EA045327B1 - Композиции ферментов с уменьшенным вирусным и микробным загрязнением - Google Patents
Композиции ферментов с уменьшенным вирусным и микробным загрязнением Download PDFInfo
- Publication number
- EA045327B1 EA045327B1 EA202291942 EA045327B1 EA 045327 B1 EA045327 B1 EA 045327B1 EA 202291942 EA202291942 EA 202291942 EA 045327 B1 EA045327 B1 EA 045327B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- tissue
- enzyme preparation
- pancreatin
- irradiated
- electron beam
- Prior art date
Links
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims description 200
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims description 200
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 title claims description 70
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 47
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 title description 24
- 238000011109 contamination Methods 0.000 title description 22
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 title description 22
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 199
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 172
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 125
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 claims description 115
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 claims description 115
- 238000010894 electron beam technology Methods 0.000 claims description 91
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 65
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 61
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 54
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims description 53
- 210000004923 pancreatic tissue Anatomy 0.000 claims description 53
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 claims description 37
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 claims description 37
- 235000019626 lipase activity Nutrition 0.000 claims description 32
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 21
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 21
- 241000702619 Porcine parvovirus Species 0.000 claims description 19
- 201000007089 exocrine pancreatic insufficiency Diseases 0.000 claims description 17
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 claims description 13
- 208000035404 Autolysis Diseases 0.000 claims description 11
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 claims description 11
- 230000028043 self proteolysis Effects 0.000 claims description 11
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 claims description 9
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 claims 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 66
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 63
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 50
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 32
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 32
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 32
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 32
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 31
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 26
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 23
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 23
- 239000000047 product Substances 0.000 description 23
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 21
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 20
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 20
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 20
- 235000019422 polyvinyl alcohol Nutrition 0.000 description 20
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 19
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 19
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 19
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 19
- 208000022133 pulmonary valve agenesis Diseases 0.000 description 19
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 19
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 18
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 16
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 16
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 15
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 15
- -1 micropellets Substances 0.000 description 15
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 15
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 14
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 13
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 13
- 244000309711 non-enveloped viruses Species 0.000 description 13
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 12
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 12
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 12
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 12
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 12
- 108010067035 Pancrelipase Proteins 0.000 description 11
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 11
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 11
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 11
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 10
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 10
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 9
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- XRHVZWWRFMCBAZ-UHFFFAOYSA-L Endothal-disodium Chemical compound [Na+].[Na+].C1CC2C(C([O-])=O)C(C(=O)[O-])C1O2 XRHVZWWRFMCBAZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 229940045258 pancrelipase Drugs 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 7
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 7
- DOOTYTYQINUNNV-UHFFFAOYSA-N Triethyl citrate Chemical compound CCOC(=O)CC(O)(C(=O)OCC)CC(=O)OCC DOOTYTYQINUNNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 7
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 7
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 7
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 7
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 7
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- 239000001069 triethyl citrate Substances 0.000 description 7
- VMYFZRTXGLUXMZ-UHFFFAOYSA-N triethyl citrate Natural products CCOC(=O)C(O)(C(=O)OCC)C(=O)OCC VMYFZRTXGLUXMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 235000013769 triethyl citrate Nutrition 0.000 description 7
- 208000000668 Chronic Pancreatitis Diseases 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 6
- 206010033649 Pancreatitis chronic Diseases 0.000 description 6
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 6
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 6
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 6
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 6
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 5
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 5
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 5
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 5
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 5
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 5
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 5
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 5
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 5
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 5
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 102100032533 ADP/ATP translocase 1 Human genes 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000796932 Homo sapiens ADP/ATP translocase 1 Proteins 0.000 description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 4
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 4
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 4
- 229940008099 dimethicone Drugs 0.000 description 4
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 description 4
- 235000013870 dimethyl polysiloxane Nutrition 0.000 description 4
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 4
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 4
- 239000012569 microbial contaminant Substances 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 206010073306 Exposure to radiation Diseases 0.000 description 3
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 3
- 208000035467 Pancreatic insufficiency Diseases 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940025131 amylases Drugs 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 3
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 3
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 229920003132 hydroxypropyl methylcellulose phthalate Polymers 0.000 description 3
- 239000012729 immediate-release (IR) formulation Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 3
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N phthalic acid Chemical class OC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 3
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 229920000623 Cellulose acetate phthalate Polymers 0.000 description 2
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 241000714201 Feline calicivirus Species 0.000 description 2
- 241000724675 Hepatitis E virus Species 0.000 description 2
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 2
- 241001480512 Mammalian orthoreovirus 3 Species 0.000 description 2
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 2
- 108010040806 Prolipase Proteins 0.000 description 2
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 2
- 206010041969 Steatorrhoea Diseases 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 231100000987 absorbed dose Toxicity 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 2
- 229940081734 cellulose acetate phthalate Drugs 0.000 description 2
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 2
- 238000005202 decontamination Methods 0.000 description 2
- 230000003588 decontaminative effect Effects 0.000 description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- NOPFSRXAKWQILS-UHFFFAOYSA-N docosan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO NOPFSRXAKWQILS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002641 enzyme replacement therapy Methods 0.000 description 2
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000011902 gastrointestinal surgery Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- IRHTZOCLLONTOC-UHFFFAOYSA-N hexacosan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO IRHTZOCLLONTOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001903 high density polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 239000004700 high-density polyethylene Substances 0.000 description 2
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 229940031704 hydroxypropyl methylcellulose phthalate Drugs 0.000 description 2
- 229920000639 hydroxypropylmethylcellulose acetate succinate Polymers 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- GOQYKNQRPGWPLP-UHFFFAOYSA-N n-heptadecyl alcohol Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCO GOQYKNQRPGWPLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- XGFDHKJUZCCPKQ-UHFFFAOYSA-N nonadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCO XGFDHKJUZCCPKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 2
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 2
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 2
- REIUXOLGHVXAEO-UHFFFAOYSA-N pentadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCO REIUXOLGHVXAEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229940057838 polyethylene glycol 4000 Drugs 0.000 description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 2
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 229960004029 silicic acid Drugs 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 208000001162 steatorrhea Diseases 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- HLZKNKRTKFSKGZ-UHFFFAOYSA-N tetradecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCO HLZKNKRTKFSKGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- URAYPUMNDPQOKB-UHFFFAOYSA-N triacetin Chemical compound CC(=O)OCC(OC(C)=O)COC(C)=O URAYPUMNDPQOKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- REZQBEBOWJAQKS-UHFFFAOYSA-N triacontan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO REZQBEBOWJAQKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 210000002438 upper gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 2
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- XFRVVPUIAFSTFO-UHFFFAOYSA-N 1-Tridecanol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCO XFRVVPUIAFSTFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- QZCLKYGREBVARF-UHFFFAOYSA-N Acetyl tributyl citrate Chemical compound CCCCOC(=O)CC(C(=O)OCCCC)(OC(C)=O)CC(=O)OCCCC QZCLKYGREBVARF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002012 Aerosil® Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 206010056375 Bile duct obstruction Diseases 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 206010008635 Cholestasis Diseases 0.000 description 1
- 241000206575 Chondrus crispus Species 0.000 description 1
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- PYGXAGIECVVIOZ-UHFFFAOYSA-N Dibutyl decanedioate Chemical compound CCCCOC(=O)CCCCCCCCC(=O)OCCCC PYGXAGIECVVIOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282324 Felis Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 1
- 102100029199 Iduronate 2-sulfatase Human genes 0.000 description 1
- 101710096421 Iduronate 2-sulfatase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010025476 Malabsorption Diseases 0.000 description 1
- 208000004155 Malabsorption Syndromes Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 229920002274 Nalgene Polymers 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010052765 Pancreatic duct obstruction Diseases 0.000 description 1
- 208000008071 Parvoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010057343 Parvovirus infection Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 1
- 235000014676 Phragmites communis Nutrition 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000004353 Polyethylene glycol 8000 Substances 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000701811 Reindeer papillomavirus Species 0.000 description 1
- 241000702247 Reoviridae Species 0.000 description 1
- 229920001800 Shellac Polymers 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- MKRNVBXERAPZOP-UHFFFAOYSA-N Starch acetate Chemical compound O1C(CO)C(OC)C(O)C(O)C1OCC1C(OC2C(C(O)C(OC)C(CO)O2)OC(C)=O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(C)C(O)C2O)CO)O1 MKRNVBXERAPZOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 102000005262 Sulfatase Human genes 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IYKJEILNJZQJPU-UHFFFAOYSA-N acetic acid;butanedioic acid Chemical compound CC(O)=O.OC(=O)CCC(O)=O IYKJEILNJZQJPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000005840 alpha-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010030291 alpha-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000005250 beta ray Effects 0.000 description 1
- 230000002457 bidirectional effect Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 208000024330 bloating Diseases 0.000 description 1
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 description 1
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 235000010410 calcium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000648 calcium alginate Substances 0.000 description 1
- 229960002681 calcium alginate Drugs 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- OKHHGHGGPDJQHR-YMOPUZKJSA-L calcium;(2s,3s,4s,5s,6r)-6-[(2r,3s,4r,5s,6r)-2-carboxy-6-[(2r,3s,4r,5s,6r)-2-carboxylato-4,5,6-trihydroxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylate Chemical compound [Ca+2].O[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H](C([O-])=O)[C@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O2)C([O-])=O)O)[C@H](C(O)=O)O1 OKHHGHGGPDJQHR-YMOPUZKJSA-L 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 229960001631 carbomer Drugs 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000012930 cell culture fluid Substances 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 238000010293 colony formation assay Methods 0.000 description 1
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 229920006037 cross link polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- LRCFXGAMWKDGLA-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;hydrate Chemical compound O.O=[Si]=O LRCFXGAMWKDGLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AMTWCFIAVKBGOD-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;methoxy-dimethyl-trimethylsilyloxysilane Chemical compound O=[Si]=O.CO[Si](C)(C)O[Si](C)(C)C AMTWCFIAVKBGOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 229960000735 docosanol Drugs 0.000 description 1
- LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N dodecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCO LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 235000004626 essential fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000020774 essential nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 206010016766 flatulence Diseases 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000005251 gamma ray Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 239000001087 glyceryl triacetate Substances 0.000 description 1
- 235000013773 glyceryl triacetate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003943 hypromellose Drugs 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 239000005414 inactive ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000012770 industrial material Substances 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000829 kaolin Drugs 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003367 kinetic assay Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229960001375 lactose Drugs 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000004199 lung function Effects 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 1
- 238000003913 materials processing Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 229960002900 methylcellulose Drugs 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 229940043348 myristyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 235000003715 nutritional status Nutrition 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 229920000620 organic polymer Polymers 0.000 description 1
- 210000000277 pancreatic duct Anatomy 0.000 description 1
- 210000001819 pancreatic juice Anatomy 0.000 description 1
- 238000010951 particle size reduction Methods 0.000 description 1
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 229960000292 pectin Drugs 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L phthalate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C([O-])=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000003022 phthalic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229940093430 polyethylene glycol 1500 Drugs 0.000 description 1
- 229940113125 polyethylene glycol 3000 Drugs 0.000 description 1
- 229940093429 polyethylene glycol 6000 Drugs 0.000 description 1
- 229940085678 polyethylene glycol 8000 Drugs 0.000 description 1
- 235000019446 polyethylene glycol 8000 Nutrition 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920006327 polystyrene foam Polymers 0.000 description 1
- 229940100467 polyvinyl acetate phthalate Drugs 0.000 description 1
- 229940068984 polyvinyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 235000003784 poor nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 229940088417 precipitated calcium carbonate Drugs 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 208000037921 secondary disease Diseases 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000004208 shellac Substances 0.000 description 1
- 229940113147 shellac Drugs 0.000 description 1
- 235000013874 shellac Nutrition 0.000 description 1
- ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N shellac Chemical compound OCCCCCC(O)C(O)CCCCCCCC(O)=O.C1C23[C@H](C(O)=O)CCC2[C@](C)(CO)[C@@H]1C(C(O)=O)=C[C@@H]3O ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N 0.000 description 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 229940083037 simethicone Drugs 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 229940080313 sodium starch Drugs 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 108060007951 sulfatase Proteins 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007669 thermal treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002622 triacetin Drugs 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229940087291 tridecyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Description
Перекрёстная ссылка на родственные заявки
По заявке на данное изобретение испрашивается приоритет на основании предварительной заявки US 62/314,048, поданной 28 марта 2016 г., предварительной заявки US 62/452,746, поданной января 2017 г., и предварительной заявки US 62/454,184, поданной 3 февраля 2017 г., которые во всей полноте включены в настоящее изобретение посредством ссылки.
Область техники
Настоящее изобретение относится к ферментным препаратам, получаемым из тканей животных, фармацевтическим композициям, содержащим такие ферментные препараты, и способам снижения риска вирусного или микробного загрязнения таких препаратов и композиций. Примеры ферментных композиций включают экстракты поджелудочной железы, подходящие для терапевтического применения, например для лечения и/или профилактики нарушений пищеварения, в частности нарушений пищеварения вследствие внешнесекреторной недостаточности поджелудочной железы у животных и людей.
Предпосылки
Продукты, полученные из тканей животных, могут иметь вирусные и/или микробные загрязнения. Некоторые биологические загрязнения, такие как бактериальные или протозойные, могут быть дезактивированы в процессе производства. Однако другие биологические загрязнения, такие как безоболочечные вирусы, устойчивы к общепринятым способам снижения или дезактивации загрязнений. В частности, проблемой является дезактивация или удаление вирусов из получаемых из тканей животных ферментных композиций, без уничтожения или изменения активности ферментов в этом процессе.
Общепринятые способы дезактивации вирусов включают, например, пастеризацию, сухой нагрев, обработку паром, обработку растворителем/детергентом и понижение pH. Выбор используемых способов дезактивации вирусов зависит от природы и загрязнения продукта, применяемого способа очистки, если таковой имеется, и природы вирусного загрязнителя. Например, обработка растворителем или детергентом может разрушить липидную мембрану оболочечных вирусов и, таким образом, может применяться для дезактивации оболочечных вирусов. Однако многие безоболочечные вирусы обычно не дезактивируются обработкой растворителем или детергентом.
Нагрев, в частности сухой нагрев, является другим общепринятым способом дезактивации вирусов. Тепловая обработка, способная дезактивировать даже высокоустойчивые вирусы, такие как безоболочечные вирусы, требует продолжительного времени (до нескольких часов) и контроля влагосодержания. Более того, тепловая обработка может повредить желаемой биологической активности продукта, в частности, если продуктом является ферментная композиция.
Ферментные продукты поджелудочной железы давно применяют для лечения внешнесекреторной недостаточности поджелудочной железы, связанной с фиброзом желчного пузыря (CF), хроническим панкреатитом, непроходимостью поджелудочной железы или желчных протоков (например, вследствие неопластического заболевания), хирургическими вмешательствами, такими как панкреатэктомия или операции желудочно-кишечного обвода, равно как и с другими заболеваниями и расстройствами. Поджелудочная железа выделяет ферменты, включая липазы, протеазы и амилазы, в проксимальный просвет двенадцатиперстной кишки, где они способствуют гидролизу основных питательных веществ. Амилазы и протеазы выделяют и другие органы кроме поджелудочной железы, и они вносят вклад в переработку углеводов и белков. Однако только незначительная доля липазы из источников, отличных от поджелудочной железы, вовлечена в переработку липидов. Таким образом, пациенты с не излеченной внешнесекреторной недостаточностью поджелудочной железы обычно испытывают затруднения с переработкой жиров и могут страдать симптомами нарушения пищеварения или нарушения питания или того и другого с дефицитом незаменимых жирных кислот и жирорастворимых витаминов, потерей массы тела, запорами, метеоризмом, вздутием живота и жирным, дурнопахнущим жидким стулом (стеаторея). Для пациентов с CF неправильное лечение может иметь серьёзные последствия, поскольку нормальное состояние питания напрямую связано с правильной работой лёгких.
Терапия ферментами поджелудочной железы излечивает и/или предотвращает нарушение всасывания и способствует выздоровлению и развитию пациентов с внешнесекреторной недостаточностью поджелудочной железы. У пациентов с CF слизь закупоривает протоки поджелудочной железы, так же как это происходит в лёгких. Пищеварительные ферменты поджелудочной железы не выделяются в кишечник, и потому нарушается переработка крахмала, жира и белка. Недостаточность переработки, среди прочего, приводит к стеаторее, абдоминальным болям и потере массы тела.
Основой нарушения пищеварения у животных и людей обычно является недостаток пищеварительных ферментов, в частности недостаток эндогенной липазы, а также протеазы и/или амилазы. Если недостаточность поджелудочной железы является патологической, то она может быть врождённой или приобретённой. Приобретённая недостаточность поджелудочной железы, например, может быть следствием алкоголизма. Врождённая недостаточность поджелудочной железы может быть, например, следствием фиброза желчного пузыря. Последствия дефицита пищеварительных ферментов могут быть тяжёлыми симптомами недостаточного питания или неправильного питания, которые могут сопровождаться нарастающей восприимчивостью ко вторичным заболеваниям.
Замещение экзогенными пищеварительными ферментами или смесями пищеварительных фермен- 1 045327 тов (т.е. терапия ферментами поджелудочной железы) показало себя эффективной терапией недостатка эндогенных пищеварительных ферментов. Наиболее часто в терапии ферментов поджелудочной железы применяют фармацевтические препараты, содержащие свиной панкреатин (также известной как ферментозаместительная терапия). Для таких фармацевтических препаратов активным ингредиентом, оцениваемым в клинических испытаниях, является липаза, и дозировка в доступных в продаже продуктах выражается в единицах липазы. Тем не менее такие смеси пищеварительных ферментов, получаемые из поджелудочной железы свиней, содержат липазы, амилазы и протеазы и могут быть эффективно использованы в терапии ферментов поджелудочной железы у людей благодаря большому сходству содержащихся в них ферментов и сопутствующих веществ с составом сока поджелудочной железы человека. Ферменты поджелудочной железы обычно вводят перорально в виде твёрдых препаратов.
Поджелудочные железы могут быть получены от животных, таких как свиньи, выращенные и забитые на мясо. Законодательное регулирование часто требует, чтобы поджелудочные железы получали со скотобойни одного вида животных (т.е. ни один другого вида животных не подлежит забою на данном оборудовании), что ограничивает доступность исходного сырья. Распространённое загрязнение оборудования инфицирующими агентами может привести к свёртыванию производства и дефициту поставок. Выполнение текущего тестирования помогает выявить загрязнённые партии, а отбраковка таких партий накладывает дополнительные ограничения на и так уже ограниченные поставки исходного сырья.
Разработаны способы получения фермента(ов) из поджелудочной железы животных. Например, в US 4623624 описаны способы, с помощью которых панкреатин получают аутолизом водной, содержащей изопропанол, суспензии ткани.
В поджелудочных железах свиньи, применяемых в производстве панкреатина, отмечается присутствие инфицирующих агентов и, в частности, вирусов. В действительности, большинство поголовья свиней инфицировано парвовирусом свиней (ПВС), который высокоустойчив к дезактивации. В панкреатине ПВС определяется как инфицирующий агент. Несмотря на то, что ПВС, как полагают, не является патогенным для людей, желательно получать панкреатин с пониженной нагрузкой по ПВС. При этом ПВС является обычным модельным вирусом, его трудно дезактивировать стандартными способами, такими как химическая или термическая обработка.
US 2010/0119654 касается облучения спиртового или водного биологического экстракта, который содержит твёрдую фазу в виде суспензии. Излучение, применяемое в US 2010/0119654, является ультрафиолетовым (UV) излучением, рентгеновским излучением, β-излучением или γ-излучением. UV облучение панкреатинового промежуточного продукта, растворённого в 40% изопропаноле, приводит к снижению содержания M2 фагов вплоть до 4 log10. Гамма-облучение панкреатина (АФИ) даёт приблизительно 40% снижение активности липазы при 27 кГр и 13% снижение активности липазы при 5 кГр. Содержание бактерий снижается более чем в 2,5 log10, но об инактивации вирусов не сообщается. Когда панкреатин (АФИ) подвергают β-облучению, то, как сообщается, сохраняется более 85% ферментной активности, но число микробов уменьшается только приблизительно в 1,5 log10.
Публикация WO 2003/020324 относится к стерилизации облучением пищеварительных ферментов, таких как трипсин, α-галактозидаза и идуронат 2-сульфатаза. Лиофилизированные или жидкие ферменты (трипсин, гликозидаза или сульфатаза) облучают как таковые или в присутствии стабилизатора. Облучение γ-излучением осуществляют с применением источника 60Co. Об инактивации вирусов не сообщается.
Публикация WO 2007/014896 описывает снижение концентрации одного или более биологических, в частности вирусных, загрязнений панкреатина путём нагревания панкреатина.
В US 2009/0233344 тепловая обработка панкреатина при 80°C в течение 32 ч обеспечивает снижение вирусного титра ПВС в 2,5 log10, сопровождаемое также 20% потерей липазной активности. Тепловая обработка панкреатина при 100°C в течение 8 ч обеспечивает снижение вирусного титра ПВС более чем в 3 log10, сопровождаемое примерно 50% потерей липазной активности.
Таким образом, стадии способа, которые могут быть эффективны против трудно дезактивируемых вирусов, таких как ПВС, в значительной степени изменяют природу панкреатинового продукта путём деградации или уменьшения содержания ферментов поджелудочной железы, в частности липазы, до неприемлемых уровней. Такие изменения активности способны снизить или изменить профиль эффективности конечного продукта. Поэтому в течение процесса производства желательно поддерживать ферментативную активность, в особенности липазную активность.
Поскольку каждый из ранее протестированных способов очистки от вирусных загрязнений, обладающих определенной эффективностью в отношении трудно дезактивируемых вирусов (например, РПВС), приводит к существенной потере ферментативной активности, включая липазную активность, производители выражают скептицизм в отношении того, что может быть достигнут разумный уровень соотношения инактивация/очистка без ухудшения качества продукта. В частности, производители высказывают скептицизм в отношении того, что может быть разработана приемлемая независимая стадия вирусной очистки без негативного влияния на химические, физические или фармацевтические свойства панкреатина. Например, см. письмо от Scientific Protein Laboratories к FDA от 22 июня 2004 г. в деле номер 2003B-0206.
- 2 045327
Краткое описание изобретения
Настоящее изобретение относится к ферментному препарату, выделенному из источника, представляющего собой ткань животного. Выделенный ферментный препарат включает один или более ферментов, имеет пониженное, по сравнению с исходной тканью животного, вирусное и/или микробное загрязнение и сохраняет по меньшей мере одну биологическую активность источника, представляющего собой ткань животного. В частных вариантах осуществления ферментный препарат получают, подвергая исходную ткань животного облучению, предпочтительно электронно-лучевым излучением с последующим выделением из облученной ткани одного или более ферментов. В некоторых вариантах осуществления исходной тканью животного является незараженная ткань. В некоторых вариантах облученная ткань показывает снижение содержания вирусных и/или микробных загрязнений по меньшей мере 3 log10, предпочтительно по меньшей мере 4 log10 по сравнению с необлученной исходной тканью животного. В некоторых вариантах осуществления применяют дополнительные независимые стадии снижения содержания вирусов (например, во время выполнения стадий выделения одного или более ферментов из облученной ткани). В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат, выделенный из облученной ткани, обладает биологической активностью, соответствующей по меньшей мере 50%, предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности ферментного препарата сравнения, такого как ферментный препарат, выделенный из необлученного источника ткани животного. В некоторых вариантах осуществления биологической активностью является липазная активность. В некоторых вариантах осуществления облученная ткань показывает снижение содержания вирусных и/или микробных загрязнений по меньшей мере 3 log10, предпочтительно по меньшей мере 4 log10 по сравнению с необлученной исходной тканью животного, а ферментный препарат, выделенный из облученной ткани, обладает биологической активностью, соответствующей по меньшей мере 50%, предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности ферментного препарата сравнения, такого как ферментный препарат, выделенный из необлученного источника ткани животного.
Другой аспект настоящего изобретения относится к способу получения ферментного препарата, происходящего из ткани животного, в котором ферментный препарат имеет пониженное вирусное и/или микробное загрязнение по сравнению с исходной тканью животного. Способ включает обработку, достаточную для достижения содержания вирусных и/или микробных загрязнений на величину по меньшей мере 3 log10, предпочтительно по меньшей мере 4 log10 по сравнению с исходной тканью животного. В некоторых вариантах осуществления обработка включает подвергание интактного источника ткани животного. Воздействию излучения, предпочтительно электронно-лучевого, с получением облученной ткани животного. В некоторых вариантах осуществления электронно-лучевое воздействие достаточно для уменьшения вирусного и/или микробного загрязнения исходной ткани животного при сохранении по меньшей мере одной биологической активности исходной ткани животного. В некоторых вариантах осуществления биологической активностью является липазная активность. В некоторых вариантах осуществления один или более ферментов и/или проферментов экстрагированы из облученной ткани животного. В некоторых вариантах осуществления способ снижает риск инфекционного загрязнения препарата, полученного из животного источника, или фармацевтической композиции, включающей препарат, полученный из животного источника, по сравнению с необработанным образцом.
Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, включающей раскрытый в описании препарат. Фармацевтическая композиция может быть пероральной дозированной фармацевтической формой. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическую композицию применяют для лечения или предотвращения заболевания, восприимчивого к заместительной терапии ферментами поджелудочной железы, такого как внешнесекреторная поджелудочная недостаточность. Таким образом, другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения или предотвращения внешнесекреторной поджелудочной недостаточности, включающему введение пациенту в целях лечения дозы ферментного препарата или фармацевтической композиции, раскрытых в описании.
Другой аспект настоящего изобретения относится к наборам, которые содержат ферментный препарат или фармацевтическую композицию, раскрытые в описании.
Эти и другие объекты изобретения раскрыты в последующих подразделах. Не следует рассматривать указанные объекты как ограничивающие объем изобретения.
Подробное описание изобретения
Данное подробное описание предназначено исключительно для того, чтобы ознакомить специалистов в данной области техники с настоящим изобретением, его принципами, его практическим применением таким образом, чтобы специалисты в данной области техники были бы в состоянии адаптировать и применять изобретение во всей многочисленности его форм так, чтобы наилучшим образом приспособить его к требованиям практического применения. Описание и частные примеры предназначены исключительно для иллюстративных целей. Таким образом, данное изобретение не ограничено вариантами его осуществления, раскрытыми в настоящем документе на выдачу патента, и может быть различным образом модифицировано.
А. Определения.
Использованные в описании и в прилагаемой формуле изобретения определения, если не указано
- 3 045327 иного, имеют следующие приводимые ниже значения.
Используемый термин АФИ обозначает активный фармацевтический ингредиент. Как указано, предпочтительным АФИ является панкреатин, в частности свиной панкреатин, который обыкновенно применяют в терапевтических целях, т.е. панкреатин, соответствующий стандартам фармакопей, например Европейской Фармакопеи и/или Фармакопеи США, и подходящий для перорального введения для лечения или профилактики нарушений пищеварения у млекопитающих и в особенности нарушения пищеварения вследствие хронической внешнесекреторной недостаточности поджелудочной железы, такой как у пациентов, страдающих фиброзом желчного пузыря, хроническом панкреатитом, или у пациентов, перенесших хирургическое вмешательство на верхнем отделе желудочно-кишечного тракта.
Используемый термин неочищенный относится к неочищенному составу или смеси, содержащей ферменты и/или проферменты, а также дополнительные компонент ткани источника. Неочищенный препарат или смесь включает, но не ограничивается, тканью животного.
Термин ферментный препарат относится к любой композиции по изобретению, содержащей один или несколько ферментов как в активной, так и в неактивной формах (т.е. проферменты или зимогены). Термин включает экстракты из клеток или тканей, а также препараты, полученные из тканевого или клеточного материала животных. Одним из примеров ферментного препарата является панкреатин, панкрелипаза, экстракт, получаемый из поджелудочной железы млекопитающего, предпочтительно свиньи.
Термин экстракт в той мере, в какой он относится к настоящим ферментным препаратам, определяет один или более ферментов и/или проферментов, которые выделены по меньшей мере из одного компонента ткани, из которой они происходят. Экстрагированные компоненты могут быть в форме активного фермента или профермента (зимогена), требующего последующего превращения в активную форму.
Термин выделенное вещество в той мере, в какой он относится к данным ферментным препаратам, относится к одному или более активным ферментам, которые были выделены по меньшей мере из одного компонента ткани, из которой они происходят. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления выделенный фермент или выделенный ферментный препарат включает один или более активных ферментов, которые получены превращением из соответствующей проферментной формы путём гидролиза и/или аутолиза. Гидролиз и/или аутолиз с целью превращения профермента в активный фермент могут происходить до, во время или после экстракции.
Используемые здесь термины ферменты поджелудочной железы, панкреатин и панкрелипаза относятся к ферментным смесям, выделяемым из поджелудочных желёз животных, включающим в качестве основных компонентов пищеварительные ферменты, такие как липаза, протеаза и амилаза. В частности, термины ферменты поджелудочной железы, панкреатин и панкрелипаза здесь используются как синонимичные и относятся к экстрактам поджелудочной железы, пригодным для терапевтического применения в соответствии со стандартными фармакопеями и содержащим некоторые пищеварительные ферменты, свойства которых определены в известных монографиях, как указано выше. В результате осуществления стандартных способов производства ферменты поджелудочной железы, панкреатин и панкрелипаза обычно доступны в форме порошка, такого как порошок панкреатина, иногда именуемого порошком поджелудочной железы. Ферменты поджелудочной железы, панкреатин и панкрелипаза также могут быть, и предпочтительно являются, активными изолятами поджелудочной железы. Панкреатин для фармацевтического применения обычно имеет коровье или свиное происхождение. Свиной панкреатин является предпочтительным. Панкрелипаза в некоторых источниках описана как ферментный препарат с повышенной (липазной) активностью по сравнению с панкреатином.
Используемый здесь термин фармацевтическая композиция обозначает композицию, включающую раскрытый в описании ферментный препарат и необязательно один или более фармацевтических эксципиентов.
Термин фармацевтически приемлемый используется в качестве прилагательного и обозначает, что соответствующее существительное относится к продукту, подходящему для фармацевтического применения или к части фармацевтического продукта.
Ортогональная стадия снижения микробной и/или вирусной нагрузки относится к определенному способу снижения содержания микробов и/или вирусов, которые могут присутствовать в образце. Стадия снижения микробной и/или вирусной нагрузки может быть ортогональной благодаря тому, что в способе предоставлены одна или более дополнительных стадий снижения микробной и/или вирусной нагрузки. В определенных вариантах осуществления ортогональная стадия снижения микробной и/или вирусной нагрузки имеет механизм, существенно отличный от других применяемых в способе стадий снижения микробной и/или вирусной нагрузки таким образом, что достигаемая ортогональной стадией величина log10 уничтожения становится аддитивна с кумулятивной величиной log10 уничтожения, достигаемой при проведении всех остальных стадий снижения микробной и/или вирусной нагрузки, проводимых при получении ферментного препарата.
Термины предотвращать, предотвращая или предотвращение относятся к способу предотвращения начала состояния, расстройства или заболевания и/или проявления сопутствующих им симптомов или к предохранению субъекта от возникновения состояния, расстройства или заболевания. Используе- 4 045327 мые здесь термины предотвращать, предотвращая или предотвращение также включает отсрочку начала состояния, расстройства или заболевания и/или проявления сопутствующих им симптомов и снижение у субъекта риска проявления возникновения состояния, расстройства или заболевания.
Термин субъект включает людей и прочих приматов, равно как и домашних и практически одомашненных животных, без ограничения включающих домашнюю птицу, пчел, коров, овец, коз, свиней, лошадей, собак, кошек, кроликов, крыс, мышей и им подобных Термин домашняя птица охватывает все типы пернатых, включая без ограничения, цыплят, индюков, уток, гусей, группу нелетающих птиц и пернатую дичь. В определенных вариантах осуществления субъектом является человек.
Термин терапевтически эффективное количество обозначает достаточное количество ферментного препарата или фармацевтической композиции для лечения состояния расстройства или заболевания с разумным соотношением польза/риск, применимым к любому медицинскому лечению. При использовании в медицинском лечении терапевтически эффективное количество одного из ферментных препаратов может быть применено в виде экстракта или в неочищенной форме. Альтернативно, ферментная композиция может быть введена в виде фармацевтической композиции, содержащей целевую ферментную композицию в сочетании с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями.
Термины лечить, лечебный и лечение относятся к способу частичного снятия и подавления симптомов состояния, расстройства или заболевания и/или их сопутствующих симптомов.
Б. Ферментные препараты и способы получения.
В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение включает ферментный препарат, содержащий один или более ферментов и/или проферментов, имеющих животное происхождение, предпочтительно из тканей млекопитающего. В определённых вариантах осуществления ферментный препарат включает смесь пищеварительных ферментов и/или проферментов. В определённых вариантах осуществления ферментный препарат включает липазу. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат включает амилазу. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат включает протеазу. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат включает панкреатин. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат включает профермент, такой как пролипаза или типсиноген. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат находится в неочищенной форме. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат включает один или более ферментов и/или проферментов, которые были экстрагированы их тканей животного. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат включает один или более ферментов, которые были выделены из тканей животного.
В некоторых вариантах выделенный ферментный препарат имеет ту же самую или по существу ту же самую биологическую активность, но менее инфицирован по сравнению с той тканью, из которой он был выделен. В определённых вариантах осуществления выделенный ферментный препарат имеет ту же самую или по существу ту же самую биологическую активность, что и ферментный препарат сравнения. В определённых вариантах осуществления инфицированность выделенного ферментного препарата уменьшена по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10, по сравнению с инфицированностью ткани, из которой он был выделен. В определённых вариантах осуществления инфицированность, которую снижают, является вирусной инфицированностью, в частности инфицированностью безоболочечным вирусом и/или инфицированностью оболочечным вирусом. В определённых вариантах осуществления биологическая активность выделенного ферментного препарата составляет по меньшей мере 50%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 80% или предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности ферментного препарата сравнения. В определенных вариантах осуществления биологическая активность является ферментной активностью, такой как протеазная активность, амилазная активность или предпочтительно липазная активность.
В другом варианте осуществления ферментный препарат выделен из предварительно обработанного тканевого источника и имеет ту же самую или по существу ту же самую биологическую активность, но менее инфицирован, чем препарат сравнения, выделенный из необработанного тканевого источника. В определенных вариантах осуществления инфицированность ферментного препарата уменьшена по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10 по отношению к препарату сравнения. В определенных вариантах осуществления инфицированность предварительно обработанного тканевого источника уменьшена по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10 по отношению к необработанному тканевому источнику. В определенных вариантах осуществления уменьшаемая инфицированность является вирусной инфицированностью, особенно инфицированностью безоболочечным вирусом. В определенных вариантах осуществления биологическая активность ферментного препарата составляет по меньшей мере 50%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 80% или предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности препарата сравнения, выделенного из необработанного тканевого источника. В определенных вариантах осуществления биологическая активность является ферментной активностью, такой как протеазная активность, амилазная активность или предпочтительно липазная активность.
В другом варианте осуществления ферментный препарат получен из ткани, облученной пучком электронов. В некоторых вариантах осуществления ткань, облученная пучком электронов, является тка- 5 045327 нью млекопитающего, предпочтительно тканью свиньи. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат, полученный из ткани, облученной пучком электронов, включает панкреатин. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат, полученный из ткани, облученной пучком электронов, включает профермент, такой как пролипаза или типсиноген. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат, полученный из ткани, облученной пучком электронов, находится в неочищенной форме. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат, полученный из ткани, облученной пучком электронов, включает один или более ферментов и/или проферментов, которые были экстрагированы из облученной ткани. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат, полученный из ткани, облученной пучком электронов, включает один или более ферментов, которые были выделены из облученной ткани.
В другом варианте осуществления ферментный препарат выделен из ткани, облученной пучком электронов, и имеет ту же самую или по существу ту же самую биологическую активность, но менее инфицирован, чем препарат сравнения, выделенный из необлученного тканевого источника. В некоторых вариантах осуществления облученной тканью является ткань поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления облученной тканью является отслоенная ткань поджелудочной железы, цельная поджелудочная железа или часть цельной поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления необлученным тканевым источником является ткань поджелудочной железы. В определенных вариантах осуществления инфицированность ферментного препарата уменьшена по меньшей мере на три logio, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10 по отношению к препарату сравнения. В определенных вариантах осуществления инфицированность, которую снижают, является вирусной инфицированностью, в частности, инфицированностью безоболочечным вирусом и/или инфицированностью оболочечным вирусом. В некоторых вариантах осуществления инфицированность, которую снижают, является инфицированностью парвовирусом свиней. В определенных вариантах осуществления биологическая активность ферментного препарата составляет по меньшей мере 50%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 80% или предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности препарата сравнения. В некоторых вариантах осуществления биологической активностью является ферментная активность, такая как протеазная активность, амилазная активность или предпочтительно липазная активность.
В другом варианте осуществления ферментный препарат включает проферменты, облученные электронным пучком. В определенных вариантах осуществления ферментный препарат подвергают дальнейшей обработке, такой как превращение облученных проферментов в их активную форму (например, аутолизом и/или гидролизом).
Настоящие ферментные препараты будут более понятны в связи со следующими способами, которые иллюстрируют примеры методик, с помощью которых данные ферментные препараты могут быть получены.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение включает способ получения ферментной композиции, состоящий в воздействии облучения на источник проэнзима, предпочтительно, облучение пучком электронов. В определенных вариантах осуществления источником профермента является группа клеток. В некоторых вариантах осуществления группой клеток является интактная ткань, полученная из железы млекопитающего или ее части. В некоторых вариантах осуществления группой клеток является цельная железа, полученная от млекопитающего. В некоторых вариантах осуществления группой клеток является часть железы, полученной от млекопитающего. В некоторых вариантах осуществления группой клеток является замороженный блок ткани. В некоторых вариантах осуществления группой клеток является интактная ткань животного или отслоенная или измельченная ткань животного.
В другом аспекте настоящее изобретение включает способ производства энзиматического препарата. Метод включает воздействие облучения на ткань животного, предпочтительно облучение пучком электронов. В некоторых вариантах ткань животного является интактной тканью. В некоторых вариантах интактной тканью животного является замороженный блок ткани. В некоторых вариантах интактная ткань животного является отслоенной или измельченной тканью животного.
В некоторых вариантах осуществления метод начинается с ткани животного, предпочтительно с интактной ткани животного. В некоторых вариантах осуществления тканью животного является ткань млекопитающего, предпочтительно тканью поджелудочной железы свиньи. В некоторых вариантах осуществления ткань поджелудочной железы свиньи получена с проверенной скотобойни, предпочтительно с моновидовой скотобойни.
В определённых вариантах осуществления интактная ткань животного включает интактную ткань поджелудочной железы. В определённых вариантах осуществления интактная ткань поджелудочной железы включает цельную поджелудочную железу или её часть, такую как одна или более долей. В определённых вариантах осуществления интактная ткань поджелудочной железы включает отслоенную замороженную ткань. В некоторых вариантах осуществления интактная ткань поджелудочной железы включает блок замороженной ткани, который может быть подвержен механической обработке. В некоторых вариантах осуществления интактная ткань поджелудочной железы включает ткань поджелудочной железы, которая подверглась минимальной манипуляции или изменению или не была подвергнута манипуля
- 6 045327 ции или изменению, таким образом, что, например, уничтожает активные ферменты и/или переводит проферменты в ткани в их активную форму. Например, гомогенат ткани, который подвергся существенной химической или ферментной обработке для перевода проэнзимов в их активную форму, не является интактной тканью в используемом здесь смысле. В качестве другого примера ткань, которая была раздроблена или измельчена в условиях, в которых уничтожаются активные ферменты и/или проферменты превращаются в ткани в их активную форму, не является интактной тканью в используемом здесь смысле.
В некоторых вариантах осуществления ткань животного, предпочтительно замороженная ткань животного, является тонкоизмельчённой. В некоторых вариантах осуществления тонкое измельчение может быть достигнуто с использованием дробильной машины для замороженных блоков, такой как Hydrauflake Chunker, выпускаемой General Machinery Corporation (Sheboygan, WI), которая предназначена для раздробления замороженной обрабатываемой ткани для последующей переработки.
В определённых вариантах осуществления животная ткань является облучённой. В определённых вариантах осуществления животную ткань подвергают воздействию стерилизующего пучка ускоренных электронов, например E-пучка или электроннолучевого излучения. В некоторых вариантах осуществления интактную животную ткань подвергают облучению пучком электронов. В некоторых вариантах осуществления цельную поджелудочную железу или её интактную часть подвергают облучению пучком электронов. В некоторых вариантах осуществления отслоенную ткань поджелудочной железы свиньи подвергают облучению пучком электронов.
Электронный пучок является формой ионизирующей энергии, которая обычно характеризуется малой глубиной проникания и высокими дозами. Пучок, т.е. концентрированный, высокозаряженный поток электронов, генерируют ускорением и конверсией электричества. Электроны генерируют с помощью оборудования, называемого здесь ускорителями, которые способны производить пучки, которые являются либо импульсными, либо непрерывными. Когда облучаемый материал проходит под или перед электронным пучком, энергия электронов поглощается. Эта поглощенная энергия изменяет различные химические связи и биологические свойства продукта/материала Энергия, которая была поглощена, называется поглощенной дозой. Именно это поглощение энергии, или дозировка, уничтожает вирусы и микроорганизмы, например разрушая их цепочки ДНК или РНК.
Облучение может быть выполнено общепринятым способом, таким как помещение ткани в подходящий контейнер и подвергание этой ткани воздействию пучка электронов. В определенных вариантах осуществления контейнер, содержащий ткань, помещен на конвейер, который проходит через пучок электронов. В определенных вариантах осуществления контейнер, содержащий ткань, не содержит никакого растворителя. В определенных вариантах осуществления контейнер, содержащий ткань, по существу, свободен от растворителя. В определенных вариантах осуществления контейнер, содержащий ткань, не содержит никакого легковоспламеняющегося растворителя. В определенных вариантах осуществления контейнер, содержащий ткань, по существу свободен от легковоспламеняющегося растворителя, такого как спирт. Например, контейнер может содержать замороженную интактную ткань, такую как цельная железа, часть цельной железы, или отслоенную ткань.
В некоторых вариантах осуществляют облучение дозой, достаточной, по существу, для инактивации устойчивых вирусов и/или микробов в ткани. В определенных вариантах облучение осуществляют в дозе, которая предотвращает потерю биологической активности, предпочтительно ферментной активности, относительно ферментного препарата сравнения, выделенного из необлученной ткани.
Пучок ускоренных электронов может быть получен на ускорителе электронов, таком как ускоритель электронов, поставляемый Iotron Industries USA, Inc (Columbia City, IN). В определенных вариантах осуществления ускоритель электронов работает при мощности от 20 до 250 кВт с энергией электронов от 5 до 18 МэВ. В некоторых вариантах осуществления ускоритель электронов работает при 50 кВт и 10 МэВ. В некоторых вариантах осуществления ускоритель электронов обеспечивает энергию пучка в 10 МэВ или выше.
Ткань может быть подвергнута облучению пучком электронов в течение времени и в дозе, достаточных для достижения инактивации вирусов и микробов без отрицательного влияния на биологическую активность одного или более ферментов, которые впоследствии экстрагируют или выделяют из облученной ткани. Доза электронного облучения, требуемая для стерилизации ткани, может изменяться, например, в зависимости от размера ткани, типа ткани и типа и количества вирусного или микробного загрязнителя, который предполагается или наличествует в образце ткани. Специалист в данной области может осознать и способен определить соответствующие дозу и время, подходящие для конкретной ткани и основанные на характеристиках ткани и используемого ускорителя. Выбранная доза электронного излучения эффективна для инактивации инфицирующих агентов, которые трудно уничтожить общепринятыми способами без минимальной потери ферментной активности.
Поглощённая доза излучения выражается в килогреях (кГр), где 1 кГр=1000 Дж энергии, приложенной к 1 кг материала. В определённых вариантах осуществления ткань подвергают воздействию пучка электронов до тех пор, пока не будет поглощено количество излучения, инактивирующего инфицирующий аген,. Например, ткань может быть подвергнута воздействию пучка электронов до дос
- 7 045327 тижения дозы приблизительно 10, приблизительно 15, приблизительно 20, приблизительно 25, приблизительно 30, приблизительно 35, приблизительно 40, приблизительно 45 или приблизительно 50 кГр или более. В качестве другого примера ткань может быть подвергнута воздействию пучка электронов до достижения дозы приблизительно от 5 до 50, приблизительно от 10 до 40, приблизительно от 15 до 35 кГр. В некоторых вариантах осуществления ткань может быть подвергнута воздействию пучка электронов до достижения дозы приблизительно 30 кГр. В некоторых вариантах осуществления поджелудочную железу свиньи облучают дозой пучка электронов, достаточной для обеспечения высокого показателя log10 уничтожения инфицирующих агентов, предпочтительно инфицирующих агентов, которые трудно дезактивировать, таких, как безоболочечные вирусы, с минимальной потерей ферментной активности.
В некоторых вариантах осуществления доза может быть определена с применением плёнок радиохромных красителей. Такие плёнки могут быть откалиброваны по референтным национальным стандартам.
В некоторых вариантах осуществления ткань подвергают облучению пучком электронов в течение времени и в дозе, достаточных для достижения по меньшей мере трех log10, предпочтительно по меньшей мере четырех log10 снижения величины вирусного содержания модельного вируса относительно образца сравнения. В одном из таких вариантов осуществления ткань подвергают облучению пучком электронов в течение времени и в дозе, достаточных для достижения по меньшей мере трех log10, предпочтительно по меньшей мере четырех log10 снижения величины вирусной нагрузки модельным вирусом относительно образца сравнения. В некоторых вариантах осуществления модельным вирусом является парвовирус свиней. В некоторых вариантах осуществления тканью является интактная ткань. В некоторых из таких осуществлений интактной тканью является железа, такая как цельная поджелудочная железа или её часть, такая как одна или более долей поджелудочной железы. В другом из таких осуществлений интактной тканью является замороженная отслоенная ткань.
В некоторых вариантах осуществления воздействие пучком электронов включает воздействие с одной стороны или с другой стороны. В некоторых вариантах осуществления ткань подвергают воздействию электронным пучком с одной стороны. В некоторых вариантах осуществления ткань подвергают воздействию электронным пучком с разных сторон, например воздействию пучка электронов с двух сторон. Таким образом, доза приблизительно в 20 кГр может включать двустороннее воздействие приблизительно 10 кГр/сторону, доза приблизительно в 30 кГр может включать двустороннее воздействие приблизительно 15 кГр/сторону, доза приблизительно в 40 кГр может включать двустороннее воздействие приблизительно 20 кГр/сторону, доза приблизительно в 50 кГр может включать двустороннее воздействие приблизительно 25 кГр/сторону.
В некоторых вариантах осуществления способы получения ферментного препарата снижают риск инфицирования вирусами или микробами фармацевтической композиции, содержащей ферментный препарат.
В некоторых вариантах осуществления инфицированность облученной поджелудочной железы снижена по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10, по сравнению с инфицированностью железы перед обработкой излучением.
В некоторых вариантах осуществления инфицированность ферментного препарата производного или выделенного из облученной поджелудочной железы снижена по меньшей мере на три log10, предпочтительно, по меньшей мере на четыре log10, по сравнению с инфицированностью железы перед обработкой излучением Альтернативно инфицированность ферментного препарата определяют по отношению к ферментному препарату, полученному или выделенному из необлученной поджелудочной железы.
В некоторых вариантах осуществления снижаемая инфицированность является вирусной инфицированностью, в частности инфицированностью безоболочечным вирусом, таким как парвовирус свиней (ПВС) Например, инфицированность ПВС панкреатинового продукта, выделенного из облученной поджелудочной железы, снижена по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10 по отношению к препарату сравнения, выделенному из необлученной поджелудочной железы. В качестве другого примера инфицированность парвовирусом свиней панкреатинового продукта, выделенного из облученной поджелудочной железы, снижена по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10 по отношению к необлученной поджелудочной железе. В одном из таких вариантов осуществления инфицированность ферментного препарата парвовирусом свиней дополнительно уменьшают последующими стадиями ортогональной вирусной инактивации, проводимыми после облучения.
В некоторых вариантах осуществления способы могут также включать следующие за стадией облучения стадию исследования на присутствие или количественное определение в ткани или в ферментном препарате, выделенном из ткани, одного или более микроорганизмов (например, вирусов, бактерий, простейших). Способы определения того, содержит ли образец микроорганизм, известны из уровня техники и включают, например, анализ бляшкообразования или анализ образования колоний. Эффективная стерилизация также может быть определена с использованием общепринятых микробиологических методик, таких как, например, включения подходящих биологических индикаторов в облучаемую партию или контактирование ткани с культуральной средой и инкубирование среды для определения стерильности
- 8 045327 ткани.
В определенных вариантах осуществления вирусную инфицированность можно определить по конечной точке титрования с последующим вычислением половинной дозы, инфицирующей тканевую культуру (TCID50). Вычисленные таким способом вирусные титры могут быть представлены как log10 TCID50 на 1 мл с доверительным интервалом 95%.
В некоторых вариантах осуществления снижение вирусного загрязнения приведено в соответствии с общей главой <1050> USP-NF национальной фармакопеи США как логарифмический фактор уменьшения, который является разницей в вирусном титре между образцом сравнения и образцом, полученным из ткани, облученной электронным пучком после выделения. Например, уменьшение на три log10 может означать уменьшение вирусной нагрузки в 1000 раз, а уменьшение на четыре log10 может означать уменьшение вирусной нагрузки в 10000 раз.
В некоторых вариантах осуществления способы получения ферментного препарата позволяют снизить вирусное и/или микробное загрязнение ферментного препарата без существенного снижения его ферментной активности.
В некоторых вариантах осуществления ферментная активность ферментного препарата, выделенного из облученной поджелудочной железы, сохраняется. Например, в некоторых вариантах осуществления биологическая активность ферментного препарата составляет по меньшей мере 50%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 80% или предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности препарата сравнения, выделенного из необлученной поджелудочной железы. В определенных вариантах осуществления биологическая активность является ферментной активностью, такой как протеазная активность, амилазная активность или предпочтительно липазная активность.
После облучения ткань может быть далее обработана с получением ферментной композиции. Например, в некоторых вариантах осуществления из облучённой ткани могут быть экстрагированы один или более ферментов и/или проферментов. В некоторых вариантах осуществления из облученной ткани могут быть выделены один или более ферментов и/или проферментов. Известны различные способы выделения ферментов из образцов ткани. Например, US 4623624 предоставляет способы выделения панкреатина аутолизом водной, содержащей изопропанол суспензии ткани.
В некоторых вариантах осуществления облученная ткань может быть подвергнута аутолизу и/или гидролизу для превращения проферментов в их активную форму. Например, облученная ткань может быть объединена с инициатором гидролиза для начала аутолиза. В некоторых вариантах осуществления аутолиз и/или гидролиз проводят при температуре окружающей среды. В некоторых вариантах осуществления реакционную смесь по окончании реакции фильтруют, фильтрат собирают, присутствующие в фильтрате ферменты осаждают (например, изопропанолом), осадок отфильтровывают, промывают изопропанолом и сушат при пониженном давлении.
Следует понимать, что способы, описанные выше и проиллюстрированные в разделе Примеры, являются иллюстративными и их не следует рассматривать как ограничивающие объем изобретения в том виде, как оно охарактеризовано в прилагаемой формуле изобретения. Все альтернативы, модификации и эквиваленты способов и конкретных примеров включены в объем формулы изобретения.
В. Композиции.
По меньшей мере в одном варианте осуществления настоящее изобретение включает композиции, содержащие ферментный препарат, раскрытый в описании. В определенных вариантах осуществления композиция включает один или более ферментов и/или проферментов, экстрагированных из облученной ткани животного. В определенных вариантах осуществления композиция включает один или более ферментов, выделенных из облученной ткани животного. В определенных вариантах осуществления композиция является неочищенной смесью, содержащей один или более ферментов, выделяемых из ткани животного.
В другом аспекте обеспечена фармацевтическая композиция, содержащая ферментный препарат, раскрытый в описании, и далее необязательно содержащая один или более общепринятых фармацевтически приемлемых эксципиентов, таких как можно найти в монографиях, таких как Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. (Alfonso R. Gennaro, ed, Mack Publishing Company, Easton, PA, 1990), Remington the Science and Practice of Pharmacy, 19th Ed. (Lippincott, Williams & Wilkins, 1995), Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3rd Ed. (Arthur H. Kibbe, ed., Amer Pharmaceutical Assoc, 1999), the Pharmaceutical Codex Principles and Practice of Pharmaceutics 12th Ed. (Water Lund ed., Pharmaceutical Press, London, 1994), The United Kingdom Pharmacopeia The National Formulary (United States Pharmacopeial Convention), и Goodman and Gilman's the Pharmacological Basis of Therapeutics (Louis S. Goodman and Lee E. Limbird, eds, McGraw Hill, 1992), содержание которых включено в настоящее описание путем ссылки.
Фармацевтические композиции, содержащие ферментный препарат, раскрытый в описании, могут быть использованы для восполнения пищеварительных ферментов при лечении и/или профилактике расстройства пищеварения у животных, в частности расстройства пищеварения вследствие хронической экзокринной недостаточности поджелудочной железы, такой как у пациентов, страдающих муковисцидозом, хроническим панкреатитом, или у пациентов, перенесших хирургическое вмешательство на верхнем отделе желудочно-кишечного тракта. Фармацевтические композиции или дозированные формы,
- 9 045327 раскрытые в описании, предпочтительно могут быть пероральными дозированными формами, которые, в частности, могут быть введены людям.
Пероральная дозированная форма, содержащая ферментный препарат, может быть, например, в форме капсул, гранул, гранулятов, микропеллет, микросфер, микротаблеток, пеллет, пилюль, порошков и/или таблеток. В целях данного описания приставка микро используется для описания пероральной дозированной формы, если диаметр пероральной дозированной формы или все ее измерения (длина, высота, ширина) равен или менее приблизительно 5 мм.
В определенных вариантах осуществления пероральная дозированная форма является капсулой. Капсула может содержать приблизительно от 2000 до приблизительно 40000 липазных единиц на капсулу. В некоторых вариантах осуществления пероральной дозированной формой является капсула, содержащая 3000, 6000, 12000, 24000 или 36000 липазных единиц на капсулу. В некоторых вариантах осуществления пероральной дозированной формой является капсула, содержащая 3000, 5000, 10000, 15000, 20000, 25000 или 40000 липазных единиц на капсулу. В некоторых вариантах осуществления пероральной дозированной формой является капсула, содержащая 2600, 4200, 10500, 16800 или 21000 липазных единиц на капсулу. В некоторых вариантах осуществления пероральной дозированной формой является капсула, содержащая 4000, 13800, 20700 или 23000 липазных единиц на капсулу. В некоторых вариантах осуществления пероральной дозированной формой является капсула, содержащая 4000, 8000 или 16000 липазных единиц на капсулу. В некоторых вариантах осуществления пероральной дозированной формой является капсула, содержащая 4000, 8000 или 16000 липазных единиц на капсулу. В других вариантах осуществления пероральной дозированной формой является капсула, содержащая 3000, 4000, 6000 или 8000 липазных единиц на капсулу. Дозировка может быть выражена разнообразными способами, которые включают в себя единицы Фармакопеи США, единицы Европейской Фармакопеи или единицы Британской Фармакопеи.
В некоторых вариантах осуществления пероральная дозированная форма является таблеткой, содержащей 10440 или 20880 липазных единиц на таблетку.
Известны разнообразные фармацевтические композиции и дозированные формы, содержащие панкреатин, такие, как композиции с отсроченным или немедленным высвобождением. Например, US 9198871 обеспечивает композиции панкреатина с отсроченным высвобождением.
В некоторых вариантах осуществления пероральная дозированная форма является панкреатиновой микропеллетой или панкреатиновой микросферой. В некоторых вариантах осуществления панкреатиновая микропеллета или панкреатиновая микросфера покрыта, например, кишечнорастворимым покрытием. В некоторых вариантах осуществления панкреатиновая микропеллета или панкреатиновая микросфера вне зависимости от наличия любого подобного покрытия содержит примерно от 10 до примерно 95% по массе панкреатина, примерно от 5 до примерно 90% по массе по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого связующего агента и между 0 и примерно 10% по массе по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого эксципиента. Более конкретно, панкреатиновая микропеллета или панкреатиновая микросфера содержит примерно от 70 до примерно 90% по массе панкреатина, примерно от 10 до примерно 30% по массе по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого связующего агента и между 0 и приблизительно 5% по массе по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого эксципиента. В некоторых вариантах осуществления панкреатиновая микропеллета или панкреатиновая микросфера содержит примерно от 70 до примерно 90% по массе панкреатина, примерно от 10 до примерно 30% по массе по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого связующего агента. В некоторых вариантах осуществления панкреатиновая микропеллета или панкреатиновая микросфера являются приблизительно сферическими и имеют диаметр от примерно 0,5 до примерно 2,0 мм. В некоторых вариантах осуществления панкреатиновая микропеллета или панкреатиновая микросфера имеет первое измерение примерно от 0,5 до примерно 2,0 мм и второе измерение примерно от 0,5 до примерно 2,0 мм. В некоторых вариантах осуществления панкреатиновая микропеллета или панкреатиновая микросфера имеет первое измерение примерно от 0,8 до примерно 1,0 мм и второе измерение примерно от 0,5 до примерно 2,0 мм.
Примеры фармацевтически приемлемых связующих агентов включают полиэтиленгликоль 1500, полиэтиленгликоль 2000, полиэтиленгликоль 3000, полиэтиленгликоль 4000, полиэтиленгликоль 6000, полиэтиленгликоль 8000, полиэтиленгликоль 10000, гидроксипропилметилцеллюлозу, полиоксиэтилен, сополимеры полиоксиэтилен-полиоксипропилен и смеси указанных органических полимеров. Предшествующий список фармацевтически приемлемых связующих агентов не следует понимать как исчерпывающий, но исключительно как иллюстративный, поскольку средний специалист в данной области способен понимать, что может быть использовано множество других фармацевтически приемлемых связующих агентов или комбинация связующих агентов. Полиэтиленгликоль 4000 является предпочтительным фармацевтически приемлемым связующим агентом.
Примеры подходящих фармацевтически приемлемых эксципиентов включают вещества, способствующие скольжению, такие как стеарат магния или стеарат кальция, стеариновая кислота, тальк и/или крахмал; наполнители, такие как фосфат кальция, кукурузный крахмал, декстраны, декстрин, гидратированный диоксид кремния, микрокристаллическая целлюлоза, каолин, лактоза, маннит, поливинилпирро- 10 045327 лидон, осаждённый карбонат кальция, сорбит и/или тальк; агенты, способствующие распадаемости лекарственной формы, такие как аэросил (кремневая кислота), альгиновая кислота, амилоза, альгинат кальция, карбонат кальция, формальдегид-желатин, пектинкарбонат, саговый крахмал, бикарбонат натрия и/или крахмал; и/или увлажняющие агенты, такие как глицерин и/или крахмал. Предшествующий список фармацевтически приемлемых эксципиентов не следует понимать как исчерпывающий, но исключительно как иллюстративный, поскольку средний специалист в данной области способен понимать, что может быть использовано множество других фармацевтически приемлемых эксципиентов или комбинация эксципиентов. Для целей данного описания синтетические масла и мономерные сложные эфиры фталевой кислоты не следует рассматривать как подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты. В некоторых вариантах осуществления панкреатиновые микропеллеты или панкреатиновые микросферы не содержат фармацевтически приемлемых эксципиентов, но необязательно могут содержать увеличенное количество панкреатина.
В другом варианте осуществления пероральная дозированная форма панкреатина, такая как пероральная дозированная форма с кишечнорастворимым покрытием, предлагается для производства лекарственного средства для лечения медицинских состояний, таких как расстройства пищеварения, экзокринная недостаточность поджелудочной железы, панкреатит, муковисцидоз, диабет типа I и/или диабет типа II.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция является фармацевтической композицией с контролируемым высвобождением, например, фармацевтическая композиция с контролируемым высвобождением может быть получена нанесением кишечнорастворимого покрытия на пероральную дозированную форму. В некоторых вариантах осуществления кишечнорастворимое покрытие включает пленкообразующий агент, пластификатор и, необязательно, добавки, уменьшающие липкость.
Подходящие пленкообразующие агенты включают агар, карбомерный гомополимер и сополимеры (т.е. перекрестно сшитые полимеры на основе акриловой кислоты с большой молекулярной массой), карбоксиметилцеллюлозу, карбоксиметилэтилцеллюлозу, каррагин, ацетат фталат целлюлозу, ацетат сукцинат целлюлозу, ацетат тримеллиат целлюлозу, хитин, белковый экстракт зерновых, этилцеллюлозу, гуммиарабик, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилацетат сукцинат, ацетат сукцинат гидроксипропилметилцеллюлозу, фталат гидроксипропилметилцеллюлозу, сополимер метакриловой кислоты и этилметакрилата, метилцеллюлозу, пектин, поливинилацетатфталат, поливиниловый спирт, шеллак, альгинат натрия, ацетат фталат крахмала и/или сополимер стирол/малеиновая кислота или смеси указанных пленкообразующих полимеров. Предпочтительными пленкообразующими агентами являются ацетат фталат целлюлозы, ацетат сукцинат гидроксипропилметилцеллюлозы и сополимер метакриловой кислоты и этилметакрилата. Наиболее предпочтительным является фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, такой как HP 55 или HPMCP HP-50. Синтетические масла не следует рассматривать как предпочтительные пленкообразующие агенты. Предшествующий список пленкообразующих агентов не следует понимать как исчерпывающий, но исключительно как иллюстративный, поскольку средний специалист в данной области способен понимать, что может быть использовано множество других пленкообразующих агентов или комбинация пленкообразующих агентов.
Пластификатор(ы) обычно может (могут) присутствовать в количестве более чем примерно 1,5% и обычно в количестве примерно от 2 до примерно 20% по массе по отношению к пленкообразующему агенту. Пластификатор может содержать насыщенные неразветвленные одноатомные спирты, имеющие от 12 до 30 углеродных атомов. Более конкретно, подходящие пластификаторы включают лауриловый спирт, тридециловый спирт, миристиловый спирт, пентадециловый спирт, цетиловый спирт, гептдециловый спирт, стеариловый спирт, нонадециловый спирт, арахидоновый спирт, бегениловый спирт, карнаубиловый спирт, цериловый спирт, корианиловый спирт, мелиссиловый спирт, ацетилтрибутилцитрат, дибутилсебакат, сложные эфиры жирной кислоты и глицерина, глицерин, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, сорбитовые жирные кислоты, триацетин, триэтилцитрат и смеси указанных пластификаторов. Предпочтительными пластификаторами являются цетиловый спирт, стеариловый спирт, триэтилцитрат и их смеси. Когда цетиловый спирт применяют в качестве единственного пластификатора, он может присутствовать в количестве более чем примерно 1,5%, обычно в количестве примерно от 2 до примерно 15%, предпочтительно примерно от 2 до примерно 10% по массе по отношению к пленкообразующему агенту. Когда триэтилцитрат применяют в качестве единственного пластификатора, он может присутствовать в количестве от примерно 5 до примерно 20%, предпочтительно примерно от 12 до примерно 15% по массе по отношению к пленкообразующему агенту. Синтетические масла и сложные мономерные эфиры фталевой кислоты не следует рассматривать как подходящие пластификаторы. Предшествующий список пластификаторов не следует понимать как исчерпывающий, но исключительно как иллюстративный, поскольку средний специалист в данной области способен понимать, что может быть использовано множество других пластификаторов или комбинация пластификаторов в том случае, если они по существу свободны как от синтетических масел, так и от мономерных сложных эфиров фталевой кислоты.
В определенных вариантах осуществления пластификатор состоит из цетилового спирта и триэтилцитрата, которые совместно присутствуют в количестве более чем примерно 3%, обычно в количестве
- 11 045327 примерно от 4 до примерно 20%, в особенности между примерно 6 и примерно 15%, более конкретно, между примерно 7 и примерно 10% по массе по отношению к пленкообразующему агенту Массовое соотношение цетилового спирта и триэтилцитрата при их совместном присутствии может быть от примерно 0,05:1 до примерно 1:1, например 0,1:1, 0,2:1, 0,3:1, 0,4:1, 0,5:1, 0,6:1, 0,7:1, 0,8:1 или 0,9:1. В частности, соотношение цетилового спирта и триэтилцитрата может быть от примерно 0,25:1 до примерно 0,5:1, предпочтительно от примерно 0,3:1 до примерно 0,45:1, более предпочтительно от примерно 0,35:1 до примерно 0,4:1 и еще более предпочтительно от примерно 0,38:1 до примерно 0,4:1 (мас./мас.).
Кишечнорастворимое покрытие необязательно содержит добавку, уменьшающую липкость Подходящие добавки, уменьшающие липкость, включают диметикон и касторовое масло. Диметикон, в особенности диметикон 1000, является предпочтительной добавкой, уменьшающей липкость. Количество добавки, уменьшающей липкость (если присутствует) в кишечнорастворимом покрытии, составляет примерно от 1,5 до примерно 3% по массе по отношению к пленкообразующему агенту. Синтетические масла не следует рассматривать как предпочтительные добавки, уменьшающие липкость. Предшествующий список добавок, уменьшающих липкость, не следует понимать как исчерпывающий, но исключительно как иллюстративный, поскольку средний специалист в данной области способен понимать, что может быть использовано множество других добавок, уменьшающих липкость, или комбинация добавок, уменьшающих липкость.
В некоторых вариантах осуществления кишечнорастворимое покрытие составляет от примерно 5 до примерно 30% по массе, более предпочтительно от примерно 7 до примерно 20%, еще более предпочтительно от примерно 10 до примерно 15% по массе от полного состава пероральной дозированной формы с кишечнорастворимым покрытием или фармацевтической композиции с контролируемым высвобождением. В некоторых вариантах осуществления кишечнорастворимое покрытие составляет от примерно 20 до примерно 30% по массе, более предпочтительно от примерно 22 до примерно 26% по массе, еще более предпочтительно от примерно 22,5 до примерно 25% по массе от полного состава пероральной дозированной формы с кишечнорастворимым покрытием или фармацевтической композиции с контролируемым высвобождением.
В некоторых вариантах фармацевтическая композиция является капсулой с контролируемым высвобождением для перорального введения. Капсула может содержать пеллеты с кишечнорастворимым покрытием, включающие липазу, протеазу и амилазу. Пеллеты с кишечнорастворимым покрытием могут иметь первое измерение от примерно 0,5 до примерно 2 мм и, необязательно, второе измерение от примерно 0,5 до примерно 2 мм. Например, пеллеты с кишечнорастворимым покрытием могут быть приблизительно сферическими и иметь диаметр от примерно 0,71 до примерно 1,60 мм. В качестве другого примера пеллеты с кишечнорастворимым покрытием могут быть нитеобразными и иметь диаметр от примерно 0,5 до примерно 2,0 мм и длину от примерно 0,5 до примерно 2,0 мм. Композиция может далее включать неактивные ингредиенты, раскрытые в описании, такие как цетиловый спирт, диметикон, фталат гипромеллозы, полиэтиленгликоль и триэтилцитрат.
В некоторых других вариантах осуществления фармацевтическая композиция является фармацевтической композицией с немедленным высвобождением. Например, в фармацевтической композиции с немедленным высвобождением кишечнорастворимое покрытие может отсутствовать.
Г. Способы применения.
По меньшей мере в одном аспекте настоящее изобретение включает способ лечения экзокринной недостаточности поджелудочной железы у субъекта, в частности у субъекта человека в целях такого лечения. Способ включает введение субъекту ферментного препарата или фармацевтической композиции, содержащей ферментный препарат. В некоторых вариантах осуществления экзокринная недостаточность поджелудочной железы является следствием муковисцидоза, хронического панкреатита, панкреатэктомии или других состояний.
В другом аспекте настоящее изобретение включает способ лечения или предотвращения у субъекта расстройства пищеварения, в частности у субъекта человека в целях такого лечения или предотвращения. В некоторых вариантах осуществления расстройство пищеварения является следствием хронической экзокринной недостаточности поджелудочной железы, такой как у пациентов, страдающих муковисцидозом, хроническим панкреатитом, или у пациентов, перенесших хирургическое вмешательство на верхнем отделе желудочно-кишечного тракта.
В другом аспекте настоящее изобретение включает применение ферментного препарата или фармацевтической композиции, содержащей ферментный препарат, для лечения экзокринной недостаточности поджелудочной железы у субъекта в целях такого лечения.
В другом аспекте настоящее изобретение включает применение ферментного препарата или фармацевтической композиции, содержащей ферментный препарат, для лечения или профилактики расстройства пищеварения у субъекта в целях такого лечения или профилактики.
В некоторых вариантах осуществления, относящихся к способам и применениям, упомянутым выше, ферментный препарат содержит панкреатин. В некоторых вариантах осуществления подходящая дозировка панкреатина может быть основана на липазных единицах. Комитет по муковисцидозу (CFF) опубликовал Согласованное Руководство, которое содержит рекомендованные общие суточные дозы
- 12 045327 липазных единиц.
В некоторых вариантах осуществления младенцам в возрасте до 12 месяцев вводят от 2000 до
4000 липазных единиц, предпочтительно 3000 липазных единиц на 120 мл питательного состава или на одно грудное кормление.
В некоторых вариантах осуществления пациентам в возрасте от 1 года до 4 лет вводят от 1000 до 2500 липазных единиц на 1 кг массы тела на один приём пищи. В некоторых вариантах осуществления вводят от 500 до 2500 липазных единиц на 1 кг массы тела на один приём пищи в возрасте по крайней мере 4 лет.
В некоторых вариантах осуществления максимальная суточная дозировка не превышает 10000 липазных единиц на 1 кг массы тела. В некоторых вариантах осуществления максимальная суточная дозировка не превышает 4000 липазных единиц на 1 г поглощённого жира.
В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат или фармацевтическую композицию, содержащую ферментный препарат, вводят непосредственно перед приёмом пищи. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат или фармацевтическую композицию, содержащую ферментный препарат, вводят во время приёма пищи или лёгкой закуски.
В ещё одном варианте осуществления обеспечен способ лечения медицинского состояния, такого как расстройства пищеварения, экзокринная недостаточность поджелудочной железы, панкреатит, муковисцидоз, диабет типа I и/или II, введением лицу терапевтически эффективного количества ферментного препарата или фармацевтической композиции, содержащей ферментный препарат, в целях такого лечения.
По меньшей мере в одном аспекте настоящее изобретение включает способ расщепления белка. Способ включает контактирование белка, подлежащего перевариванию, с ферментной композицией в условиях, достаточных для расщепления белка.
В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат включает один или более ферментов и/или проферментов, экстрагированных из ткани животного, облучённой пучком электронов. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат включает один или более ферментов и/или проферментов, выделенных из ткани животного, облучённой пучком электронов. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат находится в неочищенной форме.
В некоторых вариантах осуществления стадия контактирования происходит in vivo. В некоторых вариантах осуществления стадия контактирования происходит in vitro.
В некоторых вариантах осуществления перевариваемый белок применяют для приготовления белкового гидролизованного продукта.
Ферментные препараты, композиции, способы и методы применения, раскрытые в описании, будут более понятны со ссылкой на следующие варианты осуществления и примеры, которые включены в настоящее описание в качестве иллюстрации и не ограничивают объём изобретения.
Д. Варианты осуществления.
Один аспект настоящего изобретения включает ферментный препарат, полученный способом, включающим стадии:
(а) получение ткани поджелудочной железы животного;
(б) облучение ткани поджелудочной железы пучком электронов с получением облучённой ткани поджелудочной железы, где облучение пучком электронов достаточно для достижения снижения микробной и/или вирусной нагрузки; и (в) выделение панкреатина из облучённой ткани поджелудочной железы.
В некоторых вариантах осуществления стадия выделения выключает инициирование гидролиза или аутолиза ткани поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления стадия выделения выключает смешивание облучённой ткани поджелудочной железы с водой. В некоторых вариантах осуществления стадия (в) включает активацию профермента из облучённой ткани поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления снижение микробной и/или вирусной нагрузки составляет по меньшей мере три log10, предпочтительно по меньшей мере четыре log10 по отношению к образцу сравнения, полученному из необлучённой ткани. Например, снижение микробной и/или вирусной нагрузки парвовирусом свиней (ПВС) составляет по меньшей мере три log10, предпочтительно по меньшей мере четыре log10 по отношению к образцу сравнения, полученному из необлучённой ткани. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность ферментного препарата, полученного на стадии (в), соответствует по меньшей мере 50%, предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности ферментного препарата сравнения, полученного из необлучённой ткани поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность является липазной активностью. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность является протеазной активностью или амилазной активностью. В некоторых вариантах осуществления способ далее включает одну или более дополнительных стадий, которые обеспечивают дополнительное снижение микробной и/или вирусной нагрузки.
Другой аспект настоящего изобретения включает ферментный препарат, содержащий один или более ферментов, выделенных из ткани млекопитающего, подвергнутой обработке, достаточной для достижения снижения вирусной нагрузки по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере
- 13 045327 на четыре log1o. Например, обработка достаточна для достижения снижения вирусной нагрузки ПВС по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10 по отношению к необлучённому контрольному образцу.
Другой аспект настоящего изобретения включает ферментный препарат, содержащий один или более ферментов, выделенных из ткани млекопитающего, где перед выделением фермента ткань млекопитающего подвергают обработке, достаточной для достижения снижения вирусной нагрузки по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10. Например, обработка достаточна для достижения снижения вирусной нагрузки ПВС по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10 по отношению к необработанному контрольному образцу. В некоторых вариантах осуществления ткань млекопитающего является тканью поджелудочной железы свиньи. В некоторых вариантах осуществления ткань поджелудочной железы свиньи является расслоенной. В некоторых вариантах осуществления ткань поджелудочной железы свиньи находится в виде замороженного блока. В некоторых вариантах осуществления ткань поджелудочной железы свиньи является цельной поджелудочной железой или её частью, такой как одна или более долей. В некоторых вариантах осуществления один или более ферментов включают панкреатин. В некоторых вариантах осуществления обработка включает облучение пучком электронов. В некоторых вариантах осуществления облучение пучком электронов имеет дозу примерно от 5 до примерно 50 кГр, предпочтительно примерно от 10 до примерно 40 кГр. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность ферментного препарата соответствует по меньшей мере 50%, предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности препарата сравнения, полученного из необлучённой ткани млекопитающего. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность является липазной активностью. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность является протеазной активностью или амилазной активностью. В некоторых вариантах осуществления снижение вирусной нагрузки является ортогональным снижением.
Другой аспект настоящего изобретения включает способ уменьшения риска загрязнения панкреатинового продукта инфицирующим агентом, включающий стадии:
(а) обеспечение ткани поджелудочной железы млекопитающего;
(б) подвергание ткани поджелудочной железы облучению пучком электронов с получением облучённой ткани поджелудочной железы, где облучение пучком электронов достаточно для достижения уменьшения риска загрязнения панкреатинового продукта инфицирующим агентом; и (в) выделение панкреатина из облучённой ткани поджелудочной железы с получением таким образом панкреатинового продукта с уменьшенным риском загрязнения инфицирующим агентом по отношению к ткани поджелудочной железы млекопитающего, полученной на стадии (а), или образцу панкреатина, выделяемому из необлучённой ткани поджелудочной железы.
В некоторых вариантах осуществления инфицирующим агентом является парвовирус свиней (ПВС). В некоторых вариантах осуществления способ обеспечивает снижение по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10 в отношении меры, характеризующей уровень активности безоболочечного вируса, такого как парвовирус свиней (ПВС). В некоторых вариантах осуществления мера, характеризующая уровень активности безоболочечного вируса, является вирусной нагрузкой.
Другой аспект настоящего изобретения включает ферментный препарат, содержащий один или более ферментов, выделенных из ткани млекопитающего, и по существу инактивированный безоболочечный вирус, где препарат имеет биологическую активность, которая соответствует по меньшей мере 50%, предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности препарата сравнения. В некоторых вариантах осуществления препарат сравнения не был подвергнут обработке, достаточной для инактивирования безоболочечного вируса. В некоторых вариантах осуществления по существу инактивированный безоболочечный вирус является парвовирусом свиней (ПВС). В некоторых вариантах осуществления один или более ферментов включают панкреатин. В некоторых вариантах осуществления один или более ферментов выделены из ткани млекопитающего. В некоторых вариантах осуществления тканью млекопитающего является ткань млекопитающего, облучённая пучком электронов.
Другой аспект настоящего изобретения включает фармацевтическую композицию, содержащую один или более ферментов, выделенных из ткани млекопитающего, которая была подвергнута обработке для уменьшения риска вирусной или микробной инфицированности, где композиция имеет биологическую активность, соответствующую по меньшей мере 50%, предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности композиции сравнения. В некоторых вариантах осуществления один или более ферментов включают липазу. В некоторых вариантах осуществления композиция сравнения содержит необработанный образец ткани млекопитающего, соответствующей ткани млекопитающего, которая была подвергнута обработке для уменьшения риска вирусной или микробной инфицированности. В некоторых вариантах осуществления обработка включает облучение пучком электронов. В некоторых вариантах осуществления облучение пучком электронов имеет дозу примерно от 5 до примерно 50 кГр, предпочтительно примерно от 10 до примерно 40 кГр.
Другой аспект настоящего изобретения включает способ получения панкреатинового продукта,
- 14 045327 включающий стадии:
(а) получение ткани поджелудочной железы млекопитающего;
(б) облучение ткани поджелудочной железы пучком электронов с получением облученной ткани поджелудочной железы:
(в) выделение панкреатина из облученной ткани поджелудочной железы с получением панкреатинового продукта.
В некоторых вариантах осуществления биологическая активность панкреатинового продукта, полученного на стадии (в), соответствует по меньшей мере 50%, предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности панкреатинового продукта сравнения. В некоторых вариантах осуществления панкреатиновый продукт сравнения получен из необлученной ткани поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления облучение пучком электронов достаточно для достижения снижения вирусной нагрузки по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10. Например, обработка достаточна для достижения снижения вирусной нагрузки ПВС по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10 по отношению к необлученному образцу сравнения. В некоторых вариантах осуществления облучение пучком электронов имеет дозу примерно от 5 до примерно 50 кГр, предпочтительно примерно от 10 до примерно 40 кГр. В некоторых вариантах осуществления биологической активностью является липазная активность. В некоторых вариантах осуществления биологической активностью является протеазная активность или амилазная активность.
Другой аспект настоящего изобретения включает способ переваривания белка, включающий стадии (а) обеспечения ферментного или проферментного препарата, выделенного из ткани животного, облученной пучком электронов; и (б) контактирования белка с ферментным или проферментным препаратом в условиях, достаточных для переваривания белка. В некоторых вариантах осуществления стадия контактирования происходит да vivo. В некоторых вариантах осуществления стадия контактирования происходит in vitro. В некоторых вариантах осуществления тканью животного является поджелудочная железа свиньи. В некоторых вариантах осуществления перевариваемый белок применяют для приготовления белкового гидролизованного продукта. В некоторых вариантах осуществления ферментный или проферментный препарат, выделенный из ткани животного, облученной пучком электронов, показывает снижение вирусной нагрузки по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10 по отношению к ферментному или проферментному препарату сравнения, выделяемому из необлученной ткани животного. В некоторых вариантах осуществления ферментный или проферментный препарат, выделяемый из ткани животного, облученной пучком электронов, показывает биологическую активность, соответствующую по меньшей мере 50%, предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности ферментного или проферментного препарата сравнения, выделяемого из необлученной ткани животного.
Другой аспект настоящего изобретения включает ферментный препарат, содержащий один или более ферментов, выделенных из ткани поджелудочной железы, облученной пучком электронов. В некоторых вариантах осуществления ткань поджелудочной железы включает поджелудочную железу свиньи. В некоторых вариантах осуществления перед облучением поджелудочную железу свиньи замораживают и механически перерабатывают в чешуйки или блоки. Так, в некоторых таких вариантах ткань поджелудочной железы, подвергаемая облучению пучком электронов, является расслоенной замороженной тканью поджелудочной железы или замороженным блоком ткани поджелудочной железы. В некоторых вариантах осуществления поджелудочная железа свиньи является цельной поджелудочной железой или ее частью, такой как одна или более долей. В некоторых вариантах осуществления один или более ферментов включают панкреатин. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат показывает снижение вирусной нагрузки по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10 по отношению к ферментному препарату сравнения. Например, ферментный препарат показывает снижение вирусной нагрузки ПВС по меньшей мере на три log10, предпочтительно по меньшей мере на четыре log10 по отношению к ферментному препарату сравнения. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность ферментного препарата соответствует по меньшей мере 50%, предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности ферментного препарата сравнения. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность является липазной активностью. В некоторых вариантах осуществления биологическая активность является протеазной активностью или амилазной активностью. В некоторых вариантах осуществления ферментный препарат сравнения получен из необлученной ткани. В некоторых вариантах осуществления снижение вирусной нагрузки является ортогональным снижением.
Другой аспект настоящего изобретения включает способ лечения экзокринной недостаточности поджелудочной железы, включающий введение пациенту дозы любого из указанных выше ферментных препаратов и/или фармацевтических композиций. В некоторых вариантах осуществления экзокринная недостаточность поджелудочной железы является следствием муковисцидоза или хронического панкреатита.
Е. Примеры.
Пример 1. Облучение пучком электронов парвовируса свиней (ПВС), панкреатина АФИ и поджелу- 15 045327 дочной железы свиньи.
Материалы и способы.
Парвовирус свиней в клеточной культуральной жидкости во флаконах.
Поскольку сама ткань поджелудочной железы свиньи может обладать некоторым инактивирующим действием на вирусы, первоначально образцы вирусов, используемые в данных исследованиях, готовят из инфицированных культур клеток. Парвовирус свиней (ПВС), штамм NADL-2 (ATCC® VR-742™) и свиные семенные клетки (ATCC® CRL-1746™) приобретают в Американской коллекции типовых культур (ATCC). ПВС размножают, культивируют и хранят в соответствии с рекомендациями ATCC. ПВС размножают приблизительно до титра 108 вирусных инфекционных единиц (ИЕ)/мл. Вирус собирают из лизированных клеток в клеточной культуральной среде, состоящей из минимальной питательной среды (МПС), 10% эмбриональной телячьей сыворотки (ЭТС), 2 мМ глутамина, 100 ЕД/мл пенициллина, 100 мг/мл стрептомицина.
Перед поставкой ПВС фасуют во флаконы, а затем помещают в двойные пакеты. Флаконами являются криогенные флаконы Nalgene, т.е. полипропиленовые с навинчиваемыми снаружи крышками из полиэтилена высокой плотности (ПЭВП) с кольцом, предохраняющим от протечки, имеющие длину 1,87 дюйма, диаметр 0,5 дюйма и вместимость 2,0 мл и объём заполнения 1,0 мл. Каждый отдельный флакон помещают в пакет Food Saver (полиэтиленовый с внешним нейлоновым слоем) и запечатывают под вакуумом. Пакеты обрезают так, чтобы они точно подходили к флаконам. Четыре отдельных флакона затем помещают внутрь другого пакета Food Saver (приблизительно 11x14 дюймов) и запечатывают под вакуумом.
Замороженные расслоенные поджелудочные железы свиней.
Поджелудочную железу, полученную от убойного борова (Animal Technology, Tyler, TX), хранят на сухом льду.
Замороженную расслоенную поджелудочную железу свиньи помещают в 12х12х13/4-дюймовый контейнер (прозрачный полипропилен), который запечатывают под вакуумом в 3 мил пакет из полипропилена/нейлона. Пакет запечатывают нагревом. Поджелудочные железы хранят на сухом льду, чтобы гарантировать температуры ниже 20°C. Масса образца замороженной расслоенной поджелудочной железы свиньи равна 1,05 кг плюс масса упаковки 270 г (0,27 кг). Крышка весит 100 г. Поверхностная плотность 1,3 г/см2. Для каждой дозы излучения готовят две упаковки, включая контроль без облучения, одну невскрытую упаковку применяют для выделения ферментного препарата после доставки обратно на место проведения выделения с другой упаковкой, составляющей запас.
Панкреатин (АФИ).
Применяли два типа АФИ панкреатина: панкреатин N и панкреатин S. Оба АФИ хранили в условиях окружающей среды. Панкреатин N (номер материала 1030828, Abbott Laboratories) является порошком от желтоватого/серого до нечисто белого цвета. Панкреатин N имеет происхождение из поджелудочной железы убойного борова. Панкреатин S (номер материала 1030829, Abbott Laboratories) является порошком от желтоватого/серого до нечисто белого цвета. Использовался панкреатин S из поджелудочной железы коровы.
Панкреатин АФИ помещали в 21/2х31/2х15/8-дюймовый контейнер (прозрачный полипропилен), который запечатывали под вакуумом в 3 мил пакет из полипропилена/ нейлона. Пакет запечатывали нагревом. Масса образца АФИ панкреатина 80 г плюс масса упаковки 26 г. Поверхностная плотность 1,4 г/см2. Образцы панкреатина N подвергали облучению пучком электронов при указанной дозе. Контроль не подвергали облучению пучком электронов.
Активность панкреатина N определяли после возвращения на место исследования. Использовался панкреатин N из поджелудочной железы убойного борова. Все упаковки панкреатина N приходят с места облучения невскрытыми.
Облучение пучком электронов.
Источником пучка электронов является линейный ускоритель для обработки промышленных материалов (IMPELA®, Iotron Industries, Inc Columbia City, IN), 10 МэВ, ширина сканирования 80 см.
Образцы замороженной расслоенной поджелудочной железы свиньи и парвовируса свиней хранят при температуре ниже -20°C, поместив на сухой лед, находящийся на алюминиевом поддоне. Дозиметры размещают на верхней поверхности каждого образца. Образцы упакованного АФИ панкреатина, находящиеся при температуре окружающей среды, помещают на растянутый лист пенополистирола, дозиметры размещают на верхней поверхности. Упаковки направляют на конвейерную ленту под электронно-лучевой трубкой. После одного прохода облучения дозиметры забирают. Упаковки направляют на второй проход под излучающей трубкой после переворачивания упаковки (верхняя сторона теперь обращена вниз) и на верхней поверхности размещают новый дозиметр. После второго круга облучения упаковки и дозиметры забирают. Упаковки замороженных расслоенных поджелудочных желез свиньи и парвовируса свиней забирают и помещают для перевозки на сухой лед. Упаковки АФИ панкреатина забирают и хранят при перевозке при температуре окружающей среды. Упаковки контроля замороженных расслоенных поджелудочных желез свиньи и парвовируса свиней, помещенные на сухой лед, для обрат- 16 045327 ной перевозки на сухом льду готовят без воздействия излучением. Упаковки контроля АФИ панкреатина, приготовленные для обратной перевозки, хранят при температуре окружающей среды и готовят без воздействия излучением. Дозу пучка электронов вычисляют из показаний дозиметра с помощью калибровочной кривой.
Исследование вирусной инфицированности.
Вирусную инфицированность определяют титрованием десятикратных разведений на 96-луночных микропланшетах с применением подходящих контролей в трехкратном повторении для каждой дозы энергии. Вирусные титры вычисляют с применением способа Рида и Мюнха, описанного в статье Reed L.J., Muench H. (1938), A simple method of estimating fifty percent endpoints, The American Journal of Hygiene, 27:493-493, и выражают как 50% TCID50 на 1 мл.
Выделение и исследование панкреатина.
Способ, применяемый для выделения панкреатина, по существу схож с раскрытым в US 4623624 и включает гидролиз и/или аутолиз с последующим просеиванием волокна, осаждение ферментов, отделение осадка фильтрацией и/или центрифугированием, промывку фильтровальной лепешки, сушку и уменьшение размера частиц. Гидролиз проводят, используя одну упаковку, соответствующую каждой дозе излучения, включая необлученный контроль. Для каждого опыта по выделению отбирают упаковку без повреждений (таких как большие трещины). Благодаря предосторожностям, принятым при обратной перевозке на место исследования, все упаковки приходят неповрежденными, и одну упаковку для каждой дозы излучения, включая контроль, случайным образом выбирают для выделения. Для начала гидролиза в качестве источника протеазы применяют панкреатин с более раннего выделения. Для подачи ионов кальция, необходимых для активации протеаз, применяют гидроксид кальция. В качестве буферного агента для гидролиза применяют бикарбонат натрия. В качестве пеногасящего агента применяют симетикон. Гидролиз поджелудочной железы проводят при температуре, близкой к температуре окружающей среды. Окончание гидролиза определяют центрифугированием гидролизованной смеси после добавления изопропанола как описано ниже. После окончания гидролиза для снижения скорости гидролиза добавляют дополнительный изопропанол, смесь охлаждают, смесь перемешивают и отделяют волокна с применением сита 0,425 дюйма. Волокна промывают изопропанолом и сдавливают для вытеснения удерживаемой жидкости. Промывную жидкость объединяют с ранее полученным фильтратом. Для осаждения ферментов к фильтрату добавляют дополнительный изопропанол. Суспензию фильтруют через фильтровальную ткань с отверстиями в 15 мкм и промывают повышающимися концентрациями изопропанола и абсолютным изопропанолом в качестве конечной промывки. Лепешку сушат на фильтровальной ткани в токе азота, создавая вакуум под фильтровальной тканью до тех пор, пока лепешка не будет визуально казаться сухой (цвет лепешки становится светлее после удаления изопропанола и воды). Лепешку снимают с фильтровальной ткани и сушат в вакууме и в токе азота при температуре ниже примерно 50°C до содержания воды по Карлу Фишеру 3,5% или ниже. Выход панкреатина составляет от 80 до 100 г с 1 кг замороженной расслоенной поджелудочной железы убойного борова.
Центрифужное исследование на окончание гидролиза.
Из сосуда для гидролиза отбирают три черпака примерно по 10 мл и пропускают через сито 0,425 мм, собирают фильтрат в пластиковый стакан (в пластиковый стакан также выскребают фильтрат), отбрасывают волокна, которые задержались на сите. С помощью пипетки в 50 мл центрифужную пробирку добавляют 10 г раствора из реактора, добавляют 5,5 мл 85% ИПС, перемешивают 1 мин шпателем. В 50 мл центрифужную пробирку к фильтрату добавляют 20 мл 85% ИПС, перемешивают 1 мин шпателем. Центрифугируют суспензию примерно при 90xg в течение 2 мин.
Первый образец можно отбирать через 2 ч после начала гидролиза или когда цвет изменится с розового до коричневатого и суспензия станет более тонкой (примерно 2 ч).
Следующий образец отбирают, когда цвет станет коричневым без розового оттенка, в этой точке ожидается примерно 25% осадка, осадок будет менее твердым, и в прозрачном верхнем слое могут присутствовать остатки. После этого отбор проб, по возможности, можно производить с получасовыми интервалами.
Гидролиз прекращают, когда два последовательных измерения показывают менее 20% осадков. В этой точке осадок будет твердым без остатков в прозрачном верхнем слое.
Двустороннее облучение ПВС во флаконах пучком электронов проводят в трех повторениях. Данные по вирусной нагрузке и логарифмической редукции ПВС, подвергнутого облучению пучком электронов, приведены в табл. 1.
- 17 045327
Таблица 1
Доза | 0 | 9,5 | 19,25 | 38,45 | 0 | 9,5 | 19,25 | 38,45 |
(кГр) | Вирусная | Вирусная | Вирусная | Вирусная | Логариф- | Логариф- | Логариф- | Логариф- |
нагрузка | нагрузка | нагрузка | нагрузка | мическая | мическая | мическая | мическая | |
редукция | редукция | редукция | редукция | |||||
Вирус, | Вирус, | Вирус, | Вирус, | |||||
титр/мл | титр/мл | титр/мл | титр/мл | |||||
Тест А | 1,50Е+08 | 2,50Е+06 | 1,50Е+05 | 0,00Е+00 | 1,78Е+00 | 3,00Е+00 | ||
Тест В | 1,50Е+08 | 6,34Е+06 | 6,34Е+04 | 0 | 1,37Е+00 | 3,37Е+00 | ||
Тест С | 4,00Е+08 | 1,26Е+06 | 4,00Е+05 | 1,50Е+02 | 0 | 2,50+00 | 3,00Е+00 | 6,43Е+00 |
Среднее | 0 | 1,88Е+00 | ЗД2Е+00 | 6,43Е+00 |
Дозу пучка электронов определяют, оценивая дозу, поглощённую каждым образцом из поверхностной дозы, показанной дозиметром, закреплённым на контейнере с образцом. В табл. 1 показано, что воздействие на ПВС примерно 40 кГр обеспечивает примерно 6,5 log10 логарифмической редукции, тогда как воздействие примерно 20 кГр обеспечивает примерно 3 log10 логарифмической редукции. На основе этих данных ожидается, что воздействие примерно 30 кГр обеспечит примерно 4 log10 логарифмической редукции.
Воздействие на ПВС примерно 60 кГр, примерно 80 кГр или примерно 100 кГр приводит к конечным вирусным титрам ниже предела обнаружения исследования.
Панкреатин исследуют валидированными способами на активности свободных протеазы, амилазы и липазы, как описано в Фармакопее США. Панкреатин исследуют валидированными способами на общую протеазу, как описано в Европейской Фармакопее (ЕФ).
Выполнение двустороннего облучения панкреатина N пучком электронов.
Все контейнеры с панкреатином N в месте исследования получают неповреждёнными и используют для исследования.
Данные по ферментной активности АФИ панкреатина, подвергнутого облучению пучком электронов, приведены в табл. 2.
Таблица 2
Доза электронного | Активность | Активность | Общая | Активность |
пучка | липазы | амилазы | активность | свободной |
протеазы | протеазы | |||
кГр | единицы | единицы | единицы | единицы |
Американской | Американской | Американской | Американской | |
фармакопеи/г | фармакопеи/г | фармакопеи/г | фармакопеи/г | |
Контроль (0 кГр) | 89106 | 564390 | 383192 | 314093 |
18,6 кГр | 63328 | 398752 | 321567 | 266540 |
37,45 кГр | 58631 | 386628 | 302341 | 244531 |
56,5 кГр | 47755 | 282378 | 272499 | 232087 |
76,35 кГр | 40583 | 272760 | 259117 | 214914 |
99,4 кГр | 37799 | 286652 | 247005 | 196356 |
В табл. 2 показано, что воздействие на АФИ панкреатина примерно 20 кГр приводит к потере примерно 30% липазной активности, воздействие на АФИ панкреатина примерно 40 кГр приводит к потере примерно 35% липазной активности, воздействие на АФИ панкреатина примерно 60 кГр приводит к потере примерно 46% липазной активности, воздействие на АФИ панкреатина примерно 80 кГр приводит к потере примерно 54% липазной активности, воздействие на АФИ панкреатина примерно 100 кГр приводит к потере примерно 58% липазной активности. На основе этих данных ожидается, что воздействие примерно 30 кГр приведёт к потере примерно 30% липазной активности.
Выполнение двустороннего облучения поджелудочной железы убойного борова пучком электронов. Данные по ферментной активности панкреатина, полученного из замороженной расслоенной поджелудочной железы убойного борова, подвергнутой облучению пучком электронов, приведены в табл. 3.
- 18 045327
Таблица 3
Доза электронного | Активность | Активность | Общая активность | Активность |
пучка | липазы | амилазы | протеазы | свободной протеазы |
кГр | единицы | единицы | единицы | единицы |
Американской | Американской | Американской | Американской | |
фармакопеи/г | фармакопеи/г | фармакопеи/г | фармакопеи/г | |
Контроль (0 кГ р) | 74986 | 423487 | 243421 | 151365 |
18,75 кГр | 74741 | 449569 | 337594 | 128749 |
35,5 кГ р | 65348 | 349816 | 360407 | 128506 |
56,55 кГ р | 57976 | 398281 | 268297 | 119727 |
77,4 кГр | 34806 | 251691 | 175994 | 109158 |
100,4 кГр | 36362 | 276118 | 206217 | 100342 |
В табл. 3 показано, что воздействие на замороженную расслоенную поджелудочную железу убойного борова примерно 20 кГр приводит к потере примерно 1% липазной активности, воздействие на замороженную расслоенную поджелудочную железу убойного борова примерно 40 кГр приводит к потере примерно 13% липазной активности, воздействие на замороженную расслоенную поджелудочную железу убойного борова примерно 60 кГр приводит к потере примерно 23% липазной активности, воздействие на замороженную расслоенную поджелудочную железу убойного борова примерно 80 кГр приводит к потере примерно 54% липазной активности, воздействие на замороженную расслоенную поджелудочную железу убойного борова примерно 100 кГр приводит к потере примерно 52% липазной активности. На основе этих данных ожидается, что воздействие примерно 30 кГр приведет к потере примерно 10% липазной активности.
Как показано в табл. 2 и 3, облучение АФИ панкреатина пучком электронов приводит к меньшей потере ферментной активности по сравнению с облучением ткани поджелудочной железы пучком электронов перед выделением. Не желая быть связанным теорией, устойчивость интактной ткани к облучению пучком электронов может быть связана с конформацией фермента (т.е. в форме профермента) в ткани-источнике и/или сопутствующими коферментами в ткани-источнике, обеспечивающими защиту структуры.
Пример 2. Облучение электронным пучком целой поджелудочной железы свиней.
Дальнейшее исследование выполняют с применением целой поджелудочной железы свиней. Примерно 3,6 кг размороженной поджелудочной железы свиней помещают в картонные коробки, обработанные изнутри воском, размером примерно 10x15x1,5 дюймов. Коробки замораживают до -20°C и хранят до применения для облучения пучком электронов. Коробки перевозят для облучения пучком электронов в грузовике-рефрижераторе (-20°C). Коробки достают из грузовика-рефрижератора и затем подвергают двустороннему облучению электронным пучком, при этом необлученные коробки служат в качестве контрольных. По пять коробок используют для каждой номинальной дозы облучения 0, 15, 20 и 25 кГр и отправляют обратно для оценки в грузовике-рефрижераторе (-20°C), вместе с необлученными коробками, и затем хранят при -20°C.
Замороженные образцы поджелудочной железы выбираются из каждой коробки в произвольном порядке внутри коробки для дальнейшего выделения панкреатина. Выделение проводят, как описано в данном описании изобретения. Панкреатин, выделенный из цельной поджелудочной железы, подвергнутой облучению пучком электронов, затем исследуют на ферментную активность согласно колориметрическому исследованию.
Образцы АФИ панкреатина испытывают, используя колориметрический кинетический анализ при помощи считывателя микропланшета с применением субстратов, структурно схожих с теми, что используются в USP 39 <Pancrelipase>. Активности ферментов определяют, измеряя скорость образования продукта по отношению к стандартному образцу панкрелипазы. Показана аналитическая сравнимость между зарегистрированными методами из монографии Американской фармакопеи и альтернативными способами, использующими методы считывателя микропланшета.
Процедуры приготовления образцов, выделения и оценки повторяют по четыре раза для каждой дозы для того, чтобы получить в общей сложности по пять измерений для каждой дозы. Средние значения пяти измерений приведены в табл. 4.
- 19 045327
Таблица 4
Ферментная активность АФИ после облучения цельной поджелудочной железы
Доза электронного | Средняя | Средняя | Средняя | Средняя общая |
пучка* | липазная | амилазная | активность | активность |
активность | активность | свободной протеазы | протеазы | |
кГр | единицы | единицы | единицы | единицы |
Американской | Американской | Американской | Американской | |
фармакопеи/мг | фармакопеи/мг | фармакопеи/мг | фармакопеи/мг | |
Контроль (0 кГр) | 104 | 456 | 197 | 344 |
14,9 кГр | 99 | 435 | 201 | 291 |
19,9 кГр | 106 | 411 | 200 | 316 |
24,9 кГр 104 395 * (минимальная доза + максимальная доза)/2. | 183 | 301 |
В табл. 4 показано, что панкреатин, выделенный из цельной поджелудочной железы, подвергнутый облучению электронным пучком дозой до примерно 25 кГр, обладает такой же или по существу такой же липазной активностью, что и панкреатин, выделенный из необлученного контрольного образца.
Пример 3. Облучение электронным пучком малыми дозами интактной ткани поджелудочной железы свиней.
Дальнейшие исследования проводят впрыскиванием в ткань поджелудочной железы свиней живого вируса и затем подвергают содержащие вирус ткани облучению электронным пучком с малыми дозами (приблизительно 12,3 кГр), чтобы обеспечить выделение и оценку вируса. Данное дополнительное исследование проводят для демонстрации эффективной инактивации нескольких родственных вирусов при малых дозах, чтобы обеспечить эффективную количественную оценку влияния облучения пучком электронов.
Избранные вирусы намеренно впрыскивают в образцы тканей и уровень элиминации вируса определяют сравнением количества введенного вируса и количества вируса, оставшегося после обработки пучком электронов. Вирусы, выбранные для данного исследования, приведены в табл. 5.
Таблица 5
Вирусы, выбранные для исследования элиминации вируса
Вирус | Семейство | Геном | Оболочка | Размер (нм) | Физико- |
Реовирус типа 3 | Reo | РНК | Нет | 60-80 | химическая резистентность Средняя |
РЕОЗ Парвовирус | Parvo | ДНК | Нет | 18-24 | Высокая |
свиней пвс Кошачий | Calici | РНК | Нет | 35-39 | Средняя |
калицивирус
ККВ .
PEO3 имеет двухцепочечную РНК, сегментированный геном и принадлежит к семейству вирусов Reoviridae, к которому также относится ротавирус. Таким образом, PEO3 может служить моделью для ротавируса. ККВ используется в качестве модельного вируса для проверки достоверности методов инактивации в кровяных продуктах и, в частности, в качестве модельного для вируса гепатита E (ВГЕ).
Поджелудочную железу свиней нарезают и измельчают. Ткань затем добавляют на чашку Петри и впрыскивают в неё определённый вирус. Стандартные вирусные материалы обладают сертифицированными титрами, по меньшей мере 1 х 107 БОЕ/мл. Образец с добавкой выдерживают при комнатной температуре по меньшей мере в течение 60 мин (до тех пор, пока ткань не вернётся к исходной сухости). Вслед за выдержкой дополнительное количество ткани поджелудочной железы свиней добавляют на чашку. Чашку затем запечатывают и помещают на сухой лёд для перевозки к установке для облучения электронным пучком. Каждая из чашек содержит приблизительно 13 г ткани, при этом плотность ткани схожа с плотностью цельной железы.
Для каждого вируса имеются также обработанные образцы восстановления (не перевезённые) и необлучённые перевозимые образцы контроля (перевезённые к установке для облучения электронным пуч- 20 045327 ком, но не облучённые).
Облучение пучком электронов проводят на установке по облучению пучком электронов. После того, как обработка излучением пучка электронов окончена, облучённые образцы и необлучённые перевезённые образцы контроля перевозят обратно для определения вирусной нагрузки. По методике, образцы до исследования хранят при температуре нем более чем -60°C.
Для каждого образца 50 мл культуральной среды добавляют в стерильную бутылку. Ткань экстрагируют, выполняя трижды вымачивание в течение приблизительно 5-10 мин при комнатной температуре с последующим 15-30-секундным перемешиванием на вортексе. Затем образцы центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 мин. Надосадочную жидкость от экстракции используют для исследования вируса.
Вирусные титры определяют, используя стандартный тест бляшкообразования. В качестве типа клеток-индикаторов для PEO3, ПВС и ККВ используют Vero, PT-1 и CRFK соответственно. Вирусные титры и фактор элиминации вируса рассчитывают в соответствии со стандартными процедурами. Фактор элиминации вируса (ФЭВ) рассчитывают следующим образом:
ФЭВ- log Объём * титр перед обработкой
Объём * титр после обработки
Данные по элиминации вируса, вызванной облучением образца содержащей вирус ткани пучком электронов, представлены в табл. 6.
Таблица 6
Элиминация вируса после облучения поджелудочной железы с добавкой вируса
Общий вирусный log | Фактор | 95% | ||
Модельный вирус | До обработки | После обработки | элиминации | доверительный |
вируса | интервал | |||
РЕОЗ | 6,5 | <2,4 | >4,1 | 0,08 |
ККВ | 6,7 | 4,9 | 1,8 | 0,05 |
ПВС | 5,8 | 3,6 | 2,2 | 0,29 |
Данные исследования подтверждают, что достаточная инактивация вирусов, включая кошачий калицивирус (ККВ) и реовирус типа 3 (PEO3), может быть достигнута при помощи облучения интактной ткани пучком электронов малой дозой. Более того, облучение поджелудочной железы с последующим выделением ферментного препарата (например, АФИ панкреатина) из облучённой железы демонстрирует схожие результаты потери ферментной активности по отношению к необлучённому контрольному образцу, как показано в табл. 3, где использовалась расслоенная поджелудочная железа свиней.
Введение стадии обеззараживания перед обработкой поджелудочной железы свиней обеспечивает эффективный контроль известных инфекционных агентов как касательно безопасности оператора при выделении ферментов, так и относительно безопасности пациентов. Таким образом, использование обработки пучком электронов, которая эффективна для инактивации широкого спектра микробов и вирусов, включая вирусы, которые сложно инактивировать (например, парвовирус свиней), с минимальными потерями ферментной активности, обеспечивает преимущество по сравнению с другими способами.
Как раскрыто в описании, стадия облучения пучком электронов может рассматриваться как стадия ортогональной инактивации вируса. Уменьшение микробной и/или вирусной нагрузки, полученной в ткани поджелудочной железы, облученной пучком электронов, аддитивно переходит и на панкреатин, из неё выделяемый, по отношению к уменьшению, достигнутому на других стадиях снижения микробной и/или вирусной нагрузки. Общая логарифмическая (log10) редукция, достигаемая на всех стадиях, включая облучение пучком электронов, является кумулятивной логарифмической (log10) редукцией, достигаемой на всех стадиях микробной и/или вирусной инактивации, произведенной на ткани поджелудочной железы.
Следует понимать, что предыдущее подробное описание и прилагаемые примеры являются исключительно иллюстративными и их не следует воспринимать как ограничивающие объем изобретения, который определен исключительно прилагаемой формулой изобретения и ее эквивалентами. Специалисту в данной области очевидны различные замены и модификации к раскрытым вариантам осуществления изобретения. Такие замены и модификации, включая, без ограничения, относящиеся к химическим структурам, заместителям, производным, промежуточным продуктам, синтезам, составам или способам или любым комбинациям таких замен и модификаций в применении изобретения могут быть сделаны, не отступая от замысла и объема охраны изобретения.
Все источники (из патентной и непатентной литературы), цитированные выше, включены в данный документ посредством ссылки. Обсуждение таких источников предназначено исключительно для того, чтобы обобщить утверждения, сделанные их авторами. Не предполагается, что любой из этих источни-
Claims (8)
- ков (или часть любого источника) является релевантным из уровня техники (и вообще входит в уровень техники). Заявитель оставляет за собой право выражать сомнения в точности и уместности цитированных источников.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Ферментный препарат для лечения внешнесекреторной недостаточности поджелудочной железы, полученный способом, включающим стадии:(а) облучение пучком электронов интактной ткани поджелудочной железы млекопитающего с получением облучённой ткани поджелудочной железы, где облучение пучком электронов имеет дозу от примерно 5 до примерно 50 кГр и является достаточным для достижения снижения вирусной нагрузки модельным вирусом по меньшей мере на три logio по отношению к образцу сравнения; и (б) выделение панкреатина из облучённой ткани поджелудочной железы.
- 2. Ферментный препарат по п.1, где облучение пучком электронов достаточно для достижения снижения вирусной нагрузки модельным вирусом по меньшей мере на четыре login по отношению к образцу сравнения.
- 3. Ферментный препарат по п.1, где модельный вирус является парвовирусом свиней (ЛВС).
- 4. Ферментный препарат по п.1, где интактной тканью поджелудочной железы млекопитающего является расслоенная ткань, цельная железа или часть цельной железы.
- 5. Ферментный препарат по п.1, где стадия (б) включает инициирование гидролиза или аутолиза облучённой ткани поджелудочной железы или активацию профермента из облучённой ткани поджелудочной железы.
- 6. Ферментный препарат по любому из пп.1-5, где биологическая активность ферментного препарата, полученного на стадии (б), соответствует по меньшей мере 50%, предпочтительно по меньшей мере 90% биологической активности ферментного препарата сравнения.
- 7. Ферментный препарат по п.6, где биологическая активность является липазной активностью.
- 8. Ферментный препарат по любому из пп.1-7, где облучение пучком электронов имеет дозу примерно от 10 до примерно 40 кГр.^gj) Евразийская патентная организация, ЕАПВРоссия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US62/314,048 | 2016-03-28 | ||
US62/452,746 | 2017-01-31 | ||
US62/454,184 | 2017-02-03 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA045327B1 true EA045327B1 (ru) | 2023-11-15 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20190201502A1 (en) | Enzyme compositions with reduced viral and microbial contamination | |
US10704037B2 (en) | Processes for the manufacture and use of pancreatin | |
US20220211825A1 (en) | Enzyme compositions with reduced viral and microbial contamination | |
US8283147B2 (en) | Pancreatin and method for reducing the viral and microbial contamination of pancreatin | |
CA2793686A1 (en) | Pharmaceutical compositions comprising a pancreatic enzyme preparation with viral infectivity reduced below a significant level and methods of preparing and using the same | |
TR201808840T4 (tr) | Stabil sindirim enzimi bileşimleri. | |
US10184121B2 (en) | Methods for removing viral contaminants from pancreatic extracts | |
Ma et al. | Temporal distribution of encapsulated bacteriophages during passage through the chick gastrointestinal tract | |
Luo et al. | Inactivation of two SARS-CoV-2 virus surrogates by electron beam irradiation on large yellow croaker slices and their packaging surfaces | |
US10093916B2 (en) | Method for reducing or inactivating viral and microbial content in the processes for the manufacture of pancreatin | |
EP3688153A1 (en) | Enzyme compositions with reduced viral and microbial contamination | |
EA045327B1 (ru) | Композиции ферментов с уменьшенным вирусным и микробным загрязнением | |
EA040925B1 (ru) | Препарат панкреатина с уменьшенной вирусной и микробной нагрузкой и способ его получения | |
EA045569B1 (ru) | Ферментный препарат со сниженным уровнем вирусного и микробного загрязнения и способ его получения | |
Stefansson et al. | A medical device forming a protective barrier that deactivates four major common cold viruses | |
US20100119654A1 (en) | Method for reducing the virus and micro-organism content of biological extracts which contain solids and extract produced according to the method | |
CN114303454B (zh) | 生物制品dbt的病毒灭活方法 | |
ES2896244T3 (es) | Método para reducir o inactivar contenido vírico y microbiano en los procesos para la fabricación de pancreatina | |
BR112017024920B1 (pt) | Método de fabricação de uma preparação de pancreatina |