EA032431B1

EA032431B1 - Производные фумагиллола

Info

Publication number: EA032431B1
Application number: EA201791398A
Authority: EA
Inventors: Зачариа Черуваллатх; Джон Дэвид Лоусон; Кристофер Макбрайд
Original assignee: Такеда Фармасьютикал Компани Лимитед
Priority date: 2014-12-19
Filing date: 2015-12-18
Publication date: 2019-05-31
Also published as: EA201791398A1; UY36450A; EP3233870B1; KR20170099973A; IL252908A0; AR103078A1; US10328089B2; AU2015364477A1; CR20170332A; EP3233870A1; SG11201704985VA; US9827255B2; TW201636342A; ES2702026T3; ECSP17045054A; US20180050051A1; DOP2017000138A; US20160175332A1; MX2017007926A; PE20171141A1

Abstract

Предложены соединения формулы (1)их стереоизомеры и фармацевтически приемлемые соли соединений и стереоизомеров, где Rи Rопределены в описании. Описание также относится к материалам и методам получения соединений формулы (1), к фармацевтическим композициям, которые содержат их, и к их применению для лечения ожирения и связанных с ним заболеваний, расстройств и патологических состояний, связанных с MetAP2.

Description

Изобретение относится к производным фумагиллола и, более конкретно, к производным фосфиноксида и фосфоната фумагиллола, которые являются ингибиторами метионин-аминопептидазы 2 (Ме!АР2), к фармацевтическим композициям, которые содержат их, и к их применению для лечения заболеваний, расстройств и патологических состояний, связанных с Ме!АР2, включая ожирение.

Уровень техники

Метионин-аминопептидазы представляют собой ферменты, которые связываются с ионами кобальта и марганца. Металлоферменты широко обнаруживаются в прокариотических и эукариотических клетках и существуют в трех формах: Ме!АР1А, Ме!АРЮ и Ме!АР2. См. М. Ье87С7ушеска е! а1., Опсодепе 25:3471-78 (2006). Они отвечают за удаление Ν-терминального остатка метионина из зарождающихся белков, что является важной стадией созревания белка и, вероятно, необходимо для правильной функциональной регуляции, внутриклеточного нацеливания и оборота белка. См. 8.М. Агйп е! а1., Ргос. Ναΐΐ. Асай. 8с1. И8А 92:7714-18 (1995). Известные (необратимые) ингибиторы Ме!АР2 включают натуральный продукт фумагиллин и его более мощный полисинтетический аналог ΤNР-470 (АСМ-1470). См. Ώ. 1пдЪег е! а1., ΝλΗιιό 348:555-57 (1990); также см. Е.С. ('.ΐπΠϊΐΙι е! а1., Сйеш1з!гу & Вю1оду 4(6):461-471 (1997). Оба соединения ингибируют ангиогенез, а ΤNР-470 оценивается в многочисленных клинических испытаниях как лечение для рака. См., например, К.8. НегЪз! е! а1., I. С1ш. Опсо1оду 20(22):4440-47 (2002) (немелкоклеточный рак легкого); С.1. ЕодоШейз е! а1., С1ш. Сапсег Кез. 7:1198-1203 (2001) (прогрессирующий андрогензависимый рак предстательной железы); \.М. 8!ай1ег е! а1., I. С1ш. Опсо1оду 17(8):2541-45 (1999) (метастатическая почечная карцинома); А.Р. Кийе1ка е! а1., Ν. Епд1. I. Мей. 338:991-92 (1998) (метастатический рак шейки матки); А.Р. Кийе1ка е! а1., С1ш. Сапсег Кез. 3:1501-05 (1997) (плоскоклеточный рак шейки матки); и Р. Вйагдауа е! а1., С1ш. Сапсег Кез. 5:1989-95 (1999) (саркома, колоректальный рак и меланома).

Многочисленные исследования также показывают, что ингибиторы Ме!АР2 могут применяться для лечения ожирения. Например, ΤNР-470 тестировали в различных моделях ожирения мышей и показывали дозозависимое, обратимое снижение веса и потерю жировой ткани. См. М.А. Киршск е! а1., Ргос. №11. Асай. 8ск и8А 99 (16):10730-35 (2002). Было также показано, что ΤΝΤ-470 предотвращает ожирение, вызванное диетой, у мышей. См. Е. ВгакепЫе1ш е! а1., С1гси1а!юп Кезеагск 94 (12):1579-88 (2004). Было показано, что лечение фумагиллином нарушает диетическое ожирение у мышей, о чем свидетельствует гипотрофия адипоцитов, но без значительного влияния на ангиогенез жировой ткани. См. Н.К. криен е! а1., ОЪезйу 18 (12):2241-46 (2010). Кроме того, было обнаружено, что ингибитор Ме!АР2, СКО-732, уменьшает потребление пищи, массу тела, жировую массу и размер адипоцитов у животных с ожирением. См. У.М. К1Ш, е! а1., I. Мо1. Епйосгшо1оду, 38:455-65 (2007). В последнее время СКО-732 (белораниб гемиоксалат) подвергся ранней фазе клинического тестирования у взрослых пациентов с ожирением (например, 30 < ИМТ < 45 кг/м²).

Некоторые ингибиторы Ме!АР2 описаны в \О 2012/130906 А1, \О 2012/122264 А1, и8 2012/004162 А1, \О 2010/065877 А2, \О 2010/065883 А2, \О 2009/117902 А1, \О 2009/073445 А2, \О 2003/027104 А1, \О 2002/042295 А2, и8 2002/0151493 А1, и8 6949584 В2, \О 99/59987 А1, \О 99/59986 А1, \О 98/56372 А1, ЕР 0359036 А1 и ЕР 0354787 А1.

Сущность изобретения

В изобретении предлагаются производные фумагиллола и их фармацевтически приемлемые соли. Изобретение также относится к фармацевтическим композициям, которые содержат производные фумагиллола, и обеспечивает их применение для лечения заболеваний, расстройств и состояний, связанных с ингибированием Ме!АР2, включая ожирение.

В одном аспекте данного изобретения предлагаются соединения формулы 1

его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль соединения или стереоизомера, где

К¹ и К², каждый независимо, выбраны из фенила или -ОК⁴, причем каждый фенил независимо замещен от 0 до 1 К^а;

каждый К^а независимо выбран из С1-6алкила, замещенного от 0 до 3 К^Ъ; каждый К⁴ независимо выбран из С1-6алкила, замещенного от 0 до 3 К^Ъ; и каждый К^Ъ независимо выбран из галогена.

В другом аспекте изобретения предлагается соединение, выбранное из следующих соединений:

- 1 032431 (2- ( ( (ЗВ, 45, 55, 6Д) -5-метокси-4- ( (2В, ЗВ) -2-метил-З- (3метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6ил)окси)этил)дифенилфосфиноксид;

(2- ( ( (ЗВ, 45, 55, 6В) -5-метокси-4- ( (2В, ЗВ) -2-метил-З- (3метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6ил)окси)этил)ди-п-толилфосфиноксид;

(2- ( ( (ЗВ, 45, 55, 6В) -5-метокси-4- ( (2В, ЗВ) -2-метил-З- (3метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6ил)окси)этил)бис(4-(трифторметил)фенил)фосфиноксид;

диметил- (2- ( ( (ЗВ, 45, 55, 6В) -5-метокси-4- ( (2В, ЗВ) -2-метил-З(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6ил)окси)этил)фосфонат;

диэтил- (2- ( ( (ЗВ, 45, 55, 6В) -5-метокси-4- ( (2В, ЗВ) -2-метил-З(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6ил)окси)этил)фосфонат;

стереоизомера любого из вышеупомянутых соединений; и фармацевтически приемлемой соли любого из указанных вышесоединений или стереоизомеров.

Еще в одном аспекте изобретения предлагается соединение, которое представлено структурой

В дополнительном аспекте изобретения предлагается соединение, которое представлено структурой

В другом аспекте изобретения предлагается соединение, которое представлено структурой

В другом аспекте изобретения предлагается фармацевтическая композиция, которая включает соединение формулы 1, его стереоизомер или фармацевтически приемлемую соль соединения или стереоизомера, или любое из соединений, стереоизомеров или фармацевтически приемлемых солей, определенных в предыдущих пунктах; и фармацевтически приемлемый эксципиент.

- 2 032431

Еще в одном аспекте изобретения предлагается соединение формулы 1, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль соединения или стереоизомера или любое из соединений, стереоизомеров или фармацевтически приемлемых солей, определенных в предыдущих параграфах для применения в качестве лекарственного средства.

В дополнительном аспекте изобретения предлагается применение соединения формулы 1, его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли соединения или стереоизомера или любое из соединений, стереоизомеров или фармацевтически приемлемых солей, определенных в предыдущих параграфах, для лечения заболевания, расстройства или патологического состояния, связанного с метионин аминопептидазой 2, выбранных из гипергликемии, диабета, дислипидемии, ожирения, резистентности к инсулину, метаболического синдрома X, нарушения толерантности к глюкозе, синдрома поликистозных яичников, сердечно-сосудистых заболеваний, безалкогольного стеатоза печени, атеросклероза и синдрома Прадера-Вилли.

В другом аспекте изобретения предлагается применение соединения формулы 1, его стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли соединения или стереоизомера или любого из соединений, стереоизомеров или фармацевтически приемлемых солей, определенных в предыдущих параграфах, для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания, расстройства или патологического состояния, связанного с Ме1АР2.

Подробное описание изобретения

Если не указано иное, в этом описании используются определения, приведенные ниже.

Замещенный при использовании в связи с химическим заместителем или фрагментом (например, группой С_1-балкил) означает, что один или несколько атомов водорода заместителя или фрагмента были заменены одним или более неводородных атомов или групп, при условии соблюдения требований валентности и того, что результатом замещения является химически стабильное соединение.

Около или приблизительно, когда используется в связи с измеримой числовой переменной, относится к указанному значению переменной и ко всем значениям переменной, которые находятся в пределах погрешности эксперимента указанного значения или в пределах ± 10% от указанного значения, в зависимости от того, что больше.

Алкил относится к линейным и разветвленным насыщенным углеводородным группам, обычно имеющим определенное количество атомов углерода (например, С_1-4алкил относится к алкильной группе, имеющей от 1 до 4 (т.е. 1, 2, 3 или 4) атомов углерода, С_1-6алкил относится к алкильной группе, имеющей от 1 до 6 атомов углерода и т.д.). Примеры алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, ипропил, н-бутил, втор-бутил, и-бутил, т-бутил, пент-1-ил, пент-2-ил, пент-3-ил, 3-метилбут-1-ил, 3метилбут-2-ил, 2-метилбут-2-ил, 2,2,2-триметилэт-1-ил, н-гексил и т.п.

Алкандиил относится к двухвалентным алкильным группам, где алкил определен выше и обычно имеет определенное количество атомов углерода (например, С1_-4алкандиил относится к алкандиильной группе, имеющей от 1 до 4 (т.е. 1, 2, 3 или 4) атомов углерода, С1_-6алкандиил относится к алкандиильной группе, имеющей от 1 до 6 атомов углерода и т.д.). Примеры алкандиильных групп включают метилен, этан-1,1-диил, этан-1,2-диил, пропан-1,3-диил, пропан-1,2-диил, пропан-1,1-диил, пропан-2,2-диил, бутан-1,4-диил, бутан-1,3-диил, бутан-1,2-диил, бутан-1,1-диил, изобутан-1,3-диил, изобутан-1,1-диил, изобутан-1,2-диил и т.п.

Алкенил относится к линейным и разветвленным углеводородным группам, имеющим одну или несколько углерод-углеродных двойных связей и обычно имеющим определенное количество атомов углерода. Примеры алкенильных групп включают этенил, 1-пропен-1-ил, 1-пропен-2-ил, 2-пропен-1-ил, 1-бутен-1-ил, 1-бутен-2-ил, 3-бутен -1-ил, 3-бутен-2-ил, 2-бутен-1-ил, 2-бутен-2-ил, 2-метил-1-пропен-1ил, 2-метил-2-пропен-1-ил, 1,3-бутадиен-1-ил, 1,3-бутадиен-2-ил и т.п.

Алкинил относится к линейным или разветвленным углеводородным группам, имеющим одну или несколько тройных углерод-углеродных связей и обычно имеющим определенное количество атомов углерода. Примеры алкинильных групп включают этинил, 1-пропин-1-ил, 2-пропин-1-ил, 1-бутин-1ил, 3-бутин-1-ил, 3-бутин-2-ил, 2-бутин -1-ил и т.п.

Гало, галоген и галогено может использоваться взаимозаменяемо и относиться к фтору, хлору, бром и иоду.

Галогеналкил, галогеналкенил и галогеналкинил относятся к алкильным, алкенильным и алкинильным группам, замещенным одним или несколькими атомами галогена, где алкил, алкенил и алкинил определены выше и обычно имеют определенное количество атомов углерода. Примеры галогеналкильных групп включают фторметил, дифторметил, трифторметил, хлорметил, дихлорметил, трихлорметил, 1-фторэтил, 1,1-дифторэтил, 1-хлорэтил, 1,1-дихлорэтил, 1-фтор-1-метилэтил, 1-хлор-1 метилэтил и т.п.

Циклоалкил относится к насыщенным моноциклическим и бициклическим углеводородным группам, обычно имеющим определенное количество атомов углерода, которые содержат кольцо или кольца (например, С_3-8циклоалкил относится к циклоалкильной группе, имеющей от 3 до 8 атомов углерода в качестве кольцевых членов). Бициклические углеводородные группы могут включать изолированные кольца (два кольца, не содержащие общих атомов углерода), спирокольца (два кольца, разде

- 3 032431 ляющие один атом углерода), конденсированные кольца (два кольца, разделяющие два атома углерода и связь между двумя общими атомами углерода) и мостиковые кольца (два кольца, разделяющие два атома углерода, но не общую связь). Циклоалкильная группа может быть присоединена через любой кольцевой атом, если только такое присоединение не будет нарушать требования валентности и, если это указано, может необязательно включать один или несколько неводородных заместителей, если такая замена не будет нарушать валентные требования.

Примеры моноциклических циклоалкильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и т.п. Примеры конденсированных бициклических циклоалкилгрупп включают бицикло[2.1.0]пентанил (т.е. бицикло[2.1.0]пентан-1-ил, бицикло[2.1.0]пентан-2-ил и бицикло[2.1.0]пентан5-ил), бицикло[3.1.0]гексанил, бицикло[3.2.0]гептанил, бицикло[4.1.0]гептанил, бицикло[3.3.0]октанил, бицикло[4.2.0]октанил, бицикло[4.3.0]нонанил, бицикло[4.4.0]деканил и т.п. Примеры мостиковых циклоалкильных групп включают бицикло[2.1.1]гексанил, бицикло[2.2.1]гептанил, бицикло[3.1.1]гептанил, бицикло[2.2.2]октанил, бицикло[3.2.1]октанил, бицикло[4.1.1]октанил, бицикло[3.3.1]нонанил, бицикло[4.2.1]нонанил, бицикло[3.3.2]деканил, бицикло[4,2.2]деканил, бицикло[4,3,1]деканил, бицикло[3.3.3]ундеканил, бицикло[4.3.2]ундеканил, бицикло[4.3.3]додеканил и т.п. Примеры спироциклоалкильных групп включают спиро[3.3]гептанил, спиро[2.4]гептанил, спиро[3.4]октанил, спиро[2.5]октанил, спиро[3.5]нонанил и т.п. Примеры изолированных бициклических циклоалкильных групп включают соединения, полученные из би(циклобутана), циклобутанциклопентана, би(циклопентана), циклобутанциклогексана, циклопентанциклогексана, би(циклогексана) и т.д.

Циклоалкилиден относится к двухвалентным моноциклическим циклоалкильным группам, где циклоалкил определен выше, которые присоединены через один атом углерода группы и обычно имеют определенное количество атомов углерода, которые содержат кольцо (например, С_3-6циклоалкилиден относится к циклоалкилиденовой группе, имеющей от 3 до 6 атомов углерода в качестве кольцевых членов). Примеры включают циклопропилиден, циклобутилиден, циклопентилиден и циклогексилиден.

Циклоалкенил относится к частично ненасыщенным моноциклическим и бициклическим углеводородным группам, обычно имеющим определенное количество атомов углерода, которые содержат кольцо или кольца. Как и в случае циклоалкильных групп, бициклические циклоалкенильные группы могут включать изолированные, спиро-, конденсированные или мостиковые кольца. Аналогично, циклоалкенильная группа может быть присоединена через любой кольцевой атом и, если это указано, может необязательно включать один или несколько неводородных заместителей, если такое присоединение или замещение не нарушали бы требования валентности. Примеры циклоалкенильных групп включают частично ненасыщенные аналоги описанных выше циклоалкильных групп, таких как циклобутенил (т.е. циклобутен-1-ил и циклобутен-3-ил), циклопентенил, циклогексенил, бицикло[2.2.1]гепт-2-енил и т.п.

Арил относится к полностью ненасыщенным моноциклическим ароматическим углеводородам и к полициклическим углеводородам, имеющим по меньшей мере одно ароматическое кольцо, как моноциклические, так и полициклические арильные группы, обычно имеющие определенное количество атомов углерода, которые содержат их кольцевые члены (например, С_6-1₄арил относится к арильной группе, имеющей от 6 до 14 атомов углерода в качестве членов кольца). Группа может быть присоединена через любой кольцевой атом и, если это указано, может необязательно включать один или несколько неводородных заместителей, если такое присоединение или замещение не будет нарушать требования валентности. Примеры арильных групп включают фенил, бифенил, циклобутабензенил, инденил, нафталенил, бензоциклогептанил, бифениленил, флуоренил, группы, полученные из циклогептатриенового катиона и т.п.

Арилен относится к двухвалентным арильным группам, где арил определен выше. Примеры ариленовых групп включают фенилен (т.е. бензол-1,2-диил).

Гетероцикл и гетероциклил могут быть взаимозаменяемы и относятся к насыщенным или частично ненасыщенным моноциклическим или бициклическим группам, имеющим кольцевые атомы, состоящие из атомов углерода и 1-4 гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода и серы. Как моноциклическая, так и бициклическая группы обычно имеют определенное количество атомов углерода в их кольце или кольцах (например, С_2-6гетероциклил относится к гетероциклильной группе, имеющей от 2 до 6 атомов углерода и от 1 до 4 гетероатомов в качестве кольцевых членов). Как и в случае бициклических циклоалкильных групп, бициклические гетероциклильные группы могут включать в себя изолированные кольца, спирокольца, конденсированные кольца и мостиковые кольца. Группа гетероциклил может быть присоединена через любой кольцевой атом и, если это указано, может необязательно включать один или несколько неводородных заместителей, если такое присоединение или замещение не будет нарушать требования валентности или привести к химически нестабильному соединению. Примеры гетероциклильных групп включают оксиранил, тииранил, азиридинил (например, азиридин-1-ил и азиридин-2-ил), оксетанил, тиетанил, азетидинил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенеил, пирролидинил, тетрагидропиранил, тетрагидротиопиранил, пиперидинил, 1,4-диоксанил, 1,4-оксатианил, морфолинил, 1,4-дитианил, пиперазинил, 1,4-азатианил, оксепанил, тиепанил, азепанил, 1,4-диоксепанил, 1,4-оксатиепанил, 1,4-оксаазепанил, 1,4-дитиепанил, 1,4-тиазепанил, 1,4-диазепанил, 3,4-дигидро-2Н-пиранил, 3,6-дигидро-2Н-пиранил, 2Н-пиранил, 1,2-дигидропиридинил, 1,2,3,4-тетрагидропиридинил, 1,2,5,6

- 4 032431 тетрагидропиридинил, 1,6-дигидропиримидинил, 1,2,3,4-тетрагидропиримидинил и 1,2-дигидропиразоло[1,5-б][1.2.4]триазинил.

Гетероцикл-диил относится к гетероциклильным группам, которые присоединены через два кольцевых атома группы, где гетероциклил определен выше. Как правило, они имеют определенное количество атомов углерода в их кольце или кольцах (например, С_2-6гетероцикл-диил относится к гетероциклической диильной группе, имеющей от 2 до 6 атомов углерода и 1-4 гетероатома в качестве кольцевых членов). Примеры гетероциклических диильных групп включают в себя многовалентные аналоги описанных выше гетероциклических групп, такие как морфолин-3,4-диил, пирролидин-1,2-диил, 1пирролидинил-2-илиден, 1-пиридинил-2-илиден, 1-(4Н)-пиразолил-5-илиден, 1-(3Н)-имидазолил-2-илиден, 3-оксазолил-2-илиден, 1-пиперидинил-2-илиден, 1-пиперазинил-6-илиден и т.п.

Гетероароматический и гетероарил могут быть взаимозаменяемы и относиться к ненасыщенным моноциклическим ароматическим группам и к полициклическим группам, имеющим по меньшей мере одно ароматическое кольцо, каждое из которых имеет кольцевые атомы, состоящие из атомов углерода и 1-4 гетероатомов независимо выбранных из азота, кислорода и серы. Как моноциклическая, так и полициклическая группы обычно имеют определенное количество атомов углерода в качестве членов кольца (например, С1_-9гетероарил относится к гетероарильной группе, содержащей от 1 до 9 атомов углерода и от 1 до 4 гетероатомов в качестве кольцевых членов) и может включать любую бициклическую группу в которой любой из вышеуказанных моноциклических гетероциклов конденсирован с бензольным кольцом. Гетероарильная группа может быть присоединена через любой кольцевой атом (или кольцевые атомы для конденсированных колец) и, если это указано, может необязательно включать один или несколько неводородных заместителей, если такое присоединение или замещение не нарушало бы требования валентности или не приводило к химически неустойчивому соединению. Примеры гетероарильных групп включают моноциклические группы, такие как пирролил (например, пиррол-1-ил, пиррол-2ил и пиррол-3-ил), фуранил, тиофенил, пиразолил, имидазолил, изоксазолил, оксазолил, изотиазолил, тиазолил, 1,2,3-триазолил, 1,3,4-триазолил, 1-окса-2,3-диазолил, 1-окса-2,4-диазолил, 1-окса-2,5-диазолил, 1-окса-3, 4-диазолил, 1-тиа-2,3-диазолил, 1-тиа-2,4-диазолил, 1-тиа-2,5-диазолил, 1-тиа-3,4-диазолил, тетразолил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил и пиразинил.

Примеры гетероарильных групп также включают бициклические группы, такие как бензофуранил, изобензофуранил, бензотиофенил, бензо[с]тиофенеил, 1Н-индолил, 3Н-индолил, изоиндолил, 1Низоиндолил, индолинил, изоиндолинил, бензимидазолил, 1Н-индазолил, 2Н-индазолил, бензотриазолил, 1Н-пирроло[2,3-Ь]пиридинил, 1Н-пирроло[2,3-с]пиридинил, 1Н-пирроло[3,2-с]пиридинил, 1Н-пирроло[3,2-Ь]пиридинил, 3Н-имидазо[4,5-Ь]пиридинил, 3Н-имидазо[4,5-с]пиридинил, 1Н-пиразоло[4,3-Ь]пиридинил, 1Н-пиразоло[4,3-с]пиридинил, 1Н-пиразоло[3,4-с]пиридинил, 1Н-пиразоло[3,4-Ь]пиридинил, 7Н-пуринил, индолизинил, имидазо[1,2-а]пиридинил, имидазо[1,5-а]пиридинил, пиразоло[1,5-а]пиридинил, пирроло[1,2-Ь]пиридазинил, имидазо[1,2-с]пиримидинил, хинолинил, изохинолинил, циннолинил, хиназолинил, хиноксалинил, фталазинил, 1,6-нафтиридинил, 1,7-нафтиридинил, 1,8-нафтиридинил, 1,5-нафтиридинил, 2,6-нафтиридинил, 2,7-нафтиринил, пиридо[3,2-б]пиримидинил, пиридо[4,3-б]пиримидинил, пиридо[3,4-б]пиримидинил, пиридо[2,3-б]пиримидинил, пиридо[2,3-Ь]пиразинил, пиридо[3,4Ь]пиразинил, пиримидо[5,4-б]пиримидинил, пиразино[2,3-Ь]пиразинил, пиримидо[4,5-б]пиримидинил, 1,2,3,4-тетрагидропиридо[2,3-Ь]пиразинил, 2,3-дигидробензо[Ь][1,4]диоксинил, 3,4-дигидро-2Н-пиридо[3,2-Ь][1,4]оксазинил, 2,3-дигидро-1Н-бензо[б]имидазолил, бензо[б]тиазолил, 2,3-дигидро-1Н-пирроло[2,3-Ь]пиридинил, [1,2,4]триазоло[1,5-а]пиридинил, 2,3-дигидро-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридинил, тетразоло[1,5-а]пиридинил, 7Н-пирроло[2,3-б]пиримидинил, пиразоло[1,5-а]пиримидинил, имидазо[1,2-а]пиримидинил, 4,5-дигидро-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидинил, 2,3,6,7-тетрагидро-1Н-пуринил, 5Н-пирроло[2,3-Ь]пиразинил, имидазо[1,2-а]пиразинил, имидазо[1,2-Ь]пиридазинил и 4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5 -а] пиразинил.

Гетероарилен относится к гетероарильным группам, которые присоединены через два кольцевых атома группы, где гетероарил определен выше. Как правило, они имеют определенное количество атомов углерода в их кольце или кольцах (например, С_3-5гетероарилен относится к группе гетероарилена, имеющей от 3 до 5 атомов углерода и от 1 до 4 гетероатомов в качестве кольцевых членов). Примеры гетероариленовых групп включают в себя многовалентные аналоги описанных выше гетероарильных групп, таких как пиридин-2,3-диил, пиридин-3,4-диил, пиразол-4,5-диил, пиразол-3,4-диил и т.п.

Оксо относится к кислороду с двойной связью (=0).

Уходящая группа относится к любой группе, которая оставляет молекулу во время процесса фрагментации, включая реакции замещения, реакции элиминирования и реакции присоединенияотщепления. Уходящие группы могут быть нуклеофугальными, в которых группа уходит с парой электронов, которая ранее служила связью между уходящей группой и молекулой, или может быть электрофугальной, в которой группа оставалась без пары электронов. Способность уходящей группы нуклеофуга покидать молекулу зависит от ее основной силы, причем самыми сильными основаниями являются самые слабые уходящие группы. Общие уходящие группы нуклеофугов включают азот (например, из солей диазония); сульфонаты, в том числе алкилсульфонаты (например, мезилат), фторалкилсульфонаты (например, трифлат, гексафлат, нонафлат и трезилат) и арилсульфонаты (например, тозилат, брозилат,

- 5 032431 хлоридат и нозилат). Другие включают карбонаты, ионы галогенидов, карбоксилатные анионы, фенолятные ионы и алкоксиды. Некоторые более прочные основы, такие как ИН₂ ^- и ОН^-, могут быть более хорошими уходящими группами при обработки кислотой. Обычные уходящие группы электрофугов включают протон, СО₂ и металлы.

Противоположный энантиомер относится к молекуле, которая является несовместимым зеркальным отображением эталонной молекулы, которая может быть получена путем инверсии всех стереогенных центров эталонной молекулы. Например, если эталонная молекула имеет 8 абсолютную стереохимическую конфигурацию, то противоположный энантиомер имеет К абсолютную стереохимическую конфигурацию. Аналогично, если эталонная молекула имеет 8,8 абсолютную стереохимическую конфигурацию, то противоположный энантиомер имеет К,К стереохимическую конфигуляцию и так далее.

Стереоизомер и стереоизомеры соединения с данной стереохимической конфигурацией относятся к противоположному энантиомеру соединения и к любым диастереоизомерам, включая геометрические изомеры (Ζ/Е) соединения. Например, если соединение имеет 8.Κ.Ζ стереохимические конфигурации, его стереоизомеры будут включать в себя его противоположный энантиомер, имеющий Κ8,Ζ конфигурацию и его диастереомер, имеющий 8,8,Ζ конфигурацию, ΚΚΖ конфигуарцию, 8,К,Е конфигурацию, К,8,Е конфигурацию, 8,8,Е конфигурацию и К,К,Е конфигурацию. Если стереохимическая конфигурация соединения не указана, то стереоизомер относится к любой из возможных стереохимических конфигураций соединения.

Существенно чистый стереоизомер и его варианты относятся к образцу, содержащему соединение, имеющее определенную стереохимическую конфигурацию, и которое содержит по меньшей мере около 95% образца.

Чистый стереоизомер и их варианты относятся к образцу, содержащему соединение, имеющее определенную стереохимическую конфигурацию, и которое содержит по меньшей мере около 99,5% образца.

Субъект относится к млекопитающему, включая человека.

Фармацевтически приемлемые вещества относятся к тем веществам, которые пригодны для введения субъектам.

Лечение относится к обращению, облегчению, ингибированию развития или предотвращению заболевания, расстройства или патологического состояния, к которым применяется такой термин, или к обращению, облегчению, ингибированию или предотвращению одного или нескольких симптомов такого заболевания или патологического состояния.

Лечение относится к акту лечения, как определено непосредственно выше.

Лекарство, лекарственное вещество, активный фармацевтический компонент и тому подобное, относятся к соединению (например, соединениям формулы 1, включая субродовые соединения и соединения, конкретно названные в описании), которые могут быть использованы для лечения субъекта, нуждающегося в лечении.

Эффективное количество лекарственного средства терапевтически эффективное количество лекарственного средства и т.п. относится к количеству лекарственного средства, которое может быть использовано для лечения субъекта, и может, среди прочего, зависеть от массы и возраста субъекта и пути введения.

Эксципиент относится к любому разбавителю или несущей среде для лекарственного средства.

Фармацевтическая композиция относится к комбинации одного или нескольких лекарственных веществ и одного или нескольких эксципиентов.

Лекарственный препарат, фармацевтическая лекарственная форма, лекарственная форма, конечная лекарственная форма и тому подобное, относятся к фармацевтической композиции, пригодной для лечения субъекта, нуждающегося в лечении, и обычно могут находиться в форме таблеток, капсул, саше, содержащих порошок или гранулы, жидкие растворы или суспензии, пластыри, пленки и т.п.

Патологическое состояние, связанное с МекАР2 и подобные фразы относятся к заболеванию, расстройству или патологическому состоянию у субъекта, для которого ингибирование МекАР2 может обеспечить терапевтическое или профилактическое преимущество.

В описании могут использоваться следующие условные сокращения: Ас (ацетил); АСЫ (ацетонитрил); ΑΙΒΝ (азо-бис-изобутиронитрил); АР1 (активный фармацевтический компонент); водн. (водный раствор); Вос (трет-бутоксикарбонил); СЬх (карбобензилокси); дЬа (дибензилиденацетон); ОСС (1,3-дициклогексилкарбодиимид); ОСЕ (1,1-дихлорэтан); ДХМ (дихлорметан); Э1РЕА ((Ν,Ν-диизопропилэтиламин, основание Хюнига); ОМА (Ν,Ν-диметилацетамид); ОМАР (4-диметиламинопиридин); ЭМАКЭ (модифицирующий болезнь антиревматический препарат); ΌΜΕ (1,2-диметоксиэтан); ОМЕ (Ν,Ν-диметилформамид); ДМСО (диметилсульфоксид); άρρί (1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцен); ДТТ (дитиотреитол); ЕС₅₀ (эффективная концентрация при половинном максимальном ответе); ЕЭА этоксилированный додециловый спирт, Вг|®35); ЕЭС (Ν-(3диметиламинопропил)-Л'-этилкарбодиимид); ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота); э.и. (энантиомерный избыток); экв. (эквиваленты); Ек (этил); ЕкзN (триэтиламин); ЕкОАс (этилацетат); ЕкОН (этанол); НАТи (2-(3Н-[1,2,3]триазоло [4,5-Ь] пиридин-3-ил)-1,1, 3,3-тетраметилуроний гексафторфосфат

- 6 032431 (V)); НЕРЕ8 (4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-этансульфоновая кислота); АсОН (уксусная кислота); НОВ! (1Н-бензо[[4][1,2,3] триазол-1-ол); 1С₅₀ (концентрация при 50% ингибировании); ИПС (изопропанол); 1РАс (изопропилацетат); 1РЕ (изопропиловый эфир); ЛДА (диизопропиламид лития); ЫНМО§ (литийбис(триметилсилил) амид); МХПБК (м-хлоропероксибензойная кислота); Ме (метил); МеОН (метанол); МТВЕ (метил-трет-бутиловый эфир); Т.пл. (точка плавления); Ναθΐ-Ви (трет-бутилат натрия); ΝΜΜ (Νметилморфолин); ОТ£ (трифлат); РЕ (петролейный эфир); Рй (фенил); Р1СС₅₀ (-1од₁₀(1С₅₀), где 1С₅₀ указывается в молярных (М) единицах); Рг (пропил); ί-Рт (изопропил); ПТФЭ (политетрафторэтилен); комн. темп. (комнатная температура, приблизительно от 20 до 25°С); ТСЕР (трис(2-карбоксиэтил)фосфин); ТФА(трифторуксусная кислота); ТЕАА (2,2,2-трифторуксусный ангидрид); ТГФ (тетрагидрофуран); ТМС (триметилсилил); и трис-буфер (2-амино-2-гидроксиметилпропан-1,3-диоловый буфер).

Как описано ниже, данное описание относится к соединениям формулы 1 и их фармацевтически приемлемым солям. Это описание также относится к материалам и методам получения соединений формулы 1, фармацевтических композиций, которые их содержат, и применению соединений формулы 1 и их фармацевтически приемлемых солей (необязательно в сочетании с другими фармакологически активными агентами) для лечения ожирения и других заболеваний, расстройств или патологических состояний, связанных с Ме!АР2.

В дополнение к конкретным соединениям примеры соединений формулы 1 включают соединения, в которых (ί) В¹ и В², каждый независимо, выбраны из фенила и С3-5гетероарила, и каждый фенил и С3-5гетероарил независимо замещен от 0 до 3 В^а; (ιί) каждый В¹ и В² независимо выбран из фенила и С3-5гетероарил, каждый С_3-5гетероарил имеет 5 кольцевых атомов, причем каждый фенил и С_3-5гетероарил независимо замещен от 0 до 3 В^а; (ш) каждый В¹ и В² независимо выбран из фенила и С_3-5гетероарила, каждый С_3-5гетероарил имеет 6 кольцевых атомов, причем каждый фенил и С_3-5гетероарил независимо замещен от 0 до 3 В^а; или (ίν) каждый В¹ и В² независимо выбран из фенила и С3-5гетероарила, каждый С3-5гетероарил представляет собой пиридинил, и каждый фенил и С3-5гетероарил независимо замещен от 0 до 3 В^а.

Соединения формулы 1 также включают такие, в которых (ν) каждый В¹ и В² независимо выбран из фенила и С3-5гетероарила и каждый С3-5гетероарил независимо выбран из пирролила, фуранила, тиенила, пиразолила, имидазолила, изоксазолила, оксазолила, изотиазолила, тиазолила, пиридинила, пиридазинила, пиримидинила и пиразинила, причем каждый фенил и С3-5гетероарил независимо замещен от 0 до 3 В^а.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (ί)-(ν) в предшествующем параграфе соединения формулы 1 включают соединения, в которых (νί) В¹ и В² оба представляют собой С3-5гетероарил, и каждый С3-5гетероарил независимо замещен от 0 до 3 В^а.

Соединения формулы 1 также включают такие, в которых (νίί) В¹ и В² оба представляют собой фенил, и каждый фенил независимо замещен от 0 до 3 В^а.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (ί)-(νίί) в предшествующих параграфах соединения формулы 1 включают соединения, в которых (νίίί):

каждый В^а независимо выбран из галогена, -ΟΝ, В³ и В⁴;

каждый В³ независимо выбран из -ОВ⁴, -№(В⁴)В⁵, -ΝΡ⁴ί.’(Ο)Ρ⁶ и -С(О)^В⁴)В⁵;

каждый В⁴ и В⁵ независимо выбран из (a) С1_-6алкила, который замещен от 0 до 3 В^Ь и (b) С_6-1₄арил(СН₂)_т-, который замещен от 0 до 3 В^с; каждый В⁶ независимо выбран из:

(a) С1_-6алкила, который замещен от 0 до 3 В^Ь и (b) С_6-1₄арил(СН₂)_т-, который замещен от 0 до 3 В⁴; каждый В^Ь независимо выбран из галогена, -ΟΝ, и В⁷; каждый В^с и В⁴ независимо выбран из:

(a) галогена, -ΟΝ и В⁷ и (b) С1-6алкила, который замещен от 0 до 3 В^Ь;

каждый В⁷ независимо выбран из -ОВ⁸, -№(В⁸)В⁹, -ЯВ⁸С(О)В⁹ и -С(О)^В⁸)В⁹; и каждый В⁸ и В⁹ независимо выбран из С1_-6алкила и С_3-8циклоалкил(СН₂)_т-, каждый из которых замещен от 0 до 3 заместителями, независимо выбранными из галогена и -ΟΝ.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (ί)-(νίί) в предшествующих параграфах, соединения формулы 1 включают соединения, в которых (ίχ) каждый В^а независимо выбран из галогена, -ΟΝ, В³ и В⁴;

каждый В³ независимо выбран из -ОВ⁴ и-^В⁴)В⁵;

каждый В⁴ и В⁵ независимо выбран из (a) С1_-6алкила, который замещен от 0 до 3 В^Ь и (b) С6-14арил-(СН2)т-, где С6-14арильный фрагмент представляет собой фенил, замещенный от 0 до 3 заместителями, независимо выбранными из В^Ь и С1_-6алкила, и каждый С1_-6алкил независимо замещен от 0 до 3 В^Ь;

каждый В^Ь независимо выбран из галогена, -ΟΝ, и В⁷; каждый В^с независимо выбран из (a) галогена, -ΟΝ и В⁷ и (b) С1-6алкила, который замещен от 0 до 3 В^Ь;

- 7 032431 каждый К⁷ независимо выбран из -ОК⁸ и -К(К⁸)К⁹; и каждый К⁸ и К⁹ независимо выбран из С1_-балкила и С;,_-хциклоалкил-(СН₂)_т-. каждый из которых замещен от 0 до 3 заместителями, независимо выбранными из галогена и -СК

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (ί)-(νίί) в предшествующих параграфах, соединения формулы 1 включают соединения, в которых (х) каждый К^а независимо выбран из галогена, -СК, К³ и К⁴;

каждый К³ независимо выбран из -ОК⁴ и-К(К⁴)К⁵; каждый К⁴ и К⁵ независимо выбран из:

(a) С_1-6алкила, который замещен от 0 до 3 К^Ь и (b) С_6-14арил- (СН₂)_т-, где С_6-14арильный фрагмент представляет собой фенил, замещенный от 0 до 3 заместителями, независимо выбранными из К^Ь и С_1-6алкила, и каждый С_1-6алкил независимо замещен от 0 до 3 К^Ь;

каждый К^Ь независимо выбран из галогена и -СК; и каждый К^с независимо выбран из галогена, -СК и С_1-6алкила, замещенного от 0 до 3 К^Ь.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (ί)-(νίί) в предшествующих параграфах, соединения формулы 1 включают соединения, в которых (χί) каждый К^а независимо выбран из галогена, -СК, К³ и К⁴;

каждый К³ независимо выбран из -ОК⁴ и-К(К⁴)К⁵;

каждый К⁴ и К⁵ независимо выбран из С_1-6алкила, замещенного от 0 до 3 К^Ь; и каждый К^Ь независимо выбран из галогена и -СК.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (ί)-(νίί) в предшествующем параграфах, соединения формулы 1 включают соединения, в которых (χίί) К^а отсутст вует.

Соединения формулы 1 также включают соединения, в которых (χίίί) К¹ и К², каждый независимо, представляют собой -ОК⁴ или -К(К⁴)К⁵; (χίν) К¹ и К² оба представляют собой -ОК⁴; или (χν) К¹ и К² оба представляют собой -К(К⁴)К⁵.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (χίίί)-(χν) в предшествующем параграфе, соединения формулы 1 включают соединения, в которых (χνί) каждый К⁴ и К⁵ независимо выбран из (a) С_1-6алкила, который замещен от 0 до 3 К^Ь и (b) С_6-14арил(СН₂)_т-, который замещен от 0 до 3 К^с; каждый К^Ь независимо выбран из галогена, -СК, и К⁷; каждый К^с независимо выбран из:

(a) галогена, -СК и К⁷ и (b) С_1-6алкила, замещенного от 0 до 3 К^Ь;

каждый К⁷ независимо выбран из -ОК⁸, -К(К⁸)К⁹, -КК⁸С(О)К⁹ и -С(О)К(К⁸)К⁹; и каждый К⁸ и К⁹ независимо выбран из С_1-6алкила и С_3-8 циклоалкил-(СН₂)_т-, каждый из которых замещен от 0 до 3 заместителями, независимо выбранными из галогена и -СК.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (χίίί)-(χν) в предшествующем параграфе, соединения формулы 1 включают соединения, в которых (χνίί) каждый К⁴ и К⁵ независимо выбран из (a) С_1-6алкила, замещенного от 0 до 3 К^Ь и (b) С_6-14арил(СН₂)_т-, где С_6-14арильный фрагмент представляет собой фенил, замещенный от 0 до 3 _К ^с _; каждый К^Ь независимо выбран из галогена, -СК, и К⁷; каждый К^с независимо выбран из (a) галогена, -СК и К⁷ и (b) С_1-6алкила, замещенного от 0 до 3 К^Ь; каждый К⁷ независимо выбран из -ОК⁸ и -К(К⁸)К⁹; и каждый К⁸ и К⁹ независимо выбран из С_1-6алкила и С_3-8циклоалкил-(СН₂)_т-, каждый из которых замещен от 0 до 3 заместителями, независимо выбранными из галогена и -СК.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (χίίί)-(χν) в предшествующем параграфе, соединения формулы 1 включают соединения, в которых (χνίίί) каждый К⁴ и К⁵ независимо выбран из (a) С_1-6алкила, который замещен от 0 до 3 К^Ь и (b) С_6-14арил(СН₂)_т-, где С_6-14арильный фрагмент представляет собой фенил, замещенный от 0 до 3 _К ^с _; каждый К^Ь независимо выбран из галогена и -СК; и каждый К^с независимо выбран из галогена, -СК и С1-6алкила, который замещен от 0 до 3 К^Ь.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (χίίί)-(χν) в предшествующем параграфе, соединения формулы 1 включают соединения, в которых (χίχ) каждый К⁴ и К⁵ независимо выбран из С1-6алкила, замещенного от 0 до 3 К^Ь; и каждый К^Ь независимо выбран из галогена и -СК.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (χίίί)-(χν) в предыдущем параграфе, соединения формулы 1 включают соединения, в которых (хх) каждый К⁴ и К⁵ независимо выбран из С_1-3алкила, замещенного от 0 до 3 К^Ь; и

- 8 032431 каждый К^Ь независимо выбран из галогена и -ΟΝ.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (χίίί)-(χν) в предыдущем параграфе, соединения формулы 1 включают соединения, в которых (χχί) каждый К⁴ и К⁵ независимо выбран из метила и этила, каждый из которых замещен от 0 до 3 К^Ь; и каждый К^Ь независимо выбран из галогена и -ΟΝ.

Кроме того, или в качестве альтернативы, в одном из вариантов реализации изобретения (χίίί)-(χν) в предыдущем параграфе, соединения формулы 1 включают соединения, в которых (χχίί) каждый К⁴ и К⁵ независимо представляет собой метил, замещенный от 0 до 3 К^Ь; и каждый К^Ь независимо выбран из галогена и -ΟΝ.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (χίίί)-(χν) в предыдущем параграфе, соединения формулы 1 включают в себя те, в которых (χχίίί) каждый К⁴ и К⁵ независимо представляет собой этил, замещенный от 0 до 3 К^Ь; и каждый К^Ь независимо выбран из галогена и -ΟΝ.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (ί)-(νίίί) в предыдущих параграфах, соединения формулы 1 включают те, в которых (в χχίν) К⁴ отсутствует.

Кроме того, или в качестве альтернативы, к одному из вариантов реализации изобретения (1)-(х), (χίίί)-(χνίίί) и (χχίν) в предыдущих параграфах, соединения формулы 1 включают те, в которых (χχν) т равен 0, 1, 2 или 3; (χχνί) т равен 0, 1 или 2; (χχνίί) т равен 0 или 1; или (χχνίίί) т равен 0.

Кроме того, или в качестве альтернативы, к одному из вариантов реализации изобретения (1)-(х), (χίίί)-(χνίίί) и (χχίν)-(χχνίίί) в предыдущих параграфах, соединения формулы 1 включают те, в которых (χχίχ) К^с отсутствует.

Кроме того, или в качестве альтернативы одному из вариантов реализации изобретения (ί)-(χχίχ) в предыдущих параграфах, соединения формулы 1 включают те, в которых (ххх) К^Ь отсутствует.

Соединения формулы 1 включают варианты реализации изобретения (1)-(ххх), описанные в предыдущих параграфах, и все соединения, конкретно названные выше, и в примерах и могут существовать в виде солей, комплексов, сольватов, гидратов и жидких кристаллов. Аналогично, соединения формулы 1, которые являются солями, могут существовать в виде комплексов, сольватов, гидратов и жидких кристаллов.

Соединения формулы 1 могут образовывать фармацевтически приемлемые комплексы, соли, сольваты и гидраты. Данные соли включают кислотно-аддитивные (включая дикислоты) и основноаддитивные соли. Фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли включают соли, полученные из неорганических кислот, таких как хлористоводородная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота, серная кислота, бромистоводородная кислота, иодистоводородная кислота, фтористоводородная кислота и фосфорные кислоты, а также нетоксичные соли, полученные из органических кислот, таких как алифатические моно- и дикарбоновые кислоты, фенилзамещенные алкановые кислоты, гидроксиалкановые кислоты, алкандиовые кислоты, ароматические кислоты, алифатические и ароматические сульфокислоты и т.д. Такие соли включают агатные, адипатные, аспартатные, бензоатные, безилатные, бикарбонатные, карбонатные, бисульфатные, сульфатные, боратные, камсилатные, цитратные, цикламатные, эдизилатные, эзилатные, формиатные, фумаратные, глюэптатные, глюконатные, глюкуронатные, гексафторфосфатные, гибензатные, гидрохлоридные/хлоридные, гидробромидные/бромидные, гидроиодидные/иодидные, изетионатные, лактатные, малатные, малеатные, малонатные, мезилатные, метилсульфатные, нафтилатные, 2-напсилатные, никотинатные, нитратные, оротатные, оксалатные, пальмитатные, памоатные, фосфатные, гидрофосфатные, дигидрофосфатные, пироглутаматные, сахаратные, стеаратные, сукцинатные, танатные, тартратные, тозилатные, трифторацетатные и ксинафоатные соли.

Фармацевтически приемлемые основные соли включают соли, полученные из оснований, включая катионы металлов, такие как катион щелочного или щелочноземельного металла, а также амины. Примеры подходящих катионов металлов включают натрий, калий, магний, кальций, цинк и алюминий. Примеры подходящих аминов включают аргинин, Ν,Ν'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэтиламин, диэтаноламин, дициклогексиламин, этилендиамин, глицин, лизин, Ν-метилглюкамин, оламин, 2амино-2-гидроксиметилпропан-1,3-диол и прокаин. Для обсуждения пригодных кислотно-аддитивных и основно-аддитивных солей см. 8.М. Ветде е1 а1., 1. Рйатт. 8с1. (1911) 66:1-19; также см. §1аЫ и \Усгти111. НапбЬоок о£ Рйаттасеийса1 8а11к: Ргоретйек, 8е1ес1юп и Ике (2002).

Фармацевтически приемлемые соли могут быть получены с использованием различных способов. Например, соединение формулы 1 можно ввести в реакцию с подходящей кислотой или основанием с получением желаемой соли. Альтернативно, предшественник соединения формулы 1 может быть подвергнут взаимодействию с кислотой или основанием для удаления лабильной по отношению к кислоте или основанию защитной группы или для открытия лактонной или лактамной группы предшественника. Кроме того, соль соединения формулы 1 может быть превращена в другую соль (или свободную форму) путем обработки соответствующей кислотой или основанием или путем приведения в контакт с ионообменной смолой. После реакции соль может быть выделена фильтрованием, если она выпадает в осадок из раствора или выпариванием для извлечения соли. Степень ионизации соли может варьироваться от полностью ионизованной до почти неионизованной.

- 9 032431

Соединения формулы 1 могут существовать в континууме твердых состояний от полностью аморфного до полностью кристаллического. Термин аморфный относится к состоянию, в котором материал не имеет дальнего порядка на молекулярном уровне и в зависимости от температуры может проявлять физические свойства твердого вещества или жидкости. Обычно такие материалы не дают отличительных рентгенограмм и, проявляя свойства твердого тела, более формально описываются как жидкие. При нагревании происходит переход от твердых к жидким свойствам, который характеризуется изменением состояния, обычно второго порядка (стеклование). Термин кристаллический относится к твердой фазе, в которой материал имеет регулярную упорядоченную внутреннюю структуру на молекулярном уровне и дает отличительную рентгенограмму с определенными пиками. Такие материалы при достаточном нагревании также будут обладать свойствами жидкости, но переход от твердого вещества к жидкости характеризуется изменением фазы, обычно первого порядка (точка плавления).

Соединения формулы 1 могут также существовать в несольватированных и сольватированных формах. Термин сольват описывает молекулярный комплекс, содержащий соединение и одну или несколько фармацевтически приемлемых молекул растворителя (например, этанол). Термин гидрат представляет собой сольват, в котором растворителем является вода. Фармацевтически приемлемые сольваты включают те, в которых растворитель может быть замещен изотопом (например, И₂О, ацетон-д₆, ДМСОдб).

В настоящее время принятая система классификации сольватов и гидратов органических соединений различает изолированные сайтные, канальные и координационно-ионные сольваты и гидраты. См., например, К.К Могпк (Н.О. ВпИат изд.) Ро1утогр1пкт ίη Рйаттасеи11са1 ЗоНдк (1995).

Изолированные сайтные сольваты и гидраты являются такими, в которых молекулы растворителя (например, воды) выделяются из прямого контакта друг с другом посредством взаимодействия молекул органического соединения. В канальных сольватах молекулы растворителя находятся в решетчатых каналах, где они находятся рядом с другими молекулами растворителя. В координированных сольватах металл-ион молекулы растворителя связаны с ионом металла.

Когда растворитель или вода плотно связаны, комплекс будет иметь четко определенную стехиометрию, не зависящую от влажности. Когда, однако, растворитель или вода слабо связаны, как в канальных сольватах и в гигроскопических соединениях, содержание воды или растворителя будет зависеть от влажности и условий сушки. В таких случаях обычно наблюдается нестехиометрия.

Соединения формулы 1 могут также существовать в виде многокомпонентных комплексов (отличных от солей и сольватов), в котором соединение (лекарственное средство) и по меньшей мере один другой компонент присутствуют в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Комплексы этого типа включают клатраты (комплексы включения лекарственных растений) и сокристаллы. Последние обычно определяются как кристаллические комплексы нейтральных молекулярных компонентов, которые связаны друг с другом посредством нековалентных взаимодействий, но также могут быть комплексом нейтральной молекулы с солью. Сокристаллы могут быть получены кристаллизацией расплава, перекристаллизацией из растворителей или совместного физического измельчения компонентов. См., например, О. А1тагккоп и М.1. Ζ;·ι\\όιό11<ο. С1ет. Соттип. (2004) 17:1889-1896. Для общего обзора многокомпонентных комплексов см. 1.К. На1еЫ1ап, 1. Р1агт. 8с1. (1975) 64(8):1269-88.

При подходящих условиях соединения формулы 1 могут существовать в мезоморфном состоянии (мезофаза или жидкий кристалл). Мезоморфное состояние находится между истинным кристаллическим состоянием и истинным жидким состоянием (либо расплавом, либо раствором). Мезоморфизм, возникающий в результате изменения температуры, описывается как термотропный, а мезоморфизм, возникающий в результате добавления второго компонента, такого как вода или другой растворитель, описывается как лиотропный. Соединения, которые могут образовывать лиотропные мезофазы описаны как амфифильные и включают молекулы, которые имеют полярный ионный фрагмент (например, -СОО№1'. -СОО^-К⁺, -8Оз^-Иа⁺) или полярный неионный фрагмент (такой как -Ν^-Ν' (СН₃)₃). См., например, Ν.Η. Найкйотпе и А. 81иай, Стук1а1к апд 1йе Ро1апхтд Мктоксоре (4-е изд., 1970).

Каждое соединение формулы 1 может существовать в виде полиморфных форм стереоизомеров, таутомеров или их комбинации, может быть изотопно-меченым, может быть результатом введения пролекарства или образовывать метаболит после введения.

Пролекарства относятся к соединениям, которые практически не обладают фармакологической активностью, которые при метаболизировании ш у1уо подвергаются превращению в соединения, имеющие желаемую фармакологическую активность. Пролекарства могут быть получены путем замены соответствующих функциональных групп, присутствующих в фармакологически активных соединениях, на профрагменты, как описано, например, в Н. Випддааг, Иеадп о£ Ргодгидк (1985). Примеры пролекарств включают сложные эфиры, простые эфиры или амидные производные соединений формулы 1, имеющих карбоксильную, гидроксильную или аминофункциональную группы соответственно. Для дополнительного обсуждения пролекарств см., например, Т. Нфис1п и V. 81е11а Рто-дтидк ак №уе1 ИеНуету 8ук1етк. АС8 Зутрокшт Зепек 14 (1975) и Е.В. Восйе ед., ВюгеуегыЫе Сатегк ш Эгид Иеыдп (1987).

Метаболиты относятся к соединениям, образованным ш у1уо при введении фармакологически активных соединений. Примеры включают гидроксиметильную, гидрокси, вторичную амино, первичную

- 10 032431 амино, фенольную производную и производные карбоновой кислоты соединений формулы 1, имеющие соответственно метил, алкокси, третичную амино-, вторичную амино-, фенильную и амидную группу, соответственно.

Соединения формулы 1 могут существовать в виде стереоизомеров, которые являются результатом присутствия одного или нескольких стереогенных центров, одной или нескольких двойных связей или их обоих. Стереоизомеры могут быть чистыми, существенно чистыми или смесями. Такие стереоизомеры могут также образовываться из кислотно-аддитивных или основно-аддитивных солей, в которых противоион является оптически активным, например, когда противоион представляет собой Ό-лактат или Ьлизин.

Соединения формулы 1 могут существовать в виде таутомеров, которые представляют собой изомеры, образующиеся в результате таутомеризации. Таутомерная изомерия включает, например, иминенаминовую, кето-енольную, оксим-нитрозо и амид-имидную таутомерию.

Соединения формулы 1 могут проявлять более одного типа изомерии.

Геометрические (цис/транс) изомеры могут быть разделены принятыми способами, такими как хроматография и фракционная кристаллизация.

Принятые методы получения или выделения соединения, имеющего специфическую стереохимическую конфигурацию, включают хиральный синтез из подходящего оптически чистого предшественника или разделение рацемата (или рацемата соли или производного) с использованием, например, хиральной жидкостной хроматографии высокого давления (ВЭЖХ). Альтернативно, рацемат (или рацемический предшественник) можно ввести в реакцию с подходящим оптически активным соединением, например спиртом, или в случае, когда соединение формулы 1 содержит кислотный или основной фрагмент, кислотой или основанием, таким как винная кислота или 1-фенилэтиламин. Полученную диастереомерную смесь можно разделять хроматографией, фракционной кристаллизацией и т.д. и соответствующий диастереоизомер превращать в соединение, имеющее требуемую стереохимическую конфигурацию. Для дополнительного обсуждения методов разделения стереоизомеров см. Е.Ь. Е11с1 и 8.Н. \УПсп. 81сгсосйст181гу о£ Огдашс Сотроипбк (1994).

Соединения формулы 1 могут содержать изотопные вариации, в которых по меньшей мере один атом замещается атомом, имеющим тот же атомный номер, но с атомной массой, отличной от атомной массы, обычно встречающейся в природе. Изотопы, пригодные для включения в соединения формулы 1, включают, например, изотопы водорода, такие как ²Н и ³Н; изотопы углерода, такие как С ¹³С и ¹⁴С;

1315 151718 изотопы азота, такие как N и Ν; изотопы кислорода, такие как О, О и О; изотопы серы, такие как 8; изотопы фтора, такие как Е; изотопы хлора, такие как С1 и изотопы иода, такие как I и I. Использование изотопных вариаций (например, дейтерия, ²Н) может позволить получить определенные терапевтические преимущества, возникающие в результате большей метаболической стабильности, например увеличения периода полувыведения ίη у1уо или снижения дозировки. Кроме того, некоторые изотопные вариации описанных соединений могут включать радиоактивный изотоп (например, тритий, ³Н или ¹⁴С), которые могут быть полезны в исследованиях распределения лекарственных средств и/или суб11 18 15 13 стратов. Замещение изотопами, излучающими позитрон, такими как С, Е, О и Ν, могут быть полезны в исследованиях позитронной эмиссионной томографии (ПЭТ) для изучения активности рецептора субстрата. Изотопно-меченые соединения могут быть получены способами, аналогичными описанным в другом месте описания, с использованием подходящего меченого изотопами мечения реагента вместо немаркированного реагента.

Соединения формулы 1 могут быть получены с использованием способов, описанных ниже. Некоторые из схем и примеров могут опускать детали общих реакций, включая окисление, восстановление и т.д., методы разделения (экстракция, испарение, осаждение, хроматография, фильтрация, растирание, кристаллизация и т.п.) и аналитические процедуры, которые известны специалистам в области органической химии. Детали таких реакций и методов можно найти в ряде трактатов, в том числе Ктсйагб Ьагоск, Сотргсйспыус Огдашс ТгапкГогтаОопк (1999) и многотомной серии, под редакцией М1с1ас1 В.8тДй и др., Сотрспбшт о£ Огдашс 8уп111сОс Мс11юбк (1974 с! ксс.].). Исходные материалы и реагенты могут быть получены из коммерческих источников или могут быть получены с использованием литературных методов. Некоторые из схем реакций могут опустить незначительные продукты, полученные в результате химических превращений (например, спирт от гидролиза сложного эфира, СО₂ от декарбоксилирования дикислоты и т.д.). Кроме того, в некоторых случаях промежуточные продукты реакции могут быть использованы на последующих стадиях без выделения или очистки (т.е. ίη κίΐιι).

В некоторых схемах реакций и примерах ниже некоторые соединения могут быть получены с использованием защитных групп, которые предотвращают нежелательную химическую реакцию в реакционноспособных местах. Защитные группы также могут быть использованы для повышения растворимости или изменения других физических свойств соединения. Для обсуждения стратегий защитных групп, описания материалов и способов установки и удаления защитных групп и компиляции полезных защитных групп для общих функциональных групп, включая амины, карбоновые кислоты, спирты, кетоны, альдегиды и т.д., см. Т.У. Сгсспс и Р.С. ХУиК Рго1ссОпд Сгоирк ίη Огдашс СйсниИгу (1999) и Р. Косюпкк1, Рго1сс1|ус Сгоирк (2000).

- 11 032431

Как правило, химические превращения, описанные во всем описании, могут быть осуществлены с использованием, по существу, стехиометрических количеств реагентов, хотя некоторые реакции могут выиграть от использования избытка одного или нескольких реагентов. Кроме того, многие из реакций, описанных во всем описании, могут быть проведены при комнатной температуре (комн.темп.) и давлении окружающей среды, но в зависимости от кинетики реакции, выходов и так далее некоторые реакции могут проводиться при повышенных давлениях или использовать более высокие температуры (например, при кипячении) или более низких температурах (например, от -78 до 0°С). Любая ссылка в описании и формуле изобретения на стехиометрический диапазон, диапазон температур, диапазон рН и т.д, независимо от того, явно ли оно использует слово диапазон, также включает указанные конечные точки.

Многие химические превращения могут также использовать один или несколько совместимых растворителей, которые могут влиять на скорость реакции и выход. В зависимости от природы реагентов один или несколько растворителей могут представлять собой полярные протонные растворители (включая воду), полярные апротонные растворители, неполярные растворители или некоторую их комбинацию. Иллюстративные примеры растворителей включают насыщенные алифатические углеводороды (например, н-пентан, н-гексан, н-гептан, н-октан, циклогексан, метилциклогексан); ароматические углеводороды (например, бензол, толуол, ксилолы); галогенированные углеводороды (например, метиленхлорид, хлороформ, четыреххлористый углерод); алифатические спирты (например, метанол, этанол, пропан-1-ол, пропан-2-ол, бутан-1-ол, 2-метилпропан-1-ол, бутан-2-ол, 2-метилпропан-2-ол, пентан-1-ол, 3-метил-бутан-1-ол, гексан-1-ол, 2-метоксиэтанол, 2-этоксиэтанол, 2-бутоксиэтанол, 2-(2-метоксиэтокси)этанол, 2-(2-этоксиэтокси)этанол, 2-(2-бутоксиэтокси)этанол); простые эфиры (например, диэтиловый эфир, диизопропиловый эфир, дибутиловый эфир, 1,2-диметоксиэтан, 1,2-диэтоксиэтан, 1метокси-2-(2-метоксиэтокси)этан, 1-этокси-2-(2-этоксиэтокси)этан, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан); кетоны (например, ацетон, метилэтилкетон); сложные эфиры (метилацетат, этилацетат); азотсодержащие растворители (например, формамид, Ν,Ν-диметилформамид, ацетонитрил, Ν-метилпирролидон, пиридин, хинолин, нитробензол); серосодержащие растворители (например, сероуглерод, диметилсульфоксид, тетрагидротиофен-1,1-диоксид); и фосфорсодержащие растворители (например, гексаметилфосфорный триамид).

В приведенной ниже схеме идентификаторы заместителей (например, К¹, К², К³ и т.д.), как определено выше для формулы 1. Как упоминалось ранее, однако, некоторые из исходных материалов и промежуточных продуктов могут включать защитные группы, которые удаляются до получения конечного продукта. В таких случаях идентификатор заместителя относится к фрагментам, определенным в формуле 1 и к остаткам с соответствующими защитными группами. Например, исходный материал или промежуточный продукт в схемах может включать заместитель К², имеющий потенциально реакционноспособный амин. В таких случаях, К² будет включать фрагмент с или без, скажем, Вос или СЬ/-группы, присоединенной к амину.

В схеме А проиллюстрирован общий метод получения соединений формулы 1. Согласно данному методу фумагиллол (А1) вводят в реакцию с винилфосфиноксидом (А2, в котором К¹ и К² независимо представляют собой фенил или С3-5гетероарил, каждый из которых замещен 1-3 К^а), Р-винилфосфинатом или Р-винилфосфиновым амидом (А2, в котором один из К¹ и К² представляет собой фенил или С3-5гетероарил, каждый из которых необязательно замещен и другой представляет собой -ОК⁴ или Х(К⁴)К⁵ соответственно), Р-винилфосфонатом или винилфосфонийдиамидом (А2, в котором К¹ и К² оба представляют собой -ОК⁴ или ^(К⁴)К⁵, соответственно) или Р-винилфосфонамидатом (А2, в котором один из К¹ и К² представляет собой -ОК⁴ и другой представляет собой -ЖК⁴)К⁵). Окса-присоединение по Михаэлю проводят в присутствии сильного основания (например, КОН, Να()Η, МОИ, ΝαΗ и т.д.) и в одном или более совместимых растворителях (ДМФА, толуол, метилциклогексан, и т.д.), обычно при комнатной температуре. Фумагиллол (А1) можно получить путем гидролиза фумагиллина. Например, фумагиллин, который коммерчески доступен в виде соли дициклогексиламина, может быть приведен в контакт с водным раствором гидроксида натрия при комнатной температуре с получением А1. Виниловый реагент (А2) может быть получен с использованием методов, известных в данной области техники, например путем введения в реакцию соответственно замещенного фосфинхлорида, фосфонохлоридата, фосфонамидного хлорида, фосфорохлоридата, фосфородиамидного хлорида или фосфорамидохлоридата с реагентом Гриньяра (например, СН₂=СНМдВг) в совместимом растворителе (например, Е1₂О, ТГФ) с получением А2.

Схема А

В схеме В проиллюстрирован другой метод получения винилового реагента (А2), чем в схеме А. В

- 12 032431 соответствии с данным методом винилгалогенид или трифлат (В2, в котором Х=Вг, I, ΟΤί) вводят в реакцию с требуемым фосфиноксидом (В1, в котором К¹ и К² независимо представляют собой фенил или С3-5гетероарил, каждый из которых необязательно замещен), фосфинатом или фосфиновым амидом (В1, в котором один из К¹ и К² представляет собой фенил или С3-5гетероарил, каждый из которых необязательно замещен, и другой представляет собой -ОК⁴ или -Ν(Κ⁴)Κ⁵), фосфонатом или фосфонийдиамидом (В1, в котором К¹ и К² оба представляют собой -ОК⁴ или ^(К⁴)К⁵) или фосфонамидатом (В1, в котором один из К¹ и К² представляет собой -ОК⁴ и другой представляет собой -Х(К⁴)К⁵). Реакция протекает в присутствии палладиевого катализатора (например, Рб(РРй₃)₄) и основания (Εΐ₃Ν, УьСО₃. К₂СО₃, С§₂СО₃, К₃РО₄ и т.д.) в совместимом растворителе (ТГФ, ДМФА, диоксан, толуол и т.д.), обычно при повышенной температуре. См., например, Хи е! а1., 8упШез18 8:691-92 (1986) (введение в реакцию дифенилфосфиноксида и винилбромида с Рб(Рй₃Р)₄ и Εΐ₃Ν в толуоле при 60°С в течение 8 ч с выходом дифенил(винил)фосфиноксида); также см. Ка1ек е! а1., Огуашс Ьейегз 10 (20):4637-40 (2008) (введение в реакцию диэтилфосфоната и винилбромида с Рб(Рй₃Р)₄ и Сз₂СО₃ в ТГФ при 120°С в течение 10 мин в микроволновом реакторе с выходом диэтилвинилфосфоната).

Схема В

Р¹

В1 х

Н₂С=/

В2

Рс1(РР11_Э)4 □снование

К¹

А2

Методы, проиллюстрированные в схемах, могут быть изменены по желанию. Например, можно добавлять или удалять защитные группы и продукты могут быть дополнительно модифицированы, напри мер, путем алкилирования, ацилирования, гидролиза, окисления, восстановления, амидирования, сульфирования, алкинирования и т.п. для получения желаемого конечного продукта. Кроме того, любой промежуточный или конечный продукт, который содержит смесь стереоизомеров, может быть необязательно очищен с помощью хиральной колоночной хроматографии (например, сверхкритической жидкостной хроматографии) или путем дериватизации с оптически чистыми реагентами, как описано выше, с получением желаемого стереоизомера.

Соединения формулы 1, которые включают указанные выше соединения и их фармацевтически приемлемые комплексы, соли, сольваты и гидраты, следует оценивать по их биофармацевтическим свойствам, таким как растворимость и стабильность раствора в различных рН, проницаемость и т.п., для выбора подходящей лекарственной формы и способа введения. Соединения, предназначенные для фармацевтического применения, могут быть введены в виде кристаллических или аморфных продуктов и могут быть получены, например, в виде твердых пробок, порошков или пленок способами, такими как оса ждение, кристаллизация, сушка вымораживание, распылительная сушка, испарительная сушка, микро волновая сушка или радиочастотная сушка.

Соединения формулы 1 могут быть введены отдельно или в комбинации друг с другом или с одним или несколькими фармакологически активными соединениями, которые отличаются от соединений формулы 1. Как правило, одно или несколько из указанных соединений вводят в виде фармацевтической композиции (композиции) в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами. Выбор эксципиентов, среди прочего, зависит от конкретного способа введения, влияния эксципиента на растворимость и стабильность и характера лекарственной формы. Пригодные фармацевтические композиции и способы их получения могут быть найдены, например, в А.К. Сепиаго (изд.), Кетΐηβίοη: Тйе 8с1епсе апб Ргасйсе оТРйагтасу (20-е изд., 2000).

Соединения формулы 1 могут быть введены перорально. Пероральное введение может включать глотание, и в этом случае соединение попадает в кровоток через желудочно-кишечный тракт. Альтернативно или дополнительно пероральное введение может включать введение через слизистую (например, буккальное, сублингвальное, супралингвальное введение), так что соединение попадает в кровоток через слизистую оболочку полости рта.

Рецептуры, пригодные для перорального введения, включают твердые, полутвердые и жидкие системы, такие как таблетки; мягкие или твердые капсулы, содержащие множественные частицы или наночастицы, жидкости или порошки; пастилки, которые могут быть заполнены жидкостью; жевательные резинки; гели; быстро диспергирующие лекарственные формы; пластинки; вагинальные суппозитории; спреи; и буккальные или мукоадгезивные пластыри. Жидкие рецептуры включают суспензии, растворы, сиропы и эликсиры. Такие рецептуры могут быть применены в качестве наполнителей в мягких или твердых капсулах (например, из желатина или гидроксипропилметилцеллюлозы) и обычно включают носитель (например, воду, этанол, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, метилцеллюлозу или подходящее масло) и один или более эмульгирующих агентов, суспендирующих агентов или их оба. Жидкие препараты также могут быть получены восстановлением твердого вещества (например, из саше).

Соединения формулы 1 также могут быть применены в быстрорастворимых, быстроразрушающихся лекарственных формах, таких как описанные в I папу и Сйеп, Ехрег! Ор1п1оп ΐη Тйегареийс Ра1еп18

- 13 032431 (2001) 11(6):981-986.

Для таблетированных лекарственных форм в зависимости от дозы активный фармацевтический ингредиент (АР1) может содержать от около 1 до около 80 мас.% лекарственной формы или более типично от около 5 до около 60 мас.% лекарственной формы. В дополнение к АР1 таблетки могут включать один или несколько разрыхлителей, связующие вещества, разбавители, поверхностно-активные вещества, скользящие вещества, смазывающие вещества, антиоксиданты, красители, ароматизаторы, консерванты и маскирующие вкус средства. Примеры разрыхлителей включают натрийкрахмалгликолат, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, кальцийкарбоксиметилцеллюлозу, натрийкроскармелозу, кросповидон, поливинилпирролидон, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, С_1-балкилзамещенную гидроксипропилцеллюлозу, крахмал, предварительно желатинированный крахмал и альгинат. Обычно разрыхлитель будет содержать от около 1 до около 25 мас.% или от около 5 до около 20 мас.% лекарственной формы.

Связующие вещества обычно применяют для придания когезионных качеств рецептуре таблеток. Подходящие связующие включают микрокристаллическую целлюлозу, желатин, сахара, полиэтилтенгликоль, природные и синтетические смолы, поливинилпирролидон, прежелатинизированный крахмал, гидроксипропилцеллюлозу и гидроксипропилметилцеллюлозу. Таблетки могут также содержать разбавители, такие как лактоза (моногидрат, моногидрат с распылительной сушкой, безводный), маннит, ксилит, декстроза, сахароза, сорбит, микрокристаллическая целлюлоза, крахмал и двухосновный дигидрат фосфата кальция.

Таблетки могут также включать поверхностно-активные вещества, такие как лаурилсульфат натрия и полисорбат 80 и скользящие вещества, такие как диоксид кремния и тальк. Когда они присутствуют, поверхностно-активные агенты могут содержать от около 0,2 до около 5 мас.% таблетки, а скользящие вещества могут составлять от около 0,2 до около 1 мас.% таблетки.

Таблетки могут также содержать смазывающие вещества, такие как стеарат магния, стеарат кальция, стеарат цинка, стеарат натрия и фумарат натрия и смеси стеарата магния с лаурилсульфатом натрия. Смазывающие вещества могут содержать от около 0,25 до около 10 мас.% или от около 0,5 до около 3 мас.% таблетки.

Таблетные смеси могут быть сжаты непосредственно или путем уплотнения валиком для образования таблеток. Таблетные смеси или части смесей альтернативно могут быть мокрыми, сухими или расплавленными-гранулированными, расплавленными-застывшими или экструдированными перед таблетированием. При желании, до смешивания один или несколько компонентов могут быть отсортированы путем скрининга или фрезерования или обоих. Конечная лекарственная форма может содержать один или несколько слоев и может быть покрыта, не покрыта оболочкой или инкапсулирована. Иллюстративные примеры таблеток могут содержать до около 80 мас.% АР1, от около 10 до около 90 мас.% связующего вещества, от около 0 до около 85 мас.% разбавителя, от около 2 до около 10 мас.% разрыхлителя и от около 0,25 до около 10 мас.% смазывающего вещества. Для обсуждения смешивания, гранулирования, измельчения, скрининга, таблетирования, покрытия, а также описания альтернативных методов приготовления лекарственных препаратов см. А.К. Сеппаго (ей.), Кеттд1оп: Т1е Заепсе апй Ргасйсе о£ Р1агтасу (20-е изд., 2000); Н.А. ЫеЪегтап е! а1. (изд.), РЬагтасеи!юа1 Эозаде Еогтз: ТаЪ1е!з, т. 1-3 (2-е изд., 1990); и Э.К. РапкН & С.К. РапкЬ, НапйЪоок о£ РЬагтасеи!юа1 6гаш1а1юп Тес1по1оду, том 81 (1997).

Перорально потребляемые пленки для человеческого или ветеринарного применения представляют собой гибкие водорастворимые или набухающие в воде тонкопленочные дозируемые формы, которые могут быстро растворяться или являться мукоадгезивными. В дополнение к АР1 типичная пленка включает один или несколько пленкообразующих полимеров, связующих веществ, растворителей, увлажнителей, пластификаторов, стабилизаторов или эмульгаторов, агентов, улучшающих вязкость и растворителей. Другие компоненты пленки могут включать в себя антиоксиданты, красители, ароматизаторы и усилители вкуса, консерванты, стимуляторы слюноотделения, охлаждающие агенты, сорастворители (включая масла), смягчающие вещества, наполнители, противопенные агенты, поверхностно-активные вещества и маскирующие вкус средства. Некоторые компоненты рецептуры могут выполнять более одной функции.

В дополнение к требованиям дозирования количество АР1 в пленке может зависеть от его растворимости. Если АР1 водорастворимый, то он обычно будет составлять от около 1 до около 80 мас.% компонентов нерастворителя (растворенных веществ) в пленке или от около 20 до около 50 мас.% растворенных веществ в пленке. Менее растворимый АР1 может содержать большую долю композиции, обычно до около 88 мас.% компонентов нерастворителя в пленке.

Пленкообразующий полимер может быть выбран из природных полисахаридов, белков или синтетических гидроколлоидов и обычно содержит от около 0,01 до около 99 мас.% или от около 30 до около 80 мас.% пленки.

Пленочные дозировочные формы обычно получают путем испарительной сушки тонких водных пленок, покрытых на отслаиваемую подложку или бумагу, которая может быть выполнена в сушильном шкафу или туннеле (например, в комбинированном устройстве для нанесения покрытия), в лиофилизационном оборудовании или в вакуумной печи.

- 14 032431

Пригодные твердые рецептуры для перорального введения могут включать композиции для немедленного высвобождения и композиции с модифицированным высвобождением. Рецептуры модифицированного высвобождения включают замедленное, устойчивое, импульсное, контролируемое, целенаправленное и запрограммированное высвобождение. Для общего описания подходящих композиций с модифицированным высвобождением, см. патент США № 6106864. Для получения дополнительной информации о других полезных технологиях выпуска, таких как дисперсии с высокой энергией и осмотические и покрытые частицы, см. Уегта с1 а1., РРагтасеиДса1 Тес1по1оду 0и-1те (2001) 25(2):1-14.

Соединения формулы 1 также могут быть введены непосредственно в кровоток, мышцу или внутренний орган субъекта. Подходящие способы парентерального введения включают внутривенное, внутриартериальное, внутрибрюшинное, интратекальное, внутрижелудочковое, внутриутробное, внутригрудное, внутричерепное, внутримышечное, внутрисуставное и подкожное введение. Подходящие устройства для парентерального введения включают игольчатые инжекторы, включая инжекторы с микроиглой, инжекторы без иглы и инфузионные устройства.

Парентеральные рецептуры обычно представляют собой водные растворы, которые могут содержать эксципиенты, такие как соли, углеводы и буферные агенты (например, рН от около 3 до около 9). Однако для некоторых применений соединения формулы 1 могут быть более подходящим образом составлены в виде стерильного неводного раствора или в виде высушенной формы для использования в сочетании с подходящим носителем, таким как стерильная вода без пирогена. Получение парентеральных рецептур в стерильных условиях (например, путем лиофилизации) может быть легко осуществлено с использованием стандартных фармацевтических методов.

Растворимость соединений, которые применяются при приготовлении парентеральных растворов, может быть увеличена с помощью соответствующих рецептурных методов, таких как введение агентов, повышающих растворимость. Рецептуры для парентерального введения могут быть составлены для немедленного или модифицированного высвобождения. Рецептуры с модифицированным высвобождением включают замедленное, устойчивое, импульсное, контролируемое, целевое и запрограммированное высвобождение. Таким образом, соединения формулы 1 могут быть составлены в виде суспензии, твердого вещества, полутвердого вещества или тиксотропной жидкости для введения в качестве имплантированного депо, обеспечивающего модифицированное высвобождение активного соединения. Примеры таких рецептур включают в себя стенты с лекарственным покрытием и полутвердые вещества и суспензии, содержащие загруженные лекарственным средством микросферы сополимера поли(ОЬ-молочнойгликолевой)кислоты (РСЬА).

Соединения формулы 1 также могут быть введены местно, внутрикожно или трансдермально на кожу или слизистую оболочку. Типичные рецептуры для этой цели включают гели, гидрогели, лосьоны, растворы, кремы, мази, пылевидные порошки, перевязочные материалы, пены, пленки, покрытия для кожи, пластины, имплантаты, губки, волокна, бинты и микроэмульсии. Также могут применять липосомы. Типичные носители могут включать спирт, воду, минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, глицерин, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль. Рецептуры для местного применения могут также включать усилители проницаемости. См., например, Ρίηηίη апб Могдап, 1. РРагт. 8съ 88(10):955-958 (1999).

Другие средства для местного применения включают доставку электропорацией, ионтофорез, фонофорез, сонофорез и иньекция с микроиглой или без иглы (например, Ро\\'<!ег|ес1'^|Л1 и ВюдесТ™). Рецептуры для местного введения могут быть составлены для немедленного или модифицированного высвобождения, как описано выше.

Соединения формулы 1 могут также быть введены интраназально или путем ингаляции, обычно в виде сухого порошка, аэрозольного спрэя или носовых капель. Ингалятор может быть применен для введения сухого порошка, который включает только АР1, порошковую смесь АР1 и разбавитель, такой как лактоза, или частицы смешанного компонента, которые включают в себя АР1 и фосфолипид, такой как фосфатидилхолин. Для интраназального применения порошок может включать биоадгезив, например хитозан или циклодекстрин. Контейнер под давлением, насос, пульвелизатор, распылитель или небулайзер могут использоваться для генерирования аэрозольного спрея из раствора или суспензии, содержащей АР1, один или несколько агентов для диспергирования, солюбилизации или расширения выпуска АР1 (например, ЕЮН с водой или без нее), один или несколько растворителей (например, 1,1,1,2тетрафторэтан или 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан), которые служат в качестве пропеллента и необязательно поверхностно-активное вещество, такое как сорбитан триолеат, олеиновая кислота или олиголактовая кислота. Для получения тонкого тумана можно использовать распылитель с использованием электрогидродинамики.

Перед применением в в виде рецептуры сухого порошка или суспензии лекарственный продукт обычно измельчают до размера частиц, подходящих для доставки путем ингаляции (обычно 90% частиц в расчете на объем, имеющий наибольший размер менее 5 мкм). Это может быть достигнуто с помощью любого подходящего способа уменьшения размера, такого как спирально-струйное фрезерование, струйное фрезерование с псевдоожиженным слоем, обработка сверхкритической текучей среды, гомогенизация под высоким давлением или распылительная сушка.

- 15 032431

Капсулы, блистеры и картриджи (изготовленные, например, из желатина или гидроксипропилметилцеллюлозы) для использования в ингаляторе или инсуффляторе могут быть составлены так, чтобы содержать порошковую смесь активного соединения, подходящую порошковую основу, такую как лактоза или крахмал, и модификатор производительности, такой как Ь-лейцин, маннит или стеарат магния. Лактоза может быть безводной или моногидратной. Другие подходящие эксципиенты включают декстран, глюкозу, мальтозу, сорбит, ксилит, фруктозу, сахарозу и трегалозу.

Подходящая рецептурная композиция для использования в распылителе с использованием электрогидродинамики для получения тонкого тумана может содержать от около 1 до около 20 мг АР1 за приведение в действие и объем активации может варьироваться от около 1 мкл до около 100 мкл. Типичная рецептура может включать одно или несколько соединений формулы 1, пропиленгликоль, стерильную воду, ЕкОН и №С1. Альтернативные растворители, которые могут быть использованы вместо пропиленгликоля, включают глицерин и полиэтиленгликоль.

Рецептуры для ингаляционного введения, интраназального введения или и того, и другого могут быть составлены для немедленного или модифицированного высвобождения с использованием, например, РСЬА. Подходящие ароматизаторы, такие как ментол и левоментол, или подсластители, такие как сахарин или сахарин натрия, могут быть добавлены в композиции, предназначенные для ингаляционного/интраназального введения.

В случае ингаляторов с сухим порошком и аэрозолей единица дозирования определяется с помощью клапана, который доставляет измеренное количество. Единицы дозирования, как правило, расположены для введения дозированной дозы или затяжки, содержащей от примерно 10 до примерно 1000 мкг АР1. Общая суточная доза обычно составляет от около 100 мкг до около 10 мг, которая может быть введена в разовой дозе или, чаще, в виде разделенных доз в течение дня.

Активные соединения могут быть введены ректально или вагинально, например в виде суппозитория, пессария или клизмы. Какао-масло представляет собой традиционную основу суппозиториев, но при необходимости могут использоваться различные альтернативы. Рецептуры для ректального или вагинального введения могут быть составлены для немедленного или модифицированного высвобождения, как описано выше.

Соединения формулы 1 также можно вводить непосредственно в глаз или ухо, как правило, в виде капель микронизированной суспензии или раствора в изотоническом, рН-скорректированном стерильном физиологическом растворе. Другие рецептуры, подходящие для окулярного и слухового введения, включают мази, гели, биоразлагаемые имплантаты (например, абсорбируемые гель-губки, коллаген), небиодеградируемые имплантаты (например, силикон), пластины, линзы и частицы или везикулярные системы, такие как ниосомы или липосомы. Рецептура может включать один или несколько полимеров и консервант, такой как хлорид бензалкония. Типичные полимеры включают поперечносшитую полиакриловую кислоту, поливиниловый спирт, гиалуроновую кислоту, целлюлозные полимеры (например, гидроксипропилметилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, метилцеллюлозу) и гетерополисахаридные полимеры (например, гель-камедь). Такие рецептуры также могут быть получены путем ионтофореза. Рецептуры для глазного или слухового введения могут быть составлены для немедленного или модифицированного высвобождения, как описано выше.

Для улучшения их растворимости, скорости растворения, маскирования вкуса, биодоступности или стабильности соединения формулы 1 могут быть объединены с растворимыми макромолекулярными образованиями, включая циклодекстрин и его производные и полиэтилтенгликольсодержащие полимеры. Например, комплексы АР1-циклодекстрин обычно пригодны для большинства лекарственных форм и путей введения. Могут применяться как комплексы включения, так и без включения. В качестве альтернативы прямому комплексообразованию с АР1 циклодекстрин может использоваться в качестве вспомогательной добавки, т.е. в качестве носителя, разбавителя или солюбилизатора. Для этих целей обычно используют альфа-, бета- и гамма-циклодекстрины. См., например, УО 91/11172, УО 94/02518 и УО 98/55148.

Как отмечено выше, одно или несколько соединений формулы 1, включая указанные выше соединения и их фармацевтически активные комплексы, соли, сольваты и гидраты, могут быть объединены друг с другом или с одним или несколькими другими активными фармацевтически активными соединениями для лечения различных заболеваний, патологических состояний и расстройств. В таких случаях активные соединения могут быть объединены в виде единичной дозированной формы, как описано выше, или могут быть представлены в виде набора, который подходит для совместного введения композиций. Набор содержит (1) две или более различных фармацевтических композиций, по меньшей мере одна из которых содержит соединение формулы 1; и (2) устройство для отдельного удержания двух фармацевтических композиций, таких как разделенная бутылка или разделенный пакет из фольги. Примером такого набора является знакомая блистерная упаковка, используемая для упаковки таблеток или капсул. Набор подходит для введения различных типов лекарственных форм (например, пероральных и парентеральных) или для введения различных фармацевтических композиций с отдельными интервалами дозирования или для титрования различных фармацевтических композиций относительно друг друга. Для обеспечения соответствия пациентам набор обычно содержит указания для введения и может быть снаб

- 16 032431 жен памяткой.

Для введения людям общая суточная доза заявленных и описанных соединений обычно находится в диапазоне от около 0,1 мг до около 3000 мг в зависимости от пути введения. Например, для перорального введения может потребоваться общая суточная доза от около 1 до около 3000 мг, тогда как внутривенная доза может требовать только суточной дозы от около 0,1 до около 300 мг. Общую суточную дозу могут вводить в виде разовых или разделенных доз и по усмотрению врача она может выходить за пределы типичных диапазонов, указанных выше. Хотя данные дозы основаны на среднем человеческом субъекте, имеющем массу от примерно 60 до примерно 70 кг, врач сможет определить подходящую дозу для пациента (например, младенца), масса которого выходит за пределы этого диапазона массы.

Как указано выше, соединения формулы 1 могут применять для лечения заболеваний, расстройств и патологических состояний, для которых указано ингибирование Ме1ЛР2. Такие заболевания, расстройства и патологические состояния обычно относятся к любому нездоровому или ненормальному состоянию у субъекта, для которого ингибирование Ме1ЛР2 обеспечивает терапевтическое преимущество. Более конкретно, соединения формулы 1 могут применять для лечения ожирения или состояния избыточного веса у субъекта или для лечения заболеваний, расстройств или патологических состояний, связанных с ожирением или избыточным состоянием, включая сердечно-сосудистые заболевания, гипертонию, диабет, гипергликемию, резистентность к инсулину, метаболический синдром X, нарушение толерантности к глюкозе, безалкогольный стеатоз печени, дислипидемию (включая высокий общий уровень холестерина или высокий уровень триглицеридов), атеросклероз, инсульт, апноэ во сне, остеоартрит, бесплодие, синдром поликистозных яичников и синдром Прадера-Вилли.

Согласно практическому руководству Идентификация, оценка и лечение избыточного веса и ожирения у взрослых, опубликованному в 2000 г. Национальным институтом сердца, легких и крови, у взрослого человека можно классифицировать как избыточный вес, так и ожирение на основе индекса массы тела субъекта (ИМТ). ИМТ рассчитывается путем деления массы субъекта (в кг) на квадрат высоты субъекта (в метрах). В руководстве ИМТ 25-29,9 кг/м² классифицируется, как избыточный вес и индексы массы тела 30-34,9 кг/м², 35-39,9 кг/м² и >40 кг/м² классифицируются как ожирение класса 1, ожирение класса 2 и ожирение класса 3 (экстремальное) соответственно.

Заявленные в формуле изобретения и описанные соединения могут быть объединены с одним или несколькими другими фармакологически активными соединениями или терапиями для лечения одного или нескольких заболеваний, заболеваний или состояний, для которых указан Ме!ЛР2, включая ожирение. Например, соединения формулы 1, которые включают соединения, названные выше, и их фармацевтически приемлемые комплексы, соли, сольваты и гидраты, могут быть введены одновременно, последовательно или отдельно в сочетании с одним или несколькими соединениями или терапиями для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, гипертонии, диабета, гипергликемия, резистентности к инсулину, метаболического синдрома X, нарушения толерантности к глюкозе, безалкогольного стеатоза печени, дислипидемии, атеросклероза, инсульта, апноэ во сне, остеоартрита, бесплодия, синдрома поликистозных яичников и синдрома Прадера-Вилли. Такие комбинации могут предлагать значительные терапевтические преимущества, в том числе меньшее количество побочных эффектов, улучшенную способность лечить малообеспеченные популяции пациентов или синергическую активность.

Например, соединения формулы 1 могут быть объединены с одним или несколькими агентами для лечения ожирения, диабета, гипергликемии, резистентности к инсулину, метаболического синдрома X, нарушенной толерантности к глюкозе и неалкогольного стеатоза печени. Данные агенты включают ингибиторы липазы поджелудочной железы (например, орлистат); инсулин; сенсибилизаторы инсулина, включая бигуаниды (например, буформин, метформин и фенформин) и глитазоны (например, пиоглитазон и розиглитазон); средства, повышающие секрецию инсулина, включая сульфонилмочевины (например, ацетогексамид, хлорпропамид, толазамид, толбутамид, гликлазид, глимепирид, глипизид и глибурид) и меглитиниды (например, натеглинид и репаглинид); ингибиторы альфа-глюкозидазы (например, акарбоза и миглитол); глюкагоноподобные пептидные аналоги и агонисты (например, экзенатид, лираглутид и таспоглутид); ингибиторы дипептидилпептидазы-4 (например, алоглиптин, линаглиптин, саксаглиптин, ситаглиптин и вилдаглиптин); и аналоги амилина (например, прамлинид).

Кроме того, соединения формулы 1 могут быть объединены с одним или несколькими агентами для лечения остеоартрита, включая нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) (например, апазон, аспирин, целекоксиб, диклофенак (с мизопростолом и без него), дифлунизал, этодолак, фенопрофен, флурбипрофен, ибупрофен, индометацин, кетопрофен, меклофенамат натрия, мефенамовая кислота, мелоксикам, набуметон, напроксен, оксапрозин, фенилбутазон, пироксикам, холин и салицилаты магния, сальсалат и сулиндак); анальгетики (например, ацетаминофен и сульфат морфина, а также кодеин, гидрокодон, оксикодон, пропоксифен и трамадол, все с ацетаминофеном или без него); кортикостероиды (например, бетаметазон, ацетат кортизона, дексаметазон, гидрокортизон, метилпреднизолон, преднизолон и преднизон); и агенты остеопороза (например, алендронат, клодронат, этидронат, ибандронат, неридронат, олипадронат, памидронат, ризедронат, тилудронат и золедронат).

Соединения формулы 1 также могут быть объединены с одним или несколькими агентами для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, гипертонии, дислипидемии, атеросклероза и инсульта, включая

- 17 032431 блокаторы кальциевых каналов (например, амлодипин, аранидипин, азелнидипин, барнидипин, бепридил, бенидипин, цилнидипин, дилтиазем, исрадипин, эфонидипин, фелодипин, фендилин, флуспирилеин, лацидипин, лерканидипин, манидипин, мибефрадил, никардипин, нифедипин, нилвадипин, нимодипин, низолдипин, нитрендипин, пранидипин и верапамил); статины (например, аторвастатин, флувастатин, ловастатин, мевастатин, питавастатин, правастатин, розувастатин и симвастатин); РРАК альфаактиваторы (например, фибраты, такие как безафибрат, ципрофибрат, клофибрат, фенофибрат и гемфиброзил); секвестранты желчной кислоты (например, холестирамин, колесевелам и колестипол); другие агенты, снижающие уровень липидов (например, ниацин и эзетимиб); бета-блокаторы (например, алпренолол, атенолол, бетаксолол, бисопролол, буциндолол, картеолол, карведилол, целипролол, эсмолол, кора Эвкоммии, лабеталол, метопролол, надолол, небиволол, окпренолол, пенбутолол, пиндолол, пропранолол, соталол и тимолол); ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента (АСЕ) (беназеприл, каптоприл, эналаприл, имидаприл, лизиноприл, периндоприл, хинаприл, рамиприл, трандолаприл и зофеноприл); и ингибиторы агрегации тромбоцитов (абциксимаб, аспирин, цилостазол, клопидогрель, дипиридамол, дипиридамол, эптифибатид, ифетробан, пикотамид, прасугрел, терутробан, тикагрелор, тиклопидин и тирофибан).

Биологическая активность

Биологическую активность соединения формулы 1 можно определить с использованием различных методов ΐπ νΐίΓΟ и ίη νίνο. Следующие анализы ίη νΐίΓΟ измеряют способность тестируемого соединения ингибировать Ме1АР2. Анализы ΐπ νίνο измеряют способность тестируемого соединения индуцировать потерю массы тела или гипогликемическую активность.

Очистка белка Ме1АР2.

ДНК, кодирующую полноразмерную последовательность человеческого фермента Ме1АР2, амплифицируют с помощью ПЦР и клонируют в экспрессирующий вектор рРа§1Вас (1п\ч1годе'п). Рекомбинантный бакуловирус, включающий конструкцию Ме1АР2, генерируют транспозицией с использованием системы Вас-1о-Вас (1пу|1годеп). Экспрессию рекомбинантного белка осуществляют путем инфицирования клеток 8робор1ега йищрегба 819 (1пу|1годеп) в 5 л волновых биореакторах (Уасе' В1о!есЬ). Рекомбинантный белок выделяют из клеточных экстрактов путем связывания с колонкой 8Р Нйгар Ра§1 1^;1о\х или 8Р 8ерБаго§е (8щша) и белок элюируют, используя градиент ХаС1. Частично очищенные экстракты Ме1АР2 дополнительно очищают с помощью АКТА РРБС на колонке 8ирегбех-200 (СЕ). Чистоту белка Ме1АР2 определяют на денатурирующем геле 8Э8-РАСЕ. Очищенный белок Ме1АР2 концентрируют до конечной концентрации 17 или 2,5 мг/мл. Белок хранят при -78°С в буфере, содержащем 10 мМ НЕРЕ8 рН 7,4, 150 мМ ХаС1 и 1 мМ СОС1₂ или в буфере, содержащем 20 мМ НЕРЕ8 рН 7,4, 120 мМ ХаС1 и 5 мМ МпС12.

Ферментный анализ: ингибирование Ме1АР2.

Ингибирование Ме1АР2 определяют с использованием черного 384-луночного планшета при следующих условиях реакции: 50 мМ Нере§ рН 7,5, 100 мМ ИаС1, 10 мкМ МпС1₂ или 10 мкМ СоС1₂, 0,005% Вгц35®, 1 мМ ТСЕР, 1% ДМСО. Для начала анализа в каждую лунку добавляли 4 мкл 5-50 нМ раствора фермента Ме1АР2 (конечная концентрация фермента составляла от 2 до 20 нМ) с последующим добавлением 2 мкл испытуемого соединения (2,5-кратные серийные разведения для 11 точек данных для каждого испытуемого соединения) в буферном растворе, содержащем 5% ДМСО. Затем в каждую лунку планшета добавляют 4 мкл раствора субстрата (2,5 х К_т Ме1-АМС), который содержит конечную концентрацию субстрата при значении К_т. Скорость реакции контролируют путем считывания флуоресценции при 460 нм с длиной волны возбуждения при 330 нм в течение 10 до 30 мин с использованием считывателя флуоресцентных пластин. Результаты для каждой лунки выражаются в виде процента ингибирования и вычисляются с использованием уравнения

I _ ί X - Ρθ8ίίίνβ _______ Ингибирование= \Νβ₈αίίνβ - Ροζίίίίνβ] , где Νβξαϋνβ представляет собой среднее значение всех скоростей на пластине в отсутствие тестируемого соединения, Ροαίίίνβ представляет собой скорость с 10 мкМ инструментального соединения (активность Ме1АР2 на 100% ингибируется) и х представляет собой скорость (исходные данные) в присутствии тестируемого соединения. 1С₅₀ для каждого испытуемого соединения получают путем подгонки процентных данных ингибирования со стандартным 4-параметрическим уравнением и сообщается, как р1С₅₀, т.е. -1од(1С₅₀), где 1С₅₀ представляет собой молярную концентрацию при 50% ингибировании.

Клеточная активность Ме1АР2: вестерн-блоттинг ХМе1-14-3-3у.

Клетки НИУЕС (Еоп/а) высевают в 96-луночные микропланшеты для культивирования тканей и культивируют в течение 24 ч до добавления тестируемых соединений (11-точечная серия серийных разведений) или ДМСО несущей среде. Через 24 ч экстракты целых клеток получают лизирующими клетками в буфере для выделения клеток (сигнальная система клетки), содержащем ингибиторы протеазы и фосфатазы (Са1ЫосБет). Нерастворимый материал удаляют центрифугированием и образцы разбавляют и кипятят в буфере 8Э8-РАОЕ. Белки разделяют с помощью 8Э8-РАОЕ и переносят на РУЭР-мембраны.

- 18 032431

Мембраны блокируют, затем инкубируют с соответствующими первичными антителами, NΜеΐ-14-3-3γ (Νονπδ) и β-актином (81§та), с последующей инкубацией со вторичными ПВОуе 680- или 800С\\'конъюгированными антителами (Ι,ί-Сог). Мембраны сканируются на О4уззеу (Ι.ί-Сог), а сигналы, соответствующие Ν-\%'ΐΙ4-3-3γ и β-актину количественно определяют с использованием программного обеспечения Ь1Сог. ЕС₅₀ соединений получены путем подбора коэффициентов необработанного белка ΝМе!14-3-3у по сигналу β-актинового белка с использованием программного обеспечения для гибкой подгонки Х1.ГП4 М1сгозой Ехсе1 и сообщают, как рЕС₅₀, т.е. -1од(ЕС₅₀), где ЕС₅₀ представляет собой молярную концентрацию при 50% эффективном (максимальном) ответе.

Потеря массы тела.

От 10 до 12 недельных самцов мышей С57Ь1/6 получают от коммерческих поставщиков и помещают на диету с высоким содержанием жиров (60% ккал) в течение не менее 15 недель. Лечение ингибиторами Ме!АР2 начинается, когда средняя масса тела достигает около 50 г. Готовят раствор ингибиторов Ме!АР2 в водном растворе 0,5% метилцеллюлозы и вводят через пероральный зонд. Контрольные животные получают эквивалентный объем водного раствора 0,5% метилцеллюлозы без ингибитора Ме!АР2. Массу тела (МТ) и потребление пищи регистрируют ежедневно, а эффективность рассчитывают индивидуально, как процент от потери МТ относительно значений предварительной обработки. В зависимости от плана исследования лечение продолжается в течение 12, 14 или 28 дней. В некоторых исследованиях косвенную калориметрию или состав тела определяют в конце лечения.

Гипогликемическая активность.

Шестинедельных самцов мышей ККА^у получают от коммерческих поставщиков и помещают на стандартное питание. Лечение ингибитором Ме!АР2 начинается после 8-дневной акклиматизации. Ингибитор Ме!АР2 готовят в водном растворе 0,5% метилцеллюлозы, который вводят один раз в день через пероральный зонд. Контрольных животных обрабатывают эквивалентным объемом водного 0,5% раствора целлюлозы без соединения. Через 4 недели кровь собирают из хвостовой вены каждой из мышей. Уровни глицидного гемоглобина измеряют с использованием автоматизированного анализатора гликогемоглобина Тозой НРС-72368 и уровней глюкозы в плазме с использованием автоматизированного анализатора глюкозы НйасЫ модели 7180. Для оценки гипогликемической активности ингибитора Ме1АР2 статистические различия между группами, контролируемыми и обработанными соединением, анализируют с использованием одностороннего теста Уильямса.

Примеры

Следующие примеры предназначены для иллюстрации и не для ограничения и представляют собой конкретные варианты реализации настоящего изобретения.

Спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР) ¹Н были получены для многих соединений в следующих примерах. Характеристичные химические сдвиги (δ) приведены в частях на миллион в слабом поле относительно тетраметилсилана с использованием обычных сокращений для обозначения основных пиков, включая з (синглет), 4 (дублет), I (триплет), с] (квартет), т (мультиплет) и Ьг (уширенный). Следующие условные сокращения используются для обычных растворителей: СОСИ (дейтерохлороформ), ДМСО-4₆ (дейтеродиметилсульфоксид), С1УО1) (дейтерометанол), 6Ι)₃6Ν (дейтероацетонитрил) и ТГФ4₈ (дейтеротетрагидрофуран). Масс-спектры (т/ζ для [М+Н]⁺) записывали с использованием либо массспектрометрии с использованием электрораспылительной ионизации (ЭС-МС), либо методом массспектрометрии с химической ионизацией при атмосферном давлении (АРС1-М8).

Там, где указано, продукты некоторых препаратов и примеров очищают с помощью ВЭЖХ с массовой загрузкой (насос: \Са1егз^|Х1 2525; МС:2р™; программное обеспечение: Маззйупх™), флешхроматография или препаративная тонкослойная хроматография (ТСХ). Обращенно-фазную хроматографию обычно проводят на колонке (например, 6етт1™ 5 мкм С18 110А, Ах1а™, 30x75 мм, 5 мкм) в кислых условиях (кислотный режим), элюируя смесью СΗзСN и водными подвижными фазами, содержащими 0,035 и 0,05% трифторуксусной кислоты (ТФА), соответственно, или в основных условиях (основной режим), элюируя водой и 20/80 (об./об.) водными/ацетонитрильными подвижными фазами, обе из которых содержат 10 мМ NΗ4ΗСΟз. Препаративную ТСХ обычно проводят на силикагелевых пластинах 60 Р₂₅4. После выделения хроматографией удаляют растворитель и полученный продукт сушат в центрифужном испарителе (например, ΟеηеVас™), роторном испарителе, вакуумированной колбе и т.д. Реакции в инертной (например, азоте) или реакционной (например, Н2) атмосфере обычно проводят при давлении около 1 атм (14,7 фунт/кв.дюйм).

Получение 1. (3В,48,58,6В)-5-Метокси-4-((2В,3В)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)1-оксаспиро[2.5]октан-6-ол °\7н ?^Нз ?^Нз >Α·'Ζ_Ο — I

ОН СН₃

В 1-литровую трехгорлую круглодонную колбу загрузили 1,5М водн. №ОН (263 мл, 395 ммоль) с

- 19 032431 последующим прибавлением дициклогексиламина (2Е,4Е,6Е,8Е)-10-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)-10-оксодека2,4,6,8-тетраеноата (79 г, 123 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, в течение которой образовывался коричневый твердый осадок. ТСХ показал, что указанное в заголовке соединение является основным продуктом. Прибавили этилацетат (200 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Желтый осадок, образовавшийся во время прибавления, и агрегированное твердое вещество распадалось на более мелкие частицы. Прибавили хлорид натрия (35,6 г, 609 ммоль) и смесь перемешивали еще 10 мин. Смесь фильтровали и осадок на фильтре промывали ЕЮЛс (160 мл). Органическую и водную фазу разделили и водную фазу экстрагировали ЕЮЛс (2x200 мл). Органические слои объединили и затем промывали водой (96 мл), 0,4Ν Н₂8О₄ (с сульфатом аммония, 13 г/л) (2x200 мл) и водным раствором хлорида натрия (160 мл). Органическую фазу сушили над №₂8О.|. отфильтровали и концентрировали, используя роторный испаритель. Остаток разбавили ацетоном (2 х 40 мл) и конденсировали досуха на роторном испарителе, получая сырой продукт в виде светло-оранжевого сиропа. Остаток затем разбавили ацетоном (4,0 мл) и 3% водн. Ναΐ 1СО₃(72 мл), а затем охладили на ледяной бане. Смесь закристаллизовывали продуктом из предыдущей загрузки и перемешивали в течение 2 ч на ледяной бане. Смесь отфильтровали и осадок на фильтре промывали ледяной водой (100 мл). Осадок сушили на воздухе в течение 4 ч и затем сушили в высоком вакууме при комнатной температуре в течение ночи, получая указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества с металлическим оттенком (21,8 г, 62,5%). [М+Н]⁺ рассчитано для С1₆Н₂₇О₄, 283,19; найдено 283,3.

Получение 2. Дифенил(винил)фосфиноксид

В 500 мл трехгорлой круглодонной колбе, оснащенной магнитной мешалкой, смешали дифенилфосфиноксид (19,2 г, 95 ммоль), бромоэтен (1М ТГФ) (86 мл, 86 ммоль), Εΐ₃Ν (39,7 мл, 285 ммоль) и Рб(РР₃Р)₄ (4,99 г, 4,32 ммоль) в толуоле (150 мл) с получением желтой суспензии. Смесь продували азотом и нагревали до 60°С в течение 24 ч в атмосфере Ν₂. Затем смесь охладили и фильтровали. Фильтрат концентрировали и очищали флеш-хроматографией (240 г колонка), элюируя 50-100% ЕЮЛс в гептане. Чистые фракции объединяли и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества (10 г, 51%). [М+Н]⁺ рассчитано С1₄Н1₄ОР, 229,08; найдено 229,1.

Получение 3. ди-п-Толил(винил)фосфиноксид

В пробирке объемом 40 мл, оснащенной магнитной мешалкой, смешали ди-п-толуолфосфиноксид (930 мг, 4,04 ммоль), бромоэтен (1М ТГФ) (3,67 мл, 3,67 ммоль), Εΐ₃Ν (1,689 мл, 12,12 ммоль) и Рб(РР₃Р)₄(424 мг, 0,367 ммоль) в толуоле (10 мл) с получением желтой суспензии. Смесь продули Ν₂, пробирку герметично закрыли и нагревали до 60°С в течение 18 ч. Затем смесь охлаждали и фильтровали. Фильтрат концентрировали и очищали флеш-хроматографией (колонка 25 г), элюируя 50-100% ЕЮЛс в гептане. Чистые фракции объединили и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде прозрачного сиропа (400 мг, 42,5%). [М+Н]⁺ рассчитано С1₆Н₁₈ОР, 257,11, найдено 257,1.

Получение 4. бис(4-(Трифторметил)фенил)(винил)фосфиноксид

В пробирке объемом 40 мл, оснащенной магнитной мешалкой, смешали бис(4-(трифторметил)фенил)фосфиноксид (930 мг, 2,75 ммоль), бромотен (1М ТГФ) (2,500 мл, 2,500 ммоль), Εΐ₃Ν (1,150 мл, 8,25 ммоль) и Рб(РР₃Р)₄ (289 мг, 0,250 ммоль) в толуоле (10 мл) с получением желтой суспензии. Смесь продули Ν₂, пробирку герметично закрыли и нагревали до 80°С в течение 18 ч. Затем смесь охладили и фильтровали. Фильтрат концентрировали и очищали флеш-хроматографией (колонка 25 г), элюируя 50-100% ЕЮЛс в гептане. Чистые фракции объединили и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого сиропа (320 мг, 35,1%). [М+Н]⁺ рассчитано С1₆Н1₂Р₆ОР, 365,05, найдено 365,1.

Пример 1. (2-(((3К,48,58,6К)-5-Метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)- 20 032431

В пробирке объемом 8 мл, оснащенной магнитной мешалкой, смешали (3К,48,58,6К)-5-метокси-4((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6-ол (250 мг, 0,885 ммоль), дифенил(винил)фосфиноксид (202 мг, 0,885 ммоль) и КОН (24,84 мг, 0,443 ммоль) в толуоле (3 мл) с получением коричневого раствора. Смесь оставили перемешиваться в течение 1,5 ч при комнатной температуре, а затем фильтровали и концентрировали. Небольшое количество Е1₂О (~1,5 мл) прибавили к концентрированной смеси, которую встряхивали до тех пор, пока она не стала коричневым раствором. Раствор закристаллизовали кристаллами продукта из предыдущей загрузки. Кристаллы начали образовываться примерно через минуту. Пробирку закрыли и оставили на ночь при комнатной температуре. Утром остаточный Е1₂О отобрали пипеткой в отдельную пробирку и кристаллы промыли Е1₂О (2х). В Е1₂О в отдельной пробирке наблюдали образование кристаллов, которые прибавили обратно в исходную пробирку, встряхивали с некоторым дополнительным количеством Е1₂О и светло-желтый раствор Е1₂О удалили пипеткой. Оставшиеся кристаллы сушили в токе Ν₂. Затем в пробирку прибавили воду (~8 мкл) и смесь встряхивали и фильтровали. Твердые вещества промывали несколько раз водой для удаления остатков КОН. Полученные кристаллы промыли небольшим количеством Е1₂О и оставили сушиться. Кристаллы перенесли в пробирку и сушили под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде рыжевато-коричневого твердого вещества (320 мг, 70,8%). ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭзОЭ) δ ррт 0,66-0,74 (т, 1Н), 1,13 (8, 3Н), 1,41-1,55 (т, 1Н), 1,59-1,70 (т, 5Н), 1,77 (8, 4н), 2,15-2,25 (т, 1Н), 2,252,36 (т, 1Н), 2,40 (б, 1=4,29 Гц, 1Н), 2,44-2,51 (т, 1Н), 2,69 (661, 1Н), 2,83 (б, 1=4,29 Гц, 1Н), 2,93 (616, 1=15,32, 8,38, 8,38, 6,82 Гц, 1Н), 3,32-3,42 (т, 3Н), 3,42-3,50 (т, 1Н), 3,83-4,03 (т, 3Н), 5,21-5,27 (т, 1Н), 7,49-7,60 (т, 6Н), 7,72-7,86 (т, 4Н). [М+Н]⁺ рассчитано С30Н40О₅Р, 511,26; найдено 511,4.

Пример 2. (2-(((3К,48,58,6К)-5-Метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)1-оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)ди-п-толилфосфиноксид

В круглодонной колбе объемом 50 мл, оснащенной магнитной мешалкой, смешали (3К,48,58,6К)-5метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6-ол (441 мг, 1,561 ммоль), ди-п-толил(винил)фосфиноксид (400 мг, 1,561 ммоль) и КОН (26,3 мг, 0,468 ммоль) в толуоле (3 мл) с получением бесцветной суспензии. Смесь оставили перемешиваться в течение 2 ч. Продукт очищали препаративной ВЭЖХ, элюируя 45-85% ΟΠ₃ΟΝ в 10 мМ водн. КН₄НСО₃. Чистые фракции объединяли и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде липкой белой пены (225 мг, 27%). ¹Н ЯМР (400 МГц, СВ3ОВ) δ ррт 0,67-0,73 (т, 1Н), 1,13 (8, 3Н), 1,18 (1, 1=7,07 Гц, 1Н), 1,43-1,53 (т, 1Н), 1,58-1,67 (т, 2Н), 1,69 (8, 3Н), 1,77 (8, 3Н), 1,79-1,85 (т, 1Н), 2,17-2,25 (т, 1Н), 2,29-2,36 (т, 1Н), 2,36-2,42 (т, 7Н), 2,42-2,47 (т, 1н), 2,58-2,68 (т, 1Н), 2,82-2,85 (т, 1Н), 2,85-2,91 (т, 1Н), 3,37 (8, 3Н), 3,46-3,49 (т, 1Н), 3,49-3,52 (т, 1Н), 3,79-3,89 (т, 1Н), 3,93-4,02 (т, 2Н), 5,22-5,28 (т, 1Н), 7,31-7,36 (т, 4Н), 7,58-7,65 (т, 2Н), 7,65-7,72 (т, 2Н). [М+Н]⁺ рассчитано С32Н₄₄О₅Р, 539,29; найдено 539,4.

Пример 3. (2-(((3К,48,58,6К)-5-Метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)1-оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)бис(4-(трифторметил)фенил)фосфиноксид

В круглодонной колбе объемом 20 мл, оснащенной магнитной мешалкой, смешали (3К,48,58,6К)-5метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6-ол (248 мг, 0,879 ммоль), бис(4-(трифторметил)фенил)(винил)фосфиноксид (320 мг, 0,879 ммоль) и КОН (14,79 мг, 0,264 ммоль) в толуоле (3 мл) с получением бесцветной суспензии. Смесь оставили перемешиваться в течение 2 ч. Продукт очищали препаративной ВЭЖХ, элюируя 45-85% С11₃ΟΝ в 10 мМ водн. NН₄НСО₃.

- 21 032431

Чистые фракции объединили и лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения в виде белого пушистого твердого вещества (127,6 мг, 22,46%). *Н ЯМР (400 МГц, СЭзОЭ) δ ррт 0,64 (б, 1=13,14 Гц, 1Н), 1,13 (8, 3Н), 1,36 (бб, 1=13,52, 4,17 Гц, 1Н), 1,44-1,53 (т, 2Н), 1,68 (8, 3Н), 1,75-1,81 (т, 4Н), 2,18 (б, 1=6, 82 Гц, 1Н), 2,29-2,36 (т, 2Н), 2,36-2,41 (т, 1Н), 2,75 (8, 1Н), 2,81 (б, 1=4,29 Гц, 1Н), 3,063,16 (т, 1Н), 3,39 (8, 3Н), 3,49 (бб, 1=11,37, 2,53 Гц, 1Н), 3,91-4,12 (т, 3Н), 5,19-5,25 (т, 1Н), 7,85 (бк, 1=5,56, 2,78 Гц, 4Н), 8,00 (бб, 1=11,37, 8,08 Гц, 2Н), 8,09 (бб, 1=11,49, 7,96 Гц, 2Н). [М+Н]⁺ рассчитано С₃₂Н₃₈Е₆О₅Р, 647,24; найдено 647,4.

Пример 4. Диметил-(2-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1 -оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)фосфонат

В пробирке объемом 20 мл, оснащенной магнитной мешалкой, смешали (3К,48,58,6К)-5-метокси-4((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6-ол (835 мг, 2,96 ммоль), диметилвинилфосфонат (523 мг, 3,84 ммоль) и КОН (1161 мг, 20,70 ммоль) в ДМФА с получением бесцветной суспензии. Смесь оставили перемешиваться в течение 20 мин при комнатной температуре. Продукт отделили от нерастворенного КОН и разделили между водой (70 мл) и этилацетатом (75 мл). Фазы разделили и водную фазу снова экстрагировали этилацетатом (75 мл). Органические фазы объединили, промывали водным раствором хлорида натрия (30 мл) и органическую фазу концентрировали с получением желтого сиропа. Продукт очищали препаративной ВЭЖХ, элюируя 35-75% №^Ν в 10 мМ водн. NН4НСО₃. Чистые фракции объединяли и экстрагировали Ек₂О (2x200 мл). Объединенные органические экстракты концентрировали с получением желтой жидкости, которую растворили в СП₃С\вода (1:1) и затем лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения в виде белого гигроскопического твердого вещества с металлическим оттенком (380 мг, 30,7%). ¹Н ЯМР (400 МГц, СП3ОП) δ ррт 0,92-0,98 (т, 1Н), 1,18 (8, 3Н), 1,61-1,68 (т, 4Н), 1,75 (8, 3Н), 1,99-2,05 (т, 2Н), 2,112,26 (т, 4Н), 2,26-2,35 (т, 1Н), 2,52 (б, 1=4,29 Гц, 1Н), 2,60 (к, 1=6,32 Гц, 1Н), 2,94 (б, 1=4,04 Гц, 1Н), 3,363,45 (т, 3Н), 3,48 (8, 1Н), 3,59 (бб, 1=11,24, 2,40 Гц, 1Н), 3,74 (бб, 1=10,99, 1,64 Гц, 6Н), 3,77-3,84 (т, 2Н), 4,11 (Ьг 8, 1Н), 5,21-5,26 (т, 1Н). [М+Н]⁺ рассчитано С₂0Н36О₇Р, 419,22; найдено 419,3.

Пример 5. Диэтил-(2-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1 -оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)фосфонат

В сухой круглодонной колбе объемом 100 мл, оснащенной магнитной мешалкой, смешали (3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6-ол (6,55 г, 23,20 ммоль) с ДМФА (50 мл) с получением бесцветного раствора. Прибавили диэтилвинилфосфонат (4,28 мл, 27,8 ммоль) и КОН (3,90 г, 69, 6 ммоль) и реакционную смесь оставили перемешиваться в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем продукт отделили от нерастворенного КОН, разбавили водой (200 мл) и экстрагировали ЕкОАс (2x300 мл). Объединенные экстракты концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ, элюируя 35-75% №^Ν в 10 мМ водн. NН4ОН. Чистые фракции объединили, концентрировали примерно до половины исходного объема и затем экстрагировали Ек₂О (2x500 мл). Органические вещества промывали водой и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде вязкого прозрачного масла (5 г, 48%).¹Н ЯМР (400 МГц, СП3ОЭ) δ ррт 0,90-1,03 (т, 1Н), 1,19 (8, 3Н), 1,32 (кб, 1=7,07, 1,26 Гц, 6Н), 1,62-1,69 (т, 4Н), 1,76 (8, 3Н), 1,97-2,08 (т, 2Н), 2,12-2,25 (т, 4Н), 2,31 (б, 1=7,07 Гц, 1Н), 2,53 (б, 1=4,29 Гц, 1Н), 2,60 (к, 1=6,32 Гц, 1Н), 2,95 (б, 1=4,29 Гц, 1Н), 3,44 (8, 3Н), 3,60 (бб, 1=11,12, 2,53 Гц, 1Н), 3,74-3,89 (т, 2Н), 4,07-4,16 (т, 5Н), 5,20-5,27 (т, 1Н). [М+Н]⁺ рассчитано С22Н₄₀О₇Р, 447,25; найдено 447,4.

В табл. 1 проиллюстрировано ингибирование МекАР2 для некоторых соединений, показанных в примерах, где значения р1С₅₀ и рЕС₅₀ представляют более высокую эффективность. Соединения, проиллюстрированные в табл. 1, испытывали в соответствии с ферментным анализом (р1С₅₀), описанным в начале описания на стр. 35, в котором фермент МекАР2 образует комплекс с ионами кобальта и марганца, и в соответствии с клеточным анализом (рЕС₅₀), описанным в начале описания на стр. 36.

- 22 032431

В табл. 2 перечислены потери массы тела (ВУБ) у мышей после обработки некоторыми из соединений, проиллюстрированных в примерах. Соединения, проиллюстрированные в табл. 2, тестировали в соответствии с протоколом ВУЬ, описанным в описании, начиная со стр. 36, используя дозу, режим дозирования (частота) и продолжительность лечения, указанные в таблице.

Таблица 2. Потеря веса тела (ВУЬ) у мышей

Пример, №	Доза	Частота	Продолжительность	ВИЪ
1	3 мг/кг	один раз в сутки	28 дней	18
5	1 мг/кг	один раз в сутки	28 дней	18

В табл. 3 перечислены уровни гликированного гемоглобина (СНЬ) и уровни глюкозы в плазме (РС) у мышей ККА^у после 4-недельного лечения соединением, показанным в примере 1. Исследование проводилось в соответствии с протоколом, описанным в спецификации, начинающейся со стр. 37, используя дозу, указанную в таблице. Значения указаны со средним ± стандартным отклонением у 8 животных в каждой группе.

Таблица 3. Гипогликемическая активность у мышей

Группа	Доза	СНЬ %	РС мг/дл
Контроль	-	6,8 + 0,4	436,6 + 64,4
Пример 1	10 мг/кг	5,6 + 0, 4 +	296,5 ± 77,4 +

+р < 0,025 относительно одностороннего теста Уильямса.

При использовании в данном описании и прилагаемой формуле изобретения формы единственного числа могут относиться к одному объекту или к множеству объектов, если контекст явно не указывает иного. Так, например, ссылка на композицию, содержащую соединение, может включать одно соединение или два или более соединений. Вышеприведенное описание предназначено для иллюстрации, а не для ограничения. Многие варианты реализации изобретения будут очевидны специалистам в данной области техники после прочтения вышеприведенного описания. Следовательно, объем изобретения должен определяться со ссылкой на прилагаемую формулу изобретения и включает полный объем эквивалентов, на которые такие претензии имеют право. Описание всех статей и ссылок, приведенных в описании, включая патенты, заявки на патент и публикации, включено в настоящее описание посредством ссылки во всей их полноте и для всех целей.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы 1 его стереоизомер или П¹ . . Г>² или стереоизомера, где

К¹ и К², каждый независимо, выбраны из фенила или -ОК⁴, причем каждый фенил независимо замещен от 0 до 1 К^а;

каждый К^а независимо выбран из С1-6алкила, замещенного от 0 до 3 К^Ь; каждый К⁴ независимо выбран из С1-6алкила, замещенного от 0 до 3 К^Ь; и каждый К^Ь независимо выбран из галогена.
2. Соединение, стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль по п.1, где К¹ и К² оба представляют собой фенил и каждый фенил независимо замещен от 0 до 1 К^а.
3. Соединение, стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль по любому из пп.1, 2, где К¹ и

- 23 032431

К² оба представляют собой незамещенный фенил.
4. Соединение, стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль по п.1, где К¹ и К² оба представляют собой -ОК⁴.
5. Соединение, стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль по п.4, где каждый К⁴ независимо представляет собой метил, замещенный от 0 до 3 К^Ь.
6. Соединение, стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль по п.4, где каждый К⁴ независимо представляет собой этил, замещенный от 0 до 3 К^Ь.
7. Соединение, стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль по любому из пп.1-6, где К^Ьотсутствует.
8. Соединение по п.1, которое выбрано из следующих соединений: (2-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-окса- спиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)дифенилфосфиноксид;

(2-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)ди-п-толилфосфиноксид;

(2-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)бис(4-(трифторметил)фенил)фосфиноксид;

диметил-(2-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)фосфонат;

диэтил-(2-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)фосфонат и фармацевтически приемлемой соли любого из указанных выше соединений.
9. Соединение по п.1, которое выбрано из следующих соединений: (2-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-окса- спиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)дифенилфосфиноксид;

(2-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)ди-п-толилфосфиноксид;

(2-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1-оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)бис(4-(трифторметил)фенил)фосфиноксид;

диметил-(2-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)фосфонат;

диэтил(2-(((3К,48,58,6К)-5-метокси-4-((2К,3К)-2-метил-3-(3-метилбут-2-ен-1-ил)оксиран-2-ил)-1оксаспиро[2.5]октан-6-ил)окси)этил)фосфонат и фармацевтически приемлемой соли любого из указанных выше соединений.
10. Соединение по п.1, которое представлено структурой
11. Соединение по п.1, которое представлено структурой
12. Соединение по п.1, которое представлено структурой
13. Соединение по п.1, которое представлено структурой

- 24 032431

СНз О °ν Г Т о*** - 1 СН;
14. Соединение по п.1, которое представлено структурой
15. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, расстройства или состояния, связанного с метионин аминопептидазой 2, содержащая соединение, стереоизомер или фармацевтически приемлемую соль, как определено в любом из пп.1-14; и фармацевтически приемлемый эксципиент.
16. Применение соединения, стереоизомера или фармацевтически приемлемой соли, как определено в любом из пп.1-14, для лечения заболевания, расстройства или состояния, связанного с метионин аминопептидазой 2.
17. Применение по п.16, где заболевание, расстройство или состояние, связанное с метионин аминопептидазой 2, выбрано из гипергликемии, диабета, дислипидемии, ожирения, резистентности к инсулину, метаболического синдрома X, нарушенной толерантности к глюкозе, синдрома поликистозных яичников, сердечно-сосудистых заболеваний, безалкогольного стеатоза печени, атеросклероза и синдрома Прадера-Вилли.