EA031089B1

EA031089B1 - Кристаллический (2s)-3-[(3s,4s)-3-[(1r)-1-гидроксиэтил]-4-(4-метокси-3-{[1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-1-ил]-3-оксопропан-1,2-диол

Info

Publication number: EA031089B1
Application number: EA201790143A
Authority: EA
Inventors: Пин Хуан; Сет Дитрих Райб
Original assignee: Эли Лилли Энд Компани
Priority date: 2014-09-04
Filing date: 2015-08-28
Publication date: 2018-11-30
Also published as: MX2017002688A; TN2017000045A1; TW201619149A; AU2015312229B2; PH12017500400A1; CA2956517A1; EP3189044A1; CR20170051A; NZ728359A; PE20170442A1; US20170233373A1; EA201790143A1; CL2017000467A1; DOP2017000037A; BR112017003010A2; ECSP17013015A; WO2016036596A1; CN107001327B; CO2017001097A2; AU2015312229A1

Abstract

Описан кристаллический (2S)-3-[(3S,4S)-3-[(1R)-1-гидроксиэтил]-4-(4-метокси-3-{[1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-1-ил]-3-оксопропан-1,2-диол и его фармацевтические композиции. В изобретении также описаны способы применения данного соединения для лечения гиперактивности мочевого пузыря.

Description

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ (45) Дата публикации и выдачи патента

2018.11.30 (21) Номер заявки

201790143 (22) Дата подачи заявки

2015.08.28 (51) Int. Cl. C07D 401/14 (2006.01)

А61К31/4439 (2006.01)

А61Р13/10 (2006.01) (54) КРИСТАЛЛИЧЕСКИЙ (2S)-3-[(3S,4S)-3-|(l к)-1ГИДР()К’( И ) ГИ.1|-4-(4МЕТОКСИ-3-{[1-(5-МЕТИЛПИРИДИН-2-ИЛ)АЗЕТИДИН-3-ИЛ]ОКСИ}ФЕНИЛ)-3МЕТИЛПИРРОЛИДИН-1-ИЛ]-3-ОКСОПРОПАН-1,2-ДИОЛ (31) PCT/CN2014/085925 (32) 2014.09.04 (33) CN (43) 2017.06.30 (86) PCT/US2015/047415 (87) WO 2016/036596 2016.03.10 (71) (73) Заявитель и патентовладелец:

ЭЛИ ЛИЛЛИ ЭНД КОМПАНИ (US) (72) Изобретатель:

Хуан Пин, Райб Сет Дитрих (US) (74) Представитель:

Лыу Т.Н., Угрюмой В.М., Гизатуллина Е.М., Глухарёва А.О., Дементьев В.Н., Карпенко О.Ю., Клюкин В.А., Строкова О.В., Христофоров А.А.

(RU) (56) WO-A1-2014159012

ЕР-А1-2564849

WO-A1-0147905

NICHOLS P.J.; DEMATTEI J.A.; BARNETT B.R.; LEFUR N.A.; CHUANG T.; PISCOPIO A.D.; KOCK K.: Preparation of pyrrolidine-based PDE4 inhibitors via enantioselective conjugate addition of alpha-substituted malonates to aromatic nitroalkenes, ORG. LETT., vol. 8, no. 7, 3 April 2006 (2006-04-03), pages 1495-1498, XP002747953, cited in the application, the whole document

031089 В1 (57) Описан кристаллический (2S)-3-[(3 8,48)-3-[(1Р)-1-гидроксиэтил]-4-(4-метокси-3-{ [1-(5метилпиридин-2-ил)азетидин-3 -ил]окси}фенил)-3 -метилпирролидин-1 -ил] -3-оксопропан-1,2диол и его фармацевтические композиции. В изобретении также описаны способы применения данного соединения для лечения гиперактивности мочевого пузыря.

031089 Bl

В изобретении предложен кристаллический (28)-3-[(38,48)-3-[(1К)-1-гидроксиэтил]-4-(4-метокси-3{[1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-1-ил]-3-оксопропан-1,2-диол и его фармацевтические композиции, способы их применения и способы их получения.

Гиперактивность мочевого пузыря (ГМП) представляет собой выявляемое при помощи симптомов состояние, которое относится к симптомам учащенного мочеиспускания и неотложных позывов к мочеиспусканию, сопровождающихся или не сопровождающихся неотложным мочеиспусканием. ГМП представляет собой состояние, которое негативно сказывается на качестве жизни и социальной деятельности приблизительно 17% взрослого населения. Несмотря на прогресс, достигнутый в лечении ГМП, многие пациенты страдают от ГМП в течение многих лет без ее улучшения. Первоочередным лечением для ГМП является использование антимускариновых лекарственных средств, которые обеспечивают хороший начальный ответ, однако при длительном применении указанных средств пациенты перестают соблюдать режим лечения из-за нежелательных явлений и снижающейся эффективности. Остается значительная потребность в безопасных и эффективных способах лечения ГМП остается неудовлетворенной.

Циклические нуклеотиды (цАМФ и цГМФ) представляют собой важные вторичные мессенджеры, которые модулируют сократимость гладких мыщц. Фосфодиэстеразы циклических нуклеотидов (ФДЭ) гидролизуют циклические нуклеотиды и играют важную роль в регуляции уровня и продолжительности действия циклических нуклеотидов внутри клеток. Соединения, которые ингибируют ФДЭ, повышают клеточные уровни циклических нуклеотидов и тем самым расслабляют многие типы гладких мышц. Предыдущие исследования показали, что расслабление гладких мышц мочевого пузыря главным образом опосредуется агентами, которые повышают цАМФ. Фосфодиэстераза-4 (ФДЭ-4) является специфичной к цАМФ и обильно экспрессируется в мочевом пузыре. Было показано, что ФДЭ-4, по существу, вовлечена в контроль тонуса гладкой мускулатуры мочевого пузыря in vitro и на животных моделях гиперактивности мочевого пузыря (Kaiho Y. и др. BJU International 2008, 101(5), 615-620).

Указанные соединения согласно настоящему изобретению представляют собой ингибиторы фосфодиэстеразы-4 (ФДЭ-4) и демонстрируют избирательную активность в отношении ФДЭ-4. Таким образом, предполагается, что соединения согласно настоящему изобретению являются подходящими для лечения состояний, в которых ФДЭ-4 играет определенную роль, таких как гиперактивность мочевого пузыря, включая облегчение связанных симптомов, таких как частота и неотложность. Кроме того, предполагается, что настоящее изобретение, кристаллическая форма (28)-3-[(38,48)-3-[(1К)-1-гидроксиэтил]-4-(4метокси-3 -{[1 -(5-метилпиридин-2 -ил)азетидин-3 -ил] окси} фенил) -3 -метилпирролидин-1 -ил] -3оксопропан-1,2-диола, обеспечивает преимущества в получении, использовании или технологичности.

В международной публикации заявки WO 01/47905 раскрыты некоторые производные соединения пирролидина в качестве ингибиторов фосфодиэстераз, в частности ФДЭ-4, и указанные соединения заявлены как подходящие для лечения ряда заболеваний, включая астму.

В настоящем изобретении предложены новые соединения, которые представляют собой ингибиторы ФДЭ-4 и как таковые являются подходящими для лечения гиперактивности мочевого пузыря и других расстройств. Указанные соединения обеспечивают удовлетворенность потребности в безопасных и эффективных средствах для лечения состояний, связанных с ФДЭ-4, таких как гиперактивность мочевого пузыря.

В изобретении предложено соединение согласно формуле I

где R представляет собой водород или метил или его фармацевтически приемлемую соль.

Конкретное соединение согласно формуле I представляет собой соединение, в котором R представляет собой метил или его фармацевтически приемлемую соль.

Конкретное соединение согласно формуле I представляет собой (2S)-3-[(3S,4S)-3-[(1R)-1гидроксиэтил]-4-(4-метокси-3-{[1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил]окси}фенил)-3метилпирролидин-1-ил]-3-оксопропан-1,2-диол или его фармацевтически приемлемую соль.

Кроме того, в изобретении предложен кристаллический (2S)-3-[(3S,4S)-3-[(1R)-1-гидроксиэтил]-4(4-метокси-3 -{[1 -(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3 - ил] окси}фенил)-3 -метилпирролидин-1 -ил] -3 -оксопропан-1,2-диол.

Кроме того, в изобретении предложен кристаллический (2S)-3-[(3S,4S)-3-[(1R)-1-гидроксиэтил]-4(4-метокси-3 -{[1 -(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3 - ил] окси}фенил)-3 -метилпирролидин-1 -ил] -3 -оксопропан-1,2-диол, характеризующийся дифрактограммой рентгеновской порошковой дифракции, полученной с применением CuKa излучения, имеющей дифракционный пик при угле дифракции в 2-тета составляющий 18,5° в комбинации с одним или более пиков, выбранных из группы, состоящей из 16,2,

- 1 031089

20,2, 14,4° и с допустимым отклонением для углов дифракции 0,2°.

Кроме того, в настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение согласно формуле I или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель. В конкретном варианте реализации фармацевтическая композиция дополнительно содержит один или несколько терапевтических агентов, таких как тадалафил. Таким образом, в настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая первый компонент, который представляет собой соединение согласно формуле I или его фармацевтически приемлемую соль, и второй компонент, который представляет собой тадалафил и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.

Кроме того, в настоящем изобретении предложено соединение согласно формуле I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии.

Кроме того, в настоящем изобретении предложено соединение согласно формуле I или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения гиперактивности мочевого пузыря.

Кроме того, в настоящем изобретении предложено применение соединения согласно формуле I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения гиперактивности мочевого пузыря.

Конкретное соединение согласно формуле I представляет собой соединение согласно формуле Ia

где R представляет собой водород или метил, или его фармацевтически приемлемую соль.

Конкретное соединение согласно формуле Ia представляет собой соединение, в котором R представляет собой метил или его фармацевтически приемлемую соль.

Конкретное соединение согласно формуле Ia представляет собой (2S)-3-[(3S,4S)-3-[(1R)-1гидроксиэтил] -4-(4-метокси-3 -{[1-(5 -метилпиридин-2-ил)азетидин-3 -ил] окси}фенил)-3 метилпирролидин-1-ил]-3-оксопропан-1,2-диол или его фармацевтически приемлемую соль.

Кроме того, в настоящем изобретении предложен способ лечения гиперактивности мочевого пузыря, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения согласно формуле Ia или его фармацевтически приемлемой соли. В конкретном варианте реализации в настоящем изобретении предложен способ лечения гиперактивности мочевого пузыря, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества первого компонента, который представляет собой соединение согласно формуле Ia или его фармацевтически приемлемую соль, в сочетании с эффективным количество второго компонента, который представляет собой тадалафил.

Кроме того, в настоящем изобретении предложено соединение по настоящему изобретению для одновременного, раздельного или последовательного применения в комбинации с тадалафилом для лечения гиперактивности мочевого пузыря.

Кроме того, в настоящем изобретении предложен способ лечения гиперактивности мочевого пузыря, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества (2S)-3-[(3S,4S)-3[(1R)-1 -гидроксиэтил]-4-(4-метокси-3-{[ 1 -(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3 -ил]окси} фенил)-3 -метилпирролидин-1-ил]-3-оксопропан-1,2-диола или его фармацевтически приемлемой соли в сочетании с эффективным количеством тадалафила.

Следует понимать, что соединения согласно настоящему изобретению могут существовать в виде стереоизомеров. Варианты реализации настоящего изобретения включают все энантиомеры, диастереомеры и их смеси. Предпочтительные варианты реализации изобретения относятся к одному диастереомеру, более предпочтительные варианты реализации изобретения относятся к одному энантиомеру.

Термин фармацевтически приемлемая соль включает соль присоединения кислоты, которая находится в комплексе с основной частью соединения формулы I. Такие соли включают фармацевтически приемлемые соли, например соли, перечисленные в источнике Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, P.H. Stahl and C.G. Wermuth (Eds.), Wiley-VCH, New York, 2002, известном специалистам в данной области техники.

Согласно изобретению помимо фармацевтически приемлемых солей предполагается использование других солей. Они могут служить в качестве промежуточных соединений в процессе очистки соединений или в способах получения других фармацевтически приемлемых солей или могут использоваться для идентификации, характеристики или очистки соединений согласно изобретению.

При использовании в настоящем описании термин пациент относится к теплокровному животному, такому как млекопитающее, и включает человека. Человек является предпочтительным пациентом.

- 2 031089

Также следует понимать, что специалист в данной области техники может лечить гиперактивность мочевого пузыря путем введения пациенту, имеющему на данный момент симптомы указанного заболевания, эффективного количества соединения формулы I. Таким образом, предполагается, что термины лечение и лечить относятся ко всем процессам, которые могут приводить к замедлению, прерыванию, сдерживанию, контролированию или остановке прогрессирования имеющегося расстройства и/или его симптомов, но необязательно указывают на полное устранение всех симптомов.

Также следует понимать, что специалист в данной области техники может лечить гиперактивность мочевого пузыря путем введения эффективного количества соединения формулы I пациенту, имеющему риск развития симптомов. Таким образом, предполагается, что термин лечение включает профилактическое лечение указанных симптомов.

При использовании в настоящем описании термин эффективное количество соединения формулы I относится к количеству, которое представляет собой дозу, эффективную для лечения расстройства, такого как гиперактивность мочевого пузыря, описанная в настоящем документе. Лечащий врач-диагност, как специалист в данной области техники, легко может определить эффективное количество путем использования общепринятых методов и анализа результатов, полученных при аналогичных условиях. При определении эффективного количества или дозы соединения формулы I учитывается ряд факторов, включая, но не ограничиваясь указанными, соединение формулы I, подлежащее введению; совместное введение других агентов при их использовании; вид млекопитающего; его размер, возраст и общее состояние здоровья; степень поражения или тяжесть расстройства, такого как гиперактивность мочевого пузыря; ответ конкретного пациента на лечение; способ введения; характеристики биодоступности вводимого препарата; выбранный режим дозирования; сопутствующее применение другого лекарственного средства и другие соответствующие условия.

Соединение формулы I можно применять в комбинации с другими лекарственными средствами, которые используются для лечения/предотвращения/подавления или облегчения заболеваний или состояний, при которых соединения формулы I оказывают полезное действие, включая гиперактивность мочевого пузыря. Указанное другое лекарственное средство (средства) можно вводить с помощью такого способа и в таком количестве, которое обычно используется для этих целей, включая одновременное или последовательное введение с соединением формулы I. Когда соединение формулы I используют одновременно с одним или более другими лекарственными средствами, фармацевтическая стандартная лекарственная форма, содержащая помимо соединения формулы I указанные другие лекарственные средства, является предпочтительной. Соответственно, фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению включают композиции, содержащие один или более других активных ингредиентов в дополнение к соединению формулы I. Другие активные ингредиенты, эффективные для лечения гиперактивности мочевого пузыря, которые можно комбинировать с соединением формулы I путем раздельного введения или введения в одном фармацевтическом препарате, включают ингибитор ФДЭ5, такой как тадалафил.

Соединения согласно настоящему изобретению можно вводить отдельно или в виде фармацевтической композиции в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителями или наполнителями, относительное содержание и природа которых определяется в соответствии с показателями растворимости и химическими свойствами, включая стабильность, выбранное соединение, выбранный способ введения и стандартную методику получения фармацевтического препарата. Несмотря на то что соединения согласно настоящему изобретению сами по себе обладают эффективностью, их также можно получать и вводить в виде их фармацевтически приемлемых солей для возможности кристаллизации, повышения растворимости и т.п.

Специалист в области получения лекарственных форм легко может выбрать подходящую форму и способ введения в зависимости от конкретных характеристик выбранного соединения, подлежащего лечению расстройства или состояния, стадии указанного расстройства или состояния и других соответствующих условий (см., например, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, D.B. Troy, Editor, 21^stEdition., Lippincott, Williams & Wilkins, 2006).

Анализ ингибирования ФДЭ-4 in vitro.

Анализы активности фосфодиэстераз проводили, по существу, в соответствии со способом, описанным в источнике Loughney K. et al., J. Biol. Chem., 271, pp. 796-806 (1996). Осуществляли экспрессию и выделение человеческих рекомбинантных белков ФДЭ4А, ФДЭ4В, ФДЭ4С, ФДЭ4D и ФДЭ5 из дрожжей Saccharomyces cerevisiae, у которых отсутствуют эндогенные фосфодиэстеразы. Фосфодиэстеразы разводили на льду с помощью буфера для разведения ферментов (25 мМ Tris, pH 7,5, 0,1 мМ ДТТ, 5,0 мМ MgCl₂, 100 мМ NaCl, 5 мкМ ZnSO₄, 100 мкг/мл БСА) с достижением концентрации, обеспечивающей гидролиз примерно 20-40% циклических нуклеозидмонофосфатов (цНМФ) в отсутствие ингибитора.

Исходный раствор исследуемого соединения разводили с помощью рабочей установки Beckman BioMek™ 1000 с достижением диапазона концентрации 4,5 log единиц с шагом повышения концентрации 0,5 log. Концентрация ДМСО в конечной аналитической системе составляла 2,5% для всех ферментов ФДЭ. Конечная анализируемая концентрация исследуемого соединения варьировала от 0,03 нМ до 1 мкМ.

- 3 031089

Анализ проводили в 96-луночном титрационном микропланшете на роботизированной установке Beckman BioMek™ 1000. Каждому ряду лунок планшета соответствовала кривая зависимости эффекта от дозы с 10 точками, включающими плацебо-контроль (без фермента), контроль без ингибитора и разведения ингибитора в концентрации, находящейся в пределах 4,5 log единиц, с шагом повышения концентрации 0,5 log. Исходные аналитические растворы (вода, разбавитель ингибитора [2,5% или 10% ДМСО], 5-кратный аналитический буфер для ФДЭ, субстрат, растворы ингибитора, растворы фермента, нуклеотидаза змеиного яда и суспензия древесного угля) наносили в емкости системы Biomek™. Реакцию инициировали с помощью фермента и реакционную смесь инкубировали в течение 15 мин при температуре 30°C. Затем добавляли нуклеотидазу яда змеи Crotalus atrox в избытке (5 мкл/лунка) и смесь инкубировали в течение дополнительных 3 мин. Реакцию останавливали путем добавления 200 мкл суспензии активированного древесного угля, после чего планшет центрифугировали в течение 5 мин при 750xg. Запускали программу переноса, которая обеспечивала забор и перенос в новый планшет 200 мкл супернатанта. Количество радиоактивной энергии, высвобождаемой в виде фосфата, определяли с помощью счетчика Wallac MicroBeta Plate™.

Приведенные данные при каждой концентрации ингибитора анализируют с применением четырех-, трех- или двухпараметрической логистической модели доза-эффект, чтобы получить значение IC₅₀. Для тех наборов данных, которые демонстрируют ингибирование >95% при максимальной концентрации ингибитора, применяют четырехпараметрическую логистическую модель доза-эффект.

В приведенном выше анализе соединения примеров 1 и 2 демонстрируют IC₅₀ менее чем 10 нм в присутствии ФДЭ-4В. Более конкретно соединение примера 2 в приведенном выше анализе обладает IC₅₀ в 0,58 нМ, измеряемой в присутствии ФДЭ-4В. Указанные данные показывают, что соединения примера 1 и 2 представляют собой ингибиторы ФДЭ-4В.

Модель гиперактивности мочевого пузыря in vivo.

Эффект ингибиторов ФДЭ4 на ГМП in vivo исследовали на мышиной модели хронической вызванной циклофосфамидом (ЦФА) гиперактивности мочевого пузыря, адаптированной на основе материалов источника Boudes et al., Neurourol. Urodynam. 2011. В типичном исследовании использовали самок мышей линии С57/В16 с массой тела примерно 20 г (Harlan Laboratories, Inc., Индианаполис, Индиана). Мышей распределяли на группы случайным образом на основе массы тела за день до начала исследования. Мышей помещали отдельно друг от друга и содержали при температуре 22°C с поддержанием 12часового свето-темнового цикла и обеспечением свободного доступа к пище (корм TD 2014, содержаний 0,72% Са и 0,61%Р, 990 МЕ/г D3, Teklad™, Мэдисон, Висконсин) и воде. На 1, 3, 5 и 7 сутки животным вводили внутрибрюшинно циклофосфамид (растворенный в физиологическом растворе) в концентрации 100 мг/кг для хронической индукции ГМП. Животным контрольной группы, получающей носитель, ежедневно вводили пероральным путем носитель (1% ГЭЦ /0,25% Tween 80/0,05% антивспениватель). Всем остальным группам ежедневно вводили пероральным путем тадалафил в концентрации 10 мг/кг в комбинации с исследуемым соединением в концентрации 0,1, 1,0 или 10,0 мг/кг в объеме 200 мкл/мышь. На 8 сутки мышей помещали в камеры для сбора мочи с фильтровальной бумагой, расположенной на дне камеры. До сбора мочи каждой мыши принудительно давали 1 мл воды. Мочу собирали с 6 до 10 ч вечера (т.е. в течение 4 ч). Во время 4-часового периода в качестве источника воды использовали гелевые капсулы (DietGel™ 76A). Фильтровальную бумагу меняли каждый час. Частоту мочеиспускания и объем мочи на каждое мочеиспускание рассчитывали с использованием программы Image J (NIH). Статистический анализ данных проводили с помощью программы JMP8® (Cary N.C.).

Через 8 суток после обработки ЦФА у животных развивалась ГМП, о чем свидетельствует повышенная частота мочеиспускания (плацебо: 6,66 ± 0,91 мочеиспусканий за 4-часовой период по сравнению с введением носителя: 16,5 ± 1,65 мочеиспусканий за 4-часовой период) и сниженный объем мочи на каждое мочеиспускание (плацебо: 173,36 ± 38,39 мл по сравнению с введением носителя: 31,93 ± 4,16 мл). Все лечебные группы получали фиксированную дозу тадалафила 10 мг/кг. Указанная доза тадалафила не оказывает существенного влияния на частоту мочеиспусканий или объем мочи на каждое мочеиспускание. Согласно протоколу, по существу, описанному выше, соединение примера 2, вводимое совместно с тадалафилом, значимо уменьшает частоту мочеиспускания в зависимости от дозы (табл. 1). Кроме того, в зависимости от дозы также наблюдают увеличения значений объема мочи на пробу (табл. 2). Это свидетельствует о том, что соединение примера 2 в комбинации с тадалафилом является активным в отношении животной модели гиперактивности мочевого пузыря.

- 4 031089

Таблица 1

Лечение	Средняя частота мочеиспускания (колво/4 часа)	Стандартная ошибка	Значение р по отношению к носителю*
Носитель	16,5	1,6583
0,1 мг/кг Примера 2 + 10 мг/кг тадалафила	10	0,9587	0,0057
1,0 мг/кг Примера 2 + 10 мг/кг тадалафила	8,61	0,7633	0,0003
10,0 мг/кг Примера 2 + 10 мг/кг тадалафила	8,38	1,2049	0,0000

*р<0,05 является статистически значимым; р<0,001 является статистически высоко значимым; р-значения вычисляли на основе модели ANOVA для преобразования квадратного корня числа разовых порций мочи в 4 ч; р-значения корректировали для множественных сравнений с носителем, применяя коррекцию Даннетта.

Таблица 2

Лечение	Средний объем мочи на пробу (мл)	Стандартная ошибка	Значение р по отношению к носителю*
Носитель	31,93	4,1635
0,1 мг/кг Примера 2 + 10 мг/кг тадалаф ила	47,30	6,3428	0,29619
1,0 мг/кг Примера 2 + 10 мг/кг тадалаф ила	77,15	5,6815	0,00003
10,0 мг/кг Примера 2 + 10 мг/кг тадалаф ила	81,93	10,0205	0,00007

*р<0,05 является статистически значимым; р<0,001 является статистически высоко значимым; р-значения вычисляли на основе модели ANOVA для логарифма объемов разовых порции мочи, р-значения корректировали для множественных сравнений с носителем, применяя коррекцию Даннетта.

Соединения формулы I могут быть получены с помощью методов, известных в области химии, или с помощью нового способа, описанного в настоящей заявке. Процесс получения соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли в соответствии со способом и новые промежуточные соединения для получения соединения формулы I обеспечивают дополнительные признаки изобретения и проиллюстрированы с помощью следующих далее схем, где значение заместителя R является таким, как определено выше, если иное специально не указано.

В целом, соединение согласно формуле Ia, в которой R представляет собой водород или метил, может быть получено из соединения формулы II, где 1,2-диольная группа содержит подходящую защитную группу, такую как ацетонид (схема 1). Более конкретно, соединение формулы II подвергают реакции с кислотой, например, водным раствором соляной или уксусной кислоты, в подходящем растворителе с получением соединения формулы Ia. Подходящие растворители включают воду, метанол и ацетонитрил. Соединение согласно формуле II, в которой R представляет собой водород или метил, может быть получено путем проведения реакции между соединением формулы III и соединением формулы IV, где L представляет собой подходящую уходящую группу, такую как фтор или хлор, в присутствии подходящего основания. Подходящие основания включают карбонат калия и карбонат цезия. Реакцию удобно проводить в растворителе, таком как №метил-2-пирролидон или ацетонитрил.

Соединение формулы III может быть получено из соединения формулы V, где азетидинамин содержит подходящую защитную группу, такую как дифенилметил. Более конкретно, соединение формулы V подвергают реакции с газообразным водородом в присутствии подходящего катализатора, такого как палладий на углеродном носителе, с получением соединения формулы III. Реакцию удобно проводить в растворителе, таком как метанол или этанол.

Соединение формулы V может быть получено путем проведения реакции между соединением формулы VI и 1-(дифенилметил)азетидин-3-илметансульфонатом в присутствии подходящего основания. Подходящие основания включают карбонат калия и карбонат цезия. Реакцию удобно осуществлять в подходящем растворителе, таком как ацетонитрил.

- 5 031089

Схема 1

Альтернативно, соединение формулы II может быть получено непосредственно из соединения формулы VI (схема 2). Более конкретно, соединение формулы VI подвергают реакции с соединением формулы VII, где R представляет собой водород или метил и OMs представляет собой уходящую группу метансульфонил, в присутствии подходящего основания, такого как карбонат цезия. Указанную реакцию удобно проводить в подходящем растворителе, таком как ацетонитрил.

Соединение формулы VII может быть получено путем проведения реакции между соединением формулы VIII и метансульфонилхлоридом в присутствии основания, такого как триэтиламин. Реакцию удобно проводить в подходящем растворителе, таком как метиленхлорид. Соединение формулы VIII, где R представляет собой водород или метил, может быть получено путем проведения реакции между соединением формулы IV, где L представляет собой подходящую уходящую группу, такую как фтор или хлор, и 3-гидроксиазетидином в присутствии подходящего основания. Подходящие основания включают карбонат калия. Реакцию удобно проводить в подходящем растворителе.

- 6 031089

Соединение формулы VI может быть получено с помощью методов, известных специалисту в данной области техники, включая методы, описанные в международной публикации заявки WO 01/47905, а также показанные на схеме 3 со ссылкой на источник Nichols Р.1.; DeMattei J.A.; Barnett b.K.; LeFur N.A.; Chuang Т.; Piscopio A.D.; Kock K. Org. Lett. 2006, 8, 1495-1498.

Схема 3

Альтернативно, соединение формулы II может быть получено из соединения формулы XIII (схема 4). Более конкретно, соединение формулы XIII подвергают реакции с (8)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4карбоновой кислотой в ацилирующих условиях с получением соединения формулы II. Соединение формулы XIII может быть получено путем удаления защитной группы от соединения формулы XIV, где Pg представляет собой подходящую защитную группу амина. Подходящие защитные группы амина включают трет-бутилоксикарбонил (t-BOC). Соединение формулы XIV, где Pg представляет собой подходящую защитную группу амина, может быть получено из соединения формулы XV. Более конкретно, соединение формулы XV подвергают реакции с соединением формулы VII, в которой R представляет собой водород или метил и OMs обозначает уходящую группу метансульфонил, в присутствии подходящего основания, такого как н-гидрат ортофосфата калия. Реакцию удобно проводить в подходящем растворителе, таком как диметилформамид. Соединение согласно формуле XV можно получить из соединения согласно формуле X, как это описано в получениях и примерах.

- 7 031089

Схема 4

В контексте настоящего описания термин ДМСО относится к диметилсульфоксиду; Трис относится к трисгидроксиметиламинометану; ДТТ относится к дитиотреитолу; ГЭЦ относится к гидроксиэтилцеллюлозе и IC₅₀ относится к концентрации агента, который обеспечивает 50% от максимально возможного ингибировия реакции для данного агента.

В области органической химии признано, что для химической структуры можно вывести одно или несколько химических названий. Альтернативные названия могут быть представлены в примерах и по лучениях.

Получение 1. Синтез (1Я)-1-[(38,48)-1-{[(48)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]карбонил}-4-(3-{[1(дифенилметил)азетидин-3-ил]окси}-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этанола

К суспензии (1Я)-1-[(38,48)-1-{[(48)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил] карбонил}-4-(4-метокси-3гидроксифенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этанола (2,0 г) и карбоната калия (1,46 г) в ацетонитриле (30 мл) добавляют 1-(дифенилметил)азетидин-3-илметансульфонат (2,51 г). Указанную смесь нагревают при 80°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают и выливают в этилацетат (100 мл), промывают водой (40 мл) и солевым раствором (40 мл), сушат над сульфатом натрия, фильтруют и досуха выпаривают указанный фильтрат. Полученный остаток очищают (силикагель, 60% этилацетат/гексан к этилацетату) с получением 0,6 г указанного в заголовке соединения. МС (ЕС+) = 601 (М+1).

Получение 2. Синтез (1Я)-1-[(38,48)-1-{[(48)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]карбонил}-4-(4метокси-3-{[1-(азетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этанола

В сосуд Парра (Parr™), содержащий раствор (1Я)-1-[(38,48)-1-{[(48)-2,2-диметил-1,3 -диоксолан-4ил]карбонил}-4-(3-{[1-(дифенилметил)азетидин-3-ил]окси}-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-3ил]этанола (0,6 г) в метаноле (20 мл), вносят гидроксид палладия на углероде (60 мг, 20 мас.% палладия на сухую основу С). Указанную суспензию гидрируют при избыточном давлении газообразного водорода в 30 psi до тех пор, пока не прекратится поглощение газообразного водорода. Указанную реакционную смесь фильтруют через Celite™ и указанный фильтрат выпаривают с получением указанного в заголовке соединения (0,4 г). МС (ЕС+) = 435 (М+1).

- 8 031089

Получение 3. Синтез трет-бутил-(38,48)-4-(3-(бензилокси)-4-метоксифенил)-3-((К)-1-гидрокси-

Триэтиламин (0,6 г, 5,93 ммоль) добавляют к (Я)-1-((38,48)-4-(3-(бензилокси)-4-метоксифенил)-3метилпирролидин-3-ил)этан-1-олу (20,0 г, 58,57 ммоль) в этилацетате (200 мл). Указанную реакционную смесь охлаждают до 0-5°C. К реакционной смеси добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (13,45 г, 61,63 ммоль) в метаноле (60 мл), поддерживая температуру реакции в диапазоне от 0 до 5°C. Указанную реакционную смесь нагревают до 15-20°C и перемешивают в течение 2 ч. Добавляют воду (200 мл) и проводят разделение слоев. Обратную экстракцию водного слоя осуществляют этилацетатом (100 мл). Органические слои объединяют и промывают водой (100 мл). Указанный органический слой концентрируют до 2 объемов. Добавляют н-гептан (200 мл) и перемешивают при 15-20°C в течение 16 ч. Указанную суспензию фильтруют и осадок промывают н-гептаном. Осадок сушат под вакуумом при температуре ниже 50°C с получением указанного в заголовке соединения (22,0 г, 49,92 ммоль): ¹Н ЯМР (CDCl3): δ 0,58 (d, J=8,8 Гц, 3H), 1,02 (m, 3H), 1,06 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 3,16 (m, 2H), 3,58 (m, 4H), 3,91 (s, 3H), 5,24 (m, 2H), 6,78 (m, 3H), 7,36 (m, 5H) и ¹³С ЯМР (CDCl3): δ (ppm) 17,5, 17,6, 19,7, 19,8, 28,8, 45,7, 46,3, 48,4,

48,7, 49,1, 52,4, 52,9, 56,2, 69,1, 71,1, 71,2, 79,5, 111,6, 116,1, 116,3, 121,4, 127,4, 128,0, 128,8, 129,8, 137,8, 147,4, 148,8, 155,2, 155,3. Вращательную изомеризацию наблюдают в ¹Н и ¹³С ЯМР-спектрах, которая вызывает удвоение соответствующих пиков.

Получение 4. Синтез трет-бутил-(38,48)-3-[(1К)-1-гидроксиэтил]-4-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3метилпирролидин-1 -карбоксилата

Гидроксид палладия (0,26 г, 1,85 ммоль) вносят в реакционный раствор, содержащий трет-бутил(3S,4S)-4-(3 -(бензилокси)-4-метоксифенил)-3 -((R)-1 -гидроксиэтил)-3 -метилпирролидин-1 -карбоксилат (5,0 г, 11,32) в метаноле (50 мл), и из реакционной смеси откачивают воздух для получения атмосферы водорода с показателем давления 138-207 кПа при температуре 15-20°C. Через два часа указанную реакционную смесь фильтруют через диатомовую землю. Указанный отфильтрованный осадок промывают метанолом (10 мл) и органический слой концентрируют до 1-2 объемов. Добавляют метил-третбутиловый эфир (МТБЭ) (25 мл) и концентрируют органический слой до 1-2 объемов. Вносят дополнительное количество МТБЭ (25 мл) и концентрируют указанный органический слой до 1-2 объемов. К указанному раствору добавляют н-гептан (50 мл) и перемешивают в течение 16 ч при температуре 5-10°C. Указанную суспензию фильтруют и осадок промывают н-гептанами. Указанный осадок сушат под вакуумом при температуре ниже 50°C с получением указанного в заголовке соединения (3,9 г, 11,10 ммоль): ¹Н ЯМР (CDCl3): δ 0,76 (s, 3H), 1,11 (d, J=6,4 Гц, 3H), 1,48 (s, 9H), 3,24 (m, 2H), 3,60 (m, 5H), 3,88 (s, 3H), 5,62 (brs, 1H), 6,78 (m, 2H), 6,86 (s, 1H) и ¹³С ЯМР (CDCl3): δ (ppm) 17,6, 17,7, 19,6, 19,7,

28.8, 45,9, 46,1, 46,5, 48,5, 49,1, 49,2, 49,6, 52,7, 53,2, 56,2, 69,3, 79,5, 110,6, 110,7, 115,5, 115,7, 120,6,

120.8, 130,7, 145,5, 145,8, 155,3, 155,4. Вращательную изомеризацию наблюдают в ¹Н и ¹³С ЯМРспектрах, которая вызывает удвоение соответствующих пиков.

Получение 5. Синтез трет-бутил-(3S,4S)-3-((R)-1-гидроксиэтил)-4-(4-метокси-3-((1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3 -ил)окси)фенил)-3 -метилпирролидин-1 -карбоксилата

H-гидрат ортофосфата калия (238,1 г, 1,12 моль) добавляют к раствору трет-бутил-(38,48)-3-[(1К)-1гидроксиэтил]-4-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3-метилпирролидин-1-карбоксилата (100 г, 274,3 ммоль)

- 9 031089 в диметилформамиде (700 мл). Полученную смесь нагревают до 90-95°C. К указанной реакционной смеси по каплям добавляют раствор 1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил-метансульфоната (73,3 г, 289,81 ммоль) в диметилформамиде (30 мл). После того как завершают добавление, указанную смесь перемешивают при 90-100°C. Через 16 ч реакционную смесь охлаждают до 15-25°C и добавляют этилацетат (2500 мл) и воду (2500 мл). Слои разделяют и осуществляют обратную экстракцию водного слоя этилацетатом (2500 мл). Органические слои объединяют, промывают 12% солевым раствором (2500 мл, 2 раза) и концентрируют органический слой под вакуумом при 50°C до 2-3 объемов. Добавляют тетрагидрофуран (300 мл) и концентрируют под вакуумом при 50°C до 2-3 объемов. Добавляют тетрагидрофуран (300 мл) и концентрируют под вакуумом при 50°C до 2 объемов. Добавляют тетрагидрофуран (600 мл) с получением указанного в заголовке соединения (765,7 г, 264,65 ммоль) в виде раствора в тетрагидрофуране, который в последующей реакции применяют без последующей очистки.

Получение 6. Синтез (К)-1-((38,48)-4-(4-метокси-3-((1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил)окси)фенил)-3-метилпирролидин-3-ил)этан-1-ола

Концентрированную HCl (44 мл, 535,92 ммоль, 12,18М) добавляют к раствору трет-бутил-(38,48)-3((К)-1-гидроксиэтил)-4-(4-метокси-3-((1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил)окси)фенил)-3-метилпирролидин-1-карбоксилата (22,0 г, 44,21 ммоль) в тетрагидрофуране (88 мл) с температурой 15-20°C. После того как завершают добавление, указанный раствор нагревают до 30-35°C. Через четыре часа добавляют 10% водный раствор карбоната натрия для того с доведением рН до 8-9. Указанную реакционную смесь концентрируют до тех пор, пока весь тетрагидрофуран не будет удален. Добавляют дихлорметан (440 мл) и разделяют слои. Органический слой промывают водой (220 мл). Указанный органический слой концентрируют с получением указанного в заголовке соединения (17,0 г, 42,77 ммоль): ¹Н ЯМР (CDCl3): δ 0,75 (s, 3H), 1,17 (d, J=6,4 Гц, 3H), 2,15 (s, 3H), 3,18 (d, J=11,6 Гц, 1H), 3,47 (s, 2H), 3,65 (m, 2H), 3,79 (m, 6H), 4,07 (m, 2H), 4,50 (m, 2H), 5,10 (d, J=5,2 Гц, 1H), 6,27 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,65 (s, 1H), 6,80 (s, 2H), 7,29 (m, 1H), 7,88 (s, 1H) и ¹³С ЯМР (CDCl3): δ (ppm) 17,3, 17,8, 19,3, 46,8, 48,0, 49,6, 50,3, 51,1, 55,7, 58,0, 67,5, 68,8, 106,3, 111,5, 114,3, 121,5, 122,0, 128,0, 138,5, 145,9, 146,8, 148,5, 158,6.

Получение 7. Синтез (1К)-1-[(38,48)-1-{[(48)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]карбонил}-4-(4метокси-3-{[1-пиридин-2-ил-азетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этанола

Смесь (1К)-1-[(38,48)-1-{[(48)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]карбонил}-4-(4-метокси-3-{[1-(азетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этанола (50 мг), 2-фторпиридина (11,8 мг) и карбоната калия (31,8 мг) в У-метил-2-пирролидоне (3 мл) нагревают при 120°C в течение ночи. Указанную реакционную смесь охлаждают, вносят в метиленхлорид (40 мл) и промывают водой (10 мл). Органический слой сушат над сульфатом натрия и выпаривают до 3 мл. Добавляют ацетонитрил и указанный раствор неочищенного продукта очищают при помощи хроматографии с обращенной фазой (от 5 до 95% смеси ацетонитрил/вода). Соответствующие фракции собирают и выпаривают с получением указанного в заголовке соединения (22,1 мг). МС (ЕС+) = 512(М+1).

Получение 8. Синтез (1К)-1-[(38,48)-1-{[(48)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]карбонил}-4-(4метокси-3-{[1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этанола

Указанное в заголовке соединение получают, по существу, по способу получения 7, применяя 2 хлор-5-метилпиридин. МС (ЕС+) = 526 (М+1).

Альтернативный синтез (1R)- 1-[(38,48)-1-{[(48)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]карбонил}-4-(4метокси-3-{[1-(5-метилпирид ин-2-ил)азетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этанола

- 10 031089

(8)-2,2-Диметил-1,3-диоксолан-4-карбоксилат калия (165 г, 891,13 ммоль) добавляют к раствору ^)-1-((38,48)-4-(4-метокси-3-((1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил)окси)фенил)-3-метилпирролидин3-ил)этан-1-ола (300 г, 754,68 ммоль), диметилформамида (3000 мл), этилацетата (1500 мл) и N-метилморфолина (375 г, 3,71 моль). Указанную смесь охлаждают до 0-10°C и перемешивают в течение 30 мин. 50 мас.% раствора циклического ангидрида 1-пропанфосфоновой кислоты (675 г, 1,06 моль, 551,92 мл) в этилацетате вносят с такой скоростью, чтобы поддерживать внутреннюю температуру в пределах от 0 до 10°C. После перемешивания при 0-10°C в течение 30 мин указанную смесь нагревают до 10-20°C. Через один час добавляют воду (6,0 л) и этилацетат (4,5 л). Слои разделяют и обратную экстракцию водного слоя осуществляют этилацетатом (3,0 л). Объединенные органические слои промывают водой (3,0 л) и концентрируют до 3 объемов. Добавляют изопропилацетат (1,5 л) и концентрируют указанный органический слой до 3 объемов. Добавляют изопропилацетат (1,5 л) и перемешивают в течение 20 ч при 15-20°C. Указанную суспензию фильтруют и указанное твердое вещество сушат под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (290,0 г, 551,7 ммоль): ¹Н ЯМР (CDCl3): δ 0,76 (s, 3H), 1,20 (d, J=6,4 Гц, 3H), 1,45 (m, 6H), 2,20 (s, 3H), 3,75 (m, 3H), 3,85 (m, 6H), 4,20 (m, 4H), 4,42 (m, 3H), 4,68 (m, 1H), 5,10 (m, 1H), 6,30 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,65 (d, J=12,8 Гц, 1H), 6,85 (d, J=2,4 Гц, 2Н), 7,30 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,98 (s, 1H) и ¹³С ЯМР (CDCl3): δ (ppm) 16,9, 17,4, 17,5, 19,6, 21,7, 25,5, 25,6, 25,8, 44,6, 46,3, 47,0,

48,8, 49,3, 49,6, 52,6, 53,0, 55,8, 58,0, 66,4, 67,8, 68,5, 74,1, 74,2, 106,0, 110,6, 111,5, 114,7, 115,0, 121,6, 121,7, 122,1, 122,2, 129,0, 129,6, 138,2, 145,8, 147,5, 147,6, 148,3, 148,4, 158,9, 168,2, 168,4. Вращательную изомеризацию наблюдают в ¹Н и ¹³С ЯМР-спектрах, которая вызывает удвоение соответствующих пи ков.

Пример 1. Синтез (28)-3-[(38,48)-3-[(^)-1-гидроксиэтил]-4-{4-метокси-3-[(1-пиридин-2-илазетидин-3-ил)окси] фенил}-3-метилпирролидин-1 -ил] -3-оксопропан-1,2-диола

К раствору (^)-1-[(38,48)-1-{[(48)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]карбонил}-4-(4-метокси-3-{[1пиридин-2-илазетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этанола (22,1 мг) в тетрагидрофуране (2 мл) добавляют водный 1,0 М HCl (1 мл). Перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют водный 1,0 М HCl (1 мл) и перемешивают в течение дополнительных 8 ч. Нейтрализуют при помощи водного раствора 1,0М NaOH, экстрагируют этилацетатом, сушат и выпаривают с получением указанного в заголовке соединения (18,2 мг). МС (ЕС+) = 472 (М+1).

Пример 2. Синтез (28)-3-[(38,48)-3-[(^)-1-гидроксиэтил]-4-(4-метокси-3-{[1-(5-метилпиридин-2ил)азетидин-3 -ил] окси}фенил)-3 -метилпирролидин-1 -ил] -3 -оксопропан-1,2-диола

Указанное в заголовке соединение получают, по существу, при помощи способа согласно примеру

1. МС (ЕС+) = 486 (М+1).

Пример 3. Получение кристаллического (28)-3-[(38,48)-3-[(^)-1-гидроксиэтил]-4-(4-метокси-3-{[1(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил] окси} фенил)-3-метилпирролидин-1 -ил] -3-оксопропан-1,2-диола.

Альтернативным названием (28)-3-[(38,48)-3-[(^)-1-гидроксиэтил]-4-(4-метокси-3-{[1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-1-ил]-3-оксопропан-1,2-диола является (8)-2,3-дигидрокси-1-((38,48)-3-(^)-1-гидроксиэтил)-4-(4-метокси-3-((1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3 -ил)окси)фенил)-3-метилпирролидин-1 -ил)пропан-1 -он

- 11 031089

(1К)-1-[(38,48)-1-{[(48)-2,2-Диметил-1,3-диоксолан-4-ил]карбонил}-4-(4-метокси-3-{[1-(5метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-3-ил]этанол (20 г, 38,05 ммоль) добавляют к раствору 1N соляной кислоты (120 мл, 120,0 ммоль) с температурой 5-10°C. Указанный раствор нагревают до 20-25°C и перемешивают в течение 3 ч. Добавляют дихлорметан (400 мл) и полученные слои разделяют. К водному слою добавляют дихлорметан (400 мл) и при помощи 7% водного раствора бикарбоната натрия доводят значение рН до 7-8. Слои разделяют и осуществляют обратную экстракцию водного слоя дихлорметаном (200 мл). Объединенные органические слои промывают водой (100 мл). Указанный органический слой досуха концентрируют. К указанному в заголовке соединению (4,0 г) добавляют этанол (8 мл). Указанную смесь перемешивают в течение 20 ч при температуре 1520°C. Указанную суспензию фильтруют и влажный осадок высушивают под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде кристаллического твердого вещества (3,5 г).

Альтернативное получение кристаллического (28)-3-[(38,48)-3-[(1К)-1-гидроксиэтил]-4-(4-метокси3-{[1-(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил]окси}фенил)-3-метилпирролидин-1-ил]-3-оксопропан-1,2 диола.

1н. соляной кислоты (1800 мл, 1,8 моль) добавляют к (1К)-1-[(38,48)-1-{[(48)-2,2-диметил-1,3диоксолан-4-ил]карбонил} -4-(4-метокси-3 -{[1 -(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3 -ил] окси} фенил)-3 метилпирролидин-3-ил]этанолу (290 г, 551,7 ммоль) при 20-25°C. После перемешивания в течение 3 ч добавляют дихлорметан (5800 мл) и 10% водный раствор карбоната натрия для того, чтобы довести значение рН до 7-8. Добавляют этанол (1450 мл) и указанную смесь перемешивают в течение тридцати минут. Слои разделяют и органический слой промывают водой (2900 мл). Органический слой концентрируют до 2-3 объемов. Добавляют этанол (1450 мл) и концентрируют органический слой до 2-3 объемов. Добавляют этанол (580 мл) и указанную реакционную смесь охлаждают до 15-20°C. Добавляют затравочные кристаллы указанного в заголовке соединения (0,1 г) и указанную смесь перемешивают в течение 24 ч. Указанную суспензию фильтруют и осадок промывают этанолом (290 мл). Указанный осадок сушат под вакуумом при 55-60°C в течение 40 ч с получением указанного в заголовке соединения (240,0 г, 494,25 ммоль): ¹H ЯМР (CDCl3): δ 0,73 (m, 3H), 1,19 (d, J=6,0 Гц, 3H), 1,8 (brs, 3H), 2,20 (s, 3H), 3,31 (m, 1H), 3,53 (m, 1H), 3,85 (m, 9H), 4,38 (m, 2H), 4,42 (m, 3H), 5,07 (m, 1H), 6,32 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,68 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,84 (m, 2H), 7,33 (m, 1H), 8,02 (m, 1H) и ¹³С ЯМР (CDCl3): δ (ppm) 17,0, 17,5, 17,6, 19,6, 44,5, 47,4, 48,8, 49,3, 52,7, 55,9, 57,7, 58,2, 64,0, 64,1, 67,5, 67,6, 67,7, 70,5, 71,3, 106,2, 111,3, 111,4, 115,1, 120,7, 122,1, 128,7, 138,5, 138,7, 145,7, 147,3, 148,1, 158,5, 170,9. Вращательную изомеризацию наблюдают в ¹Н и ¹³С ЯМР спектрах, которая вызывает удвоение соответствующих пиков.

Рентгеновская порошковая дифракция.

Рентгенограммы рентгеновской порошковой дифракции (XRD) твердых кристаллических веществ получают на рентгеновском порошковом дифрактометре Bruker D4 Endeavor, оснащенном CuKa источником (λ = 1,54060 А) и детектором Vantec, работающим при 35 кВ и 50 мА. Образец сканируют от 4 до 40° в 2Θ с размером шага 0,009° в 2Θ и скоростью сканирования 0,5 с/шаг, и с 0,6 мм щелью расходимости, 5,28 мм фиксированной противорассеивающей щелью и 9,5 мм приемной щелью. Сухой порошок помещают в кварцевый держатель образца и получают гладкую поверхность при помощи предметного стекла. Рентгеновские дифрактограммы кристаллических форм получают при температуре окружающей среды и относительной влажности. В области кристаллографии хорошо известно, что для любой рассматриваемой кристаллической формы относительные интенсивности дифракционных пиков могут варьироваться в зависимости от преимущественной ориентации в результате таких факторов, как морфология кристаллов и габитус. Когда присутствуют эффекты предпочтительной ориентации, то изменяются интенсивности пиков, однако остаются неизменными характерные положения пиков полиморфа. См., например, Фармакопея США № 23, Национальный формуляр № 18, стр. 1843-1844, 1995. Кроме того, в области кристаллографии также хорошо известно, что для любой рассматриваемой кристаллической формы угловые положения пиков могут слегка отличаться. Например, положения пиков могут смещаться из-за изменения температуры или влажности, при которых анализируют образец, смещения образца или присутствия или отсутствия внутреннего стандарта. В данном случае вариабельность положения пика ±0,2° в 2Θ будет учитывать данные потенциальные изменения, не препятствуя однозначной идентификации указанной кристаллической формы. Подтверждение кристаллической формы может быть проведено на основе любой уникальной комбинации различающихся пиков (в единицах ° 2Θ), обычно более крупных пиков. Рентгеновские дифрактограммы кристаллических форм, полученные при температуре окружающей среды и относительной влажности, были скорректированы на основании NIST 675 со стандартными пиками при 8,853 и 26,774° 2Θ.

- 12 031089

Образец (2S)-3-[(3S,4S)-3-[(1 R)- 1-гидроксиэтил] -4-(4-метокси-3 -{[1 -(5-метилпиридин-2-ил)азетидин-3-ил]окси} фенил)-3-метилпирролидин-1-ил]-3-оксопропан-1,2-диола характеризуется дифрактограммой XRD, полученной с применением CuKa излучения, имеющей дифракционные пики (значения 2θ), описанные в табл. 3, и, в частности, имеющей пики при 18,5° в комбинации с одним или более пиков, выбранных из группы, состоящей из 16,2, 20,2, 14,4° и допустимым отклонением для углов дифракции 0,2°.

Таблица 3

Положения пиков Примера 3
Пик	Угол ° (°2-тета) +/- 0.2°	Относительная интенсивность (% от наиболее интенсивного пика)
1	13,1	21,9
2	24,1	22,0
3	25,0	27,0
4	22,3	30,3
5	20,7	32,0
6	19,0	45,2
7	14,4	46,3
8	20,2	50,0
9	16,2	86,5
10	18,5	100,0

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Кристаллический ^)-3-[^^)-3-[(^)-1-гидроксиэтил]-4-(4-метокси-3-{[1-(5-метилпиридин-2ил)азетидин-3 -ил]окси} фенил)-3-метилпирролидин-1 -ил] -3 -оксопропан-1,2-диол, характеризующийся дифрактограммой рентгеновской порошковой дифракции, полученной с применением CuKa излучения, имеющей дифракционный пик при угле дифракции в 2-тета, составляющий 18,5° в комбинации с одним или более пиков, выбранных из группы, состоящей из 16,2, 20,2 и 14,4°, с допустимым отклонением для углов дифракции 0,2°.
2. Фармацевтическая композиция для лечения гиперактивности мочевого пузыря, содержащая кристаллическое соединение по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.
3. Фармацевтическая композиция, содержащая первый компонент, который представляет собой кристаллическое соединение по п.1, и второй компонент, который представляет собой тадалафил, и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.
4. Способ лечения гиперактивности мочевого пузыря, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества кристаллического соединения по п.1.
5. Способ лечения гиперактивности мочевого пузыря, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества кристаллического соединения по п.1 в комбинации с эффективным количеством тадалафила.
6. Применение кристаллического соединения по п.1 для лечения гиперактивности мочевого пузыря.
7. Применение кристаллического соединения по п. 1 одновременно, раздельно или последовательно в комбинации с тадалафилом для лечения гиперактивности мочевого пузыря.