EA028618B1

EA028618B1 - Противохеликобактерное бактерицидное средство

Info

Publication number: EA028618B1
Application number: EA201500698A
Authority: EA
Inventors: Олег Иванович КИСЕЛЕВ; Олег Иванович Киселев; Дмитрий Анатольевич Леменовский; Михаил Михайлович Молокоедов; Игорь Александрович Морозов; Элла Германовна Деева; Василина Михайловна Дмитриева; Виктор Прохорович Дядченко; Валентин Иванович Евстигнеев
Priority date: 2015-07-24
Filing date: 2015-07-24
Publication date: 2017-12-29
Also published as: EA201500698A1

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть применено для эрадикации инфекции Helicobacter pylori. В качестве противохеликобактерного бактерицидного средства предложено использовать межмолекулярносвязанные композиции (МСК), синтезированные в результате ионного взаимодействия в водных растворах молекул бензилдиметил-[3-(миристоиламино)пропил]аммоний хлорида - замещенного амида миристиновой кислоты (АМК), и молекул полигексаметиленгуанидинов (ПГМГ). Выполненный сравнительный анализ воздействия растворов МСК на бактерии Helicobacter pylori и микрофлору кишечника организма человека подтверждает селективность бактерицидного действия этого инновационного препарата на бактерии Helicobacter pylori и безопасность его применения в концентрациях от 0,000125 до 0,00025% для микрофлоры кишечника.

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть применено при создании высокоэффективных и безопасных лекарственных средств для эрадикации инфекции НсПсоЬасЗсг ργίοτί.

Инфекция НеНсоЪас1сг ρνίοη (Ηρ) является самой распространенной среди терапевтических инфекций. В настоящее время ею инфицировано более 60% населения планеты. В Российской Федерации в зависимости от региона НеПсоЪасЮг ρνίοη инфицировано от 80 до 95% взрослого населения.

Научным сообществом официально признанными заболеваниями хеликобактерной этиологии считаются хронический гастрит, язвенная болезнь и МЛЬТ-лимфома желудка. Инфекция НейсоЪас1ег ρνίοη является главным фактором риска в желудочном канцерогенезе. В связи с этим противоинфекционная терапия и эрадикация (полное устранение инфекции Ней^Ъа^ег ρνίοτί из организма) строго рекомендованы при ее наличии у больных с вышеперечисленными заболеваниями. Во всех международных и национальных рекомендациях предусмотрено проведение эрадикации с помощью 2-3 антибиотиков и антибактериальных средств на фоне антикислотосекреторной терапии. Эффективность стандартных схем при использовании в ургентной терапии и поликлинической практике антибиотиков не превышает 6065%, так как на протяжении многих лет используются одни и те же антибиотики, созданные для лечения пневмоний, урогенитальных инфекций, но не специфические для Ηρ-инфекции . Поскольку эти препараты применяются по прямому назначению в виде монотерапии, прогресссивно возрастает количество резистентных к ним штаммов Ηρ. В связи этим создание новых эффективных и безопасных для организма человека антихеликобактерных бактерицидных средств является одной из весьма актуальных задач современной фармакологии.

Известно антисептическое средство широкого спектра антимикробного действия, действующим веществом которого является бензилдиметил-[3-(миристоиламино)пропил]аммоний хлорид - замещенный амид миристиновой кислоты (АМК) (патент РФ № 2163119).

В основе биологического действия АМК лежит его воздействие на клеточные мембраны. Бактериальная клетка имеет оболочку и надмембранные структуры, состоящие из гликолипидов, гликопротеидов и высокодисперсных веществ, которые и являются объектом воздействия АМК

Преобладающим механизмом является гидрофобное взаимодействие АМК, относящегося к ПАВ (поверхностно-активным веществам), с липидными структурами мембран микроорганизмов, приводящее к их фрагментации и разрушению. Неполярная часть молекулы АМК, погружаясь в гидрофобную часть мембраны, во-первых, разрушает надмембранный слой, разрыхляет мембрану, повышает ее проницаемость для крупномолекулярных веществ и, во-вторых, поскольку на мембранных структурах фиксируется большинство ферментов, АМК изменяет энзиматическую активность клетки, угнетая ферментативные системы. Г идрофобный радикал АМК соответствует максимальному связыванию детергента с клеточной мембраной микроорганизма, т.е. такое взаимодействие наиболее энергетически выгодно по сравнению с ПАВ-антисептиками, длина которых существенно ниже или выше. Катионный радикал АМК сначала уменьшает, а затем и нейтрализует заряд клеточной стенки. Таким образом, в результате воздействия АМК происходит нарушение структуры и функции мембран бактериальных клеток и вирусных клеток. АМК не воздействует на оболочки клеток человека, поскольку те имеют значительно большую длину липидных радикалов и гидрофобных взаимодействий с молекулами АМК не происходит (патент РФ № 2163119).

Известны также композиции полигексаметиленгуанидинов и минеральных кислот, обладающие бактерицидным действием (патент РФ № 2118175).

Полигексаметиленгуанидиновые композиции используются для медицинской и бытовой дезинфекции (1), для дезинфекции на предприятиях пищевой промышленности и продовольственной торговли (2), (3).

Бактерицидные свойства полигексаметиленгуанидинов (ПГМГ) обусловлены наличием в их повторяющихся звеньях гуанидиновых группировок, являющихся активным началом некоторых природных и синтетических лекарственных средств и антибиотиков. Гидрофобные звенья, соединяющие гуанидиновые группировки, способствуют осаждению препарата на фосфолипидных мембранах клеток. Проникая в клетку инфектанта, препарат блокирует действие ферментов, препятствует репликации нуклеиновых кислот, угнетает дыхательную систему клетки, что приводит к ее гибели. Установлено также, что бактерицидная активность солей ПГМГ усиливается по мере увеличения молекулярной массы, температуры, рН среды и практически не изменяется в присутствии белковой нагрузки (4), (5).

Обладая высоким бактерицидным эффектом по отношению ко многим микроорганизмам, соли ПГМГ и АМК относятся к IV классу (малоопасные вещества) при кожном пути поступления в организм и к III классу (умеренно опасные вещества) при поступлении через желудок.

Эти изобретения (патенты РФ № 2163119 и № 2118175) прияты нами за наиболее близкие аналоги.

Целью изобретения является создание нового высокомолекулярного органического бактерицидного соединения, эффективного для эрадикации инфекции Ηе1^сοЪасΐе^ ρνίοτί и безопасного в отношении кишечной микрофлоры человека.

Поставленная цель достигается тем, что в качестве такого бактерицидного средства предлагается использовать раствор ПАВ-антисептика, включающий в качестве действующего вещества межмолеку- 1 028618 лярносвязанную композициию (МСК), синтезируемую в результате ионного взаимодействия в растворах молекул замещенного амида миристиновой кислоты (АМГ) и молекул полигексаметиленгуанидинов (ПГМГ).

Структурные формулы полученных нами межмолекулярносвязанных органических композиций (МСК) приведены ниже.

Далее приведены примеры предлагаемых способов получения растворов бактерицидного средства МСК различной концентрации:

Пример 1. Бактерицидное средство МСК готовят путем смешения 15%-ного раствора бензилдиметил-[3-(миристоиламино)пропил]аммоний хлорида (замещенного амида миристиновой кислоты - АМК) с 20%-ным раствором полигексаметиленгуанидина (ПГМГ), перемешивая при комнатной температуре в течение 10-15 мин при следующем соотношении объемов растворов: 66,67 мл АМК / 25,0 мл ПГМГ, и доводя добавлением очищенной воды до 100 мл, получают 100 мл раствора межмолекулярносвязанного органического соединения с массовой долей МСК в растворе, равной 15%, концентрат МСК - 15.

Пример 2. Бактерицидное средство МСК готовят путем смешения 15%-ного раствора бензилдиметил-[3-(миристоиламино)пропил]аммоний хлорида (АМК с 7,5%-ным раствором полигексаметиленгуанидина (ПГМГ)), перемешивая при комнатной температуре в течение 10-15 мин при следующем соотношении объемов растворов: 200 мл 15%-ного раствора АМК и 100 мл 7,5%-ного раствора ПГМГ, получая в результате 300 мл водного концентрата с массовой долей действующеего вещества (МСК) в растворе, равной 12,5%, концентрат МСК- 12,5, и доводя добавлением очищенной воды до 150 л, получают 150 л готового препарата - раствора межмолекулярносвязанного органического соединения с массовой долей МСК в растворе, равной 0,00025%. Дальнейшим двухкратным разбавлением раствора путем добавления очищенной воды получают до 300 л готового препарата - раствора межмолекулярносвязанного органического соединения с массовой долей МСК в растворе, равной 0,000125%.

Полученные в экспериментах ΐη уйго сравнительные данные по бактерицидному воздействию препарата МСК на НеБсоЬас1ег ру1оп и микрофлору кишечника приведены в табл. 1 и 2.

Таблица 1. Определение минимальной бактерицидной концентрации растворов МСК для госпитальных штаммов НеНсоЬас1ег ру1оп, резистентых к антибиотику метронидазол.

Концентрация МСК, %	0,2	0,0025	0,00025	0,000125
НеНсоЬас1ег ру1оп, штаммы: АЗ 7	-	-	-	+
А45	-	-	-	+

Примечание: (-) - отсутствие роста культуры Н-ру1оп. Получено, что живые бактерии (+) в растворе МСК сохраняются при концентрации препарата не более 0,000125%, но и при такой концентрации препарата через 1,5 ч инкубации жизнеспособность сохраняют не более 1% бактерий. Различий в ингибировании роста между штаммами не наблюдалось.

- 2 028618

Таблица 2. Зоны задержки роста микроорганизмов, наиболее характерных для микрофлоры кишечника человека, под воздействием различных концентраций растворов бактерицидного препарата МСК.

Концентрация МСК, %	0,25	0,0025	0,00025
К1еЪ81е11аРпеитота	А	7,0	6,0	6,0
Б	8,0	0	0
ЕзЬепсЫа сой	А	7,0	6,0	6,0
Б	7,0	0	0
81арЬу1ососсиз аигеиз	А	8,0-9,0	7,0-7,5	6,0
Б	11,0	10,0	0
Рзеийотопаз аеги§то8а	А	8,0	6,0	6,0
Б	6,0	0*	0
ЕасХоЪасШиз 8рр.	А Б	10,0 9,0	0 0	0 0

Примечание. (А) - бумажные фильтровальные диски, (Б) - капли растворов, (*) - отмечаются зоны просветления, значения 6,0 для бумажных дисков (А) - зона задержки роста отсутствует.

Сравнительный анализ воздействия растворов МСК (табл. 1 и 2) в концентрациях от 0,000125 до 0,00025% на бактерии НейсоЬас1ег ру1ог1 и микрофлору кишечника организма человека подтверждает селективность эффективного бактерицидного действия этого инновационного препарата на бактерии НеБсоЬас1ег ру1ог1 и безопасность его применения для микрофлоры кишечника.

Литература:

1. Дезсредства, справочник под ред. А.А. Монисова и М.Г. Шандалы, ТОО Рарорь, М., 1996.

2. Экологически безопасные полимерные биоциды, сб. статей ИЭТП, М., 2000.

3. Проблемы дезинфекции и стерилизации, ВНИИДиС, вып.23, 1974 г., стр. 96.; Вып. 24, 1975, стр. 58.

4. Баркова Н.П. и др. Тез. IX Всесоюзного семинара по изысканию лекарственных средств, Рига, 1991, стр. 56. С.А. Кондрашов, Гигиена и санитария, N3, 11, 1992

5. Ефимов К.М., Гембицкий П.А., Снежко А.Г. Полигуанидины - класс малотоксичных дезсредств пролонгированного действия. Журнал Дезинфекционное дело, № 4, М. 2000 .

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Противохеликобактерное бактерицидное средство, представляющее собой раствор ПАВантисептика, включающее в качестве действующего вещества межмолекулярносвязанную композициию (МСК), синтезируемую в результате ионного взаимодействия в растворах замещенного амида миристиновой кислоты (АМГ) и полигексаметиленгуанидина (ПГМГ) и обладающую эффективным бактерицидным действием, селективным в отношении НеБсоЬас1ег ру1ог1 при концентрациях растворов МСК от 0,000125 до 0,00025%, безопасных для кишечной микрофлоры.
2. Бактерицидное средство по п.1, отличающееся тем, что для эрадикации инфекции НейсоЬас1ег ру1ог! используются растворы МСК в концентрации 0,00025%.