8和9的氨基酸序列，A2-HCDR1、A2-HCDR2和A2-HCDR3分别包含SEQ ID NO:10、11和12的氨基酸序列，且LCDR1、LCDR2和LCDR3分别包含SEQ ID NO:13、14和15的氨基酸序列；(b)包含组氨酸的缓冲液；(c)包含聚山梨醇酯的有机共溶剂；和(d)包含糖的稳定剂；其中调配物的pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，抗体浓度为1mg/ml±0.1mg/ml至200mg/ml±20mg/ml。在一些实施例中，抗体浓度为2mg/ml±0.2mg/ml。在一些实施例中，抗体浓度为20mg/ml±2mg/ml。在一些实施例中，抗体浓度为80mg/ml±8mg/ml。在一些实施例中，抗体浓度为100mg/ml±10mg/ml。在一些实施例中，抗体浓度为160mg/ml±16mg/ml。在一些实施例中，抗体浓度为约2mg/ml至约100mg/ml。
在一些实施例中，组氨酸缓冲液浓度为5mM±1mM至15mM±3mM。在一些情况下，组氨酸缓冲液浓度为10mM±1mM。在一些实施例中，组氨酸缓冲液包含L-组氨酸和L-组氨酸一盐酸盐一水合物。在一些情况下，L-组氨酸浓度为3.65mM±0.5mM且L-组氨酸一盐酸盐一水合物浓度为6.35mM±0.5mM。在一些情况下，组氨酸缓冲液包含0.57±0.05mg/ml的L-组氨酸和1.33±0.13mg/ml的L-组氨酸一盐酸盐一水合物。
在一些实施例中，聚山梨醇酯浓度为0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v。在一些情况下，聚山梨醇酯浓度为0.1％±0.05％w/v。在一些情况下，聚山梨醇酯浓度为0.1％±0.01％w/v。在一些实施例中，聚山梨醇酯为聚山梨醇酯80。
在一些实施例中，糖为蔗糖。在一些情况下，蔗糖浓度为5％±1％至20％±4％w/v。在某些情况下，蔗糖浓度为8％±0.5％至12％±0.5％w/v。在一些实施例中，蔗糖浓度为10％±1％w/v。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)2mg/ml±0.2mg/ml的抗体，(b)5mM±1mM至15mM±3mM组氨酸缓冲液，(c)0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v聚山梨醇酯，和(d)5％±1％至20％±4％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)2mg/ml±0.2mg/ml抗体，(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，(c)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(d)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)2mg/ml±0.2mg/ml抗体，(b)3.65mM±0.2mM L-组氨酸，(c)6.35mM±0.2mM L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(e)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)2mg/ml±0.2mg/ml抗体，(b)0.57mg/ml±0.05mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.13mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(e)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)20mg/ml±2mg/ml抗体，(b)5mM±1mM至15mM±3mM组氨酸缓冲液，(c)0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v聚山梨醇酯，和(d)5％±1％至20％±4％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)20mg/ml±2mg/ml抗体，(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，(c)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(d)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)20mg/ml±2mg/ml抗体，(b)3.65mM±0.2mML-组氨酸，(c)6.35mM±0.2mM L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(e)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)20mg/ml±2mg/ml抗体，(b)0.57mg/ml±0.05mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.13mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(e)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)80mg/ml±8mg/ml抗体，(b)5mM±1mM至15mM±3mM组氨酸缓冲液，(c)0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v聚山梨醇酯，和(d)5％±1％至20％±4％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)80mg/ml±8mg/ml抗体，(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，(c)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(d)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)80mg/ml±8mg/ml抗体，(b)3.65mM±0.2mML-组氨酸，(c)6.35mM±0.2mM L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(e)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)80mg/ml±8mg/ml抗体，(b)0.57mg/ml±0.05mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.13mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(e)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)100mg/ml±10mg/ml抗体，(b)5mM±1mM至15mM±3mM组氨酸缓冲液，(c)0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v聚山梨醇酯，和(d)5％±1％至20％±4％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)100mg/ml±10mg/ml抗体，(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，(c)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(d)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)100mg/ml±10mg/ml抗体，(b)3.65mM±0.2mM L-组氨酸，(c)6.35mM±0.2mM L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(e)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)100mg/ml±10mg/ml抗体，(b)0.57mg/ml±0.05mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.13mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(e)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)160mg/ml±16mg/ml抗体，(b)5mM±1mM至15mM±3mM组氨酸缓冲液，(c)0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v聚山梨醇酯，和(d)5％±1％至20％±4％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)160mg/ml±16mg/ml抗体，(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，(c)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(d)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)160mg/ml±16mg/ml抗体，(b)3.65mM±0.2mM L-组氨酸，(c)6.35mM±0.2mM L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(e)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在一些实施例中，药物组合物包含：(a)160mg/ml±16mg/ml抗体，(b)0.57mg/ml±0.05mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.13mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯，和(e)10％±1％w/v蔗糖，pH为5.8±0.3。
在这些实施例中的任一者中，聚山梨醇酯可为聚山梨醇酯80。
在上文或本文所论述的药物组合物的各种实施例中，如通过尺寸排阻-超高效液相色谱(SE-UPLC)测定，在45℃下储存1个月后，至少90％的抗体具有原生构象。在一些情况下，如通过SE-UPLC测定，在45℃下储存1个月后，至少93％的抗体具有原生构象。在一些情况下，如通过SE-UPLC测定，在45℃下储存1个月后，至少95％的抗体具有原生构象。
在上文或本文所论述的药物组合物的各种实施例中，如通过SE-UPLC测定，在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，至少95％的抗体具有原生构象。在一些情况下，如通过SE-UPLC测定，在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，至少97％的抗体具有原生构象。
在上文或本文所论述的药物组合物的各种实施例中，如通过SE-UPLC测定，在5℃下储存3个月后，至少95％的抗体具有原生构象。在一些情况下，如通过SE-UPLC测定，在5℃下储存3个月后，至少98％的抗体具有原生构象。
在上文或本文所论述的药物组合物的各种实施例中，如通过SE-UPLC测定，在45℃下储存1个月后，调配物含有不超过6％的高分子量(HMW)物种。在一些情况下，如通过SE-UPLC测定，在45℃下储存1个月后，调配物含有不超过5.6％的HMW物种。
在上文或本文所论述的药物组合物的各种实施例中，如通过SE-UPLC测定，在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，调配物含有不超过2％的HMW物种。在一些情况下，如通过SE-UPLC测定，在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，调配物含有不超过1％的HMW物种。
在上文或本文所论述的药物组合物的各种实施例中，如通过SE-UPLC测定，在5℃下储存3个月后，调配物含有不超过1.5％的HMW物种。在一些情况下，如通过SE-UPLC测定，在5℃下储存9个月后，调配物含有不超过1％的HMW物种。
在上文或本文所论述的任何药物组合物的各种实施例中，抗体包含分别包含SEQID NO:7、8和9的氨基酸序列的A1-HCDR1、A1-HCDR2和A1-HCDR3；分别包含SEQ ID NO:10、11和12的氨基酸序列的A2-HCDR1、A2-HCDR2和A2-HCDR3；和分别包含SEQ ID NO:13、14和15的氨基酸序列的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
在一些实施例中，第一抗原结合域包含与SEQ ID NO:4的氨基酸序列具有至少90％一致性的HCVR和与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少90％一致性的LCVR，且第二抗原结合域包含与SEQ ID NO:5的氨基酸序列具有至少90％一致性的HCVR和与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少90％一致性的LCVR。在一些实施例中，第一抗原结合域包含与SEQID NO:4的氨基酸序列具有至少95％一致性的HCVR和与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少95％一致性的LCVR，且第二抗原结合域包含与SEQ ID NO:5的氨基酸序列具有至少95％一致性的HCVR和与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少95％一致性的LCVR。在一些实施例中，第一抗原结合域包含与SEQ ID NO:4的氨基酸序列具有至少99％一致性的HCVR和与SEQID NO:6的氨基酸序列具有至少99％一致性的LCVR，且第二抗原结合域包含与SEQ ID NO:5的氨基酸序列具有至少99％一致性的HCVR和与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少99％一致性的LCVR。
在上文或本文所论述的任何药物组合物的各种实施例中，第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR。
在一些实施例中，抗体包含分别附接至第一抗原结合域和第二抗原结合域中的每一个的HCVR的人类IgG重链恒定区。在一些实施例中，重链恒定区是同型IgG1。在一些实施例中，重链恒定区是同型IgG4。在一些实施例中，附接至第一抗原结合域的HCVR的重链恒定区或附接至第二抗原结合域的HCVR的重链恒定区(但两者并非同时)含有相对于未经修饰的相同同型的重链减少蛋白A结合的氨基酸修饰。在一些情况下，修饰在同型IgG1或IgG4的重链中包含H435R取代(EU编号)。在一些情况下，修饰在同型IgG1或IgG4的重链中包含H435R取代和Y436F取代(EU编号)。
在一些实施例中，抗体包含嵌合铰链。举例来说，在一实施例中，嵌合铰链包含衍生自人类IgG1铰链区或人类IgG4铰链区的第一氨基酸序列或“上铰链”序列和衍生自人类IgG2铰链区的第二氨基酸序列或“下铰链”序列。在某些实施例中，根据EU编号，第一或“上铰链”序列包含来自216至227位的氨基酸残基。在一些实施例中，根据EU编号，第二或“下铰链”序列包含来自228至236位的氨基酸残基。在抗体重链恒定区是同型IgG4的某些情况下，嵌合铰链包含来自人类IgG4的上铰链序列(根据EU编号，216至227位)和来自人类IgG2的下铰链序列(根据EU编号，228至236位)。在抗体重链恒定区是同型IgG1的某些情况下，嵌合铰链包含来自人类IgG1的上铰链序列(根据EU编号，216至227位)和来自人类IgG2的下铰链序列(根据EU编号，228至236位)。在重链恒定区是同型IgG1且抗体包含嵌合铰链的一些实施例中，另外的IgG1重链恒定区的CH2域是同型IgG4。除非另外指明，否则提及的IgG1或IgG4重链恒定区包括包含嵌合铰链(例如，分别为IgG1或IgG4上铰链序列和IgG2下铰链序列)的重链恒定区。例如，提及的IgG1重链恒定区包括包含IgG2下铰链序列的IgG1重链恒定区，且提及的IgG4重链恒定区包括包含IgG2下铰链序列的IgG4重链恒定区。
在一些实施例中，双特异性抗体包含重链恒定区，所述重链恒定区包含选自由SEQID NO:16、17、18和19组成的组的氨基酸序列。在一些实施例中，双特异性抗体包含：包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列的重链恒定区和包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列的重链恒定区。在一些实施例中，双特异性抗体包含：包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列的重链恒定区和包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列的重链恒定区。
在上文或本文所论述的任何药物组合物的各种实施例中，抗体包含含有第一抗原结合域的HCVR的第一重链和含有第二抗原结合域的HCVR的第二重链，其中第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的残基1-452，且第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的残基1-448。在一些实施例中，抗体进一步包含含有第一和第二抗原结合域的LCVR的共同轻链，其中所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列。
在上文或本文所论述的任何药物组合物的各种实施例中，抗体包含含有第一抗原结合域的HCVR的第一重链和含有第二抗原结合域的HCVR的第二重链，其中第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，且第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列。在一些实施例中，抗体进一步包含含有第一和第二抗原结合域的LCVR的共同轻链，其中所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列。
在一个方面中，本发明提供了一种药物调配物，其包含：(a)2mg/ml±0.2mg/ml的双特异性抗体，所述双特异性抗体包含特异性结合至人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合至人类CD3的第二抗原结合域，其中第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且第二抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，pH为5.8±0.2；(c)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80；和(d)10％±1％w/v蔗糖。
在一些实施例中，药物调配物由以下组成：(a)2mg/ml±0.2mg/ml的抗体，(b)3.65mM±0.2mM L-组氨酸，(c)6.35mM±0.2mM L-组氨酸一盐酸盐一水合物，和(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80，在pH为5.8±0.2的水中。在一些实施例中，药物调配物由以下组成：(a)2mg/ml±0.2mg/ml的抗体，(b)0.57mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)1mg/ml±0.1mg/ml聚山梨醇酯80，和(e)100mg/ml±10mg/ml蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。
在一个方面中，本发明提供了一种药物调配物，其包含：(a)20mg/ml±2mg/ml的双特异性抗体，所述双特异性抗体包含特异性结合至人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合至人类CD3的第二抗原结合域，其中第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且第二抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，pH为5.8±0.2；(c)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80；和(d)10％±1％w/v蔗糖。
在一些实施例中，药物调配物由以下组成：(a)20mg/ml±2mg/ml的抗体，(b)3.65mM±0.2mM L-组氨酸，(c)6.35mM±0.2mM L-组氨酸一盐酸盐一水合物，和(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80，在pH为5.8±0.2的水中。在一些实施例中，药物调配物由以下组成：(a)20mg/ml±2mg/ml的抗体，(b)0.57mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)1mg/ml±0.1mg/ml聚山梨醇酯80，和(e)100mg/ml±10mg/ml蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。
在一个方面中，本发明提供了一种药物调配物，其包含：(a)80mg/ml±8mg/ml的双特异性抗体，所述双特异性抗体包含特异性结合至人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合至人类CD3的第二抗原结合域，其中第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且第二抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，pH为5.8±0.2；(c)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80；和(d)10％±1％w/v蔗糖。
在一些实施例中，药物调配物由以下组成：(a)80mg/ml±8mg/ml的抗体，(b)3.65mM±0.2mM L-组氨酸，(c)6.35mM±0.2mM L-组氨酸一盐酸盐一水合物，和(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80，在pH为5.8±0.2的水中。在一些实施例中，药物调配物包括：(a)80mg/ml±8mg/ml的抗体，(b)0.57mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.1mg/mlL-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)1mg/ml±0.1mg/ml聚山梨醇酯80，和(e)100mg/ml±10mg/ml蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。
在一个方面中，本发明提供了一种药物调配物，其包含：(a)100mg/ml±10mg/ml的双特异性抗体，所述双特异性抗体包含特异性结合至人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合至人类CD3的第二抗原结合域，其中第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且第二抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，pH为5.8±0.2；(c)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80；和(d)10％±1％w/v蔗糖。
在一些实施例中，药物调配物由以下组成：(a)100mg/ml±10mg/ml的抗体，(b)3.65mM±0.2mM L-组氨酸，(c)6.35mM±0.2mM L-组氨酸一盐酸盐一水合物，和(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80，在pH为5.8±0.2的水中。在一些实施例中，药物调配物由以下组成：(a)100mg/ml±10mg/ml的抗体，(b)0.57mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)1mg/ml±0.1mg/ml聚山梨醇酯80，和(e)100mg/ml±10mg/ml蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。
在一些实施例中，药物调配物包含：(a)1至200mg/ml的抗体(如上文或本文所论述)；(b)包含乙酸盐或磷酸盐的缓冲液；(c)包含聚山梨醇酯的有机共溶剂；和(d)包含糖的稳定剂；其中调配物的pH为5.8±0.3。在一些实施例中，药物调配物包含：(a)1至200mg/ml的抗体(例如2mg/ml、20mg/ml、80mg/ml或100mg/ml)，(b)1-50mM乙酸盐或磷酸盐缓冲液，和(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80，在pH为5.8±0.2的水中。
在一个方面中，本发明提供了一种药物组合物，其中所述组合物包含如上文或本文所论述的药物调配物，且所述组合物容纳于容器中。在一些实施例中，容器为小瓶。在一些情况下，小瓶为2ml、5ml、10ml或20ml的1型透明玻璃小瓶。在一些实施例中，容器为注射器。在一些情况下，注射器为低钨玻璃。在一些实施例中，容器为预填充注射器。在一些实施例中，组合物容纳于自动注射器中。
在一个方面中，本发明提供了一种试剂盒，其包含(i)含有包含如上文或本文所论述的药物调配物的组合物的容器，和使用所述组合物的说明书。在一些实施例中，容器为玻璃小瓶。在一些实施例中，容器为预填充注射器。在一些实施例中，容器为自动注射器。在一些情况下，说明书叙述组合物的皮下施用。在一些情况下，说明书叙述组合物的静脉内施用。
在一个实施例中，本发明提供了一种容器，任选地其中所述容器为玻璃小瓶，其含有处于稳定调配物中的2mg的抗体，其中调配物包含(a)2mg/ml±0.2mg/ml的抗体，(b)0.57mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)1mg/ml±0.1mg/ml聚山梨醇酯80，和(e)100mg/ml±10mg/ml蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。在一个实施例中，本发明提供了一种容器，任选地其中所述容器为玻璃小瓶，其含有处于稳定调配物中的20mg、80mg或160mg的抗体，其中调配物包含(a)20mg/ml±2mg/ml抗体，(b)0.57mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)1mg/ml±0.1mg/ml聚山梨醇酯80，和(e)100mg/ml±10mg/ml蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。在一个实施例中，本发明提供了一种容器，任选地其中所述容器为玻璃小瓶，其含有处于稳定调配物中的100mg、200mg或400mg抗体，其中调配物包含(a)100mg/ml±10mg/ml抗体，(b)0.57mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)1mg/ml±0.1mg/ml聚山梨醇酯80，和(e)100mg/ml±10mg/ml蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。
在一个方面中，本发明提供了包含如上文或本文所论述的药物调配物的单位剂型，其中抗体以0.1mg至500mg的量存在。在一些情况下，抗体以2至2.5mg的量存在。在一些情况下，抗体以10至11mg的量存在。在一些情况下，抗体以20至25mg的量存在。在一些情况下，抗体以80至90mg的量存在。在一些情况下，抗体以100至125mg的量存在。在一些情况下，抗体以160至180mg的量存在。在一些情况下，抗体以190至210mg的量存在。在一些情况下，抗体以320至360mg的量存在。在一些实施例中，单位剂型为玻璃小瓶。在一些实施例中，单位剂型为预填充注射器。在一些实施例中，单位剂型为自动注射器。
在上文或本文所论述的药物组合物、试剂盒或单位剂型中的任一者中，含有药物调配物的容器可包含顶隙，所述顶隙包含气体，其中所述气体包含小于5体积％的氧气。在一些情况下，气体包含小于1体积％的氧气。在一些情况下，气体包含不超过0.1体积％的氧气。
在一个方面中，本发明提供含有药物组合物的容器，其中所述组合物包含如上文或本文中所论述的药物调配物。在一些情况下，容器为注射器。在一些情况下，容器为预填充注射器。在一些情况下，容器为自动注射器。在一些情况下，容器为玻璃小瓶。
在各种实施例中，上文或本文所论述的实施例的特征或组分中的任一者可组合，且此类组合涵盖于本公开案的范围内。上文或本文所论述的任何具体值可与上文或本文所论述的另一相关值组合以叙述范围，其中所述值表示所述范围的上端和下端，且此类范围和属于此类范围内的所有值涵盖于本公开案的范围内。上文或本文所论述的值中的每一者可表示为具有1％、5％、10％或20％的变化。举例来说，10mM浓度可表示为10mM±0.1mM(1％变化)、10mM±0.5mM(5％变化)、10mM±1mM(10％变化)或10mM±2mM(20％变化)。
其它实施例将由随后具体实施方式的综述变得显而易见。
具体实施方式
在描述本发明之前，应理解本发明不限于所描述的特定方法和实验条件，因而方法和条件可改变。还应理解，本文所使用的术语仅出于描述特定实施例的目的而并不意图为限制性的，因为本发明的范围将仅由随附权利要求书限制。
除非另外规定，否则本文所使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解相同的含义。如本文所使用，当关于特定叙述数值或值范围使用时，术语“约”意指值可与叙述值相差不超过1％。举例来说，如本文所使用，表述“约100”包括99和101和其间的所有值(例如99.1、99.2、99.3、99.4等)。
尽管类似或等效于本文所描述的方法和材料的任何方法和材料可以用于本发明的实践或测试中，但现描述示例性方法和材料。本说明书中所提及的所有专利、申请和非专利出版物均以全文引用的方式并入本文中。
药物调配物
如本文所使用，表述“药物调配物”意指至少一种活性成分(例如双特异性抗CD20×抗CD3抗体，其能够在人类或非人类动物中发挥生物作用)与至少一种非活性成分的组合，所述非活性成分在与活性成分和/或一种或多种额外非活性成分组合时适用于治疗性施用至人类或非人类动物。除非另外具体指示，否则如本文所使用的术语“调配物”意指“药物调配物”。本发明提供包含至少一种治疗性多肽的药物调配物。根据本发明的某些实施例，治疗性多肽为特异性结合至人类CD20和人类CD3的双特异性抗体或其抗原结合片段。更具体来说，本发明包括药物调配物，其包含：(i)特异性结合至人类CD20和人类CD3的人类双特异性抗体；(ii)包含组氨酸的缓冲液；(iii)包含聚山梨醇酯的有机共溶剂；和(iv)包含糖的稳定剂。如果额外组分不会显著地干扰调配物的稳定性，则所述组分可包括于本发明的调配物中。下文详细描述本发明内所包括的具体示例性组分和调配物。
在某些实施例中，本发明的药物调配物为流体调配物。如本文所使用，表述“流体调配物”意指在约2℃至约45℃下主要以流体状态存在的至少两种组分的混合物。流体调配物尤其包括液体调配物。流体调配物可视其特定成分而具有低粘度、中等粘度或高粘度。
特异性结合至人类CD20和人类CD3的双特异性抗体
本发明的药物调配物可包含特异性结合至人类CD20和人类CD3抗体的人类双特异性抗体或其抗原结合片段。
如本文所使用，包括“双特异性抗体”的术语“抗体”通常意图指包含通过二硫键互连的四个多肽链(两个重(H)链和两个轻(L)链)的免疫球蛋白分子以及其多聚体(例如IgM)；然而，在术语“抗体”的定义内还涵盖仅由重链组成(即缺乏轻链)的免疫球蛋白分子。各重链包含重链可变区(在本文中缩写为HCVR或VH)和重链恒定区。重链恒定区包含CH1、CH2和CH3三个域。各轻链包含轻链可变区(在本文中缩写为LCVR或VL)和轻链恒定区。轻链恒定区包含一个域(CL1)。VH和VL区可以进一步细分成高变区，所述高变区称为互补决定区(CDR)，穿插有称为构架区(FR)的更保守区。各VH和VL由自氨基端至羧基端按以下顺序排列的三个CDR和四个FR构成：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。
在本发明的某些实施例中，本发明的抗CD20×抗CD3双特异性抗体为人类抗体。如本文所使用，术语“人类抗体”意图包括具有衍生自人类生殖系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区的抗体。本发明的人类抗体可包括例如CDR且确切地说CDR3中的不由人类生殖系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如通过体外无规或位点特异性诱变或通过体内体细胞突变引入的突变)。然而，如本文所使用，术语“人类抗体”并不意图包括其中衍生自如小鼠的另一哺乳动物物种的生殖系的CDR序列已移植至人类构架序列上的抗体。在各种实施例中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体为人类IgG抗体。在各种实施例中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体为同型IgG1、IgG2、IgG3或IgG4或混合同型的人类抗体。在一些实施例中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体为人类IgG1抗体(即，所述抗体包含分别附接至第一抗原结合域和第二抗原结合域中的每一个的HCVR的人类IgG1重链恒定区)。在一些实施例中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体为人类IgG4抗体(即，所述抗体包含分别附接至第一抗原结合域和第二抗原结合域中的每一个的HCVR的人类IgG4重链恒定区)。在上文或本文所论述的实施例中的任一个中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体可包含人类κ轻链。在上文或本文所论述的实施例中的任一个中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体可包含人类λ轻链。
在任何实施例中，双特异性抗体可在一条或两条重链中包括修饰以促进自均二聚杂质中纯化双特异性抗体(即，异二聚体)。在一些实施例中，双特异性抗体包括相同的第一和第二重链(即，抗CD20结合臂的重链和抗CD3结合臂的重链)(例如，同型IgG1或IgG4两者)，但一条或另一条重链的CH3域中存在与缺乏修饰的抗体相比，降低了双特异性抗体与蛋白A的结合的修饰。在一些情况下，第一重链的CH3域(例如，抗CD20结合臂的CH3域)结合蛋白A，且第二重链的CH3域(例如，抗CD3结合臂的CH3域)含有减少或消除蛋白A结合的突变。在一些情况下，突变是H435R修饰(根据EU编号；根据IMGT外显子编号的H95R)。在一些情况下，突变是H435R修饰(根据EU编号；根据IMGT外显子编号的H95R)和Y436F修饰(根据EU编号；根据IMGT编号的Y96F)。可发现于第二CH3域内的其它修饰包括：在IgG1 CH3域的情况下，根据EU的D356E、L358M、N384S、K392N、V397M和V422I(根据IMGT的D16E、L18M、N44S、K52N、V57M和V82I)；和在IgG4 CH3域的情况下，根据EU的Q355R、N384S、K392N、V397M、R409K、E419Q和V422I(根据IMGT的Q15R、N44S、K52N、V57M、R69K、E79Q和V82I)。
在任何实施例中，双特异性抗体可包括嵌合铰链。术语“嵌合铰链”意图包括嵌合蛋白，所述嵌合蛋白包含衍生自一个Ig分子的铰链区的第一氨基酸序列和衍生自Ig分子的不同类别或子类的铰链区的第二氨基酸序列。举例来说，在一实施例中，嵌合铰链包含衍生自人类IgG1铰链区或人类IgG4铰链区的第一氨基酸序列或“上铰链”序列和衍生自人类IgG2铰链区的第二氨基酸序列或“下铰链”序列。在某些实施例中，根据EU编号，第一或“上铰链”序列包含来自216至227位的氨基酸残基。在一些实施例中，根据EU编号，第二或“下铰链”序列包含来自228至236位的氨基酸残基。
在一些实施例中，本发明的抗体为重组人类抗体。如本文所使用，术语“重组人类抗体”意图包括通过重组方式制备、表现、产生或分离的所有人类抗体，如使用转染至宿主细胞中的重组表现载体表现的抗体、自重组组合性人类抗体库分离的抗体、自转殖有人类免疫球蛋白基因的动物(例如小鼠)分离的抗体(参见例如Taylor等人(1992)《核酸研究(Nucl.Acids Res.》20:6287-6295)或通过涉及将人类免疫球蛋白基因序列剪接至其它DNA序列的任何其它方式制备、表现、产生或分离的抗体。此类重组人类抗体具有衍生自人类生殖系免疫球蛋白序列的可变和恒定区。然而，在某些实施例中，此类重组人类抗体经历体外诱变(或当使用转殖有人类Ig序列的动物时，经历体内体细胞诱变)，且因此重组抗体的VH和VL区的氨基酸序列虽然衍生自人类生殖系VH和VL序列且与其相关，但可能并非天然存在于体内人类抗体生殖系组库内的序列。
如本文所使用，术语抗体的“抗原结合部分”或“抗原结合片段”(或简单地说“抗体部分”或“抗体片段”)是指保持特异性结合至人类CD20或人类CD3的能力的抗体的一个或多个片段。
如本文所使用，“经分离的抗体”意图指基本上不含具有不同抗原特异性的其它抗体的抗体(例如特异性结合人类CD20和人类CD3的经分离的双特异性抗体基本上不含特异性结合除人类CD20和人类CD3之外的抗原的抗体)。
术语“特异性结合”或其类似术语意指抗体或其抗原结合片段与在生理条件下相对稳定的抗原形成复合物。特异性结合的特征可以在于解离常数为至少约1×10-6M或更大。用于判定两个分子是否特异性结合的方法为本领域中熟知的，且包括例如平衡透析、表面等离子共振和其类似方法。然而，特异性结合人类CD20和人类CD3的经分离的抗体可与如来自其它物种(异种同源物)的CD20或CD3分子的其它抗原具有交叉反应性。在本发明的情形下，认为结合至人类CD20和人类CD3的多特异性(例如双特异性)抗体以及一个或多个额外抗原“特异性结合”人类CD20和人类CD3。此外，经分离的抗体可基本上不含其它细胞物质和/或化学物质。
可包括于本发明的药物调配物中的示例性抗CD20×抗CD3双特异性抗体阐述于WO2014/047231中，其公开内容以全文引用的方式并入。
根据本发明的某些实施例，抗CD20×抗CD3双特异性抗体或其抗原结合片段包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，其中第一抗原结合域分别包含重链互补决定区(CDR)A1-HCDR1、A1-HCDR2和A1-HCDR3，其包含SEQID NO:7、8和9的氨基酸序列，且第二抗原结合域分别包含重链CDR A2-HCDR1、A2-HCDR2和A2-HCDR3，其包含SEQ ID NO:10、11和12的氨基酸序列。根据本发明的某些实施例，抗CD20×抗CD3双特异性抗体或其抗原结合片段包含共同(对于第一和第二抗原结合域而言)轻链互补决定区LCDR1-LCDR2-LCDR3，其分别包含SEQ ID NO:13、14和15的氨基酸序列。
在某些实施例中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体或其抗原结合片段包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，其中第一抗原结合域包含包括SEQ ID NO:4的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)，且第二抗原结合域包含包括SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR。在某些实施例中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体或其抗原结合片段包含包括SEQ ID NO:6的氨基酸序列的共同轻链可变区(LCVR)。在某些实施例中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体或其抗原结合片段包含第一抗原结合域和第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，所述HCVR/LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:4/6的氨基酸序列，且所述第二抗原结合域包含HCVR/LCVR氨基酸序列对，所述HCVR/LCVR氨基酸序列对包含SEQ ID NO:5/6的氨基酸序列。在一些实施例中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体包含上述HCVR/LCVR序列对和人类IgG1重链恒定区。在一些实施例中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体包含上述HCVR/LCVR序列对和人类IgG4重链恒定区。在一些实施例中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体包含上述HCVR/LCVR序列对和人类IgG重链恒定区。在一些实施例中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体包含上述HCVR/LCVR序列对和人类IgG1或IgG4重链恒定区。在一些实施例中，抗CD20×抗CD3双特异性抗体包含：包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的第一重链、包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的第二重链，和包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的共同轻链。具有第一抗原结合域和第二抗原结合域的示例性抗CD20×抗CD3双特异性抗体在本文中称为REGN1979，所述第一抗原结合域特异性结合人类CD20且包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且所述第二抗原结合域特异性结合人类CD3且包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQID NO:6的氨基酸序列的LCVR。在一些实施例中，双特异性抗体具有包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的第一重链(包括特异性结合人类CD20的HCVR)、包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的第二重链(包括特异性结合人类CD3的HCVR)和包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的共同轻链。在一些情况下，抗体的成熟形式可能不包括SEQ ID NO:1和2的C端赖氨酸残基。因此，在一些情况下，抗体的抗CD20结合臂包含包括SEQ ID NO:1的残基1-452的重链，且抗体的抗CD3结合臂包含包括SEQ ID NO:2的残基1-448的重链。
本发明的药物调配物内所含有的抗体或其抗原结合片段的量可视调配物所期望的具体特性以及意图使用调配物的特定情况和目的而变化。在某些实施例中，药物调配物可含有约0.1mg/mL至约500mg/mL的抗体；约0.5mg/mL至约400mg/mL的抗体；约1mg/mL至约200mg/mL的抗体；约2mg/mL至约100mg/mL；约1mg/mL至约5mg/mL的抗体；约10mg/mL至约30mg/mL的抗体；约75mg/mL至约125mg/mL；约5mg/mL至约50mg/mL；或约2mg/mL至约160mg/mL的抗体。举例来说，本发明的调配物可为液体调配物，其包含约0.5mg/mL；约1mg/mL；约2mg/mL；约3mg/mL；约4mg/mL；约5mg/mL；约6mg/mL；约7mg/mL；约8mg/mL；约9mg/mL；约10mg/mL；约11mg/mL；约12mg/mL；约13mg/mL；约14mg/mL；约15mg/mL；约16mg/mL；约17mg/mL；约18mg/mL；约19mg/mL；约20mg/mL；约21mg/mL；约22mg/mL；约23mg/mL；约24mg/mL；约25mg/mL；约26mg/mL；约27mg/mL；约28mg/mL；约29mg/mL；约30mg/mL；约35mg/mL；约40mg/mL；约45mg/mL；约50mg/mL；约55mg/mL；约60mg/mL；约65mg/mL；约70mg/mL；约75mg/mL；约80mg/mL；约85mg/mL；约90mg/mL；约95mg/mL；约96mg/mL；约97mg/mL；约98mg/mL；约99mg/mL；约100mg/mL；约101mg/mL；约102mg/mL；约103mg/mL；约104mg/mL；约105mg/mL；约110mg/mL；约115mg/mL；约120mg/mL；约125mg/mL；约130mg/mL；约135mg/mL；约140mg/mL；约145mg/mL；约150mg/mL；约155mg/mL；约160mg/mL；约165mg/mL；约170mg/mL；约175mg/mL；约180mg/mL；约185mg/mL；约190mg/mL；约195mg/mL；或约200mg/mL的特异性结合至人类CD20和人类CD3的抗体或其抗原结合片段。在某些实施例中，药物调配物为液体调配物，其可含有1±0.1mg/mL至200±20mg/mL的抗体；2±0.2mg/mL至100±10mg/mL的抗体；1±0.5mg/mL至30±5mg/mL的抗体；10±1mg/mL至30±3mg/mL的抗体；1±0.1mg/mL至3±0.3mg/mL的抗体；15±1.5mg/mL至25±2.5mg/mL的抗体；90±5mg/mL至110±5mg/mL的抗体；或150±7.5mg/mL至170±7.5mg/mL的抗体。在一些实施例中，药物调配物含有2±0.2mg/mL的抗体。在一些实施例中，药物调配物含有20±2mg/mL的抗体。在一些实施例中，药物调配物含有80±8mg/ml的抗体。在一些实施例中，药物调配物含有100±10mg/ml的抗体。
生物等效物
本发明涵盖具有与本文所公开的示例性分子的氨基酸序列不同的氨基酸序列但保留结合人类CD20和人类CD3的能力的抗体。当相比于亲本序列时，此类变异分子可包含氨基酸的一个或多个添加、缺失或取代，但仍展现与本文所论述的抗体的生物活性基本上等效的生物活性。
本发明包括与本文所阐述的示例性抗体中的任一者生物等效的抗原结合分子。举例来说，如果两种抗体为当在类似实验条件下以相同莫耳剂量(单次剂量或多次剂量)施用时，吸收速率和吸收程度未显示显著差异的医药等效物或医药替代物，则将其视为生物等效的。如果一些抗体在其吸收程度方面等效但在其吸收速率方面并不等效，则将其视为等效物或医药替代物，且仍可将其视为生物等效的，这是因为此类吸收速率方面的差异为既定的且反映在标签中，对于在例如长期使用时达到有效体内药物浓度并非必需的，且对于所研究的特定药品在医疗上无关紧要。
在一个实施例中，如果两种抗体的安全性、纯度和效力不存在临床上有意义的差异，则所述两种抗体是生物等效的。
在一个实施例中，如果患者可以在参考产品与生物学产品之间转换一或多次且相比于不具有所述转换的持续疗法，预期副作用风险没有增加，则两种抗体为生物等效的，所述副作用包括临床上显著的免疫原性变化或经减弱的有效性。
生物等效性可通过体内和体外方法证明。生物等效性测量包括例如(a)人类或其它哺乳动物中的体内测试，其中测量血液、血浆、血清或其它生物流体中的抗体或其代谢物随时间变化的浓度；(b)与人类体内生物可用性资料相关且合理地预测人类体内生物可用性资料的体外测试；(c)人类或其它哺乳动物中的体内测试，其中测量抗体(或其目标)随时间变化的适当急性药理学作用；和(d)建立抗原结合蛋白的安全性、功效或生物可用性或生物等效性的良好受控的临床试验。
调配物赋形剂和pH
本发明的药物调配物包含一种或多种赋形剂。如本文所使用，术语“赋形剂”意指添加至调配物中以提供期望稠度、粘度或稳定作用的任何非治疗剂。
在某些实施例中，本发明的药物配药物调配物具有小于15cP的粘度，这有利于从预填充注射器或自动注射器递送组合物。在一些情况下，当使用毛细管粘度计测量时(例如，如实例3中所论述)，药物调配物在20℃下的粘度为小于14cP、小于13cP、小于12cP、小于11cP、小于10cP、小于9cP、小于8cP、小于7cP、小于6cP、小于5cP、小于4cP、小于3cP、小于2cP或小于1.5cP。在一些实施例中，当使用毛细管粘度计测量时(例如，如实例3中所论述)，药物调配物在20℃下在至多150mg/ml的抗体浓度下的粘度为小于15cP。在一些实施例中，当使用毛细管粘度计测量时(例如，如实例3中所论述)，药物调配物在20℃下在至多100mg/ml的抗体浓度下的粘度为小于5cP。在一些实施例中，当使用毛细管粘度计测量时(例如，如实例3中所论述)，药物调配物在20℃下在至多20mg/ml的抗体浓度下的粘度为小于2cP。
在某些实施例中，本发明的药物调配物包含一种或多种碳水化合物，例如一种或多种糖。糖可以是还原糖或非还原糖。“还原糖”包括例如具有酮基或醛基且含有允许糖充当还原剂的反应性半缩醛基的糖。还原糖的具体实例包括果糖、葡萄糖、甘油醛、乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、木糖、核糖、鼠李糖、半乳糖和麦芽糖。非还原糖可包含变旋异构碳，所述变旋异构碳为缩醛且基本上不与氨基酸或多肽发生起始梅纳反应(Maillard reaction)的反应。非还原糖的具体实例包括蔗糖、海藻糖、山梨糖、蔗糖素、松三糖和棉子糖。糖酸包括例如葡萄糖二酸、葡萄糖酸盐和其它多羟基糖和其盐。在一些实施例中，糖为蔗糖。在一些情况下，糖(例如蔗糖)充当抗CD20×抗CD3双特异性抗体的热稳定剂。
本发明的药物调配物内所含有的糖(例如蔗糖)的量视使用调配物的具体情况和预期目的而变化。在某些实施例中，调配物可含有约0.1％至约20％糖；约0.5％至约20％糖；约1％至约20％糖；约2％至约15％糖；约5％至约15％糖；约7.5％至约12.5％糖；或约9％至约11％糖。举例来说，本发明的药物调配物可包含约0.5％、约1.0％、约1.5％、约2.0％、约2.5％、约3.0％、约3.5％、约4.0％、约4.5％、约5.0％、约5.5％、约6.0％、约6.5％、约7.0％、约7.5％、约8.0％、约8.5％、约9.0％、约9.5％、约10.0％、约10.5％、约11.0％、约11.5％、约12.0％、约12.5％、约13.0％、约13.5％、约14.0％、约14.5％、约15％或约20％糖(例如蔗糖)。在一些实施例中，调配物含有约10％糖(例如蔗糖)。上述百分比中的每一者对应于重量/体积百分比(w/v)。在一些情况下，调配物含有5％±1％至20％±4％w/v蔗糖。在一些情况下，调配物含有8％±0.5％至12％±0.5％w/v蔗糖。在一些情况下，调配物含有10％±1％w/v蔗糖。
本发明的药物调配物还可包含一种或多种有机共溶剂(或界面稳定剂)，其类型和量应在如回转式振荡的粗糙处置或搅动条件下使抗CD20×抗CD3双特异性抗体稳定。在一些实施例中，有机共溶剂为表面活性剂。如本文所使用，术语“表面活性剂”意指降低物质所溶解的流体的表面张力和/或降低油与水之间的界面张力的物质。表面活性剂可以是离子或非离子的。可包括于本发明的调配物中的示例性非离子表面活性剂包括例如烷基聚(环氧乙烷)、烷基多葡糖苷(例如辛基葡糖苷和癸基麦芽糖苷)、如鲸蜡醇和油醇的脂肪醇、椰油酰胺MEA、椰油酰胺DEA和椰油酰胺TEA。可包括于本发明的调配物中的具体非离子表面活性剂包括例如聚山梨醇酯，如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯28、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯65、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯81和聚山梨醇酯85；泊洛沙姆(poloxamer)，如泊洛沙姆188(也称为Pluronic F68)、泊洛沙姆407；聚乙烯-聚丙二醇；或聚乙二醇(PEG)。聚山梨醇酯20也称为TWEEN 20、脱水山梨糖醇单月桂酸酯和聚氧乙烯脱水山梨糖醇单月桂酸酯。在一些实施例中，表面活性剂为聚山梨醇酯80。
本发明的药物调配物内所含有的表面活性剂的量可视调配物所期望的具体特性以及意图使用调配物的特定情况和目的而变化。在某些实施例中，调配物可含有约0.01％至约1％表面活性剂；约0.01％至约0.5％表面活性剂；约0.05％至约0.15％；约0.08％至约0.12％；或约0.09％至约0.11％表面活性剂。举例来说，本发明的调配物可包含约0.01％；约0.02％；约0.03％；约0.04％；约0.05％；约0.06％；约0.07％；约0.08％；约0.09％；约0.10％；约0.11％；约0.12％；约0.13％；约0.14％；约0.15％；约0.16％；约0.17％；约0.18％；约0.19％；约0.20％；约0.21％；约0.22％；约0.23％；约0.24％；约0.25％；约0.26％；约0.27％；约0.28％；约0.29％；或约0.30％表面活性剂(例如聚山梨醇酯80)。在一些实施例中，调配物含有约0.1％表面活性剂(例如聚山梨醇酯80)。上述百分比中的每一者对应于重量/体积百分比(w/v)。在一些情况下，调配物含有0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v聚山梨醇酯80。在一些情况下，调配物含有0.1％±0.05％w/v聚山梨醇酯80。在一些情况下，调配物含有0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80。
本发明的药物调配物还可包含用于维持稳定pH且用于帮助稳定抗CD20×抗CD3双特异性抗体的缓冲液或缓冲液系统。在一些实施例中，缓冲液或缓冲液系统包含缓冲范围完全或部分覆盖pH 5.5至6.1的范围的至少一种缓冲液。在某些实施例中，缓冲液包含组氨酸缓冲液。在某些实施例中，缓冲液(例如组氨酸)以约1mM至约40mM、约1mM至约30mM、约1mM至约20mM；约3mM至约18mM、约5mM至约15mM；或约8mM至约12mM的浓度存在。在一些实施例中，缓冲液(例如组氨酸)以约1mM；约2mM；约3mM；约4mM；约5mM；约6mM；约7mM；约8mM；约9mM；约10mM；约11mM；约12mM；约13mM；约14mM；约15mM；约16mM；约17mM；约18mM；约19mM；或约20mM的浓度存在。在一些情况下，调配物含有浓度为5mM±1mM至15mM±3mM的组氨酸缓冲液。在一些情况下，调配物含有浓度为10mM±1mM的组氨酸缓冲液。在一些实施例中，组氨酸缓冲液包含L-组氨酸和L-组氨酸一盐酸盐一水合物。在一些情况下，组氨酸缓冲液包含浓度为3.65mM±0.5mM的L-组氨酸和浓度为6.35mM±0.5mM的L-组氨酸一盐酸盐一水合物。在一些情况下，组氨酸缓冲液包含浓度为3.65mM±0.2mM的L-组氨酸和浓度为6.35mM±0.2mM的L-组氨酸一盐酸盐一水合物。在一些实施例中，调配物含有乙酸盐缓冲液(例如，呈上文或本文所论述的任何浓度的缓冲液)。在一些实施例中，调配物含有磷酸盐缓冲液(例如，呈上文或本文所论述的任何浓度的缓冲液)。
在抗体纯化过程中，可能期望或有必要将一种缓冲液交换为另一种，以达成合适的赋形剂浓度、抗体浓度、pH等。可以例如通过使用例如半透切向流过滤膜的超过滤/透滤作用(UF/DF)来完成缓冲液交换。然而，使用此类技术有可能引起吉布斯-唐南效应(Gibbs-Donnan effect)(Bolton等人,2011,《生物技术进展(Biotechnol.Prog.)》27(1):140-152)。在蛋白质浓缩过程中，膜的产品侧上正电荷的积累通过正离子优先向膜的对侧移动而在电学上得到配衡。此现象的潜在后果是，由于在UF/DF步骤期间带正电荷的透滤缓冲赋形剂对带正电荷的抗体蛋白的静电排斥，因此某些组分(例如组氨酸)的最终浓度可能低于这些组分的预期目标浓度。因此，本发明包括以下调配物，其中由于吉布斯-唐南效应，例如组氨酸的浓度在本文所叙述的量或范围内变化。
体积排阻描述了高浓度样品的特性，其中溶液总体积中的很大一部分被溶质占据，尤其是大分子(如蛋白质)，使溶剂排除在此空间之外。随后，此减少了可用于溶解其它溶质的溶剂的总体积，其可能会导致超过滤膜分配不均。因此，本发明包括调配物，其中由于体积排阻效应，例如组氨酸的浓度可在本文所叙述的量或范围内变化。
在制造本发明调配物期间，调配物的组成可能发生变化。这些变化可包括活性成分的浓度、赋形剂的浓度和/或调配物的pH。本发明包括包含抗CD20×抗CD3双特异性抗体的调配物，所述抗CD20×抗CD3双特异性抗体是稳定的且在赋形剂浓度变化高达至少10％的情况下保留效力。举例来说，本文包括抗CD20×抗CD3双特异性抗体调配物，其中所述调配物的稳定性和效力不受抗体、蔗糖、组氨酸缓冲液和/或聚山梨醇酯的浓度的±10％或±20％变化影响。
药物调配物的稳定性
本发明的药物调配物展现高水准的稳定性。如本文所使用的关于药物调配物的术语“稳定”意指药物调配物内的抗体在储存限定时间量之后保留可接受程度的结构和/或功能和/或生物活性。即使调配物中所含有的抗体在储存限定时间量之后无法维持100％的其结构和/或功能和/或生物活性，所述调配物仍可为稳定的。在某些情况下，约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的抗体在储存限定时间量之后的结构和/或功能和/或生物活性的维持可视为“稳定的”。
稳定性可尤其通过测定在给定温度下储存限定时间量之后调配物中剩余的原生抗体的百分比来测量。原生抗体的百分比可尤其通过尺寸排阻色谱法(例如尺寸排阻高效液相色谱法[SE-HPLC])来测定。当本文使用“可接受的稳定度”时，所述短语意指可在给定温度下储存限定时间量之后在调配物中检测到至少90％原生形式的抗体。在某些实施例中，可在给定温度下储存限定时间量之后在调配物中检测到至少约90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％原生形式的抗体。测量稳定性之前的限定时间量可为至少1个月、至少2个月、至少3个月、至少4个月、至少5个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月、至少12个月、至少18个月、至少24个月、至少30个月、至少36个月或更长时间。当评定稳定性时药物调配物可储存的温度可为约-80℃至约45℃的任何温度，例如储存在约-80℃、约-30℃、约-20℃、约0℃、约4℃-8℃、约5℃、约25℃、约35℃、约37℃或约45℃下。举例来说，如果在5℃下储存3个月后，通过SE-HPLC检测到大于约90％、95％、96％或97％的原生抗体，则药物调配物可视为稳定的。如果在5℃下储存6个月后，通过SE-HPLC检测到大于约90％、95％、96％或97％的原生抗体，则药物调配物也可视为稳定的。如果在5℃下储存9个月后，通过SE-HPLC检测到大于约90％、95％、96％、96.5％、97％、97.5％、98％、98.5％、99％或99.5％的原生抗体，则药物调配物也可视为稳定的。如果在5℃下储存12个月后，通过SE-HPLC检测到大于约90％、95％、96％、96.5％、97％、97.5％、98％、98.5％、99％或99.5％的原生抗体，则药物调配物也可视为稳定的。如果在5℃下储存24个月后，通过SE-HPLC检测到大于约90％、95％、96％、96.5％、97％、97.5％、98％、98.5％、99％或99.5％的原生抗体，则药物调配物也可视为稳定的。如果在5℃下储存36个月后，通过SE-HPLC检测到大于约90％、95％、96％、96.5％、97％、97.5％、98％、98.5％、99％或99.5％的原生抗体，则药物调配物也可视为稳定的。如果在25℃下储存3个月后，通过SE-HPLC检测到大于约90％、95％、96％、96.5％、97％、97.5％、98％、98.5％、99％或99.5％的原生抗体，则药物调配物也可视为稳定的。如果在25℃下储存6个月后，通过SE-HPLC检测到大于约90％、95％、96％、96.5％、97％、97.5％、98％、98.5％、99％或99.5％的原生抗体，则药物调配物也可视为稳定的。如果在25℃下储存9个月后，通过SE-HPLC检测到大于约90％、95％、96％、96.5％、97％、97.5％、98％、98.5％、99％或99.5％的原生抗体，则药物调配物也可视为稳定的。如果在45℃下储存1个月后，通过SE-HPLC检测到大于约90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％或98％的原生抗体，则药物调配物也可视为稳定的。
还可使用其它方法以评定本发明的调配物的稳定性，如用以测定热稳定性的差示扫描热量测定(DSC)、用以测定机械稳定性的受控搅动和用以测定溶液混浊度的在约350nm或约405nm处的吸光度。举例来说，如果在约5℃至约25℃下储存6个月或更多个月后，本发明的调配物的OD405相对于t＝0时调配物的OD405的变化小于约0.05(例如0.04、0.03、0.02、0.01或更小)，则调配物可视为稳定的。
测量抗体与其目标的结合亲和力还可用于评定稳定性。举例来说，如果在例如-80℃、-30℃、-20℃、5℃、25℃、37℃、45℃等下储存限定时间量(例如14天至9个月)后，本发明的调配物内所含有的抗CD20×抗CD3双特异性抗体以抗体在所述储存之前的结合亲和力的至少80％、85％、90％、95％或更多亲和力结合至人类CD20和人类CD3，则调配物可视为稳定的。结合亲和力可通过如ELISA或等离子共振的任何方法来测定。生物活性可通过CD20或CD3活性分析来测定，例如通过使表达CD20或CD3的细胞与包含抗CD20×抗CD3双特异性抗体的调配物接触。抗体与此类细胞的结合可如经由FACS分析来直接测量。
稳定性可尤其通过测定在限定温度下储存限定时间量之后在调配物内形成聚集物(高分子量(HMW))的抗体的百分比来测量，其中稳定性与所形成的聚集物百分比成反比。经聚集的抗体的百分比可尤其通过尺寸排阻色谱法(例如尺寸排阻高效液相色谱法[SE-HPLC]或尺寸排阻超高效液相色谱法[SE-UPLC])来测定。当本文使用“可接受的稳定度”时，所述短语意指至多6％的抗体呈在给定温度下储存限定时间量之后在调配物中检测到的聚集形式。在某些实施例中，可接受的稳定度意指可在给定温度下储存限定时间量之后在调配物中的聚集物中检测到至多约6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.1％的抗体。测量稳定性之前的限定时间量可为至少2周、至少28天、至少1个月、至少2个月、至少3个月、至少4个月、至少5个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月、至少12个月、至少18个月、至少24个月、至少30个月、至少36个月或更长时间。当评定稳定性时药物调配物可储存的温度可为约-80℃至约45℃的任何温度，例如储存在约-80℃、约-30℃、约-20℃、约0℃、约4℃-8℃、约5℃、约25℃、约35℃、约37℃或约45℃下。举例来说，如果在5℃下储存九个月后，检测到小于约2％、1.75％、1.5％、1.25％、1％、0.75％、0.5％、0.25％或0.1％呈聚集形式的抗体，则药物调配物可视为稳定的。如果在25℃和60％相对湿度下储存三个月后，检测到小于约2％、1.75％、1.5％、1.25％、1％、0.75％、0.5％、0.25％或0.1％呈聚集形式的抗体，则药物调配物也可视为稳定的。如果在45℃下储存1个月之后，检测到小于约6％、5.9％、5.8％、5.7％、5.6％、5.5％、5％、4.5％、4％、3.5％、3％、2.5％、2％、1.5％、1％、0.5％或0.1％呈聚集形式的抗体，则药物调配物也可视为稳定的。如果在-20℃、-30℃或-80℃下储存三个月后，检测到小于约2％、1.9％、1.8％、1.7％、1.6％、1.5％、1％、0.5％或0.1％呈聚集形式的抗体，则药物调配物也可视为稳定的。
稳定性可尤其通过测定在离子交换期间在比抗体的主要洗脱份(“主要电荷形式”)更具酸性的洗脱份(“酸性形式”)中迁移的抗体的百分比来测量，其中稳定性与呈酸性形式的抗体的分数成反比。不希望受理论束缚，相对于未去酰胺化抗体而言，抗体去酰胺化可能使抗体变得带更多的负电且因此更具酸性(参见例如Robinson,N.,《蛋白质去酰胺化(Protein Deamidation)》,PNAS,2002年4月16日,99(8):5283-5288)。“酸化”抗体的百分比可通过离子交换色谱法(例如阳离子交换高效液相色谱法[CEX-HPLC]或阳离子交换超高效液相色谱法[CEX-UPLC])来测定。当本文使用“可接受的稳定度”时，所述短语意指至多52％的抗体呈在限定温度下储存限定时间量之后在调配物中检测到的较具酸性形式。在某些实施例中，可接受的稳定度意指可在给定温度下储存限定时间量之后在调配物中检测到至多约52％、50％、45％、40％、35％、30％、29％、28％、27％、26％、25％、20％、15％、10％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.1％呈酸性形式的抗体。测量稳定性之前的限定时间量可为至少2周、至少28天、至少1个月、至少2个月、至少3个月、至少4个月、至少5个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月、至少12个月、至少18个月、至少24个月、至少30个月、至少36个月或更长时间。当评定稳定性时药物调配物可储存的温度可为约-80℃至约45℃的任何温度，例如储存在约-80℃、约-30℃、约-20℃、约0℃、约4℃-8℃、约5℃、约25℃或约45℃下。举例来说，如果在-80℃、-30℃或-20℃下储存三个月后，小于约29％、28％、27％、26％、25％、24％、23％、22％、21％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.1％的抗体呈较具酸性形式，则药物调配物可视为稳定的。如果在5℃下储存九个月后，小于约28％、27％、26％、25％、24％、23％、22％、21％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.1％的抗体呈较具酸性形式，则药物调配物也可视为稳定的。如果在25℃下储存28天后，小于约30％、29％、28％、27％、26％、25％、24％、23％、22％、21％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.1％的抗体呈较具酸性形式，则药物调配物也可视为稳定的。如果在37℃下储存28天后，小于约37％、36％、35％、34％、33％、32％、31％、30％、29％、28％、27％、26％、25％、24％、23％、22％、21％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.1％的抗体呈较具酸性形式，则药物调配物也可视为稳定的。如果在45℃下储存28天后，可检测到小于约52％、51％、50％、49％、48％、47％、46％、45％、44％、43％、42％、41％、40％、39％、38％、37％、36％、35％、34％、33％、32％、31％、30％、29％、28％、27％、26％、25％、24％、23％、22％、21％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.1％呈较具酸性形式的抗体，则药物调配物也可视为稳定的。
提及“指定时间段之后”药物调配物的稳定性意指在指定时间段结束时或指定时间段快结束时进行稳定性参数(例如原生形式％、HMW物种％或酸性形式％)测量，且意指对于其后所测量的参数，药物调配物不一定维持相同稳定度。举例来说，提及9个月之后的特定稳定性意指在研究开始之后9个月时或约9个月时进行稳定性测量。用于评定调配物中的抗体的稳定性的额外方法展示于下文所呈现的实例中。
如下文实例中所说明，本发明部分基于以下发现：所要求的赋形剂与双特异性抗CD20×抗CD3抗体的组合产生稳定的调配物。
示例性调配物
根据本发明的一个方面，药物调配物包含：(i)特异性结合至人类CD20和人类CD3的人类抗CD20×抗CD3双特异性抗体；(ii)包含组氨酸的缓冲液；(iii)包含聚山梨醇酯的有机共溶剂；和(iv)包含糖的稳定剂。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为约2mg/ml至约200mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(ii)组氨酸，其浓度为约5mM至约15mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为约0.05％w/v至约0.15％w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为约5％w/v至约15％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为约2mg/ml至约200mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG1的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)组氨酸，其浓度为约5mM至约15mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为约0.05％w/v至约0.15％w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为约5％w/v至约15％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为约2mg/ml至约200mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)组氨酸，其浓度为约5mM至约15mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为约0.05％w/v至约0.15％w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为约5％w/v至约15％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为约2mg/ml至约200mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含第一重链、第二重链和共同轻链，所述第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，所述第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列，且所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列；(ii)组氨酸，其浓度为约5mM至约15mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为约0.05％w/v至约0.15％w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为约5％w/v至约15％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为约2mg/ml至约200mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(ii)组氨酸，其浓度为约8mM至约12mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为约0.075％w/v至约0.125％w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为约8％w/v至约12％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为约2mg/ml至约200mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG1的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)组氨酸，其浓度为约8mM至约12mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为约0.075％w/v至约0.125％w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为约8％w/v至约12％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为约2mg/ml至约200mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)组氨酸，其浓度为约8mM至约12mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为约0.075％w/v至约0.125％w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为约8％w/v至约12％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为约2mg/ml至约200mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含第一重链、第二重链和共同轻链，所述第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，所述第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列，且所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列；(ii)组氨酸，其浓度为约8mM至约12mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为约0.075％w/v至约0.125％w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为约8％w/v至约12％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为约2mg/ml至约200mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(ii)组氨酸，其浓度为10mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为约2mg/ml至约200mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG1的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)组氨酸，其浓度为10mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为约2mg/ml至约200mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)组氨酸，其浓度为10mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为约2mg/ml至约200mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含第一重链、第二重链和共同轻链，所述第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，所述第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列，且所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列；(ii)组氨酸，其浓度为10mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为2mg/ml±0.2mg/ml至200mg/ml±20mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为2mg/ml±0.2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为20mg/ml±2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为100mg/ml±10mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为2mg/ml±0.2mg/ml至200mg/ml±20mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为2mg/ml±0.2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为20mg/ml±2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为100mg/ml±10mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为2mg/ml±0.2mg/ml至200mg/ml±20mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区，且其中两条重链中的一条具有CH3域中的修饰(例如根据EU编号的H435R和Y436F)，所述修饰相对于未经修饰的IgG4CH3域减少了蛋白A结合；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为2mg/ml±0.2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区，且其中两条重链中的一条具有CH3域中的修饰(例如根据EU编号的H435R和Y436F)，所述修饰相对于未经修饰的IgG4 CH3域减少了蛋白A结合；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为20mg/ml±2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区，且其中两条重链中的一条具有CH3域中的修饰(例如根据EU编号的H435R和Y436F)，所述修饰相对于未经修饰的IgG4 CH3域减少了蛋白A结合；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为100mg/ml±10mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区，且其中两条重链中的一条具有CH3域中的修饰(例如根据EU编号的H435R和Y436F)，所述修饰相对于未经修饰的IgG4 CH3域减少了蛋白A结合；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为2mg/ml±0.2mg/ml至100mg/ml±10mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含第一重链、第二重链和共同轻链，所述第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，所述第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列，且所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为2mg/ml±0.2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含第一重链、第二重链和共同轻链，所述第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，所述第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列，且所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为20mg/ml±2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含第一重链、第二重链和共同轻链，所述第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，所述第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列，且所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为100mg/ml±10mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含第一重链、第二重链和共同轻链，所述第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，所述第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列，且所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列；(ii)组氨酸，其浓度为10mM±1mM；(iii)聚山梨醇酯80，其浓度为0.1％±0.01w/v；和(iv)蔗糖，其浓度为10％±1％w/v，其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为2mg/ml±0.2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(ii)L-组氨酸，其浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL；(iii)L-组氨酸一盐酸盐一水合物，其浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL；(iv)聚山梨醇酯80，其浓度为1mg/mL±0.1mg/mL，和(v)蔗糖，其浓度为100mg/mL±10mg/mL，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为2mg/ml±0.2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG1的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)L-组氨酸，其浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL；(iii)L-组氨酸一盐酸盐一水合物，其浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL；(iv)聚山梨醇酯80，其浓度为1mg/mL±0.1mg/mL，和(v)蔗糖，其浓度为100mg/mL±10mg/mL，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为2mg/ml±0.2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)L-组氨酸，其浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL；(iii)L-组氨酸一盐酸盐一水合物，其浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL；(iv)聚山梨醇酯80，其浓度为1mg/mL±0.1mg/mL，和(v)蔗糖，其浓度为100mg/mL±10mg/mL，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为2mg/ml±0.2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含第一重链、第二重链和共同轻链，所述第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，所述第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列，且所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列；(ii)L-组氨酸，其浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL；(iii)L-组氨酸一盐酸盐一水合物，其浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL；(iv)聚山梨醇酯80，其浓度为1mg/mL±0.1mg/mL，和(v)蔗糖，其浓度为100mg/mL±10mg/mL，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为20mg/ml±2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(ii)L-组氨酸，其浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL；(iii)L-组氨酸一盐酸盐一水合物，其浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL；(iv)聚山梨醇酯80，其浓度为1mg/mL±0.1mg/mL，和(v)蔗糖，其浓度为100mg/mL±10mg/mL，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为20mg/ml±2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG1的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)L-组氨酸，其浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL；(iii)L-组氨酸一盐酸盐一水合物，其浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL；(iv)聚山梨醇酯80，其浓度为1mg/mL±0.1mg/mL，和(v)蔗糖，其浓度为100mg/mL±10mg/mL，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为20mg/ml±2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)L-组氨酸，其浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL；(iii)L-组氨酸一盐酸盐一水合物，其浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL；(iv)聚山梨醇酯80，其浓度为1mg/mL±0.1mg/mL，和(v)蔗糖，其浓度为100mg/mL±10mg/mL，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为20mg/ml±2mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含第一重链、第二重链和共同轻链，所述第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，所述第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列，且所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列；(ii)L-组氨酸，其浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL；(iii)L-组氨酸一盐酸盐一水合物，其浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL；(iv)聚山梨醇酯80，其浓度为1mg/mL±0.1mg/mL，和(v)蔗糖，其浓度为100mg/mL±10mg/mL，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为100mg/ml±10mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；(ii)L-组氨酸，其浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL；(iii)L-组氨酸一盐酸盐一水合物，其浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL；(iv)聚山梨醇酯80，其浓度为1mg/mL±0.1mg/mL，和(v)蔗糖，其浓度为100mg/mL±10mg/mL，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为100mg/ml±10mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG1的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)L-组氨酸，其浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL；(iii)L-组氨酸一盐酸盐一水合物，其浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL；(iv)聚山梨醇酯80，其浓度为1mg/mL±0.1mg/mL，和(v)蔗糖，其浓度为100mg/mL±10mg/mL，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为100mg/ml±10mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含特异性结合人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合人类CD3的第二抗原结合域，所述第一抗原结合域包含：包含SEQ IDNO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，其中抗体具有同型IgG4的重链恒定区(任选地其中两条重链中的一条具有相对于相同同型的未经修饰的重链减少蛋白A结合的修饰，且任选地其中两条重链中的一条或两条具有嵌合铰链)；(ii)L-组氨酸，其浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL；(iii)L-组氨酸一盐酸盐一水合物，其浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL；(iv)聚山梨醇酯80，其浓度为1mg/mL±0.1mg/mL，和(v)蔗糖，其浓度为100mg/mL±10mg/mL，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
在一些情况下，稳定的液体药物调配物包含(i)浓度为100mg/ml±10mg/ml的人类双特异性抗体，其特异性结合至人类CD20和人类CD3且包含第一重链、第二重链和共同轻链，所述第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列，所述第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列，且所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列；(ii)L-组氨酸，其浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL；(iii)L-组氨酸一盐酸盐一水合物，其浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL；(iv)聚山梨醇酯80，其浓度为1mg/mL±0.1mg/mL，和(v)蔗糖，其浓度为100mg/mL±10mg/mL，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
在这些示例性调配物中的任一者中，“稳定”可定义为：(a)如通过尺寸排阻-超高效液相色谱法(SE-UPLC)测定，在45℃下储存1个月后，至少90％的抗体具有原生构象；(b)如通过SE-UPLC测定，在45℃下储存1个月后，至少93％的抗体具有原生构象；(c)如通过SE-UPLC测定，在45℃下储存1个月后，至少95％的抗体具有原生构象；(d)如通过SE-UPLC测定，在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，至少95％的抗体具有原生构象；(e)如通过SE-UPLC测定，在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，至少97％的抗体具有原生构象；(f)如通过SE-UPLC测定，在5℃下储存3个月后，至少95％的抗体具有原生构象；(g)如通过SE-UPLC测定，在5℃下储存3个月后，至少98％的抗体具有原生构象；(h)如通过SE-UPLC测定，在45℃下储存1个月后，调配物含有不超过6％的高分子量(HMW)物种；(i)如通过SE-UPLC测定，在45℃下储存1个月后，调配物含有不超过5.6％的HMW物种；(j)如通过SE-UPLC测定，在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，调配物含有不超过2％的HMW物种；(k)如通过SE-UPLC测定，在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，调配物含有不超过1％的HMW物种；(l)如通过SE-UPLC测定，在5℃下储存3个月后，调配物含有不超过1.5％的HMW物种；和/或(m)如通过SE-UPLC测定，在5℃下储存9个月后，调配物含有不超过1％的HMW物种。
在这些示例性调配物中的任一者中，双特异性抗体可在一条或两条重链中包括修饰以促进自均二聚杂质中纯化双特异性抗体(即，异二聚体)。在一些实施例中，双特异性抗体包括相同的第一和第二重链(即，抗CD20结合臂的重链和抗CD3结合臂的重链)(例如，同型IgG1或IgG4两者)，但一条或另一条重链的CH3域中存在与缺乏修饰的抗体相比，降低了双特异性抗体与蛋白A的结合的修饰。在一些情况下，第一重链的CH3域(例如，抗CD20结合臂的CH3域)结合蛋白A，且第二重链的CH3域(例如，抗CD3结合臂的CH3域)含有减少或消除蛋白A结合的突变。在一些情况下，突变是H435R修饰(根据EU编号；根据IMGT外显子编号的H95R)。在一些情况下，突变是H435R修饰(根据EU编号；根据IMGT外显子编号的H95R)和Y436F修饰(根据EU编号；根据IMGT编号的Y96F)。可发现于第二CH3域内的其它修饰包括:在IgG1 CH3域的情况下，根据EU的D356E、L358M、N384S、K392N、V397M和V422I(根据IMGT的D16E、L18M、N44S、K52N、V57M和V82I)；和在IgG4 CH3域的情况下，根据EU的Q355R、N384S、K392N、V397M、R409K、E419Q和V422I(根据IMGT的Q15R、N44S、K52N、V57M、R69K、E79Q和V82I)。
本发明所涵盖的药物调配物的额外非限制性实例在本文其它地方阐述，包括下文所呈现的工作实例。
容器和施用方法
本发明的药物调配物可含于适用于储存药品和其它治疗性组合物的任何容器内。举例来说，药物调配物可含于如小瓶、安瓿、注射器、药筒、瓶或IV袋的具有限定体积的经密封且经灭菌的塑料或玻璃容器内。可使用包括例如澄清且不透明(例如琥珀色)玻璃或塑料小瓶的不同类型的小瓶以含有本发明的调配物。同样，可使用任何类型的注射器以含有和/或施用本发明的药物调配物。在一些实施例中，药物调配物含于预填充注射器中。在一些实施例中，药物调配物含于预填充立桩针注射器中。
本发明的药物调配物可含于“正常钨”注射器或“低钨”注射器内。如本领域的普通技术人员将了解，制造玻璃注射器的方法一般涉及使用用以刺穿玻璃，由此产生可自其中抽吸液体且自注射器排出的洞的热钨棒。此过程导致痕量钨沉积于注射器的内表面上。后续洗涤和其它处理步骤可用于减少注射器中的钨的量。如本文所使用，术语“正常钨”意指注射器含有大于500十亿分率(ppb)的钨。术语“低钨”意指注射器含有小于500ppb的钨。举例来说，根据本发明，低钨注射器可含有小于约490、480、470、460、450、440、430、420、410、390、350、300、250、200、150、100、90、80、70、60、50、40、30、20、10ppb或更少的钨。
用于注射器中的橡胶柱塞和用于封闭小瓶开口的橡胶塞可被涂布以防止注射器或小瓶的药品内容物污染和/或保留其稳定性。因此，根据某些实施例，本发明的药物调配物可含于包含经涂布的柱塞的注射器内，或含于用经涂布的橡胶塞密封的小瓶内。举例来说，柱塞或橡胶塞可涂布有氟碳化合物薄膜。适用于与含有本发明的药物调配物的小瓶和注射器一起使用的经涂布的橡胶塞和/或柱塞的实例在例如以下中提及：美国专利第4,997,423号；第5,908,686号；第6,286,699号；第6,645,635号；和第7,226,554号，所述专利的内容以全文引用的方式并入本文中。可在本发明的情形下使用的特定示例性经涂布的橡胶塞和柱塞可以以商品名
Figure BDA0003741880490000371
商购自宾夕法尼亚州莱昂维尔的西氏医药服务公司(West Pharmaceutical Services,Inc.,Lionville,PA)。
Figure BDA0003741880490000372
是氟碳涂层的一个实例，用于最小化或防止药品粘附至橡胶表面。根据本发明的某些实施例，药物调配物可含于包含经氟碳化合物涂布的柱塞的低钨注射器内。
药物调配物可以通过如注射(例如皮下、静脉内、肌内、腹膜内等)或经皮、经粘膜、经鼻、经肺和/或经口施用的非经肠途径施用至患者。大量可再用笔式和/或自动注射器式递送装置可以用于皮下递送本发明的药物调配物。仅举数例，实例包括但不限于AUTOPENTM(英国伍德斯托克的欧文芒福德公司(Owen Mumford,Inc.,Woodstock,UK))、DISETRONICTM笔(瑞士布格多夫(Bergdorf,Switzerland)的Disetronic Medical Systems)、HUMALOGMIX 75/25TM笔、HUMALOGTM笔、HUMALIN 70/30TM笔(印第安纳州印第安纳波利斯的礼来公司(Eli Lilly and Co.,Indianapolis,IN))、NOVOPENTM I、NOVOPENTM II和NOVOPENTM III(丹麦哥本哈根的诺和诺德(Novo Nordisk,Copenhagen,Denmark))、NOVOPEN JUNIORTM(丹麦哥本哈根的诺和诺德)、BDTM笔(新泽西州富兰克林湖的BD公司(Becton Dickinson,FranklinLakes,NJ))、OPTIPENTM、OPTIPEN PROTM、OPTIPEN STARLETTM和OPTICLIKTM(德国法兰克福的赛诺菲-安万特(sanofi-aventis,Frankfurt,Germany))。仅举数例，应用于本发明的药物组合物的皮下递送中的抛弃式笔式和/或自动注射器式递送装置的实例包括但不限于SOLOSTARTM笔(赛诺菲-安万特)、FLEXPENTM(诺和诺德)和KWIKPENTM(礼来)、SURECLICKTM自动注射器(加利福尼亚州绍曾德奥克斯的安进(Amgen,Thousand Oaks,CA))、PENLETTM(德国斯图加特的(Stuttgart,Germany))、EPIPEN(Dey,L.P.)和HUMIRATM笔(伊利诺伊州雅培园的雅培(Abbott Labs,Abbott Park,IL))。在一些情况下，药物调配物含于特别适于与自动注射器一起使用的注射器中。
本文还考虑使用微输注器来递送本发明的药物调配物。如本文所使用，术语“微输注器”意指皮下递送装置，其经设计以在延长的时间段内(例如，约10、15、20、25、30或更长时间)缓慢地施用较大体积(例如，至多约2.5mL、约3.0mL或更多)的治疗性调配物。参见例如，US 6,629,949；US 6,659,982；和Meehan等人，《控制释放杂志(J.ControlledRelease)》46:107-116(1996)。微输注器对于递送高浓度(例如，约100、125、150、175、200mg/mL或更高)和/或粘稠溶液中所含有的较大剂量治疗性蛋白质特别有用。
在某些实施例中，药物调配物经由IV滴注施用，使得调配物在含有生理学可接受的溶液的IV袋中稀释。在一个实施例中，药物组合物是处于静脉输液袋中的复合无菌制剂，使得单剂量的药品稀释至100mL、250mL(或其它适合于静脉内滴注递送的类似量)的生理缓冲液(例如0.9％的盐水)。
本发明的药物调配物还可含于单位剂型中。如本文所使用，术语“单位剂型”是指适用作待治疗的患者的单位剂量的物理离散单位，各单位含有经计算以与所需医药载剂、稀释剂或赋形剂结合产生所期望治疗效果的预定量的活性化合物。在各种实施例中，单位剂型含于如本文所论述的容器内。本发明的调配物中的活性成分(例如抗CD20×抗CD3双特异性抗体)的实际剂量水准可变化以便获得可有效达成特定患者、组合物和施用模式所期望的治疗反应且对患者不具有副作用的量的活性成分。所选剂量水准将视各种药物动力学因素而定，所述因素包括所采用的本发明的特定组合物的活性、施用途径、施用时间、所采用的特定化合物的排泄速率、治疗持续时间、与所采用的特定组合物组合使用的其它药物、化合物和/或物种、所治疗患者的年龄、性别、体重、病况、一般健康状况和先前病史；和医学领域中熟知的类似因素。如本文所使用的术语“稀释剂”是指适合于改变或达成如本文所描述的示例性或适当浓度或浓度的溶液。
在各种实施例中，单位剂型含有意图单次使用的量的活性成分(例如抗CD20×抗CD3双特异性抗体)。在各种实施例中，单位剂型中的活性成分的量为约0.1mg至约5000mg、约100mg至约1000mg，和约100mg至约500mg、约100mg至约400mg、约100mg至约200mg、约250mg至约350mg、约125mg至约175mg、约275mg至约325mg、约1mg至约250mg、约1mg至约100mg、约1mg至约50mg、约1mg至约25mg、约1mg至约10mg、约1mg至约5mg或其范围或区间。例如约2mg至约100mg或2mg至20mg的上文所叙述量的中间范围也意图成为本发明的一部分。举例来说，意图包括使用上文所叙述值(或含于上文所叙述范围内的值)中的任一个的组合作为上限值和/或下限值的值范围。在特定实施例中，调配物常常以呈单位剂型的液体形式供应。在一些实施例中，单位剂型含有2至2.5mg或10至11mg、20至25mg、80至90mg、100至125mg、160至180mg、200至225或320至360mg。在一些实施例中，根据本发明的单位剂型适合于皮下施用至患者(例如，含有浓度为约100mg/ml或约160mg/ml的抗体的单位剂型)。
在一个实施例中，本发明提供了在稳定调配物中包含约2mg的抗体的单位剂型，其中所述调配物包含浓度为2mg/ml±0.2mg/ml的抗体；(ii)浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL的L-组氨酸；(iii)浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL的L-组氨酸一盐酸盐一水合物；(iv)浓度为1mg/mL±0.1mg/mL的聚山梨醇酯80；和(v)浓度为100mg/mL±10mg/mL的蔗糖，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。在一个实施例中，本发明提供了在稳定调配物中包含约20mg、约80mg、约160mg或约320mg的抗体的单位剂型，其中所述调配物包含浓度为20mg/ml±2mg/ml的抗体；(ii)浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL的L-组氨酸；(iii)浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL的L-组氨酸一盐酸盐一水合物；(iv)浓度为1mg/mL±0.1mg/mL的聚山梨醇酯80；和(v)浓度为100mg/mL±10mg/mL的蔗糖，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。在一个实施例中，本发明提供了在稳定调配物中包含约100mg、约200mg、约300mg或约400mg的抗体的单位剂型，其中所述调配物包含浓度为100mg/ml±10mg/ml的抗体；(ii)浓度为0.57mg/mL±0.1mg/mL的L-组氨酸；(iii)浓度为1.33mg/mL±0，1mg/mL的L-组氨酸一盐酸盐一水合物；(iv)浓度为1mg/mL±0.1mg/mL的聚山梨醇酯80；和(v)浓度为100mg/mL±10mg/mL的蔗糖，其中所述调配物在水中的pH为5.8±0.3。
本发明还包括制备单位剂型的方法。在示例性实施例中，用于制备医药单位剂型的方法包括在合适容器(例如本文所论述的那些容器)中合并前述实施例中的任一个的调配物。
在各种实施例中，药物调配物含于容器(例如，小瓶或预填充注射器)中，所述容器可含有小于5体积％的氧化气体(例如氧气)的顶隙气体。在各个实施例中，容器的顶隙中的氧化气体(例如氧气)的浓度可小于4.5％、小于4％、小于3.5％、小于3％、小于2.5％、小于2％或小于1.5％。在一个实施例中，顶隙中的氧化气体(例如氧气)的浓度小于约1％。在一个实施例中，顶隙中的氧化气体(例如氧气)的浓度不超过约0.5％。在一个实施例中，顶隙中的氧化气体(例如氧气)的浓度不超过约0.1％。在各种实施例中，药品容器的顶隙中的氧化气体(例如氧气)的浓度小于0.9％、小于0.8％、小于0.7％、小于0.6％、小于0.5％、小于0.4％、小于0.3％、小于0.2％或小于0.1％。在一些情况下，顶隙气体中的氧气浓度为约0.01％至约1.5％。在一些情况下，顶隙气体中的氧气浓度为约0.75％至约1.25％。在一些情况下，顶隙气体中的氧气浓度为约0.05％至约0.15％。在各种实施例中，顶隙中的氧化气体(例如氧气)被惰性气体如氮气、氩气、氦气、氙气、氖气、氪气或氡气替代或基本上被替代。在一个实施例中，非氧化气体为氮气。在一个实施例中，非氧化气体为氩气。
药物调配物的治疗性用途
本发明的药物调配物尤其适用于治疗、预防和/或改善与表现人类CD20的细胞相关的任何疾病或病症。可以通过施用本发明的药物调配物来治疗的示例性、非限制性疾病和病症包括B细胞癌，如非霍奇金氏淋巴瘤，例如滤泡性淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤和边缘区淋巴瘤。
本发明的治疗方法包含向个体施用包含如本文所公开的抗CD20×抗CD3双特异性抗体的任何调配物。施用药物调配物的个体可为例如需要此类治疗的任何人类或非人类动物。举例来说，个体可为诊断患有前述疾病或病症中的任一者或视为处于罹患前述疾病或病症中的任一者的风险下的个体。本发明进一步包括本文所公开的药物调配物中的任一种在制造用于治疗与表现人类CD20的细胞相关的任何疾病或病症的药剂中的用途，所述任何疾病或病症包括上文所提及的示例性疾病、病症和病况中的任一者。
在一些实施例中，本发明提供包含如本文所论述的药物调配物(例如具有调配物或单位剂型的容器)和包装或标签(例如药品说明书)以及药物调配物使用说明书的试剂盒以治疗如上文所论述的疾病或病症。在一些情况下，说明书提供如本文所论述的单位剂型用于治疗疾病或病症的用途。
本文中所提及的序列和相应SEQ ID NO的概述展示于下表1中。
表1：序列概述
SEQ ID NO: 描述
1 抗CD20重链
2 抗CD3重链
3 共同抗CD20和抗CD3轻链
4 抗CD20 HCVR
5 抗CD3 HCDR
6 共同抗CD20和抗CD3 LCVR
7 抗CD20 HCDR1
8 抗CD20 HCDR2
9 抗CD20 HCDR3
10 抗CD3 HCDR1
11 抗CD3 HCDR2
12 抗CD3 HCDR3
13 共同抗CD20和抗CD3 LCDR1
14 共同抗CD20和抗CD3 LCDR2
15 共同抗CD20和抗CD3 LCDR3
16 IgG4重链恒定区
17 具有H435R/Y436F的IgG4重链恒定区
18 IgG1重链恒定区
19 具有H435R/Y436F的IgG1重链恒定区
实例
提出以下实例以便为本领域的普通技术人员提供如何制造和使用本发明的方法和组合物的完整公开内容和描述，且并不意图限制本发明人视作其发明的范围。已努力确保关于所用数字(例如量、温度等)的准确性，但还应考虑一些实验误差和偏差。除非另有指示，否则份数为重量份，分子量为平均分子量，温度以摄氏度计，且压力为大气压或接近大气压。
实例1：研发稳定的抗CD20×抗CD3双特异性抗体调配物
调配物研发活动涉及评定缓冲液、pH、有机共溶剂、表面活性剂和热稳定剂以鉴别增强蛋白质稳定性的赋形剂。由这些研究产生的结果以及实例2中所论述的结果被用于研发适合临床用途的稳定的液体调配物。
通过将15mg/mL REGN1979在45℃下在处于变化pH范围内的一系列缓冲液系统中培育28天来在液体调配物中检验缓冲液和pH对REGN1979的热稳定性的影响。研究以下pH和缓冲液系统：乙酸盐(pH为4.5-5.5)、组氨酸(pH为5.5-6.5)和磷酸盐(pH为6.0-7.0)。基于SE-UPLC分析的结果，当在介于pH 5.5与pH 6.0的组氨酸缓冲液中调配REGN1979时，观察到最大蛋白质稳定性(表2)。基于CEX-UPLC分析的结果，当在介于pH 5.5与pH 6.0的组氨酸缓冲液中调配或在介于pH 4.5与5.0的乙酸盐缓冲液中调配REGN1979时，观察到最大蛋白质稳定性。这些分析还揭露，碎片化(即，低分子量物种的形成)、HMW物种和电荷变体形成是主要降解路径。选择组氨酸缓冲液作为药品(DP)调配物的调配物缓冲液，因为其使高分子量物种的形成降至最低，而高分子量物种是比较关注的降解路径。对于DP调配物，选择pH值为5.8，因为在此pH值下高分子量物种和电荷变体的形成降至最低。基于这些结果以及实例2中所论述的结果，选择pH为5.8的10mM组氨酸缓冲液用于REGN1979DP调配物。
常常将热稳定剂(如蔗糖)添加至抗体调配物中以增加蛋白质的热稳定性。当与10％蔗糖调配且在加速条件下培育时，液体调配物中的25mg/mL REGN1979展现改良的稳定性(表3)。在45℃下培育28天之后，相比于无蔗糖的调配物中的HMW物种增加1.4％，含有10％蔗糖的调配物中增加0.6％。基于这些结果以及实例2中所论述的结果，选择蔗糖作为REGN1979 DP调配物的热稳定剂。
常常将有机共溶剂(如表面活性剂)添加至抗体调配物中以保护蛋白质免受搅动诱发的聚集影响。检验表面活性剂对25mg/mL REGN1979搅拌应力稳定性和热稳定性的影响。评估以下表面活性剂：在此实例中为0.1％的聚山梨醇酯20和0.1％的聚山梨醇酯80。搅拌应力稳定性和热稳定性研究的结果分别概述于表4和表5中。在不存在表面活性剂的情况下，通过涡旋120分钟进行搅拌时，REGN1979不稳定。在不存在表面活性剂的情况下，如通过SE-UPLC测定，调配物展现HMW物种增加1.5％(表4)。两种经测试的表面活性剂在类似程度上均能保护REGN1979不受搅拌诱发的不稳定性影响(表4)。此外，经测试的两种表面活性剂均在类似程度上降低了REGN1979的热稳定性，体现为HMW物种、LMW物种和碱性带电物种增加(表5)。基于这些结果以及实例2中所论述的结果，选择聚山梨醇酯80作为REGN1979 DP调配物的表面活性剂。
当在pH为5.8的组氨酸、聚山梨醇酯80和蔗糖存在下调配时，REGN1979展现最大的稳定性。在REGN1979液体调配物研发过程中鉴别的主要降解路径是高分子量和低分子量物种和电荷变体的形成。基于这些实验的结果和实例2中所论述的结果，含有pH为5.8的10mM组氨酸、0.1％(w/v)聚山梨醇酯80、10％(w/v)蔗糖和2-160mg/mL(例如2mg/ml、20mg/ml或100mg/ml)REGN1979的水性缓冲调配物是最稳定的。
表2：缓冲液和pH对在45℃下培育28天的15mg/mL REGN1979的稳定性的影响
Figure BDA0003741880490000431
a报导为相对于起始物质的纯度变化。在所有9种调配物中，起始物质(未培育)根据SE-UPLC含有≥93.3％原生峰且根据CEX-UPLC含有≥64.6％主峰
表3：蔗糖对在45℃下培育28天的25mg/mL REGN1979的稳定性的影响
Figure BDA0003741880490000432
a报导为相对于起始物质的纯度变化。在两种调配物中起始物质(未培育)根据SE-UPLC含有≥97.1％原生峰且根据CEX-UPLC含有≥65.4％主峰
表4：表面活性剂对搅拌后(涡旋120分钟)25mg/mL REGN1979的稳定性的影响
Figure BDA0003741880490000441
a报导为相对于起始物质的纯度变化。在所有3种调配物中起始物质(未培育)根据SE-UPLC含有≥97.1％原生峰且根据CEX-UPLC含有≥65.4％主峰
表5：表面活性剂对在45℃下培育28天的25mg/mL REGN1979的稳定性的影响
Figure BDA0003741880490000442
a报导为相对于起始物质的纯度变化。在所有3种调配物中起始物质(未培育)根据SE-UPLC含有≥97.1％原生峰且根据CEX-UPLC含有≥65.4％主峰
实例2：调配物的储存和应力稳定性
进行研究稳定性研究以评估REGN1979药品(DP)调配物的储存、加速和应力稳定性。通过将1.2mL或5.5mL药物物质分别填充至2mL或10mL 1型玻璃小瓶中，随后进行氮气上覆处理来产生用于研究稳定性研究的DP。将DP在若干高温条件下培育。选择这些加速条件以模拟DP在制造和处理期间可能要经历的条件，且阐明伴随氮气上覆的REGN1979 DP的降解路径。
储存稳定性：目前，对于2mL小瓶和10mL小瓶DP，可获得9个月的研究稳定性资料。对于两种DP演示物，REGN1979DP当在5℃下储存9个月时，其物理和化学稳定性是稳定的(表6和表7)。在所监测的属性中的任一者中未检测到物理或化学稳定性方面的明显变化。
加速稳定性：表8和表9分别提供了在加速条件下培育后的REGN1979 2mL小瓶和10mL小瓶DP的分析结果。对于两个DP演示物，当将蛋白质在25℃下培育一个月时，未观察到明显降解，其指示两种REGN1979 DP均可以在室温下短时间暴露。在45℃下培育28天之后，检测到HMW、LMW和电荷变体的明显形成。此加速条件的结果表明，HMW、LMW和电荷变体的形成是2mL小瓶和10mL小瓶DP的主要降解路径。
应力稳定性：表10和表11分别提供了REGN1979 2mL小瓶和10mL小瓶DP中的应力稳定性结果。当搅拌(在室温下涡旋)120分钟或进行8次冷冻/解冻循环(在-30℃冷冻)时，两种DP演示物在物理和化学上均稳定。在所监测的属性中的任一者中未检测到物理或化学稳定性方面的明显变化。
表6：研究在5℃下储存的REGN1979药品的稳定性
Figure BDA0003741880490000461
CEX，阳离子交换；DS，药物物质；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表7：研究在5℃下储存的REGN1979药品的稳定性
Figure BDA0003741880490000471
CEX，阳离子交换；DS，药物物质；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表8：研究REGN1979药品的稳定性-加速条件的影响
Figure BDA0003741880490000481
CEX，阳离子交换；DS，药物物质；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表9：研究REGN1979药品的稳定性-加速条件的影响
Figure BDA0003741880490000491
CEX，阳离子交换；DS，药物物质；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表10：研究REGN1979药品的稳定性-应力条件的影响
Figure BDA0003741880490000501
CEX，阳离子交换；DS，药物物质；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表11：研究REGN1979药品的稳定性-应力条件的影响
Figure BDA0003741880490000511
CEX，阳离子交换；DS，药物物质；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
储存、加速和应力稳定性研究的结果指示，REGN1979将在制造(调配、填充/修整和贴标签操作)期间稳定，且可耐受短暂暴露于室温且不损害物理或化学稳定性。
对含有2mg/ml、20mg/ml、100mg/ml和160mg/ml的双特异性抗体(REGN1979)和10mM组氨酸、10％w/v蔗糖、0.1％w/v聚山梨醇酯80且pH为5.8的调配物进行了额外的稳定性实验。这些结果展示于下表12至27中。NR＝未报导；ND＝过度降解而无法分析。
表12：研究在5℃下储存的2mg/mL REGN1979药品(5％顶隙O2)的稳定性
Figure BDA0003741880490000521
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表13：研究2mg/mL REGN1979药品(5％顶隙O2)的稳定性-加速条件的影响
Figure BDA0003741880490000531
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，TD，过度降解而无法分析；超高效液相色谱
表14：研究2mg/mL REGN1979药品(5％顶隙O2)的稳定性-应力条件的影响
Figure BDA0003741880490000541
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表15：研究在5℃下储存的20mg/mL REGN1979药品的稳定性-在10mL玻璃小瓶中填充4.5mL
Figure BDA0003741880490000551
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表16：研究20mg/mL REGN1979药品的稳定性-在10mL玻璃小瓶中填充4.5mL-加速条件的影响
Figure BDA0003741880490000561
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；TD，过度降解；UPLC，超高效液相色谱
表17：研究20mg/mL REGN1979药品的稳定性-在10mL玻璃小瓶中填充4.5mL-应力条件的影响
Figure BDA0003741880490000571
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；TD，过度降解；UPLC，超高效液相色谱
表18：研究在5℃下储存的160mg REGN1979药品的稳定性-在10mL玻璃小瓶中填充8.5mL
Figure BDA0003741880490000581
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表19：研究160mg REGN1979药品的稳定性-在10mL玻璃小瓶中填充8.5mL-加速条件的影响
Figure BDA0003741880490000591
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；TD，过度降解；UPLC，超高效液相色谱
表20：研究160mg REGN1979药品的稳定性-在10mL玻璃小瓶中填充8.5mL-应力条件的影响
Figure BDA0003741880490000601
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表21：研究在5℃下储存的100mg/mL REGN1979药品的稳定性
Figure BDA0003741880490000611
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表22：研究100mg/mL REGN1979药品的稳定性-加速条件的影响
Figure BDA0003741880490000621
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；TD，过度降解；UPLC，超高效液相色谱
表23：研究100mg/mL REGN1979药品的稳定性-应力条件的影响
Figure BDA0003741880490000631
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛细管等电聚焦；LMW，低分子量；MCE，微芯片毛细管电泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RH，相对湿度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表24：研究在5℃下储存的160mg/mL REGN1979药品的稳定性
Figure BDA0003741880490000641
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表25：研究经储存的160mg/mL REGN1979药品的稳定性-加速条件的影响
Figure BDA0003741880490000642
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表26：研究在5℃下储存的80mg/mL REGN1979药品的稳定性
Figure BDA0003741880490000651
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
表27：研究经储存的80mg/mL REGN1979药品的稳定性-加速条件的影响
Figure BDA0003741880490000652
CEX，阳离子交换；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相色谱
使用浓度为100mg/ml的双特异性抗体(REGN1979)的各种其它赋形剂进行了额外稳定性研究。下表28展示了各种调配物(F1-F13)。这些稳定性实验的结果展示于表29-41。在这些实验中的每一个中，容器/封闭件均为具有20mm经
Figure BDA0003741880490000661
涂布的West V2-F451W4432/50 GRY B2-TR塞的5mL 1型硼硅酸盐玻璃小瓶。
表28：经评估的额外调配物
调配物# 缓冲液 表面活性剂 稳定剂 pH
F1 10mM组氨酸 0.1％PS20 150mM ArgHCl 6.0
F2 10mM组氨酸 0.1％PS20 5％山梨醇 5.5
F3 10mM琥珀酸盐 0.1％PS20 150mM NaCl 6.0
F4 10mM乙酸盐 0.1％PS80 150mM ArgHCl 6.2
F5 10mM乙酸盐 0.1％泊洛沙姆88 5％山梨醇 5.7
F6 10mM组氨酸 0.1％PS80 150mM NaCl 5.5
F7 10mM组氨酸 0.1％PS80 5％山梨醇 6.0
F8 10mM琥珀酸盐 0.1％泊洛沙姆88 150mM ArgHCl 5.5
F9 10mM琥珀酸盐 0.1％PS20 5％山梨醇 6.5
F10 10mM乙酸盐 0.1％泊洛沙姆88 150mM NaCl 6.2
F11 10mM乙酸盐 0.1％PS20 10％蔗糖 5.2
F12 10mM组氨酸 0.1％泊洛沙姆88 10％蔗糖 6.5
F13 10mM琥珀酸盐 0.1％PS80 10％蔗糖 6.0
表29：研究在45℃下储存的调配物F1的稳定性
Figure BDA0003741880490000671
表30：研究在45℃下储存的调配物F2的稳定性
Figure BDA0003741880490000672
表31：研究在45℃下储存的调配物F3的稳定性
Figure BDA0003741880490000681
表32：研究在45℃下储存的调配物F4的稳定性
Figure BDA0003741880490000682
表33：研究在45℃下储存的调配物F5的稳定性
Figure BDA0003741880490000691
表34：研究在45℃下储存的调配物F6的稳定性
Figure BDA0003741880490000692
表35：研究在45℃下储存的调配物F7的稳定性
Figure BDA0003741880490000701
表36：研究在45℃下储存的调配物F8的稳定性
Figure BDA0003741880490000702
表37：研究在45℃下储存的调配物F9的稳定性
Figure BDA0003741880490000711
表38：研究在45℃下储存的调配物F10的稳定性
Figure BDA0003741880490000712
表39：研究在45℃下储存的调配物F11的稳定性
Figure BDA0003741880490000721
表40：研究在45℃下储存的调配物F12的稳定性
Figure BDA0003741880490000722
表41：研究在45℃下储存的调配物F13的稳定性
Figure BDA0003741880490000731
实例3：调配物的粘度
在20℃下使用Rheosense m-VROC毛细管粘度计(Rheosense,San Ramon,CA)进行粘度测量。在含有10mM组氨酸和5％蔗糖(pH 5.8)的调配物缓冲液中制备具有在79.9至184.9mg/ml范围内的不同REGN1979浓度的样品。在测量之前使用2μm离心旋转过滤器过滤所有样品。测量结果展示于以下表42中。
表42.粘度-蛋白质浓度
Figure BDA0003741880490000732
含有特定浓度的REGN1979、L-组氨酸(0.57mg/ml)、L-组氨酸一盐酸盐一水合物(1.33mg/ml)、蔗糖(100mg/ml)、聚山梨醇酯80(1mg/ml)和注射用水(USP)的药品被测定为具有下表43中所示的粘度。
表43.药品粘度
REGN1979浓度 粘度(cP)
2mg药品 2mg/ml 1.4
80mg和160mg药品 20mg/ml 1.7
200mg药品 100mg/ml 4.95
在含有多达154.8mg/ml抗体的调配物中观察到的低粘度(例如小于15cP)对用于预填充注射器或自动注射器是有利的。
本发明的范围不受本文所描述的具体实施例限制。实际上，根据前述描述，除本文所描述的修改之外，本发明的各种修改对本领域技术人员而言也会变得显而易见。此类修改意图属于随附权利要求书的范围内。
<110> Regeneron Pharmaceuticals, Inc.
<120> 含有抗CD20×抗CD3双特异性抗体的稳定调配物
<130> 10664WO01
<150> 62/946,207
<151> 2019-12-10
<160> 19
<170> FastSEQ for Windows Version 4.0
<210> 1
<211> 453
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗CD20 REGN1979重链
<400> 1
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Val Ile Ser Trp Asn Ser Asp Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met His Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Asn His Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Tyr Tyr Tyr Gln Tyr
100 105 110
Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala
115 120 125
Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser
130 135 140
Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe
145 150 155 160
Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly
165 170 175
Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu
180 185 190
Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr
195 200 205
Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg
210 215 220
Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro
225 230 235 240
Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser
325 330 335
Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Leu Gly Lys
450
<210> 2
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗CD3 REGN1979重链
<400> 2
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Asn Ser Gly Tyr Gly His Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ala Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val
195 200 205
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys
210 215 220
Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
Lys
<210> 3
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 共同REGN1979轻链
<400> 3
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Ile Asn Trp Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 4
<211> 127
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗CD20 REGN1979 HCVR
<400> 4
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Val Ile Ser Trp Asn Ser Asp Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met His Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Asn His Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Tyr Tyr Tyr Gln Tyr
100 105 110
Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 5
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗CD3 REGN1979 HCVR
<400> 5
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Asn Ser Gly Tyr Gly His Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ala Ser
115 120
<210> 6
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 共同REGN1979 LCVR
<400> 6
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Ile Asn Trp Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210> 7
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗CD20 REGN1979 HCDR1
<400> 7
Gly Phe Thr Phe Asn Asp Tyr Ala
1 5
<210> 8
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗CD20 REGN1979 HCDR2
<400> 8
Ile Ser Trp Asn Ser Asp Ser Ile
1 5
<210> 9
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗CD20 REGN1979 HCDR3
<400> 9
Ala Lys Asp Asn His Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Tyr Tyr Tyr Gln Tyr
1 5 10 15
Gly Met Asp Val
20
<210> 10
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗CD3 REGN1979 HCDR1
<400> 10
Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr Thr
1 5
<210> 11
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗CD3 REGN1979 HCDR2
<400> 11
Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile
1 5
<210> 12
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗CD3 REGN1979 HCDR3
<400> 12
Ala Lys Asp Asn Ser Gly Tyr Gly His Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
1 5 10 15
<210> 13
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 共同REGN1979 LCDR1
<400> 13
Gln Ser Val Ser Ser Asn
1 5
<210> 14
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 共同REGN1979 LCDR2
<400> 14
Gly Ala Ser
1
<210> 15
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 共同REGN1979 LCDR3
<400> 15
Gln His Tyr Ile Asn Trp Pro Leu Thr
1 5
<210> 16
<211> 326
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> IgG4重链恒定区
<400> 16
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 17
<211> 326
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有H435R/Y436F修饰的IgG4重链恒定区
<400> 17
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
115 120 125
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
130 135 140
Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
145 150 155 160
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
165 170 175
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
180 185 190
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
195 200 205
Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
210 215 220
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn
225 230 235 240
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
245 250 255
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
260 265 270
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg
275 280 285
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys
290 295 300
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu
305 310 315 320
Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 18
<211> 329
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> IgG1重链恒定区
<400> 18
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
115 120 125
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
130 135 140
Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr
145 150 155 160
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
165 170 175
Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
180 185 190
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
195 200 205
Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln
210 215 220
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu
225 230 235 240
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
245 250 255
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn
260 265 270
Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
275 280 285
Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val
290 295 300
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln
305 310 315 320
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325
<210> 19
<211> 329
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 具有H435R/Y436F修饰的IgG1重链恒定区
<400> 19
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
115 120 125
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
130 135 140
Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr
145 150 155 160
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
165 170 175
Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
180 185 190
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
195 200 205
Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln
210 215 220
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu
225 230 235 240
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
245 250 255
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn
260 265 270
Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
275 280 285
Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val
290 295 300
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln
305 310 315 320
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325

Claims (121)

1.一种稳定液体药物调配物，其包含：
(a)双特异性抗体，其包含特异性结合至人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合至人类CD3的第二抗原结合域，其中所述第一抗原结合域包含重链可变区(HCVR)中所含的三个重链互补决定区(CDR)(A1-HCDR1、A1-HCDR2和A1-HCDR3)和轻链可变区(LCVR)中所含的三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，且所述第二抗原结合域包含重链可变区(HCVR)中所含的三个重链CDR(A2-HCDR1、A2-HCDR2和A2-HCDR3)和轻链可变区(LCVR)中所含的三个轻链CDR(LCDR1、LCDR2和LCDR3)，其中A1-HCDR1、A1-HCDR2和A1-HCDR3分别包含SEQ ID NO:7、8和9的氨基酸序列，A2-HCDR1、A2-HCDR2和A2-HCDR3分别包含氨基酸SEQ ID NO:10、11和12的氨基酸序列，且LCDR1、LCDR2和LCDR3分别包含SEQ ID NO:13、14和15的氨基酸序列；
(b)包含组氨酸的缓冲液；
(c)包含聚山梨醇酯的有机共溶剂；和
(d)包含糖的稳定剂；
其中所述调配物的pH为5.8±0.3。
2.根据权利要求1所述的药物调配物，其中所述抗体浓度为1mg/ml±0.1mg/ml至200mg/ml±20mg/mL。
3.根据权利要求2所述的药物调配物，其中所述抗体浓度为2mg/ml±0.2mg/ml。
4.根据权利要求2所述的药物调配物，其中所述抗体浓度为20mg/ml±2mg/mL。
5.根据权利要求2所述的药物调配物，其中所述抗体浓度为80mg/ml±8mg/ml。
6.根据权利要求2所述的药物调配物，其中所述抗体浓度为100mg/ml±10mg/ml。
7.根据权利要求2所述的药物调配物，其中所述抗体浓度为160mg/ml±16mg/ml。
8.根据权利要求2所述的药物调配物，其中所述抗体浓度为约2mg/ml至约100mg/ml。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的药物调配物，其中所述组氨酸缓冲液浓度为5mM±1mM至15mM±3mM。
10.根据权利要求9所述的药物调配物，其中所述组氨酸缓冲液浓度为10mM±1mM。
11.根据权利要求10所述的药物调配物，其中所述组氨酸缓冲液包含L-组氨酸和L-组氨酸一盐酸盐一水合物。
12.根据权利要求11所述的药物调配物，其中所述组氨酸缓冲液包含0.57±0.05mg/ml的L-组氨酸和1.33±0.13mg/ml的L-组氨酸一盐酸盐一水合物。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的药物调配物，其中所述聚山梨醇酯浓度为0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v。
14.根据权利要求13所述的药物调配物，其中所述聚山梨醇酯浓度为0.1％±0.05％w/v。
15.根据权利要求13所述的药物调配物，其中所述聚山梨醇酯浓度为0.1％±0.01％w/v。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的药物调配物，其中所述聚山梨醇酯为聚山梨醇酯80。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的药物调配物，其中所述糖为蔗糖。
18.根据权利要求17所述的药物调配物，其中所述蔗糖浓度为5％±1％至20％±4％w/v。
19.根据权利要求18所述的药物调配物，其中所述蔗糖浓度为8％±0.5％至12％±0.5％w/v。
20.根据权利要求19所述的药物调配物，其中所述蔗糖浓度为10％±1％w/v。
21.根据权利要求1所述的药物调配物，其包含：
(a)2mg/ml±0.2mg/ml抗体，
(b)5mM±1mM至15mM±3mM组氨酸缓冲液，
(c)0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v聚山梨醇酯，和
(d)5％±1％至20％±4％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
22.根据权利要求21所述的药物调配物，其包含：
(a)2mg/ml±0.2mg/ml抗体，
(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，
(c)0.1％±0.05％w/v聚山梨醇酯，和
(d)10％±1％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
23.根据权利要求22所述的药物调配物，其包含：
(a)2mg/ml±0.2mg/ml抗体，
(b)0.57mg/ml±0.05mg/ml L-组氨酸，
(c)1.33mg/ml±0.13mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，
(d)0.1％±0.05％w/v聚山梨醇酯，和
(e)10％±1％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
24.根据权利要求1所述的药物调配物，其包含：
(a)20mg/ml±2mg/ml抗体，
(b)5mM±1mM至15mM±3mM组氨酸缓冲液，
(c)0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v聚山梨醇酯，和
(d)5％±1％至20％±4％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
25.根据权利要求24所述的药物调配物，其包含：
(a)20mg/ml±2mg/ml抗体，
(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，
(c)0.1％±0.05％w/v聚山梨醇酯，和
(d)10％±1％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
26.根据权利要求25所述的药物调配物，其包含：
(a)20mg/ml±2mg/ml抗体，
(b)0.57mg/ml±0.05mg/ml L-组氨酸，
(c)1.33mg/ml±0.13mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，
(d)0.1％±0.05％w/v聚山梨醇酯，和
(e)10％±1％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
27.根据权利要求1所述的药物调配物，其包含：
(a)80mg/ml±8mg/ml抗体，
(b)5mM±1mM至15mM±3mM组氨酸缓冲液，
(c)0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v聚山梨醇酯，和
(d)5％±1％至20％±4％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
28.根据权利要求27所述的药物调配物，其包含：
(a)80mg/ml±8mg/ml抗体，
(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，
(c)0.1％±0.05％w/v聚山梨醇酯，和
(d)10％±1％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
29.根据权利要求28所述的药物调配物，其包含：
(a)80mg/ml±8mg/ml抗体，
(b)0.57mg/ml±0.05mg/ml L-组氨酸，
(c)1.33mg/ml±0.13mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，
(d)0.1％±0.05％w/v聚山梨醇酯，和
(e)10％±1％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
30.根据权利要求1所述的药物调配物，其包含：
(a)100mg/ml±10mg/ml抗体，
(b)5mM±1mM至15mM±3mM组氨酸缓冲液，
(c)0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v聚山梨醇酯，和
(d)5％±1％至20％±4％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
31.根据权利要求30所述的药物调配物，其包含：
(a)100mg/ml±10mg/ml抗体，
(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，
(c)0.1％±0.05％w/v聚山梨醇酯，和
(d)10％±1％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
32.根据权利要求31所述的药物调配物，其包含：
(a)100mg/ml±10mg/ml抗体，
(b)0.57mg/ml±0.05mg/ml L-组氨酸，
(c)1.33mg/ml±0.13mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，
(d)0.1％±0.05％w/v聚山梨醇酯，和
(e)10％±1％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
33.根据权利要求1所述的药物调配物，其包含：
(a)160mg/ml±16mg/ml抗体，
(b)5mM±1mM至15mM±3mM组氨酸缓冲液，
(c)0.01％±0.005％至0.5％±0.25％w/v聚山梨醇酯，和
(d)5％±1％至20％±4％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
34.根据权利要求33所述的药物调配物，其包含：
(a)160mg/ml±16mg/ml抗体，
(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，
(c)0.1％±0.05％w/v聚山梨醇酯，和
(d)10％±1％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
35.根据权利要求34所述的药物调配物，其包含：
(a)160mg/ml±16mg/ml抗体，
(b)0.57mg/ml±0.05mg/ml L-组氨酸，
(c)1.33mg/ml±0.13mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，
(d)0.1％±0.05％w/v聚山梨醇酯，和
(e)10％±1％w/v蔗糖，
pH为5.8±0.3。
36.根据权利要求21至35中任一项所述的药物调配物，其中所述聚山梨醇酯为聚山梨醇酯80。
37.根据权利要求1至36中任一项所述的药物调配物，其中如通过尺寸排阻-超高效液相色谱(SE-UPLC)测定，在45℃下储存1个月后，至少90％的所述抗体具有原生构象。
38.根据权利要求37所述的药物调配物，其中如通过SE-UPLC测定，在45℃下储存1个月后，至少93％的所述抗体具有原生构象。
39.根据权利要求38所述的药物调配物，其中如通过SE-UPLC测定，在45℃下储存1个月后，至少95％的所述抗体具有原生构象。
40.根据权利要求1至39中任一项所述的药物调配物，其中如通过SE-UPLC测定，在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，至少95％的所述抗体具有原生构象。
41.根据权利要求40所述的药物调配物，其中如通过SE-UPLC测定，在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，至少97％的所述抗体具有原生构象。
42.根据权利要求1至41中任一项所述的药物调配物，其中如通过SE-UPLC测定，在5℃下储存3个月后，至少95％的所述抗体具有原生构象。
43.根据权利要求42所述的药物调配物，其中如通过SE-UPLC测定，在5℃下储存3个月后，至少98％的所述抗体具有原生构象。
44.根据权利要求1至43中任一项所述的药物调配物，其中如通过SE-UPLC测定，在45℃下储存1个月后，所述调配物含有不超过6％的高分子量(HMW)物种。
45.根据权利要求44所述的药物调配物，其中如通过SE-UPLC测定，在45℃下储存1个月后，所述调配物含有不超过5.6％的HMW物种。
46.根据权利要求1至45中任一项所述的药物调配物，其中如通过SE-UPLC测定，在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，所述调配物含有不超过2％的HMW物种。
47.根据权利要求46所述的药物调配物，其中如通过SE-UPLC测定，在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，所述调配物含有不超过1％的HMW物种。
48.根据权利要求1至47中任一项所述的药物调配物，其中如通过SE-UPLC测定，在5℃下储存3个月后，所述调配物含有不超过1.5％的HMW物种。
49.根据权利要求48所述的药物调配物，其中如通过SE-UPLC测定，在5℃下储存9个月后，所述调配物含有不超过1％的HMW物种。
50.根据权利要求1至49中任一项所述的药物调配物，其中所述第一抗原结合域包含与SEQ ID NO:4的氨基酸序列具有至少90％一致性的HCVR和与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少90％一致性的LCVR，且所述第二抗原结合域包含与SEQ ID NO:5的氨基酸序列具有至少90％一致性的HCVR和与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少90％一致性的LCVR。
51.根据权利要求50所述的药物调配物，其中所述第一抗原结合域包含与SEQ ID NO:4的氨基酸序列具有至少95％一致性的HCVR和与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少95％一致性的LCVR，且所述第二抗原结合域包含与SEQ ID NO:5的氨基酸序列具有至少95％一致性的HCVR和与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少95％一致性的LCVR。
52.根据权利要求51所述的药物调配物，其中所述第一抗原结合域包含与SEQ ID NO:4的氨基酸序列具有至少99％一致性的HCVR和与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少99％一致性的LCVR，且所述第二抗原结合域包含与SEQ ID NO:5的氨基酸序列具有至少99％一致性的HCVR和与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少99％一致性的LCVR。
53.根据权利要求1至52中任一项所述的药物调配物，其中所述第一抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR。
54.根据权利要求53所述的药物调配物，其中所述抗体包含分别附接至所述第一抗原结合域和所述第二抗原结合域中的每一个的所述HCVR的人类IgG重链恒定区。
55.根据权利要求54所述的药物调配物，其中所述重链恒定区是同型IgG1。
56.根据权利要求54所述的药物调配物，其中所述重链恒定区是同型IgG4。
57.根据权利要求54至56中任一项所述的药物调配物，其中附接至所述第一抗原结合域的所述HCVR的所述重链恒定区或附接至所述第二抗原结合域的所述HCVR的所述重链恒定区(但两者并非同时)含有相对于未经修饰的相同同型的重链减少蛋白A结合的氨基酸修饰。
58.根据权利要求57所述的药物调配物，其中所述修饰在同型IgG1或IgG4的重链中包含H435R取代(EU编号)。
59.根据权利要求57所述的药物调配物，其中所述修饰在同型IgG1或IgG4的重链中包含H435R取代和Y436F取代(EU编号)。
60.根据权利要求54至56中任一项所述的药物调配物，其中所述抗体包含重链恒定区，所述重链恒定区包含选自由SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:19组成的组的氨基酸序列。
61.根据权利要求60所述的药物调配物，其中所述抗体包含：包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列的重链恒定区和包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列的重链恒定区。
62.根据权利要求60所述的药物调配物，其中所述抗体包含：包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列的重链恒定区和包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列的重链恒定区。
63.根据权利要求53所述的药物调配物，其中所述抗体包含含有所述第一抗原结合域的所述HCVR的第一重链和含有所述第二抗原结合域的所述HCVR的第二重链，其中所述第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的残基1-452，且所述第二重链包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的残基1-448。
64.根据权利要求63所述的药物调配物，其中所述抗体包含含有所述第一和第二抗原结合域的所述LCVR的共同轻链，其中所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列。
65.一种药物调配物，其包含：
(a)2mg/ml±0.2mg/ml的双特异性抗体，其包含特异性结合至人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合至人类CD3的第二抗原结合域，其中所述第一抗原结合域包含：
包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；
(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，pH为5.8±0.2；
(c)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80；和
(d)10％±1％w/v蔗糖。
66.根据权利要求65所述的药物调配物，其由以下组成：(a)2mg/ml±0.2mg/ml的所述抗体，(b)3.65mM±0.2mM L-组氨酸，(c)6.35mM±0.2mM L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80，和(e)10％±1％w/v蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。
67.根据权利要求65所述的药物调配物，其由以下组成：(a)2mg/ml±0.2mg/ml的所述抗体，(b)0.57mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)1mg/ml±0.1mg/ml聚山梨醇酯80，和(e)100mg/ml±10mg/ml蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。
68.一种药物调配物，其包含：
(a)20mg/ml±2mg/ml的双特异性抗体，其包含特异性结合至人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合至人类CD3的第二抗原结合域，其中所述第一抗原结合域包含：
包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；
(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，pH为5.8±0.2；
(c)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80；和
(d)10％±1％w/v蔗糖。
69.根据权利要求68所述的药物调配物，其由以下组成：(a)20mg/ml±2mg/ml的所述抗体，(b)3.65mM±0.2mM L-组氨酸，(c)6.35mM±0.2mM L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80，和(e)10％±1％w/v蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。
70.根据权利要求68所述的药物调配物，其由以下组成：(a)20mg/ml±2mg/ml的所述抗体，(b)0.57mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)1mg/ml±0.1mg/ml聚山梨醇酯80，和(e)100mg/ml±10mg/ml蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。
71.一种药物调配物，其包含：
(a)100mg/ml±10mg/ml的双特异性抗体，其包含特异性结合至人类CD20的第一抗原结合域和特异性结合至人类CD3的第二抗原结合域，其中所述第一抗原结合域包含：包含SEQID NO:4的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR，且所述第二抗原结合域包含：包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列的HCVR和包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列的LCVR；
(b)10mM±1mM组氨酸缓冲液，pH为5.8±0.2；
(c)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80；和
(d)10％±1％w/v蔗糖。
72.根据权利要求71所述的药物调配物，其由以下组成：(a)100mg/ml±10mg/ml的所述抗体，(b)3.65mM±0.2mM L-组氨酸，(c)6.35mM±0.2mM L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)0.1％±0.01％w/v聚山梨醇酯80，和(e)10％±1％w/v蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。
73.根据权利要求71所述的药物调配物，其由以下组成：(a)100mg/ml±10mg/ml的所述抗体，(b)0.57mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸，(c)1.33mg/ml±0.1mg/ml L-组氨酸一盐酸盐一水合物，(d)1mg/ml±0.1mg/ml聚山梨醇酯80，和(e)100mg/ml±10mg/ml蔗糖，在pH为5.8±0.2的水中。
74.根据权利要求65至73中任一项所述的药物调配物，其中所述抗体包含分别附接至所述第一抗原结合域和所述第二抗原结合域中的每一个的所述HCVR的人类IgG重链恒定区。
75.根据权利要求74所述的药物调配物，其中所述重链恒定区是同型IgG1。
76.根据权利要求74所述的药物调配物，其中所述重链恒定区是同型IgG4。
77.根据权利要求74至76中任一项所述的药物调配物，其中附接至所述第一抗原结合域的所述HCVR的所述重链恒定区或附接至所述第二抗原结合域的所述HCVR的所述重链恒定区(但两者并非同时)含有相对于未经修饰的相同同型的重链减少蛋白A结合的氨基酸修饰。
78.根据权利要求77所述的药物调配物，其中所述修饰在同型IgG1或IgG4的重链中包含H435R取代(EU编号)。
79.根据权利要求77所述的药物调配物，其中所述修饰在同型IgG1或IgG4的重链中包含H435R取代和Y436F取代(EU编号)。
80.根据权利要求74至76中任一项所述的药物调配物，其中所述抗体包含重链恒定区，所述重链恒定区包含选自由SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:19组成的组的氨基酸序列。
81.根据权利要求80所述的药物调配物，其中所述抗体包含：包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列的重链恒定区和包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列的重链恒定区。
82.根据权利要求80所述的药物调配物，其中所述抗体包含：包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列的重链恒定区和包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列的重链恒定区。
83.根据权利要求65至73中任一项所述的药物调配物，其中所述抗体包含含有所述第一抗原结合域的所述HCVR的第一重链和含有所述第二抗原结合域的所述HCVR的第二重链，其中所述第一重链包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列的残基1-452，且所述第二重链包含SEQID NO:2的氨基酸序列的残基1-448。
84.根据权利要求83所述的药物调配物，其中所述抗体包含含有所述第一和第二抗原结合域的所述LCVR的共同轻链，其中所述共同轻链包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列。
85.根据权利要求65至84中任一项所述的药物调配物，其中：(a)在45℃下储存1个月后，至少90％的所述抗体具有原生构象；(b)在45℃下储存1个月后，至少93％的所述抗体具有原生构象；(c)在45℃下储存1个月后，至少95％的所述抗体具有原生构象；(d)在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，至少95％的所述抗体具有原生构象；(e)在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，至少97％的所述抗体具有原生构象；(f)在5℃下储存3个月后，至少95％的所述抗体具有原生构象；(g)在5℃下储存3个月后，至少98％的所述抗体具有原生构象；(h)在45℃下储存1个月后，所述调配物含有不超过6％的高分子量(HMW)物种；(i)在45℃下储存1个月后，所述调配物含有不超过5.6％的HMW物种；(j)在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，所述调配物含有不超过2％的HMW物种；(k)在25℃和60％相对湿度下储存3个月后，所述调配物含有不超过1％的HMW物种；(l)在5℃下储存3个月后，所述调配物含有不超过1.5％的HMW物种；和/或(m)在5℃下储存9个月后，所述调配物含有不超过1％的HMW物种；如通过SE-UPLC测定。
86.一种药物组合物，其中所述组合物包含根据权利要求1至85中任一项的药物调配物，且所述组合物容纳于容器中。
87.根据权利要求86所述的药物组合物，其中所述容器为小瓶。
88.根据权利要求87所述的药物组合物，其中所述小瓶为2ml、5ml、10ml或20ml的1型透明玻璃小瓶。
89.根据权利要求86所述的药物组合物，其中所述容器为注射器。
90.根据权利要求89所述的药物组合物，其中所述注射器为低钨玻璃。
91.根据权利要求86所述的药物组合物，其中所述容器为预填充注射器。
92.根据权利要求86所述的药物组合物，其容纳于自动注射器中。
93.根据权利要求87至92中任一项所述的药物组合物，其中所述容器包含包括气体的顶隙，其中所述气体包含小于5体积％的氧气。
94.根据权利要求93所述的药物组合物，其中所述气体包含小于1体积％的氧气，或不超过0.1体积％的氧气。
95.一种试剂盒，其包含(i)含有包含根据权利要求1至85中任一项所述的药物调配物的组合物的容器，和使用所述组合物的说明书。
96.根据权利要求95所述的试剂盒，其中所述容器为玻璃小瓶。
97.根据权利要求95所述的试剂盒，其中所述容器为预填充注射器。
98.根据权利要求95所述的试剂盒，其中所述容器为自动注射器。
99.根据权利要求95所述的试剂盒，其中所述说明书叙述所述组合物的皮下施用。
100.根据权利要求95所述的试剂盒，其中所述说明书叙述所述组合物的静脉内施用。
101.根据权利要求95至100中任一项所述的试剂盒，其中所述容器包含包括气体的顶隙，其中所述气体包含小于5体积％的氧气。
102.根据权利要求101所述的试剂盒，其中所述气体包含小于1体积％的氧气，或不超过0.1体积％的氧气。
103.一种包含根据权利要求1至85中任一项所述的药物调配物的单位剂型，其中所述抗体以0.1mg至500mg的量存在。
104.根据权利要求103所述的单位剂型，其中所述抗体以2至2.5mg的量存在。
105.根据权利要求103所述的单位剂型，其中所述抗体以10至11mg的量存在。
106.根据权利要求103所述的单位剂型，其中所述抗体以20至25mg的量存在。
107.根据权利要求103所述的单位剂型，其中所述抗体以80至90mg的量存在。
108.根据权利要求103所述的单位剂型，其中所述抗体以100至125mg的量存在。
109.根据权利要求103所述的单位剂型，其中所述抗体以160至180mg的量存在。
110.根据权利要求103所述的单位剂型，其中所述抗体以190至210mg的量存在。
111.根据权利要求103所述的单位剂型，其中所述抗体以320至360mg的量存在。
112.根据权利要求103所述的单位剂型，其为玻璃小瓶。
113.根据权利要求103所述的单位剂型，其为预填充注射器。
114.根据权利要求103所述的单位剂型，其为自动注射器。
115.根据权利要求112所述的单位剂型，其中所述玻璃小瓶包含包括气体的顶隙，其中所述气体包含小于5体积％的氧气。
116.根据权利要求115所述的单位剂型，其中所述气体包含小于1体积％的氧气，或不超过0.1体积％的氧气。
117.一种含有药物组合物的容器，其中所述组合物包含根据权利要求1至85中任一项所述的药物调配物。
118.根据权利要求117所述的容器，其为注射器。
119.根据权利要求117所述的容器，其为预填充注射器。
120.根据权利要求117所述的容器，其为自动注射器。
121.根据权利要求117所述的容器，其为玻璃小瓶。
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