EA045054B1 - Новая комбинация активных агентов для лечения прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (pf-ild) - Google Patents
Новая комбинация активных агентов для лечения прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (pf-ild) Download PDFInfo
- Publication number
- EA045054B1 EA045054B1 EA202090977 EA045054B1 EA 045054 B1 EA045054 B1 EA 045054B1 EA 202090977 EA202090977 EA 202090977 EA 045054 B1 EA045054 B1 EA 045054B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- nintedanib
- formula iii
- inhibitor
- ild
- pharmaceutically acceptable
- Prior art date
Links
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 title claims description 85
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 64
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 title claims description 46
- 239000013543 active substance Substances 0.000 title description 4
- 229960004378 nintedanib Drugs 0.000 claims description 175
- XZXHXSATPCNXJR-ZIADKAODSA-N nintedanib Chemical compound O=C1NC2=CC(C(=O)OC)=CC=C2\C1=C(C=1C=CC=CC=1)\NC(C=C1)=CC=C1N(C)C(=O)CN1CCN(C)CC1 XZXHXSATPCNXJR-ZIADKAODSA-N 0.000 claims description 175
- 201000009794 Idiopathic Pulmonary Fibrosis Diseases 0.000 claims description 116
- 208000036971 interstitial lung disease 2 Diseases 0.000 claims description 113
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 68
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 65
- 101000988424 Homo sapiens cAMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase 4B Proteins 0.000 claims description 61
- 102100029168 cAMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase 4B Human genes 0.000 claims description 61
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims description 60
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 52
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 claims description 52
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 claims description 52
- 150000004917 tyrosine kinase inhibitor derivatives Chemical class 0.000 claims description 52
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 42
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 claims description 41
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 41
- 229960001164 apremilast Drugs 0.000 claims description 37
- IMOZEMNVLZVGJZ-QGZVFWFLSA-N apremilast Chemical compound C1=C(OC)C(OCC)=CC([C@@H](CS(C)(=O)=O)N2C(C3=C(NC(C)=O)C=CC=C3C2=O)=O)=C1 IMOZEMNVLZVGJZ-QGZVFWFLSA-N 0.000 claims description 37
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 33
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 28
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 28
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 claims description 26
- 210000000651 myofibroblast Anatomy 0.000 claims description 25
- 229940123932 Phosphodiesterase 4 inhibitor Drugs 0.000 claims description 24
- 239000002587 phosphodiesterase IV inhibitor Substances 0.000 claims description 24
- 230000009795 fibrotic process Effects 0.000 claims description 23
- 229960002586 roflumilast Drugs 0.000 claims description 22
- MNDBXUUTURYVHR-UHFFFAOYSA-N roflumilast Chemical compound FC(F)OC1=CC=C(C(=O)NC=2C(=CN=CC=2Cl)Cl)C=C1OCC1CC1 MNDBXUUTURYVHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 22
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 22
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 22
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 21
- ISWRGOKTTBVCFA-UHFFFAOYSA-N pirfenidone Chemical compound C1=C(C)C=CC(=O)N1C1=CC=CC=C1 ISWRGOKTTBVCFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 229960003073 pirfenidone Drugs 0.000 claims description 20
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 19
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 17
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 15
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 15
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 15
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 claims description 14
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 claims description 14
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 12
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 12
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 11
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 9
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 claims description 9
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 claims description 6
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 claims description 5
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 230000008693 nausea Effects 0.000 claims description 5
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 claims description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 claims description 3
- 230000009218 additive inhibitory effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000030136 gastric emptying Effects 0.000 claims 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 claims 4
- 239000000902 placebo Substances 0.000 claims 4
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 claims 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 claims 3
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 claims 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims 2
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 claims 2
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 claims 1
- 235000021152 breakfast Nutrition 0.000 claims 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 claims 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 48
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 41
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 23
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 21
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 21
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 21
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 20
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 18
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 18
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 13
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 13
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 13
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 12
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 11
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 11
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 11
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 11
- PCGSQNPMMSALEJ-UHFFFAOYSA-N roflumilast n-oxide Chemical compound ClC1=C[N+]([O-])=CC(Cl)=C1NC(=O)C1=CC=C(OC(F)F)C(OCC2CC2)=C1 PCGSQNPMMSALEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 10
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 10
- WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 5-bromodeoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 9
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 9
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 description 9
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 9
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 8
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 7
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 230000030248 negative regulation of fibroblast proliferation Effects 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 6
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 5
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 5
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 229940000425 combination drug Drugs 0.000 description 5
- 208000018631 connective tissue disease Diseases 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 5
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 5
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 5
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 5
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 5
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 4
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 4
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 4
- 201000001155 extrinsic allergic alveolitis Diseases 0.000 description 4
- 230000003328 fibroblastic effect Effects 0.000 description 4
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 4
- 208000022098 hypersensitivity pneumonitis Diseases 0.000 description 4
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 4
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 4
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 4
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 238000010599 BrdU assay Methods 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 3
- 208000004852 Lung Injury Diseases 0.000 description 3
- 102000046299 Transforming Growth Factor beta1 Human genes 0.000 description 3
- 101800002279 Transforming growth factor beta-1 Proteins 0.000 description 3
- 206010069363 Traumatic lung injury Diseases 0.000 description 3
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 231100000515 lung injury Toxicity 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 3
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 3
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 3
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 3
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 229940099456 transforming growth factor beta 1 Drugs 0.000 description 3
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 2
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 2
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 2
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 2
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 2
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108091008794 FGF receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000044168 Fibroblast Growth Factor Receptor Human genes 0.000 description 2
- 101000916644 Homo sapiens Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 description 2
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 2
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 102100028198 Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor Human genes 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108091008606 PDGF receptors Proteins 0.000 description 2
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 description 2
- 102000011653 Platelet-Derived Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 2
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 2
- 239000012083 RIPA buffer Substances 0.000 description 2
- 241000219061 Rheum Species 0.000 description 2
- 229940100514 Syk tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 229960004308 acetylcysteine Drugs 0.000 description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 2
- 210000002821 alveolar epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003510 anti-fibrotic effect Effects 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N mycophenolate mofetil Chemical compound COC1=C(C)C=2COC(=O)C=2C(O)=C1C\C=C(/C)CCC(=O)OCCN1CCOCC1 RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N 0.000 description 2
- 229960004866 mycophenolate mofetil Drugs 0.000 description 2
- 201000004071 non-specific interstitial pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000002206 pro-fibrotic effect Effects 0.000 description 2
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 2
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 125000000020 sulfo group Chemical group O=S(=O)([*])O[H] 0.000 description 2
- 238000002636 symptomatic treatment Methods 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- NBHGLBORHJRXFF-UHFFFAOYSA-N 1-piperazin-1-yl-2h-thieno[3,2-d]pyrimidine Chemical class C1CNCCN1N1C(C=CS2)=C2C=NC1 NBHGLBORHJRXFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JMUGMZBGUVOSPU-UHFFFAOYSA-N 1-piperidin-1-yl-2h-thieno[3,2-d]pyrimidine Chemical class C1CCCCN1N1C(C=CS2)=C2C=NC1 JMUGMZBGUVOSPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000033116 Asbestos intoxication Diseases 0.000 description 1
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100031168 CCN family member 2 Human genes 0.000 description 1
- -1 Compounds Compound Chemical class 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 101001102692 Dictyostelium discoideum Dual specificity protein kinase pyk3 Proteins 0.000 description 1
- 101100296720 Dictyostelium discoideum Pde4 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010060902 Diffuse alveolar damage Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010063560 Excessive granulation tissue Diseases 0.000 description 1
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 101000777550 Homo sapiens CCN family member 2 Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 201000003838 Idiopathic interstitial pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 208000003250 Mixed connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 101100335081 Mus musculus Flt3 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 101100082610 Plasmodium falciparum (isolate 3D7) PDEdelta gene Proteins 0.000 description 1
- 206010035600 Pleural fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 108010050808 Procollagen Proteins 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 238000001069 Raman spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 201000010001 Silicosis Diseases 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010050207 Skin fibrosis Diseases 0.000 description 1
- QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N Tacrolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1\C=C(/C)[C@@H]1[C@H](C)[C@@H](O)CC(=O)[C@H](CC=C)/C=C(C)/C[C@H](C)C[C@H](OC)[C@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)O[C@@]2(O)C(=O)C(=O)N2CCCC[C@H]2C(=O)O1 QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N 0.000 description 1
- 108010017842 Telomerase Proteins 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 102100026857 Tyrosine-protein kinase Lyn Human genes 0.000 description 1
- 101710088331 Tyrosine-protein kinase Lyn Proteins 0.000 description 1
- 102000013814 Wnt Human genes 0.000 description 1
- 108050003627 Wnt Proteins 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000008043 acidic salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009692 acute damage Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000002730 additional effect Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 210000001132 alveolar macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005775 apoptotic pathway Effects 0.000 description 1
- 206010003441 asbestosis Diseases 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 1
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 1
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 201000009267 bronchiectasis Diseases 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940017733 esbriet Drugs 0.000 description 1
- ZNMRDZZRAFJOKY-UHFFFAOYSA-N ethanesulfonic acid methyl 2-hydroxy-3-[N-[4-[methyl-[2-(4-methylpiperazin-1-yl)acetyl]amino]phenyl]-C-phenylcarbonimidoyl]-1H-indole-6-carboxylate Chemical compound CCS(=O)(=O)O.CN1CCN(CC1)CC(=O)N(C)C2=CC=C(C=C2)N=C(C3=CC=CC=C3)C4=C(NC5=C4C=CC(=C5)C(=O)OC)O ZNMRDZZRAFJOKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000019305 fibroblast migration Effects 0.000 description 1
- 230000003352 fibrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 210000001126 granulation tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 230000002390 hyperplastic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000004068 intracellular signaling Effects 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004199 lung function Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000006151 minimal media Substances 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229940015847 ofev Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012663 orally bioavailable inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940044205 orally bioavailable inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 208000005987 polymyositis Diseases 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000007425 progressive decline Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 150000003195 pteridines Chemical class 0.000 description 1
- 230000009325 pulmonary function Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008458 response to injury Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000037390 scarring Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 229960001967 tacrolimus Drugs 0.000 description 1
- QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N tacrolimus Natural products CO[C@H]1C[C@H](CC[C@@H]1O)C=C(C)[C@H]2OC(=O)[C@H]3CCCCN3C(=O)C(=O)[C@@]4(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]4C)OC)[C@@H](C[C@H](C)CC(=C[C@@H](CC=C)C(=O)C[C@H](O)[C@H]2C)C)OC QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000003325 tomography Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000023750 transforming growth factor beta production Effects 0.000 description 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
Description
1. Предпосылки создания изобретения
Интерстициальные заболевания легких (ILD) включают большую и разнообразную группу из более чем 200 заболеваний легких и респираторных состояний, которые характеризуются воспалением и фиброзом интерстициальной ткани, ткани и пространства между междуальвеолярными мешочками легкого (см., например, du Bois, Nat. Rev. Drug Discov. 2010, 9, 129-140). ILD затрагивают альвеолярный эпителий, эпителий легочных капилляров, базальную мембрану, периваскулярную и перилимфатическую ткани. ILD может развиваться, когда поражение легких запускает атипичный заживляющий ответ.
Обычно, организм генерирует только необходимое количество ткани для репарации повреждения. Но при ILD, репарационный процесс происходит неправильно и ткань вокруг альвеолярных мешочков (альвеол) становится рубцовой и утолщается. Это значительно усложняет кислороду прохождение в кровоток.
Пролонгированное ILD может приводить к легочному фиброзу, но это не всегда так.
Следовательно, ILD также включает так называемые прогрессирующие фиброзирующие интерстициальные заболевания легких (PF-ILD).
При прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваниях легких (PF-ILD), ответ на повреждение легких при фиброзирующих ILD включает развитие фиброза, который становится прогрессирующим, самоподдерживающим и независимым от исходной клинической ассоциации или пускового механизма. Постулируется, что на этой стадии необходима нацеленная антифиброзная терапия для замедления прогрессирования заболевания.
На основании сходности в обоих поведениях, как в биологическом, так и клиническом, то есть самоподдерживающийся фиброз и прогрессирующее снижение функции легких и ранней смертности, считается оправданным группировать пациентов с PF-ILD вместе, независимо от исходного диагноза ILD.
Количество пациентов с различными фиброзирующими ILD, например, идиопатической неспецифической интерстициальной пневмонией (iNSIP) или хроническим гиперчувствительным пневмонитом (CHP), сходно с количеством или ниже количества пациентов с IPF; количество пациентов с прогрессирующим фенотипом в пределах каждой группы, при этом все еще оставаясь достоверным, еще ниже. Таким образом, группирование пациентов с PF-ILD вместе рассматривается только как облегченный путь предоставления эффективных терапий для всех пациентов с прогрессирующим фиброзирующим интерстициальным заболеванием легких.
Пациент страдает от PF-ILD, в том случае, если лечащий врач диагностирует для этого пациента интерстициальное заболевание легких (ILD) и что дополнительно по меньшей мере один из следующих критериев для прогрессирующего фиброзирующего интерстициального заболевания легких выполняется в течение 24 месяцев после первого визита к лечащему врачу, несмотря на лечение с применением неутвержденных лекарственных средств, применяемых в клинической практике для лечения ILD, как оценено лечащим врачом (неутвержденные лекарственные средства, применяемые в клинической практике для лечения ILD, включают, но не ограничиваясь только ими, кортикостероиды, азатиоприн, микофенолата мофетил (MMF), n-ацетилцистеин (NAC), ритуксимаб, циклофосфамид, циклоспорин, такролимус):
Клинически достоверное снижение форсированной жизненной ёмкости (FVC) %, прогнозируемое на основании относительного снижения >10%
Граничное снижение FVC %, прогнозируемое на основании относительного снижения >5 до <10% в комбинации с ухудшением респираторных симптомов
Граничное снижение FVC %, прогнозируемое на основании относительного снижения >5 до <10% в комбинации с увеличением участков фиброзных изменений при томографии грудной клетки.
Ухудшение респираторных симптомов, а также увеличение участков фиброзных изменений при томографии грудной клетки. Тем самым должны быть исключены изменения, обусловленные сопутствующими заболеваниями, например, инфекции, сердечная недостаточность.
Фиброзирующее заболевание легких на компьютерной томографии с высоким разрешением (HRCT), определяемое как ретикулярная аномалия с тракционным бронхоэктазом с или без образования пустот, с распространенностью заболевания >10%, осуществляемое в течение 12 месяцев после первого визита к лечащему врачу.
Для пациентов на фоне заболевания соединительной ткани (CTD): стабильное CTD, как определяется по отсутствию инициации новой терапии или отмены терапии в связи с CTD в течение 6 недель до первого визита к лечащему врачу.
Диффузионная способность легких для монооксида углерода (DLCO), скорректированная на гемоглобин (Hb) при первом визите к лечащему врачу > 30% и <80% прогнозируется как нормальная при втором визите к лечащему врачу.
FVC >45% прогнозируется при втором визите к лечащему врачу.
Примерами PF-ILD являются идиопатический фиброз лёгких (IPF), идиопатическая неспецифическая интерстициальная пневмония (iNSIP), гиперчувствительный пневмонит (HP), неклассифицируемые идиопатические интерстициальные пневмонии, ревматоидный артрит ILD (RA-ILD), Синдром Шегрена ILD, системная красная волчанка ILD (SLE-ILD), полимиозит и дерматомиозит ILD (PM/DM-ILD), сме- 1 045054 шанное заболевание соединительной ткани ILD (MCTD-ILD), системный склероз ILD (SSc-ILD), другие заболевания соединительной ткани ILD (CTD-ILD), саркоидоз, асбестоз, силикоз.
Наиболее выраженными PF-ILD являются идиопатический фиброз лёгких (IPF) и системный склероз интерстициальная болезнь лёгких (SSc-ILD). Идиопатический фиброз лёгких (IPF) представляет собой PF-ILD, для которого не может быть идентифицировано объективной причины (которая является определением для идиопатический) и который связан с типическими данными как радиографически (базальный и плевральный расположенный фиброз с образованием пустот), так и патологически (временно и пространственно гетерогенный фиброз, гистопатологическое образование пустот и фибробластных очагов).
Идиопатический фиброз лёгких (IPF) представляет собой хроническое фиброзное необратимое и в конечном итоге летальное заболевание легких, которое характеризуется прогрессирующим фиброзом в интерстициальной ткани в легких, что приводит к снижению объёма лёгких и прогрессирующей легочной недостаточности. IPF также характеризуется специфической гистопатологической картиной, известной как обычная интерстициальная пневмония (UIP) (Raghu и др., Am. J. Respir. Crit. Care Med. 183: 788824.). Легочные функции у пациентов с фиброзом легких, вызываемые либо IPF или любым другим PFILD, определяются как форсированная жизненная ёмкость (FVC).
Термин IPF обозначает рубцевание легочной ткани и вызывает ухудшение диспноэ (нехватку воздуха). IPF обычно связан с плохим прогнозом со средней продолжительностью жизни 2-3 лет после постановки диагноза. Полагают, что IPF является результатом аберрантного процесса заживления ран, включающего /вовлекающего аномальное и чрезмерное отложение коллагена (фиброз) в интерстициальной ткани легких с минимальным ассоциированным воспалением (Harari S, Caminati A (2010). IPF: new insight on pathogenesis and treatment. Allergy. 65 (5): 537-553).
Фибробласты осуществляют центральную роль в патогенезе фиброзных процессов, которые являются общими для ILD, PF-ILD и IPF, и несколько факторов оказывают влияние на их пролиферацию и синтез их внеклеточного матрикса (ECM). При ILD, эти мезенхимальные клетки имеют повышенную активность по отношению к их пролиферации, миграции, синтезу внеклеточного матрикса (ECM) и ответу на фиброгенные цитокины. Повышенное отложение ECM из активированных фибробластов (называемых миофибробласты) способствует усилению жесткости легочной ткани и разрушению областей альвеолярного обмена кислорода, что приводит к прогрессирующему диспноэ и в конечном итоге летальному исходу.
На основании сходства в обеих этиологических патофизиологиях и клиническом течении PF-ILD и IPF, предполагается, что терапевтически активные агенты, которые нацелены на фундаментальные процессы при прогрессирующем фиброзе легких при IPF, будут проявлять сопоставимые терапевтические эффекты при PF-ILD.
В 2014 году, Управление по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными препаратами США (FDA) разрешило первые лекарственные средства для лечения IPF В США: нинтеданиб (OFEV) производства Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. и пирфенидон (ESBRIET) производства InterMune Inc. Пирфенидон уже получил разрешение для лечения IPF в Европе, Японии и нескольких других странах в этом время и нинтеданиб получил разрешения для лечения IPF в Европе в январе 2015.
Следовательно, стандартными лечениями IPF в настоящее время являются либо лечение с применением пирфенидона (US 3,974,281 B) или лечение с применением нинтеданиба (US 6762180 B; P05-1275) (https://consultqd.clevelandclinic.org/2015/09/pirfenidone-and-nintedanib-novel-agents-in-the-treatment-ofidiopathic-pulmonary-fibrosis/).
Тем не менее, у пациентов с IPF, имеющих легкое или умеренное нарушение FVC (>50 % предсказанного), оба в настоящее время разрешенные лекарственные средства пирфенидон и нинтеданиб, могут только уменьшать снижение FVC, согласующееся с замедлением прогрессирования заболевания, но оба неспособны остановить или даже обратить или вылечить симптомы IPF (Tzouvelekis и др., Ther. Clin. Risk Management 2015, 11, 359-370).
Несмотря на оба варианта лечения, либо с применением пирфенидона или нинтеданиба, проявляют благоприятные эффекты на замедление прогрессирования IPF заболевания.
Наиболее значимыми побочными эффектами, связанными с обоими препаратами, нинтеданибом и пирфенидоном, являются побочные явления со стороны желудочно-кишечного тракта, в особенности диарея, тошнота, рвота, боли в области живота, снижение аппетита и снижение веса тела. В случае, если развиваются побочные явления со стороны желудочно-кишечного тракта, то они обычно устраняются либо путем прерывания лечения, уменьшения дозы или симптоматического лечения побочных явлений со стороны желудочно-кишечного тракта (см. Mazzei и др., Ther. Adv. Respir. Dis. 2015, том 9 [3], сс. 121129).
Благодаря этим аккумулятивные побочные явления со стороны желудочно-кишечного тракта пирфенидона с одной стороны и нинтеданиба с другой стороны, комбинированное лечение для IPF путем комбинирования пирфенидона и нинтеданиба не часто используется. В исследованиях было показано, что комбинированное лечение с применением пирфенидона и нинтеданиба приводит к увеличенным побочным явлениям со стороны желудочно-кишечного тракта, в особенности к диарее, тошноте, рвоте и
- 2 045054 боли в эпигастральной области (Vancheri и др., Nintedanib with Add-on Pirfenidone in Idiopathic Pulmonary
Fibrosis: Results of the INJOURNEY Trial. Am J Respir Crit Care Med. 2017, Epub в печати).
В соответствии с вышеизложенным, поскольку эти оба активных компонента в настоящее время разрешены для лечения IPF, пирфенидон и нинтеданиб,- при введении отдельно - не способны останавливать или излечивать IPF, но вместо этого только могут замедлять прогрессирование заболевания IPF до определенной степени в процентах (Tzouvelekis и др., Ther. Clin. Risk Management 2015, 11, 359-370), и поскольку дополнительно оба компонента нинтеданиб и пирфенидон проявляют значительные побочные явления со стороны желудочно-кишечного тракта, которые накапливаются при комбинировании обоих соединений, существует настоятельная медицинская потребность в улучшенных лекарственных средства для лечения IPF/лечения PF-ILD, в особенности для улучшенных комбинированных лечений/ комбинированных лекарственных средств, содержащих в качестве первого компонента комбинации либо один из разрешенных лекарственных средств при IPF нинтеданиб или пирфенидон (с доказанной эффективностью для лечения IPF) и второй другой подходящий компонент комбинации, который является активным для лечения IPF/PF-ILD с приемлемой переносимостью (но который отличается от пирфенидона или нинтеданиба). Таким образом, это было бы чрезвычайно благоприятно обеспечивать новую комбинацию лекарственного средства с хорошей/улучшенной терапевтической эффективностью и с приемлемой переносимостью, в особенности по отношению к побочным явлениям со стороны желудочнокишечного тракта.
Следовательно, задача настоящего изобретения состоит в обеспечении нового комбинированного лечения/комбинированного лекарственного средства для лечения PF-ILD/лечения IPF, включающего в качестве первого компонента комбинации один из разрешенных в настоящее время лекарственных средств для IPF, либо нинтеданиб или пирфенидон, и второй компонент комбинации (который отличается от нинтеданиба или пирфенидона), таким образом это комбинированное лечение / комбинированное лекарственное средство улучшено по сравнению с лечением PF-ILD/IPF с применением только первого компонента комбинации отдельно.
Эта задача решается путем обеспечения комбинированного лечения/комбинированного лекарственного средства для лечения PF-ILD / лечения IPF, которое включает в качестве первого компонента комбинации терапевтически эффективное количество нинтеданиба или его фармацевтически приемлемой соли и в качестве второго компонента комбинации терапевтически эффективное количество PDE4Bингибитора формулы III где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр или его фармацевтически приемлемую соль.
Это вышеуказанное новое комбинированное лечение / комбинированное лекарственное средство для лечения PF-ILD / лечения IPF, содержащее в качестве первого компонента комбинации нинтеданиб и в качестве второго компонента комбинации PDE4B-ингибитор формулы III, демонстрирует улучшенную терапевтическую эффективность при лечении PF-ILD/IPF по сравнению с лечением с применением нинтеданиба отдельно или по сравнению с лечением с применением вышеуказанного PDE4B-ингибитора отдельно. Эксперименты A) и B), как описано в разделе 6 (Экспериментальные данные) экспериментально продемонстрировали, что комбинация, содержащая PDE4B-ингибитор формулы III и нинтеданиб, проявляет:
a) отчетливый ингибирующий эффект на переход фибробласта в миофибробласт (что соответствует второму уровню патогенеза фиброзных процессов, характерных для PF-ILD, в то время как нинтеданиб (разрешенное в настоящее время лекарственное средство для лечения IPF) не демонстрирует соответствующего ингибирующего эффекта на переход фибробласта в миофибробласт (следовательно, PDE4B-ингибитор формулы III проявляет взаимодополняющий терапевтический эффект к нинтеданибу, который указывает на то, что комбинация PDE4B-ингибитора формулы III и нинтеданиба будет иметь значительное преимущество по сравнению с лечением с применением нинтеданиба отдельно) и
б) отчетливый сверхаддитивный синергетический ингибирующий эффект на пролиферацию фибробластов (что соответствует третьему уровню патогенеза фиброзных процессов, характерных для PF-ILD, который тестируемые другие комбинации PDE4-ингибитор/нинтеданиб рофлумиласт/нинтеданиб и апремиласт/нинтеданиб неожиданно не проявляют).
Вышеуказанное комбинированное лечение/комбинированное лекарственное средство для лечения PF-ILD, в особенности для лечения IPF, согласно изобретению, содержащее в качестве первого компонента комбинации нинтеданиб и в качестве второго компонента новой комбинации PDE4B-ингибитор
- 3 045054 формулы III, дополнительно проявляют приемлемую переносимость при лечении PF-ILD.
Приемлемая переносимость обозначает в контексте настоящего изобретения, что переносимость лечения с применением комбинации нинтеданиба с PDE4B-ингибитором формулы III, является лучше, чем переносимость комбинации нинтеданиба и пирфенидона, предпочтительно только незначительно хуже, более предпочтительно, не существенно хуже по сравнению с лечением с применением нинтеданиба отдельно и, таким образом, будет хорошо переноситься пациентом.
Нинтеданиб, соединение формулы A (свободное основание)
о описан в US 6762180 B1 (WO 01/27081), который таким образом включен в качестве ссылки.
В US 7119093B (WO 2004/013099) описана моноэтансульфонатная соль этого соединения формулы A; другие солевые формы представлены в US 2009/0318471 A (WO 2007/141283).
Оба документа, US 7119093B и US 2009/0318471 A таким образом включены в качестве ссылки.
Нинтеданиб является чрезвычайно эффективным, перорально биодоступным ингибитором рецепторов фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR), рецепторов фактора роста тромбоцитов (PDGFR) и рецепторов фактора роста фибробластов (FGFR). Он конкурентно связывается с аденозинтрифосфат (АТФ) связывающим карманом этих рецепторов и блокирует внутриклеточную передачу сигналов.
Дополнительно нинтеданиб ингибирует Fms-подобную тирозин-протеинкиназу 3 (Flt 3), лимфоцитспецифическую тирозин-протеинкиназу (Lck), тирозин-протеинкиназу lyn (Lyn) и прото-онкогенную тирозин-протеинкиназу src (Src) (Hilberg и др., Cancer Res. 2008, 68, 4774-4782). Недавно было обнаружено, что нинтеданиб также ингибирует рецептор колониестимулирующего фактора 1 (CSF1R) (Tandon и др., Am J Respir Crit Care Med 2017; 195:A2397).
Показано, что нинтеданиб также может ингибировать или ослаблять клеточную пролиферацию, способствующую ангиогенезу (Hilberg и др., Cancer Res. 2008, 68, 4774-4782), а также пролиферацию фибробластов в легких, миграцию (Hostettler и др., Respir Res. 2014, 15, 157) и трансформацию в миофибробласты (Wollin и др., Eur. Respir J 2015, 45, 1434-1445.), способствующих фиброзу легких (например, IPF), SSc-ILD и RA-ILD. Кроме того, были обнаружены его противофиброзная и противовоспалительная активность на моделях фиброза легких (Wollin и др., Eur. Respir J 2015, 45, 1434-1445; Wollin и др., J. Pharmacol. Exp. Ther. 2014, 394, 209-220). Дополнительно нинтеданиб продемонстрировал способность ингибировать миграцию фибробластов, пролиферацию и трансформацию в миофибробласты на SSc клеточных моделях, ослаблять фиброз кожи и легких на SSc и SSc-ILD животных моделях (Huang и др., Ann. Rheum. Dis. 2016, 74, 883-890, Huang и др., Ann Rheum Dis. 2017, EPub в печати), уменьшать фиброз легких на RA-ILD животных моделях (Redente и др., Am J Respir Crit Care Med 2016, 193, A4170) и ослаблять фиброз легких на мишиной модели хронического аллергического поражения легких, имеющего сходство с аспектами HP (Lee и др. Exp Lung Res. 2017 EPub в печати).
Фармацевтические дозированные формы, содержащие нинтеданиб, описаны в US 9907756В (WO 2009/147212) и в US 2011/0190318 (WO 2009/147220) и таким образом включены в настоящую заявку путем ссылки. Также, безводный порошковый препарат для ингаляции был описан (Vartiainen и др., Стендовый доклад на международном семинаре по фиброзу легких и дыхательный путей в Дублине, сентябрь 2016 г.).
Применение нинтеданиба для лечения различных заболеваний, и среди них также применение для лечения фиброзных заболеваний, описано в WO 2006/067165.
Нинтеданиб в качестве единственного компонента лечения для идиопатического фиброза лёгких обычно дозируют два раза в сутки в дозе 150 мг (два раза в сутки в дозе 100 мг для пациентов с печёночной недостаточностью лёгкой степени).
Кроме того, в WO 2006/067165 описано, что нинтеданиб можно комбинировать с различными компонентами комбинаций. Среди различных других компонентов комбинаций в WO 2006/067165 также предлагается комбинировать нинтеданиб с PDE4-ингибиторами, такими как, например, рофлумиласт.
Тем не менее, в отличие от нинтеданиба (который был разрешен для лечения IPF тогда же), PDE4ингибитор рофлумиласт (изначально описанный в US 5712298 B) никогда не разрабатывался, ни утверждался для лечения пролиферативных фиброзных нарушений, таких как PF-ILD или IPF в особенности. Вместо этого, рофлумиласт тогда же был разрешен для лечения хронического обструктивного заболевания легких (COPD), которое является исключительно респираторным заболеванием, не вовлекающим любые фиброзные симптомы. Также другие PDE4-ингибиторы, такие как, например, апремиласт (изначально описанный в US 6020358B), которые появились на рынке в последующие годы, никогда не рассматривались как разработанные или подлежащие утверждению для лечения пролиферативных фиброзных заболеваний, таких как PF-ILD или, в особенности, для IPF, но вместо этого апремиласт был разре- 4 045054 шен для лечения только псориаза (заболевание кожи).
Дополнительно к рофлумиласту и апремиласту были опубликованы многие другие патентные заявки, в которых рассматривались другие PDE4/PDE4B-ингибиторы с улучшенными свойствами:
Птеридины в качестве PDE4-ингибиторов в WO 2006/056607, WO 2006/058869, WO 2006/058868 и
WO 2006/058867.
Пиперазино-дигидротиенопиримидины в качестве PDE4-ингибиторов в WO 2006/111549, WO 2007/118793 и WO 2009/050242.
Пиперидинодигидротиенопиримидины в качестве PDE4B-ингибиторов в WO 2009/050248 и в WO 2013/026797.
PDE4B-ингибиторы формулы III
III были описаны в US 8609670B (WO 2013/026797), который таким образом включен в качестве ссылки.
2. Общие термины и определения
Термины, которые специфически не определены в настоящей заявке, должны пониматься в значениях, в которых их понимает квалифицированный специалист в данной области техники в свете данного раскрытия и контекста. Однако, как используется в заявке, если специально не указано иначе, следующие термины будут иметь указанные значения и им присваиваются следующие обозначения.
Выражение фармацевтически приемлемый применяется в настоящей заявке по отношению к тем соединениям, материалам, композициям, и/или дозированным формам, которые с медицинской точки зрения, являются подходящими для применения для контактирования с тканями человека животных без проявления чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической ответной реакции или другой проблемы или осложнения, и соизмеримы с рациональным соотношением польза/риск.
Как используется в настоящей заявке, фармацевтически приемлемая соль относится к производным описанных соединений, где исходное соединение модифицируют путем получения его кислотных или основных солей. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают, но не ограничиваясь только ими, соли неорганических или органических кислот щелочных остатков, таких как амины; щелочные или органические соли кислотных остатков, таких как карбоновые кислоты; и подобные.
Термины лечение и лечить, как используется в настоящей заявке, охватывает как терапевтическое, то есть лечебное и/или паллиативное, и превентивное, то есть профилактическое, лечение.
Терапевтическое лечение относится к лечению пациентов, у которых уже развилось одно или несколько из указанных состояний, которые проявляются в острой или хронической форме. Терапевтическое лечение может быть симптоматическим лечением для ослабления симптомов особого показания или этиологическим лечением для обратного развития или частичного обратного развития состояний показания или для остановки или замедления прогрессирования заболевания.
Профилактическое лечение (предотвращение) относится к лечению пациентов, имеющих риск развития одного или нескольких указанных состояний, перед клиническим началом заболевания для уменьшения указанного риска.
Термины лечение и лечить включают введение одного или нескольких активных соединений для предотвращения или задержки начала симптомов или осложнений и для предотвращения или задержки развития заболевания, состояния или нарушения и/или для устранения или контролирования заболевания, состояния или нарушения, а также для облегчения симптомов или осложнений, связанных с заболеванием, состоянием или нарушением.
Термин терапевтически эффективное количество обозначает количество соединения согласно настоящему изобретению, которое (I) лечит или предотвращает конкретное заболевание или состояние, (II) ослабляет, облегчает или устраняет один или несколько симптомов конкретного заболевания или состояния, или (III) предотвращает или замедляет начало одного или нескольких симптомов конкретного заболевания или состояния, описанных в настоящем изобретении.
3. Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к способу лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD)), который включает введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества PDE4B-ингибитора формулы III
- 5 045054
где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр или его фармацевтически приемлемой соли и терапевтически эффективного количества ингибитора тирозинкиназы выбирают из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль.
В предпочтительном варианте осуществления вышеуказанного способа, указанный PDE4Bингибитор формулы III вводят в дозе, которая будет приводить к расчетной свободной фракции соединения формулы III у человека в интервале от 1 нмоль/л до 2000 нмоль/л, более предпочтительно в интервале от 1 нмоль/л до 1000 нмоль/л.
В предпочтительном варианте осуществления вышеуказанного способа, прогрессирующее фиброзирующее интерстициальное заболевание легких представляет собой идиопатический фиброз лёгких (IPF) или системный склероз ILD (SSc-ILD).
В другом предпочтительном варианте осуществления вышеуказанного способа, вышеуказанный PDE4B-ингибитор формулы III вводят одновременно, конкурентно, последовательно, один за одним, альтернативно или раздельно с ингибитором тирозинкиназы, выбранным из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль.
В дальнейшем предпочтительном варианте осуществления вышеуказанного способа, указанный ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната.
В другом особо предпочтительном варианте осуществления вышеуказанного способа, указанный ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната и его вводят в дозе, которая будет приводить к расчетной свободной фракции нинтеданиба моноэтансульфоната у человека в интервале от 1 нмоль/л до 300 нмоль/л, более предпочтительно в интервале от 10 нмоль/л до 100 нмоль/л.
В другом особенно предпочтительном варианте осуществления вышеуказанного способа, указанный PDE4B-ингибитор формулы III вводят в дозе, которая будет приводить к расчетной свободной фракции соединения формулы III у человека в интервале от 1 нмоль/л до 2000 нмоль/л, более предпочтительно в интервале от 1 нмоль/л до 1000 нмоль/л.
Кроме того, настоящее изобретение относится к PDE4B-ингибитору формулы III
где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр или его фармацевтически приемлемой соли, для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где указанный способ включает введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества указанного PDE4B-ингибитора формулы III в комбинации с терапевтически эффективным количеством ингибитора тирозинкиназы, выбранным из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль.
В предпочтительном вышеуказанном варианте осуществления прогрессирующее фиброзирующее интерстициальное заболевание легких (PF-ILD) представляет собой либо идиопатический фиброз лёгких (IPF) или системный склероз ILD (SSC-ILD), более предпочтительно IPF.
В другом предпочтительном варианте осуществления вышеуказанного PDE4B-ингибитор формулы III вводят одновременно, конкурентно, последовательно, один за одним, альтернативно или раздельно с ингибитором тирозинкиназы, выбранным из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль.
В дальнейшем предпочтительном варианте осуществления вышеуказанный ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната.
В другом особо предпочтительном варианте осуществления, вышеуказанный ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната и его вводят в дозе, которая будет приводить к расчетной свободной фракции нинтеданиба моноэтансульфоната у человека в интервале от 1 нмоль/л до 300 нмоль/л, более предпочтительно в интервале от 10 нмоль/л до 100 нмоль/л.
В другом особенно предпочтительном варианте осуществления, вышеуказанный PDE4B-ингибитор
- 6 045054 формулы III вводят в дозе, которая будет приводить к расчетной свободной фракции соединения формулы III в плазме крови человека в интервале от 1 нмоль/л до 2000 нмоль/л, более предпочтительно в интервале от 1 нмоль/л до 1000 нмоль/л.
Кроме того, настоящее изобретение относится к ингибитору тирозинкиназы, выбранному из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемые соли, для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где указанный способ включает введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества указанного ингибитора тирозинкиназы в комбинации с терапевтически эффективным количеством PDE4B-ингибитора формулы III
где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр или его фармацевтически приемлемую соль.
В предпочтительном вышеуказанном варианте осуществления одно или несколько прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD) будут представлять собой либо идиопатический фиброз лёгких (IPF) или системный склероз ILD (SSC-ILD, более предпочтительно IPF.
В другом предпочтительном варианте осуществления вышеуказанный ингибитор тирозинкиназы вводят одновременно, конкурентно, последовательно, один за одним, альтернативно или раздельно с PDE4B-ингибитором формулы III.
В дальнейшем предпочтительном варианте осуществления вышеуказанный ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната.
В другом особо предпочтительном варианте осуществления, вышеуказанный способ ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната и его вводят в дозе, которая будет приводить к расчетной свободной фракции нинтеданиба моноэтансульфоната у человека в интервале от 1 нмоль/л до 300 нмоль/л, более предпочтительно в интервале от 10 нмоль/л до 100 нмоль/л.
Настоящее изобретение относится к применению PDE4B-ингибитора формулы III
где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр или его фармацевтически приемлемой соли для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где терапевтически эффективное количество указанного PDE4B-ингибитора формулы III или его фармацевтически приемлемой соли вводят пациенту, который в этом нуждается, в комбинации с терапевтически эффективным количеством ингибитора тирозинкиназы, выбранным из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль.
В предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к вышеуказанному применению PDE4B-ингибитора формулы III для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где указанное прогрессирующее фиброзирующее интерстициальное заболевание легких представляет собой либо идиопатический фиброз лёгких (IPF) или системный склероз ILD (SSCILD), более предпочтительно IPF.
В дальнейшем предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к вышеуказанному применению PDE4B-ингибитора формулы III для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где указанный PDE4B-ингибитор формулы III вводят одновременно, конкурентно, последовательно, один за одним, альтернативно или раздельно с ингибитором тирозинкиназы, выбранным из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль.
В другом предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к вышеуказанному применению PDE4B-ингибитора формулы III для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где указанный ингибитор тирозинкиназы представляет собой нин- 7 045054 теданиб в форме его моноэтансульфоната. В другом особо предпочтительном варианте осуществления вышеуказанного применения, указанный ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната и его вводят в дозе, которая будет приводить к расчетной свободной фракции нинтеданиба моноэтансульфоната у человека в интервале от 1 нмоль/л до 300 нмоль/л, более предпочтительно в интервале от 10 нмоль/л до 100 нмоль/л.
В более предпочтительном варианте осуществления, изобретение относится к вышеуказанному применению PDE4B-ингибитора формулы III для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD).
В особенно предпочтительном варианте осуществления, изобретение относится к вышеуказанному применению PDE4B-ингибитора формулы III для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD).
В другом особенно предпочтительном варианте осуществления, изобретение относится к вышеуказанному применению для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где PDE4B-ингибитор формулы III вводят в дозе, которая будет приводить к расчетной свободной фракции соединения формулы III в плазме крови человека в интервале от 1 нмоль/л до 2000 нмоль/л, более предпочтительно в интервале от 1 нмоль/л до 1000 нмоль/л.
Настоящее изобретение относится к применению ингибитора тирозинкиназы, выбранного из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль, для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где терапевтически эффективное количество указанного ингибитора тирозинкиназы вводят пациенту, который в этом нуждается, в комбинации с терапевтически эффективным количеством PDE4B-ингибитора формулы III
III, где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр или его фармацевтически приемлемую соль.
В предпочтительном варианте осуществления, изобретение относится к вышеуказанному применению ингибитора тирозинкиназы, выбранного из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль, для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где указанное прогрессирующее фиброзирующее интерстициальное заболевание легких представляет собой либо идиопатический фиброз лёгких (IPF) или системный склероз ILD (SSC-ILD), более предпочтительно IPF.
В дальнейшем предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к вышеуказанному применению ингибитора тирозинкиназы, выбранного из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль, для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где указанный ингибитор тирозинкиназы вводят одновременно, конкурентно, последовательно, один за одним, альтернативно или раздельно с PDE4B ингибитором формулы III или его фармацевтически приемлемой солью.
В другом предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к вышеуказанному применению ингибитора тирозинкиназы, выбранного из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль, для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где указанный ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната. В другом особо предпочтительном варианте осуществления вышеуказанного применения, указанный ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната и его вводят в дозе, которая будет приводить к расчетной свободной фракции нинтеданиба моноэтансульфоната у человека в интервале от 1 нмоль/л до 300 нмоль/л, более предпочтительно в интервале от 10 нмоль/л до 100 нмоль/л.
В более предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к вышеуказанному применению ингибитора тирозинкиназы, выбранного из группы, включающей нинтеданиб и фармацевтически приемлемую соль, для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний лег- 8 045054 ких (PF-ILD).
В особенно предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к применению ингибитора тирозинкиназы, выбранного из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль, для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PFILD).
В другом особенно предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к вышеуказанному применению ингибитора тирозинкиназы для приготовления фармацевтической композиции для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где PDE4B-ингибитор формулы III вводят в дозе, которая будет приводить к расчетной свободной фракции соединения формулы III в плазме крови человека в интервале от 1 нмоль/л до 2000 нмоль/л, более предпочтительно в интервале от 1 нмоль/л до 1000 нмоль/л.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей
PDE4B-ингибитор формулы III где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр или его фармацевтически приемлемую соль;
ингибитор тирозинкиназы, выбранный из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль, и необязательно, один или несколько фармацевтически приемлемых носителей и/или наполнителей.
В предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к вышеуказанной фармацевтической композиции, где указанный ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната. В другом особо предпочтительном варианте осуществления вышеуказанной фармацевтической композиции, указанный ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната и его вводят в дозе, которая будет приводить к расчетной свободной фракции нинтеданиба моноэтансульфоната у человека в интервале от 1 нмоль/л до 300 нмоль/л, более предпочтительно в интервале от 10 нмоль/л до 100 нмоль/л.
В другом особенно предпочтительном варианте осуществления, настоящее изобретение относится к вышеуказанной фармацевтической композиции, где указанный PDE4-В-ингибитор формулы III в дозе, которая приводит к расчетной свободной фракции соединения формулы III в плазме крови человека в интервале от 1 нмоль/л до 2000 нмоль/л, предпочтительно в интервале от 1 нмоль/л до 1000 нмоль/л.
В дальнейшем варианте осуществления настоящее изобретение относится к набору, который содержит первую фармацевтическую композицию или дозированную форму, содержащую PDE4B-ингибитор формулы III где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр или его фармацевтически приемлемую соль, необязательно, один или несколько фармацевтически приемлемых носителей и/или наполнителей и вторую фармацевтическую композицию или дозированную форму, содержащую ингибитор тирозинкиназы, выбранный из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль, и необязательно, один или несколько фармацевтически приемлемых носителей и/или наполнителей.
В предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к вышеуказанному набору, который предназначен для применения в способе лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD).
В более предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к вышеуказанному набору, который предназначен для применения в способе лечения либо идиопатического фиброза лёгких (IPF) или системного склероза ILD (SSc-ILD).
В другом предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к вышеуказанному
- 9 045054 набору, который предназначен для применения в способе лечения одного или нескольких PF-ILD, где указанную первую фармацевтическую композицию или дозированную форму вводят одновременно, конкурентно, последовательно, одну за одной, альтернативно или раздельно со второй фармацевтической композицией или дозированной формой.
В дальнейшем предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к вышеуказанному набору, где указанный ингибитор тирозинкиназы второй фармацевтической композиции или дозированной формы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната.
В другом особо предпочтительном варианте осуществления вышеуказанного набора указанный ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната и его вводят в дозе, которая будет приводить к расчетной свободной фракции нинтеданиба моноэтансульфоната у человека в интервале от 1 нмоль/л до 300 нмоль/л, более предпочтительно в интервале от 10 нмоль/л до 100 нмоль/л.
В другом особенно предпочтительном варианте осуществления, настоящее изобретение относится к вышеуказанному набору, где указанный PDE4-B-ингибитор формулы III в дозе, которая приводит к расчетной свободной фракции соединения формулы III в плазме крови человека в интервале от 1 нмоль/л до 2000 нмоль/л, предпочтительно 1 нмоль/л и 1000 нмоль/л.
В особенно предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к вышеуказанным наборам, которые дополнительно содержат листок-вкладыш, содержащий напечатанные инструкции для одновременного, конкурентного, последовательного, одна за одной, альтернативного или раздельного применения первой и второй фармацевтической композиции или дозированных форм для лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD).
В другом особенно предпочтительном варианте осуществления, настоящее изобретение относится к любому из вышеуказанных наборов, который дополнительно содержит листок-вкладыш, содержащий напечатанные инструкции для одновременного, конкурентного, последовательного, одна за одной, альтернативного или раздельного применения первой и второй фармацевтической композиции или дозированных форм для лечения идиопатического фиброза лёгких (IPF).
В другом особенно предпочтительном варианте осуществления, настоящее изобретение относится к любому из вышеуказанных наборов, который дополнительно содержит листок-вкладыш, содержащий напечатанные инструкции для одновременного, конкурентного, последовательного, одна за одной, альтернативного или раздельного применения первой и второй фармацевтической композиции или дозированных форм для лечения системный склероз ILD (SSc-ILD).
4. Краткое описание фигур:
Фиг. 1: Эксперимент A1)
Ингибирование в зависимости от концентрации стимулируемой TGF-β экспрессии α-SMA белка фибробластами легких человека от пациентов с IPF с помощью соединения формулы III (закрашенные кружки, черная линия; IC50=210 нмоль/л) или комбинации соединения формулы III с 100 нмоль/л нинтеданиба (незаштрихованные кружки, серая линия; IC50=110 нмоль/л).
□ представлено измеренное ингибирование экспрессии α-SMA белка фибробластами в присутствии 100 нМ нинтеданиба отдельно, который не продемонстрировал ингибирующего эффекта.
Данные представлены в виде ± СПС для n=5 доноров. Данные нормированы к нелеченным (нестимулированным) контрольным клеткам (=100% ингибирование) и к TGF-β леченным клеткам (=0% ингибирование).
Фиг. 2: Эксперимент A2)
Ингибирование в зависимости от концентрации TGF-в-стимулируемой экспрессии α-SMA белка фибробластами легких человека от пациентов с IPF с помощью апремиласта (закрашенные кружки, черная линия; IC50=3 мкмоль/л) или комбинации апремиласта с 100 нмоль/л нинтеданиба (незаштрихованные кружки, серая линия; IC50=2 мкмоль/л).
□ представлено измеренное ингибирование экспрессии α-SMA белка фибробластами в присутствии 100 нМ нинтеданиба отдельно, который не продемонстрировал ингибирующего эффекта.
Данные представлены в виде ± СПС для n=5 доноров. Данные нормированы к нелеченным (нестимулированным) контрольным клеткам (=100% ингибирование) и к TGF-β леченным клеткам (=0% ингибирование).
Фиг. 3: Эксперимент A3)
Ингибирование в зависимости от концентрации стимулируемой TGF-β экспрессии α-SMA белка фибробластами легких человека от пациентов с IPF с помощью рофлумиласт N-оксида (закрашенные кружки, черная линия; IC50=14 нмоль/л) или комбинации рофлумиласт N-оксида с 100 нмоль/л нинтеданиба (незаштрихованные кружки, серая линия; IC50=8,5 нмоль/л).
□ представлено измеренное ингибирование экспрессии α-SMA белка фибробластами в присутствии 100 нМ нинтеданиба отдельно, который не продемонстрировал ингибирующего эффекта.
Данные представлены в виде ± СПС для n=5 доноров. Данные нормированы к нелеченным (нести- 10 045054 мулированным) контрольным клеткам (=100% ингибирование) и к TGF-β леченным клеткам (=0% ингибирование).
Фиг. 4: Эксперимент B1)
Ингибирование в зависимости от концентрации FGF плюс ГЕ-1в-стимулированной пролиферация фибробластов легких человека от пациентов с IPF с помощью соединения формулы III (закрашенные кружки, черная жирная линия; IC50=25 5 нмоль/л) или комбинации соединения формулы III с 100 нмоль/л нинтеданиба (незаштрихованные кружки, серая жирная линия; IC50=23 нмоль/л). Рассчитанная аддитивная кривая комбинации обоих лекарственных средств представлена незаштрихованными треугольниками и пунктирной линией.
□ представляет FGF плюс ГЕ-1в-стимулированная пролиферация фибробластов легких человека от пациентов с IPF с помощью 100 нМ нинтеданиба отдельно.
Данные представлены в виде ± СПС для n=5 доноров. Данные нормированы к нелеченным (нестимулированным) контрольным клеткам (=100% ингибирование) и к FGF + IL-1e леченным клеткам (=0% ингибирование).
Фиг. 5: Эксперимент B2)
Ингибирование в зависимости от концентрации FGF плюс ГЕ-1в-стимулированной пролиферация фибробластов легких человека от пациентов с IPF с помощью апремиласта (закрашенные кружки, черная жирная линия; IC50=1,8 мкмоль/л ) или комбинации апремиласта с 100 нмоль/л нинтеданиба (незаштрихованные кружки, серая жирная линия; IC50=1,6 мкмоль/л). Рассчитанная аддитивная кривая комбинации обоих лекарственных средств представлена незаштрихованными треугольниками и пунктирной линией.
□ представляет FGF плюс ГЕ-1в-стимулированная пролиферация фибробластов легких человека от пациентов с IPF с помощью 100 нМ нинтеданиба отдельно.
Данные представлены в виде ± СПС для n=5 доноров. Данные нормированы к нелеченным (нестимулированным) контрольным клеткам (=100% ингибирование) и к FGF + IL-1e леченным клеткам (=0% ингибирование).
Фиг. 6: Эксперимент B3)
Ингибирование в зависимости от концентрации FGF плюс ГЕ-1в-стимулированной пролиферация фибробластов легких человека от пациентов с IPF с помощью рофлумиласт N-оксида (закрашенные кружки, черная жирная линия; IC50=440 пмоль/л) или комбинации рофлумиласт N-оксида с 100 нмоль/л нинтеданиба (незаштрихованные кружки серая жирная линия; IC50=5 3 4 пмоль/л).
Рассчитанная аддитивная кривая комбинации обоих лекарственных средств представлена незаштрихованными треугольниками и пунктирной линией.
□ представляет FGF плюс ГЕ-1в-стимулированную пролиферацию фибробластов легких человека от пациентов с IPF с помощью 100 нМ нинтеданиба отдельно.
Данные представлены в виде ± СПС для n=5 доноров. Данные нормированы к нелеченным (нестимулированным) контрольным клеткам (=100% ингибирование) и к FGF + IL-1e леченным клеткам (=0% ингибирование).
5. Экспериментальные данные
6.1 Патогенез фиброзных процессов, которые характерны для ILD, PF-ILD и IPF
Патогенез фиброзных процессов, которые характерны для ILD, PF-ILD и IPF, в настоящее время не конца изучены.
Основными характеристиками IPF являются изменения эпителиальных и мезенхимальных клеток, а также взаимодействие между этими клетками, в то время как в настоящее время полагают, что воспалительные процессы играют только незначительную роль [Lehtonen и др., Respiratory Research (2016) 17: 14].
Одна из получивших широкое распространение гипотез для объяснения механизмов при патегенезе IPF указывает на то, что повреждение альвеолярного эпителия приводит к чрезмерной ответной реакции заживления ран с чрезмерным высвобождением факторов роста и транскрипции и последующей активацией цитокинов и трансформации фибробластов в фенотип секретирующих миофибробластов, что приводит к чрезмерной продукции белков внеклеточного матрикса (ECM), [King ТЕ, Jr, Pardo A, Selman M., Lancet. 2011;378:1949-1961]. Фибробластные центры, типичная гистологическая характерная особенность IPF, представляет собой специфический агрегат клеток, в особенности фибробластов и миофибробластов, покрытых поврежденным и гиперпластическим эпителием, и ECM, продуцируемые миофибробластами [Kuhn C, McDonald JA.,. Am J Pathol. 1991;138:1257-1265]. Исследования показали, что IPF пациенты с высоким количеством фибробластных очагов имеют сокращенное выживание [Kaarteenaho R., Respir Res. 2013;14(1):43]. Дополнительно, было показано, что степень экспрессии альфа актина гладких мышц (α-SMA), маркера миофибробластов, в легких IPF-пациентов, находится в обратной зависимости от выживания пациентов [Waisberg DR, Parra ER, Barbas-Filho JV, Fernezlian S, Capelozzi VL]. Повышенной экспрессии теломеразы фибробластов предшествует экспрессия миофибробластами альфа актина гладких мышц при идиопатическом фиброзе лёгких [Clinics (Sao Paulo) 2012;67:1039-1046].
Существующие в настоящее время концепции патогенеза фиброзных процессов свидетельствуют о
- 11 045054 том, что после воздействие эндогенных или экзогенных стимулов, эпителий легких инициирует повреждающую ответную реакцию, которая приводит к продукции растворимых факторов, таких как трансформирующий ростовой фактор бета-1 (TGF-e1), фактор роста тромбоцитов (PDGF), фактор роста соединительной ткани (CTGF), и цитокины, включая интерлейкин-4 (IL-4) и интерлейкин-13 (IL-13). Эти вещества способствуют захвату воспалительных клеток и мезенхимальную активацию, которая вызывает распространение находящихся в ткани пост-эмбриональных фибробластов, которые, как полагают, приводят к появлению активированных миофибробластов. Эти клетки являются центральными в процессе заживления ран, но, если они немодулируемые, откладывают чрезмерное количество ECM и разрушают нормальную архитектуру легких. Во время нормального процесса заживления ран, миофибробласты активированы временно и вызывают непосредственно продукцию гранулирующей ткани путем выработки ECM и проявления сил сцепления. После осуществления заживления, гранулирующая ткань рассасывается и миофибробласты подвергаются запрограммированной клеточной гибели для восстановления нормальной архитектуры и функции ткани [Klingberg и др., J Pathol. 2013; 229: 298-309]. Нарушения на любой стадии в этом процессе может вызывать патологию ткани. Если заживляющий ответ является недостаточным, как это наблюдается при синдроме острой дыхательной недостаточности у взрослых, развивается патология, при которой доминируют острые повреждения и, вследствие этого, диффузное альвеолярное повреждение. Однако если доминирует фаза заживления, окружение ткани сдвигается в сторону фиброза и ремоделирования и развивается патология, при которой доминирует нерегулируемое накопление рубцовой ткани. Полагают, что фибробласты и активированные миофибробласты являются центральными в этом процессе [Moore и др., Curr Pathobiol Rep. сентябрь 2013 г.; 1 (3): 199-208].
На последующем уровне, фибробласты и миофибробласты при IPF демонстрируют патологический фенотип, который характеризуется неконтролируемой пролиферацией и выживанием. Эти клетки накапливаются в интерстициальной ткани легких, где они откладывают чрезмерные количества обогащенных коллагеном-I ECM и в конечном итоге организуются в фибробластные центры, описанные выше. Поскольку эти участки распространяются и становятся прилегающими к альвеолярному пространству, то они, вероятно, сначала прорывают, а затем в конечном итоге разрушают альвеолярные базальные мембраны [White и др., J Pathol. 2003; 201: 343-354].
Это распространение в значительной степени приписывается резистентности к запрограммированной клеточной гибели, которая была описана для первичных фибробластов, полученных из легочной ткани IPF [Maher и др., Am J Respir Crit Care Med. 2010; 182: 73-82 и Nho и др., PLoS one 2013; 8]. Для этого наблюдения предложено несколько возможных механизмов, включая аномалии апоптотических путей, аберрантную Wnt передачу сигналов [Chang и др., J Biol Chem. 2010; 285; 8196-8206] и дефектную аутофагию [Patel и др., PLoS One 2012; 7].
Тем не менее, различные хорошо охарактеризованные цитокины, включая TGF-β, либо были обнаружены в поврежденных легких или продуцируются воспалительными клетками, удаленными из легких. Кроме того, на животной модели легочного фиброза, продукция TGF-β увеличена перед синтезом коллагена и он главным образом продуцируется с помощью альвеолярных макрофагов. При прогрессирующем идиопатическим фиброзе лёгких, могут быть обнаружены большие отложения TGF-β с помощью иммуногистохимического окрашивания, главным образом в эпителиальных клетках в областях регенерации и ремоделирования легких. Это свидетельствует о том, что патогенез прогрессирующего фиброза, характерного для заболевания легких, таких как ILD, PF-ILD и IPF, может представлять собой аберрантный репарационный процесс (см. Khali и др., Ciba Found Symp. 1991; 157: 194-207 и Cutroneo и др., J. Cell. Physiol. 211: 585-589, 2007).
На основании этих исходных данных относительно фиброза, является очевидным, что патология фиброзных процессов, лежащих в основе ILD, PF-ILD и в особенности IPF, может быть разделена на три различных уровня патогенеза фиброзных процессов, в соответствии с которыми хронологический порядок в особенности второго и третьего уровня еще не полностью понятен и также может частично рассматриваться параллельно.
На первом уровне фиброзных процессов, после воздействия эндогенных или экзогенных стимулов, эпителий легких обычно инициирует поражающий ответ, который приводит к продукции растворимых факторов, таких как трансформирующий ростовой фактор бета-1 (TGF-β 1), цитокины и профиброзные медиаторы/фиброзные маркеры, такие как, например, проколлаген, фибронектин и MCP-1.
После этого, на втором уровне патогенеза фиброзных процессов, эти профиброзные медиаторы/фиброзные маркеры способствуют мезенхимальной активации, которая вызывает распространение резидентных в тканях пост-эмбриональных фибробластов, которые, как полагают, приводят к появлению миофибробластов, активированной формы фибробластов. Эти миофибробласты является центральными в процессе заживления ран, но, если они немодулированы, то они продуцируют чрезмерные количества материала внеклеточного матрикса и коллагена/рубцовой ткани. Этот миофибробластный фенотип дополнительно характеризуется сильной экспрессией α-актина гладких мышц (α-SMA). Трансформация/активация фибробластов в миофибробласт, который интенсивно экспрессирует α-SMA белок, составляет второй уровень патогенеза фиброзных процессов, характерных для ILD, PF-ILD и IPF.
- 12 045054
Следовательно, количественное определение экспрессии белка α-актин гладких мышц (α-SMA) является подходящим критерием для определения степени трансформации/активации фибробластов в миофибробласты, что соответствует второму уровню патогенеза фиброзных процессов, характерных для
ILD, PF-ILD и IPF.
Третий уровень патогенеза фиброзных процессов, характерных для ILD, PF-ILD и IPF характеризуется неконтролируемой пролиферацией/делением клеток и выживанием фибробластов и миофибробластов, вероятно, благодаря их резистентности к запрограммированной клеточной гибели. Пролиферирующие фибробласты и миофибробласты накапливаются в интерстициальной ткани легких, где они откладывают чрезмерные количества обогащенного коллагеном-I ECM и в конечном итоге организуются в фибробластные центры.
Количественное определение деления клеток (например, путем количественного определения инкорпорации BrdU в ДНК пролиферирующих фибробластов) является подходящим критерием для определения степени пролиферации фибробластов, что соответствует третьему уровню патогенеза фиброзных процессов, характерных для ILD, PF-ILD и IPF.
6.2 Принцип экспериментальных анализов A) и B):
Фибробласты легких IPF-пациентов (IPF-LF клетки), выращиваемые в планшетах на 96 лунок, инкубировали в течение 30 мин с различными концентрациями PDE4 ингибиторов Соединение формулы III, апремиласт или рофлумиласт-К-оксид или с комбинацией каждого из вышеуказанных PDE4ингибиторов с нинтеданибом.
После инкубирования с соединением, клетки стимулировали с помощью релевантных для анализа стимулов и инкубировали в течение релевантных для анализа времени в присутствии тестируемых соединений.
α-SMA белок определяли с помощью вестерн-заместительного анализа (MSD), используя моноклонатильные антитела к актину гладких мышц.
BrdU, инкорпорированный в ДНК пролиферирующих клеток, определяли с помощью ELISA.
BrdU представляет собой аналог предшественника ДНК тимидина. В пролиферирующих клетках, ДНК реплицируется перед осуществлением деления клеток. Если BrdU добавляют в культуру клеток, то пролиферирующие клетки будут инкорпорировать его и их ДНК, точно так же, как они бы инкорпорировали тимидин. Количество BrdU в ДНК клеток может быть обнаружено с помощью специфических антиBrdU флуоресцирующих антител с последующей проточной цитометрии или с помощью клеточного ELISA с моноклональными антителами к BrdU.
6.3 Эксперимент A): Исследование белка α-SMA (актин гладких мышц) (вестерн-заместительного анализа)
Высевание и истощение клеток
Фибробласты IPF-легких (пассаж 5-8) высевали в планшеты для культивирования тканей на 96 лунок в количестве 4500 клеток/лунку с 100 мкл/лунку FBM + дополнительные компоненты. Через 24 часа после высевания клетки промывали один раз с помощью FBM среды без дополнительных компонентов и истощали в течение 24 ч.
Эксперимент A1)
В эксперименте A1) PDE4B-ингибитор формулы III использовали в качестве тестируемого соединения в возрастающих концентрациях либо отдельно (см. закрашенные кружки и черную жирную кривую на фиг. 1) или в возрастающих концентрациях совместно с фиксированной концентрацией 100 нмоль/л нинтеданиба (см. незаштрихованные кружки и серая жирная линия на фиг. 1).
Эксперимент A2)
В эксперименте A2) апремиласт использовали в качестве тестируемого соединения в возрастающих концентрациях либо отдельно (см. закрашенные кружки и черную жирную кривую на фиг. 2) или в возрастающих концентрациях совместно с фиксированной концентрацией 100 нмоль/л нинтеданиба (см. незаштрихованные кружки и серая жирная линия на фиг. 2).
Эксперимент A3)
В эксперименте A3) рофлумиласт-К-оксид использовали в качестве тестируемого соединения в возрастающих концентрациях либо отдельно (см. закрашенные кружки и черную жирную кривую на фиг. 3) или в возрастающих концентрациях совместно с фиксированной концентрацией 100 нмоль/л нинтеданиба (см. незаштрихованные кружки и серая жирная линия на фиг. 3).
Разведения тестируемых соединений
Все тестируемые соединения (PDE4B-ингибитор формулы III, апремиласт или рофлумиласт) приготавливали 1000х в 0,1 ммоль/л HCl или ДМСО и осуществляли серийные разведения 1:3,16 (в 0,1 ммоль/л HCl или ДМСО). Для получения 2 концентрированных соединение-среда, приготавливали 1:500
- 13 045054 разведение (2 мкл 1000x разведения добавляли к 998 мкл FBM плюс 2 нмоль/л PGE2).
Предварительное инкубирование с тестируемыми соединениями
Через 48 ч после высевания среду отсасывали и добавляли FBM (100 мкл на лунку). После инкубирования в течение 1 ч при 37°C 90 мкл среды, содержащей 2x концентрированные соединения (при различных концентрациях) плюс 2х концентрированный PGE2 (2 нмоль/л) добавляли в течение 30 мин.
Конечная концентрация для PGE2 составляла 1 нмоль/л.
Стимуляция
Через 30 мин после предварительного инкубирования с тестируемым соединением (190 мкл), добавляли 10 мкл 20x концентрированного TGF-β и клетки стимулировали в течение 48 ч при температуре 37°C.
Для этого маточный раствор TGF-β (20 мкг/мл, восстановленный в 4 ммоль/л стерильной HCL) разводили 1:200 в истощенной среде для достижения концентрации 100 нг/мл. 10 мкл этой TGF-β среды или истощенной среды добавляли к указанным лункам. Концентрацию тестируемого соединения поддерживали во время стимуляции. Конечная концентрация TGF-β составляла 4 нг/мл.
Белковые лизаты
Через 48 ч после стимуляции супернатанты удаляли и хранили при -80°C для дальнейших экспериментов.
Клетки промывали один раз с помощью ледяного PBS и добавляли на лунку 50 мкл RIPA буфера, содержащего 1x ингибитор протеазы. Лизаты инкубировали в течение 5 мин на льду, затем хранили при -80°C.
Вестерн-заместительный анализ α-SMA
После размораживания, 25 мкл каждого лизата переносили на мембрану многоэлементный планшет на 96 лунок (MSD) и инкубировали в течение 2 ч при комнатной температуре с осторожным встряхиванием. После окончания времени инкубирования, планшеты промывали 3 раза с помощью 200 мкл 1x Трис-промывочного буфера (MSD) и добавляли 150 мкл 3% блокирующего буфера в течение 1 часа. После блокирования, планшеты промывали 3 раза с помощью 200 мкл 1x Трис-промывочного буфера и 25 мкл раствора антитела (на планшет 0,75 мл 3% блокирующего буфера, 2,25 мл 1x Трис-промывочного буфера, 1,2 мкл анти-a-SMA антитела (1:2500), 15 мкл козьего антимышиного сульфо-меченного антитела (1:200) добавляли в течение 1 ч. После AB-инкубирования планшеты промывали 3 раза с помощью 200 мкл 1x Трис-промывочного буфера и добавляли на лунку 150 мкл 1x MSD буфера считывания.
Планшеты анализировали с помощью Sector Imager (MSD).
6.4 Эксперимент B: Анализ пролиферации клеток
Высевание и истощение клеток
Фибробласты IPF-легких (пассаж 5-8) высевали в планшеты для культивирования тканей на 96 лунок в количестве 2500 клеток/лунку с 100 мкл/лунку FBM + дополнительные компоненты. Через 24 ч после высевания клетки промывали один раз с помощью FBM среды без дополнительных компонентов и затем выдерживали в этой среде в течение 24 ч истощения.
Эксперимент B1)
В эксперименте B1) PDE4B-ингибитор формулы III использовали в качестве тестируемого соединения в возрастающих концентрациях либо отдельно (см. закрашенные кружки и черную жирную кривую на фиг. 4) или в возрастающих концентрациях совместно с фиксированной концентрацией 100 нмоль/л нинтеданиба (см. незаштрихованные кружки и серая жирная линия на фиг. 4).
Пунктирная линия с незаштрихованными треугольниками представляет рассчитанную аддитивную кривую комбинированного лечения с применением 100 нмоль/л нинтеданиба с соответствующей концентрацией PDE4B-ингибитора формулы III.
Эксперимент B2)
В эксперименте B2) апремиласт использовали в качестве тестируемого соединения в возрастающих концентрациях либо отдельно (см. закрашенные кружки и черную жирную кривую на фиг. 5) или в возрастающих концентрациях совместно с фиксированной концентрацией 100 нмоль/л нинтеданиба (см. незаштрихованные кружки и серая жирная линия на фиг. 5).
Пунктирной линией с незаштрихованными треугольниками представляет рассчитанная аддитивная кривая комбинированного лечения с применением 100 нмоль/л нинтеданиба с соответствующей концентрацией апремиласта.
Эксперимент B3)
В эксперименте B3) рофлумиласт-К-оксид использовали в качестве тестируемого соединения в возрастающих концентрациях либо отдельно (см. закрашенные кружки и черную жирную кривую на фиг. 6) или в возрастающих концентрациях совместно с фиксированной концентрацией 100 нмоль/л нинтеда- 14 045054 ниба (см. незаштрихованные кружки и серая жирная линия на фиг. 6).
Пунктирная линия с незаштрихованными треугольниками представляет рассчитанную аддитивную кривую комбинированного лечения с применением 100 нмоль/л нинтеданиба с соответствующей концентрацией рофлумиласт-Ы-оксида.
Разведения тестируемых соединений
Все тестируемые соединения приготавливали 1000x в 0,1 ммоль/л HCl или ДМСО и осуществляли серийные разведения 1:3,16 (в 0,1 ммоль/л HCl или ДМСО). Для получения 1х концентрированного соединения в среде 1 мкл 1000х ДМСО разведение добавляли к 999 мкл FBM.
Предварительное инкубирование с тестируемыми соединениями
Через 48 ч после высевания, среду удаляли путем отсасывания и 90 мкл соединения или истощенной среды добавляли в течение 30 мин.
Стимуляция
Через 30 мин после предварительного инкубирования с тестируемым соединением (90 мкл) добавляли 10 мкл 10х концентрированного FGF плюс IL-1e и клетки стимулировали в течение 92 ч при температуре 37°C.
Для этого FGF и IL-1e маточные растворы (250 и 10 мкг/мл соответственно) разводили в истощенной среде для достижения концентрации 200 нг/мл и 300 пг/мл для FGF и IL-1e соответственно. 10 мкл этой стимулирующей среды или истощенной среды добавляли к указанным лункам.
Концентрацию тестируемого соединения поддерживали во время стимуляции. Конечная концентрация FGF составляла 20 нг/мл.
Конечная концентрация IL-1e составляла 30 пг/мл.
Анализ BrdU
Пролиферацию определяли с помощью колориметрического иммунологического анализа для количественного определения пролиферации клеток, на основании инкорпорации BrdU во время синтеза ДНК.
Анализ осуществляли в соответствии с инструкциями производителя.
Через 72 ч после стимуляции осуществляли 1:100 разведение BrdU в истощенной среде (полученная концентрация 100 мкмоль/л) и добавляли 10 мкл на лунку (конечная концентрация на лунку 10 мкмоль/л). Приблизительно через 18 ч BrdU среду удаляли путем отсасывания. Клетки фиксировали и денатурировали в течение 30 мин при комнатной температуре с реагентом FixDenat. Реагент удаляли путем перехвата и добавляли анти-BrdU-POD рабочий раствор (время инкубирования: 90 мин). Планшет промывали три раза с помощью 200 мкл промывочного буфера, затем инкубировали с раствором субстрата приблизительно в течение 10 мин. Реакцию останавливали путем добавления 1 моль/л H2SO4 к раствору субстрата и планшеты анализировали при 450 нм на фотометре (EnVision 2104 Multilabel планшет-ридер, PerkinElmer).
6.5 Анализ данных х-кратность относительно нестимулированного контроля рассчитывали на основании полученных показаний оптической плотности (ОП) для BrdU анализа или MSD единиц (α-SMA анализ).
Значение ингибирование в % рассчитывали на основании х-кратного относительно нестимулированного контроля.
В каждом из экспериментов для различных доноров все значения ингибирования определяли в двух или трех повторах.
Значения холостых проб вычитали из всех значений.
Значения IC50 стимулированных клеток определяли в соответствии со следующей формулой: Значение ингибирование в % = 100-(Υ/Κ1)*100
K1 = среднее значение ОП стимулированных контрольных лунок без обработки тестируемым соединением минус среднее значение ОП нестимулированных контрольных лунок без обработки тестируемым соединением Y = ОП стимулированной лунки, обработанной соединением
Рассчитывали нелинейную регрессию log (концентрация ингибитора) относительно значения ингибирования в %, используя трехпараметрическую подгонку с переменным угловым коэффициентом с помощью программного обеспечения Graph Pad Prism Software.
Для расчета аддитивного эффекта соединения формулы III, апремиласта или рофлумиласт-Ы-оксида в комбинации с нинтеданибом использовали следующую формулу
Эффект PDE4 ингибитора (ЕВ) + эффект нинтеданиба (EN) = EB+N = ЕВ +
ΕΝ - (EB*EN) = пунктирная кривая (Poch & Holzmann, 1980).
Тестируемые соединения
Тестируемые соединения Соединение формулы III, апремиласт, рофлумиласт-Ы-оксид и нинтеданиб растворяли в ДМСО и хранили при -20°C. Приготавливали серийные разведения из 7 концентраций перед каждым экспериментом.
- 15 045054
6.6 Материалы и способы
| Материал | Поставщик | Номер заказа |
| Тестируемый образец IPF-LF клеточная линия (пассаж 5-8) | Asterand | DI16769 |
| rhTGF-β | R&DSystems | DI16783 DI19873 BI209755 В1210978 В1212020 240-В-010 |
| rhFGF основной | R&DSystems | 234_FSE |
| rhIL-Ιβ | R&DSystems | 201-LB-005 |
| rhPGE2 | Tocris | 2296 |
| Моноклональное антитела к актину | Sigma | А2547 |
| гладких мышц Козье антимышиное сульфо-меченное | MSD | R32AC-1 |
| антитело Многоэлементный планшет на 96 | MSD | L15XB-3 |
| лунок Plate High Bind MSD Blocker A | MSD | R93BA-4 |
| MSD Трис-промывочный буфер (Юх) | MSD | R61TX-1 |
| MSD Буфер считывания Т (4х) | MSD | R92TC-2 |
| RIPA буфер | Sigma | R0278-500ML |
| Смесь ингибиторов протеаз (100х) | ThermoScientific | 78437 |
| PBS | Gibco | 10010023 |
| BrdU-анализ | Roche | 11647229001 |
| Колба для клеточной культуры, 75 см2, | BD Falcon™ | 353110 |
| обработанная культурой ткани Колба для клеточной культуры, 175 | BD Falcon™ | 353112 |
| см2, обработанная культурой ткани Планшет на 96 лунок (клеточная | Nunc microwell 96F | 167008 |
| культура) ДМСО | Merck | 1.02952.1000 |
| Cells-to-CT 1 Step TaqMan набор | Ambion | А25602 |
Среда для наращивания клеток:
FBM (минимальная среда для фибробластов, Lonza, № по кат.: CC-3131), дополненная инсулином, FGF-2, 0,5 % FBS, GA-1000 (все в FGM-2 SingleQuots, Lonza, № по кат. CC-4126)
Реагенты для субкультирования IPF-LF клеток:
Hepes забуференный физиологический раствор (Lonza, № по кат. CC-5022)
Трипсин/EDTA (0,25 мг/мл) (Lonza, CC-5012)
TNS (трипсин-нейтрализирующий раствор, Lonza, CC-5002)
Истощенная среда:
FBM без дополнительных компонентов
Стимулирующая среда для α-SMA анализа: FBM плюс 4 нг/мл rhTGF-β и 1 нмоль/л PGE2
Стимулирующая среда для BrdU анализа:
FBM плюс 20 нг/мл rhbFGF плюс 30 пг/мл rhIL-1e
6.7 Интерпретация экспериментов
Эксперимент A): Ингибирование стимулируемой TGF-β экспрессии α-SMA белка фибробластами легких человека от пациентов с IPF
Чем больше специфический активный агент имеет тенденцию ингибировать стимулируемую TGF-β экспрессию α-SMA белка фибробластами легких человека от IPF пациентов, тем больше этот агент будет иметь терапевтический эффект на втором уровне патогенеза фиброзных процессов, который заключается в переходе фибробластов в миофибробласты. Следовательно, в этом Эксперименте A), который имитирует второй уровень фиброзных процессов, был экспериментально определен эффект:
а) нинтеданиба отдельно, соединения формулы III отдельно, апремиласта отдельно и рофлумиластN-оксида отдельно и
б) соединения формулы III с нинтеданибом, апремиласта с нинтеданибом и рофлумиласт-N-оксида с нинтеданибом на стимулируемую TGF-β экспрессию α-SMA белка фибробластами легких человека от IPF пациентов.
В то время как нинтеданиб, вводимый отдельно в концентрации 100 нмоль/л, не проявляет в этом эксперименте ингибирующего эффекта на стимулируемую TGF-β экспрессию α-SMA белка фибробластами легких человека (подтверждая тот факт, что нинтеданиб в этой концентрации отдельно не проявляет терапевтического эффекта на втором уровне патогенеза фиброзных процессов (см. □; на фиг. 1, 2 и 3: Ингибирование составляло <0), все тестируемые PDE4-ингибиторы (соединение формулы III, апремиласт и рофлумиласт-N-оксид), когда вводятся отдельно и также когда вводятся совместно с нинтедани- 16 045054 бом в фиксированной концентрации 100 нмоль/л, проявляют, по меньшей мере, в определенных концентрациях ингибирование в зависимости от концентрации стимулируемой TGF-β экспрессии α-SMA белка фибробластами легких человека, что подтверждает определенный терапевтический эффект всех этих
PDE4-ингибиторов на втором уровне патогенеза фиброзных процессов (активация миофибробластов).
На основании этих результатов можно сделать вывод о том, что PDE4-ингибиторы - по меньшей мере в определенном диапазоне концентраций - имеют потенциал проявлять зависимый от концентрации терапевтический эффект на переход/активацию фибробласта в миофибробласт , явление, которое представляет второй уровень патогенеза фиброзных процессов, которые характерны для ILD, в особенности для PF-ILD, в то время как нинтеданиб в концентрации 100 нмоль/л отдельно не проявляет терапевтического эффекта на тот же самый второй уровень патогенеза в соответствии с этим экспериментом.
Следовательно, PDE4-ингибиторы проявляют по отношению к нинтеданибу так называемый комплементарный эффект или дополнительный эффект переход/активацию фибробласта в миофибробласт (= второй уровень патогенеза фиброзных процессов). Таким образом, введение нинтеданиба совместно с PDE4B-ингибитором формулы III будет проявлять превосходящий эффект на терапевтическую эффективность по сравнению с лечением IPF с применением, например, нинтеданиба отдельно.
Если Вы сравните измеряемое ингибирование на стимулируемую TGF-β экспрессию α-SMA белка фибробластов легких человека для соединения формулы III (фиг. 1), для апремиласта (фиг. 2) и для рофлумиласт-К-оксида (фиг. 3), то является очевидным, что только для соединения формулы III (фиг. 1) полная кривая концентрация/ингибирование расположена при ингибированиях выше нуля, в то время как, например, для апремиласта и в особенности для рофлумиласт-К-оксида низкие концентрации PDE4-ингибитора (либо отдельно или в комбинации с нинтеданибом) приводят к отрицательным ингибированиям стимулируемой TGF-β экспрессии α-SMA белка (подтверждая отсутствие терапевтического эффекта на втором уровне фиброзных процессов для апремиласта и в особенности для рофлумиласт-Nоксида при этих более низких концентрациях (в то время как соединение формулы III, как видно, проявляет положительное ингибирование стимулируемой TGF-β экспрессии α-SMA белка при всех тестиуремых концентрациях).
Эксперимент B): Ингибирование пролиферации фибробластов
Чем больше специфический активный агент имеет тенденцию ингибировать пролиферацию культивируемых фибробластов легких человека от IPF пациентов, тем больше этот агент будет иметь терапевтический эффект на третьем уровне патогенеза фиброзных процессов, который представляет собой пролиферацию фибробластов.
Следовательно, эффект
а) нинтеданиба отдельно, соединения формулы III отдельно, апремиласта отдельно и рофлумиластN-оксида отдельно и
б) соединения формулы III с нинтеданибом, апремиласта с нинтеданибом и рофлумиласт-К-оксида с нинтеданибом на пролиферацию фибробластов легких человека от IPF пациентов был экспериментально определен в Эксперименте B).
В этом эксперименте B), который имитирует третий уровень патогенеза фиброзных процессов (пролиферация фибробластов), нинтеданиб, вводимый отдельно в концентрации 100 нмоль/л, уже проявляет отчетливый ингибирующий эффект на пролиферацию фибробластов легких человека (см. данные ингибирования обозначены символом □ на фиг. 4, 5 и 6).
Тем не менее, результаты Экспериментов B1) на фиг. 4, B2) на фиг. 5 и B3) на фиг. 6 демонстрируют, что не только нинтеданиб отдельно имеет ингибирующий эффект на пролиферацию фибробластов, но также и PDE4-ингибиторы, такие как соединение формулы III (см. закрашенные кружки и черную жирную кривую в B1, фиг. 4)), апремиласт (см. закрашенные кружки и черную жирную кривую в B2, фиг. 5)) и рофлумиласт-К-оксид (см. закрашенные кружки и черную жирную кривую в B3 на фиг. 6)) проявляют в целом ингибирующий эффект в зависимости от концентрации на пролиферацию фибробластов и, следовательно, имеют терапевтический эффект на пролиферацию фибробластов (третий уровень патогенеза фиброзных процессов).
Поскольку, очевидно, оба компонента нинтеданиб в фиксированной концентрации 100 нмоль/л и тестируемые PDE4-ингибиторы в зависимости от концентрации проявляют ингибирующий эффект на пролиферацию фибробластов, то можно предполагать простой аддитивный эффект для ингибирования пролиферации фибробластов с помощью комбинации 100 нмоль/л нинтеданиба и соответствующего PDE4-ингибитора в его соответствующей концентрации.
На фиг. 4, 5 и 6 пунктирные кривые с незаштрихованными треугольниками представляют эти рассчитанные аддитивные комбинационные кривые, которые рассчитаны на основании простого добавления измеренного значения ингибирования для 100 нмоль/л нинтеданиба плюс измеренное значение ингибирования для соответствующего PDE4-ингибитора отдельно в изменяемых концентрациях.
Тем не менее, серые жирные кривые с незаштрихованными кружками на фиг. 4, 5 и 6 представляют экспериментально измеренные кривые ингибирования для комбинаций, содержащих 100 нмоль/л нин- 17 045054 теданиба и соответствующий PDE4-uHru6umop в изменяемых концентрациях.
Неожиданно, на фиг. 4, на которой показано результаты Эксперимента В1) экспериментально измеренные кривые ингибирования пролиферации фибробластов для комбинации нинтеданиба с соединением формулы III (жирная серая линия, незаштрихованные кружки) являются достоверно сдвинутыми влево (что обозначает к более низким концентрациям соединения формулы III) по сравнению с соответствующей рассчитанной аддитивной кривой ингибирования для комбинации нинтеданиба с соединением формулы III (пунктирная кривая с незаштрихованными треугольниками).
Этот существенный сдвиг влево является очевидным индикатором для сверхаддитивного синергетического эффекта комбинации 100 нмоль/л нинтеданиба с соединением формулы III. Этот экспериментально наблюдаемый сверхаддитивный синергетический эффект для комбинации нинтеданиба и соединение формулы III является полностью неожиданным, в особенности, поскольку этот синергетический сверхаддитивный эффект, по-видимому, не представляет классовый эффект.
На фиг. 5 представлены результаты соответствующего Эксперимента B2), где соединение формулы III заменяют на апремиласт. На фиг. 5 показано, что экспериментально измеренные кривые ингибирования для комбинации нинтеданиба с апремиластом (жирная серая линия, незаштрихованные кружки) не сдвинута влево, но вместо это даже незначительно сдвинута вправо (это обозначает к более высоким концентрациям апремиласта) по сравнению с соответствующей рассчитанной аддитивной кривой ингибирования для комбинации нинтеданиба с апремиластом (пунктирная кривая с незаштрихованными треугольниками). Такой сдвиг вправо теоретически будет даже являться индикатором меньше, чем аддитивное ингибирование пролиферации фибробластов (антисинергетический эффект) с помощью комбинации нинтеданиба и апремиласта. Тем не менее, этот незначительный сдвиг вправо измеренной кривой для комбинации нинтеданиб/апремиласт по сравнению с рассчитанной кривой комбинации нинтеданиб/апремиласт более или менее находится в пределах планок погрешностей и, следовательно, не является статистически достоверным. Таким образом, для комбинации нинтеданиба с апремиластом экспериментально может наблюдаться более или менее нормальный аддитивный эффект, как ожидается.
На фиг. 6 представлены результаты соответствующего Эксперимента B3), где соединение формулы III заменено на рофлумиласт-К-оксид. На фиг. 6 показано, что экспериментально измеренные кривые ингибирования для комбинации нинтеданиба с рофлумиласт-К-оксидом (жирная серая линия, незаштрихованные кружки) также сдвинуто вправо, а не влево по сравнению с соответствующей рассчитанная аддитивная кривая ингибирования для комбинации нинтеданиба с рофлумиласт-К-оксидом (пунктирная кривая с незаштрихованными треугольниками). Такой сдвиг вправо является индикатором для меньше, чем аддитивного ингибирования пролиферации фибробластов (антисинергетический эффект) для комбинации нинтеданиба и рофлумиласт-К-оксида.
Этот сдвиг вправо измеренной кривой комбинации нинтеданиб/рофлумиласт комбинация по сравнению с рассчитанной кривой комбинация нинтеданиб/рофлумиласт представлен только для очень высокой концентрации рофлумиласт-К-оксида за пределами диапазоне планок погрешностей.
Следовательно, для комбинации нинтеданиба с рофлумиласт-К-оксидом также экспериментально может быть определен более или менее аддитивный эффект, как ожидается.
Этот сверхаддитивный синергетический эффект на ингибирование пролиферации фибробластов, которые наблюдается исключительно для комбинации нинтеданиба с соединением формулы III, также отображается в большом отличии значений IC50, рассчитанных для кривых концентрация/ингибирование
а) измеренных для фибробластов легких человека от IPF пациентов, леченных с применением соединения формулы III отдельно на фиг. 4 (жирная черная кривая, IC50-значение 255 нмоль/л) и
б) измеренных для фибробластов легких человека от IPF пациентов, леченных с применением комбинации, содержащей соединение формулы III и нинтеданиб на фиг. 4 (жирная серая кривая, IC50значение 23 нмоль/л).
В данном случае, IC50-значение для кривой ингибирования, измеренной для соединения формулы III, вводимого отдельно, по сравнению со IC50-значением для кривой ингибирования, измеренной для комбинации соединения формулы III с нинтеданибом является в 11-раз больше (255 нмоль/л /23 нмоль/л=11).
В противоположность этому соответствующие отличия для IC50-значений для кривых ингибирования, измеренных для других PDE4-ингибиторов апремиласт и рофлумиласт-К-оксид, вводимых отдельно, по сравнению с кривой ингибирования, измеренной для соответствующей комбинации PDE4ингибитора/нинтеданиб, являются намного меньше (в 1,13-раз больше для апремиласта, в 0,82-раз меньше для рофлумиласт-К-оксида).
Этот экспериментально определенный сверхаддитивный синергетический эффект на ингибирование пролиферации фибробластов, который наблюдается исключительно для комбинации соединения формулы III с нинтеданибом, очевидно, не представляет собой классовый эффект, поскольку ни один из других тестируемых PDE4-ингибиторов апремиласт или рофлумиласт не проявляет в комбинации с нинтеданибом соответствующий сходный сверхаддитивный синергетический эффект, а вместо этого только ожидаемый аддитивный ингибирующий эффект (нинтеданиб/рофлумиласт-К-оксид проявляет-
Claims (19)
1. Способ лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), который включает введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтиче-
- 19 045054 ски эффективного количества PDE4B-ингибитора формулы III
где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр, или его фармацевтически приемлемой соли и терапевтически эффективное количество ингибитора тирозинкиназы, выбранное из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль.
1) на втором уровне патогенеза фиброзных процессов, характерных для PF-ILD (активация фибробластов в миофибробластов) значительный терапевтический эффект по сравнению с полным диапазоном тестируемых концентраций для PDE4B-ингибитора формулы III (при этом нинтеданиб отдельно не проявляет терапевтического эффекта на втором уровне) и
2. Способ по п.1, где прогрессирующее фиброзирующее интерстициальное заболевание легких представляет собой идиопатический фиброз лёгких (IPF).
2) на третьем уровне патогенеза фиброзных процессов, характерных для PF-ILD (пролиферация фибробластов) неожиданно даже сверхаддитивный синергетический терапевтический эффект (который комбинации рофлумиласт-К-оксид/нинтеданиб- и апремиласт/нинтеданиб неожиданно не проявляют).
Другое дополнительное преимущество, которое очевидно проявляет комбинация PDE4Bингибитора формулы III с нинтеданибом по сравнению с другими комбинациями PDE4ингибитор/нинтеданиб (такими как, например, рофлумиласт-К-оксид/нинтеданиб), является ее относительно хорошая переносимость (в особенности по отношению к побочным явлениям со стороны желудочно-кишечного тракта).
Известно, что нинтеданиб, а также пирфенидон - только два разрешенные в настоящее время терапевтические агенты для лечения IPF - проявляют оба значительные побочные явления со стороны желудочно-кишечного тракта, такие как диарея, тошнота, рвота, потеря веса и др., которые являются основной причиной, почему нинтеданиб и пирфенидон обычно не комбинируются вследствие их аддитивных и, следовательно, более частных побочных явлений со стороны желудочно-кишечного тракта.
В отличие от нинтеданиба и пирфенидона, было показано, что PDE4B-ингибитор формулы III является относительно свободным от типичных для PDE4-ингибитора побочных явлений со стороны желудочно-кишечного тракта, таких как диарея, в соответствующем эксперименте на крысах (см. WO 2013/026797
Раздел 53: Эксперименты по опорожнению желудка и кишечному транзиту и фиг. 2a (опорожнение желудка) и 2b (кишечный транзит)). В этих экспериментах может быть показано, что возрастающее количество соединения из примера 2 (которое является идентичным к PDE4B-ингибитором формулы III в настоящей заявке) по сущности не оказывает влияния на опорожнение желудка и на кишечный транзит пробного завтрака у крыс по сравнению с нелеченными крысами.
Тем не менее, в сходных экспериментах по опорожнению желудка и кишечному транзиту было показано, что альтернативный PDE4-ингибитор рофлумиласт проявляет очевидную тенденцию побочных явлений со стороны желудочно-кишечного тракта.
Дополнительно, также хорошо известно из клинических исследований, что рофлумиласт (который разрешен только для лечения COPD) проявляет значительные побочные явления со стороны желудочнокишечного тракта у пациентов-людей с COPD, такие как диарея, тошнота, потеря веса.
В http://www.rxlist.com/daliresp-drug.htm было описано, что рофлумиласт, вводимый пациентам с COPD в дозе 500 мкг ежедневно, приводит у 9,5% всех пациентов к диарее (по сравнению с только 2,7% пациентов, получающих плацебо), у 4,7% всех пациентов к тошноте (по сравнению с только 1,4% пациентов, получающих плацебо), у 7,5% всех пациентов к снижению веса (по сравнению с только 2,1% пациентов, получающих плацебо) и у 4,4% всех пациентов к головной боли (по сравнению с только 2,1 % пациентов, получающих плацебо).
В связи с наблюдениями, указанными выше, комбинация PDE4B-ингибитора формулы III с нинтеданибом имеет лучшую переносимость по отношению к побочным явлениям со стороны желудочнокишечного тракта по сравнению, например, с комбинацией рофлумиласта с нинтеданибом. Дополнительно, комбинация PDE4B-ингибитора формулы III с нинтеданибом имеет лучшую терапевтическую эффективность по отношению к лечению ILD, PF-ILD и в особенности IPF (см. фиг. 1-6) в комбинации с приемлемой переносимостью по отношению к побочным явлениям со стороны желудочно-кишечного тракта (WO 2013/026797 Раздел 5.3).
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
3. Способ по п.1 или 2, где PDE4B-ингибитор формулы III вводят одновременно, совместно, последовательно, один за одним, попеременно или раздельно с ингибитором тирозинкиназы, выбранным из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемые соли.
4. Способ по одному из пп.1-3, где ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната.
5. Применение комбинации, содержащей терапевтически эффективное количество PDE4Bингибитора формулы III
где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр, или его фармацевтически приемлемую соль, и терапевтически эффективное количество ингибитора тирозинкиназы, выбранного из группы, состоящей из нинтеданиба и его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD).
6. Применение комбинации по п.5, где прогрессирующее фиброзирующее интерстициальное заболевание легких представляет собой идиопатический фиброз лёгких (IPF).
7. Применение комбинации по п.5 или 6, где указанный PDE4B ингибитор формулы III или его фармацевтически приемлемую соль вводят одновременно, совместно, последовательно, один за одним, попеременно или раздельно с ингибитором тирозинкиназы, выбранным из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемые соли.
8. Применение комбинации по одному из пп.5-7, где ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната.
9. Применение PDE4B-ингибитора формулы III
где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр, или его фармацевтически приемлемой соли для приготовления фармацевтической композиции для лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD), где терапевтически эффективное количество указанного PDE4B-ингибитора формулы III или его фармацевтически приемлемой соли вводят пациенту, который в этом нуждается, в комбинации с терапевтически эффективным количеством ингибитора тирозинкиназы, выбранным из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль.
10. Применение PDE4B-ингибитора формулы III для приготовления фармацевтической композиции для лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний
- 20 045054 легких (PF-ILD) по п.9, где прогрессирующее фиброзирующее интерстициальное заболевание легких представляет собой идиопатический фиброз лёгких (IPF).
11. Применение PDE4B-ингибитора формулы III по п.9 или 10, где PDE4B-ингибитор формулы III или его фармацевтически приемлемую соль вводят одновременно, совместно, последовательно, один за одним, попеременно или раздельно с ингибитором тирозинкиназы, выбранным из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль.
12. Применение PDE4B-ингибитора формулы III по одному из пп.9, 10 или 11, где ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната.
13. Применение ингибитора тирозинкиназы, выбранного из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль, для приготовления фармацевтической композиции для лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PFILD), где терапевтически эффективное количество указанного ингибитора тирозинкиназы вводят пациенту, который в этом нуждается, в комбинации с терапевтически эффективным количеством PDE4Bингибитора формулы III где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр, или его фармацевтически приемлемой соли.
14. Применение ингибитора тирозинкиназы для приготовления фармацевтической композиции для лечения одного или нескольких прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (PF-ILD) по п.13, где прогрессирующее фиброзирующее интерстициальное заболевание легких представляет собой идиопатический фиброз лёгких (IPF).
15. Применение ингибитора тирозинкиназы выбирают из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемую соль, по п.13 или 14, где указанный ингибитор тирозинкиназы вводят одновременно, совместно, последовательно, один за одним, попеременно или раздельно с PDE4Bингибитором формулы III или его фармацевтически приемлемой солью.
16. Применение ингибитора тирозинкиназы по одному из пп.13, 14 или 15, где ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната.
17. Фармацевтическая композиция, содержащая
PDE4B-ингибитор формулы III где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр;
или его фармацевтически приемлемую соль ингибитор тирозинкиназы, выбранный из группы, включающей нинтеданиб и его фармацевтически приемлемые соли, и один или несколько фармацевтически приемлемых носителей и/или наполнителей.
18. Фармацевтическая композиция по п.17, где ингибитор тирозинкиназы представляет собой нинтеданиб в форме его моноэтансульфоната.
19. Фармацевтический набор, который содержит первую фармацевтическую композицию или дозированную форму, содержащую PDE4B-ингибитор формулы III где S* представляет собой атом серы, который представляет хиральный центр, или его фармацевтически приемлемую соль,
-
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP17197719.2 | 2017-10-23 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA045054B1 true EA045054B1 (ru) | 2023-10-27 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11813266B2 (en) | Combination of active agents for the treatment of progressive fibrosing interstitial lung diseases (PF-ILD) | |
| US20180078529A1 (en) | Angiotensin ii receptor agonist for treating pulmonary fibrosis | |
| JP2008530101A (ja) | 有機化合物の組合わせ剤 | |
| JP2016528303A (ja) | 新規使用 | |
| ES2848710T3 (es) | Nuevo uso de compuestos agonistas del receptor sigma-1 | |
| AU2017281980B2 (en) | Wnt inhibitors for use in the treatment of fibrosis | |
| EP3474897B1 (en) | Cilastatin for use in the treatment of sepsis | |
| WO2023104961A1 (en) | New therapeutic combinations for the treatment of progressive fibrosing interstitial lung diseases | |
| EA045054B1 (ru) | Новая комбинация активных агентов для лечения прогрессирующих фиброзирующих интерстициальных заболеваний легких (pf-ild) | |
| EP4426307A1 (en) | New oral pharmaceutical composition and dose regimen for the therapy of progressive fibrosing interstitial lung diseases | |
| JP6429401B2 (ja) | 変異を有するｉ型コラーゲンの小胞体内過剰蓄積正常化剤 | |
| Asenjo‐Bueno et al. | Respiratory dysfunction in old mice could be related to inflammation and lung fibrosis induced by hyperphosphatemia | |
| WO2023222332A1 (en) | Diphenyl ureas for the treatment of viral infections | |
| WO2023199010A1 (en) | Treatment of muscle fibrosis | |
| Aerden | Diazepam in acute stroke |