EA044180B1 - NPRA AGONISTS, COMPOSITIONS AND THEIR USES - Google Patents
NPRA AGONISTS, COMPOSITIONS AND THEIR USES Download PDFInfo
- Publication number
- EA044180B1 EA044180B1 EA201992226 EA044180B1 EA 044180 B1 EA044180 B1 EA 044180B1 EA 201992226 EA201992226 EA 201992226 EA 044180 B1 EA044180 B1 EA 044180B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- seq
- sequence
- peptide
- natriuretic peptide
- cgmp
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 46
- 102100039339 Atrial natriuretic peptide receptor 1 Human genes 0.000 title 1
- 101000961044 Homo sapiens Atrial natriuretic peptide receptor 1 Proteins 0.000 title 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 title 1
- JSOQIZDOEIKRLY-UHFFFAOYSA-N n-propylnitrous amide Chemical compound CCCNN=O JSOQIZDOEIKRLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- 108020001621 Natriuretic Peptide Proteins 0.000 claims description 362
- 102000004571 Natriuretic peptide Human genes 0.000 claims description 362
- 239000000692 natriuretic peptide Substances 0.000 claims description 361
- 101800001890 Atrial natriuretic peptide Proteins 0.000 claims description 131
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 111
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 111
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 78
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 65
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 63
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 63
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 63
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 59
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 39
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 26
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 26
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 19
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 claims description 19
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 14
- 239000004475 Arginine Chemical group 0.000 claims description 12
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 claims description 12
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Chemical group OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 101500027325 Homo sapiens Atrial natriuretic peptide Proteins 0.000 claims description 11
- 125000001924 fatty-acyl group Chemical group 0.000 claims description 11
- 230000009723 vascular congestion Effects 0.000 claims description 11
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical group NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 10
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 claims description 9
- 241000700159 Rattus Species 0.000 claims description 9
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 9
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 claims description 7
- 230000001452 natriuretic effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims description 7
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 claims description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 5
- 101500026735 Homo sapiens Brain natriuretic peptide 32 Proteins 0.000 claims description 4
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 101000749809 Homo sapiens 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase Proteins 0.000 claims description 3
- 101000796277 Homo sapiens C-type natriuretic peptide Proteins 0.000 claims description 3
- 102000047974 human CNP Human genes 0.000 claims description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 2
- ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 3',5'-cyclic GMP Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 0.000 claims 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 claims 1
- 231100000279 safety data Toxicity 0.000 claims 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 claims 1
- ZOOGRGPOEVQQDX-KHLHZJAASA-N cyclic guanosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)O[P@](O)(=O)O[C@@H]1[C@H](O)[C@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 ZOOGRGPOEVQQDX-KHLHZJAASA-N 0.000 description 166
- 101800001288 Atrial natriuretic factor Proteins 0.000 description 160
- 102400001282 Atrial natriuretic peptide Human genes 0.000 description 127
- NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N carperitide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N 0.000 description 123
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 115
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 115
- 101800000407 Brain natriuretic peptide 32 Proteins 0.000 description 86
- 102000012421 C-Type Natriuretic Peptide Human genes 0.000 description 74
- 101800000060 C-type natriuretic peptide Proteins 0.000 description 74
- 102400000667 Brain natriuretic peptide 32 Human genes 0.000 description 73
- 101800002247 Brain natriuretic peptide 45 Proteins 0.000 description 73
- HPNRHPKXQZSDFX-OAQDCNSJSA-N nesiritide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 HPNRHPKXQZSDFX-OAQDCNSJSA-N 0.000 description 69
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 26
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 26
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 21
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 17
- 150000002190 fatty acyls Chemical group 0.000 description 17
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 14
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 13
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 11
- 230000004044 response Effects 0.000 description 11
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 9
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 8
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 8
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 8
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 8
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 7
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000033300 receptor internalization Effects 0.000 description 6
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 6
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 description 5
- 125000004448 alkyl carbonyl group Chemical group 0.000 description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 108010006835 Atrial Natriuretic Factor Receptors Proteins 0.000 description 4
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 4
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical class O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 3
- -1 blood cGMP) Chemical compound 0.000 description 3
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 108010078321 Guanylate Cyclase Proteins 0.000 description 2
- 102000014469 Guanylate cyclase Human genes 0.000 description 2
- 108090001050 Phosphoric Diester Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 102000004861 Phosphoric Diester Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000001746 atrial effect Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 210000002464 muscle smooth vascular Anatomy 0.000 description 2
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- MZCACYLMMMXSKC-UHFFFAOYSA-N 32 amino acid peptide Chemical compound C=1C=CC=CC=1CC(C(=O)NC(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCCNC(N)=N)NC(=O)C(CCCNC(N)=N)NC(=O)C(CCSC)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(O)=O)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1N(CCC1)C(=O)C1NCCC1)C(C)O)CC1=CC=CC=C1 MZCACYLMMMXSKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 208000020446 Cardiac disease Diseases 0.000 description 1
- 206010007556 Cardiac failure acute Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N D-arginine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
- 229930028154 D-arginine Natural products 0.000 description 1
- 101001117256 Drosophila melanogaster High affinity cGMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase 9A Proteins 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- SNIOPGDIGTZGOP-UHFFFAOYSA-N Nitroglycerin Chemical compound [O-][N+](=O)OCC(O[N+]([O-])=O)CO[N+]([O-])=O SNIOPGDIGTZGOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000006 Nitroglycerin Substances 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000011016 Type 5 Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases Human genes 0.000 description 1
- 108010037581 Type 5 Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases Proteins 0.000 description 1
- 102000010989 Type 6 Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases Human genes 0.000 description 1
- 108010037638 Type 6 Cyclic Nucleotide Phosphodiesterases Proteins 0.000 description 1
- 108010001957 Ularitide Proteins 0.000 description 1
- 102400001279 Urodilatin Human genes 0.000 description 1
- GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N Vasopressin Natural products N1C(=O)C(CC=2C=C(O)C=CC=2)NC(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002852 Vasopressins Human genes 0.000 description 1
- 108010004977 Vasopressins Proteins 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N argipressin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)=O)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)C1=CC=CC=C1 KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- QLBHNVFOQLIYTH-UHFFFAOYSA-L dipotassium;2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [K+].[K+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O QLBHNVFOQLIYTH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940058180 edetate dipotassium anhydrous Drugs 0.000 description 1
- 230000008497 endothelial barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000006277 exogenous ligand Substances 0.000 description 1
- 230000008713 feedback mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229960003711 glyceryl trinitrate Drugs 0.000 description 1
- 150000002333 glycines Chemical class 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 102000027424 natriuretic peptide receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008599 natriuretic peptide receptors Proteins 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000036454 renin-angiotensin system Effects 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000035936 sexual power Effects 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000005480 straight-chain fatty acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 102000027257 transmembrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008578 transmembrane receptors Proteins 0.000 description 1
- IUCCYQIEZNQWRS-DWWHXVEHSA-N ularitide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 IUCCYQIEZNQWRS-DWWHXVEHSA-N 0.000 description 1
- 210000004509 vascular smooth muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000304 vasodilatating effect Effects 0.000 description 1
- 229960003726 vasopressin Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Description
Перекрестная ссылка на связанную заявкуCross reference to related application
По заявке на данное изобретение испрашивают приоритет предварительной заявки США № 62/475,147, поданной 22 марта 2017 г., описание которой включено в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме.This invention claims priority to U.S. Provisional Application No. 62/475,147, filed March 22, 2017, the disclosure of which is incorporated herein by reference in its entirety.
ПредпосылкиPrerequisites
Увеличение циклического гуанозинмонофосфата (cGMP) in vivo имеет множество применений при различных гипертензиях, сосудистом застое или заболевании сердца у млекопитающих. Попытки повышать cGMP in vivo для того, чтобы лечить различные сердечно-сосудистые заболевания или усиливать сексуальную эффективность, привели к использованию ингибиторов фосфофодиэстераз 5, 6 и 9 (фосфофодиэстеразы представляют собой ферменты, которые разрушают cGMP) (см., например, Keravis T., Lugnier С., Br. J. Pharmacol. 2012; 165:1288-305) или соединений, которые повышают продуцирование cGMP, таких как нитроглицерин/нитраты и натрийуретические пептиды.Increasing cyclic guanosine monophosphate (cGMP) in vivo has many applications in various hypertension, vascular congestion, or cardiac disease in mammals. Attempts to increase cGMP in vivo in order to treat various cardiovascular diseases or enhance sexual performance have led to the use of phosphodiesterase 5, 6 and 9 inhibitors (phosphodiesterases are enzymes that degrade cGMP) (see, for example, Keravis T., Lugnier C Br J Pharmacol 2012;165:1288-305) or compounds that increase cGMP production such as nitroglycerin/nitrates and natriuretic peptides.
Предсердный натрийуретический пептид (ANP) и натрийуретический пептид головного мозга (BNP) действуют через натрийуретический рецептор A (NPRA), и натрийуретический пептид с-типа (CNP) действует через натрийуретический рецептор В (NPRB) (см., например, Silver M.A., Curr. Opin. Nephrol. Hypertens., 2006, vol. 15,14-21; Yoshibayashi M. et al., Eur. J. Endocrinol., 1996, vol 135, 265-268) для того, чтобы увеличивать внутриклеточный cGMP, что также отражается в определенной степени в увеличении cGMP крови. Когда лиганды натрийуретического рецептора связываются с натрийуретическими трансмембранными рецепторами, которые имеют внутриклеточный домен гуанилатциклазы, активируют активность гуанилатциклазы, что ведет к увеличенному внутриклеточному cGMP, проявлению различных физиологических активностей и увеличению cGMP крови.Atrial natriuretic peptide (ANP) and brain natriuretic peptide (BNP) act through the natriuretic receptor A (NPRA), and c-type natriuretic peptide (CNP) acts through the natriuretic receptor B (NPRB) (see, for example, Silver M.A., Curr Opin. Nephrol. Hypertens., 2006, vol. 15,14-21; Yoshibayashi M. et al., Eur. J. Endocrinol., 1996, vol 135, 265-268) in order to increase intracellular cGMP, which is also reflected to a certain extent in the increase in blood cGMP. When natriuretic receptor ligands bind to natriuretic transmembrane receptors, which have an intracellular guanylate cyclase domain, they activate guanylate cyclase activity, leading to increased intracellular cGMP, the expression of various physiological activities and increased blood cGMP.
Увеличение cGMP имеет положительные эффекты, оказываемые на гипертензию и/или застой сосудистого текучего вещества и/или заболевание сердца. Внутриклеточный cGMP широко известен в качестве внутриклеточного вторичного мессенджера, который отвечает за опосредование внеклеточного сигнала (от натрийуретического пептида, например ANP, BNP, CNP, уродилатин и оксид азота (I)) во внутриклеточном действии. Это хорошо исследовано в отношении управления тонусом гладких мышц сосудов. В целом, известно, что увеличении внутриклеточного cGMP в сосудистых гладкомышечных клетках расслабляет гладкие мышцы и снижает кровяное давление.Increasing cGMP has beneficial effects on hypertension and/or vascular fluid congestion and/or heart disease. Intracellular cGMP is widely recognized as an intracellular second messenger that is responsible for mediating extracellular signal (from natriuretic peptide, e.g. ANP, BNP, CNP, urodilatin and nitric oxide (I)) to intracellular action. This has been well researched in relation to the control of vascular smooth muscle tone. In general, increasing intracellular cGMP in vascular smooth muscle cells is known to relax smooth muscle and reduce blood pressure.
ANP и BNP представляют собой известные медицинские средства для того, чтобы управлять кровяным давлением и нагрузкой сердца у пациентов с заболеванием сердца. ANP человека (hANP) используют в клинике в качестве терапевтического средства для острой сердечной недостаточности в Японии, a BNP используют в клинике в качестве терапевтического средства для застойной сердечной недостаточности в Соединенных штатах. Медицинское использование существующих натрийуретических пептидов ограничено их коротким временем полужизни и ограниченной активностью, чтобы обеспечивать достаточный cGMP, и их обычно вводят посредством непрерывной внутривенной инфузии.ANP and BNP are known medical agents for managing blood pressure and cardiac workload in patients with heart disease. Human ANP (hANP) is used clinically as a therapeutic agent for acute heart failure in Japan, and BNP is used clinically as a therapeutic agent for congestive heart failure in the United States. The medical use of existing natriuretic peptides is limited by their short half-life and limited activity to provide sufficient cGMP, and they are usually administered by continuous intravenous infusion.
ANP, BNP и CNP представляют собой пептиды, имеющие циклическую структуру, необходимую для их активности, которая возможна благодаря присутствию дисульфидных связей. ANP представляет собой пептид из 28 аминокислот, продуцируемый и секретируемый клетками предсердия. Пептид проявляет диуретическое действие в почке и расслабляет и расширяет сосудистые гладкие мышцы в кровеносных сосудах. Кроме того, ANP антагонизирует действие ренин-ангиотензин-альдостероновой системы (RAAS) и вазопрессина. Эти действия всесторонне снижают нагрузку на сердце через снижение кровяного давления и объема текучих веществ организма. В действительности, секреции ANP способствует подъем давления наполнения предсердия при застойной сердечной недостаточности и т.д., и ANP облегчает симптомы застойной сердечной недостаточности через указанные выше действия.ANP, BNP and CNP are peptides that have a cyclic structure necessary for their activity, which is possible due to the presence of disulfide bonds. ANP is a 28 amino acid peptide produced and secreted by atrial cells. The peptide exhibits a diuretic effect in the kidney and relaxes and dilates vascular smooth muscle in blood vessels. In addition, ANP antagonizes the actions of the renin-angiotensin-aldosterone system (RAAS) and vasopressin. These actions comprehensively reduce the load on the heart by reducing blood pressure and body fluid volume. In fact, the secretion of ANP is promoted by the rise in atrial filling pressure in congestive heart failure, etc., and ANP alleviates the symptoms of congestive heart failure through the above actions.
BNP представляет собой пептид из 32 аминокислот, который впервые обнаружен в головном мозге, но впоследствии обнаружены его продуцирование и секреция преимущественно в кардиомиоцитах. Секреция BNP возрастает у пациентов с сердечной недостаточностью, и BNP облегчает различные симптомы, ассоциированные с сердечной недостаточностью, через указанные выше действия.BNP is a 32 amino acid peptide that was first discovered in the brain but was subsequently found to be produced and secreted predominantly in cardiomyocytes. The secretion of BNP increases in patients with heart failure, and BNP alleviates various symptoms associated with heart failure through the above actions.
ANP и BNP обладают различными физиологическими активностями, помимо вазодилятирующего действия, кровяного давления и регуляции сосудистых текучих веществ через диуретическое действие. Например, сообщалось о действии ANP, оказываемом на индуцированное бактериальное инфекцией воспаление и ассоциированный отказ функции эндотелиального барьера (см., например, Xing J., et al., J. appl. Physiol., 2011, 110 (1), 213-224).ANP and BNP have various physiological activities in addition to vasodilating effects, blood pressure and regulation of vascular fluids through diuretic effects. For example, the effect of ANP on bacterial infection-induced inflammation and associated failure of endothelial barrier function has been reported (see, e.g., Xing J., et al., J. appl. Physiol., 2011, 110 (1), 213-224 ).
Существует необходимость в натрийуретических пептидах, обладающих увеличенным временем полужизни и активностью. Настоящее изобретение стремится удовлетворить эту потребность и предусматривает дополнительные связанные преимущества. Например, настоящее изобретение предусматривает новые композиции с, к удивлению, увеличенной активностью, как измеряют по увеличению cGMP.There is a need for natriuretic peptides having increased half-life and activity. The present invention seeks to satisfy this need and provides additional associated advantages. For example, the present invention provides new compositions with surprisingly increased activity, as measured by an increase in cGMP.
- 1 044180- 1 044180
Краткое изложениеSummary
Настоящее изобретение предусматривает производное натрийуретического пептида формулы (I) или композицию, содержащую производное натрийуретического пептида формулы (I)The present invention provides a natriuretic peptide derivative of formula (I) or a composition containing a natriuretic peptide derivative of formula (I)
I (жирный ацил)z-(В)х-(G)y-NP (I) , где z представляет собой 1, x представляет собой целое от 2 до 4 и y представляет собой 3 или z представляет собой 0, x представляет собой целое от 0 до 4 и y представляет собой целое от 1 до 3; жирный ацил содержит от 12 до 24 (например, от 12 до 18) атомов углерода;I (fatty acyl) z -(B) x -(G) y -NP (I) where z is 1, x is an integer from 2 to 4 and y is 3 or z is 0, x is an integer from 0 to 4 and y is an integer from 1 to 3; a fatty acyl contains 12 to 24 (eg, 12 to 18) carbon atoms;
В представляет собой лизин или аргинин;B represents lysine or arginine;
G представляет собой глицин;G represents glycine;
NP представляет собой натрийуретический пептид;NP is a natriuretic peptide;
если присутствует, (жирный ацил)2- ковалентно связывают с N-концом в (В)х;if present, (fatty acyl) 2 is covalently linked to the N-terminus in (B) x ;
(жирный ацил)2-(B)x- ковалентно связывают с N-концом в (G)y; и (жирный ацил)2-(B)x-(G)у- ковалентно связывают с N-концом в NP.(fatty acyl) 2 -(B) x - is covalently linked to the N-terminus in (G) y ; and (fatty acyl) 2 -(B) x -(G) y - is covalently linked to the N-terminus in the NP.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, увеличивает уровень cGMP крови при парентеральном введении млекопитающему до уровня выше, чем натрийуретический пептид NP при парентеральном введении млекопитающему в эквивалентной дозе (например, доза в моль/кг, доза в мг/кг или доза как в моль/кг, так и в мг/кг). Как используют в настоящем описании, поскольку производное добавления имеет более низкую дозу в моль/кг, когда дают в равной дозе в мг/кг, то, если активность сравнима при одной и той же дозе в мг/кг, ожидают, что производное добавления более активно в той же дозе в моль/кг.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative or a composition containing a natriuretic peptide derivative increases the blood cGMP level when administered parenterally to a mammal to a level higher than natriuretic peptide NP when administered parenterally to a mammal at an equivalent dose (e.g., dose in mol/kg, dose in mg/kg or dose in both mol/kg and mg/kg). As used herein, since the addition derivative has a lower mol/kg dose when given at an equal mg/kg dose, then if the activity is comparable at the same mg/kg dose, the addition derivative is expected to be more active at the same dose in mol/kg.
NP обычно представляет собой родительский натрийуретический пептид, встречающийся в природе у живых организмов. NP можно выбирать из ANP человека (ID последовательности 1), ANP грызуна (ID последовательности 19), BNP человека (ID последовательности 41) и ANP человека (ID последовательности 57).NP is typically the parent natriuretic peptide found naturally in living organisms. The NP can be selected from human ANP (Sequence ID 1), rodent ANP (Sequence ID 19), human BNP (Sequence ID 41) and human ANP (Sequence ID 57).
В одном из вариантов осуществления NP представляет собой ANP человека (ID последовательности 1).In one embodiment, the NP is human ANP (Sequence ID 1).
В одном из вариантов осуществления В представляет собой лизин.In one embodiment, B is lysine.
Производное натрийуретического пептида или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, в соответствии с изобретением может содержать производное натрийуретического пептида формулы (II)A natriuretic peptide derivative or a composition containing a natriuretic peptide derivative in accordance with the invention may contain a natriuretic peptide derivative of formula (II)
Iжирный ацил-(В)х-(G) 3-NP (II) , где жирный ацил имеет от 12 до 24 (например, от 12 до 18) атомов углерода;I fatty acyl-(B) x -(G) 3 -NP (II) where the fatty acyl has from 12 to 24 (for example, from 12 to 18) carbon atoms;
В представляет собой лизин или аргинин (например, В представляет собой лизин);B is lysine or arginine (eg, B is lysine);
x представляет собой 2-4;x represents 2-4;
G представляет собой глицин;G represents glycine;
NP представляет собой натрийуретический пептид;NP is a natriuretic peptide;
жирный ацил- ковалентно связывают с N-концом в (В)х;fatty acyl-covalently linked to the N-terminus in (B) x ;
жирный ацил-(B)x- ковалентно связывают с N-концом в (G)3;fatty acyl-(B) x - is covalently linked to the N-terminus in (G) 3 ;
жирный ацил-(B)x-(G)3- ковалентно связывают с N-концом в NP.fatty acyl-(B) x -(G) 3 - is covalently linked to the N-terminus in the NP.
При введении млекопитающим производное натрийуретического пептида или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, обычно увеличивает cGMP крови до уровня выше, чем соответствующий родительский NP при введении в эквивалентной дозе (например, доза в моль/кг, доза в мг/кг или доза как в моль/кг, так и в мг/кг).When administered to mammals, a natriuretic peptide derivative or a composition containing a natriuretic peptide derivative typically increases blood cGMP to a level higher than the corresponding parent NP when administered at an equivalent dose (e.g., mole/kg dose, mg/kg dose, or mole dose). /kg, and in mg/kg).
В одном из вариантов осуществления x представляет собой 2. В одном из вариантов осуществления x представляет собой 3. В одном из вариантов осуществления x представляет собой 4.In one embodiment, x is 2. In one embodiment, x is 3. In one embodiment, x is 4.
В некоторых вариантах осуществления в жирном ациле-(B)x-(G)3-NP, x=4; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.In some embodiments, in the fatty acyl-(B) x -(G) 3 -NP, x=4; NP is optionally selected from sequence IDs 1, 19, 41, and 57. For example, in some embodiments, B is lysine and NP is sequence ID 1; B represents lysine and NP represents sequence ID 19; B is lysine and NP is sequence ID 41 and/or B is lysine and NP is sequence ID 57.
В некоторых вариантах осуществления в жирном ациле-(B)x-(G)3-NP, x=3; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.In some embodiments, in the fatty acyl-(B) x -(G) 3 -NP, x=3; NP is optionally selected from sequence IDs 1, 19, 41, and 57. For example, in some embodiments, B is lysine and NP is sequence ID 1; B represents lysine and NP represents sequence ID 19; B is lysine and NP is sequence ID 41 and/or B is lysine and NP is sequence ID 57.
В некоторых вариантах осуществления в жирном ациле-(B)x-(G)3-NP, x=2; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В пред- 2 044180 ставляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин иIn some embodiments, in the fatty acyl-(B) x -(G) 3 -NP, x=2; NP is optionally selected from Sequence IDs 1, 19, 41, and 57. For example, in some embodiments, B is lysine and NP is Sequence ID 1; B represents lysine and
NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собойNP is sequence ID 19; B represents lysine and NP represents
ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.Sequence ID 41 and/or B is lysine and NP is Sequence ID 57.
В некоторых вариантах осуществления в жирном ациле-(B)x-(G)3-NP, x=1; NP необязательно выбирают из любой одной из ID последовательностей 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.In some embodiments, in the fatty acyl-(B) x -(G) 3 -NP, x=1; The NP is optionally selected from any one of sequence IDs 1, 19, 41, and 57. For example, in some embodiments, B is lysine and NP is sequence ID 1; B represents lysine and NP represents sequence ID 19; B is lysine and NP is sequence ID 41 and/or B is lysine and NP is sequence ID 57.
В одном из вариантов осуществления жирный ацил содержит 18 атомов углерода.In one embodiment, the fatty acyl contains 18 carbon atoms.
В одном из вариантов осуществления -(B)x-(G)3- выбирают из -KKGGG-, -KKKGGG- и -KKKKGGG-.In one embodiment, -(B) x -(G) 3 - is selected from -KKGGG-, -KKKGGG- and -KKKKGGG-.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 9, ID последовательности 10, ID последовательности 11, ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID последовательности 56, ID последовательности 82, ID последовательности 52, ID последовательности 113, ID последовательности 68, ID последовательности 122 и ID последовательности 72; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 9, ID последовательности 10, ID последовательности 11, ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID последовательности 56, ID последовательности 82, ID последовательности 52, ID последовательности 113, ID последовательности 68, ID последовательности 122 и ID последовательности 72.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is that defined in one of Sequence ID 9, Sequence ID 10, Sequence ID 11, Sequence ID 14, Sequence ID 18, Sequence ID 56, Sequence ID 82, Sequence ID 52, ID sequence 113, sequence ID 68, sequence ID 122 and sequence ID 72; or a composition containing a natriuretic peptide derivative contains a natriuretic peptide derivative as defined in one of Sequence ID 9, Sequence ID 10, Sequence ID 11, Sequence ID 14, Sequence ID 18, Sequence ID 56, Sequence ID 82, Sequence ID 52, Sequence ID 113, Sequence ID 68, Sequence ID 122, and Sequence ID 72.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID последовательности 56, ID последовательности 82, ID последовательности 52, ID последовательности 68, ID последовательности 122 и ID последовательности 72; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID последовательности 56, ID последовательности 82, ID последовательности 52, ID последовательности 68, ID последовательности 122 и ID последовательности 72.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is that defined in one of Sequence ID 14, Sequence ID 18, Sequence ID 56, Sequence ID 82, Sequence ID 52, Sequence ID 68, Sequence ID 122, and Sequence ID 72; or the composition comprising a natriuretic peptide derivative comprises a natriuretic peptide derivative as defined in one of Sequence ID 14, Sequence ID 18, Sequence ID 56, Sequence ID 82, Sequence ID 52, Sequence ID 68, Sequence ID 122, and Sequence ID 72.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 93, ID последовательности 94, ID последовательности 95, ID последовательности 102, ID последовательности 103, ID последовательности 104, ID последовательности 111, ID последовательности 112, ID последовательности 113, ID последовательности 120, ID последовательности 121 и ID последовательности 122, или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 93, ID последовательности 94, ID последовательности 95, ID последовательности 102, ID последовательности 103, ID последовательности 104, ID последовательности 111, ID последовательности 112, ID последовательности 113, ID последовательности 120, ID последовательности 121 и ID последовательности 122.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is that defined in one of Sequence ID 93, Sequence ID 94, Sequence ID 95, Sequence ID 102, Sequence ID 103, Sequence ID 104, Sequence ID 111, Sequence ID 112, ID Sequence ID 113, Sequence ID 120, Sequence ID 121, and Sequence ID 122, or a composition comprising a natriuretic peptide derivative comprises a natriuretic peptide derivative as defined in one of Sequence ID 93, Sequence ID 94, Sequence ID 95, Sequence ID 102, ID sequence ID 103, sequence ID 104, sequence ID 111, sequence ID 112, sequence ID 113, sequence ID 120, sequence ID 121 and sequence ID 122.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 18, ID последовательности 34, ID последовательности 56 и ID последовательности 72; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 18, ID последовательности 34, ID последовательности 56 и ID последовательности 72.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is as defined in one of Sequence ID 18, Sequence ID 34, Sequence ID 56, and Sequence ID 72; or the composition comprising a natriuretic peptide derivative comprises a natriuretic peptide derivative as defined by one of Sequence ID 18, Sequence ID 34, Sequence ID 56 and Sequence ID 72.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 14, ID последовательности 30, ID последовательности 52 и ID последовательности 68; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 14, ID последовательности 30, ID последовательности 52 и ID последовательности 68.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is as defined in one of Sequence ID 14, Sequence ID 30, Sequence ID 52, and Sequence ID 68; or the composition comprising a natriuretic peptide derivative comprises a natriuretic peptide derivative as defined by one of Sequence ID 14, Sequence ID 30, Sequence ID 52 and Sequence ID 68.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 10, ID последовательности 30, ID последовательности 52 и ID последовательности 68; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 10, ID последовательности 30, ID последовательности 52 и ID последовательности 68.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is as defined in one of Sequence ID 10, Sequence ID 30, Sequence ID 52, and Sequence ID 68; or the composition comprising a natriuretic peptide derivative comprises a natriuretic peptide derivative as defined by one of Sequence ID 10, Sequence ID 30, Sequence ID 52 and Sequence ID 68.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 9, ID последовательности 10, ID последовательности 11, ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID последовательности 56 и ID последовательности 72; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 9, ID последовательности 10, ID последовательности 11, ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID после- 3 044180 довательности 56 и ID последовательности 72.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is as defined in one of Sequence ID 9, Sequence ID 10, Sequence ID 11, Sequence ID 14, Sequence ID 18, Sequence ID 56, and Sequence ID 72; or the composition comprising a natriuretic peptide derivative comprises a natriuretic peptide derivative as defined in one of Sequence ID 9, Sequence ID 10, Sequence ID 11, Sequence ID 14, Sequence ID 18, Sequence ID 56, and Sequence ID 72.
В одном из вариантов осуществления, производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 73, ID последовательности 74, ID последовательности 79, ID последовательности 80, ID последовательности 81, ID последовательности 83, ID последовательности 84 и ID последовательности 85; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 73, ID последовательности 74, ID последовательности 79, ID последовательности 80, ID последовательности 81, ID последовательности 83, ID последовательности 84 и ID последовательности 85.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is as defined in one of Sequence ID 73, Sequence ID 74, Sequence ID 79, Sequence ID 80, Sequence ID 81, Sequence ID 83, Sequence ID 84, and Sequence ID 85; or the composition containing a natriuretic peptide derivative contains a natriuretic peptide derivative as defined in one of Sequence ID 73, Sequence ID 74, Sequence ID 79, Sequence ID 80, Sequence ID 81, Sequence ID 83, Sequence ID 84, and Sequence ID 85.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности с 87 до 122; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности с 87 до 122.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is as defined in one of Sequence IDs 87 to 122; or the composition comprising a natriuretic peptide derivative comprises a natriuretic peptide derivative as defined by one of Sequence IDs 87 to 122.
Производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, может содержать производное натрийуретического пептида формулы (III):A natriuretic peptide derivative according to the disclosure or a composition containing a natriuretic peptide derivative may comprise a natriuretic peptide derivative of formula (III):
1(B) х- (G) y~NP (III), где В представляет собой лизин или аргинин (например, В представляет собой лизин);1(B) x - (G) y ~NP (III), where B is lysine or arginine (for example, B is lysine);
x представляет собой 0-4;x represents 0-4;
G представляет собой глицин;G represents glycine;
y представляет собой 1-3;y represents 1-3;
NP представляет собой натрийуретический пептид;NP is a natriuretic peptide;
(B)x-(G)y- ковалентно связывают с N-концом в NP.(B) x -(G) y - is covalently linked to the N-terminus in the NP.
При введении млекопитающим (B)x-(G)y-NP или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида (B)x-(G)y-NP, может увеличивать cGMP крови до уровня выше, чем соответствующий родительский NP при введении в эквивалентной дозе (например, доза в моль/кг, доза в мг/кг или доза как в моль/кг, так и в мг/кг).When administered to mammals, (B) x -(G) y -NP or a composition containing a natriuretic peptide derivative (B) x -(G) y -NP may increase blood cGMP to a level higher than the corresponding parent NP when administered at an equivalent dose (e.g. dose in mol/kg, dose in mg/kg or dose in both mol/kg and mg/kg).
В одном из вариантов осуществления x представляет собой 0. В одном из вариантов осуществления x представляет собой 1. В одном из вариантов осуществления x представляет собой 2. В одном из вариантов осуществления x представляет собой 3. В одном из вариантов осуществления x представляет собой 4. В одном из вариантов осуществления у представляет собой 1. В одном из вариантов осуществления у представляет собой 2. В одном из вариантов осуществления у представляет собой 3.In one embodiment, x is 0. In one embodiment, x is 1. In one embodiment, x is 2. In one embodiment, x is 3. In one embodiment, x is 4. In one embodiment, y is 1. In one embodiment, y is 2. In one embodiment, y is 3.
В некоторых вариантах осуществления в (B)x-(G)y-NP, x=0 и y необязательно представляет собой 1, 2 или 3; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, NP имеет ID последовательности 1; NP имеет ID последовательности 19; NP имеет ID последовательности 41 или ID последовательности 57.In some embodiments, in (B) x -(G) y -NP, x=0 and y is optionally 1, 2 or 3; The NP is optionally selected from sequence IDs 1, 19, 41, and 57. For example, the NP has sequence ID 1; NP has sequence ID 19; NP has a sequence ID of 41 or a sequence ID of 57.
В некоторых вариантах осуществления в (B)x-(G)y-NP, y=3; В необязательно представляет собой лизин и x необязательно представляет собой 1, 2, 3 или 4; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, NP имеет ID последовательности 1; NP имеет ID последовательности 19; NP имеет ID последовательности 41 или ID последовательности 57.In some embodiments, in (B) x -(G) y -NP, y=3; B optionally represents lysine and x optionally represents 1, 2, 3 or 4; The NP is optionally selected from sequence IDs 1, 19, 41, and 57. For example, the NP has sequence ID 1; NP has sequence ID 19; NP has a sequence ID of 41 or a sequence ID of 57.
В одном из вариантов осуществления у представляет собой 3.In one embodiment, y is 3.
В одном из вариантов осуществления (B)x-(G)y- выбирают из G-, GG-, -GGG-, KGGG- и KKKKGGG-.In one embodiment, (B) x -(G) y - is selected from G-, GG-, -GGG-, KGGG- and KKKKGGG-.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 2, ID последовательности 3, ID последовательности 4, ID последовательности 5, ID последовательности 8 и ID последовательности 44; или композиция, содержащая производное натрийуретического пептида, содержит производное натрийуретического пептида, как определено в одном из ID последовательности 2, ID последовательности 3, ID последовательности 4, ID последовательности 5, ID последовательности 8 и ID последовательности 44.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is as defined in one of Sequence ID 2, Sequence ID 3, Sequence ID 4, Sequence ID 5, Sequence ID 8, and Sequence ID 44; or the composition comprising a natriuretic peptide derivative comprises a natriuretic peptide derivative as defined in one of Sequence ID 2, Sequence ID 3, Sequence ID 4, Sequence ID 5, Sequence ID 8 and Sequence ID 44.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую производное натрийуретического пептида, как определено в настоящем описании, и эксципиент.The present invention further provides a pharmaceutical composition comprising a natriuretic peptide derivative as defined herein and an excipient.
Фармацевтическая композиция может содержать, состоять по существу из или состоять из одного или нескольких производных натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием и эксципиента.The pharmaceutical composition may contain, consist essentially of, or consist of one or more natriuretic peptide derivatives as disclosed and an excipient.
В одном из вариантов осуществления фармацевтическая композиция предназначена для парентерального введения при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки или при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки, чтобы увеличивать cGMP для лечения заболевания. В некоторых вариантах осуществления заболевание выбирают из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца. В определенных вариантах осуществления заболевание представляет собой заболевание сердца.In one embodiment, the pharmaceutical composition is for parenteral administration at a dose of natriuretic peptide derivatives of less than 1.5 mg/kg body weight per day or at a dose of natriuretic peptide derivatives less than 0.3 mg/kg body weight per day to increase cGMP for the treatment of a disease. In some embodiments, the disease is selected from hypertension, vascular congestion, and heart disease. In certain embodiments, the disease is a heart disease.
Настоящее изобретение также предусматривает производное натрийуретического пептида в соот- 4 044180 ветствии с раскрытием или композицию, содержащую производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием, для использования в лечении заболевания. Заболевание можно выбирать из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца. В одном из вариантов осуществления заболевание представляет собой заболевание сердца.The present invention also provides a natriuretic peptide derivative according to the disclosure or a composition containing a natriuretic peptide derivative according to the disclosure for use in the treatment of a disease. The disease can be selected from hypertension, vascular congestion and heart disease. In one embodiment, the disease is a heart disease.
В одном из вариантов осуществления лечение заболевания включает парентеральное введение пациенту производного натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием или композиции, содержащей производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием, при дозе меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки.In one embodiment, treatment of the disease includes parenteral administration to a patient of a natriuretic peptide derivative according to the disclosure, or a composition containing a natriuretic peptide derivative according to the disclosure, at a dose of less than 1.5 mg/kg body weight per day.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает способ лечения заболевания у пациента, способ включает парентеральное введение пациенту производного натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием или композиции, содержащей производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием.The present invention further provides a method of treating a disease in a patient, the method comprising parenterally administering to the patient a natriuretic peptide derivative according to the disclosure or a composition containing a natriuretic peptide derivative according to the disclosure.
Способ может включать парентеральное введение фармацевтической композиции, содержащей, состоящей по существу из или состоящей из одного или нескольких производных натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием.The method may include parenteral administration of a pharmaceutical composition containing, consisting essentially of, or consisting of one or more natriuretic peptide derivatives in accordance with the disclosure.
Производное натрийуретического пептида или композицию, содержащую производное натрийуретического пептида, можно вводить парентерально при дозе меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки или при дозе меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки для того, чтобы увеличивать cGMP крови у пациента. В некоторых вариантах осуществления заболевание выбирают из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца. В определенных вариантах осуществления заболевание представляет собой заболевание сердца.A natriuretic peptide derivative or a composition containing a natriuretic peptide derivative can be administered parenterally at a dose of less than 1.5 mg/kg body weight per day or at a dose less than 0.3 mg/kg body weight per day to increase blood cGMP at the patient. In some embodiments, the disease is selected from hypertension, vascular congestion, and heart disease. In certain embodiments, the disease is a heart disease.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает способ увеличения cGMP крови у пациента, способ включает парентеральное введение пациенту, нуждающемуся в этом, производного натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием или композиции, содержащей производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием.The present invention further provides a method of increasing blood cGMP in a patient, the method comprising parenterally administering to a patient in need thereof a natriuretic peptide derivative according to the disclosure or a composition containing a natriuretic peptide derivative according to the disclosure.
Производное натрийуретического пептида или композицию, содержащую производное натрийуретического пептида, можно вводить парентерально при дозе меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки или при дозе меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки.The natriuretic peptide derivative or a composition containing a natriuretic peptide derivative can be administered parenterally at a dose of less than 1.5 mg/kg body weight per day or at a dose of less than 0.3 mg/kg body weight per day.
Настоящее изобретение также предусматривает использование производного натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием или композиции, содержащей производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием, для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания. Заболевание можно выбирать из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца.The present invention also provides for the use of a natriuretic peptide derivative according to the disclosure or a composition containing a natriuretic peptide derivative according to the disclosure for the manufacture of a medicament for treating a disease. The disease can be selected from hypertension, vascular congestion and heart disease.
Подробное описаниеDetailed description
Настоящее изобретение относится к производным натрийуретического пептида или их композициям, которые обладают неожиданно превосходящей способностью увеличивать cGMP крови и/или внутриклеточный cGMP in vivo по сравнению с нативным пептидом, таким как предсердный натрийуретический пептид (ANP), или натрийуретический пептид головного мозга (BNP), или натрийуретический пептид с-типа (CNP). Как описано выше, ANP, BNP и CNP представляют собой пептиды, обладающие циклической структурой, необходимой для их активности, которую делают возможной благодаря присутствию дисульфидных связей. Производные натрийуретического пептида по настоящему изобретению также могут иметь внутримолекулярные дисульфидные связи (между двумя остатками цистеина), что ведет к циклической структуре. Внутримолекулярные дисульфидные связи можно формировать в разбавленном растворе самопроизвольно или с использованием подходящего окислителя. Формирование внутримолекулярного дисульфидного мостика можно подтвердить посредством анализа HPLC/MS.The present invention relates to natriuretic peptide derivatives or compositions thereof that have a surprisingly superior ability to increase blood cGMP and/or intracellular cGMP in vivo compared to a native peptide, such as atrial natriuretic peptide (ANP), or brain natriuretic peptide (BNP), or c-type natriuretic peptide (CNP). As described above, ANP, BNP and CNP are peptides having a cyclic structure necessary for their activity, which is made possible by the presence of disulfide bonds. The natriuretic peptide derivatives of the present invention may also have intramolecular disulfide bonds (between two cysteine residues), leading to a cyclic structure. Intramolecular disulfide bonds can be formed in dilute solution spontaneously or using a suitable oxidizing agent. The formation of an intramolecular disulfide bridge can be confirmed by HPLC/MS analysis.
Как используют в настоящем описании, производное добавления или производное удлинения относится к пептидному производному, где основная аминокислотная последовательность остова для пептида остается той же, но добавление дополнительных функциональных групп и/или аминокислоты к основной аминокислотной последовательности с использованием одного или нескольких реакционноспособных фрагментов в основной аминокислотной последовательности дает производное добавления или производное удлинения. Производное добавления или производное удлинения отличается от производного усечения и/или замены пептида, где одну или несколько аминокислот в основной аминокислотной последовательности остова пептида удаляют и/или заменяют на другие функциональные группы и/или аминокислоты соответственно.As used herein, an addition derivative or an extension derivative refers to a peptide derivative where the basic amino acid sequence of the backbone for the peptide remains the same, but the addition of additional functional groups and/or amino acids to the basic amino acid sequence using one or more reactive fragments in the basic amino acid sequence gives an addition derivative or an extension derivative. An addition derivative or an extension derivative is distinguished from a peptide truncation and/or substitution derivative, where one or more amino acids in the basic amino acid sequence of the peptide backbone are removed and/or replaced with other functional groups and/or amino acids, respectively.
Полагают, что изменение аминокислотной последовательности пептидов может иметь непредсказуемые последствия, оказываемые на их биологическую активность, и изменения, которые сохраняют активность пептида, являются неочевидными и непредсказуемыми. В настоящем изобретении описаны конкретные структурные изменения встречаемого в природе натрийуретического пептида (NP). Как используют в настоящем описании, встречаемый в природе натрийуретический пептид обозначают на всем протяжении как родительский пептид или родительский NP, неограничивающие примеры которого представляют собой SEQ ID NO: 1 (ANP человека), SEQ ID NO: 19 (ANP грызуна), SEQ ID NO: 41 (BNP человека) и SEQ ID NO: 57 (CNP человека). В кратком изложении, конкретные изменения родительского NP вели к удивительно неожиданному усилению или увеличенной силе по сравнению с родительскимIt is believed that changing the amino acid sequence of peptides can have unpredictable effects on their biological activity, and changes that maintain the activity of the peptide are not obvious and unpredictable. The present invention describes specific structural changes in naturally occurring natriuretic peptide (NP). As used herein, a naturally occurring natriuretic peptide is referred to throughout as the parent peptide or parent NP, non-limiting examples of which are SEQ ID NO: 1 (human ANP), SEQ ID NO: 19 (rodent ANP), SEQ ID NO : 41 (human BNP) and SEQ ID NO: 57 (human CNP). In summary, specific changes to the parent NP resulted in a surprisingly unexpected gain or increased strength relative to the parent
- 5 044180- 5 044180
NP in vivo, как измеряют по ответу cGMP крови, тогда как другие изменения вели к утрате активности.NP in vivo, as measured by blood cGMP response, while other changes led to loss of activity.
Как используют в настоящем описании, термин сила относится к увеличению cGMP крови непосредственно (0-2 ч) после введения болюса относительно родительского нативного пептида в равной дозе.As used herein, the term strength refers to the increase in blood cGMP immediately (0-2 hours) after bolus administration relative to the parent native peptide at an equal dose.
Как используют в настоящем описании, термин кажущееся истощение рецептора является синонимом истощения рецептора и относится к утрате способности пептида иметь замедленный эффект, наблюдаемый как повышенный cGMP крови в более позднее время (т.е. 6 ч и позже).As used herein, the term apparent receptor depletion is synonymous with receptor depletion and refers to the loss of the ability of the peptide to have a delayed effect, observed as increased blood cGMP at later times (ie, 6 hours and later).
Как используют в настоящем описании, термин замедленный эффект является синонимом замедленного повышения cGMP и относится к способности натрийуретического пептида поддерживать повышенный уровень cGMP крови в течение по меньшей мере 6 ч после одного введения болюса пептида.As used herein, the term delayed effect is synonymous with delayed cGMP rise and refers to the ability of a natriuretic peptide to maintain elevated blood cGMP levels for at least 6 hours after a single administration of a bolus of peptide.
Как используют в настоящем описании, термин состоящий по существу из или состоит по существу из относится к композиции, содержащей перечисленные компоненты, а также другие компоненты при условии, что другие компоненты существенно не влияют на важные характеристики композиции (например, биодоступность, фармакокинетика, токсичность и/или индукция супрессии активности активного ингредиента).As used herein, the term consisting essentially of or consisting essentially of refers to a composition containing the listed components as well as other components, provided that the other components do not significantly affect the important characteristics of the composition (for example, bioavailability, pharmacokinetics, toxicity and /or induction of suppression of the activity of the active ingredient).
Как используют в настоящем документе, при описании размеров, измерения, длительности, количества и т.д. термин приблизительно обозначает возможное различие в ±5%.As used herein when describing size, measurement, duration, quantity, etc. the term approximately indicates a possible difference of ±5%.
Как используют в настоящем описании, термин жирный ацил относится к любой ацильной группе, происходящей из жирных кислот, включая насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты. Например, типичная жирная ацильная группа, происходящая из ненасыщенных жирных кислот, имеет формулу Н2α.b(С)α(О)-, где a может представлять собой от 12 до 24 (например, от 14 до 24, от 16 до 24, от 18 до 24, от 20 до 24, от 22 до 24, от 12 до 22, от 12 до 20, от 12 до 18, от 12 до 16, от 12 до 14, 12, 14, 16, 18, 20, 22 или 24) и b может представлять собой 1, 3, 5 или 7 (например, 1, 3 или 5; 1 или 3; или 1). Эта формула представляет жирный ацил, происходящий из насыщенных разветвленных и неразветвленных жирных кислот и жирной кислоты с уровнем ненасыщенности от нуля (т.е. b=1) до 3 (т.е. b представляет собой 3, когда углеродная цепь жирной кислоты содержит одну двойную связь, b представляет собой 5, когда углеродная цепь жирной кислоты содержит две двойные связи, и b представляет собой 7, когда углеродная цепь жирной кислоты содержит три двойные связи). Например, производное натрийуретического пептида формулы (I) может иметь формулу Н2а.b(C)a(O)-(B)x-(G)3-NP, где а составляет от 12 до 24 и b может составлять 1, 3, 5 или 7.As used herein, the term fatty acyl refers to any acyl group derived from fatty acids, including saturated and unsaturated fatty acids. For example, a typical fatty acyl group derived from unsaturated fatty acids has the formula H2α . b (C) α (O)-, where a may be from 12 to 24 (for example, from 14 to 24, from 16 to 24, from 18 to 24, from 20 to 24, from 22 to 24, from 12 to 22, 12 to 20, 12 to 18, 12 to 16, 12 to 14, 12, 14, 16, 18, 20, 22 or 24) and b may be 1, 3, 5 or 7 (for example , 1, 3 or 5; 1 or 3; or 1). This formula represents a fatty acyl derived from saturated branched and straight-chain fatty acids and a fatty acid with an unsaturation level of zero (i.e. b=1) to 3 (i.e. b is 3 when the fatty acid carbon chain contains one double bond, b represents 5 when the fatty acid carbon chain contains two double bonds, and b represents 7 when the fatty acid carbon chain contains three double bonds). For example, the natriuretic peptide derivative of formula (I) may have the formula H2a . b (C) a (O)-(B) x -(G) 3 -NP, where a is from 12 to 24 and b can be 1, 3, 5 or 7.
В некоторых вариантах осуществления типичная жирная ацильная группа, происходящая из насыщенных жирных кислот, имеет формулу CH3(CH2)nC(O)-, содержащую от 12 до 24 атомов углерода (т.е. когда n составляет целое от 10 до 22). Например, производное натрийуретического пептида формулы (I) может иметь формулу CH3(CH2)nC(O)-(B)x-(G)3-NP, где n составляет от 10 до 22 (например, от 12 до 22, от 14 до 22, от 16 до 22, от 18 до 22, от 20 до 22, от 10 до 20, от 10 до 18, от 10 до 16, от 10 до 14, от 10 до 12, 10, 12, 14, 16, 18, 20 или 22). В некоторых вариантах осуществления n составляет от 10 до 14, от 12 до 16, от 14 до 18, от 16 до 20, от 18 до 22 или от 14 до 16. В некоторых вариантах осуществления жирный ацил содержит 12 или 18 атомов углерода (т.е. n составляет 10 или 16). В определенных вариантах осуществления жирный ацил содержит 14 или 20 атомов углерода (т.е. n составляет 12 или 18). В определенных вариантах осуществления жирный ацил содержит 16 или 22 атомов углерода (т.е. n составляет 14 или 20). В определенном варианте осуществления жирный ацил содержит 18 или 24 атомов углерода (т.е. n составляет 16 или 22).In some embodiments, a typical fatty acyl group derived from saturated fatty acids has the formula CH 3 (CH 2 ) n C(O)-, containing from 12 to 24 carbon atoms (i.e., when n is an integer from 10 to 22 ). For example, a natriuretic peptide derivative of formula (I) may have the formula CH 3 (CH 2 ) n C(O)-(B) x -(G) 3 -NP, where n is from 10 to 22 (for example, from 12 to 22 , from 14 to 22, from 16 to 22, from 18 to 22, from 20 to 22, from 10 to 20, from 10 to 18, from 10 to 16, from 10 to 14, from 10 to 12, 10, 12, 14, 16, 18, 20 or 22). In some embodiments, n is 10 to 14, 12 to 16, 14 to 18, 16 to 20, 18 to 22, or 14 to 16. In some embodiments, the fatty acyl contains 12 or 18 carbon atoms (t ie n is 10 or 16). In certain embodiments, the fatty acyl contains 14 or 20 carbon atoms (ie, n is 12 or 18). In certain embodiments, the fatty acyl contains 16 or 22 carbon atoms (ie, n is 14 or 20). In a certain embodiment, the fatty acyl contains 18 or 24 carbon atoms (ie, n is 16 or 22).
В настоящем описании буквы во всех раскрытых последовательностях представляют стандартные однобуквенные коды аминокислот для встречаемых в природе аминокислот, где коды заглавными буквами обозначают L-аминокислоты, а строчные буквы обозначают D-аминокислоты. Например, глицин можно представлять с помощью G, лизин можно представлять с помощью K и аргинин можно представлять с помощью R.As used herein, the letters in all disclosed sequences represent standard single-letter amino acid codes for naturally occurring amino acids, wherein capital letter codes represent L-amino acids and lowercase letters represent D-amino acids. For example, glycine can be represented by G, lysine can be represented by K, and arginine can be represented by R.
При использовании аллометрического масштабирования с экспонентой 0,7 (т.е. доза у другого биологического вида = доза мыши/((масса мыши/усредненная масса другого биологического вида)0,7)) 15 мг/кг дозы мышей эквивалентно приблизительно 7,5 мг/кг дозы крысы, приблизительно 2,5 мг/кг дозы собаки и 1,5 мг/кг дозе человека. Как используют в настоящем описании, 15 мг/кг в дозе мыши, как представлено в релевантных примерах данных, понимают как эквивалент приблизительно 7,5 мг/кг дозы крысы, которая является эквивалентом приблизительно 2,5 мг/кг дозы собаки, которая является эквивалентом приблизительно 1,5 мг/кг дозы человека. Дозу 1,5 и 0,3 мг/кг в разделах Краткое изложение и Формула изобретения интерпретируют как дозу человека, если не указано иное.Using allometric scaling with an exponential of 0.7 (i.e. dose in other species = mouse dose/((mouse weight/average weight of other species) 0.7 )) 15 mg/kg mouse dose is equivalent to approximately 7.5 mg/kg rat dose, approximately 2.5 mg/kg dog dose, and 1.5 mg/kg human dose. As used herein, a 15 mg/kg mouse dose as presented in the relevant example data is understood to be equivalent to approximately 7.5 mg/kg rat dose, which is equivalent to approximately 2.5 mg/kg dog dose, which is equivalent approximately 1.5 mg/kg human dose. The 1.5 and 0.3 mg/kg doses in the Summary and Claims sections are interpreted as human doses unless otherwise noted.
КомпозицииCompositions
Настоящее изобретение предусматривает производное натрийуретического пептида формулы (I) или его композиции, как определено в настоящем описании.The present invention provides a natriuretic peptide derivative of formula (I) or a composition thereof, as defined herein.
В одном из вариантов осуществления в формуле (I) z представляет собой 1, x представляет собой 3 или 4 и у представляет собой 3, В представляет собой лизин. В формуле (I) NP может представлять собой ANP человека (ID последовательности 1). В формуле (I) жирный ацил может содержать 12, 18, 20, 22 илиIn one embodiment, in formula (I), z is 1, x is 3 or 4, and y is 3, B is lysine. In formula (I), the NP may be human ANP (sequence ID 1). In formula (I), the fatty acyl may contain 12, 18, 20, 22 or
- 6 044180 атомов углерода.- 6,044,180 carbon atoms.
Настоящее изобретение предусматривает производное натрийуретического пептида формулы (II), как определено в настоящем описании.The present invention provides a natriuretic peptide derivative of formula (II) as defined herein.
В одном из вариантов осуществления в формуле (II) x представляет собой 2, 3 или 4 и В представляет собой лизин. В формуле (II) NP может представлять собой ANP человека (ID последовательности 1). В формуле (II), жирный ацил может содержать 12 или 18 атомов углерода. Альтернативно, жирный ацил может содержать от 14 или 18 атомов углерода, от 16 до 18 атомов углерода или от 20 или 24 атома углерода.In one embodiment, in formula (II), x is 2, 3 or 4 and B is lysine. In formula (II), the NP may be human ANP (Sequence ID 1). In formula (II), the fatty acyl may contain 12 or 18 carbon atoms. Alternatively, the fatty acyl may contain 14 or 18 carbon atoms, 16 to 18 carbon atoms, or 20 or 24 carbon atoms.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида формулы жирный ацил-(B)x-(G)3-NP, где жирный ацил имеет от 12 до 24 (например, от 12 до 18) атомов углерода;In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is a cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative of the formula fatty acyl-(B) x- (G) 3 -NP, wherein the fatty acyl has 12 to 24 (e.g., 12 to 18) carbon atoms ;
В представляет собой лизин или аргинин (например, В представляет собой лизин);B is lysine or arginine (eg, B is lysine);
x представляет собой 2-4;x represents 2-4;
G представляет собой глицин;G represents glycine;
NP представляет собой родительский натрийуретический пептид, встречающийся в природе у живого организма;NP is the parent natriuretic peptide naturally occurring in living organisms;
жирный ацил- ковалентно связывают с N-концом в (В)х;fatty acyl-covalently linked to the N-terminus in (B) x ;
жирный ацил-(B)x- ковалентно связывают с N-концом в (G)3;fatty acyl-(B) x - is covalently linked to the N-terminus in (G) 3 ;
жирный ацил-(B)x-(G)3- ковалентно связывают с N-концом в NP; и при введении млекопитающим, производное натрийуретического пептида повышает cGMP крови до уровня выше, чем соответствующий родительский NP при введении в эквивалентной дозе (например, доза в моль/кг, доза в мг/кг или доза как в моль/кг, так и в мг/кг).fatty acyl-(B) x -(G) 3 - is covalently linked to the N-terminus in NP; and when administered to mammals, the natriuretic peptide derivative increases blood cGMP to a level higher than the corresponding parent NP when administered at an equivalent dose (e.g., mol/kg dose, mg/kg dose, or both mol/kg and mg dose /kg).
В некоторых вариантах осуществления в формуле жирный ацил-(B)x-(G)3-NP, x=4; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.In some embodiments, the formula is fatty acyl-(B) x -(G) 3 -NP, x=4; NP is optionally selected from sequence IDs 1, 19, 41, and 57. For example, in some embodiments, B is lysine and NP is sequence ID 1; B represents lysine and NP represents sequence ID 19; B is lysine and NP is sequence ID 41 and/or B is lysine and NP is sequence ID 57.
В некоторых вариантах осуществления в формуле жирный ацил-(B)x-(G)3-NP, x=3; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.In some embodiments, the formula is fatty acyl-(B) x -(G) 3 -NP, x=3; NP is optionally selected from sequence IDs 1, 19, 41, and 57. For example, in some embodiments, B is lysine and NP is sequence ID 1; B represents lysine and NP represents sequence ID 19; B is lysine and NP is sequence ID 41 and/or B is lysine and NP is sequence ID 57.
В некоторых вариантах осуществления в формуле жирный ацил-(B)x-(G)3-NP, x=2; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.In some embodiments, the formula is fatty acyl-(B) x -(G) 3 -NP, x=2; NP is optionally selected from sequence IDs 1, 19, 41, and 57. For example, in some embodiments, B is lysine and NP is sequence ID 1; B represents lysine and NP represents sequence ID 19; B is lysine and NP is sequence ID 41 and/or B is lysine and NP is sequence ID 57.
В некоторых вариантах осуществления в формуле жирный ацил-(B)x-(G)3-NP, x=1; NP необязательно выбирают из любой одной из ID последовательностей 1, 19, 41 и 57. Например, в некоторых вариантах осуществления В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 1; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 19; В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 41 и/или В представляет собой лизин и NP представляет собой ID последовательности 57.In some embodiments, the formula is fatty acyl-(B) x -(G) 3 -NP, x=1; The NP is optionally selected from any one of sequence IDs 1, 19, 41, and 57. For example, in some embodiments, B is lysine and NP is sequence ID 1; B represents lysine and NP represents sequence ID 19; B is lysine and NP is sequence ID 41 and/or B is lysine and NP is sequence ID 57.
Настоящее изобретение предусматривает производное натрийуретического пептида формулы (III), как определено в настоящем описании.The present invention provides a natriuretic peptide derivative of formula (III) as defined herein.
В одном из вариантов осуществления в формуле (III) x представляет собой 0, 1, 2, 3 или 4 и В представляет собой лизин. Например, в формуле (III) x может составлять от 2 до 4, например 3. В формуле (III) NP может представлять собой ANP человека (ID последовательности 1).In one embodiment, in formula (III), x is 0, 1, 2, 3 or 4 and B is lysine. For example, in formula (III), x may be from 2 to 4, such as 3. In formula (III), the NP may be human ANP (sequence ID 1).
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида формулы (B)x-(G)y-NP, где В представляет собой лизин или аргинин (например, В представляет собой лизин);In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is a cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative of the formula (B)x-(G)y-NP, wherein B is lysine or arginine (eg, B is lysine);
x представляет собой 0-4;x represents 0-4;
G представляет собой глицин;G represents glycine;
у представляет собой 1-3;y represents 1-3;
NP представляет собой родительский натрийуретический пептид, встречающийся в природе у живого организма;NP is the parent natriuretic peptide naturally occurring in living organisms;
(B)x-(G)y- ковалентно связывают с N-концом в NP; и(B) x -(G) y - covalently linked to the N-terminus in NP; And
- 7 044180 при введении млекопитающим (B)x-(G)y-NP повышает cGMP крови до уровня выше, чем соответствующий родительский NP при введении в эквивалентной дозе (например, доза в моль/кг, доза в мг/кг или доза как в моль/кг, так и в мг/кг).- 7 044180 when administered to mammals, (B) x -(G) y -NP increases blood cGMP to a level higher than the corresponding parent NP when administered at an equivalent dose (e.g. mol/kg dose, mg/kg dose or dose as in mol/kg and mg/kg).
В некоторых вариантах осуществления в формуле (B)x-(G)y-NP x=0 и у необязательно представляет собой 1, 2 или 3; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, NP имеет ID последовательности 1; NP имеет ID последовательности 19; NP имеет ID последовательности 41 или ID последовательности 57.In some embodiments, in formula (B), x -(G) y -NP x=0 and y is optionally 1, 2, or 3; The NP is optionally selected from sequence IDs 1, 19, 41, and 57. For example, the NP has sequence ID 1; NP has sequence ID 19; NP has a sequence ID of 41 or a sequence ID of 57.
В некоторых вариантах осуществления в формуле (B)x-(G)y-NP y=3; В необязательно представляет собой лизин и x необязательно представляет собой 1, 2, 3 или 4; NP необязательно выбирают из ID последовательности 1, 19, 41 и 57. Например, NP имеет ID последовательности 1; NP имеет ID последовательности 19; NP имеет ID последовательности 41 или ID последовательности 57.In some embodiments, in formula (B) x -(G) y -NP y=3; B optionally represents lysine and x optionally represents 1, 2, 3 or 4; The NP is optionally selected from sequence IDs 1, 19, 41, and 57. For example, the NP has sequence ID 1; NP has sequence ID 19; NP has a sequence ID of 41 or a sequence ID of 57.
В некоторых вариантах осуществления, когда В представляет собой лизин или аргинин, каждый В в (В)х может представлять собой одно и то же или различное. Например, (В)х может представлять собой K, R, RR, KK, KR, RK, RRR, KKK, KRR, RKR, RRK, KKR, KRK, RKK, RRRR, KKKK, KRRR, RKRR, RRKR, RRRK, KKRR, RKKR, RRKK, KRRK, KKKR. RKKK, KRKK, KKRK, KKKR, RRRR или KKKK.In some embodiments, when B is lysine or arginine, each B in (B) x may be the same or different. For example, (B) x may be K, R, RR, KK, KR, RK, RRR, KKK, KRR, RKR, RRK, KKR, KRK, RKK, RRRR, KKKK, KRRR, RKRR, RRKR, RRRK, KKRR , RKKR, RRKK, KRRK, KKKR. RKKK, KRKK, KKRK, KKKR, RRRR or KKKK.
В некоторых вариантах осуществления производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием может представлять собой производное натрийуретического пептида, как определено в любом одном из ID последовательностей с 2 до 18, с 20 до 34, с 42 до 56 и с 58 до 72.In some embodiments, a natriuretic peptide derivative according to the disclosure may be a natriuretic peptide derivative as defined by any one of sequence IDs 2 to 18, 20 to 34, 42 to 56, and 58 to 72.
В некоторых вариантах осуществления производное натрийуретического пептида в соответствии с раскрытием может представлять собой производное натрийуретического пептида, как определено в любом одном из ID последовательностей с 73 до 86, с 87 до 95, с 96 до 104, с 105 до 113 и с 114 до 122.In some embodiments, a natriuretic peptide derivative according to the disclosure may be a natriuretic peptide derivative as defined by any one of sequence IDs 73 to 86, 87 to 95, 96 to 104, 105 to 113, and 114 to 122 .
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 9, ID последовательности 10, ID последовательности 11, ID последовательности 14, ID последовательности 18, ID последовательности 56 и ID последовательности 72.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is as defined in one of Sequence ID 9, Sequence ID 10, Sequence ID 11, Sequence ID 14, Sequence ID 18, Sequence ID 56, and Sequence ID 72.
В одном из вариантов осуществления производное натрийуретического пептида представляет собой то, что определено в одном из ID последовательности 2, ID последовательности 3, ID последовательности 4, ID последовательности 5, ID последовательности 8 и ID последовательности 44.In one embodiment, the natriuretic peptide derivative is as defined in one of Sequence ID 2, Sequence ID 3, Sequence ID 4, Sequence ID 5, Sequence ID 8, and Sequence ID 44.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу жирный ацил-(B)x-(G)3-NP или (В)х-(G)y-NP, можно в общем представлять формулой Х-пептид.In some embodiments, cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula fatty acyl-(B) x- (G) 3 -NP or (B) x- (G) y -NP may be generally represented by the formula X-peptide.
В одном из аспектов в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид, или их композиции, где фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из G, GG, GGG, BGGG, BBGGG, BBBGGG и BBBBGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы Х-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из GG, GGG, BGGG, BBGGG, BBBGGG и BBBBGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы Х-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из GGG, BGGG, BBGGG, BBBGGG и BBBBGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы Х-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из BGGG, BBGGG, BBBGGG и BBBBGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы Х-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из BBGGG, BBBGGG и BBBBGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из BBBGGG и BBBBGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X представляет собой BBBBGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В указанных выше вариантах осуществления для cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, последняя G представляет собой глицин и В представляет собой лизин или аргинин. В некоторых вариантах осуществления в любом из указанных выше вариантов осуществления для cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, последняя G представляет собой глицин и В представляет собой лизин (см., например, SEQ ID NO: 5-8, 21-26, 45-48 и 61-64). cGMP-увеличивающие производных натрийуретического пептида формулы X-пептид могут увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем их родительский натрийуретический пептид (ANP, BNP или CNP). В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида формулы X-пептид увеличивают уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который выше, чем их родитель- 8 044180 ский натрийуретический пептид (ANP, BNP или CNP). Родительский натрийуретический пептид ANP,In one aspect, provided herein are cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide, or compositions thereof, wherein the peptide moiety is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP and X is selected from G. GG, GGG, BGGG, BBGGG, BBBGGG and BBBBGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, in cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the peptide moiety is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP, and X is selected from GG, GGG, BGGG, BBGGG, BBBGGG, and BBBBGGG. attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, in cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the peptide moiety is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP, and X is selected from GGG, BGGG, BBGGG, BBBGGG, and BBBBGGG, attached to N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, in cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the peptide moiety is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP, and X is selected from BGGG, BBGGG, BBBGGG, and BBBBGGG attached to N- end of the peptide fragment. In some embodiments, in cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the peptide fragment is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP, and X is selected from BBGGG, BBBGGG, and BBBBGGG, attached to the N-terminus of the fragment peptide. In some embodiments, in cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the peptide fragment is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP, and X is selected from BBBGGG and BBBBGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, in cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the peptide fragment is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP, and X is BBBBGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment. In the above embodiments, for the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the last G is glycine and B is lysine or arginine. In some embodiments, in any of the above embodiments, for cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the last G is glycine and B is lysine (see, for example, SEQ ID NO: 5-8, 21-26 , 45-48 and 61-64). cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide can increase blood cGMP levels following administration to mammals at levels that are similar to or higher than their parent natriuretic peptide (ANP, BNP or CNP). In some embodiments, cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide increase blood cGMP levels upon administration to mammals at a level that is higher than their parent natriuretic peptide (ANP, BNP, or CNP). Parent natriuretic peptide ANP,
BNP и CNP может иметь последовательности, встречающиеся в природе у позвоночных животных или, более конкретно, встречающийся у млекопитающих натрийуретических пептид (например, SEQ ID NO:BNP and CNP may have sequences naturally occurring in vertebrates or, more specifically, a mammalian natriuretic peptide (e.g., SEQ ID NO:
1, 19, 41 или 57).1, 19, 41 or 57).
В другом аспекте в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид, или их композиции, где фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из CH3(CH2)10COKKKKGGG, CH3(CH2)12COKKKKGGG, CH3(CH2)14COKKKKGGG и CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из CH3(CH2)14COKKKKGGG и CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X представляет собой и CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В указанных выше вариантах осуществления для cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, последняя G представляет собой глицин, К представляет собой лизин и группы CH3(CH2)[10, 12, 14 или 16]СО представляют собой стандартную химическую формулу для алкилкарбонила и нижний индекс [10, 12, 14 или 16] представляет число групп СН2 в цепи алкила. cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида формулы X-пептид могут увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем их родительский натрийуретический пептид (ANP, BNP или CNP). В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида формулы X-пептид увеличивают уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который выше, чем их родительский натрийуретический пептид (ANP, BNP или CNP). Родительский натрийуретический пептид ANP, BNP и CNP может иметь последовательности, встречающиеся в природе у позвоночных животных, или более конкретно встречающийся у млекопитающих натрийуретический пептид (например, SEQ ID NO: 1, 19, 41 или 57).In another aspect, provided herein are cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide, or compositions thereof, wherein the peptide fragment is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP and X is selected from CH 3 ( CH2) 10 COKKKKGGG, CH 3 (CH 2 ) 12 COKKKKGGG, CH 3 (CH 2 ) 14 COKKKKGGG and CH 3 (CH2) 16 COKKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, in cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the peptide moiety is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP, and X is selected from CH 3 (CH2) 14 COKKKKGGG and CH 3 (CH2 ) 16 COKKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, in cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the peptide moiety is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP, and X is and CH 3 (CH2) 16 COKKKKGGG attached to N -end of the peptide fragment. In the above embodiments, for the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the last G is glycine, K is lysine, and CH3 (CH2)[ 10 , 12, 14, or 16 ]CO groups are the standard chemical formula for alkylcarbonyl and the subscript [10, 12, 14 or 16] represents the number of CH2 groups in the alkyl chain. cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives of Formula X-peptide can increase blood cGMP levels after administration to mammals at levels that are similar to or higher than their parent natriuretic peptide (ANP, BNP or CNP). In some embodiments, cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide increase blood cGMP levels upon administration to mammals at a level that is higher than their parent natriuretic peptide (ANP, BNP, or CNP). The parent natriuretic peptide ANP, BNP and CNP may have sequences naturally occurring in vertebrates, or more specifically a mammalian natriuretic peptide (eg, SEQ ID NO: 1, 19, 41 or 57).
В еще одном аспекте в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид, или их композиции, где фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из CH3(CH2)10CORRRRGGG, CH3(CH2)12CORRRRGGG, CH3(CH2)14CORRRRGGG и CH3(CH2)16CORRRRGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X выбирают из CH3(CH2)10CORRRRGGG и CH3(CH2)16CORRRRGGG, прикрепляемых к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления в cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, фрагмент пептида выбирают из (a) ANP, (b) BNP и (с) CNP и X представляет собой CH3(CH2)16CORRRRGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В указанных выше вариантах осуществления для cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида формулы X-пептид, последняя G представляет собой глицин, R представляет собой аргинин, и группы СН3(СН2)[10, 12, 14 или 16]СО представляют собой стандартную химическую формулу для алкилкарбонила и [10, 12, 14 или 16] представляет число групп СН2 в цепи алкила. cGMPувеличивающие производные натрийуретического пептида формулы X-пептид могут увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем их родительский натрийуретический пептид (ANP, BNP или CNP). В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида формулы X-пептид увеличивают уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который выше, чем их родительский натрийуретический пептид (ANP, BNP или CNP). Родительский натрийуретический пептид ANP, BNP и CNP может иметь последовательности, встречающиеся в природе у позвоночных животных, или более конкретно встречающийся у млекопитающих натрийуретический пептид (например, SEQ ID NO: 1, 19, 41 или 57).In yet another aspect, provided herein are cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide, or compositions thereof, wherein the peptide fragment is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP and X is selected from CH 3 (CH 2 ) 10 CORRRRGGG, CH3(CH2)12CORRRRGGG, CH3(CH2)14CORRRRGGG and CH3(CH2)16CORRRRGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, in cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the peptide moiety is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP, and X is selected from CH3(CH2)10CORRRRGGG and CH3(CH2)16CORRRRGGG. attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, in cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the peptide moiety is selected from (a) ANP, (b) BNP, and (c) CNP, and X is CH 3 (CH 2 ) 16 CORRRRGGG attached to N -end of the peptide fragment. In the above embodiments, for cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide, the last G is glycine, R is arginine, and the CH 3 (CH 2 )[ 10 , 12 , 14, or 16 ]CO groups are standard chemical the formula is for alkylcarbonyl and [10, 12, 14 or 16] represents the number of CH 2 groups in the alkyl chain. cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide can increase blood cGMP levels after administration to mammals at levels that are similar to or higher than their parent natriuretic peptide (ANP, BNP or CNP). In some embodiments, cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives of formula X-peptide increase blood cGMP levels upon administration to mammals at a level that is higher than their parent natriuretic peptide (ANP, BNP, or CNP). The parent natriuretic peptide ANP, BNP and CNP may have sequences naturally occurring in vertebrates, or more specifically a mammalian natriuretic peptide (eg, SEQ ID NO: 1, 19, 41 or 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой GG (G = глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. Например, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 3, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANPIn some embodiments, provided herein are cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; or a composition containing, consisting essentially of or consisting of cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; where the peptide fragment is ANP, BNP or CNP and X is GG (G = glycine) attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, the peptide fragment is an ANP. In some embodiments, the peptide fragment is BNP. In some embodiments, the peptide fragment is a CNP. X-peptide can increase blood cGMP levels following administration to mammals at levels that are similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide. For example, when the X-peptide is sequence ID 3, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP
- 9 044180- 9 044180
SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве другого примера X-пептид представляет собой ID последовательности 21, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 43, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 59, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).SLRRSSCFGGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 1). As another example, X-peptide is Sequence ID 21, X-peptide increases blood cGMP levels after administration to mammals at a level that is similar to or higher than their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 1). As an example, when the X-peptide is sequence ID 43, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (sequence ID 41 ). As an example, when the X-peptide is sequence ID 59, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (sequence ID 57 ).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой G (глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 2, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 20, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 42, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41).In some embodiments, provided herein are cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; or a composition containing, consisting essentially of or consisting of cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; wherein the peptide fragment is ANP, BNP or CNP and X is a G (glycine) attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, the peptide fragment is an ANP. In some embodiments, the peptide fragment is BNP. In some embodiments, the peptide fragment is a CNP. X-peptide can increase blood cGMP levels following administration to mammals at levels that are similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide. As an example, when the X-peptide is Sequence ID 2, the X-peptide increases blood cGMP levels upon administration to mammals at a level that is similar to or greater than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 1 ). As another example, when the X-peptide is sequence ID 20, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 19). As an example, when the X-peptide is sequence ID 42, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (sequence ID 41 ).
В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 58, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).As an example, when the X-peptide is sequence ID 58, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (sequence ID 57 ).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMPувеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой GGG (G = глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 4, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 22, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 44, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH выше, чем) их родительский натрийуретический пептид (ID последовательности 41). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 60, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).In some embodiments, provided herein are cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; or a composition containing, consisting essentially of or consisting of cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; where the peptide fragment is ANP, BNP or CNP and X is GGG (G = glycine) attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, the peptide fragment is BNP. In some embodiments, the peptide fragment is a CNP. X-peptide can increase blood cGMP levels following administration to mammals at levels that are similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide. As an example, when the X-peptide is Sequence ID 4, the X-peptide increases blood cGMP levels upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 1 ). As an example, when the X-peptide is sequence ID 22, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 19 ). As an example, when the X-peptide is sequence ID 44, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH higher than) their parent natriuretic peptide (sequence ID 41 ). As another example, when the X-peptide is sequence ID 60, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (sequence ID 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет соIn some embodiments, provided herein are cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; or a composition containing, consisting essentially of or consisting of cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; where the peptide fragment represents
- 10 044180 бой ANP, BNP или CNP и X представляет собой KGGG (K = лизин, G = глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 5, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 23, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда Xпептид представляет собой ID последовательности 45, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSsGlgCkVLRRH (ID последовательности 41).- 10 044180 fight ANP, BNP or CNP and X is KGGG (K = lysine, G = glycine) attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, the peptide fragment is BNP. In some embodiments, the peptide fragment is a CNP. X-peptide can increase blood cGMP levels following administration to mammals at levels that are similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide. As an example, when the X-peptide is Sequence ID 5, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 1 ). As an example, when the X-peptide is Sequence ID 23, the X-peptide increases blood cGMP levels upon administration to mammals at a level that is similar to or greater than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 19 ). As an example, when the Xpeptide is sequence ID 45, the X peptide increases blood cGMP levels upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSsGlgCkVLRRH (sequence ID 41).
В качестве другого примера, В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 61, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).As another example, when the X-peptide is sequence ID 61, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (Sequence ID 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой KKGGG (K = лизин, G = глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 6, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 24, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 46, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 62, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).In some embodiments, provided herein are cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; or a composition containing, consisting essentially of or consisting of cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; where the peptide fragment is ANP, BNP or CNP and X is KKGGG (K = lysine, G = glycine) attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, the peptide fragment is an ANP. In some embodiments, the peptide fragment is BNP. In some embodiments, the peptide fragment is a CNP. X-peptide can increase blood cGMP levels after administration to mammals at levels that are similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide. As an example, when the X-peptide is Sequence ID 6, the X-peptide increases blood cGMP levels upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 1 ). As an example, when the X-peptide is sequence ID 24, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 19 ). As an example, when the X-peptide is sequence ID 46, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (sequence ID 41 ). As another example, when the X-peptide is sequence ID 62, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (sequence ID 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющего формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой KKKGGG (K = лизин, G = глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 7, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 25, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 47, X-пептид увеличивает уровень cGMP кровиIn some embodiments, provided herein are cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; or a composition containing, consisting essentially of or consisting of cGMP-increasing derivatives of a natriuretic peptide having the formula X-peptide; where the peptide fragment is ANP, BNP or CNP and X is KKKGGG (K = lysine, G = glycine) attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, the peptide fragment is an ANP. In some embodiments, the peptide fragment is BNP. In some embodiments, the peptide fragment is a CNP. X-peptide can increase blood cGMP levels following administration to mammals at levels that are similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide. As an example, when the X-peptide is Sequence ID 7, the X-peptide increases blood cGMP levels upon administration to mammals at a level that is similar to or greater than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 1 ). As another example, when the X-peptide is sequence ID 25, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 19). As an example, when the X-peptide is sequence ID 47, the X-peptide increases the blood cGMP level
- 11 044180 после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В качестве еще одного другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 63, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).- 11 044180 after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (sequence ID 41). As yet another example, when the X-peptide is sequence ID 63, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC ( Sequence ID 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMPувеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой KKKKGGG (K = лизин, G = глицин), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 8, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 26, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве еще одного другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 48, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41).In some embodiments, provided herein are cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; or a composition containing, consisting essentially of or consisting of cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; where the peptide fragment is ANP, BNP or CNP and X is KKKKGGG (K = lysine, G = glycine) attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, the peptide fragment is an ANP. In some embodiments, the peptide fragment is BNP. In some embodiments, the peptide fragment is a CNP. X-peptide can increase blood cGMP levels after administration to mammals at levels that are similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide. As an example, when the X-peptide is sequence ID 8, the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 1 ). As another example, when the X-peptide is sequence ID 26, the X-peptide increases the blood cGMP level upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 19). As yet another example, when the X-peptide is sequence ID 48, the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH ( Sequence ID 41).
В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 64, X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).As another example, when the X-peptide is sequence ID 64, the X-peptide increases blood cGMP levels upon administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (sequence ID 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой CH3(CH2)pCOKKGGG (K = лизин, G = глицин и CH3(CH2)pCO представляет стандартную химическую формулу для алкилкарбонила, где р представляет собой от 10 до 22 (например, от 10 до 16) и представляет число повторяющихся групп СН2 в цепи алкила), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP или BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид.In some embodiments, provided herein are cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; or a composition containing, consisting essentially of or consisting of cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; where the peptide moiety is ANP, BNP or CNP and X is CH3 ( CH2 )pCOKKGGG (K=lysine, G=glycine and CH3 ( CH2 )pCO is the standard chemical formula for alkylcarbonyl, where p represents 10 to 22 (eg, 10 to 16) and represents the number of repeating CH 2 groups in the alkyl chain) attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, the peptide fragment is ANP or BNP. In some embodiments, the peptide fragment is an ANP. In some embodiments, the peptide fragment is BNP. In some embodiments, the peptide fragment is a CNP. X-peptide can increase blood cGMP levels after administration to mammals at levels that are similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide.
В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид ANP представляет собой SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 9, 10, 73 и 74. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 9 (фрагмент пептида представляет собой ANP и X представляет собой CH3(CH2)10COKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 10 (фрагмент пептида представляет собой ANP и X представляет собой CH3(CH2)16COKKGGG, прикрепляемый к Nконцу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид ANP представляет собой SLRRSSCFGGRMIRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19) и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 75-78. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 75 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKGGG, прикрепIn some embodiments, the parent ANP natriuretic peptide is SLRRSSCFGGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 1), and some representative cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives are Sequence IDs 9, 10, 73, and 74. As an example, when X-peptide is Sequence ID 9 (the peptide fragment is ANP and X is CH 3 (CH 2 ) 10 COKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg , higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 1). As an example, when the X-peptide is sequence ID 10 (the peptide fragment is ANP and X is CH 3 (CH 2 ) 16 COKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 1). In some embodiments, the parent ANP natriuretic peptide is SLRRSSCFGGRMIRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 19) and some representative cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives are Sequence ID 75-78. As an example, when the X peptide is sequence ID 75 (the peptide fragment is ANP, and X is CH 3 (CH 2 ) 10 COKKGGG, attached
- 12 044180 ляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGlGcNSFRY (ID последовательности 19). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 78 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRMIRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид BNP представляет собой SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 79-82. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 79 (фрагмент пептида представляет собой BNP и X представляет собой CH3(CH2)10COKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 82 (фрагмент пептида представляет собой BNP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (id последовательности 41).- 12 044180 attached to the N-terminus of the peptide fragment), X-peptide increases blood cGMP levels after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGlGcNSFRY (sequence ID 19). As another example, when the X-peptide is sequence ID 78 (the peptide fragment is ANP, and X is CH 3 (CH2) 16 COKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGRMIRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 19). In some embodiments, the parent BNP natriuretic peptide is SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (Sequence ID 41), and some representative cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives are Sequence IDs 79-82. As an example, when the X-peptide is sequence ID 79 (the peptide fragment is BNP and X is CH 3 (CH 2 ) 10 COKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (sequence ID 41). As another example, when the X-peptide is sequence ID 82 (the peptide fragment is BNP, and X is CH 3 (CH 2 ) 10 COKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (sequence id 41).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой CH3(CH2)pCOKKKgGg (K = лизин, G = глицин, группы CH3(CH2)pCO представляют собой стандартную химическую формулу для алкилкарбонила, где р представляет собой от 10 до 22 (например, или от 10 до 16) и представляет число повторяющихся групп СН2 в цепи алкила), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP или BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой CNP, имеющий последовательность GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 83-85. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 83 (фрагмент пептида представляет собой CNP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57). В качестве другого примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 85 (фрагмент пептида представляет собой CNP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой ANP, имеющий последовательность SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 11-14. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 11 (фрагмент пептида представляет собой ANP и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 14 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой ANP, имеющий последовательность SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19), и некоторые репрезенIn some embodiments, provided herein are cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; or a composition containing, consisting essentially of or consisting of cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; where the peptide fragment is ANP, BNP or CNP and X is CH 3 (CH 2 ) p COKKKgGg (K = lysine, G = glycine, the CH 3 (CH 2 ) p CO groups represent the standard chemical formula for alkylcarbonyl, where p represents from 10 to 22 (for example, or from 10 to 16) and represents the number of repeating CH 2 groups in the alkyl chain) attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, the peptide fragment is ANP or BNP. In some embodiments, the peptide fragment is an ANP. In some embodiments, the peptide fragment is BNP. In some embodiments, the peptide fragment is a CNP. X-peptide can increase blood cGMP levels after administration to mammals at levels that are similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide. In some embodiments, the parent natriuretic peptide is a CNP having the sequence GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (Sequence ID 57), and some representative cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives are Sequence ID 83-85. As an example, when the X-peptide is sequence ID 83 (the peptide fragment is CNP, and X is CH 3 (CH 2 ) 10 COKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (sequence ID 57). As another example, when the X-peptide is sequence ID 85 (the peptide fragment is CNP, and X is CH 3 (CH 2 ) 16 COKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (sequence ID 57). In some embodiments, the parent natriuretic peptide is an ANP having the sequence SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 1), and some representative cGMP-increasing derivatives of the natriuretic peptide are Sequence IDs 11-14. As an example, when the X-peptide is sequence ID 11 (the peptide fragment is ANP and X is CH 3 (CH 2 ) 10 COKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 1). As an example, when the X-peptide is sequence ID 14 (the peptide fragment is ANP, and X is CH 3 (CH 2 ) 16 COKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 1). In some embodiments, the parent natriuretic peptide is an ANP having the sequence SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 19), and some represen
- 13 044180 тативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 27-30. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 27 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 30 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой BNP, имеющий последовательность SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 49-52. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 49 (фрагмент пептида представляет собой BNP и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 52 (фрагмент пептида представляет собой BNP и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой CNP, имеющий последовательность GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 65-68. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 65 (фрагмент пептида представляет собой CNP и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 68 (фрагмент пептида представляет собой CNP и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).- 13 044180 tative cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives are Sequence ID 27-30. As an example, when the X-peptide is sequence ID 27 (the peptide fragment is ANP, and X is CH 3 (CH 2 ) 10 COKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 19). As an example, when the X-peptide is sequence ID 30 (the peptide fragment is ANP, and X is CH 3 (CH2) 16 COKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 19). In some embodiments, the parent natriuretic peptide is a BNP having the sequence SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (Sequence ID 41), and some representative cGMP-increasing derivatives of the natriuretic peptide are Sequence IDs 49-52. As an example, when the X-peptide is sequence ID 49 (the peptide fragment is BNP and X is CH 3 (CH 2 ) 10 COKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (sequence ID 41). As an example, when the X-peptide is sequence ID 52 (the peptide fragment is BNP and X is CH 3 (CH2) 16 COKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (sequence ID 41). In some embodiments, the parent natriuretic peptide is a CNP having the sequence GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (Sequence ID 57), and some representative cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives are Sequence ID 65-68. As an example, when the X-peptide is sequence ID 65 (the peptide fragment is CNP and X is CH 3 (CH 2 ) 10 COKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (sequence ID 57). As an example, when the X-peptide is sequence ID 68 (the peptide fragment is CNP and X is CH 3 (CH2) 16 COKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (sequence ID 57).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании предоставлены cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида, имеющие формулу X-пептид; или композиция, содержащая, состоящая по существу из или состоящая из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид; где фрагмент пептида представляет собой ANP, BNP или CNP и X представляет собой CH3(CH2)pCOKKKKGGG (K = лизин, G = глицин, группы CH3(CH2)pCO представляют собой стандартную химическую формулу для алкилкарбонила, где р представляет собой от 10 до 22 (например, или от 10 до 16) и представляет число повторяющихся групп СН2 в цепи алкила), прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP или BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой ANP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой BNP. В некоторых вариантах осуществления фрагмент пептида представляет собой CNP. X-пептид может увеличивать уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид. В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой ANP, имеющий последовательность SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 15-18. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 15 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 18 (фрагмент пептида представляет собой ANP и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введеIn some embodiments, provided herein are cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; or a composition containing, consisting essentially of or consisting of cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide; where the peptide fragment is ANP, BNP or CNP and X is CH 3 (CH 2 ) p COKKKKGGG (K = lysine, G = glycine, CH3(CH2)pCO groups represent the standard chemical formula for alkylcarbonyl, where p represents from 10 to 22 (eg, or 10 to 16) and represents the number of repeating CH 2 groups in the alkyl chain) attached to the N-terminus of the peptide fragment. In some embodiments, the peptide fragment is ANP or BNP. In some embodiments, the peptide fragment is an ANP. In some embodiments, the peptide fragment is BNP. In some embodiments, the peptide fragment is a CNP. X-peptide can increase blood cGMP levels after administration to mammals at levels that are similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide. In some embodiments, the parent natriuretic peptide is an ANP having the sequence SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 1), and some representative cGMP-increasing derivatives of the natriuretic peptide are Sequence IDs 15-18. As an example, when the X-peptide is sequence ID 15 (the peptide fragment is ANP, and X is CH 3 (CH 2 ) 10 COKKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 1). As an example, when the X-peptide is sequence ID 18 (the peptide fragment is ANP and X is CH 3 (CH2) 16 COKKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration
- 14 044180 ния млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 1). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой ANP, имеющий последовательность SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 31-34. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 31 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 34 (фрагмент пептида представляет собой ANP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (ID последовательности 19). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой BNP, имеющий последовательность SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 53-56. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 53 (фрагмент пептида представляет собой BNP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 56 (фрагмент пептида представляет собой BNP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (ID последовательности 41). В некоторых вариантах осуществления родительский натрийуретический пептид представляет собой CNP, имеющий последовательность GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57), и некоторые репрезентативные cGMP-увеличивающие производные натрийуретического пептида представляют собой ID последовательности 69-72. В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 69 (фрагмент пептида представляет собой CNP, и X представляет собой CH3(CH2)10COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57). В качестве примера, когда X-пептид представляет собой ID последовательности 72 (фрагмент пептида представляет собой CNP, и X представляет собой CH3(CH2)16COKKKKGGG, прикрепляемый к N-концу фрагмента пептида), X-пептид увеличивает уровень cGMP крови после введения млекопитающим при уровне, который схож или выше, чем (например, выше, чем) их родительский натрийуретический пептид CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (ID последовательности 57).- 14 044180 tion in mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 1). In some embodiments, the parent natriuretic peptide is an ANP having the sequence SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (Sequence ID 19), and some representative cGMP-enhancing derivatives of the natriuretic peptide are Sequence IDs 31-34. As an example, when the X-peptide is sequence ID 31 (the peptide fragment is ANP, and X is CH 3 (CH2) 10 COKKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 19). As an example, when the X-peptide is sequence ID 34 (the peptide fragment is ANP, and X is CH 3 (CH2) 16 COKKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide ANP SLRRSSCFGGRIDRIGAQSGLGCNSFRY (sequence ID 19). In some embodiments, the parent natriuretic peptide is BNP having the sequence SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (Sequence ID 41), and some representative cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives are Sequence ID 53-56. As an example, when the X-peptide is sequence ID 53 (the peptide fragment is BNP, and X is CH 3 (CH2) 10 COKKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (sequence ID 41). As an example, when the X-peptide is sequence ID 56 (the peptide fragment is BNP, and X is CH 3 (CH2) 16 COKKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (sequence ID 41). In some embodiments, the parent natriuretic peptide is a CNP having the sequence GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (Sequence ID 57), and some representative cGMP-enhancing derivatives of the natriuretic peptide are Sequence IDs 69-72. As an example, when the X-peptide is sequence ID 69 (the peptide fragment is CNP, and X is CH 3 (CH 2 ) 10 COKKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (sequence ID 57). As an example, when the X-peptide is sequence ID 72 (the peptide fragment is CNP, and X is CH 3 (CH 2 ) 16 COKKKKGGG attached to the N-terminus of the peptide fragment), the X-peptide increases the blood cGMP level after administration to mammals at a level that is similar to or higher than (eg, higher than) their parent natriuretic peptide CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (sequence ID 57).
Фармацевтические композиции и способы использованияPharmaceutical compositions and methods of use
Изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую натрийуретический пептид в соответствии с раскрытием и эксципиент. Фармацевтическая композиция может представлять собой фармацевтическую композицию, содержащую, состоящую по существу из или состоящую из одного или нескольких производных натрийуретического пептида, указанных выше, и эксципиента, для парентерального введения при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки или при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки, чтобы увеличивать cGMP для лечения заболевания.The invention provides a pharmaceutical composition containing a natriuretic peptide in accordance with the disclosure and an excipient. The pharmaceutical composition may be a pharmaceutical composition containing, consisting essentially of or consisting of one or more natriuretic peptide derivatives as defined above and an excipient, for parenteral administration at a dose of the natriuretic peptide derivatives of less than 1.5 mg/kg body weight per day or at a dose of natriuretic peptide derivatives of less than 0.3 mg/kg body weight per day to increase cGMP to treat the disease.
В некоторых вариантах осуществления доза производных натрийуретического пептида составляет более чем 0,0001 мг/кг массы тела в сутки. Например, доза производных натрийуретического пептида может составлять более чем 0,0001 и/или меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки. В некоторых вариантах осуществления доза производных натрийуретического пептида составляет более чем 0,0001 и/или меньше чем 1,0 мг/кг массы тела в сутки или больше чем 0,0001 и/или меньше чем 0,5 мг/кг массы тела в сутки. В некоторых вариантах осуществления доза производных натрийуретического пептида составляет более чем 0,0001 и/или меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки.In some embodiments, the dose of the natriuretic peptide derivatives is greater than 0.0001 mg/kg body weight per day. For example, the dose of natriuretic peptide derivatives may be more than 0.0001 and/or less than 1.5 mg/kg body weight per day. In some embodiments, the dose of the natriuretic peptide derivatives is greater than 0.0001 and/or less than 1.0 mg/kg body weight per day or greater than 0.0001 and/or less than 0.5 mg/kg body weight per day . In some embodiments, the dose of the natriuretic peptide derivatives is greater than 0.0001 and/or less than 0.3 mg/kg body weight per day.
В некоторых вариантах осуществления заболевание выбирают из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца. В определенных вариантах осуществления заболевание представляет собой заболевание сердца.In some embodiments, the disease is selected from hypertension, vascular congestion, and heart disease. In certain embodiments, the disease is a heart disease.
В еще одном дополнительном аспекте настоящее изобретение отличается способом лечения заболевания у пациента, включающим, состоящим по существу из или состоящим из парентерального введеIn yet another further aspect, the present invention features a method of treating a disease in a patient, comprising, consisting essentially of, or consisting of parenterally administering
- 15 044180 ния пациенту одного или нескольких производных натрийуретического пептида, указанных выше, или фармацевтической композиции, содержащей, состоящей по существу из или состоящей из одного или нескольких производных натрийуретического пептида, указанных выше, при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки или при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки для того, чтобы увеличивать cGMP крови у пациента. В некоторых вариантах осуществления заболевание выбирают из гипертензии, сосудистого застоя и заболевания сердца. В определенных вариантах осуществления заболевание представляет собой заболевание сердца.- 15 044180 administration to the patient of one or more natriuretic peptide derivatives specified above, or a pharmaceutical composition containing, consisting essentially of or consisting of one or more natriuretic peptide derivatives specified above, at a dose of natriuretic peptide derivatives less than 1.5 mg/ kg body weight per day or at a dose of natriuretic peptide derivatives of less than 0.3 mg/kg body weight per day in order to increase the patient's blood cGMP. In some embodiments, the disease is selected from hypertension, vascular congestion, and heart disease. In certain embodiments, the disease is a heart disease.
В еще одном дополнительном аспекте настоящее изобретение отличается способом увеличения cGMP крови у пациента, включающим, состоящим по существу из или состоящим из парентерального введения пациенту, нуждающемуся в этом, одного или нескольких натрийуретических производных, указанных выше, или фармацевтической композиции, содержащей, состоящей по существу из или состоящей из одного или нескольких производных натрийуретического пептида, указанных выше, при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки или при дозе производных натрийуретического пептида меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки.In yet another additional aspect, the present invention features a method of increasing blood cGMP in a patient, comprising, consisting essentially of, or consisting of parenterally administering to a patient in need thereof one or more of the natriuretic derivatives mentioned above, or a pharmaceutical composition comprising, consisting essentially of of or consisting of one or more natriuretic peptide derivatives specified above, at a dose of natriuretic peptide derivatives of less than 1.5 mg/kg body weight per day or at a dose of natriuretic peptide derivatives less than 0.3 mg/kg body weight per day.
В еще одном аспекте в настоящем изобретении описаны фармацевтические композиции, содержащие (состоящие по существу из или состоящие из) любого из cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид, описанную выше вместе с одним или несколькими подходящими эксципиентами, для парентерального и/или подкожного использования в дозе (cGMP-увеличивающего производного) меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки (например, меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки) для того, чтобы увеличивать cGMP, например, чтобы увеличивать cGMP у млекопитающих для того, чтобы лечить заболевания, которые можно улучшать посредством увеличения cGMP (например, cGMP крови). Также предусмотрены способы лечения заболеваний, которые можно улучшать посредством увеличения cGMP (например, cGMP крови), и/или увеличения cGMP (например, cGMP крови), включающие (состоящие по существу из или состоящие из парентерального и/или подкожного введения любых cGMP-увеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид, описанную выше вместе с одним или несколькими подходящими эксципиентами, при дозе (cGMP-увеличивающего производного) меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки (например, меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки). В некоторых вариантах осуществления заболевания, которые можно улучшать посредством увеличения cGMP (например, cGMP крови) включают, состоят по существу из или состоят из гипертензии, сосудистого застоя, заболевания сердца; и лечение может включать, состоять по существу из или состоять из парентерального и/или подкожного введения любого из cGMPувеличивающих производных натрийуретического пептида, имеющих формулу X-пептид, описанную выше, вместе с одним или несколькими подходящими эксципиентами, при дозе (cGMP-увеличивающего производного) меньше чем 1,5 мг/кг массы тела в сутки (например, меньше чем 0,3 мг/кг массы тела в сутки). В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения, выбирают из ID последовательности 2-18, 20-35, 37, 38, 42-56 и 58-85, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 2-8, 20-26, 42-48 и 58-64, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 9-18, 27-35, 37, 38, 49-56 и 65-122, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 9, 10, 73-89, 96-98, 105-107 и 114-116, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 9, 75, 79 и 83, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 10, 78, 82 и 86, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 10, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 78, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 82, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторыхIn yet another aspect, the present invention provides pharmaceutical compositions containing (consisting essentially of or consisting of) any of the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide described above together with one or more suitable excipients, for parenteral and/or or subcutaneous use at a dose (of a cGMP-increasing derivative) of less than 1.5 mg/kg body weight per day (eg, less than 0.3 mg/kg body weight per day) to increase cGMP, e.g. cGMP in mammals in order to treat diseases that can be improved by increasing cGMP (eg blood cGMP). Also provided are methods of treating diseases that can be improved by increasing cGMP (e.g., blood cGMP), and/or increasing cGMP (e.g., blood cGMP), including (consisting essentially of or consisting of parenteral and/or subcutaneous administration of any cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide described above together with one or more suitable excipients, at a dose (of the cGMP-increasing derivative) of less than 1.5 mg/kg body weight per day (for example, less than 0.3 mg/ kg body weight per day).In some embodiments, diseases that can be improved by increasing cGMP (eg, blood cGMP) include, consist essentially of, or consist of hypertension, vascular congestion, heart disease; and the treatment may include, consist essentially of of or consist of parenteral and/or subcutaneous administration of any of the cGMP-increasing natriuretic peptide derivatives having the formula X-peptide described above, together with one or more suitable excipients, at a dose (of the cGMP-increasing derivative) of less than 1.5 mg/kg body weight per day (for example, less than 0.3 mg/kg body weight per day). In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide, in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment, is selected from sequence IDs 2-18, 20-35, 37, 38, 42-56, and 58-85. which is administered at the dose indicated above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence IDs 2-8, 20-26, 42-48, and 58-64, which is administered at a dose indicated above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence IDs 9-18, 27-35, 37, 38, 49-56, and 65-122, which administered at the dose indicated above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence IDs 9, 10, 73-89, 96-98, 105-107, and 114-116, which administered at the dose indicated above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence IDs 9, 75, 79, and 83, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence IDs 10, 78, 82, and 86, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 10, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 78, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 82, which is administered at the dosage specified above. In some
- 16 044180 вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 86, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 11-14, 27-30, 49-52, 65-68, 90-92, 99-101, 108-110 и 117-119, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 11, 14, 27, 30, 49, 52, 65 и 68, которое вводят при дозе, указанной выше.- 16 044180 embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide, in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 86, which is administered at the dose specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from Sequence ID 11-14, 27-30, 49-52, 65-68, 90-92, 99 -101, 108-110 and 117-119, which is administered at the dose indicated above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence ID 11, 14, 27, 30, 49, 52, 65, and 68, which is administered at a dose indicated above.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 96-122, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 102-104, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 11, 27, 49 и 65, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 11, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 27, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 49, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 65, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 14, 30, 52 и 68, которое вводят при дозе, указанной выше.In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence ID 96-122, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence ID 102-104, which is administered at the dose specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence IDs 11, 27, 49, and 65, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 11, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 27, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 49, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 65, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence IDs 14, 30, 52, and 68, which is administered at the dosage specified above.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 14, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 30, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 52, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 68, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 15-18, 31-34, 53-56, 69-72, 93-95, 102-104, 111-113 и 120-122, которое вводят при дозе, указанной выше.In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 14, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 30, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 52, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 68, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from Sequence ID 15-18, 31-34, 53-56, 69-72, 93-95, 102 -104, 111-113 and 120-122, which is administered at the dose indicated above.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 15, 18, 31, 34, 53, 56, 69 и 72, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 15, 31, 53 и 69, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 15, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 31, которое вводят при дозе, указанной выше.In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence ID 15, 18, 31, 34, 53, 56, 69, and 72, which is administered at a dose indicated above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence IDs 15, 31, 53, and 69, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 15, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 31, which is administered at the dosage specified above.
- 17 044180- 17 044180
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 53, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 69, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 18, 34, 56 и 72, которое вводят при дозе, указанной выше.In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 53, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 69, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence IDs 18, 34, 56, and 72, which is administered at the dosage specified above.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 18, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 34, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 56, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 72, которое вводят при дозе, указанной выше.In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 18, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 34, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 56, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 72, which is administered at the dosage specified above.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 93, 102, 111 и 120, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 93, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 102, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 111, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 120, которое вводят при дозе, указанной выше.In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence IDs 93, 102, 111 and 120, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 93, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 102, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 111, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 120, which is administered at the dosage specified above.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 94, 103, 112 и 121, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 94, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 103, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 112, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 121, которое вводят при дозе, указанной выше.In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence IDs 94, 103, 112, and 121, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 94, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 103, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 112, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 121, which is administered at the dosage specified above.
В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения выбирают из ID последовательности 95, 104, 113 и 122, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 95, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собой ID последовательности 104, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляетIn some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in the pharmaceutical composition or used in the methods of treatment is selected from sequence IDs 95, 104, 113 and 122, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 95, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment is Sequence ID 104, which is administered at the dosage specified above. In some embodiments, the cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula X-peptide, in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment, is
- 18 044180 собой ID последовательности 113, которое вводят при дозе, указанной выше. В некоторых вариантах осуществления cGMP-увеличивающее производное натрийуретического пептида, имеющее формулу- 18 044180 is sequence ID 113, which is administered at the dose indicated above. In some embodiments, a cGMP-enhancing natriuretic peptide derivative having the formula
X-пептид, в фармацевтической композиции или используемое в способах лечения представляет собойX-peptide, in a pharmaceutical composition or used in methods of treatment, is
ID последовательности 122, которое вводят при дозе, указанной выше.Sequence ID 122, which is administered at the dose indicated above.
Следующий пример включен с целью иллюстрации, не ограничения, описанных вариантов осуществления.The following example is included for the purpose of illustration, not limitation, of the described embodiments.
ПримерExample
Многие возможные пути доступны для того, чтобы увеличивать cGMP in vivo для терапевтических целей, такие как введение экзогенного cGMP или лигандов, которые увеличивают продуцирование эндогенного cGMP или снижают его разрушение. Экзогенный лиганд может стремиться влиять на многие различные эндогенные мишени/рецепторы, включая стимуляцию пути оксида азота (I), ингибирование фосфодиэстеразы, которая разрушает cGMP, или стимуляцию различных рецепторов натрийуретических пептидов (NPRA или NPRB).Many possible routes are available to increase cGMP in vivo for therapeutic purposes, such as administration of exogenous cGMP or ligands that increase endogenous cGMP production or reduce its degradation. An exogenous ligand may seek to influence many different endogenous targets/receptors, including stimulation of the nitric oxide (I) pathway, inhibition of phosphodiesterase that degrades cGMP, or stimulation of various natriuretic peptide receptors (NPRA or NPRB).
Осуществляли исследование для того, чтобы определять, оказывает ли пролонгированное присутствие ANP в крови замедленный фармакодинамический эффект, отражаемый в повышении концентрации cGMP крови, и чтобы определять, будет ли это повышение пропорциональным уровню ANP. Определяли уровень cGMP крови относительно ANP. К удивлению, несмотря на повышенный уровень ANP в часы 2 и 8, уровень cGMP не оставался повышенным, что указывает на то, что длительно действующие составы нативного ANP для поддержания уровня ANP крови на повышенным уровне могут не работать, как ожидалось. Эта проблема не задокументирована в литературе, и отсутствовала причина для решения этой ранее неизвестной проблемы. Существует две возможности для объяснения этого наблюдения: 1) обнаруживаемый ANP может быть неактивным или 2) переполнение рецептора ANP может вести к истощению рецептора. Чтобы исследовать, будет ли переполнение рецепторов ANP вести к утрате ответа в более поздний момент времени и одновременно исключить первую возможность, осуществляли исследование, чтобы установить, можно ли восстанавливать повышение cGMP плазмы после второго введения свежего и (заведомо) активного ANP. Для этого исследования использовали 4 группы мышей Balb/c (п=3/группа; самки в возрасте 5-6 недель; 18-25 г) и оценивали уровни cGMP в различные моменты времени после введения ANP со вторым введением ANP и без него. Высокую дозу специально использовали для того, чтобы гарантировать, что, если наступало истощение рецептора, это происходило при первой дозе и нулевой или минимальный ответ возникал после второй дозы. Оценивали два последующих s.c. (подкожных) введения ANP, сформулированного в полимерном эксципиенте (для того чтобы увеличивать стабильность in vivo). Кровь брали перед дозированием (0 ч), через 2 и 8 ч после дозирования. Две группы дозирования получали вторую дозу через 6 ч. Образцы крови (100 мкл/точка) брали из ретроорбитального синуса и помещали в охлажденные пробирки, содержащие EDTA дикалия. Образцы крови центрифугировали на 13000 об/мин в течение 10 мин при 4°С для того, чтобы отделять плазму. Образцы плазмы анализировали на cGMP с использованием набора cGMP ELISA (GE Healthcare Life Sciences, Marlborough, MA) в соответствии с протоколом производителя. Полная процедура включала: 1) измерить базовый уровень cGMP перед введением; 2) инъецировать ANP и измерить максимальный ответ через 2 ч; 3) инъецировать второй ANP через 6 ч и измерить максимальный ответ cGMP через 8 ч, чтобы видеть, если будет достигнуто дополнительное повышение cGMP. Если дополнительно имело место повышение, которое по меньшей мере равно или больше момента времени 2 ч, то имела место утрата ответа и рецептор может не быть истощен даже при высокой дозе. Если ответ через 8 ч меньше, чем ответ через 2 ч, то разумно предположить, что происходило истощение рецептора; 4) инъецировать более высокую дозу, чтобы видеть ответ на дозу. Если ответ на дозу не наблюдали, то рецептор был истощен или насыщен. Однако известно, что комплексы ANP-рецептор подвергались интернализации клетками, что может вести к истощению, если запас рецептора ограничен. Уровень ANP, ассоциированный с cGMP, также измеряли для того, чтобы подтверждать, что истощение рецептора было результатом отсутствия восприимчивости, если это имеет место. Ассоциированный уровень ANP измеряли с использованием набора для анализа ELISA (GE Healthcare Life Sciences, Marlborough, MA) в соответствии с протоколом производителя. Результаты этого исследования представлены в табл. 1.A study was conducted to determine whether the prolonged presence of ANP in the blood has a delayed pharmacodynamic effect reflected in an increase in blood cGMP concentrations and to determine whether this increase would be proportional to the level of ANP. Blood cGMP level relative to ANP was determined. Surprisingly, despite elevated ANP levels at hours 2 and 8, cGMP levels did not remain elevated, indicating that long-acting native ANP formulations to maintain blood ANP levels at elevated levels may not work as expected. This problem is not documented in the literature, and there was no reason to solve this previously unknown problem. There are two possibilities to explain this observation: 1) the detected ANP may be inactive or 2) receptor overload by ANP may lead to receptor depletion. To investigate whether flooding of ANP receptors would lead to loss of response at a later time point while ruling out the former possibility, a study was conducted to determine whether the increase in plasma cGMP could be restored after a second administration of fresh and (known) active ANP. For this study, 4 groups of Balb/c mice were used (n=3/group; females 5-6 weeks old; 18-25 g) and cGMP levels were assessed at various time points after ANP administration with and without a second ANP administration. The high dose was specifically used to ensure that if receptor depletion occurred, it occurred with the first dose and zero or minimal response occurred after the second dose. Two subsequent s.c. were assessed. (subcutaneous) administration of ANP formulated in a polymeric excipient (to increase stability in vivo). Blood was collected before dosing (0 h), 2 and 8 h after dosing. The two dosing groups received a second dose 6 hours later. Blood samples (100 μl/point) were collected from the retro-orbital sinus and placed in chilled tubes containing dipotassium EDTA. Blood samples were centrifuged at 13,000 rpm for 10 min at 4°C to separate plasma. Plasma samples were analyzed for cGMP using a cGMP ELISA kit (GE Healthcare Life Sciences, Marlborough, MA) according to the manufacturer's protocol. The complete procedure included: 1) measure baseline cGMP levels before administration; 2) inject ANP and measure the maximum response after 2 hours; 3) inject a second ANP after 6 hours and measure the maximum cGMP response after 8 hours to see if an additional increase in cGMP is achieved. If additionally there was an increase that was at least equal to or greater than the 2 hour time point, then there was a loss of response and the receptor may not be depleted even at a high dose. If the response at 8 h is less than the response at 2 h, then it is reasonable to assume that receptor depletion has occurred; 4) inject a higher dose to see dose response. If no dose response was observed, then the receptor was depleted or saturated. However, ANP-receptor complexes are known to be internalized by cells, which can lead to depletion if the receptor supply is limited. The level of ANP associated with cGMP was also measured to confirm that receptor depletion was the result of a lack of responsiveness, if any. Associated ANP levels were measured using an ELISA assay kit (GE Healthcare Life Sciences, Marlborough, MA) according to the manufacturer's protocol. The results of this study are presented in table. 1.
Результаты показывали, что, когда предпринимали попытку стимуляции NPRA с использованием экзогенно вводимого предсердного натрийуретического пептида (ANP), способность натрийуретического пептида увеличивать cGMP in vivo выглядела ограниченной кажущимся истощением рецептора при непрерывной лигандной стимуляции при высокой дозе. Когда мышам давали болюс ANP (12 мг/кг; s.c), уровень cGMP крови возрастал приблизительно на 80 пмоль/мл выше базового уровня через 2 ч и возвращался к базовому уровню (40 пмоль/мл) через 8 ч. Однако когда второй болюс ANP давали через 6 ч, уровень cGMP крови не возрастал на ожидаемые дополнительные 80 пмоль/мл через 8 ч, если не происходило истощение рецептора (см. табл. 1).The results showed that when NPRA stimulation was attempted using exogenously administered atrial natriuretic peptide (ANP), the ability of natriuretic peptide to increase cGMP in vivo appeared limited by the apparent depletion of the receptor with continuous ligand stimulation at high dose. When mice were given a bolus of ANP (12 mg/kg; s.c.), blood cGMP levels increased approximately 80 pmol/ml above baseline after 2 h and returned to baseline (40 pmol/ml) after 8 h. However, when a second bolus of ANP given after 6 hours, the blood cGMP level did not increase by the expected additional 80 pmol/ml after 8 hours unless receptor depletion occurred (see Table 1).
- 19 044180- 19 044180
Таблица 1Table 1
Результаты, показывающие, что имело место кажущееся истощение рецептора ANPResults showing that there was apparent depletion of the ANP receptor
*Следует отметить, что уровень cGMP крови через 2 ч после введения однократной дозы составлял 113 пмоль/мл при соответствующем уровне ANP 67 нг/мл. Однако если отсутствовало истощение рецептора, можно ожидать, что при втором введении через 6 ч уровень cGMP через 8 ч (2 ч после второго введения) будет значительно выше чем 113 пмоль/мл (если не таким же), вместо этого cGMP был значительно ниже. Более низкий уровень cGMP показывал истощение рецептора, что ведет к отсутствию или ограниченному физиологическому ответу, как отражено в измеряемых уровнях cGMP.*It should be noted that the blood cGMP level 2 hours after administration of a single dose was 113 pmol/ml with a corresponding ANP level of 67 ng/ml. However, if there was no receptor depletion, one would expect that with the second administration 6 hours later, the cGMP level at 8 hours (2 hours after the second administration) would be significantly higher than 113 pmol/ml (if not the same), but instead the cGMP was significantly lower. Lower cGMP levels indicated receptor depletion, leading to absent or limited physiological response as reflected in measured cGMP levels.
Уровни ANP через 2 ч усредняли для всех групп, которые получали одну и ту же дозу, поскольку во всех случаях они получали одно и то же лечение вплоть до 2 ч. Уровни ANP через 8 ч в тех группах, которые получали второе введение, совпадали с суммой уровней через 2 ч и 8 ч из группы одного введения.ANP levels at 2 hours were averaged for all groups that received the same dose because they all received the same treatment up to 2 hours. ANP levels at 8 hours in those groups that received a second dose were consistent with the sum of levels after 2 hours and 8 hours from the group of one administration.
Эта новая находка показывала, что, возможно, NPRA (рецептор ANP) может быть истощен при непрерывной стимуляции высокой дозой ANP. В данной области известно, что эффект истощения/интернализации рецептора может быть частью естественного механизма отрицательной обратной связи биологической системы. Единственный известный путь для измерения этой системы состоит в том, чтобы увеличивать экспрессию рецептора NPRA, что сейчас невозможно у не рекомбинантного организма, который нуждается в лечении для того, чтобы увеличивать cGMP крови. Это подсказанное исследование новых лигандов, которые потенциально более активны в отношении увеличения cGMP и могут ограничивать кажущееся истощение рецептора, наблюдали в табл. 1. Нелогично направленно воздействовать на рецептор, который доподлинно истощается (по причине низкого уровня экспрессии) при стимуляции из-за интернализации рецептора, однако будет полезно обнаружить лиганд, который может замедлять интернализацию/истощение рецептора, например, посредством изменения существующего лиганда ANP с использованием модификации, которая может замедлять или предотвращать интернализацию/истощение рецептора, при этом сохраняя или усиливая активность лиганда ANP. Однако изменения существующего пептида ANP имеют непредсказуемые и неочевидные исходы в отношении активности, так что единственный путь для обнаружения активных лигандов для увеличения cGMP крови с ограниченным эффектом интернализации рецептора состоял в итеративном тестировании изменения индивидуального натрийуретического пептида in vivo.This new finding showed that perhaps NPRA (ANP receptor) could be depleted by continuous stimulation with a high dose of ANP. It is known in the art that the receptor depletion/internalization effect may be part of a natural negative feedback mechanism of a biological system. The only known way to measure this system is to increase the expression of the NPRA receptor, which is currently not possible in a non-recombinant organism that requires treatment in order to increase blood cGMP. This prompted exploration of new ligands that are potentially more active in increasing cGMP and may limit apparent receptor depletion were observed in Table 1. 1. It is counterintuitive to target a receptor that is intrinsically depleted (due to low expression) upon stimulation due to receptor internalization, but it would be useful to discover a ligand that can slow down receptor internalization/depletion, for example by altering an existing ANP ligand using a modification , which can slow or prevent receptor internalization/depletion while maintaining or enhancing ANP ligand activity. However, changes to the existing ANP peptide have unpredictable and non-obvious outcomes in terms of activity, so the only way to discover active ligands to increase blood cGMP with limited effect of receptor internalization was to iteratively test changes in individual natriuretic peptide in vivo.
Создавали различные производные ANP и осуществляли их скрининг на увеличение силы in vivo при ограничении эффектов кажущегося истощения рецептора (или, возможно, могут действовать на другие cGMP-увеличивающие рецепторы) посредством изучения уровня cGMP крови в конкретные моменты времени. Любые новые производные, которые активны (указывает уровень cGMP крови через 2 ч) и не вызывают интернализации рецептора (указывает уровень cGMP через 6 ч) по сравнению с контролемVarious ANP derivatives were created and screened for increased potency in vivo while limiting the effects of apparent receptor depletion (or perhaps could act on other cGMP-enhancing receptors) by examining blood cGMP levels at specific time points. Any new derivatives that are active (indicates blood cGMP level at 2 hours) and does not cause receptor internalization (indicates cGMP level at 6 hours) compared to control
-20044180 родительского пептида ANP, следует квалифицировать как новые потенциальные средства, увеличивающие cGMP крови. Создавали различные производные и тестировали их in vivo для того, чтобы определять уровень cGMP крови через 2 и 6 ч после подкожного введения мышам 15 мг/кг (что представляет собой аллометрический эквивалент дозы человека 1,5 мг/кг), с целью найти производные, которые можно использовать в терапии для увеличения cGMP крови.-20044180 of the parent peptide ANP should be classified as a new potential blood cGMP-increasing agent. Various derivatives were created and tested in vivo to determine blood cGMP levels 2 and 6 hours after subcutaneous administration of 15 mg/kg (representing the allometric equivalent of the human dose of 1.5 mg/kg) in mice, with the goal of finding derivatives that which can be used in therapy to increase blood cGMP.
Многие из защищенных аминокислотных остатков, которые можно использовать при синтезе различных производных ANP по этому раскрытию, коммерчески доступны у поставщиков аминокислот. Кроме того, все пептиды, которые являются предметом настоящего раскрытия можно синтезировать с помощью внешних общих поставщиков пептидов, таких как Anaspec, San Jose CA. USA, Polypeptide laboratories, Torrance, CA, или ChemPep Inc, Miami, FL. Все пептиды, которые являются предметом настоящего раскрытия синтезировали в соответствии с описаниями строения и получали, очищали и обрабатывали в соответствии с подробными инструкциями. Синтез пептидов по настоящему раскрытию могут легко выполнять специалисты в данной области и, предпочтительно, через твердофазный синтез. В кратком изложении, защищенную аминокислоту, соответствующую С-концу пептида, подлежащего получению (с помощью Fmoc или Boc, как известно в данной области), сначала иммобилизуют или конъюгируют со смолой через карбоксильную группу. За этим следует снятие защитной группы с α-аминогруппы для того, чтобы сделать возможным последующее добавление второй защищенной аминокислоты, после чего следует снятие защитной группы с α-аминогруппы, добавление третьей защищенной аминокислоты, после чего следует снятие защитной группы второй аминокислоты и так далее до тех пор, пока не будет добавлена последняя N-концевая аминокислота или жирная кислота. Отщепление от смолы, снятие защитных групп с функциональных групп аминокислот и очистка схожи со стандартным синтезом пептидов, как известно в данной области. Очистки можно добиваться, используя любые стандартные подходы, такие как жидкостная хроматография высокого давления с обращенной фазой (RP HPLC) на колонках с алкилированным диоксидом кремния, например С4-С18 диоксидом кремния. Такое фракционирование на колонке в целом выполняют посредством запуска линейных градиентов, например, 10-90%, возрастающего % органического растворителя, например ацетонитрила, в водном буфере, обычно содержащем небольшое количество (например, 0,1%) средства для образования пары ионов, такого как трифторуксусная кислота (TFA) или триэтиламин (TEA). Альтернативно, ионнообменную HPLC можно использовать для разделения пептидных частиц на основе их зарядовых характеристик. Собирают фракции колонки, и те, которые содержат пептид желаемой/требуемой чистоты, необязательно объединяют с эталоном для детектора тандемной масс-спектрометрии. Затем пептид обрабатывают установленным образом для замены расщепляющей кислоты (например, TFA) на фармацевтически приемлемый анион кислоты и для того, чтобы сделать возможным формирование внутримолекулярных дисульфидных мостиков в разбавленном растворе с использованием подходящего окислителя. Формирование этого внутримолекулярного дисульфидного мостика можно подтвердить посредством анализа HPLC/MS.Many of the protected amino acid residues that can be used in the synthesis of the various ANP derivatives of this disclosure are commercially available from amino acid suppliers. In addition, all peptides that are the subject of the present disclosure can be synthesized using external general peptide suppliers such as Anaspec, San Jose CA. USA, Polypeptide laboratories, Torrance, CA, or ChemPep Inc, Miami, FL. All peptides that are the subject of this disclosure were synthesized in accordance with the structural descriptions and were prepared, purified and processed in accordance with detailed instructions. The synthesis of the peptides of the present disclosure can be easily performed by those skilled in the art and preferably through solid phase synthesis. Briefly, the protected amino acid corresponding to the C-terminus of the peptide to be produced (using Fmoc or Boc, as known in the art) is first immobilized or conjugated to the resin via a carboxyl group. This is followed by deprotection of the α-amino group to allow subsequent addition of a second protected amino acid, followed by deprotection of the α-amino group, addition of a third protected amino acid, followed by deprotection of the second amino acid, and so on until until the last N-terminal amino acid or fatty acid is added. Resin cleavage, deprotection of amino acid functional groups, and purification are similar to standard peptide synthesis as known in the art. Purification can be achieved using any standard approaches, such as reverse phase high pressure liquid chromatography (RP HPLC) on alkylated silica columns, for example C 4 -C 18 silica. Such on-column fractionation is generally accomplished by running linear gradients, e.g., 10-90%, of increasing % organic solvent, e.g., acetonitrile, in an aqueous buffer, typically containing a small amount (e.g., 0.1%) of an ion pairing agent such such as trifluoroacetic acid (TFA) or triethylamine (TEA). Alternatively, ion exchange HPLC can be used to separate peptide particles based on their charge characteristics. Column fractions are collected, and those containing the peptide of the desired/required purity are optionally combined with a tandem mass spectrometry detector standard. The peptide is then processed in a suitable manner to replace the cleavage acid (eg TFA) with a pharmaceutically acceptable acid anion and to allow the formation of intramolecular disulfide bridges in dilute solution using a suitable oxidizing agent. The formation of this intramolecular disulfide bridge can be confirmed by HPLC/MS analysis.
Для 2-точечной оценки cGMP по различным производным, тестовые образцы перед лиофилизацией растворяли в воде (Lonza, Wakersville, MD). Перед использованием, лиофилизированный тестовый образец растворяли в солевом растворе, затем подкожно инъецировали 15 мг/кг самкам мышей CD-1 в возрасте 6-8 недель (n=3). Образцы крови брали через 2 и 6 ч с использованием пробирки для сбора крови K2EDTA. Затем пробирку для сбора центрифугировали на 13000 об/мин в течение 10 мин при 4°С для того, чтобы отделять плазму. Плазму анализировали с использованием cGMP Direct Biotrak EIA (GE Healthcare Life Sciences, Marlborough, MA). Следует отметить, что, используя аллометрическое масштабирование при экспоненте 0,7 [доза у другого вида=доза мыши/((масса мыши/усредненная масса другого биологического вида)0,7)], 15 мг/кг у мышей эквивалентно приблизительно 7,5 мг/кг дозы крысы, приблизительно 2,5 мг/кг дозы собаки и 1,5 мг/кг дозы человека. В целях настоящего раскрытия 15 мг/кг у мышей, как представлено в релевантных примерах данных, следует понимать как эквивалент приблизительно 7,5 мг/кг дозы крысы, которая является эквивалентом приблизительно 2,5 мг/кг дозы собаки, которая является эквивалентом приблизительно 1,5 мг/кг дозы человека. Поскольку ответ cGMP мышей на 15 мг/кг дозу вновь обнаруженных производных (см. табл. 2) достаточно высок, будет разумно использовать суточные дозы, которые ниже чем 15 мг/кг для мышей, 7,5 мг/кг для крысы, 2,5 мг/кг для собаки и 1,5 мг/кг для человека, поскольку любая более высокая доза может вести к слишком большому увеличению cGMP, которое может вести к слишком большому или даже опасному падению кровяного давления, если не сформулировать в системе доставки с очень медленным высвобождением. Фактически, на основе ответа cGMP, более предпочтительно использовать суточные дозы, которые ниже 5 мг/кг для мышей, 1,5 мг/кг для крысы, 0,5 мг/кг для собаки и 0,3 мг/кг для человека. Дополнительно, уровень cGMP крови предпочтительно превышает нормальный базовый уровень в 1,5-3 раза. Нормальный базовый уровень cGMP в крови или плазме составлял приблизительно 20-50 пмоль/мл, но мог слегка варьировать в зависимости от набора для анализа, используемого для измерения уровня.For 2-point cGMP assessment of various derivatives, test samples were dissolved in water (Lonza, Wakersville, MD) before lyophilization. Before use, the lyophilized test sample was dissolved in saline and then injected subcutaneously with 15 mg/kg into 6-8 week old female CD-1 mice (n=3). Blood samples were collected at 2 and 6 h using a K2EDTA blood collection tube. The collection tube was then centrifuged at 13,000 rpm for 10 min at 4°C to separate the plasma. Plasma was analyzed using cGMP Direct Biotrak EIA (GE Healthcare Life Sciences, Marlborough, MA). It should be noted that using allometric scaling at an exponent of 0.7 [dose in other species = mouse dose/((mouse weight/average weight of other species) 0.7 )], 15 mg/kg in mice is equivalent to approximately 7.5 mg/kg rat dose, approximately 2.5 mg/kg dog dose, and 1.5 mg/kg human dose. For the purposes of this disclosure, 15 mg/kg in mice, as presented in the relevant example data, should be understood as equivalent to approximately 7.5 mg/kg rat dose, which is equivalent to approximately 2.5 mg/kg dog dose, which is equivalent to approximately 1 .5 mg/kg human dose. Since the response of cGMP mice to a 15 mg/kg dose of the newly discovered derivatives (see Table 2) is quite high, it would be prudent to use daily doses that are lower than 15 mg/kg for mice, 7.5 mg/kg for rats, 2. 5 mg/kg for a dog and 1.5 mg/kg for a human, since any higher dose may lead to too much of an increase in cGMP, which may lead to too large or even a dangerous drop in blood pressure if not formulated in a delivery system with a very slow release. In fact, based on the cGMP response, it is more preferable to use daily doses that are below 5 mg/kg for mice, 1.5 mg/kg for rats, 0.5 mg/kg for dogs, and 0.3 mg/kg for humans. Additionally, the blood cGMP level is preferably 1.5 to 3 times the normal baseline level. Normal baseline blood or plasma cGMP levels were approximately 20-50 pmol/mL but could vary slightly depending on the assay kit used to measure the level.
Результаты представлены в табл. 2. Итеративное тестирование и модификации на С-конце или изменение L-аргинина около N-конца на D-аргинин (ID последовательности 39 и 40) вело к утрате илиThe results are presented in table. 2. Iterative testing and modifications at the C-terminus or changing L-arginine near the N-terminus to D-arginine (sequence IDs 39 and 40) resulted in loss or
- 21 044180 снижению активности. Дополнительно, изменение аминокислоты на С-конце (ID последовательности 37 и 38) вело к ограниченному увеличению активности. Достраивание N-конца (ID последовательности 2-8, 44, 42, 60, 58) с использованием различного числа глицинов и основных аминокислот неожиданно не вело к утрате активности по сравнению с ANP. Однако различные ANP с достроенными N-концами с использованием глицина, основной аминокислоты и добавлением жирной кислоты неожиданно увеличивали силу (см. данные для 2 ч в табл. 2; ID последовательности 9, 10, 11, 14, 15, 18, 56, 72) и предотвращали кажущееся истощение/интернализацию рецептора (см. данные для 6 ч в табл. 2; ID последовательности 15, 18). Схожие результаты наблюдали с использованием других натрийуретических пептидов (достроенные BNP и CNP; ID последовательности 56, 72). Модификации с использованием жирной кислоты без глицина имели слегка увеличенную активность, но не достоверный эффект на кажущуюся интернализацию рецептора по сравнению с контрольным ANP (см. данные для 6 ч в табл. 2; ID последовательности 35).- 21 044180 decrease in activity. Additionally, changing the amino acid at the C-terminus (sequence IDs 37 and 38) led to a limited increase in activity. Extension of the N-terminus (sequence ID 2-8, 44, 42, 60, 58) using different numbers of glycines and basic amino acids unexpectedly did not lead to a loss of activity compared to ANP. However, various ANPs with N-terminal extensions using glycine, a basic amino acid, and the addition of a fatty acid unexpectedly increased potency (see 2 h data in Table 2; Sequence IDs 9, 10, 11, 14, 15, 18, 56, 72 ) and prevented apparent receptor depletion/internalization (see 6 h data in Table 2; Sequence ID 15, 18). Similar results were observed using other natriuretic peptides (extended BNP and CNP; sequence ID 56, 72). Modifications using fatty acid without glycine had slightly increased activity, but no significant effect on apparent receptor internalization compared to control ANP (see data for 6 hours in Table 2; sequence ID 35).
Таблица 2table 2
Сила (cGMP 2 ч) и истощение рецептора с помощью (cGMP 6 ч) различных пептидовPotency (cGMP 2 h) and receptor depletion by (cGMP 6 h) various peptides
- 22 044180- 22 044180
- 23 044180- 23 044180
Как используют в настоящем описании, доза 1,5 мг/кг для человека также будет эквивалентом 15 мг/кг у мышей, как представлено в релевантных примерах данных, которая является эквивалентом приблизительно 7,5 мг/кг дозе крысы, которая является эквивалентом приблизительно 2,5 мг/кг дозе собаки, которая является эквивалентом приблизительно 1,5 мг/кг дозе человека. Поскольку ответ мышей на 15 мг/кг достаточно высок для вновь обнаруженных производных (см. табл. 2), разумно использоватьAs used herein, a dose of 1.5 mg/kg in humans would also be equivalent to 15 mg/kg in mice, as presented in the relevant example data, which is equivalent to approximately 7.5 mg/kg in rats, which is equivalent to approximately 2 .5 mg/kg dog dose, which is equivalent to approximately 1.5 mg/kg human dose. Since the response of mice to 15 mg/kg is quite high for the newly discovered derivatives (see Table 2), it is reasonable to use
Claims (19)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/475,147 | 2017-03-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA044180B1 true EA044180B1 (en) | 2023-07-28 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7126270B2 (en) | NPRA agonists, compositions and uses thereof | |
| US12083164B2 (en) | Amylin analogues | |
| AU2016232218B2 (en) | Amylin analogues | |
| AU2020200934B2 (en) | Long-acting adrenomedullin derivative | |
| EP3206707B1 (en) | Fc-ela-32 and its use in the treatment of cardiac conditions | |
| CN112876552A (en) | Long-acting adrenomedullin derivative | |
| EA044180B1 (en) | NPRA AGONISTS, COMPOSITIONS AND THEIR USES | |
| KR102714599B1 (en) | NPRA agents, compositions and uses thereof | |
| EP2911686B1 (en) | Peptides for preventing ischemic tissue injury | |
| KR20170069997A (en) | Myristoylated leptin-related peptides and uses thereof | |
| EA042757B1 (en) | ANALOGUES OF AMILIN |