EA044180B1 - Агонисты npra, композиции и их использование - Google Patents
Агонисты npra, композиции и их использование Download PDFInfo
- Publication number
- EA044180B1 EA044180B1 EA201992226 EA044180B1 EA 044180 B1 EA044180 B1 EA 044180B1 EA 201992226 EA201992226 EA 201992226 EA 044180 B1 EA044180 B1 EA 044180B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- seq
- sequence
- peptide
- natriuretic peptide
- cgmp
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 46
- 102100039339 Atrial natriuretic peptide receptor 1 Human genes 0.000 title 1
- 101000961044 Homo sapiens Atrial natriuretic peptide receptor 1 Proteins 0.000 title 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 title 1
- JSOQIZDOEIKRLY-UHFFFAOYSA-N n-propylnitrous amide Chemical compound CCCNN=O JSOQIZDOEIKRLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- 108020001621 Natriuretic Peptide Proteins 0.000 claims description 362
- 102000004571 Natriuretic peptide Human genes 0.000 claims description 362
- 239000000692 natriuretic peptide Substances 0.000 claims description 361
- 101800001890 Atrial natriuretic peptide Proteins 0.000 claims description 131
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 111
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 111
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 78
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 65
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 63
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 63
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 63
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 59
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 39
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 26
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 26
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 19
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 claims description 19
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 14
- 239000004475 Arginine Chemical group 0.000 claims description 12
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 claims description 12
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Chemical group OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 101500027325 Homo sapiens Atrial natriuretic peptide Proteins 0.000 claims description 11
- 125000001924 fatty-acyl group Chemical group 0.000 claims description 11
- 230000009723 vascular congestion Effects 0.000 claims description 11
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical group NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 10
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 claims description 9
- 241000700159 Rattus Species 0.000 claims description 9
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 9
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 claims description 7
- 230000001452 natriuretic effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims description 7
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 claims description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 5
- 101500026735 Homo sapiens Brain natriuretic peptide 32 Proteins 0.000 claims description 4
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 101000749809 Homo sapiens 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase Proteins 0.000 claims description 3
- 101000796277 Homo sapiens C-type natriuretic peptide Proteins 0.000 claims description 3
- 102000047974 human CNP Human genes 0.000 claims description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 2
- ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 3',5'-cyclic GMP Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 0.000 claims 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 claims 1
- 231100000279 safety data Toxicity 0.000 claims 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 claims 1
- ZOOGRGPOEVQQDX-KHLHZJAASA-N cyclic guanosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)O[P@](O)(=O)O[C@@H]1[C@H](O)[C@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 ZOOGRGPOEVQQDX-KHLHZJAASA-N 0.000 description 166
- 101800001288 Atrial natriuretic factor Proteins 0.000 description 160
- 102400001282 Atrial natriuretic peptide Human genes 0.000 description 127
- NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N carperitide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N 0.000 description 123
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 115
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 115
- 101800000407 Brain natriuretic peptide 32 Proteins 0.000 description 86
- 102000012421 C-Type Natriuretic Peptide Human genes 0.000 description 74
- 101800000060 C-type natriuretic peptide Proteins 0.000 description 74
- 102400000667 Brain natriuretic peptide 32 Human genes 0.000 description 73
- 101800002247 Brain natriuretic peptide 45 Proteins 0.000 description 73
- HPNRHPKXQZSDFX-OAQDCNSJSA-N nesiritide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 HPNRHPKXQZSDFX-OAQDCNSJSA-N 0.000 description 69
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 26
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 26
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 21
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 17
- 150000002190 fatty acyls Chemical group 0.000 description 17
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 14
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 13
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 11
- 230000004044 response Effects 0.000 description 11
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 9
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 8
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 8
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 8
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 8
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 7
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000033300 receptor internalization Effects 0.000 description 6
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 6
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 description 5
- 125000004448 alkyl carbonyl group Chemical group 0.000 description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 108010006835 Atrial Natriuretic Factor Receptors Proteins 0.000 description 4
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 4
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical class O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 3
- -1 blood cGMP) Chemical compound 0.000 description 3
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 108010078321 Guanylate Cyclase Proteins 0.000 description 2
- 102000014469 Guanylate cyclase Human genes 0.000 description 2
- 108090001050 Phosphoric Diester Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 102000004861 Phosphoric Diester Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000001746 atrial effect Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 210000002464 muscle smooth vascular Anatomy 0.000 description 2
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- MZCACYLMMMXSKC-UHFFFAOYSA-N 32 amino acid peptide Chemical compound C=1C=CC=CC=1CC(C(=O)NC(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCCNC(N)=N)NC(=O)C(CCCNC(N)=N)NC(=O)C(CCSC)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(O)=O)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1N(CCC1)C(=O)C1NCCC1)C(C)O)CC1=CC=CC=C1 MZCACYLMMMXSKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 208000020446 Cardiac disease Diseases 0.000 description 1
- 206010007556 Cardiac failure acute Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N D-arginine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
- 229930028154 D-arginine Natural products 0.000 description 1
- 101001117256 Drosophila melanogaster High affinity cGMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase 9A Proteins 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- SNIOPGDIGTZGOP-UHFFFAOYSA-N Nitroglycerin Chemical compound [O-][N+](=O)OCC(O[N+]([O-])=O)CO[N+]([O-])=O SNIOPGDIGTZGOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000006 Nitroglycerin Substances 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000011016 Type 5 Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases Human genes 0.000 description 1
- 108010037581 Type 5 Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases Proteins 0.000 description 1
- 102000010989 Type 6 Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases Human genes 0.000 description 1
- 108010037638 Type 6 Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases Proteins 0.000 description 1
- 108010001957 Ularitide Proteins 0.000 description 1
- 102400001279 Urodilatin Human genes 0.000 description 1
- GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N Vasopressin Natural products N1C(=O)C(CC=2C=C(O)C=CC=2)NC(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002852 Vasopressins Human genes 0.000 description 1
- 108010004977 Vasopressins Proteins 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N argipressin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)=O)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)C1=CC=CC=C1 KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- QLBHNVFOQLIYTH-UHFFFAOYSA-L dipotassium;2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [K+].[K+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O QLBHNVFOQLIYTH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940058180 edetate dipotassium anhydrous Drugs 0.000 description 1
- 230000008497 endothelial barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000006277 exogenous ligand Substances 0.000 description 1
- 230000008713 feedback mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229960003711 glyceryl trinitrate Drugs 0.000 description 1
- 150000002333 glycines Chemical class 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 102000027424 natriuretic peptide receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008599 natriuretic peptide receptors Proteins 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000036454 renin-angiotensin system Effects 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000035936 sexual power Effects 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000005480 straight-chain fatty acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 102000027257 transmembrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008578 transmembrane receptors Proteins 0.000 description 1
- IUCCYQIEZNQWRS-DWWHXVEHSA-N ularitide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 IUCCYQIEZNQWRS-DWWHXVEHSA-N 0.000 description 1
- 210000004509 vascular smooth muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000304 vasodilatating effect Effects 0.000 description 1
- 229960003726 vasopressin Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Description
Перекрестная ссылка на связанную заявку
По заявке на данное изобретение испрашивают приоритет предварительной заявки США № 62/475,147, поданной 22 марта 2017 г., описание которой включено в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме.
Предпосылки
Увеличение циклического гуанозинмонофосфата (cGMP) in vivo имеет множество применений при различных гипертензиях, сосудистом застое или заболевании сердца у млекопитающих. Попытки повышать cGMP in vivo для того, чтобы лечить различные сердечно-сосудистые заболевания или усиливать сексуальную эффективность, привели к использованию ингибиторов фосфофодиэстераз 5, 6 и 9 (фосфофодиэстеразы представляют собой ферменты, которые разрушают cGMP) (см., например, Keravis T., Lugnier С., Br. J. Pharmacol. 2012; 165:1288-305) или соединений, которые повышают продуцирование cGMP, таких как нитроглицерин/нитраты и натрийуретические пептиды.
Предсердный натрийуретический пептид (ANP) и натрийуретический пептид головного мозга (BNP) действуют через натрийуретический рецептор A (NPRA), и натрийуретический пептид с-типа (CNP) действует через натрийуретический рецептор В (NPRB) (см., например, Silver M.A., Curr. Opin. Nephrol. Hypertens., 2006, vol. 15,14-21; Yoshibayashi M. et al., Eur. J. Endocrinol., 1996, vol 135, 265-268) для того, чтобы увеличивать внутриклеточный cGMP, что также отражается в определенной степени в увеличении cGMP крови. Когда лиганды натрийуретического рецептора связываются с натрийуретическими трансмембранными рецепторами, которые имеют внутриклеточный домен гуанилатциклазы, активируют активность гуанилатциклазы, что ведет к увеличенному внутриклеточному cGMP, проявлению различных физиологических активностей и увеличению cGMP крови.
Увеличение cGMP имеет положительные эффекты, оказываемые на гипертензию и/или застой сосудистого текучего вещества и/или заболевание сердца. Внутриклеточный cGMP широко известен в качестве внутриклеточного вторичного мессенджера, который отвечает за опосредование внеклеточного сигнала (от натрийуретического пептида, например ANP, BNP, CNP, уродилатин и оксид азота (I)) во внутриклеточном действии. Это хорошо исследовано в отношении управления тонусом гладких мышц сосудов. В целом, известно, что увеличении внутриклеточного cGMP в сосудистых гладкомышечных клетках расслабляет гладкие мышцы и снижает кровяное давление.
ANP и BNP представляют собой известные медицинские средства для того, чтобы управлять кровяным давлением и нагрузкой сердца у пациентов с заболеванием сердца. ANP человека (hANP) используют в клинике в качестве терапевтического средства для острой сердечной недостаточности в Японии, a BNP используют в клинике в качестве терапевтического средства для застойной сердечной недостаточности в Соединенных штатах. Медицинское использование существующих натрийуретических пептидов ограничено их коротким временем полужизни и ограниченной активностью, чтобы обеспечивать достаточный cGMP, и их обычно вводят посредством непрерывной внутривенной инфузии.
ANP, BNP и CNP представляют собой пептиды, имеющие циклическую структуру, необходимую для их активности, которая возможна благодаря присутствию дисульфидных связей. ANP представляет собой пептид из 28 аминокислот, продуцируемый и секретируемый клетками предсердия. Пептид проявляет диуретическое действие в почке и расслабляет и расширяет сосудистые гладкие мышцы в кровеносных сосудах. Кроме того, ANP антагонизирует действие ренин-ангиотензин-альдостероновой системы (RAAS) и вазопрессина. Эти действия всесторонне снижают нагрузку на сердце через снижение кровяного давления и объема текучих веществ организма. В действительности, секреции ANP способствует подъем давления наполнения предсердия при застойной сердечной недостаточности и т.д., и ANP облегчает симптомы застойной сердечной недостаточности через указанные выше действия.
BNP представляет собой пептид из 32 аминокислот, который впервые обнаружен в головном мозге, но впоследствии обнаружены его продуцирование и секреция преимущественно в кардиомиоцитах. Секреция BNP возрастает у пациентов с сердечной недостаточностью, и BNP облегчает различные симптомы, ассоциированные с сердечной недостаточностью, через указанные выше действия.
ANP и BNP обладают различными физиологическими активностями, помимо вазодилятирующего действия, кровяного давления и регуляции сосудистых текучих веществ через диуретическое действие. Например, сообщалось о действии ANP, оказываемом на индуцированное бактериальное инфекцией воспаление и ассоциированный отказ функции эндотелиального барьера (см., например, Xing J., et al., J. appl. Physiol., 2011, 110 (1), 213-224).
Существует необходимость в натрийуретических пептидах, обладающих увеличенным временем полужизни и активностью. Настоящее изобретение стремится удовлетворить эту потребность и предусматривает дополнительные связанные преимущества. Например, настоящее изобретение предусматривает новые композиции с, к удивлению, увеличенной активностью, как измеряют по увеличению cGMP.
- 1 044180
Краткое изложение
Настоящее изобретение предусматривает производное натрийуретического пептида формулы (I) или композицию, содержащую производное натрийуретического пептида формулы (I)
I (жирный ацил)z-(В)х-(G)y-NP (I) , где z представляет собой 1, x представляет собой целое от 2 до 4 и y представляет собой 3 или z представляет собой 0, x представляет собой целое от 0 до 4 и y представляет собой целое от 1 до 3; жирный ацил содержит от 12 до 24 (например, от 12 до 18) атомов углерода;
В представляет собой лизин или аргинин;
G представляет собой глицин;
NP представляет собой натрийуретический пептид;
если присутствует, (жирный ацил)2- ковалентно связывают с N-концом в (В)х;
(жирный ацил)2-(B)x- ковалентно связывают с N-концом в (G)y; и (жирный ацил)2-(B)x-(G)у- ковалентно связывают с N-концом в NP.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, увеличивает уровень cGMP крови при парентеральном введении млекопитающему до уровня выше, чем натрийуретический пептид NP при парентеральном введении млекопитающему в эквивалентной дозе (например, доза в моль/кг, доза в мг/кг или доза как в моль/кг, так и в мг/кг). Как используют в настоящем описании, поскольку производное добавления имеет более низкую дозу в моль/кг, когда дают в равной дозе в мг/кг, то, если активность сравнима при одной и той же дозе в мг/кг, ожидают, что производное добавления более активно в той же дозе в моль/кг.
NP обычно представляет собой родительский натрийуретический пептид, встречающийся в природе у живых организмов. NP можно выбирать из ANP человека (ID последовательности 1), ANP грызуна (ID последовательности 19), BNP человека (ID последовательности 41) и ANP человека (ID последовательности 57).
В одном из вариантов осуществления NP представляет собой ANP человека (ID последовательности 1).
В одном из вариантов осуществления В представляет собой лизин.
Производное натрийуретического пептида или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, в соответствии с изобретением может содержать производное натрийуретического пептида формулы (II)
Iжирный ацил-(В)х-(G) 3-NP (II) , где жирный ацил имеет от 12 до 24 (например, от 12 до 18) атомов углерода;
В представляет собой лизин или аргинин (например, В представляет собой лизин);
x представляет собой 2-4;
G представляет собой глицин;
NP представляет собой натрийуретический пептид;
жирный ацил- ковалентно связывают с N-концом в (В)х;
жирный ацил-(B)x- ковалентно связывают с N-концом в (G)3;
жирный ацил-(B)x-(G)3- ковалентно связывают с N-концом в NP.
При введении млекопитающим производное натрийуретического пептида или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, обычно увеличивает cGMP крови до уровня выше, чем соответствующий родительский NP при введении в эквивалентной дозе (например, доза в моль/кг, доза в мг/кг или доза как в моль/кг, так и в мг/кг).
В одном из вариантов осуществления x представляет собой 2. В одном из вариантов осуществления x представляет собой 3. В одном из вариантов осуществления x представляет собой 4.
В некоторых вариантах осуществления в жирном ациле-(B)x-(G)3-NP, x=4; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.
В некоторых вариантах осуществления в жирном ациле-(B)x-(G)3-NP, x=3; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.
В некоторых вариантах осуществления в жирном ациле-(B)x-(G)3-NP, x=2; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В пред- 2 044180 ставляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и
NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой
ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.
В некоторых вариантах осуществления в жирном ациле-(B)x-(G)3-NP, x=1; NP необязательно выбирают из любой одной из ID последовательностей 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.
В одном из вариантов осуществления жирный ацил содержит 18 атомов углерода.
В одном из вариантов осуществления -(B)x-(G)3- выбирают из -KKGGG-, -KKKGGG- и -KKKKGGG-.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 9, ID последовательности 10, ID последовательности 11, ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID последовательности 56, ID последовательности 82, ID последовательности 52, ID последовательности 113, ID последовательности 68, ID последовательности 122 и ID последовательности 72; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 9, ID последовательности 10, ID последовательности 11, ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID последовательности 56, ID последовательности 82, ID последовательности 52, ID последовательности 113, ID последовательности 68, ID последовательности 122 и ID последовательности 72.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID последовательности 56, ID последовательности 82, ID последовательности 52, ID последовательности 68, ID последовательности 122 и ID последовательности 72; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID последовательности 56, ID последовательности 82, ID последовательности 52, ID последовательности 68, ID последовательности 122 и ID последовательности 72.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 93, ID последовательности 94, ID последовательности 95, ID последовательности 102, ID последовательности 103, ID последовательности 104, ID последовательности 111, ID последовательности 112, ID последовательности 113, ID последовательности 120, ID последовательности 121 и ID последовательности 122, или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 93, ID последовательности 94, ID последовательности 95, ID последовательности 102, ID последовательности 103, ID последовательности 104, ID последовательности 111, ID последовательности 112, ID последовательности 113, ID последовательности 120, ID последовательности 121 и ID последовательности 122.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 18, ID последовательности 34, ID последовательности 56 и ID последовательности 72; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 18, ID последовательности 34, ID последовательности 56 и ID последовательности 72.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 14, ID последовательности 30, ID последовательности 52 и ID последовательности 68; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 14, ID последовательности 30, ID последовательности 52 и ID последовательности 68.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 10, ID последовательности 30, ID последовательности 52 и ID последовательности 68; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 10, ID последовательности 30, ID последовательности 52 и ID последовательности 68.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 9, ID последовательности 10, ID последовательности 11, ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID последовательности 56 и ID последовательности 72; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 9, ID последовательности 10, ID последовательности 11, ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID после- 3 044180 довательности 56 и ID последовательности 72.
В одном из вариантов осуществления, производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 73, ID последовательности 74, ID последовательности 79, ID последовательности 80, ID последовательности 81, ID последовательности 83, ID последовательности 84 и ID последовательности 85; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 73, ID последовательности 74, ID последовательности 79, ID последовательности 80, ID последовательности 81, ID последовательности 83, ID последовательности 84 и ID последовательности 85.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности с 87 до 122; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности с 87 до 122.
Производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, может содержать производное натрийуретического пептида формулы (III):
1(B) х- (G) y~NP (III), где В представляет собой лизин или аргинин (например, В представляет собой лизин);
x представляет собой 0-4;
G представляет собой глицин;
y представляет собой 1-3;
NP представляет собой натрийуретический пептид;
(B)x-(G)y- ковалентно связывают с N-концом в NP.
При введении млекопитающим (B)x-(G)y-NP или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида (B)x-(G)y-NP, может увеличивать cGMP крови до уровня выше, чем соответствующий родительский NP при введении в эквивалентной дозе (например, доза в моль/кг, доза в мг/кг или доза как в моль/кг, так и в мг/кг).
В одном из вариантов осуществления x представляет собой 0. В одном из вариантов осуществления x представляет собой 1. В одном из вариантов осуществления x представляет собой 2. В одном из вариантов осуществления x представляет собой 3. В одном из вариантов осуществления x представляет собой 4. В одном из вариантов осуществления у представляет собой 1. В одном из вариантов осуществления у представляет собой 2. В одном из вариантов осуществления у представляет собой 3.
В некоторых вариантах осуществления в (B)x-(G)y-NP, x=0 и y необязательно представляет собой 1, 2 или 3; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, NP имеет ID последовательности 1; NP имеет ID последовательности 19; NP имеет ID последовательности 41 или ID последовательности 57.
В некоторых вариантах осуществления в (B)x-(G)y-NP, y=3; В необязательно представляет собой лизин и x необязательно представляет собой 1, 2, 3 или 4; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, NP имеет ID последовательности 1; NP имеет ID последовательности 19; NP имеет ID последовательности 41 или ID последовательности 57.
В одном из вариантов осуществления у представляет собой 3.
В одном из вариантов осуществления (B)x-(G)y- выбирают из G-, GG-, -GGG-, KGGG- и KKKKGGG-.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 2, ID последовательности 3, ID последовательности 4, ID последовательности 5, ID последовательности 8 и ID последовательности 44; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 2, ID последовательности 3, ID последовательности 4, ID последовательности 5, ID последовательности 8 и ID последовательности 44.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую производное натрийуретического пептида, как определено в настоящем описании, и эксципиент.
Фармацевтическая композиция может содержать, состоять по существу из или состоять из одного или нескольких производных натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием и эксципиента.
В одном из вариантов осуществления фармацевтическая композиция предназначена для парентерального введения при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки или при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки, чтобы увеличивать cGMP для лечения заболевания. В некоторых вариантах осуществления заболевание выбирают из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца. В определенных вариантах осуществления заболевание представляет собой заболевание сердца.
Настоящее изобретение также предусматривает производное натрийуретического пептида в соот- 4 044180 ветствии с раскрытием или композицию, содержащую производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием, для использования в лечении заболевания. Заболевание можно выбирать из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца. В одном из вариантов осуществления заболевание представляет собой заболевание сердца.
В одном из вариантов осуществления лечение заболевания включает парентеральное введение пациенту производного натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием или композиции, содержащей производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием, при дозе меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает способ лечения заболевания у пациента, способ включает парентеральное введение пациенту производного натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием или композиции, содержащей производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием.
Способ может включать парентеральное введение фармацевтической композиции, содержащей, состоящей по существу из или состоящей из одного или нескольких производных натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием.
Производное натрийуретического пептида или композицию, содержащую производное натрийуретического пептида, можно вводить парентерально при дозе меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки или при дозе меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки для того, чтобы увеличивать cGMP крови у пациента. В некоторых вариантах осуществления заболевание выбирают из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца. В определенных вариантах осуществления заболевание представляет собой заболевание сердца.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает способ увеличения cGMP крови у пациента, способ включает парентеральное введение пациенту, нуждающемуся в этом, производного натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием или композиции, содержащей производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием.
Производное натрийуретического пептида или композицию, содержащую производное натрийуретического пептида, можно вводить парентерально при дозе меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки или при дозе меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки.
Настоящее изобретение также предусматривает использование производного натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием или композиции, содержащей производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием, для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания. Заболевание можно выбирать из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца.
Подробное описание
Настоящее изобретение относится к производным натрийуретического пептида или их композициям, которые обладают неожиданно превосходящей способностью увеличивать cGMP крови и/или внутриклеточный cGMP in vivo по сравнению с нативным пептидом, таким как предсердный натрийуретический пептид (ANP), или натрийуретический пептид головного мозга (BNP), или натрийуретический пептид с-типа (CNP). Как описано выше, ANP, BNP и CNP представляют собой пептиды, обладающие циклической структурой, необходимой для их активности, которую делают возможной благодаря присутствию дисульфидных связей. Производные натрийуретического пептида по настоящему изобретению также могут иметь внутримолекулярные дисульфидные связи (между двумя остатками цистеина), что ведет к циклической структуре. Внутримолекулярные дисульфидные связи можно формировать в разбавленном растворе самопроизвольно или с использованием подходящего окислителя. Формирование внутримолекулярного дисульфидного мостика можно подтвердить посредством анализа HPLC/MS.
Как используют в настоящем описании, производное добавления или производное удлинения относится к пептидному производному, где основная аминокислотная последовательность остова для пептида остается той же, но добавление дополнительных функциональных групп и/или аминокислоты к основной аминокислотной последовательности с использованием одного или нескольких реакционноспособных фрагментов в основной аминокислотной последовательности дает производное добавления или производное удлинения. Производное добавления или производное удлинения отличается от производного усечения и/или замены пептида, где одну или несколько аминокислот в основной аминокислотной последовательности остова пептида удаляют и/или заменяют на другие функциональные группы и/или аминокислоты соответственно.
Полагают, что изменение аминокислотной последовательности пептидов может иметь непредсказуемые последствия, оказываемые на их биологическую активность, и изменения, которые сохраняют активность пептида, являются неочевидными и непредсказуемыми. В настоящем изобретении описаны конкретные структурные изменения встречаемого в природе натрийуретического пептида (NP). Как используют в настоящем описании, встречаемый в природе натрийуретический пептид обозначают на всем протяжении как родительский пептид или родительский NP, неограничивающие примеры которого представляют собой SEQ ID NO: 1 (ANP человека), SEQ ID NO: 19 (ANP грызуна), SEQ ID NO: 41 (BNP человека) и SEQ ID NO: 57 (CNP человека). В кратком изложении, конкретные изменения родительского NP вели к удивительно неожиданному усилению или увеличенной силе по сравнению с родительским
- 5 044180
NP in vivo, как измеряют по ответу cGMP крови, тогда как другие изменения вели к утрате активности.
Как используют в настоящем описании, термин сила относится к увеличению cGMP крови непосредственно (0-2 ч) после введения болюса относительно родительского нативного пептида в равной дозе.
Как используют в настоящем описании, термин кажущееся истощение рецептора является синонимом истощения рецептора и относится к утрате способности пептида иметь замедленный эффект, наблюдаемый как повышенный cGMP крови в более позднее время (т.е. 6 ч и позже).
Как используют в настоящем описании, термин замедленный эффект является синонимом замедленного повышения cGMP и относится к способности натрийуретического пептида поддерживать повышенный уровень cGMP крови в течение по меньшей мере 6 ч после одного введения болюса пептида.
Как используют в настоящем описании, термин состоящий по существу из или состоит по существу из относится к композиции, содержащей перечисленные компоненты, а также другие компоненты при условии, что другие компоненты существенно не влияют на важные характеристики композиции (например, биодоступность, фармакокинетика, токсичность и/или индукция супрессии активности активного ингредиента).
Как используют в настоящем документе, при описании размеров, измерения, длительности, количества и т.д. термин приблизительно обозначает возможное различие в ±5%.
Как используют в настоящем описании, термин жирный ацил относится к любой ацильной группе, происходящей из жирных кислот, включая насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты. Например, типичная жирная ацильная группа, происходящая из ненасыщенных жирных кислот, имеет формулу Н2α.b(С)α(О)-, где a может представлять собой от 12 до 24 (например, от 14 до 24, от 16 до 24, от 18 до 24, от 20 до 24, от 22 до 24, от 12 до 22, от 12 до 20, от 12 до 18, от 12 до 16, от 12 до 14, 12, 14, 16, 18, 20, 22 или 24) и b может представлять собой 1, 3, 5 или 7 (например, 1, 3 или 5; 1 или 3; или 1). Эта формула представляет жирный ацил, происходящий из насыщенных разветвленных и неразветвленных жирных кислот и жирной кислоты с уровнем ненасыщенности от нуля (т.е. b=1) до 3 (т.е. b представляет собой 3, когда углеродная цепь жирной кислоты содержит одну двойную связь, b представляет собой 5, когда углеродная цепь жирной кислоты содержит две двойные связи, и b представляет собой 7, когда углеродная цепь жирной кислоты содержит три двойные связи). Например, производное натрийуретического пептида формулы (I) может иметь формулу Н2а.b(C)a(O)-(B)x-(G)3-NP, где а составляет от 12 до 24 и b может составлять 1, 3, 5 или 7.
В некоторых вариантах осуществления типичная жирная ацильная группа, происходящая из насыщенных жирных кислот, имеет формулу CH3(CH2)nC(O)-, содержащую от 12 до 24 атомов углерода (т.е. когда n составляет целое от 10 до 22). Например, производное натрийуретического пептида формулы (I) может иметь формулу CH3(CH2)nC(O)-(B)x-(G)3-NP, где n составляет от 10 до 22 (например, от 12 до 22, от 14 до 22, от 16 до 22, от 18 до 22, от 20 до 22, от 10 до 20, от 10 до 18, от 10 до 16, от 10 до 14, от 10 до 12, 10, 12, 14, 16, 18, 20 или 22). В некоторых вариантах осуществления n составляет от 10 до 14, от 12 до 16, от 14 до 18, от 16 до 20, от 18 до 22 или от 14 до 16. В некоторых вариантах осуществления жирный ацил содержит 12 или 18 атомов углерода (т.е. n составляет 10 или 16). В определенных вариантах осуществления жирный ацил содержит 14 или 20 атомов углерода (т.е. n составляет 12 или 18). В определенных вариантах осуществления жирный ацил содержит 16 или 22 атомов углерода (т.е. n составляет 14 или 20). В определенном варианте осуществления жирный ацил содержит 18 или 24 атомов углерода (т.е. n составляет 16 или 22).
В настоящем описании буквы во всех раскрытых последовательностях представляют стандартные однобуквенные коды аминокислот для встречаемых в природе аминокислот, где коды заглавными буквами обозначают L-аминокислоты, а строчные буквы обозначают D-аминокислоты. Например, глицин можно представлять с помощью G, лизин можно представлять с помощью K и аргинин можно представлять с помощью R.
При использовании аллометрического масштабирования с экспонентой 0,7 (т.е. доза у другого биологического вида = доза мыши/((масса мыши/усредненная масса другого биологического вида)0,7)) 15 мг/кг дозы мышей эквивалентно приблизительно 7,5 мг/кг дозы крысы, приблизительно 2,5 мг/кг дозы собаки и 1,5 мг/кг дозе человека. Как используют в настоящем описании, 15 мг/кг в дозе мыши, как представлено в релевантных примерах данных, понимают как эквивалент приблизительно 7,5 мг/кг дозы крысы, которая является эквивалентом приблизительно 2,5 мг/кг дозы собаки, которая является эквивалентом приблизительно 1,5 мг/кг дозы человека. Дозу 1,5 и 0,3 мг/кг в разделах Краткое изложение и Формула изобретения интерпретируют как дозу человека, если не указано иное.
Композиции
Настоящее изобретение предусматривает производное натрийуретического пептида формулы (I) или его композиции, как определено в настоящем описании.
В одном из вариантов осуществления в формуле (I) z представляет собой 1, x представляет собой 3 или 4 и у представляет собой 3, В представляет собой лизин. В формуле (I) NP может представлять собой ANP человека (ID последовательности 1). В формуле (I) жирный ацил может содержать 12, 18, 20, 22 или
- 6 044180 атомов углерода.
Настоящее изобретение предусматривает производное натрийуретического пептида формулы (II), как определено в настоящем описании.
В одном из вариантов осуществления в формуле (II) x представляет собой 2, 3 или 4 и В представляет собой лизин. В формуле (II) NP может представлять собой ANP человека (ID последовательности 1). В формуле (II), жирный ацил может содержать 12 или 18 атомов углерода. Альтернативно, жирный ацил может содержать от 14 или 18 атомов углерода, от 16 до 18 атомов углерода или от 20 или 24 атома углерода.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида формулы жирный ацил-(B)x-(G)3-NP, где жирный ацил имеет от 12 до 24 (например, от 12 до 18) атомов углерода;
В представляет собой лизин или аргинин (например, В представляет собой лизин);
x представляет собой 2-4;
G представляет собой глицин;
NP представляет собой родительский натрийуретический пептид, встречающийся в природе у живого организма;
жирный ацил- ковалентно связывают с N-концом в (В)х;
жирный ацил-(B)x- ковалентно связывают с N-концом в (G)3;
жирный ацил-(B)x-(G)3- ковалентно связывают с N-концом в NP; и при введении млекопитающим, производное натрийуретического пептида повышает cGMP крови до уровня выше, чем соответствующий родительский NP при введении в эквивалентной дозе (например, доза в моль/кг, доза в мг/кг или доза как в моль/кг, так и в мг/кг).
В некоторых вариантах осуществления в формуле жирный ацил-(B)x-(G)3-NP, x=4; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.
В некоторых вариантах осуществления в формуле жирный ацил-(B)x-(G)3-NP, x=3; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.
В некоторых вариантах осуществления в формуле жирный ацил-(B)x-(G)3-NP, x=2; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.
В некоторых вариантах осуществления в формуле жирный ацил-(B)x-(G)3-NP, x=1; NP необязательно выбирают из любой одной из ID последовательностей 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.
Настоящее изобретение предусматривает производное натрийуретического пептида формулы (III), как определено в настоящем описании.
В одном из вариантов осуществления в формуле (III) x представляет собой 0, 1, 2, 3 или 4 и В представляет собой лизин. Например, в формуле (III) x может составлять от 2 до 4, например 3. В формуле (III) NP может представлять собой ANP человека (ID последовательности 1).
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида формулы (B)x-(G)y-NP, где В представляет собой лизин или аргинин (например, В представляет собой лизин);
x представляет собой 0-4;
G представляет собой глицин;
у представляет собой 1-3;
NP представляет собой родительский натрийуретический пептид, встречающийся в природе у живого организма;
(B)x-(G)y- ковалентно связывают с N-концом в NP; и
- 7 044180 при введении млекопитающим (B)x-(G)y-NP повышает cGMP крови до уровня выше, чем соответствующий родительский NP при введении в эквивалентной дозе (например, доза в моль/кг, доза в мг/кг или доза как в моль/кг, так и в мг/кг).
В некоторых вариантах осуществления в формуле (B)x-(G)y-NP x=0 и у необязательно представляет собой 1, 2 или 3; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, NP имеет ID последовательности 1; NP имеет ID последовательности 19; NP имеет ID последовательности 41 или ID последовательности 57.
В некоторых вариантах осуществления в формуле (B)x-(G)y-NP y=3; В необязательно представляет собой лизин и x необязательно представляет собой 1, 2, 3 или 4; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, NP имеет ID последовательности 1; NP имеет ID последовательности 19; NP имеет ID последовательности 41 или ID последовательности 57.
В некоторых вариантах осуществления, когда В представляет собой лизин или аргинин, каждый В в (В)х может представлять собой одно и то же или различное. Например, (В)х может представлять собой K, R, RR, KK, KR, RK, RRR, KKK, KRR, RKR, RRK, KKR, KRK, RKK, RRRR, KKKK, KRRR, RKRR, RRKR, RRRK, KKRR, RKKR, RRKK, KRRK, KKKR. RKKK, KRKK, KKRK, KKKR, RRRR или KKKK.
В некоторых вариантах осуществления производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием может представлять собой производное натрийуретического пептида, как определено в любом одном из ID последовательностей с 2 до 18, с 20 до 34, с 42 до 56 и с 58 до 72.
В некоторых вариантах осуществления производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием может представлять собой производное натрийуретического пептида, как определено в любом одном из ID последовательностей с 73 до 86, с 87 до 95, с 96 до 104, с 105 до 113 и с 114 до 122.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 9, ID последовательности 10, ID последовательности 11, ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID последовательности 56 и ID последовательности 72.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 2, ID последовательности 3, ID последовательности 4, ID последовательности 5, ID последовательности 8 и ID последовательности 44.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу жирный ацил-(B)x-(G)3-NP или (В)х-(G)y-NP, можно в общем представлять формулой Х-пептид.
В одном из аспектов в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид, или их композиции, где фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из G, GG, GGG, BGGG, BBGGG, BBBGGG и BBBBGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы Х-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из GG, GGG, BGGG, BBGGG, BBBGGG и BBBBGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы Х-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из GGG, BGGG, BBGGG, BBBGGG и BBBBGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы Х-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из BGGG, BBGGG, BBBGGG и BBBBGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы Х-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из BBGGG, BBBGGG и BBBBGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из BBBGGG и BBBBGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X представляет собой BBBBGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В указанных выше вариантах осуществления для cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, последняя G представляет собой глицин и В представляет собой лизин или аргинин. В некоторых вариантах осуществления в любом из указанных выше вариантов осуществления для cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, последняя G представляет собой глицин и В представляет собой лизин (см., например, SEQ ID NO: 5-8, 21-26, 45-48 и 61-64). cGMP-увеличивающие производных натрийуретического пептида формулы X-пептид могут увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем их родительский натрийуретический пептид (ANP, BNP или CNP). В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида формулы X-пептид увеличивают уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который выше, чем их родитель- 8 044180 ский натрийуретический пептид (ANP, BNP или CNP). Родительский натрийуретический пептид ANP,
BNP и CNP может иметь последовательности, встречающиеся в природе у позвоночных животных или, более конкретно, встречающийся у млекопитающих натрийуретических пептид (например, SEQ ID NO:
1, 19, 41 или 57).
В другом аспекте в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид, или их композиции, где фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из CH3(CH2)10COKKKKGGG, CH3(CH2)12COKKKKGGG, CH3(CH2)14COKKKKGGG и CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из CH3(CH2)14COKKKKGGG и CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X представляет собой и CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В указанных выше вариантах осуществления для cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, последняя G представляет собой глицин, К представляет собой лизин и группы CH3(CH2)[10, 12, 14 или 16]СО представляют собой стандартную химическую формулу для алкилкарбонила и нижний индекс [10, 12, 14 или 16] представляет число групп СН2 в цепи алкила. cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида формулы X-пептид могут увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем их родительский натрийуретический пептид (ANP, BNP или CNP). В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида формулы X-пептид увеличивают уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который выше, чем их родительский натрийуретический пептид (ANP, BNP или CNP). Родительский натрийуретический пептид ANP, BNP и CNP может иметь последовательности, встречающиеся в природе у позвоночных животных, или более конкретно встречающийся у млекопитающих натрийуретический пептид (например, SEQ ID NO: 1, 19, 41 или 57).
В еще одном аспекте в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид, или их композиции, где фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из CH3(CH2)10CORRRRGGG, CH3(CH2)12CORRRRGGG, CH3(CH2)14CORRRRGGG и CH3(CH2)16CORRRRGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из CH3(CH2)10CORRRRGGG и CH3(CH2)16CORRRRGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X представляет собой CH3(CH2)16CORRRRGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В указанных выше вариантах осуществления для cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, последняя G представляет собой глицин, R представляет собой аргинин, и группы СН3(СН2)[10, 12, 14 или 16]СО представляют собой стандартную химическую формулу для алкилкарбонила и [10, 12, 14 или 16] представляет число групп СН2 в цепи алкила. cGMPувеличивающие производные натрийуретического пептида формулы X-пептид могут увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем их родительский натрийуретический пептид (ANP, BNP или CNP). В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида формулы X-пептид увеличивают уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который выше, чем их родительский натрийуретический пептид (ANP, BNP или CNP). Родительский натрийуретический пептид ANP, BNP и CNP может иметь последовательности, встречающиеся в природе у позвоночных животных, или более конкретно встречающийся у млекопитающих натрийуретический пептид (например, SEQ ID NO: 1, 19, 41 или 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой GG (G = глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. Например, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 3, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP
- 9 044180
SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве другого примера X-пептид представляет собой ID последовательности 21, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 43, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 59, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой G (глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 2, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 20, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 42, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41).
В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 58, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMPувеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой GGG (G = глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 4, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 22, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 44, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH выше, чем) их родительский натрийуретический пептид (ID последовательности 41). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 60, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет со
- 10 044180 бой ANP, BNP или CNP и X представляет собой KGGG (K = лизин, G = глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 5, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 23, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда Xпептид представляет собой ID последовательности 45, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSsGlgCkVLRRH (ID последовательности 41).
В качестве другого примера, В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 61, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой KKGGG (K = лизин, G = глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 6, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 24, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 46, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 62, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющего формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой KKKGGG (K = лизин, G = глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 7, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 25, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 47, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови
- 11 044180 после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В качестве еще одного другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 63, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMPувеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой KKKKGGG (K = лизин, G = глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 8, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 26, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве еще одного другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 48, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41).
В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 64, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой CH3(CH2)pCOKKGGG (K = лизин, G = глицин и CH3(CH2)pCO представляет стандартную химическую формулу для алкилкарбонила, где р представляет собой от 10 до 22 (например, от 10 до 16) и представляет число повторяющихся групп СН2 в цепи алкила), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP или BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид.
В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид ANP представляет собой SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 9, 10, 73 и 74. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 9 (фрагмент пептида представляет собой ANP и X представляет собой CH3(CH2)10COKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 10 (фрагмент пептида представляет собой ANP и X представляет собой CH3(CH2)16COKKGGG, прикрепляемый к Nконцу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид ANP представляет собой SLRRSSCFGGRMIRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19) и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 75-78. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 75 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKGGG, прикреп
- 12 044180 ляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGlGcNSFRY (ID последовательности 19). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 78 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMIRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид BNP представляет собой SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 79-82. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 79 (фрагмент пептида представляет собой BNP и X представляет собой CH3(CH2)10COKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 82 (фрагмент пептида представляет собой BNP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (id последовательности 41).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой CH3(CH2)pCOKKKgGg (K = лизин, G = глицин, группы CH3(CH2)pCO представляют собой стандартную химическую формулу для алкилкарбонила, где р представляет собой от 10 до 22 (например, или от 10 до 16) и представляет число повторяющихся групп СН2 в цепи алкила), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP или BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой CNP, имеющий последовательность GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 83-85. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 83 (фрагмент пептида представляет собой CNP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 85 (фрагмент пептида представляет собой CNP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой ANP, имеющий последовательность SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 11-14. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 11 (фрагмент пептида представляет собой ANP и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 14 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой ANP, имеющий последовательность SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19), и некоторые репрезен
- 13 044180 тативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 27-30. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 27 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 30 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой BNP, имеющий последовательность SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 49-52. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 49 (фрагмент пептида представляет собой BNP и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 52 (фрагмент пептида представляет собой BNP и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой CNP, имеющий последовательность GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 65-68. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 65 (фрагмент пептида представляет собой CNP и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 68 (фрагмент пептида представляет собой CNP и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой CH3(CH2)pCOKKKKGGG (K = лизин, G = глицин, группы CH3(CH2)pCO представляют собой стандартную химическую формулу для алкилкарбонила, где р представляет собой от 10 до 22 (например, или от 10 до 16) и представляет число повторяющихся групп СН2 в цепи алкила), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP или BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой ANP, имеющий последовательность SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 15-18. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 15 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 18 (фрагмент пептида представляет собой ANP и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введе
- 14 044180 ния млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой ANP, имеющий последовательность SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 31-34. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 31 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 34 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой BNP, имеющий последовательность SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 53-56. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 53 (фрагмент пептида представляет собой BNP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 56 (фрагмент пептида представляет собой BNP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой CNP, имеющий последовательность GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 69-72. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 69 (фрагмент пептида представляет собой CNP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 72 (фрагмент пептида представляет собой CNP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).
Фармацевтические композиции и способы использования
Изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую натрийуретический пептид в соответствии с раскрытием и эксципиент. Фармацевтическая композиция может представлять собой фармацевтическую композицию, содержащую, состоящую по существу из или состоящую из одного или нескольких производных натрийуретического пептида, указанных выше, и эксципиента, для парентерального введения при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки или при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки, чтобы увеличивать cGMP для лечения заболевания.
В некоторых вариантах осуществления доза производных натрийуретического пептида составляет более чем 0,0001 мг/кг массы тела в сутки. Например, доза производных натрийуретического пептида может составлять более чем 0,0001 и/или меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки. В некоторых вариантах осуществления доза производных натрийуретического пептида составляет более чем 0,0001 и/или меньше чем 1,0 мг/кг массы тела в сутки или больше чем 0,0001 и/или меньше чем 0,5 мг/кг массы тела в сутки. В некоторых вариантах осуществления доза производных натрийуретического пептида составляет более чем 0,0001 и/или меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки.
В некоторых вариантах осуществления заболевание выбирают из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца. В определенных вариантах осуществления заболевание представляет собой заболевание сердца.
В еще одном дополнительном аспекте настоящее изобретение отличается способом лечения заболевания у пациента, включающим, состоящим по существу из или состоящим из парентерального введе
- 15 044180 ния пациенту одного или нескольких производных натрийуретического пептида, указанных выше, или фармацевтической композиции, содержащей, состоящей по существу из или состоящей из одного или нескольких производных натрийуретического пептида, указанных выше, при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки или при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки для того, чтобы увеличивать cGMP крови у пациента. В некоторых вариантах осуществления заболевание выбирают из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца. В определенных вариантах осуществления заболевание представляет собой заболевание сердца.
В еще одном дополнительном аспекте настоящее изобретение отличается способом увеличения cGMP крови у пациента, включающим, состоящим по существу из или состоящим из парентерального введения пациенту, нуждающемуся в этом, одного или нескольких натрийуретических производных, указанных выше, или фармацевтической композиции, содержащей, состоящей по существу из или состоящей из одного или нескольких производных натрийуретического пептида, указанных выше, при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки или при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки.
В еще одном аспекте в настоящем изобретении описаны фармацевтические композиции, содержащие (состоящие по существу из или состоящие из) любого из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид, описанную выше вместе с одним или несколькими подходящими эксципиентами, для парентерального и/или подкожного использования в дозе (cGMP-увеличивающего производного) меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки (например, меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки) для того, чтобы увеличивать cGMP, например, чтобы увеличивать cGMP у млекопитающих для того, чтобы лечить заболевания, которые можно улучшать посредством увеличения cGMP (например, cGMP крови). Также предусмотрены способы лечения заболеваний, которые можно улучшать посредством увеличения cGMP (например, cGMP крови), и/или увеличения cGMP (например, cGMP крови), включающие (состоящие по существу из или состоящие из парентерального и/или подкожного введения любых cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид, описанную выше вместе с одним или несколькими подходящими эксципиентами, при дозе (cGMP-увеличивающего производного) меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки (например, меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки). В некоторых вариантах осуществления заболевания, которые можно улучшать посредством увеличения cGMP (например, cGMP крови) включают, состоят по существу из или состоят из гипертензии, сосудистого застоя, заболевания сердца; и лечение может включать, состоять по существу из или состоять из парентерального и/или подкожного введения любого из cGMPувеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид, описанную выше, вместе с одним или несколькими подходящими эксципиентами, при дозе (cGMP-увеличивающего производного) меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки (например, меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки). В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения, выбирают из ID последовательности 2-18, 20-35, 37, 38, 42-56 и 58-85, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 2-8, 20-26, 42-48 и 58-64, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 9-18, 27-35, 37, 38, 49-56 и 65-122, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 9, 10, 73-89, 96-98, 105-107 и 114-116, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 9, 75, 79 и 83, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 10, 78, 82 и 86, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 10, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 78, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 82, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых
- 16 044180 вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 86, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 11-14, 27-30, 49-52, 65-68, 90-92, 99-101, 108-110 и 117-119, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 11, 14, 27, 30, 49, 52, 65 и 68, которое вводят при дозе, указанной выше.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 96-122, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 102-104, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 11, 27, 49 и 65, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 11, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 27, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 49, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 65, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 14, 30, 52 и 68, которое вводят при дозе, указанной выше.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 14, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 30, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 52, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 68, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 15-18, 31-34, 53-56, 69-72, 93-95, 102-104, 111-113 и 120-122, которое вводят при дозе, указанной выше.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 15, 18, 31, 34, 53, 56, 69 и 72, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 15, 31, 53 и 69, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 15, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 31, которое вводят при дозе, указанной выше.
- 17 044180
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 53, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 69, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 18, 34, 56 и 72, которое вводят при дозе, указанной выше.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 18, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 34, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 56, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 72, которое вводят при дозе, указанной выше.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 93, 102, 111 и 120, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 93, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 102, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 111, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 120, которое вводят при дозе, указанной выше.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 94, 103, 112 и 121, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 94, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 103, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 112, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 121, которое вводят при дозе, указанной выше.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 95, 104, 113 и 122, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 95, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 104, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет
- 18 044180 собой ID последовательности 113, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу
X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой
ID последовательности 122, которое вводят при дозе, указанной выше.
Следующий пример включен с целью иллюстрации, не ограничения, описанных вариантов осуществления.
Пример
Многие возможные пути доступны для того, чтобы увеличивать cGMP in vivo для терапевтических целей, такие как введение экзогенного cGMP или лигандов, которые увеличивают продуцирование эндогенного cGMP или снижают его разрушение. Экзогенный лиганд может стремиться влиять на многие различные эндогенные мишени/рецепторы, включая стимуляцию пути оксида азота (I), ингибирование фосфодиэстеразы, которая разрушает cGMP, или стимуляцию различных рецепторов натрийуретических пептидов (NPRA или NPRB).
Осуществляли исследование для того, чтобы определять, оказывает ли пролонгированное присутствие ANP в крови замедленный фармакодинамический эффект, отражаемый в повышении концентрации cGMP крови, и чтобы определять, будет ли это повышение пропорциональным уровню ANP. Определяли уровень cGMP крови относительно ANP. К удивлению, несмотря на повышенный уровень ANP в часы 2 и 8, уровень cGMP не оставался повышенным, что указывает на то, что длительно действующие составы нативного ANP для поддержания уровня ANP крови на повышенным уровне могут не работать, как ожидалось. Эта проблема не задокументирована в литературе, и отсутствовала причина для решения этой ранее неизвестной проблемы. Существует две возможности для объяснения этого наблюдения: 1) обнаруживаемый ANP может быть неактивным или 2) переполнение рецептора ANP может вести к истощению рецептора. Чтобы исследовать, будет ли переполнение рецепторов ANP вести к утрате ответа в более поздний момент времени и одновременно исключить первую возможность, осуществляли исследование, чтобы установить, можно ли восстанавливать повышение cGMP плазмы после второго введения свежего и (заведомо) активного ANP. Для этого исследования использовали 4 группы мышей Balb/c (п=3/группа; самки в возрасте 5-6 недель; 18-25 г) и оценивали уровни cGMP в различные моменты времени после введения ANP со вторым введением ANP и без него. Высокую дозу специально использовали для того, чтобы гарантировать, что, если наступало истощение рецептора, это происходило при первой дозе и нулевой или минимальный ответ возникал после второй дозы. Оценивали два последующих s.c. (подкожных) введения ANP, сформулированного в полимерном эксципиенте (для того чтобы увеличивать стабильность in vivo). Кровь брали перед дозированием (0 ч), через 2 и 8 ч после дозирования. Две группы дозирования получали вторую дозу через 6 ч. Образцы крови (100 мкл/точка) брали из ретроорбитального синуса и помещали в охлажденные пробирки, содержащие EDTA дикалия. Образцы крови центрифугировали на 13000 об/мин в течение 10 мин при 4°С для того, чтобы отделять плазму. Образцы плазмы анализировали на cGMP с использованием набора cGMP ELISA (GE Healthcare Life Sciences, Marlborough, MA) в соответствии с протоколом производителя. Полная процедура включала: 1) измерить базовый уровень cGMP перед введением; 2) инъецировать ANP и измерить максимальный ответ через 2 ч; 3) инъецировать второй ANP через 6 ч и измерить максимальный ответ cGMP через 8 ч, чтобы видеть, если будет достигнуто дополнительное повышение cGMP. Если дополнительно имело место повышение, которое по меньшей мере равно или больше момента времени 2 ч, то имела место утрата ответа и рецептор может не быть истощен даже при высокой дозе. Если ответ через 8 ч меньше, чем ответ через 2 ч, то разумно предположить, что происходило истощение рецептора; 4) инъецировать более высокую дозу, чтобы видеть ответ на дозу. Если ответ на дозу не наблюдали, то рецептор был истощен или насыщен. Однако известно, что комплексы ANP-рецептор подвергались интернализации клетками, что может вести к истощению, если запас рецептора ограничен. Уровень ANP, ассоциированный с cGMP, также измеряли для того, чтобы подтверждать, что истощение рецептора было результатом отсутствия восприимчивости, если это имеет место. Ассоциированный уровень ANP измеряли с использованием набора для анализа ELISA (GE Healthcare Life Sciences, Marlborough, MA) в соответствии с протоколом производителя. Результаты этого исследования представлены в табл. 1.
Результаты показывали, что, когда предпринимали попытку стимуляции NPRA с использованием экзогенно вводимого предсердного натрийуретического пептида (ANP), способность натрийуретического пептида увеличивать cGMP in vivo выглядела ограниченной кажущимся истощением рецептора при непрерывной лигандной стимуляции при высокой дозе. Когда мышам давали болюс ANP (12 мг/кг; s.c), уровень cGMP крови возрастал приблизительно на 80 пмоль/мл выше базового уровня через 2 ч и возвращался к базовому уровню (40 пмоль/мл) через 8 ч. Однако когда второй болюс ANP давали через 6 ч, уровень cGMP крови не возрастал на ожидаемые дополнительные 80 пмоль/мл через 8 ч, если не происходило истощение рецептора (см. табл. 1).
- 19 044180
Таблица 1
Результаты, показывающие, что имело место кажущееся истощение рецептора ANP
| Базовый уровень 0 ч Уровень cGMP пмоль/мл (SEM) Уровень ANP нг/мл (SEM) | 2ч Уровень cGMP пмоль/мл (SEM) Уровень ANP нг/мл (SEM) | 8ч Уровень cGMP пмоль/мл (SEM) Уровень ANP нг/мл (SEM) | Время инъекции | |
| ANP 6 мг/кг (s.c; п=3) | Уровень cGMP: 42,4 (5,6) уровень ANP: 0,096 (0) | Уровень cGMP: 106,1 (10,3) уровень ANP: 32,62 (4,92) | Уровень cGMP: 34,9 (3,6) уровень ANP: 57,51 (65,96) | Одна инъекция только в 0 часов |
| ANP 6 мг/кг | Уровень cGMP: | Уровень cGMP: | Уровень cGMP: | Инъекция в 0 ч |
| (s.c; п=3) | 45,5 (7,0) уровень ANP: 0,096 (0) | 134,9 (25,5) уровень ANP: 32,62 (4,92) | 87,6 (3,3) уровень ANP: 89,15 | и 6 часов |
| ANP 12 мг/кг (s.c; п=3) | Уровень cGMP: 45,5 (7,0) уровень ANP: 0,096 (0) | Уровень cGMP: 122,0 (29,4) уровень ANP: 67,24 (6,92) | Уровень cGMP: 45,5 (6,0) уровень ANP: 115,02 (3,98) | Одна инъекция только в 0 часов |
| ANP 12 мг/кг (s.c; п=3) | Уровень cGMP: 45,5 (7,0) уровень ANP: 0,096 (0) | Уровень cGMP: 113,6 (3,1)* уровень ANP: 67,24 (6,92)* | Уровень cGMP: 70,1 (16,2)* уровень ANP: 182(10,2)* | Инъекция в 0 часов и 6 часов |
*Следует отметить, что уровень cGMP крови через 2 ч после введения однократной дозы составлял 113 пмоль/мл при соответствующем уровне ANP 67 нг/мл. Однако если отсутствовало истощение рецептора, можно ожидать, что при втором введении через 6 ч уровень cGMP через 8 ч (2 ч после второго введения) будет значительно выше чем 113 пмоль/мл (если не таким же), вместо этого cGMP был значительно ниже. Более низкий уровень cGMP показывал истощение рецептора, что ведет к отсутствию или ограниченному физиологическому ответу, как отражено в измеряемых уровнях cGMP.
Уровни ANP через 2 ч усредняли для всех групп, которые получали одну и ту же дозу, поскольку во всех случаях они получали одно и то же лечение вплоть до 2 ч. Уровни ANP через 8 ч в тех группах, которые получали второе введение, совпадали с суммой уровней через 2 ч и 8 ч из группы одного введения.
Эта новая находка показывала, что, возможно, NPRA (рецептор ANP) может быть истощен при непрерывной стимуляции высокой дозой ANP. В данной области известно, что эффект истощения/интернализации рецептора может быть частью естественного механизма отрицательной обратной связи биологической системы. Единственный известный путь для измерения этой системы состоит в том, чтобы увеличивать экспрессию рецептора NPRA, что сейчас невозможно у не рекомбинантного организма, который нуждается в лечении для того, чтобы увеличивать cGMP крови. Это подсказанное исследование новых лигандов, которые потенциально более активны в отношении увеличения cGMP и могут ограничивать кажущееся истощение рецептора, наблюдали в табл. 1. Нелогично направленно воздействовать на рецептор, который доподлинно истощается (по причине низкого уровня экспрессии) при стимуляции из-за интернализации рецептора, однако будет полезно обнаружить лиганд, который может замедлять интернализацию/истощение рецептора, например, посредством изменения существующего лиганда ANP с использованием модификации, которая может замедлять или предотвращать интернализацию/истощение рецептора, при этом сохраняя или усиливая активность лиганда ANP. Однако изменения существующего пептида ANP имеют непредсказуемые и неочевидные исходы в отношении активности, так что единственный путь для обнаружения активных лигандов для увеличения cGMP крови с ограниченным эффектом интернализации рецептора состоял в итеративном тестировании изменения индивидуального натрийуретического пептида in vivo.
Создавали различные производные ANP и осуществляли их скрининг на увеличение силы in vivo при ограничении эффектов кажущегося истощения рецептора (или, возможно, могут действовать на другие cGMP-увеличивающие рецепторы) посредством изучения уровня cGMP крови в конкретные моменты времени. Любые новые производные, которые активны (указывает уровень cGMP крови через 2 ч) и не вызывают интернализации рецептора (указывает уровень cGMP через 6 ч) по сравнению с контролем
-20044180 родительского пептида ANP, следует квалифицировать как новые потенциальные средства, увеличивающие cGMP крови. Создавали различные производные и тестировали их in vivo для того, чтобы определять уровень cGMP крови через 2 и 6 ч после подкожного введения мышам 15 мг/кг (что представляет собой аллометрический эквивалент дозы человека 1,5 мг/кг), с целью найти производные, которые можно использовать в терапии для увеличения cGMP крови.
Многие из защищенных аминокислотных остатков, которые можно использовать при синтезе различных производных ANP по этому раскрытию, коммерчески доступны у поставщиков аминокислот. Кроме того, все пептиды, которые являются предметом настоящего раскрытия можно синтезировать с помощью внешних общих поставщиков пептидов, таких как Anaspec, San Jose CA. USA, Polypeptide laboratories, Torrance, CA, или ChemPep Inc, Miami, FL. Все пептиды, которые являются предметом настоящего раскрытия синтезировали в соответствии с описаниями строения и получали, очищали и обрабатывали в соответствии с подробными инструкциями. Синтез пептидов по настоящему раскрытию могут легко выполнять специалисты в данной области и, предпочтительно, через твердофазный синтез. В кратком изложении, защищенную аминокислоту, соответствующую С-концу пептида, подлежащего получению (с помощью Fmoc или Boc, как известно в данной области), сначала иммобилизуют или конъюгируют со смолой через карбоксильную группу. За этим следует снятие защитной группы с α-аминогруппы для того, чтобы сделать возможным последующее добавление второй защищенной аминокислоты, после чего следует снятие защитной группы с α-аминогруппы, добавление третьей защищенной аминокислоты, после чего следует снятие защитной группы второй аминокислоты и так далее до тех пор, пока не будет добавлена последняя N-концевая аминокислота или жирная кислота. Отщепление от смолы, снятие защитных групп с функциональных групп аминокислот и очистка схожи со стандартным синтезом пептидов, как известно в данной области. Очистки можно добиваться, используя любые стандартные подходы, такие как жидкостная хроматография высокого давления с обращенной фазой (RP HPLC) на колонках с алкилированным диоксидом кремния, например С4-С18 диоксидом кремния. Такое фракционирование на колонке в целом выполняют посредством запуска линейных градиентов, например, 10-90%, возрастающего % органического растворителя, например ацетонитрила, в водном буфере, обычно содержащем небольшое количество (например, 0,1%) средства для образования пары ионов, такого как трифторуксусная кислота (TFA) или триэтиламин (TEA). Альтернативно, ионнообменную HPLC можно использовать для разделения пептидных частиц на основе их зарядовых характеристик. Собирают фракции колонки, и те, которые содержат пептид желаемой/требуемой чистоты, необязательно объединяют с эталоном для детектора тандемной масс-спектрометрии. Затем пептид обрабатывают установленным образом для замены расщепляющей кислоты (например, TFA) на фармацевтически приемлемый анион кислоты и для того, чтобы сделать возможным формирование внутримолекулярных дисульфидных мостиков в разбавленном растворе с использованием подходящего окислителя. Формирование этого внутримолекулярного дисульфидного мостика можно подтвердить посредством анализа HPLC/MS.
Для 2-точечной оценки cGMP по различным производным, тестовые образцы перед лиофилизацией растворяли в воде (Lonza, Wakersville, MD). Перед использованием, лиофилизированный тестовый образец растворяли в солевом растворе, затем подкожно инъецировали 15 мг/кг самкам мышей CD-1 в возрасте 6-8 недель (n=3). Образцы крови брали через 2 и 6 ч с использованием пробирки для сбора крови K2EDTA. Затем пробирку для сбора центрифугировали на 13000 об/мин в течение 10 мин при 4°С для того, чтобы отделять плазму. Плазму анализировали с использованием cGMP Direct Biotrak EIA (GE Healthcare Life Sciences, Marlborough, MA). Следует отметить, что, используя аллометрическое масштабирование при экспоненте 0,7 [доза у другого вида=доза мыши/((масса мыши/усредненная масса другого биологического вида)0,7)], 15 мг/кг у мышей эквивалентно приблизительно 7,5 мг/кг дозы крысы, приблизительно 2,5 мг/кг дозы собаки и 1,5 мг/кг дозы человека. В целях настоящего раскрытия 15 мг/кг у мышей, как представлено в релевантных примерах данных, следует понимать как эквивалент приблизительно 7,5 мг/кг дозы крысы, которая является эквивалентом приблизительно 2,5 мг/кг дозы собаки, которая является эквивалентом приблизительно 1,5 мг/кг дозы человека. Поскольку ответ cGMP мышей на 15 мг/кг дозу вновь обнаруженных производных (см. табл. 2) достаточно высок, будет разумно использовать суточные дозы, которые ниже чем 15 мг/кг для мышей, 7,5 мг/кг для крысы, 2,5 мг/кг для собаки и 1,5 мг/кг для человека, поскольку любая более высокая доза может вести к слишком большому увеличению cGMP, которое может вести к слишком большому или даже опасному падению кровяного давления, если не сформулировать в системе доставки с очень медленным высвобождением. Фактически, на основе ответа cGMP, более предпочтительно использовать суточные дозы, которые ниже 5 мг/кг для мышей, 1,5 мг/кг для крысы, 0,5 мг/кг для собаки и 0,3 мг/кг для человека. Дополнительно, уровень cGMP крови предпочтительно превышает нормальный базовый уровень в 1,5-3 раза. Нормальный базовый уровень cGMP в крови или плазме составлял приблизительно 20-50 пмоль/мл, но мог слегка варьировать в зависимости от набора для анализа, используемого для измерения уровня.
Результаты представлены в табл. 2. Итеративное тестирование и модификации на С-конце или изменение L-аргинина около N-конца на D-аргинин (ID последовательности 39 и 40) вело к утрате или
- 21 044180 снижению активности. Дополнительно, изменение аминокислоты на С-конце (ID последовательности 37 и 38) вело к ограниченному увеличению активности. Достраивание N-конца (ID последовательности 2-8, 44, 42, 60, 58) с использованием различного числа глицинов и основных аминокислот неожиданно не вело к утрате активности по сравнению с ANP. Однако различные ANP с достроенными N-концами с использованием глицина, основной аминокислоты и добавлением жирной кислоты неожиданно увеличивали силу (см. данные для 2 ч в табл. 2; ID последовательности 9, 10, 11, 14, 15, 18, 56, 72) и предотвращали кажущееся истощение/интернализацию рецептора (см. данные для 6 ч в табл. 2; ID последовательности 15, 18). Схожие результаты наблюдали с использованием других натрийуретических пептидов (достроенные BNP и CNP; ID последовательности 56, 72). Модификации с использованием жирной кислоты без глицина имели слегка увеличенную активность, но не достоверный эффект на кажущуюся интернализацию рецептора по сравнению с контрольным ANP (см. данные для 6 ч в табл. 2; ID последовательности 35).
Таблица 2
Сила (cGMP 2 ч) и истощение рецептора с помощью (cGMP 6 ч) различных пептидов
| ID последовател ьности | Пептидная последовательность | cGMP крови in vivo (пмоль/мл) минус базовый уровень (30 пмоль/мл; п=12) у мышей (п=3) | |
| 2 часа (SEM) | 6 часов (SEM) | ||
| Нет | Нет [30,3 пмоль/мл - базовый уровень составляет 30,3 пмоль/мл (SEM 2,2; п=12)] | 0 (2,2) | 0 (2,2) |
| 1) ANP | SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGC NSFRY | 37,86 (24,54) | -2,44(17,16) |
| 2) G-ANP | GSLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLG CNSFRY | 44,08 (18,37) | -13,85 (4,76) |
| 3) GG-ANP | GGSLRRSSCFGGRMDRIGAQSGL GCNSFRY | 46,79 (31,36) | 0,16(14,42) |
| 4) GGG-ANP | GGGSLRRSSCFGGRMDRIGAQSG LGCNSFRY | 41,66 (23,27) | -11,79 (2,0) |
| 5) KGGG- ANP | KGGGSLRRSSCFGGRMDRIGAQS GLGCNSFRY | 59,96 (45,75) | 44,34 (34,71) |
- 22 044180
| 6) KKGGGANP | KKGGGSLRRS SCFGGRMDRIGAQ SGLGCNSFRY | 28,6 (25,15) | -4,81 (4,37) |
| 7) KKKGGG- ANP | KKKGGGSLRRS SCFGGRMDRIGA Q SGLGCNSFRY | 23,40 (16,18) | -1,19(4,36) |
| 8) KKKKGGG- ANP | KKKKGGGSLRRS SCFGGRMDRIG AQSGLGCNSFRY | 53,00 (32,17) | 15,25 (12,73) |
| 35) C18- KKKK-ANP | CH3(CH2)16CO- KKKKSLRRSSCFGGRMDRIGAQS GLGCNSFRY | 45,00 (17,17) | 12,79 (6,65) |
| 36) C18- KKKK-ANP (np.) | CH3(CH2)16CO- KKKKSLRRSSCFGGRMDRIGAQS GLGCNSFrY | неактивный | неактивный |
| 9) C12KKGGG- ANP | CH3(CH2)10CO- KKGGGSLRRS SCFGGRMDRIGAQ SGLGCNSFRY | 163,62 (53,29) | 4,78 (6,18) |
| 10) C18KKGGG- ANP | CH3(CH2)16CO- KKGGGSLRRS SCFGGRMDRIGAQ SGLGCNSFRY | 183,12 (53,29) | 14,78 (6,18) |
| 11) C12KKKGG G-ANP | CH3(CH2)10CO- KKKGGGSLRRS SCFGGRMDRIGA Q SGLGCNSFRY | 136,16 (38,48) | 10,28 (5,58) |
| 14) C18KKKGG G-ANP | CH3(CH2)16CO- KKKGGGSLRRS SCFGGRMDRIGA Q SGLGCNSFRY | 574,25 (72,22) | 255,75 (9,35) |
| 15) C12KKKKG GG-ANP | CH3(CH2)10CO- KKKKGGGSLRRS SCFGGRMDRIG AQSGLGCNSFRY | 60,52 (25,29) | 3,36(11,04) |
| 18) C18KKKKG GG-ANP | CH3(CH2)16CO- KKKKGGGSLRRS SCFGGRMDRIG AQSGLGCNSFRY | 355,17 (77,44) | 231,65 (64,45) |
| 37) C18- RRR ANP(np.) | CH3(CH2)16CO-RRR- SGRGGGCFGGRMDRIGAQ SGLG CNSFRY | 45,61 (30,45) | 10,16(6,53) |
- 23 044180
| 38) С18- RRR- ΑΝΡ(πρ.) | CH3(CH2)16CO-RRR- SGRGSGCFGGRMDRIGAQSGLG CNSFRY | 33,56 (13,03) | 7,97 (6,01) |
| 39) С18- RRR ΑΝΡ(πρ.) | CH3(CH2)16CO-RRR- SLPRSSCFGGRMDRIGAQSGLG cnsfry-nh2 | неактивный | Неактивный |
| 40) С18- RRR ΑΝΡ(πρ.) | CH3(CH2)16CO-RRR- SLPRSSCFGGRM DRIGAQSGLG CNSFrY-NH2 | Неактивный | неактивный |
| 41) BNP | SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSG LGCKVLRRH | 49,77 (19,06) | 8,20 (7,80) |
| 56) C18KKKKG GG-BNP | CH3(CH2)16COKKKKGGGSPKMVQ GSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVL RRH | 479,02 (96,56) | 321,23 (46,78) |
| 44) GGG- BNP | GGGSPKMVQGSGCFGRKMDRIS S SSGLGCKVLRRH | 66,59 (4,18) | -5,01 (9,18) |
| 42) G-BNP | G SPKMVQGSGCFGRKMDRIS S S S GLGCKVLRRH | 18,04 (4,68) | 2,14(7,06) |
| 82) C18- KKGGG- BNP | CH3(CH2)16COKKGGGSPKMVQGS GCFGRKMDRIS SS SGLGCKVLRR H | 282,58 (34,04) | 343,62 (55,24) |
| 52) C18- KKKGGG- BNP | CH3(CH2)16COKKKGGGSPKMVQG SGCFGRKMDRISS S SGLGCKVLR RH | 801,3 (93,1) | 653,17(67,48) |
| ИЗ) C24- KKKKGGG- BNP | CH3(CH2)22COKKKKGGGSPKMVQ GSGCFGRKMDRISS S SGLGCKVL RRH | 119,14 (36,08) | 108,33 (34,96) |
| 57) CNP | GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC | 93,75 (9,85) | 24,55 (5,39) |
| 72) C18KKKKGG G-CNP | CH3(CH2)16COKKKKGGGGLSKGC FGLKLDRIGSMSGLGC | 544,99 (119,32) | 368,29 (47,63) |
| 60) GGG- | GGGGLSKGCFGLKLDRIGSMSGL | 49,98 (24,34) | 16,85 (11,74) |
| CNP | GC | ||
| 58) G-CNP | GGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC | 27,09 (15,60) | 5,10(6,27) |
| 86) C18- KKGGG- CNP | CH3(CH2)16COKKGGGGLSKGCFG LKLDRIGSMSGLGC | 80,2 (15,69) | 42,37 (1,49) |
| 68) C18- KKKGGG- CNP | CH3(CH2)16COKKKGGGGLSKGCF GLKLDRIGSMSGLGC | 330,29 (35,56) | 250,33 (16,29) |
| 122) C24- KKKKGGG- CNP | CH3(CH2)22COKKKKGGGGLSKGC FGLKLDRIGSMSGLGC | 251,92 (85,08) | 209,24 (47,4) |
Как используют в настоящем описании, доза 1,5 мг/кг для человека также будет эквивалентом 15 мг/кг у мышей, как представлено в релевантных примерах данных, которая является эквивалентом приблизительно 7,5 мг/кг дозе крысы, которая является эквивалентом приблизительно 2,5 мг/кг дозе собаки, которая является эквивалентом приблизительно 1,5 мг/кг дозе человека. Поскольку ответ мышей на 15 мг/кг достаточно высок для вновь обнаруженных производных (см. табл. 2), разумно использовать
Claims (19)
- дозы, которые ниже чем 15 мг/кг для мышей, 7,5 мг/кг для крысы, 2,5 мг/кг для собаки и 1,5 мг/кг для человека, поскольку любая более высокая доза может вести к слишком большому увеличению cGMP, которое может вести к слишком большому или даже опасному падению кровяного давления, если не сформулировать в системе доставки с очень медленным высвобождением. Фактически, поскольку уровень cGMP через 2 ч приблизительно в раз выше, чем до вычитания фона, более разумно в целях безопасности использовать меньше чем 3 мг/кг для мышей, 1,5 мг/кг для крысы, 0,5 мг/кг для собаки и 0,3 мг/кг для человека. Эти дозы являются консервативными ориентирами в отношении непревышения и представлены здесь с надежностью. Эти вновь раскрытые композиции следует использовать в дозах, которые ниже, чем дозы нативного натрийуретического пептида, при схожих условиях лечения по причине большей силы. Эта большая сила переходит в преимущества в том отношении, что необходимо меньше материала или меньше затрат и меньший объем вводимого лекарственного средства или меньше боли у пациентов. Однако точная терапевтическая доза человека несколько ниже весовой дозы родительского натрийуретического эквивалента не может быть предсказана и не является очевидной, пока не доступны данные по безопасности из клинических испытаний у человека. Несмотря на то, что процесс аллометрического масштабирования в целом предсказывает корректировку дозы от животных к человеку, точный подбор дозы с целью безопасности у человека не может быть выполнен с использованием только аллометрического масштабирования. Тем не менее аллометрического масштабирования достаточно для того, чтобы оценивать наибольшую возможную безопасную начальную дозу для достижения терапевтического эффекта.Несмотря на то, что предпочтительный вариант осуществления изобретения иллюстрирован и описан, следует принимать во внимание, что различные изменения можно выполнять в нем, не отступая от сущности и объема раскрытия.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Натрийуретический пептид формулы (I) |(жирный ацил) z- (В) х- (G) y-NP (I) , где z представляет собой 1, x представляет собой целое от 2 до 4 и у представляет собой 3 или z представляет собой 0, x представляет собой целое от 2 до 4 и у представляет собой целое от 1 до 3; жирный ацил содержит от 12 до 24 атомов углерода;В представляет собой лизин или аргинин;G представляет собой глицин;NP представляет собой натрийуретический пептид;если присутствует, (жирный ацил)z- ковалентно связывают с N-концом в (В)х;(жирный ацил)2-(B)x- ковалентно связывают с N-концом в (G)y и (жирный ацил)z-(B)x-(G)у- ковалентно связывают с N-концом в NP, где натрийуретический пептид повышает уровень cGMP крови при парентеральном введении млекопитающему до уровня выше, чем натрийуретический пептид NP при парентеральном введении млекопитающему в эквивалентной дозе.
- 2. Натрийуретический пептид по п.1, где жирный ацил содержит от 12 до 18 атомов углерода.
- 3. Натрийуретический пептид по п.1 или 2, где эквивалентная доза представляет собой дозу в моль/кг, дозу в мг/кг или дозу как в моль/кг, так и в мг/кг.
- 4. Натрийуретический пептид по п.1, гдеNP выбирают из ANP человека (SEQ ID NO: 1), ANP грызуна (SEQ ID NO: 19), BNP человека (SEQ ID NO: 41) и CNP человека (SEQ ID NO: 57); илиNP представляет собой ANP человека (SEQ ID NO: 1); илиNP представляет собой ANP грызуна (SEQ ID NO: 19); илиNP представляет собой BNP человека (SEQ ID NO: 41); или NP представляет собой CNP человека (SEQ ID NO: 57).
- 5. Натрийуретический пептид по любому одному из пп.1-4, где В представляет собой лизин.
- 6. Натрийуретический пептид по любому одному из пп.1-5, где натрийуретический пептид имеет формулу (II)Iжирный ацил-(В)х-(G) 3-NP (II ) , где жирный ацил содержит от 12 до 24 атомов углерода;В представляет собой лизин или аргинин;х представляет собой целое от 2 до 4;G представляет собой глицин;NP представляет собой натрийуретический пептид;жирный ацил- ковалентно связывают с N-концом в (В)х;- 25 044180 жирный ацил-(В)х- ковалентно связывают с N-концом в (G)3;жирный ацил-(В)х-(С)3- ковалентно связывают с N-концом в NP.
- 7. Натрийуретический пептид по п.6, где жирный ацил содержит от 12 до 18 атомов углерода.
- 8. Натрийуретический пептид по любому одному из пп.1-7, где жирный ацил содержит 18 атомов углерода.
- 9. Натрийуретический пептид по п.6 или 7, где -(В)х-(С)3-выбирают из -KKGGG-, -KKKGGG- и -KKKKGGG-.
- 10. Натрийуретический пептид по любому одному из пп.6-9, где натрийуретический пептид представляет собой одну из SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 113, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 122 и SEQ ID NO: 72; или натрийуретический пептид представляет собой одну из SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 56 и SEQ ID NO: 72; или натрийуретический пептид представляет собой одну из SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 68, SEQ ID NO: 122 и SEQ ID NO: 72; или натрийуретический пептид представляет собой одну из SEQ ID NO: 73, SEQ ID NO: 74, SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 83, SEQ ID NO: 84 и SEQ ID NO: 85; или натрийуретический пептид представляет собой одну из SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 103, SEQ ID NO: 104, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 112, SEQ ID NO: 113, SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 121 и SEQ ID NO: 122.
- 11. Натрийуретический пептид по любому одному из пп.1-5, где натрийуретический пептид имеет формулу (III) (В)„- (GQ-NP (III ) , где В представляет собой лизин или аргинин;х представляет собой целое от 2 до 4;G представляет собой глицин;у представляет собой целое от 1 до 3;NP представляет собой натрийуретический пептид;(B)x-(G)y- ковалентно связывают с N-концом в NP.
- 12. Натрийуретический пептид по п.11, где натрийуретический пептид представляет одну из SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 8 и SEQ ID NO: 44.
- 13. Фармацевтическая композиция, содержащая натрийуретический пептид по любому одному из пп.1-12 и эксципиент.
- 14. Применение натрийуретического пептида, как определено в любом одном из пп.1-12, для лечения заболевания, где заболевание выбирают из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца.
- 15. Применение по п.14, где заболевание представляет собой заболевание сердца.
- 16. Способ лечения гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца у пациента, включающий парентеральное введение пациенту натрийуретического пептида по любому одному из пп.1-12.
- 17. Способ по п.16, в котором натрийуретический пептид по любому из пп.1-12 вводят пациенту при дозе от 0,1 до 1,5 мг/кг в сутки.
- 18. Способ по п.17, где композицию вводят пациенту при дозе от 0,1 до 0,3 мг/кг в сутки.
- 19. Применение натрийуретического пептида по любому одному из пп.1-12 для получения средства для лечения заболевания, где заболевание выбирают из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца.Евразийская патентная организация, ЕАПВРоссия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/475,147 | 2017-03-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA044180B1 true EA044180B1 (ru) | 2023-07-28 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7126270B2 (ja) | Ｎｐｒａアゴニスト、組成物およびその使用 | |
| US11382956B2 (en) | Amylin analogues | |
| AU2016232218B2 (en) | Amylin analogues | |
| AU2021254623B2 (en) | Long-acting adrenomedullin derivative | |
| EP3206707B1 (en) | Fc-ela-32 and its use in the treatment of cardiac conditions | |
| WO2015040182A2 (en) | Amylin analogues | |
| WO2021093883A1 (zh) | 双受体重激动剂化合物及其药物组合物 | |
| EA044180B1 (ru) | Агонисты npra, композиции и их использование | |
| KR20170069997A (ko) | 미리스토일화된 렙틴-관련된 펩티드 및 이들의 용도 | |
| EA042757B1 (ru) | Аналоги амилина |