EA024207B1 - Пиразольные соединения - Google Patents

Пиразольные соединения Download PDF

Info

Publication number
EA024207B1
EA024207B1 EA201491852A EA201491852A EA024207B1 EA 024207 B1 EA024207 B1 EA 024207B1 EA 201491852 A EA201491852 A EA 201491852A EA 201491852 A EA201491852 A EA 201491852A EA 024207 B1 EA024207 B1 EA 024207B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
mmol
pharmaceutically acceptable
solution
pyrazol
Prior art date
Application number
EA201491852A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201491852A1 (ru
Inventor
Фучэн Цюй
Натан Брайан Мантло
Original Assignee
Эли Лилли Энд Компани
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48428684&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA024207(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Эли Лилли Энд Компани filed Critical Эли Лилли Энд Компани
Publication of EA201491852A1 publication Critical patent/EA201491852A1/ru
Publication of EA024207B1 publication Critical patent/EA024207B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/02—Heterocyclic radicals containing only nitrogen as ring hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/22—Cyclohexane rings, substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H7/00—Compounds containing non-saccharide radicals linked to saccharide radicals by a carbon-to-carbon bond
    • C07H7/06—Heterocyclic radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

В настоящем изобретении предложено соединение формулы IIгде X представляет собой следующий фрагмент:или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.

Description

(57) В настоящем изобретении предложено соединение формулы II
024207 ΒΙ где X представляет собой следующий фрагмент:
.ОС™ ^СС™ хос™ -ст 4<χ , +мОС™ -ОС™
4- ; или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
Настоящее изобретение относится к новым пиразольным соединениям, к фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, к способам применения таких соединений для лечения физиологических расстройств и к промежуточным соединениям и способам, подходящим для применения для синтеза таких соединений.
Настоящее изобретение относится к области лечения диабета и других заболеваний и расстройств, связанных с гипергликемией. Диабет представляет собой группу заболеваний, характеризующихся высоким содержанием глюкозы в крови. Ему подвержены примерно 25 млн человек в Соединенных Штатах, и он является седьмой по значимости причиной смерти в США согласно национальному информационному бюллетеню по вопросам диабета 2011 (Министерство здравоохранения и социальных служб США, центры контроля и профилактики заболеваний). Натрийзависимые котранспортеры глюкозы (§ОЬТ) представляют собой переносчики, которые отвечают за поглощение углеводов, таких как глюкоза. В частности, §СЬТ1 отвечает за перенос глюкозы через мембрану клеток щеточной каемки тонкого кишечника. Ингибирование 8СЬТ1 может приводить к снижению абсорбции глюкозы в тонком кишечнике, что обеспечивает подходящий для применения способ лечения диабета.
В патенте США № 7655632 описаны конкретные производные пиразола, обладающие ингибирующей активностью в отношении §СЬТ1 человека, которые также описаны в качестве подходящих для применения для предотвращения или лечения заболевания, связанного с гипергликемией, такого как диабет. Кроме того, в публикации международной заявки на патент АО 2011/039338 описаны конкретные производные пиразола, обладающие ингибирующей активностью в отношении §ОЬТ1/§ОЬТ2, которые также описаны в качестве подходящих для применения для лечения заболеваний костей, таких как остеопороз.
Существует потребность в альтернативных лекарственных средствах и лечении диабета. В настоящем изобретении предложены некоторые новые ингибиторы §ОЬТ1, которые могут быть подходящими для лечения диабета.
Соответственно, в настоящем изобретении предложено соединение формулы II
где X представляет собой следующий фрагмент:
или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
В настоящем изобретении также предложено соединение формулы I
или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
В настоящем изобретении также предложен способ лечения диабета у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения формул I или II или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения. В настоящем изобретении также предложен способ лечения диабета 1 типа у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения формул I или II или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения. Кроме того, в настоящем изобретении предложен способ лечения диабета 2 типа у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного коли- 1 024207 чества соединения формул I или II или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения. В настоящем изобретении также предложен способ лечения нарушения толерантности к глюкозе (НТГ), нарушения гликемии натощак (НГН) или метаболического синдрома у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения формул I или II или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения.
Кроме того, в настоящем изобретении предложено соединение формул I или II или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения для применения в терапии, в частности для лечения диабета. Кроме того, в настоящем изобретении предложено соединение формул I или II или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения для применения для лечения диабета 1 типа. Кроме того, в настоящем изобретении предложено соединение формул I или II или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения для применения для лечения диабета 2 типа. В настоящем изобретении также предложено применение соединения формул I или II или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для получения лекарственного средства для лечения диабета. Кроме того, в настоящем изобретении предложено применение соединения формул I или II или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для получения лекарственного средства для лечения диабета 1 типа. В настоящем изобретении также предложено применение соединения формул I или II или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для получения лекарственного средства для лечения диабета 2 типа. В настоящем изобретении также предложено применение соединения формул I или II или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для получения лекарственного средства для лечения НТГ, НГН или метаболического синдрома.
В настоящем изобретении также предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формул I или II или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами. В конкретном варианте реализации композиция дополнительно содержит один или более других терапевтических агентов. Настоящее изобретение также охватывает новые промежуточные соединения и способы синтеза соединения формул I или II.
Термины лечение или лечить, применяемые в настоящей заявке, включают предотвращение, ограничение, замедление, прекращение или обращение развития или тяжести имеющегося симптома или расстройства.
Термин пациент, применяемый в настоящей заявке, относится к млекопитающему, такому как мышь, морская свинка, крыса, собака или человек. Понятно, что предпочтительным пациентом является человек.
Термин эффективное количество, применяемый в настоящей заявке, относится к количеству или дозе соединения согласно настоящему изобретению или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения, которое при введении пациенту в виде одной или множества доз обеспечивает целевой эффект у пациента, подвергающегося диагностике или лечению.
Эффективное количество может быть легко определено лечащим врачом, как специалистом в данной области, при помощи известных способов и изучения результатов, полученных в аналогичных условиях. При определении эффективного количества для пациента лечащий врач рассматривает ряд факторов, включая, но, не ограничиваясь ими, вид млекопитающего; его размер, возраст и общее состояние здоровья; конкретное заболевание или расстройство; степень, поражение или тяжесть заболевания или расстройства; ответную реакцию у конкретного пациента; конкретное вводимое соединение; способ введения; характеристики биодоступности вводимого препарата; выбранный режим дозировки; применение сопутствующего лечения и другие соответствующие условия.
Соединения формул I и II обычно являются эффективными в широком диапазоне доз. Например, дневная доза обычно находится в диапазоне от примерно 0,01 до примерно 30 мг/кг массы тела. В некоторых случаях более подходящими могут быть дозы меньше нижнего предела вышеуказанного диапазона, в то время как в других случаях могут быть применены более высокие дозировки без проявления вредных побочных эффектов, и, следовательно, описанный выше диапазон доз не ограничивает объем настоящего изобретения никоим образом.
Соединения согласно настоящему изобретению предпочтительно готовят в виде фармацевтических композиций, вводимых при помощи любого из способов, обеспечивающих биодоступность соединения. Наиболее предпочтительно указанные композиции предназначены для перорального введения. Указанные фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники. (См., например, Реиипфоп: ТЬе 8с1спес апб РтасЬсе οί РЬаттасу (Ό.Β. Тгоу, ЕбЬот, 2151 Ε6ίΙίοη.. Ырршсоб, ^ЬЬатз & ^бкшк, 2006).
В другом аспекте настоящего изобретения соединения вводят в комбинации с одним или более терапевтическими агентами, такими как противодиабетические агенты. Введение в комбинации включает одновременное или последовательное введение. Кроме того, одновременное введение комбинации может проводиться в виде одной комбинированной дозы или отдельных доз каждого терапевтического агента. Примеры противодиабетических агентов включают метформин; ДПП-ГУ ингибитор (ингибитор дипептидилпептидазы IV), такой как ситаглиптин или линаглиптин; сульфонилмочевину, такую как глимепи- 2 024207 рид; тиазолидиндион, такой как пиоглитазон; базальный инсулин, такой как гларгин; быстродействующий инсулин, такой как НЦМАТОО или ЫОУОЬОО; агонист ГПП-1 (глюкагоноподобный пептид-1), такой как эксенатид или лираглутид; ингибитор §СЬТ2, такой как дапаглифлозин или эмпаглифлозин; антагонист глюкагонового рецептора, такой как ЬУ2409021; и т.п.
Соединения формул I и II получают, как показано ниже в примерах и схемах. Реагенты и исходные вещества легко доступны специалисту в данной области техники. Если не указано иное, все заместители являются такими, как определено ранее. Понятно, что указанные схемы, примеры получения и примеры не ограничивают объем настоящего изобретения никоим образом.
Примеры методов разделения включают способы селективной кристаллизации или хиральную хроматографию. (См., например, 1. Еюсщсь с1 а1., Епайютеге, РасетаЮь апб КекоШюпк, бо1т \УПеу апб 8оп8, 1пс., 1981, и Е.Ь. ЕПе1 апб 8.Н. \УПсп. §1етеосйет181гу оГ Огдатс Сотроипбк, ХУПсу-ЕИсгесюпсс. 1994). Специалисту в данной области техники должно быть понятно, что разделение и выделение при помощи хроматографии, хиральной хроматографии или селективной кристаллизации индивидуальных диастереомеров или геометрических изомеров соединения формулы I или II или индивидуальных диастереомеров или геометрических изомеров промежуточных соединений, позволяющих получить соединение формулы I или II, может быть проведено в любой подходящий момент в процессе синтеза.
Согласно настоящей заявке δ относится к сдвигу относительно тетраметилсилана в долях на миллион; мин относится к минуте или минутам; ТГФ относится к тетрагидрофурану; МеОН относится к метанолу или метиловому спирту; ВЭЖХ относится к высокоэффективной жидкостной хроматографии; термин Ас относится к ацетильному заместителю следующей структуры:
О
Термин Βζ относится к бензоильному заместителю следующей структуры:
Термин Вос относится к трет-бутилоксикарбонильной защитной группе.
Фармацевтически приемлемые соли и общепринятые способы их получения хорошо известны в данной области. См., например, Сои1б, РЬ., 5>а11 8е1есбоп Гог Ьапс бгидк, !п1егпа11опа11оигпа1 оГ РНагтасеибсь 33: 201-217 (1986); Вакбп е1 а1. 8аЙ 8е1есбоп апб Орΐ^т^ζаί^оη Ргосебигек Гог РЬаттасеибса1 Ыете СЬетюа1 ЕпИйез, Огдатс Ргосекк КекеатсЬ апб Пеуе1ортеп1, 4: 427-435 (2000); и §.М. Вегде, е! а1., РЬагтасеибса1 8аЙ8, 1оигпа1 оГ РЬагтасеибса1 Заепсеь Уо1. 66, Ыо. 1, Тншагу 1977. Специалисту в области синтеза понятно, что соединения формулы I и II, такие как амины, представляют собой органические основания и могут быть легко превращены и выделены в виде фармацевтически приемлемых солей, таких как тартрат или НС1 соли, с применением способов и условий, хорошо известных специалисту в данной области техники.
- 3 024207
Схема 1
Пример получения 1. Синтез (4-бром-2-метилфенил)метанола .Вг
Схема 1, стадия А: к раствору 4-бром-2-метилбензойной кислоты (39 г, 0,18 моль) в тетрагидрофуране (200 мл) добавляли комплекс боран-тетрагидрофуран (0,2 моль, 200 мл, 1,0 М раствор). После 18 ч при комнатной температуре растворитель удаляли при пониженном давлении с получением твердого вещества. Очищали при помощи флэш-хроматографии с получением титульного соединения в виде белого твердого вещества (32,9 г, 0,16 моль).
Ή-ЯМР (СОС13): δ 1,55 (5, 1Н), 2,28 (5, 3Н), 4,61 (5, 2Н), 7,18-7,29 (т, 3Н).
Альтернативный синтез (4-бром-2-метилфенил)метанола.
Комплекс боран-диметилсульфид (2 М раствор в ТГФ; 116 мл, 0,232 моль) при 3°С медленно добавляли к раствору 4-бром-2-метилбензойной кислоты (24,3 г, 0,113 моль) в безводном тетрагидрофуране (ТГФ, 146 мл). После перемешивания при охлаждении в течение 10 мин охлаждающую баню убирали и реакционную смесь оставляли медленно нагреваться до температуры окружающей среды. Через 1 ч раствор охлаждали до 5°С и медленно добавляли воду (100 мл). Добавляли этилацетат (100 мл) и разделяли фазы. Органический слой промывали насыщенным водным раствором ЫаНСО3 (200 мл) и сушили над Ыа28О4. В результате фильтрования и концентрирования при пониженном давлении получали остаток, который очищали при помощи фильтрования через тонкий слой силикагеля с элюированием 15% этилацетат/изогексан с получением титульного соединения (20,7 г, 91,2% выход). МС (т/ζ): 183/185
- 4 024207 (М+1-18).
Пример получения 2. Синтез 4-бром-1-хлорметил-2-метилбензола
Схема 1, стадия В: к раствору (4-бром-2-метилфенил)метанола (32,9 г, 0,16 моль) в дихлорметане (200 мл) и диметилформамиде (0,025 моль, 2,0 мл) при 0°С добавляли тионилхлорид (14,31 мл, 0,2 моль). После 1 ч при комнатной температуре смесь выливали в ледяную воду (100 г), экстрагировали дихлорметаном (300 мл), экстракт промывали 5% вод. раствором бикарбоната натрия (30 мл) и солевым раствором (200 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного титульного соединения в виде белого твердого вещества (35,0 г, 0,16 моль). Вещество применяли на следующей стадии реакции без дополнительной очистки. 'Н-ЯМР (СЭС13): δ 2,38 (8, 3Н), 4,52 (8, 2Н), 7,13-7,35 (т, 3Н).
Альтернативный синтез 4-бром-1-хлорметил-2-метилбензола.
Метансульфонилхлорид (6,83 мл, 88,3 ммоль) медленно добавляли к раствору (4-бром-2метилфенил)метанола (16,14 г, 80,27 ммоль) и триэтиламина (16,78 мл; 120,4 ммоль) в дихлорметане (80,7 мл), охлажденному в смеси лед/вода. Смесь оставляли медленно нагреваться до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 16 ч. Добавляли еще метансульфонилхлорида (1,24 мл; 16,1 ммоль) и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч. Добавляли воду (80 мл) и фазы разделяли. Органический слой промывали соляной кислотой (1н.; 80 мл), затем насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия (80 мл), затем водой (80 мл) и сушили над Ыа28О4. В результате фильтрования и концентрирования при пониженном давлении получали остаток, который очищали при помощи флэш-хроматографии (с элюированием гексаном) с получением титульного соединения (14,2 г; 80,5% выход). !Н-ЯМР (300,11 МГц, СПС13): δ 7,36-7,30 (т, 2Н), 7,18 (ά, 1=8,1 Гц, 1Н), 4,55 (8, 2Н), 2,41 (8, 3Н).
Пример получения 3. Синтез 4-[(4-бром-2-метилфенил)метил]-5-изопропил-1Н-пиразол-3-ола
Схема 1, стадия С: к раствору метилового эфира 4-метил-3-оксовалериановой кислоты (27,1 мл, 0,19 моль) в тетрагидрофуране при 0°С добавляли гидрид натрия (8,29 г, 0,21 моль, 60% дисперсия в масле). После 30 мин при комнатной температуре добавляли раствор 4-бром-1-хлорметил-2метилбензола (35,0 г, 0,16 моль) в тетрагидрофуране (50 мл). Полученную смесь грели при 70°С в течение ночи (18 ч). Реакцию гасили добавлением 1,0 М раствора НС1 (20 мл). Экстрагировали этилацетатом (200 мл), экстракт промывали водой (200 мл) и солевым раствором (200 мл), сушили над Ыа28О4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в толуоле (200 мл) и добавляли моногидрат гидразина (23,3 мл, 0,48 моль). Смесь грели при 120°С в течение 2 ч с применением прибора Дина-Старка для удаления воды. Смесь охлаждали и растворитель удаляли при пониженном давлении, остаток растворяли в дихлорметане (50 мл) и метаноле (50 мл). Указанный раствор медленно переносили в стакан с водой (250 мл). Полученный продукт, выпавший в осадок, собирали при помощи вакуумного фильтрования. Сушили под вакуумом в сушильном шкафу при 40°С в течение ночи с получением титульного соединения в виде твердого вещества (48,0 г, 0,16 моль). МС (т/ζ): 311,0 (М+1), 309,0 (М-1).
Альтернативный синтез 4-[(4-бром-2-метилфенил)метил]-5-изопропил-1Н-пиразол-3-ола.
Готовили раствор 4-бром-1-хлорметил-2-метилбензола (13,16 г, 59,95 ммоль) в ацетонитриле (65,8 мл). Добавляли карбонат калия (24,86 г, 179,9 ммоль), йодид калия (11,94 г, 71,94 ммоль) и метиловый эфир 4-метил-3-оксовалериановой кислоты (8,96 мл; 62,95 ммоль). Полученную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 ч. Добавляли соляную кислоту (2н.) до получения рН 3. Раствор экстрагировали этилацетатом (100 мл), органическую фазу промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над Ыа28О4. Смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в толуоле (65,8 мл) и добавляли моногидрат гидразина (13,7 мл, 0,180 моль). Полученную смесь кипятили с обратным холодильником и удаляли воду при помощи прибора Дина-Старка. Через 3 ч смесь охлаждали до 90°С и добавляли еще моногидрат гидразина (13,7 мл; 0,180 моль), смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч. Смесь охлаждали и концентрировали при пониженном давлении. Полученное твердое вещество растирали с водой (200 мл), фильтровали и сушили в вакуумном сушильном шкафу над Р2О5 при 60°С. Твердое вещество растирали в изогексане (200 мл) и фильтровали с
- 5 024207 получением титульного соединения (14,3 г; 77,1% выход). МС (т/ζ): 309/311 (М+1).
Пример получения 4. Синтез 4-(4-бром-2-метилбензил)-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6тетра-О-бензоил-в-Э-глюкопиранозида
Схема 1, стадия Ό: в 1 л колбу добавляли 4-[(4-бром-2-метилфенил)метил]-5-изопропил-1Нпиразол-3-ола (20 г, 64,7 ммоль), α-Ό-глюкопиранозил бромид-тетрабензоат (50 г, 76 ммоль), бензилтрибутиламмоний хлорид (6 г, 19,4 ммоль), дихлорметан (500 мл), карбонат калия (44,7 г, 323 ммоль) и воду (100 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Экстрагировали дихлорметаном (500 мл). Экстракт промывали водой (300 мл) и солевым раствором (500 мл). Органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи флэш-хроматографии с получением титульного соединения (37 г, 64 ммоль). МС (т/ζ): 889,2 (М+1), 887,2 (М-1).
Пример получения 5. Синтез 4-{4-[(1Е)-4-гидроксибут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6-тетра-О-бензоил-в-О-глюкопиранозида
Схема 1, стадия Е: к раствору 4-(4-бром-2-метилбензил)-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6тетра-О-бензоил-в-О-глюкопиранозида (3 г, 3,4 ммоль) в ацетонитриле (30 мл) и триэтиламине (20 мл) добавляли 3-бутен-1-ол (0,58 мл, 6,8 ммоль). Раствор дегазировали азотом в течение 10 мин. Добавляли три-о-толилфосфин (205 мг, 0,67 ммоль) и ацетат палладия (76 мг, 0,34 ммоль). Кипятили с обратным холодильником при 90°С в течение 2 ч. Охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя. Остаток очищали при помощи флэш-хроматографии с получением титульного соединения (2,1 г, 2,4 ммоль). МС (т/ζ): 878,4 (М+1).
Пример получения 6. Синтез 4-{4-[(1Е)-4-оксибут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)-1Нпиразол-3-ил 2,3,4,6-тетра-О-бензоил-в-О-глюкопиранозида
Схема 1, стадия Р: к раствору 4-{4-[(1Е)-4-гидроксибут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6-тетра-О-бензоил-в-О-глюкопиранозида (280 мг, 0,32 ммоль) и бикарбоната натрия (133,8 мг, 1,6 ммоль) в дихлорметане (20 мл) при 0°С добавляли 3,3,3-триацетокси-3-йодфталид (134 мг, 0,96 ммоль). После 15 мин при комнатной температуре реакцию гасили насыщенным водным раствором тиосульфата натрия (10 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (30 мл). Экстракт промывали водой (30 мл) и солевым раствором (40 мл). Органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи флэш-хроматографии с получением титульного соединения (270 мг, 0,31 ммоль). МС (т/ζ): 876,5 (М+1), 874,5 (М-1).
- 6 024207
Пример получения 7. Синтез трет-бутилового эфира 2-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3[(2,3,4,б-тетра-О-бензоил-в-О-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-2,9диазаспиро [5.5]ундекан-9-карбоновой кислоты
Схема 1, стадия С: к раствору 4-{4-[(1Е)-4-оксибут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)-1Нпиразол-3-ил 2,3,4,б-тетра-О-бензоил-в-О-глюкопиранозида (270 мг, 0,31 ммоль) и гидрохлорида третбутил-2,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилата (179 мг, 0,б2 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (5 мл) добавляли триацетоксиборгидрид натрия (98 мг, 0,4б ммоль). После 30 мин при комнатной температуре реакцию гасили насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (30 мл). Экстракт промывали водой (30 мл) и солевым раствором (40 мл), органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи флэш-хроматографии с получением титульного соединения (275 мг, 0,25 ммоль). МС (т/ζ): 1115,б (М+1).
Пример получения 8. Синтез дигидрохлорида 4-{4-[(1Е)-4-(2,9-диазаспиро[5.5]ундец-2-ил)бут-1-ен1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,б-тетра-О-бензоил-в-О-глюкопиранозида
Схема 1, стадия Н: к раствору трет-бутилового эфира 2-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3[(2,3,4,б-тетра-О-бензоил-в-О-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-2,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоновой кислоты (275 мг, 0,25 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли соляную кислоту (4,0 М раствор в 1,4-диоксане, 0,б мл, 2,4 ммоль). После выдерживания в течение ночи (18 ч) при комнатной температуре концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя с получением титульного соединения в виде твердого вещества (258 мг, 0,24 ммоль). МС (т/ζ): 1015,б (М+1).
Пример 1. Синтез 4-{4-[(1Е)-4-(2,9-диазаспиро[5.5]ундец-2-ил)бут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил в-Э-глюкопиранозида
Схема 1, стадия I: к раствору дигидрохлорида 4-{4-[(1Е)-4-(2,9-диазаспиро[5.5]ундец-2-ил)бут-1-ен1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,б-тетра-О-бензоил-β-^-глюкопираиозида (258 мг, 0,24 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли гидроксид натрия (0,5 мл, 0,5 ммоль, 1,0 М раствор). После 2 ч при 40°С концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя с получением остатка, который очищали при помощи метода препаративной ВЭЖХ: высокое значение рН, 25% В в течение 4 мин, 25-40% В в течение 4 мин при 85 мл/мин с применением колонки С18ХВпбде ОЭВ 30x75 мм, 5 мкм, растворитель А - Н2О с ХН4НСО3 при рН 10, растворитель В - МеСЫ, с получением титульного соединения в виде твердого вещества (4б мг, 0,08 ммоль). МС (т/ζ): 598,8 (М+1), 59б,8 (М-1).
- 7 024207
Пример получения 9. Синтез 4-(4-бром-2-метилбензил)-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6тетра-О-ацетил- β-Ό-глюкопиранозида
Схема 2, стадия А: в 1 л колбу добавляли 4-[(4-бром-2-метилфенил)метил]-5-изопропил-1Нпиразол-3-ол (24 г, 77,6 ммоль), 2,3,4,6-тетра-О-ацетил-а-Э-глюкопиранозил бромид (50,4 г, 116 ммоль), бензилтрибутиламмоний хлорид (5 г, 15,5 ммоль), дихлорметан (250 мл), карбонат калия (32 г, 323 ммоль) и воду (120 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь экстрагировали дихлорметаном (450 мл). Экстракт промывали водой (300 мл) и солевым раствором (500 мл). Органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи флэш-хроматографии с получением титульного соединения (36,5 г, 57 ммоль). МС (т/ζ): 638,5 (М+1), 636,5 (М-1).
Альтернативный синтез 4-(4-бром-2-метилбензил)-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6-тетра- 8 024207
О-ацетил-в-Э-глюкопиранозида.
Объединяли 4-[(4-бром-2-метилфенил)метил]-5-изопропил-1Н-пиразол-3-ол (24,0 г, 77,6 ммоль), 2,3,4,6-тетра-О-ацетил-а-Э-глюкопиранозил бромид (50,4 г, 116 ммоль), бензилтрибутиламмоний хлорид (4,94 г, 15,52 ммоль), карбонат калия (32,18 г, 232,9 ммоль), дихлорметан (250 мл) и воду (120 мл) и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 18 ч. Смесь распределяли между дихлорметаном (250 мл) и водой (250 мл). Органическую фазу промывали солевым раствором (250 мл), сушили над Ыа28О4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи флэш-хроматографии (с элюированием с градиентом от 10% этилацетата в дихлорметане до 70% этилацетата в дихлорметане) с получением титульного соединения (36,5 г, 74% выход). МС (т/ζ): 639/641 (М+1).
Пример получения 10. Синтез 4-{4-[(1Е)-4-гидроксибут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2ил)-1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозида
Схема 2, стадия В: к раствору 4-(4-бром-2-метилбензил)-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6тетра-О-ацетил-в-Э-глюкопиранозида (15 г, 23,5 ммоль) в ацетонитриле (200 мл) и триэтиламине (50 мл) добавляли 3-бутен-1-ол (6,1 мл, 70 ммоль). Раствор дегазировали азотом в течение 10 мин. Добавляли три-о-толилфосфин (1,43 г, 4,7 ммоль) и ацетат палладия (526 мг, 2,35 ммоль). После кипячения с обратным холодильником при 90°С в течение 2 ч охлаждали и концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя. Полученный остаток очищали при помощи флэш-хроматографии с получением титульного соединения (7,5 г, 11,9 ммоль). МС (т/ζ): 631,2 (М+1), 629,2 (М-1).
Пример получения 11. Синтез 4-{4-[(1Е)-4-оксибут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)-1Нпиразол-3-ил 2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозида
Схема 2, стадия С: к раствору 4-{4-[(1Е)-4-гидроксибут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозида (1,5 г, 2,38 ммоль) и бикарбоната натрия (2 г, 23,8 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при 0°С добавляли 3,3,3-триацетокси-3-йодфталид (2,1 г, 4,76 ммоль). После 15 мин при комнатной температуре реакцию гасили насыщенным водным раствором тиосульфата натрия (10 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (30 мл), экстракт промывали водой (30 мл) и солевым раствором (40 мл). Органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи флэшхроматографии с получением титульного соединения (0,95 г, 1,51 ммоль). МС (т/ζ): 628,8 (М+1), 626,8 (М-1).
Пример получения 12. Синтез трет-бутилового эфира 2-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3[(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-2,9диазаспиро [5.5]ундекан-9-карбоновой кислоты
Схема 2, Стадия Ό: к раствору 4-{4-[(1Е)-4-оксибут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)-1Нпиразол-3-ил 2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозида (600 мг, 0,95 ммоль) и гидрохлорида третбутил-2,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоксилата (333 мг, 1,2 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (30 мл) добавля- 9 024207 ли триацетоксиборгидрид натрия (303 мг, 1,4 ммоль). После 30 мин при комнатной температуре реакцию гасили насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (15 мл). Смесь экстрагировали дихлорметаном (60 мл). Экстракт промывали водой (30 мл) и солевым раствором (60 мл). Органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи флэш-хроматографии с получением титульного соединения (500 мг, 0,58 ммоль). МС (т/ζ): 866,8, 867,8 (М+1), 864,8, 865,8 (М-1).
Пример получения 13. Синтез трет-бутилового эфира 2-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3[(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-2,8диазаспиро [4.5]декан-8 -карбоновой кислоты
Титульное соединение получали, по существу, при помощи способа согласно примеру получения 12. МС (т/ζ): 852,8, 853,6 (М+1). 850,8, 851,6 (М-1).
Пример получения 14. Синтез трет-бутилового эфира 9-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3[(2,3,4.6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-3,9диазаспиро [5.5]ундекан-3 -карбоновой кислоты
Титульное соединение получали, по существу, при помощи способа согласно примеру получения 12. МС (т/ζ): 866,8, 867,6 (М+1), 864,8, 865,6 (М-1).
Пример получения 15. Синтез дигидрохлорида 4-{4-[(1Е)-4-(2,9-диазаспиро[5.5]ундец-2-ил)бут-1ен-1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозида
Схема 2, стадия Е: к раствору трет-бутилового эфира 2-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3[(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-2,9диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоновой кислоты (500 мг, 0,58 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли соляную кислоту (4,0 М раствор в 1,4-диоксане, 1,5 мл, 5,8 ммоль). После 2 ч при комнатной температуре смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя с получением титульного соединения в виде твердого вещества (480 мг, 0,57 ммоль).
МС (т/ζ): 767,4 (М+1).
Пример получения 16. Синтез дигидрохлорида 4-{4-[(1Е)-4-(2,8-диазаспиро[4.5]дец-2-ил)бут-1-ен1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-Э-глюкопиранозида
- 10 024207
Титульное соединение получали по существу при помощи способа согласно примеру получения 15. МС (т/ζ): 752,8, 753,8 (М+1), 750,8 (М-1).
Первый альтернативный синтез примера 1. Первый альтернативный синтез 4-{4-[(1Е)-4-(2,9диазаспиро[5.5]ундец-2-ил)бут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил β-Ό-глюкопиранозида
Схема 2, стадия Р: к дигидрохлориду 4-{4-[(1Е)-4-(2,9-диазаспиро[5.5]ундец-2-ил)бут-1-ен-1-ил]-2метилбензил}-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-Э-глюкопиранозида (480 мг, 0,24 ммоль) добавляли метанол (5 мл), триэтиламин (3 мл) и воду (3 мл). После выдерживания в течение 18 ч (в течение ночи) при комнатной температуре смесь концентрировали досуха при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ: высокое значение рН, 25% В в течение 4 мин, 25-40% В в течение 4 мин при 85 мл/мин с применением колонки С18ХВп4дс ΟΌΒ 30x75 мм, 5 мкм, растворитель А - Н2О с ИН4НСО3 при рН 10, растворитель Β - МсС’К с получением титульного соединения в виде твердого вещества (50 мг, 0,08 ммоль). МС (т/ζ): 598,8 (М+1), 596,8 (М-1).
Ή-ЯМР (400,31 МГц, СЭ3ОЭ): δ 7,11 (ά, 1=1,3 Гц, 1Н), 7,04 (άά, 1=1,3, 8,0 Гц, 1Н), 6,87 (ά, 1=8,0 Гц, 1Н), 6,36 (ά, 1=15,8 Гц, 1Н), 6,16 (άΐ, 1=15,8, 6,3 Гц, 1Н), 5,02 (т, 1Н), 3,81 (ά, 1=11,7 Гц, 1Н), 3,72 (ά, 1=16,8 Гц, 1Н), 3,68 (ά, 1=16,8 Гц, 1Н), 3,64 (т, 1Н), 3,37-3,29 (т, 4Н), 2,79 (т, 1Н), 2,72 (ΐ, 1=5,8 Гц, 4Н), 2,44-2,33 (т, 6Н), 2,30 (5, 3Н), 2,26 (шир. 5, 2Н), 1,59 (т, 2Н), 1,50 (т, 2Н), 1,43 (т, 2Н), 1,36 (т, 2Н), 1,11 (ά, 1=7,0 Гц, 3Н), 1,10 (ά, 1=7,0 Гц, 3Н).
Пример 2. Синтез 4-{4-[(1Е)-4-(2,8-диазаспиро[4.5]дец-2-ил)бут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил β-Ό-глюкопиранозида
Титульное соединение получали, по существу, при помощи способа из первого альтернативного синтеза примера 1. МС (т/ζ): 584,7 (М+1), 582,8 (М-1).
Пример 3. Синтез 4-{4-[(1Е)-4-(3,9-диазаспиро[5.5]ундец-3-ил)бут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил β-Ό-глюкопиранозида
Титульное соединение получали, по существу, путем обработки соединения согласно примеру получения 14 с применением НС1, как описано в примере получения 15, а затем обработки полученной гид- 11 024207 рохлоридной соли триэтиламином, как описано в первом альтернативном синтезе примера 1. МС (т/ζ): 598,8, 599,8 (М+1), 596,8, 597,8 (М-1).
Схема 3
Пример 1
Пример получения 17. Синтез трет-бутилового эфира 4-бут-3-инил-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9карбоновой кислоты
N I
Схема 3, стадия А: к суспензии гидрохлорида трет-бутилового эфира 4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9карбоновой кислоты (16,66 г, 57,28 ммоль) в ацетонитриле (167 мл) добавляли карбонат цезия (46,66 г, 143,21 ммоль). Смесь перемешивали в течение 10 мин при температуре окружающей среды, а затем добавляли 4-бромбутин (6,45 мл, 68,74 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником и перемешивали в течение 18 ч. Смесь охлаждали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток распределяли между водой (200 мл) и этилацетатом (150 мл). Фазы разделяли и водный слой экстрагиро- 12 024207 вали этилацетатом (100 мл). Объединенные органические слои промывали водой (200 мл), затем солевым раствором (150 мл), сушили над М§§04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением титульного соединения (17,2 г, 98% выход). 1Н-ЯМР (300,11 МГц, ΟΌΟ13): δ 3,43-3,31 (т, 4Н). 2,53-2,48 (т, 2Н), 2,37-2,29 (т, 4Н), 2,20 (5, 2Н), 1,94 (1, 1=2,6 Гц, 1Н), 1,44 (5, 17Н).
Пример получения 18. Синтез трет-бутилового эфира 4-[(Е)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)бут-3 -енил] -4,9-диазаспиро [5.5]ундекан-9-карбоновой кислоты
Схема 3, стадия В: к трет-бутиловому эфиру 4-бут-3-инил-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9карбоновой кислоты (17,21 г, 56,16 ммоль) добавляли триэтиламин (5,62 ммоль; 0,783 мл), 4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (8,56 мл, 59,0 ммоль) и цирконоцен хлорид (1,45 г, 5,62 ммоль). Полученную смесь грели при 65°С в течение 3,5 ч. Смесь охлаждали и растворяли в дихлорметане (150 мл). Полученный раствор пропускали через ~4 см слой силикагеля, элюируя дихлорметаном (2x200 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением титульного соединения (21,2 г, 87% выход). ’Н-ЯМР (300,11 МГц, СОС13): δ 6,65-6,55 (т, 1Н), 5,49-5,43 (т, 1Н), 3,42-3,29 (т, 4Н), 2,40-2,27 (т, 6Н), 2,25-2,08 (т, 2Н), 1,70-1,13 (т, 29Н).
Пример получения 19. Синтез трет-бутилового эфира 2-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3-в-Оглюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-2,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9карбоновой кислоты
Схема 3, стадия С: раствор 4-(4-бром-2-метилбензил)-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6тетра-О-ацетил-в-Э-глюкопиранозида (20 г, 31,3 ммоль), трет-бутилового эфира 4-[(Е)-4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бут-3-енил]-4,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9-карбоновой кислоты (16,3 г, 37,5 ммоль) и карбоната калия (12,97 г, 93,82 ммоль) в тетрагидрофуране (200 мл) и воде (40 мл) дегазировали в течение 15 мин путем продувания газообразным азотом. Добавляли Рб(ОЛе)2 (140 мг, 625 мкмоль) и 2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-три-изопропил-1,1'-бифенил (0,596 г, 1,25 ммоль) и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 16 ч. Раствор охлаждали до температуры окружающей среды и добавляли метанол (200 мл). После 30 мин растворитель удаляли при пониженном давлении. Смесь распределяли между этилацетатом (500 мл) и солевым раствором (500 мл) с добавлением водного раствора М§§04 (1 М; 500 мл) для облегчения разделения фаз. Слои разделяли и органический слой сушили над М§§04 и фильтровали через 10 см слой силикагеля, элюируя этилацетатом (~1,5 л). Фильтрат отбрасывали и слой силикагеля промывали 5% раствором МеОН в ТГФ (2 л). Метанольный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением титульного соединения (20,1 г, 92%).
МС (ш//):699(М+1).
Второй альтернативный синтез примера 1. Второй альтернативный синтез 4-{4-[(1Е)-4-(2,9диазаспиро[5.5]ундец-2-ил)бут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил β-Ό-глюкопиранозида
- 13 024207
Схема 3, стадия Ό: к раствору трет-бутилового эфира 2-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3- βО-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-2,9-диазаспиро[5.5]ундекан-9карбоновой кислоты (14,87 г; 21,28 ммоль) в дихлорметане (149 мл), охлажденному в ледяной воде, добавляли трифторуксусную кислоту (32,2 мл; 0,426 моль). Раствор оставляли нагреваться до комнатной температуры. После 30 мин смесь медленно добавляли к раствору аммиака в МеОН (2 М; 300 мл), при необходимости применяя охлаждение для поддержания постоянной температуры. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с применением 8СХ-2 смолы. Основной фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток растирали/обрабатывали ультразвуком в этилацетате, фильтровали и сушили. Полученное твердое вещество растворяли в МеОН (200 мл) и концентрировали в вакууме. Указанную процедуру повторяли несколько раз с получением титульного соединения (12,22 г, выход 96%). МС (т/ζ): 599 (М+1). |α| 2 = -12° (С=0,2, МеОН).
Схема 4
Пример получения 20. Синтез (3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3-[(2,3,4,6-тетра-О-ацетил- β-Όглюкопиранозил)окси] -1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3 -ен-1-ил метансульфоната
- 14 024207
Схема 4, стадия А: к раствору 4-{4-[(1Е)-4-гидроксибут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5-(пропан-2-ил)1Н-пиразол-3-ил 2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозида (3,7, 5,87 ммоль) в дихлорметане (15 мл) и триэтиламине (4 мл, 29 ммоль) при 0°С добавляли метансульфонилхлорид (0,54 мл, 7 ммоль). После кипячения с обратным холодильником при комнатной температуре в течение 30 мин смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя. Очищали остаток при помощи флэшхроматографии с получением титульного соединения (2,9 г, 4,1 ммоль). МС (т/ζ): 708,5 (М+1), 706,5 (М-1).
Пример получения 21. Синтез трет-бутилового эфира 2-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3[(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-2,6диазаспиро [3.5]нонан-6 -карбоновой кислоты.
Схема 4, стадия В: к раствору (3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3-[(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-Оглюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил метансульфоната (200 мг, 0,28 ммоль) и трет-бутилового эфира 2,6-диазаспиро[3.5]нонан-6-карбоновой кислоты (77 мг, 0,34 ммоль) в ацетонитриле (3 мл) добавляли диизопропилэтиламин (0,2 мл, 1,1 ммоль). Смесь грели при 80°С в течение ночи. Концентрировали при пониженном давлении и очищали остаток при помощи флэшхроматографии с получением титульного соединения (127 мг, 0,15 ммоль). МС (т/ζ): 838,8, 839,6 (М+1), 836,8, 837,6 (М-1).
Пример получения 22. Синтез трет-бутилового эфира 2-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3[(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-2,7диазаспиро [3.5]нонан-7 -карбоновой кислоты
Титульное соединение получали, по существу, при помощи способа согласно примеру получения 21. МС (т/ζ): 838,8, 839,6 (М+1), 836,8, 837,6 (М-1).
Пример получения 23. Синтез трет-бутилового эфира 7-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3[(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-2,7диазаспиро [3.5]нонан-2 -карбоновой кислоты
Титульное соединение получали, по существу, при помощи способа согласно примеру получения 21. МС (т/ζ): 838,8, 839,6 (М+1), 836,8, 837,6 (М-1).
Пример получения 24. Синтез трет-бутилового эфира 1-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3- 15 024207 [(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-1,8диазаспиро [4.5]декан-8 -карбоновой кислоты
Титульное соединение получали, по существу, при помощи способа согласно примеру получения 21. МС (т/ζ): 852,8, 853,6 (М+1), 850,8, 852,8 (М-1).
Пример получения 25. Синтез трет-бутилового эфира 8-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3[(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-в-О-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-2,8диазаспиро [4.5]декан-2 -карбоновой кислоты
Титульное соединение получали, по существу, при помощи способа согласно примеру получения 21. МС (т/ζ): 852,8, 853,6 (М+1), 850,8, 851,6 (М-1).
Пример 4. Синтез 4-{4-[(1Е)-4-(2,6-диазаспиро[3.5]нон-2-ил)бут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил β-Ό-глюкопиранозида
Схема 4, стадия С: к раствору трет-бутилового эфира 2-{(3Е)-4-[3-метил-4-({5-(пропан-2-ил)-3[(2,3,4,6-тетра-О-ацетил- 3-О-глюкопиранозил)окси]-1Н-пиразол-4-ил}метил)фенил]бут-3-ен-1-ил}-2,6диазаспиро[3.5]нонан-6-карбоновой кислоты в дихлорметане (2 мл) добавляли 4,0 М раствор НС1/1,4диоксан (1,5 мл, 1,5 ммоль) и перемешивали при КТ в течение 4,0 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении с получением пенообразного твердого вещества. Твердое вещество в течение ночи обрабатывали 2,0 М раствором аммиака в МеОН (2 мл). После 18 ч при комнатной температуре смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя. Полученный остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ: высокое значение рН, 19% В в течение 3 мин, 19-34% В в течение 5 мин при 85 мл/мин с применением колонки С18ХВпбде ΟΌΒ 30x75 мм, 5 мкм, растворитель А - Н2О с ЫН4НСО3 при рН 10, растворитель Β - МеСЫ, с получением титульного соединения в виде твердого вещества (47 мг, 0,08 ммоль). МС (т/ζ): 570,8, 571.8 (М+1), 568,7, 569,8 (М-1).
Пример 5. Синтез 4-{4-[(1Е)-4-(2,7-диазаспиро[3.5]нон-2-ил)бут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил β-Ό-глюкопиранозида
Титульное соединение получали, по существу, при помощи способа согласно примеру 4. МС (т/ζ): 570,8, 571,8 (М+1), 568,7, 569,8 (М-1).
Пример 6. Синтез трифторацетата 4-{4-[(1Е)-4-(2,7-диазаспиро[3.5]нон-7-ил)бут-1-ен-1-ил]-2метилбензил}-5-(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил β-Ό-глюкопиранозида (1:2)
- 16 024207
Титульное соединение получали, по существу, при помощи способа согласно примеру 4 с очисткой конечного соединения при помощи метода препаративной ВЭЖХ при низком значении рН (низкое значение рН, 16% В в течение 3 мин, 16-33% В в течение 5 мин при 85 мл/мин с применением колонки С18ХВгйде ОИВ 30x75 мм, 5 мкм, растворитель А - Н2О с 0,1% ТФК, растворитель В - МеСЫ с 0,1% ТФК). МС (т/ζ): 570,8, 571,8 (М+1), 568,7, 569,8 (М-1).
Пример 7. Синтез 4-{4-[(1Е)-4-(1,8-диазаспиро[4.5]дец-1-ил)бут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил β-Ό-глюкопиранозида
Титульное соединение получали, по существу, при помощи способа согласно примеру 4. МС (т/ζ): 584,7, 585,8 (М+1), 582,8, 583,8 (М-1).
Пример 8. Синтез 4-{4-[(1Е)-4-(2,8-диазаспиро[4.5]дец-8-ил)бут-1-ен-1-ил]-2-метилбензил}-5(пропан-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил β-Ό-глюкопиранозида
Титульное соединение получали, по существу, при помощи способа согласно примеру 4. МС (т/ζ): 584,7, 585,8 (М+1), 582,8, 583,8 (М-1).
Исследования натрийзависимого транспортера глюкозы 1 (§СЬТ1) и §СЬТ2.
кДНК, кодирующую 8СЬТ1 человека (к1с5а1, ЫМ_000343), §СЬТ2 человека (к1с5а2, ЫМ_003041) и §СЬТ1 мыши (к1с5а1, ЫМ_019810.4) приобретали в ОрепЫо8у81ет8, 1пуЦгодеп и ОрепЫо8у81ет8 соответственно. кДНК клонировали в рсЭЫА3.1+ для экспрессии у млекопитающих и устойчиво трансфицировали в клетки яичника китайского хомячка (СНО)-К1 при помощи стандартных процедур трансфицирования млекопитающих. Субклон, экспрессирующий §СЬТ, каждой из сверхэкспрессирующих клеточных линий выбирали на основе устойчивости к неомицину (СепеОст. 1пу11годеп) и активности в исследовании усваивания 14С-а-метил-И-глюкопиранозида (14С-АМС) (см. ниже). Клетки, устойчиво экспрессирующие 8СЬТ, выдерживали с применением стандартных способов выращивания клеточных культур.
Активность §СЬТ измеряли как зависящий от натрия захват 14С-АМС в указанных выше клеточных линиях, как описано ниже. 100 мкл питательной среды, содержащей 30000 клеток, высеивали в каждую лунку 96-луночного планшета ВюСоа! с покрытием из поли-И-лизина (Вес1оп Июкзоп) и культивировали при 37°С в течение ночи. Питательную среду аспирировали и клетки дважды промывали 200 мкл рабочего буферного раствора (140 мМ ЫаС1, 2 мМ КС1, 1 мМ СаС12, М§С12 и 14 мМ Ν-2-гидроэтилпиперазин№-2-этансульфокислоты (Нерек), рН 7,5). Избыток буфера удаляли при помощи бумажных полотенец. В каждую лунку добавляли 35 мкл рабочего буферного раствора. В каждую лунку вносили 5 мкл 10% раствора диметилсульфоксида (ДМСО) в рабочем буферном растворе, содержащем различные концентрации исследуемого соединения или не содержащем соединения в случае контроля. Реакцию инициировали путем добавления 10 мкл 14С-АМС в рабочий буферный раствор с получением конечной концентрации 4 мкМ. Планшет инкубировали при 37°С в течение 125 мин. Реакцию останавливали путем аспирации рабочего буферного раствора, а затем трижды промывали 200 мкл ледяного рабочего буферного раствора. Дня обеспечения полного удаления рабочего буферного раствора применяли ручную аспирацию. В каждую лунку добавляли 10 мкл 0,1н. раствора ЫаОН, а затем добавляли 100 мкл сцинтилляционной смеси §ирегт1х (Регк1пЕ1тег). После смешивания подсчитывали сцинтилляционный сигнал на планшете при помощи МюгоВе1а (Регк1пЕ1тег). Для определения концентрации ингибитора при полумаксимальном ингибировании (1С50) строили кривую зависимости доза-ответ по десяти точкам для дозы путем под- 17 024207 становки данных в четырехпараметровой эмпирической модели с применением программного обеспечения ЛсЬуЬуВаке (ΙΌ Виктекк δοϊυΐίοη). Соединения из представленных в настоящей заявке примеров 1-8, которые исследовали, по существу, как описано выше, имели значения 1С50 для §ОЬТ1 менее чем примерно 500 нМ.
Таблица 1
Активность ίη νίίτο примера 1 в отношении §ОЬТ1 и §ОЬТ2
Исследуемое соединение 1С50 8С.ЦГ1 человека, нМ 1С5о 8ОЬТ2 человека, нМ 1С50 8ОБТ1 мыши, нМ
Пример 1 26±20(п=10) 6100±1200(п=10) 10±2(п=9)
В частности, данные из табл. 1 демонстрируют, что соединение согласно примеру 1 ингибирует §ОЬТ1 человека и мыши ш νίίτο и обладает более высокой активностью в случае 8ОЬТ1 человека и мыши по сравнению с §ОЬТ2 человека ίη νίίτο.
Эффекты, понижающие уровень глюкозы в пероральном тесте толерантности к глюкозе (ПТТГ).
Исследуемое соединение готовили в виде состава путем добавления носителя, содержащего 1% гидроксиэтилцеллюлозы, 0,25% Т\уееп® 80 с 0,05% пеногасителя, к предварительно взвешенному исследуемому соединению с получением 1 мг/мл раствора. Смесь обрабатывали ультразвуком в течение примерно 30 с. Полученный раствор применяли в качестве базового раствора, из которого путем разбавления носителем получали растворы для дозирования более низких концентраций.
Индивидуально размещенных мышей С57В1/6 не кормили в течение ночи путем прекращения доступа к пище с позднего вечера перед днем исследования. На следующее утро мышей взвешивали и отбирали один образец крови натощак из надреза хвоста для измерения содержания глюкозы на глюкометре (ΒοΗκ ЛсспСНек). Исследуемые группы (п=5) формировали на основе содержания глюкозы в крови натощак, и они содержали преимущественно животных с содержанием глюкозы в диапазоне 80-100 мг/дл.
После формирования групп первым мышам перорально при помощи зонда вводили 10 мл/кг препарата исследуемого соединения и начинали отсчет времени.
Каждому следующему животному вводили дозу через полторы минуты после предыдущего. Через 3 ч после начала лечения первым соединением отбирали базовый образец крови для измерения содержания глюкозы (из надреза хвоста первого животного). Сразу после этого животному вводили пероральную дозу 50% декстрозы (Мокрта) в концентрации 3 г/кг. С интервалом ровно полторы минуты из хвостовой вены других животных отбирали образцы крови для определения содержания глюкозы таким образом, что отбор крови для каждого из животных проводили через 20, 40, 60 и 120 мин после введения дозы декстрозы.
Таблица 2
Эффекты, понижающие глюкозу в ПТТГ
Результаты перорального теста толерантности к глюкоте - Среднее ± СКО
2-факторный дисперсионный анализ ΑΝΟνΑ/ критерий Бонферрони *р<0,05, **р<0,01, ***р<0,001 по сравнению с носителем
Носитель Пример 1 03 мг/кг Пример 1 1 мг/кг Пример 1 3 мг/кг Пример 1 10 мг/кг
Содержание глюкозы (мг/дл)
0 минут 84 ±8,4 78 ±4,2 76 ±3,3 72 ± 2,6 78 ± 5,4
20 минут 268 ± 49,3 185 ± 13,7*** 147 ±8,3*** 133 ±7,1*** 124 ± 1,2***
40 минут 192 ±26,8 197± 14,7 171 ± 11,1 150 ±7,5 137 ±5,4**
60 минут 139 ± 6,2 164 ± 6,3 162 ± 5,8 155 ±7,2 138 ±6,1
120 минут 105 ±5,1 121 ±11,8 109 ±7,3 115 ± 10 114 ±4,3
1-факторный дисперсионный анализ ΑΝΟνΑ/ критерий Дуннетта *р<0,05, **р<0,01, ***р<0,001 по сравнению с носителем
ППКс поправкой на исходное значение 6408± 1500 5400± 519 4158 ±374 3606 ±421* 2693 ± 309**
Содержание глюкозы (мг/дл)
Стах глюкозы 268 ± 49,3 199 ± 14,1 174 ±9,38** 161 ±5,00** 141 ±5,67**
Время (минуты)
Ттах глюкозы 20 ±0 32 ±5 48 ±5 64±13** 44±7
Как показано выше в табл. 2, соединение согласно примеру 1 обеспечивает зависимое от дозировки снижение амплитуды колебаний содержания глюкозы после перорального введения 50% декстрозы
- 18 024207 (Но8р1га®) мышам С57В1/6 с нормальным содержанием глюкозы. Пример 1 также демонстрирует зависимое от дозировки снижение площади под кривой (ППК) содержания глюкозы с поправкой на исходное значение в исследовании ПТТГ. Кроме того, пример 1 дозозависимым образом снижает среднюю максимальную концентрацию глюкозы в плазме (Стах) в исследовании ПТТГ и увеличивает среднее время, требуемое для достижения максимальной концентрации глюкозы (Ттах).
Содержания глюкозы в тесте толерантности к смешанной пище для самцов крыс с диабетом, вызванным стрептозотоцином.
У крыс, которым вводили стрептозотоцин (СТ3), развивался сахарный диабет. Полагают, что агенты, которые регулируют содержание глюкозы для указанных животных, подходят для применения для лечения диабета у человека.
Исследуемое соединение готовили в виде состава путем добавления носителя, содержащего 1% гидроксиэтилцеллюлозы (ГЭЦ), 0,25% Т\уссп® 80 с 0,05% пеногасителя, к предварительно взвешенному исследуемому соединению с получением 2,5 мг/мл раствора. Смесь обрабатывали ультразвуком в течение примерно 30 с. Полученный раствор применяли в качестве базового раствора, из которого путем разбавления носителем получали растворы для дозирования более низких концентраций. СТ3, 45 мг/кг, готовили в виде 3 мл аликвот путем растворения в 0,1 М цитратном буфере и хранили в темном месте во льду до момента введения. Использовали смешанную пищу с высоким содержанием жира (Βίο-δβτν® корм для грызунов Р3282 с высоким содержанием жира), содержащую жировые калории (60%), углеводные калории (26%) и белковые калории (15%) Индивидуально размещенных крыс линии Спрага-Доули оставляли для акклиматизации на период от 3 до 7 дней.
СТ3 вводили во второй половине дня для обеспечения того условия, что животные не получали пищу в последнее время, примерно в течение 6 ч на свету (свет включали в 6 утра, свет выключали в 6 вечера) Животных анестезировали изофлураном и путем инъекции в хвостовую вену вводили СТ3. После возвращения в сознание животных возвращали в клетки и оставляли восстанавливаться в течение 7 дней.
За два дня до теста толерантности к пище (ТТП) всем крысам вводили небольшое количество (2-4 г) корма Р3282 для привыкания к его приему в процессе эксперимента. Вечером перед началом эксперимента крыс помещали в чистые клетки и убирали их пищу. На следующее утро животных взвешивали и отбирали образец крови из надреза хвоста для измерения содержания глюкозы (глюкометры АЬЬой А1рйаТтак: код 29). Животных разбивали на группы п=6 на основе массы тела и содержания глюкозы натощак. Через 30 мин перорально вводили исследуемое соединение и измеряли два значения содержания глюкозы. Затем животным давали пятиграммовую пилюлю корма Βίο-δβτν® 3282. Через 20 мин оставшуюся пищу отбирали и взвешивали. Для измерения содержания глюкозы отбирали образцы крови через 20, 40, 60 и 120 мин.
Таблица 3
Содержания глюкозы в ТТП к смешанной пище для самцов крыс с диабетом, вызванным стрептозотоцином
Содержания глюкозы (мг/дл) в группах п=5-6, Среднее ± СКО
Лечение Доза Омин. 20 мин. 40 мин. 60 мни. 120 мин. ППК с поправкой на исходное значение
Носитель 113,6 ± 12,6 297,2 ±26,6 427,6 ±41 452,2 ±37,3 544,7 ±50,1 36429 ±3155
Пример 1 10 мг/кг 139 ± 16,1 221,2 ±26,3 268,7 ±29* 330 ±36,7 490,8 ±39,2 22432 ± 2234*
Пример 1 30 мг/кг 137,4 ±26,9 195,4 ±44,8 232 ±52,2** 263,9 ± 62,2* 355,3 ± 73,2* 14649 ±3673**
Акарбоза 60 мг/кг 124 ±16,9 181 ±22,8 301.3 ±51,2 371,5 ±63,9 433,7 ±83 23877 ±4649*
2-факторный дисперсионный анализ ΑΝΟΥΑ/ критерий Бонферрони *р<0,05, **р<0,01
Как показано выше в табл. 3, соединение согласно примеру 1 значительно и дозозависимым образом снижает содержание глюкозы в ТТП по сравнению с применением группой контроля носителем. Акарбоза незначительно снижает содержание глюкозы по сравнению с контролем в любой момент времени. Кроме того, наблюдается зависимое от дозы снижение ППК содержания глюкозы с поправкой на исходное значение для лечения примером 1. Акарбоза значительно снижает ППК содержания глюкозы до значений, аналогичных значениям для примера 1 в концентрации 10 мг/кг. Табл. 3 демонстрирует, что соединение согласно примеру 1 регулирует содержание глюкозы для самцов крыс.

Claims (12)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ где X представляет собой следующий фрагмент:
    ООн .ζΟΟνη
    у. ’ ’ А ’ +ОО”. +ΌΟ .
    /САР ~ СХ>
    ’ -I- ; или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
  2. 2. Соединение или фармацевтически приемлемая соль по п.1, которое представляет собой
  3. 3. Соединение по п.2, которое представляет собой
  4. 4. Способ лечения диабета у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3.
  5. 5. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 в терапии заболеваний и расстройств, связанных с гипергликемией.
  6. 6. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 для лечения диабета.
  7. 7. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 для лечения диабета 1 типа.
  8. 8. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 для лечения диабета 2 типа.
  9. 9. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 для получения лекарственного средства для лечения диабета.
  10. 10. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 для получения лекарственного средства для лечения диабета 1 типа.
  11. 11. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 для получения лекарственного средства для лечения диабета 2 типа.
  12. 12. Фармацевтическая композиция для лечения диабета, содержащая эффективное количество соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-3 в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами.
EA201491852A 2012-05-10 2013-05-02 Пиразольные соединения EA024207B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261645101P 2012-05-10 2012-05-10
US201361769221P 2013-02-26 2013-02-26
PCT/US2013/039164 WO2013169546A1 (en) 2012-05-10 2013-05-02 Pyrazole compounds as sglt1 inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201491852A1 EA201491852A1 (ru) 2015-02-27
EA024207B1 true EA024207B1 (ru) 2016-08-31

Family

ID=48428684

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201491852A EA024207B1 (ru) 2012-05-10 2013-05-02 Пиразольные соединения

Country Status (42)

Country Link
US (2) US8697849B2 (ru)
EP (1) EP2850084B1 (ru)
JP (1) JP6148725B2 (ru)
KR (1) KR101685779B1 (ru)
AP (1) AP3593A (ru)
AR (1) AR090806A1 (ru)
AU (1) AU2013259946B2 (ru)
BR (1) BR112014026198B1 (ru)
CA (1) CA2869323C (ru)
CL (1) CL2014002845A1 (ru)
CO (1) CO7141429A2 (ru)
CR (1) CR20140473A (ru)
CY (1) CY1117912T1 (ru)
DK (1) DK2850084T3 (ru)
DO (1) DOP2014000250A (ru)
EA (1) EA024207B1 (ru)
EC (1) ECSP14026088A (ru)
ES (1) ES2588835T3 (ru)
GT (1) GT201400242A (ru)
HR (1) HRP20160804T1 (ru)
HU (1) HUE030414T2 (ru)
IL (1) IL235427A (ru)
IN (1) IN2014DN07996A (ru)
JO (1) JO3136B1 (ru)
LT (1) LT2850084T (ru)
MA (1) MA37501B1 (ru)
ME (1) ME02405B (ru)
MX (1) MX357058B (ru)
MY (1) MY177326A (ru)
NZ (1) NZ700356A (ru)
PE (1) PE20142399A1 (ru)
PH (1) PH12014502492A1 (ru)
PL (1) PL2850084T3 (ru)
PT (1) PT2850084T (ru)
RS (1) RS55107B1 (ru)
SG (1) SG11201407345QA (ru)
SI (1) SI2850084T1 (ru)
TN (1) TN2014000410A1 (ru)
TW (1) TWI579295B (ru)
UA (1) UA113086C2 (ru)
WO (1) WO2013169546A1 (ru)
ZA (1) ZA201407531B (ru)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
UA113086C2 (xx) * 2012-05-10 2016-12-12 Піразольні сполуки як інгібітори sglt1
TW201425326A (zh) 2012-10-05 2014-07-01 Lilly Co Eli 新穎脲化合物
TWI633113B (zh) 2013-10-17 2018-08-21 美國禮來大藥廠 新穎脲化合物
AR098134A1 (es) 2013-11-01 2016-05-04 Lilly Co Eli Compuestos de urea
AR098670A1 (es) * 2013-11-08 2016-06-08 Lilly Co Eli Inhibidor de sglt1
CN110054657B (zh) * 2018-01-18 2021-06-29 亚宝药业集团股份有限公司 吡喃葡萄糖取代的吡唑化合物及其制备方法
TWI805727B (zh) * 2018-04-04 2023-06-21 日商日本煙草產業股份有限公司 經雜芳基取代之吡唑化合物及其醫藥用途
JP7692832B2 (ja) * 2019-09-04 2025-06-16 日本たばこ産業株式会社 併用医薬による糖尿病の治療又は予防方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1544208A1 (en) * 2002-08-08 2005-06-22 Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. Pyrazole derivative, medicinal composition containing the same, medicinal use thereof, and intermediate for production thereof
WO2005121161A1 (de) * 2004-06-11 2005-12-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue fluorglykosidderivate von pyrazolen, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
WO2007136116A2 (en) * 2006-05-19 2007-11-29 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. C-phenyl glycitol compound for the treatment of diabetes

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ303372B6 (cs) 1999-08-31 2012-08-22 Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. Glukopyranosyloxypyrazolový derivát a farmaceutická kompozice s jeho obsahem a benzylpyrazolový meziprodukt
CA2438593C (en) 2001-02-26 2010-09-21 Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. Glucopyranosyloxypyrazole derivatives and medicinal use thereof
WO2002098893A1 (en) 2001-05-30 2002-12-12 Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. Glucopyranosyloxypyrazole derivative, medicinal composition containing the same, medicinal use thereof, and intermediate therefor
JP2004137245A (ja) 2002-08-23 2004-05-13 Kissei Pharmaceut Co Ltd ピラゾール誘導体、それを含有する医薬組成物、その医薬用途及びその製造中間体
JP5144683B2 (ja) 2007-12-27 2013-02-13 キッセイ薬品工業株式会社 ピラゾール誘導体のモノセバシン酸塩
TWI460187B (zh) 2009-02-23 2014-11-11 大正製藥股份有限公司 ４－異丙基苯基葡萄糖醇化合物
JP2013506635A (ja) 2009-10-02 2013-02-28 サノフイ 骨疾患を処置するための薬剤を製造するためのｓｇｌｔ−１／ｓｇｌｔ−２阻害剤活性を有する化合物の使用
US8163704B2 (en) 2009-10-20 2012-04-24 Novartis Ag Glycoside derivatives and uses thereof
UA113086C2 (xx) * 2012-05-10 2016-12-12 Піразольні сполуки як інгібітори sglt1

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1544208A1 (en) * 2002-08-08 2005-06-22 Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. Pyrazole derivative, medicinal composition containing the same, medicinal use thereof, and intermediate for production thereof
WO2005121161A1 (de) * 2004-06-11 2005-12-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue fluorglykosidderivate von pyrazolen, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
WO2007136116A2 (en) * 2006-05-19 2007-11-29 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. C-phenyl glycitol compound for the treatment of diabetes

Also Published As

Publication number Publication date
JO3136B1 (ar) 2017-09-20
NZ700356A (en) 2016-06-24
HUE030414T2 (en) 2017-05-29
PH12014502492B1 (en) 2015-01-12
EA201491852A1 (ru) 2015-02-27
TN2014000410A1 (en) 2015-12-21
ECSP14026088A (es) 2015-09-30
AU2013259946A1 (en) 2014-10-16
TW201406773A (zh) 2014-02-16
ES2588835T3 (es) 2016-11-07
PT2850084T (pt) 2016-08-02
EP2850084A1 (en) 2015-03-25
US9296775B2 (en) 2016-03-29
AU2013259946B2 (en) 2015-09-10
AR090806A1 (es) 2014-12-10
US20140162967A1 (en) 2014-06-12
MA37501B1 (fr) 2016-11-30
CA2869323C (en) 2016-03-29
CN104284894A (zh) 2015-01-14
LT2850084T (lt) 2016-09-12
MY177326A (en) 2020-09-11
AP3593A (en) 2016-02-15
PL2850084T3 (pl) 2017-05-31
WO2013169546A1 (en) 2013-11-14
BR112014026198B1 (pt) 2021-02-02
KR20150001798A (ko) 2015-01-06
MX357058B (es) 2018-06-25
TWI579295B (zh) 2017-04-21
CA2869323A1 (en) 2013-11-14
RS55107B1 (sr) 2016-12-30
PE20142399A1 (es) 2015-01-22
ME02405B (me) 2016-09-20
CN104284894B (zh) 2016-02-17
KR101685779B1 (ko) 2016-12-12
UA113086C2 (xx) 2016-12-12
ZA201407531B (en) 2016-05-25
PH12014502492A1 (en) 2015-01-12
GT201400242A (es) 2015-08-27
CL2014002845A1 (es) 2015-01-30
DOP2014000250A (es) 2014-11-30
JP2015516419A (ja) 2015-06-11
CO7141429A2 (es) 2014-12-12
HK1202542A1 (zh) 2015-10-02
SG11201407345QA (en) 2014-12-30
MX2014013615A (es) 2015-02-12
IN2014DN07996A (ru) 2015-05-01
IL235427A (en) 2016-06-30
JP6148725B2 (ja) 2017-06-14
SI2850084T1 (sl) 2016-07-29
AP2014008044A0 (en) 2014-11-30
DK2850084T3 (en) 2016-09-12
CY1117912T1 (el) 2017-05-17
BR112014026198A2 (pt) 2017-06-27
US20130303471A1 (en) 2013-11-14
CR20140473A (es) 2014-11-21
HRP20160804T1 (hr) 2016-08-12
US8697849B2 (en) 2014-04-15
MA37501A1 (fr) 2016-03-31
EP2850084B1 (en) 2016-06-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA024207B1 (ru) Пиразольные соединения
US20200054598A1 (en) Sglt-2 inhibitors for treating metabolic disorders in patients with renal impairment or chronic kidney disease
US8785404B2 (en) Urea compounds
JP6197113B2 (ja) 新規ｓｇｌｔ１阻害剤
CN104284894B9 (en) Pyrazole compounds
HK1202542B (en) Pyrazole compounds as sglt1 inhibitors
TWI254638B (en) An enantiomerically pure opioid diarylmethylpiperazine and methods of using same
HK1225035B (en) 4-{4-[(1 e)-4-(2,9-diazaspiro[5.5]undec-2-yl)but-1 -en-1 -yl]-2-methylbenzyl}-5-(propan-2-yl)-1 h-pyrazol-3-yl beta-d- glucopyranoside acetate

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM