EA045153B1 - Способ получения кормовой добавки из отходов переработки семян масличных культур - Google Patents
Способ получения кормовой добавки из отходов переработки семян масличных культур Download PDFInfo
- Publication number
- EA045153B1 EA045153B1 EA202190733 EA045153B1 EA 045153 B1 EA045153 B1 EA 045153B1 EA 202190733 EA202190733 EA 202190733 EA 045153 B1 EA045153 B1 EA 045153B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- fermentation
- feed additive
- feed
- vol
- strain
- Prior art date
Links
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 title claims description 86
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 69
- 238000012545 processing Methods 0.000 title claims description 30
- 239000002699 waste material Substances 0.000 title claims description 29
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 83
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 83
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 41
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 41
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 41
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 38
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 37
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 35
- 241000223253 Rhodotorula glutinis Species 0.000 claims description 30
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 claims description 25
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 claims description 25
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 25
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 25
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 25
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 25
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 23
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 claims description 23
- 108010011619 6-Phytase Proteins 0.000 claims description 22
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims description 22
- 241001123225 Naumovozyma castellii Species 0.000 claims description 22
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 21
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 21
- 241000854838 Paenibacillus nicotianae Species 0.000 claims description 19
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 19
- 101710121765 Endo-1,4-beta-xylanase Proteins 0.000 claims description 17
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 claims description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 15
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 claims description 15
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 15
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 14
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims description 14
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 13
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims description 13
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 claims description 12
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 claims description 12
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims description 12
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims description 12
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims description 12
- 102000005840 alpha-Galactosidase Human genes 0.000 claims description 12
- 108010030291 alpha-Galactosidase Proteins 0.000 claims description 12
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 claims description 12
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims description 12
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 claims description 12
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 12
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 12
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 11
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims description 11
- 241000223252 Rhodotorula Species 0.000 claims description 10
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 10
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 10
- 102100032487 Beta-mannosidase Human genes 0.000 claims description 9
- 108010055059 beta-Mannosidase Proteins 0.000 claims description 9
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 claims description 8
- 241000179039 Paenibacillus Species 0.000 claims description 6
- 229940025131 amylases Drugs 0.000 claims description 6
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 claims description 6
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 claims description 6
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 claims description 6
- 108010084185 Cellulases Proteins 0.000 claims description 5
- 102000005575 Cellulases Human genes 0.000 claims description 5
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 5
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 5
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 5
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 5
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 claims description 4
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 claims description 4
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000020238 sunflower seed Nutrition 0.000 claims description 4
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 claims description 2
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 claims description 2
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 claims description 2
- 210000004767 rumen Anatomy 0.000 claims description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 102000044503 Antimicrobial Peptides Human genes 0.000 claims 1
- 108700042778 Antimicrobial Peptides Proteins 0.000 claims 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 claims 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 claims 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 241000276703 Oreochromis niloticus Species 0.000 claims 1
- 241000178961 Paenibacillus alvei Species 0.000 claims 1
- 241001097592 Paenibacillus xylanexedens Species 0.000 claims 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims 1
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 claims 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 claims 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 claims 1
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 claims 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 claims 1
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 claims 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 71
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 53
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 52
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 51
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 38
- 239000000047 product Substances 0.000 description 37
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 36
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 23
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 21
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 21
- 235000019772 Sunflower meal Nutrition 0.000 description 20
- 235000019621 digestibility Nutrition 0.000 description 18
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 17
- 229940085127 phytase Drugs 0.000 description 16
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 15
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 14
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 14
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 13
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 13
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 13
- 101710130006 Beta-glucanase Proteins 0.000 description 12
- 235000004458 antinutrient Nutrition 0.000 description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 12
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 12
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 11
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 11
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 10
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 10
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 10
- 241000881711 Acipenser sturio Species 0.000 description 9
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 9
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 9
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108700037728 Glycine max beta-conglycinin Proteins 0.000 description 8
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 8
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 8
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 8
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 8
- 241000277275 Oncorhynchus mykiss Species 0.000 description 7
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 7
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 7
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 7
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 6
- 241000208818 Helianthus Species 0.000 description 6
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 6
- IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N Inositol-hexakisphosphate Chemical class OP(O)(=O)O[C@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1OP(O)(O)=O IMQLKJBTEOYOSI-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 6
- 241000219745 Lupinus Species 0.000 description 6
- 240000004713 Pisum sativum Species 0.000 description 6
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 6
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 6
- 108010083391 glycinin Proteins 0.000 description 6
- 229940040461 lipase Drugs 0.000 description 6
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 6
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 6
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 6
- 235000002949 phytic acid Nutrition 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N Lactic Acid Natural products CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000486797 Naumovozyma Species 0.000 description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 5
- 230000000433 anti-nutritional effect Effects 0.000 description 5
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 5
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 5
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 5
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 5
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 5
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 5
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 5
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 5
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 5
- 108700038091 Beta-glucanases Proteins 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 4
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 4
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 4
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O ammonium group Chemical group [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 4
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 4
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 4
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 4
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 4
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 4
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 4
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 4
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 4
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 4
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 235000019629 palatability Nutrition 0.000 description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 4
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 4
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 4
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 4
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 4
- 230000001551 toxigenic effect Effects 0.000 description 4
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 4
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 4
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- 108020004463 18S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 3
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 3
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 3
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 3
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- 241000592795 Paenibacillus sp. Species 0.000 description 3
- 235000019779 Rapeseed Meal Nutrition 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 235000021120 animal protein Nutrition 0.000 description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 3
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 3
- 230000002443 hepatoprotective effect Effects 0.000 description 3
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 3
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 3
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 3
- 239000004456 rapeseed meal Substances 0.000 description 3
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 3
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 3
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 3
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N Acetoin Chemical compound CC(O)C(C)=O ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 2
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 2
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 2
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 241000194105 Paenibacillus polymyxa Species 0.000 description 2
- 241001158851 Rhodosporidium sp. Species 0.000 description 2
- 241001030146 Rhodotorula sp. Species 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 229920000617 arabinoxylan Polymers 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- RGXWDWUGBIJHDO-UHFFFAOYSA-N ethyl decanoate Chemical compound CCCCCCCCCC(=O)OCC RGXWDWUGBIJHDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YYZUSRORWSJGET-UHFFFAOYSA-N ethyl octanoate Chemical compound CCCCCCCC(=O)OCC YYZUSRORWSJGET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 108010002430 hemicellulase Proteins 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021118 plant-derived protein Nutrition 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 230000031068 symbiosis, encompassing mutualism through parasitism Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000905950 Anabas testudineus Species 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 description 1
- -1 C 5 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000012766 Cannabis sativa ssp. sativa var. sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000012765 Cannabis sativa ssp. sativa var. spontanea Nutrition 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 241000588914 Enterobacter Species 0.000 description 1
- 229920002444 Exopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 240000008620 Fagopyrum esculentum Species 0.000 description 1
- 235000009419 Fagopyrum esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 102000002464 Galactosidases Human genes 0.000 description 1
- 108010093031 Galactosidases Proteins 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 1
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 1
- 102000003820 Lipoxygenases Human genes 0.000 description 1
- 108090000128 Lipoxygenases Proteins 0.000 description 1
- 229920000057 Mannan Polymers 0.000 description 1
- 241000361919 Metaphire sieboldi Species 0.000 description 1
- 241000736262 Microbiota Species 0.000 description 1
- 241000192041 Micrococcus Species 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 108010064382 Phaseolus vulgaris alpha-amylase inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 241000508269 Psidium Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 241000192031 Ruminococcus Species 0.000 description 1
- 241000277331 Salmonidae Species 0.000 description 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 1
- UQZIYBXSHAGNOE-USOSMYMVSA-N Stachyose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO[C@@H]2[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O2)O1 UQZIYBXSHAGNOE-USOSMYMVSA-N 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001142 anti-diarrhea Effects 0.000 description 1
- 150000004783 arabinoxylans Chemical class 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N caffeine Chemical compound CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009120 camo Nutrition 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 235000005607 chanvre indien Nutrition 0.000 description 1
- NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N chembl421 Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012225 czapek media Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 241001233061 earthworms Species 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000021323 fish oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 1
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 229940059442 hemicellulase Drugs 0.000 description 1
- 239000011487 hemp Substances 0.000 description 1
- 239000010903 husk Substances 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 238000009343 monoculture Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000004465 oilseed meal Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 108010004131 poly(beta-D-mannuronate) lyase Proteins 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 108020001775 protein parts Proteins 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000253 proventriculus Anatomy 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000009933 reproductive health Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- UQZIYBXSHAGNOE-XNSRJBNMSA-N stachyose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO[C@@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)O2)O)O1 UQZIYBXSHAGNOE-XNSRJBNMSA-N 0.000 description 1
- 238000010025 steaming Methods 0.000 description 1
- 239000010902 straw Substances 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 230000000930 thermomechanical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 1
Description
Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии, к способам получения кормовых добавок для использования в кормопроизводстве. Кормовую добавку, полученную микробной или микробноэнзиматической ферментацией отходов переработки семян масличных культур, вводят непосредственно в рационы животных, птицы, рыбы или используют для производства комбикормов.
Уровень техники
С постоянно увеличивающимся мировым спросом на белок животного происхождения растет востребованность кормов и кормовых добавок, содержащих новые, нетрадиционные источники растительного белка. Это обусловлено, с одной стороны, ограниченностью ресурсов животных белков (рыбной муки, белков молочной сыворотки), которые традиционно используются в составе кормов, с другой стороны, - повышением цены на них. Поэтому внимание исследователей обращено на разработку способов и создание промышленных технологий глубокой переработки белоксодержащих отходов растительного происхождения, что стало экономически состоятельным благодаря использованию достижений современной микробиологии, энзимологии и биотехнологии.
Среди отходов переработки растительного сырья особое место занимают шроты и/или жмыхи семян масличных культур. Это, прежде всего, соевый шрот, который среди других субстратов выделяется высоким содержанием белка с наиболее полноценным составом аминокислот. Однако соевый шрот, как и другие отходы масложировой промышленности, содержит большое количество некрахмалистых полисахаридов (клетчатки, арабиноксиланов, бета-глюканов, фитатов), антипитательных веществ (ингибиторов трипсина, уреазы, липоксигеназы, лектинов и др.), которые обусловливают низкую кормовую ценность названных источников белка, ограничивают их использование, особенно в рационах молодняка животных.
Устранение антипитательного эффекта отдельных компонентов растительных кормов, повышение их перевариваемости и усвояемости при одновременном увеличении содержания белка влечет за собой укрепление физического и репродуктивного здоровья животных, птицы, рыбы, снижение их заболеваемости и повышение продуктивности. Как следствие, растет рентабельность производства продуктов животного происхождения, повышается их качество.
Проблему качества кормов, особенно перевариваемость и усвояемость входящих в их состав компонентов растительного происхождения, преодолевают несколькими путями.
Наиболее простым из них является разработка кормовых смесей на основе компонентов (добавок) различного состава и действия, в том числе коммерчески производимых.
Техническую задачу повысить питательную ценность рациона крупного рогатого скота решает способ получения гомогенизированной кормовой смеси, которая помимо 10-30% измельченной трудно перевариваемой соломы включает 5-35% кукурузы, 10-30% ячменя, 12-30% сои, 1-20% мелассы и 0,5-10% смеси витаминов [1].
Способ получения легкоусвояемого комбикорма для поросят с противодиарейным действием предусматривает механическое смешивание высушенных и измельченных листьев, незрелых и зрелых плодов гуавы в соотношении 40:25:35 (3-5%), соевого шрота (8-15%), воздушной кукурузы (40-50%), воздушной сои (5-10%), рыбной муки (3-8%), белка плазмы крови (3-8%), сыворотки (8-15%), жира (1-5%), белого сахара (1-5%) и премикса (3-5%) [2]. Использование комбикорма разработанного состава приводит к улучшению здоровья поросят, сокращению времени откорма и увеличению убойного веса, что повышает экономические показатели производства свинины.
В предлагаемых способах повышение питательной ценности кормов, содержащих трудно усваиваемые компоненты растительного происхождения, осуществляется только за счет введения дополнительных источников растительного и/или животного белка, биологически активных соединений. При этом в составе компонентов корма остается высокой концентрация антипитательных веществ и трудноперевариваемых некрахмалистых полисахаридов.
Более эффективным, чем получение кормовых смесей, является получение кормов и кормовых добавок из растительного сырья и отходов его переработки с использованием физико-химических методов. Разрабатываемые технические решения направлены на повышение питательной ценности кормов растительного происхождения и их перевариваемости. В их основе лежит термическая или лучевая обработка сырья, которая может быть реализована путем замачивания, пропаривания, прожаривания, экструдирования, облучения и т.п., а также их комбинированием. Как правило, кратковременное тепловое воздействие на цельное или измельченное зерно или отходы его переработки сопровождается незначительной денатурацией белка и снижением содержания антипитательных веществ до нормированной величины.
Предложен способ обработки необезжиренных бобов сои, который включает в себя следующие этапы: замачивание в воде (> 3 ч), удаление влаги в потоке воздуха (60°С), одновременно выполняемую тепловую СВЧ-обработку (90°С) и сушку [3]. Реализация способа позволяет получить соевые бобы целостной формы, в которых содержание антипитательных веществ (ингибиторов трипсина, влияющих на переваримость белка, и лектинов, оказывающих токсическое воздействие на функцию желудочнокишечного тракта) снижено до безопасного уровня.
Известен способ обработки полножирной сои, включающий замачивание зерна в водно-солевом
- 1 045153 растворе макро-, микроэлементов (5-8 ч), тепловую обработку (125-150°С), сушку (85-95°С, 12-18 мин) до остаточной влажности 18-28%, смешивание с сухими белковыми компонентами, охлаждение, измельчение, гранулирование (35-65°С) с одновременным вводом пробиотиков [4]. Осуществление способа позволяет частично нейтрализовать антипитательные вещества зерна сои, не ухудшая качество белка, равномерно внести макро- и микроэлементы, получить кормовой продукт сбалансированного по основным элементам питания состава, повышенной усвояемости, улучшенного вкуса.
Способ инактивации антипитательных веществ зерна сои предусматривает их прожаривание (120140°С, 3-6 мин), дробление и измельчение [5]. Полученную муку, сохраняющую большую часть питательных веществ, приобретающую приятный аромат и вкус, используют как белковый компонент комбикормов или как самостоятельную белковую кормовую добавку улучшенной поедаемости.
Особенность приведенных выше способов состоит в том, что снижение концентрации термолабильных антипитательных веществ (уреазы, ингибиторов трипсина, бета-конглицинина, лектинов и др.) в получаемых кормовых продуктах возможно только до строго регламентируемого безопасного уровня. Содержание же белка в продукте, как правило, не увеличивается, а его переваримость из-за жесткой термической обработки часто снижается. Не меняется также концентрация трудноперевариваемых некрахмалистых полисахаридов - арабиноксилана, бета-глюкана, фитата.
Наиболее эффективным способом увеличения концентрации протеина, снижения содержания антипитательных веществ вплоть до их полного удаления из растительного сырья, повышения его питательной ценности, перевариваемости и усвояемости представляется использование микробных и ферментных биотехнологий, часто комбинируемых с физико-химическим воздействием.
Известен способ получения протеинового порошка [6], предусматривающий высокотемпературную (110-120°С) обработку соевого жмыха давлением (1,5x105 Ра, 0,5-1 час), его дальнейшую ферментацию бактериями pp. Bacillus, Lactobacillus или дрожжами при температуре 20-35°С в течение 24 ч, сушку распылением и просеивание. Получают белковый продукт, обогащенный легкоусвояемыми аминокислотами, обладающий высокой питательной ценностью.
Предложен двухэтапный способ получения ферментированного кормового продукта, для чего на первом этапе проводят отдельное измельчение соевых бобов и земляного червя, ферментацию смеси белковых субстратов культурой Bacillus subtilis (106-108 КОЕ/мл, соотношение с субстратом 1:12-1:15) при температуре 20-50°С в течение 12-72 ч, повторную термообработку (> 100°С, 10-40 мин) и сушку ферментированной смеси до влажности < 10%. Второй этап - собственно составление рецептуры корма, основным компонентом которого является ферментированный продукт (60-100%), а также рыбная мука (40-0%), крахмал (10-20%), рыбий жир, соевое масло или их смесь (0,1-2,0%), витамины (1-3%) и микроэлементы (1-3%) [7]. Труднодоступность одного из компонентов ферментационной смеси (земляного червя) и его использование как источника протеина и незаменимых аминокислот животного происхождения являются основными недостатками рассматриваемого способа.
Способ получения ферментативного гидролизата шрота или жмыха масличного сырья (подсолнечника, сои, рапса, льна или технической конопли) реализуют следующим образом: сырье влажностью 1030% экструдируют при температуре 90-180°С, после чего экструдат обрабатывают ферментами протеолитического и/или целлюлолитического и/или альфа-галактозидазного действия. При этом не менее 50% массы воды вводят в зону выхода экструдата для его охлаждения, а остальную ее часть подают в гидролитическую камеру в виде раствора ферментного препарата [8]. Изобретение позволяет интенсифицировать процесс гидролиза шротов и жмыхов семян масличных культур с использованием термолабильных ферментных препаратов непосредственно после экструдирования в гидролитической камере, а также упростить машинно-аппаратное оформление процесса. Однако его недостатком является необходимость подбирать специфичность используемых ферментных препаратов исходя из состава биополимеров перерабатываемого сырья. Содержание протеина в получаемом белковом продукте не раскрывается.
Способ изготовления твердого биопродукта [9] позволяет гидролизовать неперевариваемые растительные олигосахариды (раффинозу, стахиозу и вербакозу) с образованием легко метаболизируемых моно- и дисахаридов. Техническое решение включает: 1) гидратацию измельченной биомассы, содержащей олигосахариды, белковые части бобовых (соя, боб, горох, люпин) и/или зерновых (пшеница) растений и/или их семян (рапс), и/или семян трав, полножировых или обезжиренных, до влажности < 65%; 2) обработку биомассы одним или несколькими ферментными препаратами, содержащими а-галактозидазу (5000 ед/г), в дозе 0,001-1,0 мас.% от сухого вещества биомассы при температуре 20-65°С в течение 0,1536 ч при постоянном перемешивании в условиях периодического, периодического с подпиткой или непрерывного процесса; возможно, с последующей дополнительной микробной ферментацией субстрата; 3) инактивацию α-галактозидазы при 70-150°С в течение 0,5-240 минут; 4) сушку полученного ферментированного биопродукта до содержания влаги < 10%. Способ позволяет получить ферментированный продукт с содержанием протеина в ферментированном продукте до 59,6-62,2% и редуцированным количеством неперевариваемых олигосахаридов. Концентрация в нем других антипитательных веществ не указывается. Однако в отдельных случаях для достижения указанного результата требуется дополнительная микробная ферментация белковых субстратов бактериями Bacillus cereus, дрожжами Saccharo- 2 045153 myces cerevisiae или дрожжами, утилизирующими С5-углеводы (0,25-10 мас.%). Кроме того, высокое содержание протеина в ферментированном продукте достигается преимущественно за счет использования высокобелковых частей бобовых и зерновых растений.
Способ получения ферментированного протеинового продукта фармацевтического, косметического, пищевого и кормового назначения [10] предусматривает увлажнение водопроводной водой хлопьев сои, гороха, люпина; смеси хлопьев сои и гороха, смеси хлопьев сои и люпина, смеси хлопьев гороха и люпина или смеси хлопьев сои, гороха и люпина, экструдирование при 150°С, охлаждение до 50°С, добавление отработанных пивных дрожжей (в соотношении с белковой составляющей от 1:2 до 1:100), фитазы (BASF, Natuphos) и, при необходимости, одного или несколько ферментов, выбранных из числа протеаз, пептидаз, галактозидаз, амилаз, пектиназ, гемицеллюлаз, липаз и фосфолипаз. Далее осуществляют перемешивание, анаэробное инкубирование смеси сначала при 25-60°С в течение 1-12 часов, а затем при 70-150°С в течение 0,5-240 минут. Сушку полученного продукта с содержанием сырого протеина 58,3% и редуцированным содержанием антипитательных компонентов (фитат-связанного фосфора, олигосахаридов, ингибиторов трипсина, бета-конглицинина, лектинов) проводят в условиях, когда температура частиц не превышает 85°С.
Однако указанный способ имеет ряд недостатков: использование обладающих высокой добавленной стоимостью предварительно обезвоженных, обезжиренных, мгновенно десольвентизированных и экструдированных хлопьев сои, гороха, люпина или их смесей с высоким исходным содержанием протеина; добавление ароматических веществ (3-гидрокси-2-бутанона, 3-метил-1-бутанола, этилооктаноата и этилдеканоата) для придания готовому ферментированному продукту приятного запаха и вкуса; большой расход микробной составляющей (до 50%); отсутствие критериев, позволяющих оценить необходимость добавления в ферментационную смесь тех или иных ферментов.
Известен также способ получения биологически активной кормовой добавки [11], который включает измельчение растительного сырья (шелухи семян подсолнечника, гречихи, проса, овса, рапса) до размера частиц <1 мм (60-85%); отбор культур бактерий из пищеварительного тракта (ротовой полости, зоба, преджелудка, кишечника) или экскрементов растительноядных животных; получение посевного материала; твердофазную или жидкофазную микробную ферментацию указанного целлюлозосодержащего сырья в факультативно-анаэробных условиях при температуре 18-70°С в течение 5-48 ч до достижения в ферментационной среде определенной величины целлюлазной активности (не менее 90 ед/г сухого продукта). Ферментацию проводят монокультурой, ассоциацией микроорганизмов или комплексом, состоящим из ассоциации микроорганизмов и, по крайней мере, одного дополнительного штамма микроорганизмов, относящихся к родам Bacillus, Clostridium, Lactobacillus, Bifidobacterium, Streptococcus, Micrococcus, Ruminococcus, Proteus, Enterobacter, Escherichia, Klebsiella, Pseudomonas, Brevibacterium.
К существенным недостаткам способа следует отнести сложность его исполнения и недостаточную воспроизводимость. Это обусловлено необходимостью постоянного выделения отдельных микроорганизмов и/или их ассоциаций из пищеварительного тракта или экскрементов растительноядных животных, находящихся на определенной диете; необходимостью получения накопительных микробных культур, разных для разных групп животных; непредсказуемостью качественного и количественного состава получаемой ассоциации, ее жизнеспособности. Отсутствие в описании патента данных о содержании протеина, клетчатки и обменной энергии в исходном сырье, не позволяет оценить эффективность его микробной ферментации.
Наиболее близким к заявляемому техническому решению является способ переработки соевого шрота в кормовой продукт с улучшенными свойствами [12], который предусматривает обязательную экструзионную обработку шрота влажностью 15-25% при температуре 80-150°С в течение 1 минуты, охлаждение до температуры менее 60°С, обязательное измельчение и обработку раствором ферментов (протеазы и, при необходимости, альфа-галактозидазы, фитазы, липазы, целлюлазы и/или гемицеллюлазы) и микроорганизмы - молочнокислые бактерии, симбиоз молочнокислых бактерий, сенной палочки и/или дрожжей. Микробно-энзиматическую ферментацию соевого шрота влажностью 40-90% ведут при температуре 35-60°С и рН 4,0-8,0 в течение 6-48 ч. Готовый кормовой продукт сушат при температуре 40-60°С, после чего охлаждают до 25-30°С, измельчают до частиц размером 100-500 мкм, фасуют и упаковывают.
Полученный при реализации способа кормовой продукт характеризуется по сравнению с исходным соевым шротом повышенным не менее чем на 5% содержанием белка и пониженным не менее чем на 95% количеством антипитательных веществ (уреазы, ингибиторов трипсина, глицинина, бетаконглицинина, сапонинов, лектинов, олигосахаридов). Улучшение органолептических свойств получаемого продукта способствует повышенной поедаемости кормов.
Недостатком рассматриваемого способа является возможность переработки только одного вида отходов масложировой промышленности (соевого шрота). Способ не распространяется на другие, более трудноусвояемые организмом животных отходы - шроты (жмыхи) подсолнечника, рапса, других растений и/или их смеси, что существенно ограничивает область его применения. Кроме того, предусмотренная способом практика поэтапного добавления ферментов и молочнокислых бактерий и/или симбиоза
- 3 045153 микроорганизмов сопряжена с изменением условий в ходе ферментации (температуры, скорости перемешивания, объема подаваемого воздуха), что усложняет процесс, снижает его энергоэффективность. В описании изобретения акцентируется внимание на использование ферментов, участвующих в разрушении клетчатки (целлюлаза) и фитатов (фитаза) соевого шрота, однако данные об остаточной концентрации этих соединений в ферментированном продукте отсутствуют.
Краткое описание сущности изобретения
Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии, к способам получения кормовых добавок для использования непосредственно в рационах животных, птицы, рыбы или для производства комбикормов.
Предлагается кормовая добавка, которую получают путем микробной или микробноэнзиматической ферментации отходов масложировой промышленности, представленных шротом (жмыхом) семян масличных культур - сои, подсолнечника, рапса или их смесями.
Для микробной ферментации может быть использован один или более микроорганизмов, выбранных из группы, включающей представителей родов Rhodotorula, Rhodosporidium, Saccharomyces, Naumovozyma, Paenibacillus, которые продуцируют белок, биологически активные метаболиты, включая комплекс ферментов, катализирующих разрушение антипитательных и трудноперевариваемых веществ растительного происхождения. Для микробно-энзиматической ферментации одновременно с микроорганизмами используют ферменты в количестве 0,05-0,5% к массе сухого вещества сырья. В качестве ферментов используют один или более ферментов, выбранных из числа протеаз, пептидаз, амилаз, альфагалактозидаз, маннаназ, пектиназ, бета-глюканаз, ксиланаз, эндоглюканаз (целлюлаз), фитаз, липаз, или комплексный ферментный препарат.
Кормовая добавка, полученная при реализации изобретения, характеризуется по сравнению с исходным сырьем повышенным на 3,0-7,8% содержанием сырого протеина, на 7,8-8,4% -незаменимых аминокислот, на 46,2-50,0% - усвояемого фосфора при сниженном содержании антипитательных веществ: сырой клетчатки -на 37,5-42,3%, фитинового фосфора на 24,4-29,3%, ингибиторов трипсина - на 95,2-100%, глицинина, бета-конглицинина, лектинов - на 95,5-96,3%, олигосахаридов - на 92,8-95,8%, активности уреазы - на 98,3-100%. Добавка содержит также пробиотические микроорганизмы в количестве 3,5x107 - 2,5x109 КОЕ/г.
Модифицированный по сравнению с исходным сырьем биохимический состав кормовой добавки обусловливает ее высокую усвояемость, энергетическую и питательную ценность, улучшенные органолептические свойства и поедаемость.
Содержащиеся в кормовой добавке пробиотические микроорганизмы и биологически активные продукты их метаболизма (ферменты, олиго- и полисахариды, каротиноиды, витамины, пептиды и др.) придают ей про- и пребиотические, антимикробные, иммуномодулирующие, гепатопротекторные, антиоксидантные, сорбционные, ростактивирующие свойства. Совокупность указанных свойств позволит нормализовать микрофлору ЖКТ, улучшить пищеварение, физическое здоровье, биохимический и иммунный статус, снизить заболеваемость животных, потребляющих добавку, что повысит их продуктивность при снижении расхода корма, повысит качество и рентабельность производства продуктов животного происхождения.
Сущность изобретения
Задача изобретения состоит в разработке ресурсосберегающего способа получения кормовой добавки повышенной питательной ценности и усвояемости, упрощение и удешевление процесса ее получения, а также расширение ассортимента кормовых добавок, в том числе полифункциональных, содержащих живые (активные) дрожжевые грибы и/или бактерии.
Технический результат, получаемый при реализации изобретения, заключается в получении из отходов переработки семян масличных культур (шрота и/или жмыха семян рапса, сои, подсолнечника или их смесей) кормовой добавки, которая по сравнению с исходным сырьем характеризуется повышенным содержанием сырого протеина, незаменимых аминокислот и усвояемого фосфора; пониженным содержанием антипитательных компонентов - сырой клетчатки, фитатного фосфора, олигосахаридов, ингибиторов трипсина, активности уреазы, лектинов, глицинина и бета-конглицинина; наличием пробиотических микроорганизмов и биологически активных продуктов их метаболизма.
Указанная задача решена благодаря тому, что в предлагаемом способе получения кормовой добавки 1) отходы переработки семян масличных культур увлажняют до 50-95% от полной влагоемкости, 2) добавляют суспензию по меньшей мере одного микроорганизма в экспоненциальной фазе роста, выбранного из группы, включающей представителей родов Rhodotorula, Rhodosporidium, Saccharomyces, Naumovozyma и Paenibacillus, в количестве 3-10 об.%,
3) проводят ферментацию при температуре 24-30°С и перемешивании в течение 16-48 ч,
4) высушивают при температуре не более 60°С до влажности не более 10%.
В одном из предпочтительных вариантов осуществления способа отходы переработки семян масличных культур увлажняют до 50-70% от полной влагоемкости, а ферментацию проводят в течение 36-48 ч (далее - способ по варианту 1).
- 4 045153
В другом предпочтительном варианте осуществления способа исходное сырье увлажняют до 9095% от полной влагоемкости, а ферментацию проводят в течение 16-36 ч (далее - способ по варианту 2).
Высушивание, - в одном из предпочтительных вариантов осуществления способа, - осуществляют до влажности самое большее 10 %.
В качестве исходного сырья для получения кормовой добавки используют отходы переработки семян масличных культур. В одном из предпочтительных вариантов осуществления способа используют шрот и/или жмых по меньшей мере одного вида семян, выбранных из группы, включающей семена рапса, сои и подсолнечника.
Исходное сырье при наличии крупных трудногидратируемых комков предварительно экструдируют и/или измельчают любым известным методом.
При необходимости, например, в случае излишней контаминации исходного сырья микрофлорой, его стерилизуют, используя острый пар, нагретый воздух, ионизирующее излучение или любой другой метод, в зависимости от наличия той или иной аппаратуры.
В качестве суспензии микроорганизмов, в одном из предпочтительных вариантов осуществления способа, используют суспензию по меньшей мере одного микроорганизма, выбранного из группы, включающей Rhodotorula glutinis, Naumovozyma castellii, и Paenibacillus nicotianae, предпочтительно суспензию по меньшей мере одного микроорганизма, выбранного из группы, включающей штамм ST-1 дрожжевого гриба Rhodotorula glutinis, депонированный в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов под номером У-338 Д, штамм ST-2 дрожжевого гриба Naumovozyma castellii, депонированный в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов под номером У-339 Д, и/или штамм ST-3 дрожжевого гриба Rhodotorula glutinis, депонированный в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов под номером У-340 Д, и бактериальный штамм ST-4 Paenibacillus nicotianae, депонированный в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов под номером В-14 61 Д.
Указанные пробиотические микробные культуры (живые дрожжевые грибы и/или бактерии) являются аэробными и за счет потребления кислорода и органических кислот, синтезируемых аборигенной анаэробной микрофлорой, и продукции гидролитических ферментов, расщепляющих полимеры растительных кормов, нормализуют микробиоценоз, улучшают пищеварение в различных отделах желудочнокишечного тракта, особенно в рубце жвачных животных. Синтезируемые микроорганизмами каротиноиды обусловливают антиоксидантные и ростактивирующие свойства; олигосахариды -пребиотическое действие; полисахариды - иммуномодулирующее, гепатопротекторное и детоксикационное (энтеросорбционное) действие; пептиды (продукты ферментативного гидролиза протеинов) - антимикробный эффект, что в совокупности повышает ценность и эффективность кормовой добавки.
Одновременно с суспензией микроорганизмов, еще в одном из предпочтительных вариантов осуществления способа, дополнительно вводят раствор, содержащий ферменты в количестве 0,05-0,5% к массе сухого вещества отходов переработки семян масличных культур, предпочтительно по меньшей мере один фермент, выбранный из группы, включающей протеазы, пептидазы, амилазы, альфагалактозидазы, маннаназы, пектиназы, бета-глюканазы, ксиланазы, эндоглюканазы, целлюлазы, фитазы и липазы.
Указанная задача также решена благодаря тому, что предложена кормовая добавка, полученная вышеописанным способом.
Полученная при реализации изобретения кормовая добавка превосходит исходное сырье по содержанию сырого протеина на 3,0-7,8%, в том числе полученная из шрота (жмыха) семян сои - на 5,1-7,8%, рапса - на 3,1-4,8%, подсолнечника - на 3,0-5,4%, их смеси различного качественного и количественного состава - на 4,1-6,1%. При этом в ней содержится больше незаменимых аминокислот на 7,8-8,4%, усвояемого фосфора - на 46,2-50,0%; меньше сырой клетчатки - на 37,5-42,3%, фитинового фосфора - на 24,429,3%, активности уреазы - на 98,3-100%, ингибиторов трипсина - на 95,2-100%, глицинина, бетаконглицинина, лектинов - на 95,5-96,3%, олигосахаридов - на 92,8-95,8%. Добавка содержит также пробиотические микроорганизмы в количестве 3,5х107 - 2,5x109 КОЕ/г.
Улучшенный по сравнению с исходным сырьем биохимический состав получаемой кормовой добавки обусловливает ее более высокую усвояемость, энергетическую и питательную ценность, поедаемость за счет улучшенных органолептических свойств.
Кормовая добавка, получаемая согласно предлагаемому способу, предназначена для непосредственного введения в рационы сельскохозяйственных животных, птицы, рыбы или для использования в качестве компонента комбикормов.
Предлагаемый способ позволяет:
ис пользовать в качестве исходного сырья для получения кормовой добавки не только соевый шрот, но и другие отходы масложирового производства - шрот и/или жмых семян рапса, сои, подсолнечника или их смеси;
пр именять предварительную экструзию и стерилизацию исходного сырья при необходимости, например, для устранения его излишней микробной контаминации;
пр оводить предварительное измельчение исходного сырья только при наличии в нем трудногидратируемых крупных комков;
- 5 045153 получить кормовую добавку путем не только микробно-энзиматической, но также и микробной ферментации;
придать получаемой кормовой добавке дополнительные полезные свойства за счет наличия в ней живых (активных) микроорганизмов и продуктов их метаболизма;
упростить и удешевить процесс получения из отходов переработки семян масличных культур кормовых продуктов улучшенного качества, увеличить их ассортимент.
Способ получения кормовой добавки путем микробной или микробно-энзиматической ферментации отходов переработки масличных культур иллюстрируют, но не ограничивают, следующие примеры.
Осуществление изобретения
Для ферментации отходов переработки семян масличных культур (шрота, жмыха и/или их смеси) используют про- и эукариотические микроорганизмы, которые принадлежат дрожжевым грибам родов Rhodotorula, Rhodosporidium, Saccharomyces, Naumovozyma, бактериям рода Paenibacillus, в том числе штаммы Rhodotorula glutinis ST-1, Naumovozyma castellii ST-2, Rhodotorula glutinis ST-3, Paenibacillus nicotianae ST-4.
Характеристика штамма Rhodotorula glutinis ST-1.
Штамм Rhodotorula glutinis ST-1 выделен с поверхности сквашенного молока, идентифицирован на основании результатов изучения культурально-морфологических, физиолого-биохимических признаков, данных сравнительного анализа нуклеотидной последовательности гена 18S рРНК.
Культурально-морфологические особенности штамма Rhodotorula glutinis ST-1: капсулированные дрожжи. На 3-й сутки роста при 27°С на сусло-агаре колонии круглые, с ровным краем, диаметром 2-3 мм, выпуклые, гладкие, непрозрачные, розового цвета. Характер поверхности - слизистый, блестящий. Консистенция вязкая. На пептонно-дрожжевом агаре на 3-й сутки роста при 27°С колонии розового цвета, мелкие, гладкие, с ровным краем.
Физиолого-биохимические особенности штамма Rhodotorula glutinis ST-1: облигатный аэроб, оптимальные условия роста - рН 5,5-6,0 и температура 25-27°С. Хемоорганотроф. В качестве источника азота использует минеральные соединения в аммонийной форме, а также органические вещества - пептон, триптон, дрожжевой экстракт. В качестве источника углерода утилизирует простые и сложные углеводы: глюкозу, сахарозу. Гидролизует казеин, пектин, липиды, жирные кислоты, целлюлозу. Молоко не пептонизирует, желатину не разжижает. Синтезирует каротиноиды, полисахариды, комплекс внеклеточных ферментов, включая амилазу, протеазу, пектиназу, эстеразу, липазу, альгинатлиазу, фитазу, целлюлазу.
Условия поддержания штамма Rhodotorula glutinis ST-1: без потери культурально-морфологических и физиолого-биохимических свойств, включая ферментативную активность, хранится при +4...+ 6°С методом периодических пересевов на сусло-агар с частотой 1 раз в 6-12 месяцев.
Безвредность штамма Rhodotorula glutinis ST-1 не является генетически модифицированным и не содержит генов других организмов; перенесенных генов резистентности; генетических изменений, связанных с использованием генно-технических методик. Штамм является непатогенным и безвредным для лабораторных животных, не обладает токсичностью, аллергенностью и токсигенными свойствами.
Штамм Rhodotorula glutinis ST-1 депонирован в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов Государственного научного учреждения Институт микробиологии Национальной академии наук Беларуси под регистрационным номером БИМ Y-338 Д (справка о депонировании прилагается).
Характеристика штамма Naumovozyma castellii ST-2.
Штамм Naumovozyma castellii ST-2 выделен с поверхности сбродившего варенья, идентифицирован на основании результатов изучения культурально-морфологических, физиолого-биохимических признаков, данных сравнительного анализа нуклеотидной последовательности гена 18S рРНК.
Культурально-морфологические особенности штамма Naumovozyma castellii ST-2: капсулированные дрожжи. На 3-й сутки роста при 27°С на сусло-агаре колонии круглые, с ровным краем, диаметром 2-3 мм, выпуклые, гладкие, непрозрачные, белого цвета. Характер поверхности - слизистый, блестящий. Консистенция вязкая. На пептонно-дрожжевом агаре на 3-е сутки роста при 27°С колонии белого цвета, диаметром 0,5-1 мм, круглые, выпуклые.
Физиолого-биохимические особенности штамма Naumovozyma castellii ST-2: Облигатный аэроб, оптимальные условия роста -рН 5,5-6,0 и температура 25-27°С. Хемоорганотроф. В качестве источника азота использует минеральные соединения в аммонийной форме, а также органические вещества - пептон, триптон, дрожжевой экстракт. В качестве источника углерода утилизирует простые и сложные углеводы: глюкозу, сахарозу, мальтозу. Гидролизует крахмал, казеин, пектин, целлюлозу, липиды, жирные кислоты. Молоко не пептонизирует, желатину не разжижает. Синтезирует экзополисахариды, амилазу, протеазу, пектиназу, альфа-галактозидазу, эстеразу, липазу, целлюлазу.
Условия поддержания штамма Naumovozyma castellii ST-2: без потери культуральноморфологических и физиолого-биохимических свойств, включая ферментативную активность, хранится при +4...+6°С методом периодических пересевов на сусло-агар с частотой 1 раз в 6-12 мес.
Безвредность штамма Naumovozyma castellii ST-2: не является генетически модифицированным и не содержит генов других организмов; перенесенных генов резистентности; генетических изменений,
- 6 045153 связанных с использованием генно-технических методик. Штамм является непатогенным и безвредным для лабораторных животных, не обладает токсичностью, аллергенностью и токсигенными свойствами.
Штамм Naumovozyma castellii ST-2 депонирован в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов Государственного научного учреждения Институт микробиологии Национальной академии наук Беларуси под регистрационным номером БИМ Y-339 Д (справка о депонировании прилагается).
Характеристика штамма Rhodotorula glutinis ST-3.
Штамм Rhodotorula glutinis ST-3 выделен с поверхности сквашенного молока, контаминированного посторонней микробиотой, идентифицирован на основании результатов изучения культуральноморфологических и физиолого-биохимических признаков, данных сравнительного анализа нуклеотидной последовательности гена 18S рРНК.
Культурально-морфологические особенности штамма Rhodotorula glutinis ST-3: капсулированные дрожжи. На 3-й сутки роста при 27°С на сусло агаре колонии круглые, с ровным краем, диаметром 2-3 мм, выпуклые, гладкие, непрозрачные, красно-оранжевого цвета. Характер поверхности - слизистый, блестящий. Консистенция вязкая. На пептонно-дрожжевом агаре на 3-й сутки роста при 27°С колонии оранжевого цвета, диаметром 1-2 мм, круглые, с ровным краем.
Физиолого-биохимические особенности штамма Rhodotorula glutinis ST-3: облигатный аэроб, оптимальные условия роста - рН 5,5-6,0 и температура 25-27°С. Хемоорганотроф. В качестве источника азота использует минеральные соединения в аммонийной форме, а также органические вещества - пептон, триптон, дрожжевой экстракт. В качестве источника углерода утилизирует простые и сложные углеводы: глюкозу, сахарозу. Гидролизует казеин, пектин, целлюлозу, липиды, жирные кислоты. Молоко не пептонизирует, желатину не разжижает. Синтезирует каротиноиды, полисахариды, комплекс внеклеточных ферментов, включая протеазу, пектиназу, эстеразу, липазу, фитазу, целлюлазу.
Условия поддержания штамма Rhodotorula glutinis ST-3: без потери культурально-морфологических и физиолого-биохимических свойств, включая ферментативную активность, хранится при +4...+6°С методом периодических пересевов на сусло-агар с частотой 1 раз в 6-12 месяцев.
Безвредность штамма Rhodotorula glutinis ST-3: не является генетически модифицированным и не содержит генов других организмов; перенесенных генов резистентности; генетических изменений, связанных с использованием генно-технических методик. Штамм является непатогенным и безвредным для лабораторных животных, не обладает токсичностью, аллергенностью и токсигенными свойствами.
Штамм Rhodotorula glutinis ST-3 депонирован в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов Государственного научного учреждения Институт микробиологии Национальной академии наук Беларуси под регистрационным номером БИМ Y-340 Д (справка о депонировании прилагается).
Характеристика штамма Paenibacillus nicotianae ST-4.
Штамм Paenibacillus nicotianae ST-4 выделен из зерна сельскохозяйственных культур (Могилевская обл.), идентифицирован на основании результатов изучения культурально-морфологических и физиолого-биохимических признаков, данных сравнительного анализа нуклеотидной последовательности гена 16S рРНК.
Культурально-морфологические особенности штамма Paenibacillus nicotianae ST-4 (БИМ В-1461 Д): грамположительные спорообразующие подвижные палочки. На агаризованной среде Чапека при 2 729°С на 3-й сутки роста формирует слизистые колонии размером 2-3 мм, прозрачные, неправильно круглой формы, выпуклые, гладкие, с ровным краем. Консистенция вязкая. На пептонно-дрожжевом агаре на 3-й сутки роста колонии 2-3 мм в диаметре, выпуклые, гладкие, бежевого-розового цвета, с неровными краями.
Физиолого-биохимические особенности штамма Paenibacillus nicotianae ST-4 (БИМ В-1461 Д): облигатный аэроб, оптимальные условия роста - рН 6,5 и температура 27-29°С. Хемоорганотроф. В качестве источника азота использует минеральные соединения в аммонийной форме, а также органические вещества - пептон, триптон, дрожжевой экстракт, аминокислоты и т.д. В качестве источника углерода утилизирует простые и сложные углеводы: мальтозу, глюкозу, сахарозу, маннан, лактозу. Гидролизует крахмал, казеин, пектин, лактозу, липиды, целлюлозу, β-глюкан, жирные кислоты. Молоко не пептонизирует, желатин не разжижает. Синтезирует полисахариды и комплекс ферментов, гидролизующих полимеры растительных клеточных стенок, - протеазу, амилазу, целлюлазу, бета-глюканазу, ксиланазу, пектиназу, липазу, эстеразу.
Условия поддержания штамма Paenibacillus nicotianae ST-4 (БИМ В-1461 Д): без потери культурально-морфологических и физиолого-биохимических свойств, включая ферментативную активность, хранится при +4...+6°С методом периодических пересевов на мясопептонный агар с частотой 1 раз в 6-12 месяцев.
Безвредность штамма Paenibacillus nicotianae ST-4 (БИМ В-1461 Д): не является генетически модифицированным и не содержит генов других организмов; перенесенных генов резистентности; генетических изменений, связанных с использованием генно-технических методик. Штамм является непатогенным и безвредным для лабораторных животных, не обладает токсичностью, аллергенностью и токсигенными свойствами.
- 7 045153
Штамм Paenibacillus nicotianae ST-4 депонирован в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов Государственного научного учреждения Институт микробиологии Национальной академии наук Беларуси под регистрационным номером БИМ В-1461 Д (справка о депонировании прилагается).
Микроорганизмы указанных выше групп обладают пробиотическими свойствами, а синтезируемые ими биологически активные метаболиты (ферменты, олиго- и полисахариды, каротиноиды, витамины, пептиды и др.) - пребиотическим, антимикробным, иммуномодулирующим, гепатопротекторным, антиоксидантным, сорбционным, ростактивирующим действием, что подтверждается известным уровнем техники [13-21].
Пример 1.
Исследование влияния температуры и длительности микробной ферментации сырья на содержание сырого протеина в кормовой добавке
В качестве исходного сырья используют соевый шрот с содержанием сырого протеина 46%. Сырье увлажняют водопроводной водой до 50% от полной влагоемкости, в количестве 300 г помещают в колбы Эрленмейера объемом 2 литра и добавляют посевной материал (инокулюм) - суспензию дрожжевых грибов рода Rhodotorula, в частности, Rhodotorula glutinis ST-1. Посевной материал представляет собой суспензию дрожжевого гриба, выращенного в жидкой питательной среде при 26-28°С в течение 18-24 часов до оптической плотности суспензии 0,6±0,1, измеренной при длине волны 600 нм (ОП600 = 0,6±0,1), что соответствует экспоненциальной фазе роста микроорганизма. Посевной материал (суспензию клеток микроорганизма) добавляют к подготовленному сырью в количестве 5 об %. Микробную ферментацию сырья осуществляют при 20, 24, 28, 30 и 32°С в течение 12, 24, 36, 48, 60 и 72 часов, периодически перемешивая содержимое колб, например, каждые 6-8 часов в течение 3-5 мин. По окончании ферментации содержимое колб высушивают методом конвекции при температуре 50°С до остаточной влажности не более 10%.
В исходном соевом шроте и полученной кормовой добавке определяют содержание сырого протеина согласно ГОСТу 13496.4-93. Результаты приведены в табл. 1.
Как видно из данных табл. 1, для микробной ферментации соевого шрота оптимальной является температура 24-30°С при длительности процесса 36-48 ч. В этих условиях в ферментированном шроте обнаруживается максимальное (51,3-51,8%) содержание сырого протеина, что на 5,3-5,8% больше, чем в исходном сырье. Снижение или повышение температуры удлиняет процесс микробной ферментации до 60 ч, однако не влияет на концентрацию протеина в получаемом кормовом продукте.
Таблица 1
Влияние температуры и длительности микробной ферментации соевого шрота на содержание сырого протеина
| Температур а ферментаци и, °C | Содержание сырого протеина, % | ||||||
| Соевый шрот | Соевый шрот, подвергнутый микробной ферментации в течение, часов: | ||||||
| 12 | 24 | 36 | 48 | 60 | 72 | ||
| 20 | 46, 0 | 46, 2 | 46, 8 | 47,3 | 48,9 | 51, 6 | 51,8 |
| 24 | 46, 0 | 46, 4 | 47,3 | 51,3 | 51, 6 | 51,7 | 51,5 |
| 28 | 46,0 | 46,8 | 47,5 | 51,8 | 51,8 | 51,9 | 51,8 |
| 30 | 46, 0 | 47,0 | 49, 4 | 51,4 | 51,7 | 51,8 | 51,9 |
| 32 | 46, 0 | 46, 2 | 47,1 | 48,3 | 50,3 | 51,7 | 51,7 |
Пример 2.
В качестве сырья используют соевый шрот, рапсовый жмых, смесь соевого и подсолнечного шрота, смесь соевого шрота и рапсового жмыха в различных массовых соотношениях. Сырье увлажняют водопроводной водой до 50% от полной влагоемкости и в количестве 400 г помещают в колбы Эрленмейера объемом 2 литра. В качестве посевного материала используют суспензию (ОП600 = 0,6±0,1) дрожжевых грибов рода Naumovozyma, в частности, Naumovozyma castellii ST-2 1 в количестве 1, 2, 3, 5, 8 или 10 об.%. Микробную ферментацию осуществляют при температуре 24°С в течение 48 ч при периодическом перемешивании, например, (каждые 4-5 часов в течение 2-3 мин). По окончании процесса микробной ферментации содержимое колб высушивают методом конвекции при температуре 55°С до остаточной влажности не более 10% и определяют содержание сырого протеина. Полученные результаты представлены в табл. 2.
- 8 045153
Таблица 2
Влияние количества посевного материала на содержание сырого протеина в ферментированном сырье
| Ферментируемое сырье | Содержани е сырого протеина в исходном сырье, % | Содержание сырого протеина (%) в сырье, ферментированном с использованием различного количества посевного материала, %: | |||||
| 1 | 2 | 3 | 5 | 8 | 10 | ||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
| Соевый шрот | 46, 0 | 49, 5 | 51, 0 | 52,1 | 52,2 | 52,3 | 52,2 |
| Соевый шрот + подсолнечный шрот (1 : 1 по массе) | 41, 6 | 43,4 | 45, 3 | 45, 8 | 46, 0 | 46, 2 | 46, 1 |
| Соевый шрот + подсолнечный шрот (2 : 1 по массе) | 43,0 | 45, 0 | 46, 3 | 48,2 | 48,5 | 48, 8 | 48, 8 |
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
| Соевый шрот + подсолнечный шрот (1 : 2 по массе) | 40, 1 | 43,7 | 44,0 | 44,2 | 44,4 | 44,5 | 44,5 |
| Соевый шрот + рапсовый жмых (1 : 1) | 37,4 | 40,2 | 42,0 | 42,0 | 42,2 | 42,3 | 42,4 |
| Соевый шрот + рапсовый жмых (2 : 1 по массе) | 40,2 | 42,8 | 45,5 | 45, 7 | 46, 0 | 46,1 | 46,1 |
| Соевый шрот + рапсовый жмых (1 : 2 по массе) | 34,4 | 36, 9 | 37,7 | 38,5 | 38,7 | 38,8 | 38,8 |
Согласно полученным данным, содержание сырого протеина в кормовой добавке достигает максимальной величины при использовании суспензии микробной культуры в количестве 3-10 об.%. При этом результат не зависит от состава исходного сырья и количественного соотношения входящих в него компонентов: микробная ферментация приводит к повышению концентрации сырого протеина в получаемой кормовой добавке на 4,1-6,2%.
Пример 3.
В колбы Эрленмейера объемом 2 литра помещают по 4 00 г предварительно простерилизованного (0,75 ати, 30 мин) и охлажденного до комнатной температуры соевого шрота (содержание сырого про
- 9 045153 теина 46%) влажностью 40, 50, 60, 70, 80, 85, 90, 95%. Затем в каждую из колб добавляют суспензию (ОП600 = 0,6±0,1) бактерий рода Paenibacillus, в частности, Paenibacillus nicotianae ST-4 в количестве 3 об. % и ведут ферментацию при температуре 28°С в течение 8, 16, 24, 32, 40, 48, 60 или 72 часов. В процессе ферментации соевый шрот влажностью 40, 50, 60, 70% перемешивают каждые 6-8 часов в течение 3-5 мин; шрот влажностью 80, 85, 90, 95% перемешивают постоянно, например, используя качалку со скоростью вращения платформы 180±20 оборотов в минуту. По окончании процесса микробной ферментации содержимое колб высушивают в сушильном шкафу с принудительной вентиляцией при температуре 55°С до остаточной влажности не более 10% и определяют концентрацию сырого протеина. Результаты приведены в табл. 3.
Согласно полученным данным, для достижения в кормовой добавке максимального содержания сырого протеина (52,2-52,9%) достаточно 36-48 ч микробной ферментации сырья влажностью 50-70% и 16-36 ч - влажностью 90-95%. В первом случае издержки, связанные с более длительным периодом микробной ферментации шрота меньшей влажности, компенсируются издержками на непрерывное перемешивание и сушку продукта большей влажности при сопоставимом содержании протеина в конечном продукте. Поэтому целесообразность выбора сырья той или иной влажности диктуется техническими возможностями производителя кормовой добавки.
Таблица 3
Содержание сырого протеина в кормовой добавке, полученной микробной ферментации соевого шрота различной влажности
| Длительное ть микробной ферментаци и, час | Содержание сырого протеина (%) в кормовой добавке на основе ферментированного соевого шрота различной влажности, %: | |||||||
| 40 | 50 | 60 | 70 | 80 | 85 | 90 | 95 | |
| 8 | 46, 0 | 46, 3 | 46, 6 | 46, 8 | 47,3 | 48,0 | 48,2 | 48,3 |
| 16 | 46, 2 | 47,5 | 47, 6 | 48,1 | 49, 9 | 51,2 | 52, 6 | 52,8 |
| 24 | 46, 3 | 49, 0 | 49, 3 | 49, 8 | 51,4 | 51,4 | 52,7 | 52,9 |
| 36 | 46,5 | 52,2 | 52,4 | 52,2 | 51,5 | 51,5 | 52,5 | 52,7 |
| 48 | 46, 6 | 52,4 | 52, 6 | 52,3 | 51,4 | 51, 6 | 52, 6 | 52,8 |
| 60 | 46, 8 | 52,5 | 52,7 | 52,4 | 51,5 | 51,8 | 52,8 | 52,9 |
| 72 | 46, 9 | 52, 6 | 52,8 | 52, 6 | 51,7 | 51,9 | 52,9 | 52,8 |
Пример 4.
Микробную ферментацию шротов (жмыхов) или их смесей с использованием микроорганизмов различной таксономической принадлежности осуществляют в колбах Эрленмейера объемом 2 литра в следующих условиях:
количество шрота (жмыха) влажностью 50% - 350 г;
суспензия микроорганизма (ОП600 = 0,6±0,1) - 5 об. %;
длительность ферментации - 48 ч;
температура ферментации - 28°С;
периодическое перемешивание - каждые 6-8 часов в течение 3-5 мин;
сушка - при температуре 50-55°С. Полученные результаты приведены в табл. 4.
Как видно, микробная ферментация соевого шрота, а также его смесей с рапсовым жмыхом или рапсовым жмыхом и подсолнечным шротом приводит к повышению содержания в кормовой добавке сырого протеина в пределах от 4,5 до 6,6%, в зависимости от используемой микробной культуры. Наиболее труднодоступными субстратами для роста большинства исследованных культур и модификации являются подсолнечный шрот и рапсовый жмых: концентрация сырого протеина в кормовой добавке на их основе повышена по сравнению с исходным сырьем на 3,0-3,6% и 3,1-3,8% соответственно.
- 10 045153
Таблица 4 Содержание сырого протеина в кормовых добавках на основе шротов (жмыхов), ферментированных с использованием микроорганизмов различной таксономической принадлежности
| Микроорганизм для ферментации | Содержание сырого протеина, %: | ||||
| соевый шрот | подсолн ечный шрот | рапсовы й жмых | соевый шрот + рапсовы й жмых (1 : 1 по массе) | соевый шрот + рапсовы й жмых + подсолн ечный шрот (1 : 1 : 1 по массе) | |
| Rhodotorula glutinis ST-1 | 51, 6 | 40,4 | 32,3 | 43, 1 | 42,2 |
| Naumovozyma castellii ST-2 | 52,2 | 40,3 | 32,0 | 43, 0 | 41,9 |
| Rhodotorula glutinis ST-3 | 51,1 | 40,5 | 32,4 | 42,5 | 41,8 |
| Paenibacillus nicotianae ST-4 | 52, 6 | 40, 6 | 32,5 | 42,3 | 42,0 |
| Paenibacillus sp. | 52,4 | 40,4 | 32,4 | 43,4 | 42,3 |
организмов к подготовленному сырью добавляют раствор ферментов, катализирующих разрушение растительных полимеров. Для этого используют одну или более микробных культур и раствор одного или более ферментов, выбранных из группы, включающей протеазы, пептидазы, амилазы, альфагалактозидазы, маннаназы, пектиназы, бета-глюканазы, ксиланазы, эндоглюканазы (целлюлазы), фитазы, липазы, или раствор комплексного ферментного препарата.
Микробно-энзиматическую ферментацию подсолнечного шрота с содержанием сырого протеина 37,2%, взятого в качестве трудногидролизуемого сырья, проводят в колбах Эрленмейера объемом 2 литра на качалке с использованием суспензии клеток штамма Naumovozyma castellii ST-2 и растворов одного или более коммерческих ферментных препаратов в следующих условиях:
количество подсолнечного шрота влажностью 90%-1000 г;
суспензия штамма Naumovozyma castellii ST-2-5 об. %;
раствор одного или более ферментов - из расчета 0,01; 0,05; 0,25; 0,5 и 1,0% ферментов к массе сухого вещества сырья:
фитаза (Phytaflow FG, Novozymes, Дания);
альфа-амилаза (Amylex 6T, Danisco US Inc., США) + протеаза (Novozym 25008, Novozymes, Дания) (1:1 по массе);
- 11 045153 альфа-амилаза + целлюлаза + ксиланаза + бета-глюканаза (Viscoferm, Novozymes, Дания);
фитаза + целлюлаза + ксиланаза + бета-глюканаза (Ровабио Макс Эдванс Р, Adisseo France S.A.S.,
Франция);
протеаза + пектиназа + альфа-амилаза + альфа-галактозидаза + целлюлаза + ксиланаз + маннаназа + бета-глюканаза + фитаза (FRA Octazyme P, Framelco, Нидерланды);
длительность ферментации - 30 ч;
температура ферментации - 30°С;
перемешивание - постоянное (180±20 оборотов платформы качалки в минуту);
сушка - распылительная в условиях, обеспечивающих температуру готового продукта на выходе не выше 60°С.
Полученные результаты приведены в табл. 5.
Таблица 5
Влияние концентрации ферментных препаратов на содержание сырого протеина в кормовой добавке, полученной микробно-энзиматической ферментацией подсолнечного шрота
| Количество ферментного препарата, % к массе сухого вещества сырья | Содержание сырого протеина (%) в кормовой добавке на основе подсолнечного шрота, ферментированного Naumovozyma castellii ST-2 и ферментами: | |||
| фитаза | альфаамилаза + протеаз а | альфаамилаза + целлюлаза + ксиланаза + бетаглюканаза | фитаза + целлюлаза + ксиланаза + бетаглюканаза | протеаза + пектиназа + альфа-амилаза + альфагалактозидаза + целлюлаза + ксиланаз + маннаназа + бета-глюканаза + фитаза |
| 0 (исходное сырье) | 37,2 | |||
| 0 (микробная ферментация | 39, 2 |
| ) | |||||
| 0, 01 | 39, 5 | 39, 8 | 40,2 | 40,3 | 41,0 |
| 0, 05 | 41,2 | 41,3 | 41, 6 | 41,7 | 42,0 |
| 0,25 | 41,5 | 41,7 | 42,0 | 42,2 | 42,3 |
| 0,50 | 41,7 | 41,9 | 42,2 | 42,5 | 42, 6 |
| 1, 00 | 42,0 | 42,2 | 42,4 | 42,7 | 42,9 |
Как видно, при микробно-энзиматической ферментации трудногидролизуемого подсолнечного шрота оптимальное количество используемых ферментных препаратов составляет от 0,05 до 0,5% к массе сухого вещества сырья, в зависимости от состава входящих в них ферментов. Микробноэнзиматическое воздействие на подсолнечный шрот приводит при оптимальной концентрации ферментов к повышению содержания в получаемой кормовой добавке протеина до 41,2-42,6%, что на 4,0-5,4% больше по сравнению с исходным сырьем и на 2,0-3,4% больше по сравнению с микробной ферментацией.
Пример 6.
Микробно-энзиматическую ферментацию предварительно подготовленного (экструдирование, измельчение и/или стерилизация) растительного сырья проводят в колбах Эрленмейера объемом 2 л на
- 12 045153 качалке в следующих условиях:
количество шрота (жмыха) или их смеси влажностью 95% -800 г;
суспензия клеток Paenibacillus nicotianae ST-4 (ОП6оо = 0,6±0,1) - 3 об.%;
раствор комплексного ферментного препарата FRA Octazyme P (Framelco, Нидерланды) - из расчета 0,1 % препарата к массе сухого вещества сырья:
длительность ферментации - 20 ч;
температура ферментации - 30°С;
перемешивание - постоянное;
сушка - распылительная в условиях, обеспечивающих температуру готового продукта на выходе не выше 60°С.
Полученные результаты приведены в табл. 6.
Таблица 6
Содержание протеина в кормовой добавке, полученной микробно-энзиматической ферментацией предварительно обработанного сырья
| Растительное сырье | Сырой протеи н исходн ого сырья, | Сырой протеин в кормовой добавке на основе ферментированного сырья, %: | ||||
| без предв арите льной подго товки | предвар ительно измельч енного | простер илизова нного (0,75 а ти, 30 мин) | измельченн ого и простерили зованного (0,75 ати, 30 мин) | экструд ированн ого (90 °C, 5 сек) | ||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
| Соевый шрот | 46,0 | 52,5 | 52, 8 | 52,7 | 52,9 | 52,8 |
| Рапсовый жмых | 28,7 | 32, 6 | 32,5 | 32,7 | 32,8 | 32, 6 |
| Подсолнечный шрот | 37,2 | 40,5 | 40, 6 | 40, 8 | 40,7 | 40, 9 |
| Соевый шрот + рапсовый жмых + подсолнечный шрот (1:1:1 по массе) | 37,3 | 42,2 | 42,3 | 42,3 | 42,4 | 42,5 |
Согласно полученным результатам, предварительная термомеханическая обработка исходного сырья не приводит к достоверному увеличению содержания сырого протеина (табл. 6). Титр живых (активных) клеток бактерий Paenibacillus nicotianae ST-4 в кормовой добавке варьируется в пределах 3,5х107 -8, 0х107 КОЕ/г.
Необходимость термической обработки может возникнуть при чрезмерной контаминации исходного растительного сырья посторонней микрофлорой, механической обработки - при наличии в нем большого количества крупных трудногидратируемых комков.
Пример 7.
Обобщенные в табл. 7 экспериментальные данные иллюстрируют эффективность реализации заявляемого способа получения кормовой добавки из отходов переработки семян масличных культур по варианту 1 в различных условиях ферментации.
Для этого сырье увлажняют до 50-70% от полной влагоемкости, в количестве 300 г помещают в колбы Эрленмейера объемом 2 литра и подвергают микробной или микробно-энзиматической ферментации при температуре 24-30°С и перемешивании до накопления в ферментируемом продукте максимального количества протеина, примерно 36-48 ч.
При микробной ферментации сырья используют суспензию одного или более микроорганизмов, выбранных из группы, включающей представителей родов Rhodotorula, Rhodosporidium, Saccharomyces,
- 13 045153
Naumovozyma, Paenibacillus, при микробно-энзиматической -микроорганизмы указанных выше групп и раствор одного или более ферментов, выбранных из группы, включающей протеазы, пептидазы, амилазы, альфа-галактозидазы, маннаназы, пектиназы, бета-глюканазы, ксиланазы, эндоглюканазы (целлюлазы), фитазы, липазы, или раствор комплексного ферментного препарата. Полученную кормовую добавку высушивают до влажности не более 10%, определяют содержание сырого протеина.
- 14 045153
Таблица 7
Содержание сырого протеина в образцах кормовой добавки, полученной согласно заявляемому способу по варианту 1
| Условия ферментации сырья | Содержание протеина (%) в кормовой добавке, полученной ферментацией: | |||
| соевого шрота | рапсового жмыха | подсолнечного шрота | их смеси (1:1:1 по массе) | |
| Исходное сырье (без ферментации) | 46, 0 | 28,7 | 37,2 | 37,3 |
| Суспензия Rhodotorula glutinis ST-1 (3 об. %), влажность сырья 60 %, 24 °C, 40 ч | 51,4 | 32,3 | 40,5 | 41,8 |
| Суспензия Naumovozyma castellii ST-2 (10 об. %), влажность сырья 50 %, 20 °C, 48 ч | 52,3 | 32,4 | 40,3 | 42,5 |
| Суспензия смеси (1 : 1 : 1 по объему) Rhodotorula glutinis ST-3, Paenibacillus nicotianae ST-4 и Rhodo sporidium sp . (6 об. %), влажность сырья 55 %, 28 °C, 40 ч | 52,9 | 32,8 | 41,2 | 42,4 |
| Суспензия Saccharomyces cerevisiae (3 об. %) и раствор протеазы (Olexa HS FG, Novozymes, Дания; из расчета 0,25 % фермента к массе сухого вещества сырья), влажность сырья 55 %, 30 °C, | 53, 1 | 33,5 | 41,5 | 41,7 |
- 15 045153
| 36 ч | ||||
| Суспензия Paenibacillus nicotianae ST-4 (5 об. %) и раствор целлюлазы, ксиланазы и бетаглюканазы (Viscozyme Wheat НТ FG, Novozymes, Дания; из расчета 0,15 % препарата к массе сухого вещества сырья), влажность сырья 65 %, 28 °C, 36 ч | 53, 8 | 33, 8 | 42, 0 | 43,2 |
| Суспензия смеси (1 : 1 по объему) штаммов Paenibacillus sp. , Rhodotorula sp. ( 6 об. %) и раствора протеазы, пектиназы, амилазы, альфагалактозидазы, целлюлазы, ксиланазы, маннаназы, бетаглюканазы, фитазы в составе комплексного ферментного препарата (FRA Octazyme Р, | 53, 7 | 34,0 | 42,2 | 43, 6 |
| Framelco, Нидерланды; из расчета 0,10 % препарата к массе сухого вещества сырья), влажность сырья 50 %, 28 °C, 36 ч |
Как видно, в испытанных условиях ферментации по варианту 1 содержание сырого протеина в кормовой добавке превышает его содержание в исходном сырье: в среднем увеличение составляет для соевого шрота 6,9%, для рапсового жмыха - 4,4%, подсолнечного шрота - 4,1%, для их смеси (1:1:1 по массе) - 5,2%.
- 16 045153
Пример 8.
Экспериментальные данные, обобщенные в табл. 8, иллюстрируют эффективность реализации заявляемого способа получения кормовой добавки из отходов переработки семян масличных культур по варианту 2 в различных условиях ферментации.
Сырье увлажняют до 90-95% от полной влагоемкости, суммарным количеством 1000 г помещают в колбы Эрленмейера объемом 2 литра на микробиологическую качалку и при постоянном перемешивании подвергают микробной или микробно-энзиматической ферментации при температуре 24-30°С до накопления в ферментируемом продукте максимального количества протеина (16-36 ч). Остальные условия ферментации аналогичны приведенным в примере 7. Сушку ферментированного сырья проводят на распылительной сушилке в условиях, обеспечивающих температуру готового продукта на выходе не выше 60°С.
Анализ содержания сырого протеина, незаменимых аминокислот, антипитательных факторов, титра микроорганизмов проводили общепринятыми методами (ГОСТ 10444.12, ГОСТ 10444.15, ГОСТ 13496.4, ГОСТ 13979.9, ГОСТ 26657, ГОСТ 31640, ГОСТ 31675, ГОСТ 32040, ГОСТ 33427 и др.).
Результаты обобщены в табл. 8.
Таблица 8
Содержание протеина в образцах кормовой добавки, полученной согласно заявляемому способу по варианту 2
| Условия ферментации сырья | Содержание протеина (%) в кормовой добавке, полученной ферментацией: | |||
| соевого шрота | рапсового жмыха | подсолнечн ого шрота | их смеси (1:1:1 по массе) | |
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| Исходное сырье (без ферментации) | 46, 0 | 28,7 | 37,2 | 37,3 |
| Суспензия Rhodotorula glutinis ST-3 ( 6 об . %) , влажность сырья 95 %, 20 °C, 36 ч | 51,2 | 32,3 | 40,5 | 41,3 |
| Суспензия штамма Naumovozyma castellii ST-2 ( 8 об . %), влажность сырья 90 %, 28 °C, 36 ч | 52,0 | 32,8 | 40,3 | 42,5 |
| Суспензия смеси Saccharomyces cerevisiae (3 об. %) и Paenibacillus sp. (1 об. %) , 30 °C, 20 ч | 52,3 | 32, 6 | 40, 8 | 42, 6 |
| Суспензия Rhodotorula sp. (2 об. %) и раствор фитазы | 52,5 | 32,5 | 41,9 | 42,9 |
- 17 045153
| (Creazyme Phytase 5000, Inner Mongolian CRAVB Biotechnology Co., Ltd, Монголия; из расчета 0,2 % препарата к массе сухого вещества сырья), влажность сырья 90 %, 24 °C, 30 ч | ||||
| Суспензия штамма Paenibacillus nicotianae ST-4 (2 об. %) и раствор альфаамилазы и глюкоамилазы (Saczyme Yield, Novozymes, Дания; из расчета 0,5 % препарата к массе сухого вещества сырья), влажность сырья 90 %, 24 °C, 16 ч | 52,7 | 33, 1 | 41,1 | 42,9 |
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| Суспензия штама Rhodo sporidium sp . (5 об. %) и раствор амилазы, ксиланазы, бетаглюканазы (TALZYME XL 75, Sanson | 53,2 | 33,2 | 41, 6 | 43,2 |
- 18 045153
| Industry Group СО. LTD, Китай; из расчета 0,05 % препарата к массе сухого вещества сырья), фитазы (Phytaflow FG Novozymes, Дания; из расчета 0,05 % к массе сухого вещества сырья препарата), влажность сырья 95 %, 24 °C, 24 ч | ||||
| Суспензия смеси Rhodotorula glutinis ST-1 (2,5 об. %) , Naumovozyma castellii ST-2 (5,0 об. %) и раствора протеазы, пектиназы, амилазы, целлюлазы, ксиланазы, бетаглюканазы, фитазы в составе комплексного ферментного препарата («Энзим матрикс», ООО «НПЦ Агросистема», РФ; из расчета 0,05 % препарата к массе | 53, 6 | 33,5 | 41,9 | 43,4 |
| сухого вещества сырья), влажность сырья 95 %, 30 °C, 16 ч |
Таким образом, при всех условиях ферментации по варианту 2 содержание сырого протеина в кормовой добавке превышает его содержание в исходном сырье. В среднем повышение составляет для соевого шрота 6,5%, для рапсового жмыха - 4,2%, подсолнечного шрота - 4,0%, для их смеси (1:1:1 по массе) - 5,4%.
Следует особо подчеркнуть, что в результате осуществления заявляемого способа ферментации как по варианту 1 (табл. 7), так и по варианту 2 (табл. 8) получают кормовую добавку со стабильным и близким по величине содержанием сырого протеина. Его концентрация в кормовой добавке, полученной с использованием шрота (жмыха) сои увеличивается в среднем на 6,5-6,9%, рапса -на 4,2-4,4%, подсолнечника - на 4,0-4,1%, их смеси - на 5,2-5,4% по сравнению с исходным сырьем.
При этом концентрация антипитательных веществ в кормовой добавке, получаемой согласно заявляемому способу по варианту 1 и варианту 2, снижается по сравнению с их количеством в исходном сырье. Содержание связанного с фитатом фосфора уменьшено на 24,5-27,8%, сырой клетчатки - на 38,4- 19 045153
40,1%, олигосахаридов -на 92,8-95,8%, глицинина, бета-конглицинина, лектинов - 95,6-96,3%, ингибиторов трипсина - на 95,2-100%, активности уреазы - на 98,3-100%. Титр живых (активных) клеток микробных культур, используемых для ферментации сырья, в кормовой добавке варьируется в пределах от
5,4x107 до 2,5x109 КОЕ/г.
Пример 9.
Для детальной характеристики состава, питательной ценности, испытаний эффективности нарабатывают 2 образца кормовой добавки согласно варианту 1 и варианту 2 заявляемого способа.
Кормовую добавку по варианту 1 получают микробной ферментацией соевого шрота в закрытом, оснащенном перемешивающим устройством аппарате периодического действия объемом 30 л в следующих условиях:
количество шрота (жмыха) влажностью 50% - 10,0 кг;
суспензия клеток Rhodotorula glutinis ST-1 в экспоненциальной фазе роста - 5 об.%, длительность ферментации - 48 ч;
температура ферментации - 26±2°С;
периодическое перемешивание;
сушка - в сушилке ленточного типа (модель СЛМ-4) при 55°С.
Кормовую добавку по варианту 2 получают микробно-энзиматической ферментацией предварительно измельченного соевого шрота в ферментере периодического действия объемом 100 л, оснащенном перемешивающим устройством (мешалкой) и водной рубашкой, в следующих условиях:
предварительно простерилизованный (0,75 ати, 30 мин) соевый шрот влажностью 90% - 50,0 кг;
суспензия клеток Naumovozyma castellii ST-2 (ОП600 = 0,6±0, 1) - 3 об. %, раствор комплексного ферментного препарата Энзим матрикс (ООО НПЦ Агросистема, РФ), содержащего протеазу, пектиназу, альфа-амилазу, целлюлазу, ксиланазу, бета-глюканазу, фитазу, липазу, маннаназу,- из расчета 0,05% препарата к массе сухого вещества сырья;
длительность ферментации - 30 ч;
температура ферментации - 28°С;
постоянное перемешивание;
сушка - распылительная в условиях, обеспечивающих температуру готового продукта на выходе не выше 60°С.
Анализ биохимического состава, кормовой ценности и усвояемости исходного сырья и образцов кормовой добавки проведен в независимых аккредитованных лабораториях СЗАО Серволюкс, РУП Слуцкий центр стандартизации, метрологии и сертификации, РУП Центральная научноисследовательская лаборатория (Беларусь). Анализ проводили общепринятыми на территории Евразийского экономического союза методами - ГОСТ 10444.12, ГОСТ 10444.15, ГОСТу 13496.4, ГОСТу 13979.9, ГОСТу 26657, ГОСТу 31640, ГОСТ 31675, ГОСТу 33427, ГОСТу Р 51038 и др.
Полученные результаты обобщены в табл. 9 и табл. 10.
- 20 045153
Таблица 9
Сравнительная характеристика соевого шрота и образцов кормовой добавки, полученной согласно заявляемому способу по варианту 1 и варианту 2
| Показатель | Единица измерения | Кормовая добавка по варианту 1 | Кормовая добавка по варианту 2 | Соевый шрот |
| Обменная энергия | ккал/кг | 2327 | 2395 | 2256 |
| Сухое вещество | г/100 г | 90, 82 | 90,49 | 90, 60 |
| Фосфор усвояемый | г/100 г | 0,39 | 0,38 | 0,26 |
| Фосфор фитиновый | г/100 г | 0,29 | 0,31 | 0,41 |
| Сырая клетчатка | г/100 г | 3,50 | 3,23 | 5, 60 |
| Сырой протеин | г/100 г | 51,45 | 52,15 | 46, 00 |
| Лизин | г/100 г | 3,21 | 3, 15 | 2,97 |
| Метионин | г/100 г | 0,74 | 0,72 | 0, 66 |
| Цистин | г/100 г | 0,72 | 0,76 | 0, 69 |
| Треонин | г/100 г | 2,10 | 2,11 | 1,84 |
| Триптофан | г/100 г | 0, 66 | 0, 69 | 0, 65 |
| Валин | г/100 г | 2,55 | 2,59 | 2,24 |
| Изолейцин | г/100 г | 2,51 | 2,50 | 2,14 |
| Лейцин | г/100 г | 3, 92 | 3, 96 | 3, 63 |
| Фенилаланин | г/100 г | 2,59 | 2, 61 | 2,50 |
| Гистидин | г/100 г | 1,32 | 1,33 | 1,36 |
| Аргинин | г/100 г | 3,43 | 3,47 | 3,36 |
| Сумма аминокислот | г/100 г | 23,75 | 23, 89 | 22,04 |
| Титр микроорганизмов: | КОЕ/г | 3,5 х 108 | 8,5 х 108 | 8,0 х 104 0 |
Таблица 10
Сравнительная характеристика усвояемости аминокислот соевого шрота и образцов кормовой добавки, полученной согласно заявляемому способу по варианту 1 и варианту 2
| Аминокислота | Усвояемость аминокислот (%) : | |||||
| Кормовая добавка по варианту 1 | Кормовая добавка по варианту 2 | соевый шрот | ||||
| птица | свиньи | птица | свиньи | птица | свиньи | |
| Лизин | 89, 8 | 90, 0 | 88,9 | 92 | 86, 9 | 86, 9 |
| Метионин | 87,3 | 86, 0 | 88,7 | 89 | 86, 4 | 89, 4 |
| Цистин | 74,3 | 91,0 | 76, 1 | 93 | 82, 6 | 81,2 |
| Треонин | 84,5 | 86, 0 | 85, 0 | 89 | 83, 7 | 70, 1 |
| Триптофан | 88,3 | 89, 0 | 86, 7 | 91 | 83, 1 | 88,0 |
| Валин | 84,1 | 88,0 | 85, 2 | 90 | 87, 9 | 87,1 |
| Изолейцин | 89, 7 | 90, 0 | 89, 4 | 91 | 88, 8 | 88,3 |
| Лейцин | 90,7 | 89, 0 | 90,5 | 91 | 88, 9 | 87,1 |
| Фенилаланин | 91,8 | 90, 0 | 91,3 | 92 | 89, 2 | 89, 2 |
| Гистидин | 86, 9 | 91,0 | 87,0 | 92 | 86, 9 | 89, 7 |
| Аргинин | 93,5 | 94,0 | 93, 6 | 95 | 82, 1 | 89, 3 |
Как видно, при масштабировании процессов микробной или микробно-энзиматической ферментации соевого шрота концентрация сырого протеина в образцах кормовой добавки достигает 51,45-52,15 г/100 г;
- 21 045153 незаменимых аминокислот - в сумме 23,75-23,85 г/100 г; усвояемого фосфора - 0,38-0,39 г/100 г, что соответственно на 11,8-13,4; 7,8-8,4 и 46,2-50,0% выше их содержания в исходном сырье (табл. 9). При этом усвояемость животными всех незаменимых аминокислот, за исключением цистина и валина у птицы, метионина у свиней, является более высокой, чем усвояемость соответствующих аминокислот исходного соевого шрота (табл. 10).
Кроме того, в ферментированных продуктах не обнаружено ингибиторов трипсина и активности уреазы; содержание глицинина, бета-конглицинина и лектинов снижено на 95,5-95,9%, олигосахаридов на 92,9-93,5%, сырой клетчатки - на 37,5-42,3%, фитинового фосфора - на 24,4-29,3% по сравнению с исходным соевым шротом.
Титр пробиотического микроорганизма Naumovozyma castellii ST-2, используемого в процессе ферментации соевого шрота, составил 3,5х107 - 1,5x108 КОЕ/г кормовой добавки.
Пример 10.
Эффективность использования образцов кормовой добавки, полученной заявленным способом, исследована на ценных видах рыб, которые по сравнению с другими животными наиболее требовательны к качеству и количеству потребляемого протеина. Испытания проводили в Республиканском унитарном предприятии Институт рыбного хозяйства в лабораторных аквариумах, в каждом из которых содержали по пять сеголетков радужной форели средней массой 24-32 г или по пять двухлеток осетра ленского средней массой 220-440 г, отдельно в контрольных и опытных группах.
Условия содержания радужной форели: аквариумы объемом 90 литров; температура воды - 17,3°С, количество растворенного в воде кислорода - 7,5 мг/л, рН 6,8. Рыба контрольной группы получала основной рацион (Комбикорм экструдированный для сеголетков лососевых рыб, ТУ BY 100035627.0152013), а для рыбы опытных групп соевый шрот в комбикорме был частично (5, 10, 15%) и полностью (100%) заменен кормовой добавкой, полученной согласно заявляемому способу по варианту 1.
Условия содержания ленского осетра: аквариумы объемом 250 литров; температура воды - 19°С, содержание растворенного в воде кислорода - 7,5 мг/л, рН 6,8. Рыба контрольной группы получала основной рацион (Комбикорм экструдированный для осетровых рыб, ТУ BY 100035627.016-2015), а для рыбы опытных групп соевый шрот в комбикорме частично (на 5, 10, 15%) и полностью (на 100%) заменен кормовой добавкой, полученной согласно заявляемому способу по варианту 2.
По окончании эксперимента проанализирован относительный прирост массы рыбы и величина кормового коэффициента, отражающего количество корма, затраченного на получение 1 кг прироста. Исследованы также биохимические показатели мяса рыбы, влияющие на его питательную ценность. Результаты исследований, выполненных с использованием общепринятых методов, приведены в табл. 11-13.
Как видно, замена 10% комбикорма кормовой добавкой давала наибольший абсолютный прирост массы радужной форели (62,8%), что в 4,2 раза превышало контрольный показатель (табл. 11).
Таблица 11
Показатели эффективности использования кормовой добавки в рационе радужной форели
| Показатель эффективности использования кормовой добавки | Доля замены соевого шрота в комбикорме кормовой добавкой, %: | ||||
| 0 (контроль) | 5 | 10 | 15 | 100 | |
| Абсолютный прирост массы, г | 3,60±0,40 | 12,20±1,1 6 | 15,00±2,7 4 | 6,40±2,11 | 5, 40±2,48 |
| Кормовой коэффициент, ед. | 4, 1 | 1, 6 | 0, 9 | 1,9 | 2, 6 |
Менее значительное повышение приростов наблюдалось у ленского осетра: при оптимальной дозе введения шрота (15%) этот показатель составил 9,57%, превысив контрольный уровень в 1,23 раза (табл. 12).
- 22 045153
Таблица 12
Показатели эффективности использования кормовой добавки в рационе ленского осетра
Показатель добавкой эффективности исполь зования кормовой добавки
Абсолютный прирост массы.
Кормовой коэффициент
Кроме того, отмечено более эффективное использование комбикорма рыбой при введении в его состав кормовой добавки во всех испытанных дозах. Максимальный эффект получен при замене 10% основного рациона форели и 15% - осетра. Кормовой коэффициент в первом случае снижается с 4,1 ед. (контроль) до 0,9 ед., во втором - с 3,7 ед. до 3,0 ед., что согласуется с приведенными выше данными о приростах массы рыбы.
Отмечено также, что при введении в основной рацион кормовой добавки в оптимальной для радужной форели (10%) и ленского осетра (15%) дозе содержание протеина в их мышечной массе превышает контрольные показатели соответственно на 14,6 и 26,1%, а жирность - на 5,4 и 32,9% соответственно (табл. 13).
Таблица 13
Влияние дозы замены соевого шрота в комбикорме кормовой добавкой на показатели мяса радужной форели и ленского осетра
| Рыба | Доза кормовой добавки, % | Показатели качества мяса рыбы: | |||
| влага, % | сухое вещество, % | протеин, % | жир, % | ||
| Радужная форель | 0 (контроль) | 75,01±1,Об | 24,99±1,Об | 14,41±0,29 | 8,48±0,55 |
| 5 | 74,59±1,02 | 25,41±1,02 | 16,33±0,97 | 7,41±0,37 | |
| 10 | 74,34+0,94 | 25,66+0,94 | 16,51+0,27 | 6,94+0,74 | |
| 15 | 75,57±0,18 | 24,43+0,18 | 15,73±1,17 | 6,43+1,31 | |
| 100 | 76,30±0,59 | 23,70±0,59 | 12,79±0,53 | 7,87±0,83 | |
| Ленский осетр | 0 (контроль) | 79,07±0,32 | 20,93±0,32 | 13,51±0,78 | 5,47±1,43 |
| 5 | 78,14±0,20 | 21,86±0,20 | 12,71±0,31 | 7,71±0,35 | |
| 10 | 82,04±0,39 | 17,97±0,39 | 9,57±0,61 | 6,58±0,25 | |
| 15 | 73,72±0,37 | 26, 29±0,37 | 17,04±0,96 | 7,27±0,28 | |
| 100 | 77,54±0,31 | 22,46±0,31 | 13,74±0,72 | 7,00±0,94 |
Сходный эффект получен при использовании заявляемой кормовой добавки в рационе животных, которые отличаются меньшей, чем ценные виды рыбы привередливостью к аминокислотному составу потребляемого белка.
Таким образом, реализация разработанного ресурсосберегающего, экологически безопасного способа получения кормовой добавки позволяет из отходов переработки семян масличных культур получить кормовой продукт повышенной питательной ценности и усвояемости, упростить и удешевить процесс,
- 23 045153 расширить ассортимент кормовых продуктов.
Применение полученной в соответствии с заявляемым способом кормовой добавки, дополнительно содержащей культуры активных (живых) микроорганизмов и их биологически активные метаболиты, способствует улучшению физического, биохимического и иммунного статуса животных, нормализации микрофлоры желудочно-кишечного тракта, улучшению пищеварения, уменьшению риска возникновения заболеваний, обусловленных нарушением функций пищеварительной системы и обмена веществ, что приводит к увеличению продуктивности животных, снижению расхода корма, повышению качества и рентабельности производства получаемых от них продуктов.
Источники информации.
1. SI 25728 (А) - 2020-05-29
2. CN 109744377 - 2019-05-14
3. RU 2038797 - 1995.07.09
4. RU 2134993 - 1999-08-27
5. RU 2480997 - 2013-05-10
6. CN 101371681 - 2009.02.25
7. US 2016135483 - 2016-05-19
8. RU 2631827 - 2017-09-26
9. ЕА 201492027 - 2015-02-27
10. WO 2006102907 - 2006-12-14
И. RU 2202224 - 2003-04-20
12. RU 2552084 - 2015-06-10 (прототип)
13. Naghmouchi К., Baah J., Cudennec В., Drider D. Required characteristics of Paenibacillus polymyxa JB-0501 as potential probiotic // Arch. Microbiol. - 2013. - Vol. 195, No. 8. -
P. 537-543.
14. Лобанок А.Г., Сапунова Л.И., Шарейко Н.А., Долженкова Е.А. Дрожжи как основа биологически активных кормовых добавок про- и пребиотического действия // Весцг НАН Беларус!.
Сер. бгял. навук. - 2014. - № 1. - С. 17-22.
15. Midhun S.J., Neethu S., Vysakh A., Arun D., Radhakrishnan E.K., Jyothis M. Antibacterial activity and probiotic characterization of autochthonous Paenibacillus polymyxa isolated from Anabas testudineus (Bloch, 1792) // Microb. Pathog. - 2017. - Vol. 113. - P. 403-411.
16. Banik A., Halder S.K., Ghosh C., Mondal K.C. Fungal Probiotics: Opportunity, Challenge, and Prospects. In: Yadav A., Singh S., Mishra S., Gupta A. (eds). - Recent Advancement in White Biotechnology Through Fungi. Fungal Biology. - Springer, Cham., 2019.
17. Chen S.W., Liu C.H., Hu S.Y. Dietary administration of probiotic Paenibacillus ehimensis NPUST1 with bacteriocin-like activity improves growth performance and immunity against Aeromonas hydrophila and Streptococcus iniae in Nile tilapia
-
Claims (9)
1) отходы переработки семян масличных культур увлажняют до 50-95% от полной влагоемкости,
1. Способ получения кормовой добавки, в котором
2. Способ по п.1, в котором увлажнение отходов переработки семян масличных культур осуществляют до 50-70% от полной влагоемкости, а ферментацию проводят в течение 36-48 ч.
2) добавляют суспензию по меньшей мере одного микроорганизма в экспоненциальной фазе роста, выбранного из группы, включающей Rhodotorula glutinis, Rhodosporidium species, Saccharomyces cerevisiae, Naumovozyma castellii и Paenibacillus nicotianae, в количестве 3-10 об.%,
3. Способ по п.1, в котором увлажнение отходов переработки семян масличных культур осуществляют до 90-95% от полной влагоемкости, а ферментацию проводят в течение 16-36 ч.
3) проводят ферментацию при температуре 24-30°С и перемешивании в течение 16-48 ч,
4. Способ по любому из пп.1-3, в котором в качестве отходов переработки семян масличных культур используют шрот и/или жмых по меньшей мере одного вида семян, выбранных из группы, включающей семена рапса, сои и подсолнечника.
4) высушивают при температуре не более 60°С до влажности не более 10%.
5. Способ по любому из пп.1-4, в котором отходы переработки семян масличных культур предварительно экструдируют и/или измельчают.
6. Способ по любому из пп.1-5, в котором отходы переработки семян масличных культур при необходимости стерилизуют.
7. Способ по любому из пп.1-6, в котором в качестве суспензии микроорганизмов используют суспензию по меньшей мере одного микроорганизма, выбранного из группы, включающей штамм Rhodotorula glutinis ST-1, депонированный в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов под номером БИМ Y-338 Д, штамм Naumovozyma castellii ST-2, депонированный в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов под номером БИМ Y-339 Д, штамм Rhodotorula glutinis ST-3, депонированный в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов под номером БИМ Y-340 Д, штамм Paenibacillus nicotianae ST-4, депонированный в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов под номером БИМ В-1461 Д.
8. Способ по любому из пп.1-7, в котором одновременно с суспензией микроорганизмов дополнительно вводят раствор, содержащий ферменты в количестве 0,05-0,5% к массе сухого вещества отходов переработки семян масличных культур, предпочтительно по меньшей мере один фермент, выбранный из группы, включающей протеазы, пептидазы, амилазы, альфа-галактозидазы, маннаназы, пектиназы, бета-
- 25 045153 глюканазы, ксиланазы, эндоглюканазы, целлюлазы, фитазы и липазы.
9. Кормовая добавка, полученная способом по любому из пп.1-8, обогащенная белком, незаменимыми аминокислотами, легкоусвояемым фосфором, пробиотическими микроорганизмами и биологически активными продуктами их метаболизма - ферментами, полисахаридами, олигосахаридамипребиотиками, каротиноидами, витаминами.
О Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EA202092984 | 2020-12-29 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA045153B1 true EA045153B1 (ru) | 2023-10-31 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhou et al. | Enhancement of growth and intestinal flora in grass carp: the effect of exogenous cellulase | |
| TWI535385B (zh) | 具增進發酵豆粉之產率的桿菌屬菌株及使用該菌株製造發酵豆粉的方法 | |
| JP5872104B2 (ja) | 新たなバチルス・サブチルス｛ｎｏｖｅｌｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ｝ | |
| KR20180067700A (ko) | 사료 첨가제 조성물 | |
| Zentek et al. | (Bio) Technological processing of poultry and pig feed: Impact on the composition, digestibility, anti-nutritional factors and hygiene | |
| US20170042949A1 (en) | System and method for production of shelf stable probiotics for animal nutrition enhancement | |
| EP3203858A1 (en) | Bacillus strains with fast germination and antimicrobial activity against clostridium perfringens | |
| CN107518156A (zh) | 饲料添加剂组合物 | |
| JP2011055831A (ja) | 枯草菌を用いた発酵大豆粕の製造方法 | |
| Wang et al. | Bacillus subtilis LCBS1 supplementation and replacement of fish meal with fermented soybean meal in bullfrog (Lithobates catesbeianus) diets: Effects on growth performance, feed digestibility and gut health | |
| Dai et al. | Fermentation techniques in feed production | |
| YIN et al. | Effects of soybean meal replacement with fermented alfalfa meal on the growth performance, serum antioxidant functions, digestive enzyme activities, and cecal microflora of geese | |
| EP3735837A1 (en) | Method for producing fermented composition with improved odor using yeast | |
| Mirzah et al. | Effect of the Substitution the Fish Meal with Shrimp Head Waste Fermented in Diet on Broiler Performance | |
| KR101909375B1 (ko) | 발효 구아밀(Guar meal) 제조방법 | |
| RU2552084C1 (ru) | Способ переработки соевого шрота в кормовой продукт с улучшенными свойствами | |
| CN117241678A (zh) | 用于动物健康的饲料组合物 | |
| EA045153B1 (ru) | Способ получения кормовой добавки из отходов переработки семян масличных культур | |
| Das et al. | Evaluation of phytase-producing ability by a fish gut bacterium, Bacillus subtilis subsp. subtilis | |
| Yasar et al. | Nutritional fortification of sunflower meal by Bacillus subtilis ATCC PTA-6737 fermentation. | |
| RU2803994C1 (ru) | Способ получения сухой ферментированной белковой кормовой добавки из рапсового шрота | |
| Das et al. | Inclusion of different levels of solid-state fermented mahua oil cake on growth, digestibility and immunological parameters of rohu (Labeo rohita) | |
| Aguihe | Response of Turkey Growers Fed Fermented Shea Butter Cake Based Diets with Fullzyme® Supplementation | |
| Raman et al. | Comparative Evaluation of Dietary Raw and Solid-state Fermented Sesbania Leaf Meal in Labeo rohita (Hamilton, 1822) | |
| CN116725120A (zh) | 连续酶菌发酵肉粉提高蛋白消化率的方法及在宠物中的应用效果 |